KR20070084063A

KR20070084063A - 심장 부전 치료에서의 좌심실 재형성의 역행을 위한 하나이상의 재형성제와 조합한 라놀라진의 용도

Info

Publication number: KR20070084063A
Application number: KR1020077010435A
Authority: KR
Inventors: 브렌트 블랙번; 하니 사바흐
Original assignee: 씨브이 쎄러퓨틱스, 인코포레이티드
Priority date: 2004-11-09
Filing date: 2005-11-09
Publication date: 2007-08-24
Also published as: RU2007121707A; ZA200703697B; WO2006053161A1; MX2007005367A; BRPI0517650A; SG156681A1; US20090176772A1; JP2008519770A; IL183056A0; CN101072562A; US20060111361A1; AU2005304421A1; CA2586840A1; WO2006053161A8; NO20072934L; EP1809289A1

Abstract

본 발명은 치료학적 유효량의 라놀라진 및 하나 이상의 조-재형성제 (이것은 ACE 억제제, ARB, 또는 베타-차단제일 수 있음) 의 병용 투여에 의한 좌심실 재형성의 역행 방법에 관한 것이다. 본 방법은 심장 부전의 치료에서 유용성을 발견한다. 본 발명은 또한 이러한 병용 투여에 적합한 약학 제형에 관한 것이다.

Description

심장 부전 치료에서의 좌심실 재형성의 역행을 위한 하나 이상의 재형성제와 조합한 라놀라진의 용도 {USE OF RANOLAZINE IN COMBINATION WITH AT LEAST ONE REMODELING AGENT FOR REVERSING LEFT VENTRICULAR REMODELING IN THE TREATMENT OF HEART FAILURE}

관련 출원에 대한 교차 참조

본 출원은 전체 명세가 참조로써 본원에 인용된 2004 년 11 월 9 일에 출원된 미국 가출원 제 60/626,154 호에 대한 우선권을 청구한다.

발명분야

본 발명은 치료학적 유효량의 라놀라진 및 하나 이상의 조-재형성제 (이것은 ACE 억제제, 안지오텐신 II 수용체 차단제 (ARB), 또는 베타-차단제일 수 있음) 의 병용 투여에 의한 좌심실 재형성의 역행 방법에 관한 것이다. 본 방법은 심장 부전의 치료에서 유용성을 발견한다. 본 발명은 또한 이러한 병용 투여에 적합한 약학 제형에 관한 것이다.

심장 부전은 산업화 사회에서의 사망 및 상해의 주 요인이다. 이것은 그 자체가 질환은 아니지만, 심장이 신체 조직 및 기관의 산소 요구를 충족시키기 위한 충분한 혈액 공급량을 펌프 해줄 수 없는 상태이다. 그 결과, 종종 유액이 심장 및 기타 기관, 예컨대 폐에 축적되고, 주변 조직 내에 퍼져 울혈성 심장 부전 (CHF) 을 야기한다. CHF 는 종종 관상동맥질환, 심근경색증, 심근병증, 심판막 이상 등과 같은 심혈관 문제의 증상이다.

심장 부전의 중요한 요소는 동반되는 좌심실의 재형성이다. 심장 근육이 작동하지 않고, 충분한 혈액 공급량을 펌프하는 능력을 잃어버리면, 심장, 더욱 특히 좌심실 (LV) 은 보상을 하기 위해 비대해진다. 상기 재형성 또는 비대의 범위는 심장 부전 환자, 특히 CHF 환자에서 증가된 사망률과 관련되어 왔다.

특정 베타-차단제 및 안지오텐신 전환 효소 또는 "ACE" 억제제는 LV 재형성의 진행을 느리게 하고, 심지어 역행시킨다고 제시되어 있다. 그러나, 상기 작용제 둘 다는 바람직하지 않은 부작용을 갖고, 이것은 투여량을 제한한다. 또한, 역 재형성을 유도하는 상이한 베타-차단제의 능력 사이에 상당한 변이가 있다. 그러므로, 역 LV 재형성을 증가시키는 방법을 제공하기 위한 필요가 있다. 이제 라놀라진 및 조-재형성제의 투여가 바람직하지 않은 좌심실 재형성의 역행을 상승적으로 향상시킨다는 것을 발견하였다.

발명의 개요

본 발명의 한 구현예에서, 바람직하지 않은 좌심실 재형성의 역행 방법이 제공된다. 상기 방법은 치료학적 유효량의 라놀라진 및 치료학적 유효량의 하나 이상의 조-재형성제를 이를 필요로 하는 포유류에 공동투여하는 것을 포함한다. 조-재형성제는 ACE 억제제, ARB, 또는 베타-차단제일 수 있다. 상기 방법은 울혈성 심장 부전 (CHF) 및/또는 만성 심장 부전의 치료에 사용하기에 적합하다. 라놀라진 및 조-재형성제는 별도 투여 형태로 투여할 수 있고, 또는 단일 투여 형태로 투여할 수 있다.

본 발명의 또다른 구현예에서, 약학 제형은 치료학적 유효량의 라놀라진, 치료학적 유효량의 하나 이상의 조-재형성제, 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하여 제공된다.

본 발명의 또다른 구현예에서, 포유류에서의 심장 부전의 치료 방법이 제공된다. 방법은 치료학적 유효량의 라놀라진 및 치료학적 유효량의 하나 이상의 조-재형성제를 이를 필요로 하는 포유류에 공동투여하는 것을 포함한다. 방법은 울혈성 심장 부전 (CHF) 및/또는 만성 심장 부전의 치료에 사용하기에 적합하다. 라놀라진 및 조-재형성제는 별도 투여 형태로 투여할 수 있고, 또는 단일 투여 형태로 투여할 수 있다.

도 1 은 확장기말용적과 관련된 라놀라진, 라놀라진 및 에날라프릴, 및 라놀라진 및 메토프로롤 타르트레이트의 비교 연구의 결과를 그래프로 묘사한다. 에날라프릴 및 메토프로롤 타르트레이트에 대한 기존의 데이터도 또한 제시된다.

도 2 는 수축기말용적과 관련된 라놀라진, 라놀라진 및 에날라프릴, 및 라놀라진 및 메토프로롤 타르트레이트의 비교 연구의 결과를 그래프로 묘사한다. 에날라프릴 및 메토프로롤 타르트레이트에 대한 기존의 데이터도 또한 제시된다.

발명의 상세한 설명

정의 및 일반적 파라미터

본 명세서에 사용된 바와 같은 다음 단어 및 구는 이들이 사용되는 문맥이 다르게 지시된 범위를 제외하고는, 일반적으로 하기 언급되는 바와 같은 의미를 갖는 것으로 의도된다.

"임의의" 또는 "임의로" 는 이어서 기재된 사건 또는 상황이 일어날 수도 있고, 또는 일어나지 않을 수도 있으며, 명세서에 상기 사건 또는 상황이 일어나는 예 및 일어나지 않는 예가 포함되는 것을 의미한다.

용어 "ACE 억제제" 는 안지오텐신 전환 효소를 억제하여, 안지오텐신 I 의 안지오텐신 II 로의 전환을 감소시킬 수 있는 작용제를 말한다. 보완적인 작용으로서, ACE 억제제는 또한 브래디키닌의 분해를 감소시킨다. 적합한 ACE 억제제에는 베나제프릴, 카프토프릴, 실라자프릴, 에날라프릴, 포시노프릴, 이미다프릴, 리시노프릴, 페린도프릴, 퀴나프릴, 라미프릴, 테모카프릴, 및 트란도라프릴이 포함되나, 이에 한정되는 것은 아니다.

용어 "ARB" 는 안지오텐신 II 수용체 차단제인 작용제를 말하고, 또한 안지오텐신 길항제로서 언급된다. ACE 억제제와 같이, ARB 는 안지오텐신 II 를 감소시키지만, ACE 억제제가 하는 것과 같이 폐 내의 혈류 대신 세포 벽에서 이를 행하여, 좀 더 전신적 방식으로 작용한다. 적합한 ARB 에는 칸데사르탄, 실렉세틸, 에프로사르탄, 이베사르탄, 로사르탄, 올메사르탄, 메독소밀, 텔미사르탄, 발사르탄, 졸라사르탄, 및 타소사르탄이 포함되나, 이에 한정되는 것은 아니다.

용어 "베타-차단제" 는 베타-아드레날린성 수용체에 결합하여 베타-아드레날 린성 자극의 효과를 억제하는 작용제를 말한다. 베타-차단제는 AV 결절 전도를 증가시킨다. 또한, 베타-차단제는 심박수를 조절하는 시냅스 후 신경 말단에 대한 노르에피네프린의 효과를 차단하여 심박수를 감소시킨다. 베타 차단제는 또한 부한된 세포내 Ca++ 을 감소시키고, 이것은 탈분극-후 매개된 자율성을 억제한다. 베타-차단제의 예에는 아세부토롤, 아테노롤, 베탁소롤, 비소프로롤, 카르테오롤, 라베타롤, 메토프로롤, 나도롤, 옥스프레노롤, 펜부토롤, 핀도롤, 프로프라노롤, 소타롤, 티모롤, 에스모롤, 소타롤, 카르베디롤, 메드록사롤, 부신도롤, 레보부노롤, 메티프라노롤, 셀리프로롤, 및 프로파페논이 포함되나, 이에 한정되는 것은 아니다.

"비경구 투여" 는 환자에게 주사를 통한 치료제의 전신전 전달이다.

용어 "치료학적 유효량" 은 하기 정의되는 바와 같이, 이러한 치료를 필요로 하는 포유류에 투여하는 경우, 치료를 달성하기에 충분한 화학식 I 의 화합물의 양을 말한다. 치료학적 유효량은 사용되는 치료제의 특정 활성, 환자의 질환 상태의 경중도, 연령, 물리적 상태, 기타 질환 상태의 존재, 및 환자의 영양상태에 따라 다를 것이다. 부가적으로, 환자가 수여받을 수 있는 기타 약물은 투여자에 대한 치료제의 치료학적 유효량의 결정에 영향을 미칠 것이다.

용어 "치료" 또는 "치료함" 은 하기를 포함하는, 포유류에서의 질환의 임의의 치료를 의미한다:

(i) 질환의 예방, 즉, 질환의 임상 증상이 발달되지 않게 함;

(ii) 질환의 억제, 즉 임상 증상의 발달의 저지; 및/또는

(iii) 질환의 경감, 즉, 임상 증상의 퇴보를 야기함.

본원에서 사용되는 바와 같은, "약학적으로 허용가능한 담체" 에는 임의의 및 모든 용매, 분산 매질, 코팅, 항박테리아제 및 항진균제, 등장성 작용제 및 흡수지연제 등이 포함된다. 약학적으로 활성인 성분에 대한 이러한 매질 및 작용제의 사용은 당업계에 잘 공지된다. 임의의 통상적인 매질 또는 작용제가 활성 성분과 부적합한 경우를 제외하고는, 치료적 조성물에서의 그의 용도가 계획된다. 보충의 활성 성분을 또한 조성물 내에 혼입할 수 있다.

용어 "바람직하지 않은 좌심실 재형성" 은 심방 크기, 벽 두께, 및 좌심실의 기타 면적 변화의 변형 및 감소된 확장 및/또는 수축 수행에 의해 증명될 수 있는 심근 손상에 반응하여 일어나는 좌심실에 대한 임의의 기타 변화를 말한다.

발명의 방법

본 발명은 바람직하지 않은 좌심실 재형성의 역행 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 치료학적 유효량의 라놀라진 및 치료학적 유효량의 하나 이상의 조-재형성제를 이를 필요로 하는 포유류에 공동투여하는 것을 포함한다. 조-재형성제는 ACE 억제제, ARB, 또는 베타-차단제일 수 있다. 상기 방법은 울혈성 심장 부전 (CHF) 및/또는 만성 심장 부전의 치료에 사용하기에 적합하다.

라놀라진 및 조-재형성제는 별도 투여 형태로 투여할 수 있고, 또는 단일 투여 형태로 투여할 수 있다. 별도 투여 형태로서 투여하는 경우, 개별 성분을 임의의 순서로 투여할 수 있고, 동시에 또는 엇갈리게 섭취할 수 있다.

라놀라진 (±)-N-(2,6-디메틸페닐)-4-[2-히드록시-3-(2-메톡시페녹시)-프로 필]-1-피페라진아세트아미드는 협심증의 치료를 위해 현재 임상 실험이 진행되고 있는 항허혈제이다. 화합물 그 자체는 그의 명세서가 본원에 참조로서 인용되는 미국 특허 제 4,567,264 호에 기재되어 있다. 라놀라진의 지효성 제형이 바람직하고, 미국 특허 제 6,503,911 호, 제 6,369,062 호 및 제 6,617,328 호에 기재되어 있다.

심장 부전의 치료에 이점을 제공하는 라놀라진의 능력은 이전에 미국 특허 제 6,528,511 호 및 제 6,528,511 호 및 [Sabbah et al. (2002) J. Card . Fail, 8(6):416-22] 에 기재되어 있다. 상기 참조에서 심장 부전의 치료에의 라놀라진의 용도는 LV 작용을 개선하는 화합물의 능력에 의해 지지된다. 그러나, 본 발명 전에, 조-재형성제와 함께 투여된 경우, 역 LV 재형성을 유도하는 화합물의 상승적 능력은 공지되지 않았다.

라놀라진 및 공동투여된 작용제는 유사한 유용성을 갖는 작용제의 임의의 허용된 투여 방식에 의해, 예를 들어 참조로서 인용된 특허 및 특허 출원에서 기재된 바와 같이, 구강을 포함하여, 동맥내 주사에 의해, 정맥내, 복막내, 비경구, 근육내, 피하, 경구로, 또는 함침된 또는 코팅된 장치 예컨대 스텐트, 예를 들어, 또는 동맥-삽입 원통형 중합체를 통해, 단일 또는 복수 투여량으로 환자에게 제공될 수 있다.

한가지 투여 방식은 비경구, 특히 주사에 의한 것이다. 본 발명의 신규 조성물이 주사에 의한 투여를 위해 혼입될 수 있는 형태에는 참깨유, 옥수수유, 면화씨유, 또는 땅콩유 뿐 아니라, 엘릭시르, 만니톨, 덱스트로스, 또는 멸균 수용액 및 유사한 약학적 부형제와 함께 수성 또는 유성 현탁액, 또는 에멀션이 포함된다. 식염수 중의 수용액은 또한 주사를 위해 통상적으로 사용되지만, 본 발명의 문맥에서는 덜 바람직하다. 에탄올, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 액체 폴리에틸렌 글리콜 등 (및 그의 적합한 혼합물), 시클로덱스트린 유도체, 및 식물유를 또한 사용할 수 있다. 적합한 유동성은 예를 들어, 코팅, 예컨대 레시틴의 사용에 의해, 분산액의 경우 필요한 입자 크기의 유지에 의해, 및 계면활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다. 미생물 작용의 방지는 다양한 항박테리아제 및 항진균제, 예를 들어, 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 소르브산, 티메로살 등에 의해 야기할 수 있다.

멸균 주사가능 용액은 적합한 용매 내에 필요한 양의 성분을 상기 열거된 바와 같은 다양한 기타 성분과 함께 혼입하고, 필요한 경우, 여과 멸균하여 제조한다. 일반적으로, 분산액은 다양한 멸균된 활성 성분을, 염기성 분산 매질 및 상기 열거된 것들로부터 필요한 다른 성분을 함유하는 멸균 부형제 내에 혼입하여 제조한다. 멸균 주사가능 용액의 제조용 멸균 분말의 경우, 바람직한 제조 방법은 활성 성분의 분말에 더해 이전의 그의 멸균-여과된 용액으로부터 임의의 부가적인 바람직한 성분을 산출하는 진공-건조 및 동결-건조 기술이다.

경구 투여는 성분의 투여를 위한 또다른 경로이다. 투여는 캡슐 또는 장용 코팅 정제 등을 통해 이뤄질 수 있다. 라놀라진 및 하나 이상의 공동투여되는 작용제를 포함하는 약학 조성물의 제조에서, 활성 성분은 통상적으로 부형제에 의해 희석되고/거나 캡슐, 사켓, 종이 또는 기타 용기의 형태일 수 있는 담체 내에 둘러싸진다. 부형제가 희석제로서 역할을 하는 경우, 이것은 고체, 반고체, 또는 액체 물질 (상기와 같음) 일 수 있고, 활성 성분을 위한 전달체, 담체 또는 매질로서 작용한다. 그러므로, 조성물은 정제, 알약, 분말, 마름모꼴 정제, 향낭, 교갑, 엘릭시르, 현탁액, 에멀션, 용액, 시럽, 에어로졸 (고체로서 또는 액체 매질 내에), 예를 들어, 10 중량% 이하의 활성 화합물을 함유하는 연고, 연질 및 경질 젤라틴 캡슐, 멸균 주사가능 용액 및 멸균 포장된 분말의 형태일 수 있다.

적합한 부형제의 일부 예에는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 소르비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 검, 인산칼슘, 알기네이트, 트래거캔스 고무, 젤라틴, 칼슘 실리케이트, 미세결정성 셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로오스, 멸균수, 시럽 및 메틸 셀룰로오스가 포함된다. 제형은 부가적으로: 윤활제, 예컨대 탈크, 마그네슘 스테아레이트, 및 광유; 습윤제; 유화제 및 부유제; 방부제, 예컨대 메틸- 및 프로필히드록시-벤조에이트; 감미제; 및 풍미제를 포함할 수 있다.

본 발명의 조성물은 당업계에 공지된 공정을 사용하여 환자에게 투여 후 활성 성분의 빠른, 지속된 또는 지연된 방출을 제공하도록 제형화될 수 있다. 상기 논의된 바와 같이, 감소된 생체이용률의 라놀라진이 제공되는, 지효성 제형이 일반적으로 바람직하다. 경구 투여를 위한 서방성 약물 전달 시스템에는 중합체-코팅된 저장소 또는 약물-중합체 매트릭스 제형을 함유하는 삼투압 펌프 시스템 및 용해 시스템이 포함된다. 서방성 시스템의 예는 미국 특허 제 3,845,770 호; 제 4,326,525 호; 제 4,902,514 호; 및 제 5,616,345 호에 제시된다.

조성물은 바람직하게는 단위 투여 형태로 제형화된다. 용어 "단위 투여 형태" 는 인간 대상 및 기타 포유류에 대한 단일 투여량으로서 적합한 물리적으로 분리된 단위를 말하고, 각 단위는 원하는 치료 효과를 생성하기 위해 계산된 소정량의 활성 물질을 적합한 약학 부형제와 함께 함유한다 (예, 정제, 캡슐, 앰플). 본 발명의 활성제는 넓은 투여량 범위에 걸쳐 효과적이고, 일반적으로 약학적 유효량으로 투여된다. 그러나 사실상 투여되는 각 활성제의 양은 치료되는 상태, 선택된 투여 경로, 투여되는 실제 화합물 및 그의 관련된 활성, 연령, 체중, 개개인 환자의 반응, 환자의 증상의 경중도 등을 포함하여, 관련된 상황의 견지에서, 내과 의사에 의해 결정될 것임이 이해될 것이다.

고체 조성물, 예컨대 정제의 제조를 위해, 주요 활성 성분을 약학 부형제와 혼합하여, 본 발명의 화합물의 균질 혼합물을 함유하는 고체 예비제형 (preformulation) 조성물을 형성한다. 상기 예비제형 조성물이 균질한 것으로 언급되는 경우, 이것은 활성 성분이 조성물 전반에 걸쳐 고르게 분산되어, 조성물이 동일하게 효과적인 단위 투여 형태, 예컨대 정제, 알약 및 캡슐로 쉽게 세분될 수 있는 것을 의미한다.

본 발명의 정제 또는 알약을 코팅하거나 그렇지 않으면, 조제하여, 연장된 작용의 이점을 제공하는 투여 형태를 제공하거나, 위의 산성 조건으로부터 보호한다. 예를 들어, 정제 또는 알약은 내부 투여량 및 외부 투여량 요소를 포함할 수 있고, 후자는 전자를 덮는 봉투의 형태이다. 라놀라진 및 공동투여된 작용제는 위에서의 붕괴에 저항하고, 내부 요소를 십이지장 내로 손상되지 않게 통과시키거나, 방출을 지연시키는 역할을 하는 장용 층에 의해 분리될 수 있다. 다양 한 물질을 이러한 장용 층 또는 코팅을 위해 사용할 수 있고, 이러한 물질에는 다수의 중합체성 산 및 중합체성 산과 셸락, 세틸 알코올, 및 셀룰로오스 아세테이트와 같은 물질과의 혼합물이 포함된다.

하기 실시예는 본 발명의 바람직한 구현예를 나타내기 위해 포함된다. 하기 실시예에 기재된 기술은 발명의 실시에 잘 작용하기 위해 발명자에 의해 발견된 기술을 나타내고, 그러므로 그의 실시에 대한 바람직한 방식을 구성하는 것으로 고려할 수 있다는 것이 당업자에 의해 인정되어야만 한다. 그러나, 당업자는 본 명세서의 견지에서, 기재된 특정 구현예에 많은 변형이 이뤄질 수 있고, 또한 본 발명의 취지 및 범주로부터 벗어남 없이 유사한 또는 비슷한 결과를 수득할 수 있다는 것을 인정해야 한다.

본 발명의 베타 차단제, ACE 억제제, 및 ARB 는 당업계에 잘 공지되어 있고, 시판된다. 라놀라진은 전체 명세서가 본원에 참조로서 인용된 미국 특허 제 4,567,264 호에 기재된 방식과 같은 통상적인 방법에 의해 제조할 수 있다.

실시예 1

하기 실시예는 복합 연속 관동맥내 (intracoronary) 마이크로색전술에 의해 생성된 만성 심장 부전 개에서의 좌심실 (LV) 기능장애 및 LV 심방 재형성의 진행에 대한, 라놀라진 단독 및 안지오텐신 전환 효소 (ACE) 억제제와의 병용 및 베타-차단제와의 병용의 효과를 시험한다.

동물 준비

개에서의 만성 LV 기능장애 및 부전을 [Sabbah et al. (1991) Am. J. Physiol. 260:H1379-H1384] 에 의해 이전에 기재된 바와 같이 폴리스티렌 라텍스 마이크로스피어 (직경 77-109 μm) 로의 복합 연속 관동맥내 색전술에 의해 생성하였다. 일반적 마취 및 멸균 조건하에서 심장 카테터삽입 동안 관동맥 마이크로색전술을 수행하였다. 히드로모르폰 (0.22 mg/kg), 디아제팜 (0.2-0.6 mg/kg) 및 나트륨 펜토바르비탈 50-100 mg 의 정맥내 주사의 조합을 사용하여 마취를 유도하여 수행하였다. 마취면을 1% 내지 2% 이소플루란을 사용하여 연구 내내 유지하였다. 좌 및 우 심장 카테터삽입을 대퇴부 동맥절개 및 정맥절개를 통해 수행하였다. 각 카테터삽입 후, 6-0 실크를 사용하여 혈관을 복구하고, 피부를 4-0 봉합으로 봉했다. 혈관조영술로 측정된 LV 박출율이 30% 내지 40% 일 때, 마이크로색전술을 중지하였다. 마지막 색전술 후 2 주의 기간을 두어, 마지막 마이크로색전술에 의해 생성된 경색이 완전히 치유되고 심장 부전이 성립된 것을 확실하게 하였다. 그 다음 연구 프로토콜을 수행하였다.

연구 동물

체중 19 내지 25 kg 의 건강한, 조건화된, 목적-사육된 잡종개.

연구 프로토콜

무작위, 블라인드식, 플라시보 대조된 연구 디자인을 사용하였다. 총 28 마리의 개를 상기 기재한 바와 같이 복합 연속 관동맥내 마이크로색전술을 시행하여, 만성 심장 부전을 생성하였다. 마지막 색전술 2 주 후, 개를 무작위로 4 연구 그룹 (처리 팔) 으로 나누었다. 개를 무작위로 라놀라진 단독 (375 mg, 비드, n=7), 라놀라진 (375 mg 비드) 과 메토프로롤 타르트레이트 (25 mg 비드, n=7) 의 병용, 라놀라진 (375 mg 비드) 과 에날라프릴 (10 mg 비드, n=7) 의 병용, 또는 플라시보 (라놀라진 전달체 비드, n=7) 로 3 개월 경구 치료법에 적용하였다. 랜덤화 (마지막 색전술 2 주 후) 전에 혈류역학, 혈관조영술, 심장초음파검사, 도플러 (Doppler) 및 신경호르몬 측정을 수행한 후, 치료법을 완료하였다 (치료법 개시 3 개월 후). 마지막 혈류역학 및 혈관조영술 연구 완료 후, 개를 안락사시키고, 심장을 제거하고, 향후 조직학적 및 생화학적 평가를 위해 조직을 준비하고 저장하였다. 연구의 1 차 및 2 차 종점은 하기와 같았다:

1 차 종점

혈관조영술로 측정된 LV 박출율의 평가에 기반한 진행성 LV 기능장애의 예방 또는 약화.

혈관조영술로 측정된 LV 확장기말용적 및 LV 수축기말용적의 측정에 기반한 진행성 LV 재형성의 예방 또는 약화.

2 차 종점

1) LV 피크 -dP/dt, 2) 초기 이완의 LV 시간 상수 (Tau), 3) 승모판막 속도 PE/PA, 및 4) LV 확장기말 주위벽부하 (wall stress) 의 평가에 기반한 진행성 LV 확장기 기능장애의 예방 또는 약화.

심근세포 비대의 약화 정도, 대체 섬유증의 용적 분획, 사이질 섬유증의 용적 분획, 모세혈관 밀도 및 산소 확산 거리.

혈장 신경호르몬 (혈장 노르에피네프린 (PNE), 혈장 레닌 활성 (PRA) 및 혈 장 심방 나트륨이뇨인자 (ANF) 의 순환 수준의 변화 뿐 아니라 심근관통 혈장 노르에피네프린의 변화 (동맥에서 관상 정맥동 차이).

혈류역학 측정

마취된 개에서의 좌 및 우 심장 카테터삽입 동안, 모든 혈류역학 측정을 수행하였다. 임의의 마이크로색전술 전에, 기준선 측정을 하여, 모든 혈류역학 파라미터가 정상 한계 내에 있는 것을 확실히 하였다. 비정상 개는 연구에서 제외하였다. 하기 파라미터를 모든 개에서 모든 3 회 연구 시간 기간에 측정하였다: 심박수, 평균 대동맥압, 등용성 수축 (피크 +dP/dt) 및 이완 (피크 -dP/dt) 동안의 LV 압의 피크 변화율, 및 LV 확장기말압.

심실조영술 측정

혈류역학 측정 완료 후 심장 카테터삽입 동안 좌 심실조영술을 수행하였다. 심실조영술을 개의 우측 편에 두고 수행하였고, 20 ml 의 대조 물질 (RENO-M-60, Squibb Diagnostics) 의 파워 주사 동안, 초 당 30 프레임에서 35 mm 영화에 기록하였다. LV 의 평면에 위치한 방사선 불투과성 격자를 사용하여 이미지 확대에 대한 보정을 하였다. 면적 길이법 (4) 을 사용하는 혈관조영술 실루엣으로부터 LV 수축기말 및 확장기말용적을 계산하였다. 조기 박동 및 기외수축후 박동은 임의의 분석에서 제외하였다. LV 박출율을 확장기말 및 수축기말용적의 차이 대 확장기말용적의 비 × 100 으로서 계산하였다. 일회박출량을 LV 확장기말 및 수축기말용적 사이의 차이로서 계산하였다. 심박출량을 일회박출량 × 심박수로서, 및 심박출계수를 심박출량 ÷ 체표면적으로서 계산하였다.

심장초음파검사 및 도플러 측정

심장초음파검사 및 도플러 연구를 3.5 MHZ 변환기의 77030A 초음파 시스템 (Hewlett-Packard) 을 사용하여 모든 특정화된 연구 시간에 모든 개에서 수행하였다. 우측 옆으로 누운 자세로 위치된 개에서 모든 심장초음파검사 측정을 수행하였고, 수반되는 오프라인 분석을 위해 Panasonic 6300 VHS 레코더에 기록하였다. LV 유두근의 수평면에서 횡 2-차원 심장초음파상을 수득하였고, 단축 LV 분획 영역을 계산하기 위해 사용하였다. 후자를 (확장기말 LV 공동 면적 - 수축기말 공동 면적) ÷ 확장기말 공동 면적 × 100 으로서 계산하였다. 또한 2 심실도 2-차원 심장초음파상을 LV 장 및 단 반축을 확인하기 위해 수득하였고, LV 확장기말 주위벽부하의 계산에 사용하였다. 벽부하는 하기와 같이 계산하였다: 부하 = Pb/h(1-h/2b)(1-hb/2a2), 여기서 P 는 LV 확장기말압이고, a 는 LV 장 반축이고, b 는 LV 단 반축이고, h 는 LV 벽 두께이다.

승모판 유입 속도를 간헐파형 도플러 심장초음파검사에 의해 측정하였다. 속도 파형을 사용하여, 초기 확장기에서의 피크 승모판 흐름 속도 (PE), LA 수축 동안의 피크 승모판 유입 속도 (PA), PE 대 PA 의 비 및 초기 승모판 유입 감속 시간을 계산하였다. 기능적 승모판 역류 (MR) 의 존재 또는 부재를 심첨 2-심실 및 심첨 4-심실도 둘 다를 사용하는 도플러 색상 흐름 맵핑 (Hewlett-Packard model 77020A Ultrasound System) 으로 결정하였다. 존재하는 경우, 기능적 MR 의 경중도를 역류 분사 면적 대 좌심방의 면적의 비 × 100 에 기반하여 정량화하였다. 그 다음 두 가지 도로부터 계산된 비를 평균내어, 기능적 MR 의 경중도 의 단일 대표적 측정치를 수득하였다.

혈액 신경호르몬 및 전해질 측정

혈류역학 평가를 보완하기 위해 여러 신경호르몬의 혈장 농도의 평가를 수행하였다. 혈류역학 및 혈관조영 평가를 위해 기재된 각 연구 시간 기간에 측정을 수행하였다. 심장 카테터삽입 동안 상향 대동맥 및 관상정맥동으로부터 혈액 샘플을 수득하여 심근관통 PNE 농도를 추정하였다. 심근관통 PNE 를 두 샘플 간의 차이로서 계산하였다. 의식이 있는 개로부터 정맥 혈액 샘플을 이중으로 수득하고, 방사면역검정법을 사용하는 노르에피네프린, 혈장 레닌 활성 및 혈장 심방 나트륨이뇨인자의 혈장 농도의 측정을 위한 심장 카테터삽입을 하였다. 또한, 혈청 전해질 (Na+, K+, 크레아티닌 및 BUN) 의 측정을 위해 동일한 시간 간격에 혈액 샘플을 수득하였다.

조직형태계측 평가

희생 당일, 모든 혈류역학 및 혈관조영술 연구의 완료 후, 개의 흉부를 좌측 개흉술을 통해 개방하고, 심장막을 개방하여 심장을 빠르게 제거하고 빙냉의, Tris 완충액 (pH 7.4) 에 두었다. LV 로부터 3 개의 2 mm 두께의 횡절단을; 한 절단은 기저부, 한 절단은 중간부 및 한 절단은 심첨부로부터 수득하고, 10% 포르말린에 두었다. 또한 경벽 블록을 수득하고, 이소펜탄에서 빠르게 얼리고, 액체 질소에 의해 -160℃ 로 냉각시키고, 필요할 때까지 -70℃ 에 저장하였다. 또한 LV 조직 샘플을 수득하고, 향후 주사 및 전자전달현미경 연구를 위해 글루테르알데히드에 저장하였다.

각 심실로부터, 3 개의 횡절단을 LV 의 기저부, 중간부 및 심첨부로부터 한 절단씩, 각각 대략 3 mm 두께로 수득하였다. 비교를 위해, 7 마리의 정상 개로부터의 조직 샘플을 수득하고 동일한 방식으로 준비하였다. 각 횡절단으로부터, 경벽 조직 블록을 수득하고 파라핀 블록에 함침시켰다. 각 블록으로부터, 6 μm 두께의 섹션을 준비하고, 고모리 트리크롬 (Gomori trichrome) 으로 염색하여, 섬유 조직을 확인하였다. 대치 섬유증의 용적 분획 즉, 모든 3 가지 횡 LV 절단 내의 생존가능한 조직에 대한 상처 조직의 비를, 컴퓨터-기반 비디오 농도계측기 (MOCHA, Jandel Scientific, Corte Madera, CA) 를 사용하여 섬유 조직에 의해 점유되는 총 표면적 % 로서 계산하였다. LV 가 없는 벽 조직 블록을 두번째 중간-심실 횡절단으로부터 수득하여, Tissue-Tek 함침 매질 (Sakura, Torrance, CA) 을 사용하여 코르크 상에 고정하고, 이소펜탄에서 빠르게 얼리고, 액체 질소에서 미리 냉각시키고, 사용할 때까지 -70℃ 에 저장하였다. 대략 8 μm 두께의 저온유지 섹션을 각 블록으로부터 준비하고, 3.3 U/ml 뉴로아미니다제 유형 V (Sigma Chemical Co., St. Louis. MO) 으로 전처리 후, 플루오레세인-표지된 땅콩 응집소 (Vector Laboratories Inc., Burlingame, CA) 로 염색하여, 근육세포 경계 및 모세혈관을 포함하는 사이질 공간을 묘사하였다 (5). 섹션을 로다민-표지된 그리포니아 심플리시폴리아 (Griffonia simplicifolia) 렉틴 I (GSL-I) 으로 2 중 염색하여, 모세혈관을 확인하였다. 분석을 위해 각 섹션으로부터 10 방사 배향의 현미경 필드 (배율 ×100, 대물 ×40, 및 접안 2.5) 를 무작위로 선택하였다. 상처 조직을 함유하는 필드 (경색증) 를 배제하였다. 컴퓨터-보조 면적 측정 을 사용하여 각 개에 대해 평균 근육세포 횡-단면적을 계산하였다. 사이질 공간에 의해 점유되는 총 표면적 및 모세혈관에 의해 점유되는 총 표면적을 컴퓨터-기반 비디오 농도계측기 (MOCHA, Jandel Scientific, Corte Madera, CA) 를 사용하여 각각의 무작위로 선택된 필드로부터 측정하였다. 사이질 콜라겐의 용적 분획을 사이질 공간에 의해 점유되는 총 표면적 % - 모세혈관에 의해 점유되는 총 면적 % 로서 계산하였다 (5). 모세혈관 밀도를 mm2 당 모세혈관의 수로서 계산하였다. 산소 확산 거리를 두 연접 모세혈관 사이의 거리의 반으로서 계산하였다. 비교를 위해, 7 마리의 정상 개로부터 수득된 LV 조직을 사용하여 동일한 측정을 수행하였다.

통계적 분석

모든 연구 측정이 기준선에서 유사하다는 것을 확실히 하기 위해, 임의의 색전술 전 모든 4 개 연구 그룹 및 치료법 개시 전 무작위화 시점 사이에 비교를 수행하였다. 상기 비교를 위해, 일방 변량 분석 (ANOVA) 을 0.05 에서 α 값으로 사용하였다. 유의성이 획득되는 경우, p ≤ 0.05 에서 유의성 값으로 스튜던트-뉴만-쿠엘 (Student-Newman-Kuels) 검정을 사용하여 그룹 방식 비교를 수행하였다. 유의한 것으로 간주된 p < 0.05 로의 스튜던트 쌍 t-검정을 사용하여 처리-전 및 처리-후 측정 사이의 그룹내 비교를 측정하였다. 치료 효과를 평가하기 위해, 처리-전에서 처리-후까지의 각 측정치에 대한 변화 (Δ) 를 4 개 연구 팔 각각에 대해 계산하였다. 그룹 사이에 Δ 에서의 유의한 차이가 존재하는 지의 여부를 결정하기 위해, ANOVA 를 0.05 에서 α 값으로 사용하였다. 유의성이 획득되는 경우, p ≤ 0.05 에서 유의성 값으로 스튜던트-뉴만-쿠엘 검정을 사용하여 그룹 방식 비교를 수행하였다. 모든 데이터는 평균 ± SEM 으로 보고된다.

기준선 측정

임의의 마이크로색전술 전에 수득된 기준선 혈류역학, 심실조영술, 심장초음파검사, 도플러 및 혈장 신경호르몬 및 전해질 측정은 표 1 내지 4 에 제시된다. 임의의 기준선 측정에서 4 개의 연구 그룹 사이에 유의한 차이가 없었다.

처리-전 측정

무작위화 또는 그 시점에 수득된 혈류역학, 심실조영술, 심장초음파검사, 도플러 및 혈장 신경호르몬 및 전해질 측정은 표 5 내지 8 에 에 제시된다. 임의의 처리-전 측정에서 4 개의 연구 그룹 사이에 유의한 차이가 없었다.

그룹-내 비교 - 플라시보 (표 5-8)

플라시보에 대해 무작위화한 개에서, 처리-전 및 처리-후 사이의 심박수, 평균 대동맥압 및 LV 확장기말압에는 차이가 없었다. 그러나, LV 피크 +dP/dt 및 -dP/dt 둘 다는 유의하게 감소하였다. 상기 연구 그룹에서, LV 확장기말용적 및 수축기말용적은 처리 3 개월 종료시에 유의하게 증가한 반면, LV 박출율 및 일회박출량은 유의하게 감소하였다. 심박출량 및 심박출계수는 또한 감소하는 경향이 있으나, 감소는 통계적 차이에 도달하지 않았다. 심장초음파검사 및 도플러 결과는 단축 LV 분획 면적에서 유의한 감소를 나타내었고, 승모판 유입 PE/PA 비 및 감속 시간은 기능 승모판 역류의 경중도 및 LV 확장기말 주위벽부하에서 유의한 증가를 보였다. 혈장 신경호르몬 및 전해질에는 유의한 차이가 없었다.

그룹-내 비교 - 라놀라진 단독 (표 5-8)

라놀라진으로의 단일요법에 대해 무작위화한 개에서, 심박수, 평균 대동맥압, LV 피크 +dP/dt 및 피크 -dP/dt 에는 차이가 없었으나, LV 확장기말압은 유의하게 감소하였다. 상기 연구 그룹에서, LV 확장기말용적 및 수축기말용적은 처리 3 개월 종료시에 변하지 않은 채로 남아 있었던 반면, LV 박출율, 일회박출량 및 심박출계수는 유의하게 증가하였다. 심박출량은 또한 증가하는 경향이 있으나, 증가는 통계적 차이에 도달하지 않았다. 심장초음파검사 및 도플러 결과는 단축 LV 분획 면적, 승모판 유입 PE/PA 비, 감속 시간 및 기능 승모판 역류의 경중도에서 유의한 변화를 나타내지 않았다. 그러나, LV 확장기말 주위벽부하는 유의하게 감소하였다. 혈장 신경호르몬 및 전해질에는 유의한 차이가 없었다.

그룹-내 비교 - 라놀라진 + 에날라프릴 (표 5-8)

라놀라진 및 에날라프릴의 병용 치료법에 대해 무작위화한 개에서, 심박수, 평균 대동맥압, LV 피크 +dP/dt 및 피크 -dP/dt 에는 차이가 없었으나, LV 확장기말압은 유의하게 감소하였다. 상기 연구 그룹에서, LV 확장기말용적은 처리 3 개월 종료시에 변하지 않은 채로 남아 있었고, 수축기말용적은 유의하게 감소한 반면, LV 박출율, 일회박출량 및 심박출계수는 유의하게 증가하였다. 심박출량은 또한 증가하는 경향이 있으나, 증가는 통계적 차이에 도달하지 않았다. 심장초음파검사 및 도플러 결과는 단축 LV 분획 면적 및 감속 시간에서 유의한 증가를 나타내었다. PE/PA 비는 증가하는 경향이 있으나, 증가는 통계적 차이에 도달하지 않았다. 기능 승모판 역류의 경중도 및 LV 확장기말 주위벽부하는 유의하게 감소하였다. 혈장 신경호르몬 및 전해질에는 유의한 차이가 없었다.

그룹-내 비교 - 라놀라진 + 메토프로롤 (표 5-8)

라놀라진 및 메토프로롤의 병용 치료법에 대해 무작위화한 개에서, 심박수, 평균 대동맥압, LV 피크 +dP/dt 및 피크 -dP/dt 에는 차이가 없었으나, LV 확장기말압은 유의하게 감소하였다. 상기 연구 그룹에서, LV 확장기말용적 및 수축기말용적은 처리 3 개월 종료시에 유의하게 감소한 반면, LV 박출율, 일회박출량 및 심박출계수는 유의하게 증가하였다. 심박출량은 또한 증가하는 경향이 있으나, 증가는 통계적 차이에 도달하지 않았다. 심장초음파검사 및 도플러 결과는 단축 LV 분획 면적, PE/PA 비 및 감속 시간에서 유의한 증가를 나타내었다. 기능 승모판 역류의 경중도 및 LV 확장기말 주위벽부하는 유의하게 감소하였다. 혈장 신경호르몬 및 전해질에는 유의한 차이가 없었다.

처리 효과 - 그룹-간 비교 (표 9-12)

처리 효과 데이터는 표 9 내지 12 에 제시되고, 개별 개 데이터는 첨부 1 에 제시된다. 처리 효과 분석은 심박수 및 평균 대동맥압과 관련해 4 가지 연구 그룹 사이에 차이를 나타내지 않았다. 플라시보와 비교해, LV 확장기말압, 피크 LV +dP/dt 및 피크 -dP/dt 가, 라놀라진 단독 및 에날라프릴 또는 메토프로롤과 조합된 라놀라진을 처리한 개에서 유의하게 증가하였다. LV 확장기말, 수축기말용적, 박출율, 일회박출량 및 심박출계수 모두가 플라시보와 비교해 모든 3 개 처리 팔에서 유의하게 개선되었다. 심박출량은 플라시보와 비교해 처리 팔에서 또한 증가하는 경향이 있으나, 증가는 통계적 차이에 도달하지 않았다. LV 용 적의 감소 및 LV 박출율의 증가는 라놀라진 단독에 대해 무작위화한 개에 비해 병용 치료법에 대해 무작위화한 개에서 유의하게 더 컸다.

플라시보와 비교해서, 라놀라진 단독은 단축 LV 분획 면적을 유의하게 증가시키고, LV 확장기말 벽부하를 유의하게 감소시켰다. PE/PA 비, MR 의 경중도 및 감속 시간은 플라시보에 비해 라놀라진 단독으로 개선되는 경향이 있으나, 개선의 범위는 통계적 차이에 도달하지 않았다. 플라시보와 비교해, 병용 치료법은 단축 LV 분획 면적, PE/PA 비, 승모판 역류의 경중도, 감속 시간 및 LV 확장기말 벽부하를 유의하게 개선하였다. 혈장 신경호르몬 및 전해질과 관련해 4 개 연구 그룹 사이에 유의한 차이는 없었다.

조직형태계측 발견

조직형태계측 데이터는 표 13 에 제시된다. 정상 개와 비교해, 플라시보로 처리된 개는 근육세포 횡-단면적, 대체 및 사이질 섬유증의 용적 분획 및 모세혈관 밀도의 유의한 감소와 함께 산소 확산 거리에서의 유의한 증가를 나타내었다. 라놀라진 단독으로의 처리 뿐 아니라 병용 치료법으로의 처리는 플라시보와 비교해 모든 상기 조직형태계측 측정을 유의하게 개선하였다. 개선 범위는 병용 치료법으로 처리된 개에서 라놀라진 단독으로 처리된 것보다 유의하게 더 컸다.

중등도 심장 부전 개에서 수행된 상기 연구의 결과는 라놀라진으로의 단일요법이 LV 기능의 보호 및 LV 재형성의 약화에 의해 증명되는 바와 같이 심장 부전의 진행을 예방하는 것을 나타낸다. ACE 억제제 또는 베타-차단제와 병용되는 경우, 라놀라진은 LV 수축기 및 확장기 기능을 현저하게 개선하고, LV 크기 감소 및 근육세포 비대, 사이질 섬유증, 모세혈관 밀도 및 산소 확산 거리 개선에 의해 증명되는 바와 같이 전체적 및 세포 LV 재형성의 역행을 도출한다. 결과는 만성 심장 부전의 치료를 위한 부가 치료법으로서 라놀라진의 용도를 지지한다.

표 1 : 임의의 마이크로색전술 전 기준선에서의 혈류역학 측정.

LV = 좌심실; RAN = 라놀라진; ENA = 에날라프릴; MET = 메토프로롤

표 2: 임의의 마이크로색전술 전 기준선에서의 심실조영술 측정.

표 3: 임의의 마이크로색전술 전 기준선에서의 심장초음파검사 및 도플러 측정.

LV = 좌심실; RAN = 라놀라진; ENA = 에날라프릴; MET = 메토프로롤; EDWS = 확장기말 주위벽부하

표 4: 임의의 마이크로색전술 전 기준선에서의 신경호르몬 및 전해질 측정.

LV = 좌심실; RAN = 라놀라진; ENA = 에날라프릴; MET = 메토프로롤; ANF = 심방 나트륨이뇨인자; PNE = 혈장 노르에피네프린

표 5: 무작위화 시점 (PRE) 및 치료법 3 개월 후 (POST) 에서의 혈류역학 측정.

RAN = 라놀라진; ENA = 에날라프릴; MET = 메토프로롤; HR=심박수 (박동/분); mAoP = 평균 대동맥압 (mmHg); LVEDP = LV 확장기말압 (mmHg); +dP/dt = 피크 LV +dP/dt (mmHg/초); -dP/dt = 피크 LV -dP/dt (mmHg/초); * = p < 0.05

표 6: 무작위화 시점 ( PRE ) 치료법 3 개월 후 (POST) 에서의 심실조영술 측정.

RAN = 라놀라진; ENA = 에날라프릴; MET = 메토프로롤; EDV = LV 확장기말용적 (ml); ESV = LV 수축기말용적 (ml); EF = LV 박출율 (%); SV = 일회박출량 (ml); CO = 심박출량 (L/분); CI = 심박출계수 (L/분/m2); * = p < 0.05

표 7: 무작위화 시점 (PRE) 치료법 3 개월 후 (POST) 에서의 심장초음파검사 및 도플러 측정.

RAN = 라놀라진; ENA = 에날라프릴; MET = 메토프로롤; FAS = 단축 LV 분획 면적 (%); MR = 승모판 역류의 경중도 (%); DT = 감속 시간 (msec); EDWS = LV 확장기말 주위벽부하 (gm-cm²); * = p < 0.05

표 8: 무작위화 시점 ( PRE ) 치료법 3 개월 후 ( POST ) 에서의 신경호르몬 및 전해질 측정.

RAN = 라놀라진; ENA = 에날라프릴; MET = 메토프로롤; Creat = 혈청 크레아티닌 (mg/dL); BUN = 혈액 우레아 질소 (mg/dL); PNE = 혈장 노르에피네프린 (pg/ml); PRA = 혈장 렌닌 활성 (ng/ml/hr); ANF = 심방 나트륨이뇨인자 (pg/ml); T-PNE = 심근관통 노르에피네프린

처리 효과 표

표 9: 4 개 연구 그룹 사이에서의 혈류역학 측정에 있어서 처리-전에서 처리-후의 변화 비교 (Δ) (처리 효과)

RAN = 라놀라진; ENA = 에날라프릴; MET = 메토프로롤; HR = 심박수 (박동/분); mAoP = 평균 대동맥압 (mmHg); LVEDP = LV 확장기말압 (mmHg); +dP/dt = 피크 LV +dP/dt (mmHg/초); -dP/dt = 피크 LV -dP/dt (mmHg/초); * = p < 0.05 대 플라시보

표 10: 4 개 연구 그룹 사이에서의 심실조영술 측정에 있어서 처리-전에서 처리-후의 변화 비교 (Δ) (처리 효과)

RAN = 라놀라진; ENA = 에날라프릴; MET = 메토프로롤; EDV = LV 확장기말용적 (ml); ESV = LV 수축기말용적 (ml); EF = LV 박출율 (%); SV = 일회박출량 (ml); CO = 심박출량 (L/분); CI = 심박출계수 (L/분/m²); * = p < 0.05 대 플라시보; † = p < 0.05 대 RAN 단독.

표 11: 4 개 연구 그룹 사이에서의 심장초음파검사 및 도플러 측정에 있어서 처리-전에서 처리-후의 변화 비교 (Δ) (처리 효과)

RAN = 라놀라진; ENA = 에날라프릴; MET = 메토프로롤; FAS = 단축 LV 분획 면적 (%); MR = 승모판 역류의 경중도 (%); DT = 감속 시간 (msec); EDWS = LV 확장기말 주위벽부하 (gm-cm²); * = p < 0.05 대 플라시보.

표 12: 4 개 연구 그룹 사이에서의 신경호르몬 및 전해질 측정에 있어서 처 리-전에서 처리-후의 변화 비교 (Δ) (처리 효과)

RAN = 라놀라진; ENA = 에날라프릴; MET = 메토프로롤; Creat = 혈청 크레아티닌 (mg/dL); BUN = 혈액 우레아 질소 (mg/dL); PNE = 혈장 노르에피네프린 (pg/ml); PRA = 혈장 렌닌 활성 (ng/ml/hr); ANF = 심방 나트륨이뇨인자 (pg/ml); T-PNE = 심근관통 노르에피네프린.

표 13: 조직형태계측 측정

RAN = 라놀라진; ENA = 에날라프릴; MET = 메토프로롤; MCSA = 근육세포 횡-단면적; VFRF = 대치 섬유증의 용적 분획; VFIF = 사이질 섬유증의 용적 분획; CD = 모세혈관 밀도; ODD = 산소 확산 거리; * = p < 0.05 대 정상; † = p < 0.05 대 플라시보; ‡ = p < 0.05 대 RAN 단독

실시예 2

LV 역 재형성에 대한 ACE 억제제 에날라프릴 및 베타-차단제 메토프로롤의 효과에 대한 기존의 데이터를, 라놀라진 단독, 라놀라진 및 에날라프릴, 및 라놀라진 및 메토프로롤 타르트레이트에 대해 실시예 1 에서 수득된 데이터와 비교하였다. 에날라프릴 및 메토프로롤 데이터를 [Sabbah et al. (1994) Circ. 89:2852-2859] 로부터 취하였다. 비교 결과는 도 1 및 2 에 그래프로 나타낸다.

도 1 은 라놀라진, 에날라프릴, 또는 메토프로롤 중 어느 것도 LV 확장기말용적을 독립적으로 감소시킬 수 없는 반면, 라놀라진 및 에날라프릴의 병용 투여 및 라놀라진 및 메토프로롤의 병용 투여가 LV 확장기말용적을 감소시키는, 즉, LV 재형성을 역행시킬 수 있다는 것을 예증하였다.

도 2 는 라놀라진, 에날라프릴, 또는 메토프로롤 중 어느 것도 LV 수축기말용적을 독립적으로 감소시키는 것으로 나타나지 않은 반면, 라놀라진 및 에날라프릴의 병용 투여 및 라놀라진 및 메토프로롤의 병용 투여가 LV 수축기말용적을 감소시키는, 즉, LV 재형성을 역행시킬 수 있다는 것을 예증하였다.

Claims

치료학적 유효량의 라놀라진 및 치료학적 유효량의 하나 이상의 조-재형성제를 바람직하지 않은 좌심실 재형성의 역행을 필요로 하는 포유류에 투여하는 것을 포함하는, 바람직하지 않은 좌심실 재형성의 역행 방법.
제 1 항에 있어서, 조-재형성제가 ACE 억제제, ARB, 또는 베타-차단제를 포함하는 방법.
제 2 항에 있어서, 조-재형성제가 ACE 억제제를 포함하는 방법.
제 3 항에 있어서, ACE 억제제가 베나제프릴, 카프토프릴, 실라자프릴, 에날라프릴, 포시노프릴, 이미다프릴, 리시노프릴, 페린도프릴, 퀴나프릴, 라미프릴, 테모카프릴, 및 트란도라프릴로 이루어지는 군으로부터 선택되는 방법.
제 2 항에 있어서, 조-재형성제가 ARB 를 포함하는 방법.
제 5 항에 있어서, ARB 가 칸데사르탄, 실렉세틸, 에프로사르탄, 이베사르탄, 로사르탄, 올메사르탄, 메독소밀, 텔미사르탄, 발사르탄, 졸라사르탄, 및 타소사르탄으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 방법.
제 2 항에 있어서, 조-재형성제가 베타-차단제를 포함하는 방법.
제 7 항에 있어서, 베타-차단제가 아세부토롤, 아테노롤, 베탁소롤, 비소프로롤, 카르테오롤, 라베타롤, 메토프로롤, 나도롤, 옥스프레노롤, 펜부토롤, 핀도롤, 프로프라노롤, 소타롤, 티모롤, 에스모롤, 소타롤, 카르베디롤, 메드록사롤, 부신도롤, 레보부노롤, 메티프라노롤, 셀리프로롤, 및 프로파페논으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 방법.
제 2 항에 있어서, 좌심실 재형성이 울혈성 심장 부전 (CHF) 및/또는 만성 심장 부전의 결과인 방법.
제 1 항에 있어서, 라놀라진 및 조-재형성제가 별도 투여 형태로서 투여되는 방법.
제 1 항에 있어서, 라놀라진 및 조-재형성제가 단일 투여 형태로서 투여되는 방법.
치료학적 유효량의 라놀라진, 치료학적 유효량의 하나 이상의 조-재형성제, 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 제형.
제 12 항에 있어서, 조-재형성제가 ACE 억제제, ARB, 또는 베타-차단제를 포함하는 제형.
제 13 항에 있어서, 조-재형성제가 ACE 억제제를 포함하는 제형.
제 14 항에 있어서, ACE 억제제가 베나제프릴, 카프토프릴, 실라자프릴, 에날라프릴, 포시노프릴, 이미다프릴, 리시노프릴, 페린도프릴, 퀴나프릴, 라미프릴, 테모카프릴, 및 트란도라프릴로 이루어지는 군으로부터 선택되는 제형.
제 13 항에 있어서, 조-재형성제가 ARB 를 포함하는 제형.
제 16 항에 있어서, ARB 가 칸데사르탄, 실렉세틸, 에프로사르탄, 이베사르탄, 로사르탄, 올메사르탄, 메독소밀, 텔미사르탄, 발사르탄, 졸라사르탄, 및 타소사르탄으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 제형.
제 13 항에 있어서, 조-재형성제가 베타-차단제를 포함하는 제형.
제 18 항에 있어서, 베타-차단제가 아세부토롤, 아테노롤, 베탁소롤, 비소프로롤, 카르테오롤, 라베타롤, 메토프로롤, 나도롤, 옥스프레노롤, 펜부토롤, 핀도 롤, 프로프라노롤, 소타롤, 티모롤, 에스모롤, 소타롤, 카르베디롤, 메드록사롤, 부신도롤, 레보부노롤, 메티프라노롤, 셀리프로롤, 및 프로파페논으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 제형.
치료학적 유효량의 라놀라진 및 치료학적 유효량의 하나 이상의 조-재형성제를 심장 부전의 치료를 필요로 하는 포유류에 투여하는 것을 포함하는 심장 부전의 치료 방법.
제 20 항에 있어서, 조-재형성제가 ACE 억제제, ARB, 또는 베타-차단제를 포함하는 방법.
제 21 항에 있어서, 조-재형성제가 ACE 억제제를 포함하는 방법.
제 22 항에 있어서, ACE 억제제가 베나제프릴, 카프토프릴, 실라자프릴, 에날라프릴, 포시노프릴, 이미다프릴, 리시노프릴, 페린도프릴, 퀴나프릴, 라미프릴, 테모카프릴, 및 트란도라프릴로 이루어지는 군으로부터 선택되는 방법.
제 21 항에 있어서, 조-재형성제가 ARB 를 포함하는 방법.
제 24 항에 있어서, ARB 가 칸데사르탄, 실렉세틸, 에프로사르탄, 이베사르 탄, 로사르탄, 올메사르탄, 메독소밀, 텔미사르탄, 발사르탄, 졸라사르탄, 및 타소사르탄으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 방법.
제 21 항에 있어서, 조-재형성제가 베타-차단제를 포함하는 방법.
제 26 항에 있어서, 베타-차단제가 아세부토롤, 아테노롤, 베탁소롤, 비소프로롤, 카르테오롤, 라베타롤, 메토프로롤, 나도롤, 옥스프레노롤, 펜부토롤, 핀도롤, 프로프라노롤, 소타롤, 티모롤, 에스모롤, 소타롤, 카르베디롤, 메드록사롤, 부신도롤, 레보부노롤, 메티프라노롤, 셀리프로롤, 및 프로파페논으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 방법.
제 21 항에 있어서, 심장 부전이 울혈성 심장 부전 (CHF) 또는 만성 심장 부전인 방법.
제 20 항에 있어서, 라놀라진 및 조-재형성제가 별도 투여 형태로서 투여되는 방법.
제 20 항에 있어서, 라놀라진 및 조-재형성제가 단일 투여 형태로서 투여되는 방법.