KR20060025549A

KR20060025549A - 중증급성호흡기증후군(ｓａｒｓ)의 치료 또는 예방을 위한글리시르히진 및 그 유도체

Info

Publication number: KR20060025549A
Application number: KR1020057023445A
Authority: KR
Inventors: 진드리히 치나틀; 한스 빌헬름 되르; 제롤드 호버; 마틴 미카엘리스
Original assignee: 조한 울프강 괴테 유니버시티
Priority date: 2003-06-06
Filing date: 2004-06-07
Publication date: 2006-03-21
Also published as: CA2527989A1; EP1660059A1; CN1838947A; US20070099855A1; EP1719515A2; EP1719515A3; WO2004108122A1; JP2006527185A

Abstract

본 발명은 바이러스 감염, 특히 중증급성호흡기증후군(SARS)에서의 바이러스 감염을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키는 방법을 제공한다. 보다 구체적으로는, 본 발명은 글리시르히진 및/또는 그 유도체를 투여함으로써 SARS-관련 코로나 바이러스 또는 하나 이상의 그 증상을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 글리시르히진 또는 그 유도체를 글리시르히진 또는 그 유도체 이외의 다른 예방약 또는 치료약과 조합하여 투여함으로써, SARS-관련 코로나 바이러스 또는 하나 이상의 그 증상을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키는 방법을 제공한다.

Description

중증급성호흡기증후군(ＳＡＲＳ)의 치료 또는 예방을 위한 글리시르히진 및 그 유도체{Glycyrrhizin or derivatives thereof for treating or preventing severe acute respiratory syndrome(SARS)}

관련 출원

본 출원은 전체가 참고로 본 명세서에 통합된 2003년 6월 6일 출원된 미국 가출원 60/476,908의 우선권을 주장한다.

1. 서론

본 발명은 호흡기 감염, 특히 중증급성호흡기증후군(SARS)을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키는 방법을 제공한다. 보다 구체적으로, 본 발명은 글리시르히진 및/또는 그 유도체를 투여함으로써 SARS-관련 코로나 바이러스 또는 하나 이상의 그 질환을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 글리시르히진 및/또는 그 유도체를 글리시르히진 및/또는 그 유도체 이외의 다른 예방약 또는 치료약과 함께 복합투여함으로써 SARS-관련 코로나 바이러스 또는 하나 이상의 그 증상을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키는 방법을 제공한다.

2. 발명의 배경

2.1. 중증급성호흡기증후군(SARS)

중증급성호흡기증후군(SARS) 환자에게서 새로운 코로나 바이러스가 발견되었으며, SARS의 유망한 원인인 것으로 규명되었다(SARS; Drosten et al., 2003, N Engl J Med 348: 1967-76). SARS는 가까운 접촉에 의해 전염성이 매우 높은 감염성 질환이다. SARS의 증상은 발열(> 38℃), 마른 기침, 숨참, 또는 호흡곤란 및 폐렴의 징후가 있는 가슴 X-선 촬영의 변화를 포함한다. 다른 증상으로는 두통, 근육강직, 식욕부진, 권태감, 정신혼란, 발진, 및 설사 등이 있다. 현재, SARS-관련 코로나 바이러스 감염에 대한 예방 또는 치료가 가능한 특정 치료법이 없다. SARS-관련 코로나 바이러스가 확산할 잠재력 및 SARS의 치사율을 고려해 볼 때, 예방을 위한 예방 및 치료, SARS-관련 코로나 바이러스 감염의 예방, 치료, 및/또는 경감을 위한 예방 및 치료 요법이 필요하다.

2.2. 글리시르히진

감초(Glycyhrrhizza glabra)에서 발견되는 가장 유망한 화합물인 글리시르히진은 트리테르펜 글리코시드이다. Glycyhrrhizza glabra는 터키, 이라크, 스페인, 그리스, 및 중국 북부가 원산지이다. Glycyhrrhizza glabra 및 글리시르히진은 수천년간 식품의 감미제 또는 방향제로, 그리고 다양한 건강 문제의 치료를 위해 사용되어 왔다.

글리시르히진의 구조는 트리테르펜 부분(글리시르헤틴산) 및 두 개의 이듀론산 잔기(iduronic acid)를 포괄한다. 소화성 궤양(글리시르히진은 효소 15-히드록시-프로스타글란딘 디하이드로게나제 및 델타-13-프로스타글란딘 리덕타제를 억제한다); 감기 및 다른 바이러스 감염(글리시르히진은 인터페론 생성을 촉진시키며 거담/진해 효과를 갖는 것으로 보고되었다); 미생물 및 기생충 감염(글리시르히진은 면역 시스템을 촉진시킬 수 있다); 암(이 또한 면역계의 작용과 관련 가능성이 있다)과 같은 질환을 치료하는데 오랫동안 사용되어 왔다. 예를 들어, Wendell,1998, U.S. Pharmacist 23(4), Herbal Pharmacy: Locorice를 참조하면 알 수 있다. 글리시르히진은 코르티솔을 분해하는 효소를 억제하며; 이것은 신체에서 자연적으로 생산되는 코르티솔의 효과를 연장시켜, 글루코코르티코이드에 의해 소듐 저류, 수분 저류, 및 칼륨 소실뿐만 아니라 항염증 효과 또한 유발한다.

글리시르히진의 다른 명칭은 글리시르히진산, 글리시르히즈산, 글리시르헤틴산 글리코시드, 및 (3-베타,20-베타)-20-카르복시-11-옥소-30-노롤린-12-엔-3-일 2-O-베타-D-글루코피라뉴로노실-알파-D-글루코피라노시듀론산을 포함한다.

본 출원의 섹션 2 또는 다른 섹션의 모든 참고문헌의 인용은 그러한 참고문헌이 본 출원 이전의 기술이라는 것을 인정하는 것은 아니다.

3. 발명의 요약

본 발명은 바이러스 감염(예: 코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염)을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키는 글리시르히진에 기초한 치료법을 제공한다. 구체적으로, 본 발명은 글리시르히진에 의해 SARS-관련 코로나 바이러스 감염 또는 하나 이상의 그 증상을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키는 방법을 제공한다. 보다 구체적으로는, 본 발명은 치료가 필요한 환자에게 예방학적으로 또는 치료학적으로 유효한 양의 글리시르히진 또는 그 유도체, 및 선택적으로 예방학적으로 또는 치료학적으로 유효한 양의 글리시르히진 또는 그 유도체 이외의 예방약 또는 치료약를 투여하는 것을 포함하는, 바이러스 감염(예: 코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염) 또는 하나 이상의 그 증상을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키기 위한 예방 및 치료 프로토콜을 제공한다. 바이러스 감염(예: 코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염) 또는 그 증상을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키는데 사용될 수 있는 글리시르히진 또는 그 유도체 이외의 예방약 또는 치료약의 예로는 항바이러스제, 항생제, 면역조절제, 항염증제, 및 바이러스 항원(예: SARS-관련 코로나 바이러스 항원)에 면역특이적으로 결합하는 항체 등이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

특정 구현예에서, 본 발명은 치료가 필요한 환자(바람직하게는 인간)에게 예방학적으로 또는 치료학적으로 유효한 양의 글리시르히진 또는 그 유도체를 투여하는 것을 포함하는, SARS-관련 코로나 바이러스 감염을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키는 방법을 제공한다. 또 다른 구현예에서, 본 발명은 치료가 필요한 환자(바람직하게는 인간)에게 예방학적으로 또는 치료학적으로 유효한 양의 글리시르히진 또는 그 유도체 및 예방학적으로 또는 치료학적으로 유효한 양의 글리시르히진 또는 그 유도체 이외의 예방약 또는 치료약를 투여하는 것을 포함하는, SARS-관련 코로나 바이러스 감염을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시는 방법을 제공한다. 이러한 구현예에 따르면, 글리시르히진 또는 그 유도체는 바람직하게는 정제된 것이다.

본 발명은 바이러스 감염(예: 코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염) 또는 하나 이상의 그 증상을 예방, 치료, 관리, 및/또는 경감시키는데 사용하기 위한 조성물을 포함한다. 특정 구현예에서, 조성물은 글리시르히진 또는 그 유도체를 포함한다. 다른 구현예에서, 조성물은 화학식 I의 화합물(하기 참조)을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 조성물은 글리시르히진 또는 그 유도체, 및 글리시르히진 또는 그 유도체 이외의 하나 이상의 예방약 또는 치료약를 포함한다. 다른 구현예에서, 조성물은 화학식 I의 화합물(하기 참조) 및 하나 이상의 예방약 또는 치료약를 포함한다. 이러한 구현예에 따르면, 조성물은 추가로 담체를 더 포함할 수 있다. 예방약 또는 치료약의 비제한적 예로는 면역조절제, 항염증제, 항바이러스제, 항생제, 및 SARS 관련 코로나 바이러스 항원에 면역특이적으로 결합하는 항체, 단백질, 폴리펩티드, 또는 펩티드 등이 있다.

특정 구현예에서, 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 담체, 유효한 양의 글리시르히진 또는 그 유도체, 및 선택적으로 유효한 양의 글리시르히진 또는 그 유도체 이외의 하나 이상의 예방약 또는 치료약를 포함한다. 이러한 구현예에 따르면, 약제학적 조성물은 바람직하게는 멸균상태이며 원하는 투여 방법에 적절한 형태이다.

본 발명은 바이러스 감염(예: 코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염) 또는 하나 이상의 그 증상을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키기 위한, 유효한 양의 글리시르히진 또는 그 유도체를 단독으로 또는 글리시르히진 또는 그 유도체 이외의 유효한 양의 하나 이상의 치료제를 치료가 필요한 환자에게 투여하기 위한 프로토콜을 제공한다. 본 발명의 복합 치료법의 치료(예: 예방약 또는 치료약)는 환자에게 동시에 또는 순서대로 이루어질 수 있다. 본 발명의 복합 치료법의 치료(예: 예방약 또는 치료약)는 또한 주기적으로 이루어질 수 있다. 주기 치료법은 소정의 기간동안 제 1 치료(예: 제 1 예방약 또는 치료약)를 수행한 다음, 소정의 기간동안 제 2 치료(예: 제 1 예방약 또는 치료약)을 수행하고, 이러한 순서적인 치료, 즉 주기를 반복하는 것을 포함하며, 이는 치료(예: 예방약 또는 치료약) 중 하나의 내성의 생성을 감소시키고, 치료(예: 예방약 또는 치료약) 중 하나의 부작용의 발생을 막거나 감소시키고, 및/또는 치료의 효능(efficacy)을 개선시키기 위한 것이다.

본 발명의 복합 치료법의 치료(예: 예방약 또는 치료약)는 대상에게 동시에 투여할 수 있다. 용어 "동시에"는 치료(예: 예방약 또는 치료약)의 투여를 정확히 동시에 투여하는 것으로 한정되는 것이라기 보다는, 글리시르히진 또는 그 유도체가 다른 치료와 함께 작용하여 다른 방식으로 투여할 경우보다 효과의 증진을 제공할 수 있도록 글리시르히진 또는 그 유도체 그리고 또 다른 치료(들)를 대상에게 순서대로 그리고 일정시간 간격 내에 투여하는 것을 의미한다. 예를 들어, 각각의 치료는 동시에 또는 서로 다른 시점에 임의의 순서에 따라 순서대로 대상에게 투여할 수 있다; 그러나, 동시에 투여할 경우, 그 치료들은 바람직한 치료 효과 또는 예방효과가 나타날 수 있도록 시간상으로 충분히 가까운 시간 이내에 투여되어야 한다. 각각의 치료는 임의의 적절한 형태로 임의의 적절한 경로에 의해 대상에게 별도로 투여할 수 있다. 다양한 구현예에서, 치료(예: 예방약 또는 치료약)는 15 분 미만, 30 분 미만, 1 시간 미만 간격으로 , 약 1 시간 간격으로, 약 1 시간 내지 약 2 시간 간격으로, 약 2 시간 내지 3 시간 간격으로, 약 3 시간 내지 4 시간 간격으로, 약 4 시간 내지 약 5 시간 간격으로, 약 5 시간 내지 약 6 시간 간격으로, 약 6 시간 내지 약 7 시간 간격으로, 약 7 시간 내지 약 8 시간 간격으로, 약 8 시간 내지 약 9 시간 간격으로, 약 9 시간 내지 약 10 시간 간격으로, 약 10 시간 내지 약 11 시간 간격으로, 약 11 시간 내지 약 12 시간 간격으로, 24 시간 간격으로, 48 시간 간격으로, 72 시간 간격으로, 또는 1 주 간격으로 투여한다. 바람직한 구현예에서, 두 개 이상의 치료(예: 예방약 또는 치료약)는 동일한 환자 방문 내에 투여한다.

복합치료법의 예방약 또는 치료약는 동일한 약제학적 조성물로서 대상에게 투여할 수 있다. 택일적으로는, 복합치료법의 예방약 또는 치료약은 서로 분리된 약제학적 조성물로서 환자에게 동시에 투여될 수 있다. 예방약 또는 치료약은 대상에게 동일하거나 서로 다른 투여경로를 통해 투여할 수 있다.

본 발명의 예방약 또는 치료약(예: 글리시르히진 또는 그 유도체), 조성물, 또는 복합치료법는, 주사 투여(예: 피내, 근육내, 복강내, 정맥내, 및 피하 투여), 경막외 투여, 국소 투여, 폐 투여, 및 점막 투여(예: 경비 및 경구 투여)를 포함하지만, 이에 한정되지 않는 당업자에게 잘 알려져 있는 임의의 투여방법으로 투여할 수 있다. 특정 구현예에서, 예방약 또는 치료약, 또는 약제학적 조성물은 피하, 근육내, 국소, 또는 정맥내로 투여한다. 바람직한 구현예에서, 예방약 또는 치료약, 또는 약제학적 조성물은 경구로, 경비로, 또는 폐 투여에 의해 대상에게 투여할 수 있다. 예방약 또는 치료약, 또는 약제학적 조성물은 전신으로 또는 국소로 투여할 수 있다.

일 구현예에서, 본 발명의 예방약 또는 치료약(예: 글리시르히진 또는 그 유도체), 조성물, 또는 복합치료법는 환자의 치료가 필요한 부위에 국소적으로 투여한다; 이러한 투여는 예를 들어, 국소 주입, 주사, 또는 임플란트에 의해 이루어질 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며, 상기 임플란트는 시알라스틱 멤브레인(sialastic membranes)과 같은 막 또는 섬유를 포함한 다공성, 비다공성, 또는 젤라틴 물질로 이루어질 수 있다. 또 다른 구현예에서, 예방약 또는 치료약(예: 글리시르히진 또는 그 유도체), 조성물, 또는 본 발명의 복합치료법는 대상에게 소포(vesicle)의 형태로 투여한다. 또 다른 구현예에서, 본 발명의 예방약 또는 치료약(예: 글리시르히진 또는 그 유도체), 조성물, 또는 복합치료법은 제어 방출 시스템 또는 서방성 시스템으로 투여한다.

본 발명은 세포를 글리시르히진 또는 그 유도체와 접촉시키는 단계를 포함하는, 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)을 억제하거나 감소시키는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)의 하나 이상의 단계를 억제시키거나 감소시키는 방법을 제공한다. 바이러스 감염의 그러한 단계는 세포로의 침입, 바이러스의 복제, 바이러스 유전자 생성물의 발현, 바이러스 입자의 생성, 및 바이러스 입자의 방출을 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명은 또한 세포를 글리시르히진 또는 그 유도체와 접촉시키는 단계를 포함하는, 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)의 복제를 억제하거나 감소시키는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 세포를 글리시르히진 또는 그 유도체와 접촉시키는 것을 포함하는, 바이러스 입자(예:코로나 바이러스 입자, C 형 간염 바이러스 입자, 인플루엔자 바이러스 입자, 및 West Nile 바이러스 입자, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 입자)의 생성 및/또는 방출을 억제하거나 감소시키는 방법을 제공한다.

특정 구현예에서, 글리시르히진 또는 그 유도체는 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)을 본 명세서에 기재되어 있거나 당업자에게 잘 알려져 있는 in vitro 및/또는 in vivo 어세이에서 PBS와 같은 대조군에 비해서 25% 이상, 바람직하게는 30% 이상, 35% 이상, 40% 이상, 50% 이상, 55% 이상, 60% 이상, 65% 이상, 70% 이상, 75% 이상, 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 또는 98% 이상을 억제하거나 감소시킨다. 또 다른 구현예에서, 글리시르히진 또는 그 유도체는 바이러스(예:코로나 바이러스, C 형 간염 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 및 West Nile 바이러스, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스)의 복제를 본 명세서에 기재되어 있거나 당업자에게 잘 알려져 있는 in vitro 및/또는 in vivo 어세이에서 PBS와 같은 대조군에 비해서 25% 이상, 바람직하게는 30% 이상, 35% 이상, 40% 이상, 50% 이상, 55% 이상, 60% 이상, 65% 이상, 70% 이상, 75% 이상, 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 98% 이상을 억제하거나 감소시킨다. 또 다른 구현예에서, 글리시르히진 또는 그 유도체는 바이러스 입자(예:코로나 바이러스 입자, C 형 간염 바이러스 입자, 인플루엔자 바이러스 입자, 및 West Nile 바이러스 입자, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 입자)의 생성 및/또는 분비를 본 명세서에 기재되어 있거나 당업자에게 잘 알려져 있는 in vitro 및/또는 in vivo 어세이에서 PBS와 같은 대조군에 비해서 25% 이상, 바람직하게는 30% 이상, 35% 이상, 40% 이상, 50% 이상, 55% 이상, 60% 이상, 65% 이상, 70% 이상, 75% 이상, 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 또는 98% 이상을 억제하거나 감소시킨다.

본 발명은 또한 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염) 또는 그 증상을 예방, 치료, 관리, 또는 경감하는데 사용하기 위한, 용기 내에 예방약 또는 치료약(글리시르히진 또는 그 유도체) 를 포함하고, 선택적으로는 동일한 용기 또는 서로 다른 용기에 글리시르히진 또는 그 유도체 이외의 다른 예방약 또는 치료약를 포함하는 제품을 제공한다. 이러한 제품은 또한 사용설명서를 더 포함할 수 있다.

소정의 구현예에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 글리시르히진 유도체 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염을 제공한다:

상기 화학식에서, R₁, R₂, 및 R₃는 -N(H)R₄이며, 여기에서 R₄는 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)이며, 단 R₄는 티아졸, 우라실, 또는 하기 화학식이 아니다:

.

소정의 구현예에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염을 제공한다:

[화학식 I]

상기 화학식에서, R₁ 및 R₂ 중 하나는 하기 화학식을 가지며;

R₃ 및 나머지 R₁과 R₂는 각각 독립적으로 -OH; -OCH₃; -NH-NH₂; -NHCH(COOH)CH₂SCH₂C₆H₅; 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환); 아미노산; 펩티드; -N(H)R₄이며, 여기에서 R₄는 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)이다.

[화학식 I]

상기 화학식에서, R₁, R₂, 및 R₃ 중 하나는 아미노산 또는 펩티드이며, R₁, R₂, 및 R₃ 중 다른 두 개는 각각 독립적으로 -OH; -OCH₃; -NH-NH₂; -NHCH(COOH)CH₂SCH₂C₆H₅; 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환); -N(H)R₄이며, 여기에서 R₄는 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)이다.

소정의 구현예에서, 본 발명은 본 발명은 하기 화학식 I의 글리시르히진 유도체 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염을 제공한다:

[화학식 I]

상기 화학식에서, R₁, R₂, 및 R₃는 하기 화학식을 갖는다:

소정의 구현예에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 글리시르히진 유도체 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염을 포함한다:

[화학식 I]

상기 화학식에서, R₁, R₂, 및 R₃ 는 각각 독립적으로 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)이며, 단 R₁, R₂, 및 R₃ 모두 프롤린은 아니다.

화학식 I의 글리시르히진 유도체는 바이러스 감염, 예를 들어 SARS-관련 코로나 바이러스와 같은 코로나 바이러스 감염을 치료하거나 예방하는데 사용될 수 있다.

3.1. 용어 및 약어

부속적인: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "부속적인(adjunctive)" 및 "결합(conjunction)"은 "복합하여(in combination)" 또는 "조합하여 (combinatorial)"과 함께 혼용되어 사용된다.

항체: 본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "항체" 및 "항체들"은 모노클로날 항체, 다중특이적(multispecific) 항체, 인간 항체, 인간화 항체, 카멜화 항체(camelised antibody), 키메라 항체, 단일 체인 Fvs(scFv), 단일 체인 항체, 단일 도메인 항체, Fab 프래그먼트, F(ab) 프래그먼트, 디설피드-결합 Fvs(sdFv), 및 항이디오타입(항-Id) 항체, 및 상기 임의의 에피토프 결합 프래그먼트를 말한다. 특히, 항체는 면역 글로불린 분자 및 면역학적으로 활성이 있는 면역글로불린 분자 프래그먼트, 즉 항원결합부위를 함유하는 분자를 포함한다. 면역글로불린 분자는 임의의 종류(예: IgG, IgE, IgM, IgD, IgA, 및 IgY), 클래스(예: IgG₁, IgG₂, IgG₃, IgG₄, IgA₁, 및 IgA₂) 또는 서브클래스일 수 있다.

항바이러스 화합물: 본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "항바이러스 화합물" 및 "항바이러스제"는 혼용되어 사용될 수 있다.

유효한 양: 본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "유효한 양"은 바이러스 감염(예: 코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염) 또는 하나 이상의 그 증상의 심한 정도 및/또는 지속시간을 감소 또는 경감시키거나, 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)의 진전을 예방하거나, 바이러스 감염(예:코로나 바이 러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)과 관련된 하나 이상의 증상의 재발, 발전, 또는 개시를 예방하거나, 바이러스(예:코로나 바이러스, C 형 간염 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 및 West Nile 바이러스, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스)의 복제 또는 증식을 예방 또는 감소시키거나, 바이러스 입자(예:코로나 바이러스 감염 입자, C 형 간염 바이러스 입자, 인플루엔자 바이러스 입자, 및 West Nile 바이러스 입자, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 입자)의 생성 및/또는 분비를 예방 또는 감소시키거나, 또 다른 치료(예: 예방약 또는 치료약)의 예방 효과 또는 치료 효과를 증진시키거나 향상시키기에 충분한 치료(예: 예방약 또는 치료약)의 양을 말한다. 특정 구현예에서, 유효한 양의 치료약 또는 예방약은 바이러스의 다음 단계의 생명 주기, 즉 바이러스 입자의 세포와의 결합, 바이러스 유전자 정보의 세포로의 도입, 바이러스 단백질의 발현, 새로운 바이러스 입자의 생성, 및 세포로부터의 바이러스 입자의 분비중 하나 이상을 5% 이상, 바람직하게는 10% 이상, 15% 이상, 20% 이상, 25% 이상, 30% 이상, 35% 이상, 40% 이상, 45% 이상, 50% 이상, 55% 이상, 60% 이상, 65% 이상, 70% 이상, 75% 이상, 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 또는 100% 이상 감소시킨다. 또 다른 특정 구현예에서, 유효한 양의 예방약 또는 치료약은 바이러스의 복제, 증식, 또는 확산을 5% 이상, 바람직하게는 10% 이상, 15% 이상, 20% 이상, 25% 이상, 30% 이상, 35% 이상, 40% 이상, 45% 이상, 50% 이상, 55% 이상, 60% 이상, 65% 이상, 70% 이상, 75% 이상, 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 또는 100% 이상 감소시킨다. 글리시르히진의 유효한 양의 비제한적 예를 아래에 기재하였다.

노인: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "노인"은 65 세 이상, 바람직하게는 70 세 이상의 인간을 말한다.

아동: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "아동"은 24 월령 내지 18 세의 인간을 말한다.

유아: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "유아"는 24 월령 미만, 바람직하게는 16 월령 미만, 6 월령 미만, 3 월령 미만, 2 월령 미만, 또는 1 월령 미만을 말한다.

핵산 서열의 동정: 두 개의 핵산 서열의 %동일성을 결정하기 위해, 서열을 최적의 비교 목적을 위해 배열한다(예: 제 2 아미노산과 또는 핵산 서열과의 최적의 배열을 위해 갭(gap)을 제 1 아미노산 서열 또는 핵산 서열에 도입할 수 있다). 그런 다음, 해당 아미노산 지점 또는 뉴클레티드 지점에서의 뉴클레오티드들을 비교한다. 제 1 서열에서의 지점이 제 2 서열의 해당 지점과 동일한 뉴클레오티드일 경우, 그 지점에서 분자는 동일하다. 두 개의 서열 간의 %동일성은 서열에서 공유하는 동일한 지점의 수의 함수(즉, %동일성 = 동일한 겹치는 지점의 수/지점의 총수 x 100%)이다. 일 구현예에서, 두 개의 서열은 동일한 길이를 갖는다.

두 개의 서열 간의 %동일성의 결정은 수학적 알고리즘을 이용하여 이루어질 수 있다. 두 개의 서열의 비교에 사용되는 수학적 알고리즘의 바람직한 비제한적 예는 Karlin and Altschul, 1993, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 90: 5873-5877 의 변형에 해당하는 Karlin and Altschul, 1990, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 87:2264-2268에 기재되어 있다. 그러한 알고리즘은 NBLAST and XBLAST programs of Altschul etal., 1990, J. Mol. Biol. 215: 403.에 통합되어 있다. BLAST 뉴클레오티드 연구는 본 발명의 핵산 분자와 동일한 뉴클레오티드 서열을 얻기 위해 BLAST 뉴클레오티드 프로그램 파라미터 세트, 예를 들어 스코어= 100, 워드길이=12로 수행할 수 있다. 비교의 목적으로 갭이 도입된 배열을 획득하기 위해, 갭이 도입된 BLAST를 Altschul et al., 1997, Nucleic Acids Res. 25: 3389-3402에 기재된 바와 같이 이용될 수 있다. 택일적으로는, 분자 간의 먼 관계(Id.)를 검출하는 반복적인 연구를 수행하기 위해 PSI-BLAST를 이용할 수 있다. BLAST를 이용할 경우, 갭이 도입된 BLAST, 및 PSI-Blast 프로그램, 각각의 프로그램(예: XBLAST 및 NBLAST)의 디폴트 파라미터가 이용될 수 있다(예를 들어, NCBI 웹사이트 참조). 서열의 비교를 위해 사용되는 수학적 알고리즘의 비제한적 예는 Myers and Miller, 1988, CABIOS 4:11-17의 알고리즘이다. 그러한 알고리즘은 GCG 서열 배열 소프트웨어 패키지의 일부인 ALIGN 프로그램(버젼 2.0)에 통합되어 있다. 아미노산 서열의 비교를 위해 ALIGN 프로그램을 이용할 경우, PAM120 중량 잔사 테이블, 12의 갭 길이 페널티, 및 4의 갭 패널티를 이용할 수 있다.

바이러스 항원(예:코로나 바이러스 항원, C 형 간염 바이러스 항원, 인플루엔자 바이러스 항원, 및 West Nile 바이러스 항원, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 항원)에 대한 면역 특이적 결합: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "바이러스 항원(예:코로나 바이러스 항원, C 형 간염 바이러스 항원, 인 플루엔자 바이러스 항원, 및 West Nile 바이러스 항원, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 항원)에 대한 면역 특이적 결합" 및 그 유사 용어는 바이러스(예:코로나 바이러스, C 형 간염 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 및 West Nile 바이러스, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스)에 특이적으로 결합하지만, 다른 폴리펩티드에는 특이적으로 결합하지 않는 펩티드, 폴리펩티드, 단백질, 융합 단백질, 및 그의 항체 또는 프래그먼트를 말한다. 바이러스 항원(예:코로나 바이러스 항원, C 형 간염 바이러스 항원, 인플루엔자 바이러스 항원, 및 West Nile 바이러스 항원, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 항원)에 면역특이적으로 결합하는 펩티드, 폴리펩티드, 단백질, 또는 항체는 다른 펩티드, 폴리펩티드, 또는 단백질에 예를 들어, 이뮤노어세이, BIAcore 또는 당해 기술분야에 공지되어 있는 다른 어세이에 의해 결정한 결과 더 낮은 친화도로 결합할 수 있다. 바이러스 항원(예:코로나 바이러스 항원, C 형 간염 바이러스 항원, 인플루엔자 바이러스 항원, 및 West Nile 바이러스 항원, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 항원)에 면역특이적으로 결합하는 항체 또는 프래그먼트는 관련이 있는 항원과 교차 반응할 수 있다. 바람직하게는, 바이러스 항원(예:코로나 바이러스 항원, C 형 간염 바이러스 항원, 인플루엔자 바이러스 항원, 및 West Nile 바이러스 항원, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 항원)에 면역특이적으로 결합하는 항체 또는 프래그먼트는 다른 항원과 교차 반응하지 않는다. 바이러스 항원(예:코로나 바이러스 항원, C 형 간염 바이러스 항원, 인플루엔자 바이러스 항원, 및 West Nile 바이러스 항원, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 항원)에 면역특이적으로 결합하는 항체 또는 프래그먼트는 예를 들어, 이뮤노어세이, BIAcore 또는 당해 기술분야에 공지되어 있는 다른 기술에 의해 동정할 있다. 항체 또는 그 프래그먼트는, 라디오이뮤노어세이(RIA) 및 ELISAs(enzyme-linked immunosorbent assays)와 같은 실험 기술을 이용하여 결정한 결과 그것이 임의의 교차 반응성 항원보다 더 높은 친화도로 바이러스 항원과 결합할 경우, 바이러스 항원(예:코로나 바이러스 항원, C 형 간염 바이러스 항원, 인플루엔자 바이러스 항원, 및 West Nile 바이러스 항원, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 항원)에 특이적으로 결합한다. 예를 들어, 항체 특이성에 대해서는 Paul, ed. , 1989, Fundamental Immunology, 2nd ed., Raven Press, New York, 332-336 쪽을 참조하면 알 수 있다.

복합: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "복합"은 하나 이상의 치료(예: 하나 이상의 예방약 및/또는 치료약)를 사용하는 것을 의미한다. 용어 "복합"의 사용은 치료(예: 예방약 및/또는 치료약)를 바이러스(예:코로나 바이러스, C 형 간염 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 및 West Nile 바이러스, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스)에 감염된 대상에게 투여하는 순서를 제한하지 않는다. 제 1 치료(예: 제 1 예방약 또는 치료약)는 바이러스가 감염된 대상에게 제 2 치료(예: 제 2 예방약 또는 치료약) 전에(예: 5 분, 15 분, 30 분, 45 분, 1 시간, 2 시간, 4 시간, 6 시간, 12 시간, 24 시간, 48 시간, 72 시간, 96 시간, 1 주, 2 주, 3 주, 4 주, 5 주, 6 주, 8 주, 또는 12 주 전), 제 2 치료와 동시에, 또는 제 2 치료 이후(예: 5 분, 15 분, 30 분, 45 분, 1 시간, 2 시간, 4 시간, 6 시간, 12 시간, 24 시간, 48 시간, 72 시간, 96 시간, 1 주, 2 주, 3 주, 4 주, 5 주, 6 주, 8 주, 또는 12 주 후)에 투여할 수 있다.

감염: 본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "감염"은 세포 또는 조직 내에서의 바이러스의 침습 및/또는 증식, 그리고 바이러스이 침습 및 증식으로 인한 병리학적 상태를 포함한다. 바이러스의 생명주기의 침습 및 증식 단계는 다음 단계, 즉 바이러스 입자의 세포와의 결합, 바이러스 유전자 정보의 세포로의 도입, 바이러스 단백질의 발현, 새로운 바이러스 입자의 생성, 및 세포로부터의 바이러스 입자의 분비를 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다.

관리: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "관리하다(manage)", "관리하는 것(managing)", 및 "관리(management)"는 대상이 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)의 치유는 아니지만 치료(예: 예방약 또는 치료약)로부터 얻어내는 유익한 효과를 말한다. 소정의 구현예에서, 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)의 진행 또는 악화를 억제하기 위해 대상에게 질병을 관리하는 하나 이상의 치료(예: 하나 이상의 예방약 또는 치료약)를 투여한다.

비반응성: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "비반응성" 및 "저항성이 있는"은 바이러스 감염과 관련된 하나 이상의 증상을 완화하기 위해 임상적으로 적 절하지 않은 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)에 대한 현재 사용 가능한 치료(예: 예방약 또는 치료약)로 치료된 환자를 의미한다. 전형적으로, 그러한 환자는 심각한, 지속적으로 활성이 있는 감염으로 고생하여, 감염과 관련된 증상을 완화시키기 위해 추가적인 치료를 필요로 한다.

예방: 본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "예방하다", "예방하는 것" 및 "예방"은 치료(예: 예방약 또는 치료약)의 투여, 또는 복합치료법(예: 예방약 또는 치료약의 조합)의 투여의 결과, 대상의 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)의 하나 이상의 증상의 재발, 개시, 또는 발병을 차단시키는 것을 의미한다.

예방약: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "예방약" 및 "예방약들"은 바이러스 감염의 예방에 사용될 수 있는 임의의 약물을 말한다. 소정의 구현예에서, 용어 "예방약"은 글리시르히진 또는 그 유도체를 말한다. 소정의 다른 구현예에서, 용어 "예방약"은 글리시르히진 또는 그 유도체를 말하지 않는다.

예방학적으로 유효한 양: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "예방학적으로 유효한 양"이란 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염) 또는 하나 이상의 그 증상의 발병, 재발, 또 는 개시를 예방하거나 다른 치료(예: 예방약)의 예방 효과를 개선시키거나 향상시키는데 충분한 치료(예: 글리시르히진 또는 그 유도체와 같은 예방약)의 양을 의미한다. 특정 구현예에서, 예방학적으로 유효한 양의 예방약은 바이러스(예:코로나 바이러스, C 형 간염 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 및 West Nile 바이러스, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스)의 다음 단계의 생명 주기, 즉 바이러스 입자의 세포와의 결합, 바이러스 유전자 정보의 세포로의 도입, 바이러스 단백질의 발현, 새로운 바이러스 입자의 생성, 및 세포로부터의 바이러스 입자의 분비중 하나 이상을 5% 이상, 바람직하게는 10% 이상, 15% 이상, 20% 이상, 25% 이상, 30% 이상, 35% 이상, 40% 이상, 45% 이상, 50% 이상, 55% 이상, 60% 이상, 65% 이상, 70% 이상, 75% 이상, 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 또는 100% 이상 감소시킨다. 또 다른 특정 구현예에서, 예방학적으로 유효한 양의 예방약은 바이러스의 복제, 증식, 또는 확산을 5% 이상, 바람직하게는 10% 이상, 15% 이상, 20% 이상, 25% 이상, 30% 이상, 35% 이상, 40% 이상, 45% 이상, 50% 이상, 55% 이상, 60% 이상, 65% 이상, 70% 이상, 75% 이상, 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 또는 100% 이상 감소시킨다. 글리시르히진의 예방학적으로 유효한 양의 비제한적 예를 아래에 기재하였다.

정제된: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "정제된"은 실질적으로 다른 예방약 또는 치료약이 존재하지 않는 예방약 또는 치료약(예: 글리시르히진 또는 그 유도체)을 의미한다. 바람직하게는, 예방약 또는 치료약은 제 2의 예방약 또는 치료약이 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 99% 이상 존재하지 않는 다. 바람직한 구현예에서, 글리시르히진 또는 그 유도체는 정제된 것이다.

예방 프로토콜: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, "예방 프로토콜"이란 하나 이상의 약물의 투여 및 시간조절을 위한 치료법을 말한다.

프로토콜: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, "프로토콜"은 투여 스케줄 및 투여 치료법을 포함한다. 본 명세서의 프로토콜은 사용 방법이며, 예방 및 치료 프로토콜을 포함한다.

호흡기: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "호흡기"는 허파 꽈리로의 신체의 개방을 가능하게 하는 모든 기관 및 부위(예: 코, 입, 눈(누관을 포함))를 말한다.

부작용: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "부작용"은 예방 또는 치료약의 원치 않으며 불리한 효과를 포괄한다. 불리한 효과는 항상 원치 않는 것이지만, 원치 않는 효과는 반드시 해로운 것은 아니다. 예방약 또는 치료약의 불리한 효과는 해롭거나 불편하거나 위험할 수 있다.

대상: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "대상" 및 "환자"는 서로 혼용되어 사용된다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "대상" 및 "환자"는 동물, 바람직하게는 비영장류(예: 소, 돼지, 닭, 고양이, 개, 랫트, 및 마우스) 및 영장류(예: 시아노몰가우스(cyanomolgous) 원숭이, 침팬지, 및 인간)를 포함한 포유류, 보다 바람직하게는 인간을 포함한다. 일 구현예에서, 대상은 SARS-관련 코로나 바이러스로 감염된 포유류, 바람직하게는 인간이다. 또 다른 구현예에서, 대상은 농장 동물(예: 말, 돼지, 또는 소) 또는 애완동물(예: 개 또는 고양이) 이다. 또 다 른 구현예에서, 대상은 SARS-관련 코로나 바이러스 감염을 발병할 위험이 있는 포유류, 바람직하게는 인간이다. 또 다른 구현예에서, 대상은 인간 유아이다. 또 다른 구현예에서, 대상은 인간 아동 또는 인간 성인이다. 또 다른 구현예에서, 대상은 요양원과 같은 그러나 이에 한정되지 않은 조직 또는 그룹 내에 있는 인간이다. 또 다른 구현예에서, 대상은 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)의 예방, 치료, 관리, 또는 경감을 위해 이용 가능한 현재의 치료에 비반응성 또는 저항성이 있다.

상승적인: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "상승적인"은 두 개 이상의 단일 치료법(에: 하나 이상의 예방약 또는 치료약)의 상가적 효과보다 더 효과적인 글리시르히진 또는 그 유도체 및 다른 치료(예: 예방약 또는 치료약)와의 조합을 말한다. 치료의 조합(에: 예방약 또는 치료약의 조합)의 상승효과는 바이러스에 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)된 대상에게 하나 이상의 치료의 투여량을 낮추고/거나 그 치료의 투여 빈도를 낮추는 것을 가능하게 한다. 치료의 투여량을 낮추고/거나 그 치료의 빈도를 낮추는 능력은 대상에게 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)의 예방 또는 치료에 있어서의 그 치료의 효능을 감소시키지 않으면서 그 치료제의 투여와 관련된 독성을 감소시 킨다. 또한, 상승효과는 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)의 예방 또는 치료에 있어서 치료(예: 예방약 또는 치료약)의 향상된 효능을 유발할 수 있다. 최종적으로, 복합치료법(예: 예방약 또는 치료약)의 상승효과는 임의의 단일 치료와 관련된 불리한 또는 원치 않는 부작용을 피하거나 감소시킬 수 있다.

치료약: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "치료약" 및 "치료약들"은 바이러스 감염의 하나 이상의 증상을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키는데 사용될 수 있는 임의의 약물을 말한다. 소정의 구현예에서, 용어 "치료약"은 글리시르히진 또는 그 유도체를 말한다. 소정의 다른 구현예에서, 용어 "치료약"은 글리시르히진 또는 그 유도체를 말하지 않는다.

치료학적으로 유효한 양: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "치료학적으로 유효한 양"이란 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)의 심각도를 감소시키거나, 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)의 지속시간을 감소시키거나, SARS-관련 코로나 바이러스 감염의 하나 이상의 증상을 경감시키거나, 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)의 진행을 예방하거나, 바이러스 감염의 퇴행을 유발하거나, 또 다른 치료약의 치료 효과(들)를 증진시키거나 개선시키기에 충분한치료제의 양을 말한다. 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)의 치료와 관련하여, 치료학적으로 유효한 양이란 바이러스의 복제의 감소 또는 억제, 세포의 바이러스 감염의 억제 또는 감소, 바이러스 입자 생성의 억제 또는 감소, 바이러스 입자의 분비의 억제 또는 감소, 바이러스의 다른 조직 또는 대상로의 확산의 억제 또는 감소, 또는 감염과 관련된 하나 이상의 증상의 완화를 위해 충분한 치료약의 양을 말한다. 특정 구현예에서, 치료학적으로 유효한 양의 치료제는 바이러스(예:코로나 바이러스, C 형 간염 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 및 West Nile 바이러스, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스)의 다음 단계의 생명 주기, 즉 바이러스 입자의 세포와의 결합, 바이러스 유전자 정보의 세포로의 도입, 바이러스 단백질의 발현, 새로운 바이러스 입자의 생성, 및 세포로부터의 바이러스 입자의 분비중 하나 이상을 5% 이상, 바람직하게는 10% 이상, 15% 이상, 20% 이상, 25% 이상, 30% 이상, 35% 이상, 40% 이상, 45% 이상, 50% 이상, 55% 이상, 60% 이상, 65% 이상, 70% 이상, 75% 이상, 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 또는 100% 이상 감소시킨다. 또 다른 특정 구현예에서, 치료학적으로 유효한 양의 치료약은 바이러스의 복제, 증식, 또는 확산을 5% 이상, 바람직하게는 10% 이상, 15% 이상, 20% 이상, 25% 이상, 30% 이상, 35% 이상, 40% 이상, 45% 이상, 50% 이상, 55% 이상, 60% 이상, 65% 이상, 70% 이상, 75% 이상, 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 또는 100% 이상 감소시킨다. 글리시르히진의 치료학적으로 유효한 양의 비제한적 예를 아래에 기재하였다.

치료 프로토콜: 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "치료법 프로토콜"은 하나 이상의 치료제 투여의 투여량 및 시간조절을 위한 방법을 말한다.

치료법(therapy): 본 명세서에서 사용된 바와 같이, "치료법들" 및 "치료법"은 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염) 또는 하나 이상의 그 증상을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키는데 사용될 수 있는 임의의 프로토콜(들), 방법(들), 및/또는 시약(들)을 말한다. 소정의 구현예에서, 용어 "치료법들" 및 "치료법"는 호흡 조건 또는 당해 의료 분야에 공지되어 있는 하나 이상의 그 증상의 치료, 관리, 예방, 또는 경감에 유용한 다른 항바이러스제 치료, 항생제 치료, 생물학적 치료, 보조적 치료, 및/또는 다른 치료를 말한다.

치료(treat): 본 명에서에서 사용된 바와 같이, "치료하다", "치료", 및 "치료하는 것"은 하나 이상의 치료(예: 하나 이상의 예방약 또는 치료약을 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아님)의 투여의 결과, 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염) 또는 하나 이상의 그 증상의 진행, 심각도, 및/또는 지속시간의 감소 또는 경감을 의미한다. 특정 구현예에서, 그러한 용어는 바이러스(예:코로나 바이러스, C 형 간염 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 및 West Nile 바이러스, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스) 복제의 감소 또는 억제, 바이러스(예:코로나 바이러스, C 형 간염 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 및 West Nile 바이러스, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스)의 다른 조직 또는 대상로의 확산의 억제 또는 감소, 세포의 바이러스 감염(예:코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)의 억제 또는 감소, 또는 바이러스 감염과 관련된 하나 이상의 증상의 경감을 말한다.

본 명세서에서 사용된, "5 내지 7-멤버의 헤테로고리"는 산소, 질소, 및 황으로 구성된 그룹에서 선택된 1 내지 3 개의 헤테로 원자를 갖는 5- 내지 7-멤버의 탄소원자의 방향족 또는 비방향족 고리이다. 5 내지 7-멤버의 헤테로고리의 예는 테트라하이드로퓨라닐, 디옥솔라닐, 피롤리디닐, 몰폴리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 테트라하이드로피라닐, 피리미딘-2,4(1H,3H)-디온, 및 2,3-디하이드로-2-티옥소피리미딘-4(1H)-온 등이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 명세서에 사용된 "아미노산"은 임의의 천연의 아미노산 및 D-아미노산과 같은 비천연의 아미노산을 의미한다. 아미노산은 보호기로 치환될 수 있다. 아미노기 및 아미도기의 적절한 보호기로는 아세틸, t-부톡시-C(O)-, 벤질옥시-C(O)- 등이 있다. 히드록시기의 적절한 보호기로는 벤질 등이 있다. 카르복시 모이어티의 적절한 보호기로는 벤질, t-부틸 등이 있다. 다른 적절한 보호기가 당업자가에 게 잘 알려져 있으며, T. W. Greene, Protecting Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, Inc.1981에 개시되어 있는 것들을 포함한다.

본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "펩티드"는 2 내지 6 개의 아미노산의 서열이다. 소정의 구현예에서, 펩티드는 2, 3, 4, 또는 6 개의 아미노산 길이를 갖는다.

본 명세서에 기재된 기(group)가 "치환 또는 비치환된"이라고 할 경우, 치환될 때는 화합물의 바람직한 활성에 불리한 영향을 주지 않는 임의의 바람직한 치환기 또는 치환기들로 치환될 수 있다. 바람직한 치환기의 예로는 본 명세서에 개시한 실시예의 화합물 및 구현예에서 발견되는 것을 들 수 있이며, 이외에도 할로겐(클로로, 요오도, 브로모, 또는 플루오로); C₁ _-6 알킬; C₂ _-6 알케닐; C₂ _-6 알키닐; 히드록실; C₁ _-6 알콕실; 아미노; 니트로; 티올; 티오에테르; 이민; 시아노; 아미도; 포스포나토; 포스핀; 카르복실; 티오카르보닐; 술포닐; 술폰아미드; 케톤; 알데히드; 에스테르; 산소(=O); 할로알킬(예: 트리플루오로메틸); 모노시클릭 또는 융합되거나 비융합된 폴리시크릭일 수 있는 카보시클릭 시클로알킬(예: 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 또는 시클로헥실); 또는 모노시클릭 또는 융합되거나 비융합된 폴리시크릭일 수 있는 헤테로시클로알킬(예: 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 몰폴리닐, 또는 티아지닐); 카보시클릭 또는 헤테로시클릭, 모노시클릭 또는 융합되거나 비융합된 폴리시클릭 아릴(예: 페닐, 나프틸, 피롤릴, 인돌릴, 퓨라닐, 티오페닐, 이미다졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 티아졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 피라졸릴, 피리디닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 아크리디닐, 피라지닐, 피리다지닐, 피리미디닐, 벤즈이미다졸릴, 벤조티오페닐, 또는 벤조퓨라닐); 벤질옥시; 아미노(1차, 2차, 또는 3차); -N(CH₃)₂; O-저급 알킬; O-아릴, 아릴; 아릴-저급 알킬; -CO₂CH₃; -OCH₂CH₃; 메톡시; CONH₂; -OCH₂CONH₂; NH₂; SO₂NH₂; OCHF₂; CF₃; OCF₃ 등이 있으며, 그러한 모이어티는 융합된 고리 구조 또는 브릿지(예: -OCH₂O-) 에 의해 선택적으로 치환될 수 있다.

이러한 치환기는 그러한 그룹으로부터 선택된 치환기로 선택적으로 더 치환될 수 있다.

도시된 구조 및 그 구조에 주어진 화학명이 모순될 경우, 도시된 구조가 기준이 된다는 것에 주의해야 한다. 또한, 예를 들어, 진한 선 또는 점선으로 표시되어 있지 않다면, 구조의 입체화학 또는 구조의 비율은 그것의 모든 입체이성질체를 포괄하는 것으로 해석해야 한다.

5. 발명의 상세한 설명

본 발명은 바이러스 감염(예: 코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염) 또는 하나 이상의 그 증상을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키는 글리시르히진에 의한 치료법을 제공한다. 구체적으로, 본 발명은 예방학적으로 또는 치료학적으로 유효한 양의 글리시르히진 또는 그 유도체, 및 선택적으로 예방학적으로 또는 치료학적으로 유효한 양의 글리시르히진 또는 그 유도체 이외의 예방약 또는 치료약을 치료가 필요한 환자 에게 투여하는 것을 포함하는, 바이러스 감염(예: 코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염) 또는 하나 이상의 그 증상을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키기 위한 예방 및 치료 프로토콜을 제공한다.

본 발명은 또한 세포를 글리시르히진 또는 그 유도체와 접촉시키는 것을 포함하는, 바이러스 감염(예: 코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염)을 억제하거나 감소시키는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 세포를 글리시르히진 또는 그 유도체와 접촉시키는 것을 포함하는, 바이러스(예: 코로나 바이러스, C 형 간염 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 및 West Nile 바이러스, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스)의 복제를 억제하거나 감소시키는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 세포를 글리시르히진 또는 그 유도체와 접촉시키는 것을 포함하는, 바이러스 입자(예: 코로나 바이러스, C 형 간염 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 및 West Nile 바이러스, 그리고 바람직하게는 SARS-관련 코로나 바이러스)의 생성 및/또는 분비를 억제하거나 감소시키는 방법을 제공한다.

본 발명은 바이러스 감염(예: 코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염) 또는 하나 이상의 그 증상을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키는데 사용하기 위한, 글리시르히진 또는 그 유도체를 포함하는 약제학적 조성물 및 제품을 제공한다. 본 발명은 또한 바이 러스 감염(예: 코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염) 또는 하나 이상의 그 증상을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키는데 사용하기 위한, 글리시르히진 또는 그 유도체 및 글리시르히진 또는 그 유도체 이외의 하나 이상의 예방약 또는 치료약를 포함하는 약제학적 조성물 및 제품을 제공한다.

5.1. 글리시르히진 및 그 유도체

본 발명은 하기 구조를 갖는 글리시르히진("화합물 1")을 사용하는 것에 관한 것이다.

글리시르히진 유도체는 글리시르히진의 하나 이상의 카르복실산기 및 히드록실기 중 하나 이상이 변형된 임의의 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염, 유리 염기, 용매화물, 수화물, 입체이성질체, 클러스레이트(clathrate), 또는 프로드럭을 포함한다. 일 구현예에서, 글리시르히진 유도체는 글리시르히진의 1, 2, 또는 3 개의 카르복실산기가 변형된 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염, 유리 염기, 용매화물, 수화물, 입체이성질체, 클러스레이트, 또는 프로드럭이다. 또 다른 구현예에서, 글리시르히진 유도체는 추가의 구현예를 포함하는 화학식 I의 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염, 유리 염기, 용매화물, 수화물, 입체이성질체, 클러스레이트, 또는 프로드럭이다. 또 다른 구현예에서, 글리시르히진 유도체는 화합물 2-8 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염, 유리 염기, 용매화물, 수화물, 입체이성질체, 클러스레이트, 또는 프로드럭을 포함한다.

소정의 구현예에서, 글리시르히진 또는 그 유도체는 본 발명의 방법에 사용하기 위해 정제된다.

특정 구현예에서, 글리시르히진 유도체는 18β-글리시르헤틴산이다. 이론에 얽매이지 않고, 18β-글리시르헤틴산은 장의 글루쿠로니다아제에 의해 촉진되는 화합물 I의 가수분해 산물이다. 또 다른 구현예에서, 글리시르히진 유도체는 글리시르히진 술페이트이다.

글리시르히진 또는 그 유도체는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염, 유리 염기, 용매화물, 수화물, 입체이성질체, 클러스레이트, 또는 프로드럭의 형태이다.

소정의 구현예에서, 글리시르히진 유도체는 글리시르히진의 약제학적으로 허용 가능한 염이다. 글리시르히진의 약제학적으로 허용 가능한 염은 표준 방법에 의해 획득될 수 있다. 예를 들어, 산 및 글리시르히진을 두 개의 반응물 모두(즉, 글리시르히진의 유리 염기 및 각각의 산)가 충분히 용해될 수 있는 용매 시스템에 용해한다. 한 방법에서는, 결정 또는 침전을 획득하기 위해, 결과적으로 생성된 염이 거의 녹지 않거나 전혀 녹지 않는 용매 또는 용매 혼합물이 사용된다. 택일적으로, 원하는 염이 매우 잘 용해될 수 있는 용매를 사용한 다음, 역용매(또는 그 결과 생성되는 염이 거의 녹지 않는 용매) 를 용액에 가할 수 있다. 염 형성 또는 결정화의 다른 변수는 염 용액을 농축하거나(예: 가열, 필요하다면 감압 하에서 가열, 또는 예를 들어 실온에서 용매를 서서히 증발시키는 것에 의함), 시드 결정의 부가와 함께 시딩하거나, 수화물의 형성에 필요한 물 활성을 결정하는 것을 포함한다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "약제학적으로 허용 가능한 염(들)"이란 무기산 및 무기염기, 그리고 유기산 및 유기염기를 포함하는 약제학적으로 허용 가능한 무독성 산 또는 염기로부터 제조된 염을 말한다. 본 발명의 화합물의 약제학적으로 허용 가능한 적절한 염기 부가염은 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 칼륨, 소듐, 및 아연으로부터 제조된 금속염, 또는 라이신, N,N'-디벤질에틸렌디아민, 클로로프로케인, 콜린, 디에탄올아민, 에틸렌디아민, 메글루민(N-메틸글루카민), 및 프로케인으로부터 제조되는 유기염을 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 적절한 무독성 산으로는 무기산, 그리고 아세트산, 알긴산, 안트라닐산, 벤젠술폰산, 벤조산, 캄포술폰산, 시트르산, 에탄술폰산, 포름산, 퓨마르산, 퓨로산, 갈락튜론산, 글루콘산, 글루쿠론산, 글루탐산, 글리콜산, 브롬산, 염산, 이세티온산, 락트산, 말레산, 말산, 만델산, 메탄술폰산, 뮤식산, 니트르산, 파모산, 판토 텐산, 페닐아세트산, 인산, 프로피온산, 살리실산, 스테아르산, 숙신산, 술파닐산, 황산, 타르타르산, 및 p-톨루엔술폰산과 같은 유기산을 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 특정 무독성 산은 염산, 브롬산, 인산, 황산, 메탄술폰산, 및 부티르산 등을 포함한다. 다른 특정 염의 예로는 염산염 및 메실레이트염 등이 있다. 이외의 다른 염들도 당해 기술분야에 잘 알려져 있으며, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18^th eds., Mack Publishing, Easton PA(1990) 또는 Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 1 9^th eds., Mack Publishing, Easton PA (1995)를 참조하면 알 수 있다.

글리시르히진의 약제학적으로 허용 가능한 염으로는 글리시르히진의 모노- 또는 디- 암모늄염, 글리시르히진의 모노- 또는 디- 소듐염, 글리시르히진의 모노- 또는 디- 포타슘염 등이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

소정의 구현예에서, 글리시르히진 또는 그 유도체는 글리시르히진 또는 그 유도체의 라세미체 및/또는 에난티오머이다.

소정의 구현예에서, 글리시르히진 또는 그 유도체는 다형체(polymorph)의 형태로서 이용될 수 있다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 그리고 달리 한정하지 않는다면, 용어 "다형체"는 글리시르히진 또는 그 유도체의 특정 결정 배열을 의한다. 다형체는 서로 다른 작업 조건 및/또는 용매를 사용함으로써 획득될 수 있다. 특히, 다형체는 글리시르히진 또는 그 유도체를 특정 용매 중에 재결정함으로써 제조될 수 있다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 그리고 달리 한정하지 않는다면, 용어 "프로드럭"은 생물학적 조건(in vitro 또는 in vivo) 하에서 수화, 산화, 또는 달리 반응하여 활성 화합물, 특히 글리시르히진 또는 그 유도체를 생성시킬 수 있는 글리시르히진 유도체를 의미한다. 프로드럭의 예로는 생가수분해 가능한 아미드, 생가수분해 가능한 에스테르, 생가수분해 가능한 카바메이트, 생가수분해 가능한 카보네이트, 생가수분해 가능한 유레이드(ureides), 및 생가수분해 가능한 포스페이트 유사체와 같은 생가수분해 가능한 모이어티를 포함하는, 글리시르히진 또는 그 유도체의 유도체 및 대사물 등이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 바람직하게는 글리시르히진 또는 그 유도체의 프로드럭은 카르복실산의 저급 알킬 에스테르이다. 카르복실레이트 에스테르는 분자에 존재하는 임의의 카르복실산 모이어티를 에스테르화 함으로써 쉽게 형성된다. 프로드럭은 Burger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery 6^th ed.(Donald J. Abrahamed.,2001, Wiley) 및 Design and Application of Prodrugs(H. Bundgaarded., 1985, Harwood Academic Publishers GmfH)에 기재되어 있는 것과 같은 전형적으로 잘 알려진 방법을 이용하여 제조할 수 있다.

소정의 구현예에서, 글리시르히진 또는 그 유도체는 광학적으로 순수하다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이 그리고 달리 한정하지 않는다면, 용어 "광학적으로 순수한" 또는 "입체이성질체적으로 순수한"이란 화합물의 한 입체이성질체가 그 화합물의 다른 입체이성질체를 실질적으로 함유하지 않는다는 것을 의미한다. 예 를 들어, 하나의 키랄 센터를 갖는 입체이성질체적으로 순수한 화합물은 실질적으로 그 화합물의 반대편 에난티오머를 함유하지 않을 것이다. 두 개의 키랄 센터를 갖는 입체이성질체적으로 순수한 화합물은 그 화합물의 다른 다이아스테레오머를 실질적으로 함유하지 않을 것이다. 전형적으로 입체 이성질체적으로 순수한 화합물은 화합물의 하나의 입체이성질체를 80 중량% 초과 그 화합물의 다른 입체이성질체를 20% 미만, 보다 바람직하게는 화합물의 하나의 입체이성질체를 90 중량% 초과 그 화합물의 다른 입체이성질체를 10 중량% 미만, 더욱 바람직하게는 화합물의 하나의 입체이성질체를 95 중량% 초과 그 화합물의 다른 입체이성질체를 5 중량% 미만, 가장 바람직하게는 화합물의 하나의 입체이성질체를 97 중량% 초과 그 화합물의 다른 입체이성질체를 3 중량% 미만 포함한다.

소정의 구현예에서, 글리시르히진의 유도체를 획득하기 위해, 화합물 I의 하나 이상의 -COOH 기를 에스테르, 예를 들어 메틸에스테르, 에틸에스테르, n-프로필에스테르, 이소프로필에스테르로 변형할 수 있다.

소정의 구현예에서, 글리시르히진의 유도체를 획득하기 위해, 화합물 I의 트리테르펜 부분에서 육원환(six-membered ring) 중 하나 이상은 하나 이상의 헤테로 원자를 갖는다. 헤테로원자는 N, O, 또는 P 일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 소정의 구현예에서, 트리테르펜에서의 육원환 중 두 개 이상, 3 개 이상, 4 개 이상, 또는 5 개 모두가 헤테로 고리이다.

소정의 구현예에서, 글리시르히진의 유도체를 획득하기 위해, 추가적인 이중 결합이 트리테르펜 부위의 고리 시스템에 도입된다. 소정의 구현예에서, 트리테르 펜 부분의 고리 시스템은 방향족이다.

소정의 구현예에서, 글리시르히진 유도체를 획득하기 위해, 화합물 I의 -OH 기중 하나 이상을 변형하여 아실화 할 수 있다.

소정의 구현예에서, 글리시르히진 유도체를 획득하기 위해, 화합물 I의 하나 이상의 산소를 황으로 교체한다.

소정의 구현예에서, 글리시르히진의 약제학적으로 허용 가능한 염은 글리시르히진의 모노암모늄염이다:

소정의 구현예에서, 글리시르히진 유도체는 하기 화학식 I의 화합물이다.

[화학식 I]

상기 화학식 I에서, R₁, R₂, 및 R₃ 는 각각 독립적으로 -OH; -OCH₃; -NH-NH₂; -NHCH(COOH)CH₂SCH₂C₆H₅; 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환); 아미노산; 펩티드; 또는 -N(H)R₄이며, 여기에서 R₄는 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)이다. 화학식 I의 또 다른 구현예는 R₁, R₂, 및 R₃ 는 각각 독립적으로 -OH; 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환); -글리신-루이신; 또는 -N(H)R₄이며, 여기에서 R₄는 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R₁, R₂, 및 R₃는 -N(H)R₄이며, 여기에서 각각의 R₄는 독립적으로 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)이며, 단 R₄는 티아졸, 우라실, 또는 하기 화학식이 아닌 화학식 I의 화합물을 제공한다:

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R₁, R₂, 및 R₃는 -N(H)R₄이며, 여기에서 각각의 R₄는 독립적으로 5-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)이며, 단 R₄는 티아졸이 아닌 화학식 I의 화합물을 제공한다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R₁, R₂, 및 R₃는 -N(H)R₄이며, 여기에서 각각의 R₄는 6-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)이며, 단 R₄는 우라실, 또는 하기 화학식이 아닌 화학식 I의 화합물을 제공한다:

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R₁ 및 R₂ 중 하나는 하기 화학식을 가지며;

R₃ 및, R₁과 R₂ 중 다른 하나는 각각 독립적으로 -OH; -OCH₃; -NH-NH₂; -NHCH(COOH)CH₂SCH₂C₆H₅; 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환); 아미노산; 펩티드; -N(H)R₄이며, 여기에서 R₄는 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)인 화학식 I의 화합물을 제공한다. 또 다른 구현예에서, R₃ 및, R₁과 R₂ 중 다른 하나는 각각 독립적으로 -OH; 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환); 글리신-루이신; -N(H)R₄이며, 여기에서 R₄는 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R₁ _, R₂, 및 R₃ 중 하나는 아미노산 또는 펩티드이며, R₁ _, R₂, 및 R₃ 중 나머지 두 개는 각각 독립적으로 -OH; -OCH₃; -NH-NH₂; -NHCH(COOH)CH₂SCH₂C₆H₅; 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환); -N(H)R₄이며, 여기에서 R₄는 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환) 인 화학식 I의 화합물을 제공한다. 또 다른 구현예에서, R₁ _, R₂, 및 R₃ 중 나머지 두 개는 각각 독립적으로 -OH; 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환); -N(H)R₄이며, 여기에서 R₄는 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R₁ _, R₂, 및 R₃ 중 하나는 -글리신-루이신이며, R₁ _, R₂, 및 R₃ 중 나머지 두 개는 각각 독립적으로 -OH; -OCH₃; -NH-NH₂; -NHCH(COOH)CH₂SCH₂C₆H₅; 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환); -N(H)R₄이며, 여기에서 R₄는 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)인 화학식 I의 화합물을 제공한다. 또 다른 구현예에서, R₁ _, R₂, 및 R₃ 중 나머지 두 개는 각각 독립적으로 -OH; 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환); -N(H)R₄이며, 여기에서 R₄는 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R₁ _, R₂, 및 R₃ 중 두 개는 -글리신-루이신이며, R₁ _, R₂, 및 R₃ 중 나머지 하나는 -OH; -OCH₃; -NH-NH₂; -NHCH(COOH)CH₂SCH₂C₆H₅; 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환); -N(H)R₄이며, 여기에서 R₄는 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)인 화학식 I의 화합물을 제공 한다. 또 다른 구현예에서, R₁ _, R₂, 및 R₃ 중 나머지 하나는 각각 독립적으로 -OH; 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환); -N(H)R₄이며, 여기에서 R₄는 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R₁, R₂, 및 R₃는 하기 화학식을 갖는 화학식 I의 화합물을 제공한다:

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R₁ _, R₂, 및 R₃ 는 각각 독립적으로 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)이며, 단 R₁ _, R₂, 및 R₃ 모두가 프롤린은 아닌 화학식 I의 화합물을 제공한다.

소정의 보다 구체적인 구현예에서, 본 발명은 하기 화학식을 갖는 글리시르히진 유도체 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염을 제공한다:

화합물 2: R₁ _, R₂, 및 R₃ 는 각각 하기 화학식임

;

화합물 3: R₃ 는 -OH이고; R₁ _, 및 R₂ 는 각각 -글리신-루이신임

화합물 4: R₃ 는 하기 화학식이고

;

R₁ _, 및 R₂ 는 각각 -OH 임;

화합물 5: R₃는 -OH이고, R₁ _, 및 R₂ 는 각각 하기 화학식임

;

화합물 6: R₁ _, R₂, 및 R₃ 는 각각 하기 화학식임

;

화합물 7:

화합물 8:

소정의 구현예에서, 본 발명의 글리시르히진 유도체는 3,000 mg/L 미만, 1,500 mg/L 미만, 500 mg/L 미만, 250 mg/L 미만, 100 mg/L 미만, 50 mg/L 미만, 10 mg/L 미만, 또는 1 mg/L 미만의 EC₅₀을 갖는다. EC₅₀은 하기 섹션 6.1에 기재된 바와 같이 결정될 수 있다.

소정의 구현예에서, 본 발명의 방법에서 사용될 수 있는 글리시르히진 유도체는 3,000 mg/L 미만, 1,500 mg/L 미만, 500 mg/L 미만, 250 mg/L 미만, 100 mg/L 미만, 50 mg/L 미만, 10 mg/L 미만, 또는 1 mg/L 미만의 EC₅₀을 갖는다. EC₅₀은 하기 섹션 6.1에 기재된 바와 같이 결정될 수 있다.

5.1.1 글리시르히진 유도체의 합성

글리시르히진 유도체는 표준의 잘 알려진 합성 방법, 예를 들어 March, J. Advanced Organic Chemistry; Reactions Mechanisms, and Structure, 4^th ed., 1992에 따른 방법으로 획득될 있다. 본 발명의 화합물 및 그 중간체를 제조하는데 유용한 출발물질은 상업적으로 입수 가능하거나, 공지의 합성 방법 및 시약을 이용하여 상업적으로 입수 가능한 물질로부터 제조할 수 있다.

글리시르히진 유도체의 예시적인 합성 방법은 전체가 참고로 본 명세서에 통합되어 있는 Baltina, 2003, Current Medicinal Chemistry 10(2):155-171에 기재되어 있다.

5.2. 글리시르히진과 조합하기에 유용한 약물

바이러스 감염(예: 코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염)의 예방, 치료, 관리, 또는 경감을 위해 글리시르히진 또는 그 유도체와 조합하여 사용될 수 있는 치료약 또는 예방약은 소분자, 합성 약물, 펩티드(시클릭 펩티드 포함), 폴리펩티드, 단백질, 핵산(예: 안티센스 뉴클레오티드 서열, 트리플 헬릭스, RNAi, 및 생물학적으로 활성이 있는 단배질, 폴리펩티드, 또는 펩티드를 암호화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하지만 이에 한정되지 않는 DNA 및 RNA 뉴클레오티드 서열), 항체, 합성 또는 천연 무기 분자, 유사 작용제(mimetic agent), 그리고 합성 및 천연 유기 분자를 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 그러한 약물의 특정 구현예는 면역 조절제(예: 인터페론), 항염증제(예: 아드레노코르티코이드, 코르티코스테로이드(예: 베클로메타손, 부데소나이드, 플루니솔리드, 플루티카손, 트리암시놀론, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론, 프레드니손, 하이드로코르티손), 글루코코르티코이드, 스테로이드, 및 비스테로이드성 항염증제(예: 아스피린, 이부프로펜, 디클로페낙, 및 COX-2 억제제)), 통증 완화제, 류코트리엔 길항제(예: 몬테루카스트, 메틸 크산틴, 자피르루카스트, 및 질레우톤), 베타2-작용제(예: 알부테롤, 비테롤, 페노테롤, 이소에타리에(isoetharie), 메타프로테레놀, 피르부테롤, 살부타몰, 터부탈린 포르모테롤, 살메테롤, 및 살부타몰 터부탈린), 항콜린제(예: 이프라트로피움 브로마이드 및 옥시트로피움 브로마이드), 설파살라진, 페니실라민, 답손, 항히스타민제, 항말라리아제(예: 히드록시클로로퀸), 항바이러스제(예: 뉴클레오시드 유사체(예: 지도부딘, 아시클로버, 강그시클로버(gangcyclovir), 비다라빈, 이독수리딘, 트리플루리딘, 및 리바비린), 포스카르넷, 아만타딘, 리만타딘, 사퀴나비르, 인디나비르, 리토나비르, 및 AZT) 및 항생제(예: 닥티노마이신(구 악티노마이신), 블레오마이신, 에리쏘마이신, 페니실린, 미트라마이신, 및 안트라마이신(AMC))을 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다.

특정 구현예에서, 하기 약물 중 하나 이상 또는 하기 약물의 조합이 바이러스 감염(예: 코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염) 또는 그 증상의 예방, 치료, 관리, 또는 경감을 위해 글리시르히진 또는 그 유도체와 조합하여 사용된다: 아만타딘, 리바비린, 리만타딘, 아시클로버, 팜시클로버, 포스카르넷, 강시클로버(ganciclovir), 트 리플루리딘, 비다라빈, 디다노신, 스타부딘, 잘실타빈, 지도부딘, 인터페론(예: 인터페론-α, 인터페론-β, 및/또는 인터페론-γ), 항생제, 면역조절제, 및 바이러스 항원(예: 예를 들어 비구조 단백질, 헤마글루티닌-에스터라제 당단백질, 스파이크 당단백질, 작은 막 유전자(small membrane gene), 막 당단백, 및 뉴클레오단백질과 같은 코로나 바이러스 항원, C 형 간염 바이러스 항원, 인플루엔자 바이러스 항원, 및 West Nile 바이러스 항원)과 면역 특이적으로 결합하는 항체 또는 그의 프래그먼트(예: 인간, 키메라, 인간화, 및 카멜화 항체, 모노클로날 항체, 폴리클로날 항체, 단일 체인 항체, SFv, Fab 프래그먼트, 및 F(ab') 프래그먼트).

바이러스 감염(예: 코로나 바이러스 감염, C 형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염, 및 West Nile 바이러스 감염) 또는 호흡기 상태, 특히 바이러스 호흡기 상태, 또는 하나 이상의 그 증상의 예방, 치료, 관리, 또는 경감을 위해 유용한 것으로 알려져 있거나 사용되어 왔고 현재 사용되고 있는 임의의 치료법은 본 명세서에 기재된 발명에 따라 글리시르히진 또는 그 유도체와 조합하여 사용될 수 있다. 예를 들어, 호흡기 상태 또는 하나 이상의 그 증상을 예방, 치료, 관리, 도는 경감시키는데 사용되어 왔고 사용되고 있는 치료법(예: 예방약 또는 치료약)에 관한 정보에 대해서는 Gilman et al., Goodman and Gilman's : The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th ed., McGraw-Hill, New York, 2001; The Merck Manual of Diagnosis and Therapy, Berkow, M.D. et al. (eds.),17th Ed., Merck Sharp & Dohme Research Laboratories, Rahway, NJ, 1999; Cecil Textbook of Medicine, 20th Ed., Bennett and Plum (eds.), W.B. Saunders, Philadelphia, 1996을 참조하면 알 수 있다.

SARS-관련 코로나 바이러스, 인플루엔자 바이러스, C 형 간염 바이러스, 및 West Nile 바이러스에 대한 글리시르히진 또는 그 유도체 및 제 2 화합물과의 상승적 효과를 시험하기 위해, 각각의 바이러스에 대해 임의의 세포배양 시스템 및/또는 동물 모델 시스템이 사용될 수 있다(섹션 5.6 및 6.1 참조). 대조군은 치료를 하지 않는 세포/동물을 포함하며, 그리고 각각의 화합물로 치료한 세포/동물이 포함될 수 있다.

5.3. 표적 감염

본 발명은 중증급성호흡기증후군의 원인 물질로서 확인된 바이러스의 감염을 예방, 치료, 관리 또는 경감시키기 위한 글리시르히진에 의한 치료법을 제공한다. 특히, 본 발명은 또한 SARS 관련 코로나 바이러스 감염의 예방, 치료, 관리 또는 경감을 위한 글리시르히진에 의한 치료법을 제공한다. 특정 구현예에서, 글리시르히진에 의한 치료법은 표 1의 균주의 핵산 서열을 갖는 SARS 관련 코로나 바이러스를 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키기 위해 이용된다. 특정 구현예에서, 글리시르히진에 의한 치료법은 표 1에 참고된 SARS 관련 코로나 바이러스의 분리물 중의 하나의 핵산 서열과 핵산 수준에서 50 내지 65%, 바람직하게는 65 내지 80%, 더욱 바람직하게는 75 내지 85%, 가장 바람직하게는 85 내지 99% 동일한 SARS 관련 코로나 바이러스의 감염을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키기 위해 이용된다. 또 다른 구현예에서, 글리시르히진 기재 치료법은 [Drosten et al., 2003, N Engl J Med 348: 1967-1976]에 기재된 소 코로나 바이러스와 핵산 수준에서 50 내지 65%, 바람 직하게는 65 내지 80% 동일한 SARS 관련 코로나 바이러스의 감염을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키기 위해 이용된다.

특정 구현예에서, 글리시르히진에 의한 치료법은 게놈 또는 이의 단편이 [Drosten et al., 2003, N Engl J Med 348: 1967-1976]에 기재된 소 코로나 바이러스의 게놈 또는 이의 단편과 높은 스트린전시 조건하에 혼성화하는 SARS 관련 코로나 바이러스의 감염을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키기 위해 이용된다. 실시예를 통해 제한 없이, 상기 높은 스트린전시 조건을 이용하는 절차는 하기와 같다: DNA를 포함하는 필터의 예비혼성화는 6X SSC, 50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 1 mM EDTA, 0.02% PVP, 0.02% 피콜, 0.02% BSA, 및 500㎍/ml 변성된 연어 정자 DNA로 구성된 완충액에서 65℃에서 8시간 내지 밤새 수행된다. 필터를 100㎍/ml 변성된 연어 정자 DNA 및 5-20 X 10⁶ cpm의 ³²P-표지된 프로브를 포함하는 예비혼성화 혼합물에서 65℃에서 48시간 동안 혼성화한다. 필터의 세정은 2X SSC, 0.01% PVP, 0.01% 피콜, 및 0.01% BSA를 포함하는 용액에서 1시간 동안 37℃에서 수행된다. 이어서 자가방사선촬영법 전에 45분 동안 50℃에서 0.1X SSC에서 세정한다. 이용될 수 있는 높은 스트린전시의 기타 조건은 당업계에 주지되어 있다.

특정 구현예에서, 글리시르히진에 의한 치료법은 게놈 또는 이의 단편이 [Drosten et al., 2003, N Engl J Med 348: 1967-1976]에 기재된 소 코로나 바이러스의 게놈 또는 이의 단편과 적당한(moderate) 스트린전시 조건하에 혼성화하는 SARS 관련 코로나 바이러스의 감염을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키기 위해 이 용된다. 예를 들면, 제한 없이, 상기 적당한 스트린전시 조건을 이용하는 절차는 하기와 같다: DNA를 포함하는 필터를 6X SSC, 5X 덴하트 용액, 0.5% SDS 및 100㎍/ml 변성된 연어 정자 DNA를 포함하는 용액에서 55℃에서 6시간 동안 예비혼성화한다. 혼성화는 동일한 용액에서 수행되며, 5-20 X 10⁶ cpm ³²P-표지된 프로브가 이용된다. 필터를 55℃에서 18-20시간 동안 혼성화 혼합물에서 인큐베이션한 후, 1X SSC 및 0.1% SDS를 포함하는 용액에서 60℃에서 30분 동안 2회 세정한다. 필터를 건조 블롯팅하고, 자가방사선촬영법을 위해 노출시킨다. 이용될 수 있는 적당한 스트린전시의 기타 조건은 당업계에 주지되어 있다. 필터의 세정은 2X SSC, 0.1% SDS를 포함하는 용액에서 1시간 동안 37℃에서 수행된다.

특정 구현예에서, 글리시르히진에 의한 치료법은 게놈 또는 이의 단편이 [Drosten et al., 2003, N Engl J Med 348: 1967-1976]에 기재된 소 코로나 바이러스의 게놈 또는 이의 단편과 낮은 스트린전시 조건하에 혼성화하는 SARS 관련 코로나 바이러스의 감염을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키기 위해 이용된다. 실시예를 통해 제한 없이, 상기 낮은 스트린전시 조건을 이용하는 절차는 하기와 같다 (또한, Shilo and Weinberg, 1981, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78: 6789-6792 참고): DNA를 포함하는 필터를 35% 포름아미드, 5X SSC, 50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 5 mM EDTA, 0.1% PVP, 0.1% 피콜, 1% BSA, 및 500㎍/ml 변성된 연어 정자 DNA를 포함하는 용액에서 40℃에서 6시간 동안 예비혼성화한다. 혼성화는 하기 변경을 갖는 동일한 용액에서 수행된다: 0.02% PVP, 0.02% 피콜, 0.2% BSA, 100㎍/ml 연어 정자 DNA, 10% (wt/vol) 덱스트란 설페이트, 및 5-20 X 10⁶ cpm ³²P-표지된 프로브가 이용된다. 필터를 40℃에서 18-20시간 동안 혼성화 혼합물에서 인큐베이션한 후, 2X SSC, 25 mM Tris-HCl (pH7.4), 5 mM EDTA, 및 0.1 % SDS를 포함하는 용액에서 55℃에서 1.5시간 동안 세정한다. 상기 세정액을 신선한 용액으로 교환하고, 60℃에서 부가적인 1.5시간 동안 인큐베이션하였다. 필터를 건조 블롯팅하고, 자가방사선촬영법을 위해 노출하였다. 필요시, 필터를 65-68℃에서 세번째 세정하고, 필름에 재노출시켰다. 이용될 수 있는 낮은 스트린전시의 기타 조건은 당업계에 주지되어 있다.

상기 구현예에 따라서, SARS 관련 코로나 바이러스는 바람직하게는 림프구감소증 및 부드럽게 상승된 아미노전이효소 수준을 야기한다.

SARS 관련 코로나 바이러스의 상이한 균주의 GenBank 등록 번호

SARS 관련 코로나 바이러스의 분리물/서열 유형	GenBank 등록 번호
SARS 코로나 바이러스, 완전 게놈	NC_004718
SARS 코로나 바이러스 CUHK-W1, 완전 게놈	AY278554
SARS 코로나 바이러스 ZJ01, 완전 게놈	AY297028
SARS 코로나 바이러스 타이완 JC-2003, RNA 지시된 RNA 중합효소, 부분적인 코딩 서열	AY286402
SARS 코로나 바이러스 TOR2, 완전 게놈	AY274119
SARS 코로나 바이러스 TW1, 완전 게놈	AY291451
SARS 코로나 바이러스 Tor2 RNA 중합효소 1b mRNA	AY271716
SARS 코로나 바이러스 분리물 SIN2774, 완전 게놈	AY283798
SARS 코로나 바이러스 분리물 SIN2748, 완전 게놈	AY283797
SARS 코로나 바이러스 분리물 SIN2679, 완전 게놈	AY283796
SARS 코로나 바이러스 분리물 SIN2677, 완전 게놈	AY283795
SARS 코로나 바이러스 분리물 SIN2500, 완전 게놈	AY283794
SARS 코로나 바이러스 CUHK-Su10, 완전 게놈	AY282752
SARS 코로나 바이러스 홍콩/03/2003 RNA 지시된 RNA 중합효소 유전자	AY268070
SARS 코로나 바이러스 BJ01, 완전 게놈	AY278488
SARS 코로나 바이러스 BJ04, 부분적인 게놈	AY279354
SARS 코로나 바이러스 Urbani, 완전 게놈	AY278741
SARS 코로나 바이러스 BJ03, 부분적인 게놈	AY278490
SARS 코로나 바이러스 GZ01, 부분적인 게놈	AY278489
SARS 코로나 바이러스 BJ02, 부분적인 게놈	AY278487
SARS 코로나 바이러스 타이완 RNA 지시된 RNA 중합효소(pol) 유전자	AY268049
SARS 코로나 바이러스 HKU-39849, 완전 게놈	AY278491
SARS 코로나 바이러스 베트남 균주 200300592 중합효소 유전자, 부분적인 코딩 서열	AY269391

본 발명은 SARS의 임의의 증상이 자체로 나타나기 전에, SARS 관련 코로나 바이러스의 감염으로부터 대상을 방어하거나 또는 SARS 관련 코로나 바이러스로 감염된 대상을 치료하기 위한 글리시르히진에 의한 치료법을 제공한다. 본 발명은 또한 발생하는 SARS 관련 코로나 바이러스 감염으로부터 SARS 관련 코로나 바이러스 감염을 갖는 또 다른 대상과 접촉하였거나 접촉 중인 대상을 예방하기 위한 글리시르히진에 의한 치료법을 제공한다. 본 발명은 추가로 SARS 관련 코로나 바이러스에 노출된 대상에서 SARS를 예방하기 위한 글리시르히진에 의한 치료법을 제공한다. 당업자에게 공지된 임의의 방법이 SARS 관련 코로나 바이러스를 검출하기 위해 이용될 수 있다 (섹션 5.5, 이하 참고).

특정 구현예에서, 본 발명에 따라 예방, 치료, 관리 또는 경감되는 SARS 관련 코로나 바이러스 감염은 인간 대상에서 하나 이상의 하기 증상을 야기하거나 또는 하기 증상과 관련된다: 고열 (>38°셀시우스), 마른기침, 호흡 단축 또는 호흡곤란, 및 폐렴의 증상인 가슴 X-선의 변화. 상기 구현예에 따라, SARS 관련 코로나 바이러스 감염은 하나 이상의 하기 부가적인 증상을 야기하거나 또는 증상과 관련될 수 있다: 두통, 근육경직, 식욕감소, 권태감, 혼돈, 발진 및 설사.

본 발명은 또한 SARS 관련 코로나 바이러스 감염 이외의, 또는 부가하여 다른 바이러스 감염의 예방, 치료, 관리 또는 경감을 위한 글리시르히진에 의한 치료법을 제공한다. 특정의 더욱 구체적인 구현예에서, 본 발명은 하기에 제한되지 않는 바이러스의 감염의 예방, 치료, 관리 또는 경감을 위한 글리시르히진에 의한 치료법을 제공한다: DNA 바이러스, 예를 들면, B형 간염 및 C형 간염 바이러스; 파보바이러스, 예를 들면, 아데노 관련 바이러스 및 사이토메갈로 바이러스; 파포바 바이러스, 예를 들면, 파필로마 바이러스, 폴리오마 바이러스, 및 SV40; 아데노바이러스; 헤르페스 바이러스, 예를 들면, 헤르페스 심플렉스 I형(HSV-I), 헤르페스 심플렉스 II형 (HSV-II), 및 엡스타인-바르 바이러스; 폭스바이러스, 예를 들면, 마마 (천연두) 및 백시니아 바이러스; 및 RNA 바이러스, 예를 들면, 인간 면역결핍 바이러스 I형(HIV-I), 인간 면역결핍 바이러스 II형(HIV-II), 인간 T-세포 림프친화 바이러스 I형(HTLV-I), 인간 T-세포 림프친화 바이러스 II형(HTLV-II), 인플루엔자 바이러스, 홍역 바이러스, 광견병 바이러스, 센다이 바이러스, 피코르나바이러스 예를 들면, 회색질척수염 바이러스, 콕삭키바이러스, 리노바이러스, 레오바이러스, 토가바이러스 예를 들면, 풍진 바이러스 (독일 홍역) 및 셈리키 삼림 바이러스, 아르보바이러스, 및 A형 간염 바이러스. 특정의 더욱 구체적인 구현예에서, 본 발명은 코로나 바이러스 감염, C형 간염 바이러스 감염, 인플루엔자 바이러스 감염 및 서부 나일강 바이러스 감염, 바람직하게는 SARS 관련 코로나 바이러스 감염의 예방, 치료, 관리 또는 경감을 위한 글리시르히진에 의한 치료법을 제공한다.

5.4. 치료 및 예방 방법

5.4.1 SARS 관련 코로나 바이러스 감염

본 발명은 SARS 관련 코로나 바이러스 감염 또는 이의 하나 이상의 증상을 예방, 치료, 관리 또는 경감시키는 방법으로서, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상에게 글리시르히진 또는 이의 유도체를 투여하는 것을 포함한다. 특정 구현예에서, 본 발명은 SARS 관련 코로나 바이러스 감염 또는 이의 하나 이상의 증상을 예방, 치료, 관리 또는 경감시키는 방법으로서, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상에게 예방학적 또는 치료학적 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체를 투여하는 것을 포함한다. SARS 관련 코로나 바이러스의 감염은 당업자에게 공지된 임의의 방법에 의해 진단될 수 있다. 전형적인 방법에 대해, 섹션 5.5, 이하를 참고한다.

본 발명은 SARS 관련 코로나 바이러스 감염 또는 이의 하나 이상의 증상을 예방, 치료, 관리 또는 경감시키는 방법으로서, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상에게 글리시르히진 또는 이의 유도체 및 글리시르히진 또는 이의 유도체 이외의 하나 이상의 예방약 또는 치료약을 투여하는 것을 포함한다. 특정 구현예에서, 본 발명은 SARS 관련 코로나 바이러스 감염 또는 이의 하나 이상의 증상을 예방, 치료, 관리 또는 경감시키는 방법으로서, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상에게 예방학적 또는 치료학적 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체의 투여량 및 글리시르히진 이외의 예방학적 또는 치료학적 유효량의 하나 이상의 예방약 또는 치료약의 투여량을 투여하는 것을 포함한다.

본 발명은 SARS 관련 코로나 바이러스 감염을 예방하는 방법을 제공하는데, 상기 방법은 SARS 관련 코로나 바이러스로 감염될 위험이 있는 대상에게 글리시르히진 또는 이의 유도체를 투여하는 것을 포함한다. 특정 구현예에서, 본 발명은 SARS 관련 코로나 바이러스 감염을 예방하는 방법을 제공하는데, 상기 방법은 SARS 관련 코로나 바이러스로 감염될 위험이 있는 대상에게 예방학적 또는 치료학적 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체의 투여량을 투여하는 것을 포함한다.

본 발명은 SARS 관련 코로나 바이러스 감염을 예방하는 방법을 제공하는데, 상기 방법은 SARS 관련 코로나 바이러스로 감염될 위험이 있는 대상에게 글리시르히진 또는 이의 유도체 및 글리시르히진 또는 이의 유도체 이외의 하나 이상의 예방약 또는 치료약을 투여하는 것을 포함한다. 특정 구현예에서, 본 발명은 SARS 관련 코로나 바이러스 감염을 예방하는 방법을 제공하는데, 상기 방법은 SARS 관련 코로나 바이러스로 감염될 위험이 있는 대상에게 예방학적 또는 치료학적 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체의 투여량, 및 글리시르히진 또는 이의 유도체 이외의 예방학적 또는 치료학적 유효량의 하나 이상의 예방약 또는 치료약의 투여량을 투여하는 것을 포함한다.

본 발명의 복합 치료법의 치료(예를 들면, 예방약 또는 치료약)는 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 본 발명의 복합 치료법은 글리시르히진 또는 이의 유도체 및 글리시르히진 또는 이의 유도체와 상이한 작용 기전을 갖는 하나 이상의 기타 치료법 (예를 들면 , 하나 이상의 기타 예방약 또는 치료약)을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 본 발명의 복합 치료법은 글리시르히진 또는 이의 유도체 및 글리시르히진 또는 이의 유도체와 동일한 작용 기전을 갖는 하나 이상의 기타 치료법 (예를 들면 , 하나 이상의 기타 예방약)을 포함한다. 특정 구현예에서, 본 발명의 복합 치료법은 부가적인 또는 상승 효과를 갖기 위해 글리시르히진 또는 이의 유도체와 함께 기능함으로써 글리시르히진 또는 이의 유도체의 예방 또는 치료 효과(들)을 개선시킨다. 특정 구현예에서, 본 발명의 복합 치료법은 예방약 또는 치료약과 관련된 부작용을 감소시킨다.

상기 복합 치료법의 예방약 또는 치료약은 동일한 약학 조성물에서, 대상, 바람직하게는 인간 대상에게 투여될 수 있다. 대안적인 구현예에서, 상기 복합 치료법의 예방약 또는 치료약은 별개의 약학 조성물로 대상에게 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있다. 상기 예방약 또는 치료약은 동일하거나 또는 상이한 투여 경로에 의해 대상에게 투여될 수 있다.

하나의 구현예에서, 글리시르히진 또는 이의 유도체를 포함하는 약학 조성물은 SARS 관련 코로나 바이러스 또는 이의 하나 이상의 증상을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키기 위해 대상, 바람직하게는 인간에게 투여된다. 또 다른 구현예에서, 글리시르히진 또는 이의 유도체 및 하나 이상의 이의 유도체 및 글리시르히진 또는 이의 유도체 이외의 기타 예방약 또는 치료약을 포함하는 약학 조성물은 SARS 관련 코로나 바이러스 또는 이의 하나 이상의 증상을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키기 위해 대상, 바람직하게는 인간에게 투여된다.

특정 구현예에서, 글리시르히진 또는 이의 유도체는 SARS 또는 SARS 관련 코로나 바이러스 감염의 증상이 나타나기 전에 또는 후에, 또는 SARS 관련 코로나 바이러스 감염의 진단 전에 또는 후에 대상에게 투여된다. 특정 구현예에서, 글리시르히진 또는 이의 유도체는 예를 들면, 대상이 SARS 관련 코로나 바이러스 감염의 증가된 위험에 있을 때, 예를 들면, 대상이 면역손상되거나 또는 면역억제될 때, 또는 SARS 관련 코로나 바이러스 감염의 유행이 있을 때, 또는 대상이 SARS 관련 코로나 바이러스 감염의 더 큰 위험을 갖는 지역에 있거나 또는 여행할 때, 예방적으로 대상에게 투여된다. 기타 구현예에서, 본 발명의 약학 조성물은 SARS 관련 코로나 바이러스 감염의 초기 단계에 대상에게 투여된다. 여전히 기타 구현예에서, 본 발명의 약학 조성물은 예를 들면, 걸린 대상에서 진행성 SARS 관련 코로나 바이러스 감염의 결과를 예방하기 위해 또는 다른 사람에게 바이러스의 전이를 예방하기 위해 SARS 관련 코로나 바이러스 감염의 후기 단계에 대상에게 투여된다.

5.4.2 기타 바이러스 감염

본 발명은 또한 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체를 투여하는 것을 포함하는 바이러스 감염을 치료, 예방, 관리 또는 경감시키는 방법을 제공한다. 기타 구현예에서, 바이러스 감염의 치료, 관리, 경감 또는 예방 방법은 치료를 필요로 하는 환자에게 또 다른 치료법 (예를 들면, 항바이러스제; 섹션 5.2 참고)과 복합하여 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체를 투여하는 것을 포함한다. 기타 구현예에서, 바이러스 감염의 치료, 관리, 경감 또는 예방 방법은 치료를 필요로 하는 환자에게 리바비린과 복합하여 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체를 투여하는 것을 포함한다.

본 발명은 또한 SARS 관련 코로나 바이러스 이외의 기타 바이러스, 예를 들면, 기타 코로나 바이러스, C형 간염 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 및 서부 나일강 바이러스 감염을 치료, 예방, 관리 또는 경감시키는 방법을 제공한다. 본 발명의 특정 구현예에서, C형 간염 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 및 서부 나일강 바이러스의 감염의 치료, 관리, 경감 또는 예방 방법은 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체를 투여하는 것을 포함한다. 기타 구현예에서, C형 간염, 인플루엔자 바이러스, 및 서부 나일강 바이러스의 감염의 치료, 관리, 경감 또는 예방 방법은 치료를 필요로 하는 환자에게 리바비린과 복합하여 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체를 투여하는 것을 포함한다.

C형 간염 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 및 서부 나일강 바이러스에 대한 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 또 다른 치료법 (예를 들면, 리바비린)과 복합된 글리시르히진 또는 유도체의 유효성은 당업자에게 공지된 임의의 동물 모델 시스템을 이용하여 시험될 수 있다. 특정의 더욱 구체적인 구현예에서, C형 간염 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 및 서부 나일강 바이러스에 대한 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 또 다른 치료법 (예를 들면, 리바비린)과 복합된 글리시르히진 또는 유도체의 유효성은 감염된 세포를 상이한 농도의 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 또 다른 치료법 (예를 들면, 리바비린)과 복합된 글리시르히진 또는 유도체로 처리함으로써 시험될 수 있다. 바이러스 감염의 세포병변 효과는 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 또 다른 치료법 (예를 들면, 리바비린; 예를 들면, 섹션 5.6 및 6.1 참고)과 복합된 글리시르히진 또는 유도체의 존재 및 부재하에 측정된다.

특정 구현예에서, 본 발명은 바이러스 감염이 기타 치료에 비반응성인 바이러스 감염의 치료, 예방, 관리, 또는 경감 방법을 제공한다.

C형 간염 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 및 서부 나일강 바이러스에 대한 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 또 다른 치료법 (예를 들면, 리바비린)과 복합된 글리시르히진 또는 유도체의 유효성은 당업자에게 공지된 임의의 동물 모델 시스템을 이용하여 시험될 수 있다. 특정의 더욱 구체적인 구현예에서, C형 간염 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 및 서부 나일강 바이러스에 대한 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 또 다른 치료 (예를 들면, 리바비린)와 복합된 글리시르히진 또는 유도체의 유효성은 감염된 마우스를 상이한 농도의 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 또 다른 치료법 (예를 들면, 리바비린)과 복합된 글리시르히진 또는 이의 유도체로 처리함으로써 시험될 수 있다. 동물에서 바이러스의 증식은 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 또 다른 치료법 (예를 들면, 리바비린; 예를 들면, 섹션 5.6 및 6.1 참고)과 복합된 글리시르히진 또는 유도체의 존재 및 부재하에 측정된다. 더욱 구체적인 구현예에서, BALB/c 마우스는 10(4) 50% 조직 배양 감염량 (TCID50)으로 비강내로 접종된다. 2일 후에, 폐 및 비강 비갑개를 제거하고, -70℃에서 저장한다. 동결된 조직을 조직배양 배지에서 균질화하고, 바이러스 역가를 Vero 세포 단층을 이용하여 측정한다.

특정 구현예에서, 본 발명은 또한 SARS 관련 코로나 바이러스 이외의 기타 코로나 바이러스의 치료, 예방, 경감, 또는 관리 방법을 제공하는데, 상기 방법은 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체를 상기 코로나 바이러스로 감염된 환자에게 투여하는 것을 포함한다.

특정의 더욱 구체적인 구현예에서, 본 발명의 방법은 전염성 위장염 바이러스 (TGEV), 돼지 호흡기성 및 생식성 바이러스, 감염성 기관지염 바이러스, 고양이 코로나 바이러스 (FECV), 및 고양이 감염성 복막염 바이러스 (FIPV)의 감염의 치료, 예방, 경감, 또는 관리하기 위해 이용될 수 있다.

5.4.3. 표적 환자

특정 구현예에서, 본 발명의 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 복합 치료법은 SARS를 갖는 것으로 진단된 대상과 접촉 중이거나 또는 접촉했던 대상에게 투여된다. 특정 구현예에서, 본 발명의 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 복합 치료법은 최근 10일 내에, 최근 15일 내에, 최근 30일 내에, 최근 50일 내에, 최근 75일 내에, 또는 최근 100일 내에 SARS의 케이스를 보고한 지역으로 여행했던 대상에게 투여된다. 상기 지역의 최신 리스트는 세계건강기구의 웹사이트에서 발견될 수 있다.

특정 구현예에서, 본 발명의 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 복합 치료법은 SARS의 특징이 있는 하나 이상의 증상을 갖는 대상에게 투여된다. 상기 증상은 고열 (>38℃), 마른기침, 호흡의 단축 또는 호흡 곤란, 및 폐렴의 증상인 가슴 X-선의 변화를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. SARS와 관련된 부가적인 증상 또는 특징은 두통, 근육경직, 식욕감소, 권태감, 혼돈, 발진 및 설사을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.

특정 구현예에서, 본 발명의 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 복합 치료법은 성인 인간 대상 또는 면역손상된 또는 면역억제된 대상에게 투여된다. 기타 구현예에서, 본 발명의 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 복합 치료법은 유아 인간 대상 또는 공동 가정 또는 기관의 대상에게 투여된다. 여전히 기타 구현예에서, 본 발명의 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 복합 치료법은 0 내지 10세, 10 내지 20세, 30 내지 40세, 40 내지 50세, 50 내지 60세, 60 내지 70세, 70 내지 80세, 80 내지 90세, 90 내지 100세, 100 내지 120세인 대상에게 투여된다.

특정 구현예에서, 본 발명의 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 복합 치료법은 또 다른 바이러스, 바람직하게는 호흡기성 바이러스로 감염된 대상에게 투여된다. 기타 구현예에서, 본 발명의 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 복합 치료법은 이전에 또 다른 호흡기성 바이러스로 감염된 대상에게 투여된다. 여전히 기타 구현예에서, 본 발명의 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 복합 치료법은 폐렴으로 고생 중이거나 또는 이전에 폐렴으로 고생한 대상에게 투여된다.

5.5. 바이러스 감염의 진단

환자로부터 시료(예를 들면, 가래, 점액, 혈청, 코 흡입물, 인후 도찰물, 기관지폐포세척액 또는 기타 유형의 체액)를 수득하고, 바이러스 감염 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스 감염)을 진단하기 위해 바이러스 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스)의 존재에 대해 시험할 수 있다. 특정 구현예에서, 완전한 세포를 포함하는 시료는 직접 진행될 수 있는 반면에, 완전한 세포가 없는 분리물은 먼저 허용 세포주에서 배양되어야 한다. 예시적인 구현예에서, 배양된 세포 현탁액은 예를 들면, 실온에서 5분 동안 300xg에서 원심분리에 이은, 동일한 조건하에 PBS, pH 7.4 세정에 의해 투명하게 되어야 한다. 세포 펠렛을 분석을 위해 작은 부피의 PBS에 재현탁한다. 완전한 세포를 포함하는 일차 임상 분리물은 PBS와 혼합되며, 실온에서 5분 동안 300xg에서 원심분리된다. 점액을 멸균 피펫 팁을 이용하여 경계면으로부터 제거하고, 세포 펠렛을 동일한 조건하에 PBS로 1회 더 세정한다. 펠렛을 이어서 분석을 위해 작은 부피의 PBS에 재현탁한다.

바이러스 감염은 당업자에게 공지된 임의의 방법에 의해 진단될 수 있다. 바이러스 감염 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스 감염)을 진단하는 전형적인 방법은 바이러스 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스)의 뉴클레오티드 서열의 검출, 바이러스의 항원의 검출, 및 바이러스 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스)에 면역특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 단편을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.

SARS 관련 코로나 바이러스의 뉴클레오티드 서열의 예는 본원에 전체적으로 참고로 포함된, Drosten et al. (2003, N Engl J Med 348: 1967-1976; 예를 들면, 도 1 참고)에 기재된다. SARS 관련 코로나 바이러스의 게놈 서열 정보는 일반인이 이용가능하다; SARS 관련 코로나 바이러스의 상이한 분리물의 GenBank 등록 번호에 대해, 예를 들면 표 1을 참고한다. 상기 서열은 National Center for Biotechnology In형성 (NCBI)의 웹페이지로부터 유용하다. 상기 뉴클레오티드 서열은 당업자에게 공지된 임의의 방법, 예를 들면, PCR, RT-PCR 또는 SARS 관련 코로나 바이러스의 뉴클레오티드 서열에 특이적인 프로브를 이용한 노던 블롯 분석에 제한되지 않는 방법에 의해 검출될 수 있다. SARS 관련 코로나 바이러스를 검출하는 특정 프라이머 및 프로토콜은 세계건강기구의 웹페이지 및 독일 함부르크에 있는 열대 의학을 위한 Bernhard Nocht Institute의 웹페이지 상에 기재된다.

바이러스 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스)의 코딩 서열은 바이러스 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스)를 검출하는 항체를 생성하기 위해 이용될 수 있는 바이러스의 단백질, 폴리펩티드 또는 펩티드 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스 단백질, 폴리펩티드 또는 펩티드)를 생성하기 위해 발현될 수 있다. 바이러스 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스 항원)에 면역특이적으로 결합하는 항체는 당업자에게 주지된 기술, 예를 들면 면역분석법 (예를 들면, 면역침전법, 웨스턴 블롯, ELISA 및 유세포분석)을 이용하여 바이러스 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스)를 검출하기 위해 이용될 수 있다.

면역침전법 프로토콜은 일반적으로 단백질 포스파타아제 및/또는 프로테아제 저해제 (예를 들면, EDTA, PMSF, 159 아프로티닌, 소듐 바나데이트)로 보충된 용해 완충액 예를 들면, RIPA 완충액 (1% NP-40 또는 Triton X-100, 1% 소듐 데옥시콜레이트, 0.1% SDS, 0.15 M NaCl, 0.01 M 소듐 포스페이트, pH 7.2, 1% 트라실올)에서 세포 집단을 용해하고, 목적 항체를 세포 용해액에 첨가하고, 4℃에서 일정 시간 (예를 들면, 4 시간 이하) 동안 인큐베이션하고, 단백질 A 및/또는 단백질 G 세파로오스 비드를 세포 용해액에 첨가하고, 약 1시간 이상 동안 4℃에서 인큐베이션하고, 상기 비드를 용해 완충액에서 세정하고, 상기 비드를 SDS/시료 완충액에서 재현탁하는 것을 포함한다. 목적 항체의 특정 항원을 면역침전하는 능력은 예를 들면, 웨스턴 블롯 분석에 의해 평가될 수 있다. 당업자는 항원에 대한 항체의 결합을 증가시키고, 백그라운드를 감소하기 위해 변형될 수 있는 변수(예를 들면, 세포 용해액을 세파로오스 비드로 미리 투명하게 하는 것)에 관하여 인식할 것이다. 면역침전법 프로토콜에 관한 추가의 논의를 위해, 예를 들면, [Ausubel et al., eds., 1994, Current Protocols in Molecular Biology, Vol.1, John Wiley & Sons, Inc., New York at pages 10, 16, 1]을 참고한다.

웨스턴 블롯 분석은 일반적으로 단백질 시료의 제조, 폴리아크릴아미드 겔 (예를 들면, 항원의 분자량에 의존하여 8%-20% SDS-PAGE)에서 단백질 시료의 전기영동, 상기 폴리아크릴아미드 겔에서 막, 예를 들면, 니트로셀룰로오스, PVDF 또는 나일론으로 상기 단백질 시료의 이동, 상기 막을 블록킹 용액(예를 들면, 3% BSA 또는 탈지유를 포함하는 PBS)에서 블록킹, 상기 막을 세정 완충액(예를 들면, PBSTween20)에서 세정하는 단계, 상기 막을 블록킹 완충액에 희석된 1차 항체 (목적 항체)와 함께 인큐베이션하는 단계, 상기 막을 세정 완충액에서 세정하는 단계, 상기 막을 블록킹 완충액에 희석된 효소 기질(예를 들면, 호스래디쉬 퍼옥시다아제 또는 알칼리 포스파타아제) 또는 방사성 분자 (예를 들면, ¹²P 또는 ¹²¹I)와 접합된 2차 항체 (1차 항체를 인식하는 항체, 예를 들면, 항-인간 항체)와 함께 인큐베이션하는 단계, 상기 막을 세정 완충액에서 세정하는 단계, 및 항원의 존재를 검출하는 단계를 포함한다. 당업자는 검출된 신호를 증가시키고, 백그라운드 노이즈를 감소시키기 위해 변형될 수 있는 변수에 관하여 인식할 것이다. 웨스턴 블롯 프로토콜에 관한 추가의 논의를 위해, 예를 들면, [Ausubel et al., eds., 1994, GinTent Protocols in Molecular Biology, Vol. 1, John Wiley & Sons, Inc., New York at 10.8.1]을 참고한다.

ELISA는 항원을 제조하는 단계, 96-웰 미세역가 플레이트의 웰을 상기 항원으로 코팅하는 단계, 상기 웰에 결합하지 않는 항원을 세정하여 제거하는 단계, 검출가능한 화합물, 예를 들면, 효소 기질(예를 들면, 호스래디쉬 퍼옥시다아제 또는 알칼리 포스파타아제)에 접합된 목적 항체를 상기 웰에 첨가하는 단계 및 일정 시간 동안 인큐베이션하는 단계, 결합되지 않는 항체 또는 비특이적으로 결합된 항체를 세정하여 제거하는 단계, 및 웰에 코팅된 항원에 특이적으로 결합된 항체의 존재를 검출하는 단계를 포함한다. ELISA에서, 목적 항체는 검출가능한 화합물에 접합될 필요는 없으며; 대신에, 검출가능한 화합물에 접합된 2차 항체 (목적 항체를 인식함)는 상기 웰에 첨가될 수 있다. 또한, 상기 웰을 상기 항원으로 코팅하는 대신에, 상기 항체가 상기 웰에 코팅될 수 있다. 이 경우에, 검출가능한 분자는 효소 기질 (예를 들면, 호스래디쉬 퍼옥시다아제 또는 알칼리 포스파타아제)에 접합된 항원일 수 있다. 신호 검출 및 ELISA의 기타 변이를 증가시키기 위해 변형될 수 있는 변수는 당업자에게 주지되어 있다. ELISA에 관한 추가의 논의를 위해, 예를 들면, [Ausubel et al., eds, 1994, Current Protocols in Molecular Biology, Vol. I, John Wiley & Sons, Inc., New York at 11.2.1]을 참고한다.

항원에 대한 항체(scFv 또는 항체 단편 또는 이의 변이체를 포함하거나, 또는 택일적으로 항체 단편 또는 이의 변이체로 구성됨)의 결합 친화성 및 항체-항원 상호작용의 오프-레이트(off-rate)는 경쟁 결합 분석에 의해 측정될 수 있다. 경쟁 결합 분석의 일예는 미표지된 항원의 증가하는 양의 존재하에 표지된 항원 (예를 들면, ³H 또는 ¹²¹I)과 목적 항체의 인큐베이션, 및 표지된 항원에 결합된 항체의 검출을 포함하는 방사면역측정법이다.

바이러스 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스)에 면역특이적으로 결합하는 항체의 존재는 대상에서 바이러스 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스)의 존재를 진단하기 위해 대상에서 검출될 수 있다. 당업자에게 공지된 임의의 방법이 바이러스 항원 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스 항원; 면역분석법 예를 들면, ELISA 포함)에 면역특이적으로 결합하는 항체의 존재를 검출하기 위해 이용될 수 있다.

예시적인 구현예에서, SARS 관련 코로나 바이러스 항원은 고체 지지체에 연결된다. 이어서, SARS 관련 코로나 바이러스 항원에 면역특이적으로 결합하는 항체의 존재를 시험하고자 하는 물질을 SARS 관련 코로나 바이러스 항원에 대한 항체의 결합에 도움이 되는 조건하에 고체 지지체와 인큐베이션한다. 이어서, 상기 고체 지지체를 임의의 비특이적으로 결합된 항체를 제거하는 조건하에 세정한다. 세정 단계에 이어, 결합된 항체의 존재는 당업자에게 공지된 임의의 기술을 이용하여 검출될 수 있다. 특정 구현예에서, SARS 관련 코로나 바이러스 항원-항체 복합체를 SARS 관련 코로나 바이러스 항원에 결합된 항체에 대한 검출가능하게 표지된 항체의 결합에 도움이 되는 조건하에, 예를 들면, 대상이 인간이라면, 검출가능하게 표지된 항체는 인간 항체에 대한 것인 대상 종에 의해 생성된 항체를 인식하는 검출가능하게 표지된 항체와 인큐베이션한다.

특정 구현예에서, 상기 검출가능하게 표지된 항체는 효소 활성과 접합된다. 또 다른 구현예에서, 상기 검출가능하게 표지된 항체는 방사성으로 표지된다. SARS 관련 코로나 바이러스 항원-항체-검출가능하게 표지된 항체 복합체를 이어서 세정하고, 상기 검출가능하게 표지된 항체의 존재를 당업자에게 공지된 임의의 기술에 의해 정량하는데, 여기에서 상기 이용된 기술은 검출가능하게 표지된 항체의 표지 유형에 의존한다.

감염의 발생은 당업계에 주지된 임의의 방법에 의해 측정될 수 있는데, 예를 들면, 제한 없이, 임상 시료 (예를 들면, 코 도찰물)는 항-바이러스 항원 항체 (예를 들면, 항-SARS 관련 코로나 바이러스-항원 항체)를 이용하여 면역형광분석법 (IFA)에 의해 바이러스 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스)의 존재에 대해 시험할 수 있다. 기타 구현예에서, 바이러스-특이적인 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스 특이적인) 뉴클레오티드 서열은 당업계에 공지된 임의의 방법에 의해 검출된다. 상기 방법은 PCR, RT-PCR, 및 노던 블롯 혼성화를 포함하나, 이에 제한되지 않는다.

5.6. 생물학적 분석법

본 발명의 치료법 (예를 들면, 예방약 또는 치료약)의 몇 가지 양태는 바람직하게는 인간에 이용하기 전에 원하는 치료 활성을 위해, 시험관 내, 세포 배양물 시스템, 및 동물 모델 생물체, 예를 들면, 설치류 동물 모델 시스템에서 시험된다. 예를 들면, 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 글리시르히진 또는 이의 유도체 및 또 다른 항-바이러스 화합물의 특이적인 복합의 투여가 지시되는지를 결정하기 위해 이용될 수 있는 분석은 환자 조직 시료가 배양물에서 성장하고, 글리시르히진 또는 이의 유도체, 또는 글리시르히진 또는 이의 유도체 및 또 다른 항-바이러스 화합물에 노출되거나 또는 그렇지 않으면 접촉되고, 상기 조직 시료에 대한 물질(들)의 효과가 관찰되는 세포 배양 분석을 포함한다. 상기 조직 시료는 환자로부터 생검에 의해 수득될 수 있다. 상기 시험은 치료학적으로 가장 효과적인 글리시르히진 또는 이의 유도체, 또는 글리시르히진 또는 이의 유도체 및 기타 항-바이러스 화합물의 복합의 확인을 허용한다. 다양한 특이적인 구현예에서, 시험관 내 분석은 특정 바이러스 감염에 관련된 대표적인 세포 또는 세포 유형, 예를 들면, 폐 조직으로부터 수득된 세포를 이용하여 수행될 수 있다.

상기 예방약 또는 치료약은 당업계에 주지된 방법을 이용하여 시험관 내에서 배양된 세포에서 바이러스 복제를 변경하는 능력 (예를 들면, 플라크 형성에 의해 측정됨) 또는 바이러스 단백질의 생성(예를 들면, 웨스턴 블롯 분석, RT-PCR 또는 노던 블롯 분석에 의해 측정됨)에 대해 평가될 수 있다. 당업자에게 공지된 임의의 방법은 세포를 감염시키거나, 세포에서 복제하거나, 또는 숙주에서 증식하는 바이러스 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스)의 능력에 대한 이의 효과에 대해 글리시르히진 및 이의 유도체를 시험하기 위해 이용될 수 있다.

바이러스 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스) 감염된 세포의 생존능은 당업자에게 공지된 임의의 기술에 의해 측정될 수 있다. 특정 구현예에서, 바이러스-감염된 세포의 증식은 바이러스 감염된 세포의 생존능을 결정하기 위해 측정된다. 상이한 세포 유형 (환자 세포 및 세포주 포함)은 상기 분석에 이용될 수 있는데, 예를 들면, 하기에 제한되지 않는다: Vero 세포, HeLa 세포, HeLa, 16HBE14o, HMEC-1, 1301 및 MOLT-4. 상기 세포는 SARS 관련 코로나 바이러스로 감염될 수 있다.

특정 구현예에서, 바이러스 감염된 세포에 대한 글리시르히진 및 이의 유도체의 효과는 상기 바이러스-감염된 세포에 의한 감염성 바이러스 입자의 생성을 측정함으로써 결정된다. 특정 구현예에서, 상기 감염된 세포가 성장하는 배지의 시료는 감염 후 상이한 시간 포인트, 예를 들면, 감염 후 4 시간, 12 시간, 24 시간, 48 시간 및 72 시간에 취해진다. 상층액에서 바이러스의 역가는 TCID₅₀ 시험을 이용하여 측정될 수 있다.

특정 구현예에서, 상기 감염된 세포에 의한 바이러스 단백질의 생성이 측정된다. 바이러스 단백질의 수준은 SDS-PAGE 및 상기 바이러스 단백질에 특이적인 항체를 이용한 이은 웨스턴 블롯 분석에 의해 측정될 수 있다. 바이러스 단백질은 예를 들면 비구조적 단백질, 적혈구응집소-에스테라아제 당단백질, 돌기 당단백질, 작은 막 유전자, 막 당단백질, 및 핵단백질을 포함한다.

본원에 기재된 분석법은 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 글리시르히진 또는 이의 유도체 및 또 다른 항-바이러스 화합물의 조합의 존재 및 부재하에 바이러스의 성장 특성을 결정하기 위해 시간에 따른 바이러스 역가를 분석하기 위해 이용될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 바이러스 역가는 감염된 세포 또는 감염된 대상로부터 시료를 수득하고, 상기 시료의 연속 희석을 제조하고, 감염에 감수성인 세포의 단층을 단일 플라크의 출현을 허용하는 바이러스의 희석으로 바이러스를 감염시킴으로써 측정된다. 상기 플라크를 이어서 카운트하고, 바이러스 역가를 시료의 밀리리터당 플라크 형성 단위로서 표시한다. 본 발명의 특정 구현예에서, 대상에서 본 발명의 바이러스의 성장 속도는 대상에서 바이러스에 대한 항체의 역가에 의해 평가된다. 대상으로부터 시료는 당업자에게 공지된 임의의 방법에 의해 수득될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 시료는 코 흡입물, 인후 도찰물, 가래 또는 기관지폐포세척액으로 구성된다.

특정 구현예에서, 바이러스 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스)로 감염된 세포의 생존은 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 글리시르히진 또는 이의 유도체 및 또 다른 항-바이러스 화합물의 조합의 유효성의 표시이다. 당업계에 주지된 많은 분석법이 세포 생존 및/또는 성장을 평가하기 위해 이용될 수 있는데; 예를 들면, 세포 증식은 브로모데옥시우리딘(BRDU) 혼입(예를 들면, Hoshino et al., 1986, Int. J. Cancer 38, 369; Campana et al., 1988, J. Immunol. Meth. 107: 79 참고) 또는 (³H)-티미딘 혼입 (예를 들면, Chen, J., 1996, Oncogene 13: 1395- 403; Jeoung, J., 1995, J. Biol. Chem. 270: 18367-73 참고)을 측정함으로써, 직접 세포 카운트에 의해, 전사, 번역 또는 공지된 유전자 원종양유전자 (예를 들면, fos, myc) 또는 세포 주기 마커 (Rb, cdc2, 사이클린 A, D1, D2, D3, E 등)의 변화를 검출함으로써 분석될 수 있다. 상기 단백질 및 mRNA의 수준 및 활성은 당업계에 주지된 임의의 방법에 의해 측정될 수 있다. 예를 들면, 단백질은 공지된 면역진단 방법 예를 들면, 시판되는 항체를 이용한 웨스턴 블롯팅 또는 면역침전법에 의해 정량화될 수 있다. mRNA는 당업계에 주지되고, 통상적인 방법, 예를 들면, 노던 분석, RNase 보호, 역전사와 연결된 중합효소 연쇄반응을 이용하여 정량화될 수 있다. 세포 생존능은 당업계에 공지된 트리판-블루 염색법 또는 기타 세포 사멸 또는 생존능 마커를 이용함으로써 평가될 수 있다. 특정 구현예에서, 세포 ATP의 수준은 세포 생존능을 결정하기 위해 측정된다. 분화는 예를 들면, 형태의 변화에 기초하여 가시적으로 평가될 수 있다.

본 발명의 치료법 (특히, 예방약 및/또는 치료약의 복합투여)은 인간에 이용하기 전에 적당한 동물 모델 시스템에서 시험될 수 있다. 상기 동물 모델 시스템은 래트, 마우스, 병아리, 소, 원숭이, 돼지, 개, 토끼 등을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 당업계에 주지된 임의의 동물 시스템이 이용될 수 있다.

상기 동물 시스템은 널리 이용되며, 당업자에게 주지되어 있다. 예방약 및/또는 치료약은 반복하여 투여될 수 있다. 상기 절차의 몇 가지 양태는 변할 수 있다. 상기 양태는 예방약 및/또는 치료약을 투여하는 일시적인 계획을 포함하며, 상기 물질은 별도로 또는 혼합물로서 투여된다.

글리시르히진의 항바이러스 효과를 시험하기 위한 예시적인 동물 모델 시스템은 본원에 전체적으로 포함되는, [Utsunomiya et al., 1996, Antimicrobial Agents and Chemotherapy 41 (3):551-556 (예를 들면, 재료 및 방법에서)]에 기재된다. 동물 모델 시스템에서 화합물의 항바이러스 효과는 변수 예를 들면, 생존율, 감염된 동물 유래의 시료에서 바이러스 역가, 동물에서 세포, 조직 및/또는 기관에 대한 바이러스-감염의 병리학적 효과에 기초하여 측정될 수 있다. 대조군은 바이러스로 감염되지 않은 동물 및/또는 글리시르히진 또는 이의 유도체로 처리되지 않는 동물을 포함한다.

상기 치료법 (예를 들면, 예방약 또는 치료약)은 생체 내에서 바이러스 감염 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스 감염)을 저해 또는 감소시키는 이의 능력에 대해 평가될 수 있다. 예를 들면, 상기 예방약 또는 치료약은 시험 동물, 바람직하게는 SARS 관련 코로나 바이러스에 노출된 시험 동물에 투여될 수 있으며, 상기 시험 동물은 이어서 바이러스 역가, 상기 바이러스에 대한 항체, 상기 바이러스의 단백질 또는 핵산, 또는 임의의 SARS 관련 증상에 대해 조사한다.

본 발명의 예방 및/또는 치료 프로토콜의 독성 및/또는 효능은 예를 들면, LD₅₀ (집단의 50%에 치명적인 투여량) 및 ED₅₀ (집단의 50%에 치료학적으로 효과적인 투여량)을 측정하기 위해 세포 배양물 또는 실험 동물에서 표준 약학 절차에 의해 측정될 수 있다. 독성 및 치료 효과 사이의 투여비는 치료 지수이며, 이는 비율 LD₅₀/ED₅₀로서 표시될 수 있다.

세포 배양 분석 및 동물 연구로부터 수득된 데이타는 인간에서 이용하기 위한 예방약 또는 치료약의 투여량의 범위를 제제화하는데 이용될 수 있다. 상기 물질의 투여량은 바람직하게는 거의 또는 전혀 독성이 없는 ED₅₀를 포함하는 순환 농도의 범위 내에 있다. 상기 투여량은 이용된 투여 형태 및 이용된 투여 경로에 의존하여 상기 범위 내에서 변할 수 있다. 본 발명의 방법에 이용된 임의의 물질에 대해, 치료학적으로 효과적인 투여량은 세포 배양 분석으로부터 초기에 평가될 수 있다. 투여는 세포 배양물에서 측정된 IC₅₀ (즉, 증상의 반-최대 저해를 달성하는 시험 화합물의 농도)을 포함하는 순환 혈장 농도 범위를 달성하기 위해 동물 모델에서 제제화될 수 있다. 상기 정보는 인간에서 유용한 투여량을 더욱 정확하게 측정하기 위해 이용될 수 있다. 혈장에서 수준은 예를 들면, 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 및 방사선면역분석법 (RIA)에 의해 측정될 수 있다. 예방약 또는 치료약의 약동학은 예를 들면, 변수 예를 들면, 피크 혈장 수준(C_max), 곡선하의 면적 (시간에 따른 물질의 혈장 농도를 플롯팅함으로써 측정되며, 생체이용율을 반영하는 AUC), 상기 화합물의 반감기 (t₁ _/2), 및 최대 농도의 시간을 측정함으로써 결정될 수 있다.

또한, 당업자에게 공지된 임의의 분석법이 본원에 개시된 바이러스 감염 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스 감염)에 대한 본 발명의 치료법의 예방 및/또는 치료 유용성을 평가하기 위해 이용될 수 있다.

5.7. 투여 방법

본 발명은 바이러스 감염 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스 감염) 또는 이의 하나 이상의 증상의 예방, 치료, 관리, 및 경감 방법을 제공한다. 특정 구현예에서, 조성물은 글리시르히진 또는 이의 유도체를 포함한다. 또 다른 구현예에서, 조성물은 글리시르히진 또는 이의 유도체 및 글리시르히진 또는 이의 유도체 이외의 하나 이상의 예방약 또는 치료약을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 조성물은 글리시르히진 또는 이의 유도체 및 하나 이상의 항바이러스제를 포함한다. 또 다른 구현예에서, 조성물은 글리시르히진 또는 이의 유도체 및 리바비린을 포함한다. 상기 구현예에 따라, 상기 조성물은 추가로 담체를 포함할 수 있다.

본 발명의 조성물은 단위 투여 형태의 제조시 이용될 수 있는 약학 조성물 (예를 들면, 불순 또는 비멸균 조성물) 및 약학 조성물(즉, 대상 또는 환자에게 투여하기에 적합한 조성물)의 제조시 유용한 벌크 약물 조성물을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 상기 조성물은 본원에 개시된 예방학적 또는 치료학적 유효량의 예방약 및/또는 치료약 또는 상기 물질 및 약학적으로 허용가능한 담체의 조합을 포함한다. 바람직하게는, 본 발명의 조성물은 약학 조성물이며, 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체, 약학적으로 허용가능한 담체, 및 임의로 유효량의 또 다른 예방약 또는 치료약을 포함한다.

특정 구현예에서, 용어 "약학적으로 허용가능한"은 연방 또는 주 정부의 관리 기관에 의해 인정되거나 또는 미국 약전, 유럽 약전, 또는 동물, 더욱 구체적으로 인간에 이용하기 위해 기타 일반적으로 인정된 약전에 열거된 것을 의미한다. 용어 "담체"는 희석제, 보조제 (예를 들면, Freund's 보조제 (완전 및 불완전)), 부형제, 또는 상기 치료가 포함되거나 또는 투여되는 운반체를 말한다. 상기 약학적 담체는 멸균 액체, 예를 들면, 물 및 석유, 동물, 식물성 또는 합성 기원, 예를 들면, 땅콩유, 대두유, 미네랄 오일, 참깨유 등을 포함하는 오일일 수 있다. 물은 상기 약학 조성물이 정맥내로 투여될 때 바람직한 담체이다. 염 용액 및 수성 덱스트로오스 및 글리세롤 용액은 또한 액체 담체, 특히 주사용액으로서 이용될 수 있다. 적당한 약학 부형제는 전분, 글루코오스, 락토오스, 수크로오스, 젤라틴, 맥아, 쌀, 밀가루, 분필, 실리카 겔, 소듐 스테아레이트, 글리세롤 모노스테아레이트, 활석, 염화나트륨, 건조된 탈지유, 글리세롤, 프로필렌, 글리콜, 물, 에탄올 등을 포함한다. 원한다면, 상기 조성물은 또한 미량의 습윤제 또는 유화제, 또는 pH 완충제를 포함할 수 있다. 상기 조성물은 용액, 현탁액, 에멀션, 정제, 환, 캡슐, 분말, 서방성 제형물 등의 형태를 취할 수 있다.

일반적으로, 본 발명의 조성물의 성분은 단위 투여 형태, 예를 들면, 밀폐 기밀 용기 예를 들면, 활성 물질의 양을 나타내는 앰퓰 또는 향주머니에서 건조 동결건조된 분말 또는 무수 농축액으로 별도로 또는 함께 혼합되어 제공된다. 상기 조성물이 주입에 의해 투여되는 경우에, 멸균 약학 등급 물 또는 염수를 포함하는 주입 병을 이용하여 분배될 수 있다. 상기 조성물이 주사에 의해 투여되는 경우에, 주사용 멸균수 또는 염수의 앰퓰이 성분이 투여 되기 전에 혼합될 수 있도록 제공될 수 있다.

본 발명의 조성물은 중성 또는 염 형태로 제제화될 수 있다. 약학적으로 허용가능한 염은 음이온을 이용하여 형성된 것, 예를 들면, 염산, 인산, 아세트산, 옥살산, 타르타르산, 부티르산 등으로부터 유래된 것, 및 양이온을 이용하여 형성된 것, 나트륨, 칼륨, 암모늄, 칼슘, 수산화제2철, 이소프로필아민, 트리에틸아민, 2-에틸아미노 에탄올, 히스티딘, 프로카인 등으로부터 유래된 것을 포함한다.

다양한 전달 시스템이 공지되어 있으며, 호흡기 증상 (바람직하게는, 바이러스 호흡기성 감염 및 가장 바람직하게는, SARS 관련 코로나 바이러스 감염) 또는 이의 하나 이상의 증상, 예를 들면, 리포좀, 마이크로입자, 마이크로캡슐에서 캡슐화, 항체 또는 항체 단편을 발현할 수 있는 재조합 세포, 수용체 매개 세포내이입(예를 들면, Wu and Wu, J. Biol. Chem. 262: 4429-4432 (1987) 참고), 레트로바이러스 또는 기타 벡터의 부분으로서 핵산의 구축 등을 예방, 관리, 치료, 또는 경감시키는데 유용한 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 글리시르히진 또는 이의 유도체 및 글리시르히진 또는 이의 유도체 이외의 예방약 또는 치료약의 조합을 투여하기 위해 이용될 수 있다. 본 발명의 예방약 또는 치료약의 투여 방법은 비경구적 투여 (예를 들면, 진피내, 근육내, 복강내, 정맥내 및 피하), 경막외(epidurala) 투여, 종양내 투여, 및 점막 투여 (예를 들면, 비강내 및 경구 경로)를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 게다가, 폐 투여는 예를 들면, 흡입기 또는 분무기, 및 에어로졸화제를 이용한 제형의 이용에 의해 이용될 수 있다. 예를 들면, 이의 각각이 전체적으로 본원에 참고로 포함된, 미국 특허 제6,019,968호, 제5,985,320호, 제5,985,309호, 제5,934,272호, 제5,874,064호, 제5,855,913호, 제5,290,540호, 및 제4,880,078호; 및 PCT 공개 WO 92/19244, WO 97/32572, WO 97/44013, WO 98/31346, 및 WO 99/66903을 참고한다. 하나의 구현예에서, 본 발명의 글리시르히진 또는 이의 유도체, 복합 치료법, 또는 조성물은 Alkermes AIR^TM 폐 약물 전달 기술(Alkermes, Inc., Cambridge, MA)을 이용하여 투여된다. 특정 구현예에서, 본 발명의 예방약 또는 치료약은 근육내로, 정맥내로, 종양내로, 경구로, 비강내로, 폐, 또는 피하로 투여된다. 상기 예방약 또는 치료약은 임의의 편리한 경로, 예를 들면 주입 또는 일시주사에 의해, 상피 또는 점막피부 내층을 통한 흡수에 의해 (예를 들면, 경구 점막층, 직장 및 창자점막층 등) 투여될 수 있으며, 기타 생물학적으로 활성 물질과 함께 투여될 수 있다. 투여는 전신성 또는 국부적일 수 있다.

특정 구현예에서, 본 발명의 예방약 또는 치료약을 치료를 필요로 하는 부위에 국부적으로 투여하는 것이 바람직할 수 있으며; 이는 예를 들면, 제한 없이, 국부 주입, 주사에 의해, 또는 임플란트를 통해 달성될 수 있으며, 상기 임플란트는 막 및 기질, 예를 들면, 시알라스틱 막, 중합체, 섬유성 기질 (예를 들면, Tissuel

), 또는 콜라겐 기질을 포함하는 다공성 또는 비다공성 물질이다. 하나의 구현예에서, 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체는 SARS 관련 코로나 바이러스 감염 또는 이의 증상을 예방, 치료, 관리, 및/또는 경감시키기 위해 대상에게 병 걸린 부위에 국소적으로 투여된다.

또 다른 구현예에서, 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체는 SARS 관련 코로나 바이러스 또는 이의 하나 이상의 증상을 예방, 치료, 관리, 및/또는 경감시키기 위해 대상에게 글리시르히진 또는 이의 유도체 이외의 유효량의 하나 이상의 치료법 (예를 들면, 하나 이상의 예방약 또는 치료약)와 복합하여 병 걸린 부위에 국소적으로 투여된다.

상기 예방약 또는 치료약은 조절된 방출 또는 지속된 방출 시스템으로 전달될 수 있다. 조절된 방출 약학 제품의 목적은 이용된 약물의 양 및 상기 증상을 치료 또는 제어하는 시간을 최소화하면서 약물 치료법의 이점을 최대화하는 것이다. 조절된 방출 제형물의 이점은 약물의 연장된 활성, 감소된 투여 빈도 및 치료된 대상에 의한 경감된 순응도를 포함한다. 게다가, 조절된 방출 제형물은 작용 개시에 필요한 시간 및 기타 특성 예를 들면, 약물의 혈중 수준에 영향을 주므로, 부작용의 발생에 대해 일부 제어를 제공한다.

가장 조절된 방출 제형물은 원하는 효과를 신속하게 생성하는 양으로 초기에 약제를 방출한 후, 연장된 기간에 걸쳐 원하는 효과를 계속하기에 충분한 양으로 기타 성분을 점차적으로 및 연속적으로 방출하도록 디자인된다. 연속된 치료 및 예방 효과를 유지하기 위해, 상기 약물은 대사되고, 신체로부터 배출되는 약물의 양을 대체할 속도로 투여 형태로부터 방출되어야 한다. 약제의 조절된 방출은 pH, 온도, 효소, 물, 또는 기타 생리적 조건 또는 화합물을 포함하나, 이에 제한되지 않는 다양한 조건에 의해 촉진될 수 있다.

하나의 구현예에서, 펌프가 조절된 또는 지속된 방출을 달성하기 위해 이용될 수 있다 (Langer, 이하 동일; Sefton, 1987, CRC Crit. Ref. Biomed. Eng. 14: 20; Buchwald et al., 1980, Surgery 88: 507; Saudek et al., 1989, N. Engl. J. Med. 321: 574). 또 다른 구현예에서, 중합체성 물질은 본 발명의 치료법의 조절된 또는 지속된 방출을 달성하기 위해 이용될 수 있다 (예를 들면, Medical Applications of Controlled Release, Langer and Wise (eds.), CRC Pres., Boca Raton, Florida (1974); Controlled Drug Bioavailability, Drug Product Design and Performance, Smolen and Ball (eds.), Wiley, New York (1984); Ranger and Peppas, 1983, J., Macromol. Sci. Rev. Macromol. Chem. 23: 61 참고; 또한 Levy et al., 1985, Science 228: 190; During et al., 1989, Ann. Neurol. 25: 351; Howard et al., 1989, J. Neurosurg. 7 1: 105 참고); 미국 특허 제5,679,377호; 미국 특허 제5,916,597호; 미국 특허 제5,912,015호; 미국 특허 제5,989,463호; 미국 특허 제5,128,326호; PCT 공개 WO 99/15154; 및 PCT 공개 WO 99/20253. 지속된 방출 제형물에 이용된 중합체의 예는 폴리(2-히드록시 에틸 메타크릴레이트), 폴리(메틸 메타크릴레이트), 폴리(아크릴산), 폴리(에틸렌-co-비닐 아세테이트), 폴리(메타크릴산), 폴리글리콜리드 (PLG), 폴리안히드리드, 폴리(N-비닐 피롤리돈), 폴리(비닐 알코올), 폴리아크릴아미드, 폴리(에틸렌 글리콜), 폴리락티드 (PLA), 폴리(락티드-co-글리콜리드) (PLGA), 및 폴리오르토에스테르를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 바람직한 구현예에서, 지속된 방출 제형물에 이용된 중합체는 불활성이며, 삼출가능한 불순물이 없으며, 저장시 안정하며, 멸균이며, 생분해성이다. 여전히 또 다른 구현예에서, 조절된 또는 지속된 방출 시스템은 예방 또는 치료 표적의 근처에 위치할 수 있으므로, 전신성 투여량의 단지 분획을 요구한다 (예를 들면, Goodson, in Medical Applications of Controlled Release, supra, vol. 2, pp. 115-138 (1984) 참고).

조절된 방출 시스템은 [Langer (1990, Science 249: 1527-1533)]에 의한 검토에서 논의된다. 당업자에게 공지된 임의의 기술이 본 발명의 하나 이상의 치료약을 포함하는 지속된 방출 제형물을 제조하기 위해 이용될 수 있다. 예를 들면, 이의 각각이 본원에 전체적으로 참고로 포함된 미국 특허 제4,526,938호, PCT 공개 WO 91/05548, PCT 공개 WO 96/20698, Ning et al., 1996, "Intratumoral Radioimmunotheraphy of a Human Colon Cancer Xenograft Using a Sustained-Release Gel, "Radiotherapy & Oncology 39: 179-189, Song et al., 1995, "Antibody Mediated Lung targeting of Long-Circulating Emulsions," PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 50: 372-397, Cleek et al., 1997, "Biodegradable Polymeric Carriers for a bFGF Antibody for Cardiovascular Application," Pro. Int'l. Symp. Control. Rel. Bioact. Mater. 24: 853-854, and Lam et al., 1997, "Microencapsulation of Recombinant Humanized Monoclonal Antibody for Local Delivery," Proc. Int'l. Symp. Control Rel. Bioact. Mater. 24: 759-760 를 참고한다.

특정 구현예에서, 본 발명의 조성물이 예방약 또는 치료약을 코딩하는 핵산인 경우에, 상기 핵산은 적당한 핵산 발현 벡터의 부분으로서 구축하고, 이를 세포내가 되도록 투여함으로써, 예를 들면, 레트로바이러스 벡터의 이용에 의해(미국 특허 제4,980,286호 참고), 직접 주사에 의해, 또는 미세입자 충격의 이용에 의해 (예를 들면, 유전자총; Biolistic, Dupont), 또는 지질 또는 세포-표면 수용체 또는 트랜스펙션 물질로 코팅함으로써, 또는 핵에 들어가는 것으로 알려진 호메오박스 유사 펩티드에 연결하여 투여함으로써(예를 들면, Joliot et al., 1991, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88: 1864-1868) 이의 코딩된 예방약 또는 치료약의 발현을 촉진하기 위해 생체 내에서 투여될 수 있다. 택일적으로, 핵산은 상동 재조합에 의한 발현을 위해 세포내로 도입되어, 숙주 세포 DNA 내에 혼입될 수 있다.

본 발명의 약학 조성물은 이의 의도한 투여 경로와 양립되도록 제제화된다. 투여 경로의 예는 비경구적, 예를 들면, 정맥내, 진피내, 피하, 경구, 비강내 (예를 들면, 흡입), 경피 (예를 들면, 국부), 경점막, 및 직장 투여를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 특정 구현예에서, 상기 조성물은 인간에 정맥내, 피하, 근육내, 경구, 비강내, 또는 국부 투여에 적당한 약학 조성물로서 통상의 절차에 따라 제제화된다. 전형적으로, 정맥내 투여를 위한 조성물은 멸균 등장 수성 완충액 중의 용액이다. 필요시, 상기 조성물은 또한 가용화제 및 국부 마취제, 예를 들면, 주사 자리에서 통증을 완화하기 위한 리그노캄(lignocamne)을 포함할 수 있다.

본 발명의 조성물이 국부로 투여되고자 한다면, 상기 조성물은 연고, 크림, 경피 패치, 로션, 겔, 샴푸, 스프레이, 에어로졸, 용액, 에멀션 형태, 또는 당업자에게 주지된 기타 형태로 제제화될 수 있다. 예를 들면, [Remington's Pharmaceutical Sciences and Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, 19th ed., Mack Pub. Co., Easton, PA (1995)] 참고. 비스프레이성 국부 투여 형태를 위해, 국부 적용과 상용성이며, 바람직하게는 물보다 큰 역학점도를 갖는 담체 또는 하나 이상의 부형제를 포함하는 점성 내지 반고체 또는 고체 형태가 전형적으로 이용된다. 적당한 제형물은 다양한 특성, 예를 들면, 삼투압에 영향을 주기 위해 원한다면, 멸균되거나 또는 보조제(예를 들면, 보존제, 안정제, 습윤제, 완충액, 또는 염)와 혼합된 용액, 현탁액, 에멀션, 크림, 연고, 분말, 도찰제, 고약 등을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 기타 적합한 국소 투여 형태는 바람직하게는 고체 또는 액체 불활성 담체와 조합된 활성 성분이 가압된 휘발성 물질과 혼합물(예를 들면, 기체 분사제, 예를 들면, 프레온) 또는 짜내는 병에 포장되는 스프레이성 에어로졸 제제를 포함한다. 보습제 또는 습윤제가 또한 원한다면 약학 조성물 및 투여 형태에 첨가될 수 있다. 상기 부가적인 성분의 예는 당업계에 주지되어 있다.

본 발명의 방법이 조성물의 비강내 투여를 포함한다면, 상기 조성물은 에어로졸 형태, 스프레이, 분무 또는 드롭 형태로 제제화될 수 있다. 특히, 본 발명에 따라 이용하기 위한 예방약 또는 치료약은 적당한 분사제 (예를 들면, 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 또는 기타 적당한 기체)의 이용과 함께, 가압된 팩 또는 분무기로부터 에어로졸 스프레이 제공의 형태로 편리하게 전달될 수 있다. 가압된 에어로졸의 경우에, 상기 투여 단위는 측정된 양을 전달하기 위해 밸브를 제공함으로써 결정될 수 있다. 흡입기 또는 취입기에 이용하기 위한 캡슐 및 카트리지 (예를 들면, 젤라틴으로 구성됨)는 화합물의 분말 믹스 및 적당한 분말 기재 예를 들면, 락토오스 또는 전분을 포함하여 제제화될 수 있다.

본 발명의 방법이 경구 투여를 포함한다면, 조성물은 정제, 캡슐, 교갑(cachet), 겔캡, 용액, 현탁액 등의 형태로 경구로 제제화될 수 있다. 정제 또는 캡슐은 약학적으로 허용가능한 부형제 예를 들면, 결합제 (예를 들면, 미리젤라틴화된 옥수수 전분, 폴리비닐피롤리돈, 또는 히드록시프로필 메틸셀룰로오스); 충전제 (예를 들면, 락토오스, 미세결정성 셀룰로오스, 또는 칼슘 히드로겐 포스페이트); 윤활제 (예를 들면, 마그네슘 스테아레이트, 활석, 또는 실리카); 붕해제 (예를 들면, 감자 전분 또는 소듐 전분 글리콜레이트); 또는 습윤제 (예를 들면, 소듐 라우릴 설페이트)를 이용하여 통상적인 수단에 의해 제조될 수 있다. 상기 정제는 당업계에 주지된 방법에 의해 코팅될 수 있다. 경구 투여용 액체 제제는 제한되지 않고, 용액, 시럽 또는 현탁액의 형태를 취할 수 있거나, 또는 사용 전에 물 또는 기타 적당한 운반체와 구성을 위해 건조 제품으로서 제공될 수 있다. 상기 액체 제제는 약학적으로 허용가능한 첨가제 예를 들면, 현탁제 (예를 들면, 소르비톨 시럽, 셀룰로오스 유도체, 또는 수소화된 식용지방); 유화제 (예를 들면, 레시틴 또는 아카시아); 비수성 운반체 (예를 들면, 아몬드 오일, 오일성 에스테르, 에틸 알코올, 또는 분획화된 식물성 오일); 및 보존제 (예를 들면, 메틸 또는 프로필-p-히드록시벤조에이트 또는 소르브산)를 이용하여 통상적인 수단에 의해 제조될 수 있다. 상기 제제는 또한 적당하게 완충액 염, 풍미제, 착색제, 및 감미제를 포함할 수 있다. 경구 투여용 제제는 예방약 또는 치료약(들)의 서방성, 조절된 방출, 또는 지속된 방출을 위해 적당하게 제제화될 수 있다.

본 발명의 방법은 에어로졸화제를 이용하여 제제화된 조성물의 흡입기 또는 분무기의 이용에 의한 폐 투여를 포함할 수 있다. 예를 들면, 이의 각각이 본원에 전체적으로 참고로 포함된, 미국 특허 제6,019,968호, 제5,985,320호, 제5,985,309호, 제5,934,272호, 제5,874,064호, 제5,855,913호, 제5,290,540호, 및 제4,880,078호; 및 PCT 공개 WO 92/19244, WO 97/32572, WO 97/44013, WO 98/31346, 및 WO 99/66903을 참고한다. 특정 구현예에서, 본 발명의 글리시르히진 또는 이의 유도체, 복합 치료법, 및/또는 조성물은 Alkermes AIR^TM 폐 약물 전달 기술(Alkermes, Inc., Cambridge, MA)을 이용하여 투여된다.

본 발명의 방법은 주사에 의한 (예를 들면, 일시주사 또는 연속적 주입에 의한) 비경구적 투여를 위해 제제화된 조성물의 투여를 포함할 수 있다. 주사용 제형물은 첨가된 보존제와 함께 단위 투여 형태 (예를 들면, 앰퓰 또는 다중 투여 용기로)로 제공될 수 있다. 상기 조성물은 오일성 또는 수성 운반체에 현탁액, 용액 또는 에멀션과 같은 형태를 취할 수 있으며, 제제화제, 예를 들면, 현탁제, 안정화제 및/또는 분산제를 포함할 수 있다. 택일적으로, 활성 성분은 사용 전에 적당한 운반체 (예를 들면, 멸균 발열 물질이 없는 물)를 이용한 구성을 위해 분말 형태일 수 있다.

본 발명의 비경구적 투여 형태를 제공하기 위해 이용될 수 있는 적당한 운반체는 당업자에게 주지되어 있다. 특정 구현예에서, 비경구적 투여 형태용 적당한 운반체는 주사용 물 USP; 염화나트륨 주사, 링거 주사, 덱스트로오스 주사, 덱스트로오스 및 염화나트륨 주사 및 수유된 링거 주사를 포함하나, 이에 제한되지 않는 수성 운반체; 에틸 알코올, 폴리에틸렌 글리콜 및 폴리프로필렌 글리콜을 포함하나, 이에 제한되지 않는 수-혼화성 운반체; 및 옥수수 오일, 면실 오일, 땅콩 오일, 참깨 오일, 에틸 올레에이트, 이소프로필 미리스테이트 및 벤질 벤조에이트를 포함하나, 이에 제한되지 않는 비수성 운반체를 포함하나, 이에 제한되지 않는다.

기타 구현예에서, 예방약 또는 치료약의 용해도를 증가시키는 화합물은 비경구적 투여 형태 내로 혼입된다. 예를 들면, 시클로덱스트린 및 이의 유도체는 탈리도미드 유사체 및 이의 유도체의 용해도를 증가시키기 위해 이용될 수 있다. 예를 들면, 본원에 참고로 포함된 미국 특허 제5,134,127호를 참고한다. 본 발명의 방법은 저장 제제로서 제제화된 조성물의 투여를 부가적으로 포함할 수 있다. 상기 장기간 작용하는 제형물은 이식에 의해 (예를 들면, 피하로 또는 근육내로) 또는 근육내 주사에 의해 투여될 수 있다. 그리하여, 예를 들면, 상기 조성물은 적당한 중합체성 또는 소수성 물질 (예를 들면, 허용가능한 오일 중에 에멀션으로서) 또는 이온교환수지를 이용하여, 또는 빈약하게 가용성인 유도체 (예를 들면, 빈약하게 가용성인 염으로서)로서 제제화될 수 있다.

본 발명의 방법은 중성 또는 염 형태로서 제제화된 조성물의 투여를 포함한다. 약학적으로 허용가능한 염은 음이온을 이용하여 형성된 것, 예를 들면, 염산, 인산, 아세트산, 옥살산, 타르타르산, 부티르산 등으로부터 유래된 것, 및 양이온을 이용하여 형성된 것, 나트륨, 칼륨, 암모늄, 칼슘, 수산화제2철, 이소프로필아민, 트리에틸아민, 2-에틸아미노 에탄올, 히스티딘, 프로카인 등으로부터 유래된 것을 포함한다.

일반적으로, 조성물의 성분은 별도로 또는 단위 투여 형태, 예를 들면, 밀폐된 기밀 용기 예를 들면, 활성 물질의 양을 표시하는 앰퓰 또는 향주머니에서 건조 동결건조 분말 또는 무수 농축액으로 혼합된다. 투여 방식이 주입인 경우에, 조성물은 멸균 약학 등급 물 또는 염수를 포함하는 주입 병을 이용하여 분배될 수 있다. 투여 방식이 주사에 의한 경우에, 주사용 멸균수 또는 염수가 성분이 투여 전에 혼합될 수 있도록 제공될 수 있다.

특히, 본 발명은 본 발명의 하나 이상의 예방약 또는 치료약, 또는 약학 조성물이 밀폐된 기밀 용기 예를 들면, 물질의 양을 표시하는 앰퓰 또는 향주머니에 패키지되는 것을 제공한다. 하나의 구현예에서, 본 발명의 하나 이상의 예방약 또는 치료약, 또는 약학 조성물은 밀폐된 기밀 용기에서 건조 멸균된 동결건조 분말 또는 무수 농축액으로서 제공되며, 대상에 투여하기 위한 적당한 농도로 재구성될 수 있다 (예를 들면, 물 또는 염수 이용).

상기 조성물은 원한다면, 활성 물질을 포함하는 하나 이상의 단위 투여 형태를 포함할 수 있는 팩 또는 디스펜서 장치에 제공될 수 있다. 상기 팩은 예를 들면, 금속 또는 플라스틱 호일, 예를 들면, 기포 팩을 포함할 수 있다. 상기 팩 또는 디스펜서 장치는 투여 설명서를 첨부할 수 있다.

일반적으로, 본 발명의 조성물의 성분은 상기 조성물의 수용자와 동일한 종 기원 또는 종 반응성인 대상으로부터 유래된다. 그리하여, 바람직한 구현예에서, 인간 또는 인간화된 항체는 치료 또는 예방을 위해 인간 환자에게 투여된다.

5.8. 투여량 및 빈도

바이러스 감염 (예를 들면, SARS 관련 코로나 바이러스 감염) 또는 이의 하나 이상의 증상의 예방, 치료, 관리 또는 경감에 효과적인 예방학적 또는 치료학적 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체는 표준 임상 기술에 의해 결정될 수 있다. 투여량, 투여 빈도, 또는 양자는 환자의 나이, 환자의 체중, 환자의 반응, 환자의 상태의 심각성, 및 환자의 과거 병력뿐만 아니라 예방약 또는 치료약의 투여 경로, 약동학 및 약역학 효과에 의존할 것이며, 의사의 판단 및 각 환자의 환경에 따라 결정되어야 한다. 효과적인 투여량은 시험관 내 또는 동물 모델 시험 시스템으로부터 유래된 투여량-반응 곡선으로부터 외삽될 수 있다 (섹션 5.6, 하기 참고).

글리시르히진 또는 이의 유도체의 전형적인 투여량은 대상 또는 시료 중량의 킬로그램당 밀리그램 또는 마이크로그램 양의 글리시르히진 또는 이의 유도체를 포함한다 (예를 들면, 킬로그램당 약 1 마이크로그램 내지 킬로그램당 약 500 밀리그램, 킬로그램당 약 100 마이크로그램 내지 킬로그램당 약 5 밀리그램, 또는 킬로그램당 약 1 마이크로그램 내지 킬로그램당 약 50 마이크로그램). 특정 구현예에서, 글리시르히진 또는 이의 유도체의 1일 투여량은 50 mg, 75 mg, 100 mg, 150 mg, 250 mg, 500 mg, 750 mg 이상, 또는 1 g 이상이다.

하나의 구현예에서, 바이러스 감염 또는 이의 하나 이상의 증상의 예방, 치료, 관리 또는 경감에 이용하기 위한 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 글리시르히진 또는 이의 유도체를 포함하는 조성물의 투여량은 0.01 내지 5000 mM, 1 내지 300 mM, 10 내지 100 mM 및 10 mM 내지 1 M의 농도이다. 또 다른 구현예에서, 바이러스 감염 또는 이의 하나 이상의 증상의 예방, 치료, 관리 또는 경감에 이용하기 위한 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 글리시르히진 또는 이의 유도체를 포함하는 조성물의 투여량은 5μM 이상, 10μM 이상, 50μM 이상, 100μM 이상, 500μM 이상, 1mM 이상, 5mM 이상, 10mM 이상, 50mM 이상, 100mM 이상, 또는 500mM 이상의 농도이다.

하나의 구현예에서, SARS 관련 코로나 바이러스 감염 또는 이의 하나 이상의 증상의 예방, 치료, 관리 또는 경감에 이용하기 위한 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 글리시르히진 또는 이의 유도체를 포함하는 조성물의 투여량은 0.01 내지 5000 mM, 1 내지 300 mM, 10 내지 100 mM 및 10 mM 내지 1 M의 농도이다. 또 다른 구현예에서, SARS 관련 코로나 바이러스 감염 또는 이의 하나 이상의 증상의 예방, 치료, 관리 또는 경감에 이용하기 위한 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 글리시르히진 또는 이의 유도체를 포함하는 조성물의 투여량은 5μM 이상, 10μM 이상, 50μM 이상, 100μM 이상, 500μM 이상, 1mM 이상, 5mM 이상, 10mM 이상, 50mM 이상, 100mM 이상, 또는 500mM 이상의 농도이다.

특정 구현예에서, 환자에서 SARS 관련 코로나 바이러스 감염 또는 이의 하나 이상의 증상의 예방, 치료, 관리 또는 경감에 이용하기 위한 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 글리시르히진 또는 이의 유도체를 포함하는 조성물의 투여량은 환자 체중의 0.25㎍/kg 이상, 바람직하게는 0.5㎍/kg 이상, 1㎍/kg 이상, 2㎍/kg 이상, 3㎍/kg 이상, 4㎍/kg 이상, 5㎍/kg 이상, 6㎍/kg 이상, 7㎍/kg 이상, 8㎍/kg 이상, 9㎍/kg 이상, 10㎍/kg 이상, 25㎍/kg 이상, 바람직하게는 50㎍/kg 이상, 100㎍/kg 이상, 250㎍/kg 이상, 500㎍/kg 이상, 1mg/kg 이상, 5mg/kg 이상, 6mg/kg 이상, 7mg/kg 이상, 8mg/kg 이상, 9mg/kg 이상, 10mg/kg 이상이다. 또 다른 구현예에서, 환자에서 SARS 관련 코로나 바이러스 감염 또는 이의 하나 이상의 증상의 예방, 치료, 관리 또는 경감에 이용하기 위한 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 글리시르히진 또는 이의 유도체를 포함하는 조성물의 투여량은 5mg, 바람직하게는 10mg, 50mg, 100mg, 150mg, 200mg, 250mg, 300mg, 350mg, 400mg, 500mg, 550mg, 600mg, 650mg, 700mg, 750mg, 800mg 이상의 단위 투여량이다. 또 다른 구현예에서, 환자에서 SARS 관련 코로나 바이러스 감염 또는 이의 하나 이상의 증상의 예방, 치료, 관리 또는 경감에 이용하기 위한 글리시르히진 또는 이의 유도체 또는 글리시르히진 또는 이의 유도체를 포함하는 조성물의 투여량은 약 5mg 내지 약 100mg, 바람직하게는 약 100mg 내지 약 200mg, 약 150mg 내지 약 300mg, 약 150mg 내지 약 400mg, 약 250mg 내지 약 500mg, 약 500mg 내지 약 800mg, 약 500mg 내지 약 1000mg, 또는 약 5mg 내지 약 1000mg의 범위의 단위 투여량이다.

바이러스 감염 (바람직하게는, SARS 관련 코로나 바이러스 감염) 또는 이의 증상의 예방, 치료, 또는 경감을 위해 이용되었거나 또는 현재 이용되는 글리시르히진 또는 이의 유도체 이외의 예방약 또는 치료약의 투여량은 임상의사에게 유용한 참고자료, 예를 들면, Physicaian's Desk Reference PDR (55판, 2001)을 이용하여 결정될 수 있다. 바람직하게는, 바이러스 감염 (바람직하게는, SARS 관련 코로나 바이러스 감염)을 예방, 치료, 또는 경감시키기 위해 이용되었거나 또는 현재 이용되는 것보다 낮은 투여량이 글리시르히진 또는 이의 유도체와 복합하여 이용된다.

또 다른 구현예에서, 대상은 예방학적 또는 치료학적 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체의 하나 이상의 투여량으로 투여되는데, 상기 예방학적 또는 치료학적 유효량은 각 투여에 대해 동일하지 않다. 또 다른 구현예에서, 대상은 예방학적 또는 치료학적 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체의 하나 이상의 투여량으로 투여되는데, 상기 대상에게 투여되는 예방학적 또는 치료학적 유효량의 투여량은 치료가 진전될 때, 예를 들면, 0.01㎍/kg, 0.02㎍/kg, 0.04㎍/kg, 0.05㎍/kg, 0.06㎍/kg, 0.08㎍/kg, 0.1㎍/kg, 0.2㎍/kg, 0.25㎍/kg, 0.5㎍/kg, 0.75㎍/kg, 1㎍/kg, 1.5㎍/kg, 2㎍/kg, 4㎍/kg, 5㎍/kg, 10㎍/kg, 15㎍/kg, 20㎍/kg, 25㎍/kg, 30㎍/kg, 35㎍/kg, 40㎍/kg, 45㎍/kg, 또는 50㎍/kg에 의해 증가된다. 또 다른 구현예에서, 대상은 예방학적 또는 치료학적 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체의 하나 이상의 투여량으로 투여되는데, 상기 대상에게 투여되는 예방학적 또는 치료학적 유효량의 투여량은 치료가 진전될 때, 예를 들면, 0.01㎍/kg, 0.02㎍/kg, 0.04㎍/kg, 0.05㎍/kg, 0.06㎍/kg, 0.08㎍/kg, 0.1㎍/kg, 0.2㎍/kg, 0.25㎍/kg, 0.5㎍/kg, 0.75㎍/kg, 1㎍/kg, 1.5㎍/kg, 2㎍/kg, 4㎍/kg, 5㎍/kg, 10㎍/kg, 15㎍/kg, 20㎍/kg, 25㎍/kg, 30㎍/kg, 35㎍/kg, 40㎍/kg, 45㎍/kg, 또는 50㎍/kg에 의해 감소된다.

특정 구현예에서, 대상은 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체의 하나 이상의 투여량으로 투여되는데, 유효량의 상기 글리시르히진 또는 이의 유도체의 투여량은 20% 내지 25%, 바람직하게는 25% 내지 30%, 30% 내지 35%, 35% 내지 40%, 40% 내지 45%, 45% 내지 50%, 50% 내지 55%, 55% 내지 60%, 60% 내지 65%, 65% 내지 70%, 70% 내지 75%, 75% 내지 80%, 또는 85% 이상에 의해 SARS 관련 코로나 바이러스의 복제를 저해 또는 감소시킨다. 기타 구현예에서, 대상은 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체의 하나 이상의 투여량으로 투여되는데, 유효량의 상기 글리시르히진 또는 이의 유도체의 투여량은 20% 내지 25%, 바람직하게는 25% 내지 30%, 30% 내지 35%, 35% 내지 40%, 40% 내지 45%, 45% 내지 50%, 50% 내지 55%, 55% 내지 60%, 60% 내지 65%, 65% 내지 70%, 70% 내지 75%, 75% 내지 80%, 또는 85% 이상에 의해 SARS 관련 코로나 바이러스 입자의 생성을 저해 또는 감소시킨다. 기타 구현예에서, 대상은 유효량의 글리시르히진 또는 이의 유도체의 하나 이상의 투여량으로 투여되는데, 유효량의 상기 글리시르히진 또는 이의 유도체의 투여량은 20% 내지 25%, 바람직하게는 25% 내지 30%, 30% 내지 35%, 35% 내지 40%, 40% 내지 45%, 45% 내지 50%, 50% 내지 55%, 55% 내지 60%, 60% 내지 65%, 65% 내지 70%, 70% 내지 75%, 75% 내지 80%, 또는 85% 이상에 의해 SARS 관련 코로나 바이러스 입자의 방출을 저해 또는 감소시킨다.

특정 구현예에서, 본 발명은 SARS 관련 코로나 바이러스 감염의 예방, 치료, 관리 또는 경감 방법을 제공하는데, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상에게 5 mg 이상, 바람직하게는 10 mg, 50 mg, 100 mg, 150 mg, 200 mg, 250 mg, 300 mg, 350 mg, 400 mg, 500 mg, 550 mg, 600 mg, 650 mg, 700 mg, 750 mg, 800 mg 이상의 글리시르히진 또는 이의 유도체를 특정 기간 동안 1일에 1회, 2일에 1회, 3일에 1회, 4일에 1회, 5일에 1회, 6일에 1회, 7일에 1회, 8일에 1회, 10일에 1회, 2주에 1회, 또는 3주에 1회 투여하는 것을 포함한다.

전술한 투여 계획은 단지 예시적인 목적으로 제공되며, 제한하는 것으로 고려되지 않아야 한다. 당업자는 글리시르히진 또는 이의 유도체의 모든 투여량이 본 발명의 범위 내라는 것을 용이하게 이해할 것이다.

증상 (바람직하게는, 바이러스 증상) 또는 이의 하나 이상의 증상의 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키기 위해 이용되었거나, 또는 현재 이용되는 글리시르히진 또는 이의 유도체 이외의 치료법 (예를 들면, 예방약 또는 치료약)은 바이러스 감염 또는 이의 하나 이상의 증상을 치료, 관리, 예방, 또는 경감시키기 위해 본 발명의 방법에 따라 글리시르히진 또는 이의 유도체와 복합하여 투여될 수 있다.

호흡기성 증상 (바람직하게는, 바이러스 호흡기성 증상 및 가장 바람직하게는, SARS 관련 코로나 바이러스 감염) 또는 이의 하나 이상의 증상의 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키기 위해 이용되었거나, 또는 현재 이용되는 글리시르히진 또는 이의 유도체 이외의 치료법 (예를 들면, 예방약 또는 치료약)은 SARS 관련 코로나 바이러스 감염 또는 이의 하나 이상의 증상을 치료, 관리, 예방, 또는 경감시키기 위해 본 발명의 방법에 따라 글리시르히진 또는 이의 유도체와 복합하여 투여될 수 있다. 바람직하게는, 본 발명의 복합 치료법에 이용된 예방약 또는 치료약의 투여량은 호흡기성 증상 (바람직하게는, 바이러스 호흡기성 증상 및 가장 바람직하게는, SARS 관련 코로나 바이러스 감염) 또는 이의 하나 이상의 증상을 예방, 치료, 관리, 또는 경감시키기 위해 이용되었거나, 또는 현재 이용되는 것보다 낮다. 증상 (바람직하게는, 바이러스 호흡기성 증상) 또는 이의 하나 이상의 증상의 예방, 치료, 관리, 또는 경감을 위해 현재 이용되는 물질의 추천된 투여량은 본원에 전체적으로 참고로 포함되는, [Hardman et al., eds., 2001, Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis Of Basis Of Therapeutics, 10th ed., Mc-Graw-Hill, New York; Physician's Desk Reference (PDR) 57th ed., 2003, Medical Economics Co., Inc., Montvale, NJ]를 포함하나, 이에 제한되지 않는 당업계의 임의의 참고자료로부터 수득될 수 있다.

다양한 구현예에서, 상기 치료법 (예를 들면, 예방약 또는 치료약)은 5분 미만의 사이를 두고, 30분 미만의 사이를 두고, 1시간 사이를 두고, 약 1시간 사이를 두고, 약 1 내지 약 2 시간 사이를 두고, 약 2 시간 내지 약 3 시간 사이를 두고, 약 3 시간 내지 약 4 시간 사이를 두고, 약 4 시간 내지 약 5 시간 사이를 두고, 약 5 시간 내지 약 6 시간 사이를 두고, 약 6 시간 내지 약 7 시간 사이를 두고, 약 7 시간 내지 약 8 시간 사이를 두고, 약 8 시간 내지 약 9 시간 사이를 두고, 약 9 시간 내지 약 10 시간 사이를 두고, 약 10 시간 내지 약 11 시간 사이를 두고, 약 11 시간 내지 약 12 시간 사이를 두고, 약 12 시간 내지 18 시간 사이를 두고, 18 시간 내지 24 시간 사이를 두고, 24 시간 내지 36 시간 사이를 두고, 36 시간 내지 48 시간 사이를 두고, 48 시간 내지 52 시간 사이를 두고, 52 시간 내지 60 시간 사이를 두고, 60 시간 내지 72 시간 사이를 두고, 72 시간 내지 84 시간 사이를 두고, 84 시간 내지 96 시간 사이를 두고, 또는 96 시간 내지 120 시간 사이를 두고 투여된다. 바람직한 구현예에서, 2 이상의 치료법이 동일한 환자 방문 내에 투여된다.

특정 구현예에서, 글리시르히진 또는 이의 유도체 및 하나 이상의 기타 치료법 (예를 들면, 예방약 또는 치료약)은 주기적으로 투여된다. 주기적 치료법은 일정 기간 동안 제 1 치료법 (예를 들면, 제 1 예방약 또는 치료약)의 투여에 이은, 일정 기간 동안 제 2 치료법 (예를 들면, 제 2 예방약 또는 치료약)의 투여에 이은, 임의로 일정 기간 동안 제 3 치료법 (예를 들면, 예방약 또는 치료약)의 투여 등, 및 상기 순차적인 투여를 반복하는 것, 즉, 상기 치료법 중의 하나에 대한 내성의 발생을 감소시키거나, 상기 치료법 중의 하나의 부작용을 막거나 또는 감소시키고/시키거나 상기 치료법의 효능을 경감시키기 위한 주기를 포함한다.

특정 구현예에서, 동일한 글리시르히진 유도체의 투여는 반복될 수 있으며, 상기 투여는 1 일, 2 일, 3 일, 5 일, 10 일, 15 일, 또는 30 일 이상에 의해 분리될 수 있다. 기타 구현예에서, 글리시르히진 또는 이의 유도체 이외의 동일한 치료법(예를 들면, 예방약 또는 치료약)의 투여가 반복될 수 있으며, 상기 투여는 1 일, 2 일, 3 일, 5 일, 10 일, 15 일, 또는 30 일 이상에 의해 분리될 수 있다.

5.9. 제품

본 발명은 또한 완성된 패키지되고, 표지된 약품을 포함한다. 상기 제품은 적당한 그릇 또는 용기 예를 들면, 유리병 또는 밀폐된 기타 용기에서 적당한 단위 투여 형태를 포함한다. 비경구적 투여에 적당한 투여 형태의 경우에, 활성 물질, 예를 들면, 글리시르히진 또는 이의 유도체는 멸균되며, 미립자가 없는 용액으로서 투여하기에 적합하다. 즉, 본 발명은 비경구적 용액 및 동결건조된 분말 양자를 포함하는데, 각각은 멸균되며, 후자는 주사 전에 재구성을 위해 적합하다. 택일적으로, 상기 단위 투여 형태는 경구, 경피, 비강내, 폐 또는 국소 전달에 적합한 고체일 수 있다.

특정 구현예에서, 상기 단위 투여 형태는 정맥내, 근육내, 비강내, 경구, 국소, 폐, 또는 피하 전달에 적합하다.

임의의 약품에 대해, 패키징 물질 및 용기는 저장 및 선적 동안 제품의 안정성을 보호하도록 디자인된다. 또한, 본 발명의 제품은 문제되는 호흡기성 증상을 적당하게 예방 또는 치료하는 방법에 관하여 내과의사, 기술자, 환자에게 조언하는 이용 또는 기타 정보 재료에 대한 설명서를 포함한다. 즉, 상기 제품은 실제적인 투여량, 모니터링 절차, 총 림프구 수, 비만 세포 수, 비만 세포 탈과립, 적혈구 세포 수, T 세포 수, IgE 항체 생성, 및 기타 모니터링 정보를 포함하나, 이에 제한되지 않는 투여 관리 및 모니터링 정보를 나타내거나 또는 제안하는 지시 수단을 포함한다.

구체적으로, 본 발명은 패키징 물질, 예를 들면, 상자, 병, 튜브, 바이얼, 용기, 분무기, 취입기, 정맥내 (i.v.) 백, 봉투 등; 및 상기 패키징 물질 내에 포함된 약제의 하나 이상의 단위 투여 형태를 포함하는 제품을 제공하는데, 상기 패키징 물질은 상기 글리시르히진 또는 이의 유도체가 본원에 기재된 특정 투여량을 투여하고, 특정 투여 관리를 이용함으로써 SARS 관련 코로나 바이러스 감염 또는 이의 하나 이상의 증상을 치료, 예방, 관리, 또는 경감시키기 위해 이용될 수 있다는 것을 나타내는 지시 수단을 포함한다.

본 발명은 또한 패키징 물질, 예를 들면, 상자, 병, 튜브, 바이얼, 용기, 분무기, 취입기, 정맥내 (i.v.) 백, 봉투 등; 및 상기 패키징 물질 내에 포함된 각 약제의 하나 이상의 단위 투여 형태를 포함하는 제품을 제공하는데, 하나의 약제는 글리시르히진 또는 이의 유도체를 포함하며, 제 2 약제는 글리시르히진 또는 이의 유도체 이외의 예방약 또는 치료약을 포함하며, 상기 패키징 물질은 상기 글리시르히진 또는 이의 유도체가 본원에 기재된 특정 투여량을 투여하고, 특정 투여 관리를 이용함으로써 SARS 관련 코로나 바이러스 감염 또는 이의 하나 이상의 증상을 치료, 예방, 관리, 또는 경감시키기 위해 이용될 수 있다는 것을 나타내는 지시 수단을 포함한다.

본 발명은 또한 패키징 물질, 예를 들면, 상자, 병, 튜브, 바이얼, 용기, 분무기, 취입기, 정맥내 (i.v.) 백, 봉투 등; 및 상기 패키징 물질 내에 포함된 약제의 하나 이상의 단위 투여 형태를 포함하는 제품을 제공하는데, 하나의 약제는 글리시르히진 또는 이의 유도체 및 글리시르히진 또는 이의 유도체 이외의 예방약 또는 치료약을 포함하며, 상기 패키징 물질은 상기 물질이 본원에 기재된 특정 투여량을 투여하고, 특정 투여 관리를 이용함으로써 SARS 관련 코로나 바이러스 감염 또는 이의 하나 이상의 증상을 치료, 예방, 관리, 또는 경감시키기 위해 이용될 수 있다는 것을 나타내는 지시 수단을 포함한다.

본 발명은 본 발명의 방법에 의해 감소 또는 피할 수 있는 역효과가 SARS 관련 코로나 바이러스 감염 또는 이의 하나 이상의 증상의 예방, 치료, 관리, 또는 경감에 이용하기 위한 제품에 포함된 정보 물질에 나타낸다. 본 발명의 방법에 의해 감소 또는 피할 수 있는 역효과는 활력징후 이상(발열, 빈맥, 서맥, 고혈압, 저혈압), 혈액학적 사건(빈혈, 림프구감소증, 백혈구감소증, 저혈소판증), 두통, 오한, 현기증, 구역, 무력증, 요통, 흉통 (흉압), 설사, 근육통, 통증, 가려움증, 건선, 비염, 발한, 주사 자리 반응, 및 혈관확장을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.

4. 도면의 간단한 설명

도 1. 베로 세포(Vero cell)에서 SARS-관련 코로나 바이러스의 복제에 대한 글리시르히진의 효과. 세포를 감염시킨지 72 시간 뒤에 60 파트의 메탄올 및 40 파트의 아세톤으로 세포를 고정하였다. SARS에 감염된 환자의 혈청에서 퍼옥시다제 염색에 의해 바이러스를 검출하였다.

(A) 모의 감염 세포; (B) 치료를 받지 않은 감염 세포; (C) 4,000 mg/L의 글리시르히진으로 치료한 감염 세포; (D) 1,000 mg/L의 글리시르히진으로 치료한 감염 세포.

도 2. 베로 세포(Vero cell)에서 SARS-관련 코로나 바이러스의 복제에 대한 글리시르히진 및 리바비린의 효과. (A) 치료를 받지 않은 감염 세포; (B) 50 mg/L 리바비린을 치료한 감염세포; (C) 100 mg/L의 글리시르히진으로 치료한 감염 세포; (D) 50 mg/L 리바비린 및 100 mg/L의 글리시르히진으로 치료한 감염 세포.

6.1. 실시예 1: 감초 뿌리의 활성 성분인 글리시르히진 , 및 SARS 관련 코로나 바이러스의 복제

SARS의 출현은 질환을 치료하기 위한 항바이러스 화합물에 대한 연구를 인가한다. 현재에, SARS 관련 코로나 바이러스 감염에 대한 어떠한 구체적인 치료도 확인되지 않았다. 독일 프랑크푸르트 대학교의 임상 센터에 수용된 SARS를 갖는 환자 유래의 코로나 바이러스의 2개의 임상 분리물 (FFM-1 및 FFM-2)에 대한 리바비린, 6-아자우리딘, 피라조푸린, 미코페놀산, 및 글리시르히진의 항바이러스 가능성을 평가하였다. 모든 화합물은 시판되며, 이의 항바이러스, 항종양, 및 면역억제 활성에 대해 환자에서 이용되었다. 모든 화합물 중에서, 글리시르히진이 SARS 관련 코로나 바이러스의 복제를 저해하는데 가장 활성이 있었다. 상기 결과는 글리시르히진의 예방 및 치료 유용성을 나타낸다.

Vero 세포의 컨플루언트 층 상에 96-웰 마이크로플레이트에서 감염 후 72-96 h에 바이러스에 의해 유도된 세포병인을 시각적으로 세었다. 선택지수를 대조군 값의 50%까지 세포병변 효과를 저해하는데 필요한 화합물의 농도(EC₅₀)에 대한 50%까지 세포 생존능을 감소시킨 화합물의 농도(CC₅₀)의 비로서 결정하였다. MMT 세포-증식성 Kit I (Roche, Mannheim, 독일)을 이용한 약물의 세포독성을 결정하였다.

이노신 모노포스페이트 탈수소효소의 저해제인 리바비린 및 미코페놀산은 SARS 관련 코로나 바이러스 (SARS-CV)의 복제에 영향을 주지 않았다 (표 2 참고). 오로티딘 모노포스페이트 탈카르복실화효소의 저해제인 6-아주리딘 및 피라조푸린은 각각 5 및 12의 선택지수를 가지면서 비독성 투여량으로 SARS-CV의 복제를 저해하였다. Vero 세포에서 SARS-CV 복제의 가장 강력한 저해제는 67의 선택지수를 갖는 글리시르히진이었다.

Vero 세포 배양물에서 SARS 관련 코로나 바이러스에 대한 화합물의 활성

화합물	EC₅₀*(mg/L)	CC₅₀*(mg/L)	선택지수
6-아자우리딘	16-8	104	6
피라조푸린	4-2	52	12
미코페놀산	>50	>50	NC
리바비린	>1000	>1000	NC
글리시르히진
바이러스 흡착 후	600	>20,000†	>33
바아러스 흡착 동안 및 후	300	>20,000	>67
바이러스 흡착 동안	2400	>20,000	>8-3
EC₅₀= 대조군 값의 50%까지 세포병변 효과를 저해하는데 필요한 화합물의 유효 농도 CC₅₀= 50%까지 세포 생존능을 감소시킨 화합물의 세포독성 농도 NC= 계산불가능 * 8개 분석의 평균(SD) † 이용된 최대 농도에서(200 mg/L), 세포 생존능의 20-30% 감소가 기록되었다.

바이러스 복제를 저해하는 것 외에, 글리시르히진은 복제 주기의 바이러스-초기 단계의 흡착 및 통과를 저해한다. 글리시르히진은 바이러스 흡착 후에 첨가될 때보다 흡착 기간 동안 첨가될 때 덜 효과적이었다 (각각 EC₅₀ 600 대 2400 mg/L). 글리시르히진은 흡착 기간 동안 및 후 양자에서 제공될 때 가장 효과적이었다 (EC₅₀ 300 mg/L).

도 1은 Vero 세포에서 SARS-CV의 복제에 대한 글리시르히진의 효과를 보여준다. SARS 환자로부터 혈청 시료를 이용한 SARS-CV의 복제를 측정하였다. 바이러스 항원의 발현은 임의의 기타 배양물보다 1000 mg/L의 글리시르히진으로 처리된 배양물에서 훨씬 낮았으며; 고농도의 글리시르히진 (4000 mg/L)은 바이러스의 복제를 완전히 봉쇄하였다 (도 1).

글리시르히진은 세포 신호전달 경로 예를 들면, 단백질 키나아제 C; 카제인 키나아제 II ; 및 전사 인자 예를 들면, 활성제 단백질 1 및 핵인자 카파B에 영향을 준다. 더욱이, 글리시르히진 및 이의 아글리콘 대사산물인 18β-글리시르히진산은 유도성 아산화질소 합성효소의 발현 및 대식세포에서 아산화질소의 생성을 상향 조절한다 (Jeong HG, Kim JY. Induction of inducible nitric oxide synthase expression by 18β-glycyrrhetinic acide in macrophases. FEBS Lett 2002; 513: 208-12). 아산화질소는 몇 가지 바이러스 예를 들면, 또한 글리시르히진에 의해 저해될 수 있는 일본뇌염바이러스 (플라비비레이트 패밀리의 멤버)의 복제를 저해한다. 이론에 구속되지 않고, 글리시르히진은 아산화질소 합성효소를 유도하며, 상기 아산화질소 합성효소는 SARS 관련 코로나 바이러스 복제를 저해한다. 여기에 보여주지 않는 결과에서, 글리시르히진은 Vero 세포에서 아산화질소 합성효소를 유도하였으며, SARS 관련 코로나 바이러스 복제는 아산화질소 공여자 (DETANONOate)가 배양 배지에 첨가되었을 때 저해되었다.

6.2 실시예 2: 글리시르히진 유도체의 항-SARS 활성

글리시르히진 유도체 합성

글리시르히진의 아미노산 유도체 (예를 들면, 화합물 6 및 화합물 3)를 [L. A. Baltina et al. Transformations of Glycyrrhizic Acid. VIII. Synthesis of Immunomodulating Glycopeptides using tert-Butyl Esters of Amino Acids; Russian J. Bioorg. Chem., 1994, 20 (12), 778-784; Baltina L. A. et al., Transformations of Glycyrrhizic Acid. VII. Synthesis of Triterpene Glycopeptides containing Alkyl Esters of L-Amino Acids, Khim. Prir. Soedin., 1994, (20), 261-268; and R. M. Kondratenko, et al., and Immunostimulating Activity of Cysteine-Containing Derivatives of Glycyrrhizic Acid, Russian J. Bioorg. Chem., 2004, 30(1), 61-67]에 보고된 활성화된 N-히드록시숙신이미드 에스테르를 이용함으로써 합성하였다.

화합물 3의 선택적인 합성을 N,N'-디시클로헥실카보디이미드 (DCC)-N-히드록시숙신이미드 및 작은 과량(1 mmol)의 염기(트리에틸아민)의 존재하에 0℃에서 테트라히드로푸란 중에 아미노 성분으로서 Gly-L-Val 히드로클로라이드의 t-부틸 에스테르를 이용함으로써 수행하였다. T-부틸 에스테르기를 CF₃COOH로 탈봉쇄하고, 유리 30-COOH 작용기를 갖는 표적 산물을 50-53%의 수율로 칼럼 크로마토그래피(CC)에 의해 단리하였다.

R_l 및 R₂에서 S-벤질-L-시스테인을 포함하는 글리시르히진의 아미노산 유도체의 선택적인 합성을 N,N'-디시클로헥실카보디이미드 (DCC)-N-히드록시숙신이미드 및 작은 과량(1 mmol)의 염기(트리에틸아민)의 존재하에 0℃에서 테트라히드로푸란 중에 아미노 성분으로서 L-Cys(SBn) 히드로클로라이드의 t-부틸 에스테르를 이용함으로써 수행하였다. T-부틸 에스테르기를 CF₃COOH로 탈봉쇄하고, 유리 30-COOH 작용기를 갖는 표적 산물을 50-53%의 수율로 칼럼 크로마토그래피(CC)에 의해 단리하였다.

화합물 7을 77%의 수율로 끓는 메탄올 중에서 히드라진 수화물과 글리시르히진 트리메틸 에스테르의 반응에 의해 제조하였다 (L. A. Baltina, et al., Transformations of Glycyrrhizic Acid. X. Synthesis of New Esters, Zh. Org. Khim., 1994,30 (11), 1622-1626).

헤테로시클릭 아미드 화합물 2 및 화합물 4를 DCC의 존재하에 글리시르히진과 5-아미노우라실 및 6-아미노-2-티오-우라실의 반응에 의해 제조하였다.

18β-글리시르헤틴산 메틸 에스테르의 β-D-글루코피라노실-(1→2)-β-D-글루코피라노시드를 [Baltina L. A. et al., Transformations of Glycyrrhizic Acid: The Synthesis of 3-O-[β-6'-Deoxy-6'-아미노-D-Glucopyranosyl(1-2)-β-6"Deoxy-6"-Amino-D-Glucopyranosido]-(3β,20β)-11-Oxo-20-Methoxycarbonyl-18β-olean-12-en-3-ol, Mendeleev Comm., 1995, (5), 178-179]에 기재된 부드러운 조건하에 NaBH₄ 를 이용하여 메탄올 중에 글리시르히진 트리메틸 에스테르의 환원에 의해 합성하였다.

화합물 5를 부드러운 조건하에 DCC를 통해 DMF-피리딘 혼합물에서 글리시르히진 및 N-아세틸-β-D-글리코피라노실아민의 커플링에 의해 합성하였다. 산물인 화합물 5를 42% 수율로 칼럼 크로마토그래피 CC에 의해 균일 (TLC) 상태로 수득하였다. 화합물 5의 수율은 DCC 및 N-히드록시벤조트리아졸이 커플링 반응에 이용되었을 때 높았다 (60%)(R. M. Kondratenko et al. Russian J. Bioorg. Chem., 2004, 30(3), 1-8).

합성된 화합물의 구조를 IR, UV, NMR ¹H 및 ¹³C 스펙트럼에 의해 확인하였다.

Vero 세포 배양물에서 SARS 관련 코로나 바이러스에 대한 상이한 글리시르히진 유도체의 활성은 상기 실시예 1에 기재된 바와 같이 시험하였다. 상이한 글리시르히진 유도체의 활성은 하기 표 3에 보여준다.

유도체	EC₅₀μM	CC₅₀μM	치료지수 I
화합물 6	35	1462	41
화합물 7	16	66	4
화합물 8	8	44	6
화합물 2	5	15	3
글리시르히진 모노암모늄 염	327	625	2
화합물 3	139	250	2
화합물 4	50	250	5
화합물 5	47	>2000	>43

실시예 3: SARS 관련 코로나 바이러스에 대한 글리시르히진 및 리바비린의 복합투여의 상승 효과

SARS 관련 코로나 바이러스에 대한 글리시르히진 및 리바비린의 조합의 효과를 시험하기 위해, Vero 세포를 SARS 관련 코로나 바이러스 B로 감염시키고, 각각 글리시르히진, 리바비린, 및 글리시르히진 및 리바비린의 복합으로 처리하였다. SARS 관련 코로나 바이러스를 본원에 전체적으로 참고로 포함된 [Drosten et al., 2003, New England Journal of Medicine 348 (20): 1967-1976]에 기재된 ARS 관련 코로나 바이러스로 감염된 환자의 시료로부터 수득하였다. 미처리된 세포를 대조군으로 이용하였다. 이어서, 세포를 감염 후 72시간에 60 파트 메탄올 및 40 파트 아세톤으로 고정하였다. 바이러스를 퍼옥시다아제 염색에 의해 SARS 환자로부터 혈청에서 검출하였다. 결과를 도 2에 보여준다. 도 2(A)는 치료 없는 감염된 세포를 보여주며; 도 2(B)는 50mg/L 리바비린으로 처리된 감염된 세포를 보여주며; 도 2(C)는 100 mg/L 글리시르히진으로 처리된 감염된 세포를 보여주며; 도 2(D)는 50 mg/L 리바비린 및 100 mg/L 글리시르히진으로 처리된 감염된 세포를 보여준다.

리바비린 및 글리시르히진 사이의 상승 효과는 양자 화합물의 더 낮은 농도를 이용하도록 한다. 더 낮은 농도의 리바비린의 이용은 리바비린이 더 높은 농도에서 독성이 있는 것으로 알려져 있기 때문에 특히 유리하다.

6.4 실시예 4: 글리시르히진 유도체의 항-고양이 감염성 복막염 바이러스 및 항-전염성 위장염 바이러스 활성

서론

코로나 바이러스 및 아르테리바이러스는 뇌염에서 장염 범위의 질환을 야기하면서, 인간을 포함하는 복수 종의 포유류를 감염시킨다 (Perlman S., Pathogenesis of coronavirus-induced infections. Review of pathological and immunological aspects. Adv Exp Med Biol. 1998; 440: 503-13). 상기 바이러스의 수 종은 가축 동물을 감염시키며, 현저한 이환율 및 사망률을 야기하여, 주요한 경제적 손실을 초래한다. 상기 카테고리에 전염성 위장염 바이러스 (TGEV), 돼지 호흡기성 및 생식성 바이러스 및 감염성 기관지염 바이러스와 같은 병원균을 포함된다. 고양이 코로나 바이러스 (FECV)는 일반적으로 높은 이환율로 감염을 야기하지 않으나, 적은 비율의 경우에, 바이러스는 더욱 독성으로 돌연변이된다. 고양이 감염성 복막염 바이러스 (FIPV)는 어린 고양이에게 심각한 질환을 야기한다. 상기 질환은 대부분 면역병리학적이며, 코로나 바이러스 연구의 주요 목적으로 이해된다.

재료 및 방법

모든 코로나 바이러스 및 고양이 신장 세포주는 비엔나 수의과 대학의 Unger 박사로부터 친절하게 제공받았다. 1×10⁶ CRFK 세포 (ATCC CCL-94)를 MEM (+10% FCS, +1% 비필수 AS, +AB)을 포함하는 96 웰 플레이트 내로 접종하였다. 컨플루언트될 때 24시간 후에, 세포를 FCS가 없는 MEM에서 50㎕ FipV (고양이 감염성 복막염 바이러스) 및 TGEV (전염성 위장염 바이러스)로 감염시켰다. 상기 세포를 글리시르히진 유도체를 적용하기 전에 실온에서 30분 동안 인큐베이션하였다.

미감염된 세포뿐만 아니라 대조군 물질로 처리된 세포를 대조군으로서 첨가하였다. 상기 물질을 1OOOμM로 시작하여 상이한 농도로 96 well 플레이트에서희석하고, 50㎕를 37℃에서 밤새 인큐베이션하였다. 48 시간 후에, CPE (세포병변 효과)를 현미경 관찰로 측정하였다. 상기 세포의 증식 활성을 표준 분석법, 예를 들면, CellTiter96

-AQueous Proliferationassay (Promega)를 이용하여 측정하였다.

결과

글리시르히진 모노암모늄 염 및 글리시르히진 유도체 화합물 5 FipV 및 TFEV 각각에 대한 EC₅₀ 값은 하기 표 4에 보여준다. 부분적인 저해가 표시된 농도 미만의 농도에서 관찰되었다. 게다가, GA 또는 GA+M-21-1 (met)로 처리된 감염된 세포의 상층액을 표준 TCID50 분석을 이용하여 적정하였다. 1 로그 이상의 바이러스 복제의 현저한 감소가 FipV 및 TGEV에 대해 화합물 5에 대해 100μM 내지 500μM의 범위에서 시험된 모든 농도에서 관찰되었다. 바이러스 복제는 바이러스 FipV 및 TGEV 양자에 대해 500μM의 글리시르히진 농도에서 현저하게 감소되었다.

글리시르히진 유도체	EC₅₀μM, FipV	EC₅₀μM, TGEV	Tox. CRFK 세포
글리시르히진 모노암모늄 염	<500μM	<500μM	>1mM
화합물 5	<100μM	<100μM	>1mM

결론

글리시르히진 모노암모늄 염 및 글리시르히진 유도체 화합물 5는 투여량 의존 방식으로 바이러스 유도된 세포 사멸로부터 세포를 보호할 뿐만 아니라 CRFK 세포에서 FipV 및 TGEV의 바이러스 복제를 저해한다. 그리하여, 글리시르히진 모노암모늄 염 및 글리시르히진 유도체 화합물 5는 상기 코로나 바이러스에 의해 야기된 질환을 표적화하는 수의 약물의 제조에 유용하다.

균등물

본 발명은 본 발명의 수 개의 양태의 예시로서 의도된 실시예에 개시된 특정 구현예 및 본 발명의 범위 내에 기능적으로 균등한 임의의 구현예에 의해 범위가 제한되지 않는다. 정말로, 본원에 보여주고 기재된 것 외에 본 발명의 다양한 변형이 당업자에게 명백하게 될 것이며, 첨부된 청구범위의 범위 내에 해당될 의도이다.

수많은 참고자료가 인용되며, 이의 전체 개시는 본원에 전체적으로 포함되었다.

Claims

SARS-관련 코로나 바이러스로 감염된 인간에게 치료학적으로 유효한 양의 글리시르히진 또는 그 유도체를 투여하는 것을 포함하는, SARS-관련 코로나 바이러스 감염을 치료하거나 하나 이상의 그 증상을 경감시키는 방법.
제 1 항에 있어서, 글리시르히진 유도체는 하기 화학식 I의 화합물인 것을 특징으로 하는 방법:

[화학식 I]

상기 화학식 I에서, R₁, R₂, 및 R₃는 각각 독립적으로 -OH; 5-, 6-, 또는 7- 멤버의 헤테로고리; -글리신-루이신; -N(H)R₄이고, 여기에서 R₄는 5-, 6-, 또는 7- 멤버의 헤테로 고리이다.
제 2 항에 있어서, R₁, R₂, 및 R₃는 각각 하기 화학식을 갖는 것을 특징으로 하는 방법.
세포를 유효한 양의 글리시르히진 또는 그 유도체와 접촉시키는 것을 포함하는, SARS-관련 코로나 바이러스의 증식을 억제하거나 감소시키는 방법.
세포를 유효한 양의 글리시르히진 또는 그 유도체와 접촉시키는 것을 포함하는, SARS-관련 코로나 바이러스 입자의 생성을 억제하거나 감소시키는 방법.
제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서, 글리시르히진 또는 그 유도체는 정제된 것을 특징으로 하는 방법.
제 1 항, 제 4 항, 및 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서, 글리시르히진 유도체는 18β-글리시르히진산인 것을 특징으로 하는 방법.
제 1 항에 있어서, SARS-관련 코로나 바이러스로 감염된 인간은 노인, 유아, 또는 면역기능이 저하된 인간인 것을 특징으로 하는 방법.
제 1 항에 있어서, 치료학적으로 유효한 양의 글리시르히진 또는 그 유도체 이외의 다른 항바이러스제를 투여하는 것을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 9 항에 있어서, 글리시르히진 이외의 항바이러스제는 리바비린인 것을 특징으로 하는 방법.
예방학적으로 유효한 양의 글리시르히진 또는 그 유도체를 치료가 필요한 인간에게 투여하는 것을 포함하는 SARS-관련 코로나 바이러스 감염을 예방하는 방법.
제 11 항에 있어서, 글리시르히진 또는 그 유도체를 정제하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 11 항에 있어서, 환자가 SARS-관련 코로나 바이러스 감염에 노출된 것을 특징으로 하는 방법.
제 11 항에 있어서, 글리시르히진 유도체가 18β-글리시르히진산인 것을 특징으로 하는 방법.
하기 화학식 I의 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염:

[화학식 I]

상기 화학식에서, R₁, R₂, 및 R₃는 -N(H)R₄이며, 여기에서 R₄는 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)이며, 단 R₄는 티아졸, 우라실, 또는 하기 화학식이 아니다:
하기 화학식 I의 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염:

[화학식 I]

상기 화학식에서, R₁ 및 R₂ 중 하나는 하기 화학식을 가지며;

R₃ 및 나머지 R₁과 R₂는 각각 독립적으로 -OH; -OCH₃; -NH-NH₂; -NHCH(COOH)CH₂SCH₂C₆H₅; 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환); 아미노산; 펩티드; -N(H)R₄이며, 여기에서 R₄는 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)이다.
하기 화학식 I의 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염:

[화학식 I]

상기 화학식에서, R₁, R₂, 및 R₃ 중 하나는 아미노산 또는 펩티드이며, R₁, R₂, 및 R₃ 중 다른 두 개는 각각 독립적으로 -OH; -OCH₃; -NH-NH₂; -NHCH(COOH)CH₂SCH₂C₆H₅; 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환); -N(H)R₄이며, 여기에서 R₄는 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)이다.
하기 화학식 I의 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염:

[화학식 I]

상기 화학식에서, R₁, R₂, 및 R₃는 하기 화학식을 갖는다:
하기 화학식 I의 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염:

[화학식 I]

상기 화학식에서, R₁, R₂, 및 R₃ 는 각각 독립적으로 5-, 6-, 또는 7-멤버의 헤테로고리(치환 또는 비치환)이며, 단 R₁, R₂, 및 R₃ 모두 프롤린은 아니다.
치료학적으로 유효한 양의 제 15 항 내지 제 19 항 중 어느 한 항의 화합물을 SARS-관련 코로나 바이러스에 감염된 인간에게 투여하는 것을 포함하는, SARS-관련 코로나 바이러스 감염을 치료하거나 하나 이상의 그의 증상을 경감시키는 방법.