WO2022138696A1

WO2022138696A1 - コロナウイルス感染症を予防又は治療するための医薬組成物

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Publication number: WO2022138696A1
Application number: PCT/JP2021/047492
Authority: WO
Inventors: 敦史川口; 勇人丹治; 正 ▲高▼橋
Original assignee: 国立大学法人筑波大学; 株式会社Ｌｔｔバイオファーマ
Priority date: 2020-12-23
Filing date: 2021-12-22
Publication date: 2022-06-30
Also published as: JPWO2022138696A1

Abstract

コロナウイルス感染症の新たな予防又は治療薬を提供する。　本発明は、エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質を含む、コロナウイルスの感染を予防又は治療するための医薬組成物に関する。

Description

コロナウイルス感染症を予防又は治療するための医薬組成物

　本発明は、コロナウイルス感染症を予防又は治療するための医薬組成物に関する。

　ヒトに感染するコロナウイルスとしては、ヒトに日常的に感染する４種類のコロナウイルス（ＨｕｍａｎＣｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ：ＨＣｏＶ）（ＨＣｏＶ－２２９Ｅ、ＨＣｏＶ－ＯＣ４３、ＨＣｏＶ－ＮＬ６３及びＨＣｏＶ－ＨＫＵ１）、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス（Ｓｅｖｅｒｅａｃｕｔｅｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅ：ＳＡＲＳ－ＣｏＶ）、中東呼吸器症候群コロナウイルス（ＭｉｄｄｌｅＥａｓｔｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅ：ＭＥＲＳ－ＣｏＶ）などが知られている（非特許文献１）。

　新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）は、２０１９年１２月、中華人民共和国湖北省武漢市において確認された、新型コロナウイルスであるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２がヒト細胞内に侵入することにより発症する感染症である。２０２１年１０月現在、感染者数（死亡者数）は世界で約２．１９億人（約４５５万人）を超え、２００カ国以上に広がっている。主な症状は、発熱、咳、咳以外の急性呼吸器症状・肺炎で、重症化すると、過剰な免疫反応に基づく重篤な臓器障害「サイトカインストーム症候群」や重度の呼吸不全「急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）」が引き起こされ死に至ることがある。

　ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は新興ウイルスであるため、国内外とも承認薬が存在しなかったが、世界的にＣＯＶＩＤ－１９が急速に拡大しパンデミック化したことを受けて、世界中で精力的に治療薬又は予防薬の開発が進められた。
　ＣＯＶＩＤ－１９予防薬としては、ワクチンの開発が進んでおり、例えば、不活化ワクチン、組換えタンパク質ワクチン、ペプチドワクチン、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）ワクチン、ＤＮＡワクチン、ウイルスベクターワクチンなど様々な種類が挙げられるが、特にｍＲＮＡワクチンの接種が世界的に進められている。しかし、ワクチンの効果は、抗原として選択した抗原部位の存在に依存するため、ワクチンの抗原部位によっては変異体に対する効果が低くなるなどの問題がある。
　ＣＯＶＩＤ－１９治療薬としては、モルヌピラビルなどの新薬の他、可及的速やかに上市させる目的で既承認薬である抗ウイルス薬、例えばレムデシビル、ネルフィナビル、ファビピラビル等を転用する治療候補薬の開発が進められ、薬事承認されるに至った薬もある。日本では２０２１年１０月現在、レムデシビル、バリシチニブ、カシリビマブ、イムデビマブ、ソトロビマブがＣＯＶＩＤ－１９治療薬として承認されている（非特許文献２）が、実際に投与される例は少ない状況にある。
　また、ＣＯＶＩＤ－１９の種々の症状に対する治療薬候補としては、ステロイドであるデキサメタゾン、シクレソニド、プロテアーゼ阻害薬であるナファモスタット、カモスタット、駆虫薬であるイベルメクチン、ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤であるバリシチニブなどが期待されている。

国立感染症研究所ウェブサイト厚生労働省ウェブサイト

　しかしながら、いずれの予防薬及び／又は治療薬も未だコロナウイルス感染症、特にＣＯＶＩＤ－１９に対して十分な効果があることが確認されるに至っておらず、新たな予防薬及び／又は治療薬の開発が希求されている。
　従って、本発明の課題は、コロナウイルス感染症、特にＣＯＶＩＤ－１９の新たな予防及び／又は治療薬を提供することにある。

　そこで本発明者らは、既存の承認薬の中から新たなコロナウイルス、特にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する予防及び／又は治療薬を見出すべく種々検討した結果、エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、抗コロナウイルス活性作用、及びコロナウイルス感染による死亡に対する生存率の回復作用を有し、コロナウイルス感染症、特にＣＯＶＩＤ－１９の予防及び／又は治療薬として有用であることを見出し、本発明を完成した。

　すなわち、本発明は、次の発明［１］～［３１］を提供するものである。
［１］エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質を含む、コロナウイルス感染症を予防又は治療するための医薬組成物。
［２］前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、一般式（１）

（式中、Ｒ¹はヒドロキシ基又は酸残基を示すか、Ｒ²と一緒になって酸素原子を形成し；Ｒ²は水素原子又はエチニル基を示すか、Ｒ¹と一緒になって酸素原子を形成し；Ｒ³は水素原子、ヒドロキシ基又はアシルオキシ基を示し；Ｒ⁴は水素原子又はハロゲノアルキル基を示し；Ｒ⁵は水素原子又はハロゲノアルキル基を示し；ｎは０～２の整数を示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグである、［１］記載の医薬組成物。
［３］一般式（１）中のＲ⁴及びＲ⁵がハロゲノアルキル基である、［２］記載の医薬組成物。
［４］一般式（１）中のＲ⁴及びＲ⁵がハロゲノエチル基である、［２］記載の医薬組成物。
［５］一般式（１）中のＲ⁴及びＲ⁵がクロロエチル基である、［２］記載の医薬組成物。
［６］一般式（１）中のｎが０の整数を示す、［２］～［５］のいずれかに記載の医薬組成物。
［７］一般式（１）中のＲ¹がヒドロキシ基であり、Ｒ²及びＲ³が水素原子である、［２］～［６］のいずれかに記載の医薬組成物。
［８］前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、エストラムスチン

である［１］記載の医薬組成物。
［９］一般式（１）中のＲ¹とＲ²が一緒になって酸素原子を形成し、Ｒ³が水素原子である、［２］～［６］のいずれかに記載の医薬組成物。
［１０］前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、エストロムスチン

である［１］記載の医薬組成物。
［１１］一般式（１）中のＲ¹が酸残基であり、Ｒ²及びＲ³が水素原子である［２］～［６］のいずれかに記載の医薬組成物。
［１２］一般式（１）中のＲ¹がリン酸基であり、Ｒ²及びＲ³が水素原子である、［２］～［６］のいずれかに記載の医薬組成物。
［１３］前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、エストラムスチンリン酸エステル又はそのナトリウム水和物。

である［１］記載の医薬組成物。
［１４］前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質として、更に下記一般式（２）

（式中、Ｘは炭素原子、硫黄原子又は窒素原子を示し；Ｙは窒素原子又は炭素原子を示し；Ｒ⁶は水素原子、アルキル基又は存在しないことを示し；Ｒ⁷は水素原子又は酸素原子を示し；ｍは１～３の整数を示し；ｌは４～７の整数を示し；破線部分は二重結合があり得ることを示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグを含む、［１］～［１３］のいずれかに記載の医薬組成物。
［１５］前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、下記一般式（２）

（式中、Ｘは炭素原子、硫黄原子又は窒素原子を示し；Ｙは窒素原子又は炭素原子を示し；Ｒ⁶は水素原子、アルキル基又は存在しないことを示し；Ｒ⁷は水素原子又は酸素原子を示し；ｍは１～３の整数を示し；ｌは４～７の整数を示し；破線部分は二重結合があり得ることを示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグである、［１］記載の医薬組成物。
［１６］一般式（２）において、Ｘは炭素原子又は窒素原であり、Ｙは窒素原子であり、Ｒ⁶は水素原子又は炭素数１－６のアルキル基である、［１４］又は［１５］記載の医薬組成物。
［１７］一般式（２）において、Ｘは炭素原子であり、Ｙは窒素原子であり、Ｒ⁶は水素原子又は炭素数１－６のアルキル基である、［１４］又は［１５］記載の医薬組成物。
［１８］一般式（２）において、Ｘは硫黄原子であり、Ｙは炭素原子であり、Ｒ⁶は存在しない、［１４］又は［１５］記載の医薬組成物。
［１９］一般式（２）で表される化合物がバゼドキシフェンである、［１４］～［１７］のいずれかに記載の医薬組成物。

［２０］一般式（２）で表される化合物がラロキシフェンである、［１４］、［１５］又は［１８］記載の医薬組成物。

［２１］前記コロナウイルス感染症が、ＳＡＲＳ（ｓｅｖｅｒｅ　ａｃｕｔｅ　ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅ）コロナウイルス１若しくは２、又はＭＥＲＳ（Ｍｉｄｄｌｅ　Ｅａｓｔ　ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ　ｓｙｎｄｒｏｍｅ）コロナウイルスによる感染症である［１］～［２０］のいずれかに記載の医薬組成物。
［２２］前記コロナウイルス感染症が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２（ｓｅｖｅｒｅ　ａｃｕｔｅ　ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ　ｓｙｎｄｒｏｍｅ　ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ　２）による感染症であるＣＯＶＩＤ－１９である、［１］～［２０］のいずれかに記載の医薬組成物。
［２３］コロナウイルス感染症を予防又は治療するための、エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質。
［２４］前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、一般式（１）

（式中、Ｒ¹はヒドロキシ基又は酸残基を示すか、Ｒ²と一緒になって酸素原子を形成し；Ｒ²は水素原子又はエチニル基を示すか、Ｒ¹と一緒になって酸素原子を形成し；Ｒ³は水素原子、ヒドロキシ基又はアシルオキシ基を示し；Ｒ⁴は水素原子又はハロゲノアルキル基を示し；Ｒ⁵は水素原子又はハロゲノアルキル基を示し；ｎは０～２の整数を示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグである、［２３］記載の物質。
［２５］前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、下記一般式（２）

（式中、Ｘは炭素原子、硫黄原子又は窒素原子を示し；Ｙは窒素原子又は炭素原子を示し；Ｒ⁶は水素原子、アルキル基又は存在しないことを示し；Ｒ⁷は水素原子又は酸素原子を示し；ｍは１～３の整数を示し；ｌは４～７の整数を示し；破線部分は二重結合があり得ることを示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグである、［２３］記載の物質。
［２６］コロナウイルス感染症を予防又は治療用の医薬組成物を製造するための、エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質の使用。
［２７］前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、一般式（１）

（式中、Ｒ¹はヒドロキシ基又は酸残基を示すか、Ｒ²と一緒になって酸素原子を形成し；Ｒ²は水素原子又はエチニル基を示すか、Ｒ¹と一緒になって酸素原子を形成し；Ｒ³は水素原子、ヒドロキシ基又はアシルオキシ基を示し；Ｒ⁴は水素原子又はハロゲノアルキル基を示し；Ｒ⁵は水素原子又はハロゲノアルキル基を示し；ｎは０～２の整数を示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグである、［２６］記載の使用。
［２８］前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、下記一般式（２）

（式中、Ｘは炭素原子、硫黄原子又は窒素原子を示し；Ｙは窒素原子又は炭素原子を示し；Ｒ⁶は水素原子、アルキル基又は存在しないことを示し；Ｒ⁷は水素原子又は酸素原子を示し；ｍは１～３の整数を示し；ｌは４～７の整数を示し；破線部分は二重結合があり得ることを示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグである、［２６］記載の使用。
［２９］エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質を投与することを特徴とする、コロナウイルス感染症を予防又は治療する方法。
［３０］前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、一般式（１）

（式中、Ｒ¹はヒドロキシ基又は酸残基を示すか、Ｒ²と一緒になって酸素原子を形成し；Ｒ²は水素原子又はエチニル基を示すか、Ｒ¹と一緒になって酸素原子を形成し；Ｒ³は水素原子、ヒドロキシ基又はアシルオキシ基を示し；Ｒ⁴は水素原子又はハロゲノアルキル基を示し；Ｒ⁵は水素原子又はハロゲノアルキル基を示し；ｎは０～２の整数を示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグである、［２９］記載の方法。
［３１］前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、下記一般式（２）

（式中、Ｘは炭素原子、硫黄原子又は窒素原子を示し；Ｙは窒素原子又は炭素原子を示し；Ｒ⁶は水素原子、アルキル基又は存在しないことを示し；Ｒ⁷は水素原子又は酸素原子を示し；ｍは１～３の整数を示し；ｌは４～７の整数を示し；破線部分は二重結合があり得ることを示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグである、［２９］記載の方法。

　本発明の医薬組成物は、抗コロナウイルス活性作用、特に抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性作用；及びコロナウイルス感染、特にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染による死亡に対する生存率の回復作用を有し、コロナウイルス感染症、特にＣＯＶＩＤ－１９の予防及び／又は治療薬として有用である。

ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染細胞の生存率（８０％以上）を指標として、抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２薬をスクリーニングした結果を示す。エストラムスチンリン酸エステル（Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ：ＥＭＰ）及びバゼドキシフェン酢酸エステル（Ｂａｚｅｄｏｘｉｆｅｎｅ　ａｃｅｔａｔｅ：ＢＺＡ）の単独投与、もしくは併用投与による抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性を示す。パネルＡは、Ｒｅｍｄｅｓｉｖｉｒの抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２効果を示す。エストラムスチンリン酸エステルによるウイルスタンパク質発現阻害活性を示す。Ｅｎｔｒｙ：エストラムスチンリン酸エステルをウイルス吸着時に添加、Ｐｏｓｔ　Ｅｎｔｒｙ：エストラムスチンリン酸エステルをウイルス吸着後に添加。エストラムスチンリン酸エステル関連化合物による抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性を示す。Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ：エストラムスチンリン酸エステル、Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ：エストラムスチン、Ｅｓｔｒａｄｉｏｌ：エストラジオール、Ｅｓｔｒоｍｕｓｔｉｎｅ：エストロムスチン、Ｅｓｔｒｏｎｅ：エストロン。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を感染させたヒトＡＣＥ２トランスジェニックマウスにエストラムスチンリン酸エステル、バゼドキシフェン酢酸エステル又はそれらを併用投与して生存率を評価した結果を示す。被験化合物を投与した非感染マウスでの体重測定結果を示す。ＥＭＰ：エストラムスチンリン酸エステル投与、ＢＺＡ：バゼドキシフェン酢酸エステル投与、ＥＭＰ＋ＢＺＡ：エストラムスチンリン酸エステル及びバゼドキシフェン酢酸エステル投与。被験化合物添加群のＥＦＰ遺伝子発現量を定量ＰＣＲ法により評価した結果を示す。Ｅｓｔｒａｄｉｏｌ：エストラジオール投与、ＥＭＰ：エストラムスチンリン酸エステル投与、ＢＺＡ：バゼドキシフェン酢酸エステル投与。

　一実施態様において、本発明は、エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質を含む、コロナウイルス感染症を予防又は治療するための医薬組成物である。
　本発明の「エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質」は、エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質であれば任意の物質であってよく、例えば、低分子化合物、ペプチド、アミノ酸、タンパク質、核酸、脂質、糖などが含まれる。
　なお、「エストロゲン受容体と複合体を形成し得る」とは、エストロゲン受容体と一時的に結合して一時的に複合体を形成し得ること、及びエストロゲン受容体と持続的に結合して持続的に複合体を形成し得ることの両方をいうことができる。
　本明細書において、低分子化合物とは、分子量が１０００以下の化合物をいう。本明細書において、ペプチドとは、２～４９個のアミノ酸がペプチド結合した分子をいい、タンパク質とは、５０個以上のアミノ酸がペプチド結合した分子をいい、それぞれ修飾アミノ酸を含む場合も含まれる。本明細書において、核酸とは、一本鎖又は二本鎖のＤＮＡ又はＲＮＡをいい、二本鎖にはホモ二本鎖もヘテロ二本鎖も含み、直鎖状も環状も含み、修飾塩基を含む核酸も含む。本明細書において、脂質とは、生物から単離され得る無極性溶媒に可溶な物質をいい、例えば、脂肪酸、ワックス、ステロール、脂溶性ビタミン、アシルグリセロール、リン脂質などが含まれる。本明細書において、糖とは、ケトン基又はアルデヒド基を含み、かつ２以上のヒドロキシル基を有する化合物をいう。
　好ましい実施態様において、エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質は、低分子化合物である。

　本発明の医薬組成物に含まれるエストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質は、一種類であってよく、又は二種類以上の併用であってもよい。
　好ましい実施態様において、エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質は、（ｉ）後掲の一般式（１）で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグ；（ｉｉ）後掲の一般式（２）で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグ；又は（ｉｉｉ）前記（ｉ）及び（ｉｉ）の両方を含む。
　「エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質」の好ましい態様としては：ステロイド骨格を有する女性ホルモン、例えば、エストロン、エストラジオール、エストリオールなど；選択的エストロゲン受容体モジュレーター(ＳＥＲＭ)、例えば、バゼドキシフェン、ラロキシフェンなど；イソフラボン、例えば、ゲニステインなど；タモキシフェン；及び、これらの誘導体、例えば、エストラムスチン、エストラムスチンリン酸エステル、エストラムスチンリン酸エステルナトリウム水和物、エストロムスチンなど；が挙げられ、当該誘導体を形成し得る基としては、例えば、ナイトロジェンマスタード基、酸基（例えば、リン酸基など）などが挙げられる。

　「エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質」は、エストロゲン受容体と複合体を形成する限り、エストロゲン受容体のアゴニストでもアンタゴニストでもあってよく、又はエストロゲン受容体の活性とは関係無く単にエストロゲン受容体に結合し得るリガンドであってもよい。好ましい実施態様において、エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質は、エストロゲン受容体のアゴニストである。
　また、エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質は、エストロゲン受容体自体の発現又は活性を制御し得る物質であってよい。好ましい実施態様において、エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質は、エストロゲン受容体の発現又は活性を増加させ、本発明の効果の向上に寄与する物質である。好ましい実施態様において、エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質は、ステロイド骨格を有する女性ホルモンとナイトロジェンマスタードとが化学結合した構造を有することにより、エストロゲン受容体の発現又は活性を増加させるシグナルを長期化させて、本発明の効果の向上に寄与する。好ましい実施態様において、エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質は、ＳＥＲＭであることにより、エストロゲン受容体の発現又は活性を増加させ、本発明の効果の向上に寄与する。好ましい実施態様において、エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質は、ステロイド骨格を有する女性ホルモンとナイトロジェンマスタードとが化学結合した構造を有する化合物とＳＥＲＭとを併用することにより相乗的にエストロゲン受容体の発現又は活性を増加させ、本発明の効果の向上に寄与する。

　「エストロゲン受容体（ＥＲともいう）」は、典型的には、リガンド（本発明のエストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質を含む）が結合することにより活性化され、核内に移行して、遺伝子の転写を制御する転写因子として機能する。エストロゲン受容体には、典型的には、ＥＲα及びＥＲβのアイソフォームが存在し、αα型若しくはββ型のホモ二量体、又はαβ型のヘテロ二量体を形成することが知られている。本発明のエストロゲン受容体は、単量体又は二量体の両方が含まれ、より具体的には、ＥＲα単量体又はＥＲβ単量体、並びにαα型又はββ型のホモ二量体、及びαβ型のヘテロ二量体の全ての態様が含まれる。
　「エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質」は、エストロゲン受容体の単量体であるＥＲα又はＥＲβと複合体を形成し得る物質であってよく、あるいはエストロゲン受容体のαα型若しくはββ型のホモ二量体又はαβ型のヘテロ二量体と複合体を形成し得る物質であってよい。好ましい実施態様において、エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質は、エストロゲン受容体と結合することにより、（ｉ）エストロゲン受容体の核内移行を促進し、（ｉｉ）エストロゲン受容体の転写活性を促進し、及び／又は（ｉｉｉ）エストロゲン受容体の発現又は活性を正に制御し得る。

　エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質がエストロゲン受容体と複合体を形成し得るか否かは、当該技術分野において公知の任意の方法を用いて調べることができるが、例えば、分子間相互作用解析装置（例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標））を用いた相互作用解析；抗エストロゲン受容体抗体を用いたプルダウンアッセイ及び結合物質に対する質量分析、ＦＴ－ＩＲ法による分析、又はＧＣ－ＭＳ法による分析；抗エストロゲン受容体抗体及び標的分子に対する抗体を用いたサンドイッチＥＬＩＳＡアッセイ又はウエスタンブロッティング；標的分子を結合させたカラム又はタグ付き標的分子を用いた結合アッセイ；などを用いて、当該物質がエストロゲン受容体と結合するか否かを決定することができる。当該物質がエストロゲン受容体と結合したことは、例えば、当該解析の検出限界内で検出された場合には結合する、当該解析の検出限界外にある場合に結合しない、と評価することができる。

　「コロナウイルス」には、本出願時において国際ウイルス分類委員会（ＩＣＴＶ）によって分類されている全てのコロナウイルスが含まれ、ヒトに感染する代表的なコロナウイルスであるＨＣｏＶ－２２９Ｅ、ＨＣｏＶ－ＯＣ４３、ＨＣｏＶ－ＮＬ６３及びＨＣｏＶ－ＨＫＵ１、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を含む）、及びＭＥＲＳ－ＣｏＶなども含まれる。
　本発明の予防及び／又は治療薬が対象とするコロナウイルスとしては、ＳＡＲＳコロナウイルス又はＭＥＲＳコロナウイルスが好ましく、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を含むＳＡＲＳコロナウイルスがより好ましく、特に新型コロナウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）が更により好ましい。
　「ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２」には、野生型に加えて、全ての変異型が含まれる。例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２変異型には、Ｎ５０１Ｙ、Ｅ４８４Ｋ、Ｌ４５２Ｒ、Ｅ４８４Ｑ、ｄｅｌＨ６９Ｖ７０、Ｎ５０１Ｙ、Ｅ４８４Ｋ、Ｋ４１７Ｎ、Ｋ４１７Ｔ、Ｎ４３９Ｋ、Ｄ６１４Ｇ、Ａ２２２Ｖ、Ｙ４５３Ｆ、Ｐ６８１Ｈ、Ｑ２７ｓｔｏｐ、ｄｅｌＹ１４４、Ａ５７０Ｄ、Ｔ７１６Ｉ、Ｓ９８２Ａ、Ａ１７０８Ｄ、Ａ７０１Ｖ、Ｌ２４２＿２４４Ｌ、Ｄ８０Ａ、Ｌ１８Ｆ、Ｒ２４６Ｉ、Ｄ２１５Ｇなどを含む変異の１つ又は任意の２つ以上の組み合わせを含む変異型が含まれる。また、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２変異型には、イギリス型、南アフリカ型、ブラジル型、インド型、日本型（関西型、東京型など）、由来不明などの地域に関連する名称が含まれる変異型、及びアルファ（α）、ベータ（β）、ガンマ（γ）、デルタ（δ）、イータ（η）、イオタ（ι）、カッパ（κ）、ラムダ（λ）、イプシロン（ε）、ゼータ（ζ）、シータ（θ）などのギリシャ文字を使用する変異型も含まれる。

　「コロナウイルス感染症」とは、上記コロナウイルスにより引き起こされる感染症をいう。コロナウイルス感染症は、コロナウイルスが感染する任意の動物におけるコロナウイルス感染症であってよく、哺乳動物におけるコロナウイルス感染症が好ましく、霊長類におけるコロナウイルス感染症がより好ましく、ヒトにおけるコロナウイルス感染症が更により好ましい。
　好ましい実施態様において、コロナウイルス感染症は、ＳＡＲＳコロナウイルス又はＭＥＲＳコロナウイルスにより引き起こされる感染症であり、特にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２により引き起こされる感染症であるＣＯＶＩＤ－１９が好ましい。

　一実施態様において、本発明のコロナウイルスの感染を予防又は治療するための医薬組成物の有効成分は、下記一般式（１）

（式中、Ｒ¹はヒドロキシ基又は酸残基を示すか、Ｒ²と一緒になって酸素原子を形成し；Ｒ²は水素原子又はエチニル基を示すか、Ｒ¹と一緒になって酸素原子を形成し；Ｒ³は水素原子、ヒドロキシ基又はアシルオキシ基を示し；Ｒ⁴は水素原子又はハロゲノアルキル基を示し；Ｒ⁵は水素原子又はハロゲノアルキル基を示し；ｎは０～２の整数を示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグである。

　前記一般式（１）は、ステロイド骨格を有する女性ホルモンとナイトロジェンマスタードとを化学結合させた構造を有し、好ましくは、エストラジオール、エストロン又はそれらの誘導体とナイトロジェンマスタードとを化学結合させた構造を有する。
　前記一般式（１）中のＲ¹はヒドロキシ基又は酸残基を示すか、Ｒ²と一緒になって酸素原子を形成する。Ｒ¹がＲ²と一緒になって酸素原子を形成する場合、Ｒ¹及びＲ²と隣接する炭素原子とで、ケトンを形成する。

　Ｒ¹で示される酸残基としては、脂肪酸残基、有機スルホン酸残基、有機硫酸残基、有機リン酸残基、リン酸基、硫酸基、炭酸基などが挙げられる。酸残基というときは、例えば酢酸の場合アセトキシ基などのような残基を示す。
　脂肪酸残基としては、アセトキシ基、プロピオニルオキシ基、ブチリルオキシ基、ピバロイルオキシ基などの炭素数１～２４の脂肪酸残基、酒石酸残基、クエン酸残基、コハク酸残基などが挙げられる。有機スルホン酸残基としては、メタンスルホン酸残基、エタンスルホン酸残基、プロパンスルホン酸残基などの炭素数１～８のアルカンスルホン酸残基、トルエンスルホン酸残基などの芳香族スルホン酸残基が挙げられる。有機硫酸残基としては、アルキル硫酸残基が挙げられる。有機リン酸残基としては、アルキルリン酸残基などが挙げられる。

　Ｒ²は、水素原子又はエチニル基を示すか、Ｒ¹と一緒になって酸素原子を形成する。Ｒ²がＲ¹と一緒になって酸素原子を形成する場合、前記のようにＲ¹及びＲ²と隣接する炭素原子とで、ケトンを形成する。
　Ｒ²は、水素原子を示すか、Ｒ¹と一緒になって酸素原子を形成するのが好ましい。

　好ましいＲ¹としては、ヒドロキシ基、脂肪酸残基、有機スルホン酸残基、リン酸基が挙げられ、より好ましくはヒドロキシ基、脂肪酸残基又はリン酸基であり、更に好ましくはヒドロキシ基又はリン酸基である。また、Ｒ¹がＲ²と一緒になって酸素原子を形成する場合も好ましい。

　Ｒ³は水素原子、ヒドロキシ基又はアシルオキシ基を示す。
　アシルオキシ基としては、アセトキシ基、プロピオニルオキシ基、ブチリルオキシ基、ピバロイルオキシ基などの炭素数１～２４のアルカノイルオキシ基が挙げられ、炭素数１～８のアルカノイルオキシ基がより好ましい。

　Ｒ⁴は水素原子又はハロゲノアルキル基を示し、Ｒ⁵は水素原子又はハロゲノアルキル基を示す。ここでハロゲノアルキル基としては、クロロアルキル基、ブロモアルキル基、フルオロアルキル基、ヨードアルキル基が挙げられ、クロロアルキル基がより好ましい。
　ハロゲノアルキル基としては、ハロゲノＣ１－６アルキル基が好ましく、ハロゲノＣ１－４アルキル基がより好ましく、ハロゲノＣ２アルキル基が更により好ましい。
　ハロゲノアルキル基の具体例としては、クロロメチル基、クロロエチル基、３－クロロプロピル基、２－クロロプロピル基、４－クロロブチル基などが挙げられ、クロロエチル基が更に好ましい。
　また、Ｒ⁴及びＲ⁵がハロゲノアルキル基である場合がより好ましく、Ｒ⁴及びＲ⁵がハロゲノＣ１－４アルキル基である場合がより好ましく、Ｒ⁴及びＲ⁵がハロゲノエチル基である場合が更に好ましく、Ｒ⁴及びＲ⁵がクロロエチル基である場合が更に好ましい。

　ｎは０～２の整数を示し、０又は１が好ましく、０がより好ましい。

　一般式（１）中のＲ⁴及びＲ⁵が、ハロゲノアルキル基である化合物が好ましく、ハロゲノエチル基である化合物がより好ましく、クロロエチル基である化合物が更により好ましい。一般式（１）中のＲ⁴及びＲ⁵がハロゲノアルキル基であり、ｎが０の整数を示す化合物が好ましく、一般式（１）中のＲ⁴及びＲ⁵がハロゲノエチル基であり、ｎが０の整数を示す化合物がより好ましく、一般式（１）中のＲ⁴及びＲ⁵がクロロエチル基であり、ｎが０の整数を示す化合物が更により好ましい。
　一般式（１）中のＲ¹がヒドロキシ基であり、Ｒ²及びＲ³が水素原子であり、Ｒ⁴及びＲ⁵がハロゲノアルキル基であり、ｎが０の整数を示す化合物が好ましい。また、一般式（１）中のＲ¹がヒドロキシ基であり、Ｒ²及びＲ³が水素原子であり、Ｒ⁴及びＲ⁵がハロゲノエチル基であり、ｎが０の整数を示す化合物がより好ましい。更に、一般式（１）中のＲ¹がヒドロキシ基であり、Ｒ²及びＲ³が水素原子であり、Ｒ⁴及びＲ⁵がクロロエチル基であり、ｎが０の整数を示す化合物が更に好ましい。
　一般式（１）中のＲ¹とＲ²が一緒になって酸素原子を形成し、Ｒ³が水素原子であり、Ｒ⁴及びＲ⁵がハロゲノアルキル基であり、ｎが０の整数を示す化合物が好ましい。また、一般式（１）中のＲ¹とＲ²が一緒になって酸素原子を形成し、Ｒ³が水素原子であり、Ｒ⁴及びＲ⁵がハロゲノエチル基であり、ｎが０の整数を示す化合物がより好ましい。更に、一般式（１）中のＲ¹とＲ²が一緒になって酸素原子を形成し、Ｒ³が水素原子であり、Ｒ⁴及びＲ⁵がクロロエチル基であり、ｎが０の整数を示す化合物が好ましい。
　一般式（１）中のＲ¹が酸残基であり、Ｒ²及びＲ³が水素原子である化合物が好ましい。また、一般式（１）中のＲ¹がリン酸基であり、Ｒ²及びＲ³が水素原子であり、Ｒ⁴及びＲ⁵がハロゲノアルキル基であり、ｎが０の整数を示す化合物が好ましい。更に、一般式（１）中のＲ¹がリン酸基であり、Ｒ²及びＲ³が水素原子であり、Ｒ⁴及びＲ⁵がハロゲノエチル基であり、ｎが０の整数を示す化合物が好ましい。更に、一般式（１）中のＲ¹がリン酸基であり、Ｒ²及びＲ³が水素原子であり、Ｒ⁴及びＲ⁵がクロロエチル基であり、ｎが０の整数を示す化合物がより好ましい。

　一般式（１）で表される化合物の塩としては、薬学的に許容される塩であれば特に限定されないが、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩などの鉱酸塩、リン酸塩、炭酸塩など、酢酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩などの有機酸塩など、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩などの金属塩などが挙げられる。

　一般式（１）で表される化合物又はその塩の溶媒和物、水和物としては、エタノール和物、水和物などが挙げられる。また、プロドラッグとしては、Ｒ¹が前記酸残基の場合のほか、ステロイド骨格のいずれかの水素原子が他の置換基に置換された場合などが挙げられる。

　一般式（１）で表される化合物又はその塩の好ましい具体例としては、下記式（１－１）で表されるエストラムスチンリン酸エステル又はそのナトリウム水和物、下記式（１－２）で表されるエストラムスチン、及び下記式（１－３）で表されるエストロムスチンが挙げられる。

　エストラムスチンリン酸エステルナトリウム水和物は、日本においては、販売名：エストラサイト（登録商標）カプセル１５６．７ｍｇ（販売会社：日本新薬）として、及び米国等の外国においては、販売名：ＥＭＣＹＴ（登録商標）(Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｓｏｄｉｕｍ　ｃａｐｓｕｌｅ) （販売会社：Ｐｆｉｚｅｒ　Ｉｎｃ．）として市販されている。

　これらの一般式（１）で表される化合物の特定の態様は、前立腺癌治療剤として用いられているが、コロナウイルス、特にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する作用については、全く知られていない。

　本発明の一般式（１）の化合物の態様には、ステロイド骨格を有する女性ホルモンが含まれるが、ステロイド骨格を有する女性ホルモンは、エストロゲン受容体に結合し、当該複合体が核内に移行して特定の遺伝子（群）の転写を制御することができる。特定の理論に拘束されず、本発明との関係において、ナイトロジェンマスタードは、ステロイド骨格を有する女性ホルモンとエストロゲン受容体との結合を安定化し、本発明の一般式（１）の化合物とエストロゲン受容体とから構成される複合体が長期にわたって作用することにより、本発明の医薬組成物の抗コロナウイルス活性作用、特に抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性作用が発揮されると考えられる。
　本発明の一般式（１）の化合物の態様には、ステロイド骨格を有する女性ホルモンが含まれることから、性差によって効果の高さが異なる可能性があり得ると考えられる。
　また、一般式（１）の化合物の態様のうち少なくともエストラムスチンについては、エストラムスチン結合タンパク質（ＥＭＢＰ）と結合し、及び／又はマイクロチューブルの構築阻害により、本発明の医薬組成物の抗コロナウイルス活性作用、特に抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性作用を発揮する可能性もあり得る。

　別の実施態様において、本発明のコロナウイルスの感染を予防又は治療するための医薬組成物の有効成分は、下記一般式（２）

（式中、Ｘは炭素原子、硫黄原子又は窒素原子を示し；Ｙは窒素原子又は炭素原子を示し；Ｒ⁶は水素原子又はアルキル基を示し；Ｒ⁷は水素原子又は酸素原子を示し；ｍは１～３の整数を示し；ｌは４～７の整数を示し；破線部分は二重結合があり得ることを示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグである。

　当該一般式（２）で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグは、単独でもコロナウイルスの感染を予防又は治療するための医薬組成物の有効成分として有用であるが、他のエストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質と併用するのがより好ましく、前記一般式（１）で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグと併用するのが更に好ましい。

　一般式（２）において、アルキル基としては、炭素数１～６のアルキル基が好ましく、炭素数１～４のアルキル基がより好ましく、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基が更に好ましく、メチル基がより更に好ましい。ここで、アルキル基には、直鎖又は分岐鎖のアルキル基が含まれる。

　Ｘは炭素原子、硫黄原子又は窒素原子を示し、Ｙが窒素原子又は炭素原子を示す。ここで、Ｘが炭素原子又は窒素原子であり、Ｙが窒素原子であり、Ｒ⁶が水素原子又は炭素数１－６のアルキル基である場合が好ましく；Ｘが炭素原子であり、Ｙが窒素原子であり、Ｒ⁶が水素原子又は炭素数１－６のアルキル基である場合がより好ましい。この態様の場合、Ｒ⁶としては、炭素数１～６のアルキル基が好ましく、炭素数１～４のアルキル基がより好ましく、メチル基が更に好ましい。
　また、別の態様として、Ｘが硫黄原子であり、Ｙが炭素原子であり、Ｒ⁶は存在しない場合も好ましい。

　Ｒ⁷は水素原子又は酸素原子を示す。Ｒ⁷が酸素原子を示す場合、Ｒ⁷は隣接する炭素原子と一緒になってケトン基を形成する。
　ｍは、１～３の整数を示すが、１又は２がより好ましく、２が更に好ましい。
　ｌは、４～７の整数を示すが、４～６がより好ましく、５又は６が更に好ましい。

　一般式（２）で表される化合物の塩としては、薬学的に許容される塩であれば特に限定されないが、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩などの鉱酸塩、リン酸塩、炭酸塩など、酢酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩などの有機酸塩などが挙げられる。

　一般式（２）で表される化合物又はその塩の溶媒和物、水和物としては、エタノール和物、水和物などが挙げられる。また、プロドラッグとしては、一般式（２）中のヒドロキシ基に種々の酸がエステル結合した場合などが挙げられる。

　好ましい実施態様において、エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質は、下記式（２－１）で表されるバゼドキシフェン又はその酢酸塩である。

　好ましい実施態様において、エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質は、下記式（２－２）で表されるラロキシフェン又はその塩酸塩である。

　これらの一般式（２）で表される化合物の態様には、バゼドキシフェン及びラロキシフェンなどのＳＥＲＭが含まれるが、ＳＥＲＭが単独で、又はＳＥＲＭが一般式（１）で表される化合物と併用されることでコロナウイルス感染症、特にＣＯＶＩＤ－１９に対する作用については、ほとんど知られていない。

　本発明の一般式（２）の化合物の態様には、ＳＥＲＭが含まれるが、ＳＥＲＭはエストロゲン受容体に結合することができ、当該複合体が核内に移行して特定の遺伝子（群）の転写を制御することができ、エストロゲン受容体の長期的な転写活性の調節に関与することができる。よって、特定の理論に拘束されず、本発明との関係において、本発明の一般式（２）の化合物は、エストロゲン受容体と複合体を形成することにより、本発明の抗コロナウイルス活性作用、特に抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性作用が発揮されると考えられる。

　後記実施例に示すように、本発明のエストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質の態様である（ｉ）一般式（１）で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグ、特にエストラムスチン、エストラムスチンリン酸エステルナトリウム水和物、及びエストロムスチン、；（ｉｉ）一般式（２）で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグ、特にバゼドキシフェン及びラロキシフェン；並びに（ｉｉｉ）（ｉ）及び（ｉｉ）の併用は、抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性作用、及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染による死亡に対する生存率の回復作用を有し、コロナウイルス感染症、特にＣＯＶＩＤ－１９の予防又は治療薬として有用であることを本願明細書において実証している。
　ここで、「抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性作用」とは、（１）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２が細胞内へ侵入することの阻害作用；（２）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の細胞内複製、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２遺伝子の発現、及び／又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２構成要素アセンブリの阻害作用；（（１）及び／又は（２）の結果として）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の増殖及び／又は細胞外放出の抑制作用；並びに（（１）～（３）の結果として）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染による細胞傷害の抑制作用のいずれか又はこれらの任意の組み合わせをいう。
　また、「ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染による死亡に対する生存率の回復作用」とは、同種生物においてはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染による致死が引き起こされる条件（例えば、ウイルス力価、ウイルス数など）において、本発明の医薬組成物又はエストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質を当該生物に投与することにより生存率が回復する作用をいう。

　本願明細書及び実施例においてＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２について実証された結果及びそれによる本発明の効果は、ウイルス分類学上の類似性、並びに類縁ウイルスとのゲノム及び遺伝子の相同性に基づき、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２以外のコロナウイルスにも同様に適用できると考える。
　従って、本発明に係る「抗コロナウイルス活性作用」とは、（１）コロナウイルスが細胞内へ侵入することの阻害作用、（２）コロナウイルスゲノムの細胞内複製、コロナウイルス遺伝子の発現、及び／又はコロナウイルス構成要素アセンブリの阻害作用、並びに（（１）及び／又は（２）の結果として）コロナウイルスの増殖及び／又は細胞外放出の抑制作用のいずれか又はこれらの任意の組み合わせをいう。
　また、「コロナウイルス感染による死亡に対する生存率の回復作用」とは、同種生物においてはコロナウイルス感染による致死が引き起こされる条件（例えば、ウイルス力価、ウイルス数など）において、本発明の医薬組成物又はエストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質を当該生物に投与することにより生存率が回復する作用をいう。

　本発明の医薬組成物は、前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質の１種又は２種以上を含有すればよいが、これに薬学的に許容される担体を配合して種々の投与形態の医薬組成物とするのが好ましい。
　このような医薬組成物の投与形態としては、注射剤、経口剤（錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等）、吸入剤、点鼻剤、軟膏剤、クリーム剤、貼付剤、坐剤等が挙げられ、注射剤、経口剤、又は吸入剤が特に好ましい。

　これらの医薬組成物の形態とするために用いられる薬学的に許容される担体としては、例えば、溶解補助剤、賦形剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、着色剤、矯味剤、防腐剤、界面活性剤などが挙げられる。
　より具体的には、水、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、乳糖、ブドウ糖、Ｄ－マンニトール、澱粉、結晶セルロース、炭酸カルシウム、カオリン、デンプン、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、エタノール、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム塩、ステアリン酸マグネシウム、タルク、アセチルセルロース、白糖、酸化チタン、安息香酸、パラオキシ安息香酸エステル、デヒドロ酢酸ナトリウム、アラビアゴム、トラガント、メチルセルロース、卵黄、非イオン界面活性剤、白糖、単シロップ、クエン酸、蒸留水、エタノール、グリセリン、プロピレングリコール、マクロゴール、リン酸－水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸ナトリウム、ブドウ糖、塩化ナトリウム、フェノール、チメロサール、パラオキシ安息香酸エステル、亜硫酸水素ナトリウム、カルメロース、ヒプロメロース、ラウリル硫酸ナトリウム、無水ケイ酸（好ましくは、軽質無水ケイ酸）、アスコルビン酸、カルナウバロウ、酸化鉄（好ましくは三二酸化鉄）、デンプングリコール酸Ｎａ、部分アルファ化デンプン、マクロゴール６０００、クロスポビドン、ポビドン、ポリソルベート８０等が挙げられる。
　経口剤とする場合には、賦形剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、着色剤、矯味剤などが用いられ、常法によって製造できる。経口剤としては、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤などが好ましい。
　注射剤とする場合には、水、溶解補助剤などが用いられる。注射剤としては、静脈内投与剤、皮下注射剤、筋肉内投与剤が好ましく、凍結乾燥製剤、粉末充填剤の形態が挙げられる。
　吸入剤の形態としては、吸入粉末剤、吸入液剤、吸入エアゾール剤が挙げられるが、特に限定されるものではない。吸入粉末剤は、吸入量が一定となるように調製した粉末状の医薬組成物をエアゾールとして吸入する製剤である。ここで、粉末状医薬組成物には、糖や糖アルコールなどを添加剤として用いることもできる。吸入粉末剤の具体例としては、ドライパウダー吸入器（Ｄｒｙ　Ｐｏｗｄｅｒ　Ｉｎｈａｌｅｒ）を挙げることができる。吸入液剤は、ネブライザ等により吸入する液状の吸入製剤である。前記有効成分を適当な溶剤を用いて、溶解又は懸濁し、溶液又は懸濁液として調製すればよい。調製時、等張化剤やｐＨ調節剤等を添加することができる。吸入液剤に用いるデバイスはネブライザとして通常用いられるものを使用することができる。
　点鼻剤は、通常、液状の医薬組成物をミスト状に噴霧又は蒸発して用いることができる。また、例えば賦形剤等と混合して、ゲル状、粉状、粒状等の固形に加工されたものであってもよい。点鼻剤の医薬組成物においては、薬学的に許容しうる担体を含んでもよい。薬学的に許容しうる担体としては、賦形剤、結合剤、崩壊剤、流動化剤、滑沢剤、コーティング剤、懸濁化剤、着色剤、甘味剤または界面活性剤等を用いることができる。

　本発明の医薬組成物は、一般式（１）の化合物を５０ｍｇ～２５０ｍｇ含有する製剤とすることができ、特にエストラムスチン、エストロムスチン又はエストラムスチンリン酸エステルを含有する医薬組成物としては、既存薬の組成を好ましく使用することができ、これらの有効成分を５０ｍｇ～２５０ｍｇ含有するカプセル剤とすることができる。典型的には、１カプセル中、エストラムスチンリン酸エステルナトリウム水和物を１５６．７ｍｇ（エストラムスチンリン酸エステルとして１４０ｍｇ）含有することが好ましい。
　本発明の医薬組成物は、一般式（２）の化合物を５ｍｇ～１２０ｍｇ含有する製剤とすることができ、特にバゼドキシフェン又はラロキシフェンを含有する医薬組成物としては、既存薬の組成を好ましく使用することができ、これらの有効成分を５ｍｇ～１２０ｍｇ含有するカプセル剤とすることができる。典型的には、１カプセル中、バゼドキシフェン酢酸塩を２２．６ｍｇ（バゼドキシフェンとして２０ｍｇ）、又はラロキシフェン塩酸塩を６０ｍｇ含有することが好ましい。
　本発明の医薬組成物は、一般式（１）の化合物を５０ｍｇ～２５０ｍｇ及び一般式（２）の化合物を５ｍｇ～１２０ｍｇ含有する製剤とすることができる。ここで、一般式（１）の化合物としては、エストラムスチン、エストロムスチン又はエストラムスチンリン酸エステルのいずれかであることが好ましく、一般式（２）の化合物としては、バゼドキシフェン又はラロキシフェンであることが好ましい。より好ましくは、本発明の医薬組成物は、一般式（１）の化合物としては、エストラムスチン、又はエストラムスチンリン酸エステルのいずれかを含有し、一般式（２）の化合物としては、バゼドキシフェンを含有する。

　本発明の医薬組成物中における本発明の有効成分の含有量は、有効成分、投与形態によって大きく変動し、特に限定されるものではないが、通常は、組成物全量に対して０．０１～１００質量％、好ましくは１～１００質量％である。好ましくは、本発明の医薬組成物中における本発明の有効成分の含有量は、承認された態様と同じであってよく、又は異なっていてもよい。
　有効成分は、経口剤の場合には、通常一投与単位当たり、５質量％～７０質量％程度、より好ましくは３５質量％～６０質量％程度含有するのが好ましい。

　本発明の医薬組成物の投与量は、有効成分、投与する患者の症状、年齢、投与方法によって異なるが、前記有効成分量として、成人に対して１日あたり１０ｍｇ～１０００ｍｇであるのが好ましく、成人に対して１回あたり１０ｍｇ～５００ｍｇであるのがより好ましい。
　一般式（１）の場合、本発明の医薬組成物の有効成分量として、成人に対して１日あたり２００ｍｇ～１０００ｍｇであるのが好ましく、成人に対して１回あたり１００ｍｇ～５００ｍｇであるのが好ましい。特定の実施態様において、一般式（１）の場合、本発明の医薬組成物の有効成分量として、成人に対して１日あたり６２６．８ｍｇであるのが好ましく、成人に対して１回あたり３１３．４ｍｇであるのが好ましい。
　一般式（２）の場合、本発明の医薬組成物の有効成分量として、成人に対して１日あたり１０ｍｇ～１００ｍｇであるのが好ましく、成人に対して１回あたり１０ｍｇ～８０ｍｇであるのが好ましい。特定の実施態様において、一般式（２）の場合、本発明の医薬組成物の有効成分量として、成人に対して１日１回投与で２０ｍｇであるのが好ましく、別の特定の実施態様において、一般式（２）の場合、本発明の医薬組成物の有効成分量として、成人に対して１日１回投与で６０ｍｇであるのが好ましい。
　本発明の医薬組成物において、一般式（１）の化合物及び一般式（２）の化合物の両方が含まれる場合、一般式（１）の有効成分量と、一般式（２）の有効成分量とは、上記記載の任意の組み合わせであってよい。
　またこの投与量は１日に１～４回に分けて投与することもでき、１日１回又は２回の経口投与がより好ましい。

　本発明の医薬組成物は、コロナウイルスの感染前、感染時、及び感染後の任意の時間に投与でき、投与回数も性差、年齢、重篤度などに応じて適宜増減できる。本発明のエストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質の態様には、一般式（１）のようにステロイド骨格を有する女性ホルモンや一般式（２）のようにＳＥＲＭを含み、エストロゲン受容体に作用する可能性が考えられるため、本発明の医薬組成物の投与に関する諸事項、例えば投与部位、投与量、投与回数、投与時間などは、コロナウイルス感染者の性別、年齢及び／又は重篤度などにより必要に応じて適宜変更することができる。
　本発明の投与経路は、１つであってよく、又は別の投与経路を組み合わせてもよい。投与経路は、経口、経静脈、経鼻、経肺などを含む任意の投与経路であってよい。

　好ましい実施態様において、本発明の医薬組成物を投与するタイミングとしては、例えば以下が挙げられる：
（ｉ）コロナウイルス感染の数日前、例えば、７日より前の任意の日、７日前、６日前、５日前、４日前、３日前、２日前、１日前；
（ｉｉ）コロナウイルス感染の数時間前、例えば、１２時間より前の任意の時間、１２時間前、６時間前、３時間前、若しくは１時間前、又は１２時間前から１時間前の任意の時間；
（ｉｉｉ）コロナウイルスの感染時（好ましくは、コロナウイルス感染前後１時間を含む）；
（ｉｖ）コロナウイルス感染の数日後、例えば、７日より後の任意の日、７日後、６日後、５日後、４日後、３日後、２日後、１日後；
（ｖ）コロナウイルス感染の数時間後、例えば、１２時間より後の任意の時間、１２時間後、６時間後、３時間後、若しくは１時間後、又は１２時間後から１時間後の任意の時間。
　本発明の医薬組成物は、上記タイミングのいずれかで１回投与することができ、又は任意のタイミングの組み合わせで複数回に分けて投与できる。

　本発明の好ましい別の実施態様は、コロナウイルス感染症、特にＣＯＶＩＤ－１９を予防又は治療するための、前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質である。
　本発明の好ましい別の実施態様は、コロナウイルス感染症、特にＣＯＶＩＤ－１９を予防又は治療用の医薬組成物を製造するための、前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質の使用である。
　本発明の好ましい別の実施態様は、前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質を投与することを特徴とする、コロナウイルス感染症、特にＣＯＶＩＤ－１９を予防又は治療する方法である。

　次に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。

実施例１（抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２薬の探索）
１．実験方法
　ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染細胞の生存率を指標として、抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２薬のスクリーニングを実施した。
　使用ライブラリ：ＬＴＴバイオファーマ既承認薬ライブラリ（株式会社ＬＴＴバイオファーマから入手した）
　使用細胞：ＶｅｒｏＥ６－ＴＭＰＲＳＳ２アフリカミドリザル腎由来細胞（医薬基盤・健康・栄養研究所から入手した）
　ウイルス株：ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２　ＮＩＩＤ株（国立感染症研究所より入手した）
　陰性コントロール：化合物未処理
　サンプル群：既承認薬ライブラリ（１０μＭ）添加群
　評価：ＶｅｒｏＥ６－ＴＭＰＲＳＳ２細胞は、３７℃、５％ＣＯ₂存在下で、ＤＭＥＭ（高グルコース）に非働化ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を１０％となるように添加した培地を用いて培養した。ＶｅｒｏＥ６－ＴＭＰＲＳＳ２細胞を３０，０００細胞／ウェルで９６ウェルプレートに播種し、細胞が接着後に１，５００ＴＣＩＤ₅₀価のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を各化合物と共に添加した。４８時間の培養後、ＷＳＴ－８アッセイ（Ｄｏｊｉｎｄｏより入手）にて感染細胞の生存率を評価した。化合物非添加群の感染細胞では約３０％の生存率であるのに対し、生存率が８０％以上を示す既承認薬ライブラリ化合物を選別した。非感染細胞において、２０％以上の増殖抑制を示して細胞毒性があると判断される化合物は選別外とした。

２．実験結果
　図１にスクリーニングの結果を示す。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染に対し、８０％以上の生存率を示す既承認薬ライブラリ化合物を選別した。その結果、エストラムスチンリン酸エステル（Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、バゼドキシフェン酢酸塩（Ｂａｚｅｄｏｘｉｆｅｎｅ　ａｃｅｔａｔｅ）、及びラロキシフェン塩酸塩（Ｒａｌｏｘｉｆｅｎｅ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）が同定された（図１）。
　これらの化合物について、エストラムスチンリン酸エステルにおけるステロイド骨格を有する女性ホルモン部分、並びにＳＥＲＭであるバゼドキシフェン及びラロキシフェンは、エストロゲン受容体に結合して、当該複合体が核内に移行して特定の遺伝子（群）を制御するということが知られ、共通の特徴を有する。
　エストラムスチンリン酸エステルは、アルキル化剤としても知られ、マイクロチューブルの構築阻害により殺細胞作用を示すことも知られているが、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する効果は知られていない。

実施例２（本発明の化合物の単剤又は併用によるｉｎ　ｖｉｔｒｏ抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２効果の評価）
１．実験方法
　ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染細胞から放出される子孫ウイルス量を指標として、抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性を評価した。
　Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ：Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（Ｓｏｄｉｕｍ　ｓａｌｔ）はＣａｙｍａｎ　Ｃｈｅｍｉｃａｌより購入し、滅菌水に溶解して１０ｍＭの溶液を調製した。
　Ｂａｚｅｄｏｘｉｆｅｎｅ　ａｃｅｔａｔｅ：Ｂａｚｅｄｏｘｉｆｅｎｅ　ａｃｅｔａｔｅはＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓより購入し、ＤＭＳＯに溶解して１０ｍＭの溶液を調製した。
　Ｒｅｍｄｅｓｉｖｉｒ：ＲｅｍｄｅｓｉｖｉｒはＳｅｌｌｅｃｋより購入し、ＤＭＳＯに溶解して１０ｍＭの溶液を調製した。
　使用細胞：ＶｅｒｏＥ６－ＴＭＰＲＳＳ２アフリカミドリザル腎由来細胞（医薬基盤・健康・栄養研究所から入手した）
　ウイルス株：ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２　ＮＩＩＤ株（国立感染症研究所より入手した）
　陰性コントロール：化合物未処理
　サンプル群：エストラムスチンリン酸エステル（ＥＭＰ；０．３、１、３μＭ）及びバゼドキシフェン酢酸塩（ＢＺＡ；０．３、１、３μＭ）添加群
　プライマー：Ｎ　ｇｅｎｅ　Ｆｏｒｗａｒｄ：５'－ＴＴＡ　ＣＡＡ　ＡＣＡ　ＴＴＧ　ＧＣＣ　ＧＣＡ　ＡＡ－３'、Ｎ　ｇｅｎｅ　Ｒｅｖｅｒｓｅ：５'－ＧＣＧ　ＣＧＡ　ＣＡＴ　ＴＣＣ　ＧＡＡ　ＧＡＡ－３'
　逆転写反応：cＤＮＡ合成キット（ＴＯＹＯＢＯ社；ＲｅｖｅｒＴｒａＡｃｅ）とＮ　ｇｅｎｅ　Ｒｅｖｅｒｓｅプライマーを用いて逆転写反応を行った。
　定量ＰＣＲ法：定量ＰＣＲキット（Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ社；ＳＹＢＲ　Ｇｒｅｅｎ　Ｒｅａｌ－Ｔｉｍｅ　ＰＣＲ　Ｍａｓｔｅｒ　Ｍｉｘｅｓ）とＮ　ｇｅｎｅ　Ｆｏｒｗａｒｄプライマー及びＮ　ｇｅｎｅ　Ｒｅｖｅｒｓｅプライマーを用いて行った。
　ウイルスＲＮＡ精製：培養上清からＮｕｃｌｅｏＳｐｉｎＲＮＡＶｉｒｕｓ精製キット（ＴａＫａＲａ社）を用いてウイルスＲＮＡを精製した。
　評価：ＶｅｒｏＥ６－ＴＭＰＲＳＳ２細胞は、３７℃、５％ＣＯ₂存在下で、ＤＭＥＭ（高グルコース）に非働化ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を１０％となるように添加した培地を用いて培養した。ＶｅｒｏＥ６－ＴＭＰＲＳＳ２細胞を２×１０⁵細胞／ウェルで１２ウェルプレートに播種し、細胞が接着後に２×１０⁴ＴＣＩＤ₅₀価のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を各濃度のＲｅｍｄｅｓｉｖｉｒ、Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ及びＢａｚｅｄｏｘｉｆｅｎｅ　ａｃｅｔａｔｅと共に添加した。１時間のウイルス吸着後、ＤＭＥＭ培地で細胞を洗浄し、未吸着のウイルスを除去後、各濃度の各化合物を含む１ｍｌのＤＭＥＭ培地を添加し、３７℃、５％ＣＯ₂存在下で２４時間培養した。培養上清は１５，０００ｒｐｍ、３分間の遠心後に回収し、ウイルスＲＮＡを精製した。精製したウイルスＲＮＡは、逆転転写反応後、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮ遺伝子に特異的なプライマーを用いて、定量ＰＣＲ法を行った。化合物非添加群を１００％として、各化合物添加群のウイルス産生量を評価した。

２．実験結果
　図２にＥｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ及びＢａｚｅｄｏｘｉｆｅｎｅ　ａｃｅｔａｔｅの単独投与、もしくは併用投与による抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性を示す。単独投与では、Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ及びＢａｚｅｄｏｘｉｆｅｎｅ　ａｃｅｔａｔｅは、濃度依存的に抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性を示すとともに最終的にはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２産生の完全な抑制を示した。これらの単独投与におけるＩＣ₉₉値は、それぞれ約３μＭであった。
　一方、Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ及びＢａｚｅｄｏｘｉｆｅｎｅ　ａｃｅｔａｔｅの併用投与でも、濃度依存的に抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性を示すとともに最終的にはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２産生の完全な抑制を示した。この併用におけるＩＣ₉₉値は０．３～１μＭまで低下した。また、Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ　ｉｎｄｅｘは０．９（ＣＩ＝１，ａｄｄｉｔｉｖｅ；ＣＩ＜１，ｓｙｎｅｒｇｉｓｍ；ＣＩ＞１，ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ）であることから、Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ及びＢａｚｅｄｏｘｉｆｅｎｅ　ａｃｅｔａｔｅの併用は、相乗的に抗ウイルス活性が促進されることが観察された。
　また、参考として、Ｒｅｍｄｅｓｉｖｉｒの抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２効果についてもパネルＡに示す。この結果の比較から、本発明の化合物又はその併用は、ＣＯＶＩＤ－１９既承認薬であるＲｅｍｄｅｓｉｖｉｒと同等以上の抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２効果を有することが示された。

実施例３（エストラムスチンリン酸エステルの作用機序の解析）
１．実験方法
　ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染細胞でのスパイクタンパク質の発現量をウェスタンブロット法により検出し、エストラムスチンリン酸エステルの作用機構を評価した。
　エストラムスチンリン酸エステル：エストラムスチンリン酸エステル（ナトリウム塩）はＣａｙｍａｎ　Ｃｈｅｍｉｃａｌより購入しより購入し、滅菌水に溶解して１０ｍＭの溶液を調製した。
　使用細胞：ＶｅｒｏＥ６－ＴＭＰＲＳＳ２アフリカミドリザル腎由来細胞（医薬基盤・健康・栄養研究所から入手した）
　ウイルス株：ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２　ＮＩＩＤ株（国立感染症研究所より入手した）、Ａ型インフルエンザウイルス（筑波大学で保有）
　陰性コントロール：化合物未処理
　サンプル群：１０μＭ　エストラムスチンリン酸エステル添加群
　抗体：ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗スパイクタンパク質抗体（慶応大学より入手）、Ａ型インフルエンザウイルス抗ＮＰ抗体（筑波大学で作製）
　評価：ＶｅｒｏＥ６－ＴＭＰＲＳＳ２細胞は、３７℃、５％ＣＯ₂存在下で、ＤＭＥＭ（高グルコース）に非働化ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を１０％となるように添加した培地を用いて培養した。ＶｅｒｏＥ６－ＴＭＰＲＳＳ２細胞を２×１０⁵細胞／ウェルで１２ウェルプレートに播種し、細胞が接着後に２×１０⁵ＴＣＩＤ₅₀価のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、若しくは２×１０⁵ＰＦＵのＡ型インフルエンザウイルスを各濃度のエストラムスチンリン酸エステルと共に添加した。１時間のウイルス吸着後、ＤＭＥＭ培地で細胞を洗浄し、未吸着のウイルスを除去後、各濃度のエストラムスチンリン酸エステルを含む１ｍＬのＤＭＥＭ培地を添加し、３７℃、５％ＣＯ₂存在下で２４時間培養した。エストラムスチンリン酸エステルの作用機構を理解するため、ウイルス吸着時のみ、エストラムスチンリン酸エステルを添加したサンプル、及びウイルス吸着後のみ、エストラムスチンリン酸エステルを添加したサンプルも調製した。感染細胞を回収後、細胞抽出液を調製して７．５％ＳＤＳ－ＰＡＧＥで展開後、各抗体を用いてウェスタンブロット法を行った。

２．実験結果
　図３にエストラムスチンリン酸エステルによるウイルスタンパク質発現阻害活性を示す。１０μＭのエストラムスチンリン酸エステルを添加することで、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質発現量は顕著に低下するのに対し、Ａ型インフルエンザウイルスのＮＰタンパク質の発現量は低下しなかった。よって、エストラムスチンリン酸エステルの抗ウイルス活性はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に特異的であることが示された。
　また、エストラムスチンリン酸エステルは、ウイルス吸着時だけでなく、ウイルス吸着後から添加することでも、顕著な抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性を示した。よって、エストラムスチンリン酸エステルは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の細胞への侵入後からウイルスタンパク質発現までのいずれかの過程も抑制することが示された。

実施例４（エストラムスチンリン酸エステル関連化合物の抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性の評価）
１．実験方法
　エストラムスチンリン酸エステルは細胞内で脱リン酸化されエストラムスチンに変換される。一方、１７β－ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼにより、酸化されることでエストロムスチンに代謝される。また、エストラムスチンとエストロムスチンはナイトロゲンマスタード基が加水分解されることで、それぞれエストラジオールとエストロンに変換される。そこで、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染細胞から放出される子孫ウイルス量を指標として、これらエストラムスチンリン酸エステル関連化合物の抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性を評価した。
　エストラムスチンリン酸エステル：エストラムスチンリン酸エステル（ナトリウム塩）はＣａｙｍａｎ　Ｃｈｅｍｉｃａｌより購入し、滅菌水に溶解して１０ｍＭの溶液を調製した。
　エストラムスチン、エストラジオール、エストロン：エストラムスチンはＢＬＤ　Ｐｈａｒｍａｔｅｃｈ、エストロンとエストラジオールはＷａｋｏより購入し、ＤＭＳＯに溶解して１０ｍＭの溶液を調製した。
　使用細胞：ＶｅｒｏＥ６－ＴＭＰＲＳＳ２アフリカミドリザル腎由来細胞（医薬基盤・健康・栄養研究所から入手した）
　ウイルス株：ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２　ＮＩＩＤ株（国立感染症研究所より入手した）
　陰性コントロール：化合物未処理
　サンプル群：各エストラムスチンリン酸エステル関連化合物（０．３、１、３、１０μМ）添加群
　プライマー：Ｎ　ｇｅｎｅ　Ｆｏｒｗａｒｄ：５’－ＴＴＡＣＡＡＡＣＡＴＴＧＧＣＣＧＣＡＡＡ－３’、Ｎ　ｇｅｎｅ　Ｒｅｖｅｒｓｅ：５’－ＧＣＧＣＧＡＣＡＴＴＣＣＧＡＡＧＡＡ－３’
　逆転写反応：ｃＤＮＡ合成キット（ＴＯＹＯＢＯ社；ＲｅｖｅｒＴｒａＡｃｅ）とＮ　ｇｅｎｅ　Ｒｅｖｅｒｓｅプライマーを用いて逆転写反応を行った。
　定量ＰＣＲ法：定量ＰＣＲキット（Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ社；ＳＹＢＲ　Ｇｒｅｅｎ　Ｒｅａｌ－Ｔｉｍｅ　ＰＣＲ　Ｍａｓｔｅｒ　Ｍｉｘｅｓ）とＮ　ｇｅｎｅ　Ｆｏｒｗａｒｄプライマー及びＮ　ｇｅｎｅ　Ｒｅｖｅｒｓｅプライマーを用いて行った。
　ウイルスＲＮＡ精製：培養上清からＮｕｃｌｅｏＳｐｉｎＲＮＡＶｉｒｕｓ精製キット（ＴａＫａＲａ社）を用いてウイルスＲＮＡを精製した。
　評価：ＶｅｒｏＥ６－ＴＭＰＲＳＳ２細胞は、３７℃、５％ＣＯ₂存在下で、ＤＭＥＭ（高グルコース）に非働化ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を１０％となるように添加した培地を用いて培養した。ＶｅｒｏＥ６－ＴＭＰＲＳＳ２細胞を２×１０⁵細胞／ウェルで１２ウェルプレートに播種し、細胞が接着後に２×１０⁴ＴＣＩＤ₅₀価のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を各濃度の化合物と共に添加した。１時間のウイルス吸着後、ＤＭＥＭ培地で細胞を洗浄し、未吸着のウイルスを除去後、各濃度の化合物を含む１ｍＬのＤＭＥＭ培地を添加し、３７℃、５％ＣＯ₂存在下で２４時間培養した。培養上清は１５，０００ｒｐｍ、３分間の遠心後に回収し、ウイルスＲＮＡを精製した。精製したウイルスＲＮＡは、逆転転写反応後、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮ遺伝子に特異的なプライマーを用いて、定量ＰＣＲ法を行った。化合物非添加群を１００％として、各濃度の化合物添加群のウイルス産生量を評価した。

２．実験結果
　図３にエストラムスチンリン酸エステル関連化合物による抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性を示す。エストラムスチンリン酸エステルと比較して、エストラムスチンでは高い抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性が観察された。一方、エストロムスチンでは活性は低下したものの、抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性は観察されており、ステロイド骨格上の水酸基は必須ではないことが示唆された。また、ナイトロゲンマスタード基が加水分解されたエストラジオール及びエストロンでは、抗ウイルス活性が観察されず、エストラムスチンの抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性にはナイトロゲンマスタード基が必須であることが明らかになった。
　他方、既承認薬ライブラリには、ナイトロジェンマスタード又はその類似構造を含む化合物として、シクロホスファミド水和物、イホスファミド、メルファラン、及びベンダムスチン塩酸塩が含まれていたが、実施例１のスクリーニングではヒットしなかった。これは、本発明の構造に係るナイトロジェンマスタード及びステロイド女性ホルモンの両方の構造が存在することが、本発明の抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性に重要な寄与を果たしていることを示すと考えられる。

実施例５（本発明の化合物によるｉｎ　ｖｉｖｏ抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２効果の評価）
１．実験方法
　ヒトＡＣＥ２トランスジェニックマウスにＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を感染させ、生存率を評価した。
　Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ：Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（Ｓｏｄｉｕｍ　ｓａｌｔ）はＣａｙｍａｎ　Ｃｈｅｍｉｃａｌより購入し、滅菌水に溶解して１０ｍＭの溶液を調製後、ＰＢＳに希釈して鼻腔投与した。
　Ｂａｚｅｄｏｘｉｆｅｎｅ　ａｃｅｔａｔｅ：Ｂａｚｅｄｏｘｉｆｅｎｅ　ａｃｅｔａｔｅはＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓより購入し、ＤＭＳＯに溶解して１０ｍＭの溶液を調製後、コーンオイルで希釈して腹腔投与した。
　使用マウス：Ｃ５７ＢＬ／６系統ｈＡＣＥ２トランスジェニックマウス（医薬基盤・健康・栄養研究所から入手した）
　ウイルス株：ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２　ＮＩＩＤ株（国立感染症研究所より入手した）
　陰性コントロール：化合物未処理
　サンプル群：Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅを０．２ｍｇ／３５μｌ／ｈｅａｄで鼻腔投与、もしくはＢａｚｅｄｏｘｉｆｅｎｅ　ａｃｅｔａｔｅを３ｍｇ／２００μｌ／ｋｇで腹腔投与した。
　評価：５００ＴＣＩＤ₅₀／ｈｅａｄのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２をペントバルビタール麻酔下のマウスに鼻腔接種した。投与当日から感染５日後まで、1回／日でＥｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ及びＢａｚｅｄｏｘｉｆｅｎｅ　ａｃｅｔａｔｅを投与した。

２．実験結果
　図５にＥｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ投与によるマウスの生存率解析結果を示す。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２接種５日後に全頭死亡するマウスインビボ系において、Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ単剤を投与することで、顕著にマウスの生存率が改善された（８０％程度回復）。また、Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅをＢａｚｅｄｏｘｉｆｅｎｅ　ａｃｅｔａｔｅと併用投与することにより、より完全な生存率の改善が見られた（１００％回復）。よって、Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅは、ｉｎ　ｖｉｖｏでも抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性があることが示唆され、Ｂａｚｅｄｏｘｉｆｅｎｅ　ａｃｅｔａｔｅによりＥｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅのその抗コロナウイルス効果、特に抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２効果は増強される可能性がある。
　また、図６に非感染マウスでの体重測定結果を示す。麻酔投与により、一時的な体重減少が観察されるが、顕著なものではなく、Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ及びＢａｚｅｄｏｘｉｆｅｎｅ　ａｃｅｔａｔｅ投与による強い毒性は観察されていない。

実施例６（エストロゲン応答遺伝子の発現解析）
１．実験方法
　エストロゲン応答遺伝子のひとつであるＥＦＰ遺伝子の発現量を指標として、エストロゲン受容体の活性を評価した。
　Ｅｓｔｒａｄｉｏｌ：エストラジオールはＷａｋｏより購入し、ＤＭＳＯに溶解して１０ｍＭの溶液を調製した。
　Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ：Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（Ｓｏｄｉｕｍ　ｓａｌｔ）はＣａｙｍａｎ　Ｃｈｅｍｉｃａｌより購入し、滅菌水に溶解して１０ｍＭの溶液を調製した。
　Ｂａｚｅｄｏｘｉｆｅｎｅ　ａｃｅｔａｔｅ：Ｂａｚｅｄｏｘｉｆｅｎｅ　ａｃｅｔａｔｅはＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓより購入し、ＤＭＳＯに溶解して１０ｍＭの溶液を調製した。
　使用細胞：ＶｅｒｏＥ６－ＴＭＰＲＳＳ２アフリカミドリザル腎由来細胞（医薬基盤・健康・栄養研究所から入手した）
　陰性コントロール：化合物未処理
　サンプル群：各化合物３μＭ添加群
　プライマー：５’－ＡＡＡＧＣＣＡＣＣＡＧＣＴＣＡＣＡＴＣＣＧＡ－３’、５’－ＧＣＧＧＴＧＴＴＧＴＡＧＴＣＣＡＧＧＡＴＧＡ－３’
　逆転写反応：ｃＤＮＡ合成キット（ＴＯＹＯＢＯ社；ＲｅｖｅｒＴｒａＡｃｅ）とＯｌｉｇｏ（ｄＴ）₂₀プライマーを用いて逆転写反応を行った。
　定量ＰＣＲ法：定量ＰＣＲキット（Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ社；ＳＹＢＲＧｒｅｅｎＲｅａｌ－Ｔｉｍｅ　ＰＣＲＭａｓｔｅｒＭｉｘｅｓ）と上記プライマーを用いて行った。
　評価：各化合物を添加後、０．５、１、２、４時間後にサンプルを回収し、非添加群を１００％として、各化合物添加群のＥＦＰ遺伝子発現量を定量ＰＣＲ法により評価した結果を図７に示す。エストラジオールを添加してもＥＦＰ遺伝子の発現は促進されず、むしろ発現量が低下する様子が観察された。これは、血清培地での培養下でエストラジオールが添加されることで、ネガティブフィードバックが誘導された結果だと推測される。
　一方、ＥＭＰ及びＢＺＡ添加時は、血清存在下でもＥＦＰ遺伝子の発現促進を観察することができた。従って、ＥＭＰ及びＢＺＡは、血清の存在にかかわらず、エストロゲン受容体の発現又は活性の増加の持続性が長い、又はその作用が強いことが示唆された。

Claims

　エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質を含む、コロナウイルス感染症を予防又は治療するための医薬組成物。
　前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、一般式（１）

（式中、Ｒ¹はヒドロキシ基又は酸残基を示すか、Ｒ²と一緒になって酸素原子を形成し；Ｒ²は水素原子又はエチニル基を示すか、Ｒ¹と一緒になって酸素原子を形成し；Ｒ³は水素原子、ヒドロキシ基又はアシルオキシ基を示し；Ｒ⁴は水素原子又はハロゲノアルキル基を示し；Ｒ⁵は水素原子又はハロゲノアルキル基を示し；ｎは０～２の整数を示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグである、請求項１記載の医薬組成物。
　一般式（１）中のＲ⁴及びＲ⁵がハロゲノアルキル基である、請求項２記載の医薬組成物。
　一般式（１）中のＲ⁴及びＲ⁵がハロゲノエチル基である、請求項２記載の医薬組成物。
　一般式（１）中のＲ⁴及びＲ⁵がクロロエチル基である、請求項２記載の医薬組成物。
　一般式（１）中のｎが０の整数を示す、請求項２～５のいずれか１項記載の医薬組成物。
　一般式（１）中のＲ¹がヒドロキシ基であり、Ｒ²及びＲ³が水素原子である、請求項２～６のいずれか１項記載の医薬組成物。
　前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、エストラムスチン

である請求項１記載の医薬組成物。
　一般式（１）中のＲ¹とＲ²が一緒になって酸素原子を形成し、Ｒ³が水素原子である、請求項２～６のいずれか１項記載の医薬組成物。
　前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、エストロムスチン

である請求項１記載の医薬組成物。
　一般式（１）中のＲ¹が酸残基であり、Ｒ²及びＲ³が水素原子である請求項２～６のいずれか１項記載の医薬組成物。
　一般式（１）中のＲ¹がリン酸基であり、Ｒ²及びＲ³が水素原子である、請求項２～６のいずれか１項記載の医薬組成物。
　前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、エストラムスチンリン酸エステル又はそのナトリウム水和物

である請求項１記載の医薬組成物。
　前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質として、更に下記一般式（２）

（式中、Ｘは炭素原子、硫黄原子又は窒素原子を示し；Ｙは窒素原子又は炭素原子を示し；Ｒ⁶は水素原子、アルキル基又は存在しないことを示し；Ｒ⁷は水素原子又は酸素原子を示し；ｍは１～３の整数を示し；ｌは４～７の整数を示し；破線部分は二重結合があり得ることを示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグを含む、請求項１～１３のいずれか１項記載の医薬組成物。
　前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、下記一般式（２）

（式中、Ｘは炭素原子、硫黄原子又は窒素原子を示し；Ｙは窒素原子又は炭素原子を示し；Ｒ⁶は水素原子、アルキル基又は存在しないことを示し；Ｒ⁷は水素原子又は酸素原子を示し；ｍは１～３の整数を示し；ｌは４～７の整数を示し；破線部分は二重結合があり得ることを示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグである、請求項１記載の医薬組成物。
　一般式（２）において、Ｘは炭素原子又は窒素原であり、Ｙは窒素原子であり、Ｒ⁶は水素原子又は炭素数１－６のアルキル基である、請求項１４又は１５記載の医薬組成物。
　一般式（２）において、Ｘは炭素原子であり、Ｙは窒素原子であり、Ｒ⁶は水素原子又は炭素数１－６のアルキル基である、請求項１４又は１５記載の医薬組成物。
　一般式（２）において、Ｘは硫黄原子であり、Ｙは炭素原子であり、Ｒ⁶は存在しない、請求項１４又は１５記載の医薬組成物。
　一般式（２－１）で表される化合物がバゼドキシフェンである、請求項１４～１７のいずれか１項記載の医薬組成物。
　一般式（２－２）で表される化合物がラロキシフェンである、請求項１４、１５又は１８記載の医薬組成物。
　前記コロナウイルス感染症が、ＳＡＲＳ（ｓｅｖｅｒｅ　ａｃｕｔｅ　ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅ）コロナウイルス１若しくは２、又はＭＥＲＳ（Ｍｉｄｄｌｅ　Ｅａｓｔ　ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ　ｓｙｎｄｒｏｍｅ）コロナウイルスによる感染症である請求項１～２０のいずれか１項記載の医薬組成物。
　前記コロナウイルス感染症が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２（ｓｅｖｅｒｅａｃｕｔｅｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ２）による感染症であるＣＯＶＩＤ－１９である、請求項１～２０のいずれか1項記載の医薬組成物。
　コロナウイルス感染症を予防又は治療するための、エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質。
　前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、一般式（１）

（式中、Ｒ¹はヒドロキシ基又は酸残基を示すか、Ｒ²と一緒になって酸素原子を形成し；Ｒ²は水素原子又はエチニル基を示すか、Ｒ¹と一緒になって酸素原子を形成し；Ｒ³は水素原子、ヒドロキシ基又はアシルオキシ基を示し；Ｒ⁴は水素原子又はハロゲノアルキル基を示し；Ｒ⁵は水素原子又はハロゲノアルキル基を示し；ｎは０～２の整数を示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグである、請求項２３記載の物質。
　前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、下記一般式（２）

（式中、Ｘは炭素原子、硫黄原子又は窒素原子を示し；Ｙは窒素原子又は炭素原子を示し；Ｒ⁶は水素原子、アルキル基又は存在しないことを示し；Ｒ⁷は水素原子又は酸素原子を示し；ｍは１～３の整数を示し；ｌは４～７の整数を示し；破線部分は二重結合があり得ることを示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグである、請求項２３記載の物質。
　コロナウイルス感染症を予防又は治療用の医薬組成物を製造するための、エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質の使用。
　前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、一般式（１）

（式中、Ｒ¹はヒドロキシ基又は酸残基を示すか、Ｒ²と一緒になって酸素原子を形成し；Ｒ²は水素原子又はエチニル基を示すか、Ｒ¹と一緒になって酸素原子を形成し；Ｒ³は水素原子、ヒドロキシ基又はアシルオキシ基を示し；Ｒ⁴は水素原子又はハロゲノアルキル基を示し；Ｒ⁵は水素原子又はハロゲノアルキル基を示し；ｎは０～２の整数を示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグである、請求項２６記載の使用。
　前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、下記一般式（２）

（式中、Ｘは炭素原子、硫黄原子又は窒素原子を示し；Ｙは窒素原子又は炭素原子を示し；Ｒ⁶は水素原子、アルキル基又は存在しないことを示し；Ｒ⁷は水素原子又は酸素原子を示し；ｍは１～３の整数を示し；ｌは４～７の整数を示し；破線部分は二重結合があり得ることを示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグである、請求項２６記載の使用。
　エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質を投与することを特徴とする、コロナウイルス感染症を予防又は治療する方法。
　前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、一般式（１）

（式中、Ｒ¹はヒドロキシ基又は酸残基を示すか、Ｒ²と一緒になって酸素原子を形成し；Ｒ²は水素原子又はエチニル基を示すか、Ｒ¹と一緒になって酸素原子を形成し；Ｒ³は水素原子、ヒドロキシ基又はアシルオキシ基を示し；Ｒ⁴は水素原子又はハロゲノアルキル基を示し；Ｒ⁵は水素原子又はハロゲノアルキル基を示し；ｎは０～２の整数を示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグである、請求項２９記載の方法。
　前記エストロゲン受容体と複合体を形成し得る物質が、下記一般式（２）

（式中、Ｘは炭素原子、硫黄原子又は窒素原子を示し；Ｙは窒素原子又は炭素原子を示し；Ｒ⁶は水素原子、アルキル基又は存在しないことを示し；Ｒ⁷は水素原子又は酸素原子を示し；ｍは１～３の整数を示し；ｌは４～７の整数を示し；破線部分は二重結合があり得ることを示す）
で表される化合物、又は薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、水和物、若しくはプロドラッグである、請求項２９記載の方法。