KR20060106554A - 아토피 피부의 개선 효과를 갖는 애기수영 및/또는 대황추출물 함유 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 애기수영(Rumex acetosella L.) 및/또는 대황(Rheum coreanum) 추출물을 함유하는 화장료 및 약학조성물에 관한 것이다.

본 발명은 항염, 항산화, 및 항균 작용을 갖는 상기 생약 추출물을 통해 피부를 청결 미화하여 피부의 건강을 유지 또는 증진시킬 수 있는 화장료로 이용될 수 있으며, 특히 아토피 피부 개선 효과를 갖는 화장료 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.

또한 본 발명은 대장균(Escherichia coli), 황색포도상구균 (Staphylococcus aureus), 장구균 (Enterococcus faecalis), 세라티아균(Serratia marcescens ), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa), 바실러스균(Bacillus subtilis), 살모넬라균 (Salmonella typhimurium), 폐렴간균(Streptococcus pneumoniae)등의 병원미생물에 대한 항균력을 가지고 있어, 아토피 질환 및 2차 질환 예방용 약학조성물로 유용하게 이용될 수 있다.

애기수영, 대황, 화장료, 아토피, 항균

Description

아토피 피부의 개선 효과를 갖는 애기수영 및/또는 대황 추출물 함유 화장료 조성물{Cosmeceutical compositions comprising a Rumex acetosella L. extract and/or a Rheum coreanum extract with improvement effect of atopic dermatitis}

도 1은 애기수영(Rumex acetosella L.)및/또는 대황(Rheum coreanum) 추출물의 세포증식 효과 그래프이다.

도 2는 애기수영(Rumex acetosella L.)및/또는 대황(Rheum coreanum) 추출물의 자유라디칼 소거 효과 그래프이다.

도 3은 애기수영(Rumex acetosella L.)및/또는 대황(Rheum coreanum) 추출물의 리폭시게나아제 활성억제 효과 그래프이다.

도 4는 애기수영(Rumex acetosella L.)및/또는 대황(Rheum coreanum) 추출물의 이질균에 대한 항균력 결과 그래프이다.

도 5는 애기수영(Rumex acetosella L.)및/또는 대황(Rheum coreanum) 추출물을 함유하는 화장료의 아토피 피부 개선 효과 그래프이다.

도 6은 애기수영(Rumex acetosella L.)과 대황(Rheum coreanum) 혼합 추출물을 함유하는 화장료를 사용하기 전과 후의 임상 결과사진이다.

본 발명은 애기수영(Rumex acetosella L.) 및/또는 대황(Rheum coreanum) 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 세포 증식 등의 항염작용, 자유라디칼 소거·리폭시게나아제(Lpoxygenase) 활성억제 등의 항산화 작용 및 항균 작용이 있어 아토피 피부개선 효과를 갖는 화장료로 유용하게 이용될 수 있다.

또한 본 발명은 아토피 질환 및 2차 질환 예방용 약학조성물로 유용하게 이용될 수 있다.

최근에 외모에 관심이 높아지면서 인체를 청결, 미화하여 매력을 더하고 용모를 밝게 변화시키기 위한 일반적인 화장료의 사용보다 피부에서 생화학적 또는 물리적인 효능, 효과를 나타내는 화장료에 관한 연구가 활발히 진행되고 있다. 특히 피부노화를 방지할 수 있는 항산화 작용을 갖거나 아토피 피부 개선 등 피부 건강을 증진하거나 유지하는 효능을 나타낼 수 있는 화장료 소재들이 주 연구 대상이다.

항염 작용은 염증을 방어하는 기전으로, 염증은 조직에 해롭거나 해로울 가능성이 있는 요인들로부터 생체를 보호하는 국소적인 생리적 반응이다. 이러한 염증 현상이 과다하게 유발되면 염증성 세포 산물인 단백질 분해효소들에 의해 세포 및 결합조직이 손상을 입고 결합조직의 손상은 피부탄력을 감소시켜 피부의 노화를 촉진시키므로 건강한 피부를 유지할 수 없게 된다. 따라서 피부 건강을 증진하거나 유지하는 화장료 소재로 항염작용을 갖는 소재가 요구된다.

또한, 산소, 태양광선, 세균, 공해물질 등에 의해 생성된 자유 라디칼이 정상피부세포를 공격하여 세포 또는 세포막을 파괴시키거나, 피부재생 능력을 감소로 인한 피부 손상을 촉진시키므로 이런 자유 라디칼의 생성을 억제하는 항산화 작용을 갖는 화장료 소재도 건강한 피부를 유지하는 데 유용하다.

일반적으로, 아토피성 피부질환은 유아기에 주로 발생하는 태열이라고 불리는 질환으로서, 전체 인구의 10~20% 정도가 유아시절에 경험할 정도로 흔히 있는 피부질환이다. 아토피성 피부는 주로 피부가 건조해지기 쉬운 환경에서 각질층내의 세라마이드(ceramides)의 함량이 감소됨에 따라 발생되는 질환이며 최근 증가 추세에 있는 질환 중의 하나이다.

아토피성 피부는 각질층의 수분유지기능이 떨어져 피부가 건조되면 각질이 쉽게 일어나 피부장벽(skin barrier) 기능이 저하되며 자극유발물질들이 각질층 내로 침입하여 자극을 유발시키고 정상피부에서는 침입하기 어려운 항원 단백질이 쉽게 침입할 수 있어 피부 알러지 등이 발생하는 것으로 견디기 힘들만큼의 소양증 증상을 나타내는 특징을 갖는다. 그러므로 아토피성 피부질환 환자의 90% 이상이 가려움을 참지 못해 긁어서 생긴 상처에 의해 포도상구균에 감염되어 있으며, 최근 의 보고에 의하면 포도상구균의 외독소가 우리 몸의 면역체계를 자극하여 알러지를 일으키는 화학물질을 나오게 하여 아토피성 피부를 악화시킨다고 한다. 즉, 포도상구균 자체가 알러지원으로 작용한다.

이러한 아토피 피부의 발생 원인에 대해서는 지금까지 크게 네 가지로 밝혀져 있는데, 첫째는 유전적 원인에 의한 것으로 피부보호기능을 담당하는 피부 보호막인 세포막의 인지질과 각질세포간의 결합물질인 세포간 지질을 구성하는 필수 지방산인 감마-리놀레인산(γ-linoleic acid;GLA)이 부족한 상태로 인해 피부 보호막을 단단하게 만들지 못하므로 피부표면의 수분의 쉽게 소실되고 외부자극에 의해 쉽게 알러지가 발생한다. 둘째로 환경적 요인에 의한 것으로 현대인의 주거환경의 변화로 아파트생활이 보편화되면서 생활환경이 건조한 상태로 변화됨에 따라 이로 인해 수분 보유력이 저하되고 피부보호기능이 상실되어 적은 자극에도 민감하게 반응하여 알러지가 발생한다. 셋째는 활성산소에 의한 것으로 활성산소에 의해 과산화지질이 생성하게 되고 이것에 의해 아토피 피부가 발생한다. 넷째로 세균, 바이러스, 곰팡이에 감염되어 발생한다는 것으로서 이러한 원인들이 복합적으로 관계하여 발생한다(피부과학, 대한피부과학회 간행위원회, 여문각, 1992).

그러므로 세균 또는 바이러스에 의해 가려움증이 발생하여 긁으면 피부 보습력이 저하되어 거친 피부가 되므로 이와 같은 균을 억제하는 항균 작용을 갖는 화장료 소재도 인체를 청결하게 함으로서 피부를 건강하게 유지할 수 있는 화장료 소재로 유용하다.

현재 일반적으로 사용되고 있는 아토피 피부를 치료 방법으로는 1) 보습제 사용, 2) 타르제제를 사용 3) 트리암시놀론이나 a푸오시놀론과 같은 바르는 스테로이드 제제와 먹는 스테로이드 제제 사용, 4) 자외선 치료, 5) 클린다마이신, 디클록사시린(dicloxacilline)과 같은 항생제, 6) 항소양제, 7) 포타시움 퍼망가네이트(potassium permanganate), 세트리마이드(cetrimide), 클로르헥시딘(chlorhexidine), 클로옥시레놀(chloroxylenol), 디브로모프로파미딘(dibromopropamidine), 폴리녹시린(polynoxylin), 포비돈 아이오다인(povidone iodine) , 트리클로산(triclosan)과 같은 항균제, 8) 면역 조절, 면역 억제, 면역 치료제, 9) 식품, 향기, 한방 등의 방법을 사용하고 있다.

그러나 타르제제는 알코올 성분이 있어 냄새가 좋지 않고 건조한 피부를 자극하는 단점이 있고, 스테로이드 제제는 발진, 피부색 변화 고혈압, 백내장 등의 부작용이 심각하며, 자외선 치료는 햇볕의 화상, 가려움증 유발, 색소 침착과 장기간 치료 시에는 피부의 조기 노화와 암의 위험이 높고, 항생제는 주로 내복약으로 사용하는 단점이 있다. 또한 항균제는 농도 따른 피부 자극이 있으며, 면역조절, 억제제 등은 수두, 대상포진 등의 바이러스에 감염된 얼굴에 사용해서는 안되는 등의 사용상에 어려움이 있어 그 사용에 한계가 있으며, 또한 식품요법, 한방치료, 기 타 향기요법 등은 사용상의 부작용은 없지만 그 효과가 미비한 경우가 많아 근본적인 치료가 되기 어려워 사용상에 그 한계가 있을 수 있다.

따라서, 이러한 아토피를 치료하기 위해서는 항균, 보습, 항염의 효과가 우 수하며, 부작용이 없고 비용이 저렴한 물질의 개발 및 그 물질이 함유된 제품을 쉽게 사용할 수 있는 화장료 소재의 개발이 절실히 요구된다. 또한 아토피 질환 및 2차 질환 예방용 약학 제제가 필요하다.

본 발명자들은 항염, 항산화, 및 항균 등의 기전을 갖는 생약재 소재의 탐색연구가 시행되고 있던 중, 안트라퀴논(Anthraquinone) 유도체인 크리소패닉 산(Chrysophanic acid)이 항산화 또는 항균 작용이 있는 성분이며 이는 마디풀과(Polygonaceae)의 식물에 많이 존재한다고 알려져 있다는 사실을 인지하고(Phytochemical Dictionary-a handbook of bioactive compounds from plants, Jeffrey B.Harborne, Taylor & Francis, 1993) 마디풀과 식물들을 대상으로 화장료 및 약학조성물에 이용될 수 있는 원료연구를 거듭 시행하였다. 마디풀과(Polygonaceae)의 식물들은 한국에 5속 82종이 있고 세계적으로 각지에 30속(屬) 800종(種)이 분포하며, 그 예로 약용식물로 대황, 수영, 고마리, 여뀌, 호범꼬리, 호장, 하수오 등이 있으며 염료식물인 쪽(Persicaria tinctoria)등 많은 종류의 식물이 속한다.

마디풀과 식물 중 애기수영은 한방에서 잎과 줄기를 소산모(小酸模)라는 약재로 쓰며, 항암 효과가 있고, 폐결핵으로 인한 각혈에 지혈 효과가 있다. 민간에서 통경. 옴. 비듬. 피부병 등에 약재로 쓰인다. 전초 추출액은 방부약, 괴혈병 치료약, 지혈제, 이뇨제, 치질, 폐결핵 등에 쓰며 잎 추출액은 열병, 두통, 간질병에 쓰고 골절과 종양에 진통제로도 쓰인다(약초의 성분과 이용, 일월서각. 1994. 과학백과사전 출판사편, 중약 대사전, 도서출판 정담, 중약 대사전 편찬위원회,1997). 이런 애기수영이 항염, 항산화, 및 항균 작용을 가짐에 대해서도 공지된 바 없으며, 화장품에 이용된 예도 없다.

또한 마디풀과 식물 중 대황은 뿌리와 뿌리줄기(근경)에 안트라퀴논 유도체와 탄닌성분이 있어 한방에서는 장의 연동운동을 도와 변비치료를 목적으로 사용되는 한약재이며, 뿌리 추출물은 대장균에 대한 억균 작용이 있는 것으로 알려져 있으나 그 효능이 이용되고 있지 못하다(약초의 성분과 이용, 일월서각, 1994. 과학백과사전 출판사편, 중약 대사전, 도서출판 정담, 중약 대사전 편찬위원회, 1997).

대한민국 공개특허 제2001-18655호는 대황 추출물을 함유하는 화장료 조성물을 개시하고 있으며, 특히 대황 추출물의 자유 라디칼 소거 효과를 확인함으로서 노화방지에 효과가 있는 화장료 조성물에 이용될 수 있음을 기재하고 있다. 대한민국 공고특허 제180994호는 적석지 분말, 한수설 분말, 대황분말, 율무분말, 황연분말, 치자분말, 황백분말 및 황금분말을 함유하는 비누 조성물을 개시하고 있으며, 상기 비누 조성물은 세안용으로 보습효과 및 살균, 항균 효과가 있음을 기재하고 있다. 또한, 대한민국 특허 제361040호는 황백, 산수유, 대황, 행인, 당귀, 정향 및 띠 추출물을 안정화한 니오좀 함유 화장료 조성물을 개시하고 있으며, 상기 조성물들은 피부탄력 효과, 보습효과가 있음을 기재하고 있다.

대한민국 공개특허 제2003-55154호는 마디풀과에 속하는 대황, 황련, 광금, 황백, 백선피 및 선자황을 포함하는 조성물이 아토피성 피부염, 건성지루성 피부 염, 습진에서 나타나는 피부염증, 소양증, 피부각질의 과각화, 세균감염증 또는 창상 등의 피부질환에 효과가 있음을 개시하고 있다.

본 발명자는 마디풀과 식물들 중 화장료에 이용된 바 없는 애기수영이 안트라퀴논(Anthraquinone) 유도체인 크리소패닉 산(Chrysophanic acid)을 함유하고 있는 점에 착안하여 이를 화장료 소재로 유용할 수 있는 항염, 항산화 및 항균 작용 모두를 동시에 가짐을 확인하고 본 발명을 완성하였다.

본 발명은 항염, 항산화, 및 항균 작용을 동시에 가지며 아토피 피부에도 유용하게 이용될 수 있는 신규의 화장료 소재를 제공하는 것을 목적으로 한다.

또한 본 발명은 상기 효능을 갖는 신규의 화장료 소재를 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

아울러 본 발명은 상기 혼합 추출물을 함유하는 아토피 피부질환 치료용 약학조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 항염, 항산화, 및 항균 작용을 동시에 가짐으로서 피부를 청결, 미화하여 피부의 건강을 증진 또는 유지할 수 있는 화장료 소재인 애기수영(Rumex acetosella L.) 추출물을 함유하는 화장료 조성물을 제공한다.

또한 본 발명은 화장료에 사용될 수 있는 대황(Rheum coreanum)추출물을 혼합한 화장료 조성물을 제공한다.

아울러 본 발명은 상기 추출물들을 함유함으로서 아토피 피부에도 유용하게 이용할 수 있는 화장료 및 약학조성물을 제공한다.

이하 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.

본 발명은 아토피 피부에 유용하게 이용될 수 있는 신규한 화장료 소재인 애기수영 추출물의 용도에 관한 것이며, 또한 애기수영 추출물과 화장료에 사용될 수 있는 대황(Rheum coreanum)추출물을 혼합한 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 애기수영(Rumex acetosella L.)은 마디풀과 (Polygonaceae)의 다년생 초본식물로 높이가 20~50cm정도로 자란다. 뿌리줄기가 옆으로 뻗으면서 번식하고 줄기는 곧게 서며 털 모양의 돌기가 있으며 모가 난 세로줄이 있고 자줏빛이 돌며 잎과 더불어 신맛이 난다. 뿌리에서 나온 잎은 뭉쳐나고 잎자루가 길며 창 모양이고 끝이 뾰족하며 밑 부분에 귀 같은 돌기가 좌우로 퍼진다. 애기수영은 애기괴싱아, 애기승아, 애괴승아, 소산모(小酸模)라고 불리우며 크리소패닉 산(Chrysophanic acid), 크리소파놀(Chrysophanol), 아스코르빈 산(Ascorbic acid), 루틴(Rutin), 아데노신(Adenosine)등의 성분을 포함한다.

본 발명의 대황(Rheum coreanum)은 마디풀과(Polygonaceae) 식물로 장군풀이라고도 불리우며 중국 서장, 청해지역이 원산지로 우리나라에서도 해발 1,000m이상 의 고산지대에서 자생하며, 최근에는 전라북도지역에서 종자번식 및 근경번식의 방법으로 재배가 이루어지고 있다.

본 발명은 대황을 분쇄하여 분말로 만들고 건조한 애기수영 전초를 세절한 후 동일 비율로 즉 1:1로 혼합하여 그 건조 중량의 1~15배 부피량의 물, 탄소수 1~4의 저급 알코올 또는 이들 저급 알코올과 물과의 혼합용매, 에틸아세테이트 중에서 선택된 추출용매를 부가하여 4~30℃에서 3~20일간 침적시켜 유효성분을 추출한 후, 추출용매를 감압농축기로 농축하여 추출물을 얻는다.

또 다른 추출 방법으로는, 대황을 분쇄하여 분말로 만들고 건조한 애기수영 전초를 세절한 후 동일 비율로 즉 1:1로 혼합하여 그 건조 중량의 1~15배 부피량의 물, 탄소수 1~4의 저급 알코올 또는 이들 저급 알코올과 물과의 혼합용매, 에틸아세테이트, 물, 글리세린, 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 용매를 사용한다. 이어서 용매가 증발되는 것을 방지하기 위해 냉각 콘덴서를 구비한 추출기로 30~100℃에서 3~48시간 동안 가열 추출하거나 5~30℃에서 1~5일간 침적시켜 유효성분을 추출하는 방법을 사용하여 추출한 다음, 추출 용매를 감압농축기로 농축하여 추출물을 얻는다. 이렇게 하여 제조된 대황 및 애기수영 추출물은 크리소패닉 산을 포함하는 안트로퀴논 유도체를 함유한다.

상기의 애기수영 및 대황 혼합 추출물은 감압 농축기로 농축함으로써 더욱 정제된 애기수영 및 대황 혼합 추출물을 얻을 수 있으며, 또한 유효성분의 증발을 방지하기 위하여 냉각 콘덴서를 장착하여 추출할 수 있다. 상기 추출물은 통상의 방법으로 액상 또는 분말 등의 형태로 제조될 수 있다.

염증을 발생하는 세포들은 잠재적 침입물질로부터의 침입을 방지하기 위하여 감염된 숙주에 proteases, protaglandins, cytokines, ROIs 및 여타 매개물질들을 방출 한다. 이러한 매개물질들의 작용들이 숙주의 결합조직 내의 세포 및 비세포 물질에 손상을 주게된다. 백혈구 활동을 증가시키는 이러한 매개물질들의 방출은 아라키돈산 반응을 통한 효소작용에 의해 진행 되는데 여기에는 리폭시게나아제 작용에 의한 류코트리엔(leucotrienes)의 생성과정이 포함된다. 따라서 본 발명에 따른 애기수영 및 대황 혼합 추출물이 종래 염증 억제에 도움이 되는 물질로 알려진 퀘세틴인 대조군과 거의 유사한 리폭시게나아제 억제효과를 확인하여 상기 혼합 추출물이 항염 작용을 가짐을 알 수 있다. 또한, 본 발명의 혼합 추출물이 대조군으로 항산화 물질이기도 한 퀘세틴과 거의 유사한 자유 라디칼 소거 효과를 나타냄을 측정함으로서 상기 혼합 추출물의 항산화 작용을 확인하였다. 아울러 본 발명의 혼합 추출물이 병원성 이질균, 미생물, 푸른 곰팡이에 대해 이들 균에 대한 억제효과를 확인함으로서 일반 균들에 대한 항균 작용을 확인하였다.

따라서 상기 혼합 추출물은 항염, 항산화 및 항균 작용을 통해 피부를 청결 및 미화하여 피부의 건강을 증진 또는 유지할 수 있는 화장료 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.

또한 본 발명은 애기수영 또는 애기수영 및 대황 혼합 추출물을 아토피 피부를 갖는 소인에게 도포하여 개선 정도를 평가하였으며, 소인 뿐 아니라 그들의 보호자를 통하여 아토피 피부의 개선 정도를 평가한 결과 눈에 띄게 아토피 피부 개선이 나타났다. 그러므로 상기 화장료 조성물은 아토피 피부를 갖는 사람에게도 이용될 수 있으며, 이들 피부의 건강을 증진 또는 유지할 수 있다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기 애기수영 및 대황 혼합 추출물을 액상으로 화장료 조성물 중량 대비 0.1~10%의 양으로 함유할 수 있고, 분말로 화장료 조성물 총 건조중량 대비 0.001~5중량%, 바람직하게는 0.01~3중량%로 포함될 수 있다.

본 발명은 화장수, 영양로션, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 팩 등의 화장료 조성물로 제형화 될 수 있으며 이 때 제형의 종류, 사용목적 등에 따라 임의로 선정된 색소, 방부제, 계면 활성제, 유분, 물, 보습제 증점제, 킬레이트제, 향료 등의 첨가제를 함유할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.

아울러 본 발명은 상기 추출물들을 유효성분으로 함유하는 아토피성 피부질환 치료용 약학조성물에 관한 것이다.

본 발명은 통상적으로 사용되는 충전제, 중량제, 결합제, 습윤제, 붕해제 및 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제 등과 혼합하여 애기수영 또는 애기수영 및 대황 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피성 피부질환 치료용 조성물을 제조할 수 있으며, 통상적인 방법에 의해 정제, 캅셀제, 산제, 과립제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 액제 등의 경구투여용 제제나 통상의 방법으로 주사용 증류수에 용해하여 주사제로 또는 에어로졸, 로션, 크림 형태로도 사용될 수 있다.

본 발명의 약학조성물은 경구 또는 비경구 투여될 수 있고, 유효성분인 애기수영 또는 애기수영 및 대황 혼합 추출물은 광범위한 투여 범위에 대해 유효하다. 예를 들어, 애기수영 또는 애기수영 및 대황 혼합 추출물의 1일 투여량은 통상적으로 약 1mg/kg 내지 2000㎎/kg, 바람직하게는 약 10mg/kg 내지 500mg/kg 범위이다. 그러나 실제적으로 투여되는 생리 활성 물질의 양은 치료하려는 질환의 상태, 선택된 투여 경로, 개별적인 환자의 연령, 체중 및 반응, 및 병의 중증도를 비롯한 관련 상황에 비추어 의사가 결정할 것이므로 상기 투여 범위는 본 발명의 범위를 제한하는 것은 아니다.

본 발명은 애기수영 또는 애기수영 및 대황 혼합 추출물이 매우 우수한 항염, 항산화, 항균, 세포증식, 피부 가려움증 개선, 아토피 피부 개선 등의 효능을 나타냄을 확인한 것으로서, 상기 추출물을 유효성분으로 함유하는 제제들은 안정성, 안전성 면에서 우수하다.

이하, 실시예, 제조예 및 실험예를 들어 본 발명의 구성 및 효과를 상세히 설명하나, 본 발명이 이들에만 한정되는 것은 아니다.

실시예 1. 애기수영 추출물의 제조

건조하여 세절한 애기수영 100g을 에틸알코올 1㎏에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 100℃로 8시간 끓여서 추출한 후300메쉬 여과지로 여과하고, 1주일간 방치하여 침전물을 에드벤텍 5번 여과지와 와트만 GFC 47mm 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기를 이용하여 50℃에서 완전히 농축하여 건조 중량 21.03 g을 얻었다.

실시예 2. 대황 추출물의 제조

대황을 분쇄하여 만든 분말 100g을 에틸알코올 1㎏에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 100℃로 8시간 끓여서 추출한 후 300메쉬 여과지로 여과하고, 1주일간 방치하여 침전물을 에드벤텍 5번 여과지와 와트만 GFC 47mm 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기를 이용하여 50℃에서 완전히 농축하여 건조 중량 20.22 g을 얻었다.

실시예 3. 애기수영 및 대황 혼합 추출물의 제조

애기수영을 분쇄하여 만든 분말 50g과 건조하여 세절한 대황 50g을 70% 에틸 알코올 1L에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 100℃로 8시간 끓여 추출한 후 300메쉬 여과지로 여과하고, 1주일간 방치하여 침전물을 에드벤텍 5번 여과지와 와트만 GFC 47mm 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기를 이용하여 50에서 완전히 농축하여 애기수영 및 대황 혼합 추출물의 건조분말 23.17g을 얻었다.

실시예 4. 애기수영 및 대황 혼합 추출물의 제조

먼저 대황을 분쇄하여 만든 분말 50g과 건조하여 세절한 애기수영 50g을 메틸알코올 1㎏에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 100℃로 8시간 끓여서 추출한 후 300메쉬 여과지로 여과하고, 1주일간 방치하여 침전물을 에드벤텍 5번 여과지와 와트만 GFC 47mm 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기를 이용하여 50℃에서 완전히 농축한 후 이 농축액에 물 1㎏를 가하고 다시 디에틸에테르 1㎏를 가하여 잘 섞어준 후 두 층으로 완전히 분리시킨다. 하층인 수층에 다시 1㎏의 에틸아세테이트를 가하여 잘 섞어준 후 두 층으로 완전히 분리시켜 에틸아세테이트 층을 감압 농축기를 이용하여 50℃로 완전히 농축하여 건조 중량 10.12g를 얻었다.

제조예 1. 화장수(스킨로션)의 제조

실시예 3에서 제조된 대황 및 애기수영 혼합 추출물 분말을 함유한 화장료 중 화장수(스킨로션)의 처방예는 다음과 같다.

번호	원 료	함량(중량%)
1	대황 및 애기수영 혼합 추출물 분말(실시예3)	1.0
2	글리세린	3.0
3	부틸렌 글리콜	2.0
4	프로필렌 글리콜	2.0
5	폴리옥시에칠렌 경화피마자유	1.0
6	에탄올	10.0
7	트리에탄올아민	0.1
8	방부제	미량
9	색소	미량
10	향료	미량
11	정제수	잔량

<제조방법>

11번에 2,3,4,8번을 순서대로 투입하고 교반하여 용해시킨 후, 5번을 60℃ 정도 가열하여 용해시킨 후, 10번을 투입하여 용해한 후 11번에 투입한다. 마지막으로 1,6,7,9번을 투입하여 충분히 교반한 뒤 숙성시킨다.

제조예 2. 영양로션의 제조

실시예 3의 대황 및 애기수영 혼합 추출물 분말을 함유한 화장료 중 영양로션의 처방예는 다음과 같다.

번호	원 료	함량(중량%)
1	대황 및 애기수영 혼합 추출물 분말(실시예3)	1.0
2	밀납	1.0
3	폴리솔베이트 60	1.5
4	솔비탄 세스퀴올레이트	0.5
5	유동 파라핀	10.0
6	소르비탄 스테아레이트	1.0
7	친유형 모노스테아린산 글리세린	0.5
8	스테아린산	1.5
9	글리세릴스테아레이트/피이지??400 스테아레이트	1.0
10	프로필렌글리콜	3.0
11	카르복시폴리머	0.1
12	트리에탄올아민	0.2
13	방부제	미량
14	색소	미량
15	향료	미량
16	정제수	잔량

<제조방법>

10, 11, 13, 16을 혼합교반하면서 80℃로 가열하여 제조부에 투입한 후 유화기를 작용시키고 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 12를 80℃로 가열 용해한 후 유화한다. 유화가 끝나면 교반기를 이용하여 교반하면서 50℃까지 냉각한 뒤 15번을 투입하고 45℃까지 냉각한 뒤 14번을 투입하고 35℃에 1번을 투입하여 25℃까지 냉각한 뒤 숙성시킨다.

제조예 3. 영양크림의 제조

실시예 1 내지 실시예 4에서 제조된 추출물 분말을 함유한 화장료 중 영양크림의 처방예는 다음과 같다.

번호	원 료	제조예3A	제조예3B	제조예3C	제조예3D	비교예1	비교예2
1	실시예 1	1.0	-	-	-	-	-
2	실시예 2	-	1.0	-	-	-	-
3	실시예 3	-	-	1.0	-	-	-
4	실시예 4	-	-	-	1.0	-	-
5	스테아린산	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
6	세틸알콜	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
7	글리세릴모노스테아레이트	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
8	폴리옥시에틸렌소르비탄모노스테아레이트	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
9	솔비탄세스퀴올레이트	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
10	글리세릴모노스테아레이트/글리세릴스테아레이트/폴리옥시에틸렌스테아레이트	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0
11	왁스	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0
12	유동파라핀	4.0	4.0	4.0	4.0	4.0	4.0
13	스쿠알란	4.0	4.0	4.0	4.0	4.0	4.0
14	카프릴릭/카프릭트리글리세라이드	4.0	4.0	4.0	4.0	4.0	4.0
15	카르복시비닐폴리머	0.3	0.3	0.3	0.3	0.3	0.3
16	부틸렌글리콜	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
17	글리세린	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0
18	트리에탄올아민	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
19	정제수	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량
20	물	-	-	-	-	1.0	-
21	Crysophanic Acid	-	-	-	-	-	1.0

<제조방법>

제조예 3A, B, C 및 D : 15, 16, 17, 19을 혼합교반하면서 80℃로 가열하여 제조부에 투입한 후 유화기를 작용시키고 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14을 80℃로 가열하여 용해한 후 18을 투입 교반하여 제조부에 투입하고 유화한다. 유화가 끝나면 교반기를 이용하여 교반하면서 35℃까지 냉각하고 각각 1, 2, 3 및 4번을 투입하여 25℃까지 냉각한 뒤 숙성시키고 제조예 3A, B, C 및 D로 하였다.

비교예1 및 2 : 15, 16, 17, 19을 혼합교반하면서 80℃로 가열하여 제조부에 투입한 후 유화기를 작용시키고 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14을 80℃로 가열하여 용해한 후 18을 투입교반하여 제조부에 투입하고 유화한다. 유화가 끝나면 교반기를 이용하여 교반하면서 35℃까지 냉각하고 20, 21번을 각각의 비교예 1 및 2에 투입하여 25℃까지 냉각한 뒤 숙성시킨다.

제조예 4. 에센스의 제조

실시예 3에서 제조된 대황 및 애기수영 혼합 추출물 분말을 함유한 화장료 중 에센스의 처방예는 다음과 같다.

번호	원 료	함량(중량%)
1	대황 및 애기수영 혼합 추출물 분말(실시예3)	1.0
2	시토 스테롤	1.7
3	폴리글리세릴 2-올레이트	1.5
4	세라마이드	0.7
5	스테아레스-4	1.2
6	콜레스테롤	1.5
7	디세틸포스페이트	0.4
8	농글리세린	5.0
9	마카다미아 오일	15.0
10	카르복시비닐폴리머	0.2
11	산탄검	0.2
12	방부제	미량
13	향료	미량
14	정제수	잔량

<제조방법>

2, 3, 4, 5 및 6을 일정한 온도에서 균질화하여 비이온계 양친매성 지질이라 칭한다. 상기 비이온계 양친매성 지질과 1, 7, 8 및 14를 혼합하고 일정한 온도에서 균질화하여 마이크로플루이다이져를 통과하고 이어 9를 일정한 온도에서 서서히 첨가하여 균질화한 후 다시 마이크로플루이다이져에 재차 통과시킨다 그리고 10, 11, 12, 13을 투입하여 분산시켜 안정화하고 숙성시킨다.

실험예 1. 세포배양을 이용한 세포 증식 효과시험

상기 실시예 1 내지 실시예 4에서 제조된 추출물 건조분말에 대하여 세포배양을 이용한 세포 증식 효과를 측정하였다.

1) 실험방법

세포 독성 및 증식 실험을 다음과 같은 방법으로 실시하였다. 배양하고 있는 세포(파이브로블라스트,3T3)를 96 웰 마이크로플레이트에 5,000세포/웰로 분주하여 30분간 항온조에서 배양하고, 시료를 농도 별 각각 0.05, 0.07, 0.1, 0.3, 0.5, 1.0(%,W/V))로 투여하여 72시간동안 배양하였다. 그리고 티아졸린 블루(Thiazoline blue)를 투여하고 4시간동안 추가 배양을 하였다. 배양액을 모두 버리고 마이크로플레이트의 각 웰에 반응 정지액을 가하고 5분간 교반한 후, 570㎚에서 흡광도를 측정하였다. 대조군은 시료 주입량만큼 10 % 우태아혈청(Fetal Bovine Serum, FBS) 배지를 투여하여 세포 성장의 최적 조건으로 동시배양을 하였으며, 대조군의 세포증식을 100%로 하고 시료 투입 실험군의 세포 증식율을 계산하였다.

2) 실험결과

세포증식 효과는 계산식 1에 의해 산출되었고, 그 결과는 하기 표 1에 나타내었으며, 도 1의 그래프로 도식화하였다.

[계산식 1]

추출물 농도(%)	세포 증식율(%)
	실시예 1	실시예2	실시예3	실시예4	Crysophanic acid
대조군	100	100	100	100	100
0.01	105.93	104.88	105.71	110.22	103.35
0.05	109.76	110.84	111.59	123.18	105.93
0.1	118.49	115.70	119.69	133.50	110.82
0.3	130.54	128.41	131.66	160.47	113.72
0.5	142.82	139.81	154.32	189.29	118.23
1.0	166.73	160.88	191.46	198.96	119.34

표 1에서 알 수 있는 바와 같이, 세포 성장 최적 조건에서의 세포 증식을 100%로 하였을 때, 애기수영 추출물인 실시예 1의 효과는 166.73%로서 공지된 대황 추출물인 실시예 2 또는 대조군인 Crysophanic acid의 효과 보다 우수한 세포 증식 효과를 나타내었다. 세포 증식 효과가 있다는 것은 세포에 대한 독성이 없다는 것을 의미하는 것으로, 상기 세포 증식효과 실험으로부터 애기수영 혼합 추출물은 우수한 세포증식 효과와 더불어 세포독성이 없는 안전한 것임을 확인할 수 있다. 또한 실시예 3 및 실시예 4의 결과로부터 대황 및 애기수영의 혼합 추출물은 세포증식 효과에 있어서 상승효과가 있음을 알 수 있다.

따라서 본 발명에 따른 애기수영 추출물은 아토피성 피부질환의 치료에 유용한 소재로 이용할 수 있으며, 또한 본 발명에 따른 애기수영 및/또는 대황 추출물은 아토피성 피부 개선 작용을 갖는 화장료 및 아토피성 피부질환 치료용 약학 조성물로 이용될 수 있다.

실험예 2. 자유라디칼(Free Radical) 소거 효과 시험

상기 실시예 1 내지 실시예 4에 대하여 자유라디칼(Free Radical) 소거 효과를 측정하였으며 비교 물질로 Quercetin을 사용하였다.

1) 실험방법

DPPH(1,1-디페닐-2피크릴-히드라질)법 (참조:Blois.M.S.Nature 181, 1190, 1958)을 사용하여 실험을 수행하였으며, DPPH와 Quercetin은 시그마(SIGMA)사의 것을 사용하였다. 0.2mM DPPH 메탄올 용액 1ml에 실시예 1 내지 실시예 4에서 제조된 추출물의 여러 농도(5, 10, 20, 30ppm), Quercetin 의 에탄올 용액 2ml를 첨가하고 잘 교반한 후 실온에서 10분간 반응을 시킨다. 그리고 517nm에서 흡광도를 측정하였으며, 이때 공시험으로 각 시료 대신 정제수를 사용하였다.

하기 계산식 2를 이용하여 자유라디칼 소거효과를 구하고 그 결과를 아래의 표 2에 기재하였다.

[계산식 2]

2) 실험결과

농도(ppm)	자유라디칼 소거 효과(%)
	실시예 1	실시예 2	실시예 3	실시예 4	Quercetin	Crysophanic acid
0	0	0	0	0	0	0
5	23.75	20.32	29.16	29.22	29.80	25.93
10	44.57	40.85	49.70	53.58	52.70	46.37
20	68.39	66.92	73.83	94.77	93.28	70.81
30	88.27	87.35	91.23			89.27
40	93.70	92.50				94.30

실시예 1의 SC₅₀ : 16.94ppm

실시예 2의 SC₅₀ : 16.94ppm

실시예 3의 SC₅₀ : 13.42ppm

실시예 4의 SC₅₀ : 9.95ppm

Quercetin의 SC₅₀ : 10.07ppm

Crysophanic acid의 SC₅₀ : 15.48ppm

표 2에서 알 수 있는 바와 같이 실시예 1의 자유라디칼 50% 소거 농도(SC₅₀)는 16.94ppm으로 Quercetin의 10.07ppm에 비해 다소 낮은 효과이나 Quercetin이 단일 물질이며 이를 추출하여 그 순수 물질의 수득과 사용상의 안정성 및 비용을 고려한다면 애기수영 혼합 추출물의 자유라디칼 소거 효과가 더 우수할 것이라고 예측되며, 사용 및 생산 비용적인 면에서도 더 효과적임을 알 수 있다. 또한 대조군인 Crysophanic acid 와 자유라디칼 소거 효과가 유사하였다. 그러므로 본 발명에 다른 애기수영 추출물은 자유라디칼 소거 효과가 우수한 것임을 확인할 수 있으며, 대황 및 애기수영의 혼합 추출물인 실시예 3 및 실시예 4로부터 자유라디칼의 소거 효과는 상승작용이 있음을 알 수 있다. 실험예 2를 도식화하여 도 2에 표시하였다.

따라서 본 발명에 따른 애기수영 추출물은 항산화 작용을 갖는 화장료 소재로 유용하며, 애기수영 및/또는 대황 추출물은 아토피성 피부 개선 작용을 갖는 화장료로 이용될 수 있다.

실험예 3. 리폭시게나아제(Lpoxygenase) 활성억제 효과 시험

상기 실시예 1 내지 실시예 4에 대하여 리폭시게나아제(Lpoxygenase) 활성억제 효과를 측정하였으며 비교 물질로 Quercetin을 사용하였다.

1) 실험방법

TBAS법을 사용하여 실험을 수행하였으며, 실험에 사용하는 Linoleic acid와 Lipoxygenase, Thiobabitulic acid, Quercetin는 시그마(SIGMA)사의 것을 사용하였다. 1mM Linoleic acid 1ml에 의 실시예 1 내지 실시예 4의 여러 농도(1, 5, 10, 20, 30ppm), Quercetin을 0.05ml를 첨가하고 Lipoxygenase 0.95ml를 투여 후 잘 교반하고 25℃에서 10분간 반응을 시킨다. 그리고 Trichloroacetic acid를 0.5ml 투여하고 Thiobarbiturlic acid 1ml 첨가한 후 10분간 heating을 한 후 얼음물에서 2분간 냉각시켜 반응을 종료시킨다. 반응이 종결된 반응액에 Butanol 2ml를 넣고 4000g로 5분간 원심분리 한 후 535nm에서 흡광도를 측정하였으며, 이때 공시험으로 각 시료 대신 정제수를 사용하였다.

하기 계산식 3를 이용하여 Lipoxygenase 활성억제 효과를 구하고 그 결과를 아래의 표 3에 기재하였다.

[계산식 3]

2) 실험결과

농도(ppm)	Inhibition (%)
	실시예 1	실시예 2	실시예 3	실시예 4	Quercetin	Crysophanic acid
1.0	4.37	3.04	5.07	8.75	9.21	4.88
5.0	16.32	15.66	19.88	25.69	28.64	17.23
10.0	40.55	39.97	34.82	65.21	61.49	33.57
20	85.77	88.12	89.33	93.06	94.64	60.29
30	95.41	95.78	98.69	98.88	98.97	89.06

실시에 1의 IC₅₀ : 13.9ppm

실시예 2의 IC₅₀ : 13.9ppm

실시예 3의 IC₅₀ : 12.95ppm

실시예 4의 IC₅₀ : 10.58ppm

Quercetin IC₅₀ : 10.48ppm

Crysophanic acid의 IC₅₀ : 13.9ppm

표 3에서 알 수 있는 바와 같이, 실시예 1의 리폭시게나아제 50% 활성억제 농도(IC₅₀)는 대조군인 Crysophanic acid과 같은 정도로서 리폭시게나아제 활성억제 효과가 우수한 것임을 알 수 있다. 또한 하며, 사용 및 생산 비용적인 면에서도 더 효과적이다는 것을 알 수 있다. 대황 및 애기수영의 혼합 추출물인 실시예 3 및 실시예 4의 혼합추출물은 리폭시게나아제 활성억제 효과가 상승되었음을 확인할 수 있다. 그러므로 본 발명은 우수한 리폭시게나아제 활성억제 효과를 나타내는 것으로서 도식화하여 도 3에 표시하였다.

따라서 본 발명에 따른 애기수영 추출물은 항산화 작용을 갖는 화장료 소재로 유용하며, 애기수영 및/또는 대황 추출물은 아토피성 피부 개선 작용을 갖는 화장료 및 아토피성 피부질환 치료용 약학 조성물로 이용될 수 있다.

실험예 4. 이질균을 이용한 항균력 효과 시험

상기 실시예 1 내지 실시예 4에서 제조된 추출물 건조분말에 대하여 병원성 이질균을 이용한 항균력 효과를 측정하였다.

1) 실험방법

병원성 이질균을 이용한 항균력 실험을 다음과 같은 방법으로 실시하였다. Test tube에 MIC Test 배지를 8㎖씩 시료의 수만큼 분취한다. 단 첫번째 Test tube에는 배지를 9㎖을 넣는다. 각 시료의 첫번째 Test tube에 각각의 시료를 100㎍/㎖씩 투여한다. 각 시료의 첫번째 Test tube에서 1㎖ 취해 다음 Test tube에 투여하는 방법으로 순차적으로 10배씩 희석하고 각각의 Test tube에 배양하고 있는 이질균 (Shigella sonnei)을 1㎖씩 투여하여 24시간 배양한 후에 각각의 Test tube에 있는 배양액을 600㎚에서 흡광을 측정한다. 초기의 흡광도는 배양하고 있는 이질균을 0.1%가 되게 배지에 넣은 후 흡광도를 측정하여 초기값으로 한다. 각각의 시료는 실시예 1, 실시예 2, 실시예 3, 실시예 4, Grape Fruit Extract, Ampicillin, Tetracycline, EtOH를 사용하였다. Grape Fruit Extract 는 유통되고 있는 항균 추출물로 비교하기 위함이고, Ampicillin과 Tetracycline은 항균제로 Positive control이며, EtOH는 Negative control로 사용하였다.

2) 실험결과

항균력 효과 결과는 하기 표 4에 나타내었으며, 도 4에 그래프로 표시하였다.

시 료			Concentration (ug/ml)
			100	10.0	1.0	0.1	0.01	0.001	0.0001
실험군		실시예 1	0.0746	0.1189	0.1387	0.1587	0.1590	0.1649	0.1569
		실시예 1 S.D	0.0069	0.0073	0.0071	0.0025	0.0045	0.0044	0.0099
		실시예 2	0.0782	0.1119	0.1283	0.1506	0.1520	0.1589	0.1529
		실시예 2 S.D	0.0065	0.0082	0.0058	0.0225	0.0455	0.0068	0.0077
		실시예 3	0.0440	0.0906	0.1205	0.1356	0.1395	0.1410	0.1481
		실시예 3 S.D	0.0058	0.0003	0.0064	0.0123	0.0053	0.0170	0.0049
		실시예 4	0.0540	0.0626	0.0605	0.0706	0.0755	0.0910
		실시예 4 S.D	0.0038	0.0023	0.0084	0.0053	0.0083	0.0160
		Crysophanic A.	0.0599	0.0681	0.0675	0.0682	0.0727	0.1125
		Crysophanic A. S.D	0.0107	0.0083	0.0124	0.0076	0.0097	0.0036
비교군	Positive Control	Ampicillin	0.0375	0.0386	0.0417	0.0414	0.0410	0.0429
		Ampicillin S.D	0.0004	0.0005	0.0030	0.0016	0.0007	0.0003
		Tetracycline	0.0579	0.0661	0.0633	0.0636	0.0697	0.1031
		Tetracycline S.D	0.0037	0.0168	0.0069	0.0086	0.0137	0.0136
	Negative Control	EtOH	0.1444	0.1455	0.1444	0.1433	0.1447	0.1444	0.1387
		EtOH S.D	0.0037	0.0037	0.0041	0.0049	0.0064	0.0058	0.006

상기의 결과 표 4에서 알 수 있는 바와 같이, 본 발명에 따른 실시예 1 및 실시예 4는 우수한 항균효과가 있었으며, Positive control인 Ampicillin 및 Tetracycline 과 대등한 항균효과가 있음을 알 수 있다. Ampicillin 과 Tetracycline은 시중에 유통되는 항균제로 부작용 및 사용상의 한계점과 생산 비용적인 면을 고려한다면 본 발명에 따른 추출물은 사용상에 안전하고 부작용이 없는 항균효과가 대단히 우수한 것으로 생산 비용적인 면에서도 더 효과적이다는 것을 알 수 있다.

병원성 이질균에 대한 항균력을 도식화하여 도4 에 표시하였다.

그러므로 본 발명에 따른 애기수영 추출물은 아토피성 피부질환에 의한 2차 감염의 예방 및 치료에 이용할 수 있으며, 또한 본 발명에 따른 애기수영 및/또는 대황 추출물은 아토피성 피부 개선 작용을 갖는 화장료 및 아토피성 피부질환 치료용 약학 조성물로 이용될 수 있다.

실험예 5. 병원성 미생물을 이용한 항균력 효과 시험

실시예 1 내지 실시예 4에 대하여 병원성 미생물을 이용한 항균력 효과를 측정하였다.

1) 실험방법

상기 실시예 1 내지 실시예 4에서 제조된 추출물 건조분말을 0.1중량%로 하여 항균력 평가의 시료로 사용하였다. 각각의 병원미생물을 액체 배양하여 soft agar배지(tryptone 1g, yeast extract 0.5g, NaCl 1g, agar 0.5g, D.W 100mL) 3mL에 혼합한후 LB 평판배지 (tryptone 10g, yeast extract 5g, NaCl 10g, agar 15g, D.W 1L)에 붓고 상기의 시료를 점적한 paper disk(직경 6mm)을 배지 중앙에 올려놓고 24시간 동안 배양한 후, clear zone의 길이를 재어 생육 억제환을 측정하였으며, 대조군은 희석용매인 D.W로 하였다.

2) 실험결과

표 5는 이질균 외의 병원미생물에 대한 상기 시료의 항균력에 대한 결과이다.

균주명	성장억제환(mm)
	실시예 1	실시예 2	실시예 3	실시예 4	Chrsophanic acid
대장균	15	18	18	21	20
황색포도상구균	15	18	20	20	21
장구균	12	16	17	19	18
세라티아균	14	15	15	17	16
녹농균	10	11	12	15	15
바실러스균	15	16	20	22	19
살모넬라균	15	16	19	20	19
폐렴간균	13	14	15	15	16

표 5에서 알 수 있는 바와 같이, 실시예 1 내지 실시예 4의 대황 및/또는 애기수영 추출물은 대장균, 황색포도상구균, 장구균, 세라티아균, 녹농균, 바실러스균, 살모넬라균, 폐렴간균의 다양한 병원성 균에 대하여 광범위하게 항균력이 우수함을 확인할 수 있다.

그러므로 본 발명에 따른 애기수영 추출물은 아토피성 피부질환에 의한 2차 감염의 예방 및 치료에 이용할 수 있으며, 또한 본 발명에 따른 애기수영 및/또는 대황 추출물은 아토피성 피부 개선 작용을 갖는 화장료 및 아토피성 피부질환 치료용 약학 조성물로 이용될 수 있다.

실험예 6. 아토피 피부 개선효과의 임상 평가를 측정

제조예 3A 내지 제조예 3D의 화장료에 대한 아토피 피부 개선효과의 임상 평가를 측정하였다.

제조예 3A 내지 제조예 3D의 아토피 피부의 개선 효과를 평가하기 위해, 아토피성 피부를 가지고 한의원 및 병원에 내원하여 치료받는 소인 30명을 대상으로 다음과 같은 실험을 실시하였다. 시험 시료를 이중 맹검법(double-blinded test)에 의하여 각각 오른쪽과 왼쪽으로 나누어 전신에 도포하되, 가능한 한 시험시료의 효과에 영향을 미칠 수 있는 다른 보습제의 사용은 금지하였다. 시험 시료를 도포한 지 1, 2, 3, 4주 후의 효과를 스코래드 SCORAD:SCORing Atopic Dermatitis) 측정법으로 평가하여 그 결과를 하기 표 6에 나타냈다.

1) 판정기준

① 정도 기준(Extent criteria) : 면적 = 피손부위/100

② 강도 기준(intensity criteria)

- 홍반 (1/2/3)

- 부종 (1/2/3)

- 삼출 (1/2/3)

- 피부 벗겨짐 (1/2/3)

- 태선화 정도 (1/2/3)

- 건조 정도 (1/2/3)

③ 주관적 기준

- 가려움 (1-10)

- 불면증 (1-10)

*스코래드 계산 = (정도기준/5) + (강도기준/7) + 주관적기준

분류	0주	1주	2주	3주	4주
제조예 3A	63.9	47.6	30.3	21.6	20.7
	0%	25.5%	52.58%	66.20%	67.6%
제조예 3B	60.2	45.2	29.7	22.8	20.6
	0%	24.9%	50.66%	62.12%	65.78%
제조예 3C	67.6	36.7	20.1	14.5	11.3
	0%	45.7%	70.3%	78.6%	83.3%
제조예 3D	65.7	33.8	18.8	12.9	9.7
	0%	48.6%	71.4%	80.4%	85.2%
비교예 1	57.2	46.6	32.2	19.4	10.4
	0%	18.6%	30.9%	39.7%	46.2%
비교예 2	66.2	49.3	43.8	37.2	35.3
	0%	25.53%	33.84%	43.81%	46.68%

표 6에서 알 수 있는 바와 같이, 제조예 3A 내지 제조예 3D에서 제조된 애기수영 추출물을 함유하는 처방예는 아토피 피부 개선효과가 뚜렷이 나타남을 알 수 있으며, 비교예 1 및 비교예 2에 비해 매우 우수하다는 것을 확인할 수 있다. 특히, 4주 후의 결과를 보면 65% 이상 개선 효과가 있는 것으로 나타났으며, 특히 대황 및 애기수영 추출물을 함유하는 처방예3C는 83% 정도의 우수한 개선 효과를 나타내고 있다. 아토피 피부의 개선율을 도식화하여 도 5에 표시하였다. 또한 제조예 3C의 사용 전후에 대한 임상적 결과 사진을 도 6에 표시하였다.

한편, 보호자가 느끼는 아토피 피부염 완화 효과를 살펴보기 위하여, 제조예 3A 내지 제조예 3D, 비교예 1 및 비교예 2의 화장료를 1개월 동안 사용한 후, 사용자의 부모가 하기 기준에 따라 피부염의 가려움증, 홍반 변화, 피부 건조증에 대한 만족도와 함께 전반적인 피부염 개선 정도 및 시험시료에 의한 부작용 여부 등을 평가하도록 하여 하기 표 7에 나타냈다.

(판정기준)

1	2	3	4	5
효과없음	약간있음	보통	우수	매우우수
매우불만	불만	보통	만족	매우만족

분류	피부가려움증	홍반 변화	피부 건조증	전반적 개선효과	부작용
제조예 3A	4.21	4.22	4.55	4.45	4.40
제조예 3B	4.00	4.31	4.52	4.36	4.24
제조예 3C	4.51	4.96	4.70	4.86	4.64
제조예 3D	4.81	4.95	4.60	4.96	4.87
비교예 1	2.55	3.27	3.65	3.22	3.97
비교예 2	3.33	2.26	3.03	2.82	3.56

상기 표 7에서 알수 있는 바와 같이, 본 발명에 따른 제조예 3A 내지 제조예 3D는 피시험자인 아토피성 피부를 갖는 소아에 대하여 전 평가항목에서 개선 효과가 있음을 확인할 수 있다.

상기 살펴본 바와 같이 본 발명은 항염, 항산화, 및 항균 작용을 동시에 가지며 아토피 피부에도 유용하게 이용될 수 있는 신규의 화장료 소재로서 애기수영(Rumex acetosella L.) 추출물을 제공한다.

특히, 본 발명은 항염, 항산화 및 항균 작용을 동시에 가짐으로서 피부를 청결, 미화하여 피부의 건강을 증진 또는 유지할 수 있는 애기수영(Rumex acetosella L.) 및 대황(Rheum coreanum) 혼합 추출물 함유 화장료 조성물로 이용될 수 있다.

또한, 본 발명은 또한 본 발명은 아토피 피부염에 관련된 황색 포도상구균 및 기타 세균에 대한 항균 효과 및 아토피 피부 개선 효과, 세포 증식 효과를 가지므로서 애기수영 및/도는 대황 추출물을 함유하는 아토피 피부질환 치료용 약학조성물로 이용될 수 있다.

Claims (14)

1. 애기수영(Rumex acetosella L.) 추출물을 함유하는 화장료 조성물.
2. 제 1 항에 있어서, 대황(Rheum coreanum) 추출물을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
3. 제 2 항에 있어서, 상기 혼합 추출물은 애기수영 및 대황이 1:1의 중량비로 혼합됨을 특징으로 하는 화장료 조성물.
4. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 애기수영 및 대황 추출물은 물, 탄소수 1~3의 무수 또는 함수 알코올, 에틸아세테이트 및 이들의 혼합 용매 중에서 선택된 것으로 추출됨을 특징으로 하는 화장료 조성물.
5. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 애기수영 및 대황 추출물은 추출공정의 수행 전 또는 후에 디에틸에테르 가용성분을 제거한 다음 추출된 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
6. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 화장료 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 맛사지크림, 에센스 및 팩 중에서 선택되는 것으로 제형화 된 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
7. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 화장료 조성물은 항균, 항산화 및 항염증 작용을 가짐을 특징으로 하는 화장료 조성물.
8. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 화장료 조성물은 아토피 피부에 이용됨을 특징으로 하는 화장료 조성물.
9. 애기수영(Rumex acetosella L.) 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피성 피부질환 치료용 약학조성물.
10. 제 9 항에 있어서, 유효성분으로 대황(Rheum coreanum) 추출물을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 아토피성 피부질환 치료용 약학조성물.
11. 제 10 항에 있어서, 상기 혼합 추출물은 애기수영 및 대황이 1:1의 중량비로 혼합됨을 특징으로 하는 아토피성 피부질환 치료용 약학조성물.
12. 애기수영(Rumex acetosella L.) 추출물을 유효성분으로 함유하는 항균제.
13. 제 12 항에 있어서, 유효성분으로 대황(Rheum coreanum) 추출물을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 항균제.
14. 제 13 항에 있어서, 상기 혼합 추출물은 애기수영 및 대황이 1:1의 중량비로 혼합됨을 특징으로 하는 항균제.

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