KR20070104673A - 암의 치료를 위한 항－ｃｔｌａ４ 항체와 인돌리논병용요법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 암의 치료를 위해 인간 CTLA4에 항-CTLA4 항체, 특히 인간 항체, 예를 들어, 항체 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무맙(11.2.1 또는 CP-675,206으로도 칭함), 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1 및 이필리무맙(10D1 또는 MDX-010으로도 칭함)의 아미노산 서열을 가진 것을, 인돌리논 수용체 티로신 키나제 억제제(RTKI), 예컨대, N-[2-다이에틸아미노]에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드(화합물 1), N-[2-(에틸아미노)에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드(화합물 2) 및 5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-N-[(2S)-2-하이드록시-3-모폴린-4-일프로필]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드(화합물 3)와 병용한 투여에 관한 것이다. 본 발명은 항-CTLA4 항체와 인돌리논 RTKI, 특히 화합물 1의 병용물을 투여하는 것에 관한 것이다. 본 발명은 국한되었든 전이되었든지 간에 질환의 연속상을 따른 어느 시점(들)(예를 들어, 암의 어느 단계)에서의 암의 신보강요법, 보강요법, 1차 요법, 2차 요법 및 3차 요법에 관한 것이다.

항-CTLA4 항체, 항원-결합성 부분, 인돌리논 수용체 티로신 키나제 억제제

Description

암의 치료를 위한 항－ＣＴＬＡ４ 항체와 인돌리논 병용요법{ANTI-CTLA4 ANTIBODY AND INDOLINONE COMBINATION THERAPY FOR TREATMENT OF CANCER}

본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게서 암의 치료를 위한 방법에 관한 것이다.

암은 이제는 미국에서 사망의 주된 원인이다. 현재, 이것은 전형적으로 외과적 수술, 방사선 요법 및 화학 요법의 3가지 유형의 요법 중 하나 혹은 이들의 병용에 의해 치료되고 있다. 화학 요법은 세포 복제 또는 세포 대사의 붕괴를 포함한다. 신생물성 질환의 치료에 사용되는 전신 화학요법의 유해효과는 생명에 위협적일 수 있고, 암 환자의 임상적 관리에 대해서 주된 중요성으로 되어 왔다.

표적 요법의 발전은 부작용을 줄이기 위해서 정상 조직에 해를 주지 않으면서 신생물 세포의 특정 표적화를 중점적으로 다루고 있다. 표적화 요법은 종양 세포 성장으로서 영양원을 필요로 하기 때문에 혈관 신생을 중점적으로 다루고 있다. 종양 세포에 의해 정교하게 만들어진 성장 인자(예를 들어, VEGF 및 PDGF)는 새로운 용기의 발전을 위해 혈관 신생을 자극하여 주된 영양물을 제공하고, 또한, 종양 세포의 전이를 위한 수단을 제공한다(Klagsburn and D'Amore, 1996, Cytokine & Growth Factor Reviews 7:259-270). 또한, 혈관 신생에서의 그들의 역할 때문에, 치료적 접근법은 RTK(receptor-type tyrosine kinase: 수용체형 티로신 키나제) 및 그의 RTKI(receptor-type tyrosine kinase inhibitor: 수용체형 티로신 키나제 억제제)를 더욱 중점적으로 다루고 있다.

세포 배양 실험 및 유전자 녹아웃 실험은 각 수용체가 혈관 신생의 상이한 양상에 기여하는 것을 나타낸다. 또한, 종양 성장은 VEGF 수용체 길항제의 혈관신생억제 효과에 민감한 것으로 나타내고 있다(예를 들어, Kim et al., 1993, Nature 362:841-844; Weidner et al., 1991, N. Engl . J. Med . 324:1-8 참조). 또한, PDGF는 정상 혈관 발전에 필요한 혈관주위세포의 성장 및 생전을 지지함으로써 혈관 신생에 중요한 역할을 한다.

따라서, 고형 종양은 이들 종양이 그들의 성장을 뒷받침하는 데 필요한 혈관의 형성을 위한 혈관 신생에 좌우되므로 티로신 키나제 억제제에 의해 치료될 수 있다. 이들 고형 종양으로는 조직구 림프종, 뇌암, 비뇨생식관암, 림프계통암, 위암, 후두암, 예컨대 폐 샘암종 및 소세포 폐암을 비롯한 폐암, 직장결장암, 유방암, 췌장암, NET(neuroendocrine tumor: 신경내분비종)를 포함한다. 추가의 예로는 Raf-활성화 종양 유전자(예를 들어, K-ras, erb-B)의 과발현 혹은 활성화가 관찰되는 암을 포함한다. 이러한 예로는 췌장암종 및 유방 암종을 포함한다. 따라서, 이들 티로신 키나제의 억제제는 이들 효소에 의존하는 증식성 질환의 예방 및 치료에 유용하다. 그러므로, 티로신 키나제의 신호 전달을 억제, 조정 및/또는 조 절하기 위한 치료 방법의 개발이 요망되고 있다.

암 요법에 대한 대안적인 및/또는 추가의 접근법은 종양 자체를 표적화하기 보다는 및/또는 표적화에 가해서 면역 체계("면역 요법")를 표적으로 하는 것이다. 하나의 암 면역 요법 접근법은 CTLA4(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4; CD152)를 표적화하고, 이 CTLA4는 활성화 T 세포 상에 발현되는 세포 표면 수용체이다. CTLA4의 그의 천연 리간드인 B7.1(CD80) 및 B7.2(CD86)에의 결합은 음성 조절 신호를 T 세포에 전달하고, 이 음성 신호의 차단은 동물 모델에 있어서 T 세포 면역 기능 및 항종양 활성을 증강시킨다(Thompson and Allison, Immunity 7:445-450 (1997); McCoy and LeGros, lmmunol . & Cell Biol. 77:1-10 (1999)). 몇몇 연구는 항체를 이용한 CTLA4 차단이 종양의 T 세포-매개 사멸을 증강시키고, 이것은 항종양 면역을 유발할 수 있는 것을 입증하고 있다(Leach et al., Science 271:1734-1736 (1996); Kwon et al., Proc . Natl . Acad. Sci USA 94:8099-8103 (1997); Kwon et al., Natl . Acad . Sci USA 96:15074-15079 (1999)).

항종양 반응을 유발하기 위해 항-CTLA4 항체를 이용하는 것은 암의 치료에 커다란 가망성을 보유하지만, 이러한 항체에 의해서 종양, 특히 고형 종양을 치료하는 새로운 요법을 개발하기 위한 장기적인 요구가 있었다. 마찬가지로, 현재 유효한 항암치료의 성공에도 불구하고, 이들 치료에 대한 경쟁 반응이 드물게 관찰되고, 이들 치료에 대한 환자 모집단의 난치성은 여전히 많다. 따라서, 새로운 치료 요법의 개발, 특히 현행 화학요법의 세포 독성 부작용을 저감하면서 기타 항종양제, 바람직하게는 RTKI의 항종양 활성을 증대시키거나 강화시키는 능력을 가진 것 이 필요하다. 본 발명은 이들 요구에 부응하는 것이다.

발명의 개요

본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게서 암의 치료를 위한 방법을 포함한다. 이 방법은 상기 환자에게 치료상 유효량의 항-CTLA4 항체 또는 그의 항원-결합성 부분을 치료상 유효량의 인돌리논 수용체 티로신 키나제 억제제(RTKI: receptor tyrosine kinase inhibitor)와 병용해서 투여하는 것을 포함한다.

일 측면에 있어서, 상기 인돌리논 RTKI는 N-[2-다이에틸아미노]에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드, N-[2-(에틸아미노)에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드 및 5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-N-[(2S)-2-하이드록시-3-모폴린-4-일프로필]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염이다.

다른 측면에 있어서, RTKI는 N-[2-다이에틸아미노]에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드이다.

또 다른 측면에 있어서, N-[2-다이에틸아미노]에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아 마이드의 치료상 유효량의 범위는 1일당 약 25 ㎎ 내지 87.5 ㎎이고, N-[2-다이에틸아미노]에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드는 경구 투여된다.

다른 측면에 있어서, N-[2-다이에틸아미노]에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드의 치료상 유효량의 범위는 1일당 약 37.5 ㎎ 내지 50 ㎎이다.

또 다른 측면에 있어서, N-[2-다이에틸아미노]에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드는 매일 투여, 대략 4주 동안 매일 투여, 대략 4주 동안 매일 투여 후 약 2주간 휴지 기간을 둠, 대략 3주 동안 매일 투여 후 약 1주간 휴지 기간을 둠 및 대략 2주 동안 매일 투여 후 약 1주간 휴지 기간을 둠으로 이루어진 군으로부터 선택된 투약 요법에 따라 투여된다.

다른 측면에 있어서, 상기 치료는 신보강 요법, 보강 요법, 1차 요법 및 2차 요법으로 이루어진 군으로부터 선택된 요법이다.

또 다른 측면에 있어서, 상기 인간 항-CTLA4 항체의 치료상 유효량의 범위는 약 0.1 ㎎/㎏ 내지 50 ㎎/㎏이다.

다른 측면에 있어서, 인간 항-CTLA4 항체의 치료상 유효량의 범위는 약 0.3 ㎎/㎏ 내지 20 ㎎/㎏이다.

또 다른 측면에 있어서, 상기 인간 항-CTLA4 항체의 치료상 유효량은 적어도 1 ㎎/㎏, 적어도 3 ㎎/㎏, 적어도 6 ㎎/㎏, 적어도 10 ㎎/㎏ 및 적어도 15 ㎎/㎏으 로 이루어진 군으로부터 선택된다.

다른 측면에 있어서, 상기 항체는 28일마다 약 6 ㎎/㎏의 투여, 3개월마다 약 6 ㎎/㎏의 투여, 28일마다 약 10 ㎎/㎏의 투여, 3개월마다 약 10 ㎎/㎏의 투여, 28일마다 약 15 ㎎/㎏의 투여 및 3개월마다 약 15 ㎎/㎏의 투여로 이루어진 군으로부터 선택된 투약 요법에 따라 투여된다.

일 측면에 있어서, N-[2-다이에틸아미노]에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드는 1일당 약 37.5 ㎎으로 투여되고, 상기 항-CTLA4 항체는 3개월마다 약 10 ㎎/㎏의 투여 및 3개월마다 약 15 ㎎/㎏의 투여로 이루어진 군으로부터 선택된 투약 요법에 따라 투여된다.

또 다른 측면에 있어서, 상기 암은 유방암, 전립선암, 난소암, 췌장암, 폐암, 급성 골수성 백혈병, 직장결장 암종(CRC: colorectal carcinoma), 콩팥 세포 암종(RCC: renal cell carninoma), 위장관 기질성 종양(GIST: Gastrointestinal stromal tumor) 및 육종으로 이루어진 군으로부터 선택된다.

다른 측면에 있어서, 상기 항-CTLA4 항체 또는 그의 항원-결합성 부분은 이하의 (a) 내지 (e)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 항체이다:

(a) CTLA4에 대한 결합 친화도가 약 10^-8 이상이고, CTLA4와 B7-1과의 결합 및 CTLA4와 B7-2와의 결합을 억제하는 인간 항체;

(b) 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무 맙(ticilimumab)(11.2.1 또는 CP-675,206이라고도 칭함), 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1 및 이필리무맙(ipilimumab)으로 이루어진 군으로부터 선택된 항체로부터 CDR 서열에 상응하는 하나 이상의 인간 CDR 서열을 포함하는 아미노산 서열을 갖는 인간 항체;

(c) 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무맙, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1 및 이필리무맙으로 이루어진 군 중에서 선택된 항체의 중쇄 및 경쇄의 아미노산 서열을 갖는 인간 항체;

(d) CTLA4와의 결합을 위해 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무맙, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1 및 이필리무맙으로 이루어진 군으로부터 선택된 항체의 중쇄 및 경쇄의 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 항체와 경쟁하는 항체, 또는 그의 항원-결합성 부분; 및

(e) CTLA4와의 결합을 위해 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무맙, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1 및 이필리무맙으로 이루어진 군 중에서 선택된 항체의 중쇄 및 경쇄의 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 항체와 교차-경쟁하는 항체, 또는 그의 항원-결합성 부분.

일 측면에 있어서, 상기 항체는 4.1.1, 4.13.1, 티실리무맙 및 이필리무맙으로 이루어진 군으로부터 선택된 항체의 중쇄 및 경쇄의 아미노산 서열을 가진 인간 항체이다.

가장 바람직하게는, 상기 항체는 티실리무맙이다.

다른 측면에 있어서, 상기 항체 또는 그의 항원-결합성 부분은 중쇄 및 경쇄 를 포함하되, 상기 중쇄의 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열 및 상기 경쇄의 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열은 이하의 (a) 내지 (g)로 이루어진 군으로부터 선택된다:

(a) 서열번호 3의 아미노산 서열 및 서열번호 9의 아미노산 서열;

(b) 서열번호 15의 아미노산 서열 및 서열번호 21의 아미노산 서열;

(c) 서열번호 27의 아미노산 서열 및 서열번호 33의 아미노산 서열;

(d) 서열번호 1의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열 및 서열번호 7의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열;

(e) 서열번호 13의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열 및 서열번호 19의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열;

(f) 서열번호 25의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열 및 서열번호 31의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열; 및

(g) 이필리무맙의 중쇄 및 경쇄의 아미노산 서열.

또 다른 측면에 있어서, 상기 항체 또는 그의 항원-결합성 부분은 이하의 (a) 내지 (c)로 이루어진 군으로부터 선택된 항체이다:

(a) 서열번호 4, 서열번호 5, 서열번호 6, 서열번호 10, 서열번호 11 및 서열번호 12에 기재된 아미노산 서열을 포함하는 항체;

(b) 서열번호 16, 서열번호 17, 서열번호 18, 서열번호 22, 서열번호 23 및 서열번호 24에 기재된 아미노산 서열을 포함하는 항체; 및

(c) 서열번호 28, 서열번호 29, 서열번호 30, 서열번호 34, 서열번호 35 및 서열번호 36에 기재된 아미노산 서열을 포함하는 항체.

다른 측면에 있어서, 상기 항체 또는 그의 항원-결합성 부분은 서열번호 27에 기재된 아미노산 서열을 가진 중쇄 가변 영역 및 서열번호 33에 기재된 아미노산 서열을 가진 경쇄 가변 영역을 포함한다.

또 다른 측면에 있어서, 상기 항체는 이하의 (a) 내지 (c)로 이루어진 군으로부터 선택된다:

(a) 서열번호 2 및 서열번호 8에 기재된 아미노산 서열을 포함하는 항체;

(b) 서열번호 14 및 서열번호 20에 기재된 아미노산 서열을 포함하는 항체; 및

(c) 서열번호 26 및 서열번호 32에 기재된 아미노산 서열을 포함하는 항체.

다른 측면에 있어서, 상기 항체는 상기 인돌리논 RTKI의 과정의 완료 후에 투여되고, 가장 바람직하게는, 상기 환자에서의 면역 반응의 수준은 인돌리논 RTKI의 상기 과정 동안 혹은 해당 과정 직후 상기 환자에서의 면역 반응의 수준보다 높다.

일 측면에 있어서, 상기 항체는 인돌리논 RTKI의 상기 과정 후 약 1일 내지 100일 투여된다.

본 발명은 암의 치료를 위한 약학 조성물을 포함한다. 이 조성물은 치료상 유효량의 항-CTLA4 항체 또는 그의 항원-결합성 부분, 치료상 유효량의 인돌리논 RTKI 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함한다.

일 측면에 있어서, 상기 인돌리논 RTKI는 N-[2-다이에틸아미노]에틸]-5- [(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드, N-[2-(에틸아미노)에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드 및 5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-N-[(2S)-2-하이드록시-3-모폴린-4-일프로필]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염이다.

본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에 있어서 암을 치료하기 위해서 항-CTLA4 항체를 적어도 하나의 인돌리논(예를 들어, 화합물 1, 화합물 2, 화합물 3 등)과 병용해서 이용하는 것에 관한 것이다. 화합물 1 또는 그의 L-말레이트 염은 SU11248, SU011248, 수니티닙 말레이트(sunitinib malate)(USAN/WHO 지정) 또는 SUTENT™(L-말레이트염)로도 지칭된다. 본 발명은 또한 항체-인돌리논 병용물과 적어도 하나의 첨가제와의 조합에 의한 암의 치료에 관한 것이다.

본 발명에서 이용가능한 항체 및 이들을 제조하는 방법은 국제출원 제PCT/US99/30895호(WO 00/37504로 2000년 6월 29일 공개됨)(예를 들어, 11.2.1 및 CP-675,206으로도 알려진 티실리무맙), 유럽 특허 출원 EP 1262193 A1(공개일: 2002년 4월 12일), 미국 특허 출원 제09/472,087호(미국특허 공보 제6,682,736호로 간행됨), 미국 특허 출원 제09/948,939호(미국 특허 출원 공개 공보 제2002/0086014호)[예를 들어, 10D1 및 MDX-010(미국 뉴저지주의 프린세톤시에 소재한 메다렉스(Medarex)사 제품)으로도 칭해지는 이필리무맙]에 개시되어 있으며, 이들 문헌은 각각 참고로 본 명세서에 반영된다. 이들 항체와 관련된 아미노산 서열 및 핵산 서열에 대한 정보는 본 명세서에서 제공되고 있지만, 추가의 정보는 미국특허 공보 제6,682,736호뿐만 아니라 WO 00/37504, EP 1262193 및 US2002/0086014에서도 발견할 수 있으며; 이들 특허문헌에 기재된 서열은 각각 참고로 본 명세서에 반영된다.

다양한 암을 치료하기 위한 이들 항체의 소정의 이용은 미국 특허 출원 제 10/153,382호(미국 특허 공개 공보 제2003/0086930호로 공개됨)에 기재되어 있으며, 이 특허문헌은 그 전문이 본 명세서에 참고로 반영된다.

본 명세서에서 달리 규정되지 않는 한, 본 발명과 연계해서 사용된 과학 및 기술 용어들은 당업자가 통상적으로 인식하고 있는 의미를 지닐 것이다. 추가로, 문맥상 달리 요구되지 않는 한, 단수 용어는 복수를 포함하고, 복수 용어는 단수를 포함하는 것으로 한다. 일반적으로, 본 명세서에 기재된 세포 및 조직 배양, 분자 생물학, 면역학, 미생물학, 유전학, 및 단백질 및 핵산 화학 및 혼성화 기술 및 이들과 관련해서 사용된 명칭은 당업계에 널리 공지되어 있고 통상적으로 사용되고 있는 것이다.

본 발명의 방법과 기술은 일반적으로 당업계에 널리 공지되어 있고, 달리 언급되지 않는 한 본 명세서 전반에 걸쳐 인용되고 논의된 각종의 일반적이고도 보다 구체적인 참고 문헌에 기재된 바와 같은 방법에 따라서 수행한다. 이러한 참고 문헌에는, 예를 들어 다음과 같은 문헌이 포함된다: 문헌 Sambrook and Russell, Molecular Cloning, A Laboratory Approach, Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, NY (2001); Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, NY (2002); 및 Harlow and Lane Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY (1990)(이들은 본 명세서에 참고로 반영된다). 효소적 반응 및 정제 기술은 당업계에서 통상적으로 수행되는 바와 같이 또는 본 명세서에 기재된 바와 같이, 제조업자의 사양에 따라서 수행한다. 본 명세서에 기재된 분석 화학, 합성 유기 화학, 및 의학적 및 제약 화학 기술 분야의 실험 과정 및 기술에서 이들과 관련해서 사용된 명칭은 당해 분야에 널리 공지되어 있고 통상적으로 사용되고 있는 것이다. 화학적 합성, 화학적 분석, 약학 제제, 제형화 및 전달, 및 환자 치료에 대해서는 표준 기술을 사용한다.

정의

본 명세서에 사용된 바와 같이, 이하의 용어들은 각각 이 부문에서 그와 연관된 의미를 갖는다.

단수로 표현한 것은 본 명세서에 있어서 문법상 대상체 하나 또는 하나 보다 많은 것(즉, 적어도 하나)을 지칭하기 위해 사용되고 있다. 예시하자면, 단수형태의 "요소"란 하나의 요소 혹은 하나보다 많은 요소를 의미한다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 20개의 통상적인 아미노산 및 그들의 약어는 통상적인 활용에 따른다. 이에 대해서는 문헌[Immunology--A Synthesis (2nd Edition, E. S. Golub and D. R. Gren, Eds ., Sinauer Associates, Sunderland, Mass. (1991))]을 참조할 수 있고, 이 문헌은 본 명세서에 참고로 반영된다.

"보존적 아미노산 치환"은 하나의 아미노산 잔기가 유사한 화학적 특성(예를 들어, 전하 또는 소수성)을 지닌 측쇄 R기를 갖는 또 다른 아미노산 잔기에 의해 치환되는 것이다. 일반적으로, 보존적 아미노산 치환은 단백질의 기능적 특성을 실질적으로 변화시키지 않을 것이다. 2개 이상의 아미노산 서열이 보존적 치환에 의해 서로 상이한 경우에는, 보존적 치환 특성을 교정하기 위해 퍼센트 서열 동일성 또는 유사도를 상향 조정할 수 있다. 이와 같이 조정하는 방법은 당업자에게 충분히 공지되어 있으며, 이에 대해서는 예를 들어, 문헌[Pearson, Methods Mol . Biol. 243:307-31 (1994)]을 참조하면 된다.

유사한 화학적 특성을 지닌 측쇄를 갖는 아미노산 군의 예로는 이하의 1) 내지 7)에 기재된 것이 포함된다: 1) 지방족 측쇄: 글라이신, 알라닌, 발린, 루이신 및 이소루이신; 2) 지방족-하이드록실 측쇄: 세린 및 트레오닌; 3) 아마이드-함유 측쇄: 아스파라긴 및 글루타민; 4) 방향족 측쇄: 페닐알라닌, 티로신 및 트립토판; 5) 염기성 측쇄: 리신, 아르기닌 및 히스티딘; 6) 산성 측쇄: 아스파르트산 및 글루탐산; 및 7) 황-함유 측쇄: 시스테인 및 메티오닌. 바람직한 보존적 아미노산 치환기는 발린-루이신-이소루이신, 페닐알라닌-티로신, 리신-아르기닌, 알라닌-발린, 글루타메이트-아스파르테이트 및 아스파라긴-글루타민이다.

대안적으로, 보존적 대체는 본 명세서에 참고로 반영된 문헌[Gonnet et al., Science 256:1443-45 (1992)]에 기재된 PAM250 로그-가능도 매트릭스(log-likelihood matrix)에서 양의 값을 갖는 모든 변화이다. "적당하게 보존적인" 대체는 PAM250 로그-가능도 매트릭스에서 비음의(nonnegative) 값을 갖는 모든 변화이다.

바람직한 아미노산 치환은 (1) 단백질 분해에 대한 감수성을 저하시키고; (2) 산화에 대한 감수성을 저하시키며; (3) 단백질 복합체를 형성하기 위한 결합 친화도를 변경시키고; (4) 이러한 유사체의 기타 물리화학적 또는 기능적 특성을 부여하거나 변형시키는 것이다. 치환, 결실 및/또는 삽입을 포함하는 유사체에는 천연 펩타이드 서열 이외의 서열의 각종 돌연 변이 단백질이 포함될 수 있다. 예를 들어, 단일 또는 다중 아미노산 치환(바람직하게는, 보존적 아미노산 치환)은 천연 서열(바람직하게는, 분자간 접촉물을 형성하는 도메인(들) 외부의 폴리펩타이드 부분)에서 이루어질 수 있다. 보존적 아미노산 치환은 모 서열의 구조적 특징을 실질적으로 변화시키지 않아야 한다(예를 들어, 대체 아미노산이 모 서열 내에 생기는 나선을 파괴시키지 않아야 하거나, 또는 모 서열의 특징이 되는 기타 유형의 이차 구조를 붕괴시키지 않아야 한다). 당업계에서 인식되고 있는 폴리펩타이드 이차 및 삼차 구조의 예는 문헌[Proteins , Structures and Molecular Principles (Creighton, Ed., W. H. Freeman and Company, New York (1984)); Introduction to Protein Structure (C. Branden and J. Tooze, eds., Garland Publishing, New York, N.Y. (1991)); 및 Thornton et al., Nature 354:105 (1991)]에 기재되어 있으며, 이들 문헌은 각각 참고로 본 명세서에 반영된다.

폴리펩타이드에 대한 서열 유사도(서열 동질성이라고도 칭함)는 전형적으로, 서열 분석용 소프트웨어를 사용하여 측정한다. 단백질 분석용 소트프웨어는 보존적 아미노산 치환을 비롯한 각종 치환, 결실 및 기타 변형에 할당된 유사도 계측치를 이용하여 유사한 서열을 매치시킨다. 예를 들어, GCG(Genetics Computer Group, Inc.)는 밀접하게 관련된 폴리펩타이드, 예컨대 상이한 유기체 종으로부터의 상동성 폴리펩타이드 간 또는 야생형 단백질과 그의 돌연변이 단백질 간의 서열 상동성 또는 서열 동질성을 결정하기 위해 디폴트(default) 파라미터와 함께 사용할 수 있는 "갭"(Gap) 및 "베스트피트"(Bestfit) 등의 프로그램을 포함하고 있다. 이에 대해서는 예를 들어, GCG 버전 6.1을 참조하면 된다. 폴리펩타이드 서열은 또한 GCG 버전 6.1 내의 프로그램인 디폴트 혹은 권장되는 파라미터를 이용하는 FASTA를 이용해서 비교될 수 있다. FASTA(예를 들어, FASTA2 및 FASTA3)는 조회 서열과 조사 서열 간에 가장 잘 중첩된 영역의 서열 동질성과 정렬을 제공해준다(문헌: Pearson, Methods Enzymol. 183:63-98 (1990); Pearson, Methods Mol . Biol. 132:185-219 (2000)]. 본 발명의 서열을 상이한 유기체로부터의 다수의 서열을 함유하는 데이터베이스와 비교하는 경우에 바람직한 또 다른 알고리즘은 디폴트 파라미터를 이용하는 컴퓨터 프로그램 BLAST, 특히 blastp 또는 tblastn이다. 이에 대해서는 예를 들어 문헌[Altschul et al., J. Mol . Biol. 215:403-410 (1990); Altschul et al., Nucleic Acids Res. 25:3389-402 (1997)]을 참고할 수 있고, 이들 문헌은 본 명세서에 참고로 반영된다.

본래의 "항체"는 다이설파이드 결합에 의해 상호-연결된 적어도 2개의 중쇄(H)와 2개의 경쇄(L)를 포함한다. 이에 대해서는 일반적으로 문헌[Fundamental Immunology, Ch. 7 (Paul, W., ed., 2nd ed. Raven Press, N.Y. (1989)]을 참조할 수 있고, 이 문헌은 참고로 본 명세서에 반영된다. 각 중쇄는 중쇄 가변 영역(HCVR 또는 V_H)과 중쇄 불변 영역(C_H)으로 구성된다. 중쇄 불변 영역은 3개의 도메인, 즉 CH1, CH2 및 CH3으로 구성된다. 각 경쇄는 경쇄 가변 영역(LCVR 또는 V_L)과 경쇄 불변 영역으로 구성된다. 경쇄 불변 영역은 1개의 도메인, 즉 C_L로 구성된다. V_H 및 V_L 영역은 추가로 골격 영역(FR)으로 지칭되는 더욱 보존된 영역이 개입된, 상보성 결정 영역(CDR)으로 지칭되는 초가변성(hypervariability) 영역으로 세분될 수 있다. 각 V_H 및 V_L은 3개의 CDR과 4개의 FR로 구성되는데, 이들은 아미노-말단에서부터 카복실-말단까지 다음 순서로 배열된다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. 아미노산을 각 도메인에 할당하는 것은 문헌[Kabat, Sequences of Proteins of Immunological Interest (National Institutes of Health, Bethesda, MD (1987 and 1991)), 또는 Chothia & Lesk, J. Mol . Biol. 196:901-917 (1987); Chothia et al., Nature 342:878-883 (1989)]의 정의에 따른다.

중쇄 및 경쇄의 가변 영역은 항원과 상호 작용하는 결합 도메인을 함유한다. 항체의 불변 영역은 면역 체계의 각종 세포(예를 들어, 효과기 세포(effector cells)) 및 고전적인 보체 계통(classical complement system)의 제 1 성분(Clq)을 비롯한 호스트 조직 혹은 인자에 대한 면역글로불린의 결합을 매개할 수 있다.

"항체"란 용어는 본래의 항체의 항원, 예를 들어 CTLA4와 특이적으로 결합하는 능력을 보유한 본래의 항체의 항원-결합성 부분을 포함할 수 있다. 항원-결합성 부분은 본래 항체의 재결합 DNA 기술에 의해 혹은 효소적 혹은 화학적 분해에 의해 생성될 수 있다.

"항원-결합성 부분"의 예로는 이하의 (i) 내지 (vi)가 포함된다: 즉, (i) V_L 도메인, V_H 도메인, C_L 도메인 및 CH1 도메인으로 이루어진 1가 단편인 Fab 단편; (ii) 힌지 영역에서 다이설파이드 브리지에 의해 연결된 2개의 Fab 단편을 포함하는 2가 단편인 F(ab')₂ 단편; (iii) V_H 도메인 및 CH1 도메인으로 이루어진 Fd 단편; (iv) 항체의 단일 암(arm)의 V_L 도메인 및 V_H 도메인으로 이루어진 Fv 단편; (v) V_H 도메인으로 이루어진 단일 도메인 항체("dAb")[참고: Ward et al., (1989) Nature 341:544-546]; 및 (vi) 분리된 상보성 결정 영역(CDR). 더욱이, Fv 단편의 두 도메인 V_H와 V_L이 별개의 유전자에 의해 암호화되긴 하지만, 재조합 방법을 사용하여, 이들이 단일 단백질 쇄로서 만들어질 수 있도록 해주는 합성 링커에 의해 함께 연결될 수 있는데, 여기서는 V_H 영역과 V_L 영역이 쌍을 이루어 1가 분자(단일 쇄 Fv(scFv)로서 공지됨)를 형성하며; 이에 대해서는 예를 들어 문헌[Bird et al., Science 242:423-426 (1988) 및 Huston et al., Proc . Natl . Acad . Sci. USA 85:5879-5883 (1988)]을 참조하면 된다. 이러한 단일 쇄 항체는 "항체"란 용어를 참조해서 포함된다.

"이중특이적(bispecific) 항체"는 두 상이한 결합 특이성을 가지며, 이에 대해서는 예를 들어 미국 특허 제5,922,845호; 미국특허 제5,837,243호; 문헌[Zeilder, J. Immunol. 163:1246-1252 (1999); Somasundaram, Hum. Antibodies 9:47-54 (1999); Keler, Cancer Res. 57:4008-4014 (1997)]을 참조하면 된다. 예를 들어, 본 발명은 인간 CTLA4 등의 세포 표면 항원에 대한 하나의 결합 부위와, 효과기 세포의 표면상의 Fc 수용체에 대한 제 2 결합 부위를 가지는 이중특이적 항체를 제공한다. 본 발명은 또한 적어도 3개의 결합 부위를 가지는 멀티특이성 항체를 제공한다.

"이중특이적 항체"란 용어는 더욱 "다이아바디"(diabody)를 포함한다. 이 다이아바디는 2가의 이중 특이적 항체로, 이것은 V_H 도메인 및 V_L 도메인이 단일 폴리펩타이드 쇄 상에 발현되지만, 동일한 쇄 상에서 두 도메인 간에 쌍을 이루기에는 너무 짧은 링커를 사용함으로써, 이들 도메인이 또 다른 쇄의 상보성 도메인과 쌍을 이루도록 하고 2개의 항원 결합 부위를 작성한다[참고: 예를 들어, Holliger et al., Proc. Natl . Acad . Sci. USA 90:6444-6448 (1993); Poljak et al., Structure 2:1121-1123 (1994)].

본 명세서에서 호환적으로 사용되는 바와 같은 용어 "인간 항체" 또는 "인간 서열 항체"에는 인간 생식세포계 면역글로불린 서열로부터 유래된 가변 영역과 불변 영역(존재하는 경우)을 갖는 항체가 포함된다. 본 발명의 인간 서열 항체에는 인간 생식세포계 면역글로불린 서열에 의해 암호화되지 않은 아미노산 잔기(예를 들어, 시험관 내에서의 무작위 또는 부위-특이적 돌연변이 유발에 의해, 또는 생체 내에서의 체세포 돌연변이에 의해 도입된 돌연변이물)가 포함될 수 있다. 그러나, 본 명세서에서 사용되는 바와 같은 "인간 항체"란 용어에는 또 다른 포유류 종(예컨대 마우스)의 생식세포계로부터 유래된 CDR 서열을 인간 골격 서열상으로 이식시킨 "키메라"(chimeric) 항체(즉, "인간화" 또는 PRIMATIZED™ 항체)를 포함하도록 의도된 것은 아니다.

본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "키메라 항체"는 2가지 이상의 상이한 항체로부터의 영역을 포함하는 항체를 의미한다. 일 실시형태에서는, CDR들 중의 하나 이상이 인간 항-CTLA4 항체로부터 유래된다. 다른 실시형태에서는, 모든 CDR이 인간 항-CTLA4 항체로부터 유래된다. 또 다른 실시형태에서는, 하나 이상의 인간 항-CTLA4 항체로부터의 CDR들을 키메라 인간 항체에서 합한다. 예를 들어, 키메라 항체는 제1 인간 항-CD40 항체의 경쇄로부터의 CDR1, 제2 인간 항-CTLA4 항체의 경쇄로부터의 CDR2 및 제3 인간 항-CTLA4 항체의 경쇄로부터의 CDR3을 포함할 수 있고, 중쇄로부터의 CDR들은 하나 이상의 기타 항-CD40 항체로부터 유래될 수 있다. 또한, 골격 영역은 동일한 항-CTLA4 항체 중의 하나로부터 유래될 수 있거나, 또는 하나 이상의 상이한 인간(들)로부터 유래될 수 있다.

게다가, 본 명세서에서 앞서 논의된 바와 같이, 키메라 항체는 한 종 이상의 생식세포계 서열로부터 유래된 단백질을 포함하는 항체를 포함한다.

본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "유효량" 또는 "치료상 유효량"은 포유류, 바람직하게는 인간에게 투여된 경우에, 해당 화합물의 부재 하에서 검출된 반응과 비교해서 검출가능한 수준의 치료적 반응을 매개하는 양을 의미한다. 치료적 반응, 예를 들어 종양 성장, 종양 크기, 전이 등의 억제 및/또는 저하는 당업계에서 인식되고 있는 다수의 방법, 예를 들어 본 명세서에 기재된 바와 같은 방법에 의해 용이하게 평가될 수 있다.

당업자는 본 명세서에서 투여된 화합물 또는 조성물의 유효량이 다양하고, 이는 치료하고자 하는 질환 또는 병증, 질환의 단계, 치료받고 있는 포유류의 연령 및 건강 상태 및 신체적 조건, 질환의 중증도, 투여 중인 특별한 화합물 등의 다수의 인자들에 기초하여 용이하게 결정될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.

"치료상 유효량" 또는 "유효량"은 신생물 장애의 하나 이상의 증후군을 어느 정도 검출가능하게 감소시키는 데 필요한 제제의 양을 정량화하고자 의도된 것으로, 그 예로는, 1) 암 세포 수의 감소; 2) 종양 크기의 감소; 3) 암 세포의 말초 기관 속으로의 침투의 억제(예를 들어, 어느 정도 느리게 하거나, 바람직하게는 중지시키는 것); 3) 종양 전이의 억제(즉, 어느 정도 느리게 하거나, 바람직하게는 중지시키는 것); 4) 종양 성장의 어느 정도까지의 억제; 5) 상기 장애와 관련된 하나 이상의 증후군의 어느 정도까지의 경감 혹은 감소; 및/또는 6) 항암제의 투여와 관련된 부작용의 경감 또는 감소를 들 수 있지만, 이들로 제한되는 것은 아니다.

항체와 관련하여 본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "경쟁하다"란 제1 항체 또는 그의 항원 결합성 부분이 결합을 위해 제2 항체 또는 그의 항원 결합성 부분과 경쟁하는 것을 의미하며, 여기서는 제1 항체와 그의 동족 에피토프와의 결합이 제2 항체의 부재 하에서의 제1 항체의 결합과 비교해서 제2 항체의 존재 하에서는 검출 가능한 수준으로 저하된다. 제2 항체와 그의 에피토프와의 결합도 제1 항체의 존재 하에서 검출 가능한 수준으로 저하되는 대안이 있을 수 있지만, 그 경우는 반드시 필요한 것은 아니다. 즉, 제1 항체는 제2 항체와 그의 에피토프와의 결합을 억제할 수 있는데, 이에 수반하여 제2 항체가 제1 항체와 그의 각각의 에피토프와의 결합을 억제하지는 않는다. 그러나, 각 항체가 다른 항체와 그의 동족 에피토프 또는 리간드와의 결합을 검출 가능한 수준으로 억제하는 경우에는(동일한 수준으로 억제하든지, 보다 큰 수준으로 억제하든지, 아니면 보다 낮은 수준으로 억제하든지 간에), 이들 항체는 그들 각각의 에피토프(들)와의 결합을 위해 서로 "교차-경쟁"한다고 말할 수 있다. 예를 들어, 교차-경쟁성 항체는 본 발명에 사용된 항체(예를 들어, 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무맙, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1 및 12.9.1.1)가 결합하는 에피토프 또는 에피토프의 일부와 결합할 수 있다. 경쟁성 항체와 교차-경쟁성 항체의 양쪽 모두가 본 발명에 포함된다. 이러한 경쟁 또는 교차-경쟁이 일어나는 기전(예를 들어, 입체 장애, 입체 형태적 변화, 또는 통상적인 에피토프 또는 그의 일부와의 결합 등)에 상관없이, 당업자는 본 명세서에 제공된 교시에 근거하여, 상기 경쟁성 및/또는 교차-경쟁성 항체가 내포되고 본 명세서에 기재된 방법에 유용할 수 있다는 것을 인지할 것이다.

"에피토프"란 용어는 면역글로불린 또는 T-세포 수용체와 특이적으로 결합할 수 있는 단백질 결정기라면 어느 것이라도 포함한다. 에피토프성 결정기는 통상적으로, 아미노산 또는 당 측쇄와 같은 분자의 화학적 활성 표면 집단으로 이루어지고, 통상적으로 특이적 전하 특징뿐만 아니라 특이적 3차원적 구조적 특징을 지니고 있다. 입체 형태적 에피토프와 비입체 형태적 에피토프는 전자와의 결합이 변성 용매의 존재 하에 소멸되는 반면, 후자와의 결합은 상실되지 않는다는 점에서 구별된다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같은 용어 "인돌리논" 또는 "인돌리논 수용체 티로신 키나제 억제제"란, 예를 들어, 이들로 제한되지는 않지만 하기 화합물 2 및 화합물 3을 비롯한 하기 화합물 1, 그의 임의의 대사산물 등의 2-인돌리논 코어를 포함하는 구조를 가진 임의의 화합물을 의미한다:

[화합물 1]

[화합물 2]

[화합물 3]

.

이러한 화합물은 국제공개공보 WO 2003/016305(US 2003/0069298), WO 2005/033098(US 2005/0118255) 및 WO 2004/024127(US 2004/229229), 그리고 미국특허 공보 제6,573,293호 및 제6,653,308호에 개시되어 있고, 이들 문헌은 각각 모든 목적을 위해서 그의 전문이 본 명세서에 반영되어 있고, 상기 화합물은 적어도 하나의 수용체 티로신 키나제 및 그의 임의의 약학적으로 허용가능한 염(들)의 소정의 활성에 대해서 검출가능한 억제 활성을 포함한다. 더욱 바람직하게는, 상기 화합물은 KIT, FLT3, VEGFR 및/또는 PDGFR을 검출가능하게 억제한다. 더욱더 바람직하게는, 상기 화합물은 KIT, FLT3, VEGFR 및 PDGFR을 검출가능하게 억제하고, 더더욱 바람직하게는, 상기 화합물은 화합물 1 및 그의 활성 대사산물 화합물 2, 나아가서는 화합물 3이다.

본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "교재(instructional material)"에는 본 명세서에 언급된 각종 질환 또는 장애에 영향을 미치거나, 이를 완화시키거나 또는 치료하기 위한 키트 내에 본 발명의 화합물, 조합물 및/또는 조성물의 유용성을 전달하기 위해 사용될 수 있는 공보, 기록물, 다이아그램, 또는 기타 모든 표현 매체가 포함된다. 임의적으로 또는 대안적으로, 교재에는 본 명세서에서 그 밖에 언급된 바와 같은 것을 비롯한 세포, 조직 또는 포유류에서 상기 질병 또는 장애를 완화시키기 위한 한 가지 이상의 방법이 기재될 수 있다.

키트의 교재는, 예를 들어 본 발명의 화합물 및/또는 조성물을 함유하는 용기에 고착될 수 있거나, 또는 본 발명의 화합물 및/또는 조성물을 함유하는 용기와 함께 선적될 수 있다. 대안적으로는, 교재는 수용자가 교재와 본 발명의 화합물을 협력하여 사용할 의도로 용기와는 별도로 출하될 수도 있다.

달리 언급된 경우를 제외하고는, "환자" 또는 "대상"이란 용어는 상호 교환적으로 사용되고, 이는 가축 대상, 예를 들어 토끼, 래트 및 마우스, 및 기타 동물뿐만 아니라, 포유류, 예컨대 인간 환자 및 인간이 아닌 영장류를 지칭한다. 바람직하게는, 환자는 사람을 지칭한다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같은 "약학적으로 허용가능한 염(들)"이란 어구는 화합물에 존재할 수 있는 산성 혹은 염기성 그룹의 염을 포함한다. 천연적으로 염기성인 화합물은 각종 무기산 및 유기산과 함께 광범위한 염을 형성하는 능력을 가진다. 이러한 염기성 화합물의 약학적으로 허용가능한 산 부가염을 제조하는 데 이용될 수 있는 산은, 비독성의 산 부가염을 형성하는 것, 즉, 약리적으로 허용가능한 음이온을 함유하는 염, 예컨대, 아세테이트, 벤젠설포네이트, 벤조에이트, 바이카보네이트, 바이설페이트, 비스토실레이트, 바이타트레이트, 보레이트, 브로마이드, 칼슘 에데테이트, 캄실레이트, 카보네이트, 클로라이드, 클라불라네이트, 사이트레이트, 다이하이드로클로라이드, 에데테이트, 에디실레이트, 에스톨레이트, 에실레이트, 에틸숙시네이트, 퓨마레이트, 글루셉테이트, 글루코네이트, 글루타메이트, 글라이콜릴아르사닐레이트, 헥실레조시네이트, 하이드라바민, 하이드로브로마이드, 하이드로클로라이드, 아이오다이드, 아이소티오네이트, 락테이트, 락토바이오네이트, 라우레이트, 말레이트, 말레에이트, 만델레이트, 메실레이트, 메틸설페이트, 뮤케이트, 납실레이트, 나이트레이트, 올레에이트, 옥살레이트, 파모에이트(엠보네이트), 팔미테이트, 판토테네이트, 포스페이트/다이포스페이트, 폴리갈락투로네이트, 살리실레이트, 스테아레이트, 서브아세테이트, 숙시네이트, 태네이트, 타트레이트(주석산염), 테오클레이트, 토실레이트, 티에티오도데(thiethiodode) 및 발레레이트 염을 포함한다. 화합물 1 내지 3의 바람직한 염은 PCT 공보 제2003/016305호, 미국 특허 출원 제 10/956,420호(출원일: 2004년 9월 30일) 및 PCT 출원 제PCT/IB2004/003070호(출원일: 2004년 9월 20일)에 개시되어 있고, 이들 문헌은 그들 전문이 참고로 본 명세서에 반영된다. 화합물 1의 특히 바람직한 염은 말레이트염, 가장 바람직하게는 L-말레이트염을 포함한다. 화합물 3의 특히 바람직한 염은 말레에이트염이다.

폴리펩타이드 서열을 묘사하기 위한 통상적인 표기가 본 명세서에서 사용되고 있다. 즉, 폴리펩타이드 서열의 좌측 끝이 아미노-말단이고; 폴리펩타이드 서열의 우측 끝이 카복실-말단이다.

본 명세서에 사용된 바와 같은 "특이적으로 결합하는"이란, 샘플 중의 특이적 분자를 인식하고 이와 결합하지만, 샘플 중의 기타 분자는 실질적으로 인식 또는 결합하지 않는 화합물, 예를 들어 단백질, 핵산, 항체 등을 의미한다. 예를 들어, 샘플 중의 동족 리간드를 인식하고 이와 결합하지만, 샘플 중의 기타 분자는 실질적으로 인식 또는 결합하지 않는 항체 또는 펩타이드 억제제(예를 들어, 그의 동족 항원 CTLA4와 결합하는 항-CTLA4 항체)가 있다. 따라서, 지정된 에세이(assay) 조건 하에, 특정 결합성 부분(예를 들어, 항체 또는 그의 항원-결합성 부분)은 시험 샘플 중에 존재하는 특별한 표적 분자와는 우선적으로 결합하지만, 이러한 샘플 중에 존재하는 상당량의 기타 성분들과는 결합하지 않는다. 각종 에세이 포맷을 사용하여 관심있는 분자와 특이적으로 결합하는 항체를 선별할 수 있다. 예를 들어, 고체상 ELISA 면역분석, 면역침전, BIA코어 및 웨스턴 블롯 분석을 사용하여, CTLA4와 특이적으로 반응하는 항체를 확인(동정)한다. 전형적으로, 특이적 또는 선택적 반응은 2배 이상의 배경 신호 또는 잡음, 보다 전형적으로는 10배 이상의 배경 신호 또는 잡음일 것이며, 보다 더 구체적으로는 평형 해리 상수(K_D)가 ≤ 1 μM, 바람직하게는 ≤ 100 nM, 가장 바람직하게는 ≤ 10 nM인 경우에는 항체가 항원과 "특이적으로 결합한다"고 말할 수 있다.

"K_D"란 용어는 특별한 항체-항원 상호 작용의 평형 해리 상수를 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "실질적으로 순수한"이란 객체 종이 존재하는 우성 종(즉, 몰 기준으로 하여, 조성물 중의 기타 어떠한 개별의 종보다 더 풍부함)이고, 바람직하게는 실질적으로 정제된 분획은 객체 종(예를 들어, 항-CTLA4 항체)이 존재하는 모든 거대분자 종의 약 50% 이상(몰 기준)을 차지하는 조성물이다. 일반적으로, 실질적으로 순수한 조성물은 이러한 조성물에 존재하는 모든 거대분자 종을 약 80% 초과, 보다 바람직하게는 약 85%, 90%, 95% 및 99% 이상 포함할 것이다. 가장 바람직하게는, 객체 종을 본질적으로 균질하도록 정제하는데(통상적인 검출 방법에 의해서는 오염 종이 조성물에서 검출될 수 없음), 이러한 조성물은 본질적으로 단일 거대분자 종으로 이루어진다.

본 명세서에 사용되는 바와 같은 "치료하는"이란, 환자가 경험하는 질환 증상 (즉, 종양 성장 및/또는 전이, 또는 면역 세포의 수 및 /또는 활성 등에 의해 매개된 기타 효과)의 빈도를 저하시키는 것을 의미한다. 이 용어에는 질환의 증상, 합병증 또는 생화학적 지표(예: PSA 수준의 상승)의 발생을 예방하거나 지연시키기 위해 본 발명의 화합물 또는 작용제를 투여하여, 이러한 증상을 완화시키거나 질환, 병상 또는 장애의 추가 발생을 정지 또는 억제시키는 것이 포함된다. 치료는 예방적일 수 있거나(질환의 발병을 예방 또는 지연시키기 위해, 또는 그의 임상적 또는 무증상성 증상의 발현을 예방하기 위해서) 또는 질병 발현 후 증상의 치료적 저해 또는 완화일 수 있다. "병용 요법"은 이들 치료제의 공동 작용으로부터 유익한 효과를 제공하도록 의도된 특정 치료 요법의 일부로서 단백질 키나제 억제제, 바람직하게는, 화합물 1, 화합물 2 및 화합물 3, 더욱 바람직하게는, 화합물 1 및 화합물 2, 가장 바람직하게는, 화합물 1과, CTLA4 항체의 투여를 포함한다. 상기 병용의 유익한 효과는 치료제의 병용으로부터 초래되는 약동학적 혹은 약역학적 공동 작용을 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다. 이들 치료제의 병용 투여는 전형적으로 정해진 시간(통상, 선택된 병용에 따라 분, 시간, 일 혹은 주)에 걸쳐 수행된다. "병용 요법"은 일반적으로는 부수적으로 그리고 임의적으로 본 발명의 병용을 초래하는 개별의 단일 치료 요법의 일부로서 이들 치료제의 2개 이상의 투여를 포함하는 것으로 의도되어 있지 않다. "병용 요법"은 이들 치료제의 순차 방식, 즉, 각 치료제가 상이한 시각에 투여되는 방식뿐만 아니라, 이들 치료제, 또는 적어도 2종의 치료제의 실질적으로 동시 투여 방식에 의한 투여를 포함한다. 실질적인 동시 투여는 예를 들어 각 치료제의 고정된 비율을 가진 단일 캡슐, 또는 치료제의 각각에 대해서 다회분의 단일 캡슐을 대상에게 투여함으로써 달성될 수 있다. 각 치료제의 순차 혹은 실질인 동시 투여는 경구 경로, 정맥 경로, 근육내 경로 및 점막 조직을 통한 직접 흡수를 비롯한 임의의 적절한 경로에 의해 수행될 수 있고, 이러한 경로는 이들로 제한되는 것은 아니다. 치료제는 동일한 경로 혹은 상이한 경로에 의해 투여될 수 있다. 예를 들어, 선택된 병용법의 제1 치료제는 정맥내 주사제에 의해 투여될 수 있는 한편, 그 병용법의 다른 치료제는 경구 투여될 수 있다. 대안적으로는, 예를 들어, 이들 두 치료제는 모두 경구 투여될 수 있거나, 또는 이들 두 치료제는 정맥내 주사제에 의해 투여될 수 있다. 치료제가 투여되는 수순은 협소하게 임계적이지 않다.

"병용 요법"은 또한 기타 생물학적 활성 성분(예컨대, 이들로 제한되지는 않지만 제2의 다른 항신생물제) 및 비약물 요법(예컨대, 이들로 제한되지는 않지만, 외과적 수술이나 방사선 치료)과의 추가적인 병용으로 전술한 바와 같은 치료제의 투여를 포함할 수 있다. 병용 요법이 방사선 치료를 추가로 포함할 경우, 해당 방사선 치료는 상기 치료제와 방사선 치료의 병용의 공동 작용으로부터의 유리한 효과가 얻어지는 한, 임의의 적절한 시간에 수행될 수 있다. 예를 들어, 적절한 경우에 있어서, 방사선 치료가 아마도 수일씩 혹은 심지어 수주씩 치료제의 투여를 일시적으로 없앨 경우 유리한 효과는 더욱 달성된다.

설명

본 발명은 암, 예를 들어, 특히 콩팥 세포 암종, 유방암, 전립선암, 위장관 기질성 암, 직장결장암, 폐암, 비호지킨 림프종, 갑상샘암, 뇌종양, 난소암, 방광암, 간세포 암종, 자궁경부암, 두경부암, 급성 및 만성 백혈병, 골수성 및 림프 백혈병, 췌장암, 호지킨병, 악성흑색종, 피부의 편평세포 암종, 카포시 육종, 기타 유형의 육종(예를 들어, 지방육종, 골육종)의 치료를 위해 이러한 치료를 필요로 하는 환자에게 항-CTLA4 항체와, 인돌리논, 바람직하게는, 화합물 1, 화합물 2 또는 화합물 3의 병용물을 공동 투여하는 것을 포함하는 신규의 치료방법에 관한 것이다.

일 실시형태에 있어서, 상기 방법은 인돌리논 RTKI을 항체와 병용해서 투여하는 것을 포함한다. 일 측면에 있어서, 상기 방법은 암에 대한 신보강, 보강, 1차 요법 및 2차 요법을 제공한다. 다른 실시형태에 있어서, 항체-인돌리논 RTKI 병용은 적어도 하나의 부가적 치료제, 예컨대, 이들로 제한되지는 않지만, 특히 면역 반응(예를 들어, 항-CD40 작용적 항체)을 증강시키는 항체, 또는 유사한 효과를 가진 단백질 리간드를 비롯한 CTLA4를 목적으로 하지 않는 기타 단클론성 항체(예를 들어, AVASTIN(베바시주맙), MYELOTARG(겜투주맙), BEXXAR(토시투모맙), RITUXAN(리툭시맙), HERCEPTIN(트라스투주맙)); 1형 인터페론(예를 들어, 인터페론 알파 및 베타)을 비롯한, 항원 제시 세포(수상 세포, 대식세포, B 세포, 단핵세포)를 활성화시키는 제제; 인터페론 감마; BCG; 단백질 항원, 펩타이드 항원, 전체 세포 용해물 및 그의 유도체를 비롯한 임의의 형태 및 모든 형태에 있어서 종양 항원을 제공하는 항원; 유전적으로 암호화된 항원(예를 들어, 아데노바이러스 암호화된 항원); 생체내 혹은 생체외에서 변화되어 그들의 면역성을 증강시키는 면역체계의 세포 성분(예를 들어, 자기 수상 세포, 림프구, 열충격 단백질 등); 이들로 제한되는 것은 아니지만, 사이클로포스파미드, 메토트렉세이트, 에토포사이드, 아드리아마이신, 탁세인, 플루오로유라실, 사이토카인 아라비노사이드(AraC) 및 백금 함유 제제 등의 화학요법제와 함께 투여되지만, 이들로 제한되는 것은 아니다.

I. 항- CTLA4 항체

본 명세서의 어디에선가 이미 설명한 바와 같이, 바람직한 항-CTLA4 항체는 인간 CTLA4에 특이적으로 결합되는 인간 항체이다. 인간 항-CTLA4 항체의 예는 국제출원 제PCT/US99/30895호(WO 00/37504(공개일: 2000년 6월 29일)에 대응), 유럽 특허 출원 EP 1262193 A1(공개일: 2002년 4월 12일), 및 미국 특허 출원 제09/472,087호(미국특허 공보 제6,682,736호(Hanson et al.)로 공개됨), 미국 특허 출원 제09/948,939호(US2002/0086014로 공개됨)에 상세히 기재되어 있으며, 이들 문헌의 전문은 참고로 본 명세서에 반영된다. 이러한 항체로는 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무맙, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1 및 이필리무맙을 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다. 인간 항체는 본 발명의 치료 방법에 실질적인 이점을 제공하며, 이들은 인간 환자에 있어서 비인간 항체의 사용과 관련된 면역원성 및 알레르기 반응을 최소화할 것으로 기대된다.

본 발명의 유용한 인간 항-CTLA4 항체의 특징은 WO 00/37504, EP 1262193 및 미국특허 공보 제6,682,736호뿐만 아니라 미국 특허 출원 공개 공보 제US2002/0086014호 및 제US2003/0086930호에 광범위하게 논의되어 있고, 이들 문헌에 기재된 아미노산 서열 및 핵산 서열은 전체가 참고로 본 명세서에 반영된다. 간략하게는, 본 발명의 항체로는 항체 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무맙, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1 및 이필리무맙 등의 항체의 중쇄 및 경쇄의 아미노산 서열을 가진 항체를 포함하지만, 그 예는 이들로 제한되는 것은 아니다. 본 발명은 또한 이들 항체의 중쇄 및 경쇄의 CDR의 아미노산 서열을 가진 항체뿐만 아니라, 상기 인용된 특허출원 및 공보에 기재된 바와 같이 CDR 영역에서 변화를 가진 것에 관한 것이다. 본 발명은 또한 이들 항체의 중쇄 및 경쇄의 가변영역을 가진 항체에 관한 것이다. 다른 실시형태에 있어서, 상기 항체는 항체 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무맙, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1 및 12.9.1.1 및 이필리무맙의 중쇄 및 경쇄의 전체 길이, 가변 영역 혹은 CDR, 아미노산 서열을 가진 항체로부터 선택된다.

일 실시형태에 있어서, 본 발명은 미국 특허 출원 제09/948,939호(미국 특허 출원 공개 제2002/0086014호에 대응함) 및 미국 특허 출원 공개 제 2003/0086930호, 그리고, 이들 문헌에 인용된 인용문헌에 개시된 인간 항-CTLA4 항체, 예를 들어 MAb 10D1(이필리무맙, 미국 뉴저지주의 프린세톤시에 소재한 메다렉스사 제품)(단, 이것으로 제한되지 않음) 등을 포함하는 항체-치료제 병용을 포함한다. 더욱더 바람직하게는, 항-CTLA4 항체는 이필리무맙이다.

다른 실시형태에 있어서, V_H의 아미노산 서열은 서열번호 3, 15 및 27에 기재된 아미노산 서열을 포함한다. 다른 실시형태에 있어서, V_L은 서열번호 9, 21 및 33에 기재된 아미노산 서열을 포함한다. 더욱 바람직하게는, V_H 및 V_L은 각각 서열번호 3(V_H 4.1.1) 및 서열번호 9(V_L 4.1.1)에 기재된 아미노산 서열; 각각 서열번호 15(V_H 4.13.1) 및 서열번호 21(V_L 4.13.1)에 기재된 아미노산 서열; 및 각각 서열번호 27(V_H 11.2.1) 및 서열번호 33(V_L 11.2.1)에 기재된 아미노산 서열을 포함한다.

또 다른 실시형태에 있어서, 중쇄의 아미노산 서열은 서열번호 1, 13 및 25에 기재된 핵산 서열을 포함하는 핵산에 의해 암호화된 아미노산 서열을 포함한다. 다른 실시형태에 있어서, 경쇄는 서열번호 7, 19 및 31에 기재된 핵산 서열을 포함하는 핵산에 의해 암호화된 아미노산 서열을 포함한다. 더욱 바람직하게는, 상기 중쇄 및 경쇄는 각각 서열번호 1(중쇄 4.1.1) 및 서열번호 7(경쇄 4.1.1)에 기재된 핵산 서열; 서열번호 13(중쇄 4.13.1) 및 서열번호 19(경쇄 4.13.1)에 기재된 핵산 서열; 및 서열번호 25(중쇄 11.2.1) 및 서열번호 31(경쇄 11.2.1)에 기재된 핵산 서열을 포함하는 핵산에 의해 암호화된 아미노산 서열을 포함한다.

또한, 항체는 V_H 3-30 또는 3-33 유전자로부터 유래된 인간 CDR 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 아미노산 서열, 또는 그의 보존적 치환 또는 체세포 돌연변이를 포함할 수 있다. 항체는 또한 A27 또는 O12 유전자로부터 유래된 그의 경쇄 내의 CDR 영역, 즉, 5 이하, 혹은 10 이하의 이러한 돌연변이를 포함할 수 있다. 항체는 5개 이하 혹은 10개 이하의 아미노산만큼 다른 것을 포함하는, 이들 유전자로부터의 골격 영역을 포함할 수 있다. 또, 원래의 생식세포 서열을 반영하도록 돌연변이가 실시된 본 명세서에 기재된 골격 영역을 가진 항체도 포함된다.

본 발명의 다른 실시형태에 있어서, 항체는 CTLA4와 B7-1, B7-2, 또는 이들 모두 간의 결합을 억제한다. 바람직하게는, 항체는 약 100 nM 이하, 더 바람직하게는, 약 10 nM 이하, 예를 들어 약 5 nM 이하, 더욱더 바람직하게는, 약 2 nM 이하, 또는 더더욱 바람직하게는 예를 들어 약 1 nM 이하의 IC₅₀을 가진 B7-1과의 결합을 억제할 수 있다. 마찬가지로, 항체는 약 100 nM 이하, 더 바람직하게는, 10 nM 이하, 예를 들어, 더욱 바람직하게는, 약 5 nM 이하, 더욱더 바람직하게는, 약 2 nM 이하, 또는 훨씬 더 바람직하게는, 약 1 nM 이하의 IC₅₀을 가진 B7-2와의 결합을 억제할 수 있다.

또한, 다른 실시형태에 있어서, 항-CTLA4 항체는 CTLA4에 대한 결합 친화도가 약 10^-8 이상, 또는 더욱 바람직하게는 친화도가 약 10^-9 이상, 더더욱 바람직하게는, 친화도가 약 10^-10 이상, 훨씬 더 바람직하게는 친화도가 약 10^-11 이상이다.

항-CTLA4 항체는 4.1.1, 6.1.1, 티실리무맙, 4.13.1 및 4.14.3으로 이루어진 군으로부터 선택된 항체의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가진 항체와 결합하기 위해 경쟁할 수 있다. 또한, 항-CTLA4 항체는 이필리무맙 항체와 결합하기 위해 경쟁할 수 있다.

다른 실시형태에 있어서, 항체는 바람직하게는 항체 4.1.1, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1 또는 티실리무맙의 중쇄 및 경쇄 서열, 가변 중쇄 서열 및 가변 경쇄 서열, 및/또는 중쇄 및 경쇄 CDR 서열을 가진 항체와 교차 경쟁한다. 예를 들어, 항체는 4.1.1, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1 및 티실리무맙으로 이루어진 군으로부터 선택된 항체의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열, 가변 서열 및/또는 CDR 서열을 가진 항체가 결합하는 에피토프에 결합할 수 있다. 다른 실시형태에 있어서, 항체는 MDX-D010의 중쇄 및 경쇄 서열, 또는 항원-결합성 서열을 가진 항체와 교체-경쟁한다.

다른 실시형태에 있어서, 본 발명은 CDR-1, CDR-2 및 CDR-3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, 및 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무맙, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1 및 12.9.1.1로 이루어진 군으로부터 선택된 항체의 CDR-1, CDR-2 및 CDR-3의 아미노산 서열, 또는 보존적 변화로 이루어진 군으로부터 선택된 상기 CDR 서열로부터의 변화를 가진 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-CTLA4 항체를 이용해서 실행되고, 여기서, 상기 보존적 변화는 비극성 잔기의 다른 비극성 잔기에 의한 대체, 극성 하전 잔기의 다른 극성 비하전 잔기에 의한 대체, 극성 하전 잔기의 다른 극성 하전 잔기에 의한 대체, 및 구조적으로 유사한 잔기의 치환, 즉 비보존적 치환으로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서, 상기 비보존적 치환은 극성 비하전 잔기의 극성 하전 잔기로의 치환 및 극성 잔기의 비극성 잔기로의 치환, 부가 및 결실로 이루어진 군으로부터 선택된다.

본 발명의 또 다른 실시형태에 있어서, 항체는 골격 영역 혹은 CDR 영역 내에서 생식계열(germ line) 서열로부터 10, 7, 5 또는 3개 이하의 아미노산 변화를 함유한다. 다른 실시형태에 있어서, 항체는 골격 영역 내에서의 5개 이하의 아미노산 변화 그리고 CDR 영역 내에서의 10개 이하의 아미노산 변화를 함유한다. 하나의 바람직한 실시형태에 있어서, 항체는 골격 영역 내에서의 3개 이하의 아미노산 변화 그리고 CDR 영역 내에서의 7개 이하의 아미노산 변화를 함유한다. 바람직한 실시형태에 있어서, 골격 영역 내의 변화는 보존적인 것이고, CDR 영역 내의 것은 체세포 돌연변이이다.

다른 실시형태에 있어서, 항체는 항체 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무맙, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1 및 12.9.1.1의 CDR 서열과 함께, 중쇄 및 경쇄 CDR-1, CDR-2 및 CDR-3 서열에 걸쳐 적어도 80%, 더 바람직하게는, 적어도 85%, 더욱 바람직하게는, 적어도 90%, 더욱 더 바람직하게는, 적어도 95%, 더더욱 바람직하게는, 적어도 99%의 서열 동질성을 가진다. 더욱더 바람직하게는, 항체는 항체 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무맙, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1 및 12.9.1.1의 서열과 함께 중쇄 및 경쇄 CDR-1, CDR-2 및 CDR-3에 걸쳐 100% 서열 동질성을 공유한다.

또 다른 실시형태에 있어서, 항체는 항체 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무맙, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1 및 12.9.1.1의 가변 영역 서열과 함께 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열에 걸쳐 적어도 80%, 더 바람직하게는, 적어도 85%, 더욱 바람직하게는, 적어도 90%, 더욱더 바람직하게는, 적어도 95%, 더더욱 바람직하게는, 적어도 99%의 서열 동질성을 가진다. 더욱더 바람직하게는, 항체는 항체 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무맙, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1 및 12.9.1.1의 서열을 가진 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열에 걸쳐 100% 서열 동질성을 공유한다.

본 명세서에서 이미 논의된 항-CTLA4 항체가 바람직하지만, 당업자라면, 본 명세서에서 제공된 개시내용을 기초로 해서 본 발명이 광범위한 항-CTLA4 항체를 포함하고, 이들 특정 항체로 제한되지 않는 것을 이해할 수 있을 것이다. 특히, 인간 항체가 바람직하지만, 본 발명은 하등 인간 항체로 제한되지 않고; 오히려, 본 발명은 종의 기원에 관계없이 유용한 항체를 내포하며, 특히 키메라 인간화 및/또는 영장류화 항체를 포함한다. 또한, 본 명세서에 예시된 항체는 유전자 전이 포유동물, 예를 들어, 인간 면역 레퍼토리를 포함하는 마우스를 이용해서 얻어졌으나, 당업자라면 본 명세서에서 제공된 개시내용을 기초로 해서 본 발명이 이것에 의해 생성된 항체 혹은 기타 임의의 특정 방법으로 제한되지 않는 것을 이해할 수 있을 것이다. 대신에, 본 발명은 당업계에 공지된 방법(예를 들어, 선별 파지 발현 라이브러리 등) 또는 본 발명의 항-CTLA4 항체를 생산하기 위해 장래에 개발될 방법 등을 비롯해서 어떠한 방법으로 생산되는 항-CTLA4 항체를 포함하며, 이들 방법은 이것으로 제한되지 않는다. 본 명세서에서 제공되고 또한 예를 들어 미국특허 공보 제6,682,736호(Hanson et al.) 및 미국 특허 출원 공개 공보 제2002/0088014호에 기재된 광범위한 개시 내용을 기초로 해서, 당업자라면 본 명세서에 개시된 신규의 방법을 이용해서 치료제와 병합해서 유방암의 치료에 유용한 항체를 용이하게 생산하고 동정할 수 있다.

본 발명은 미국 특허 제6,682,736호(Hanson et al.)에 개시된 바와 같은 유전자 전이 비인간 포유동물, 즉, XenoMouse™(미국 캘리포니아주의 프리몬트시에 소재한 압게닉스사(Abgenix, Inc.) 제품)를 사용해서 생산된 인간 항체를 내포한다.

"인간" 항체의 생산을 위한 다른 유전자 전이 마우스 계통은 "HuMAb-Mouse™"(미국 뉴저지주의 프린세톤시에 소재한 메다렉스사 제품)라 칭해지며, 이것은 내인성 뮤 및 카파 쇄 부위를 불활성화하는 표적화 돌연변이와 함께 비재배열된 인간 중쇄(뮤 및 감마) 및 카파 경쇄 면역글로불린 서열을 암호화하는 인간 면역글로불린 유전자 최소부위(miniloci)를 함유한다(Lonberg et al., Nature 368:856-859 (1994) 및 미국 특허 공보 제5,770,429호).

그러나, 본 발명은 이들로 제한되지는 않지만 예를 들어, 문헌[Tomizuka et al., Proc Natl Acad Sci USA 97:722 (2000); Kuroiwa et al., Nature Biotechnol 18:1086 (2000)]; 미국 특허 출원 공개 공보 제2004/0120948호(Mikayama et al.)에 기재된 바와 같은 Kirin TC Mouse™(일본 도쿄 소재에 소재한 기린 비루(Kirin beer) 가부시키가이샤 제품); 및 HuMAb-Mouse™(미국 뉴저지주의 프린세톤시에 소재한 메다렉스사 제품) 및 XenoMouse™(미국 캘리포니아주의 프리몬트시에 소재한 압게닉스사 제품) 등의 유전자 전이 포유동물을 이용해서 생산된 인간 항-CTLA4 항체를 이용한다. 따라서, 본 발명은 임의의 유전자 전이 또는 기타 인간이 아닌 동물을 이용해서 생산된 항-CTLA4 항체를 이용하는 것도 포함한다.

또한, 인간 항-CTLA-4 항체를 생산하는 바람직한 방법은 인간 면역 레퍼토리를 포함하는 인간이 아닌 유전자 전이 포유동물을 이용한 항체의 생성을 포함하지만, 본 발명은 하등 이러한 접근법으로 제한되는 것은 아니다. 오히려, 본 명세서에서 제공된 내용을 접한 당업자가 이해할 수 있는 바와 같이, 본 발명은 목적으로 하는 항원을 특이적으로 결합하는 항체의 제조를 위한 당업계에 공지되거나 장래에 개발될 임의의 방법에 따라 생산된 CTLA4에 대해 특이한 임의의 다른 항체 또는 인간의 생산을 위한 임의의 방법을 이용하는 것을 내포한다.

인간 항체는, 이들로 제한되지는 않지만, 파지 발현 항체 라이브러리의 이용을 포함하는 방법에 의해 전개될 수 있다. 이들 기술을 이용해서, 항체는 CTLA4 발현 세포, CTLA4 자체, CTLA4의 형태, 그의 에피토프 혹은 펩타이드, 및 그에 대한 발현 라이브러리로 생성될 수 있고(예를 들어, 미국 특허 공보 제5,703,057호 참조), 그 후 전술한 활성에 대해 선별될 수 있다.

다른 실시형태에 있어서, 본 발명의 방법에 이용되는 항체는 완전히 인간일 필요는 없고 "인간화"되어 있으면 된다. 특히, 뮤린 항체 또는 다른 종으로부터의 항체는 당업계에 공지된 기술을 사용하여 "인간화"되거나 "영장류화"(primatize)된다. 이에 대해서는 예를 들어, 문헌[Winter and Harris, Immunol Today 14:43-46 (1993)], 문헌[Wright et al., Crit . Reviews in Immunol. 12:125-168 (1992)], 미국특허 제4,816,567호(Cabilly et al.) 및 문헌[Mage and Lamoyi in Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications pp. 79-97, Marcel Dekker, Inc., New York, NY (1987)]을 참조할 수 있다.

본 명세서에서 제공된 개시내용을 기초로 알 수 있는 바와 같이, 본 발명에 이용하기 위한 항체는 유전자변이 인간이 아닌 포유 동물 및 그로부터 유래된 하이브리도마로부터 얻어질 수 있지만, 하이브리도마 이외의 기타 세포주에서 발현될 수도 있다.

발현용의 숙주로서 이용가능한 포유동물 세포주는 당업계에 충분히 공지되어 있고, 또한, ATCC(the American Type Culture Collection)로부터 입수가능한 많은 무한증식 세포주, 예컨대, 중국 햄스터 난소(CHO) 세포, NSO("NS0"으로도 칭함), HeLa 세포, 베이비 햄스터 신장(BHK) 세포, 원숭이 신장 세포(COS) 및 인간 간세포 암종 세포(예를 들어, Hep G2)를 포함하지만 이들로 제한되지는 않는다. 세균, 효모, 곤충 및 식물 세포를 포함한 비-포유류 원핵 및 진핵 세포를 이용할 수도 있다.

각종 발현 시스템은 예를 들어 이들로 제한되지는 않지만 문헌[Sambrook and Russell, Molecular Cloning , A Laboratory Approach, Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, NY (2001) 및 Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, NY (2002)]에 기재된 것 등의 당업계에 충분히 공지된 바와 같이 사용될 수 있다. 이들 발현 시스템은 특히 다이하이드로폴레이트 환원 효소(DHFR)계 시스템을 포함한다. 글루타민 합성효소 발현 시스템은 유럽특허 번호 EP 216 846, EP 256 055 및 EP 323 997, 유럽특허 출원 제89303964호와 관련해서 전체 혹은 일부가 논의되어 있다. 일 실시형태에 있어서, 사용되는 항체는 글루타민 합성효소 글루타민 합성효소 시스템을 이용하는 NSO 세포(GS-NSO)이다. 다른 실시형태에 있어서, 항체는 DHFR 시스템을 이용해서 CHO 세포에서 작성된다. 이들 두 시스템은 당업계에 공지되어 있고, 특히 문헌[Barnes et al., Biotech & Bioengineering 73:261-270 (2001)]에 기재되어 있고, 이 문헌은 참고로 본 명세서에 반영된다.

비-인간 당화로부터 비롯되는 면역원성, 약동학 및/또는 효과기 기능상의 변화를 방지하기 위해서는, 당화를 제거하도록 하는 항체 CH2 도메인의 부위 지시된 돌연변이 유발이 바람직할 수 있다. 추가로, 항체를 효소적 방법[참고: 예를 들어, Thotakura et al., Meth . Enzymol. 138:350 (1987)] 및/또는 화학적 방법 [참고: 예를 들어, Hakimuddin et al., Arch. Biochem . Biophys. 259:52 (1987)]에 의해 탈당화시킬 수 있다.

추가로, 본 발명은 변경된 당화 패턴을 포함하는 항-CTLA4 항체를 사용하는 것을 내포한다. 당업자는 본 명세서에 제공된 기재 내용을 근거로 하여, 항-CTLA4 항체가 천연 항체와 비교해서 부가의, 수개의 또는 상이한 당화 부위를 포함하도록 변형시킬 수 있다는 것을 인지할 것이다. 이러한 변형은 예를 들어 미국 특허공개공보 제2003/0207336호 및 제2003/0157108호 및 국제공개공보 WO 01/81405 및 00/24893에 기재되어 있다.

부가적으로, 본 발명은 존재하는 경우에는 항체 상에 존재하는 글라이코형에 상관없이 항-CTLA4 항체를 사용하는 것을 포함한다. 더욱이, 당단백질 상에 존재하는 글라이코형을 광범위하게 재형성(리모델링)시키는 방법은 당업계에 공지되어 있고, 이에는 예를 들어 국제공개공보 WO 03/031464, WO 98/58964 및 WO 99/22764, 미국 특허공개공보 제2004/0063911호, 제2004/0132640호, 제2004/0142856호, 제2004/0072290호, 및 미국 특허 제6,602,684호(Umana et al.)에 기재된 방법들이 포함된다.

또한, 본 발명은 예를 들어 미국 특허공개공보 제2003/0207346호 및 제2004/0132640호, 및 미국 특허 제4,640,835호; 제4,496,689호; 제4,301,144호; 제4,670,417호; 제4,791,192호; 제4,179,337호에 제시된 방식으로, 당업계에 공지된 공유적 및 비공유적 변형, 예를 들어, 이들로 제한되는 것은 아니지만 폴리펩타이드를 각종 비단백질성 중합체들(예컨대, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리프로필렌글리콜 또는 폴리옥시알킬렌) 중의 하나에 연결시키는 것을 비롯하여 항-CTLA4 항체를 사용하는 것을 내포한다.

부가적으로, 본 발명은 항-CTLA4 항체, 또는 그의 항원-결합성 부분, 인간 혈청 알부민 폴리펩타이드 등을 포함하는 키메라 단백질, 또는 그의 단편을 사용하는 것을 내포한다. 키메라 단백질을, 예를 들어 이러한 키메라 단백질을 암호화하는 키메라 핵산을 클로닝함으로써 재조합 방법을 사용하여 생성시키든지 또는 2개의 펩타이드 부분을 화학적으로 연결시킴으로써 생성시키든지 간에, 당업자는 본 명세서에 제공된 교시로 일단 보강하게 되면, 이러한 키메라 단백질이 당업계에 널리 공지되어 있고 목적으로 하는 생물학적 특성, 예컨대 본 발명의 항체에 대한 안정성과 혈청 반감기 증가를 부여할 수 있다는 것을 이해할 것이므로, 이러한 분자는 본 명세서에 포함된다.

본 발명에 사용하기 위해 생성시킨 항체가 초기에 특별히 목적으로 하는 동형(isotype)을 반드시 보유할 필요는 없다. 오히려, 생성된 바와 같은 항체는 어떠한 동형이라도 보유할 수 있고, 그 후 통상적인 기술을 사용하여 전환되는 동형일 수 있다. 이들은 직접 재조합 기술(예를 들어, 미국 특허 제4,816,397호 참조) 및 세포-세포 융합 기술(예를 들어, 미국 특허 제5,916,771호)을 포함한다.

본 발명의 항체의 효과기 기능은 각종 치료적 용도를 위해 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgD, IgA, IgE 또는 IgM으로의 동형(isotype) 전환에 의해 변경될 수도 있다. 더욱이, 세포 사멸을 위한 보체에 대한 의존성은, 예를 들어 이중-특이체, 면역독소 또는 방사성 표지를 사용함으로써 피할 수 있다.

따라서, 본 발명에 사용되는 바람직한 항체는 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무맙, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1 및 이필리무맙의 아미노산 서열, 또는 예를 들어 V 영역 혹은 그의 CDR의 서열을 가진 항체에 의해 예시되지만, 본 발명은 하등 이들, 또는 기타 임의의 특정 항체를 사용하는 것으로 제한되지 않는다. 본 발명은 본 발명의 임의의 항-CTLA4 항체를 인돌리논 RTKI와 함께 병용 투여하는 것을 포함한다. 바람직하게는, 항체는 4.1.1, 4.13.1, 티실리무맙 및/또는 이필리무맙이다. 그러나, 본 명세서의 어디에선가 설명한 바와 같이, 또는 당업계에 공지되거나 장래에 개발될 임의의 항-CTLA4 항체 또는 그의 항원-결합성 부분이 본 발명의 방법에 사용될 수 있다. 특히, 임의의 인간 항체뿐만 아니라, 인간화 키메라 항체, 임의의 종으로부터 유도된 항-CTLA4 항체(예를 들어, 미국 특허 공보 제5,759,808호 및 제6,765,087호에 기재된 바와 같이 카멜리드(camelid)로부터 얻어진 단일 쇄 항체를 포함함)는 본 명세서에 기재된 신규의 방법을 실시하기 위해 치료제와 병용될 수 있다.

본 발명은 또한 특히 국제 특허 공보 WO 00/37504(공개일: 2000년 6월 29일); WO 01/14424(공개일: 2001년 3월 1일); WO 93/00431(공개일: 1993년 1월 7일); 및 WO 00/32231(공개일: 2000년 6월 8일)에 개시된 바와 같은 그러한 항체를 포함한다.

항체 4.1.1, 4.13.1 및 티실리무맙은 IgG2 항체이고, 해당 항체의 가변 영역의 서열은 본 명세서(도 1 내지 도 3), 그리고, 본 명세서에서 참조되고 도입된 상기 특허 출원 및 특허 등록 문헌에서 제공되고 있지만, 이들 항체의 전체 길이 서열은 본 명세서에 내포되어 있을 뿐만 아니라, 본 명세서의 그 밖의 부분에서 더욱 충분히 논의된 바와 같은 동형(isotype)에 관계없이, 서열번호 1 내지 36에 기재된 서열을 포함하고 또한 임의의 불변부위를 더욱 포함하는 소정의 항체의 이용도 내포되고 있는 것임을 이해할 수 있을 것이다. 마찬가지로, 이필리무맙의 항원-결합성 부분을 암호화하는 서열을 비롯한 이필리무맙 또는 그의 임의의 부위의 전체 길이 서열을 포함하는 항체는 인돌리논 RTKI, 예를 들어, 수니티닙 말레이트와 병용해서 투여될 수 있고, 이에 따라 암을 치료할 수 있다.

따라서, 본 명세서에 제시된 교시를 일단 제공받은 당업자라면, 본 발명의 항-CTLA4 항체-치료제 병용이 광범위한 항-CTLA4 항체를 포함할 수 있는 것을 용이하게 이해할 수 있을 것이다. 일 실시형태에 있어서, 본 발명의 방법은 티실리무맙을 이용한다. 본 발명의 다른 실시형태에 있어서, 상기 방법은 예를 들어 이하의 특허출원 및 특허 공보에 기재된 것과 같은 항-CTLA4 항체를 이용한다: 미국 특허 출원 제09/472,087호(미국특허 공보 제6,682,736호로 공개됨); 국제 특허 출원 제PCT/US99/30895호(WO 00/37504로 2000년 6월 29일 공개됨); 미국특허 출원 제10/612,497호(US 2004/0228858로 2004년 11월 18일 공개됨); 미국특허 출원 제10/776,649호(US 2004/0228861로 2004년 11월 18일 공개됨); 국제 특허 출원 제PCT/US00/23356호(WO 01/14424호 2001년 3월 1일 공개됨)(예를 들어, MDX-010 및 이필리무맙으로도 알려진 항체 10D1(미국 뉴저지주의 프린세톤시에 소재한 메다렉스사 제품); 국제 특허 출원 제PCT/US99/28739호(WO 00/32231로 2000년 6월 8일 공개됨); 미국특허 제5,811,097호, 제5,855,887호, 제6,051,227호 및 제6,207,156호; 미국특허 제5,844,095호(Linsley et al.); 국제 특허 출원 제PCT/US92/05202호(WO 93/00431로 1993년 1월 7일 공개됨); 미국 특허 출원 제10/153,382호(US 2003/0086930으로 2003년 5월 8일 공개됨); 미국특허 출원 제10/673,738호(US 2005/0042223으로서 2005년 2월 24일 공개); 미국특허 출원 제11/085,368호(US 2005/0226875로서 2005년 10월 13일 공개); 미국특허 출원 제60/624,856호(출원일: 2004년 11월 4일); 미국특허 출원 제60/664,364호(출원일: 2005년 3월 23일); 미국특허 출원 제60/664,653호(출원일: 2005년 3월 23); 미국특허 출원 제60/697,082호(출원일: 2005년 7월 7); 미국특허 출원 제60/711,707호(출원일: 2005년 8월 26일).

또한, 당업자는, 본 명세서에서 제공된 개시내용을 기초로 해서, 본 발명이 오로지 단일 항체의 투여만으로 제한되지 않고; 오히려, 본 발명은 적어도 하나의 항-CTLA4 항체, 예컨대, 4.1.1, 4.13.1, 티실리무맙 및 이필리무맙을, 치료제와 병용해서 투여하는 것을 포함하는 것을 알 수 있을 것이다. 게다가, 본 발명은 임의의 공지의 항-CTLA4 항체의 임의의 병용물을 투여하는 것, 예컨대, 이들로 제한되지는 않지만, 치료제를 예를 들어 4.1.1, 4.13.1, 티실리무맙 및 이필리무맙과 병용해서 투여하는 것을 포함한다. 이와 같이 해서, 항-CTLA4 항체의 임의의 병용물은 적어도 하나의 치료제와 병용될 수 있고, 본 발명은 이러한 임의의 병용물 및 그의 교환을 포함한다.

II. 항체- 인돌리논 병용 요법

A. 인돌리논 RTKI

본 발명의 방법 및 병용에서 이용될 수 있는 개시된 예시적인 인돌리논 RTKI는 특히 국제공개공보 WO 2003/016305(공개일: 2003년 2월 27일)(US 2003/0069298: 공개일: 2003년 4월 10일), WO 2005/033098(공개일: 2005년 4월 14일)(US 2005/0118255: 공개일: 2005년 6월 2일) 및 WO 2004/024127(공개일: 2004년 3월 25일)(US 2004/0229930: 공개일: 2004년 11월 18일) 및 미국특허 공보 제6,573,293호 및 제6,653,308호에 개시되어 있고, 이들 문헌에 개시된 내용은 그들 전문이 참고로 본 명세서에 반영된다. 이와 같이 해서, 본 명세서에 개시된 교시로 보강한 당업자라면 이해할 수 있는 바와 같이, 일 실시형태에 있어서, 화합물 1은 본 명세서에 있어서 바람직한 인돌리논으로서 예시되어 있지만, 본 발명은 이들로 제한되지 않고, 임의의 기타 특정 인돌리논 RTKI를 포함한다.

일 실시형태에 있어서, 본 발명에 사용되는 인돌리논은 KIT, FLT3, VEGFR 및 PDGFR을 포함하지만 이들로 제한되지는 않는 적어도 하나의 수용체 티로신 키나제를 억제할 때 검출가능한 활성을 가진다. 더욱더 바람직하게는, 인돌리논은 KIT, FLT3, VEGFR 및 PDGFR을 검출가능하게 억제한다. 항-CTLA4 항체와 병용해서 사용되는 이러한 인돌리논 RTKI는 화합물 1 및 그의 임의의 대사산물(예를 들어, 화합물 2), 또는 화합물 3을 포함한다. 바람직하게는, 인돌리논 RTKI은 화합물 1 및 화합물 2이다. 더욱더 바람직하게는, 인돌리논 RTKI는 화합물 1이다. 화합물의 임의의 약학적으로 허용가능한 염은 본 발명의 항체-인돌리논 RTKI에 포함된다. 바람직하게는, 화합물 1의 염은 말산염, 더욱 바람직하게는 L-말레이트염이다. 바람직하게는, 화합물 3의 염은 말레산염이다.

본 발명에 사용된 인돌리논 RTKI의 예는 국제공개공보 WO 2003/016305(공개일: 2003년 2월 27일), WO 2004/024127(공개일: 2004년 3월 25일), WO 2004/045523(공개일: 2004년 6월 3일), 미국특허 공보 제 6,573,293호, 미국특허 공보 제6,653,308호, 및 미국 특허 출원 제 10/991,244(US 2005/0182122(공개일: 2005년 8월 18일)에 대응)에 기재되어 있고, 이들 문헌은 각각 모든 목적을 위해서 그의 전문이 본 명세서에 반영된다. 이들 화합물의 용도는 특히 전술한 문헌뿐만 아니라, 국제공개공보 WO 2003/015608(공개일: 2003년 2월 27일, US 2003/0216410(공개일: 2003년 11월 2일)에 대응함) 및 WO 2004/045523(공개일: 2004년 6월 3일, US 2004/0152759(공개일: 2004년 8월 5일)에 대응함), 미국특허 출원 공개 공보 US 2005/0182122(공개일: 2005년 8월 18일) 및 미국 특허 가출원 제60/719,119호(출원일: 2005년 9월 20일), 제60/680,837호(출원일: 2005년 5월 12일) 및 제60/753,797호(출원일; 2005년 12월 23일)에 기재되어 있고, 이들 문헌은 그들의 전문이 참고로 본 명세서에 반영된다.

일 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI는 N-[2-다이에틸아미노]에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드로 칭해지고, 이미 본 명세서에서 화학식 1로 표시된 화합물 1(전술한 바와 같이 수니티닙 말레이트, SU11248, SU011248 및 SUTENT로서 칭해짐)이다. 본 발명은 화합물 1의 활성 대사산물(전술한 바와 같이 SU12662로도 칭해지며, 그 대사산물은 N-[2-(에틸아미노)에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드로도 칭해짐)을 포함하고, 전술한 바와 같이 화학식 2로 표시된다. 다른 실시형태에 있어서, 사용된 인돌리논 RTKI는 5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-N-[(2S)-2-하이드록시-3-모폴린-4-일프로필]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드로서 칭해지고, 화학식 3으로 표시되는 화합물 3이다. 당업자라면 본 명세서에서 제공된 개시내용을 기초로 이해할 수 있는 바와 같이, 인돌리논 RTKI의 임의의 약학적으로 허용가능한 염을 사용할 수 있다.

본 발명에 사용되는 인돌리논 화합물은 PKs(protein kinases: 단백질 키나제들)의 범 억제제이며, 따라서, PKs가 발암을 매개하고/하거나 발암에 역할을 하는 것으로 알려져 있기 때문에 암의 치료에 유용하다. 본 발명에 사용되는 인돌리논에 의해 촉매 활성이 매개되는 PKs로는 RTKs(receptor tyrosine kinases: 수용체 티로신 키나제들), CTKs(cellular tyrosine kinases: 세포 티로신 키나제들) 및 STKs(serine-threonine kinases) 등의 단백질 티로신 키나제를 포함한다. RTK-매개 신호 전달은 특이적 성장인자(리간드)와의 세포외 상호작용에 의해 개시된 후, 수용체 이량체화, 진성 단백질 티로신 키나제 활성의 과도 자극 및 인산화를 수행한다. 이와 같이 함으로써, 결합 부위는 세포내 신호 전달 분자를 위해 작성되어, 예를 들어 문헌[Schlessinger and Ullrich, 1992, Neuron 9:303-391]에 보고되어 있는 바와 같이, 적절한 세포 반응(예를 들어, 세분분할, 세포외 환경에 대한 대사효과 등)을 용이하게 하는 세포질 신호 분자의 스펙트럼과의 복합체의 형성을 가져온다.

성장 인자 수용체상의 티로신 인산화 부위가 신호 분자의 SH2(src 상동성) 도메인에 대해 높은 친화도 결합 부위로서 작용하는 것은 입증되어 있다[문헌: Fantl et al., 1992, Cell 69:413-423, Songyang et al., 1994, Mol . Cell . Biol. 14:2777-2785), Songyang et al., 1993, Cell 72:767-778 및 Koch et al., 1991, Science 252:668-678 참조]. RTK와 관련된 몇몇 개의 세포내 기질 단백질은 동정되어 있고, 그들 기질의 수용체와 SH2 도메인 간의 상호작용의 특이성은 인산화 티로신 잔기를 바로 둘러싸고 있는 아미노산 잔기에 의해 결정된다(Songyang et al., 1993, Cell 72:767-778). 특정 수용체 상의 포스포티로신 잔기를 둘러싸고 있는 아미노산 서열과 SH2 도메인 간의 결합 친화도의 차이는, 그들의 기질 인산화 프로파일인 특수 원형질에서 관찰된 차이와 일치한다. 이들 관찰은 RTK의 각각의 기능이 그의 패턴 발현과 리간드 이용성에 의해서뿐만 아니라, 특정 수용체에 의해 활성화된 하류 신호 전달 경로의 배열에 의해서도 결정되는 것을 시사한다. 따라서, 인산화는 분화유발 인자 수용체뿐만 아니라 특정 성장인자 수용체에 의해서 보충된 신호 경로의 선택성을 결정하는 중요한 조절 단계를 제공한다.

PK 신호 전달은 기타 반응 중에서 세포 증식, 분화, 성장 및 대사를 가져온다. 비정상 세포 증식은 암종, 육종, 교모세포종 및 혈관종 등의 신생물의 발병, 백혈병, 건선, 동맥경화증, 관절염 및 당뇨성 망막병증 등의 장애, 및 비제어된 혈관 신생 및/또는 혈관형성과 관련된 기타 장애를 비롯한 광범위한 장애 및 질환을 초래한다.

기전을 이해하면, 본 발명에서 이용되는 인돌리논 화합물은 본 발명을 실시하는 데 필요하지 않음을 알 수 있다. 그러나, 어떠한 특정 이론에 얽매이고 싶지는 않지만, 본 발명에 이용되는 인돌리논 화합물은 PKs의 촉매 영역에서 아미노산과 반응할 수 있다. 즉, PKs는 전형적으로 아미노산이 PKs 중에서 보존되는 영역에서 두 개의 로브(lobe) 사이의 갈라진 틈에서 ATP가 결합하는 일이 일어나는 이엽(bi-lobate) 구조를 소유한다. PKs의 억제제, 예컨대 인돌리논 RTKI는 ATP가 그렇지 않으면 PKs에 결합하는 동일한 일반적인 영역에서 수소 결합, 반 데르 바알스 힘 및/또는 이온 상호작용 등의 비공유 상호작용에 의해 결합하는 것으로 여겨진다. 구체적으로는, 본 명세서에서 사용되는 화합물의 2-인돌리논 성분이 ATP의 아데닌 고리에 의해 통상 점유되는 일반적인 공간에서 결합되는 것으로 생각된다. 특정 PK에 대한 특정 분자의 특이성은 다음에 특정 PKs에 특이적인 아미노산 도메인 및 2-인돌리논 코어상의 각종 치환체 간의 부가적인 상호작용의 결과로서 일어날 수 있다. 이와 같이 해서, 상이한 인돌리논 치환체는 특정 PKs에 대한 우선적 결합에 기여할 수 있다. 상이한 ATP(또는 기타 뉴클레오타이드) 결합 부위에서 활성인 화합물을 선택하는 능력은 본 발명의 인돌리논 화합물을 이러한 부위를 가진 임의의 단백질을 표적화하는 데 특히 유용하게 만든다. 따라서, 본 발명에 이용되는 화합물은 PKs와의 상호작용을 통해서 생체내 치료 효과를 매개하는 데 사용될 수 있다.

항-CTLA4 항체와 병합해서 본 발명에 사용되는 인돌리논 화합물은 이들로 제한되지는 않지만 암종, 카포시 육종을 비롯한 육종, 적모구종, 교모세포종, 수막종, 별아교세포종, 악성흑색종 및 근육모세포종을 포함하는 많은 종류의 고형 종양의 치료에 강력한 치료상 접근법을 제공한다. 백혈병 등의 비고형 종양 암의 치료 또는 예방은 또한 본 발명에 의해 상정된다. 처방은 뇌암, 방광암, 난소암, 위암, 췌장암, 결장암, 신장암, 장암, 유방암, 전립선암, 혈액암, 폐암 및 뼈암을 포함할 수 있지만, 이들로 제한되는 것은 아니다.

부가적으로, 항-CTLA4 항체와 병용할 경우 본 발명에 사용되는 인돌리논 화합물이 예방, 치료 및 연구에 유용할 수 있는 부적합한 PK 활성에 관련된 장애의 종류는 제한은 없지만 세포 증식성 장애, 섬유증 장애 및 대사 장애이다. 또한, 본 발명에 의해 예방, 치료 또는 더욱 연구될 수 있는 세포 증식성 장애는 암, 혈관 증식성 장애 및 혈관사이 세포 증식성 장애를 포함한다.

B. 인돌리논 RTKI 와 항- CTLA4 항체 병용

본 발명은 인돌리논 PK 억제제, 바람직하게는, 인돌리논 RTKI를 항-CTLA4 항체와 공통 투여하는 것을 포함하는 병용 요법에 관한 것이고, 더욱 바람직하게는, 인돌리논 RTKI는 화합물 1, 화합물 2, 또는 화합물 3이고, 바람직하게는, 항체는 항체 4.1.1, 4.13.1 및 티실리무맙, 이필리무맙의 항원-결합성 부분을 포함한다. 이 개시의 목적을 위해서, 화합물 1, 화합물 2, 또는 화합물 3와 관련된 것을 비롯한 인돌리논 RTKI와 관련된 것은 본 명세서에 기재된 바람직한 염(이들로 제한되는 것은 아님) 등의 그들의 약학적으로 허용가능한 염과 관련된 것을 포함한다.

일 실시형태에 있어서, 항-CTLA4 항체와 인돌리논 PK 억제제의 병용은 인돌리논이 화합물 1인 암을 치료하기 위해 환자에게 공동 투여된다. 화합물 1은 특히 전립선암, 난소암, 갑상샘암, 악성흑색종, 육종, 유방암, GIST(이마티닙(imatinib) 내성이 있거나 내성이 없는), NSCLC, 췌장암, 직장결장암, 콩팥 세포 암종 등의 치료에 유용하다. 따라서, 항-CTLA4 항체와 인돌리논 RTKI의 병용은 이들 암의 치료에 유용하다. 더욱 구체적으로는, 많은 잠재적인 치료 옵션 중, 인돌리논 RTKI와 항-CTLA4 병용 요법은 특히 이마티닙-내성 GIST, 전이성 콩팥 세포 암종, 전이 유방암, 직장결장암, 난소암, 비-소세포 폐암, 전이 유방암, 신경내분비암(예를 들어, 이자섬 세포암)을 치료하는 데 이용될 수 있다. 이들 암이 바람직하지만, 본 발명은 중피종, 간쓸개(간 및 담관), 1차 혹은 2차 CNS 종양, 1차 혹은 2차 뇌종양, 폐암(NSCLC 및 SCLC), 뼈암, 피부암, 두경부암, 피부 혹은 안구내 악성흑색종, 항문 부위의 암, 위암, 위장관(위, 직장결장 및 십이지장), 유방암, 자궁암, 난관 암종, 자궁내막의 암종, 자궁경부 암종, 질의 암종, 외음부의 암종, 호지킨병, 식도암, 소장암, 내분비계통 암, 요도암, 음경암, 고환암, 만성 혹은 급성 골수성 백혈병, 급성 혹은 만성 림프구성 백혈병, 피부 T-세포 림프종, 방광암, 신장암, 요관암, 콩팥 세포 암종, 신우 암종, 중추신경계(CNS)의 신생물, 원발성 CNS 림프종, 비호지킨 림프종, 척수 축 종양, 뇌간교종, 뇌하수체 샘종, 담관 선종, 담낭암, 다발 골수종, 섬유육종, 신경모세포종, 망막모세포종, 또는 이들 암의 1개 이상의 조합을 포함하지만, 이들로 제한되지는 않는 광범위한 악성 세포 증식성 장애의 치료에 관한 것이다. 항체-인돌리논 RTKI 병용물의 또다른 실시형태에서, 이 병용물은 양성 증식 질병을 비롯한, 임의의 비정상 세포 성장, 예컨대 이로 제한되지 않지만, 건선, 양성 전립선 비대 및 재협착을 치료하기 위해 사용될 수 있다.

또한, 본 발명은 암에 대한 신보강, 보강, 1차 치료, 2차 및/또는 3차 요법(예를 들어, 유방암에 대한 보강 요법, 전이 폐암에 대한 1차 요법, 생식세포 종양에 대한 3차 요법 등)으로서 항-CTLA4 항체를 인돌리논 RTKI와 병용해서 사용하는 것을 내포한다. 즉, 일 실시형태에 있어서, 항체-인돌리논 RTKI 병용물은 예를 들어, 종양(예컨대, 전립선암)의 외과적 절제술 전에 신보강 요법으로서 공동 투여될 수 있다. 다른 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI-항체 병용물은 신보강 요법(즉, 수술 전)으로서 그리고 수술 후의 보강 요법으로서의 양쪽 모두에 투여될 수 있다. 또 다른 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI-항체 병용물은 사이토카인- 난치성 환자에서의 전이성 콩팥 세포 암종을 치료하기 위해 공동 투여될 수 있다. 또한, 상기 병용물은 다른 제제(예를 들어, 인터페론-알파) 대신에 1차 치료로서 사용될 수 있다. 부가적 병용 및 치료 요법은 본 명세서에서 제공된 개시내용을 기초로 당업자라면 용이하게 이해할 수 있으며, 그 예로는 특히 사이토카인-난치성 환자에서의 2차 요법으로서, 이마티닙-내성 GIST 환자에서의 2차 요법으로서 전이성 콩팥 세포 암종을 치료하기 위해 인돌리논 RTKI-항-CTLA4 항체 병용물의 공통 투여를 포함하지만 이들로 제한되는 것은 아니다. 인돌리논 RTKI-항-CTLA4 병용물이 공동 투여되는 경우의 이들 요법의 병용은 신보강, 보강, 1차 및 2차 요법, 또는 이들의 임의의 조합에 이용되는 경우 등도 본 발명에 포함되지만, 이들로 제한되는 것은 아니다.

일 실시형태에 있어서, 본 발명의 병용물은 전술한 암의 하나에 대한 간호 요법의 표준과 더욱 병용해서 투여된다. 다른 실시형태에 있어서, 상기 병용은 간호 요법의 표준에 실패한 환자에게 투여된다.

당업자라면 일단 본 명세서에 개시된 교시를 제공받으면, 본 발명이 암을 치료하기 위해서 외과적 수술, 방사선 치료, 또는 이들 양쪽 모두와 함께 혹은 순차(선행하거나 후행) 항-CTLA4 항체를 이용하는 면역 요법과 병용된 인돌리논 RTKI 요법도 내포하는 것임을 알 수 있을 것이다. 즉, 다양한 치료가 본 명세서에 제공된 교시로 보강한 당업자가 이해할 수 있는 바와 같이 수니팁(sunitib)-항-CTLA4 병용 요법과 병용될 수 있다.

다른 실시형태에 있어서, 인돌리논-RTKI, 바람직하게는, 화합물 1, 화합물 2 및 화합물 3과 항-CLTA-4 항체 병용물은 종양에 대한 면역 반응을 증강시키거나, 연장시키거나 또는 이들 양쪽 모두를 행하기 위해 공동 투여된다. 그 이유는 제제 단독보다 더욱 효과적인 종양 효과를 가져오는 본 발명의 인돌리논 RTKI와 항-CTLA4 항체의 항종양효과 간에 상호작용이 있기 때문이다. 따라서, 어떠한 특정 이론에 얽매이고 싶지는 않지만, 인돌리논 RTKI와 항-CTLA4 항체의 병용은 예상되는 것보다 종양 내 더욱 강력한 면역 반응을 유발할 수 있다. 어떠한 특정 이론에 얽매이고 싶지는 않지만, RTKI, 예컨대 인돌리논 RTKI의 항종양 효과에 의해 매개되는 종양 항원(들)의 방출은 이러한 항원(들)에 대한 것을 목적으로 할 수 있는 항-CTLA4의 면역치료 효과를 증가시킬 수 있다. 이것은 항체를 이용하는 CTLA4 차단이 종양 항원에 대한 내성을 파괴(예를 들어, 종양 항원에 대한 무반응 또는 내성을 역전 혹은 방지)함으로써 종양 세포를 면역 공격에 대해 더욱 감수성으로 하는 것이 입증된 것으로 보인다. 따라서, 인돌리논 RTKI를 항-CLTA-4 항체와 병용하는 것은 잠재적인 상승효과를 제공함으로써 중요한 신규의 치료적인 암의 치료를 제공한다.

일 실시형태에 있어서, 본 발명은 항-CTLA4 항체-인돌리논 RTKI 병용을 이용해서 항종양 반응을 산출하거나 증대시키는 조성물 및 방법을 제공하며, 이때, 인돌리논 RTKI는 그렇지 않으면 단독으로 이용할 경우 동일 수준의 항종양 반응을 유도하는 데 차선으로 되는 항체의 양만큼 항종양 반응을 향상시킨다. 임의의 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI가 항종양 반응을 이끌어내기 위해 항체와 연관해서 사용되지 않을 경우, 인돌리논 RTKI 단독 투여는 항종양 반응을 산출하거나 증대시키지 못한다. 또 다른 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI와 항-CTLA4 항체는 양쪽 모두 단독으로 및/또는 병용 투여할 경우 항종양 반응을 이끌어낼 수 있다.

소정 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI는 부가적인 방법에 있어서 항-CTLA4 항체의 효과를 증강시킬 수 있다. 바람직한 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI는 상승적인 방식으로 항-CTLA4 항체의 효과를 증강시킨다. 다른 실시형태에 있어서, 항-CTLA4 항체는 부가적인 방식으로 인돌리논 RTKI의 효과를 증강시킨다. 바람직하게는, 그 효과가 상승적인 방식으로 증가된다. 이와 같이 해서, 어떤 실시형태에 있어서, 본 발명은 인돌리논 RTKI의 투여 단독 및/또는 항-CTLA4 항체 단독보다 더욱 치료상 프로파일을 제공하는 질환 치료 또는 예방 방법도 내포한다.

본 발명은 부가적인 잠재성이나 부가적인 치료효과를 가지면서 원치않는 효과나 역효과를 감소 혹은 피하는 병합 요법도 내포한다. 본 발명은 또한 치료 효능이 첨가제보다 많으면서 원치않는 효과나 역효과를 감소하거나 피할 수 있는 상승작용적인 병합도 내포한다. 소정의 실시형태에 있어서, 본 발명의 방법은 질환 및 장애의 치료 또는 예방을 허용하며, 이때 치료는 항-CTLA4 항체 및/또는 인돌리논 RTKI의 낮은 및/또는 덜 빈번한 투여를 이용해서 증강된 항종양 반응에 의해 개선되어 항-CTLA4 항체 및/또는 인돌리논 RTKI 단독의 투여에 의해 초래되는 원치않는 효과나 역효과의 유발을 저감시키면서, 치료의 효능을 유지 혹은 증강시키고, 바람직하게는 환자 순응도를 증가시켜, 치료를 향상시키고/시키거나 원치않는 효과나 역효과를 감소시킨다.

본 발명의 방법 및 조성물은 치료받지 않은 환자에 유용할 뿐만 아니라 인돌리논 RTKI 단독 투여 또는 항-CTLA4 항체 단독 투여에 대해 부분적으로 혹은 완전히 비반응성인 환자의 치료에도 유용하다. 각종 실시형태에 있어서, 본 발명은 항-CTLA4 항체 및/또는 인돌리논 RTKI의 어느 한쪽 또는 양쪽 모두의 투여를 포함하는 요법에 대해 난치성이거나 또는 비반응성일 수 있거나 혹은 그렇게 나타나는 환자에서의 질환 혹은 장애의 치료에 유용한 방법 및 조성물을 제공하며, 여기서 치료는 증강된 면역 반응에 의해 개선된다. 일 실시형태에 있어서, 상기 방법은 인돌리논 RTKI(바람직하게는, 화합물 1) 및 항-CTLA4 항체(바람직하게는, 항체 4.1.1, 항체 4.13.1, 티실리무맙, 이필리무맙 또는 그의 임의의 조합)를 병용하는 것을 포함한다.

인돌리논 RTKI는 미국 특허 출원 제10/991,244호(US 2005/0182122(공개일: 2005년 8월 18일)에 기재된 것 등(단 이것으로 제한되지 않음)과 같이 당업계에 충분히 공지된 표준 투약 요법에 따라 투여될 수 있다. 간략하게는, 본 발명의 일 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI, 더욱 바람직하게는, 화합물 1은 1일 1회 연속적으로 투여된다. 다른 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI는 약 4주 동안 매일 연속적으로 투여되고, 부가적인 인돌리논 RTKI는 투여되지 않는다. 본 발명의 일 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI는 4주 이상의 기간 동안 연속적으로 투여된다.

본 발명의 일 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI는 투여(또는 "치료") 기간 후 인돌리논 RTKI는 투여되지 않는 "휴지" 기간을 갖는 적어도 1회의 사이클을 포함하는 단속적 투약 요법에 따라 투여된다. 다른 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI는 대략 4주 동안 투여되고 나서, 해당 제제가 투여되지 않는 약 2주간의 휴지 기간을 갖고, 이어서, 적어도 1회의 부가적인 투여/휴지 사이클을 수행한다. 다른 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI는 대략 2주 동안 투여되고 나서, 해당 제제가 투여되지 않는 약 1주간의 휴지 기간 후, 이어서, 적어도 1회의 부가적인 투여/휴지 사이클을 수행한다. 또 다른 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI는 대략 3주 동안 투여 후 상기 제제를 투여하지 않는 약 1주간 휴지기간을 갖고, 이어서 적어도 1회의 부가적인 투여/휴지 사이클을 수행한다. 투여 및 휴지 기간의 사이클은 다음에 적어도 1회 반복될 수 있고, 바람직하게는, 투여/휴지 사이클은 2회 반복된다. 다른 실시형태에 있어서, 투여/휴지 사이클은 투여/휴지 사이클의 소정의 조합 방식으로 투여되도록 조정된다. 예를 들어, 인돌리논 RTKI는 4/2 투약 요법(즉 4주 투여 후 2주 휴지기간을 가짐)에 따라 투여되고, 이어서 3/1의 후속 사이클로 투여된다. 본 발명은 환자에 대해 처방될 수 있는 바와 같은 단속적인 투약 요법의 임의의 조합도 내포한다. 일 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI의 투여는, 연속적인 투약 요법이든 단속적인 투약 요법이든지 간에 질환의 진행까지 계속되며, 예컨대, 치료는 적어도 2년간 계속된다. 화합물 1의 바람직한 투약 요법은 미국 특허 출원 제10/991,244호(출원일: 2004년 11월 17일)(US 2005/0182122(공개일: 2005년 8월 18일)에 대응함)에 상세히 기재되어 있고, 이 문헌의 개시 내용은 전문이 참고로 본 명세서에 반영된다.

일 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI는 1일 1회 약 25 ㎎ 내지 87.5 ㎎ 범위의 양으로 투여된다. 더욱더 바람직하게는, 인돌리논 RTKI(예를 들어, 화합물 1)는 1일 1회 약 37.5 ㎎ 내지 50 ㎎ 투여된다. 본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 화합물 1, 2 및 3을 비롯한 인돌리논 RTKI의 양에 대한 기준은 유리염 당량질량을 나타낸다.

일 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI(예를 들어, 화합물 1, 2 및 3) 및 항체는 인돌리논이 4주 동안 매일 투여된 후 2주간 휴지를 수반하고, 이 사이클을 반복하고, 항체는 적절한 휴지 기간 후에 투여되도록 공동 투여된다. 더욱더 바람직하게는, 인돌리논은 약 50 ㎎ 경구 투여되고, 항체는 약 0.1 ㎎/㎏ 내지 50 ㎎/㎏, 더욱 바람직하게는, 약 0.3 ㎎/㎏ 내지 20 ㎎/㎏, 더욱더 바람직하게는, 약 1 ㎎/㎏ 내지 15 ㎎/㎏, 더더욱 바람직하게는 약 3 ㎎/㎏ 내지 15 ㎎/㎏, 한층더 바람직하게는, 약 6 ㎎/㎏ 내지 15 ㎎/㎏의 범위의 용량으로 정맥내 주입에 의해 투여된다.

다른 실시형태에 있어서, 항체는 적어도 0.3 ㎎/㎏, 바람직하게는, 적어도 1 ㎎/㎏, 더욱 바람직하게는, 적어도 3 ㎎/㎏, 더욱더 바람직하게는, 적어도 5 ㎎/㎏, 바람직하게는, 적어도 6 ㎎/㎏, 더더욱 바람직하게는, 적어도 10 ㎎/㎏, 한층더 바람직하게는, 적어도 15 ㎎/㎏, 더욱더 바람직하게는, 적어도 20 ㎎/㎏의 용량으로 투여된다.

본 발명의 일 실시형태에 있어서, 항체는 28일마다 약 6 ㎎/㎏ 투여된다. 다른 실시형태에 있어서, 항체는 3개월마다 약 6 ㎎/㎏ 투여된다. 본 발명의 일 실시형태에 있어서, 항체는 28일마다 약 10 ㎎/㎏ 투여된다. 또 다른 실시형태에 있어서, 항체는 3개월마다 약 10 ㎎/㎏ 투여된다. 다른 실시형태에 있어서, 항체는 28일마다 약 15 ㎎/㎏ 투여된다. 다른 실시형태에 있어서, 항체는 3개월마다 약 15 ㎎/㎏ 투여된다.

일 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI(예를 들어, 화합물 1, 2 및 3) 및 항체는, 인돌리논이 4주 동안 매일 투여 후 2주 휴지를 갖고, 이 사이클을 반복하며, 항체는 인돌리논의 투여 1일째에 투여되고, 이후, 재차 28일마다 항체가 10 ㎎/㎏으로 투여되는 항체 투여 사이클을 적어도 1회 동안 행하도록 공동 투여된다. 다른 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI는 4/2의 단속성 투약 요법으로 투여되고, 항체는 10 ㎎/㎏으로 3개월마다 투여된다. 또 다른 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI는 4/2의 단속성 투약 요법으로 투여되고, 항체는 15 ㎎/㎏으로 28일마다 투여된다. 본 발명의 일 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI는 4/2의 단속성 투약 요법으로 투여되고, 항체는 15 ㎎/㎏으로 3개월마다 투여된다. 본 발명의 다른 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI(예를 들어, 화합물 1)는 매일 약 37.5 ㎎으로 연속적으로 투여되고, 항체는 약 10 ㎎/㎏으로 3개월마다 투여된다. 본 발명의 다른 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI(예를 들어, 화합물 1)는 매일 약 37.5 ㎎으로 연속적으로 투여되고, 항체는 약 15 ㎎/㎏으로 3개월마다 투여된다. 본 발명의 또 다른 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI(예를 들어, 화합물 1)는 매일 약 37.5 ㎎으로 연속적으로 투여되고, 항체는 약 10 ㎎/㎏ 및/또는 15 ㎎/㎏ 으로 3개월마다 투여된다. 즉, 항체의 용량은 다양하며, 처방된 바와 같이 3개월마다 10 또는 15 ㎎/㎏을 포함할 수 있다.

어떠한 특정 이론에 얽매이고 싶지는 않지만, 인돌리논 RTKI는 인돌리논 RTKI의 투여시 일시적인 림프구 감소증이 일어날 수 있는 점에서 환자에게 검출가능한 면역 억제를 잠재적으로 유발시킬 수 있다. 따라서, 본 발명의 일 실시형태에 있어서, 항체는 인돌리논 RTKI의 최종 용량 투여 후 대략 1일 내지 100일 투여될 수 있다. 즉, 환자의 면역반응성(예를 들어, 림프구 감소증의 수준은 만약 있다면 많은 다른 에세이 중에서 결정될 수 있음)은 인돌리논 RTKI(예를 들어, 화합물 1, 2 및 3)에 의한 시험적 치료가 일단 완료된 후 검토 평가될 수 있다. 면역 반응은, 감소된 경우, 검토 평가될 수 있고, 항-CTLA4 항체는 상기 면역 반응이 일단 인돌리논 RTKI 투여 동안 및/또는 투여 직후의 반응 수준과 비교해서 검출가능하게 증가되면 투여될 수 있다. 하지만, 면역 반응의 수준은 환자에게 인돌리논 RTKI의 투여 전에 그 수준까지 회복할 필요는 없다.

일 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI, 바람직하게는, 화합물 1의 과정은 그를 필요로 하는 환자에게 투여된다. 상기 과정의 완료시, 항-CTLA4의 투여 전에 적절한 휴지 기간을 통과시키는 것이 가능하다. 적절한 휴지 기간은, 면역 반응의 수준이 당업계에 공지된 방법에 의해 검토 평가될 경우 인돌리논 RTKI의 과정 동안 혹은 직후 환자에 의한 면역 반응의 레벨과 비교해서 검출가능하게 증가되는 어느 시간이라도 내포한다. 치료기간 및 휴지기간을 포함하는 예시적인 단속적 투약 요법은 미국 특허 출원 제10/991,244호(US 2005/0182122(공개일: 2005년 8월 18일)에 대응함)에 기재되어 있고, 이 문헌은 모든 목적을 위해 그의 전문이 본 명세서에 반영된다.

소정의 적절한 휴지 기간은 인돌리논 RTKI의 과정 후 면역 반응을 증대시키는 데 사용될 수 있지만, 본 발명은 인돌리논 RTKI의 투여와 항체의 투여 사이에 소정의 휴지 기간을 필요로 하지 않으므로, 항체 및 인돌리논 RTKI는 실질적으로 같은 시기에 공동 투여될 수 있다. 항체의 투여에 대해서 인돌리논 RTKI의 투여 시기는 충분히 본 명세서에 제공된 교시를 기초로 해서 당업자의 전문적 지식의 범위 내이다.

따라서, 당업자는 본 명세서에서 제공된 개시내용을 기초로 해서 치료 분야에서 충분히 공지된 방법에 따라 조정되는 것임을 충분히 이해할 수 있다. 즉, 최대 내성 용량은 용이하게 확립될 수 있고, 환자에게 검출가능한 치료상 혜택을 제공하는 유효량도 결정될 수 있으며, 이것은 환자에게 검출가능한 치료상 혜택을 제공하도록 각 제제를 투여하기 위한 일시적인 요건일 수 있다. 따라서, 임의의 용량 및 투여 요법이 본 명세서에 예시되어 있지만, 이들 예는 본 발명을 실시할 때 환자에게 제공될 수 있는 용량 및 투여 요법을 하등 제한하는 것은 아니다. 또한, 당업자는 본 명세서에 제공된 교시로 일단 보강하면 다른 많은 파라미터 가운데 이들로 제한되는 것은 아니지만 종양 크기 및/또는 대사의 검출가능한 감소, 전립선암에서의 PSA의 감소된 수준 및 재발까지의 연장된 시간 등의 치료상 혜택이 암의 치료 효능을 검토 평가하기 위해 당업계에 공지된 광범위한 방법에 의해 검토 평가될 수 있고, 이들 방법은 본 명세서에 개시된 것뿐만 아니라 장래 개발될 방법도 내포하는 것임을 알 수 있을 것이다.

본 발명은 인돌리논 RTKI, 예컨대, 화합물 1과 항-CTLA4 항체의 공동 투여를 포함하는 병용 투여를 포함하는 보강 요법, 1차 요법 및/또는 2차 요법에 관한 방법을 예시하고 있지만, 본 명세서에 제공된 교시로 보강한 당업자라면 본 발명이 어떠한 특정 요법으로 제한되지 않는 것을 이해할 수 있을 것이다. 오히려, 인돌리논 RTKI 요법과 항-CTLA4 항체 요법을 병용하는 것을 포함하는 방법은 전체의 질환을 다른 상기 병용의 이용 및 치료의 연속성을 내포한다. 더욱 구체적으로는, 본 명세서에 개시된 신규의 방법은, 항체가 인돌리논 RTKI에 의해 매개된 임의의 반응뿐만 아니라 요법에 의해 매개된 임의의 반응을 비롯한 면역 반응을 증강시킬 수 있는 점에서 화학요법제에 난치성으로 된 환자뿐만 아니라 전이 전후에 치료상 혜택을 제공할 수 있다.

따라서, 본 발명은 신보강 요법에 대해서 전용으로 본 발명의 병용물을 이용하는 것으로 제한되지 않고; 대신에, 본 발명은 이들로 제한되지는 않지만 암의 보강 요법, 1차 요법 및/또는 2차 요법을 비롯한 전체 치료 범위를 포함한다. 왜냐하면, 본 명세서에 개시된 데이터는 항-CLTA-4 항체를 포함하는 면역 요법이 치료 동안 어느 시점에서 적어도 하나의 첨가제와 조합해서 또는 단독으로 치료상 혜택을 제공할 수 있는 것을 시시하기 때문이다. 즉, 예컨대 세포독성 요법(예를 들어, 방사선, 화학요법, PKs의 억제 등)과 같은 종양-특이적 항원(여기서, 이러한 항원은 면역 체계에 노출됨)의 방출을 매개하는 방법의 효능은 본 발명의 항-CTLA4 항체의 투여에 의해 증강될 수 있다. 참으로, 본 명세서에 기재된 데이터는 더욱 상기 상승적 효과가 암, 특히, 많은 암 중에서 전립선, 유방, CRC, 악성흑색종, 췌장암, 폐암, GIST, RCC의 치료를 위해 항체의 투여와 RTKI 요법을 병용함으로써 매개되는 것을 시사한다. 따라서, 본 발명은 암의 치료를 위한 중요한 신규의 치료제를 제공함으로써, 환자의 면역체계가 증강되어 항암효과를 제공한다.

III. 부가적 병용 요법

항-CTLA4 항체를 환자에게 투여하는 면역증강효과 및 인돌리논 RTKI(바람직하게는, 화합물 1)와 병용해서 이러한 항체를 공동 투여하는 조합된 부가적인 혹은 상승적인 효과를 비롯한 본 명세서에서 제공된 개시내용을 기초로 해서, 당업자라면 본 발명이 적어도 하나의 다른 치료제 요법과 병용해서 환자에게 항체-인돌리논 RTKI를 투여함으로써 치료상 혜택을 제공하는 수많은 병용요법을 내포하는 것임을 이해할 수 있을 것이다. 이러한 많은 병용은 일단 본 명세서에 제공된 교시로 보강한 당업자에게 용이하게 명백하게 될 것이지만, 이하 몇몇 병용에 대해 설명한다. 그러나, 본 발명은 단지 예시의 목적을 위해서 여기에 기재된 이들 병용으로 하등 제한되는 것은 아니다.

항체-인돌리논과 부가적 치료제와의 공동 투여(병용 요법)는 항-CTLA4 항체, 인돌리논 및 1종 이상의 부가적 치료제의 모두의 공동 투여를 내포하고, 또한 2종 이상의 별개의 약학 조성물(한 가지는 항-CTLA4 항체를 포함하고, 다른 것(들)은 인돌리논을 포함하고, 또 다른 것(들)은 적어도 부가적 치료제를 포함함)을 투여하는 것도 내포한다. 또한, 공동 투여 혹은 병용(연합) 요법은 일반적으로 항체, 인돌리논 및 부가적 치료제가 서로 동시에 투여되는 것을 의미하지만, 이것은 개별적인 치료 성분의 동시, 순차 또는 별도의 투약도 내포하며, 부가적으로, 항체가 정맥내 투여되고, 항암제가 경구적으로(예를 들어, 인돌리논 RTKI 등) 또는 피하 혹은 근육내 주사 방식으로 투여될 경우, 이 병용은 바람직하게는 2가지, 3가지 또는 그 이상의 개별의 약학 조성물로서 투여되는 것임을 이해할 수 있다.

포유동물에 부가적 화학요법이 시행된 경우, 당업계에 충분히 공지된 화학요법제가 항-CTLA4와 병용될 수 있다. 부가적으로, 이하에 일부 설명되어 있는 많은 치료제 중, 성장 인자 억제제, 생물학적 반응 조절제, 알킬화제, 중격 항생제, 빈카 알칼로이드, 면역조절제, 탁세인, SERM(selective estrogen receptor modulator), 예컨대, 이것으로 제한되지는 않지만, 라소폭시펜, 혈관 신생 억제제가 이용될 수 있다.

혈관 신생 억제제

항-CTLA4 항체와 병용해서 혈관 신생 억제제를 이용하는 것은 본 명세서의 어디에선가 이미 설명되어 있다. 게다가, 혈관 신생 억제제로는 VEGF에 대한 인간화 항체인 베바시주맙(Bevacizumab)(AVASTIN; 제네테크사(Genentech) 제품)을 들 수 있지만, 이것으로 제한되는 것은 아니다. 이것은 5FU와 병용해서 사용될 수 있고, 결장 혹은 직장의 전이 암종 환자의 1차 치료로서 처방된다. 혈관형성인자 또는 그들의 수용체를 직접적으로 표적으로 하는 제제는 자가분비 수용체 신호화를 중단시킴으로써 수용체-성분 혈액암에서 커다란 활성이 예상된다. 베바시주맙은 순환성 VEGF의 지속적 중화를 가져와, 골수형성이상증후군(MDS: myelodysplastic syndrome), 림프종, 급성 골수성 백혈병(AML) 및 고형 종양의 치료에 유용할 수 있다. 인돌리논에 부가해서, 혈관형성 수용체 신호용의 기타 RTKI 소분자 억제제도 본 발명에 내포된다. 혈액암에서 임상 시험에 들어가기 위한 제1 수용체 길항제는 SU5416(수겐사(Sugen) 제품)이고, 이것은 VEGFR-1 수용체, VEGFR-2 수용체 및 c-키트의 리간드-유래 자가 인산화를 저해한다. SU5416은 백혈병 세포주에서의 VEGF-유래 클론원성 반응을 억제하고, AML 환자로부터 골수모세포의 세포자멸사를 촉진한다. PTK787/ZK222584(노바티스사 제품) 및 AG-13736(아고우론사/화이자사 제품)을 비롯한 기타 RTKI는 AML 및 기타 수용체-성분 혈액암을 치료하기 위해 검토 평가되고 있는 중이다. 본 발명은 또한 항-CTLA4 항체 및 인돌리논 RTKI, 예컨대, 화합물 1, 화합물 2 및 화합물 3, 그리고 적어도 하나의 부가적 혈관 신생 억제제, 예컨대, AG-13736, AG-26,798 등뿐만 아니라, 당업계에 충분히 공지되거나 혹은 장래 개발될 기타 혈관 신생 억제제의 병용물을 이용한 암, 예컨대 콩팥 암종, 위장관 기질성 종양 등의 치료를 포함한다.

따라서, MMP-2(matrix-metalloproteinase 2) 억제제, MMP-9(matrix-metalloproteinase 9) 억제제 및 COX-II(cyclooxygenase II) 억제제 등의 항-혈관 신생제는 본 발명의 항체-인돌리논 RTKI 병용과 관련하여 사용될 수 있다. 유용한 COX-II 억제제의 예로는 CELEBREX™(셀레코시브), 발데코시브, 로페코시브, 파레코시브, 데라코시브, SD-8381, ABT-963, 에토리코시브, 루미라코시브, BMS-347070, NS-398, RS 57067, 멜록시캄을 들 수 있다. 유용한 기질 금속단백분해효소 억제제의 예는 국제 특허 공보 WO 96/33172; WO 96/27583; WO 98/07697, WO 98/03516, WO 98/34918, WO 98/34915, WO 98/33768, WO 98/30566, WO 90/05719, WO 99/52910, WO 99/52889, WO 99/29667, 유럽 특허출원 제780386호(공개일: 1997년 6월 25일) 제97304971.1호(출원일: 1997년 7월 8일), 제99308617.2호(출원일: 1999년 10월 29일), 제606046호(공개일; 1994년 7월 13일), 제931788호(공개일: 199년 7월 28일, 제99302232.1호(출원일: 1999년 3월 25일), 국제출원 제PCT/IB98/01113호(출원일: 1998년 7월 21일), 영국 특허출원 제9912961.1호(출원일: 1999년 6월 3일), 미국 가특허 출원 제60/148,464호(출원일: 1999년 8월 12일), 및 미국특허 공보 제 5,863,949호 및 제5,861,510호에 기재되어 있다.

바람직한 MMP-2 및 MMP-9 억제제는 MMP-1을 억제하는 활성이 적거나 없는 것이다. 더욱 바람직한 것은 기타 기질-금속단백분해효소(예컨대, MMP-1, MMP-3, MMP-4, MMP-5, MMP-6, MMP-7, MMP-8, MMP-10, MMP-11, MMP-12 및 MMP-13)에 대해서 MMP-2 및/또는 MMP-9를 선택적으로 억제하는 것이다.

신호 전달 억제제

본 명세서에 기재된 치료는 인돌리논 RTKI(예를 들어, 화합물 1) 이외의 신호 전달 억제제, 예를 들어, EGFR(epidermal growth factor receptor) 반응을 억제할 수 있는 제제, 예컨대 EGFR 항체, EGF 항체, 및 EGFR 억제제인 분자; VEGF(vascular endothelial growth factor) 억제제, 예를 들어 VEGF 수용체 및 VEGF를 억제할 수 있는 분자; 및 erbB2 수용체 억제제, 예를 들어 erbB2 수용체에 결합하는 유기 분자 혹은 항체, 예컨대, HERCEPTIN (미국 캘리포니아주의 샌프란시스코시에 소재한 제네테크사 제품)와 함께 사용될 수도 있다.

EGFR 억제제는 예를 들어 국제 특허 공개 공보 WO 95/19970, WO 98/14451, WO 98/02434, 및 미국특허 공보 제5,747,498호에 기재되어 있고, 이러한 물질은 본 명세서에 기재된 바와 같이 본 발명에 사용될 수 있다. EGFR-억제제로는 단클론성 항체 C225(ERBITUX), 항-EGFR 22Mab(미국 뉴욕주의 뉴욕시에 소재한 임클론 시스템사(ImClone Systems Inc.) 제품) 및 ABX-EGF(panitumumab, 미국 캘리포니아주의 프리몬트시에 소재한 압게닉스사 제품), 화합물 ZD-1839(AstraZeneca), BIBX-1382(베링거-인겔하임사 제품), MDX-447(미국 뉴저지주의 아난데일시에 소재한 메다렉스사 제품), 및 OLX-103(미국 뉴저지주의 화이트하우스 스테이션시에 소재한 머크사(Merck & Co.) 제품), VRCTC-310(벤테크 리서치사 제품) 및 EGF 융합 톡신(미국 매사추세츠주의 홉킨톤시에 소재한 세라겐사(Seragen Inc.) 제품) 등을 들 수 있지만, 이들로 제한되는 것은 아니다. 이들 및 기타 EGFR-억제제는 본 발명에 이용될 수 있다.

EGFR(epidermal growth factor receptor) TK(tyrosine kinase)의 억제를 목적으로 하는 화합물은 본 발명의 방법에 유용한 항신생물제의 비교적 새로운 부류를 나타낸다. 많은 인간 암은 세포 표면상에 EGFR 족의 일원을 발현시킨다. 리간드가 EGFR와 결합할 경우, 세포 분할을 증가시켜, 혈관 신생, 전이 확산 및 세포자멸사의 억제를 비롯한 암의 발병 및 진행의 기타 양상에 영향을 미치는 세포 반응의 연쇄반응을 중단시킨다. EGFR-TK 억제제는 EGFR족의 일원(EGFR(HER1 또는 ErbB-1로도 알려짐), HER2/neu(ErbB-2로도 알려짐), HER3(ErbB-3로도 알려짐) 또는 HER4(ErbB-4로도 알려짐)) 중 하나를 선택적으로 표적으로 할 수 있거나, 또는 이들의 2종 이상을 표적으로 할 수 있다. 본 발명에 사용하는 데 적합한 EGFR-TK 억제제로는 게피티닙(이레사(IRESSA)), 에를로티닙(타르세바(TARCEVA)), Cl-1033(화이자사 제품), GW2016(글락소스미스클라인사 제품), EKB-569(웨이쓰사(Wyeth) 제품), PKI-166(노바티스사 제품), CP-724,714(화이자사 제품) 및 BIBX-1382(베링거-인겔하임사 제품)를 포함한다. 추가의 EGFR-TK 억제제는 미국 특허 출원 제09/883,752호(출원일: 2001년 6월 18일)에 기재되어 있다. VEGF 억제제는, 인돌리논 RTKI, 예컨대 SU-5416 및 SU-6668(미국 캘리포니아주 샌프란시스코시에 소재한 수겐사 제품으로도 알려짐) 이외에, 항체 및 인돌리논 RTKI 병용물과 조합해서 이용될 수 있다.

VEGF 억제제는 예를 들어 국제 특허 출원 제PCT/IB99/00797호(출원일: 1999년 5월 3일), 국제 특허 공개 공보 WO 99/24440; WO 95/21613; WO 99/61422; WO 98/50356; WO 99/10349; WO 97/32856; WO 97/22596; WO 98/54093; WO 98/02438; WO 99/16755; WO 98/02437; 미국특허 공보 제5,834,504호; 제5,883,113호; 제5,886,020호; 및 제5,792,783호에 기재되어 있다. 본 발명에 유용한 몇몇 특정 VEGF 억제제의 기타 예로는 IM862(미국 워싱톤주의 커크랜드시에 소재한 사이트란사(Cytran Inc.) 제품); 임클론사(Imclone)의 항체인 IMC-1C11, 미국 캘리포니아주의 샌프란시스코시에 소재한 제네테크사의 항-VEGF 단클론성 항체; 및 리보자임사(Ribozyme)(미국 콜로라도주의 볼더시에 소재) 및 키론사(Chiron)(미국 캘리포니아주의 에머리빌시에 소재)로부터의 합성 리보자임인 앤지오자임(angiozyme)이 있다.

ErbB2 수용체 억제제, 예컨대 GW-282974(글락소 웰컴 피엘씨 사(Glaxo Wellcome plc) 제품), 및 단클론성 항체 AR-209(미국 텍사스주의 우드랜즈시에 소재한 아로넥스 파마세유티컬사(Aronex Pharmaceuticals Inc.) 제품) 및 2B-1(키론사 제품)은 또한 항체-인돌리논 RTKI 병용물과 조합될 수 있고, 예를 들어 국제 특허 공개 공보 WO 98/02434; WO 99/35146; WO 99/35132; WO 98/02437; WO 97/13760; WO 95/19970; 미국특허 공보 제 5,587,458호 및 제5,877,305호에 기재된 것을 들 수 있다. 본 발명에 유용한 ErbB2 수용체 억제제로는 EP1029853(공개일: 2000년 8월 23일) 및 국제 특허 공개 공보 WO 00/44728(공개일: 2000년 8월 3일)에 기재된 것을 들 수 있다. 상기 PCT 출원, 미국 특허 출원 및 미국 가출원에 기재된 erbB2 수용체 억제제 화합물 및 물질뿐만 아니라, erbB2 수용체를 억제시키는 기타 화합물 및 물질은 본 발명에 따라 항체와 함께 사용될 수 있다.

본 발명의 치료는 또한 비정상 세포 성장 또는 암의 치료에 유용한 기타 제제, 예를 들어 항종양 면역 반응을 증강시킬 수 있는 기타 제제, 예컨대 부가적인 상이한 CTLA4 항체, 및 CTLA4를 차단할 수 있는 기타 제제; 및 항-증식성 제제, 예컨대 파네실 단백질 전이효소 억제제(예를 들어, BMS 214662), 및 av β3 억제제, 예컨대 av β3 항체 VITAXIN, αvβ5 억제제, p53 억제제 등과 함께 이용될 수도 있다.

본 발명의 항체가 다른 면역조절제와 병용해서 투여될 경우, 해당 면역조절제는 예를 들어 수상 세포 활성제, 예건대, CD40 리간드 및 항-CD40 작용제 항체뿐만 아니라, 항원 제시 증강제, T-세포 친화성 증강제, 종양-관련 면역억제 인자의 억제제, 예컨대 TGF-β(transforming growth factor beta) 및 IL-10으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 바람직한 항-CD40 작용제 항체는 국제 특허 출원 제PCT/US02/36107호(출원일: 2002년 11월 8일)(WO 03/040170(공개일: 2003년 5월 15일)에 대응함) 및 미국 특허 출원 제10/292,088호(출원일: 2002년 11월 8일)(미국 특허 공개 US2003/0211100(공개일: 2003년 11월 13일)에 대응)에 기재된 항체, 예컨대 항체 3.1.1, 3.1.1.H-A78T, 3.1.1H-A78T-V88A-V97A, 3.1.1L-L4M-L83V, 3.1.1H-A78T-V88A-V97A/3.1.1L-L4M-L83V, 7.1.2, 10.8.3, 15.1.1, 21.2.1, 21.4.1, 22.1.1, 22.1.1H-C109A, 23.5.1, 23.25.1, 23.28.1, 23.28.1H-D16E, 23.29.1 및 24.2.1의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가진 항체를 내포하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다.

IGF -1R 억제제

본 발명의 치료 요법은 IGF-1R(insulin-like growth factor 1 receptor)에 결합함으로써 종양 성장을 억제하는 항체 혹은 기타 리간드와 병용될 수 있다. 본 발명에 이용될 수 있는 구체적인 항-IGF-1R 항체로는 국제특허출원 제PCT/US01/51113호(출원일: 2001년 12월 20일)(WO 02/053596(공개일: 2002년 7월 11일)에 대응) 및 국제특허출원 제PCT/IB2004/002555호(출원일: 2004년 8월 3일)(WO 2005/016967(공개일: 2005년 2월 24일)에 대응)에 기재된 것을 포함한다. 바람직한 항-IGFR-1R 항체는 예를 들어 항체 2.12.1, 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1, 4.9.2 및 4.17.3의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가진 항체를 포함한다.

IGF-1R을 경유해서 신호를 억제하는 리간드는 소분자 및 기타 리간드, 예를 들어 특히, IGF-1 신호를 억제하는 성장호르몬 유사체인 소마버트(somavert)(PEGVISOMANT)를 포함한다. PEGVISOMANT는 폴리에틸렌 글라이콜과 컨쥬게이트되고, 특히 말단비대증을 치료하는 데 이용될 수 있다. PEGVISOMANT는 상기 병용물이 종양 성장을 억제할 수 있는 점에서 암을 치료하기 위해 항-CTLA4 항체와 공동투여될 수 있다. 따라서, PEGVISOMANT는, 항-IGF-1R 항체와 마찬가지로, 본 명세서에 개시된 바와 같은 암을 치료하는 데 이용될 수 있다.

본 발명은 RTKI 요법(바람직하게는, 화합물 1)을 면역 요법(항-CTLA4)과 병용하고, 나아가서는 첨가제 및 요법들과 추가로 병용하는 것을 포함하는 방법을 내포한다. 즉, 당업자라면, 본 명세서에서 제공된 개시내용을 기초로 인돌리논 RTKI 요법과 항-CTLA4 항체 병용 요법이 환자를 치료하기 위해 다양한 치료법인 외과적 수술, 방사선 치료 및 기타 치료제와 더욱 병용될 수 있는 것을 알 수 있을 것이다. 치료제는 많고, 예를 들어 특히 미국 특허 출원 공개 공보 제2004/0005318호, 제2003/0086930호, 제2002/0086014호, 및 국제공개공보 WO 03/086459에 기재되어 있으며, 이들 문헌은 모두 참고로 본 명세서에 반영된다. 이러한 치료제로는 이들로 제한되지는 않지만 토포아이소머라제 I 억제제; 기타 항체(리툭시맙, 트라스투주맙, 항-IGF-1R 등); 화학요법제, 예컨대, 이들로 제한되지 않지만, 이마티닙(GLEEVEC, GLIVEC 또는 STI571; 노바티스사 제품), 소라페닙(BAY 43-9006; 바이에르 파마세유티칼사(Bayer Pharmaceuticals Corp.)/오닉스 파마세유티칼사(Onyx Pharmaceuticals)), SERM(selective estrogen receptor modulator), 탁세인, 빈카 알칼로이드, 테모졸로마이드, 혈관 신생 억제제, EGFR 억제제, VEGF 억제제, ErbB2 수용체 억제제, 항-증식성 제제(예를 들어, 파네실 단백질 전이효소 억제제 및 av β3 억제제, σvβ5 억제제, p53 억제제 등), 면역조절제, 사이토카인, 종양 백신; 종양-특이적 항원; 수상 및 줄기 세포 요법; 알킬화제, 엽산 길항제; 피리미딘 길항제; 안트라사이클린 항생제; 백금 화합물; 공동자극 분자(costimulatory molecule)(예를 들어, CD4, CD25, PD-1, B7-H3, A-1BB, OX40, ICOS, CD30, HLA-DR, MHCII 및 LFA) 등을 들 수 있다.

방사선 치료

방사선 요법은 인돌리논 RTKI/항-CTLA4 항체 병용 요법과 공동 투여될 수 있다. 방사선 치료는 유방암의 치료를 위해 잘 알려진 방사선 치료 방법에 따라 투여된다. 방사선 치료를 위한 선량 및 요법은 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있고, 질환의 단계 및 당업계에 공지된 기타 인자를 기초로 한다.

고식적 제제(Palliative agent)

본 발명은 또한 항-CTLA4 항체 및 호르몬 요법제 이외에 기타 치료제의 투여를 포함한다. 이러한 치료제로는 진통제, 암 백신, 항혈관제, 항증식제, 항이뇨제 및 지사제를 포함한다. 바람직한 항이뇨제제로는 온단세트론 염산염, 그라니세트론 염산염 및 메토클로프라마이드를 포함한다. 바람직한 지사제로는 다이페녹실레이트 및 아트로핀(LOMOTIL), 로페르아마이드(IMMODIUM) 및 옥트레오타이드(SANDOSTATIN)를 포함한다.

다른 실시형태에 있어서, 본 발명은 지사 효과를 가진 제제를 투여하는 것을 포함하되, 이 제제는 위장관의 만성 염증성 질환 상태에 처방된다. 이러한 제제는 특히 국소 활성을 가진 스테로이드(예를 들어, 부데소나이드[ENTOCORT]), 및 TNF(anti-tumor necrosis factor) 약물(예를 들어, 인프릭시맙[REMICADE], 에터너셉터(etanercept)[ENBREL] 및 아달리무맙[HUMIRA])를 포함한다.

줄기세포 기반 요법

본 명세서에 기재된 항체-인돌리논 RTKI 요법 병용은 암 환자에게 치료상 혜택을 제공하기 위해 줄기 세포 이식과 병용될 수 있다. 줄기 세포 이식은 당업계에 공지된 방법에 따라 수행될 수 있다. 이러한 몇몇 방법은 예를 들어 문헌[Appelbaum in Harrison's Principles of Internal Medicine, Chapter 14, Braunwald et al., Eds., 15^th ed., McGraw-Hill Professional (2001)]에 개시되어 있고, 이 문헌은 참고로 본 명세서에 반영된다. 이와 같이 해서, 본 발명의 방법은 줄기 세포 이식을 받은 포유동물에서 암의 치료에 관한 것이며, 이 방법은 인간 항-CTLA4 항체의 소정량을 인돌리논 RTKI 요법(바람직하게는, 화합물 1)과 병용해서 투여하는 것을 포함하며, 이때, 항체-인돌리논 요법 병용은 줄기 세포 이식과 더욱 병용할 때 암의 치료에 유효하다.

상기 방법이 줄기 세포 이식을 포함할 경우, 항체-인돌리논 요법의 첫 번째 투약량은 포유동물의 면역계가 이식으로부터 회복한 후, 예를 들어 이식 후 1 내지 12개월의 기간 내에 투여될 수 있다. 임의의 실시형태에서, 첫 번째 투약량은 이식 후 1 내지 3개월, 또는 1 내지 4개월의 기간 내에 투여된다. 환자에게는 줄기세포 이식 및 예비 치료(들)를 수행할 수도 있다.

또한, 본 발명은 (i) 포유동물에서 줄기세포 이식을 수행하는 단계 및 (ii) 유효량의 인간 항-CTLA-4 항체를 유효량의 인돌리논 RTKI와 병용해서 투여하는 단계를 포함하는, 포유동물에서의 암의 치료방법에 관한 것이다. 바람직하게는, 포유동물은 인간이다. 줄기세포 이식은 동형이형 또는 자가 줄기세포 이식일 수 있다. 또한, 세포 이식은 동일 환자로부터 및/또는 HLA-일치 공여자로부터의 림프구의 적합화 이식을 내포한다.

또한, 본 발명의 방법은 방사선 요법 및 줄기 세포 이식과 병용될 수 있거나, 또는 본 명세서에 기재되거나, 당업계에 공지되거나 혹은 장래에 개발될 치료의 어느 것과의 조합법과도 병용될 수 있다.

본 명세서의 어디에선가 이미 지적한 바와 같이, 항-CTLA4 항체는 표준 암 치료, 예컨대, 특히 화학요법 처방계획과 병용되는 경우, 화학요법제의 투약량을 줄일 수도 있다(Mokyr, M. et al., Cancer Research 58: 5301-5304 (1998)). 그 이유는, 항-CTLA4 항체와 화학요법, 예컨대, 암의 치료를 위해 본 명세서에 개시된 바와 같이 인돌리논 RTKI를 이용하는 RTKI와의 병용 요법이 대부분의 화학요법 화합물의 세포 독성 작용의 결과인 세포 사멸을 매개할 수 있거나, 그렇지 않으면 특히, 전립선암에 대해서 면역 체계와 안드로겐 억제 간의 상승 작용을 제공하기 때문이다[Grossman, Science 227:257-261 (1985); Olsen and Kovacs, Immunologic Research 23:281-288 (2001); Tanriverdi et al., J. Clin . Endocrinol. 176:293-304 (2003)]. 어떠한 특정 이론에 얽매이고 싶지는 않지만, 종양 세포 사멸은 항원 제시 경로에 있어서 종양-특이적 항원의 레벨의 증가를 초래하기 쉽고, 항-CTLA4 항체는 여기에 증가된 면역 반응을 매개한다. 상승작용적으로 종양-특이적 항원의 세포사멸 방출을 통해 면역 반응의 항-CTLA4 증강을 가져올 수 있는 기타 병용 요법은 방사선, 외과적 수술, 화학요법 및 당업계에 공지된 동시에 본 명세서에 예시된 바와 같은 광범위한 항종양제의 투여이다. 이들 프로토콜 및 본 명세서의 어딘가에 기재된 기타 사항의 각각은 종양 세포 사멸에 의해 숙주 내의 종양-특이적 항원의 공급원을 작성하여, 종양 항원을 숙주 항원 제시 경로에 공급할 수 있게 된다. 따라서, 본 명세서에 개시된 병용 요법은 종양-특이적 항원의 증가된 공급원을 제공함으로써 종양에 대한 증가된 면역 반응을 제공하고, 이어서 환자에게 치료상 혜택을 제공한다.

IV. 투약 요법(Dosage Regimen)

투약 요법은 목적으로 하는 최적의 반응을 제공하도록 조정할 수 있다. 예를 들어, 단일 볼루스(bolus)를 투여할 수 있거나, 수 회분으로 나누어진 용량을 일정 시간에 걸쳐 투여할 수 있거나, 또는 치료적 상황의 위급성에 따라 지시되는 바와 같이 용량을 일정 비율로 감소 또는 증가시킬 수 있다. 투여의 용이성과 투약량의 균일성을 위해 비경구 조성물을 투여 단위 형태로 제형화하는 것이 특히 유리하다. 본 명세서에 사용된 바와 같은 투여 단위 형태는 치료받고자 하는 포유류 대상에 대한 단일 투약량으로서 적합한 물리적으로 별개의 단위를 지칭하는 데, 각각의 단위는 요구되는 약학적 담체와 연합하여 목적으로 하는 치료 효과를 가져다 주는 것으로 계산된 소정량의 활성 화합물을 함유하고 있다. 본 발명의 투여 단위 형태에 관한 명세서는 (a) 항체의 독특한 특징과, 달성하고자 하는 특별한 치료적 또는 예방적 효과, 및 (b) 개개인에게서 민감증을 치료하기 위해 이러한 활성 화합물을 조합하는 분야에 내재된 제한 사항에 직접적으로 좌우되고 이에 영향을 받는다.

본 발명에 따라 투여되는 항체의 치료상 유효량의 비제한적인 범위의 예는 적어도 약 0.1 ㎎/㎏, 적어도 약 0.3 ㎎/㎏, 적어도 약 1 ㎎/㎏, 적어도 약 5 ㎎/㎏, 적어도 약 6 ㎎/㎏, 적어도 약 10 ㎎/㎏, 적어도 약 15 ㎎/㎏ 또는 적어도 약 20 ㎎/㎏이다. 예를 들어, 항체의 치료상 유효량의 범위는 약 0.1 내지 30 ㎎/㎏, 또는 예를 들어 약 0.3 내지 25 ㎎/㎏, 또는 예를 들어 약 1 내지 20 ㎎/㎏, 또는 예를 들어 약 3 내지 20 ㎎/㎏, 또는 예를 들어 약 5 내지 20 ㎎/㎏, 또는 예를 들어 약 10-20 ㎎/㎏, 또는 약 3-15 ㎎/㎏, 또는 예를 들어 약 5-15 ㎎/㎏, 또는 예를 들어 약 10-15 ㎎/㎏일 수 있다.

또, 예시적인 용량 상승 프로토콜(dose escalation protocol)을 이용해서, MTD(maximum tolerated dose)를 결정하여, 필요한 경우 항체-인돌리논 RTKI 병용 요법 등의 투여와 관련된 DLT(dose limiting toxicity)를 평가할 수 있고, 이것은 약 0.1 ㎎/㎏, 0.3 ㎎/㎏, 1 ㎎/㎏, 3 ㎎/㎏, 6 ㎎/㎏, 7 ㎎/㎏, 10 ㎎/㎏, 12 ㎎/㎏, 15 ㎎/㎏, 또는 15 ㎎/㎏ 이상, 또는 이들의 임의의 조합으로 증가하는 투약량을 포함하지만, 이들로 제한되지는 않으며, 더욱 바람직하게는, 0.1 ㎎/㎏, 0.3 ㎎/㎏, 1 ㎎/㎏, 3 ㎎/㎏, 6 ㎎/㎏, 10 ㎎/㎏, 15 ㎎/㎏ 또는 20 ㎎/㎏의 연속 용량을 투여하고, 기타 파라미터 중에서, 환자의 독성, 필요한 경우, 치료 효능도 평가한다. 이러한 투약 요법의 독성 및 효능을 결정하는 이러한 연구는 당업자에게 공지되어 있다.

단, 투약량 값은 질병 상태의 종류 및 중증도에 따라 다양할 수 있고, 단일 용량 혹은 다회 용량을 포함할 수 있다. 또한 특정 대상에 대해서는 특정의 투약 요법이 개인의 요구 및 조성물의 투여를 관리하거나 감독하는 사람의 전문가적인 판단에 따라 시간 경과에 걸쳐 조절될 필요가 있고, 본 명세서에 기재된 투약량 범위는 단지 일례에 불과하며, 청구범위에 청구된 조성물의 범위 혹은 실시를 제한하고자 의도된 것은 아니다. 항체의 투여에 대한 적절한 용량 및 요법을 결정하는 것은 당업계에 공지되어 있고, 본 명세서에 개시된 교시를 제공받은 당업자에 의해 달성되는 것을 이해할 수 있을 것이다.

일 실시형태에 있어서, 항체는 적절한 완충시스템 중, 약 5 내지 20 ㎎/㎖의 항체를 함유하는 멸균 수용액으로서 정맥내 제형으로 투여된다.

일 실시형태에 있어서, 용량의 일부는 정맥내 볼루스로 투여되고, 나머지는 항체 제형의 주입에 의해 투여된다. 예를 들어, 항체의 정맥내 주사는 볼루스로서 부여될 수 있고, 소정의 항체 용량의 나머지는 정맥내 주사에 의해 투여될 수 있다. 항체의 소정 용량은 예를 들어 약 1시간 30분 내지 약 5시간에 걸쳐 투여될 수 있다.

본 발명은 항-CTLA4 항체와 인돌리논 RTKI의 병용 투여에 관한 것이다. 당업자는 상기 병용물이 동시에 투여될 수 있거나, 항체 및 각종 제제가 상이한 시각에 투여될 수 있는 것을 알 수 있을 것이다. 예를 들어, 일 실시형태에 있어서, 항체는 단일 주사제로서 투여되고, 치료제(예를 들어, 인돌리논 RTKI)는 항체의 투여와 동시에 약 28일 동안 1일 1회 투여된다. 더욱더 바람직하게는, 인돌리논 RTKI, 바람직하게는, 화합물 1은 제 1사이클의 28일 동안 매일 경구 투여되고 그 후 2주 동안 투여된다. 더욱더 바람직하게는, 항체는 인돌리논 RTKI의 소정의 실제적인 면역억제효과(들)이 진정된 후 투여된다. 인돌리논 RTKI의 면역억제효과뿐만 아니라 그 효과의 소실을 평가하는 방법은 당업자에게 공지되어 있다. 항체 및 인돌리논 RTKI의 부가적 사이클은 당업계에 인정된 방법으로 결정된 바와 같이 제공될 수 있다. 그러나, 본 발명은 이들 또는, 임의의 특정 용량 혹은 항-CTLA4 항체와의 병용시 인돌리논 RTKI를 투여하는 투여 요법으로 제한되지 않는다. 오히려, 항체 및 인돌리논 RTKI의 최적 용량, 투여경로 및 요법은 충분히 공지된 방법을 이용해서 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.

예를 들어, 항체의 단일 용량 또는 다회 용량이 투여될 수 있다. 대안적으로는, 적어도 1회 용량, 또는 적어도 3회, 6회 혹은 12회 용량이 투여될 수 있다. 이들 용량은 예를 들어 2주마다, 1개월마다, 20일마다, 25일마다, 28일마다, 30일마다, 40일마다, 50일마다, 2개월마다, 70일마다, 80일마다, 3개월마다, 6개월마다 또는 해마다 투여될 수 있다. 또한, 인돌리논 RTKI는 매일마다 1일당 수회 혹은 1회, 주마다, 1주 걸러, 3주마다, 4주마다, 1개월마다, 3개월마다, 6개월마다, 1년에 1회, 혹은 당해 전문의에 의해 결정된 바와 같이 환자에게 치료상 이득을 제공하는 기타 임의의 주기로 투여될 수 있다.

일 실시형태에 있어서, 항-CTLA4 항체를 포함하는 단일 볼루스 주사제는 환자에게 대략 28일마다 약 1 ㎎/㎏ 내지 20 ㎎/㎏ 범위의 용량으로 정맥내 투여된다. 인돌리논 RTKI의 용량은 그 첫째 날에, 그리고 그 후 약 28일 동안 거의 매일 투여된다. 바람직하게는, 항체 및 인돌리논 RTKI는 각 용량 사이클의 동일한 출발일에 공동 투여된다. 또한, 본 발명은 항체의 투여 동안 어느 시점에서 인돌리논 RTKI을 투여하거나, 그 역으로 하는 것을 포함하며, 본 발명은 어떤 식으로든지 항체 및 인돌리논 RTKI의 상대적인 투여에 대해서 제한되지 않는다. 따라서, 인돌리논 RTKI는 항체의 투여 전, 투여 동안 및/또는 투여 후 투여될 수 있다.

항체-인돌리논 RTKI 병용물은 종양 세포를 민감하게 하기 위해 혹은 그렇지 않으면 환자에게 치료상 혜택을 부여하기 위해 외과적 수술, 방사선 요법, 또는 기타 치료 전에 신보강 요법으로서 투여될 수 있다. 부가적으로, 상기 병용물은 국소 치료(예를 들어, 외과적 수술, 방사선, 혹은 이들 양쪽 모두) 후에 신보강 요법으로서 공동 투여될 수 있다.

또한, 상기 병용물은 이것으로 제한되지 않지만 일단 1차 요법이 실패한 바와 같은 2차 요법으로서 투여될 수 있다. 대안적으로, 상기 병용물은 1차 요법과 동시에, 및/또는 초기 치료 후 투여될 수 있는 1차 요법 동안의 어느 시점에서 투여될 수 있다.

그 이유는 항-CLTA-4 항체 및 인돌리논 RTKI의 병용은 1차 요법이 일단 실패하였거나, 또는 전신 보강 요법이 일단 실패한 경우 등에 치료상 혜택을 제공할 수 있기 때문이다. 따라서, 본 발명은 본 명세서에 개시된 내용을 기초로 해서 당업자가 이해할 수 있는 바와 같이 호르몬제, 방사선 치료, 및 임의의 부가적 치료제(특히 화학요법, 신호억제 요법) 등을 비롯한(단, 이들로 제한되지 않음) 부가적 요법과 함께 또는 이들 부가적 요법 없이, 항체와 인돌리논 RTKI를 병용 투여하는 것을 내포한다.

본 발명은 또한, 암을 치료하는데 유효한 양(예를 들어, 예를 들어, 적어도 1 ㎎/㎏, 적어도 3 ㎎/㎏, 적어도 5 ㎎/㎏, 적어도 10 ㎎/㎏, 적어도 15 ㎎/㎏, 또는 적어도 20 ㎎/㎏)의 인간 항-CTLA4 항체와, 치료상 유효량의 인돌리논 RTKI를 포함하는 제품(예를 들어, 정맥내 투여용으로 적합화한 투여 형태)에 관한 것이다. 임의의 실시형태에 있어서, 이러한 제품은 인간 항-CTLA4 항체, 인돌리논 RTKI, 및 암을 치료하기 위해 사용하는 것에 관한 지시 사항 및/또는 라벨을 포함하는 용기 또는 용기들을 포함한다.

V. 약학 조성물

본 발명은 활성 성분으로서 본 발명의 인간 항-CTLA4 항체를 인돌리논 RTKI, 예컨대, 특히 화합물 1, 화합물 2 및 화합물 3과 병용해서 포함하는 약학 조성물의 제조 및 용도를 포괄한다. 이러한 약학 조성물은 대상에게 투여하기 적합한 형태로, 각 활성 성분 단독으로 이루어지거나, 한 가지 이상의 활성 성분의 조합물(예를 들어, 유효 용량의 항-CTLA4, 유효 용량의 인돌리논 RTKI)로서 이루어질 수 있거나, 또는 상기 약학 조성물은 활성 성분과, 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체, 하나 이상의 추가의 (활성 및/또는 불활성) 성분, 또는 이들의 몇몇 조합물을 포함할 수 있다.

일 실시형태에서는, 항체를 수성 용제 형태로 비경구(예를 들어, 정맥내) 투여하는 반면, 인돌리논 RTKI(예를 들어, 화합물 1, 화합물 2, 화합물 3 등)는 환제/캡슐 형태로 경구 투여한다. 인돌리논 RTKI의 바람직한 제형 및 투약 형태는 US 2004/0229930(WO 2004/024127)에 기재되어 있고, 이 문헌은 그의 전문이 참고로 본 명세서에 반영된다. 그러나, 당업자는 본 명세서에 제공된 기재 내용을 근거로 하여, 본 발명이 이들 제형, 또는 기타 어떠한 제형, 용량, 투여 경로 등으로 제한되지 않는다는 것을 이해할 것이다. 오히려, 본 발명은 항체를 인돌리논 RTKI와 병용해서 투여하는 어떠한 투여 방법이나 제형을 내포하며, 이것에는 특히 각 제제를 상이한 투여 경로를 통하여 상이한 제형으로 별개로 투여하는 것과, 항-CTLA4 항체를 정맥내 투여하면서 인돌리논 RTKI를 경구적으로 공동 투여하는 것 등이 포함되지만, 그 방법은 이들로 제한되지 않는다. 따라서, 이하에는 임의의 항-CTLA4 항체를 인돌리논 RTKI와 병용해서 투여하는 것을 포함하는 본 발명의 방법을 실시하기 위한 각종 제형이 기재되지만, 본 발명은 이들 제형으로 제한되지 않고, 본 발명의 방법에 사용하기 위해 본 명세서에 제공된 교시로 보강된다면 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있는 바와 같은 모든 제형을 포함한다.

본 발명에 이용된 항체는 대상에게 투여하기 적합한 약학 조성물 내로 혼입될 수 있다. 전형적으로, 본 발명의 약학 조성물은 이러한 항체와 약학적으로 허용가능한 담체를 포함한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같은 "약학적으로 허용가능한 담체"로는 생리학적으로 상용성인 모든 용매, 분산 매질, 피복재, 항균 및 항진균제, 등장성 및 흡수 지연제 등을 포함한다. 약학적으로 허용가능한 담체의 예로는 물, 식염수, 인산염 완충 식염수, 덱스트로스, 트레할로스, 글리세롤, 에탄올 등 중의 하나 이상뿐만 아니라 이들의 조합물을 들 수 있다. 많은 경우에 있어서, 등장제, 예를 들어 당, 다가 알코올(예컨대, 만니톨, 솔비톨), 또는 염화나트륨이 상기 조성물에 포함되는 것이 바람직할 것이다. 항체 또는 항체 부분의 저장 수명 또는 유효성을 증강시키는 약학적으로 허용가능한 물질로는, 예를 들어 습윤제 또는 미량의 보조 물질, 예컨대, 습윤제 또는 유화제, 방부제 또는 완충제를 들 수 있다.

항체는 각종 형태로 존재할 수 있다. 이들은 예를 들어, 액상, 반고형 및 고형 투여 형태, 예를 들어 액상 용제(예컨대, 주사용 용제 및 주입성 용제), 분산제 또는 현탁제, 정제, 환제, 산제, 리포솜 및 좌제를 포함한다. 바람직한 형태는 의도한 투여 방식과 치료적 적용에 좌우된다. 전형적인 바람직한 조성물은 주사용 용제 또는 주입성 용제 형태, 예를 들어 인간을 기타 항체로 수동면역시키는데 이용된 것과 유사한 조성물이다. 바람직한 투여 방식은 비경구 방식(예컨대, 정맥내, 피하, 복강내, 근육내)이다. 바람직한 실시형태에서는, 항체를 정맥내 주입 또는 주사함으로써 투여한다. 또 다른 바람직한 실시형태에서는, 항체를 근육내 또는 피하 주사에 의해 투여한다.

치료적 조성물은 전형적으로, 제조 및 저장 조건 하에서 멸균성이면서도 안정적이어야만 한다. 이 조성물은 용제, 마이크로에멀션, 분산제, 리포솜, 또는 높은 약물 농도에 적합한 기타 처방된 구조물로서 제형화될 수 있다. 멸균성 주사용 용제는 요구되는 양의 항체를 필요에 따라 상기 열거된 성분들 중의 하나 또는 조합물과 함께 적당한 용매에 혼입한 다음, 여과멸균시킴으로써 제조될 수 있다. 일반적으로, 분산제는 기본 분산 매질과 상기 열거된 것으로부터 요구되는 기타 성분을 함유하는 멸균성 비히클 내로 활성 화합물을 혼입함으로써 제조된다. 멸균성 주사용 용제를 제조하기 위한 멸균성 산제의 경우에, 바람직한 제조 방법은, 활성 성분 + 이전의 그의 멸균성 여과 용액으로부터의 부가의 목적 성분의 분말을 산출시키는 진공 건조 및 동결 건조법이다. 적당한 용액 유동성은, 예를 들어 레시틴과 같은 피복제를 사용하고, 분산제의 경우에는 요구되는 입자 크기를 유지하며, 계면활성제를 사용함으로써 유지할 수 있다. 주사용 조성물의 흡수 연장은 이러한 조성물 내에 흡수를 지연시키는 작용제, 예를 들어 모노스테아레이트 염 및 젤라틴을 포함시킴으로써 이루어질 수 있다.

항체는 당업계에 공지된 각종 방법, 예를 들어 경구, 비경구, 점막, 흡입, 국소, 볼내, 비강내 및 직장 투여에 의해 투여될 수 있지만, 그 방법은 이들로 제한되는 것은 아니다. 많은 치료적 적용을 위해서, 바람직한 투여 경로/방식은 피하, 근육내, 정맥내 또는 주입이다. 필요에 따라, 바늘이 아닌(non-needle) 주사를 이용할 수도 있다. 당업자가 인지하는 바와 같이, 투여 경로 및/또는 방식은 목적으로 하는 결과에 따라서 다양할 것이다.

투약 요법은 목적으로 하는 최적의 반응을 제공하도록 조정할 수 있다. 예를 들어, 단일 볼루스를 투여할 수 있거나, 수 회분으로 나누어진 용량을 일정 시간에 걸쳐 투여할 수 있거나, 또는 치료적 상황의 위급성에 따라 지시되는 바와 같이 용량을 일정 비율로 감소 또는 증가시킬 수 있다. 투여의 용이성과 투약량의 균일성을 위해 비경구 조성물을 투여 단위 형태로 제형화하는 것이 특히 유리하다. 본 명세서에 사용된 바와 같은 투여 단위 형태는 치료받고자 하는 포유류 대상에 대한 단일 투약량으로서 적합한 물리적으로 별개의 단위를 지칭하는데, 각각의 단위는 요구되는 약학적 담체와 연합하여 목적으로 하는 치료 효과를 가져다 주는 것으로 계산된 소정량의 활성 화합물을 함유하고 있다. 본 발명의 투여 단위 형태에 관한 명세서는 (a) 항체의 독특한 특징과, 달성하고자 하는 특별한 치료적 또는 예방적 효과, 및 (b) 개개인에게서 민감증을 치료하기 위해 이러한 활성 화합물을 조합하는 분야에 내재된 제한 사항에 직접적으로 좌우되고 이에 영향을 받는다.

투약량 값은 완화시키고자 하는 질환의 유형과 중증도에 따라서 다양할 수 있고, 이에는 단일 용량 또는 다회분 용량이 포함될 수 있다는 것을 인지해야 한다. 특별한 어떠한 대상에 대해서도, 구체적인 투약 요법은 개인의 요구와, 해당 조성물을 투여하거나 이러한 투여를 관리하는 사람의 전문적인 판단에 따라서 시간이 경과함에 따라 조정해야 하고, 본 명세서에 제시된 투약량 범위는 단지 예시적이며 청구된 조성물의 범위나 실시를 제한하지 않는다는 것을 추가로 인지해야 한다.

일 실시형태에 있어서, 항체는 아세트산 나트륨, 폴리솔베이트 80, 및 염화 나트륨과 함께 pH를 약 5 내지 6으로 조정한 상태에서 5 또는 10 ㎎/㎖의 항체를 함유하는 멸균 수용액으로서의 정맥내 제형으로 투여된다. 바람직하게는, 정맥내 제형은 20 mM 아세트산 나트륨, 0.2 ㎎/㎖ 폴리솔베이트 80 및 140 mM 염화 나트륨(pH 5.5)과 함께 5 내지 10 ㎎/㎖의 항체를 함유하는 멸균 수용액이다.

본 발명의 다른 실시형태에 있어서, 항체는 20 mM 히스티딘 완충액, pH 5.5, 84 ㎎/㎖ 트레할로스 이수화물, 0.2 ㎎/㎖ 폴리솔베이트 80 및 0.1 ㎎/㎖ 다이소듐 에틸렌다이아민테트라아세트산 이수화물을 포함하는 멸균용액 중에 투여된다. 일 측면에 있어서, 제형은 고무 마개와 알루미늄 시일(seal)이 부착된 청정한 유리 바이알에 포장되어 있다. 다른 측면에 있어서, 상기 바이알은 해당 바이알당 약 400 ㎎의 공칭 충전량을 가진 채 약 20 ㎎/㎖의 항체를 수용한다.

일 실시형태에 있어서, 용량의 일부는 정맥내 볼루스로 투여한 다음, 나머지는 항체 제형의 주입에 의해 투여한다. 예를 들어, 항체 0.01 ㎎/㎏ 정맥내 주사제를 볼루스로서 제공할 수 있고, 미리 정해진 항체 용량의 나머지는 정맥내 주사함으로써 투여할 수 있다. 소정 용량의 항체는 예를 들어 1시간 반 내지 2시간 내지 5시간에 걸쳐 투여될 수도 있다.

인돌리논 RTKI에 관해서는, RTKI는 당업계에 잘 알려진 바와 같이 약리학적으로 허용가능한 에스터 또는 염의 형태로, 예컨대 약리학적으로 허용가능한 양이온 혹은 음이온과 조합해서 약학 조성물에 존재할 수 있다.

본 명세서에 기재된 약학 조성물의 제형은 약리학 분야에서 공지된 혹은 이후 개발되는 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 일반적으로, 이러한 조제 방법은 활성 성분을 담체 또는 하나 이상의 기타 부속 성분에 넣는 단계, 이어서, 필요에 따라, 생성물을 바람직한 1회 혹은 다회 용량 단위로 적재하거나, 포장하는 단계를 포함한다.

본 발명의 약학 조성물은 대량으로, 1회 단위 용량으로서 또는 복수의 1회 단위 용량으로서 제조되거나, 포장되거나 또는 판매될 수 있다. 본 명세서에서 이용되는 바와 같이, "단위 용량"은 소정량의 활성 성분을 함유하는 약학 조성물의 별개의 양이다. 활성 성분의 양은 일반적으로 대상에 투여되는 활성 성분의 용량 혹은 그러한 용량의 편의적인 분획, 예컨대 그러한 용량의 1/2 혹은 1/3과 동일하다.

본 발명의 약학 조성물 중의 활성 성분, 약학적으로 허용가능한 담체 및 임의의 추가 성분의 상대적인 양은 치료 대상의 동질성, 크기 및 질병상태에 따라, 나아가서는 조성물이 투여되는 경로에 따라 다양할 것이다. 그 예로서, 조성물은 활성 성분을 0.1% 내지 100%(w/w) 포함할 수 있다.

활성 성분 이외에, 본 발명의 약학 조성물은 하나 이상의 추가의 약학적 활성제를 추가로 포함할 수 있다. 특히 상정가능한 첨가제로는 항구토제, 지사제, 화학요법제, 사이토카인 등을 들 수 있다.

본 발명의 약학 조성물의 제어된 혹은 지속 방출성 제형은 통상의 수법을 이용해서 제조할 수 있다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 약학 조성물의 "비경구 투여"는 조직 내의 갈라진 틈을 통한 약학 조성물의 투여 및 대상의 조직의 물리적인 갈라진 틈을 특징으로 하는 임의의 투여 경로를 포함한다. 이와 같이 해서, 비경구 투여는 이들로 제한되지는 않지만, 예컨대 조성물의 주사에 의한 약학 조성물의 투여, 수술적 절개를 통한 조성물의 적용, 조직-침투성 비외과적 상처 등을 통한 조성물의 적용 등을 포함한다. 특히, 비경구 투여는 예컨대 피하, 복막내, 근육내, 흉골내 주사 및 신장 투석 주입 수법 등을 포함하는 것을 상정할 수 있지만, 이들로 제한되지 않는다.

비경구 투여에 적합한 약학 조성물의 제형은 약학적으로 허용가능한 담체, 예컨대, 멸균수 혹은 멸균 등장 식염수와 조합된 활성 성분을 포함한다. 이러한 제형은 볼루스 투여 혹은 연속 투여에 적합한 형태로 제조되거나, 포장되거나 판매될 수 있다. 주사가능한 제형은 방부제를 함유하는 앰플 혹은 다회 용기 등의 단위 용량 형태로 제조되거나, 포장되거나 판매될 수 있다. 비경구 투여용의 제형으로는 이하에 논의되는 바와 같은, 유성 또는 수성 비히클 중의 현탁제, 용제, 에멀션; 페이스트, 및 이식 가능한 지속 방출 또는 생분해성 제형을 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다. 이러한 제형은 한 가지 이상의 부가 성분, 예컨대 현탁제, 안정화제 또는 분산제를 추가로 포함할 수 있지만, 그 예는 이들로 제한되는 것은 아니다. 비경구 투여용 제형의 일 실시형태에 있어서, 활성 성분은 재구성 조성물을 비경구 투여하기 전에 적절한 비히클(예를 들어, 멸균성 발열원 무함유 수(sterile pyrogen-free water))와 함께 재구성하기 위해 건조(즉, 분말 혹은 과립상) 형태로 제공된다.

본 발명의 조성물은 당업계에 공지된 각종 방법에 의해 투여할 수 있다. 투여 경로 및/또는 방식은 목적으로 하는 결과에 따라서 다양하다. 활성 화합물은 이러한 화합물이 신속하게 방출되지 못하게 하는 담체, 예를 들어 제어 방출 제형 (예를 들어, 이식체, 경피용 패치 및 미소피막화된 전달 시스템이 포함됨)과 함께 제조될 수 있다. 생분해성, 생체적합성 중합체로는 예를 들어 에틸렌 비닐 아세테이트, 폴리무수물, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오쏘에스터 및 폴리락트산을 사용할 수 있다. 이러한 제형을 제조하기 위한 많은 방법은 예를 들어 문헌[참고: Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J. R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York (1978)]에 기재되어 있다. 약학 조성물은 GMP 조건 하에 제조되는 것이 바람직하다.

본 발명의 약학 조성물은 멸균성 주사용 수성 또는 유성 현탁제 또는 용제의 형태로 제조, 포장 또는 판매될 수 있다. 이 현탁제 또는 용제는 당업계에 공지된 기술에 따라서 제형화할 수 있고, 활성 성분 이외에도 부가의 성분, 예를 들어 본 명세서에 기재된 분산제, 습윤제 또는 현탁제를 포함할 수 있다. 이러한 멸균성 주사용 제형은 비경구적으로 허용 가능한 비독성 희석제 또는 용매, 예를 들어 물 또는 1,3-부탄 다이올을 이용하여 제조할 수 있다. 기타 허용 가능한 희석제 및 용매에는 링거 용액, 등장성 염화나트륨 용액, 및 고정유, 예를 들어 합성 모노- 또는 다이-글리세라이드가 포함되지만, 이들로 제한되지 않는다. 유용한 기타 비경구적으로 투여 가능한 제형에는 활성 성분을 미세결정성 형태로 포함하거나, 리포솜 제제 내에 포함하거나, 또는 생분해성 중합체 시스템의 구성분으로서 포함하는 것들이 포함된다. 지속 방출 또는 이식용 조성물은 약학적으로 허용가능한 중합체성 또는 소수성 물질, 예를 들어 에멀션, 이온 교환 수지, 난용성 중합체 또는 난용성 염을 포함할 수 있다.

본 발명의 항-CTLA4/인돌리논 RTKI 활성 성분 병용은 동물, 바람직하게는 인간에게 투여될 수 있다. 각 활성 성분의 정확한 투여 용량은 임의의 다수의 인자, 예컨대, 동물의 종류 및 치료중인 질환 상태의 종류, 동물의 연령 및 투여 경로(들)를 비롯한(단, 이들로 제한되지 않음) 다수의 인자에 따라 좌우될 것이다.

항-CTLA4 항체는 1일 1회, 1주 1회, 2주마다 1회, 1개월에 1회 등의 덜 빈번하게, 또는 수개월마다 1회 혹은 1년 이하마다 1회 등의 훨씬 덜 빈번하게 동물에게 투여될 수 있다. 투약 빈도는 당업자에게 용이하게 명백할 것이며, 치료 중인 질환의 종류 및 중증도, 동물의 종류 및 연령 등의 임의의 많은 인자(단, 이들로 제한되지 않음)에 좌우될 것이다.

인돌리논 RTKI는 하루에 수회 동물에 투여될 수 있거나, 또는 1일 1회, 1주 1회, 2주마다 1회, 1개월에 1회 등의 덜 빈번하게, 또는 수개월마다 1회 혹은 심지어 1년 이하마다 1회 등의 훨씬 덜 빈번하게 투여될 수 있다. 용량 빈도는 당업자에게 용이하게 명백하고, 인돌리논 RTKI 자체뿐만 아니라, 치료 중인 질환의 종류 및 중증도, 동물의 종류 및 연령 등의 임의의 많은 인자(단, 이들로 제한되지 않음)에 좌우될 것이다.

항체 및 인돌리논 RTKI는 상이한 날짜에 혹은 동일 날짜의 상이한 시간에 개별적으로 또는 동일한 날짜에 동시에 투여될 수 있는 점에서 공동 투여될 수 있다. 이와 같이 해서 공동 투여는, 2종의 투여가 다른 것이 없이 한쪽 제제의 투여보다 검출가능하게 큰 환자에게 치료상 혜택을 매개하도록 항체와 인돌리논 RTKI의 투여의 임의의 일시적인 병용을 내포한다.

본 발명의 항체-인돌리논 RTKI 병용은 수많은 다른 화합물(특히, 항호르몬 요법제, 사이토카인, 화학요법 및/또는 항바이러스제)과 공동 투여될 수 있다. 대안적으로, 상기 화합물(들)은 항체-인돌리논 RTKI 조합, 또는 그의 임의의 순열에 앞서 1시간, 1일, 1주, 1개월 혹은 그 이상 투여될 수 있다. 또한, 상기 화합물(들)은 방사선 투여, 줄기세포 이식 혹은 임의의 치료제(예를 들어, 사이토카인, 화학요법 화합물 등) 또는 그의 임의의 순열의 투여 후 1시간, 1일, 1주, 1개월 혹은 그 이상 투여될 수 있다. 빈도 및 투여 요법은 당업자에게 용이하게 명백하고, 이들로 제한되지는 않지만, 치료 중인 질병의 종류 및 중증도, 동물의 연령 및 건강 상태, 투여중인 화합물 또는 화합물들의 동질성, 각종 화합물의 투여 경로 등의 임의의 많은 인자에 따라 의존할 것이다. 항체-인돌리논 RTKI를 공동 투여하는 방법을 입증하는 몇몇 유익한 예가 제공되지만, 본 발명은 어쨌든 이들 예로 제한되지 않고, 이들은 단지 본 발명에 의해 내포되는 방법을 예시하는 데 이용된다.

VI. 키트

본 발명은 암의 치료용의 각종 키트를 포함한다. 키트는 치료상 유효량의 본 발명의 인간 항-CTLA4 항체 및 치료상 유효량의 적어도 하나의 인돌리논 RTKI, 바람직하게는 화합물 1, 2 및 3, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 더욱 바람직하게는, 화합물 1을, 어플리케이터(applicator) 및 본 발명의 방법을 수행하기 위한 병용 사용을 설명하는 교재에 따라 포함한다. 예시적 키트가 이하에 기재되어 있지만, 기타 유용한 키트의 내용물도 본 명세서의 개시내용을 감안해서 당업자에게 명백할 것이다. 이들 키트의 각각은 본 발명 내에 포함된다.

본 발명에는 치료를 필요로 하는 환자에게 콩팥 세포 암종을 치료하기 위한 키트가 포함된다. 이러한 키트에는 본 발명의 인간 항-CTLA4 항체와 적어도 하나의 인돌리논 RTKI가 포함된다. 또, 키트는 환자에게 키트의 구성 성분들을 투여하기 위한 어플리케이터, 예를 들어 주사기(단, 이것으로 제한되지 않음)를 추가로 포함한다. 또한, 키트는 이러한 키트를 환자에게서 유방암을 치료하기 위해 사용하기 위한 관련된 정보가 제시된 교재를 포함한다.

보다 바람직하게는, 키트는 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무맙, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1 및 이필리무맙으로부터 선택된 적어도 하나의 항-CTLA4 항체를 포함하고; 더욱 바람직하게는 항체는 4.13.1, 티실리무맙 및 이필리무맙이다.

일 실시형태에 있어서, 인돌리논 RTKI는 화합물 1이다.

본 발명은 항-CTLA4 항체 및 임의의 인돌리논 RTKI, 예컨대 화합물 1(그러나, 이것으로 제한되지 않음)의 임의의 병용을 포함하는 키트를 내포한다. 각 키트가 바람직하지만, 본 발명은 이 특정 병용으로 제한되지 않는다. 또한, 상기 키트는 암의 치료용의 다양한 첨가제를 포함할 수 있다. 이러한 제제는 이미 기술하였고, 예를 들어, 특히 화학요법 화합물, 암 백신, 인돌리논 RTKI 이외의 신호 전달 억제제, 비정상 세포 성장 또는 암을 치료하는 데 유용한 제제, IGF-1R에 결합함으로써 종양 성장을 억제하는 항체 또는 그의 리간드, 화학요법제(많은 것 중에서 탁세인, 빈카 알칼로이드, 백금 화합물, 중격 항생제) 및 사이토카인 외에, 예를 들어, 치료 동안 일어나는 임의의 독성을 치료하는 고식적 제제(예컨대, 이들로 제한되지는 않지만, 지사제, 항구토제 등을 들 수 있음) 등을 포함한다.

본 발명은 이하의 실험예를 참조해서 더욱 상세히 설명한다. 이들 실시예는 단지 예시의 목적으로 제공될 뿐, 다른 특정이 없는 한 제한하기 위해 의도된 것은 아니다. 따라서, 본 발명은 이하의 실시예로 제한되는 것으로 간주해서는 안되고, 오히려 본 명세서에 제공된 교시의 결과로서 명백하게 되는 소정의 모든 변형예를 내포하는 것으로 간주될 필요가 있다.

전술한 발명의 개요뿐만 아니라 발명의 상세한 설명은 첨부된 도면과 관련해서 읽을 경우 더욱 잘 이해할 수 있을 것이다. 본 발명을 예시할 목적으로, 현재 바람직한 실시형태(들)를 도면에 나타내고 있다. 그러나, 본 발명은 도시된 바와 같은 정확한 배열과 수단으로 제한되지 않는다는 것을 이해할 필요가 있다.

도 1a 내지 도 1d를 포함하는 도 1은 항-CTLA4 항체 4.1.1의 뉴클레오타이드 및 아미노산 서열을 도시한 것이다. 도 1a는 4.1.1 중쇄에 대한 완전한 길이의 뉴클레오타이드 서열(서열 번호 1)을 도시한 것이다. 도 1b는 4.1.1 중쇄에 대한 완전한 길이의 아미노산 서열(서열 번호 2) 및 사각 괄호 "[]" 사이에 지정된 4.1.1 중쇄 가변 영역에 대한 아미노산 서열(서열 번호 3)을 도시한 것이다. 각 4.1.1 중쇄 CDR의 아미노산 서열은 밑줄쳐 있다. CDR 서열은 다음과 같다: CDR1: GFTFSSHGMH(서열 번호 4); CDR2: VIWYDGRNKYYADSV(서열 번호 5); 및 CDR3: GGHFGPFDY(서열 번호 6). 도 1c는 4.1.1 경쇄에 대한 뉴클레오타이드 서열(서열 번호 7)을 도시한 것이다. 도 1d는 완전한 길이의 4.1.1 경쇄에 대한 아미노산 서열(서열 번호 8) 및 사각 괄호 "[]" 사이에 표시된 바와 같은 가변 영역의 아미노산 서열(서열 번호 9)을 도시한 것이다. 각 CDR의 아미노산 서열은 다음과 같이 나타낸다: CDR1: RASQSISSSFLA(서열 번호 10); CDR2: GASSRAT(서열 번호 11); 및 CDR3: QQYGTSPWT(서열 번호 12).

도 2a 내지 2d를 포함하는 도 2는 항-CTLA4 항체 4.13.1의 뉴클레오타이드 및 아미노산 서열을 도시한 것이다. 도 2a는 4.13.1 중쇄에 대한 완전한 길이의 뉴클레오타이드 서열(서열 번호 13)을 도시한 것이다. 도 2b는 4.13.1 중쇄에 대 한 완전한 길이의 아미노산 서열(서열 번호 14) 및 사각 괄호 "[]" 사이에 지정된 4.13.1 중쇄 가변 영역에 대한 아미노산 서열(서열 번호 15)을 도시한 것이다. 각 4.13.1 중쇄 CDR의 아미노산 서열은 밑줄쳐 있다. CDR 서열은 다음과 같다: CDR1: GFTFSSHGIH(서열 번호 16); CDR2: VIWYDGRNKDYADSV(서열 번호 12); 및 CDR3: VAPLGPLDY(서열 번호 18). 도 2c는 4.13.1 경쇄에 대한 뉴클레오타이드 서열(서열 번호 19)을 도시한 것이다. 도 2d는 완전한 길이의 4.13.1 경쇄에 대한 아미노산 서열(서열 번호 20) 및 사각 괄호 "[]" 사이에 표시된 바와 같은 가변 영역의 아미노산 서열(서열 번호 21)을 도시한 것이다. 각 CDR의 아미노산 서열은 다음과 같이 나타낸다: CDR1: RASQSVSSYLA(서열 번호 22); CDR2: GASSRAT(서열 번호 23); 및 CDR3: QQYGRSPFT(서열 번호 24).

도 3a 내지 3d를 포함하는 도 3은 항-CTLA4 항체 티실리무맙의 뉴클레오타이드 및 아미노산 서열을 도시한 것이다. 도 3a는 티실리무맙 중쇄에 대한 완전한 길이의 뉴클레오타이드 서열(서열 번호 25)을 도시한 것이다. 도 3b는 티실리무맙 중쇄에 대한 완전한 길이의 아미노산 서열(서열 번호 26) 및 사각 괄호 "[]" 사이에 지정된 티실리무맙 중쇄 가변 영역에 대한 아미노산 서열(서열 번호 27)을 도시한 것이다. 각 티실리무맙 중쇄 CDR의 아미노산 서열이 밑줄쳐 있다. CDR 서열은 다음과 같다: CDR1: GFTFSSYGMH(서열 번호 28); CDR2: VIWYDGSNKYYADSV(서열 번호 29); 및 CDR3: DPRGATLYYYYYGMDV(서열 번호 30). 도3c는 티실리무맙 경쇄에 대한 뉴클레오타이드 서열(서열 번호 31)을 도시한 것이다. 도 3d는 완전한 길이의 티실리무맙 경쇄에 대한 아미노산 서열(서열 번호 32) 및 사각 괄호 "[]" 사이에 표 시된 바와 같은 가변 영역의 아미노산 서열(서열 번호 33)을 도시한 것이다. 각 CDR의 아미노산 서열은 다음과 같이 나타낸다: CDR1: RASQSINSYLD(서열 번호 34); CDR2: AASSLQS(서열 번호 35); 및 CDR3: QQYYSTPFT(서열 번호 36).

실시예 1:

전이성 콩팥 세포 암종의 1차 치료를 위해 항- CTLA4 항체를 인돌리논 RTKI (화합물 1)와 병용함

외과적 수술/방사선 치료 후에, 만약 있다면, 정확하게 2차원적으로 측정될 수 있고 크기가 통상적인 CT 스캔에 의해서는 ≥ 2 ㎝ x 1 ㎝이고 또는 나선 CT 스캔에 의해서는 ≥ 1 ㎝ x 1 ㎝인 적어도 하나의 병변을 지닌 전이성 콩팥 세포 암종(RCC) 환자에게 확립된 프로토콜에 따라 화합물 1(SU11248)을 이용한 표준 화학 요법을 실시하였다. 요약하면, 화합물 1은 4주 동안 1일당 약 50 ㎎으로 1일 1회 경구 투여하였다. 2주의 휴지 기간 후에, 화합물 1의 두번째 4주 과정을 환자에게 투여하였다. 화합물 1 투여 후 휴지하는 사이클을 지시된 바와 같이 반복해서 행하였다.

환자에게는 본 명세서에 기재된 바와 같이 약 3 ㎎/㎏, 6 ㎎/㎏, 10 ㎎/㎏ 또는 15 ㎎/㎏의 용량으로 항-CTLA4 항체의 단일 정맥내 주입(100 ㎖/hr)으로 더욱 투여하였다. 예방적 항구토제와 지사제를 적절하게 제공하였다. 이 치료는 항-CTLA4 항체 용량을 증가시키는 일없이 28일 후에 치료를 반복하였고, 그 후 28일마 다 최대 12 사이클 행하였으나, 참을 수 없는 독성이나 질환 진행은 없었다.

바람직하게는, 환자에게 항-CTLA4를 주입하기 적어도 30분 전에 항히스타민제(H1)를 미리 투약하였다. 그러나, 이러한 미리 투약하는 것은 권장되긴 하지만, 반드시 요구되지는 않는다.

화합물 1은 정해진 바에 따라 인간 항-CTLA4 항체 티실리무맙과 함께 순차 혹은 동시에 1회 혹은 반복해서 투여된다.

티실리무맙은 고무 마개와 알루미늄 시일이 부착된 20 ㎖ 용량의 청정한 유리 바이알에 제공되었다. 각 바이알은 20 mM 히스티딘 완충액, pH 5.5, 84 ㎎/㎖ 트레할로스 이수화물, 0.2 ㎎/㎖ 폴리솔베이트 80 및 0.1 ㎎/㎖ EDTA 이나트륨 이수화물을 포함하는 멸균성 수성 용액 중에, 20 ㎎/㎖(공칭 충전량 400 ㎎/바이알)의 티실리무맙을 함유하였다.

모든 환자를 대상으로 하여, 투여 전에 ECOG 성능 상태, 활력 징후 및 체중을 평가하였고, 활력 징후는 투여 후에 임상적으로 나타낸 바와 같이 반복될 수 있다. 1일째에 신체 검사(안과적 평가 및 자가면역 징후 포함)를 수행하였다. 혈액학 패널(적혈구 용적률, RBC 계수치, WBC 계수치, 시차), 화학(알칼리성 포스파타제, 칼슘, 클로라이드, GGT, LDH, 마그네슘, 인, 랜덤 글루코스, 나트륨, 요소(urea), 요산), 소변검사(혈액, 단백질), 기타(활성화 부분 트롬보플라스틴 시간[APTT: activated partial thromboplastin time], 프로트롬빈 시간(PT: prothrombin time), 자가항체 패널, C 반응성 단백질, TSH, T3, T4, 아밀라제, 리파제, 혈청 C3, C4, 혈청 Ig 수준)를 위한 샘플을 수득하였다.

기준선 인간 항-인간 항체(HAHA: human anti-human antibody) 역가를 결정하였고, 약동학적(PK) 표본을 투여 전에 수득하였다.

이하의 종말점들을 측정하였다: PK 파라미터, HAHA, 반응속도 및 진행되기까지의 시간. 진행되기까지의 시간과 전반적인 생존률은 카플란-마이어(Kaplan-Meier) 생성물 제한 방법을 사용하여 계산하였다.

항-CTLA4 항체는 4.1.1, 4.13.1, 티실리무맙 및 이필리무맙으로부터 선택된 적어도 하나의 항체의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가졌다. 바람직하게는, 상기 항체는 티실리무맙의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가졌다.

실시예 2:

전이성 콩팥 세포 암종의 1차 치료를 위해 항- CTLA4 항체를 인돌리논 RTKI 와 병용함

외과적 수술/방사선 치료 후에, 만약 있다면, 정확하게 2차원적으로 측정될 수 있고 크기가 통상적인 CT 스캔에 의해서는 ≥ 2 ㎝ x 1 ㎝이고 또는 나선 CT 스캔에 의해서는 ≥ 1 ㎝ x 1 ㎝인 적어도 하나의 병변을 지닌 전이성 콩팥 세포 암종(RCC) 환자에게 확립된 프로토콜에 따라 인돌리논 RTKI(예를 들어, 화합물 1, 화합물 2, 또는 화합물 3)를 이용한 표준 화학 요법을 실시하였다. 요약하면, 화합물 1은 4주의 치료 기간 동안 1일당 약 50 ㎎으로 1일 1회 경구 투여하였다. 2주의 휴지 기간 후에, 상기 화합물의 두번째 4주 과정을 환자에게 투여하였다. 상기 화합물에 의한 치료 후 휴지하는 단속적 투약 사이클을 지시된 바와 같이 반복해서 행하였다.

환자에게는 본 명세서에 기재된 바와 같이 약 3 ㎎/㎏, 6 ㎎/㎏, 10 ㎎/㎏ 또는 15 ㎎/㎏의 용량으로 항-CTLA4 항체의 단일 정맥내 주입(예를 들어, 100 ㎖/hr, 200 ㎖/hr 등)으로 더욱 투여하였다. 예방적 항구토제와 지사제를 적절하게 제공하였다. 이 항체 치료는 항-CTLA4 항체 용량을 증가시키는 일없이 28일 후에 치료를 반복하였고, 그 후 28일마다 최대 12 사이클 행하였으나, 참을 수 없는 독성이나 질환 진행은 없었다.

바람직하게는, 환자에게 항-CTLA4를 주입하기 적어도 30분 전에 항히스타민제(H1)를 미리 투약하였다. 그러나, 이러한 미리 투약하는 것은 권장되긴 하지만, 반드시 요구되지는 않는다.

인돌리논 RTKI는 정해진 바에 따라 항-CTLA4 항체의 투여 전에 1회 혹은 반복해서 투여된다. 환자의 면역 반응 수준은 인돌리논 RTKI(예를 들어, 화합물 1, 화합물 2, 화합물 3 등)의 각 투여 전, 투여 동안 및 투여 후에 평가하였다. 상기 항체는 인돌리논 RTKI의 과정 후, 그리고 인돌리논 RTKI의 투여 시 면역 반응의 감소가 검출된 경우 환자의 면역 반응의 검출가능한 증가 후에 투여하였다. 일반적으로, 상기 항체는 인돌리논 RTKI의 최종 용량을 환자에게 투여한 후 약 1 내지 100일째 투여하였다.

티실리무맙은 고무 마개와 알루미늄 시일이 부착된 20 ㎖ 용량의 청정한 유리 바이알에 제공되었다. 각 바이알은 20 mM 히스티딘 완충액, pH 5.5, 84 ㎎/㎖ 트레할로스 이수화물, 0.2 ㎎/㎖ 폴리솔베이트 80 및 0.1 ㎎/㎖ EDTA 이나트륨 이수화물을 포함하는 멸균성 수성 용액 중에, 20 ㎎/㎖(공칭 충전량 400 ㎎/바이알) 의 티실리무맙을 함유하였다.

모든 환자를 대상으로 하여, 투여 전에 ECOG 성능 상태, 활력 징후 및 체중을 평가하였고, 활력 징후는 투여 후에 임상적으로 나타낸 바와 같이 반복될 수 있다. 1일째에 신체 검사(안과적 평가 및 자가면역 징후 포함)를 수행하였다. 혈액학 패널(적혈구 용적률, RBC 계수치, WBC 계수치, 시차), 화학(알칼리성 포스파타제, 칼슘, 클로라이드, GGT, LDH, 마그네슘, 인, 랜덤 글루코스, 나트륨, 요소, 요산), 소변검사(혈액, 단백질), 기타(활성화 부분 트롬보플라스틴 시간[APTT], 프로트롬빈 시간(PT), 자가항체 패널, C 반응성 단백질, TSH, T3, T4, 아밀라제, 리파제, 혈청 C3, C4, 혈청 Ig 수준)를 위한 샘플을 수득하였다.

기준선 인간 항-인간 항체(HAHA) 역가를 결정하였고, 약동학적(PK) 표본을 투여 전에 수득하였다.

이하의 종말점들을 측정하였다: PK 파라미터, HAHA, 반응속도 및 진행되기까지의 시간. 진행되기까지의 시간과 전반적인 생존률은 카플란-마이어 생성물 제한 방법을 사용하여 계산하였다.

바람직하게는, 항-CTLA4 항체는 4.1.1, 4.13.1, 티실리무맙 및 이필리무맙으로부터 선택된 적어도 하나의 항체의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가졌다. 바람직하게는, 상기 항체는 티실리무맙의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가졌다.

실시예 3:

항- CTLA4 항체를 이마티닙 -내성 위장관 기질성 종양(GIST)의 인돌리논 RTKI 치료와 병용함

외과적 수술/방사선 치료 후에, 만약 있다면, 이마티닙-내성 GIST 환자에게 확립된 프로토콜에 따라 인돌리논 RTKI(화합물 1)를 이용한 표준 화학 요법을 실시하였다. 요약하면, 화합물 1은 4주 동안 1일당 약 50 ㎎으로 1일 1회 경구 투여하였다. 2주의 휴지 기간 후에, 화합물 1의 두번째 4주 과정을 환자에게 투여하였다. 화합물 1 투여 후 휴지하는 치료 사이클을 지시된 바와 같이 반복해서 행하였다.

환자에게는 본 명세서에 기재된 바와 같이 약 1㎎/㎏, 3 ㎎/㎏, 6 ㎎/㎏, 10 ㎎/㎏ 또는 15 ㎎/㎏의 용량으로 항-CTLA4 항체의 단일 정맥내 주입(100 ㎖/hr)으로 더욱 투여하였다. 예방적 항구토제와 지사제를 적절하게 제공하였다. 이 치료는 항-CTLA4 항체 용량을 증가시키는 일없이 28일 후에 치료를 반복하였고, 그 후 28일마다 최대 12 사이클 행하였으나, 참을 수 없는 독성이나 질환 진행은 없었다.

바람직하게는, 환자에게 항-CTLA4를 주입하기 적어도 30분 전에 항히스타민제(H1)를 미리 투약하였다. 그러나, 이러한 미리 투약하는 것은 권장되긴 하지만, 반드시 요구되지는 않는다.

화합물 1은 정해진 바에 따라 인간 항-CTLA4 항체와 함께 순차 혹은 동시에 1회 혹은 반복해서 투여된다.

티실리무맙은 고무 마개와 알루미늄 시일이 부착된 20 ㎖ 용량의 청정한 유리 바이알에 제공되었다. 각 바이알은 20 mM 히스티딘 완충액, pH 5.5, 84 ㎎/㎖ 트레할로스 이수화물, 0.2 ㎎/㎖ 폴리솔베이트 80 및 0.1 ㎎/㎖ EDTA 이나트륨 이수화물을 포함하는 멸균성 수성 용액 중에, 20 ㎎/㎖(공칭 충전량 400 ㎎/바이알) 의 티실리무맙을 함유하였다.

모든 환자를 대상으로 하여, 투여 전에 ECOG 성능 상태, 활력 징후 및 체중을 평가하였고, 활력 징후는 투여 후에 임상적으로 나타낸 바와 같이 반복될 수 있다. 1일째에 신체 검사(안과적 평가 및 자가면역 징후 포함)를 수행하였다. 혈액학 패널(적혈구 용적률, RBC 계수치, WBC 계수치, 시차), 화학(알칼리성 포스파타제, 칼슘, 클로라이드, GGT, LDH, 마그네슘, 인, 랜덤 글루코스, 나트륨, 요소, 요산), 소변검사(혈액, 단백질), 기타(활성화 부분 트롬보플라스틴 시간[APTT], 프로트롬빈 시간(PT), 자가항체 패널, C 반응성 단백질, TSH, T3, T4, 아밀라제, 리파제, 혈청 C3, C4, 혈청 Ig 수준)를 위한 샘플을 수득하였다.

기준선 인간 항-인간 항체(HAHA) 역가를 결정하였고, 약동학적(PK) 표본을 투여 전에 수득하였다.

이하의 종말점들을 측정하였다: PK 파라미터, HAHA, 반응속도 및 진행되기까지의 시간. 진행되기까지의 시간과 전반적인 생존률은 카플란-마이어 생성물 제한 방법을 사용하여 계산하였다.

항-CTLA4 항체는 4.1.1, 4.13.1, 티실리무맙 및 이필리무맙으로부터 선택된 적어도 하나의 항체의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가졌다. 바람직하게는, 상기 항체는 티실리무맙의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가졌다.

실시예 4:

전이성 콩팥 세포 암종의 1차 치료를 위해 항- CTLA4 항체를 인돌리논 RTKI (화합물 1)와 병용함

외과적 수술/방사선 치료 후에, 만약 있다면, 정확하게 2차원적으로 측정될 수 있고 크기가 통상적인 CT 스캔에 의해서는 ≥ 2 ㎝ x 1 ㎝이고 또는 나선 CT 스캔에 의해서는 ≥ 1 ㎝ x 1 ㎝인 적어도 하나의 병변을 지닌 전이성 콩팥 세포 암종(RCC) 환자에게 확립된 프로토콜에 따라 화합물 1(수니티닙 말레이트, SUTENT, SU11248)을 이용한 표준 화학 요법을 실시하였다. 요약하면, 화합물 1은 매일 약 37.5 ㎎으로 1일 1회 경구 투여하고, 투여는 연속해서(즉, 휴지 기간 없이) 행하였다.

환자에게는 본 명세서에 기재된 바와 같이 약 10 ㎎/㎏ 또는 15 ㎎/㎏의 용량으로 항-CTLA4 항체의 단일 정맥내 주입(100 ㎖/hr)으로 더욱 투여하였다. 예방적 항구토제와 지사제를 적절하게 제공하였다. 이 치료는 항-CTLA4 항체 용량을 증가시키는 일없이 3개월 후에 치료를 반복하였고, 그 후 3개월마다 최대 12 사이클 행하였으나, 참을 수 없는 독성이나 질환 진행은 없었다.

바람직하게는, 환자에게 항-CTLA4를 주입하기 적어도 30분 전에 항히스타민제(H1)를 미리 투약하였다. 그러나, 이러한 미리 투약하는 것은 권장되긴 하지만, 반드시 요구되지는 않는다.

티실리무맙은 고무 마개와 알루미늄 시일이 부착된 20 ㎖ 용량의 청정한 유리 바이알에 제공되었다. 각 바이알은 20 mM 히스티딘 완충액, pH 5.5, 84 ㎎/㎖ 트레할로스 이수화물, 0.2 ㎎/㎖ 폴리솔베이트 80 및 0.1 ㎎/㎖ EDTA 이나트륨 이수화물을 포함하는 멸균성 수성 용액 중에, 20 ㎎/㎖(공칭 충전량 400 ㎎/바이알)의 티실리무맙을 함유하였다.

모든 환자를 대상으로 하여, 투여 전에 ECOG 성능 상태, 활력 징후 및 체중을 평가하였고, 활력 징후는 투여 후에 임상적으로 나타낸 바와 같이 반복될 수 있다. 1일째에 신체 검사(안과적 평가 및 자가면역 징후 포함)를 수행하였다. 혈액학 패널(적혈구 용적률, RBC 계수치, WBC 계수치, 시차), 화학(알칼리성 포스파타제, 칼슘, 클로라이드, GGT, LDH, 마그네슘, 인, 랜덤 글루코스, 나트륨, 요소, 요산), 소변검사(혈액, 단백질), 기타(활성화 부분 트롬보플라스틴 시간[APTT], 프로트롬빈 시간(PT), 자가항체 패널, C 반응성 단백질, TSH, T3, T4, 아밀라제, 리파제, 혈청 C3, C4, 혈청 Ig 수준)를 위한 샘플을 수득하였다.

기준선 인간 항-인간 항체(HAHA) 역가를 결정하였고, 약동학적(PK) 표본을 투여 전에 수득하였다.

이하의 종말점들을 측정하였다: PK 파라미터, HAHA, 반응속도 및 진행되기까지의 시간. 진행되기까지의 시간과 전반적인 생존률은 카플란-마이어 생성물 제한 방법을 사용하여 계산하였다.

항-CTLA4 항체는 4.1.1, 4.13.1, 티실리무맙 및 이필리무맙으로부터 선택된 적어도 하나의 항체의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가졌다. 바람직하게는, 상기 항체는 티실리무맙의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가졌다.

실시예 5:

항- CTLA4 항체를 이마티닙 -내성 위장관 기질성 종양(GIST)의 인돌리논 RTKI 치료와 병용함

외과적 수술/방사선 치료 후에, 만약 있다면, 이마티닙-내성 GIST 환자에게 확립된 프로토콜에 따라 인돌리논 RTKI(화합물 1)를 이용한 표준 화학 요법을 실시하였다. 요약하면, 화합물 1은 매일 연속해서 약 37.5 ㎎으로 1일 1회 투여하였다.

환자에게는 본 명세서에 기재된 바와 같이 약 10 ㎎/㎏ 또는 15 ㎎/㎏의 용량으로 항-CTLA4 항체의 단일 정맥내 주입(100 ㎖/hr)으로 더욱 투여하였다. 예방적 항구토제와 지사제를 적절하게 제공하였다. 이 항체 치료는 항-CTLA4 항체 용량을 증가시키는 일없이 3개월 후에 치료를 반복하였고, 그 후 3개월마다 최대 12 사이클 행하였으나, 참을 수 없는 독성이나 질환 진행은 없었다.

바람직하게는, 환자에게 항-CTLA4를 주입하기 적어도 30분 전에 항히스타민제(H1)를 미리 투약하였다. 그러나, 이러한 미리 투약하는 것은 권장되긴 하지만, 반드시 요구되지는 않는다.

티실리무맙은 고무 마개와 알루미늄 시일이 부착된 20 ㎖ 용량의 청정한 유리 바이알에 제공되었다. 각 바이알은 20 mM 히스티딘 완충액, pH 5.5, 84 ㎎/㎖ 트레할로스 이수화물, 0.2 ㎎/㎖ 폴리솔베이트 80 및 0.1 ㎎/㎖ EDTA 이나트륨 이수화물을 포함하는 멸균성 수성 용액 중에, 20 ㎎/㎖(공칭 충전량 400 ㎎/바이알)의 티실리무맙을 함유하였다.

모든 환자를 대상으로 하여, 투여 전에 ECOG 성능 상태, 활력 징후 및 체중을 평가하였고, 활력 징후는 투여 후에 임상적으로 나타낸 바와 같이 반복될 수 있다. 1일째에 신체 검사(안과적 평가 및 자가면역 징후 포함)를 수행하였다. 혈액학 패널(적혈구 용적률, RBC 계수치, WBC 계수치, 시차), 화학(알칼리성 포스파타 제, 칼슘, 클로라이드, GGT, LDH, 마그네슘, 인, 랜덤 글루코스, 나트륨, 요소, 요산), 소변검사(혈액, 단백질), 기타(활성화 부분 트롬보플라스틴 시간[APTT], 프로트롬빈 시간(PT), 자가항체 패널, C 반응성 단백질, TSH, T3, T4, 아밀라제, 리파제, 혈청 C3, C4, 혈청 Ig 수준)를 위한 샘플을 수득하였다.

기준선 인간 항-인간 항체(HAHA) 역가를 결정하였고, 약동학적(PK) 표본을 투여 전에 수득하였다.

이하의 종말점들을 측정하였다: PK 파라미터, HAHA, 반응속도 및 진행되기까지의 시간. 진행되기까지의 시간과 전반적인 생존률은 카플란-마이어 생성물 제한 방법을 사용하여 계산하였다.

항-CTLA4 항체는 4.1.1, 4.13.1, 티실리무맙 및 이필리무맙으로부터 선택된 적어도 하나의 항체의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가졌다. 바람직하게는, 상기 항체는 티실리무맙의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가졌다.

본 명세서에 인용된 각각의 모든 특허, 특허 출원 및 공보의 기재 내용은 그들의 전문이 본 명세서에 참고로 반영된다.

본 발명이 구체적인 실시형태들을 참고로 하여 개시되어 있었지만, 본 발명의 기타 실시형태와 변형예들이 본 발명의 진정한 정신과 범위를 벗어나는 일없이 당업자에 의해 추론될 수 있는 것은 명백하다. 첨부된 청구의 범위는 이러한 모든 실시형태 및 등가의 변형예를 포함하는 것으로 간주될 필요가 있다.

SEQUENCE LISTING <110> PFIZER PRODUCTS INC. Gomez-Navarro, Jesus Baum, Charles M <120> Anti-CTLA4 Antibody And Indolinone Combination Therapy For Treatment of Cancer <130> PC32699A <140> app no. to be assigned <141> 2006-01-23 <150> US 60/664,653 <151> 2005-03-23 <160> 36 <170> PatentIn version 3.3 <210> 1 <211> 1392 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 1 atggagtttg ggctgagctg ggttttcctc gttgctcttt taagaggtgt ccagtgtcag 60 gtgcagctgg tggagtctgg gggaggcgtg gtccagcctg ggaggtccct gagactctcc 120 tgtgtagcgt ctggattcac cttcagtagc catggcatgc actgggtccg ccaggctcca 180 ggcaaggggc tggagtgggt ggcagttata tggtatgatg gaagaaataa atactatgca 240 gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtttctg 300 caaatgaaca gcctgagagc cgaggacacg gctgtgtatt actgtgcgag aggaggtcac 360 ttcggtcctt ttgactactg gggccaggga accctggtca ccgtctcctc agcctccacc 420 aagggcccat cggtcttccc cctggcgccc tgctccagga gcacctccga gagcacagcg 480 gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 540 ggcgctctga ccagcggcgt gcacaccttc ccagctgtcc tacagtcctc aggactctac 600 tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcaacttcg gcacccagac ctacacctgc 660 aacgtagatc acaagcccag caacaccaag gtggacaaga cagttgagcg caaatgttgt 720 gtcgagtgcc caccgtgccc agcaccacct gtggcaggac cgtcagtctt cctcttcccc 780 ccaaaaccca aggacaccct catgatctcc cggacccctg aggtcacgtg cgtggtggtg 840 gacgtgagcc acgaagaccc cgaggtccag ttcaactggt acgtggacgg cgtggaggtg 900 cataatgcca agacaaagcc acgggaggag cagttcaaca gcacgttccg tgtggtcagc 960 gtcctcaccg ttgtgcacca ggactggctg aacggcaagg agtacaagtg caaggtctcc 1020 aacaaaggcc tcccagcccc catcgagaaa accatctcca aaaccaaagg gcagccccga 1080 gaaccacagg tgtacaccct gcccccatcc cgggaggaga tgaccaagaa ccaggtcagc 1140 ctgacctgcc tggtcaaagg cttctacccc agcgacatcg ccgtggagtg ggagagcaat 1200 gggcagccgg agaacaacta caagaccaca cctcccatgc tggactccga cggctccttc 1260 ttcctctaca gcaagctcac cgtggacaag agcaggtggc agcaggggaa cgtcttctca 1320 tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac cactacacgc agaagagcct ctccctgtct 1380 ccgggtaaat ga 1392 <210> 2 <211> 444 <212> PRT <213> Homo sapiens 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Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys 210 215 220 Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe 225 230 235 240 Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val 245 250 255 Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe 260 265 270 Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro 275 280 285 Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr 290 295 300 Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val 305 310 315 320 Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr 325 330 335 Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg 340 345 350 Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly 355 360 365 Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro 370 375 380 Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser 385 390 395 400 Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln 405 410 415 Gly Asn Val 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agtcatggca tccactgggt ccgccaggct 120 ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatggtatg atggaagaaa taaagactat 180 gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ttgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggctgtgt attactgtgc gagagtggcc 300 ccactggggc cacttgacta ctggggccag ggaaccctgg tcaccgtctc ctcagcctcc 360 accaagggcc catcggtctt ccccctggcg ccctgctcca ggagcacctc cgagagcaca 420 gcggccctgg gctgcctggt caaggactac ttccccgaac cggtgacggt gtcgtggaac 480 tcaggcgctc tgaccagcgg cgtgcacacc ttcccagctg tcctacagtc ctcaggactc 540 tactccctca gcagcgtggt gaccgtgccc tccagcaact tcggcaccca gacctacacc 600 tgcaacgtag atcacaagcc cagcaacacc aaggtggaca agacagttga gcgcaaatgt 660 tgtgtcgagt gcccaccgtg cccagcacca cctgtggcag gaccgtcagt cttcctcttc 720 cccccaaaac ccaaggacac cctcatgatc tcccggaccc ctgaggtcac gtgcgtggtg 780 gtggacgtga gccacgaaga ccccgaggtc cagttcaact ggtacgtgga cggcgtggag 840 gtgcataatg ccaagacaaa gccacgggag gagcagttca acagcacgtt ccgtgtggtc 900 agcgtcctca ccgttgtgca ccaggactgg ctgaacggca 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Pro Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro 115 120 125 Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly 130 135 140 Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn 145 150 155 160 Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln 165 170 175 Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser 180 185 190 Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser 195 200 205 Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys 210 215 220 Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe 225 230 235 240 Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val 245 250 255 Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe 260 265 270 Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro 275 280 285 Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr 290 295 300 Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val 305 310 315 320 Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr 325 330 335 Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg 340 345 350 Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly 355 360 365 Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro 370 375 380 Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser 385 390 395 400 Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln 405 410 415 Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His 420 425 430 Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 <210> 15 <211> 118 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 15 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser His 20 25 30 Gly Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Arg Asn Lys Asp Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Val Ala Pro Leu Gly Pro Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 16 <211> 10 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 16 Gly Phe Thr Phe Ser Ser His Gly Ile His 1 5 10 <210> 17 <211> 15 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 17 Val Ile Trp Tyr Asp Gly Arg Asn Lys Asp Tyr Ala Asp Ser Val 1 5 10 15 <210> 18 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 18 Val Ala Pro Leu Gly Pro Leu Asp Tyr 1 5 <210> 19 <211> 645 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 19 gaaattgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtca gagtgtcagc agctacttag cctggtacca gcagaaacct 120 ggccaggctc ccaggctcct catctatggt gcatccagca gggccactgg catcccagac 180 aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag actggagcct 240 gaggattttg cagtgtatta ctgtcaacag tatggtaggt caccattcac tttcggccct 300 gggaccaaag tagatatcaa gcgaactgtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360 tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420 cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540 ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600 ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 645 <210> 20 <211> 214 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 20 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Arg Ser Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 21 <211> 107 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 21 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Arg Ser Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys 100 105 <210> 22 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 22 Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 23 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 23 Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr 1 5 <210> 24 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 24 Gln Gln Tyr Gly Arg Ser Pro Phe Thr 1 5 <210> 25 <211> 1413 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 25 atggagtttg ggctgagctg ggttttcctc gttgctcttt taagaggtgt ccagtgtcag 60 gtgcagctgg tggagtctgg gggaggcgtg gtccagcctg ggaggtccct gagactctcc 120 tgtgcagcgt ctggattcac cttcagtagc tatggcatgc actgggtccg ccaggctcca 180 ggcaaggggc tggagtgggt ggcagttata tggtatgatg gaagtaataa atactatgca 240 gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtatctg 300 caaatgaaca gcctgagagc cgaggacacg gctgtgtatt actgtgcgag agatccgagg 360 ggagctaccc tttactacta ctactacggt atggacgtct ggggccaagg gaccacggtc 420 accgtctcct cagcctccac caagggccca tcggtcttcc ccctggcgcc ctgctccagg 480 agcacctccg agagcacagc ggccctgggc tgcctggtca aggactactt ccccgaaccg 540 gtgacggtgt cgtggaactc aggcgctctg accagcggcg tgcacacctt cccagctgtc 600 ctacagtcct caggactcta ctccctcagc agcgtggtga ccgtgccctc cagcaacttc 660 ggcacccaga cctacacctg caacgtagat cacaagccca gcaacaccaa ggtggacaag 720 acagttgagc gcaaatgttg tgtcgagtgc ccaccgtgcc cagcaccacc tgtggcagga 780 ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 840 gaggtcacgt gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ccgaggtcca gttcaactgg 900 tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cacgggagga gcagttcaac 960 agcacgttcc gtgtggtcag cgtcctcacc gttgtgcacc aggactggct gaacggcaag 1020 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaaggc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 1080 aaaaccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggaggag 1140 atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctaccc cagcgacatc 1200 gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac acctcccatg 1260 ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 1320 cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 1380 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa tga 1413 <210> 26 <211> 451 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 26 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Pro Arg Gly Ala Thr Leu Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met 100 105 110 Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr 115 120 125 Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser 130 135 140 Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu 145 150 155 160 Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His 165 170 175 Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser 180 185 190 Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys 195 200 205 Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu 210 215 220 Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala 225 230 235 240 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 245 250 255 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 260 265 270 Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 275 280 285 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe 290 295 300 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 305 310 315 320 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile 325 330 335 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 340 345 350 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser 355 360 365 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 370 375 380 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 385 390 395 400 Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 405 410 415 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 420 425 430 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 435 440 445 Pro Gly Lys 450 <210> 27 <211> 125 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 27 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Pro Arg Gly Ala Thr Leu Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met 100 105 110 Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 28 <211> 10 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 28 Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His 1 5 10 <210> 29 <211> 15 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 29 Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 1 5 10 15 <210> 30 <211> 16 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 30 Asp Pro Arg Gly Ala Thr Leu Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val 1 5 10 15 <210> 31 <211> 714 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 31 atggacatga gggtccccgc tcagctcctg gggctcctgc tactctggct ccgaggtgcc 60 agatgtgaca tccagatgac ccagtctcca tcctccctgt ctgcatctgt aggagacaga 120 gtcaccatca cttgccgggc aagtcagagc attaacagct atttagattg gtatcagcag 180 aaaccaggga aagcccctaa actcctgatc tatgctgcat ccagtttgca aagtggggtc 240 ccatcaaggt tcagtggcag tggatctggg acagatttca ctctcaccat cagcagtctg 300 caacctgaag attttgcaac ttactactgt caacagtatt acagtactcc attcactttc 360 ggccctggga ccaaagtgga aatcaaacga actgtggctg caccatctgt cttcatcttc 420 ccgccatctg atgagcagtt gaaatctgga actgcctctg ttgtgtgcct gctgaataac 480 ttctatccca gagaggccaa agtacagtgg aaggtggata acgccctcca atcgggtaac 540 tcccaggaga gtgtcacaga gcaggacagc aaggacagca cctacagcct cagcagcacc 600 ctgacgctga gcaaagcaga ctacgagaaa cacaaagtct acgcctgcga agtcacccat 660 cagggcctga gctcgcccgt cacaaagagc ttcaacaggg gagagtgtta gtga 714 <210> 32 <211> 214 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 32 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr 20 25 30 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Thr Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 33 <211> 107 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 33 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr 20 25 30 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Thr Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 34 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 34 Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr Leu Asp 1 5 10 <210> 35 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 35 Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser 1 5 <210> 36 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 36 Gln Gln Tyr Tyr Ser Thr Pro Phe Thr 1 5

Claims (24)

1. 환자의 암을 치료하는 방법으로서,

   치료를 필요로 하는 환자에게 치료상 유효량의 항-CTLA4 항체 또는 그의 항원-결합성 부분을 치료상 유효량의 인돌리논 수용체 티로신 키나제 억제제(RTKI)와 병용해서 투여하는 단계를 포함하는 암의 치료 방법.
2. 제 1 항에 있어서,

   상기 인돌리논 RTKI가 N-[2-다이에틸아미노]에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드, N-[2-(에틸아미노)에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드 및 5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-N-[(2S)-2-하이드록시-3-모폴린-4-일프로필]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염인 암의 치료 방법.
3. 제 2 항에 있어서,

   상기 RTKI가 N-[2-다이에틸아미노]에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드인 암의 치료 방법.
4. 제 3 항에 있어서,

   상기 N-[2-다이에틸아미노]에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드의 치료상 유효량의 범위가 1일당 약 25 ㎎ 내지 87.5 ㎎이고, 상기 N-[2-다이에틸아미노]에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드가 경구 투여되는 것인 암의 치료 방법.
5. 제 4 항에 있어서,

   상기 N-[2-다이에틸아미노]에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드의 치료상 유효량의 범위가 1일당 약 37.5 ㎎ 내지 50 ㎎인 암의 치료 방법.
6. 제 3 항에 있어서,

   상기 N-[2-다이에틸아미노]에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드가 매일 투여, 대략 4주 동안 매일 투여, 대략 4주 동안 매일 투여 후 약 2주간 휴지 기간을 둠, 대략 3주 동안 매일 투여 후 약 1주간 휴지 기간을 둠 및 대략 2주 동안 매일 투여 후 약 1주간 휴지 기간을 둠으로 이루어진 군으로부터 선택된 투약 요법에 따라 투여되는 암의 치료 방법.
7. 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서,

   상기 치료가 신보강 요법, 보강 요법, 1차 요법 및 2차 요법으로 이루어진 군으로부터 선택된 요법인 암의 치료 방법.
8. 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서,

   상기 인간 항-CTLA4 항체의 치료상 유효량의 범위가 약 0.1 ㎎/㎏ 내지 50 ㎎/㎏인 암의 치료 방법.
9. 제 8 항에 있어서,

   상기 인간 항-CTLA4 항체의 치료상 유효량의 범위가 약 0.3 ㎎/㎏ 내지 20 ㎎/㎏인 암의 치료 방법.
10. 제 9 항에 있어서,

    상기 인간 항-CTLA4 항체의 치료상 유효량의 범위가 적어도 1 ㎎/㎏, 적어도 3 ㎎/㎏, 적어도 6 ㎎/㎏, 적어도 10 ㎎/㎏ 및 적어도 15 ㎎/㎏으로 이루어진 군으로부터 선택되는 암의 치료 방법.
11. 제 10 항에 있어서,

    상기 항체가 28일마다 약 6 ㎎/㎏의 투여, 3개월마다 약 6 ㎎/㎏의 투여, 28 일마다 약 10 ㎎/㎏의 투여, 3개월마다 약 10 ㎎/㎏의 투여, 28일마다 약 15 ㎎/㎏의 투여 및 3개월마다 약 15 ㎎/㎏의 투여로 이루어진 군으로부터 선택된 투약 요법에 따라 투여되는 암의 치료 방법.
12. 제 5 항에 있어서,

    상기 N-[2-다이에틸아미노]에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드가 1일당 약 37.5 ㎎으로 투여되고, 상기 항-CTLA4 항체가 3개월마다 약 10 ㎎/㎏의 투여 및 3개월마다 약 15 ㎎/㎏의 투여로 이루어진 군으로부터 선택된 투약 요법에 따라 투여되는 암의 치료 방법.
13. 제 1 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 있어서,

    상기 암이 유방암, 전립선암, 난소암, 췌장암, 폐암, 급성 골수성 백혈병, 직장결장 암종, 콩팥 세포 암종, 위장관 기질성 종양 및 육종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 암의 치료 방법.
14. 제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 있어서,

    상기 항-CTLA4 항체 또는 그의 항원-결합성 부분이 하기 (a) 내지 (e)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 항체인 암의 치료 방법:

    (a) CTLA4에 대한 결합 친화도가 약 10^-8 이상이고, CTLA4와 B7-1과의 결합 및 CTLA4와 B7-2와의 결합을 억제하는 인간 항체;

    (b) 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무맙(ticilimumab), 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1 및 이필리무맙(ipilimumab)으로 이루어진 군으로부터 선택된 항체로부터 CDR 서열에 상응하는 하나 이상의 인간 CDR 서열을 포함하는 아미노산 서열을 갖는 인간 항체;

    (c) 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무맙, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1 및 이필리무맙으로 이루어진 군 중에서 선택된 항체의 중쇄 및 경쇄의 아미노산 서열을 갖는 인간 항체;

    (d) CTLA4와의 결합을 위해 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무맙, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1 및 이필리무맙으로 이루어진 군으로부터 선택된 항체의 중쇄 및 경쇄의 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 항체와 경쟁하는 항체, 또는 그의 항원-결합성 부분; 및

    (e) CTLA4와의 결합을 위해 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 티실리무맙, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1 및 이필리무맙으로 이루어진 군 중에서 선택된 항체의 중쇄 및 경쇄의 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 항체와 교차-경쟁하는 항체, 또는 그의 항원-결합성 부분.
15. 제 14 항에 있어서,

    상기 항체가 4.1.1, 4.13.1, 티실리무맙 및 이필리무맙으로 이루어진 군으로부터 선택된 항체의 중쇄 및 경쇄의 아미노산 서열을 가진 인간 항체인 암의 치료 방법.
16. 제 15 항에 있어서,

    상기 항체가 티실리무맙인 암의 치료 방법.
17. 제 14 항에 있어서,

    상기 항체 또는 그의 항원-결합성 부분이 중쇄 및 경쇄를 포함하되, 상기 중쇄의 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열 및 상기 경쇄의 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이 하기 (a) 내지 (g)로 이루어진 군으로부터 선택되는 암의 치료방법:

    (a) 서열번호 3의 아미노산 서열 및 서열번호 9의 아미노산 서열;

    (b) 서열번호 15의 아미노산 서열 및 서열번호 21의 아미노산 서열;

    (c) 서열번호 27의 아미노산 서열 및 서열번호 33의 아미노산 서열;

    (d) 서열번호 1의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열 및 서열번호 7의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열;

    (e) 서열번호 13의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열 및 서열번호 19의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열;

    (f) 서열번호 25의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열 및 서열번호 31의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열; 및

    (g) 이필리무맙의 아미노산 서열.
18. 제 14 항에 있어서,

    상기 항체 또는 그의 항원-결합성 부분이 하기 (a) 내지 (c)로 이루어진 군으로부터 선택된 항체인 암의 치료 방법:

    (a) 서열번호 4, 서열번호 5, 서열번호 6, 서열번호 10, 서열번호 11 및 서열번호 12에 기재된 아미노산 서열을 포함하는 항체;

    (b) 서열번호 16, 서열번호 17, 서열번호 18, 서열번호 22, 서열번호 23 및 서열번호 24에 기재된 아미노산 서열을 포함하는 항체; 및

    (c) 서열번호 28, 서열번호 29, 서열번호 30, 서열번호 34, 서열번호 35 및 서열번호 36에 기재된 아미노산 서열을 포함하는 항체.
19. 제 14 항에 있어서,

    상기 항체 또는 그의 항원-결합성 부분이 서열번호 27에 기재된 아미노산 서열을 가진 중쇄 가변 영역 및 서열번호 33에 기재된 아미노산 서열을 가진 경쇄 가변 영역을 포함하는 암의 치료 방법.
20. 제 14 항에 있어서,

    상기 항체가 하기 (a) 내지 (c)로 이루어진 군으로부터 선택되는 암의 치료 방법:

    (a) 서열번호 2 및 서열번호 8에 기재된 아미노산 서열을 포함하는 항체;

    (b) 서열번호 14 및 서열번호 20에 기재된 아미노산 서열을 포함하는 항체; 및

    (c) 서열번호 26 및 서열번호 32에 기재된 아미노산 서열을 포함하는 항체.
21. 제 1 항 내지 제 20 항 중 어느 한 항에 있어서,

    상기 항체가 상기 인돌리논 RTKI의 과정의 완료 후에 투여되고, 상기 환자에서의 면역 반응의 수준이 인돌리논 RTKI의 상기 과정 동안 혹은 해당 과정 직후 상기 환자에서의 면역 반응의 수준보다 높은 암의 치료 방법.
22. 제 21 항에 있어서,

    상기 항체가 인돌리논 RTKI의 상기 과정 후 약 1일 내지 100일 투여되는 암의 치료 방법.
23. 치료상 유효량의 항-CTLA4 항체 또는 그의 항원-결합성 부분, 치료상 유효량의 인돌리논 RTKI 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는, 암 치료용 약학 조성물.
24. 제 23 항에 있어서,

    상기 인돌리논 RTKI가 N-[2-다이에틸아미노]에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥 소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드, N-[2-(에틸아미노)에틸]-5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드 및 5-[(Z)-(5-플루오로-2-옥소-1,2-다이하이드로-3H-인돌-3-일리덴)메틸]-N-[(2S)-2-하이드록시-3-모폴린-4-일프로필]-2,4-다이메틸-1H-피롤-3-카복스아마이드로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염인 암 치료용 약학 조성물.

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