KR20070030240A

KR20070030240A - 암 치료 방법

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Publication number: KR20070030240A
Application number: KR1020067027695A
Authority: KR
Inventors: 마크 에스. 버거; 이맨 엘-해리리; 토나 모건 길머; 아룬다티 니어말리니 팬다이트; 데이비드 루스나크; 네일 엘 스펙터
Original assignee: 스미스클라인 비이참 (코르크) 리미티드
Priority date: 2004-06-03
Filing date: 2005-06-01
Publication date: 2007-03-15
Also published as: BRPI0511754A; MXPA06013635A; NO20066077L; JP2008501690A; RU2006142420A; MA28691B1; CA2569132A1; AU2005251722A1; NZ551622A; IL179359A0; WO2005120504A2; US20100063074A1; WO2005120504A3; EP1768963A4; AU2005251722B2; EP1768963A2

Abstract

본 발명은 4-퀴나졸린아민 및 이를 함유하는 약제 조성물을 투여함으로써 포유동물의 암을 치료하는 방법에 관한 것이다. 특히, 본 방법은 N-{3-클로로-4-[(3-플루오로벤질)옥시]페닐}-6-[5-({[2-(메탄설포닐)에틸]아미노}메틸)-2-푸릴]-4-퀴나졸린아민 및 이의 염 및 용매화물을 투여함으로써 티로신 키나아제 EGFR 및/또는 erbB2에 의해 매개되는 암을 치료하는 방법에 관한 것이다.

Description

암 치료 방법 {CANCER TREATMENT METHOD}

암 치료에 효과적인 화학요법은 종양 분야에서 계속적인 연구 목표가 되고 있다. 일반적으로, 암은 세포 분열, 분화 및 아폽토시스 세포 괴사를 조정하는 일반적인 과정이 파괴됨으로써 초래된다. 아폽토시스 (프로그래밍된 세포 괴사)는 배발달 및 다양한 질환 예컨대, 퇴행성 신경 질환, 심혈관 질환 및 암의 병인에 중요한 역할을 수행한다. 아폽토시스의 키나아제 조절을 포함하여 가장 일반적으로 연구된 경로중 하나는 세포 표면의 성장 인자 수용체로부터 핵으로의 세포 시그널링이다 (Crews and Erikson, Cell, 74:215-17, 1993). 주목할 만한 특정 경로로는 erbB 패밀리의 성장 인자 수용체로부터의 세포 시그널링이 있다.

erbB 패밀리간에는 이들 수용체에 의해 매개되는 세포 효과를 조절하는 중요한 상호작용이 존재한다. EGFR에 결합하는 6개의 상이한 리간드는 EGF, 형질변환 성장 인자, 암피레굴린(amphiregulin), 헤파린 결합 EGF, 베타셀룰린 및 에피레굴 린(epirequlin)을 포함한다 (Alroy & Yarden, FEBS Letters, 410:83-86, 1997; Burden & Yarden, Neuron, 18:847-855, 1997; Klapper et al., ProNatlAcadSci, 494-5000, 1999). 다른 부류의 리간드에 속하는 헤레굴린(heregulin)은 HER3 및/또는 HER4에 직접적으로 결합한다 (Holmes et al., Science, 256:1205, 1992; Klapper et al., 1997, Oncogene, 14:2099-2109; Peles et al., Cell, 69:205, 1992). 특이적 리간드의 결합은 erbB 패밀리의 구성원내에서 수용체의 동종이합체화 또는 이종이합체화를 포함한다 (Carraway & Cantley, Cell, 78:5-8, 1994; Lemmon & Schlessinger, TrendsBiochemSci, 19:459-463, 1994). 기타 ErbB 수용체 구성원과 달리, 수용성 리간드는 HER2에 대해서는 아직 확인되지 않았으나, 이는 이종이합체화된 후 전이활성화되는 것으로 여겨진다. erbB-2 수용체와 EGFR, HER3 또는 HER4 수용체와의 이종이합체화가 동종이합체화 보다 바람직하다 (Klapper et al., 1999; Klapper et al., 1997). 수용체 이합체화는 ATP의 수용체 촉매 부위로의 결합, 이러한 수용체의 티로신 키나아제의 활성화 및 C-말단 티로신 잔기에서의 자가인산화를 유도한다. 그 후, 인산화된 티로신 잔기는 단백질 예컨대, Grb2, Shc 및 포스포리파아제 C에 대한 도킹 부위로서 작용하며, 이는 이어서 Ras/MEK/Erk 및 PI3K/Akt 경로를 포함하는 다운스트림 시그널링 경로를 활성화시키며, 이는 전사 인자 및 생물학적 반응 예컨대, 증식, 세포 이동, 혈관신생, 세포 생존 및 분화와 관련된 기타 단백질을 조절한다 (Alroy & Yarden, 1997; Burgering & Coffer, Nature, 376:599-602, 1995; Chan et al., AnnRevBiochem, 68:965-1014, 1999; Lewis et al., AdvCanRes, 74:49-139, 1998; Liu et al., Genes and Dev, 13:786-791, 1999; Muthuswamy et al., Mol&CellBio, 19, 10:6845-6857, 1999; Riese & Stern, Bioessays, 20:41-48, 1998).

erbB 패밀리 수용체를 표적화시키고, 암 세포에서 이들의 활성화를 차단하기 위해 모노클로날 항체 (Mab), 면역접합체, 항-EGF 백신 및 티로신 키나아제 억제제를 포함하는 여러 방법들이 개발되었다 (문헌[Sridhar et al., Lancet , 4,7:397-406, 2003] 참조). erbB2-함유 이종이합체가 시그널링에 있어서 가장 안정적이며 바람직한 개시물이기 때문에, erbB2와 EGFR 둘 모두의 동시적 차단은 매력적인 치료법이다. 암에 대한 전임상 모델에서 유효성을 갖는 일련의 6-푸라닐퀴나졸린 이중 erbB-2/EGFR TK 억제제가 합성되었다 (Cockerill et al., biorgMedChemLett, 11:1401-1405, 2001; Rusnak et al., CanRes, 61:7196-7203, 2001a; Rusnak et al., MolCanTher, 1:85-94,2001b). GW572016은 6-푸라닐퀴나졸린으로서, EGFR 및 erbB2 키나아제 둘 모두에 대한 경구적으로 활성인 가역성 이중 키나아제 억제제이다 (Rusnak et al., 2001b). 사람 이종이식 연구에서, GW572016은 용량 의존적 키나아제 억제를 보여주었으며, EGFR 또는 erbB2를 과다발현하는 종양 세포를 선택적으로 억제시켰다 (Rusnak et al., 2001b; Xia et al., Oncogene, 21:6255-6263, 2002).

본 발명자들은 N-{3-클로로-4-[(3-플루오로벤질)옥시]페닐}-6-[5-({[2-(메탄설포닐)에틸]아미노}메틸)-2-푸릴]-4-퀴나졸린아민 (GW572016) 및 이의 염 및/또는 용매화물을 투여하는 것을 포함하는, 신규한 암 치료 방법을 확인하였다.

본 발명의 요약

본 발명의 제 1 양태에 있어서, 치료학적 유효량의 하기 화학식 (I")의 화합물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 EGFR 및/또는 erbB2 과다발현 암을 치료하는 방법을 제공한다:

본 발명의 제 2 양태에 있어서, 치료학적 유효량의 하기 화학식 (I")의 화합물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 EGFR 과다발현 암을 치료하는 방법을 제공한다:

본 발명의 제 3 양태에 있어서, 치료학적 유효량의 하기 화학식 (I")의 화합물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 erbB2 과다발현 암을 치료하는 방법을 제공한다:

본 발명의 제 4 양태에 있어서, 치료학적 유효량의 하기 화학식 (I")의 화합물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 EGFR 및 erbB2 과다발현 암을 치료하는 방법을 제공한다:

본 발명의 제 5 양태에 있어서, 치료학적 유효량의 하기 화학식 (I)의 화합물, 또는 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 신장암을 치료하는 방법을 제공한다:

본 발명의 제 6 양태에 있어서, 치료학적 유효량의 하기 화학식 (I)의 화합물, 또는 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 방광암을 치료하는 방법을 제공한다:

본원에 사용된 용어 "신생물"은 세포 또는 조직의 비정성작인 성장물을 나타내며, 양성 즉, 비암성 성장물 및 악성 즉, 암성 성장물을 포함하는 것으로 이해된다. 용어 "신생물성"은 신생물을 의미하거나 신생물에 관한 것이다.

본원에 사용된 바와 같은 "유효량"은 예를 들어, 연구자 또는 임상의에 의해 간주되는 조직, 시스템, 동물 또는 사람의 생물학적 또는 의학적 반응을 유도하는 약물 또는 약제의 양을 의미한다. 또한, 용어 "치료학적 유효량"은 이러한 용량을 투여받지 못한 대응되는 피검체와 비교하여 질환, 질병 또는 부작용의 치료, 회복, 예방 또는 완화를 유도하거나 질환 또는 질병의 진행 속도를 감소시키는 양을 의미한다. 상기 용어는 또한, 그 범위내에 정상적인 생리학적 작용을 증진시키는데 유효한 양을 포함한다.

당해분야에 공지된 바와 같이, 종양은 종양 성장의 제 1 (일차) 부위가 하나 이상의 해부학적으로 분리된 부위로 퍼진다는 점에 있어서 매우 전이성을 띤다. 본원에 사용된 바와 같이, 피검체에서 "종양"에 대한 것은 일차 종양뿐만 아니라 전이성 종양 성장 또한 포함한다.

"erbB-1"로서 또한 공지된 "EGFR" 및 "erbB-2"는 erbB 패밀리의 단백질 티로신 키나아제 트랜스멤브레인 성장 인자 수용체이다. 단백질 티로신 키나아제는 세포 성장 및 분화의 조절과 관련된 다양한 단백질에서 특정 티로실 잔기의 인산화를 촉매한다 (A. F. Wilks, Progress in Growth Factor Research, 1990, 2, 97-111; S. A. Courtneidge, Dev. Supp.1, 1993, 57-64; J. A. Cooper, Semin. Cell Biol.,1994, 5(6). 377-387; R. F. Paulson, Semin. Immunol., 1995,7(4), 267-277; A. C. Chan, Curr. Opin. Immunol., 1996,8(3), 394-401). 타입 I 수용체 티로신 키나아제의 ErbB 패밀리는 ErbB1 (또한, 표피 성장 인자 수용체 (EGFR 또는 HER1)로서 공지됨), erbB2 (또한, Her2로서 공지됨), erbB3 및 erbB4를 포함한다. 이들 수용체 티로신 키나아제는 상피 조직, 간엽 조직 및 신경 조직에서 널리 발현되며, 여기서 세포 증식, 생존 및 분화를 조절하는 역할을 수행한다 (Sibilia and Wagner, Science, 269: 234 (1995) ; Threadgill et al., Science, 269: 230 (1995)). 야생형 erbB2 또는 EGFR의 증가된 발현, 또는 항상성 활성화 수용체 변이물의 발현은 실험관내 세포를 형질변환시킨다 (Di Fiore et al. , 1987; DiMarco et al, Oncogene, 4: 831 (1989) ; Hudziak et al., Proc. NatI. Acad. Sci. USA. , 84: 7159 (1987) ; Qian et al., Oncogene, 10: 211 (1995)). erbB2 또는 EGFR의 증가된 발현은 일부 유방암 및 다양한 기타 악성종양의 더욱 미비한 임상 결과와 관련있다 (Slamon et al., Science, 235: 177 (1987) ; Slamon et al., Science, 244: 707 (1989) ; Bacus et al, Am. J. Clin. Path, 102:S13 (1994)).

본원에 사용된 바와 같이, EGFR 및/또는 erbB2를 "과다발현"하는 세포는 동일한 유형의 세포에서 발견되는 수용체 수의 평균과 비교하여, 현저하게 증가된 작용성 EGFR 및/또는 erbB2 수용체를 갖는 세포를 의미한다. 예를 들어, EGFR 및/또는 erbB2의 과다발현은 유방암 (Verbeek et al., FEBS Letters 425: 145 (1998)); 결장암 (Gross et al., Cancer Research 51: 1451 (1991)); 폐암 (Damstrup et al., Cancer Research 52: 3089 (1992), renal cell (Stumm et al, Int. J. Cancer 69: 17 (1996), Sargent et al., J. Urology 142: 1364 (1989)) 및 방광암 (Chow et al., Clin. Cancer Res. 7: 1957 (2001); Bue et al., Int. J. Cancer, 76: 189 (1998); (Mellon J, Lunec J., J Uro 1996; 155:321-6; Orlando C, Sestini R., J Urol 1996;156:2089-2093), Turkeri et al., Urology 51: 645 (1998))을 포함하는 다양한 유형의 암에서 보고되었다. ErbB2의 과다발현은 이미징, 유전자 증폭, 존재하는 세포 표면 수용체의 수, 단백질 발현 및 mRNA 발현을 포함하나 이에 제한되지 않는 당해분야에 공지된 임의의 적당한 방법에 의해 평가될 수 있다. 예를 들어, 문헌[Piffanelli et al., Breast Cancer Res. Treatment 37: 267 (1996)] 참조.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "용매화물"은 용질 (본 발명에서, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 염) 및 용매에 의해 형성된 다양한 화학량론의 착물을 의미한다. 본 발명의 목적에 부합하는 이러한 용매는 용질의 생물학적 활성을 방해하지 않는다. 적합한 용매의 예로는 물, 메탄올, 에탄올 및 아세트산을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 바람직하게는, 사용되는 용매는 약제학적으로 허용되는 용매이다. 약제학적으로 허용되는 적합한 용매의 예로는 물, 에탄올 및 아세트산을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 가장 바람직하게는, 사용된 용매는 물이다.

본원에 기술된 암 치료 방법은 하기 화학식 (I)의 화합물, 또는 이의 염 또는 용매화물을 투여하는 것을 포함한다:

또 다른 양태에서, 본 화합물은 하기 화학식 (I')의 화합물 또는 이의 무수물 또는 수화물이다. 화학식 (I')의 화합물은 화학식 (I)의 화합물의 디토실레이트 염이다:

한 구체예에서, 본 화합물은 화학식 (I')의 무수성의 디토실레이트 염이다. 또 다른 구체예에서, 본 화합물은 화학식 (I')의 화합물의 모노히드레이트 디토실레이트 염인 하기 화학식 (I")의 화합물이다:

화학식 (I)의 화합물의 모노히드레이트 디토실레이트 염의 화학명은 N-{3-클로로-4-[(3-플루오로벤질)옥시]페닐}-6-[5-({[2-(메탄설포닐)에틸]아미노}메틸)-2-푸릴]-4-퀴나졸린아민 (GW572016) 디토실레이트 모노히드레이트이며, 또한, 라파티닙(lapatinib)으로서 공지되어 있다.

화학식 (I)의 화합물의 유리 염기, HCl 염 및 디토실레이트 염은 1999년 1월 8일 출원되고, 1999년 7월 15일 WO99/35146으로 공개된 국제 특허 출원 PCT/EP99/00048 및 2001년 6월 28일 출원되고 2002년 1월 10일 WO 02/02552로 공개된 국제 특허 출원 PCT/US01/20706의 공정 및 하기 언급된 적당한 실시예에 따라 제조될 수 있다. 화학식 (I)의 화합물의 디토실레이트 염을 제조하기 위한 하나의 이러한 공정은 하기 도식 1에 제시되어 있다:

도식 1

도식 1에서, 화학식 (III)의 화합물의 디토실레이트 염의 제조는 4 단계로 진행된다: 단계 1; 기재된 비시클릭 화합물을 아민과 반응시켜 기재된 요오도퀴나졸린 유도체 제공; 단계 2; 상응하는 알데히드 염의 제조; 단계 3; 퀴나졸린 디토실레이트 염의 제조; 및 단계 4; 모노히드레이트 디토실레이트 염의 제조.

전형적으로, 본 발명의 염은 약제학적으로 허용되는 염이다. 용어 "약제학적으로 허용되는 염"에 포함된 염은 본 발명의 화합물의 비독성 염을 나타낸다. 본 발명의 화합물의 염은 본 발명의 화합물의 치환기상의 질소로부터 유래된 산 부가염을 포함할 수 있다. 대표적인 염으로는 하기 염들을 포함한다: 아세테이트, 벤젠설포네이트, 벤조에이트, 이탄산염, 중황산염, 비타르트레이트, 보레이트, 브로마이드, 칼슘 에데테이트, 캄실레이트, 탄산염, 클로라이드, 클라불라네이트, 시트레이트, 디히드로클로라이드, 에데테이트, 에디실레이트, 에스톨레이트, 에실레이트, 푸마레이트, 글루셉테이트, 글루코네이트, 글루타메이트, 글리콜릴아르사닐레이트, 헥실레조르시네이트, 히드랍아민, 히드로브로마이드, 히드로클로라이드, 히드록시나프토에이트, 요오다이드, 이세티오네이트, 락테이트, 락토비오네이트, 라우레이트, 말레이트, 말레에이트, 만델레이트, 메실레이트, 메틸브로마이드, 메틸니트레이트, 메틸설페이트, 모노칼륨 말레에이트, 무케이트, 나프실레이트, 니트레이트, N-메틸글루카민, 옥살레이트, 파모에이트 (엠보네이트), 팔미테이트, 판토테네이트, 포스페이트/디포스페이트, 폴리갈락투로네이트, 칼륨, 살리실레이트, 나트륨, 스테아레이트, 서브아세테이트, 숙시네이트, 탄네이트, 타르트레이트, 테오클레이트, 토실레이트, 트리에티요오다이드, 트리메틸암모늄 및 발레이트. 약제학적으로 허용되지 않는 기타 염이 본 발명의 화합물의 제조에 유용할 수 있으며, 이들은 본 발명의 추가적 양태를 형성한다.

본 발명의 암 치료 방법에 이용하기 위해, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물이 미가공 화합물로서 투여하는 것이 가능하지만, 또한 활성 성분을 약제 조성물로서 제공하는 것이 가능하다. 따라서, 본 발명은 또한, 본 발명의 암 치료 방법에서 투여될 수 있는 약제 조성물을 제공한다. 이러한 약제 조성물은 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물, 및 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함한다. 담체(들), 희석제(들) 또는 부형제(들)은 제형의 기타 성분과 양립가능하고, 이의 수령자에서 해롭지 않다는 견지에서만 허용가능한 것이다.

약제 제형은 단위 투여량당 소정량의 활성 성분을 함유하는 단위 투여 형태로 존재할 수 있다. 이러한 단위체는 치료할 질환, 투여 경로, 및 환자의 연령, 체중 및 상태에 따라 예를 들어, 0.5mg 내지 1g, 바람직하게는, 1mg 내지 700mg, 더욱 바람직하게는, 5mg 내지 100mg의 화학식 (I)의 화합물을 함유하거나, 약제 제형은 단위 투여량당 소정량의 활성 성분을 함유하는 단위 투여 형태로 존재할 수 있다. 바람직한 단위 투여 제형은 본원에서 상기 언급된 바와 같이 일일 용량 또는 서브-용량, 또는 이의 적합한 분획량의 활성 성분을 함유하는 제형이다. 또한, 이러한 약제 제형은 약제 분야에서 널리 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다.

화학식 (I)의 화합물은 임의의 적합한 경로에 의해 투여될 수 있다. 적합한 경로는 경구, 직장, 비, 국소 (구강 및 설하 포함), 질 및 비경구 (피하, 근내, 정맥내, 피부내, 경막내 및 경막외 포함) 경로를 포함한다. 바람직한 경로는 예를 들어, 수령체의 복합된 조건에 따라 달라질 수 있다.

본 발명의 방법은 또한, 암 치료의 기타 치료학적 방법과 함께 사용될 수 있다. 특히, 항신생물 치료에서, 기타 화학치료제, 호르몬, 항체와 상기 언급된 것 이외의 수술 및/또는 방사선 치료의 복합적 치료를 예상할 수 있다. 항신생물 치료는 예를 들어, 2002년 1월 14일 출원한 국제출원 PCT US 02/01130에 기술되어 있으며, 항신생물 치료에 대한 기술하고 있는 범위까지 본원에 참고문헌으로 인용되었다. 이와 같이, 본 발명에 따른 복합 치료법은 하나 이상의 화학식 (I)의 화합물의 투여와 기타 항신생물 제제를 포함하는 기타 치료제의 선택적 사용을 포함한다. 이러한 복합 제제는 함께 또는 별도로 투여되며, 별도로 투여될 경우, 동시에 또는 임의의 순서로 짧거나 넓은 시간 간격을 두고 순차적으로 투여될 수 있다. 화학식 (I)의 화합물과 기타 약제학적 활성제(들)의 양 및 관련된 투여 시점은 목적하는 복합된 치료 효과를 달성하도록 선택될 것이다.

경구 투여에 적합한 약제 제형은 개별 단위체 예컨대, 캡슐 또는 정제; 분말 또는 과립; 용액, 또는 수용액 또는 비수성액중의 현탁액; 식용성 포말 또는 힙스(whips); 또는 수중유 액체 에멀션 또는 유중수 액체 에멀션으로서 존재할 수 있다.

예를 들어, 정제 또는 캡슐 형태로 경구 투여되는 경우, 활성 약제 성분은 비독성의 약제학적으로 허용되는 경구용 불활성 담체 예컨대, 에탄올, 글리세롤, 물 등과 혼합될 수 있다. 분말제는 적당한 미세 크기로 화합물을 분쇄하고, 유사하게 분쇄된 약제 담체 예컨대, 식용성 카르보히드레이트 예를 들어, 전분 또는 만니톨과 혼합하여 제조된다. 향료, 보존제, 분산제 및 착색제가 또한 존재할 수 있다.

캡슐은 상기 기술된 바와 같이 분말 혼합물을 제조하고, 형성된 젤라틴 쉬스(sheath)를 충전시킴으로써 제조된다. 유동화제 및 활택제 예컨대, 콜로이드성 실리카, 탈크, 마그네슘 스테아레이트, 칼슘 스테아레이트 또는 고체상 폴리에틸렌 글리콜이 충전 작업 전에 상기 분말 혼합물에 첨가될 수 있다. 붕해제 또는 가용화제 예컨대, 아가-아가, 탄산칼슘 또는 탄산나트륨이 또한, 캡슐의 섭취시에 약제의 유용성을 증진시키기 위해 첨가될 수 있다.

또한, 필요에 따라, 적합한 결합제, 활택제, 붕해제 및 착색제가 또한 상기 혼합물에 혼입될 수 있다. 적합한 결합제는 전분, 젤라틴, 천연당 예를 들어, 글루코오스 또는 베타-락토오스 알기네이트, 카르복시메틸셀룰로오스, 폴리에틸렌 글리콜, 왁스 등을 포함한다. 이러한 투여 형태에 사용된 활택제는 나트륨 올레이트, 나트륨 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 나트륨 벤조에이트, 나트륨 아세테이트, 염화나트륨 등을 포함한다. 붕해제는 비제한적으로, 전분, 메틸 셀룰로오스, 아가, 벤토나이트, 크산탄 검 등을 포함한다. 정제는 예를 들어, 분말 혼합물을 제조하고, 과립화시키거나 슬러깅시키고, 활택제 및 붕해제를 첨가하고, 정제로 압축하여 제형화된다. 분말 혼합물은 적합하게 분쇄된 화합물을 상기 기술된 바와 같은 희석제 또는 기제, 및 선택적으로, 결합제 예컨대, 카르복시메틸셀룰로오스, 알기네이트, 젤라틴 또는 폴리비닐 피롤리돈, 용해 억제제 예컨대, 파라핀, 재흡수 촉진제 예컨대, 사급 염 및/또는 흡수제 예컨대, 벤토나이트, 카올린 또는 디칼슘 포스페이트와 혼합시킴으로써 제조된다. 분말 혼합물은 결합제 예컨대, 시럽, 전분 페이스트, 아카디아 무실레이지(acadia mucilage) 또는 셀룰로오스 또는 중합성 물질의 용액으로 습식시키고, 스크린을 통해 과립화될 수 있다. 과립화에 대한 대안적인 방법으로서, 분말 혼합물을 정제 기기를 통해 형성할 수 있으며, 생성물은 과립으로 분쇄된 불완전하게 형성된 슬러그이다. 과립은 스테아르산, 스테아레이트 염, 탈크 또는 미네랄 유에 의해 윤활처리되어 정제 형성 다이로의 점착이 방지될 수 있다. 그 후, 활택성 혼합물은 정제로 압축된다. 본 발명의 화합물은 또한, 자유롭게 유동는 불활성 담체와 혼합되고, 과립화 또는 슬러깅 단계 없이 바로 정제로 압축될 수 있다. 셀락의 밀봉 코트, 당 또는 중합성 물질의 코팅 및 왁스의 광택 코팅으로 이루어진 투명 또는 불투명 보호 코팅이 제공될 수 있다. 다른 단위 투여량과 구별하기 위해 염료가 이들 코팅에 첨가될 수 있다.

경구용 유체 예컨대, 용액, 시럽 및 엘릭시르는 용량 단위 형태로 제조되어 주어진 분량이 예정된 양의 화합물을 함유할 수 있게 한다. 시럽은 화합물을 적합한 향미 수성용액에 용해시킴으로써 제조되며, 엘릭시르는 비독성의 알코올 비히클을 사용하여 제조된다. 현탁액은 비독성 비히클중에 화합물을 분산시킴으로써 제형화될 수 있다. 가용화제 및 에멀션화제 예컨대, 에톡실화된 이소스테아릴 알코올 및 폴리옥시에틸렌 소르비탈 에테르, 보존제, 향료 첨가제 예컨대, 페퍼민트 오일 또는 천연 감미제 또는 사카린 또는 기타 인공 감미제 등이 또한 첨가될 수 있다.

적합한 경우, 경구 투여용 용량 단위 제형은 미세캡슐화될 수 있다. 제형은 또한, 중합체, 왁스 등으로 미립자 물질을 코팅하거나, 이들에 미립자 물질을 삽입함으로써 방출이 서방성 또는 지속성을 띠도록 제조될 수 있다.

본 발명에 따라 사용하기 위한 제제는 또한, 리포좀 운반 시스템의 형태 예컨대, 작은 단층 소포, 큰 단층 소포 및 다층 소포의 형태로 투여될 수 있다. 리포좀은 다양한 인지질 예컨대, 콜레스테롤, 스테아릴아민 또는 포스파티딜콜린으로부터 제조될 수 있다.

본 발명에 따라 사용하기 위한 제제는 또한, 화합물 분자와 결합되는 각각의 담체로서 모노클로날 항체를 사용하여 운반될 수 있다. 화합물은 또한, 표적화가능한 약물 담체로서 가용성 중합체와 결합될 수 있다. 이러한 중합체는 폴리비닐피롤리돈, 피란 공중합체, 폴리히드록시프로필메타크릴아미드-페놀, 폴리히드록시에틸아스파르트아미드페놀, 또는 팔미톨 잔기로 치환된 폴리에틸렌옥시드폴리리신을 포함할 수 있다. 게다가, 화합물은 약물의 조절성 방출을 달성하는데 유용한 부류의 생분해성 중합체 예를 들어, 폴리락트산, 폴리엡실론 카프로락톤, 폴리히드록시 부티르산, 폴리오르토에스테르, 폴리아세탈, 폴리디히드로피란, 폴리시아노아크릴레이트 및 가교되거나 양친매성의 히드로겔 블록 공중합체에 결합할 수 있다.

경피 투여에 적합한 약제 제형은 연장된 기간 동안 수용체의 표피에 밀접한 접촉을 유지할 수 있는 개별적 패치로서 제공될 수 있다. 예를 들어, 활성 성분은 문헌 [Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986)]에 일반적으로 기술된 바와 같이, 이온삼투요법에 의해 패치로부터 전달될 수 있다.

국소 투여에 적합한 약제 제형은 연고, 크림, 현탁제, 로션, 분말제, 용액, 페이스트, 겔, 스프레이, 에어로졸 또는 오일로서 제형화될 수 있다.

안구 또는 기타 외부 조직 예컨대, 입 및 피부의 치료를 위해, 제형은 바람직하게는, 국소용 연고 또는 크림으로써 적용된다. 연고로 제형화되는 경우, 활성 성분은 파라핀 또는 수혼화성 연고 기제와 함께 사용될 수 있다. 대안적으로, 활성 성분은 수중유 크림 기제 또는 유중수 기제로 크림으로 제형화될 수 있다.

안구로의 국소 투여에 적합한 약제 제형은 활성 성분이 적합한 담체 특히, 수성 용매중에 용해되거나 현탁되는 안약을 포함한다.

입으로의 국소 투여에 적합한 약제 제형은 로젠지, 알약 및 구강청결제를 포함한다.

직장 투여에 적합한 약제 제형은 좌제 또는 관장제로서 제공될 수 있다.

담체가 고체인 비 투여에 적합한 약제 제형은 입경이 20 내지 500 마이크론이며, 흡입 즉, 코에 가까이 고정된 분말 용기로부터 신속한 흡입에 의해 비강으로 투여되는 굵은 분말을 포함한다. 스프레이 또는 점비약으로서 투여하기 위한, 담체가 액체인 적합한 제형은 수용액 또는 유용액의 활성 성분을 포함한다.

흡입에 의한 투여에 적합한 약제 제형은 다양한 유형의 미터화된 용량 가압된 에어로졸, 분무기, 취입기에 의해 생성될 수 있는 분말 또는 미스트를 포함한다.

질 투여에 적합한 약제 제형은 페사리, 탐폰, 크림, 겔, 페이스트, 거품제, 또는 스프레이 제형으로서 제공될 수 있다.

비경구 투여에 적합한 약제 제형은 항산화제, 완충제, 정균제, 및 제형이 대상 수용체의 혈액과 등장성이 되게하는 용질을 포함할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 주사 용액; 및 현탁제 및 농후제를 포함할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 현탁액을 포함한다. 상기 제형은 단위-용량 또는 다중-용량 용기, 예컨대 밀봉 엠플 및 바이알로 제공될 수 있고, 사용 직전에 멸균 액체 담체, 예컨대 주사용수의 첨가만을 필요로 하는 동결건조 상태로 저장할 수 있다. 즉석 주사 용액 및 현탁제는 멸균 분말, 과립, 및 정제로 제조될 수 있다.

상기 특정하게 언급한 성분 이외에, 제형은 해당 형태의 제형에 관련된 분야의 통상의 다른 제제를 포함할 수 있고, 예컨대, 경구 투여에 적합한 제형은 향미제를 포함할 수 있다.

지적된 바와 같이, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 특이적 화합물이 포유동물에 투여된다. 전형적으로, 본 발명의 투여된 제제중 하나의 치료학적 유효량은 예를 들어, 포유동물의 연령 및 체중, 치료가 요망되는 정확한 상태, 중증 정도, 제형의 특성, 및 투여 경로를 포함하는 다수의 인자에 의존할 것이다. 궁극적으로, 치료학적 유효량은 담당의 또는 수의사의 재량에 의해 결정되어야 한다.

전형적으로, 화학식 (I)의 화합물은 일일당 0.1 내지 100mg/수용체(포유동물)의 체중 kg, 더욱 일반적으로는, 일일당 1 내지 10mg/체중 kg으로 제공될 것이다.

상기 언급된 바와 같이, 본 발명은 N-{3-클로로-4-[(3-플루오로벤질)옥시]페닐}-6-[5-({[2-(메탄설포닐)에틸]아미노}메틸)-2-푸릴]-4-퀴나졸린아민 (GW572016) 및 이의 염 및/또는 용매화물을 투여하는 것을 포함하는 암 치료 방법에 관한 것이다.

방광암은 유럽에서는 5번째로 가장 흔한 악성종양이며, 미국에서는 4번째로 가장 빈번한 악성종양에 해당한다 (Jensen 0, Esteve J. Eur J Cancer 1990;26:1167-256; Jemal A, Thomas A. Cancer Statistics, 2002. CA Cancer J Clin 2002; 52:23-47). 전세계적으로 대다수의 방광암은 요상피종양 90 내지 95%를 구성하는 이행상피 유형 (TCC)의 암이다. 이들 종양은 신우, 요관, 방광 (90%) 및 요도 인접부 2/3를 포함하는 요로를 따라 어디에서도 발생할 수 있다. 임상적으로 국소화된 근-침윤성 TCC를 나타내는 환자중 20 내지 80%는 수술 또는 방사선치료로 이루어진 적당한 국소 치료로 치유될 수 있다. 기타 환자들은 치료 가능성이 거의 없는 국소 재발 또는 전이성 질환으로 전개될 것이다 (de Mulder p, van der Meijden A. Bladder cancer. In: Oxford Textbook of Oncolog. 2nd ed. Oxford, NY: Oxford University Press; 2002).

MVAC (메토트렉세이트, 빈블라스틴, 독소루비신 및 시스플라틴) 및 CMV를 포함하는 많은 세포독성제는 요상피 종양의 치료에 평가되어 왔으며, 이들은 현재 미국 및 유럽 각각에서 일차 치료의 성공 사례로서 간주되고 있다 (Loehrer P, Einhorn L. J Clin Oncol 1992; 10:1066-1073); von der Maase H, Hansen S. , J Clin Oncol 2000;18:3068- 3077). 젬시타빈/시스플라틴(GC)은 MVAC에 대한 대안적인 치료법으로서, 이는 더욱 안정한 프로파일을 가지며, 특히 젬시타빈은 일차 치료법으로서 승인되었기 때문에 그 사용이 증가되고 있다.

요상피관의 국소적으로 진행된 또는 전이성 TCC의 이차 치료법은 덜 규정되어 있다. 플라티늄-기재 화학치료법 후에 질환이 진행된 재발된 방광암 및/또는 기타 요상피 암에 대해 승인된 치료법은 없다. 가장 일반적으로 사용되는 제제는 텍산, 젬시타빈, 미토마이신 및 안트라시클린이다. 반응율은 7% 내지 27%로 다양하며, 진행시간 (TTP) 및 전체 생존시간 (OS)는 일반적으로 짧다. 방광암에 대한 빈약한 예후 및 이용가능한 치료법의 불충분함으로 인해, 이들 방식은 미충족된 의료 수요를 나타내며, 효과적인 치료법에 대한 추가적인 연구가 요구된다.

방광암에서 EGFR (erbB1) 및 erbB2의 과다발현은 진행된 단계 및 높은 등급의 종양과 관련있다 (Mellon J, Lunec J. , J Uro 1996; 155:321-6; Orlando C, Sestini R. , J Urol 1996; 156:2089-2093). ErbB1 및 erbB2는 일차 방광암 샘플에서 각각 72.2% 및 44.5%로 발현한다. erbB1과 erbB2의 혼합된 발현은 샘플의 33.9%에서 발견되었다 (Chow N-H, Chan S-H. , Clin Cancer Res 2001;7:1957-1962). 따라서, erbB1과 erbB2 둘 모두의 유효하고 선택적인 이중 억제제로서의 GW572016은 요상피관의 국소적으로 진행되거나 전이성인 TCC를 갖는 환자에 대해 효과적이고, 충분히 용납되는 편리한 치료 옵션을 제공할 수 있다.

본 발명의 한 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물의 요상피암을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 화합물은 화학식 (I')의 화합물, 바람직하게는 화학식 (I")의 화합물이다. 본 발명의 한 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 방광암을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 화합물은 화학식 (I')의 화합물, 바람직하게는 화학식 (I")의 화합물이다. 본 발명의 추가의 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 진행된 또는 전이성 방광암을 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명의 추가의 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 전이 세포 방광암을 치료하는 방법을 제공한다.

췌장암은 서구사회에서 암으로 인한 사망 원인 탑 10중 하나이다. 외과적 절제술은 용태를 개선시키지만, 췌장암 환자의 단지 약 10%만이 이러한 처리에 적합하다. 대부분의 치료 실패는 국소적 재발, 간전이, 또는 이 둘 모두로부터 기인하며, 수술후 1 내지 2년내에 발생한다. 진행된 췌장암은 치료학적 선택이 거의 없으며, 불길한 예후에 속한다. 췌장암 환자의 2% 미만이 5년 생존한다. 국소적으로 진행된 췌장암을 갖는 환자는 화학방사선법, 일반적으로 플루오로우라실(FU)- 또는 젬시타빈-기재 요법으로 또는 젬시타빈 단독으로 치료된다. 원격 전이를 띠는 종양에 있어서, 젬시타빈은 소규모의 무작위적 시험 후, 암관련 증상에서 통계적으로 현저한 개선 (임상증상 호전 23.8% v 4.8%)을 나타내는 표준 치료법이 되었으며, FU-기재 치료법과 비교하여 전체 생존율을 다소 증가시켰다 (5.6개월 v 4.4개월). 젬시타빈을 FU와 혼합시키거나 젬시타빈을 BAY12-9566, 마리마스타트 또는 파르네실트랜스퍼라아제 억제제 티피파르닙(tipifarnib)으로 대체함으로써 전체 생존기간을 증가시키고자 하는 최근 시도된 무작위적인 조절 시험은 젬시타빈 처리된 췌장암 환자의 생존기간을 개선시키지 못하였다. ErbB1 발현은 약 30%이며, erbB2 발현은 약 70%이다.

본 발명의 한 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 췌장암을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 화합물은 화학식 (I')의 화합물, 바람직하게는 화학식 (I")의 화합물이다.

전립선암 발병은 2003년 미국에서 220,000건이 넘는 새로운 경우가 진단되었으며, 이는 28,000건 초과의 사망을 초래한 것으로 평가되었다. 영국, 이탈리아, 스페인, 프랑스 및 독일에서는, 110,000건이 넘는 전립선암이 진단되었으며, 이 질환으로 46,000건의 사망이 발생하였다. 또한, 전립선암은 전세계적으로 남성에게 네번째로 빈번한 암이다. 전립선암 환자의 거의 반은 방사선 또는 전립선절제술로 이루어진 한정적인 국소 치료 후에 진행된 질환으로 재발한다. 진행된 전립선암 환자는 안드로겐 제거에 의해 효과적으로 치료되지만, 질환 진행에 대한 효과는 일시적이다. 이들 환자는 궁극적으로 안드로겐 절제에 비반응적인 되고, 호르몬-무반응성 전립선암 (HRPC)을 갖는 것으로 분류된다 [Crawford, 1989; Eisenberger, 1994]. HRPC 환자에 대한 표준 옵션으로는 이차 호르몬 치료 또는 화학요법을 포함한다. 미세소관 무결성에 영향을 끼치는 제제를 포함하는 복합 화학치료 요법은 용납가능한 부작용이 있는 활성을 나타내는 것으로 보여진다. 그러나, 높은 전립선 특이적 항원 (PSA) 반응율로 인해, 반응의 중간 기간은 약 6개월로 한정된다. 생존에 관한 이득은 여전히 입증되어야 한다. 증상 경감에서의 진보 및 삶의 질에서의 개선이 화학요법 및 스테로이드로 수득되었지만, 생존율을 증대시킬 혁신적인 방법이 요구된다. 전립선암 치료에 대한 신규한 방법은 종양 세포 생존에 중요한 경로를 표적으로 하는 치료법을 이용하는 것을 포함한다. 전이성 HRPC의 치료에 있어서, 미톡산트론/프레드니손 또는 에스트라무스틴이 일반적으로 사용된다. 또한, 전이성 HRPC에 대한 일차 치료로서 프레디니손과 혼합된 도세탁셀 (75mg/m2, 매 3주)이 2004년 5월 19일 승인되었다. 현재, 다중 LHRH 아고니스트 및 항-안드로겐이 호르몬 민감성 전립선암에 사용된다. 화학치료 제제로의 여러 소규모 시험이 진행중이다. 안드로겐 폐쇄제의 이용 및 이러한 치료법과 관련된 독성을 지연시키는 능력은 이러한 요법에서 erbB1/2 억제제의 임상적으로 중요한 이점일 수 있다. erbB1 및 erbB2 둘 모두는 전립선암에서 발현된다. 주요 연구는 표준 호르몬 치료에 대해 내성을 띠게 되어 전립선암의 진행이 증가되게 발현됨을 나타내었다 (41-100% erbB1; 20-80% erbB2). ErbB1 또는 ErbB2 표적 치료법으로의 임상 연구는 전립선암에서 유망하지 않았다. 호르몬-무반응성 질환에 대한 전립선암의 진행과 관련된 erbB1 및 erbB2의 발현으로서, erbB 수용체의 이중 억제제가 수용체를 특이적으로 단독 억제시키는 약물 보다 더욱 효과적인 치료 옵션을 제공할 수 있다.

본 발명의 한 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 전립선암을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 화합물은 화학식 (I')의 화합물, 바람직하게는, 화학식 (I")의 화합물이다. 본 발명의 한 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 호르몬 무반응성 전립선암을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 화합물은 화학식 (I')의 화합물, 바람직하게는, 화학식 (I")의 화합물이다.

결장직장암은 서구 사회에서 네번재로 가장 흔한 유형의 암이며, 북아메리카에서 두번째로 빈번한 암관련 사망의 원인이 된다. 미국에서 결장직장암의 연 발병건은 약 148,300건 (72,600명의 남성 및 75,700명의 여성)에 해당하며, 56,600건은 사망에 이른다 (27,800명의 남성 및 28,800명의 여성). 일반적 인구중의 결장직장암의 수명 위험율은 약 5 내지 6%이다. 가족력 위험성을 가진 환자 - 결장직장암에 걸린 일촌 또는 이촌 친척 (또는 이 둘 모두)이 있는 환자 -는 결장직장암 환자의 약 20%를 이루며, 매년 전체 결장암의 약 5 내지 10%는 체세포 우성 방식으로 유전된다.

외과적 절제술 단독은 잠재적으로 치료력이 있지만, 많은 환자들에게서 국소 또는 원위 재발이 발생하며, 재발의 가장 높은 위험성을 갖는 환자들은 플루오로우라실-기재 전신 애쥬번트 화학치료를 받을 것을 권고받으며, 이는 많은 조합적 그룹의 시험 및 분석에서 유익한 것으로 나타났다.

ErbB2는 일차 종양에서 중간 내지 고도로 발현된다. erbB2의 실험관내 발현은 아데노마-대-칼시노마 서열, 종양 단계, 침윤 가능성에서의 진행과 관련이 있으며, 생존을 위한 독립적인 예후 인자이다. ErbB1의 역할이 erbB2 보다 더욱 중요하지만 ErbB1 발현은 성장에서 erbB2 보다 낮다 (40% 대 60%). erbB1, erbB2 및 erbB3의 공동 발현은 ~30%이다 (모든 등급).

본 발명의 한 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 결장직장암을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 화합물은 화학식 (I')의 화합물, 바람직하게는, 화학식 (I")의 화합물이다. 한 구체예에서, 암은 결장암이다. 또 다른 구체예에서, 암은 직장암이다.

전세계에서 폐암의 매년 발생 인구는 1백만 2천 4백명에 달한다. 또한, 전세계 1백만 1천명은 매년 폐암으로 인해 사망하는 것으로 추정된다 [Parkin, 2001]. 이들 환자중 약 3/4는 비소세포 폐암(NSCLC)를 가지며, 대부분은 진단시 국소적으로 진행된 또는 전이성 질환을 가질 것이다. 현재, 이들 환자에 대한 치료력이 있는 치료법은 없으며; 따라서, NSCLC 환자에서 화학치료요법의 목표는 증상의 경감을 통해 삶의 질을 연장시키는 것이다. 진행된 NSCLC의 일차 복합 화학요법은 20-50%의 반응율을 유도하며, 이는 추가적인 환자에 대해 질환 안정화가 달성된다. NSCLC에 대한 일차 표준 치료는 현재 비노렐빈 또는 젬시타빈과 혼합된 시스플라틴 또는 파클리탁셀 또는 도세탁셀과 혼합된 카르보플라틴을 포함한다 [Schiller, 2002; Fossella, 2003]. 쉴러 등에 의해 보고된 4 플라티늄 더블렛에서의 진행시간 (TTP) 및 전체 생존기간(OS)은 유사하며, 각각 4개월 및 8개월이었다. 포셀라(Fossella) 등은 카르보플라틴과 도세탁셀과의 혼합물의 경우 TTP 및 OS는 5개월 및 9개월이다.

이차 화학치료요법의 이용은 목적하는 이점 (생존의 연장 또는 삶의 질에 있어서의 개선)과 약물-관련 독성 사이의 균형을 달성해야 한다. 도세탁셀, 비노렐빈, 젬시타빈, 이리노테칸, 파클리탁셀 및 프레메트렉스드는 NSCLC 환자에서 이차 치료요법으로서 활성을 나타내었다. 현재, 이전 플라티늄-기초 화학치료법의 실패 후, 국소적으로 진행된 또는 전이성 비소세포 폐암에 걸린 환자의 치료를 위해 단지 도세탁셀만이 지적되고 있다. EGFR 억제제 또한, 고찰되었다. 제피티닙 (Iressa®) 단일치료법은 플라티늄-기초 및 도세탁셀 화학치료법 둘 모두의 실패 후, 국소적으로 진행된 또는 전이성 NSCLC 환자를 위해 미국에서 사용 승인되었다. 재발된 NSCLC 환자에서 에르로티닙(Tarceva®)의 상태 III 연구로부터의 일차 결과는 전체 생존율의 개선이 달성되었음을 나타내었다. 세툭시맵(Cetuximab)(Erbitux®) 즉, erbB1을 표적으로하는 모노클로날 항체는 CRC에서 최근에 입증되었으며, 진행중인 실험은 NSCLC에서의 이의 활성을 조사중이다.

본 발명의 한 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 폐암을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 화합물은 화학식 (I')의 화합물, 바람직하게는, 화학식 (I")의 화합물이다. 한 구체예에서, 암은 비소세포 폐암이다.

미국에서는 매년 약 14,300명의 여성이 난소암으로 사망한다. 이는 여성에게서 다섯번째로 흔한 암이며, 생식기 암으로부터 사망을 초래한다. 국소 질환을 갖는 여성에게서 난소암의 5년 생존율은 약 95%이다. 그러나, 약 60%의 여성이 진단시 진행된 단계 (단계 III/IV)의 난소암을 가지며, 원위 질환의 5년 생존율은 단지 31%이다. 환자의 연령 및 생애가 난소암 발병에 영향을 끼친다. 65세 이상의 여성에게서 더 높은 질환 발병율이 나타나며 (65세 미만의 더 어린 여성 100,000에 있어서 11.2인 것과 비교하여 100,000명 여성에 있어서 56.3), 현저하게 약한 5년 생존율 (65.8%와 비교하여 32.9%)을 나타낸다.

미국에서, 진행된 상피 난소암에 걸린 여성의 표준 치료법은 지네콜로직 온콜로지 그룹(Gynecologic Oncology Group (GOG))에 의해 일차적으로 수행된 일련의 무작위적 시험으로부터 개발되었다. 1996년, 상기 그룹은 이전의 비치료된 진행된 단계 III 및 IV 질환을 갖는 환자에서 시스플라틴과 시클로포스파미드 대 시스플라틴과 파클리탁셀의 무작위전 비교 결과를 보고하였다. 시스플라틴과 파클리탁셀 요법은 이 시험에서 하기 결과에 기초하여 우수한 것으로 판단되었다: 전체 증진된 반응율 (73% v 60%; P=.01); 증가된 임상적 완전 반응율 (54% v 32%); 무진행 생존기간의 증가 (PFS; 18.1개월 v 13.6개월; P<.001); 및 가장 중요하게는, 증가된 전체 평균 생존기간 (38개월 v 24개월; P<.001). 이어서 이러한 연구 결과는 시스플라틴과 시클로포스파미드 요법 대 시스플라틴과 파클리탁셀 요법으로 무작위적으로 유사하게 지정된 단계 IIB 내지 IV 상피 난소암 환자를 대상으로 한 유럽-캐나다 시험에 의해 확인되었다. 후자 연구에서, 시스플라틴은 3시간 주입물로서 투여된 파클리탁셀과 혼합한 반면, GOG 시험에서는, 파클리탁셀이 24시간 주입물로서 투여되었다. 프로토컬의 이러한 차이에도 불구하고, 양 연구는 이전에 비처리된 진행된 난소암 환자에서 시스플라틴과 파클리탁셀로의 초기 치료의 우수성을 입증하였다. 시스플라틴의 유사체인 카르보플라틴은 어미 화합물 시스플라틴 보다 비혈액 독성이 덜하며, 카르보플라틴과 파클리탁셀의 복합 치료는 활성적인 요법인 것으로 밝혀졌다.

ErbB1은 종양 샘플에서 통상적으로 발현되는 반면, erbB-2는 다소 덜 발현된다. erbB1과 erbB2의 공동발현 또한 일반적이다. 이종이식 동물 모델 및 환자 샘플에서, erbB1은 빈약한 생존 및 화학치료법 내성에 대한 독립적인 예후적 마커이다. erbB1 과다발현은 약 70%인 반면, erbB2 과다발현은 약 30-60%이다. erbB1과 erbB2의 공동발현 또한 일반적이다: 약 30-60%. ErbB1 발현은 다변량 분석에서 DFS 및 생존에 대한 독립적인 예후적 인자이나, erbB2 예후인자는 다소 약하다. 난소암 세포주에서, erbB1 성장 의존성에 대해 입증되었다.

본 발명의 한 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 난소암을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 화합물은 화학식 (I')의 화합물, 바람직하게는, 화학식 (I")의 화합물이다.

외음암은 여성의 외부 성별 기관인 외음부에 걸리는 여성 희귀암이며, 중간 연령 내지 고령의 여성에게서 더욱 일반적이다. 외음암의 표준 치료법은 수술, 방사선치료법 및/또는 화학치료법, 초기 단계 질환에서는 플루오로우라실의 전형적인 국소 투여, 및 늦어졌거나 전이성 질환에서는 단일치료법으로서 또는 기타 제제와 함께 시스플라틴의 투여를 포함한다.

본 발명의 한 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 외음암을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 화합물은 화학식 (I')의 화합물, 바람직하게는, 화학식 (I")의 화합물이다.

자궁경부암은 전세계 여성에게서 두번째로 흔한 암이며, 저개발국가의 여성에서는 암 관련 사망을 초래한다. 전세계적으로 매년 약 500,000건의 자궁경부암이 진단된다. 일정한 검사로 인해 미국에서 침윤성 자궁경부암의 발병율을 감소시켰으며, 여기서 약 13,000건의 침윤성 자궁경부암 및 50,000건의 본래의 자궁경부암 (즉, 국소 암)이 매년 진단된다. 침윤성 자궁경부암은 중년 및 노년의 여성에서 더욱 일반적이며, 일정한 검사 및 조기 치료를 덜 받게되는 빈곤한 사회경제적 상태의 여성에게서 더욱 일반적이다. 또한, 아프리카 아메리칸, 히스파니아 및 아메리카 원주민 여성의 발병율이 더 높다. 자궁경부암의 표준 치료법은 수술, 방사선치료 및/또는 화학치료를 포함하며, 전형적으로 단일치료제로서의 시스플라틴 또는 기타 제제 예컨대, 플루오로우라실과의 투여가 있다.

본 발명의 한 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 자궁경부암을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 화합물은 화학식 (I')의 화합물, 바람직하게는, 화학식 (I")의 화합물이다.

자궁내막암에서 erbB2의 관련성은 유전자 증폭의 존재 또는 부재하의 과다 발현을 통해서이다. 자궁내막염의 10% 내지 15%는 면역조직화학요법에 의해 측정한 결과 정상 자궁내막 상피세포와 비교하여 erbB2의 과다발현을 나타냈다. 일부 연구는 과다발현을 나타내는 종양중 자궁내막암에서 erbB2 유전자가 증폭됨을 보고하였다. erbB2의 경우 과다발현은 고급 등급 및/또는 진행 상태 종양의 부분으로 제한된 것으로 보인다. 과다발현과 진행악화는 관련되어 관찰되는 경향이 있지만, erbB2 발현과 임상 결과와의 상호관계는 덜 결정적이다 (Am J Obstet Gynecol 164:15-21, 1991; Gynecol Oncol 47:179-185, 1992; Gynecol Oncol 53:84-92, 1994).

본 발명의 한 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 자궁내막암을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 화합물은 화학식 (I')의 화합물, 바람직하게는, 화학식 (I")의 화합물이다.

신장 세포 칼시노마 (RCC)는 성인 악성종양의 3%에 해당하는 것으로서 미국에서 암 사망 초래 원인중 6번째이다. 2000년 미국에서는 약 31,2000건이 진단되었으며, 약 12,000건은 사망에 이르렀다. 나머지 나라에서의 발병율은 이보다 10배 초과로 다양하다. 스칸디나비아 및 북유럽의 다른 지방에서 발병률이 높았으며, 영구 및 웨일스 지방에서는 이 보다 낮았다. 가장 낮은 율은 인도, 중국 및 일본, 및 중앙아메리카 및 남아메리카 지역에서 보고되었다. 지난 25년 동안 발병률은 꾸준히 증가하고 있다. ErbB1 과다발현은 40% 내지 80% 초과이다. 과다발현은 종양 단계 및 생존기간과 관련이 있다. 진행된 전이성 RCC를 갖는 환자에 대한 생존 연장에서 IL-2 및/또는 IFN-알파로의 사이토킨 치료 역할은 논쟁의 여지가 있으며, 이는 약 15%의 반응율을 보이며, 치료요법으로부터 실질적인 독성을 띤다. 반응 기간은 6-10개월이다. 어떤 제제도 10% 초과의 환자에서 반응을 일관되게 달성하지 못하였기 대문에, RCC는 화학요법 및 호르몬 요법에 대해 원래 내성을 띤다.

본 발명의 한 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 신장세포암을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 화합물은 화학식 (I')의 화합물, 바람직하게는, 화학식 (I")의 화합물이다. 한 구체예에서, 신장 세포암은 신장 세포 칼시노마이다.

육종은 늑막 또는 복막 라이닝의 암이다. 표피 성장 인자 수용체 (EGFR)의 과다발현은 폐, 유방 및 육종을 포함하는 많은 고형 종양에서 일반적으로 발견된다. 과다발현은 빈약한 예후와 방사선 및 화학요법에 대한 내성과 관련있는 것으로 증명되었다. 최근의 증거는 EGFR의 상향 조절 및 활성화가 초기 발암에서 중요한 역할을 수행할 수 있음을 시사한다. 육종의 원인으로써 공지된 발암성 아스베스토스 섬유는 EGFR의 발현을 상향조절하는 것으로 공지되어 있다. MET 5A 세포를 아스베스토스에 노출시키면 핵 인자-kB (NF-kB) 즉, 염증, 증식 및 폐 방어에 대한 많은 내인성 유전자의 조절에서 중요한 전사 인자의 활성화를 유도한다. 아스베스토스-매개된 EGFR/NF-kB 시그널 경로의 조정은 악성 육종의 화학적예방 및 치료 둘 모두에 대한 신규한 치료학적 방법의 개발에 중요할 수 있다 (Faux, EGFR Induced Activation of NF-kB in mesothelial Cells by Asbestos Is Important in Cell Survival, Proceedings of the American Association for Cancer Research, AACR, Vol.42, March 2001).

본 발명의 한 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 육종을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 화합물은 화학식 (I')의 화합물, 바람직하게는, 화학식 (I")의 화합물이다.

위식도 접합부를 포함하는 식도에서 발생하는 암은 미국에서는 비교적 흔하지 않으며, 2003년에는 13,900건의 발생 및 13,000건의 사망이 보고되었다. 위험성은 노화에 따라 즉, 67세 평균 연령에서 증가하였다. 식도암은 아메리카 남성중에서 암으로 인한 사망 원인중 7번째이다. 전세계적으로, 식도암은 암으로 인한 사망 원인중 6번째이다. 90% 초과의 식도암은 편평세포 칼시노마 또는 아데노칼시노마이다. 모든 아데노칼시노마중 약 3/4이 식도말단에서 발견되며, 반면 편평세포 칼시노마는 중간 및 하부 3/1 사이에 더욱 균일하게 분포되어 있다. 전체적으로, 환자중 50% 초과는 표출시 절제불가능하거나 전이성 질환을 갖는다. 5년의 전체적인 생존기간은 빈약하며, 현재 14%이다. 식도의 편평세포 칼시노마 및 아데노칼시노마 둘 모두가 화학요법에 반응적이지만, 어떠한 치료법도 현재 승인되지 않았다. ErbB1의 발현 (30% 아데노칼시노마; 70% 편평세포 칼시노마)은 식도암에 걸린 환자에서 예후적 지시물인 것으로 여겨진다. ErbB2 발현은 식도 말단 및 GE 접합부의 아데노칼시노마에서 약 25%이다.

본 발명의 한 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 식도암을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 화합물은 화학식 (I')의 화합물, 바람직하게는, 화학식 (I")의 화합물이다.

여러 임상병리학적 연구에서 면역조직화학법을 이용하여 악성 타액선 종양에서 EGFR 및 erbB2의 과다발현을 시험하였다. 선양낭성암종 (ACC)에 있어서, EGFR 과다발현의 빈도는 0-85%로 다양하며, 마찬가지로 erbB2 과다발현의 빈도 또한 0-100%로 매우 다양하다. 이러한 빈도는 일반적으로 제한된 샘플 규격을 갖는 소규모 시리즈에 기초한다. 기타 인자 예컨대, 실험실 염색 및 스코어링 방법에서의 차이, 및 항체의 선택은 불균일한 결과에 기여하는 것으로 보인다. 최근 공개된 큰 일련의 137개 타액선 칼시노마 (Glisson et al., ClinCanRes, 10:944-46, 2004)에서, erbB2 과다발현의 전체적인 빈도 (10% 이상의 종양 세포에서 2+ 내지 3+ 완전막 염색은 과다발현에 대한 파지티브로써 기록)는 모든 조직학적 서브타입의 타액선 칼시노마중 17% (137개중 23개)이다. erbB2의 과다발현은 ACC에서는 희귀한 것으로 밝혀진 반면 (4%, 70중 3), 과다발현은 타액관암에서 흔하다 (83%, 12중 10). 이러한 관찰은 타액관 서브타입의 전형적인 고급 등급 조직학적 특성과 공격적인 성형 및 유방암에 대한 조직기원성 유사성과 일관된 것으로 여겨진다.

본 발명의 한 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 타액선암을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 화합물은 화학식 (I')의 화합물, 바람직하게는, 화학식 (I")의 화합물이다.

간 칼시노마 (HCC)는 매년 1백만 2천건이 발생하는 세계적으로 가장 흔한 암중 하나이다. 이의 발병은 전세계적으로 퍼져있는 C형 간염 감염으로 인해 빠르게 증가하고 있다. 2003년 미국에서는 약 17,300건이 발생하였으며, 14,400건의 사망이 보고되었다. 절제가능한 질환을 갖는 대부분의 환자에서 수술은 선택될 수 있는 치료법이다. 국소화된 HCC에 대한 치료는 수술, 고주파치료, 에탄올 주입 또는 경동맥화학색전술을 포함한다. 그러나 보조 치료법은 확립되지 않았으며, 대부분의 종양이 재발된다. 6개월의 평균 생존기간을 갖는 재발성 또는 전이성 HCC의 예후로는 불충분하다. 단일 제제로서 또는 혼합되는 독소루비신은 진행성 HCC에 대한 일반적인 치료제이다; 그러나, 반응율은 낮으며, 세팅시 생존율이 개선된 치료법은 없다. 화학색전 또는 경동맥 색전과 화학치료법이 또한 일반적으로 수행된다. erbB1의 과다발현은 다양한 정도로 보고된 과다발현을 갖는 HCC에서 보고되었다. 종양에서 erbB1의 과다발현은 공격적인 성장, 빈약한 예후, 및 화학치료에 대한 내성과 관련이 있다. 간암 세포주에서 ErbB1과 erbB2 발현은 중용한 성장 조절제이다.

본 발명의 한 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 간암을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 화합물은 화학식 (I')의 화합물, 바람직하게는, 화학식 (I")의 화합물이다.

EGFR은 신경교종 (Bredel et al,ClinCanRes, 5: 1786-1792, 1999)을 포함한 뇌의 악성 종양 (Heimberger et al,ClinCanRes, 8: 3496-3502, 2002)에서 빈번하게 과다발현한다. 따라서, erbB1과 erbB2의 효과적이고 선택적인 이중 억제제로서의 GW572016은 신경교종을 포함한 뇌암 환자에게서 효과적이고, 충분히 용납되는 편리한 치료 옵션을 제공할 수 있다.

본 발명의 한 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 뇌암을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 화합물은 화학식 (I')의 화합물, 바람직하게는, 화학식 (I")의 화합물이다. 한 구체예에서, 뇌암은 신경교종이다.

흑색종은 매우 심각한 형태의 피부암이다. 멜라닌으로 불리된 피부 색소를 만드는 멜라노사이트-세포에서 시작된다. 흑색종은 모든 피부암의 단지 약 4%에 해당하지만, 이는 대부분의 피부암 관련 사망을 초래한다. 전형적으로, 흑색종은 수술로 치료되며, 높은 위험성을 갖는 경우, 예를 들어, 인터페론 α-2b로의 면역치료법이 수행된다.

본 발명의 한 구체예에서, 치료학적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 흑색종을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 본 화합물은 화학식 (I')의 화합물, 바람직하게는, 화학식 (I")의 화합물이다.

본 발명의 상기 암 치료법에서, 화학식 (I), (I') 및 (I")의 화합물은 상기 기술된 바와 같다.

하기 실시예는 단지 예시를 위한 것이며, 어떤식으로든 본 발명의 범위를 제한하고자 하는 것은 아니다.

본원에 사용된 바와 같이, 이들 공정, 제법 및 실시예에 사용된 기호 및 규정은 현 화학문헌, 예컨대, [the Journal of the American Chemical Society 또는 the Journal of Biological Chemistry]에서 사용되는 것과 일치한다. 표준 단일 문자 또는 세문자 약어는 일반적으로 아미노산 잔기를 나타내기 위해 사용되었으 며, 이는 특별히 언급되어 있지 않는 한 L-형태인 것으로 추측된다. 특별히 언급되지 않는 한, 모든 출발 물질은 시중의 공급원으로부터 수득되며, 추가의 정제 없이 사용되었다. 특히 하기 약어가 실시예 및 상세한 설명에 사용될 수 있다:

g (그램)	mg (밀리그램)
L (리터)	mL (밀리리터)
μL (마이크로리터)	psi (평방인치당 파운드)
M (몰농도)	mM (밀리몰농도)
N (평균)	Kg (킬로그램)
i.v. (정맥내)	Hz (헤르츠)
MHz (메가헤르츠)	mol (몰)
mmol (밀리몰)	RT (실온)
min (분)	h (시간)
mp (융점)	TLC (박층 크로마토그라피)
Tr (보유 시간)	RP (역상)
DCM (디클로로메탄)	DCE (디클로로에탄)
DMF (N,N-디메틸포름아미드)	HOAc (아세트산)
TMSE (2-(트리메틸실릴)에틸)	TMS (트리메틸실릴)
TIPS (트리이소프로필실릴)	TBS (t-부틸디메틸실릴)
HPLC (고압 액체 크로마토그래피)
THF (테트라히드로푸란)	DMSO (디메틸설폭시드)
EtOAc (에틸 아세테이트)	DME (1,2-디메톡시에탄)
EDTA (에틸렌디아민테트라아세트산)
FBS (소태 혈청)
IMDM (이스코브 개질된 둘베코 배지)
IMS (공업용 메틸화된 스피릿)
PBS (인산염 완충된 염수)
RPMI (로스엘 파크 메모리얼 인스티튜트)
RIPA 완충액
RT (실온)

* 150mM NaCl, 50mM Tris-HCl, pH7.5, 0.25% (w/v)-데옥시콜레이트, 1% NP-40, 5mM 나트륨 오르토바나데이트, 2mM 나트륨 플루오라이드, 및 프로테아제 억제제 칵테일.

다르게 언급되지 않는 한, 모든 온도는 ℃ (섭씨)로 나타내었다. 다르게 언급되지 않는 한, 모든 반응은 실온의 불활성 대기하에 수행하였다.

GW572016F는 라파타닙이며, 이의 화학명은 N-{3-클로로-4-[(3-플루오로벤질)옥시]페닐}-6-[5-({[2-(메탄 설포닐)에틸]아미노}메틸)-2-푸릴]-4-퀴나졸린아민 디 토실레이트 모노히드레이트이다.

실시예 1

GW572016F의 제조

단계 1

톨루엔 (5vol)중의 3H-6-요오도퀴나졸린-4-온 (화합물 A)의 교반된 현탁액을 20 내지 25℃에서 트리-n-부틸아민 (1.2 당량)으로 처리한 후, 90℃로 가열하였다. 포스포러스 옥시클로라이드 (1.1 당량)을 첨가한 후, 반응 혼합물을 가열하여 환류시켰다. 반응 혼합물을 50℃로 냉각시키고, 톨루엔 (50vol)을 첨가하였다. 화합물 C (1.03당량)을 고형물로서 첨가하고, 슬러리를 다시 90℃로 가온시키고, 1시간 동안 교반하였다. 슬러리를 제 2 용기로 옮기고, 첫번째 용기를 톨루엔 (2vol)으로 린싱하고, 반응 혼합물과 혼합시켰다. 반응 혼합물을 70℃로 냉각시키고, 1.0M 수산화나트륨 수용액 (16vol)을 1시간에 걸쳐 교반된 슬러리에 적가하면서 함유물 온도는 68-72℃로 유지시켰다. 혼합물을 1시간 동안 65-70℃에서 교반시킨 후, 1 시간에 걸쳐 20℃로 냉각시켰다. 현탁액을 20℃에서 2시간 동안 교반시키고, 생성물을 여과에 의해 모으고, 물 (3x5vol)과 에탄올 (IMS, 2x5vol)로 연속적으로 세척하고, 진공하에 50-60℃에서 건조시켰다. 부피는 사용된 화합물 A의 양과 관련하여 인용된 것이다. 관찰된 수율: 백색 또는 황색 결정으로서 90 내지 95%.

단계 2

N-{3-클로로-4-[(3-플루오로벤질)옥시]페닐}-6-요오도-4-퀴나졸린아민 - 화합물 D (1wt), 붕산 - 화합물 E (0.37wt, 1.35당량) 및 10% 목탄상 팔라듐 (0.028wt, 50% 수분)의 혼합물을 IMS (15vol)중에서 슬러리화시켰다. 생성된 현탁액을 5분 동안 교반시키고, 디이소프로필에틸아민 (0.39vol, 1.15당량)으로 처리하고, 반응이 완료되는 경우 (HPLC 분석으로 확인) 약 70℃로 약 3시간 동안 가열하였다. 혼합물을 테트라히드로푸란 (THF, 15vol)으로 희석한 후, 고온 여과시켜 촉매를 제거하였다. 용기를 IMS (2vol)로 린스하였다.

물 (1.5vol)중의 p-톨루엔설폰산 모노히드레이트 (1.5wt, 4당량) 용액을 5-10분에 걸쳐 65℃로 유지된 여과된 용액에 첨가하였다. 결정화 후, 현탁액을 1시간 동안 60-65℃에서 교반하고, 약 25℃에서 1시간에 걸쳐 냉각하고, 이 온도에서 추가로 2시간 동안 교반하였다. 고형물을 여과에 의해 모으고, IMS(3vol)로 세척 하고 진공하에 약 50℃에서 건조시켜 황색-오렌지색 결정 고형물로서 목적하는 화합물 F를 수득하였다 (약 5%w/w EtOH를 함유하는 에탄올 용매화물로서 분리됨).

단계 3

화합물 F^# (1wt) 및 2-(메틸설포닐)에틸아민 히드로클로라이드 (0.4wt, 1.62당량)을 THF (10vol)중에 현탁시켰다. 연속하여, 아세트산 (0.354vol, 4당량) 및 디-이소프로필에틸아민 (DIPEA, 1.08vol, 4.01당량)을 첨가하였다. 생성 용액을 약 1시간 동안 30-35℃에서 교반시킨 후, 약 22℃로 냉각시켰다. 나트륨 트리-아세톡시보로히드라이드 (0.66wt, 2.01당량)를 약 15분에 걸쳐 (이 지점에서 일부 비등이 관찰됨) 연속 충전물로서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 약 2시간 동안 약 22℃에서 교반시킨 후, HPLC 검정에 대해 샘플링하였다. 반응을 수산화나트륨 수용액 (25% w/w, 3vol) 및 이어서, 물 (2vol)을 첨가함으로써 켄칭시키고, 약 30분 동안 교반하였다 (가성 첨가의 출발시 일부 비등이 관찰됨).

그 후, 수성상을 분리하고, THF (2vol)로 추출하고, 혼합된 THF 추출물을 25% w/w 염화암모늄 수용액 (2 x 5vol)²으로 2회 세척하였다. 물 (1vol)¹중의 p-톨 루엔설폰산 모노히드레이트 (p-TSA, 0.74wt, 2.5당량) 용액을 제조하고, 약 60℃로 가온시키고, GW572016F (화합물 G) (0.002wt) 시드를 첨가하였다.

GW572016의 유리 염기의 THF 용액을 30분 이상에 걸쳐 p-TSA 용액에 첨가하면서, 60±3℃로 배치 온도를 유지시켰다. 생성된 현탁액을 약 60℃에서 1-2시간 동안 교반하고, 1시간에 걸쳐 20-25℃로 냉각시키고, 이 온도에서 약 1시간 동안 에이징시켰다. 고형물을 여과에 의해 모으고, 95:5 THF:물 (3 x 2 vol)로 세척하고, 진공하에 약 35℃에서 건조시켜 GW572016F - 화합물 G를 연황색 결정 고형물로서 제공하였다. 예상되는 수율은 이론상 80%이며, 117% w/w이다.

¹ 최소 반응 부피 약 1vol

² 최대 반응 부피 약 17vol

^# 검정을 위해 수정됨

단계 4

테트라히드로푸란 (THF, 14vol) 및 물 (6vol)중의 N-{3-클로로-4-[(3-플루오로벤질)옥시]페닐}-6-[5-({[2-(메탄 설포닐)에틸]아미노}메틸)-2-푸릴]-4-퀴나졸린 아민 - 화합물 G (1wt)의 디토실레이트 모노히드레이트 염의 현탁액을 30분 동안 약 55-60℃로 가열시켜 용액을 제공하고, 이를 여과에 의해 정화시키고, 라인을 결정화 용기로 THF/물 (7:3 비, 2vol)을 이용하여 세척하였다. 생성된 용액을 가열하여 환류시키고, 테트라히드로푸란 (9vol, 95% w/w 물과의 공비혼합물)을 대기압하에서 증류시켰다.

용액을 N-{3-클로로-4-[(3-플루오로벤질)옥시]페닐}-6-[5-({[2-(메탄 설포닐)에틸]아미노}메틸)-2-푸릴]-4-퀴나졸린아민 디토실레이트 모노히드레이트 (0.002wt)로 시딩하였다. 결정화가 성립되면, 물 (6vol)을 첨가하면서 반응 온도를 55℃ 초과되도록 유지시켰다. 혼합물을 약 2시간에 걸쳐 5-15℃로 냉각시켰다. 고형물을 여과에 의해 모으고, 테트라히드로푸란/물 (3:7 비, 2vol) 및 이어서, 테트라히드로푸란/물 (19:1 비, 2vol)로 세척하고, 진공하에 45℃에서 건조시켜 연황색 결정 고형물로서 N-{3-클로로-4-[(3-플루오로벤질)옥시]페닐}-6-[5-({[2-(메탄 설포닐)에틸]아미노}메틸)-2-푸릴]-4-퀴나졸린아민 디토실레이트 모노히드레이트를 수득하였다.

실시예 2

세포 성장을 50% 억제하는 GW572016F의 농도 (IC ₅₀ ) 측정

사람 방광 세포주 HT-1197, HT-1376 및 T24, 및 난소 세포주 SKOV3을 아메리칸 타입 컬쳐 콜렉션으로부터 입수하였다. 세포를 10% 소태 혈청 (FBS, HyClone # SH30071.03)을 갖는 RPMI 1640 (Invitrogen # 22400-089)중에서 조직 배양 플라스 크에서 유지시키고, IC₅₀ 측정을 위해 플레이팅할 때 까지 5% CO₂ 대기중에서 37℃하에 인큐베이션시켰다. IC₅₀ 측정을 위해서, 세포를 96-웰 조직 배양 디쉬에서 웰당 5,000 세포로 적당한 배지중에 플레이팅시키고, 밤새 인큐베이터에 보관하였다. 초기 시딩하고 약 24시간 후, 세포를 GW572016의 디토실레이트 염 즉, GW572016F에 노출시켰다. 세포를 5% FBS, 50 마이크로그램/ml 젠타미신 및 0.3% DMSO와 GW572016F의 세배 일련 희석물을 함유하는 50% 저급 글루코오스 DMEM 배지와 50% RPMI중에 투여하였다. 최종 농도는 30 마이크로몰 내지 0.00152 마이크로몰이다. 화합물 노출 3일 후, 성장 배지를 흡출에 의해 제거하였다. 웰당 0.1ml의 메틸렌 블루 (Sigma #M9140, 50:50 에탄올:물중의 0.5%)로 세포를 염샘시킨 후, 30분 이상 동안 실온에서 인큐베이션함으로써 세포 바이오매스를 측정하였다. 염색약을 흡출시키고, 플레이트를 탈이온수의 침수에 의해 린싱하고, 공기 건조시켰다. 0.1ml의 가용화 용액 (PBS중의 1.0% N-라우릴 사카로신, 나트륨 염, Sigma #L5121)을 첨가하여 세포로부터 염색약을 방출시켰다. 플레이트를 40분 동안 실온에서 인큐베이션시켰다. 테칸 스펙트라 마이크로-플레이트 리더(Tecan Spectra micro-plate reader)로 620nM에서 흡광도를 측정하였다. 비처리된 대조군 웰과 비교하여 세포 성장 억제율을 계산하였다. 레벤베르그 및 마르퀴아르트 (Levenberg and Marquardt: Mager, 1972) 방법 및 하기 방정식을 이용하여 IC₅₀ 값을 삽입하였다: y = V_max * [1-(xⁿ/(Kⁿ+Xⁿ))], 여기서, "K"은 IC₅₀이다.

결과는 추가적 세포주에 대한 결과와 함께 표 1에 기록하였다. 추가적인 세포주를 제조하고, 실시예 2에 언급된 방법과 유사한 방법에 따라 GW572016F에 노출시켰다. 모든 세포주는 아메리칸 타입 컬쳐 콜렉션으로부터 입수가능하며, 이들을 화합물 노출 기간 동안 대수 성장을 제공하는 밀도로 플레이팅하였다.

표 1

기원 조직	세포주	성장 억제 (IC50 μM)
방광	H1197	7.78
방광	H1376	3.34
방광	T24	8.22
결장 아데노칼시노마	SW480	6.86
결장직장 칼시노마	Lovo	3.39
결장직장 칼시노마	HCT 116	5.87
결장직장 - 맹장	NCI-H747	1.49
결장 아데노칼시노마	LS174T	1.51
결장 아데노칼시노마	DLD-1	3.63
결장 아데노칼시노마	HT29	5.24
결장 아데노칼시노마	WS620	6.75
결장 아데노칼시노마	Colo 205	7.70
직장 아데노칼시노마	SW837	4.7
결장직장 칼시노마	RKO	5.48
췌장 칼시노마	BxPC3	1.41
폐 칼시노마	H157	5.98
폐 칼시노이드 기관지	NCl-H727	7.59
폐 칼시노마	NCl-H2009	11.5
폐 칼시노마	A549	4.98
폐 칼시노마	A427	5.95
폐 칼시노마	NCl-H460	9.00
폐 칼시노마	CaLu3	0.057
NSCLC	NCl-H322	0.92
NSCLC-알베올라	NCl-H358	0.27
폐 표피	Calu1	5.51
멜라노마	SKMEL28	5.90
정상 유방	HMEC	1.34
정상 사람 포피	HFF	6.45
난소 칼시노마	SKOV3	1.25
전립선 칼시노마	PC3	7.15
전립선 칼시노마	LNCaP	4.69
신장	786O	1.82
트랜스펙트된 erbB2	H16N2	0.03
외음부 칼시노마	A431	0.23

실시예 3

요상피관의 국소적으로 진행된 또는 전이성의 이행세포 칼시노마를 갖는 환 자에 대한 단일 제제의 이차 치료제로서 라파티닙의 경구 투여 임상 연구

플라티늄-기초 치료 후 진행된, 국소적으로 진행되거나 전이성인 요상피종양에 걸린 58명 환자에게 질환이 진행되거나 투약 중단될 때까지 매일 1회 1250mg의 라파티닙을 투여하였다. 안정성 및 유효성 평가 (독립적 검토)를 각각 4주 및 8주 간격으로 수행하였다. 또한, 투약 중단시 환자를 평가하고, 사망에 이를때 까지 2달마다 평가하였다. 30명 환자로부터의 데이타를 중간 검정시 검토하고 (연구시 16주), 본원에 기재하였다.

평균 연령은 62세였다. 대부분의 환자 (67%)는 내장 전이되었다. 모든 환자에게서 erbB1 및/또는 erbB2의 발현 (면역조직화학에 의해 1+, 2+ 또는 3+)을 확인하였다. 단지 19명 환자 (63%)에 의도된 이차 치료로서 라파티닙을 투여하였다. 3명의 환자 (10%)는 초기 평가시 부분 반응 (PR)으로서 진정된 종양 감소를 나타내었으나, 단지 하나의 PR이 8주에 확인되었다. 8명 환자 (27%)는 안정 병변 (SD)을 나타냈으며, 5명은 주목할만한 종양감축을 나타내었다. 임상적 이득 (6개월 이상의 SD)은 3명의 환자 (10%)에게서 나타났다. 5명 환자 (17%)는 진행성 질환을 나타냈으며, 11명의 환자 (37%)는 8주전에 실험을 중단하였으며, 3명의 환자 (10%)는 평가불가능하였다. 질환의 진행이 실험 중단에 대한 가장 큰 이유였다.

경구 라파티닙으로의 이차 치료는 유망한 활성을 나타냈으며, 국소적으로 진행되거나 전이성인 요상피 종양 환자에서 일반적으로 잘 받아들어졌다.

실시예 3A

요상피관의 국소적으로 진행되거나 전이성인 이행세포 칼시노마를 갖는 환자 에 대한 단일제제의 이차 치료제로서 라파티닙의 경구 투여 임상 상태 II 연구

방법: 일차 종료점은 RECIST 반응율 (독립적인 방사선 검토)에 따른다. 주요 적격성 평가는 방광의 상태 IIIB 또는 IV TCC, 플라티늄-기초 일차 요법 후의 진행, 측정가능한 질환, erbB1 및/또는 erbB2의 발현 (면역조직화학에 의한 1+, 2+ 또는 3+), 및 70 이상의 카르노프스키 수행 상태를 포함한다. 경구용 라파티닙 (1250mg, 일일)을 질환 진행될 때까지 또는 허용불가능한 독성을 띨 때까지 투여하였다. 종양 및 안정성 평가를 각각 매 8주 및 4주마다 수행하였다. 심장기능을 기준선 및 매 8주마다 모니터링하였다. 다양한 바이오마커 (TUNEL, p53, pAkt, Her3, pHer3, pErk, IGF-1R, Rb, pS6)에 대한 종양 조직을 분석하였다.

결과: 방광의 국소적으로 진행된 또는 전이성 TCC를 갖는 59명 환자를 등록시켰다. 2명 (3%)은 부분적 반응 (PR)을 나타내며, 12명 (20%)은 안정 병변 (SD)을 나타내는 것으로 조사자들에 의해 기록되었으며; 독립적인 방사선 검사에 의해 1명 (2%)는 PR을 나타내고, 18명 (31%)는 SD를 나타내는 것으로 보고되었다. 조사자들 및 독립적인 검사에 기초하여, 6명 및 3명의 환자가 각각 4달 및 6달 지속되는 항구적 SD를 갖는다. 8주에, 10명의 환자는 20% 이하의 종양 성장을 나타냈으며, 4명의 환자는 세포성 색전을 나타냈으며, 10명 환자는 종양감축을 나타내었다. 대부분의 종양 축소는 일시적이다; 그러나, 한 환자는 연구시 56가 넘게 유지되었다. 평균 TTP는 8.6주 (95% CI, 8.00, 11.29)이며, 평균 전체 생존기간은 17.9주 (95% Cl, 13.14, 30.29)이다. 증가된 임상 이점에 대한 경향은 erbB1 또는 erbB2 2+ 및 3+ 환자에게서 관찰되었다. 예비 검정은 하기 바이오마커가 라파티닙에 대 해 무반응성일 환자를 예측할 수 있음을 시사한다: 높은 pHer3, 높은 pErk, 및 양 변이체 p53 및 높은 pHer3. 반대로, 높은 pAkt 및 높은 IGF-1R을 갖는 환자는 라파티닙에 대해 민감하다. 10% 이상 빈도의 유해사례 (AE)에는 설사 (39%), 발진 (32%), 메스꺼움 (27%), 구토 (22%), 무력증 (12%) 및 피로 (10%)가 있다. 한명 초과의 환자에서 발생하는 등급 3/4 AE로는 구토 (7%) 및 설사 (3%)가 있다. 한명의 환자는 심장 구혈률에서 자각증상이 없는 등급 2 감소를 나타내었다.

결론: 요약하면, 라파티닙은 충분히 용납되며, 방광의 재발된, 진행된 또는 전이성의 TCC를 갖는 환자에서 단일치료 활성을 나타냈으며, 이는 조사자 및 독립적인 검사에 의해 각각 14% 및 12%의 환자에서 임상이득(CR + PR + SD ≥ 16주)이 있는 것으로 평가된 것에 의해 입증된다. 8.6주의 평균 TTP는 이차 치료 세팅시 다양한 화학치료 요법과 양립가능하다. 면역조직화학에 의한 erbB1 또는 erbB2 2-3+의 환자에서 임상이득 경향이 있다.

실시예 4

고형 종양을 갖는 환자에서 경구 투여된 라파티닙의 임상 연구

81명의 환자 (27명 결장직장, 7명 폐, 6명 비공지된 일차의 아데노칼시노마 (AUP), 5명 H&N, 6명 신장, 6명 유방, 4명 난소 및 15명 기타 (표 II 참조))를 용량 점증적 방법으로 일일 1회 (qd) 또는 2회 (bid) 라파티닙으로 처리하였다. 40명 환자에 175-1800mg을 일일 1회 투여하고, 41명 환자에 500, 750 또는 900mg 일일 2회 투여하였다. 환자를 매달 평가하고, 질환이 진행되거나 과도한 부작용이 나타날 때 까지 처리하였다. 임상 반응을 매 8주마다 측정하였다.

하나의 CR (16+ 달 동안 유지됨)이 erbB1 과다발현 머리 및 목 편평세포 칼시노마에서 관찰되었다. erbB1 또는 erbB2를 대부분 과다발현하는 다양한 종양을 갖는 22명 환자에게서 평균 4달 (1-13+ 달) 동안 SD가 관찰되었다. 4달 초과 동안의 연속 치료 환자에 1200mg/1일 이상의 투여량으로 라파티닙을 투여하였다. 22명의 SD 환자중 비소세포 폐암 및 폐로의 AUP 전이성을 가지며, 이전 치료에서 진행성을 띤 2명 환자는 라파티닙에 대해 각각 12+ 및 8+ 달 동안 SD가 유지되었다. 간질성 폐렴에 걸린 경우는 없었다.

라파티닙의 QD 투여는 충분히 용납가능하며, 심하게 사전처리된 군집에서 임상 활성 증거를 가졌다. 결과는 표 II에 예시되어 있다. 4달 초과 동안 라파티닙을 투여받은 환자만이 표 2에 포함되어 있다.

표 2

종양 유형	# 환자	임상 반응
결장직장	27	SD=3
유방	6	SD=2
AUP	6	SD=1
NSCLC	7	SD=3
신장	6	SD=2
머리 및 목	9	CR=1; SD=3
중피종	3	SD=1
난소	4
췌장	2
자궁경부	2	SD=1
위	1
위장	1
기관지폐포	1
전립선	1
식도	1
신경내분비	1
고등급 육종	1
점액양 지방육종	1
안구 흑색종	1

CR - 표적 병변이 사라진 것으로 규정된 완전 반응

PR - 표적 병변의 30% 이상이 감소된 것으로 규정된 부분 반응

SD - 표적 병변의 비성장 또는 일부 감소로서 규정된 안정 병변

Claims

치료학적 유효량의 하기 화학식 (I")의 화합물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 EGFR 및/또는 erbB2 과다발현 암을 치료하는 방법:
제 1항에 있어서, 암이 췌장암인 방법.
제 1항에 있어서, 암이 전립선암인 방법.
제 1항에 있어서, 암이 호르몬 무반응성 전립선암인 방법.
제 1항에 있어서, 암이 결장직장암(colorectal cancer)인 방법.
제 1항에 있어서, 암이 결장암(colon cancer)인 방법.
제 1항에 있어서, 암이 직장암인 방법.
제 1항에 있어서, 암이 비소세포 폐암인 방법.
제 1항에 있어서, 암이 난소암인 방법.
제 1항에 있어서, 암이 외음부암인 방법.
제 1항에 있어서, 암이 자궁경부암인 방법.
제 1항에 있어서, 암이 자궁내막암인 방법.
제 1항에 있어서, 암이 중피종인 방법.
제 1항에 있어서, 암이 식도암인 방법.
제 1항에 있어서, 암이 타액선암인 방법.
제 1항에 있어서, 암이 간암인 방법.
제 1항에 있어서, 암이 뇌암인 방법.
제 1항에 있어서, 암이 신경교종인 방법.
제 1항에 있어서, 암이 흑색종인 방법.
치료학적 유효량의 하기 화학식 (I")의 화합물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 EGFR 과다발현 암을 치료하는 방법:
치료학적 유효량의 하기 화학식 (I")의 화합물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 erbB2 과다발현 암을 치료하는 방법:
치료학적 유효량의 하기 화학식 (I")의 화합물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 EGFR 및 erbB2 과다발현 암을 치료하는 방법:
치료학적 유효량의 하기 화학식 (I)의 화합물, 또는 이의 염 또는 용매화물을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 신장암을 치료하는 방법:
제 23항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물이 하기 화학식 (I')의 화합물 또는 이의 무수물 또는 수화물인 방법:
제 23항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물이 하기 화학식 (I")의 화합물인 방법:
제 23항에 있어서, 신장암이 신장세포 칼시노마인 방법.
치료학적 유효량의 하기 화학식 (I)의 화합물, 또는 이의 염 또는 용매화물 을 포유동물에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물에서 요상피암을 치료하는 방법:
제 27항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물이 하기 화학식 (I')의 화합물 또는 이의 무수물 또는 수화물 형태인 방법:
제 27항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물이 하기 화학식 (I")의 화합물인 방법:
제 27항에 있어서, 요상피암이 방광암인 방법.
제 27항에 있어서, 요상피암이 진행성 또는 전이성 요상피암인 방법.
제 27항에 있어서, 요상피암이 이행세포 칼시노마인 방법.