KR20060112061A - 느릅 추출물을 유효성분으로 함유하는 ５α-리덕테이즈활성 억제용 조성물 및 피지 분비 억제용 화장료 조성물 - Google Patents
느릅 추출물을 유효성분으로 함유하는 ５α-리덕테이즈활성 억제용 조성물 및 피지 분비 억제용 화장료 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 느릅 추출물을 유효성분으로 함유하는 5α-리덕테이즈 활성 억제용 조성물, 피지 분비 억제용 화장료 조성물 및 여드름 완화용 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 느릅 추출물은 5α-리덕테이즈의 활성을 억제함으로써 디하이드로테스토스테론의 생성을 억제하여 화장료 조성물의 유효성분으로 사용했을 때 피지의 과잉분비 억제 효과 및 여드름 완화 효과가 우수하다.
느릅, 5α-리덕테이즈, 피지 분비, 여드름 완화, 화장료
Description
본 발명은 5α-리덕테이즈 활성 억제용 조성물, 피지 분비 억제용 화장료 조성물 및 여드름 완화용 화장료 조성물에 관한 것이다.
5α-리덕테이즈 (5α-reductase)는 피지선, 모낭, 전립선 및 부고환 등의 남성 호르몬 반응성 조직에 존재하며, 남성 호르몬들 중 하나인 테스토스테론 (Testosterone)을 디하이드로테스토스테론 (Dihydrotestosterone, DHT)으로 환원시키는데 관여하는 효소로서, 상기 환원에는 NADPH (Nicotinamide-adenine dinucleotide phosphate)를 필요로 한다. 남성의 성충동, 골격근 증가, 남성 외부생식기와 음낭의 성장 및 정자 형성 등에는 테스토스테론이 관여하고, 여드름, 피지 및 전립선비대증 등에는 디하이드로테스토스테론이 해당 조직에서 관여한다 (Diane et al., JID, 775-778, 1995; Bruchovsky, N et al., JBC, 243, 2112-2121, 1968). 이에, 최근에는 5α-리덕테이즈 효소의 억제제를 사용하여 여드름 치료제 및 피지분비 억제제를 개발하려는 연구들이 활발히 진행되고 있다.
일반적으로 피지는 두피 및 얼굴을 포함한 피부에서 피부의 보습유지나 미생물의 침입을 막는 역할을 담당하고 있지만, 사춘기 이후에는 여드름을 유발시킨다. 특히, 20대 이후의 여성의 경우에는 피지의 과잉 분비로 인해 피부 번들거림, 화장의 들뜸 및 모공이 넓어지는 등 미용면에서 많은 문제를 유발시킨다. 과잉의 피지 분비가 일어나는데는 여러 원인이 관여하고 있는데, 그 중에서도 가장 중요한 것은 피지선을 활성화시켜 피지 분비를 촉진하는데 관여하는 호르몬의 하나인 디하이드로테스토스테론에 의해서 피지선의 세포가 활성화되어 피지 과분비가 일어난다고 알려져 있다.
여드름은 하나의 원인이 아니라 여러 가지 원인이 복합적으로 관여하는데, 사춘기의 남성 호르몬 기능의 항진으로 피지의 분비가 왕성해지고 모낭의 상피세포가 이상을 일으켜 모낭이 막히고 이로 인해 여드름의 기본 병변인 면포가 형성된다. 모낭 내에 상주하는 균은 자유-지방산 (free fatty acid)을 생성하여 모낭을 자극함으로써 염증을 유발한다. 이러한 여드름으로의 진행은 피지 과분비로 인해 더욱 악화된다.
여드름 치료을 위한 방편으로서, 종래에는 여드름의 원인이 되는 이러한 남성 호르몬을 억제하기 위해 에스트로겐 등의 여성 호르몬을 사용하거나 5α-리덕테이즈 활성 억제제를 이용해왔다. 그러나 이러한 여성 호르몬제들은 여드름 치료 효과 외에, 피부 염증을 발생시키고 호르몬 투여에 의한 부작용을 발생시키는 것으로 보고되어, 현재는 사용을 중단하거나 매우 극미량을 사용하고 있는 실정이다. 한편, 피지 과분비를 억제하는 여드름 치료제로 5α-리덕테이즈의 억제제인 아젤레익 산 (azelaic acid)을 함유한 제제가 시판되고 있다.
한편, 화장품 분야에서도 피지의 과분비는 화장품의 들뜸이나 모공이 넓어지게 되는 요인으로서 중요한 관심의 대상임에도 불구하고 그 연구는 미미한 실정이다. 현재 피지 과분비 억제 화장품은, 일시적으로 피지를 흡착시키는 다공성 파우더를 사용하거나, 기존에 피지 분비를 억제한다고 알려진 생약 추출물인 아이비 추출물 등을 화장품 원료로 사용하고 있으나 그 효과는 미미하다.
본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 논문이 참조되고 그 인용은 괄호 내에 표시되어 있다. 인용된 논문의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준과 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.
이에, 본 발명자들은 기존의 피지 분비 억제 물질의 미약한 효과 및 부작용의 문제점을 극복하기 위해 200여종의 천연 식물 추출물을 이용하여 시험관내 (in vitro)에서 5α-리덕테이즈 활성 억제율을 검색하는 연구를 거듭한 결과, 느릅 추출물이 5α-리덕테이즈 활성 저해 효과, 피지 분비 억제 효과 및 여드름 완화 효과가 매우 뛰어남을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 느릅 (Ulmus davidiana) 추출물을 유효성분으로 함유하는 5α-리덕테이즈 활성 억제용 조성물을 제공하는데 있다.
또한, 본 발명의 다른 목적은 느릅 추출물을 유효성분으로 함유하는 피지 분비 억제용 화장료 조성물을 제공하는데 있다.
또한, 본 발명의 다른 목적은 느릅 추출물을 유효성분으로 함유하는 여드름 완화용 화장료 조성물을 제공하는데 있다.
본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명 및 청구범위에 의해 보다 명확하게 된다.
본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 느릅 (Ulmus davidiana) 추출물을 유효성분으로 함유하는 5α-리덕테이즈 활성 억제용 조성물을 제공한다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 느릅 추출물을 유효성분으로 함유하는 피지 분비 억제용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 느릅 추출물을 유효성분으로 함유하는 여드름 완화용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 조성물이 적용되는 "여드름"은 당업계에서 여드름 통칭되는 모든 피부 질환 또는 여드름과 유사한 기전을 통해 발명되는 모든 피부 질환을 포함하 며, 예컨대, 집합성 여드름, 브롬화물에 의한 여드름, 일반적 여드름, 응괴 여드름(congoblate acne), 화장품 사용에 의한 여드름, 디터지칸 여드름(acne dtergicans), 청춘기 여드름, 섬광모양의 여드름(acne fulminans), 절성 여드름(acne furunculoid), 할로겐에 의한 여드름, 경결성 여드름, 켈로이드성 여드름, 물리적 자극에 의한 여드름(mechanical acne), 약물성 여드름, 괴사성 여드름, 속립성 여드름, 신생아 여드름(acne neonatorum), 지성 여드름(acne oil), 구진성 여드름, 적창(pomade acne), 월경전 여드름, 주사 여드름(acne rosacea), 모창성 여드름, 열대성 여드름(tropical acne), 중독성 여드름(acne venenata), 및 심상성 여드름 등을 포함한다.
본 발명에서 제공하는 5α-리덕테이즈 활성 억제용 조성물, 피지 분비 억제용 화장료 조성물 및 여드름 완화용 화장료 조성물은 느릅을 유효성분으로 함유한다.
느릅 (학명 : Ulmus davidiana)은 춘유 (春楡), 가유 (家楡)라고도 하며 쌍떡잎 식물로서 쐐기풀목 느릅나무과의 낙엽활엽 교목이다. 약 10 m의 높이에 이르는 큰키나무로서, 잎은 넓은 타원형이고 톱니가 있다. 봄에 연한 풀색의 작은 꽃이 모여 핀다. 느릅나무를 한자로는 유 (楡)라고 하고 껍질은 유피 (楡皮) 또는 유백피 (楡白皮), 뿌리 껍질은 유근피 (楡根皮)라고 한다. 열매를 무이, 우이인이라 한다. 예로부터 동의 치료에서 껍질을 달여 위아픔, 허리아픔에 먹었으며, 염증약으로 고약을 만들어 곪은 상처에 발랐다. 열매 (무이)는 회충증, 촌충증, 요 충증, 소화가 잘 안 될 때, 벌레떼기약, 약한 설사약 및 소화약 등으로 쓰이며 피부병에 고약을 만들어 사용하였다고 한다.
본 발명에 있어서, 느릅 추출물은 느릅나무의 다양한 기관 또는 부분 (예: 잎, 꽃, 뿌리, 줄기, 가지, 껍질 및 과실 등)으로부터 추출하여 얻은 것을 의미하고, 바람직하게는 느릅나무의 모든 기관으로부터 얻은 추출물을 의미한다.
본 발명의 느릅 추출물은 당업계에 공지된 통상의 방법에 따라, 즉, 통상적인 온도와 압력의 조건하에서, 통상적인 용매를 사용하여 제조될 수 있다.
본 발명의 조성물의 유효성분인 느릅 추출물은 물, 탄소수 1-4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3 부틸렌 글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 용매를 사용하여 추출되는 것이 바람직하며, 보다 바람직하게는 에틸 알코올이며, 보다 더 바람직하게는 70% 에틸 알코올이다. 상기 추출 용매의 적합한 양은 느릅나무 건조 중량의 1-10 배이며, 보다 바람직하게는 1-5배이다.
본 발명의 느릅 추출물은 다음의 단계를 포함하는 과정에 의해 제조된다: (a) 느릅나무에 1-5배의 물, 탄소수 1-4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3 부틸렌 글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 용매를 첨가하여 침적시키는 단계; (b) 단계 (a)의 용매 첨가된 느릅나무를 여과한 뒤 40-100℃에서 농축하는 단계; 및 (c) 상기 단계 (b)에서 농축한 성분을 여과 및 건조하여 1,3-부틸렌 글리콜에 용해하는 단계.
본 발명의 구체적인 일 실시예에 따르면, 상술한 추출 과정은 다음과 같이 실시된다: 우선, 원료가 되는 느릅나무를 세척, 건조 및 작은 조각으로 파쇄한 다음 70% 에틸 알코올을 느릅나무 건조중량의 5배 부피비로 첨가하여 5일 동안 침적시킨다. 이어, 300 메쉬에 여과한 다음, 진공 감압 농축기를 이용하여 80℃에서 농축하여 느릅 추출물 파우더를 얻은 다음 제품에 적용하기 위해 1,3-부틸렌 글리콜에 용해시킴으로써 느릅 추출물을 제조한다.
한편, 본 발명의 느릅 추출물은 상술한 추출법에 의한 추출물뿐만 아니라, 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 예덕나무 추출물에 포함된다고 해석된다.
본 발명의 느릅 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.
본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 느릅 추출물의 함량은 5α-리덕테이즈 활성 억제용 조성물, 피지 분비 억제용 화장료 조성물 및 여드름 완화용 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.0001-10 중량%, 바람직하게는 0.5-5 중량%, 가장 바람직하게는 1-3 중량%이다. 이때 느릅 추출물의 총 중량이 0.0001% 미만일 때에는 그 효과가 나타나기 어렵고, 10% 이상일 때에는 피부에 자극을 유발할 가능성이 높으며, 제형의 안정화에도 큰 영향을 미칠 수 있다. 본 발명의 바람직한 실 시예에서는 느릅 추출물을 1-3% 포함하는 화장료 조성물을 제조하였으며, 이의 피지 분비 억제 효과 및 여드름 억제 효과가 뛰어남을 확인하였다.
본 발명의 느릅 추출물을 포함하는 5α-리덕테이즈 활성 억제용 조성물은 피지 분비 억제 및 여드름 완화의 목적으로 사용될 수 있으며, 상기 조성물은 대체적으로 피지분비가 많은 얼굴, 두피 또는 등 부위에 적용될 수 있으며, 상기 부위에만 한정되지 않고 피지선이 발달한 어느 부위든 적용될 수 있다.
본 발명의 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 여드름의 심각도, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하며, 보통으로 숙련된 의사는 소망하는 치료 또는 예방에 효과적인 투여량을 용이하게 결정 및 처방할 수 있다. 바람직하게는, 본 발명의 약제학적 조성물의 투여량은 1일 투여량으로 대략 0.01 ㎎/㎏-100 ㎎/㎏이다.
본 발명의 조성물은 느릅 추출물만을 유효성분으로 포함하여도 우수한 5α-리덕테이즈 활성 억제 효과를 나타내어 과다피지 분비의 억제 및 여드름 완화 효과를 나타낼 수 있으나, 피부에 자극을 주지 않으면서 5α-리덕테이즈 활성 억제 효과를 나타낼 수 있는 다른 성분을 추가로 첨가하여 제조하여도 무방하다.
본 발명의 느릅 추출물은 실제 임상투여 시에 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜 (Propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용 될 수 있다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 유효 성분으로서 상기 느릅 추출물 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
본 발명의 화장료 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수 (스킨), 영양 화장수 (밀크로션), 영양 크림, 맛사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 느릅 추출물은 5α-리덕테이즈 활성 억제 활성이 뛰어나 디하이드로테스토스테론의 생성을 효과적으로 억제하며 (참조: 실험예 1), 여드름의 기본 병변인 면포의 발생을 효과적으로 억제한다 (참조: 실험예 2). 또한, 이러한 효과를 갖는 느릅 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 피지의 과잉 분비를 효과적으로 억제할 뿐만 아니라 (참조: 실험예 3) 여드름 개선 효과가 뛰어나다 (참조 : 실험예 4). 본 발명의 느릅 추출물의 여드름 개선효과는 기존의 여드름 치료제보다 매우 우수하며 (참조: 실험예 5), 피부자극도 거의 없다 (참조: 실험예 6).
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
제조예 1 : 느릅 추출물의 제조
곱게 자른 느릅나무 1 kg을 에틸 알코올과 물이 7:3 (v/v)으로 혼합된 수용액 5 ℓ에 5일 동안 침전시키고, 300 메쉬에 여과한 다음, 진공 감압 농축기를 이용하여 80℃에서 농축시켰다. 이렇게 하여 얻어진 느릅 추출물 파우더를 다시 제품 에 적용하기 용이하게 하기 위해 1,3-부틸렌 글리콜에 용해시켰다.
실험예 1: 느릅 추출물의 5α-리덕테이즈 활성 저해 효과 시험
느릅 추출물이 피지 분비 및 여드름 생성을 유발한다고 알려져 있는 디하이드로테스토스테론을 촉매하는 효소인 5α-리덕테이즈의 활성을 저해하는지 여부를 확인하고자 다음과 같은 실험을 실시하였다.
<효소액의 제조>
24시간 절식한 성숙한 스프로그 돌리 랫트 (Sprogue-Dawley rat)(생후 7-8주)를 디에틸이서 (Diethylether)로 치사시키고 나서, 간장 (Liver)을 수득한 뒤 이를 빙냉한 크랩스-링거 포스페이트 완충액 (Krebs-Ringer phosphate buffer)(pH 7.2)으로 관류하였다. 여기에 5배량의 빙냉한 Tris-HCl 완충액 (pH 7.2)을 가하여 호모게나이즈하고, 900 ×g에서 10분간 원심 분리하였다. 원심 분리한 상층액을 5,000 ×g에서 10분간 원심분리하고, 그 상층액을 다시 9,000 ×g에서 10분간 원심분리하여 얻은 상층액을 효소액으로 사용했다. 효소액은 -80℃에 동결보존하였다.
<5α-리덕테이즈 저해율의 측정>
Tris-HCl 완충액 (pH 7.2) 1.0 ㎖, 테스토스테론 (500 ㎍/㎖) 0.3 ㎖, 제조예 1에서 준비한 느릅 추출물을 0.1, 0.2, 0.5 및 1%의 농도로 0.2 ㎖ 및 상기에서 제조한 효소액 1.0 ㎖을 혼합한 뒤, NADPH (0.77 ㎎/㎖) 0.5 ㎖을 가하여 반응을 개시하고, 37℃에서 30분간 반응시켰다. 디클로로메탄 (Dichloromethane) 5 ㎖을 가하여 반응을 정지시킨 후, 내부 표준물질 (p-hydroxybenzoic acid n-hexyl ester, 0.1 ㎎/㎖) 0.5 ㎖을 가하여 10분간 진탕하고, 3,000 rpm에서 10분간 원심 분리하였다. 원심분리된 상층액을 제거하여 디클로로메탄 (dichloromethane) 층을 남기고, 여기에 메탄올 5 ㎖을 가하여 고속 액체크로마토그래피 (HPLC)용 샘플로 사용하였다.
5α-리덕테이즈의 저해율은 HPLC 방법을 이용하여 각 실험군의 테스토스테론 양을 측정한 뒤 다음 수학식 1의 계산식에 대입하여 산출하였으며, 그 값을 표 1에 나타내었다.
cont 0 : 느릅 추출물을 가하지 않고, NADPH를 가하기 전에 디클로로메탄을 가해서 반응을 일으키지 않도록 한 것
cont 1 : 느릅 추출물을 가하지 않고 반응을 수행한 것
| 느릅 추출물 (%) | 5α-리덕테이즈 저해율 (%) |
| 0.01 | 38.2 |
| 0.02 | 44.2 |
| 0.05 | 63.4 |
| 0.1 | 73.21 |
상기 표 1을 통해, 본 발명의 느릅 추출물은 처리농도 의존적으로 5α-리덕테이즈의 활성을 억제함을 확인할 수 있었다. 그러므로, 5α-리덕테이즈 활성을 억제하는 느릅 추출물은 남성 호르몬인 디하이드로테스토스테론의 생성량을 억제하는 효과가 있음을 알 수 있었다.
실험예 2 : 면포 억제 시험
토끼의 귀에 면포 유발물질을 처리하면 1주일 경과 후부터는 면포가 커지는데 일반적으로 면포가 커지는 것은 여드름의 염증이 일어나기 전 단계와 같은 양상이다. 면포가 커지면서 모공 내에는 피지가 과량 들어 있게 되고 이로 인해 모공도 정상적인 상태보다 커지게 된다. 따라서, 면포 발생 실험은 사람에서의 여드름 효과와는 다소 다르지만 현재로서 가장 여드름과 유사한 양상을 보이는 실험 모델이다. 이에, 제조예 1에서 제조한 느릅 추출물이 면포 억제 능력이 있는지 확인하고자 아래와 같은 실험을 실시하였다.
흰토끼의 귀에 면포 유발 물질인 50% 올레익산/파라핀 오일을 200 ㎕씩 하루 1번 도포하여 면포를 유발시킴과 동시에, 제조예 1에서 준비한 느릅 추출물을 화장품 원료이며 면포를 유발하지 않는 1,3-BG (Butylene Glycol)에 1%로 녹여, 하루에 2번 200 ㎕씩 도포하였다. 올레익산/파라핀 오일을 처리하여 면포를 유발시킨 뒤 느릅 추출물을 바르지 않은 군을 대조군으로 설정하여 실험하였다. 면포의 수는 면포의 크기가 0.2 mm 이상 되는 것을 기준으로 삼았다. 면포 발생 부위의 조직을 0.8 mm 절편하여 각질을 벗겨낸 후, 광학현미경으로 면포의 크기를 측정한 뒤 그 결과를 표 2에 나타내었다. 하기 표 2의 A-E는 면포의 크기를 측정하기 위해 절편한 조직에서 전체 면포들 중 면포가 잘 발달된 것들 중에서 무작위로 6개를 선정해 면포 크기를 측정한 것이다.
| 처리군 | 동물수 | 면포수 | 측정한 면포 크기 | ||||||
| A | B | C | D | E | 평균 | ||||
| 올레익산 처리군 (대조군) | n=3 | 16 | 5 | 4 | 6 | 3 | 4 | 4.4 | 4.53 |
| 4 | 4 | 5 | 6 | 4 | 4.6 | ||||
| 4 | 5 | 4 | 4 | 6 | 4.6 | ||||
| 올레익산 및 1% 느릅 추출물 처리군 (실험군) | n=3 | 7 | 2 | 3 | 2 | 2 | 3 | 2.4 | 2.47 |
| 2 | 2 | 4 | 2 | 3 | 2.6 | ||||
| 3 | 3 | 2 | 2 | 2 | 2.4 | ||||
상기 표 2에서 보는 바와 같이, 본 발명의 느릅 추출물은 올레익산 처리에 의한 면포의 발생을 효과적으로 억제하였다. 즉, 느릅 추출물의 처리에 의해 면포의 수와 크기가 적게 발생하는 결과를 통해 느릅 추출물이 피지의 분비를 적게 유발시킴으로써 여드름으로의 진행을 억제하는 것임을 예측할 수 있었다.
상기 실험을 통해 느릅 추출물이 피지 분비의 원인이 되는 5α-리덕테이즈의 활성을 저해하여 피지 분비를 억제함으로써 면포의 발생을 효과적으로 억제하여 여드름을 완화시킬 수 있음을 간접적으로 확인하였다. 이에, 느릅 추출물이 피지 분비 억제 및 여드름 완화 효과를 갖는지 직접적으로 확인하기 위해 이하 아래의 제형예를 통하여 느릅 추출물을 함유하는 화장료 제형의 예를 제시하나 모든 제형이 이에 한정되는 것은 아니다.
제형예 1: 유연 화장수
느릅 추출물을 함유한 화장료 중 유연 화장수의 제형예는 다음과 같다.
| 성분 | 함량(중량%) |
| 느릅 추출물 | 1.0 |
| 글리세린 | 6.0 |
| 1,3-부틸렌글리콜 | 3.0 |
| PEG 1500 | 1.0 |
| 알란토인 | 0.1 |
| DL-판테놀 | 0.3 |
| EDTA-2Na | 0.02 |
| 벤조페논-9 | 0.04 |
| 소듐 히아루로네이트 | 5.0 |
| 에탄올 | 10.0 |
| 옥틱도데세스-16 | 0.2 |
| 폴리솔베이트 20 | 0.2 |
| 방부제, 향, 색소 | 미량 |
| 증류수 | 미량 |
| 합계 | 100 |
제형예 2: 수렴 화장수
느릅 추출물을 함유한 화장료 중 수렴 화장수의 제형예는 다음과 같다.
| 성분 | 함량(중량%) |
| 느릅 추출물 | 1.0 |
| 글리세린 | 2.0 |
| 1,3-부틸렌글리콜 | 2.0 |
| 알란토인 | 0.2 |
| DL-판테놀 | 0.2 |
| EDTA-2Na | 0.02 |
| 벤조페논-9 | 0.04 |
| 소듐 히아루로네이트 | 3.0 |
| 에탄올 | 15.0 |
| 폴리솔베이트 20 | 0.3 |
| 위치하젤 추출물 | 2.0 |
| 구연산 | 미량 |
| 방부제, 향, 색소 | 미량 |
| 증류수 | 잔량 |
| 합계 | 100 |
제형예 3: 영양 화장수
느릅 추출물을 함유한 화장료 중 영양 화장수의 제형예는 다음과 같다.
| 성분 | 함량(중량%) |
| 느릅 추출물 | 3.0 |
| 글리세릴 스테아레이트 SE | 1.5 |
| 스테아릴 알코올 | 1.5 |
| 라놀린 | 1.5 |
| 폴리솔베이트 | 1.3 |
| 소르비탄 스테아레이트 | 0.5 |
| 경화식물유 | 1.0 |
| 광물유 | 5.0 |
| 스쿠알란 | 3.0 |
| 트리옥타노인 | 2.0 |
| 디메치콘 | 0.8 |
| 초산 토코페롤 | 0.5 |
| 카르복시비닐 폴리머 | 0.12 |
| 글리세린 | 5.0 |
| 1,3-부틸렌글리콜 | 3.0 |
| 소듐 히아루로네이트 | 5.0 |
| 트리에탄올아민 | 0.12 |
| 방부제, 향, 색소 | 미량 |
| 증류수 | 잔량 |
| 합계 | 100 |
제형예 4: 영양 크림
느릅 추출물을 함유한 화장료 중 영양 크림의 제형예는 다음과 같다.
| 성분 | 함량(중량%) |
| 느릅 추출물 | 3.0 |
| 친유형 모노스테아린산글리세린 | 2.0 |
| 스테아릴 알코올 | 2.2 |
| 스테아린산 | 1.5 |
| 밀납 | 1.0 |
| 폴리솔베이트 60 | 1.5 |
| 소르비탄 스테아레이트 | 0.6 |
| 경화식물유 | 1.0 |
| 스쿠알란 | 3.0 |
| 광물유 | 5.0 |
| 트리옥타노인 | 5.0 |
| 디메치콘 | 1.0 |
| 글리세린 | 5.0 |
| 베타인 | 3.0 |
| 트리에탄올아민 | 1.0 |
| 소듐 히아루로네이트 | 4.0 |
| 방부제, 향, 색소 | 미량 |
| 증류수 | 잔량 |
| 합계 | 100 |
제형예 5 : 맛사지 크림
느릅 추출물을 함유한 화장료 중 맛사지 크림의 제형예는 다음과 같다.
| 성분 | 함량(중량%) |
| 느릅 추출물 | 3.0 |
| 친유형 모노스테아린산글리세린 | 1.5 |
| 스테아릴 알코올 | 1.5 |
| 스테아린산 | 1.0 |
| 폴리솔베이트 60 | 1.5 |
| 소르비탄 스테아레이트 | 0.6 |
| 이소스테아릴 이소스테레이트 | 5.0 |
| 스쿠알란 | 5.0 |
| 광물유 | 35.0 |
| 디메치콘 | 0.5 |
| 히드록시에틸 셀룰로오스 | 0.12 |
| 글리세린 | 6.0 |
| 트리에탄올아민 | 0.7 |
| 방부제, 향, 색소 | 미량 |
| 증류수 | 잔량 |
| 합계 | 100 |
제형예 6: 에센스
느릅 추출물을 함유한 화장료 중 에센스의 제형예는 다음과 같다.
| 성분 | 함량(중량%) |
| 느릅 추출물 | 3.0 |
| 글리세린 | 10.0 |
| 베타인 | 5.0 |
| PEG 1500 | 2.0 |
| 알란토인 | 0.1 |
| DL-판테놀 | 0.3 |
| EDTA-2Na | 0.02 |
| 벤조페논-9 | 0.04 |
| 히드록시에틸 셀룰로오스 | 0.1 |
| 소듐 히아루로네이트 | 8.0 |
| 카르복시비닐 폴리머 | 0.2 |
| 트리에탄올아민 | 0.18 |
| 옥틸도데칸올 | 0.3 |
| 옥틱도데세스-16 | 0.4 |
| 에탄올 | 6.0 |
| 방부제, 향, 색소 | 미량 |
| 증류수 | 미량 |
| 합계 | 100 |
제형예 7: 팩
느릅 추출물을 함유한 화장료 중 팩의 제형예는 다음과 같다.
| 성분 | 함량(중량%) |
| 느릅 추출물 | 3.0 |
| 폴리비닐 알코올 | 15.0 |
| 셀룰로오스 검 | 0.15 |
| 글리세린 | 3.0 |
| PEG 1500 | 2.0 |
| 시이크데스트린 | 0.15 |
| DL-판테놀 | 0.4 |
| 알란토인 | 0.1 |
| 글리시리진산 모노암모늄 | 0.3 |
| 니코틴아미드 | 0.5 |
| 에탄올 | 6.0 |
| PEG 40 경화피마자유 | 0.3 |
| 방부제, 향, 색소 | 미량 |
| 증류수 | 미량 |
| 합계 | 100 |
실험예 3 : 피지 분비 억제 효과
느릅 추출물을 함유하는 화장료가 실제 피지 분비 억제 효과를 갖는지를 확인하기 위해 피지 분비량이 많은 20대 남녀 20명을 대상으로 A, B 두 그룹으로 나누어 아래와 같은 실험을 실시하였다. A 그룹에는 느릅 추출물이 함유된 유연 화장수 (제형예 1, 표 3의 조성)를, B 그룹에는 상기 제형예에서 느릅 추출물만을 제외한 일반 화장수 (대조군)를 매일 아침, 저녁 세안 후 4주간 사용하도록 하였다. 피지 측정은 세안 후 30분간 항온, 항습실에서 피부를 안정시킨 후 피지측정기 (Sebumeter)를 이용하여, 이마에서 피지량을 측정하였다. 느릅 추출물을 함유하는 화장료를 사용하기 전 피지량을 초기값으로 설정하였다. 느릅 추출물이 함유된 유연 화장수 (제형예 1)를 지속적으로 사용하면서 매주 1회 4주간 피지량의 변화를 측정하였다. 초기값과 비교하여 느릅 추출물을 함유한 유연 화장수의 피지 억제 효능 여부를 판정하였는데 그 결과는 표 10에 나타내었다.
| 주 | 피지량 (g/㎠/h) | |
| 느릅 추출물 함유 유연화장수 (제형예 1) | 느릅 추출물 함유하지 않는 유연화장수 (대조군) | |
| 초기값 | 132.4±21.3 | 141.3±28.1 |
| 1주 | 128.7±15.7 | 131.7±22.7 |
| 2주 | 124.6±19.1 | 135.7±18.8 |
| 3주 | 115.7±18.3 | 132.4±20.3 |
| 4주 | 101.8±12.9 | 134.4±15.7 |
상기 표 10에 나타난 결과와 같이, 느릅 추출물을 함유한 유연 화장수는 시간이 지남에 따라 피지 분비를 효과적으로 감소시켰다. 따라서, 본 발명의 느릅 추출물은 피지 분비를 효과적으로 감소시킴으로써 피지의 과잉분비로 인해 여드름이 발생되는 것을 방지할 수 있을 것으로 생각되어진다.
실험예 4 : 여드름 개선 효과
여드름이 발생한 남녀 10명으로 대상으로 제형예 1의 처방에 따른 유연 화장수를 아침, 저녁으로 4주간 얼굴 전체에 고루 바르도록 하였다. 여드름 개선 효과의 판정은 실험에 참가한 본인이 느끼는 정도에 따라 하기 판정 기준을 참고로 1-3점으로 시험전 상태를 평가한 뒤 여드름 치유 효과를 평가하도록 하여 그 결과를 표 11에 나타내었다.
<시험전 상태의 평가>
1 = 여드름 조금 있음 2 = 여드름 약간 있음 3 = 여드름 심함
<여드름 효과 판정>
- : 효과 거의 없음 + : 약간의 효과 있음
++ : 많이 완화 +++ : 완전히 치유됨
| 피험자 | 시험전 상태 | 2주 경과후 효과 | 4주 경과후 효과 |
| 피험자 1 | 2 | + | + |
| 피험자 2 | 1 | + | ++ |
| 피험자 3 | 1 | - | + |
| 피험자 4 | 2 | - | - |
| 피험자 5 | 2 | + | ++ |
| 피험자 6 | 2 | + | + |
| 피험자 7 | 3 | ++ | +++ |
| 피험자 8 | 2 | - | ++ |
| 피험자 9 | 3 | + | + |
| 피험자 10 | 2 | + | ++ |
상기의 표 11에서 알 수 있듯이, 느릅 추출물이 함유된 유연 화장수를 4주간 사용한 후 대다수 피험자들에서 여드름의 개선 효과를 확인할 수 있었다.
실험예 5 : 여드름 치료제와 여드름 치료 효과 비교
본 발명자들은 여드름 개선 효과가 뛰어난 느릅 추출물이 기존의 여드름 치료제에 의한 여드름 치료 효과와 비교하여 어느 정도의 치료 효과를 갖는지 확인하고자 하였다. 여드름 치료 효과를 비교하기 위하여 기존의 여드름 치료제인 아젤라익산 (azelaic acid)을 사용하였으며, 아젤라익산과 본 발명의 느릅 추출물을 각각 0.1% 및 0.05%의 농도로 여드름을 겪고 있는 피검자의 여드름 부위에 도포하여 여드름 치료 효과를 확인하였다. 숙련된 피부과 의사의 판단에 따라 여드름 치료 효과를 판정하였다.
| 처리군 | 시험농도 | 효과 |
| 느릅 추출물 | 0.1% | 73.21% |
| 0.05% | 63.4% | |
| 아젤라익산 | 0.1% | 49.44% |
| 0.05% | 35.8% |
상기 표 12에서 보는 바와 같이, 기존의 여드름 치료제인 아젤라익산에 비해 동일 처리 농도에서 본 발명의 느릅 추출물의 여드름 치료 효과가 훨씬 우수하였다. 따라서, 본 발명의 느릅 추출물은 여드름 치료에 효과적으로 사용될 수 있다.
실험예 6 : 느릅 추출물의 피부 자극 완화 효과 (인체 피부 첩포 시험)
본 발명의 느릅 추출물을 인체 피부에 직접 적용하였을 때, 피부자극 완화 효과를 가지는지 확인하기 위해 인체 피부 첩포 시험을 하였다. 과거력상 피부자극에 과민반응을 보인 적이 없으며, 현재 피부병 내지 피부 알러지 증상이 없는 피검자 15명을 대상으로 하였다. 피검자의 연령 분포는 26-34세이며, 평균 연령은 29세였다. 하기 표 13의 조성으로 실시예 1 및 비교예 1의 시험물질을 제조하였다.
| 조성 | 함량 (중량%) | ||
| 실시예 1 | 비교예 1 | ||
| A | 느릅 추출물 | 0.1 | - |
| 와그리놀 | 4.0 | 4.0 | |
| 유동파라핀 | 3.0 | 3.0 | |
| B | Arlacel 165 | 1.0 | 1.0 |
| 에멀게이드 1618 | 3.0 | 3.0 | |
| 세피겔 305 | 0.8 | 0.8 | |
| Na-락테이트 (60%) | 2.0 | 2.0 | |
| 증류수 | 잔량 | 잔량 | |
| 합계 | 100 | 100 | |
우선 시험 부위를 70% 에틸 알코올로 닦아낸 뒤 건조시켰다. 준비된 시험물질을 15 ㎍씩 핀 챔버 (Finn chamber, 100 ×10, EPITEST, 핀란드국) 내에 적하시킨 후 시험 대상자의 전박 (forearm) 안쪽 부위에 밀폐 첩포하였다. 24시간 동안 첩포하고, 첩포를 제거한 후 표시펜으로 시험부위를 표시하였다. 첩포한 후 각각 24시간 후와 48시간 후의 자극 정도를 확대경 (8MC-150, DAZOR, 미합중국)을 이용하여 시험 부위의 홍반 및 부종 유무를 관찰하였다.
피부반응은 국제접촉피부염연구회 (ICDRG: International Contact Dermatitis Research Group)의 규정 (표 14)에 따라 판정하였으며, 하기 수학식 2에 의하여 평균 피부 반응도를 계산하고 그 결과를 표 15에 나타내었다.
| 점수 | 평가기준 |
| 0 | 무반응 |
| 0.5 | 희미한 또는 가벼운 홍반 |
| 1 | 경계가 뚜렷하나 약한 홍반 부종 및 구진 |
| 2 | 뚜렷한 홍반, 구진 및 소수포 |
| 3 | 심한 홍반 및 대수포, 가피형성 |
| 피부자극 정도 | 실시예 1 | 비교예 1 |
| 평균 피부 반응도 (n=15) | 0.74 | 0.63 |
| 판정 | 미자극 | 미자극 |
상기 표 15를 통해, 느릅 추출물을 포함하는 본 발명의 화장료 조성물이 느릅 추출물을 포함하지 않는 비교예와 비슷한 정도의 자극 수치를 보여 느릅 추출물에 의한 자극이 거의 없음을 확인할 수 있었다.
이상에서 상세히 설명한 바와 같이, 본 발명은 느릅 추출물을 유효성분으로 함유하는 5α-리덕테이즈 활성 억제용 조성물, 피지 분비 억제용 화장료 조성물 및 여드름 완화용 화장료 조성물을 제공한다. 본 발명의 조성물은 피지 분비를 유발하는 효소인 5α-리덕테이즈의 활성을 효과적으로 억제하며, 피지의 과잉 분비 억제 효과 및 여드름의 개선 효과가 뛰어나 여드름의 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
Claims (9)
- 느릅 (Ulmus davidiana) 추출물을 유효성분으로 함유하는 5α-리덕테이즈 활성 억제용 조성물.
- 제 1 항에 있어서, 상기 느릅 추출물은 디하이드로테스토스테론의 생성량을 억제하는 것을 특징으로 하는 5α-리덕테이즈 활성 억제용 조성물.
- 느릅 추출물을 유효성분으로 함유하는 피지 분비 억제용 화장료 조성물.
- 느릅 추출물을 유효성분으로 함유하는 여드름 완화용 화장료 조성물.
- 제 1 항 내지 4 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 느릅 추출물은 물, 탄소수 1-4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3 부틸렌 글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 용매를 사용하여 추출되는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제 5 항에 있어서, 상기 느릅 추출물은 에틸 알코올을 용매로 사용하여 추출되는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제 6 항에 있어서, 상기 에틸 알코올은 70% 에틸 알코올인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제 1 항 내지 4 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 느릅 추출물은 조성물의 총 중량에 대해 0.0001-10 중량%로 함유되는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제 3 항 또는 4 항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
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