KR20080000008A - 항고혈압 활성을 갖는 상황버섯식초 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 항고혈압 활성을 갖는 상황버섯식초에 관한 것이다.
본 발명의 항고혈압 활성을 갖는 상황버섯식초는, 상황버섯균사체 고체배양물을 제조한 후, 주모를 제조한 다음, 1단담금을 하고, 상기의 상황버섯균사체 고체배양물을 이용하여 2단담금한 후, 2단담금 발효물을 여과하고 알코올 농도를 7 %가 되도록 물로 희석하여 희석액을 제조하고, 초산균을 분리하여 분리된 초산균의 액체종균을 상기의 알코올희석액 중량대비 10 중량% 접종하여 초산발효시키고, 여과하여 상황버섯식초를 제조하는 것으로 구성된다.
본 발명에 의해 초산생성능이 뛰어난 초산균 아세토박터 아세티-비아이지(Acetobacter aceti-BIG, 수탁번호 KACC 91256P)를 이용하여 제조한 상황버섯식초 및 그 제조방법이 제공되며, 또한 안지오텐신 전환효소 억제활성이 뛰어나고, 혈압강하 효과가 뛰어난 항고혈압 활성을 갖는 상황버섯식초가 제공된다.
식초, 항고혈압, 상황버섯균사체, 안지오텐신전환효소, 초산균

Description

항고혈압 활성을 갖는 상황버섯식초{PHELLINUS LINTEUS VINEGAR HAVING AN ANTI-HYPERTENSION ACTIVITY}
도 1은 본 발명의 상황버섯식초의 제조공정도.
도 2는 본 발명의 상황버섯식초에 대한 안지오텐신 전환효소 저해활성 실험 결과를 나타낸 그래프.
도 3은 본 발명의 상황버섯식초에 대한 혈압강하 실험 결과를 나타낸 그래프.
본 발명은 항고혈압 활성을 갖는 상황버섯식초에 관한 것이다.
고혈압은 순환기 계통의 만성퇴행성 질환으로 혈압증가가 지속됨으로서 악성고혈압, 심부전, 뇌출혈, 신경화증, 대동맥질환 등 혈관 이상에 의한 다양한 심혈관계 질환이 유발될 수 있다.
혈압조절에 있어서 매우 중요한 역할을 하는 레닌-안지오텐신 계 활성의 증 가는 고혈압 유발이나 증상과 밀접한 관련이 있고, 따라서 레닌-안지오텐신 계 과정을 차단하는 성질을 갖은 다양한 약물들이 항고혈압 치료제로서 사용되고 있다.
레닌-안지오텐신 계는 신장에서의 혈류량, 나트륨량의 감소, 교감신경계의 활성증가에 의해 활성화 되며, 신장동맥의 방사구체세포(juxtaglomerular cell)에서 분비된 레닌(renin)이 안지오텐시노젠(angiotensinogen)을 데카펩타이드 (decapeptide)인 안지오텐신Ⅰ(angiotensinⅠ)으로 분해시키고 이는 다시 안지오텐신전환효소(angiotensin converting enzyme, ACE)에 의해 C-말단의 디펩타이드 (dipeptide, His-Leu)가 가수분해 됨으로서 강한 혈관 수축 작용을 갖는 옥타펩타이드(octapeptide)인 안지오텐신Ⅱ(angiotensinⅡ)로 전환된다.
안지오텐신Ⅱ(angiotensinⅡ)의 증가는 강한 혈압 상승작용과 동시에 부신피질(adrenal cortex)에서 항이뇨 호르몬인 알도스테론(aldosterone)의 분비를 촉진하고, 알도스테론에 의해 원위세뇨관에서 나트륨 재흡수가 촉진되어 체액중의 물과 나트륨의 배설을 억제하여 순환혈액 양을 증가시킴으로서 고혈압을 일으키게 한다.
또한 ACE는 혈관 이완 작용을 하는 브레디키닌(bradkinin)을 분해하여 불활성화 시킴으로써 결과적으로 혈압상승을 유발한다. 따라서 안지오텐신Ⅱ의 생성을 막고 혈관 이완 작용을 하는 브레디키닌의 분해를 억제하기 위해서는 ACE의 작용을 저해하는 것이 필수적이다.
지금까지 천연물로부터 ACE 저해제를 분리하는 연구는 주로 식품 단백질을 펩신, 트립신 등의 단백질분해효소(protease)로 가수분해하여 얻어진 가수분해물로부터 ACE 저해효과를 갖는 기능성 펩타이드를 제조하고자 하는 것이 많았는데, 식 품단백질의 가수분해물로부터 제조된 기능성 펩타이드는 구조적, 기능적, 생리적 해석에 관한 논란이 있어 왔으며, 분리 정제 시 수율이 매우 낮을 뿐만 아니라 높은 제조경비 등의 경제적인 문제로 산업적으로 이용이 용이하지 않은 단점이 있었다.
또한, 식품의 형태로 안전하고 간편하게 장기간 지속적인 음용효과를 기대할 수 있는 효과적인 고혈압 개선제의 개발이 요구되고 있는 실정이다.
한편, 식초는 전통적으로 이용되어 온 발효식품으로 오래전부터 여러 가지 원료를 사용하여 수많은 종류의 식초가 만들어져 왔으며, 우리의 식생활에 있어서 음식의 맛을 내는 조리에 이용되거나 많은 전통 민간요법의 원료로서 사용되어 왔다.
일반적으로 식초는 체내 젖산을 분해하여 피로회복 및 질병예방, 식욕증진 및 소화흡수 증진, 콜레스테롤 저하로 인한 동맥경화 및 고혈압예방, 비만 및 변비예방, 면역기능향상과 치매예방 등의 다양한 효과가 있는 것으로 알려져 있다.
특히 최근에는 조리 시 사용되는 단순한 조미료로서 보다는 현미식초, 포도식초, 감식초, 인삼식초, 마늘식초 등과 같이 다양한 생리활성 소재들을 이용하여 기능성을 배가시킨 건강음료로서 개발되고 있다.
한국공개특허공보 10-2006-0038316(상황버섯을 이용한 식초의 제조방법 및 이에 따른 생산품)에는, 상황버섯을 건조하여 분쇄하고, 멥쌀밥, 누룩, 주정을 첨가하여 발효시키고, 숙성시켜 액상으로 정제하여 제조된 식초에 관한 것이 공개되어 있다.
한국등록특허공보 10-0500161(상황버섯 식초 및 그 제조방법)에는, 현미를 기질로 하여 상황버섯균사체 고체배양물을 배양하고, 주모담금과 1, 2단 담금에 의해 상황버섯 균사체 고체배양물을 술덧제조에 사용하는 알콜발효단계; 초산균의 분미 및 종초단계; 초산발효단계; 여과 및 숙성단계로 구성된 상황버섯 식초에 관한 것이 공개되어 있다.
그러나, 아직까지 고혈압 및 심혈관계 질환 개선에 효과적인 상황버섯식초에 대한 연구는 이뤄지지 않고 있는 실정이다.
본 발명은 상기의 문제를 해결하기 위해, 초산 생성능이 뛰어난 초산균을 이용하여 제조한 상황버섯식초 및 그 제조방법을 제공하는데 그 목적이 있다.
또한, 안지오텐신 전환효소 억제활성이 뛰어나고, 혈압강하 효과가 뛰어난 항고혈압 활성을 갖는 상황버섯식초를 제공하는데 그 목적이 있다.
본 발명은 항고혈압 활성을 갖는 상황버섯식초에 관한 것이다.
본 발명의 항고혈압 활성을 갖는 상황버섯식초는, 상황버섯균사체 고체배양물을 제조한 후, 주모를 제조한 다음, 1단담금을 하고, 상기의 상황버섯균사체 고체배양물을 이용하여 2단담금한 후, 2단담금 발효물을 여과하고 알코올 농도를 7 %가 되도록 물로 희석한 다음, 초산균을 분리하고, 분리된 초산균의 액체종균을 상 기의 알코올희석액에 희석액 중량대비 10 중량%를 접종하여 초산발효시키고, 여과하여 상황버섯식초를 제조하는 것으로 구성된다.
보다 상세히 설명하면 본 발명의 항고혈압 활성을 갖는 상황버섯식초는, 충분한 양의 물에 현미를 약 24 시간 동안 침지시킨 다음, 물을 뺀 후 현미를 배양봉투에 넣어 121 ℃에서 30 분간 고압멸균한 다음 식혀서 배양기질을 준비하는 제1공정, 여기에 배양기질 중량대비 10 중량%의 상황버섯 액체종균을 전체적으로 뒤덮이도록 접종하고, 25 ℃에서 30 일 동안 배양하여 상황버섯균사체 고체배양물을 제조하는 제2공정, 현미 : 물 : 누룩 : 효모를 1 : 1.5 : 0.02 : 0.1의 중량비율로 혼합하고, 25 ℃에서 24 시간 동안 배양하여 주모를 제조하는 제3공정, 여기에 현미 : 물 : 누룩을 1 : 1.5 : 0.02의 중량비율로 혼합하되, 이 혼합물이 상기 제3공정에서 제조한 주모의 5 ~ 10 배가 되도록 하여 25 ℃에서 24 시간동안 배양하여 1단담금을 하는 제4공정, 현미와 제2공정의 상황버섯균사체 고체배양물을 1 : 1 ~ 1 : 3의 중량비율로 혼합하여 121 ℃에서 30 분간 고압멸균한 후 식히고, 상기의 상황버섯균사체 혼합물과 제4공정의 1단담금 배양물을 1.5 : 1의 중량비로 혼합한 다음 여기에 전체 중량대비 100 중량%의 물을 첨가하여, 25 ℃에서 14 일 동안 발효시켜 2단담금하는 제5공정, 제5공정에서 제조한 2단담금 발효물을 여과하는 제6공정, 이 여과액을 알코올 농도가 7 %가 되도록 물로 희석하여 알코올희석액을 제조하는 제7공정, 초산균을 분리하여 배양하는 제8공정, 분리한 초산균을 상기 제7공정의 알코올희석액에 희석액 중량대비 10 중량%를 접종한 다음, 30 ℃에서 30 일 동안 초산발효시키는 제9공정, 상기의 초산발효액을 여과하는 제10공정을 거쳐 본 발명의 상 황버섯식초를 제조하는 것으로 구성된다.
한편, 상황버섯(Phellinus liteus)은 고산지대에 서식하고 있는 산 뽕나무의 고목에서 자생하는 매우 희귀한 담자류의 다년생 버섯이다.
상황버섯은 일본국립암연구소의 치카라 박사에 의해 상황의 종양저지율이 96.7%, 종양완전퇴숙 87.5%라는 결과가 발표되면서 의학계의 관심을 불러 일으켜 국내외 연구기관과 학계 제약업계에서 임상 실험하며 이미 그 효능이 입증된 바 있다.
또한, 상황버섯은 일반적인 항암 화학요법제와는 달리 정상세포에 독작용을 나타내지 않고, 오히려 면역기능을 강화시켜 해독작용을 활성화시켜 암에 효과가 뛰어나고, 심한기침, 간질환, 위통, 편두통 등의 각종 통증 및 빈혈의 예방과 치료, 체력 강화 및 숙취 제거, 변비에 탁월한 효과가 있다고 알려져 있다.
현미는 쌀겨층이나 씨눈 부분을 깎지 않은 쌀로써, 비타민 B1, B2, 당질, 단백질, 지방질, 미네랄, 식이섬유 등 거의 모든 영양소가 포함되어 있다.
또한, 현미는 장의 연동운동을 도와 변비를 해소시키는 효과가 있고, 대장암을 예방하는 효과가 있으며, 동맥경화와 노화방지에 커다란 역할을 하며, 미강에 아라비녹실란(arabinoxylan)을 비롯한 유용성분이 함유되어 있어 면역부활작용, 항암작용, 동맥경화 및 혈압상승 억제작용 등의 생리활성을 가지고 있다고 알려져 있다.
본 발명의 발명자들은 고혈압 및 심혈관계 질환 개선에 효과가 뛰어난 식초 에 대해 연구하던 중, 상기와 같은 효능을 갖는 상황버섯을 이용하여 식초를 제조하였고, 식초의 제조과정에서 사용하는 초산균에 있어서 보다 활성이 뛰어나고 초산 생성능이 뛰어난 초산균을 직접 분리.배양하여 본 발명의 상황버섯식초 제조에 이용함으로써, 항고혈압 활성이 뛰어난 상황버섯식초를 완성하게 되었다.
본 발명은 상황버섯종균을 현미에 접종하고 배양하여 상황버섯균사체를 만들어 본 발명의 상황버섯식초를 제조하였으며, 이때 상황버섯종균은 농촌진흥청이나 산림청에서 분양받거나, 한국생명공학연구원 유전자은행에서 분양받거나, 국제기탁기관인 미국 ATCC에서 분양받아 사용할 수 있으며, 자연산 상황버섯의 갓조직에서 조직분리하여 통상의 방법에 의해 대량배양하여 이용할 수 있다.
한편, 2단담금 발효물(술덧) 제조시, 현미와 상황버섯균사체 고체배양물을 혼합하여 고압멸균한 다음, 여기에 1단담금 배양물과 물을 첨가하고 발효시켜 2단담금 발효물을 만드는데, 이때 현미와 상황버섯균사체 고체배양물의 혼합비율에 따라 최종 만들어지는 식초의 산도가 변하는 것을 확인하였다.
즉, 상황버섯균사체 고체배양물이 첨가되지 않거나 현미의 비율이 더 높은 경우에는 최종적으로 제조되는 식초의 산도가 4 % 이하로 비교적 산도가 낮았으나, 상황버섯균사체 고체배양물과 현미가 동일 비율이거나 상황버섯균사체 고체배양물의 비율이 더 높은 경우에는 제조되는 식초의 최종 산도가 4 ~ 5 % 로써 식초의 산도가 적절하여 맛이 더욱 좋아지는 것을 확인하였다.
특히, 현미와 상황버섯균사체 고체배양물의 비율이 1 : 1 내지 1 : 3인 경우에 제조되는 식초의 산도가 가장 적절하다는 것을 알 수 있었다.
이때, 현미를 제외하고 상황버섯균사체 고체배양물만 이용하여 1단 담금 배양물과 물을 첨가하고 발효시켜 2단담금을 제조할 수도 있다.
또한, 본 발명의 발명자들이 초산 생성능이 뛰어난 초산균을 전통적인 발효법을 거쳐 제조된 감식초로부터 분리하여, 본 발명의 상황버섯식초 제조과정에 사용하여 항고혈압 활성이 뛰어난 상황버섯식초를 완성하게 되었다.
즉, 본 발명에서 이용한 초산균은, 에탄올 고체배지(glucose 3.0%, peptone 1.0%, beef extract 1.0%, ethanol 4.0%, CaCO3 1.0%, agar 1.5%, pH7.0)에 감식초를 도말하고 30 ℃에서 4 일간 배양하여 콜로니 주위에 생성된 투명한 환의 크기로 발효력이 큰 초산균을 분리한 후, 평판배양을 반복하고, 이렇게 순수하게 분리하였다.
이렇게 순수한 초산균을 초산균 액체배지(glucose 0.5%, glycerine 1.0%, peptone 0.2%, yeast extract 0.2%, MgSO4ㆍ7H2O 0.05%, acetic acid 2.0%, ethanol 4.0%, pH3.0)에 접종하여 30 ℃에서 2 ~ 3 일간 배양한 다음, 이것을 종초로 하여 다시 액체배지에서 30 ℃에서 7 일간 배양한 후 초산발효에 사용하였다.
상기와 같이 선발된 초산균은 아세토박터속(Acetobacter)에 속하는 균주로서, 아세토박터 아세티(Acetobacter aceti) 표준균주에 가장 높은 분자계통학적 유연관계를 보여주는 균주로 동정되었다.
본 균주의 DNA 유전자의 염기 서열은 서열목록에 기재하였다(서열번호 1).
따라서, 상기 초산균을 아세토박터 아세티-비아이지(Acetobacter aceti-BIG)로 명명하여 농업생명공학연구원 한국농업미생물자원센터(KACC)에 2006년 6월 19일자로 기탁하였다(수탁번호 : KACC 91256P).
본 발명의 상황버섯식초는 안전하게 장기간 섭취가 가능하여 고혈압 및 이와 관련된 심혈관계 질환의 개선에 효과적이며, 항고혈압 활성을 갖는 음료조성물 등 기능성식품으로도 다양하게 이용할 수 있다.
또한, 본 발명상황버섯식초를 유효성분으로 포함하는 의약품 등으로도 활용이 가능하다.
본 발명의 항고혈압 활성을 갖는 상황버섯식초의 제조공정에 대해 상세히 설명하면 다음과 같다.
<상황버섯식초의 제조공정>
1. 제1공정 : 배양기질 준비
시중에서 현미를 구입하여 준비한다.
충분한 양의 물에 현미를 넣고 약 24 시간 동안 침지시킨 다음, 물을 뺀 후 현미를 배양봉투에 넣어 121 ℃에서 30 분간 고압멸균한 다음 식혀서 배양기질로 준비한다.
2. 제2공정 : 상황버섯균사체 고체배양물 제조
상황버섯종균은 농촌진흥청이나 산림청에서 분양받거나, 한국생명공학연구원 생물자원센터에서 분양받거나, 국제기탁기관인 미국 ATCC에서 분양받아 준비하거나, 자연산 상황버섯의 갓조직에서 조직분리하여 통상의 방법에 의해 대량배양하여 준비한다.
준비한 상황버섯 액체종균을 배양기질 중량대비 10 중량% 접종하되, 액체종균을 상기 제1공정에서 준비한 배양기질에 전체적으로 뒤덮이도록 접종한다.
접종 후 25 ℃에서 30 일 동안 배양하여 상황버섯균사체 고체배양물을 제조한다.
3. 제3공정 : 주모제조
현미, 물, 누룩, 효모를 1 : 1.5 : 0.02 : 0.1의 중량비율로 혼합하고, 25 ℃에서 24 시간동안 배양하여 주모를 제조한다.
4. 제4공정 : 1단담금 배양물 제조
현미와 물과 누룩을 1 : 1.5 : 0.02의 중량비율로 혼합한다.
상기 제3공정에서 제조한 주모와 상기의 혼합물을 1 : 5 ~ 10 의 비율로 혼합하고 25 ℃에서 24 시간동안 배양하여 1단담금 배양물을 제조한다.
5. 제5공정: 2단담금 발효물 제조
현미와 제2공정에서 제조한 상황버섯균사체 고체배양물을 1 : 1 ~ 1 : 3의 중량비율로 혼합하여 121 ℃에서 30 분간 고압멸균한 후 식힌다.
상기의 혼합물과 제4공정의 1단담금 배양물을 1.5 : 1의 중량비로 혼합한 다음, 혼합물 전체의 중량대비 100 중량%의 물을 첨가하여, 25 ℃에서 14일 동안 발효시켜 2단담금 발효물을 제조한다.
6. 제6공정 : 여과
제5공정의 2단담금 발효물을 여과한다.
7. 제7공정 : 희석액 제조
제6공정의 여과액을 물로 희석하여 알코올 농도를 7 %가 되도록 희석액을 제조한다.
8. 제8공정 : 초산균 준비
전통적인 발효법을 거쳐 제조된 감식초로부터 분리한 초산균(수탁번호 KACC 91256P)을 준비한다.
9. 제9공정 : 초산발효액 제조
제7공정에서 제조한 희석액에 제8공정에서 준비한 초산균의 액체종균을 알코올희석액 중량대비 10 중량%로 접종한 다음 30 ℃에서 30 일 동안 초산발효시킨다.
10. 제10공정 : 여과
제9공정에서 제조한 초산발효액을 여과하여 최종 산도가 4 ~ 5 %인 본 발명의 식초를 제조한다.
이하, 본 발명의 상황버섯식초에 대하여 실시예 및 실험예를 통하여 상세히 설명하면 다음과 같다.
<실시예 1> 초산균의 분리
에탄올 고체배지(glucose 3.0%, peptone 1.0%, beef extract 1.0%, ethanol 4.0%, CaCO3 1.0%, agar 1.5%, pH7.0)에 감식초를 도말하고 30 ℃에서 4 일간 배양하여 콜로니 주위에 생성된 투명한 환의 크기로 발효력이 큰 초산균을 분리한 후, 평판배양을 반복하였다.
순수하게 분리한 초산균을 초산균 액체배지(glucose 0.5%, glycerine 1.0%, peptone 0.2%, yeast extract 0.2%, MgSO4ㆍ7H2O 0.05%, acetic acid 2.0%, ethanol 4.0%, pH3.0)에 접종하여 30 ℃에서 3 일간 배양한 다음, 이것을 종초로 하여 다시 액체배지에서 30 ℃에서 7 일간 배양한 후 초산발효에 사용하였다.
상기와 같이 배양된 초산균은 아세토박터속(Acetobacter)에 속하는 균주로서, 아세토박터 아세티(Acetobacter aceti) 표준균주에 가장 높은 분자계통학적 유연관계를 보여주는 균주로 동정되었다.
상기 균주의 DNA 유전자의 염기 서열은 서열목록에 기재하였다(서열번호 1).
따라서, 상기 초산균을 아세토박터 아세티-비아이지(Acetobacter aceti-BIG)로 명명하여 농업생명공학연구원 한국농업미생물자원센터(KACC)에 2006년 6월 19일자로 기탁하였다(수탁번호 : KACC 91256P).
<실시예 2> 상황버섯균사체를 이용한 상황버섯식초의 제조 1
시중에서 현미를 구입하여 준비하였다.
준비한 현미 10 ㎏에 충분한 양의 물을 넣고 약 24 시간 동안 침지시킨 다음, 물을 뺀 후 현미를 배양봉투에 넣고 121 ℃에서 30 분간 고압멸균한 다음 식혀 서 배양기질로 준비하였다.
상황버섯 종균은 국제기탁기관인 미국 ATCC에서 분양받아 준비하였다(ATCC 26710).
상기의 배양기질에 준비한 상황버섯 액체종균을 배양기질의 중량대비 10 중량%를 접종하되, 배양기질에 전체적으로 뒤덮이도록 접종하고, 25 ℃에서 30 일 동안 배양하여 상황버섯균사체 고체배양물을 제조하였다.
현미 100 g, 물 150 g, 누룩 2 g을 혼합하고, 여기에 효모(Saccaromyces cerevisiae) 10 g을 접종하고 25 ℃에서 24 시간동안 배양하여 주모를 제조하였다.
또, 현미 500 g, 물 750 ㎏ 누룩 10 g을 혼합한 다음 상기의 주모와 혼합하고 25 ℃에서 24 시간동안 배양하여 1단담금 배양물을 제조하였다.
현미 1.2 ㎏과 상기에서 제조한 상황버섯균사체 고체배양물 1.2 ㎏을 혼합하여 121 ℃에서 30 분간 고압멸균한 후 식히고, 여기에 1단담금 배양물을 1.6 ㎏을 혼합한 다음, 여기에 물 4 ㎏을 첨가하여 25 ℃에서 14 일 동안 발효시켜 2단담금 발효물을 제조하였다.
상기의 2단담금 발효물을 여과하고, 물을 넣어 알코올 농도를 7 %가 되도록 희석하였다.
본 발명의 실시예 1에서 분리한 초산균(기탁번호 KACC 91256P)을 준비하였다.
상기의 알코올 희석액에 준비한 초산균의 액체종균을 알코올희석액 중량대비 10 중량%를 접종한 다음 30 ℃에서 30 일 동안 초산발효시켰다.
상기에서 제조한 초산발효액을 여과하여 본 발명의 상황버섯식초를 제조하였다.
<실시예 3> 상황버섯균사체를 이용한 상황버섯식초의 제조 2
시중에서 현미를 구입하여 준비하였다.
준비한 현미 15 ㎏에 충분한 양의 물을 넣고 약 24 시간 동안 침지시킨 다음, 물을 뺀 후 현미를 배양봉투에 넣고 121 ℃에서 30 분간 고압멸균한 다음 식혀서 배양기질로 준비하였다.
상황버섯 종균은 상황버섯의 갓조직에서 조직분리하여 통상의 방법에 의해 대량배양하여 준비하였다.
상기의 배양기질에 준비한 상황버섯 액체종균을 배양기질의 중량대비 10 중량%를 접종하되, 배양기질에 전체적으로 뒤덮이도록 접종하고, 25 ℃에서 30 일 동안 배양하여 상황버섯균사체 고체배양물을 제조하였다.
현미 100 g, 물 150 g, 누룩 2 g을 혼합하고, 여기에 효모(Saccaromyces cerevisiae) 10 g을 접종하고 25 ℃에서 24 시간동안 배양하여 주모를 제조하였다.
또, 현미 1 ㎏, 물 1.5 ㎏ 누룩 20 g을 혼합한 다음 상기의 주모와 혼합하고 25 ℃에서 24 시간동안 배양하여 1단담금 배양물을 제조하였다.
현미 1.2 ㎏과 상기에서 제조한 상황버섯균사체 고체배양물 1.2 ㎏을 혼합하여 121 ℃에서 30 분간 고압멸균한 후 식히고, 여기에 1단담금 배양물을 1.6 ㎏을 혼합한 다음, 여기에 물 4 ㎏을 첨가하여 25 ℃에서 14 일 동안 발효시켜 2단담금 발효물을 제조하였다.
상기의 2단담금 발효물을 여과한 다음, 물을 넣어 알코올 농도를 7 %가 되도록 희석하였다.
본 발명의 실시예 1에서 분리한 초산균(기탁번호 KACC 91256P)을 준비하였다.
상기의 알코올희석액에 준비한 초산균의 액체종균을 알코올희석액 중량대비 10 중량%로 접종한 다음 30 ℃에서 30 일 동안 초산발효시켰다.
상기에서 제조한 초산발효액을 여과하여 본 발명의 상황버섯식초를 제조하였다.
<실시예 4> 상황버섯균사체를 이용한 상황버섯식초의 제조 3
본 발명의 실시예 2와 같은 방법으로 식초를 제조하였다.
단, 2단담금 발효물 제조시 현미 : 상황버섯균사체 고체배양물을 1 : 3의 비율로 하여 2단담금 발효물을 제조하여 본 발명의 상황버섯식초를 제조하였다.
<실시예 5> 상황버섯균사체를 이용한 상황버섯식초의 제조 4
본 발명의 실시예 2와 같은 방법으로 식초를 제조하였다.
단, 2단담금 발효물 제조시 현미 : 상황버섯균사체 고체배양물을 0 : 1의 비율, 즉 현미를 넣지 않고 2단담금 발효물을 제조하여 본 발명의 상황버섯식초를 제조하였다.
<비교예 1> 상황버섯식초의 비교제조 1
본 발명의 실시예 2와 같은 방법으로 식초를 제조하되, 2단담금 발효물 제조시 각각 현미 : 상황버섯균사체 고체배양물을 1 : 0의 비율로 혼합하여 상황버섯식초를 비교제조하였다.
<비교예 2> 상황버섯식초의 비교제조 2
본 발명의 실시예 2와 같은 방법으로 식초를 제조하되, 2단담금 발효물 제조시 각각 현미 : 상황버섯균사체 고체배양물을 3 : 1의 비율로 혼합하여 상황버섯식초를 비교제조하였다.
<비교예 3> 상황버섯식초의 비교제조 3
본 발명의 실시예 4와 같은 방법으로 식초를 제조하되, 초산균을 아세토박터 아세티 공시균주(ATCC 15973)를 이용하여 상황버섯식초를 비교제조하였다.
<실험예 1> 상황버섯식초의 산도 비교측정 실험
본 발명의 실시예 2 내지 5의 방법에 의해 제조된 상황버섯식초를 준비하였다.
비교예 1 내지 2의 방법에 의해 제조된 상황버섯식초를 준비하였다.
각각의 식초에 대해 산도를 측정하여 표 1에 그 결과를 나타내었다.
<표 1> 산도측정 결과
구 분 현미 : 상황버섯균사체 고체배양물 최종 산도(Acidity %)
실시예 2 1 : 1 4.5
실시예 3 1 : 1 4.5
실시예 4 1 : 3 4.9
실시예 5 0 : 1 4.8
비교예 1 1 : 0 4.0
비교예 2 3 : 1 3.9
상기의 표 1에서 보는 바와 같이, 본 발명의 식초 제조 과정 중 2단담금 발효물 제조시 현미와 상황버섯균사체 고체배양물의 혼합비율이 최종 제조된 식초의 산도에 영향을 미치는 것을 확인하였다.
또한, 상황버섯균사체 고체배양물이 제외된 경우나 현미의 비율이 더 높았던 경우인 비교예 1과 2의 식초는 산도가 더 떨어진다는 사실을 알 수 있었다.
<실험예 2> 초산균의 초산생성능 효과실험
본 발명의 실시예 4의 방법에 의해 제조된 상황버섯식초를 준비하였다.
실시예 4와 동일한 방법으로 식초를 제조하되, 본 발명의 초산균 대신 아세토박터 아세티 공시균주를 이용하여 제조한 상황버섯식초를 준비하였다.
각각의 식초에 대해 산도를 측정하여 표 2에 그 결과를 나타내었다.
<표 2> 산도측정 결과
구 분 초산균 최종 산도(Acidity %)
실시예 3 아세토박터 아세티-BIG(KACC 91256P) 4.9
비교예 3 아세토박터 아세티(ATCC 15973) 4.1
상기 표 2에서 보는 바와 같이, 통상적인 초산균 아세토박터 아세티를 이용하여 상황버섯식초를 제조한 비교예 3 보다 본 발명의 초산균 아세토박터 아세티-비아이지 균주를 이용하여 제조한 상황버섯식초의 최종산도가 더 높았다.
즉, 본 발명의 초산균 아세토박터 아세티-비아이지 균주의 초산 생성능이 보다 뛰어나다는 사실을 알 수 있었다.
<실험예 3> 상황버섯식초에 대한 안지오텐신 전환효소 억제활성 실험
본 발명의 실시예 1의 방법에 의해 제조된 상황버섯식초를 시료로 준비하였다.
안지오텐신 전환효소(ACE) 저해활성을 Cushman과 Cheung의 방법에 따라 측정하였다.
ACE 저해 정도는 기질로서 히퓨릴히스티딜류신(hippuryl-L-histidyl-L-leucine, HHL)을 사용하였으며, HHL은 300 mM NaCl을 포함하는 50 mM 소듐보레이트(sodium borate) 완충용액(pH 8.3)에 녹여 5 mM HHL을 만들었다.
효소는 토끼 폐로부터 분리한 것으로, 시그마알드리치사 ACE(Sigma Co., A6778)를 사용하였다.
기질 100 ㎕에 상황버섯식초 100 ㎕를 넣고 37 ℃에서 10 분간 안정화시킨 다음 효소 50 ㎕를 첨가하여 반응액을 37 ℃에서 30 분간 반응시켰다.
반응시킨 후 1N 염산 250 ㎕를 첨가하여 반응을 중지시켰다.
이때 무첨가군은 시료용액 대신 소듐보레이트 완충용액 50 ㎕를 가하였다.
반응 완료 후 반응액에 에틸아세테이트 1.5 ㎖를 넣어 30 초 동안 혼합한 후 3000 rpm에서 15 분간 원심분리한 후 상등액인 에틸아세테이트 층 1.25 ㎖을 취하여 100 ℃에서 1 시간 정도 건조시켰다.
건조 후 증류수 1.5 ㎖을 가하여 완전히 녹인 다음 228 ㎚에서 흡광도를 측정하고 대조구와 비교하여 ACE 저해 정도를 계산하였다.
Figure 112006044823999-PAT00001
* S는 시료의 흡광도, Sc는 시료 대조군의 흡광도(자체흡광도), B는 무첨가군의 흡광도, Bc는 무첨가군의 대조군 흡광도(자체흡광도)를 나타낸다.
상기와 같은 방법으로 본 발명의 상황버섯식초의 농도를 순차적으로 희석하여 안지오텐신 전환효소에 대한 저해활성을 측정한 결과 뛰어난 효소억제활성이 나타났다(도 2).
<실험예 4> 자발성 고혈압 쥐(SHR)에서 경구투여에 의한 혈압강하 효과실험
본 발명의 실시예 2의 방법에 의해 제조된 상황버섯식초를 시료로 준비하였다.
고혈압(240 mmHg 이상)이 발생된 생후 8주령의 수컷 SHR을 준비하였다.
실험군 15 마리와 대조군 15 마리를 사용하여 대조군에는 살린(saline)을, 실험군에는 본 발명의 상황버섯식초 1 ㎖/kg을 1 일 1 회씩 1 주간 경구 투여하면서 같은 시간에 혈압을 측정하여 비교하였다.
실험 결과, 대조군은 혈압의 감소가 나타나지 않았으나, 본 발명의 상황버섯 식초를 투여한 실험군에서는 유의할 수준의 혈압 감소 효과가 나타났다(도 3).
본 발명에 의해 초산생성능이 뛰어난 초산균 아세토박터 아세티-비아이지(Acetobacter aceti-BIG, 수탁번호 KACC 91256P)를 이용하여 제조한 상황버섯식초 및 그 제조방법이 제공된다.
또한, 본 발명에 의해 안지오텐신 전환효소 억제활성이 뛰어나고, 혈압강하 효과가 뛰어난 항고혈압 활성을 갖는 상황버섯식초가 제공된다.
<110> BIG Co., Ltd. <120> PHELLINUS LINTEUS VINEGAR HAVING AN ANTI-HYPERTENSION ACTIVITY <160> 1 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 1326 <212> DNA <213> Acetobacter aceti <400> 1 tcatggctca gagcgaacgc tggcggcatg cttaacacat gcaagtcgca cgaaggcttc 60 ggccttagtg gcggacgggt gagtaacgcg taggaatcta tccatgggtg ggggataact 120 ccgggaaact ggagctaata ccgcatgata cctgagggtc aaaggcgcaa gtcgcctgtg 180 gaggagcctg cgtttgatta gcttgttggt ggggtaatgg cctaccaagg cgatgatcaa 240 tagctggtct gagaggatga tcagccacac tgggactgag acacggccca gactcctacg 300 ggaggcagca gtggggaata ttggacaatg ggggcaaccc tgatccagca atgccgcgtg 360 tgtgaagaag gttttcggat tgtaaagcac tttcggcggg gacgatgatg acggtacccg 420 cagaagaagc cccggctaac ttcgtgccag cagccgcggt aatacgaagg gggctagcgt 480 tgctcggaat gactgggcgt aaagggcgtg taggcggttt gtacagttag atgtgaaatc 540 cccgggctta acctgggagc tgcatttaat acgtgcagac tagagtgtga gagagggttg 600 tggaattccc agtgtagagg tgaaattcgt agatattggg aagaacaccg gtggcgaagg 660 cggcaacctg gctcattact gacgctgagg cgcgaaagcg tggggagcaa acaggattag 720 ataccctggt agtccacgct gtaaacgatg tgtgctggat gttgggtaac ttagttactc 780 agtgtcgtag ctaacgcgat aagcacaccg cctggggagt acggccgcaa ggttgaaact 840 caaaggaatt gacgggggcc cgcacaagcg gtggagcatg tggtttaatt cgaagcaacg 900 cgcagaacct taccagggct tgtatgggta ggctgtgtcc agagatgggc atttcccgca 960 agggacctac cgcacaggtg ctgcatggct gtcgtcagct cgtgtcgtga gatgttgggt 1020 taagtcccgc aacgagcgca acccctatct ttagttgcca gcatgtttgg gtgggcactc 1080 tagagagact gccggtgaca agccggagga aggtggggat gacgtcaagt cctcatggcc 1140 cttatgtcct gggctacaca cgtgctacaa tggcgatgac aatgggaagc tagatggcga 1200 catcgtgctg atctcaaaaa gtcgtctcag ttcggattgc actctgcaac tcgagtgcat 1260 gaaggtggaa tcgctagtaa tcgcggatca gcatgccgcg gtgaatacgt ccccgggcct 1320 tgtacc 1326

Claims (6)

  1. 상황버섯식초의 제조방법에 있어서,
    충분한 양의 물에 현미를 24 시간 동안 침지시킨 다음, 물을 뺀 후 현미를 121 ℃에서 30 분간 고압멸균한 다음 식혀서 배양기질을 준비하는 제1공정,
    여기에 상황버섯 액체종균을 상기의 배양기질의 중량대비 10 %를 접종하되, 전체적으로 뒤덮이도록 접종하고, 25 ℃에서 30 일 동안 배양하여 상황버섯균사체 고체배양물을 제조하는 제2공정,
    현미 : 물 : 누룩을 1 : 1.5 : 0.02의 중량비율로 혼합하고, 여기에 상기의 현미 1 ㎏당 효모(Saccaromyces cerevisiae) 100 ㎖를 접종하고 25 ℃에서 24 시간동안 배양하여 주모를 제조하는 제3공정,
    여기에 현미 : 물 : 누룩을 1 : 1.5 : 0.02의 중량비율로 혼합하되, 이 혼합물이 상기 제3공정에서 제조한 주모의 5 ~ 10 배가 되도록 하여 25 ℃에서 24 시간동안 배양하여 1단담금 배양물을 제조하는 제4공정,
    현미와 제2공정의 상황버섯균사체 고체배양물을 1 : 1 ~ 1 : 3의 중량비율로 혼합하여 121 ℃에서 30 분간 고압멸균한 후 식히고, 상기의 상황버섯균사체 혼합물과 제4공정의 1단담금 배양물을 1.5 : 1의 중량비로 혼합한 다음 여기에 전체 혼합물의 중량대비 100 중량%의 물을 첨가하여, 25 ℃에서 14일 동안 발효시켜 2단담금 발효물을 제조하는 제5공정,
    제5공정에서 제조한 2단담금 발효물을 여과하는 제6공정,
    제6공정의 여과액에 물을 넣어 알코올 농도를 7 %가 되도록 희석액을 제조하는 제7공정,
    초산균을 준비하는 제8공정,
    분리한 초산균을 상기 제7공정의 알코올희석액에 희석액 중량대비 10 중량%를 접종한 다음, 30 ℃에서 30 일 동안 초산발효시키는 제9공정,
    제9공정에서 제조한 초산발효액을 여과하여 상황버섯식초를 제조하는 제10공정으로 구성된,
    상황버섯균사체를 이용한 상황버섯식초의 제조방법.
  2. 제1항에 있어서,
    제5공정의 2단담금 발효물 제조시, 상황버섯균사체 고체배양물을 121 ℃에서 30 분간 고압멸균한 후 식히고, 상기의 상황버섯균사체 고체배양물과 제4공정의 1단담금 배양물을 1.5 : 1의 중량비로 혼합한 다음 여기에 전체 혼합물의 중량대비 100 중량%의 물을 첨가하여, 25 ℃에서 14일 동안 발효시켜 2단담금 발효물을 제조하는 것이 특징인,
    상황버섯균사체를 이용한 상황버섯식초의 제조방법.
  3. 제1항에 있어서,
    제8공정의 초산균은, 감식초로부터 분리한 아세토박터 아세티-비아이지(Acetobacter aceti-BIG, 수탁번호 KACC 91256P)인 것이 특징인,
    상황버섯균사체를 이용한 상황버섯식초의 제조방법.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 방법에 의해 제조된 상황버섯식초.
  5. 제4항에 있어서,
    안지오텐신 전환효소 억제활성이 뛰어나고, 혈압강하 효과가 뛰어난 것이 특징인,
    항고혈압 활성을 갖는 상황버섯식초.
  6. 제4항의 상황버섯식초를 유효성분으로 포함하는,
    항고혈압 활성을 갖는 기능성 음료조성물.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR101139032B1 (ko) * 2008-12-26 2012-04-30 육태웅 꾸지뽕 식초 제조 방법 및 이에 의해 제조된 꾸지뽕 식초
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