KR20080018917A - 기능성 식품의 제제화를 위한 포스파티딜세린이 풍부한우유 분획물 - Google Patents

기능성 식품의 제제화를 위한 포스파티딜세린이 풍부한우유 분획물 Download PDF

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Abstract

물리적 안정성 뿐만 아니라 우수한 분산성 및 감각수용성을 갖는 천연 조성물의 우유 유래의 포스파티딜세린 공급원이 개시되어 있다. 상기 공급원은 분말, 액체 또는 분산액 형태의 영양약학제품에 유용하다. 상기 공급원은 버터오일 제조로부터의 유청 또는 탈지 목적을 위한 유장의 미세여과로부터의 잔존물로부터 제조될 수 있다.
포스파티딜세린, 인지질, 버터밀크, 유청

Description

기능성 식품의 제제화를 위한 포스파티딜세린이 풍부한 우유 분획물 {PHOSPHATIDYLSERINE ENRICHED MILK FRACTIONS FOR THE FORMULATION OF FUNCTIONAL FOODS}
본 발명은 소의 포스파티딜세린, 이의 제조 및 용도에 관한 것이다.
인지질 (PL)은 생물계에서 매우 일반적인 물질이다. 이는 식물 및 동물 모두에 있어서 대부분의 세포의 막을 구성한다. 이들 지질은 각종 구획 사이의 장벽으로서 기능하며, 수용체, 효소 및 운반 단백질에 대한 적절한 환경을 제공하는 이중층 구조로 조직된다. 이들은 또한 세포 간의 소통을 위한 전달 물질로서 기능한다. 뇌의 대부분은 인지질로 이루어진다. 인간 뇌 인지질 풀의 15%는 포스파티딜세린 (PS)으로 이루어진다. 뇌가 노화됨에 따라, 물질이 소실되고 콜레스테롤과 같은 불활성 물질로 대체된다.
PS는 최근 개선된 인지 수행, 기억 손실의 저지를 위한 영양양학 (nutraceutical) 식품의 활성 성분으로서 및 스트레스 완화제로서 큰 관심을 받아 왔다. 문헌은 논문 [Benton 등, "The influence of Phosphatidylserine Supplementation on Mood and Heart Rate when Faced with an Acute Stressor", Nutritional Neuroscience, Vol. 4 pp 169-178]으로 대표된다.
PS 섭취가 스트레스 및 인지 수행에 미치는 유의한 긍정적 결과를 나타내는 실험이 수년간 수행되어 왔으며, 예를 들어, 문헌 [Arjan Blokland 등, "Cognition-Enhancing Properties of Subchronic Phosphatidylserine (PS) Treatment in Middle-Aged Rats: Comparison of Bovine Cortex PS With Egg PS and Soybean PS" in Nutrition Vol. 15, No. 10, 1999]을 참고한다.
PS는 영양약학제품으로서 사용될 수 있으며, 건강에 유익한 성분의 농축물을 함유하는 각종 식품 제제, 음료, 정제 및 상이한 종류의 바에 도입될 수 있다.
역사적으로, 소의 뇌는 PS의 단리를 위한 원료로서 사용되어 왔으나; 광우병 (BSE)의 발병 이후, 상기 물질은 명백한 이유로 인하여 더이상 사용되지 않는다.
지난 수년 동안, 대두 레시틴으로부터 유도된 반-합성 변이체가 개발되어 왔고, 루카스 메이어 게엠베하 (Lucas Meyer GmbH) / 데구사 (Degussa), 엔자이모텍 (Enzymotec), 케미 (Chemi) 및 리포겐 (Lipogen)과 같은 회사에 의해 시판되어 왔다. 본원에서 WO 2005/027822를 참고한다. 모든 언급된 PS 제조업체에 의해 사용되는 주요 절차는 우리가 아는 한 기질 중 인지질의 헤드기 (head group)를 교환하는 것, 예를 들어, 반응이 일어나게 하는 활성 효소로서의 포시포리파제 D를 이용하여 포스파티딜 콜린의 콜린기를 세린으로 교환하는 것이다.
상기 절차에서 칼슘을 이용하여 효소를 활성화시킬 필요성이 존재하므로, PS는 종종 거의 분산되지 않는 Ca 염으로 끝난다. 화합물의 순도는 20 ∼ 90%에서 변할 수 있다. 헤드기 교환 절차와 관련된 또다른 문제점은 포스포리파제 D 효소 활성의 작은 잔기이고, 이는 수계 액체 시스템 내에서 PS의 불안정성을 초래한다. 유도된 순수 PL 분획물에 있어서의 추가의 주요 문제점은 대체적으로 수계 시스템 내에서 매우 불쾌한 맛의 발생이다. 상기 결점으로 인하여, PS는 대부분 오일에 용해된 캡슐형으로 시판된다. 상기 기재한 이유로 인하여, 물에 분산된 PS 음료 제제는 아직까지 성공적이지 못했다.
시판과 관련된 또다른 문제점은 PS의 유래이다. 헤드기가 교환된 PS는 천연 유래가 아니다. 이는 사실상 공중 보건 당국에 의하여 부과된, 인간 식품에서의 사용에 있어서 모든 제한을 갖는 반-합성 물질이다.
상기 기재한 문제점을 해결하기 위하여, PS의 새로운 천연 공급원을 찾아 왔다.
우유는 유지방구막 (MFGM) 중 인지질을 함유한다. 상기 막은 특정 단백질, 소위 MFGM 단백질과 함께 정렬된 이중층 구조로 조직된다.
젖통의 골지 및 지방구로부터 벗겨진 MFGM 물질로부터 유래한 특정 MFGM 단편이 탈지유 중 존재한다.
용매 추출 절차를 수행한 후, 인지질의 조성은 바람직하게는 P31 NMR (독일 소재 스펙트랄 서비스 게엠베하 (Spectral Service GmbH))에 의해 측정될 수 있다.
우유의 PL 패턴의 전형적 조성은 하기와 같다 (P31 NMR 방법):
몰 백분율
포스파티딜콜린 (PC) 27
포스파티딜이노시톨 (PI) 7
포스파티딜세린 (PS) 13
스핑고미엘린 (SPH) 25
포스파티딜에탄올아민 (PE) 27
기타 1
우유의 PL 조성은 PS 및 스핑고미엘린 (SPH)의 고 함량으로 인하여 천연에서 유일한 것이다.
SPH는 또한 우유 중 생리활성의 극성 지질이다. 이는 콜레스테롤의 섭취를 감소시키고, 또한 결장 중 항종양 효과를 갖는 것으로 생각된다. 활성 항발암 효과는 장관 중 SPH의 분해 산물, 즉 세라미드로 거슬러 올라간다. 본원에서 문헌 [Vesper 등 (1999) Sphingolipids in food and the emerging importance of sphingolipids to nutrition, J. Nutr. 129: p.1239-1250]을 언급한다.
전유는 PS의 불충분한 공급원이다. 이는 ℓ당 오로지 약 27 ㎎의 PS를 함유한다. 탈지유는 ℓ당 약 10 ㎎을 함유한다. 크림을 휘저음으로부터 발생하는 버터밀크는 ℓ당 약 130 ㎎의 PS를 함유한다. 버터오일로부터의 버터밀크는 PS의 훨씬 더 좋은 공급원이며, 이는 ℓ당 약 250 ㎎의 PS를 함유한다.
정의
본 명세서에 사용된 하기 용어는 하기 의미를 갖는다:
영양약학제품은 식품 또는 식품의 일부이고 의료적 이점 및/또는 건강에 대한 이점, 예컨대 질환의 예방 및 치료를 제공하는 임의의 물질로서 정의된다.
버터밀크는 버터 또는 버터오일의 제조 이후의 유청상 (serum phase)으로서 정의된다.
PL은 인지질의 약어이다.
PS는 포스파티일세린의 약어이다.
SPH는 스핑고미엘린의 약어이다.
MFGM은 유지방구막의 약어이다.
본 발명에 사용된 PL 농축물은 우유 유래의 인지질 농축물이다.
P31 NMR 검출기를 갖는 고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC)는 건조 샘플의 용매 추출 이후 PS를 비롯한 인지질의 조성을 측정하는 진보된 방법이다.
실험실 환경에서 정신생리학적 스트레스 반응을 조사하는 도구인 트리어 사회적 스트레스 시험 모델 (Trier Social Stress Test model, TSST)은 문헌 [Kirschbaum, C, Pirke, KM, Hellhammer, DH, The "Trier Social Stress Test", Neurophysiobiology, 1993, 28, p.76-81]에 의해 기재된 바와 같다.
DMV 인터내셔날사제 Esprion 300은 약 30%의 단백질을 갖는 유장 단백질 농축물이다.
본 발명은 우수한 분산성 및 감각수용성 뿐만 아니라 물리적 안정성을 갖는 천연 조성물의 우유 유래의 포스파티딜세린 공급원에 관한 것이다.
상기 공급원은 버터오일 제조로부터의 버터밀크 또는 유청상 유래일 수 있다. 이는 총 고체의 중량을 기준으로 계산시 0.2% 초과의 PS, 예컨대 총 고체의 중량을 기준으로 계산시 0.2 내지 10%의 PS 또는 1.5 내지 3%의 PS를 함유할 수 있다.
본 발명의 공급원은 또한 스핑고미엘린을 포스파티딜세린의 양의 약 2배의 양으로 공급할 수 있다.
상기 공급원은 영양약학 조성물에 유용하다.
이는 분말 또는 분산액 또는 용액 중 액체 농축물의 형태인 영양약학 성분일 수 있다.
영양약학 조성물의 예는 초콜릿, 아이스크림, 음료, 요구르트, 영양 바 또는 임의의 영양약학 제제이다.
특히, 본 발명의 공급원을 섭취분량 (serving)당 20 ㎎ 초과의 PS 및 40 ㎎ 초과의 SPH, 예컨대 섭취분량당 20 ㎎ 내지 500 ㎎의 PS 및 40 ㎎ 내지 1500 ㎎의 SPH를 함유하는 음료를 제공하는 양으로 함유하는, 음료 형태인 영양약학 조성물을 활성 성분 침전의 문제없이 제공하는 것이 가능하다.
1일 섭취분량은 보통 20 내지 1000 ㎖ 또는 100 내지 250 ㎖이다.
영양약학 조성물은 또한 단위 또는 용량당 20 ㎎ 내지 500 ㎎의 PS 및 40 ㎎ 내지 1500 ㎎의 SPH를 제공하는 고체 식품으로 섭취되도록 제제화될 수 있다.
20 ㎎ 내지 500 ㎎의 PS 및 40 내지 1500의 PS 사이의 모든 값이 이용될 수 있다. 특정 제한은 없다. 그러나, 1일당 20 ㎎ 미만의 PS 및 40 ㎎ 미만의 SPH의 효과는 측정하기 어려울 것이다. 1일당 500 ㎎ 초과의 PS 및 1500 ㎎ 초과의 SPH는 건강에 해로울 것이다.
영양약학 조성물은 우유 또는 우유 유래의 음료, 예컨대 드링킹 요구르트 또는 통상의 요구르트, 임의의 기타 유형의 음료, 예컨대 물, 산성 과일 주스 또는 2 내지 8 범위의 pH를 갖는 유사한 과일맛 음료를 기초로 할 수 있다.
본 발명은 또한 통상의 크림을 원심분리에 의해 농축하고, 그 후 생성되는 에멀젼을 균질화기에 의해 분쇄하고, 유청상을 수집하고, 지방을 분리하며, 투석여과를 비롯한 한외여과에 의해 처리하고 마지막으로 분무 건조시키는 것을 포함하는, 버터오일의 제조로부터의 유청으로부터 우유 유래의 포스파티딜세린 공급원을 제조하는 공정에 관한 것이다.
상기 공정은 인지질 분획물이 농축물 중 총 지질의 75% 초과를 구성하는 우유 PL 농축물을 제공할 수 있다.
상기 공정에서, 크림 중 통상의 지방 함량은 약 40% 내지 약 80%로 농축된다. 상 전환 이전에 크림 중 지방 농도가 높을수록 유청상 중 포스파티딜세린을 비롯한 PL 함량이 높다.
우유 유래의 포스파티딜세린 공급원은 또한 탈지 이후 유장의 미세여과로부터의 잔존물로부터 수득가능하다.
주로 PS의 고 함량을 함유하는 분말을 수득하기 위하여, 버터오일 제조를 위한 크림을 원심분리에 의해 약 80%의 지방을 함유하는 크림으로 농축한다. 고 전단에 의하여 에멀젼을 분쇄한 후, 농축된 버터 유청 또는 버터밀크를 버터오일과 함께 수득한다. 이에 따라 수득된 버터밀크는 공정 중 지속적으로 지방 분리되어 유청 중 총 지질의 약 70 ∼ 80%가 PL인 유청을 제공한다. 그 후, 상기 유청을 냉각하고 한외여과하여 락토오스 및 회분 함량을 감소시키며, 임의로 투석여과에 의하여 총 지질의 약 17%가 PL이고, 특히 총 고체의 약 2.0 ∼ 2.5%가 PS인 잔존물을 제공한다. 상기 농축물을 마지막으로 분무 건조한다.
상기 절차에 따라서, 하기의 전형적인 총 조성을 갖는 천연 PS의 우수한 공급원을 수득하였다:
(%)
총 지질 21 ∼ 25
인지질 16 ∼ 19 (특히, 약 2%의 PS 및 5%의 스핑고미엘린)
단백질 55 ∼ 60
락토오스 6 ∼ 9
회분 6
놀랍게도, 본 발명자는 상기 명시된 물질을 물 또는 탈지유와 같은 음료 베이스에 첨가하여 200 ㎖의 섭취분량당 100 ㎎의 PS를 제공하는 경우, 냉장고의 온도에서 장기간 저장하는 동안 PS의 침전 및 맛의 열화 없이 매우 효과적인 PS 공급원을 수득한다는 점을 발견하였다.
실시예 1
시판되는 헤드기 교환에 의해 개질된 대두 PS 제품과 비교시 본 발명의 공급원의 효과
재킷형 탱크 내에 저장된 탈지유 40 ℓ의 3 개의 뱃치를 상이한 공급원으로부터의 PS, 즉 하기를 함유하는 3 개의 상이한 분말에 첨가하였다:
2.0%의 PS를 함유하는, 버터밀크 유래의 본 발명에 따른 우유 PL 농축물
21%의 PS를 함유하는, 이스라엘 소재의 엔자이모텍사제 "PS 20" (헤드기가 교환된 대두 레시틴으로부터의 PS 제품)
62%의 PS를 함유하는, "PS 20"과 동일한 원리에 따라 제조된, 엔자이모텍사제 상동 "PS 60".
PS 첨가량을 계산하여 탈지유 성분 음료의 200 ㎖의 섭취분량당 100 ㎎의 PS 용량을 제공하였다.
PS 물질이 첨가된 우유를 재킷형 탱크 내에서 75℃까지 가열하고 최종 온도에서 10 분 동안 유지시켰다.
분산액을 각각 40 및 160 바에서 2 단계로 균질화하고, 142℃에서 6 초 동안 UHT (초고온) 처리하였다. 냉각 후, 생성물을 500 ㎖의 무균 플라스크에 채워 넣고, 8℃에서 3 개월 동안 저장하였다.
1 주; 2 개월 및 3 개월 후 우유의 맛 및 PS 함량 (P31 NMR)을 시험하였다.
시험 결과는 버터밀크의 우유 첨가된 특정 분획물이 물리적으로 및 감각 수용적으로 안정하다는 점이었다.
우유 첨가된 PS 20 및 PS 60은 물리적으로 불안정하였다. 1 주 후에 이미, 70%의 PS가 침전되었고 플라스크의 바닥에 가라앉았다. 본 발명의 공급원으로부터의 PS로 제조된 음료는 시험 기간 내내 화학적으로 안정하며 침전을 나타내지 않는 것으로 발견되었다.
감각 수용 품질에 있어서, PS 2O 샘플은 대두에 전형적인 불쾌한 오프-테이 스트 (off-taste)를 가져서 우유를 거의 마실 수 없게 만들었다. PS 60 샘플의 맛은 시험 기간 동안 더 안정하였다.
결론적으로, 사용된 제조 절차에 따르면, 본 발명에 따른 PS 유래의 버터밀크만이 활성 화합물의 침전 없이 장기간 물리적으로 안정하였다.
실시예 2
40%의 지방 함량을 갖는 240 미터톤의 크림을 원심분리기 내에서 70℃에서 11.5 ㎥/h로 농축하여 약 80% 지방의 크림을 제공하였다. 농축된 크림을 다음 단계에서 균질화기 내에서 상 전환하고, 인지질이 풍부한 유청상을 2 단계 분리 절차로 1300 ℓ/h로 제거하고, 약 4℃까지 냉각시켰다. 유청상 (버터밀크)의 한외여과 및 건조 후, 총 지질에 대하여 고 비율의 PL, 즉 23.3%의 총 지질에 대하여 19%의 PL을 갖는 약 1.2 미터톤의 우유 PL 농축물을 수득하였다. 우유 PL 농축물의 조성은 하기 표에 더 상세하게 기재되어 있다.
(%)
단백질 (Nx6.38, Kjeldahl) 58.5
락토오스 6.6
회분 5.3
수분 3.5
총 지질 23.3
총 인지질 19.1
- 스핑고미엘린 5.1
- 포스파티딜콜린 5.4
- 포스파티딜에탄올아민 4.3
- 포스파티딜세린 2.3
- 포스파티딜이노시톨 1.5
총 세라미드 1.3
강글리오사이드 0.59
콜레스테롤 0.27
트리글리세라이드 대략 3
실시예 3
제제 및 비교 및 임상 실험
250 ㎖의 용량 또는 섭취분량당 약 300 ㎎의 포스파티딜세린을 함유하는 시험 음료를 실시예 2에서 제조된 우유 PL 농축물을 사용하여 제제화하였다. 약 13.5 g의 우유 PL 분말을 사용하여 250 ㎖의 섭취분량 부피당 목적하는 포스파티딜세린 용량을 수득하였다. 음료를 트리어 사회적 스트레스 시험 모델 (TSST)에 따라 내분비, 자율 신경 및 심리학적 파라미터에 대한 임상 실험에 사용하였다. 줄리안 헬하머 (Juliane Hellhammer) 박사의 지휘 하에 독일, 트리어 소재의 인스티튜트 다크로 (Institute Daacro) / 진단 평가 및 임상 연구 기관에서 조사를 수행하였다.
탈지유 분말 및 버터오일에 대한 플라시보 음료를 제조하였다. 음료를 50 바에서 균질화하고 143℃에서 4 초 동안 가열 처리하였다. 바닐라 추출물에 의해 제제에 향미를 가하고 수크랄로오스의 첨가에 의해 단맛을 가하였다. 시험 음료 중 락토오스를 조절하여 플라시보와 동일 함량을 함유하게 하였다. 플라시보 음료는 인지질을 거의 함유하지 않았고, 이는 분석 이후 확인되었다. 따라서, 시험 및 플라시보 모두는 지질 (1.3%), 단백질 (3.2%) 및 락토오스 (4.4%)에 대하여 동일하게 함유하였다.
시험 샘플 및 플라시보는 4 개월 이상의 저장 동안 완벽하게 안정하였고 오프-테이스트를 생성하지 않았다.
임상 실험은 이중 맹검 배열의 총 46 명의 환자를 포함하였다. 시험 및 플라시보 음료는 3 주 동안 제어된 방식으로 소비되고, 그 후 환자에게 스트레스 시험인 TSST/ 트리어 사회적 스트레스 시험을 실시하였다. 기억, 기분 / 스트레스로서의 생리적, 내분비 및 인지 파라미터 모두를 측정하고 군 간에 비교하였다.
임상 시험 결과:
실험의 평가로부터 하기와 같이 요약하였다:
본 연구의 결과를 종합해보면, 음료 제제 중 상기 명시한 바와 같은 13.5 g의 우유 PL 분말 (즉, 본 발명의 첨가제)의 섭취는 작업 기억 수행을 크게 향상시키는 반면, 생리적 및 내분비 스트레스 반응을 약화시키는 것으로 나타났다. 유청 함량 및 침 코르티솔의 수준은, 예를 들어, 시험군에서 유의하게 저하되었다.
또한, 콜레스테롤 (LDL)은 플라시보군과 비교시 시험군의 혈청 중 약 10%만큼 유의하게 감소되었다는 점이 주목된다. HDL 수치는 영향을 받지 않았다.
실시예 4
밀크 초콜릿 제제
우유 PL 농축물이 첨가된 밀크 초콜릿을 하기 처방에 따라 제조하여 100 ㎏의 완성 제품의 뱃치를 제공하였다.
양 (㎏)
당 39.00
코코아 질량 16.50
카카오 기름 18.50
락토오스 4.00
우유 분말 17.50
우유 PL 분말 4.50
바닐린 0.03
제품은 물리적으로 및 감각 수용적으로 우유 PL이 없는 대조군과 완전히 유사하였다. 1일 1인분의 100 g의 초콜릿은 100 ㎎의 PS (+ 160 ㎎의 SPH)를 제공할 것이다.
실시예 5
아이스크림 제제
아이스크림 제제를 하기 처방에 따라 제조하여 100 ㎏의 뱃치를 제공하였다.
양 (㎏)
크림 (40%의 지방) 25.00
SMP (탈지유 분말) 3.62
Esprion 300 (유장 단백질 농축물) 0.67
당 9.00
과당 시럽 9.00
유화제 (LBG) 0.12
구아 검 0.08
우유 PL 분말 4.33
물 100까지
아이스크림의 일반적 1일 1인분은 75 g이다. 2.2%의 PS를 갖는 4.33%의 우유 PL 분말에서, PS의 1일 양은 70 ㎎ (160 ㎎의 SPH)이다. 제품은 맛 및 안정성 모두에 있어서 대조군과 비슷하였다. 유화제의 양은 시험 제품에서 유의하게 감소될 수 있었다.

Claims (20)

  1. 우수한 분산성 및 감각수용성 뿐만 아니라 물리적 안정성을 갖는 천연 조성물의 우유 유래의 포스파티딜세린 공급원.
  2. 제1항에 있어서, 버터오일 제조로부터의 버터밀크 또는 유청상 (serum phase) 유래의 공급원.
  3. 제1항에 있어서, 총 고체의 중량을 기준으로 계산시 0.2% 초과의 PS를 함유하는 공급원.
  4. 제1항에 있어서, 총 고체의 중량을 기준으로 계산시 0.2 내지 10%의 PS를 함유하는 공급원.
  5. 제1항에 있어서, 총 고체의 중량을 기준으로 계산시 1.5 내지 3%의 PS를 함유하는 공급원.
  6. 제1항에 있어서, 스핑고미엘린을 포스파티딜세린의 양의 약 2배의 양으로 공급하는 공급원.
  7. 제1항의 공급원의 형태인 영양약학 성분을 함유하는 영양약학 조성물.
  8. 제7항에 있어서, 초콜릿, 아이스크림, 음료, 요구르트, 영양 바 또는 임의의 영양약학 제제의 형태인 영양약학 조성물.
  9. 제8항에 있어서, 제1항의 공급원을 섭취분량 (serving)당 20 ㎎ 초과의 PS 및 40 ㎎ 초과의 SPH를 함유하는 음료를 제공하는 양으로 함유하는, 음료 형태의 영양약학 조성물.
  10. 제9항에 있어서, 제1항의 공급원을 섭취분량당 20 ㎎ 내지 500 ㎎의 PS 및 40 ㎎ 내지 1500 ㎎의 SPH를 함유하는 음료를 제공하는 양으로 함유하는, 음료 형태의 영양약학 조성물.
  11. 제10항에 있어서, 1일 섭취분량이 20 내지 1000 ㎖인 영양약학 조성물.
  12. 제11항에 있어서, 1일 섭취분량이 100 내지 250 ㎖인 영양약학 조성물.
  13. 제8항에 있어서, 단위 또는 용량당 20 ㎎ 내지 500 ㎎의 PS 및 40 ㎎ 내지 1500 ㎎의 SPH를 제공하는 고체로서 섭취하기 위한 영양약학 조성물.
  14. 제6항에 있어서, 우유를 기재로 하는 영양약학 조성물.
  15. 제6항에 있어서, 물, 산성 과일 주스 또는 2 내지 8 범위의 pH를 갖는 유사한 과일맛 음료를 비롯한, 또다른 유형의 음료를 기재로 하는 영양약학 조성물.
  16. 통상의 크림을 원심분리에 의해 농축하고, 그 후 생성되는 에멀젼을 균질화기 내에서 분쇄하고, 유청상을 수집하고, 지방을 분리하며, 투석여과를 비롯한 한외여과에 의해 처리하고 마지막으로 분무 건조시키는 것을 포함하는, 버터오일의 제조로부터의 유청으로부터 제1항의 공급원을 제조하는 방법.
  17. 제16항에 있어서, 인지질 분획물이 농축물 중 총 지질의 75% 초과를 구성하는 우유 PL 농축물을 제공하는 방법.
  18. 제16항에 있어서, 크림 중 통상의 지방 함량을 약 40% 내지 약 80%로 농축시키는 방법.
  19. 제16항의 방법에 의해 수득가능한 제1항의 공급원.
  20. 탈지 목적을 위한 유장의 미세여과로부터의 잔존물로부터 수득가능한 제1항의 공급원.
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