KR20060067406A - 천궁 추출물을 포함하는 항염증제 - Google Patents

Abstract

본 발명은 천궁 추출물을 포함하는 항염증제에 관한 것이다. 특히 본 발명은 현저한 항염증 효과를 가지며 독성이 없는 안전한 천궁 추출물에 관한 것으로, 상기 천궁 추출물은 염증성 질환 특히 류마티스 관절염 치료제로 유용하게 사용할 수 있다.

천궁, 항염증

Description

천궁 추출물을 포함하는 항염증제{ANTI-INFLAMMATORY AGENT CONTAINING EXTRACT FROM CNIDII RHIZIMA}

도 1 및 도 2는 천궁 추출물의 항염증 효과를 나타낸 것이다.

[발명이 속하는 기술분야]

본 발명은 천궁 추출물을 포함하는 항염증제에 관한 것으로, 보다 상세하게는 항염증 효과가 우수하고 독성이 없는 안전한 항염증제에 관한 것이다.

[종래기술]

관절염은 관절에 어떤 원인이든 염증성 변화가 생기는 것을 지칭하는 질환으로, 관절염은 크게 류마티스 관절염과 퇴행성 관절염으로 나눌 수 있다.

류마티스 관절염(rheumatoid arthritis)은 만성 전신성 염증질환으로, 대칭성, 다발성의 관절염과 이에 따른 관절의 손상 및 변형이 발생되며 자가 면역질환의 일종으로 관절의 활막에 생기는 이유없는 만성염증이다.

류마티스 관절염의 유병율은 성인 인구의 대략 1% 정도에 해당하며 발생 연령은 30대에서 40대에 많이 발생한다. 남녀 모두에서 발생하고 남자 보다 여자가 3배 정도 많이 발생하는 것으로 조사되고 있다. 이의 발병원인은 아직 확실하게 밝혀져 있지 않지만, 일부 밝혀진 바에 의하면 자가면역 질환으로써 인체백혈구항원( HLA ; human leukocyte antigen) 유전자와 연관성이 있으며 특히 HLA유전자중 DR4 유전자가 류마티스 관절염의 발병과 가장 관련이 있는 것으로 알려져 있다.

류마티스 관절염에 대한 보편적인 치료방법은, 비스테로이드성 소염제 및 항류마티스 약제 등을 사용한다. 상기한 약물은 통증을 완화하고 염증을 억제하여 관절기능 소실을 지연하는 효과를 나타내고 있으나, 여러 장기의 기능저하, 우울증, 세균감염 등의 심각한 부작용이 발생할 수 있어, 문제점들이 제기되고 있다. 따라서 부작용이 적고 안전성이 높은 효과적인 류마티스 관절염 치료제의 지속적인 개발이 요구되고 있다.

상기 종래기술의 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 본 발명은 항염증 효과가 우수하며 안전성이 확보된 천궁 추출물을 포함하는 항염증제를 제공하는 목적으로 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 천궁 추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증제를 제공한다.

이하 본 발명을 상세하게 설명한다.

본 발명자들은 인체에 안전하고 부작용을 최소화할 수 있는 항염증제를 연구하던 중, 천궁 추출물이 탁월한 항염 효과가 있으며 특히 만성자가면역질환인 류 마티스 관절염의 치료에 효과적임을 확인하여, 이를 토대로 본 발명을 완성하였다.

천궁(Cnidium officinale)은 미나리과(Umbelliferae)에 속하는 다년생 초본으로, 한약재로 오랜기간 사용되면서 인체 안전성이 입증된 약재이다.

천궁 추출물은 통상의 식물 추출물의 제조방법에 따라 제조된 것일 수 있다. 즉, 천궁의 일부 또는 전체를 물 또는 유기용매로 추출 및/또는 분획하여 추출물을 제조할 수 있으며, 예컨대 천궁의 잎, 가지, 뿌리, 열매, 줄기, 꽃, 껍질 등이나 이의 분쇄물에 용매를 가한 후 추출물을 수득하는 방법이다. 상기 용매는 물, 탄소수 1 내지 5의 저가 알콜 또는 알콜희석수일 수 있으며, 상기 저가 알콜은 에탄올, 메탄올, 부탄올, 프로판올 및 이소프로판올 일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 알콜희석수는 알콜을 50 내지 99 부피 %로 물에 희석한 것일 수 있다. 또한 상기 용매로 추출한 추출물은 이후, 헥산, 메틸렌클로라이드, 아세톤, 에틸아세테이트, 탄소수 1 내지 5의 저가 알콜, 클로로포름 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 용매로 분획과정을 더욱 실시할 수 있다. 상기 분획시 용매는 1종이상 사용할 수 있으며, 용매의 극성에 따라 순차적으로 사용하여 각 용매 추출물을 제조할 수 있다. 추출물 제조온도는 4 내지 120 ℃일 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 추출시간은 특별히 한정되지는 않으나 10분 내지 30일일 수 있으며, 통상의 추출기기, 초음파분쇄 추출기 또는 분획기를 이용할 수 있다. 제조된 추출물은 이후 감압 여과 또는/및 동결건조하여 용매를 제거할 수 있다.

일예로, 천궁 추출물은 근경(뿌리줄기), 잎 또는 열매 100 g 당 메탄올 또는 물 0.1 내지 5 L를 가하여 추출하여 조추출물을 제조한다. 추후 상기 조추출물 에 유기용매(헥산, 메틸렌클로라이드, 아세톤, 에틸아세테이트, 탄소수 1 내지 5의 저가 알콜 또는 클로로포름) 및 물이 1:1 부피 비율로 혼합된 유기용매를 가하여 각 유기용매별 분획물을 제조한다. 상기 유기용매를 이용한 분획시, 추출대상물에 대하여 용매는 1: 0.1 내지 10 부피비로 가할 수 있다.

본 발명의 천궁 추출물들 중, 특히 천궁 물 추출물, 메탄올 추출물 및 에틸아세테이트 추출물은 염증 유발 물질에 의한 부종 형성을 현저히 억제할 뿐만 아니라, 천궁 에틸아세테이트 추출물은 류마티스 관절염 유발 물질에 의한 관절염에 대하여 우수한 치료 효과를 나타낸다.

본 발명은 천궁 추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증제를 제공한다. 상기 천궁 추출물은 바람직하기로는 천궁 물 추출물, 천궁 메탄올 추출물, 천궁 에틸아세테이트 추출물 또는 이들의 혼합물이다. 상기 혼합물의 경우 각 추출물의 혼합비율은 0.1 내지 1 중량비일 수 있다.

본 발명의 항염증제는, 상기 유효성분을 단독으로 포함할 수 있으며, 이외 제형, 사용방법 및 사용목적에 따라 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제를 더욱 포함할 수 있다. 혼합물로 제공되는 경우, 상기 유효성분은 항염증제에 0.1 내지 99.9 중량%로 포함될 수 있으나, 통상 0.01 내지 70 중량%의 함량으로 포함되는 것이 바람직하다. 항염제는 류마티스 관절염, 루푸스, 다발성 경화증과 같은 각종 만성 염증 질환, 패혈증, 쇽, 장기이식의 거부반응과 같은 각종 급성 염증 질환, 안과질환, 기관지염, 또는 염증성 장질환의 예방 및 치료의 목적으로 사용가능하다.

상기 담체 또는 부형제의 일예로는 물, 덱스트린, 칼슘카보네이드, 락토스, 프로필렌글리콜, 리퀴드 파라핀, 생리식염수, 덱스트로스, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자이리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 폴리비닐피롤리돈, 메틸하이드록시벤조에이트, 폴리에틸 글리세롤, 카복실 메틸 셀룰로즈,프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유가 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 담체 또는 부형제는 2종이상 사용될 수 있다. 또한 항염증제를 약제화하는 경우, 통상의 충진제, 증량제, 결합제, 붕해제, 계면활성제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 또는 방부제 등을 더욱 포함할 수 있다.

또한 본 발명의 항염증제는, 천궁 추출물 이외에 공지의 항염활성을 갖는 화합물 또는 식물 추출물을 더욱 포함할 수 있으며, 천궁 추출물 100 중량부에 대하여 각각 5 내지 200 중량부로 포함될 수 있다.

항염증제의 제형은 사용방법에 따라 바람직한 형태일 수 있으며, 특히 포유동물에 투여된 후 활성 성분의 신속, 지속 또는 지연된 방출을 제공할 수 있도록 당업계에 공지된 방법을 채택하여 제형화할 수 있다. 구체적인 제형의 예로는 산제(POWDERS), 과립제(GRANULES), 정제(TABLETS), 유동 엑스제(FLUIDEXTRACTS), 유제 및 현탁제(EMULSIONS AND SUSPESIONS), 캅셀제(CAPSULES), 환제(PILLS), 트로키제(troche), 액제(LIQUIDS AND SOLUTIONS) 및 시럽제(SYRUPS) 등이 있다.

본 발명에 따른 항염증제는 경구 또는 비경구로 사용될 수 있으며, 예컨대 진피내, 근육내, 복막내, 정맥내, 피하내, 코안, 경막외 및 구강경로를 통하여 사 용될 수 있으며, 이의 투여량은, 투여방법, 복용자의 연령, 성별 및 체중, 및 질환의 중증도 등을 고려하여 결정하는 것이 좋다. 일예로, 본 발명의 항염증제는 유효성분을 기준으로 하였을 때 1 회 성인 체중 1 ㎏을 기준으로 하여 0.1 내지 500 ㎎의 용량으로 1회 이상 투여가능하다. 그러나 상기한 투여량은 예시하기 위한 일예에 불과하며 상기 범위에 한정되지는 않는다.

본 발명의 항염증제는 약제 또는 화장료제로 사용될 수 있으며, 항염증제는 약제 또는 화장료 조성물에 0.001 내지 50 중량%으로 포함될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 화장료 조성물은 기초화장품, 메이크업 화장품, 바디 화장품, 두발용 화장품, 두피용 화장품, 면도용 화장품 또는 구강용 화장품의 용도로 제공될 수 있다.

이하 본 발명의 실시예를 기재한다. 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 본 발명이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.

실시예 1: 천궁 메탄올 추출물 제조

그늘에서 충분히 건조시킨 천궁 1 ㎏에 메탄올 용매 10 L를 가하고, 50 ℃에서 3 시간 동안 환류시켜 천궁 추출물의 유효성분을 추출하였다. 고형분은 여과기로 여과하여 제거하고, 여액은 회전 증발기로 농축시킨 다음 동결 건조하여 천궁 메탄올 추출물 150 g을 수득하였다.

실시예 2: 천궁 물 추출물 제조

실시예 1과 동일하게 실시하였으며, 메탄올 대신 물을 사용하였다. 최종 천궁 물 추출물 250 g을 수득하였다.

실시예 3: 천궁 에틸아세테이트 추출물 제조

실시예 1과 동일한 방법으로 천궁 메탄올 추출물을 제조하였고, 이에 물 5 L와 에틸아세테이트 5 L를 넣어 용해시킨 후 에틸 아세테이트 층을 분리 및 건조하여 에틸아세테이트 추출물 40 g을 수득하였다. 이하 이를 KL2901로 표기한다.

실험예: 항염증 효과 검증

1. 항염증 효과

Adjuvant-induced arthritis 실험동물 모델을 이용하여 항염 효과를 검증하였다. 상기 Adjuvant-induced arthritis 실험동물 모델은 만성염증의 실험모델로 널리 이용되고 있다.

실험동물로 7주령의 수컷 Sprague-Dawley(SD) 쥐를 ㈜샘타코로 부터 공급받아, 본 연구소 동물실에서 1주일간 순화시켜 사용하였다. 염증유발물질로 미코박테리움 부티리컴(Mycobacterium Butyricum, Difco, 0640-33-7)을 프레운드스 불완전체 보강체(Freund`s incomplete adjuvant, Difco 0639-60)에 2 mg/ml로 녹인 후 120 ℃에서 20분간 멸균한 것을 사용하였다. 양성 대조구로 인도메타신(indomethacin)을 사용하였으며, 양성 대조구와 실시예 1 내지 3의 추출물 각각은 50 % 폴리에틸렌글리콜 400 수용액에 현탁하여 사용하였다.

흰쥐 6마리를 1군으로 하여, 오른쪽 뒷다리를 용적법으로 기본값을 측정하고, 양성 대구조 현탁액과 실시예 1 내지 3의 천궁 추출물 현탁액을 각각 경구투여용 존대를 이용하여 경구투여하였다. 약물투여 1시간 후, 염증유발물질을 실험동물 오른쪽 뒷다리 관절에 100 ug/50 ul로 투여하여 염증을 유발하였다. 이후 실험 동물 오른쪽 뒷다리 관절의 부종정도를 시간별(1h, 4h 또는 24h)로 용적법으로 측정하고, 하기 계산식 1을 통하여 부종 율(%, welling in footpad volume)을 구하였다. 또한 계산식 2를 통하여 항염증 효과를 환산하였다.

(계산식 1)

부종율(%) = [(Y-X)/X x 100]

X는 염증유발물질 주입 이전의 뒷다리 관절 부피이고,

Y는 염증유발물질 주입 이후의 뒷다리 관절 부피이다.

(계산식 2)

항염증 효과(%) = [(Y-X)/X x 100]

X는 무처리구의 부종 증가율이고

Y는 시료 또는 양성 대조구에 의한 부종 증가율이다.

그 결과는 하기 표 1 및 도 1에 나타내었다.

(표 1)

시료	부종율
	0h	1h	4h	24h
무처리구	0%	51%	113%	199%
양성 대조구, 5 mg/kg	0%	16%	48%	75%
실시예 1(천궁 메탄올 추출물), 100 mg/kg	0%	28%	102%	181%
실시예 2(천궁 물 추출물), 100 mg/kg	0%	21%	98%	169%
실시예 3(천궁 에틸아세테이트 추출물), 100 mg/kg	0%	11%	65%	142%

표 1 및 도 1에 나타난 바와 같이, 실시예 1 내지 3의 천궁 추출물은 염증유발물질에 의한 염증 발생을 억제하며, 특히 천궁 에틸아세테이트 추출물의 항염증 효과가 우수하였다.

2. 항 류마티스 관절염 효과

타입 II 콜라겐-유발성 관절염(Type II collagen-Induced Arthritis) 모델을 이용하여 실시예 3의 천궁 에틸아세테이트 추출물의 류마티스 관절염 치료 효과를 측정하였다. 타입 II 콜라겐-유발성 관절염 모델은 류마티스 관절염의 동물모델로 일반적으로 사용하는 모델이다.

실험동물은 10주령의 암컷 Dark Agouti(DA) 쥐(몸무게 130 - 150 g)을 일본의 SLC, Inc.(Shizuoka)사로부터 공급받고, 연구소 동물실에서 1주일간 순화시켜 사용하였다. 관절염 유발물질로, 소의 기관염 연골 타입 II 콜라겐(Bovine Tracheal Cartilage TypeII collagen, Sigma-c1188)을 0.01 M 아세테이트에 2 mg/ml로 현탁하여 하룻밤 방치한 후 프레운드스 불완전체 보강제(Difco 0639-60)를 동일 양으로 혼합하여 사용하였다. 같은 양으로 섞어 사용하였다. 양성 대조구로 인도메타신(indomethacin)을 사용하였으며, 양성 대조구와 실시예 3의 천궁 에틸아세테이트 추출물 각각을 50 % 폴리에틸렌글리콜 400 수용액에 현탁하여 사용하였다.

DA 쥐 6마리를 1군으로 하여, 실험동물의 꼬리의 기저부위(basal site)에 류마티스 관절염 유발물질 0.1 ml을 피하(intrademal)로 주사하여 자가면역질환인 류마티스 관절염을 유발시켰다. 이후 쥐의 양쪽 뒷다리를 용적법으로 기본값을 측정하고, 감작시킨 날부터 매일 양성 대조구 현탁액과 천궁 에틸아세테이트 추출물 현탁액을 각각 경구투여하였다. 감작시키기 전의 관절 두께를 기준으로 하여 늘어나는 부피를 부종율%로 계산하였다.

그 결과는 하기 표 2 및 도 2에 나타낸다.

(표 2)

시료	부종율, %
	0 일	7일	14일	17일	21일	24일	28일	30일	35일
무처리구(50% 폴리에틸렌글리콜 400 처리), 100 ul/쥐	0%	2%	0%	4%	3%	5%	3%	9%	-2%
음성 대조구(류마티스 관절염 유발물질 처리), 100 ug/쥐	-1%	-2%	2%	8%	38%	114%	93%	94%	82%
양성 대조구, 3 mg/kg/day	1%	-1%	2%	8%	53%	94%	79%	66%	31%
실시예 3(천궁 에틸아세테이트 추출물), 100 mg/kg/day	1%	-1%	2%	6%	42%	98%	82%	80%	75%

표 2 및 도 2에 나타난 바와 같이, 실시예 3의 에틸아세테이트 추출물은 염증을 효과적으로 억제한다. 따라서, 천궁 추출물은 류마티스 관절염 치료제로 사용가능하다.

이상 살펴본 바와 같이, 본 발명의 천궁 추출물은 현저한 항염증 효과를 갖는 안전한 시료로, 염증성 질환 특히 류마티스 관절염 치료제로 유용하게 사용할 수 있다.

Claims (4)

1. 천궁 추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증제.
2. 제 1항에 있어서, 상기 천궁 추출물은 천궁을 물 또는 탄소수 1 내지 5의 알콜로 추출한 것인 항염증제.
3. 제 2항에 있어서, 상기 천궁 추출물은 물 또는 탄소수 1 내지 5의 알콜로 추출한 추출물을 에틸아세테이트, 헥산, 아세톤, 메틸렌클로라이드, 부탄올, 클로로포름 및 이들의 희석수로 이루어진 군으로부터 1종이상 선택한 용매로 분획한 것인 항염증제.
4. 제 1항 내지 제 3항중 어느 한항에 있어서, 상기 항염증제는 류마티스 관절염에 사용되는 것인 항염증제.

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