KR20050038631A - 글리코겐 신타제 키나제 3의 피롤 기제 억제제 - Google Patents

글리코겐 신타제 키나제 3의 피롤 기제 억제제 Download PDF

Info

Publication number
KR20050038631A
KR20050038631A KR1020057003094A KR20057003094A KR20050038631A KR 20050038631 A KR20050038631 A KR 20050038631A KR 1020057003094 A KR1020057003094 A KR 1020057003094A KR 20057003094 A KR20057003094 A KR 20057003094A KR 20050038631 A KR20050038631 A KR 20050038631A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
compound
hydrogen
lower alkyl
group
aryl
Prior art date
Application number
KR1020057003094A
Other languages
English (en)
Inventor
마노이 드사이
지-지에 니
시몬 엔지
케이스 비. 프피스터
사비스리 래머시
샤라드하 서브라마니안
알랜 에스. 와그먼
Original Assignee
카이론 코포레이션
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 카이론 코포레이션 filed Critical 카이론 코포레이션
Publication of KR20050038631A publication Critical patent/KR20050038631A/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/12—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/56—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms, attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D249/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D249/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D249/08—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D453/00—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids
    • C07D453/02—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids containing not further condensed quinuclidine ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/08—Bridged systems

Abstract

생체외에서 글리코겐 신타제 키나제(GSK3)의 활성을 억제하고 생체내에서 GSK3 매개 장애를 치료하는 새로운 피롤 기제 화합물, 조성물 및 방법이 제공된다. 본 발명의 방법, 화합물 및 조성물은, 당뇨병, 알츠하이머병 및 다른 신경변성 질환, 비만, 죽상경화성 심혈관 질환, 본태고혈압, 다낭난소 증후군, 증후군 X, 외상성 뇌손상, 양극성 장애, 면역결핍 또는 암과 같은 GSK3 활성에 의해 매개되는 장애의 치료에서 단독으로, 또는 다른 제약학적 활성제와 함께 사용될 수 있다.

Description

글리코겐 신타제 키나제 3의 피롤 기제 억제제{PYRROLE BASED INHIBITORS OF GLYCOGEN SYNTHASE KINASE 3}
본 발명은 글리코겐 신타제 키나제 3(GSK3)의 활성을 억제하는 새로운 피롤 유도체, 이 화합물을 함유하는 제약학적 조성물, 그리고 단독으로 또는 다른 제약학적 활성제와 조합하여 이 화합물 및 조성물을 사용하는 것에 관한 것이다. 본 발명에 의해 제공된 화합물 및 조성물은, 당뇨병, 알츠하이머병 및 다른 신경변성 장애들, 비만, 죽상경화성 심혈관 질환, 본태고혈압, 다낭난소 증후군, 증후군 X, 허혈, 특히 대뇌허혈, 외상성 뇌손상, 양극성 장애, 면역결핍 그리고 암과 같은, GSK3 활성에 의해 매개되는 장애의 치료에 유용하다.
글리코겐 신타제 키나제 3(GSK3)은 세린/트레오닌 키나제로서 두 가지 동형 α와 β가 확인되었다. Woodgett, Trends Biochem. Sci., 16:177-81 (1991). 두 GSK3 동형은 휴지 세포에서 구성적으로 활성이다. GSK3는 원래 직접 인산화에 의해 글리코겐 신타제를 억제하는 키나제로서 확인되었다. 인슐린 활성화시에 GSK3이 비활성화됨으로써 글리코겐 신타제의 활성화를 허락하며 아마도 글루코스 수송과 같은 다른 인슐린-의존성 사건의 활성화도 허락할 것이다. 그 후, GSK3 활성이 인슐린과 마찬가지로 수용체 티로신 키나제(RTK)를 통해서 신호하는 다른 성장인자들에 의해서도 비활성화된다는 것이 알려졌다. 그러한 신호화 분자의 예들은 IGF-1과 EGF를 포함한다. Saito 등, Biochem. J.303:27-31(1994); Welsh 등, Biochem. J. 294:625-29(1993); 및 Cross 등, Biochem. J. 303:21-26(1994).
GSK3 활성을 억제하는 제제는 GSK3 활성에 의해 매개되는 장애의 치료에 유용하다. 이에 더하여, GSK3의 억제는 성장인자 신호화 경로의 활성화를 의태하며, 그 결과로서 GSK3 억제제는 그러한 경로가 불충분하게 활성화되는 질환의 치료에서도 유용하다. GSK3 억제제로 치료될 수 있는 질환의 예들이 하기 설명된다.
당뇨병
당뇨병은 혈액 글루코스의 만성적으로 상승된 수준(고혈당증)의 존재에 의해 정의되는 심각한 대사질환이다. 이런 고혈당증 상태는 펩티드 호르몬, 즉 인슐린 활성의 상대적 또는 절대적 부족의 결과이다. 인슐린은 췌장의 β 세포에 의해 생성 및 분비된다. 인슐린은 글루코스 이용, 단백질 합성, 및 탄수화물 에너지를 글리코겐으로 만들어 저장하는 것을 촉진하는 것으로 보고되었다. 글루코스는 중합된 글루코스의 형태인 글리코겐으로서 신체에 저장되며, 글리코겐은 대사요건을 만족시키기 위해서 다시 글루코스로 전환될 수 있다. 정상 조건에서 인슐린은 기초적 속도와 글루코스 자극 후의 증진된 속도로 모두 분비되며, 모두 글루코스의 글리코겐으로의 전환에 의해 대사 항상성을 유지하기 위해서이다.
당뇨병이란 용어는 몇 가지 상이한 고혈당 상태를 포함한다. 이들 상태는 1형 당뇨병(인슐린-의존성 당뇨병 또는 IDDM)과 2형 당뇨병(비-인슐린-의존성 당뇨병 또는 NIDDM)을 포함한다. 1형 당뇨병을 가진 개체들에 존재하는 고혈당증은 생리학적 범위 내로 혈중 글루코스 수준을 유지하는데 불충분한 결핍된, 감소된 또는 거의 존재하지 않는 수준의 인슐린과 관련된다. 종래에 1형 당뇨병은 대체 용량의 인슐린을 일반적으로 비경구 경로로 투여하여 치료하였다. GSK3 억제가 인슐린-의존성 과정을 자극하므로 결과적으로 1형 당뇨병의 치료에 유용하다.
2형 당뇨병은 노화에 따라 점차적으로 진행되는 질환이다. 이것은 처음에는 인슐린 민감성 감소 및 혈중 인슐린 농도의 보상적 상승을 특징으로 하는데, 이 중 후자는 정상 혈중 글루코스 수준을 유지하기 위해 필요하다. 증가된 인슐린 수준은 췌장 베타 세포로부터의 증가된 분비에 기인하며, 결과의 고인슐린혈증은 당뇨병의 심혈관 합병증에 관련된다. 인슐린 내성이 악화됨에 따라, 췌장 베타 세포에 대한 요구가 췌장이 충분한 수준의 인슐린을 더 이상 제공할 수 없을 때까지 지속적으로 증가하며, 그 결과 혈중 글루코스 수준이 상승하게 된다. 궁극적으로, 현성 고혈당증 및 고지질혈증이 발생하게 되며, 심혈관 질환, 신부전 및 실명을 포함하는 당뇨병에 관련된 지독한 장기적 합병증을 가져온다. 2형 당뇨병을 일으키는 정확한 대사과정(들)은 알려지지 않았지만, 부적합한 인슐린 반응에 더하여, 골격근으로의 글루코스 수송의 손상과 간 글루코스 생성의 증가를 가져온다. 음식물의 변형은 종종 비효과적이며, 따라서 대부분의 환자는 궁극적으로 이 질환의 합병증의 진행을 방지 및/또는 지연시키려는 노력에 있어서 제약학적 개입을 필요로 하고 있다. 많은 환자들이 인슐린 분비를 증가시키기 위해서 술포닐유레아를 포함하는 이용할 수 있는 많은 경구 항-당뇨제들 중 1 가지 이상으로 치료될 수 있다. 술포닐유레아 약물의 예들은 간 글루코스 생성을 억제하는 메트포르민과 인슐린-민감성 약제인 트로글리타존을 포함한다. 이들 제제의 유용성에도 불구하고, 30-40%의 당뇨병은 이들 약제를 사용하여 조절하는 것이 적합하지 않으며 피하 인슐린 주사를 필요로 한다. 추가로, 이들 치료법은 각각 관련된 부작용을 가진다. 예를 들어, 술포닐유레아는 저혈당증을 일으킬 수 있고, 트로글리타존은 심각한 간독성을 일으킬 수 있다. 현재, 전당뇨병 및 당뇨병 환자의 치료를 위한 새로운 개선된 약물이 필요하다.
상기 설명한 대로, GSK3 억제는 인슐린-의존성 과정을 자극하며 따라서 2형 당뇨병의 치료에 유용하다. 리튬염을 사용하여 얻은 최근 자료는 이런 견해에 대한 증거를 제공한다. 최근에는 리튬이온이 GSK3 활성을 억제하는 것으로 보고되었다. Klein 등, PNAS 93:8455-9 (1996). 1924년 이래로, 리튬은 혈장 글루코스 수준을 감소시키고 글리코겐 흡수를 증가시키고 인슐린의 효능을 강화하고 글루코스 신타제 활성을 상향조절하고 그리고 피부, 근육 및 지방 세포에서의 글리코겐 합성을 자극하는 능력을 포함하는 항-당뇨병 효과를 가진다는 것이 보고되었다. 그러나, 리튬은 아마도 리튬의 GSK3 이외의 다른 분자 표적에 대한 기록된 효과 때문에 GSK3 활성 억제에서의 사용에 있어서 폭넓게 받아들여지지는 않았다. 퓨린 유사체인 5-요도투베르시딘도 또한 GSK3 억제제인데, 이것도 마찬가지로 글리코겐 합성을 자극하며, 래트 간세포에 있는 글루카곤 및 바소프레신에 의한 글리코겐 신타제의 비활성화에 대해 길항작용한다. Fluckiger-Isler 등, Biochem.J.292:85-91(1993); 및 Massillon 등, Biochem. J. 299:123-8(1994). 그러나, 이 화합물은 다른 세린/트레오닌 및 티로신 키나제도 억제하는 것으로 나타났다. Massillon 등, Biochem. J. 299:123-8(1994).
당뇨병을 가진 환자들의 관리에 있어서 주요 목표 중 하나는 혈중 글루코스 수준을 가능한 정상에 가깝게 달성하는 것이다. 일반적으로, 정상 식후 혈중 글루코스 수준을 얻는 것은 금식중 고혈당증을 정상화하는 것보다 더 어렵다. 게다가, 어떤 역학연구는 식후 고혈당증(PPHG)이나 고인슐린혈증이 당뇨병의 거대혈관 합병증의 발생에 대한 위험 요인들에 독립적이라는 것을 암시한다. 최근에 PPHG를 표적으로 하는 상이한 약동학적 프로파일을 갖는 몇몇 약물이 개발되었다. 이들은 인슐린 리스프로, 아밀린 유사체, 알파-글루코시다제 억제제 및 메글리티니드 유사체를 포함한다. 인슐린 리스프로는 정상 사람 인슐린에 비해 더욱 빠른 작용 개시와 단축된 효능 지속기간을 가진다. 임상시험에서 인슐린 리스프로의 사용은 PPHG 조절의 개선 및 저혈당 사건의 발생의 감소와 관련되었다. 메글리티니드 유사체인 레파글리니드는 단기-작용 인슐린친화성 제제로서, 식사 전에 제공되었을 때 내인성 인슐린 분비를 자극하고 식후 고혈당 운동을 저하시킨다. 반대로, 아밀린 유사체는 위 배출 및 위의 흡수면으로의 영양소의 송달을 지연시킴에 의해 PPHG를 감소시킨다. 아카르보스, 미글리톨 및 보글리보스와 같은 알파-글루코시다제 억제제는 탄수화물-소화 효소를 방해하고 글루코스 흡수를 지연시킴에 의해 주로 PPHG를 감소시킨다. Yamasaki 등, Tohoku J. Exp. Med. 1997, 11; 183(3):173-83. 본 발명의 GSK 억제제가 또한 단독으로 또는 상기 제시된 제제들과 조합하여서 식후 고혈당증의 치료 뿐만 아니라 금식중 고혈당증의 치료에서도 유용하다.
알츠하이머병
GSK3는 또 알츠하이머병(AD)에 관한 생물학적 경로에 연루된다. AD의 특징적인 병리학적 특징은 β-아밀로이드 펩티드(β-AP)라고 하는 아밀로이드 전구물질 단백질(APP)의 비정상적으로 진행된 형태의 세포외 플라크 및 고인산화된 tau 단백질로 대부분 구성된 짝지어진 나선형 필라멘트(PHF)를 함유하는 세포내 신경섬유 매듭의 발생이다. GSK3는 PHF tau의 특징인 비정상 부위에서 tau 단백질을 인산화한다고 생체외 실험에서 밝혀진 다수의 키나제 중 하나이며, 또한 살아 있는 세포와 동물에서도 이를 행한다고 증명된 유일한 키나제이다. Lovestone 등 Current Biology 4:1077-86 (1994); 및 Brownlees 등, Neuroreport 8:3251-3255(1997). 더욱이, GSK3 키나제 억제제인 LiCl은 세포에서의 tau 고인산화를 차단한다. Stam-bolic 등, Current Biology 6:1664-8(1996). 이와 같이, GSK3 활성은 신경섬유 매듭의 생성에 기여할 수 있으며, 그 결과 질환의 진행에 기여할 수 있다. 최근에는 GSK3β가 AD 병인에서의 또 다른 열쇠 단백질인 프레세닐린 1(PS1)과 관련있는 것으로 나타났다. Takashima 등, PNAS 95:9637-9641 (1998). PS1 유전자에 있는 돌연변이는 β-AP의 증가된 생성을 가져오는데, 이 저자들은 또 돌연변이 PS1 단백질이 GSK3β와 더욱 단단히 결합하고 PS1의 동일한 영역에 결합되는 tau의 인산화를 강화한다는 것을 증명했다.
흥미롭게도, 또 다른 GSK3 기질인 β-카테닌도 PS1과 결합하는 것으로 나타났다. Zhong 등, Nature 395:698-702 (1998). 시토졸계 β-카테닌은 GSK3에 의한 인산화시의 변성을 표적으로 하며, 감소된 β-카테닌 활성은 β-AP 유도된 신경세포 아폽토시스에 대한 신경세포의 증가된 민감성에 관련된다. 결과적으로, GSK3β와 돌연변이 PS1의 증가된 관련성은 PS1-돌연변이 AD 환자의 뇌에서 관찰된 β-카테닌 수준의 감소를 설명할 수 있으며, 질환과 관련된 신경세포사의 증가라고 생각할 수 있다. 이들 관찰과 일관되게, 센스가 아닌 GSK3 안티센스의 주사가 뉴론 상에서 β-AP의 병리학적 효과를 차단하며, 그 결과 세포사의 개시가 24시간 지연되는 것으로 생체외 시험에서 나타났다. Takashima 등, PNAS 90:7789-93(1993). 이들 후자의 연구에서 세포사에 대한 효과는 세포내 GSK3 활성의 배증에 의해 선행되며(β-AP 투여 후 3-6시간 내), 이는 유전적 메카니즘에 더하여 GSK3 활성을 증가시킬 수 있다는 것을 시사한다. 더 나아가, AD에서 GSK3의 역할에 대한 증거가 정상 뇌조직에 비해 AD의 포스트시넵토좀 상청액에서 GSK3의 단백질 발현 수준(그러나 이 경우에 특이적 활성은 아니다)이 50%까지 증가된다는 관찰에 의해 제공된다. Pei 등, J. Neuropathol Exp. 56:70-78 (1997).
더 최근에는 공지된 GSK3 억제제인 리튬의 치료 농도가 아밀로이드 전구물질 단백질(APP) 분열을 방해함으로써 β-AP 생성을 차단한다는 것이 알려졌다. Phiel 등, Nature 423(22):435-438(2003). GSK3는 또 신경섬유 매듭의 주요 성분인 tau 단백질을 인산화하므로, GSK3 억제는 아밀로이드 플라크와 신경섬유 매듭을 모두 감소시킬 수 있으며, 알츠하이머병의 치료에 유용하다.
다른 CNS 장애
상기 설명된 리튬의 효과에 더하여, 양극성 장애(조울 증후군)의 치료에 리튬을 사용한 것은 그 역사가 오래되었다. 리튬에 대한 이런 임상반응은 양극성 장애의 병인학에 있어서 GSK3 활성의 연루를 반영할 수 있으며, 이 경우 GSK3 억제제가 그 징후에 관련될 수 있다. 이런 견해를 지지하는 차원에서, 최근에 양극성 장애에 통상 사용되는 또 다른 약물인 발프로에이트가 또한 GSK3 억제제인 것으로 알려졌다. Chen 등, J. Neurochemistry 72:1327-1330(1999). 양극성 장애를 치료하도록 작용할 수 있는 리튬 및 다른 GSK3 억제제에 의한 한 메카니즘은 신경전달물질인 글루타메이트에 의해서 유도된 비정상적으로 높은 수준으로 흥분된 뉴론의 생존을 증가시키는 것이다. Nonaka 등, PNAS 95:2642-2647(1998). 글루타메이트-유도 뉴론 흥분독성은 또한 대뇌허혈, 외상성 뇌손상 및 세균성 감염에서와 같은, 급성 손상에 관련된 신경변성의 주요 원인으로 여겨진다. 더욱이, 과도한 글루타메이트 신호화는 알츠하이머병, 헌팅톤병, 파킨슨병, AIDS 관련 치매, 근위축성 측삭경화증(ALS) 및 다발성 경화증(MS)과 같은 질환에서 보이는 만성적 신경 손상의 한 요인인 것으로 여겨진다. Thomas, J. Am. Geriatr. Soc. 43:1279-89(1995). 결론적으로, GSK3 억제제는 이들과 다른 신경변성 장애의 치료에 유용하다고 여겨진다.
면역강화
GSK3는 칼시뉴린의 효과와는 반대로 전사인자 NF-AT를 인산화하고 이것이 핵으로부터 빠져나오는 것을 촉진한다. Beals 등, Science 275:1930-33 (1997). 이와 같이 GSK3은 NF-AT에 의한 면역반응 유전자 활성화를 초기에 차단하며, GSK3 억제제는 면역반응 활성화를 허락하거나 연장하려는 경향을 가질 수 있다. 따라서, GSK3 억제제는 어떤 시토카인의 면역자극 효과를 연장 및 강화한다고 여겨지며, 그러한 효과는 종양 면역치료나 또는 실제로 일반적인 면역치료법에 대한 이들 시토카인의 잠재력을 증진시킬 수 있다.
기타 장애들
리튬은 또한 다른 생물학적 효과를 가진다. 리튬은 생체외 및 생체내 모두에서 조혈의 효능 있는 자극제이다. Hammond 등, Blood 55:26-28 (1980). 개에서 탄산리튬은 재발성 호중성백혈구감소증을 없앴으며 다른 혈액세포수를 정상화시켰다. Doukas 등, Exp.Hematol.14:215-221(1986). 만일 리튬의 이런 효과들이 GSK3의 억제를 통해 매개된다면, GSK3 억제제는 더욱 광범위한 용도를 가질 수 있다.
GSK3 억제제가 많은 질환의 치료에서 유용하므로, 새로운 GSK3 억제제의 확인은 매우 바람직할 것이다.
발명의 개요
이제 놀랍게도, 글리코겐 신타제 키나제 3(GSK3) 활성이 생체외 또는 생체내에서 어떤 피롤 기제 유도체에 의해 억제될 수 있다는 것이 발견되었다. 따라서, 본 발명은 생체외에서 GSK3의 활성을 억제하고, 생체내에서 GSK3 매개 장애를 치료하는 새로운 화합물, 조성물 그리고 방법을 제공한다. 한 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 GSK3 억제 활성을 갖는 새로운 화합물, 그것의 토토머, 또는 그것의 제약학적으로 허용되는 염을 제공한다.
상기 식에서,
X는 질소, 산소 또는 선택적으로 치환된 탄소이고;
W는 존재하지 않거나,
또는 -O-, -S-, -S(O)-, -SO2-, -NH-, -NH-CO-, -NR'CO-, -NHS02-, -NR'S02-, -CO-, -C02-, -CH2-, -CF2-, CHF, -CONH-, -CONR'-, 및 -NR'-로 구성되는 군으로부터 선택되며, 여기서 R'는 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클로이고;
A1은 선택적으로 치환된 아릴, 헤테로아릴, 또는 보호기이고;
R0 및 R0'는 수소 및 메틸로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R1, R2, R3, 및 R4는 수소, 히드록실, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 시클로저급알킬, 고리 아미노알킬, 알킬아미노알킬, 저급알콕시, 아미노, 알킬아미노, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아랄킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아랄킬카르보닐, 아릴, 및 헤테로아릴로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R5 및 R8은 수소, 할로, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 시클로알킬, 알콕시, 아미노, 아미노알콕시, 카르보닐옥시, 아미노카르보닐옥시, 알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 헤테로아랄킬카르보닐아미노, 시클로이미도, 헤테로시클로이미도, 아미디노, 시클로아미디노, 헤테로시클로아미디노, 구아니디닐, 아릴, 비아릴, 헤테로아릴, 헤테로아릴아릴, 헤테로아릴헤테로아릴, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로카르보닐옥시, 헤테로아릴카르보닐옥시, 및 아릴술폰아미도로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R6은 수소, 및 선택적으로 치환된 아릴, 헤테로아릴, 및 헤테로시클로로 구성되는 군으로부터 선택되고;
R7은 수소, 히드록시, 할로, 카르복실, 니트로, 아미노, 아미도, 아미디노, 이미도, 시아노, 술포닐, 메탄술포닐, 및 치환된 또는 비치환된 알킬, 알콕시, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아랄킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아랄킬카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 아랄킬카르보닐옥시, 헤테로아릴카르보닐옥시, 헤테로아랄킬카르보닐옥시, 알킬아미노카르보닐옥시, 아릴아미노카르보닐옥시, 포르밀, 저급알킬카르보닐, 저급알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 아미노아릴, 알킬술포닐술폰아미도, 아미노알콕시, 알킬아미노, 헤테로아릴아미노, 알킬카르보닐아미노, 알킬아미노카르보닐아미노, 아릴아미노카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 시클로아미도, 시클로티오아미도, 시클로아미디노, 헤테로시클로아미디노, 시클로알킬, 시클로이미도, 헤테로시클로이미도, 구아니디닐, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클로, 헤테로시클로알킬, 아릴술포닐, 및 아릴술폰아미도로 구성되는 군으로부터 선택된다.
다른 바람직한 구체예에서, 본 발명의 새로운 화합물은 하기 화학식 II의 화합물, 그것의 토토머, 또는 그것의 제약학적으로 허용되는 염에 의해 제공된다.
상기 식에서,
W는 존재하지 않거나, 또는
-O-, -S-, -S(O)-, -SO2-, -NH-, -NH-CO-, -NR'CO-, -NHSO2-, -NR'SO2-, -CO-, -CO2-, -CH2-, -CF2-, CHF, -CONH-, -CONR'-, 및 -NR'-로 구성되는 군으로부터 선택되며, 여기서 R'는 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클로이고;
A1은 선택적으로 치환된 아릴, 헤테로아릴, 또는 보호기이고;
R0 및 R0'는 수소 및 메틸로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R1, R2, R3, 및 R4는 수소, 히드록실, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 시클로저급알킬, 고리 아미노알킬, 알킬아미노알킬, 저급알콕시, 아미노, 알킬아미노, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아랄킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아랄킬카르보닐, 아릴, 및 헤테로아릴로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R5 및 R8은 수소, 할로, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 시클로알킬, 알콕시, 아미노, 아미노알콕시, 카르보닐옥시, 아미노카르보닐옥시, 알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 헤테로아랄킬카르보닐아미노, 시클로이미도, 헤테로시클로이미도, 아미디노, 시클로아미디노, 헤테로시클로아미디노, 구아니디닐, 아릴, 비아릴, 헤테로아릴, 헤테로아릴아릴, 헤테로아릴헤테로아릴, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로카르보닐옥시, 헤테로아릴카르보닐옥시, 및 아릴술폰아미도로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R6은 수소, 및 선택적으로 치환된 아릴, 헤테로아릴, 및 헤테로시클로로 구성되는 군으로부터 선택되고;
R7은 수소, 히드록시, 할로, 카르복실, 니트로, 아미노, 아미도, 아미디노, 이미도, 시아노, 술포닐, 메탄술포닐, 및 치환된 또는 비치환된 알킬, 알콕시, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아랄킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아랄킬카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 아랄킬카르보닐옥시, 헤테로아릴카르보닐옥시, 헤테로아랄킬카르보닐옥시, 알킬아미노카르보닐옥시, 아릴아미노카르보닐옥시, 포르밀, 저급알킬카르보닐, 저급알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 아미노아릴, 알킬술포닐, 술폰아미도, 아미노알콕시, 알킬아미노, 헤테로아릴아미노, 알킬카르보닐아미노, 알킬아미노카르보닐아미노, 아릴아미노카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 시클로아미도, 시클로티오아미도, 시클로아미디노, 헤테로시클로아미디노, 시클로알킬, 시클로이미도, 헤테로시클로이미도, 구아니디닐, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클로, 헤테로시클로알킬, 아릴술포닐, 및 아릴술폰아미도로 구성되는 군으로부터 선택된다.
또 다른 특히 바람직한 구체예에서, 본 발명의 새로운 화합물은 하기 화학식 III의 화합물, 그것의 토토머, 또는 그것의 제약학적으로 허용되는 염에 의해 제공된다.
상기 식에서,
W는 존재하지 않거나, 또는
-0-, -S-, -NH-, -NH-CO-, -CO-, -C02-, -CH2-, -CF2-, -CONH-, 및 -NR'-로 구성되는 군으로부터 선택되며, 여기서 R'는 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클릴이고;
R2 및 R3은 수소, 히드록실, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 시클로저급알킬, 고리 아미노알킬, 알킬아미노알킬, 저급알콕시, 아미노, 알킬아미노, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아랄킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아랄킬카르보닐, 아릴, 및 헤테로아릴로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R5 및 R8은 수소, 할로, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 시클로알킬, 알콕시, 아미노, 아미노알콕시, 카르보닐옥시, 아미노카르보닐옥시, 알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 헤테로아랄킬카르보닐아미노, 시클로이미도, 헤테로시클로이미도, 아미디노, 시클로아미디노, 헤테로시클로아미디노, 구아니디닐, 아릴, 비아릴, 헤테로아릴, 헤테로아릴아릴, 헤테로아릴헤테로아릴, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로카르보닐옥시, 헤테로아릴카르보닐옥시, 및 아릴술폰아미도로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R6은 수소, 및 선택적으로 치환된 아릴, 헤테로아릴, 및 헤테로시클로 구성되는 군으로부터 선택되고;
R7은 수소, 히드록시, 할로, 카르복실, 니트로, 아미노, 아미도, 아미디노, 이미도, 시아노, 술포닐, 메탄술포닐, 및 치환된 또는 비치환된 알킬, 알콕시, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아랄킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아랄킬카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 아랄킬카르보닐옥시, 헤테로아릴카르보닐옥시, 헤테로아랄킬카르보닐옥시, 알킬아미노카르보닐옥시, 아릴아미노카르보닐옥시, 포르밀, 저급알킬카르보닐, 저급알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 아미노아릴, 알킬술포닐, 술폰아미도, 아미노알콕시, 알킬아미노, 헤테로아릴아미노, 알킬카르보닐아미노, 알킬아미노카르보닐아미노, 아릴아미노카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 시클로아미도, 시클로티오아미도, 시클로아미디노, 헤테로시클로아미디노, 시클로알킬, 시클로이미도, 헤테로시클로이미도, 구아니디닐, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클로, 헤테로시클로알킬, 아릴술포닐, 및 아릴술폰아미도로 구성되는 군으로부터 선택되고;
R9 및 R10은 수소, 히드록시, 니트로, 아미노, 시아노, 할로, 티오아미도, 아미디노, 옥사미디노, 알콕시아미디노, 이미디노, 구아니디닐, 술폰아미도, 카르복실, 포르밀, 저급알킬, 아미노저급알킬, 저급알킬아미노저급알킬, 할로저급알킬, 저급알콕시, 할로저급알콕시, 저급알콕시알킬, 저급알킬아미노저급알콕시, 저급알킬카르보닐, 저급아랄킬카르보닐, 저급헤테로아랄킬카르보닐, 알킬티오, 아릴, 및 아랄킬로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택된다.
가장 바람직하게, A는 아미노피리딜, 니트로피리딜, 아미노니트로피리딜, 시아노피리딜, 시아노티아졸릴, 아미노시아노피리딜, 트리플루오로메틸피리딜, 메톡시피리딜, 메톡시니트로피리딜, 메톡시시아노피리딜, 및 니트로티아졸릴로 구성되는 군으로부터 선택된다.
본 발명의 방법, 화합물 및 조성물은, 당뇨병, 알츠하이머병 및 다른 신경변성 장애들, 비만, 죽상경화성 심혈관 질환, 본태고혈압, 다낭난소 증후군, 증후군 X, 허혈, 특히 대뇌허혈, 외상성 뇌손상, 양극성 장애, 면역결핍 그리고 암에서와 같은, GSK3 활성에 의해 매개되는 장애의 치료에서, 단독으로 또는 다른 제약학적 활성 제제와 조합하여 사용될 수 있다.
바람직한 구체예의 상세한 설명
본 발명에 따라서, 생체외 또는 생체내에서 글리코겐 신타제 키나제 3(GSK3) 활성의 억제를 위한 화합물, 조성물 및 방법이 제공된다. 한 양태로서, 본 발명은 하기 화학식 I의 GSK3 억제 활성을 갖는 새로운 화합물, 그것의 토토머, 또는 그것의 제약학적으로 허용되는 염을 제공한다.
(화학식 I)
상기 식에서,
X는 질소, 산소, 또는 선택적으로 치환된 탄소이고;
W는 존재하지 않거나, 또는
-O-, -S-, -S(O)-, -SO2-, -NH-, -NH-CO-, -NR'CO-, -NHSO2-, -NR'SO2-, -CO-, -CO2-, -CH2-, -CF2-, CHF, -CONH-, -CONR'-, 및 -NR'-로 구성되는 군으로부터 선택되며, 여기서 R'는 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클로이고;
A1은 선택적으로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴이고;
R0 및 R0'는 수소 및 메틸로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R1, R2, R3, 및 R4는 수소, 히드록실, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 시클로저급알킬, 고리 아미노알킬, 알킬아미노알킬, 저급알콕시, 아미노, 알킬아미노, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아랄킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아랄킬카르보닐, 아릴, 및 헤테로아릴로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R5 및 R8은 수소, 할로, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 시클로알킬, 알콕시, 아미노, 아미노알콕시, 카르보닐옥시, 아미노카르보닐옥시, 알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 헤테로아랄킬카르보닐아미노, 시클로이미도, 헤테로시클로이미도, 아미디노, 시클로아미디노, 헤테로시클로아미디노, 구아니디닐, 아릴, 비아릴, 헤테로아릴, 헤테로아릴아릴, 헤테로아릴헤테로아릴, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로카르보닐옥시, 헤테로아릴카르보닐옥시, 및 아릴술폰아미도로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R6은 수소, 및 선택적으로 치환된 아릴, 헤테로아릴, 및 헤테로시클로이고;
R7은 수소, 히드록시, 할로, 카르복실, 니트로, 아미노, 아미도, 아미디노, 이미도, 시아노, 술포닐, 메탄술포닐, 및 치환된 또는 비치환된 알킬, 알콕시, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아랄킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아랄킬카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 아랄킬카르보닐옥시, 헤테로아릴카르보닐옥시, 헤테로아랄킬카르보닐옥시, 알킬아미노카르보닐옥시, 아릴아미노카르보닐옥시, 포르밀, 저급알킬카르보닐, 저급알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 아미노아릴, 알킬술포닐, 술폰아미도, 아미노알콕시, 알킬아미노, 헤테로아릴아미노, 알킬카르보닐아미노, 알킬아미노카르보닐아미노, 아릴아미노카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 시클로아미도, 시클로티오아미도, 시클로아미디노, 헤테로시클로아미디노, 시클로알킬, 시클로이미도, 헤테로시클로이미도, 구아니디닐, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클로, 헤테로시클로알킬, 아릴술포닐, 및 아릴술폰아미도로 구성되는 군으로부터 선택된다.
다른 바람직한 구체예에서, 본 발명의 새로운 화합물은 하기 화학식 II의 화합물, 그것의 토토머, 또는 그것의 제약학적으로 허용되는 염에 의해 제공된다.
(화학식 II)
상기 식에서,
W는 존재하지 않거나, 또는
-O-, -S-, -S(O)-, -SO2-, -NH-, -NH-CO-, -NR'CO-, -NHSO2-, -NR'SO2-, -CO-, -CO2-, -CH2-, -CF2-, CHF, -CONH-, -CONR'-, 및 -NR'-로 구성되는 군으로부터 선택되며, 여기서 R'은 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클로이고;
A1은 선택적으로 치환된 아릴, 헤테로아릴, 또는 보호기이고;
R0 및 R0'는 수소 및 메틸로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R1, R2, R3, 및 R4는 수소, 히드록실, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 시클로저급알킬, 고리 아미노알킬, 알킬아미노알킬, 저급알콕시, 아미노, 알킬아미노, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아랄킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아랄킬카르보닐, 아릴, 및 헤테로아릴로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R5 및 R8은 수소, 할로, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 시클로알킬, 알콕시, 아미노, 아미노알콕시, 카르보닐옥시, 아미노카르보닐옥시, 알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 헤테로아랄킬카르보닐아미노, 시클로이미도, 헤테로시클로이미도, 아미디노, 시클로아미디노, 헤테로시클로아미디노, 구아니디닐, 아릴, 비아릴, 헤테로아릴, 헤테로아릴아릴, 헤테로아릴헤테로아릴, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로카르보닐옥시, 헤테로아릴카르보닐옥시, 및 아릴술폰아미도로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R6은 수소, 및 선택적으로 치환된 아릴, 헤테로아릴, 및 헤테로시클로로 구성되는 군으로부터 선택되고;
R7은 수소, 히드록시, 할로, 카르복실, 니트로, 아미노, 아미도, 아미디노, 이미도, 시아노, 술포닐,메탄술포닐, 및 치환된 또는 비치환된 알킬, 알콕시, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아랄킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아랄킬카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 아랄킬카르보닐옥시, 헤테로아릴카르보닐옥시, 헤테로아랄킬카르보닐옥시, 알킬아미노카르보닐옥시, 아릴아미노카르보닐옥시, 포르밀, 저급알킬카르보닐, 저급알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 아미노아릴, 알킬술포닐, 술폰아미도, 아미노알콕시, 알킬아미노, 헤테로아릴아미노,알킬카르보닐아미노, 알킬아미노카르보닐아미노, 아릴아미노카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 시클로아미도, 시클로티오아미도, 시클로아미디노, 헤테로시클로아미디노, 시클로알킬, 시클로이미도, 헤테로시클로이미도, 구아니디닐, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클로, 헤테로시클로알킬, 아릴술포닐, 및 아릴술폰아미도로 구성되는 군으로부터 선택된다.
또 다른 특히 바람직한 구체예에서, 본 발명의 새로운 화합물은 하기 화학식 III의 화합물, 그것의 토토머, 또는 그것의 제약학적으로 허용되는 염에 의해 제공된다.
(화학식 III)
상기 식에서,
W는 존재하지 않거나, 또는
-O-, -S-, -S(O)-, -S02-, -NH-, -NH-CO-, -NR'CO-, -NHSO2-, -NR'S02-, -CO-, -C02-, -CH2-, -CF2-, CHF, -CONH-, -CONR'-, 및 -NR'-로 구성되는 군으로부터 선택되며, 여기서 R'은 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클로이고;
R2 및 R3은 수소, 히드록실, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 시클로저급알킬, 고리 아미노알킬, 알킬아미노알킬, 저급알콕시, 아미노, 알킬아미노, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아랄킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아랄킬카르보닐, 아릴, 및 헤테로아릴로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R5 및 R8은 수소, 할로, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 시클로알킬, 알콕시, 아미노, 아미노알콕시, 카르보닐옥시, 아미노카르보닐옥시, 알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 헤테로아랄킬카르보닐아미노, 시클로이미도, 헤테로시클로이미도, 아미디노, 시클로아미디노, 헤테로시클로아미디노, 구아니디닐, 아릴, 비아릴, 헤테로아릴, 헤테로아릴아릴, 헤테로아릴헤테로아릴, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로카르보닐옥시, 헤테로아릴카르보닐옥시, 및 아릴술폰아미도로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R6은 수소, 및 선택적으로 치환된 아릴, 헤테로아릴, 및 헤테로시클로로 구성되는 군으로부터 선택되고;
R7은 수소, 히드록시, 할로, 카르복실, 니트로, 아미노, 아미도, 아미디노, 이미도, 시아노, 술포닐,메탄술포닐, 및 치환된 또는 비치환된 알킬, 알콕시, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아랄킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아랄킬카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 아랄킬카르보닐옥시, 헤테로아릴카르보닐옥시, 헤테로아랄킬카르보닐옥시, 알킬아미노카르보닐옥시, 아릴아미노카르보닐옥시, 포르밀, 저급알킬카르보닐, 저급알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 아미노아릴, 알킬술포닐, 술폰아미도, 아미노알콕시, 알킬아미노, 헤테로아릴아미노, 알킬카르보닐아미노, 알킬아미노카르보닐아미노, 아릴아미노카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 시클로아미도, 시클로티오아미도, 시클로아미디노, 헤테로시클로아미디노, 시클로알킬, 시클로이미도, 헤테로시클로이미도, 구아니디닐, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클로, 헤테로시클로알킬, 아릴술포닐, 및 아릴술폰아미도로 구성되는 군으로부터 선택되고;
R9 및 R10은 수소, 히드록시, 니트로, 아미노, 시아노, 할로, 티오아미도, 아미디노, 옥사미디노, 알콕시아미디노, 이미디노, 구아니디닐, 술폰아미도, 카르복실, 포르밀, 저급알킬, 아미노저급알킬, 저급알킬아미노저급알킬, 할로저급알킬, 저급알콕시, 할로저급알콕시, 저급알콕시알킬, 저급알킬아미노저급알콕시, 저급알킬카르보닐, 저급아랄킬카르보닐, 저급헤테로아랄킬카르보닐, 알킬티오, 아릴, 및 아랄킬로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택된다.
가장 바람직하게, A는 아미노피리딜, 니트로피리딜, 아미노니트로피리딜, 시아노피리딜, 시아노티아졸릴, 아미노시아노피리딜, 트리플루오로메틸피리딜, 메톡시피리딜, 메톡시니트로피리딜, 메톡시시아노피리딜, 및 니트로티아졸릴로 구성되는 군으로부터 선택된다.
구성요소 A1(상기 화학식 I 및 II)은 3 내지 10개의 탄소 고리 원자와 선택적으로 1개 이상의 고리 헤테로원자를 갖는 방향족 고리일 수 있다. 따라서, 한 구체예에서, A는 선택적으로 치환된 탄소고리 아릴일 수 있다. 또는 달리, A는 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 예를 들어 치환된 또는 비치환된 피리딜, 피리미디닐, 티아졸릴, 인돌릴, 이미다졸릴, 옥사디아졸릴, 테트라졸릴, 피라지닐, 트리아졸릴, 티오페닐, 푸라닐, 퀴놀리닐, 푸리닐, 나프틸, 벤조티아졸릴, 벤조피리딜, 및 벤즈이미다졸릴이며, 이들은 적어도 1개 내지는 3개 이하의 치환기로 치환될 수 있다. 대표적인 치환기는, 예를 들어 니트로, 아미노, 시아노, 할로, 티오아미도, 아미디노, 옥사미디노, 알콕시아미디노, 이미디노, 구아니디노, 술폰아미도, 카르복실, 포르밀, 저급알킬, 할로저급알킬, 저급알콕시, 할로저급알콕시, 저급알콕시알킬, 저급알킬아미노저급알콕시, 저급알킬카르보닐, 저급아랄킬카르보닐, 저급헤테로아랄킬카르보닐, 알킬티오, 아미노알킬 및 시아노알킬로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있다.
본 발명의 현재 특히 바람직한 구체예에서, A1은 하기 화학식 IV를 가진다.
상기 식에서,
R9 및 R10은 수소, 히드록시, 니트로, 아미노, 시아노, 할로, 티오아미도, 아미디노, 옥사미디노, 알콕시아미디노, 이미디노, 구아니디닐, 술폰아미도, 카르복실, 포르밀, 저급알킬, 아미노저급알킬, 저급알킬아미노저급알킬, 할로저급알킬, 저급알콕시, 할로저급알콕시, 저급알콕시알킬, 저급알킬아미노저급알콕시, 저급알킬카르보닐, 저급아랄킬카르보닐, 저급헤테로아랄킬카르보닐, 알킬티오, 아릴 및 아랄킬로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택된다.
가장 바람직하게, A는 아미노피리딜, 니트로피리딜, 아미노니트로피리딜, 시아노피리딜, 시아노티아졸릴, 아미노시아노피리딜, 트리플루오로메틸피리딜, 메톡시피리딜, 메톡시니트로피리딜, 메톡시시아노피리딜 및 니트로티아졸릴로 구성되는 군으로부터 선택된다.
본 발명의 다른 구체예에서, R1, R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 수소, 또는 할로저급알킬, 헤테로시클로아미노알킬, 및 저급알킬아미노저급알킬; 또는 저급알킬아미노저급알킬로 구성되는 군으로부터 선택된 비치환된 또는 치환된 저급알킬일 수 있다. 본 발명의 현재 바람직한 구체예는, R1, R2, 및 R3이 수소이고, R4가 수소, 메틸, 에틸, 아미노에틸, 디메틸아미노에틸, 피리딜에틸, 피페리디닐, 피롤리디닐에틸, 피페라지닐에틸 및 모르폴리닐에틸로 구성되는 군으로부터 선택된 화합물을 포함한다.
본 발명의 다른 현재 바람직한 화합물은 R5 및 R7 중 적어도 하나가 치환된 및 비치환된 아릴, 헤테로아릴 및 비아릴로 구성되는 군으로부터 선택된 화학식 I의 화합물을 포함한다. 현재 바람직한 구체예에서, R5 및 R8 중 적어도 하나는 하기 화학식 V의 치환된 또는 비치환된 구조이다.
상기 식에서,
R11, R12, R13, R14, 및 R15는 수소, 니트로, 아미노, 시아노, 할로, 티오아미도, 카르복실, 히드록시, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 저급알콕시, 저급알콕시알킬, 할로저급알킬, 할로저급알콕시, 아미노알킬, 알킬아미노, 아미노알킬알키닐, 알킬아미노알킬알키닐, 알킬티오, 알킬카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아랄킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 아미노카르보닐, 저급알킬아미노카르보닐, 아미노아랄킬, 저급알킬아미노알킬, 아릴, 헤테로아릴, 시클로헤테로알킬, 아랄킬, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 아랄킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시알킬, 알킬카르보닐옥시알킬, 헤테로아릴카르보닐옥시알킬, 아랄킬카르보닐옥시알킬, 및 헤테로아랄킬카르보닐옥시알킬로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택된다. 현재 특히 바람직한 화합물은, R11, R12, R14 및 R15는 수소이고, R13은 할로, 저급알킬, 히드록시, 저급알콕시, 할로저급알킬, 아미노카르보닐, 알킬아미노카르보닐 및 시아노로 구성되는 군으로부터 선택된 것; R11, R13, 및 R15는 수소이고, R12 및 R14는 할로, 저급알킬, 히드록시, 저급알콕시, 할로저급알킬 및 시아노로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택된 것; R11, R12, R14, 및 R15는 수소이고, R13은 헤테로아릴인 것; R11, R12, R14, 및 R15는 수소이고, R13은 헤테로시클로알킬인 것; 그리고 R11, R12, R13, R14, 및 R15 중 적어도 하나는 할로이고, R11, R12, R13, R14, 및 R15 중 나머지는 수소인 것이다.
어떤 대표적인 구체예에서, R5 및 R8 중 적어도 하나는 디클로로페닐, 디플루오로페닐, 트리플루오로메틸페닐, 클로로플루오로페닐, 브로모클로로페닐, 에틸페닐, 메틸클로로페닐, 이미다졸릴페닐, 시아노페닐, 모르폴리노페닐 및 시아노클로로페닐로 구성되는 군으로부터 선택된다.
본 발명의 다른 대표적인 구체예에서, R6은 치환된 또는 비치환된 아릴 또는 헤테로아릴, 예를 들어 치환된 또는 비치환된 피리딜, 피리미디닐, 피페라지닐, 티아졸릴, 인돌릴, 이미다졸릴, 옥사디아졸릴, 테트라졸릴, 피라지닐, 트리아졸릴, 티에닐, 푸라닐, 퀴놀리닐, 피롤리오피리딜, 벤조티아졸릴, 벤조피리딜, 벤조트리아졸릴, 및 벤즈이미다졸릴이다. 또 다른 구체예에서, R6은 하기 구조식을 갖는 모노케토피페라지닐기일 수 있다:
상기 식에서, R15 및 R16은 수소, 저급알킬, 저급알키닐, 아릴, 헤테로아릴,아릴저급알킬, 저급알킬아릴저급알킬, 할로저급알킬, 할로아릴저급알킬 탄소고리 및 헤테로고리로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 R8이 또 다른 R6 또는 R15와 함께 탄소고리, 헤테로고리 또는 아릴 고리를 형성할 수 있고; o는 1 내지 6의 정수이다. 본 발명의 이 양태의 대표적인 구체예에서, R15는 저급알킬, 예를 들어 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, 시클로프로필, n-부틸, 이소부틸 또는 t-부틸이거나, 또는 R15는 R16과 함께 하기 구조식을 갖는 기를 형성한다:
이 기의 현재 바람직한 대표적인 화합물은, 예를 들어 하기 실시예 1-362의 화합물을 포함한다.
다음의 약어들 및 정의가 본 출원 전체에서 사용된다:
"GSK-3"은 글리코겐 신타제 키나제를 나타내는 약어이다.
"AD"는 알츠하이머병을 나타내는 약어이다.
"MS"는 다발성 경화증을 나타내는 약어이다.
"ALS"은 근위축성 측삭경화증을 나타내는 약어이다.
"DMAP"는 디메틸아미노프로필아민을 나타내는 약어이다.
"DIC"는 디이소프로필카르보디이미다를 나타내는 약어이다.
"TOSMIC"는 토실메틸이소시아나이드를 나타내는 약어이다.
"DMSO"는 디메틸술폭시드를 나타내는 약어이다.
"DMF"는 N,N-디메틸포름아미드를 나타내는 약어이다.
"DMA"는 N,N-디메틸아세타미드를 나타내는 약어이다.
"TFA"는 트리플루오로아세트산을 나타내는 약어이다.
"HBTU"는 2-(1H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸유로늄 헥사플루오로포스페이트를 나타내는 약어이다.
일반적으로, 수소 또는 H 같은 어떤 원소에 대한 언급은 그 원소의 모든 동위원소들을 포함한다. 예를 들어, 만일 R 기가 수소 또는 H를 포함한다고 정의된다면, 그것은 또한 중수소 및 삼중수소를 포함한다.
용어 "알킬"은 헤테로 원자를 함유하지 않는 알킬기를 말한다. 이와 같은 용어는 직쇄 알킬, 예를 들어 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 데실, 운데실, 도데실 등을 포함한다. 이 용어는 또한 직쇄 알킬기의 분기쇄 이성질체를 포함하며, 이들은 제한은 없지만, 예를 들어 -CH(CH3)2, -CH(CH3)-(CH2CH3), -CH(CH2CH3)2, -C(CH3)3, -C(CH2CH3)3, -CH2CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)(CH2CH3), -CH2CH(CH2CH3)2, -CH2C(CH3)3, -CH2C(CH2CH3)3, -CH(CH3)CH(CH3)(CH2CH3), -CH2CH2CH-(CH3)2, -CH2CH2CH(CH3)(CH2CH3), -CH2CH2CH(CH2CH3)2, -CH2CH2C(CH3)3, -CH2CH2C(CH2-CH3)3, -CH(CH3)CH2CH(CH3)2, -CH(CH3)CH(CH3)CH(CH3)2, -CH(CH2CH3)CH(CH3)CH(CH3)(CH2-CH3) 등을 포함한다. 이 용어는 또한 고리 알킬기, 예를 들어 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 및 시클로옥틸을 포함하며, 그러한 고리는 상기 정의된 직쇄 및 분기쇄 알킬기로 치환될 수 있고, 예를 들어 아다만틸, 3-메틸-1-(메틸에틸)시클로펜탄, 및 2-메틸비시클로[2.2.0]헥산기가 있다. 용어 "알킬기"는 일차 알킬기, 이차 알킬기, 및 삼차 알킬기를 포함한다. 바람직한 알킬기는 1 내지 12개 탄소 원자를 갖는 직쇄 및 분기쇄 알킬기 그리고 고리 알킬기이다.
용어 "치환된 알킬"은 탄소(들) 또는 수소(들)괴의 하나 이상의 결합이 비-수소 또는 비-탄소 원자, 제한은 없지만, 예를 들어 할로겐 원자, 예를 들어 F, Cl, Br, 및 I; 히드록실기, 알콕시기, 아릴옥시기, 및 에스테르기와 같은 기들에 있는 산소 원자; 티올기, 알킬 및 아릴 술피드기, 술폰기, 술포닐기, 및 술폭시드기와 같은 기들에 있는 황 원자; 아민, 아미드, 알킬아민, 디알킬아민, 아릴아민, 알킬아릴아민, 디아릴아민, N-옥시드, 이미드, 및 엔아민과 같은 기들에 있는 질소 원자; 트리알킬실릴기, 디알킬아릴실릴기, 알킬디아릴실릴기, 및 트리아릴실릴기와 같은 기들에 있는 규소 원자; 그리고 다양한 다른 기들에 있는 다른 헤테로 원자와의 결합에 의해 대체된 상기 정의된 알킬기를 말한다. 치환된 알킬기는 또한 탄소(들) 또는 수소(들) 원자와의 하나 이상의 결합이 옥소, 카르보닐, 카르복실, 및 에스테르기에 있는 산소; 이민, 옥심, 히드라존, 및 니트릴과 같은 기들에 있는 질소와 같은 헤테로 원자와의 더 높은 차수의 결합(예를 들어, 이중결합 또는 삼중결합)에 의해 대체된 기들을 포함한다. 더 이상으로, 치환된 알킬기는 탄소(들) 또는 수소(들) 원자와의 하나 이상의 결합이 아릴, 헤테로시클릴기, 또는 시클로알킬기와의 결합에 의해 대체된 알킬기를 포함한다. 바람직한 치환된 알킬기는, 그 중에서도 특히, 탄소 또는 수소 원자와의 하나 이상의 결합이 불소 원자와의 하나 이상의 결합에 의해 대체된 알킬기를 포함한다. 또 다른 바람직한 치환된 알킬기는 트리플루오로메틸기 및 트리플루오로메틸기를 함유하는 다른 알킬기이다. 다른 바람직한 치환된 알킬기는 탄소 또는 수소 원자와의 하나 이상의 결합이 치환된 알킬기가 히드록실, 알콕시, 또는 아릴옥시기를 함유하도록 산소 원자와의 결합에 의해 대체된 것들을 포함한다. 또 다른 바람직한 치환된 알킬기는 아민, 또는 치환된 또는 비치환된 알킬아민, 디알킬아민, 아릴아민, (알킬)(아릴)아민, 디아릴아민, 헤테로시클릴아민, 디헤테로시클릴아민, (알킬)(헤테로시클릴)아민, 또는 (아릴)(헤테로시클릴)아민기를 갖는 알킬기를 포함한다.
본원에 사용된 대표적인 헤테로시클로기는, 예를 들어 아래에 나타낸 것들을 포함한다(여기서 치환기의 부착점, 그리고 아래 나타낸 다른 치환기들은 상부 우측 결합을 통한다). 이들 헤테로시클로기는 더 치환될 수도 있으며, 다양한 위치에서 부착될 수 있고, 이는 본원에 설명된 바와 관련하여 유기화학 및 의약화학 분야의 업자들에게 명백할 것이다. 이들 헤테로시클로기는, 예를 들어 피롤리딘, 피페리딘, 메틸피롤리딘, 피롤리딘-3-일아민, 디메틸피롤리딘-3-일아민, 2-아미노퀴누클리딘, 피롤리딘-2-온, 테트라히드로푸라닐, 피롤리딘-3-올, 4-피페리딜피페리딘, 1-벤질-4-피페리딜아민, 호모피페리딘, 호모피페리진, 호모모르폴린, 메틸피롤리딘,
을 포함한다.
대표적인 헤테로아릴기는, 예를 들어 아래에 나타낸 것들을 포함한다. 이들 헤테로아릴기는 더 치환될 수도 있으며, 다양한 위치에서 부착될 수 있고, 이는 본원에 설명된 바와 관련하여 유기화학 및 의약화학 분야의 업자들에게 명백할 것이다.
대표적인 시클로이미도 및 헤테로시클로이미도는, 예를 들어 아래에 나타낸 것들을 포함한다. 이들 시클로이미도 및 헤테로시클로이미도는 더 치환될 수도 있으며, 다양한 위치에서 부착될 수 있고, 이는 본원에 설명된 바와 관련하여 유기화학 및 의약화학 분야의 업자들에게 명백할 것이다.
대표적인 치환된 아미디노 및 헤테로시클로아미디노는, 예를 들어 아래에 나타낸 것들을 포함한다. 이들 아미디노 및 헤테로시클로아미디노는 더 치환될 수도 있으며, 이는 본원에 설명된 바와 관련하여 유기화학 및 의약화학 분야의 업자들에게 명백할 것이다.
대표적인 치환된 알킬카르보닐아미노, 알킬옥시카르보닐아미노, 아미노알킬옥시카르보닐아미노, 및 아릴카르보닐아미노기는, 예를 들어 아래에 나타낸 것들을 포함한다. 이들 기는 더 치환될 수도 있으며, 이는 본원에 설명된 바와 관련하여 유기화학 및 의약화학 분야의 업자들에게 명백할 것이다.
대표적인 치환된 아미노카르보닐기는, 예를 들어 아래에 나타낸 것들을 포함한다. 이들은 헤테로시클로기 및 헤테로아릴기에 의해 더 치환될 수 있으며, 이는 본원에 설명된 바와 관련하여 유기화학 및 의약화학 분야의 업자들에게 명백할 것이다. 바람직한 아미노카르보닐기는, N-(2-시아노에틸)카르복사미드, N-(3-메톡시프로필) 카르복사미드, N-시클로프로필-카르복사미드, N-(2-히드록시-이소프로필)카르복사미드, 메틸 2-카르보닐아미노-3-히드록시-프로파노에이트, N-(2-히드록시프로필)카르복사미드, N-(2-히드록시-이소프로필)카르복사미드, N-[2-히드록시-1-(히드록시메틸)에틸]카르복사미드, N-(2-카르보닐아미노에틸)-아세타미드, N-(2-(2-피리딜)에틸)카르복사미드, N-(2-피리딜메틸)카르복사미드, N-(옥소란-2-일메틸)카르복사미드, N-(4-히드록시피롤리딘-2-일)카르복사미드, N-[2-(2-히드록시에톡시)에틸]카르복사미드, N-(4-히드록시시클로헥실)카르복사미드, N-[2-(2-옥소-4-이미다졸리닐)에틸]카르복사미드, N-(카르보닐아미노메틸)아세타미드, N-(3-피롤리디닐프로필)카르복사미드, N-[1-(카르보닐아미노메틸)피롤리딘-3-일]아세타미드, N-(2-모르폴린-4-일에틸)카르복사미드, N-[3-(2-옥소피롤리디닐)프로필]카르복사미드, 4-메틸-2-옥소피페라진카르발데히드, N-(2-히드록시-3-피롤리디닐프로필)카르복사미드, N-(2-히드록시-3-모르폴린-4-일프로필)카르복사미드, N-{2-[(5-시아노-2-피리딜)아미노]에틸}카르복사미드, 3-(디메틸아미노)피롤리딘카르발데히드, N-[(5-메틸피라진-2-일)메틸]카르복사미드, 2,2,2-트리플루오로-N-(1-포르밀피롤리딘-3-일)아세타미드,
을 포함한다.
대표적인 치환된 알콕시카르보닐기는, 예를 들어 아래에 나타낸 것들을 포함한다. 이들 알콕시카르보닐기는 더 치환될 수 있으며, 이는 본원에 설명된 바와 함께 유기화학 및 의약화학 분야의 업자들에게 명백할 것이다.
용어 "비아릴"은 서로 축합되지 않은 2개의 아릴기가 결합되어 있는 기 또는 치환체를 말한다. 전형적인 비아릴 화합물은, 예를 들어 페닐벤젠, 디페닐디아진, 4-메틸티오-1-페닐벤젠, 페녹시벤젠, (2-페닐에티닐)벤젠, 디페닐케톤, (4-페닐부타-1,3-디인일)벤젠, 페닐벤질아민, (페닐메톡시)벤젠 등을 포함한다. 바람직한 선택적으로 치환된 비아릴기는 2-(페닐아미노)-N-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-아세타미드, 1,4-디페닐벤젠, N-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-2-[벤질아미노]-아세타미드, 및 2-아미노-N-[4-(2-페닐에티닐)페닐]프로판아미드를 포함한다.
용어 "헤테로아릴아릴"은 아릴기 중 하나가 헤테로아릴기인 비아릴기를 말한다. 전형적인 헤테로아릴아릴기는, 예를 들어 2-페닐피리딘, 페닐피롤, 3-(2-페닐에티닐)피리딘, 페닐피라졸, 5-(2-페닐에티닐)-1,3-디히드로피리미딘-2,4-디온, 4-페닐-1,2,3-티아디아졸, 2-(2-페닐에티닐)피라진, 2-페닐티오펜, 페닐이미다졸, 3-(2-피페라지닐-페닐)푸란, 3-(2,4-디클로로페닐)-4-메틸피롤 등을 포함한다. 바람직한 선택적으로 치환된 헤테로아릴아릴기는 5-(2-페닐에티닐)피리미딘-2-일아민, 1-메톡시-4-(2-티에닐)벤젠, 1-메톡시-3-(2-티에닐)벤젠, 5-메틸-2-페닐-피리딘, 5-메틸-3-페닐이속사졸, 2-[3-(트리플루오로메틸)페닐]푸란, 3-플루오로-5-(2-푸릴)-2-메톡시-1-프로프-2-에닐벤젠, (히드록시이미노)(5-페닐(2-티에닐))-메탄, 및 5-[(4-메틸피페라지닐)메틸]-2-페닐티오펜을 포함한다. 용어 "헤테로아릴헤테로아릴"은 두 개의 아릴기가 모두 헤테로아릴기인 비아릴기를 말한다. 전형적인 헤테로아릴헤테로아릴기는, 예를 들어 3-피리딜이미다졸, 2-이미다졸릴피라진 등을 포함한다. 바람직한 선택적으로 치환된 헤테로아릴헤테로아릴기는 2-(4-피페라지닐-3-피리딜)푸란, 디에틸(3-피라진-2-일(4-피리딜))-아민, 및 디메틸{2-[2-(5-메틸피라진-2-일)에티닐](4-피리딜)}아민을 포함한다.
히드록실기, 아민기 및 술프히드릴기와 관련해서 용어 "보호된" 또는 "보호기"는 이들 작용기가 바람직하지 않은 반응으로부터 Protective Groups in Organic Synthesis, Greene, T. W., John Wiley & Sons, New York, NY, (1판, 1981)에 기재된 것들과 같은 당업자에게 공지된 보호기로 보호된 형태를 말하며, 보호기는 여기 기재된 과정을 사용하여 부가 또는 제거될 수 있다. 보호된 히드록실기의 예들은, 제한은 없지만, 히드록실기와, 제한은 없지만 t-부틸디메틸클로로실란, 트리메틸클로로실란, 트리이소프로필클로로실란, 트리에틸클로로실란과 같은 시약과의 반응에 의해 얻어진 것들과 같은 실릴 에테르; 제한은 없지만, 메톡시메틸 에테르, 메틸티오메틸 에테르, 벤질옥시메틸 에테르, t-부톡시메틸 에테르, 2-메톡시에톡시메틸 에테르, 테트라히드로피라닐, 1-에톡시에틸 에테르, 알릴 에테르, 벤질 에테르와 같은 치환된 메틸 및 에틸 에테르; 제한은 없지만, 벤조일포르메이트, 포르메이트, 아세테이트, 트리클로로아세테이트, 및 트리플루오로아세테이트와 같은 에스테르를 포함한다. 보호된 아민기의 예들은, 제한은 없지만, 포름아미드, 아세타미드, 트리플루오로아세타미드, 및 벤자미드와 같은 아미드; 프탈이미드, 및 디티오숙신이미드와 같은 이미드 등을 포함한다. 보호된 술프히드릴기의 예들은, 제한은 없지만, S-벤질 티오에테르, 및 S-4-피콜릴 티오에테르와 같은 티오에테르; 헤미티오, 디티오 및 아미노티오 아세탈과 같은 치환된 S-메틸 유도체 등을 포함한다.
다른 양태로서, 본 발명은 제약학적으로 허용되는 담체와 함께 투여되었을 때 사람 또는 동물 피험체에서 GSK3 활성을 조절하는데 효과적인 양으로 화학식 I, II 또는 III의 화합물을 포함하는 조성물을 제공한다.
또 다른 구체예에서, 본 발명은 화학식 I, II 또는 III의 화합물의 GSK3 억제량을 사람 또는 동물 피험체에게 투여하는 것을 포함하는, 사람 또는 동물 피험체에서 GSK3 활성을 억제하는 방법을 제공한다.
더 나아가, 본 발명은 단독으로 또는 다른 치료적 활성 제제와 조합하여, 화학식 I, II 또는 III의 화합물의 치료적 유효량을 사람 또는 동물 피험체에게 투여하는 것을 포함하는, 사람 또는 동물 피험체에서 GSK3-매개 장애로 고통 받는 사람 또는 동물 피험체를 치료하는 방법을 제공한다.
또 다른 구체예에서, 본 발명은 제약학적의 용도를 위한 상기 설명된 화학식 I, II 또는 III의 화합물과, 당뇨병, 알츠하이머병 및 다른 신경변성 장애들, 비만, 죽상경화성 심혈관 질환, 본태고혈압, 다낭난소 증후군, 증후군 X, 허혈, 특히 대뇌허혈, 외상성 뇌손상, 양극성 장애, 면역결핍 또는 암의 치료를 위한 의약의 제조에서 이들 화합물의 사용 방법을 제공한다.
상기 사용된 그리고 본원 여기 저기서 사용된 다음 용어들은 하기 정의된 의미를 가진다:
"글리코겐 신타제 키나제 3"와 "GSK3"는 본원에서 상호교환하여 사용되며 사람 GSK3 베타 아미노산 서열(Genbank 기탁 No. L33801)의 위치 56 내지 340의 아미노산에 60% 이상의 서열 상동성을 갖는 어떤 단백질을 말한다. 두 아미노산 서열 또는 두 핵산 서열의 상동성 퍼센트를 결정하기 위해서, 서열들은 최적의 비교를 위해 정렬된다(예를 들어, 나머지 한 폴리펩티드 또는 핵산과의 최적의 정렬을 위해 한 폴리펩티드 또는 핵산의 서열에 갭이 도입될 수 있다). 다음에, 상응하는 아미노산 위치 또는 뉴클레오티드 위치에 있는 아미노산 잔기 또는 뉴클레오티드가 비교된다. 한 서열에서의 위치가 나머지 한 서열에서의 상응하는 위치와 동일한 아미노산 잔기 또는 뉴클레오티드에 의해 점유될 때, 분자는 그 위치에서 상동성이다(즉, 본원에서 사용된 아미노산 또는 핵산 "상동성"은 아미노산 또는 핵산 "동일성"과 동등하다). 두 서열 사이의 상동성 퍼센트는 서열에 의해 공유된 동일한 위치의 갯수의 함수이다(즉, 동일성 %=동일한 위치의 # / 위치의 총 # x 100). GSK3는 원래 그것의 글리코겐 신타제의 인산화에 의해 확인되었는데, 이는 본원에 참고자료로 수록된 Woodgett 등, Trends Biochezn. Sci., 16:177-81 (1991)에 설명된다. GSK3 키나제 활성을 억제함에 의해서, GSK3 활성의 하류 활성이 억제될 수 있거나, 또는 달리 자극될 수 있다. 예를 들어, GSK3 활성이 억제될 때 글리코겐 신타제는 활성화될 수 있으며, 그 결과 글리코겐 생산이 증가된다. GSK3는 또한, 예를 들어 c-jun, β-카테닌, 및 tau 단백질의 인산화를 포함하는 여러 다른 환경에서는 키나제로서 작용한다고 알려져 있다. GSK3 키나제 활성의 억제가 다양한 생물학적 환경에서 다양한 효과를 가져올 수 있다는 것이 이해된다. 그러나, 본 발명은 본 발명이 어떻게 작용하는 지에 관한 메카니즘에 있어서 어떤 이론에 제한되지 않는다.
본원에 사용된 "GSK3 억제제"는 하기 일반적으로 설명된 GSK3 억제 활성에 대해서 무-세포 분석법으로 측정했을 때 GSK3와 관련하여 약 100μM 이하, 더 전형적으로는 약 50μM 이하의 IC50을 나타내는 화합물을 말한다. "IC50"은 효소(예를 들어, GSK3)의 활성을 반-최대 수준까지 감소시키는 억제제의 농도이다. 본 발명의 대표적인 화합물은 GSK3에 대해 억제 활성을 나타내는 것으로 발견되었다. 본 발명의 화합물은 무-세포 GSK3 키나제 분석법으로 측정했을 때 GSK3에 관련하여 바람직하게는 약 10μM 이하, 더 바람직하게는 약 5μM 이하, 더욱 바람직하게는 약 1μM 이하, 가장 바람직하게는 약 200nM 이하의 IC50을 나타낸다.
"선택적으로 치환된" 또는 "치환된 또는 비치환된"은 일가 또는 이가 라디칼로 수소를 대체하는 것을 말한다. 적합한 치환기는, 예를 들어 히드록실, 니트로, 아미노, 이미노, 시아노, 할로, 티오, 티오아미도, 아미디노, 이미디노, 옥소, 옥사미디노, 메톡사미디노, 이미디노, 구아니디노, 술폰아미도, 카르복실, 포르밀, 저급알킬, 할로저급알킬, 저급알콕시, 할로저급알콕시, 저급알콕시알킬, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아랄킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아랄킬카르보닐, 알킬티오, 아미노알킬, 시아노알킬, 등을 포함한다.
치환기는 그 자체가 치환될 수 있다. 치환기 상의 치환된 기는 카르복실, 할로; 니트로, 아미노, 시아노, 히드록실, 저급알킬, 저급알콕시, 아미노카르보닐, -SR, 티오아미도, -S03H, -S02R 또는 시클로알킬일 수 있으며, 여기서 R은 전형적으로 수소, 히드록실 또는 저급알킬이다.
치환된 치환체가 직쇄 기를 포함할 때, 치환은 사슬 내에서(예를 들어, 2-히드록시프로필, 2-아미노부틸 등) 또는 사슬 말단에서(예를 들어, 2-히드록시에틸, 3-시아노프로필 등) 일어날 수 있다. 치환된 치환체는 공유 결합된 탄소 또는 헤테로 원자의 직쇄, 분기 또는 고리 배열일 수 있다.
본원에 사용된 "저급알킬"은 1 내지 10개의 탄소 원자를 포함하는 분기쇄 또는 직쇄 알킬기를 말하며, 이것은 예를 들어 하나 이상의 할로겐, 히드록실 또는 다른 기들로 치환될 수도 있고 치환되지 않을 수도 있으며, 예를 들어 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸, t-부틸, 네오펜틸, 트리플루오로메틸, 펜타플루오로에틸 등을 포함한다.
"알킬렌일"은 1 내지 20개의 탄소 원자를 갖는 이가 직쇄 또는 분기쇄 포화 지방족 라디칼을 말한다. 본 발명의 화합물에서 사용된 전형적인 "알킬렌일"은 그것의 주쇄에 1 내지 약 6개의 탄소 원자를 갖는 저급알킬렌일기이다. "알케닐"은 본원에서 하나 이상의 이중결합과 2 내지 20개의 탄소 원자를 갖는 직쇄, 분기 또는 고리 라디칼을 말한다. "알키닐"은 본원에서 하나 이상의 삼중결합과 2 내지 20개의 탄소 원자를 갖는 직쇄, 분기 또는 고리 라디칼을 말한다.
본원에 사용된 "저급알콕시"는 RO-를 말하며, 여기서 R은 저급알킬이다. 저급알콕시기의 대표적인 예들은 메톡시, 에톡시, t-부톡시, 트리플루오로메톡시 등을 포함한다.
"시클로알킬"은 일- 또는 다-고리, 헤테로고리 또는 탄소고리 알킬 치환체를 말한다. 전형적인 시클로알킬 치환체는 3 내지 8개의 주쇄(즉, 고리) 원자를 가지며, 여기서 각 주쇄 원자는 탄소 또는 헤테로 원자이다. 용어 "헤테로시클로알킬"은 본원에서 고리 구조에 1 내지 5, 더 전형적으로는 1 내지 4개의 헤테로 원자를 갖는 시클로알킬 치환체를 말한다. 본 발명의 화합물에서 사용된 적합한 헤테로 원자는 질소, 산소 및 황이다. 대표적인 헤테로시클로알킬 부분은, 예를 들어 모르폴리노, 피페라지닐, 피페라디닐 등을 포함한다. 카르보시클로알킬기는 모든 고리 원자가 탄소인 시클로알킬기다. 시클로알킬 치환체와 관련하여 사용되었을 때, 용어 "다-고리"는 본원에서 융합 및 비-융합된 알킬 고리 구조를 말한다.
"할로"는 본원에서 할로겐 라디칼, 예를 들어 플루오린, 클로린, 브로민 또는 요딘을 말한다. "할로알킬"은 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된 알킬 라디칼을 말한다. 용어 "할로저급알킬"은 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된 저급알킬 라디칼을 말한다. 용어 "할로알콕시"는 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된 알콕시 라디칼을 말한다. 용어 "할로저급알콕시"는 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된 저급알콕시 라디칼을 말한다.
"아릴"은 3 내지 14개의 주쇄 탄소 또는 헤테로 원자를 갖는 일-고리 및 다-고리 방향족 기를 말하며, 탄소고리 아릴기와 헤테로고리 아릴기를 모두 포함한다. 탄소고리 아릴기는 방향족 고리의 모든 고리 원자가 탄소인 아릴기이다. 용어 "헤테로아릴"은 본원에서 방향족 고리의 고리 원자로서 1 내지 4개의 헤테로 원자를 가지며, 나머지 고리 원자는 탄소 원자인 아릴기를 말한다. 아릴 치환체와 관련하여 사용되었을 때, 용어 "다-고리"는 본원에서 융합 및 비-융합된 고리 구조를 말하며, 여기서 적어도 하나의 고리 구조는 방향족, 예를 들어 벤조디옥사졸(이것은 페닐기와 융합된 헤테로고리 구조, 즉 를 가진다), 나프틸 등이다. 본 발명의 화합물에서 치환체로서 사용된 전형적인 아릴기는 페닐, 피리딜, 피리미디닐, 티아졸릴, 인돌릴, 이미다졸릴, 옥사디아졸릴, 테트라졸릴, 피라지닐, 트리아졸릴, 티오페닐, 푸라닐, 퀴놀리닐, 푸리닐, 나프틸, 벤조티아졸릴, 벤조피리딜, 벤즈이미다졸릴 등을 포함한다.
"아랄킬"은 아릴기로 치환된 알킬기를 말한다. 전형적으로, 본 발명의 화합물에서 사용된 아랄킬기는 아랄킬기의 알킬 부분에 통합된 1 내지 6개의 탄소 원자를 갖는다. 본 발명의 화합물에서 사용된 적합한 아랄킬기는, 예를 들어 벤질, 피콜릴 등을 포함한다.
용어 "아미노"는 본원에서 -NH2 기를 말한다. 용어 "알킬아미노"는 본원에서 -NRR' 기를 말하며, 여기서 R 및 R'는 각각 독립적으로 수소 또는 저급알킬로부터 선택된다. 용어 "아릴아미노"는 본원에서 -NRR' 기를 말하며, 여기서 R은 아릴이고, R'는 수소, 저급알킬, 또는 아릴이다. "아랄킬아미노"는 본원에서 -NRR' 기를 말하며, 여기서 R은 저급아랄킬이고, R'는 수소, 저급알킬, an 아릴, 또는 저급아랄킬이다.
용어 "아릴시클로알킬아미노"은 본원에서 아릴-시클로알킬-NH- 기를 말하며, 여기서 시클로알킬은 이가 시클로알킬기이다. 전형적으로, 시클로알킬은 3 내지 6개의 주쇄 원자를 가지며, 이 중에서 선택적으로 1 내지 약 4개는 헤테로 원자이다. 용어 "아미노알킬"은 말단이 아미노기로 치환된 알킬기를 말한다.
용어 "알콕시알킬"은 alk1-O-alk2 기를 말하며, 여기서 alk1은 알케닐 또는 알키닐이고, alk2는 알킬 또는 알케닐이다. 용어 "저급알콕시알킬"은 alk1이 저급알킬렌일 또는 저급 알케닐이고, alk2는 저급알킬 또는 저급알케닐인 알콕시알킬을 말한다. 용어 "아릴옥시알킬"은 -알킬렌일-O-아릴 기를 말한다. 용어 "아랄콕시알킬"은 -알킬렌일-O-아랄킬 기를 말하며, 여기서 아랄킬은 저급아랄킬이다.
용어 "알콕시알킬아미노"는 본원에서 -NR-(알콕시알킬) 기를 말함, 여기서 R은 전형적으로 수소, 저급아랄킬, 또는 저급알킬이다. 용어 "아미노저급알콕시알킬"은 본원에서 알콕시알킬이 저급알콕시알킬인 아미노알콕시알킬을 말한다.
용어 "아미노카르보닐"은 본원에서 -C(O)-NH2 기를 말한다. "치환된 아미노카르보닐"은 본원에서 -C(O)-NRR' 기를 말하며, 여기서 R은 저급알킬이고, R'는 수소 또는 저급알킬이다. 용어 "아릴아미노카르보닐"는 본원에서 -C(O)-NRR' 기를 말하며, 여기서 R은 아릴이고, R'는 수소, 저급알킬 또는 아릴이다. "아랄킬아미노카르보닐"은 본원에서 -C(O)-NRR' 기를 말하며, 여기서 R은 저급아랄킬이고, R'는 수소, 저급알킬, 아릴, 또는 저급아랄킬이다.
"아미노술포닐"은 본원에서 -S(0)2-NH2 기를 말한다. "치환된 아미노술포닐"은 본원에서 -S(O)2-NRR' 기를 말하며, 여기서 R은 저급알킬이고, R'는 수소 또는 저급알킬이다. 용어 "아랄킬아미노술포닐아릴"은 본원에서 -아릴-S(O)2-NH-아랄킬을 말하며, 여기서 아랄킬은 저급아랄킬이다.
용어 "카르보닐"은 이가 -C(O)- 기를 말한다. "카르보닐옥시"는 일반적으로 -C(O)-O-R를 말하며, 여기서 R은 수소, 저급알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아미노, 아릴, 헤테로아릴 또는 저급아랄킬이다. 용어 "카르보닐옥시시클로알킬"은 본원에서 일반적으로 "카르보닐옥시카르보시클로알킬"과 "카르보닐옥시헤테로시클로알킬"을 모두 말하며, 여기서 R은 각각 카르보시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬이다. 용어 "아릴카르보닐옥시"는 본원에서 -C(O)-O-아릴 기를 말하며, 여기서 아릴은 일- 또는 다-고리, 카르보시클로아릴 또는 헤테로시클로아릴이다. 용어 "아랄킬카르보닐옥시"는 본원에서 -C(O)-O-아랄킬 기를 말하며, 여기서 아랄킬은 저급아랄킬이다.
용어 "술포닐"은 본원에서 -SO2- 기를 말한다. "알킬술포닐"은 -SO2R- 구조의 치환된 술포닐을 말하며, 여기서 R은 알킬이다. 본 발명의 화합물에서 사용된 알킬술포닐기는 전형적으로 그것의 주쇄 구조에 1 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 저급알킬술포닐기이다. 이와 같은, 본 발명의 화합물에서 사용된 전형적인 알킬술포닐기는, 예를 들어 메틸술포닐(즉, 여기서 R은 메틸이다), 에틸술포닐(즉, 여기서 R은 에틸이다), 프로필술포닐(즉, 여기서 R은 프로필이다) 등을 포함한다. 용어 "아릴술포닐"은 본원에서 -SO2-아릴 기를 말한다. 용어 "아랄킬술포닐"은 본원에서 -S02-아랄킬 기를 말하며, 여기서 아랄킬은 저급아랄킬이다. 용어 "술폰아미도"는 본원에서 -SO2NH2를 말한다.
본원에서 사용된 용어 "카르보닐아미노"는 이가 -NH-C(O)- 기를 말하며, 여기서 카르보닐아미노기의 아미드 질소의 수소 원자는 저급알킬, 아릴, 또는 저급아랄킬기로 대체될 수 있다. 그러한 기들은 카르바메이트 에스테르(-NH-C(O)-O-R) 및 아미드 -NH-C(O)-O-R와 같은 부분들을 포함하며, 여기서 R은 직쇄 또는 분기쇄 저급알킬, 시클로알킬, 아릴 또는 저급아랄킬이다. 용어 "저급알킬카르보닐아미노"는 알킬카르보닐아미노를 말하며, 여기서 R은 그것의 주쇄 구조에 1 내지 약 6개의 탄소 원자를 갖는 저급알킬이다. 용어 "아릴카르보닐아미노"는 -NH-C(O)-R 기를 말하며, 여기서 R은 아릴이다. 유사하게, 용어 "아랄킬카르보닐아미노"는 카르보닐아미노를 말하며, 여기서 R은 저급아랄킬이다.
본원에서 사용된 용어 "구아니디노" 또는 "구아니딜"은 (H2N)-C(=NH)-NH2 구아니딘으로부터 유도된 부분들을 말한다. 그러한 부분들은 형식적인 이중결합을 갖는 질소 원자에 결합된 것들(구아니딘의 "2"-위치, 예를 들어 디아미노메틸렌아미노, (H2N)2C=N-)과, 형식적인 단일결합을 갖는 질소 원자들 중 어느 하나에 결합된 것들(구아니딘의 "1-" 및/또는 "3"-위치, 예를 들어 H2N-C(=NH)-NH-)을 포함한다. 질소 중 어느 하나에 있는 수소 원자는 적합한 치환체, 예를 들어 저급알킬, 아릴 또는 저급아랄킬로 대체될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "아미디노"는 R-C(=NR)-NR'-("N1" 질소에 있는 라디칼) 및 R(NR')C=N-("N2" 질소에 있는 라디칼) 부분을 말하며, 여기서 R 및 R'는 수소, 저급알킬, 아릴 또는 저급아랄킬일 수 있다.
본 발명의 화합물은 본원에 설명된 방법, 또는 본 분야에 잘 공지된 다른 방법들을 사용하여 쉽게 합성될 수 있다. 예를 들어, 광범위한 치환체를 갖는 피롤의 합성이, 본원에 참고자료로서 수록된 Blanchette, M. A.; Choy, W.; Davis, J. T.; Essenfeld, A. P.; Masamune, S.; Rousch, W. R.; Sakai, T. Tet. Let. 1984, 25, 2183; Have, R.; Leusink, F. R.; van Leusen, A. M. Synthesis 1996, 871-876; Mark Trudell, JOC, 1997, 62, 2649-2651; 및 Worrall, D. E. Org. Synth., Coll. Vol.11947, 413-416에서 이해하기 쉽게 다루어졌다.
본 발명의 GSK3 억제제 화합물은 크로마토그래피, 결정화 등의 공지된 방법을 사용하여 정제될 수 있다.
본 발명의 화합물은 바람직하게는 적어도 하나의 다른 종류의 키나제와 비교하여 GSK3에 관해 상대적으로 실질적으로 선택적인 억제 활성을 나타낸다. 본원에 사용된 용어 "선택적인"은 적어도 하나의 다른 종류의 키나제와 비교했을 때 GSK3의 억제에 대한 상대적으로 더 높은 효능을 말한다. 바람직하게, 본 발명의 GSK3 억제제는 적어도 2개의 다른 종류의 키나제와 비교했을 때 GSK3에 관하여 선택적이다. GSK3 이외의 다른 키나제에 대한 키나제 활성 분석은 일반적으로 공지되어 있다. 예를 들어, 본원에 참고자료로 수록된 Havlicek 등, J. Med. Chem., 40:408-12 (1997) 참조. GSK3 선택성은 다음에 따라서 정량될 수 있다:
GSK3 선택성 = IC5O(다른 키나제)/IC50(GSK3)
GSK3 억제제는 IC50(다른 키나제) > IC50(GSK3)일 때 GSK3에 대해 선택적이다.
따라서, GSK3에 대해 선택적인 억제제는 GSK3 이외의 다른 키나제의 억제에 관하여 1배 이상의 GSK3 선택성을 나타낸다. 본원에 사용된 용어 "다른 키나제"는 GSK3 이외의 다른 키나제를 말한다. 그러한 선택성은 일반적으로 실시예 265에 설명된 무-세포 분석법으로 측정된다.
전형적으로, 본 발명의 GSK3 억제제는 다른 키나제와 비교하여 GSK3에 대해 적어도 약 2배(즉, IC50(다른 키나제)/IC50(GSK3))의 선택성을 나타내며, 더 전형적으로는 적어도 약 5배의 선택성을 나타낸다. 통상, 본 발명의 GSK3 억제제는 적어도 하나의 다른 키나제와 비교하여 적어도 약 10배, 바람직하게는 적어도 약 100배, 더 바람직하게는 적어도 약 1000배의 GSK3에 대한 선택성을 나타낸다.
GSK3 억제 활성은 본원에 설명된 분석법 뿐만 아니라 당업자에게 일반적으로 알려져 있는 분석법들을 사용하여 쉽게 검출될 수 있다. GSK3의 특이적 억제제를 확인하기 위한 전형적인 방법은 무-세포 및 세포-기제 GSK3 키나제 분석을 모두 포함한다. 무-세포 GSK3 키나제 분석은 폴리펩티드 GSK3와의 직접 상호작용에 의해 작용하는 억제제를 검출하는 것이며, 한편 세포-기제 GSK3 키나제 분석으로는 GSK3 자체와의 직접 상호작용에 의해서, 또는 예를 들어 성숙한 활성 GSK3를 생산하는데 필요한 GSK3 발현이나 번역-후 과정의 방해, 또는 GSK3의 세포내 국부화의 변형을 포함하는 다른 메카니즘에 의해서 기능하는 억제제를 확인할 수 있다.
일반적으로, 무-세포 GSK3 키나제 분석은: (1) 펩티드 기질인 방사성 표지된 ATP(예를 들어, γ33P- 또는 γ32P-ATP, 모두 Amersham(일리노이 알링톤 하이츠)로부터 구입가능하다) 그리고 선택적으로 하나 이상의 후보 억제제와 함께 GSK3를 인큐베이션하는 단계; (2) GSK3 활성에 의한 펩티드 기질에의 방사성 표지된 포스페이트의 결합을 허락하는 시간 동안 혼합물을 인큐베이션하는 단계; (3) 효소 반응 혼합물의 전부 또는 일부를 펩티드 기질 상의 앵커 리간드와 결합할 수 있는 균일한 양의 캡쳐 리간드를 함유하는 분리된 용기, 전형적으로 마이크로타이터 웰로 옮기는 단계; (4) 반응하지 않은 방사성 표지된 ATP를 세척하여 제거하는 단계; 다음에 (5) 각 웰에 잔류한 33P 또는 32P의 양을 정량하는 단계에 의해서 쉽게 수행될 수 있다. 이 양은 펩티드 기질에 결합된 방사성 표지된 포스페이트의 양을 나타낸다. 억제는 방사성 표지된 포스페이트와 펩티드 기질의 결합 감소로서 관찰된다.
무-세포 분석법에 사용되는 적합한 펩티드 기질은 적합한 양의 ATP의 존재하에서 GSK3에 의해 인산화될 수 있는 어떤 펩티드, 폴리펩티드 또는 합성 펩티드 유도체일 수 있다. 적합한 펩티드 기질은 GSK3의 다양한 천연 단백질 기질의 서열의 일부분을 기초로 할 수 있으며, 또한 스페이서 서열 및 앵커 리간드를 포함하는 N-말단 또는 C-말단 변형 또는 확장을 함유할 수도 있다. 이와 같이, 펩티드 기질은 더 큰 폴리펩티드 내에 존재할 수 있거나, 또는 GSK3에 의한 인산화에 알맞게 디자인된 분리된 펩티드일 수 있다.
예를 들어, 펩티드 기질은 DNA 결합 단백질 CREB의 하위서열, 예를 들어 본원에 참고자료로서 수록된 Wang 등, Anal. Biochem., 220:397-402(1994)에 설명된 CREB DNA 결합 단백질 내의 SGSG-결합 CREB 펩티드 서열에 기초하여 디자인될 수 있다. Wang 등에 의해 보고된 분석에서, CREB 펩티드의 SXXXS 모티프에 있는 C-말단 세린이 cAMP-의존성 단백질 키나제(PKA)에 의해 효소로 미리 인산화되는데, 이 단계는 이 모티프에 있는 N-말단 세핀을 GSK3에 의해 인산화될 수 있도록 만드는데 필요하다. 대안으로서, 동일한 SXXXS 모티프를 가지며 또한 N-말단 앵커 리간드를 함유하지만, 합성과 동시에 C-말단 세린이 인산화된 변형된 CREB 펩티드 기질이 사용될 수 있다(이러한 기질은 Chiron Technologies PTY Ltd.(오스트레일리아 클레이톤)로부터 구입가능하다). 펩티드 합성 동안 SXXXS 모티프에 있는 제2 세린의 인산화는 별도의 단계로서 PKA와 함께 이 잔기를 효소 인산화해야하는 필요성을 없애며, 앵커 리간드의 결합이 GSK3와의 반응 후 펩티드 기질의 캡쳐를 용이하게 한다.
일반적으로, 키나제 활성 분석에 사용되는 펩티드 기질은 GSK3에 의해 인산화될 수 있는 하나 이상의 부위와 다른 키나제에 의해서는 인산화되지만 GSK3에 의해서는 인산화될 수 없는 하나 이상의 다른 부위를 함유할 수 있다. 이와 같은 이들 다른 부위들이 인산화되어 GSK3에 의해 인산화될 수 있는 모티프를 만들 수 있다. 용어 "인산화"는 본원에서 기질 펩티드를 사용하여 키나제 분석을 수행하기 전에 비-방사성 표지된 포스페이트로 기질 펩티드를 인산화하는 것을 말한다. 그러한 인산화는 편리하게는 펩티드 기질의 합성 중에 수행될 수 있다.
SGSG-결합된 CREB 펩티드는 바이오틴과 같은 앵커 리간드에 결합될 수 있으며, 이 때는 P와 Y 사이의 C 말단 근처에 있는 세린이 인산화된다. 본원에 사용된 용어 "앵커 리간드"는 펩티드 기질에 부착되어 캡쳐 리간드 상에서 펩티드 기질의 캡쳐를 용이하게 할 수 있는 리간드를 말하며, 이것은 세척 단계 동안 펩티드 기질을 적소에 고정시키는 기능을 하고, 또 반응하지 않은 방사성 표지된 ATP의 제거를 허락한다. 전형적인 앵커 리간드는 바이오틴이다. 용어 "캡쳐 리간드"는 본원에서 높은 친화성으로 앵커 리간드와 결합할 수 있는 분자를 말하며, 이것은 충실 구조에 부착된다. 결합된 캡쳐 리간드의 예들은, 예를 들어 아비딘- 또는 스트랩토아비딘-코팅 마이크로타이터 웰 또는 아가로스 비드이다. 캡쳐 리간드를 지닌 비드는 섬광제와 더 조합되어 캡쳐된 방사성 표지된 기질 펩티드를 검출하는 수단을 제공할 수 있거나, 또는 섬광제가 후속 단계에서 캡쳐된 펩티드에 첨가될 수 있다.
캡쳐된 방사성 표지된 펩티드 기질은 공지된 방법을 사용하여 섬광계수기에서 정량될 수 있다. 만일 효소 반응이 제한된 부분(예를 들어, 20% 미만)의 펩티드 기질만이 인산화되는 조건에서 행해진다면 섬광계수기에서 검출된 신호는 GSK3 활성에 비례할 것이다. 만일 억제제가 반응 동안 존재한다면 GSK3 활성은 감소될 것이고, 따라서 더 적은 양의 방사성 표지된 포스페이트가 펩티드 기질에 결합될 것이다. 결과적으로, 반응 동안 억제제가 존재하지 않는 음성대조표준에서 관찰된 것과 비교하여, 섬광 신호의 감소로서 GSK3 억제 활성이 검출될 것이다. 이 분석법은 하기 실시예 265에 더 상세히 설명된다.
세포-기제 GSK3 키나제 활성 분석은 전형적으로 GSK3와 GSK3 기질을 모두 발현할 수 있는 세포, 예를 들어 유전자의 발현을 위한 조절 대조 서열을 포함하는, GSK3와 그것의 기질을 암호화하는 유전자로 형질전환된 세포를 이용한다. 세포-기제 분석의 수행에서는 유전자를 발현할 수 있는 세포가 본 발명의 화합물의 존재하에서 인큐베이션된다. 세포가 용해되고, 인산화된 형태의 기질의 비율이, 예를 들어 SDS 파지 상에서 비인산화된 형태에 대한 상대적인 이동성을 관찰함으로써, 또는 기질의 인산화된 형태에 특이적인 항체에 의해 인식되는 기질의 양을 측정함으로써 측정된다. 기질 인산화의 양은 화합물의 억제 활성의 표시로, 즉 억제는 억제제가 없는 상태에서 수행된 분석과 비교하여 인산화의 감소로서 검출된다. 세포-기제 분석에서 검출된 GSK3 억제 활성은, 예를 들어 GSK3의 발현 억제로 인한 것이거나, 또는 GSK3의 키나제 활성의 억제에 의한 것일 수 있다.
이와 같은 세포-기제 분석은 또 GSK3 억제에 의해 연루되는 활성들, 예를 들어 tau 단백질 인산화의 억제, 인슐린 신호화의 강화 등을 특이적으로 분석하는데 사용될 수 있다. 예를 들어, 미소관-관련 단백질 tau의 알츠하이머-형 인산화를 억제하는 GSK3 억제제의 능력을 평가하기 위해서, 세포는 사람 GSK3β 및 사람 tau 단백질로 공-트랜스펙트된 다음 하나 이상의 후보 억제제와 함께 인큐베이션될 수 있다. 다양한 포유동물 셀라인과 발현 벡터가 이 종류의 분석에 사용될 수 있다. 예를 들어, COS 세포가 본원에 참고자료로서 수록된 Stambolic 등, 1996, Current Biology 6:1664-68에 설명된 프로토콜에 따라 사람 GSK3β 발현 플라스미드로, 그리고 조기 SV40 프로모터 아래 서열을 코딩하는 사람 tau 단백질을 함유하는 pSG5와 같은 발현 플라스미드 트랜스펙트될 수 있다. tau의 알츠하이머-형 인산화는 세포를 용해한 후, 예를 들어 Polymedco Inc.(뉴욕 코틀랜드 매너)로부터 구입가능한 AT8과 같은 특이적 항체를 사용하여 쉽게 검출될 수 있다. 이 분석법은 하기 실시예에 더 상세히 설명된다.
마찬가지로, 글리코겐 신타제를 활성화시킴으로써 인슐린 신호화를 강화하는 GSK3 억제제 화합물의 능력도 세포-기제 글리코겐 신타제 활성 분석을 사용하여 쉽게 확인될 수 있다. 이 분석법은 야생형 인슐린 수용체를 과발현하는 CHO-HIRC 셀라인(-100,000결합 부위/세포)과 같은 글리코겐 신타제 활성을 증가시킴에 의해 인슐린 자극에 반응하는 세포를 사용한다. CHO-HIRC 셀라인은, 본원에 참고자료로서 수록된 Moller 등, J. Biol. Chem., 265:14979-14985 (1990) 및 Moller 등, Mol. Endocrinol., 4:1183-1191 (1990)에 설명된 대로 생성될 수 있다. 이 분석은 배지에 용해된 다양한 농도의 본 발명의 화합물의 존재하에 장액-결핍 CHO-HIRC 세포를 인큐베이션한 다음에, 인큐베이션 기간의 마지막에 세포를 용해시키는 것에 의해서 수행될 수 있다. 글리코겐 신타제 활성은 Thomas 등, Anal. Biochem., 25:486-499 (1968)에 설명된 대로 세포용해액에서 검출될 수 있다. 글리코겐 신타제 활성은 상기 Thomas 등에 의해 설명된 대로 최대 글리코겐 신타제 활성의 백분율로서 각 샘플에 대해 산출되고, 후보 GSK3 억제제 농도의 함수로서 그래프로 그려진다. 글리코겐 신타제 활성을 그것의 최대 수준의 반까지 증가시킨 후보 GSK3 억제제의 농도(즉, EC50)가 당업자에게 잘 공지된 루틴커브 피팅법을 사용하여 4개 변수의 S자 모양 곡선을 피팅함으로써 계산될 수 있다. 이것은 하기 실시예 266에 더 상세히 설명된다.
GSK3 억제제는, 예를 들어 당업자에게 잘 공지된 방법들을 사용하여 생체내 활성에 대해 쉽게 스크리닝될 수 있다. 예를 들어, 2형 당뇨병의 치료에서 잠재적인 치료 활성을 갖는 후보 화합물이 2형 당뇨병의 동물 모델에서 글루코스 내성을 개선하는 능력을 검출함으로써 쉽게 확인될 수 있다. 구체적으로, 후보 화합물은 당뇨병에 걸린 마우스(예를 들어, KK, db/db, ob/ob) 또는 당뇨병에 걸린 래트(예를 들어, Zucker Fa/Fa 또는 GK)에 글루코스 볼루스를 투여하기 전에 몇 가지 경로 중 어떤 것을 사용하여 용량이 결정될 수 있다. 후보 화합물 및 글루코스를 투여한 후, 미리 선택된 시간 간격으로 혈액 샘플들을 취해서 혈청 글루코스 및 인슐린 수준에 대해 평가한다. 내인성 인슐린의 분비 수준이 상승되지 않은 상태에서의 개선된 글루코스 처리가 인슐린 민감성으로 간주되며, 이것이 화합물 효능의 지표일 수 있다. 이 분석법의 상세한 설명은 하기 실시예에 제공된다.
본 발명의 화합물은 무기 또는 유기 산으로부터 유도된 염의 영태로 사용될 수 있다. 이들 염은, 제한은 없지만, 아세테이트, 아디페이트, 알기네이트, 시트레이트, 아스파르테이트, 벤조에이트, 벤젠 술포네이트, 비술페이트, 부티레이트, 캄포레이트, 캄포르술포네이트, 디글루코네이트, 시클로펜탄프로피오네이트, 도데실술페이트, 에탄술포네이트, 글루코헵타노에이트, 글리세로포스페이트, 헤미술페이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 푸마레이트, 염산염, 브롬화수소산염, 요오드화수소산염, 2-히드록시에탄술포네이트, 락테이트, 말레에이트, 메탄술포네이트, 니코티네이트, 2-타프탈렌술포네이트, 옥살레이트, 파모에이트, 펙티네이트, 술페이트, 3-페닐프로피오네이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 숙시네이트, 타르트레이트, 티오시아네이트, p-톨루엔술포네이트 및 운데카노에이트를 포함한다. 또한, 염기성 질소-함유기가 저급알킬 할로겐화물, 예를 들어 메틸, 에틸, 프로필, 및 부틸 염화물, 브롬화물 및 요오드화물; 디알킬 술페이트, 예를 들어 디메틸, 디에틸, 디부틸 및 디아밀 술페이트; 장쇄 할로겐화물, 예를 들어 데실, 라우릴, 미리스틸 및 스테아릴 염화물, 브롬화물 및 요오드화물; 아랄킬 할로겐화물, 예를 들어 벤질 및 페네틸 브롬화물 등과 같은 제제로 4차화될 수 있다. 이로써 물이나 오일에 용해 또는 분산되는 생성물이 얻어진다.
제약학적으로 허용되는 산 부가 염을 형성하는데 사용될 수 있는 산의 예들은, 염산, 황산 및 인산과 같은 무기산과 옥살산, 말레산, 숙신산 및 시트르산과 같은 유기산을 포함한다. 염기 부가 염은 화합물 I의 화합물의 최종 분리 및 정제 단계 종안 인시튜로 제조될 수 있거나, 또는 제약학적으로 허용되는 금속 양이온의 수산화물, 탄산염 또는 중탄산염과 같은 적합한 염기나, 암모니아, 또는 유기 일차, 이차 또는 삼차 아민과 카르복실산 부분을 반응시킴으로써 따로 제조될 수 있다. 제약학적으로 허용되는 염은, 제한은 없지만, 알칼리 및 알칼리 토금속의 양이온, 예를 들어 나트륨, 리튬, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 알루미늄 염 등과, 제한은 없지만, 암모늄, 테트라메틸암모늄, 테트리에틸암모늄, 메틸아민, 디메틸아민, 트리메틸아민, 트리에틸아민, 에틸아민 등을 포함하는, 비독성 암모늄, 4차 암모늄, 및 아민 양이온을 포함한다. 염기 부가 염의 형성에 유용한 다른 대표적인 유기 아민은 디에틸아민, 에틸렌디아민, 에탄올아민, 디에탄올아민, 피페라진 등을 포함한다.
본 발명의 화합물은 장관, 비경구 그리고 국소 경로의 투여를 포함하는 다양한 방식으로 투여될 수 있다. 예를 들어, 적합한 투여 방식은 경구, 피하, 경피, 경점막, 이온삼투, 정맥내, 근육내, 복강내, 비강내, 경막하, 직장 등을 포함한다.
본 발명의 다른 구체예에 따라서, 제약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제와 함께 본 발명의 GSK3 억제제 화합물을 포함하는 조성물이 제공된다.
적합한 제약학적으로 허용되는 부형제는, 가공처리제 그리고 약물 송달 변형제 및 증진제, 예를 들어 칼슘 포스페이트, 마그네슘 스테아레이트, 활석, 단당류, 이당류, 녹말, 젤라틴, 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 나트륨 카르복시메틸 셀룰로스, 덱스트로스, 히드록시프로필-β-시클로덱스트린, 폴리비닐피롤리디논, 저용융점 왁스, 이온교환수지 등을 포함하며, 뿐만 아니라 이들 중 어떤 둘 이상의 조합을 포함한다. 다른 적합한 제약학적으로 허용되는 부형제는 본원에 참고자료로서 수록된 "Remington's Pharmaceutical Sciences," Mack Pub. Co.(뉴저지, 1991)에 설명된다.
본 발명의 GSK3 억제제 화합물을 함유하는 제약학적 조성물은, 예를 들어 용액, 현탁액, 또는 에멀젼을 포함하는 의도된 투여 방법에 적합한 어떤 형태일 수 있다. 전형적으로 액체 담체가 용액, 현탁액 또는 에멀젼을 제조하는데 사용된다. 본 발명의 실시예 사용되도록 고려되는 액체 담체는, 예를 들어 물, 식염수, 제약학적으로 허용되는 유기용매(들), 제약학적으로 허용되는 오일 또는 지방 등을 포함하며, 뿐만 아니라 이들의 둘 이상의 혼합물을 포함한다. 액체 담체는 어떤 적합한 제약학적으로 허용되는 첨가제, 예를 들어 용해제, 유화제, 영양소, 완충액, 보존제, 현탁제, 증점제, 점도조절제, 안정제 등을 함유할 수 있다. 적합한 유기용매는, 예를 들어 일가 알콜, 예를 들어 에탄올과 다가 알콜, 예를 들어 글리콜을 포함한다. 적합한 오일은, 예를 들어 대두유, 코코넛유, 올리브유, 홍화유, 면실유 등을 포함한다. 비경구 투여를 위한 담체는 에틸 올레에이트, 이소프로필 미리스티레이트 등과 같은 오일성 에스테르일 수 있다. 본 발명의 조성물은 미세입자, 미세캡슐, 리포솜 캡슐화물 등의 형태일 수 있으며, 뿐만 아니라 이들 중 어떤 둘 이상의 조합일 수도 있다.
본 발명의 화합물은, 종래의 비독성의 제약학적으로 허용되는 담체, 보조제 및 원한다면 비히클을 함유하는 용량 단위의 제제로, 경구로, 비경구로, 혀밑으로, 흡입 스프레이에 의해, 직장으로, 또는 국소적으로 투여될 수 있다. 국소 투여는 또한 경피 패치나 이온삼투장치와 같은 경피 투여의 사용을 포함할 수 있다. 본원에 사용된 용어 비경구는 피하 주사, 정맥내, 근육내, 흉골내 주사, 또는 주입 기술을 포함한다.
주사가능한 제제, 예를 들어 멸균된 주사가능한 수성 또는 유질의 현탁액이 적합한 분산제 또는 습윤제 그리고 현탁제를 사용하여 공지된 기술에 따라서 제조될 수 있다. 멸균된 주사가능한 제제는 또한 비독성의 비경구적으로 허용되는 희석제 또는 용매에 용해된 멸균 주사 용액 또는 현탁액, 예를 들어 1,3-프로판디올의 용액일 수 있다. 사용될 수 있는 허용되는 비히클 및 용매 중에는 물, 링거액, 및 등장 염화나트륨 용액이 있다. 여기에 더하여, 멸균 고정 오일이 용매 또는 현탁 매질로서 종래에 사용된다. 여기에 더하여, 올레산과 같은 지방산이 주사가능한 제제에서 사용된다.
약물의 직장 투여를 위한 좌약은 통상의 온도에서는 고체지만 직장의 온도에서는 액체이므로 직장에서 녹아서 약물을 방출하는 코코아버터 및 폴리에틸렌 글리콜과 같은 적합한 비자극성 부형제와 약물을 혼합함으로써 제조될 수 있다.
경구 투여를 위한 고체 제형은 캡슐, 정제, 알약, 분말, 및 과립을 포함할 수 있다. 그러한 고체 제형에서, 활성 화합물은 수크로스, 락토스 또는 녹말과 같은 적어도 하나의 불활성 희석제와 혼합될 수 있다. 그러한 제형은 또한, 통상의 실시에서와 마찬가지로, 불활성 희석제 이외의 다른 추가 물질들, 예를 들어 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제를 포함할 수 있다. 캡슐, 정제 및 알약의 경우 제형은 또한 완충액을 포함할 수 있다. 정제와 알약은 추가로 장관 코팅을 갖도록 제조될 수 있다.
경구 투여용의 액체 제형은 물과 같은 본 분야에 통상 사용되는 불활성 희석제를 함유하는 제약학적으로 허용되는 에멀젼, 용액, 현탁액, 시럽 및 엘리시르를 포함할 수 있다. 그러한 조성물은 또한 습윤제, 유화 및 현탁제, 시클로덱스트린, 및 감미, 향미, 및 방향제와 같은 보조제들을 포함할 수 있다.
또 다른 구체예에 따라서, 본 발명은 화학식 I, II 또는 III을 갖는 GSK3 억제제 화합물(또는 그것의 토토머 또는 그러한 화합물을 포함하는 조성물)을 피험체에서 GSK3 활성을 억제하는데 효과적인 양으로 피험체에게 투여하는 것을 포함하는, 사람 또는 동물 피험체에서 GSK3 활성을 억제하는 방법을 제공한다. 다른 구체예는 본 발명의 화합물 또는 조성물을 세포 또는 피험체에세 GSK3 활성을 억제하는데 효과적인 양으로 세포 또는 사람이나 동물 피험체에게 투여하는 것을 포함하는, 세포 또는 사람이나 동물 피험체의 GSK3-매개 장애를 치료하는 방법을 제공한다. 바람직하게, 피험체는 사람이나 사람이 아닌 동물 피험체일 것이다. GSK3 활성의 억제는 대조표준과 비교하거나 예상된 GSK3 활성과 비교하여, GSK3 활성의 검출가능한 억제를 포함한다.
본 발명의 화합물의 효과적인 양은 일반적으로, 본원에 설명된 분석법 중 어느 것에 의해서, 당업자에게 공지된 다른 GSK3 키나제 활성 분석법에 의해서, 또는 GSK3-매개 장애로 고생하는 피험체에서 증상의 완화를 검출함에 의해서, GSK3 활성을 검출할 수 있을 만큼 억제하는데 충분한 어떤 양을 포함한다.
본 발명에 따라서 치료될 수 있는 GSK3-매개 장애는, GSK3 활성이 연루되거나 또는 GSK3의 억제가 치료될 질환에서 특징적으로 검출되는 경로를 통한 신호화를 강화시키는 어떤 생물학적 또는 의학적 장애를 포함한다. 이런 상태 또는 장애는 비정상적인 GSK3 활성으로 인하거나 또는 그것을 특징으로 할 수 있다. 대표적인 GSK3-매개 장애는, 예를 들어 2형 당뇨병, 알츠하이머병 및 다른 신경변성 장애들, 비만, 죽상경화성 심혈관 질환, 본태고혈압, 다낭난소 증후군, 증후군 X, 허혈, 특히 대뇌허혈, 외상성 뇌손상, 양극성 장애, 면역결핍, 암 등을 포함한다.
본 발명에 따른 피험체의 성공적인 치료는 의학적 또는 생물학적 장애로 고생하는 피험체에서 증상의 감소 또는 완화를 유도할 수 있는데, 예를 들어 장애의 더 이상의 진행을 멈추게 하거나 장애를 예방할 수 있다. 따라서, 예를 들어, 당뇨병의 치료는 환자에서 글루코스나 HbA1c 수준의 감소를 가져올 수 있다. 마찬가지로, 알츠하이머병의 치료는 질환의 진행 속도를 감소시킬 수 있으며, 이는 예를 들어 치매의 증가속도의 감소를 측정함에 의해서 검출된다.
담체 물질과 조합되어 단일 제형을 제조할 수 있는 활성 성분의 양은 치료될 숙주와 특정한 투여 방식에 따라 변할 것이다. 그러나, 어떤 특정한 환자에 대한 특이적 용량 수준은 사용된 특정한 화합물의 활성, 나이, 체중, 일반적인 건강, 성별, 식사, 투여 시간, 투여 경로, 배설율, 약물 조합, 그리고 치료될 특정한 질환의 심한 정도를 포함하는 다양한 요인들에 의존한다는 것이 이해될 것이다. 주어진 상황에 대한 치료적 유효량은 통상의 실험에 의해서 쉽게 결정될 수 있으며, 이는 당업자나 보통의 임상의의 판단의 범위 내이다.
본 발명의 목적을 위한 치료적 유효량은 약 0.1mg/kg/일 내지 약 100mg/kg/일, 바람직하게는 약 1mg/kg/일 내지 약 20mg/kg/일, 가장 바람직하게는 약 2mg/kg/일 내지 약 10mg/kg/일의 본 발명의 GSK3 억제제 화합물일 것이며, 이것은 단일 용량 또는 복수 용량으로 투여될 수 있다.
본 발명의 화합물은 또한 리포솜의 형태로 투여될 수 있다. 본 분야에 공지된 바와 같이, 리포솜은 일반적으로 인지질이나 다른 지질 물질들로부터 유도된다. 리포솜은 수성 매질에 분산되는 단층 또는 다층 수화된 액체 결정들에 의해서 형성된다. 리포솜을 형성할 수 있는 어떤 비독성의 생리학적으로 허용되고 대사가능한 지질이 사용될 수 있다. 리포솜 형태의 본 발명의 조성물은, 본 발명의 화합물에 더하여, 안정제, 보존제, 부형제 등을 함유할 수 있다. 바람직한 지질은 인지질과 포스파티딜 콜린(레시틴)이며 천연과 합성 모두 가능하다. 리포솜을 형성하는 방법은 본 분야에 공지되어 있다. Prescott, Ed., Methods in Cell Biology, Volume XIV, Academic Press, New York, N. W., p. 33 et seq (1976) 참조.
본 발명의 화합물은 단독 활성 제약학적 제제로서 투여될 수 있지만, 장애의 치료에 사용되는 하나 이상의 다른 제제와 조합하여 사용될 수도 있다. 2형 당뇨병의 치료를 위해서 본 발명의 화합물과 조합하는데 유용한 대표적인 제제는, 예를 들어 인슐린, 트로글리타존, 로지글리타존, 피오글리타존, 글리피지드, 메트포르민, 술포닐유레아, 아카르보스 등을 포함한다. 알츠하이머병의 치료를 위해서 본 발명의 화합물과 조합하는데 유용한 대표적인 제제는, 예를 들어 리튬염, 발프로에이트, 카르바마제핀 등을 포함한다. 뇌졸중의 치료를 위해서 본 발명의 화합물과 조합하는데 유용한 대표적인 제제는, 예를 들어 조직 플라스미노겐 활성제이다.
추가의 활성제가 본 발명의 화합물과 조합하여 사용될 때, 추가의 활성제는 일반적으로, 본원에 참고자료로서 수록되는 PHYSICIANS' DESK REFERENCE(PDR) 53판(1999)에 나타낸 치료적 양으로 사용될 수 있거나, 또는 당업자에게 공지된 치료적으로 유용한 양으로 사용될 수 있다.
본 발명의 화합물과 나머지 치료적 활성제는 권고된 최대 임상 용량으로 또는 더 낮은 투약량으로 투여될 수 있다. 본 발명의 조성물에서 활성 화합물의 투약량 수준은 투여 경로, 질환의 심한 정도 및 환자의 반응에 따라서 원하는 치료 반응을 얻을 수 있도록 변할 수 있다. 조합은 분리된 조성물로서 또는 두 제제를 함유하는 단일 제형으로서 투여될 수 있다. 조합으로서 투여되었을 때, 치료제는 분리된 조성물로서 제조될 수 있으며, 이들은 동일한 시간 또는 상이한 시간에 제공될 수 있고, 또는 치료제는 단일 조성물로서 제공될 수 있다.
본 발명의 전술된 양태와 다른 양태가 아래의 대표적인 실시예들과 관련하여 더 잘 이해될 것이다.
실시예 1
피롤 합성
tert-부틸 (2E)-3-(2,4-디클로로페닐)프로프-2-엔오에이트( 2 )의 제조
순수한 DIC(1.4당량)을 실온에서 아르곤하에서 신나메이트(1당량), t-부틸알콜(4당량), DMAP(1.4당량) 및 CH2Cl2의 잘 교반된 용액에 가했다(주: 신나메이트는 완전히 용액 상태여야 하는데, 이것은 약간의 가온을 요할 수 있다. DIC를 가하기 전에 용액을 실온으로 냉각한다. 더 대규모에 있어서 발열을 피하기 위해서는 첨가 전에 DIC를 CH2Cl2로 희석하는 것이 좋을 수 있으며 얼음조를 준비한다). 8시간 교반한 후 반응물은 흰색 침전을 발생시킨다. 반응은 25% EtOAc/헥산으로 용리시키는 TLC로 모니터될 수 있다(생성물의 Rf는 0.9였다). 전체 반응물을 분별깔대기(CH2Cl2로 세척한)에 담았다. 이 유기 혼합물을 시트레이트, 포화 수성 NaHC03, 물 및 간수로 세척했다. 유기층을 건조시키고(Na2S04) 여과하고 건조상태로 농축하여 오일로서 조 생성물을 얻었다. 이 조 오일을 헥산과 혼합하고 30분 교반했다. 형성된 침전물을 셀라이트로 여과하고 여과물을 증발시켰다. 이 헥산 혼합물을 실리카 필터 플러그 위에 놓고 EtOAc/헥산(97:2 v/v)으로 용리시켰다. 최초 용리된 UV 활성 부분을 수집하고 증발시켜 99% 이상 순수한 2(수율 75-80%)를 얻었다.
tert-부틸 4-(2,4-디클로로페닐)피롤-3-카르복실레이트(3)의 제조
건조 에테르를 아르곤하에서 NaH(1.5당량, 오일 분산액)에 가했다. 주사기로 에테르를 따라낸 후 NaH를 아르곤하에서 신선한 에테르에 다시 현탁시켰다. 에테르와 DMSO의 혼합물에 용해된 TOSMIC(1.1당량)과 2(1당량)의 용액을 20-30분에 걸쳐 0℃에서 NaH의 교반된 현탁액에 적가했다. 첨가는 다소 발열반응이었고 가스가 방출되었다. 첨가 후 반응물을 주위온도로 가온했다. 완료될 때까지(2-3시간) TLC(25% EtOAc/헥산, UV 활성 생성물은 Rf=0.4에 있었다)와 LCMS로 반응의 진행을 모니터했다. 완료시 반응물을 포화 수성 NH4Cl(강한 가스 발생과 발열을 피하기 위해서 서서히 첨가한다)로 주의깊게 퀀칭하고 에테르로 희석했다. 층들을 분리하고 유기상을 포화 수성 NaHC03, 물 및 간수로 세척했다. 조 생성물인 검은색 고체를 재결정에 의해 정제할 수 있다. 뜨거운 EtOAc/헥산(1:3 v/v)의 혼합물로부터의 직접 재결정을 통해서, 또는 이 조 생성물을 최소한의 뜨거운 EtOAc에 용해시킨 다음 헥산을 가함에 의해서(EtOAc의 부피를 기준으로 헥산 2부피) 최상의 결과가 달성되었다. 뜨거운 용액을 실온으로 냉각하고 하룻밤 숙성시켰다. 먼저 결정을 여과한 다음 헥산으로 세척하여 60-70% 수율로 99% 순수한 생성물을 얻었다.
tert-부틸 4-(2,4-디클로로페닐)-1-[3-(1,3-디옥소벤조[c]아졸린-2-일)프로필]피롤-3-카르복실레이트(4)의 제조
고체 NaH(1.5당량, 오일 분산액)를 실온에서 아르곤하에서 교반된 DMF에 용해된 피롤 3(1당량)과 3-브로모프로필 프탈이미드(1.2당량)의 용액에 조금씩 가했다(주: 가스가 일부 방출되지만 온도는 40-50℃ 이상 상승하지 않는다). 반응물을 실온에서 아르곤하에서 1.5시간 교반했다. TLC(CH2Cl2/아세토니트릴(95:5 v/v), UV 활성 생성물은 Rf=0.5에 있었다)와 LCMS로 반응을 모니터했다. 완료시 반응물을 포화 수성 NH4Cl로 퀀칭했다(강한 가스 방출과 발열을 피하기 위해서 서서히 가한다). 다음에, 포화 수성 NaHC03를 에멀젼이 되지 않도록 하면서 가하고, 이 염기성 유기 혼합물을 에테르로 추출했다. 합친 에테르 층을 포화 수성 NaHC03, 물, 간수로 세척하고 Na2S04로 건조시키고 여과하고 건조상태로 농축하여 조 생성물을 얻었다. 이 조 생성물을 EtOAc/헥산(1:4 v/v)으로 실리카를 통해 용리시켜 정제했다. 정제된 생성물은 일부 잔류한 3-브로모프로필 프탈이미드를 함유했지만, 이것은 후속 합성 단계를 방해하지 않았다. 이 물질을 취해서 더 이상의 정제 없이 사용했다. 정량적 수율을 추정했다.
tert-부틸 1-(3-아미노프로필)-4-(2,4-디클로로페닐)피롤-3-카르복실레이트(5)의 제조
프탈이미도 피롤 4(1당량)을 실온에서 질소하에서 에탄올과 히드라진(3당량)에 용해시켰다. 가열환류하자 반응물은 흰색 침전을 생성했다. TLC(CH2Cl2/아세토니트릴(95:5 v/v), UV 활성 생성물은 Rf=0.2에 있었다)과 LCMS로 완료(2시간)될 때까지 환류하면서 교반했다. 완료시 반응물을 실온으로 냉각하고 침전물을 미세소결-유리 필터에 맞는 매체를 사용하여 진공여과했다. 여과물을 감압하에서 점착성 고체로 농축했다. 이 조 물질을 에탄올/EtOAc(1:1 v/v)에 흡수시키고 교반한 다음 침전물을 전과 동일한 방식으로 여과했다. 여과물을 감압하에 농축하고 진공에서 10-15분간 건조시켰다. 에탄올/EtOAc을 첨가하고 여과하고 농축하는 과정을 1회더 행하거나, 또는 필요에 따라서 흰색 침전물과 잔류한 히드라진을 대부분 제거했다. 다음에, 생성물을 하룻밤 진공에서 건조시켰다. 이 물질을 더 정제하지 않고 사용했다. 일단 건조되면 반응물은 유리질의 생성물을 제공한다(2단계에 걸친 수율 87%).
tert-부틸 1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(2,4-디클로로페닐)피롤-3-카르복실레이트(7)의 제조
미리 혼합된 건조 시약들, 피롤 5(1당량) 및 분말의 6-클로로-3-니트로-2-피리딜아민(6)(1.1당량)에 실온에서 교반하면서 DMA를 가한 다음 위니그 염기(2당량)를 가했다. 다음에, 반응물을 80℃까지 하룻밤 동안 가열했다. TLC(EtOAc/헥산(1:1 v/v), UV 활성인 황색 생성물은 Rf=0.25에 있었다), HPLC 및 LCMS로 반응을 모니터했다. HPLC에 의해 완료된 것으로 판단되면 반응물을 70℃로 냉각시켰다. 다음에, 에틸렌 디아민(무수)를 반응물에 가해서 어떤 잔류한 반응하지 않은 클로로피리딘 6을 파괴했다. 70℃에서 15분 교반한 후 포화 수성 NaHCO3를 가해서 반응물을 냉각 및 퀀칭했다. 수성 혼합물을 EtOAc로 추출하고, 합친 유기층을 포화 수성 NaHC03, 물, 간수로 세척하고 건조, 여과, 및 건조상태로 농축하여 갈색-황색 고체로서 조 생성물을 얻었다. 이 조 생성물을 EtOAc/헥산(4:6 v/v)로 용리되는 플래쉬 크로마토그래피로 정제했다. 정제된 SnAr 애덕트 7이 황색 고체로서 58% 수율로 분리되었다.
1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(2,4-디클로로페닐)피롤-3-카르복실산( 8 )의 제조
실온에서 바이알에서 TFA(촉매량)을 tert-부틸 에스테르 피롤 7(1당량), 물(0.1%) 및 CH2Cl2의 교반된 혼합물에 가했다. 바이알을 반응이 완료(12시간)될 때까지 실온에서 교반했다. 다음에, 반응물을 실온에서 감압하에서 농축하고 진공에서 건조시켰다. 조 잔류물을 CH2Cl2에 다시 용해시키고 실온에서 감압하에 농축했다. 이 물질을 TFA 염으로서 더 정제하지 않고 최종 커플링 단계에 사용했다.
N-((1S)-2-히드록시-이소프로필)(1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(2,4-디클로로페닐)피롤-3-일)카르복사미드( 9 , CHIR 154703)의 제조
실온에서 아르곤하에서 (2S)-(+)-2-아미노프로판-1-올(1.5당량)을 산(8)(1당량), HBTU(1.5당량), 위니그 염기(2당량) 및 DMF(이 순서로 바이알에 미리 혼합해 둔다)의 교반된 혼합물에 가했다. LCMS와 HPLC로 완료된 것이 확인될 때까지 반응물을 3-4시간 교반했다. 이어서 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고 NaHCO3로 희석하고 농축하여 70% 수율로 분말을 얻었다.
신남산 에스테르의 교체 제조
tert-부틸 (2E)-3-(4-에틸페닐)프로프-2-엔오에이트의 제조
4-에틸벤잘데히드(1당량)를 tert-부틸 2-(디에톡시카르보닐)아세테이트(1.2당량), 위니그 염기(6당량), LiCl(3당량) 및 CH3CN의 교반된 현탁액에 가했다. 반응 혼합물을 환류가열하여 알데히드를 완전히 용해시켰다. 50-60℃에서 12시간 가열한 후 TLC로 반응이 완료되었는지 판단했다. LiCl의 미세 현탁액을 함유하는 반응물을 CH2Cl2와 물에 분배했다. 유기층을 1M 수성 시트르산, 포화 수성NaHC03, 물 및 간수로 세척했다. 유기층을 건조시키고(Na2SO4) 여과하고 건조상태로 농축하여 고체로서 조 생성물을 얻었다. 이 조 고체를 최소량의 뜨거운 CH2Cl2에 용해시킨 다음 대략 6배의 헥산을 가했다. 약간 흐릿한 혼합물을 하룻밤 방치하여 결정화했다. tert-부틸 (2E)-3-(4-에틸페닐)프로프-2-엔오에이트가 오일로서 얻어졌으며, 이것을 용리액으로서 헥산에 용해된 5-10% EtOAc를 사용하는 칼럼 크로마토그래피로 더 정제했다. LC/MS m/z 233.3 MH+ (수율 80%).
실시예 2-362
피롤 화합물의 합성
실시예 2-362를 표에 따라서 직접, 방법 1과 계획안 1-4에서 설명된 합성방법에 따라 합성했다. 전구물질은 당업자들이 쉽게 알 수 있는 것으로, Aldrich(위스콘신 밀워키) 또는 Acros Organics(펜실베니아 피츠버그)에서 구입할 수 있다.
계획안 1 : 니트로 피롤의 합성
1-[1-{3-[(6-아미노-5-니트로피리딘-2-일)아미노]프로필}-4-(2,4-디클로로페닐)-1H-피롤-3-일]-4-메틸피페라진-2-온의 합성 (실시예 59)
에틸 트랜즈-베타-니트로스티렌(2)의 제조
수성 6M NaOH 용액(1.05당량)을 0℃에서 교반된 4-에틸벤잘데히드(1당량)와 니트로메탄(1당량)의 메탄올 용액에 가했다. 염기를 서서히 가하는 동안 10 내지 15℃로 온도를 유지했다. 반응은 얇은 흰색 침전을 생성했다. 부드럽게 교반하면서 추가량의 MeOH를 가했다. 15분 더 교반한 후 얼음조를 제거햇다. 실온에 도달했을 때 반응물에 물을 가하면 이것은 이어서 투명하게 된다. 이 투명한 요액을 교반된 6M 수성 HCl 용액을 담고 있는 플라스크에 가했다. 황색의 결정질 침전물이 형성되었다. 10분 후 이 결정질 생성물을 여과하고 물로 완전히 세척하고 흡입 건조시키고 순수 EtOH로부터 재결정했다. 황색 결정질 생성물로서 4-에틸 트랜스-베타-니트로스티렌(2)을 얻었고, 수율은 52%이고 순도는 99% 이상이었다(LC/MS m/z 178.2 MH).
4-(2,4-디클로로페닐)-3-니트로피롤(3)의 제조
THF에 용해된 TOSMIC(1당량)용액을 -78℃에서 아르곤하에서 칼륨 tert-부톡시드(2.4당량)의 교반된 용액에 적가했다. 10분 후 THF에 용해된 트랜스-베타-니트로스티렌(2)(1.05당량)를 적가했다. -78℃에서 15분 교반한 후 반응물을 -40℃까지 가온했다. TLC(25% EtOAc/헥산, UV 활성 생성물은 Rf=0.8에 있었다)로 반응의 진행을 모니터했다. 다음에, 반응물을 물로 퀀칭하고, 생성물을 에테르로 추출했다. 이어서 에테르층을 간수로 세척하고 MgS04 위에서 건조시키고 여과하고 건조상태로 농축하여 검은색 검을 얻었다. 이 조 생성물을 환류하면서 EtOAc에 용해시키고 냉각시켰다. 12시간 후 용액으로부터 생성물이 완전히 결정화되었다. 순수한 생성물을 부흐너 여과기로 수집했다. 여과물의 부피를 감소시켜 두번째 결정을 얻었다. 6시간 동안 냉각되도록 방치한 후 두번째 생성물을 수집했다. 결정을 최소한의 에테르로 세척하고 진공에서 건조시켜 밝은 오랜지색 결정으로서 4-(2,4-디클로로페닐)-3-니트로피롤(3)(수율 32%)을 얻었으며 순도는 99% 이상이었다(LC/MS m/z 258.1 MH+). 상청액에 잔류한 생성물을 CH2Cl2로 용리시키는 플래시 크로마토그래피로 정제했다.
2-{3-[4-(2,4-디클로로페닐)-3-니트로피롤릴]프로필}벤조[c]아졸린-1,3-디온(4)의 제조
NaH(1.2당량)를 아르곤 하에서 건조 플라스크에 가했다. DMF에 현탁된 NaH에 실온에서 교반하면서 DMF에 용해된 4-(2,4-디클로로페닐)-3-니트로피롤(1당량)의 용액을 가했다. 가스 방출이 멈춘 후 반응물을 15분 더 교반했고, 이 때 DMF에 용해된 3-브로모프로필 프탈이미드(1.1당량)의 용액을 황색-갈색 용액에 가했다. 2시간 후 투명한 갈색 반응물이 완성되었다(TLC로 결정: CH2Cl2/아세토니트릴(95:5 v/v), UV 활성 생성물은 Rf=0.5에 있었다). 완료시 반응물을 반 정도의 포화 수성 NH4Cl로 퀀칭했다(강한 가스 발생과 발열을 피하기 위해서 서서히 가한다). EtOAc를 가하고 흔든 다음 퀀칭 동안 형성된 아이보리색의 침전물을 여과하여 수집했다. 유기층을 물, 간수로 세척하고 건조시키고(Na2SO4) 여과하고 농축하여 아이보리색 고체로서 원하는 생성물을 얻었다. 두 부분의 생성물을 합쳐서 95% 순수한 2-{3-[4-(2,4-디클로로페닐)-3-니트로피롤]프로필}벤조[c]아졸린-1,3-디온(4)(수율 94%)를 얻었고, 이것을 더 정제하지 않고 사용했다(LC/MS m/z 445.3 MH+).
2-{3-[3-아미노-4-(2,4-디클로로페닐)피롤]프로필}벤조[c]아졸린-1,3-디온(5)의 제조
디옥산에 용해된 2-{3-[4-(2,4-디클로로페닐)-3-니트로피롤]프로필}벤조[c]아졸린-1,3-디온(4)(1당량)과 진한 HCl(7당량)의 교반된 용액을 담고 있는 둥근바닥 플라스크에 고체 SnCl2-2H20(10당량)를 조금씩 가했다. 투명한 황색 반응물을 12시간 교반했고, 이 때 LC/MS로 반응의 완료를 확인했다. 반응물을 6M 수성 NaOH를 가해서 반응물을 pH 7로 중화시킨 다음 EtOAc로 추출했다. 유기층을 여과하고 농축하여 불안정한 2-{3-[3-아미노-4-(2,4-디클로로페닐)피롤]프로필}벤조[c]아졸린-1,3-디온(5)의 용액을 얻었으며, 이것을 다음 단계에 직접 사용했다(LC/MS m/z 415.3 MH+). 정량적인 수율을 추정했다.
N-{4-(2,4-디클로로페닐)-1-[3-(1,3-디옥소벤조[c]아졸린-2-일)프로필]-피롤-3-일}-2-브로모아세타미드(6)의 제조
수성 NaHC03(8당량)를 실온에서 EtOAc에 용해된 2-{3-[3-아미노-4-(2,4-디클로로페닐)피롤]프로필}벤조[c]아졸린-1,3-디온(5)(1당량)의 교반된 용액에 가했다. 최소한의 EtOAc에 용해된 2-브로모아세틸 클로라이드(1.5당량)를 격렬하게 교반되고 있는 반응 용액에 서서히 가했다. 반응을 LC/MS로 모니터했고 30분 내에 완료된 것이 확인되었다. 유기층을 분리하고 물, 간수로 세척하고 건조시키고(Na2SO4) 여과하고 건조상태로 농축시켜 암황색 유리로서 조 N-4-(2,4-디클로로페닐)-1-[3-(1,3-디옥소벤조[c]아졸린-2-일)프로필]피롤-3-일}-2-브로모아세타미드(6)를 76%의 수율로 얻었다(순도 90%, LC/MS m/z 536.2 MH+). 분해를 피하기 위해서 생성물(6)을 -4℃에 저장했다.
N-{4-(2,4-디클로로페닐)-1-[3-(1,3-디옥소벤조[c]아졸린-2-일)프로필]-피롤-3-일}-2-[(2-히드록시에틸)메틸아미노]아세타미드(7)의 제조
N-메틸에탄올아민(2당량)을 실온에서 CH3CN에 용해된 N-{4-(2,4-디클로로페닐)-1-[3-(1,3-디옥소벤조[c]아졸린-2-일)프로필]피롤-3-일}-2-브로모아세타미드(6)(8.65당량)의 교반된 용액에 가했다. 반응을 LC/MS로 모니터했고 12시간 후 완료된 것이 확인되었다. 반응물을 농축하고 CH2Cl2에 용해된 MeOH(5:95, v/v)로 용리시키는 실리카 칼럼 크로마토그래피로 정제했다. 정제된 부분을 수집하여 농축한 후 순도 95%의 연황색 유리로서 N-{4-(2,4-디클로로페닐)-1-[3-(1,3-디옥소벤조[c]아졸린-2-일)프로필]피롤-3-일}-2-[(2-히드록시에틸)메틸아미노]아세타미드(7)를 얻었다(수율 21%, LC/MS m/z 530.4 MH+).
2-{3-[4-(2,4-디클로로페닐)-3-(4-메틸-2-옥소피페라지닐)피롤]-프로필}벤조[c]아졸린-1,3-디온(8)의 제조
DEAD(2.5당량)과 PPh3(2당량)를 실온에서 THF에 용해된 N-{4-(2,4-디클로로페닐)-1-[3-(1,3-디옥소벤조[c]아졸린-2-일)프로필]피롤-3-일}-2-[(2-히드록시에틸)메틸아미노]아세타미드(7)(1당량)에 가했다. LC/MS에 의해 완료된 것이 확인될 때까지 반응물을 55℃에서 1시간 동안 가열했다. 반응물을 농축하고 CH2Cl2에 용해된 MeOH(5:95, v/v)로 용리시키는 실리카 칼럼 크로마토그래피로 정제했다. 정제된 부분을 수집하여 농축한 후 정량적인 수율의 연황색 유리로서 2-{3-[4-(2,4-디클로로페닐)-3-(4-메틸-2-옥소피페라지닐)피롤릴]프로필}벤조[c]아졸린-1,3-디온(8)을 얻었다(LC/MS m/z 512.4MH+).
1-(1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(2,4-디클로로- 페닐)피롤-3-일)-4-메틸피페라진-2-온(11)의 제조
히드라진(1.3당량)을 순수 EtOH에 용해된 2-{3-[4-(2,4-디클로로페닐)-3-(4-메틸-2-옥소피페라지닐)피롤릴]프로필}벤조[c]아졸린-1,3-디온(8)의 용액에 가하고 75℃에서 2시간 교반했다. 반응물은 흰색 침전물을 생성했는데 이것을 여과했다. 감압하에서 EtOH를 농축했다. 잔류물을 CH2Cl2에 흡수시키고 침전물을 다시 여과했다. 이 유기 용액을 증발시켜 거품으로 만들었다. 정량적인 수율을 추정하고, 잔류물을 CH3CN과 DMA(4:1)에 흡수시켰다. 위니그 염기(1.3당량)을 혼합물에 가한 다음 6-클로로-3-니트로-2-피리딜아민(10)(1.2당량)을 가했다. 반응물을 LC/MS에의해 완료가 확인될 때까지 2시간 동안 80℃로 가열했다. 이어서 반응물을 농축했다. 잔류물을 EtOAc에 용해시키고 물, 간수로 세척하고 건조시키고(Na2SO4) 여과하고 건조상태로 농축하여 1-(1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(2,4-디클로로- 페닐)피롤-3-일)-4-메틸피페라진-2-온(11)을 얻었다. 이 생성물(11)을 CH2Cl2에 용해된 MeOH(5:95, v/v)로 용리시키는 실리카 칼럼 크로마토그래피로 정제했다. 정제된 부분을 수집하여 농축한 후, 연황색 거품을 95% 순도로 얻었다(LC/MS m/z 519.4 MH+, 수율 42%).
계획안 2 : 아미노 피롤의 합성
(tert-부톡시)-N-{1-[3-(1,3-디옥소벤조[c]아졸린-2-일)프로필]-4-(4-에틸페닐)피롤-3-일}카르복사미드(2)의 제조
2-{3-[3-아미노-4-(4-에틸페닐)피롤릴]프로필}벤조[c]아졸린-1,3-디온(1당량)을 (Boc)2O(1.5당량) 및 디옥산과 혼합하여 투명한 갈색 용액을 만들었다. 이 혼합물에 위니그 염기(1.3당량)을 실온에서 아르곤하에서 교반하면서 가했다. 12시간 후 추가 당량의 (Boc)2O를 반응물에 가하여 나머지 출발 물질을 원하는 생성물로 전환시킨다. LCMS와 EtOAc/헥산(3:2, v/v)으로 용리시키는 TLC(Rf=0.6)로 반응을 모니터할 수 있다. 반응물을 EtOAc로 희석하고 1N 시트르산으로 세척했다. 유기층을 분리하고 1N 시트르산, 포화 수성 NaHC03, 간수로 세척하고, 건조(Na2S04)시키고 여과하고 건조상태로 농축하여 암갈색 오일로서 조 생성물을 얻었다. 이 생성물을 EtOAc/헥산(3:7, v/v)으로 용리시키는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 63%의 수율로 황색 분말로서 생성물을 얻었다(순도 95%).
N-[1-(3-아미노프로필)-4-(4-에틸페닐)피롤-3-일](tert-부톡시)-카르복사미드(3)의 제조
2시간 동안 50℃에서 히드라진(5당량)을 순수 EtOH에 용해된 (tert-부톡시)-N-{1-[3-(1,3-디옥소벤조[c]아졸린-2-일)프로필]-4-(4-에틸페닐)피롤-3-일}카르복사미드(1당량)의 용액에 가했다. 반응물은 흰색 침전물을 생성했고 이것을 여과했다. 감압하에서 EtOH를 농축했다. 잔류물을 CH2Cl2에 흡수시키고 침전물을 다시 여과했다. 이 유기 용액을 증발시켜 생성물과 용매를 함유하는 황색 고체를 얻었다. 정량적인 수율을 추정했다.
N-(1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(4-에틸-페닐)피롤-3-일)(tert-부톡시)카르복사미드(4)의 제조
N-[1-(3-아미노프로필)-4-(4-에틸페닐)피롤-3-일](tert-부톡시)카르복사미드(1당량)와 6-클로로-3-니트로-2-피리딜아민(1.2당량)을 실온에서 아르곤하에서 교반하면서 DMA에 용해시켰다. 이 투명한 암갈색 용액에 위니그 염기를 가하고 이것을 LC/MS와 EtOAc/헥산(3:2, v/v)(Rf=0.3)로 용리시키는 TLC에 의해 완료된 것이 확인될 때까지 12시간 동안 60℃로 가열했다. 반응 혼합물에 EtOAc를 가한 다음 물, 간수로 세척하고, 건조시키고(Na2S04), 여과하고 건조상태로 농축하여 갈색의 조 생성물을 얻었다. 갈색 잔류물을 EtOAc/헥산(24:26, v/v)으로 용리시키는 실리카 칼럼 크로마토그래피로 정제했다. 정제된 부분을 수집하여 농축한 후, 생성물을 연황색 고체로서 분리했다(수율 75%).
{3-[3-아미노-4-(4-에틸페닐)피롤릴]프로필}(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아민(5)의 제조
N-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(4-에틸페닐)피롤-3-일)(tert-부톡시)카르복사미드(1당량)을 CH3CN와 1N 수성 HCl(45% v/v)에 용해시켰다. 이 투명한 갈색 용액을 LC/MS에 의해 완료된 것이 확인될 때까지 12시간 동안 60℃로 가열했다. 반응물을 실온으로 냉각시키고 CH3CN 수용액으로 희석했다. 혼합물을 냉동하고 건조상태로 동결건조시켜 정량적인 수율로 중염산염으로서 순수한 암황색 분말을 얻었다. {3-[3-아미노-4-(4-에틸페닐)피롤릴]프로필}(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아민을 더 정제하지 않고 사용했다.
N-(1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(4-에틸-페닐)피롤-3-일)-3-(tert-부톡시)-2-[(tert-부톡시)카르보닐아미노]프로판아미드(6)의 제조
위니그 염기(1.5당량)를 DMA에 용해된 Boc-세린(1.5당량)과 HBTU의 용액에 가했다. 혼합물을 실온에서 30분간 흔들었다. {3-[3-아미노-4-(4-에틸페닐)피롤릴]프로필}(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아민·2HCl(1당량)을 활성화 아미노산에 가했다. 16시간 동안 흔든 후 전체 반응 용액을 예비 HPLC 칼럼(CIS 역상 시스템)에 주입한 다음 CH3CN/0.1% TFA 수용액의 구배로 용리시켰다. 정제된 생성물 부분을 수집하여 동결건조한 후, 일-TFA 염으로서 황색 분말을 얻었다.
2-아미노-N-(1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(4-에틸페닐)피롤-3-일)-3-히드록시프로판아미드(7)의 제조
N-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(4-에틸페닐)피롤-3-일)-3-(tert-부톡시)-2-[(tert-부톡시)카르보닐아미노]프로판아미드(1당량)를 수성 1N HCl(75% v/v)과 CH3CN의 혼합물에 용해시켜 투명한 황색 용액을 만들고 이것을 12시간 동안 55℃에서 가열했다. LC/MS는 반응물이 순도 90% 이상의 생성물이었다는 것을 나타냈다. 반응물을 CH3CN/물 용액(1:1 v/v)으로 희석하고 건조상태로 동결건조하여 HCl 염 수화물로서 황색 분말을 얻었다.
N-(1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(4-에틸-페닐)피롤-3-일)-2-브로모아세타미드의 제조
THF에 용해된 2-브로모아세틸 클로라이드(2당량)의 용액을 실온에서 THF에 현탁된 {3-[3-아미노-4-(4-에틸페닐)피롤릴]프로필}(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아민(1당량)의 현탁액에 가한 다음 2,6-루티딘(4당량)을 가했다. 투명한 황색 용액을 30분간 교반하고 LC/MS로 반응의 완료를 판단했다. 반응물을 CH2Cl2로 희석하고 유기층을 1N 수성 시트르산, 물, 포화 수성 NaHC03, 간수로 세척하고 건조시키고(Na2SO4), 여과하고 건조상태로 농축하여 수율 76%로 황색 유리로서 조 생성물을 얻었다(순도 90% 이상). 생성물을 유리로서 냉동고에 저장하고 더 정제하지 않고 빨리 사용했다.
N-(1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(4-에틸-페닐)피롤-3-일)-2-[(3-메톡시프로필)아미노]아세타미드
N-메틸 에탄올아민(10당량)을 실온에서 DMA에 용해된 N-(1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(4-에틸-페닐)피롤-3-일)-2-브로모아세타미드의 용액에 가했다. 반응물을 16시간 동안 흔들고 LC/MS로 체크했다. 반응은 완료(생성물 80% 이상)되지 않았으며 16시간 동안 55℃로 가열했다. 일단 완료되면 전체 반응 용액을 예비 HPLC 칼럼(C18 역상 시스템)에 주입하고 CH3CN/0.1% TFA 수용액의 구배로 용리시켰다. 정제된 생성물 부분을 수집하여 동결건조시킨 후, 황색 분말을 일-TFA 염으로서 얻었다(수율 40%).
N-(1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(4-에틸-페닐)피롤-3-일)아세타미드의 제조
THF에 용해된 {3-[3-아미노-4-(4-에틸페닐)피롤릴]프로필}(6-아미노-5-니트로-(2-피리딜))아민(5)(1당량), 무수 아세트산(2당량) 및 위니그 염기(4당량)의 용액을 45분간 실온에서 교반했다. 반응을 LC/MS로 모니터했다. 황색 용액을 농축하여 유리로 만든 다음 DMSO에 용해시켰다. 반응이 완료되면 전체 반응 용액을 예비 HPLC 칼럼(C18 역상 시스템)에 주입하고 CH3CN/0.1% TFA 수용액의 구배로 용리시켰다. 정제된 생성물 부분을 수집하여 동결건조한 후, 일-TFA 염으로서 황색 분말을 얻었다.
계획안 3 : 2,4-아미드 피롤의 합성
{[(2,4-디클로로페닐)메틸]술포닐}벤젠(2)의 제조
나트륨 벤젠술포네이트(2당량)를 실온에서 아르곤하에서 DMF에 용해된 2,4-디클로로벤질 클로라이드(1)(1당량)의 교반된 용액에 가했다. 4시간 후 반응물을 물이 들어 있는 비이커에 교반하면서 부었다. 수성상을 에테르로 추출하고 건조시키고(MgS04) 여과하고 농축하여 흰색 고체(정량적 수율)을 얻었다. 순도 95% 이상의 조 {[(2,4-디클로로페닐)메틸]술포닐}벤젠을 얻었다.
2-(2,4-디클로로페닐)-2-(페닐술포닐)에틸 아세테이트(3)의 제조
-78℃에서 질소하에서 THF에 용해된 조 술폰(2)(1당량)을 헥산(1:1 당량)과 THF에 용해된 새로 제조된 2.5M 디이소프로필아민(1.3당량), n-BuLi 용액에 교반하면서 부가 깔대기를 통해 가했다. 30분 후 파라포름알데히드(2.1당량)를 가했다. 반응물을 30분 더 교반했고, 이 때 반응물을 4.5시간에 걸쳐 실온으로 가온했다. 다음에, 반응물을 포화 수성 NH4Cl로 퀀칭했다. 수성층을 EtOAc로 추출하고 건조시키고(Na2SO4) 여과하고 감압하에서 농축하여 조 술포닐 히드린을 얻었고, 이것을 더 정제하지 않고 사용했다. 조 술포닐 히드린을 CH2Cl2(과량)과 피리딘(1.2당량)에 용해시킨 다음 Ac2O(1.1당량)를 가했다. 14.5시간 동안 실온에서 교반한 후 반응물을 포화 수성 NH4Cl로 퀀칭했다. 층들을 분리하고 수성층을 Et2O로 추출했다. 합친 유기층을 건조시키고(Na2S04) 여과하고 농축하여 높은 순도로 2-(2,4-디클로로페닐)-2-(페닐술포닐)에틸 아세테이트(3)를 얻었다(수율 94%).
{[1-(2,4-디클로로페닐)비닐]술포닐}벤젠(4)의 제조
THF에 용해된 DBU(1.5당량)를 실온에서 THF에 용해된 2-(2,4-디클로로페닐)-2-(페닐술포닐)에틸 아세테이트(3)(1당량)의 용액에 가했다. 40분간 교반한 후 반응물을 포화 수성 NH4Cl로 퀀칭했다. 층들을 분리하고 수성층을 EtOAc로 추출했다. 합친 유기층을 간수로 세척하고 건조시키고(Na2S04) 여과하고 감압하에서 농축하여 {[1-(2,4-디클로로페닐)비닐]술포닐}벤젠(4)을 얻었다(수율 97%).
페닐메틸 4-(2,4-디클로로페닐)피롤-2-카르복실레이트(6)의 제조
THF에 용해된 {[1-(2,4-디클로로페닐)비닐]술포닐}벤젠(4)(1당량)과 벤질 2-이소시아노아세테이트(5)(Lash, T.D.; Bellettini, J.R.; Bastian, J. A.; Couch, K. B. Synthesis 1994, 170-172의 방법에 의해 제조됨)(2당량)을 실온에서 교반하면서 질소하에서 THF에 현탁된 칼륨 tert-부톡시드(2당량)에 가했다. 14시간 후 반응물을 포화 수성 NH4Cl로 퀀칭했다. 층들을 분리하고 수성층을 EtOAc로 추출했다. 합친 유기층을 건조시키고(Na2S04) 여과하고 농축했다. 잔류물을 최소한의 뜨거운 용매(THF/헥산, 1:1 v/v)로 2회 재결정하여 순수한 황색 결정질-고체로서 4-(2,4-디클로로페닐)피롤-2-카르복실레이트(6)를 얻었다(수율 34%).
페닐메틸 1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(2,4-디클로로페닐)피롤-2-카르복실레이트(10)의 합성은 니트로 피롤의 3,4-에스테르에 대해서 앞에서 설명된 대로 수행했다(계획안 2).
1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(2,4-디클로로페닐)피롤-2-카르복실산(11)의 제조
고체 수산화리튬(20당량)을 실온에서 THF와 물에 용해된 1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(2,4-디클로로페닐)피롤-2-카르복실레이트(10)(1당량)의 교반된 용액에 가했다. 혼합물을 LC/MS에 의해 반응 완료가 확인될 때까지 12시간 동안 50℃에서 가열했다. 반응물을 실온으로 냉각하고 1M HCl(수성)으로 산성화시켰다. 산성 용액을 EtOAc로 추출했다. 합친 유기층을 건조(Na2SO4)시키고 여과하고 농축하여 끈적한 황색 고체로서 순수한 1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(2,4-디클로로페닐)피롤-2-카르복실산(11)(수율 99%)을 얻었다.
(1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(2,4-디클로로-페닐)피롤-2-일)-N-(2-피롤리디닐에틸)카르복사미드(12)의 제조
DMF(2M)에 용해된 1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(2,4-디클로로페닐)피롤-2-카르복실산(11)(1당량)의 용액에 실온에서 위니그 염기(2.5당량), HOBT(1.2당량), EDC(1.2당량) 및 1-(2-아미노에틸)피롤리딘(1.5당량)을 연속해서 교반하면서 가했다. 12시간 후 DMF를 원심 증발기를 통해 고진공하에서 제거했다. 잔류물을 EtOAc에 용해시키고 포화 수성 NaHCO3로 세척하고 건조시키고(Na2SO4) 여과하고 농축했다. 조 생성물을 CH2Cl2에 용해된 4% MeOH로 용리시키는 실리카 플러그를 사용하여 정제하여 황색 고체로서 (1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-4-(2,4-디클로로-페닐)피롤-2-일)-N-(2-피롤리디닐에틸)카르복사미드(12)를 얻었다(수율 13%, 순도 96%).
계획안 4 : 2,3-아미드 피롤의 제조
페닐메틸 3-(2,4-디클로로페닐)피롤-2-카르복실레이트(2)의 제조
DBU(1당량)을 질소하에서 -78℃에서 THF에 용해된 2,4-디클로로니트로 스티렌(1)(1당량)과 벤질 2-이소시아노아세테이트(0.9당량)의 교반된 용액에 가했다. 반응물을 2시간에 걸쳐서 실온으로 가온했다. 반응을 CHCl3(Rf=0.3)로 용리시키는 TLC로 모니터했다. 12시간 더 교반한 후 반응물을 CH2Cl2와 EtOAc로 희석했다. 유기 혼합물을 0.1N HCl, 물, 포화 수성 NaHC03, 간수로 세척하고, 건조(Na2S04)시키고 여과하고 감압하에서 농축하여 오일을 얻었다. 이 조 생성물을 CHCl3로 용리시키는 실리카 칼럼 크로마토그래피를 사용하여 정제하여 순수한 페닐메틸 3-(2,4-디클로로페닐)피롤-2-카르복실레이트(2)를 얻었다(수율 15%).
1-{3-[(6-아미노-5-니트로(2-피리딜))아미노]프로필}-3-(2,4-디클로로페닐)피롤-2-카르복실레이트(5)의 제조와 피롤 페닐메틸의 벤질 에스테르(10)로의 변형에 대한 단계는 3,4-에스테르와 니트로 피롤 시리즈에 대해 앞에서 설명된 것과 동일한 과정을 사용한다.
실시예 363
세포-기초 글리코겐 신타제 분석법을 사용한 GSK3 억제 활성의 스크리닝
CHO-HIRC 세포를 Ham's F12 배지/10% 투석된 태아 소 혈청 중의 10cm 조직 배양 플레이트에 둔다. 합류된 10cm 플레이트로부터 세포를 수집해서 2mL 최종 부피 배지로 6-웰 조직 배양 플레이트의 6개 웰에 분배한다. 세포를 37℃에서 24시간 성장하도록 둔다. 다음에, 세포를 태아 소 혈청을 함유하지 않는 Ham's F12 배지로 3회 세척하고 마지막으로 세포를 혈청 무함유 배지 2mL 중에 24시간 더 둔다.
마지막에 DMSO에 용해된 화합물 20㎕를 각 웰에 가하고 37℃에서 인큐베이션한다. 20분 후 배지를 제거하고 세포를 실온에서 PBS로 1회 세척한 다음 액체 질소에서 플레이트 채로 빠르게 냉동시킨다. 다음에, 세포를 웰 당 140㎕의 세포용해 완충액(50mM 트리스 pH 7.8; 1mM EDTA, 100mM NaF, 25㎍/ml 로이펩틴, 1mM DTT, 1mM PMSF)의 존재하에 얼음 위에서 녹인다. 세포를 플레이트로부터 긁어내고 드라이아이스 위에서 에펜드로프 튜브에서 냉동시킨다. 다음에, 세포용해물을 녹이고 드라이아이스 위에서 다시 냉동시킨다.
다시 녹인 후 세포용해물을 15분간 14,000g으로 회전시킨다. 다음에, 상청액을 제거하고 얼음 위에 저장한다. 45㎕ 반응 완충액(65mM 트리스 pH 7.8; 26mM EDTA, 32.5mM KF, 9.3mM UDP-글루코스; 11mg/ml 글리코겐; 500nCi/ml 14C-UDP-글루코스)에 각 상청액(45㎕)을 가하고, 45㎕ 반응 완충액/20mM 글루코스-6-포스페이트에 상청액 45㎕를 더 가한다. 반응물을 30℃에서 30분간 인큐베이션한 다음에 2cm 평방 31ET 크로마토그래피 페이퍼(Whatman) 위에 스팟했다. 필터 페이퍼를 66% 에탄올로 20분간 2회 세척하고 아세톤으로 간단히 헹군 다음 실온에서 1시간 건조시킨다.
필터를 액체 섬광제 5mL에 가하고 액체 섬광계수기로 계수한다. 어떤 세포용해물에서도 활성인 총 글리코겐 신타제의 백분율은 100x(cpm - 글루코스-6-포스페이트)/(cpm + 글루코스-6-포스페이트)로 표현된다. 그러한 값은 5가지 상이한 농도의 화합물과 DMSO 만에 대해 2번 측정되며, 그 후 값들을 농도의 로그값에 대해 그래프로 표시한다. 글리코겐 신타제 활성을 최대 수준의 50%까지 자극하는 화합물의 농도를 S자형 곡선을 그래프 데이타로 피팅하여 측정한다. 최대 수준은 시험 화합물의 농도가 실질적으로 EC50 이상으로 증가함에 따라 글리코겐 신타제 활성이 점근적 경향을 나타내는 수준으로서 정의된다. 본 발명의 대표적 화합물은 10μM 미만의 농도의 활성의 갖는 것으로 나타났다.
실시예 364
tau 단백질 인산화의 억제에 대한 스크리닝
A. GSK3 발현 플라스미드를 갖는 COS 세포의 일시적 트랜스펙션 및 tau 발현
플라스미드 구성
COS 세포를 고 글루코스 MEM 배지/5% 태아 소 혈청 중의 T25 조직 배양 플라스크에 둔다. 합류된 T25 플라스크로부터 세포를 수집하고, 최종 부피 2mL/웰 배지로 Corning 6-웰 조직 배양 플레이트에 80,000세포/웰로 접종한다. 세포를 48시간 동안 37℃에서 성장시킨 다음 태아 소 혈청을 함유하지 않는 Opti-MEM으로 2회 세척한 후, 마지막으로 세포를 1mL Opti-MEM에 둔다.
tau 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 초기 SV40 프로모터하에서 플라스미드 pSG5로 서브클로닝하여 tau 발현 플라스미드를 생성한다. tau 단백질을 암호화하는 cDNA의 클로닝은 본원에 참고자료로 수록된 Goedert 등, EMBO Journal, 8(2):393-399(1989)에 일반적으로 설명된다. GSK3 발현 플라스미드를 GSK3를 pCG로 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 서브클로닝하여 제조하며, pCG는 본원에 참고자료로서 수록된 Giese 등, Genes & Development, 9:995-1008(1995)와 Matthias 등, Nucleic Acid Research, 17:6418(1989)에 설명된 ApEVRF 유도체이다.
다음의 용액들을 1.5mL 에펜드로프 튜브에 제조한다: 용액 A: 각 트랜스펙션용, DNA(tau 발현 플라스미드) 2㎍과 DNA(GSK3 발현 플라스미드) 0.7㎍을 Opti-MEM (Gibco BRL) 100㎕로 희석한다; 용액 B: 각 트랜스펙션용, 리포펙타민 시약 8㎕를 Opti-MEM 100㎕로 희석한다. 이 두 용액을 합쳐서 부드럽게 혼합하고 실온에서 45분간 인큐베이션하여 DNA-리포솜 복합체를 만든다. 각 트랜스펙션을 위해서 Opti-MEM 0.8mL를 이 복합체를 함유하는 튜브에 가한다. 희석된 용액을 부드럽게 혼합하고 헹궈진 세포위에 올려 놓는다. 세포를 복합체화된 DNA/리포펙타민과 함께 CO2 인큐베이터에서 37℃에서 6시간 동안 인큐베이션한다. 인큐베이션 후에 20% FBS를 갖는 성장배지(고 글루코스 MEM) 1mL를 각 웰에 가하고 37℃에서 하룻밤 인큐베이션한다. 트랜스펙션의 시작 후 18시간째에 배지를 신선하고 완전한 배지로 교체하고, 세포를 37℃에서 48시간 더 성장시킨다.
B. tau 인산화 억제 분석
수집하기 2시간 전에 DMSO에 용해된 시험 화합물 2㎕를 각 웰에 가하고 37℃에서 인큐베이션한다. 2시간 후 배지를 제거하고 세포를 드라이아이스 위에서 플레이트 채로 빠르게 냉동시켜 -70℃에 저장한다. 세포를 세포용해 완충액(1% 트리톤 X-100, 20mM 트리스 pH 7.5, 137mM NaCl, 15% 글리세롤, 25g/mL 로이펩틴, 1㎍/mL 펩스타틴-A, 1μM PMSF, 21㎍/mL 아프로티닌, 50mM NaF, 50mM β-글리세로포스페이트, 15mM 나트륨 피로포스페이트, 1mM 나트륨 오르토바나데이트) 200㎕의 존재하에 얼음 위에서 녹인다. 각 웰의 내용물을 5분간 4℃에서 14,000g으로 원심분리하고 상청액을 깨끗한 튜브로 옮긴다. 이 시점에서 세포용해물을 -20℃에 저장한다.
C. 세포 용해물에서 인산화된 tau의 검출을 위한 ELISA
Immulon 4 스트립(Dynatech)을 Ca++과 Mg++을 함유하는 PBS 중에 용해된 5㎍/mL 농도의 모노클로날 항-인산화된 tau(AT8, Polymedco, Inc.)로 100㎕/웰씩 코팅한다. 4℃에서 하룻밤 인큐베이션한 후 스트립을 세척 완충액(0.05% Tweens 20을 함유한 PBS)으로 2회 세척하고 1% BSA, 5% 정상 마우스 혈청 및 0.05% Tween 20을 함유하는 PBS로 실온에서 1시간 동안 차단시킨다. 스트립을 세척 완충액으로 5회 세척한다. 1% BSA, 0.1% NaN3을 함유한 PBS로 1:10으로 희석된 세포용해물(100㎕)를 각 웰에 가하고 1시간 동안 실온에서 인큐베이션한다. 세척 후 PBS-BSA에 용해된 0.5㎍/mL 바이오티닐화된 모노클로날 항-(비-인산화) tau(HT7, Polymedco, Inc.) 100㎕를 각 웰에 가한다. 스트립을 5회 세척하고 HRP-콘쥬게이트된 스트렙토아비딘을 가하고 실온에서 30분간 인큐베이션하고 세척 완충액으로 광범하게 세척한다. TMB 기질(Pierce)을 사용하여 색을 전개시키고 0.8M 황산을 동일한 부피로 첨가하여 반응을 중지시킨다. 스트립을 450nm 필터를 사용하여 ELISA 플레이트 리더로 판독한다. tau 인산화를 최대 수준의 50%까지 억제하는 화합물의 농도(즉, IC50)을 S자 곡선을 그래프 데이터로 피팅하여 측정한다.
실시예 365
글루타메이트 흥분독성으로부터 일차 해마 세포를 보호할 수 있는 GSK3 억제제의 잠재력의 시험
18-19일된 래트 배아로부터 해마를 절개했다. 이 조직을 Hibernate TM 배지(Gibco BRL)에 수집하고 약 1mm 조각으로 잘랐다. Papain 해리 시스템(Worthington Biochemical Corporation)을 사용하여 조직을 해리시켰다. 분리 후에 Neurobasal TM(Gibco BRL), 2% B27 보충액(Gibco BRL), L-글루타민 및 항생제로 이루어진 혈청 무함유 배지에 세포를 다시 현탁시켰다. 세포를 접시 당 7.5x104 세포 농도로 폴리-L-리신으로 코팅된 35mm 조직 배양 접시에 평판했다. 5% CO2에서 37℃에서 10-14일 후에 세포를 헹구고 신선한 배지를 공급했다. 다음 날 본 발명의 대표적 화합물을 1nM 내지 100μM의 최종 농도로 배양 배지에 가했다. 화합물 첨가 후 4 내지 8시간 후에 콘디셔닝 배지를 세포로부터 제거하고 37℃에 저장했다. 배양물을 10μM 글리신을 함유하는HEPES-완충된 밸런스 염 용액(HBSS)으로 2회 헹궜다. Grabb 및 Choi, J. Neuroscience 19:1657-62(1999). 다음에 배양물을 실온에서 5분간 동일한 HBSS에 용해된 200μM 글루탐산에 노출시켰다. 노출 후 배양물을 이 완충액으로 3회 헹군 다음 화합물을 함유하는 원래의 콘디셔닝 배지로 돌려보냈다. 글루탐산 노출 후 20 내지 24시간 후에 배양물을 HBSS로 헹구고 10분간 Trypan Blue에 노출시켰다. 이 염료는 죽은 세포에 의해 흡수된다. 다음에, 배양물을 헹구고 4% 파라포름알데히드 중에 30분간 고정시킨다. 살아 있는 큰 뉴론과 죽은 뉴론(청색 핵)의 갯수를 상대비 현미경으로 계수하고(각 배양물로부터 적어도 200개 세포) 사진을 찍었다. 이 방법을 사용하여 본 발명의 화합물은 뉴론의 세포사를 유도하는 글루타메이트의 잠재력을 상당히 감소시킬 수 있는 것으로 나타났다.
실시예 366
당뇨병에 걸린 설치류에서의 효능 평가 (글루코스 내성 시험)
경구 투약을 위한 화합물 제제
시험 화합물은 전형적으로, 투여 하루 전에 수용액이나 1% 카르복시메틸셀룰로스/0.1% Tween-80(모두 Sigma Chem, MO으로부터 구입함) 중의 현탁액으로서 경구 위관영약법에 알맞게 제조했다. 일부 초기 화합물은 아래와 공통된 과정에 따라서 15% 캡시톨(CyDex Co., IL로부터의 변형된 시클로덱스트린) 중의 용액으로서 제조했다. 수용액에 대해서, 건조 및 동결건조된 시험 화합물 분말을 증류수에 용해하고 교반하고 초음파처리하여 잘 혼합했다. 필요하다면 시험 용액의 pH를 1N NaOH 또는 1N HCl로 조절하고, 마지막으로 0.2 마이크론 셀룰로스 아세테이트 멤브레인(Millipore Co., MA)이 부착된 주사기를 통해 멸균 여과했다. 경구 현탁액에 대해서, 시험 화합물 분말을 1% 카르복시메틸셀룰로스/0.1% Tween-80의 신선한 현탁액과 혼합한 다음 광범위하게 초음파 처리하고 필요하다면 상기 설명한 대로 pH를 조절하고 입자 크기가 10마이크론 이하로 균일하게 될 때까지 교반했다.
당뇨병에 걸린 마우스의 글루코스 내성 시험
8주령 살찐 db/db(암컷 C57BlKs/J) 마우스를 Jackson Labs(Bar Harbor, ME)로부터 구입하여 1-2주 후에 효능 시험에 사용했다. 시험 당일 아침 일찍 음식을 제거했다(글루코스 볼루스 전 7-8시간). 국소마취제(EMLA creme, Astra Pharm., MA)를 꼬리 끝에 도포하고, 꼬리 맨끝을 잘라서 50-100uL 혈액 샘플을 얻은 다음 500U/mL 나트륨 헤파린(Elkins-Sinn, NJ)을 5uL 담고 있는 에펜드로프 튜브에 수집한 다음 혈장을 분리했다. 샘플은 하루 종일 다양한 간격으로 총 6 내지 8회의 시간 지점에서 얻었다. 마우스를 무작위로 처리 군으로 할당하고, 시험 화합물의 최초 경구 용량(0.2mL 부피)을 투여한 다음, 경구 위관영양법(oGTT)를 통해 또는 복강내 주사를 통해 4.5시간 후에 글루코스를 투여하고, 0.5시간 후에 0.2mL 50% 덱스트로스(Abbott Lab., IL)를 다시 투여했다. 글루코스를 투여하고 약 2시간 후에 최종 혈액을 샘플링 한 후 음식을 동물에게 돌려주었다.
기초 당혈증 및 인슐린혈증의 조절
시험 화합물은 전형적으로 하루 여러번 여러 가지 용량 섭생으로 또는 단일 볼루스로 db/db 마우스(상기 참조) 또는 ZDF 래트(Genetic Models, Inc.; 인디애나 인디애나폴리스)에 경구 투여되었다. ZDF 래트는 8주령이었고 1-2주 후에 효능 시험에 사용했다. 음식을 투여 약 30분 전에 제거했고, 시험 화합물의 단일 볼루스(1 내지 8mg/mL 범위의 용량 부피)를 투여했다. 그 후 2-3시간에 걸쳐서 1-6시간 지점에서 혈액을 상기 설명된 대로 샘플링했다. 혈액 샘플링 후 음식을 동물 우리에 돌려주었다.
일차 종말점
글루코스 및 인슐린 수준을 혈장 및/또는 혈액 샘플로부터 측정한다. 글루코스 수준을 원-터치 글루코미터(Lifescan Co., CA)로 전혈로부터 또는 Beckman 글루코스 분석기로 혈장으로부터 측정한다. 글루코스 결과는 전형적으로 마우스 연구에 대한 혈액 값과 래트 연구에 대한 혈장 값을 반영한다. 인슐린 수준은 공급자의 프로토콜에 따라서 ELISA(Crystal Chem. Co., IL)로 측정한다.
결과 정량
효능은 mg/dL 글루코스 또는 ng/mL 인슐린으로 표현될 수 있거나, 또는 혈장 글루코스(100mg/dL의 정상혈당 베이스라인 위에서 취함) 및 인슐린(1ng/mL의 정상혈중인슐린 위에서 취함)에 대해 곡선하면적(AUC)로서 표현된다. 전형적으로, AUC로서 표현했을 때, 결과는 실제로 감소된 AUC로서 표현된다([(비히클 대조군 AUC - 시험군 AUC/비히클 대조군 AUC X 100]). 그러한 표현은 위약 대조군에 대한 개선된 글루코스 처리 및 감소된 기초 고혈당증 또는 인슐린 전환의 크기에 대한 단일의 정량적 표현을 제공한다.
결과
본 발명의 대표적인 화합물은 우수한 생체외 효능을 나타냈으며, 캡시톨 중에서 제조되어 마우스에게 피하 투여(30mg/kg)되었을 때 생체내에서 높은 생체이용율 및 조직 침투성을 나타냈다. 글루코스 내성 시험 바로 전 기초 고혈당증의 현저한 감소와, 글루코스 검사 후 글루코스 처리의 상당한 개선이 관찰되었다. 글루코스 반응이 -60분에서 +120분까지의 혈중 글루코스 곡선하면적(AUC)를 측정함으로써 정량된 경우 대조군에 비해서 AUC의 45-50% 감소가 관찰되었다. 이것은 트로글리타존(60 또는 100mg/kg/일로 적어도 수일 동안 경구 투여되었을 때)을 사용하여 얻어진 효능에 필적한다. 또한, 치료된 동물에서는 인슐린 수준이 대조군 마우스보다 더 낮게 유지되었다는 관찰이 유의할 만한다.
본 발명의 바람직한 구체예가 예시되고 설명되었지만, 다양한 변화가 본 발명의 정신 및 범위를 벗어나지 않는 범위에서 만들어질 수 있다는 것이 이해될 것이다.

Claims (69)

  1. 화학식 I의 화합물, 그것의 토토머 또는 그것의 제약학적으로 허용되는 염.
    (화학식 I)
    상기 식에서,
    X는 질소, 산소 또는 선택적으로 치환된 탄소이고;
    W는 존재하지 않거나,
    또는 -O-, -S-, -S(O)-, -SO2-, -NH-, -NH-CO-, -NR'CO-, -NHS02-, -NR'S02-, -CO-, -C02-, -CH2-, -CF2-, CHF, -CONH-, -CONR'-, 및 -NR'-로 구성되는 군으로부터 선택되며, 여기서 R'는 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클로이고;
    A1은 선택적으로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    R0 및 R0'는 수소 및 메틸로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    R1, R2, R3, 및 R4는 수소, 히드록실, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 시클로저급알킬, 고리 아미노알킬, 알킬아미노알킬, 저급알콕시, 아미노, 알킬아미노, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아랄킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아랄킬카르보닐, 아릴, 및 헤테로아릴로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    R5 및 R8은 수소, 할로, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 시클로알킬, 알콕시, 아미노, 아미노알콕시, 카르보닐옥시, 아미노카르보닐옥시, 알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 헤테로아랄킬카르보닐아미노, 시클로이미도, 헤테로시클로이미도, 아미디노, 시클로아미디노, 헤테로시클로아미디노, 구아니디닐, 아릴, 비아릴, 헤테로아릴, 헤테로아릴아릴, 헤테로아릴헤테로아릴, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로카르보닐옥시, 헤테로아릴카르보닐옥시, 및 아릴술폰아미도로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    R6은 수소, 및 선택적으로 치환된 아릴, 헤테로아릴, 및 헤테로시클로로 구성되는 군으로부터 선택되고;
    R7은 수소, 히드록시, 할로, 카르복실, 니트로, 아미노, 아미도, 아미디노, 이미도, 시아노, 술포닐, 메탄술포닐, 및 치환된 또는 비치환된 알킬, 알콕시, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아랄킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아랄킬카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 아랄킬카르보닐옥시, 헤테로아릴카르보닐옥시, 헤테로아랄킬카르보닐옥시, 알킬아미노카르보닐옥시, 아릴아미노카르보닐옥시, 포르밀, 저급알킬카르보닐, 저급알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 아미노아릴, 알킬술포닐, 술폰아미도, 아미노알콕시, 알킬아미노, 헤테로아릴아미노, 알킬카르보닐아미노, 알킬아미노카르보닐아미노, 아릴아미노카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 시클로아미도, 시클로티오아미도, 시클로아미디노, 헤테로시클로아미디노, 시클로알킬, 시클로이미도, 헤테로시클로이미도, 구아니디닐, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클로, 헤테로시클로알킬, 아릴술포닐, 및 아릴술폰아미도로 구성되는 군으로부터 선택된다.
  2. 제 1 항에 있어서, X는 질소인 것을 특징으로 하는 화합물.
  3. 제 1 항에 있어서, R1, R2 및 R3은 수소이고, R4는 수소, 메틸, 에틸, 아미노에틸, 디메틸아미노에틸, 피리딜에틸, 피페리디닐, 피롤리디닐에틸, 피페라지닐에틸 및 모르폴리닐에틸로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
  4. 제 1 항에 있어서, R1, R2, R3 및 R4는 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
  5. 제 1 항에 있어서, A1은 화학식 IV를 갖는 것을 특징으로 하는 화합물.
    (화학식 IV)
    상기 식에서,
    R9 및 R10은 수소, 히드록시, 니트로, 아미노, 시아노, 할로, 티오아미도, 아미디노, 옥사미디노, 알콕시아미디노, 이미디노, 구아니디닐, 술폰아미도, 카르복실, 포르밀, 저급알킬, 아미노저급알킬, 저급알킬아미노저급알킬, 할로저급알킬, 저급알콕시, 할로저급알콕시, 저급알콕시알킬, 저급알킬아미노저급알콕시, 저급알킬카르보닐, 저급아랄킬카르보닐, 저급헤테로아랄킬카르보닐, 알킬티오, 아릴 및 아랄킬로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택된다.
  6. 제 1 항에 있어서, R5 및 R8 중 적어도 하나는 화학식 V의 치환된 또는 비치환된 부분인 것을 특징으로 하는 화합물.
    (화학식 V)
    상기 식에서,
    R11, R12, R13, R14, 및 R15는 수소, 니트로, 아미노, 시아노, 할로, 티오아미도, 카르복실, 히드록시, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 저급알콕시, 저급알콕시알킬, 할로저급알킬, 할로저급알콕시, 아미노알킬, 알킬아미노, 아미노알킬알키닐, 알킬아미노알킬알키닐, 알킬티오, 알킬카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아랄킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 아미노카르보닐, 저급알킬아미노카르보닐, 아미노아랄킬, 저급알킬아미노알킬, 아릴, 헤테로아릴, 시클로헤테로알킬, 아랄킬, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 아랄킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시알킬, 알킬카르보닐옥시알킬, 헤테로아릴카르보닐옥시알킬, 아랄킬카르보닐옥시알킬, 및 헤테로아랄킬카르보닐옥시알킬로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택된다.
  7. 제 6 항에 있어서, R11, R12, R14 및 R15는 수소이고, R13은 할로, 저급알킬, 히드록시, 저급알콕시, 할로저급알킬, 아미노카르보닐, 알킬아미노카르보닐 및 시아노로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
  8. 제 6 항에 있어서, R11, R13, 및 R15는 수소이고, R12 및 R14는 할로, 저급알킬, 히드록시, 저급알콕시, 할로저급알킬 및 시아노로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
  9. 제 6 항에 있어서, R11, R12, R14, 및 R15는 수소이고, R13은 헤테로아릴인 것을 특징으로 하는 화합물.
  10. 제 6 항에 있어서, R11, R12, R14, 및 R15는 수소이고, R13은 헤테로시클로알킬인 것을 특징으로 하는 화합물.
  11. 제 6 항에 있어서, R11, R12, R13, R14, 및 R15 중 적어도 하나는 할로이고, R11, R12, R13, R14, 및 R15 중 나머지는 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
  12. 제 1 항에 있어서, R5 및 R8 중 적어도 하나는 디클로로페닐, 디플루오로페닐, 트리플루오로메틸페닐, 클로로플루오로페닐, 브로모클로로페닐, 에틸페닐, 메틸클로로페닐, 이미다졸릴페닐, 시아노페닐, 모르폴리노페닐 및 시아노클로로페닐로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
  13. 제 1 항에 있어서, R6은 치환된 또는 비치환된 아릴 또는 헤테로아릴인 것을 특징으로 하는 화합물.
  14. 제 1 항에 있어서, R6은 치환된 또는 비치환된 피리딜, 피리미디닐, 피페라지닐, 티아졸릴, 인돌릴, 이미다졸릴, 옥사디아졸릴, 테트라졸릴, 피라지닐, 트리아졸릴, 티에닐, 푸라닐, 퀴놀리닐, 피롤리오피리딜, 벤조티아졸릴, 벤조피리딜, 벤조트리아졸릴, 및 벤즈이미다졸릴인 것을 특징으로 하는 화합물.
  15. 제 1 항에 있어서, R6은 하기 구조를 갖는 모노케토피페라지닐 기인 것을 특징으로 하는 화합물.
    상기 식에서, R15 및 R16은 수소, 저급알킬, 저급알키닐, 아릴, 헤테로아릴,아릴저급알킬, 저급알킬아릴저급알킬, 할로저급알킬, 할로아릴저급알킬 탄소고리 및 헤테로고리로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 R8은 다른 R16 또는 R15와 함께 탄소고리, 헤테로고리 또는 아릴 고리를 형성할 수 있고; o는 1 내지 6의 정수이다.
  16. 제 15 항에 있어서, R15는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, 시클로프로필, n-부틸, 이소부틸 또는 t-부틸과 같은 저급알킬이거나, 또는 R15는 R16과 함께 하기 구조를 갖는 기를 형성하는 것을 특징으로 하는 화합물.
  17. 제 1 항에 있어서, R5 및 R8은 독립적으로 수소 또는 저급알킬인 것을 특징으로 하는 화합물.
  18. 화학식 II를 갖는 화합물, 그것의 토토머 또는 그것의 제약학적으로 허용되는 염.
    (화학식 II)
    상기 식에서,
    W는 존재하지 않거나, 또는
    -O-, -S-, -S(O)-, -SO2-, -NH-, -NH-CO-, -NR'CO-, -NHSO2-, -NR'SO2-, -CO-, -CO2-, -CH2-, -CF2-, CHF, -CONH-, -CONR'-, 및 -NR'-로 구성되는 군으로부터 선택되며, 여기서 R'는 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클로이고;
    A1은 선택적으로 치환된 아릴, 헤테로아릴, 또는 보호기이고;
    R0 및 R0'는 수소 및 메틸로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    R1, R2, R3, 및 R4는 수소, 히드록실, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 시클로저급알킬, 고리 아미노알킬, 알킬아미노알킬, 저급알콕시, 아미노, 알킬아미노, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아랄킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아랄킬카르보닐, 아릴, 및 헤테로아릴로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    R5 및 R8은 수소, 할로, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 시클로알킬, 알콕시, 아미노, 아미노알콕시, 카르보닐옥시, 아미노카르보닐옥시, 알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 헤테로아랄킬카르보닐아미노, 시클로이미도, 헤테로시클로이미도, 아미디노, 시클로아미디노, 헤테로시클로아미디노, 구아니디닐, 아릴, 비아릴, 헤테로아릴, 헤테로아릴아릴, 헤테로아릴헤테로아릴, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로카르보닐옥시, 헤테로아릴카르보닐옥시, 및 아릴술폰아미도로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    R6은 수소, 및 선택적으로 치환된 아릴, 헤테로아릴, 및 헤테로시클로로 구성되는 군으로부터 선택되고;
    R7은 수소, 히드록시, 할로, 카르복실, 니트로, 아미노, 아미도, 아미디노, 이미도, 시아노, 술포닐, 메탄술포닐, 및 치환된 또는 비치환된 알킬, 알콕시, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아랄킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아랄킬카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 아랄킬카르보닐옥시, 헤테로아릴카르보닐옥시, 헤테로아랄킬카르보닐옥시, 알킬아미노카르보닐옥시, 아릴아미노카르보닐옥시, 포르밀, 저급알킬카르보닐, 저급알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 아미노아릴, 알킬술포닐, 술폰아미도, 아미노알콕시, 알킬아미노, 헤테로아릴아미노, 알킬카르보닐아미노, 알킬아미노카르보닐아미노, 아릴아미노카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 시클로아미도, 시클로티오아미도, 시클로아미디노, 헤테로시클로아미디노, 시클로알킬, 시클로이미도, 헤테로시클로이미도, 구아니디닐, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클로, 헤테로시클로알킬, 아릴술포닐, 및 아릴술폰아미도로 구성되는 군으로부터 선택된다.
  19. 제 18 항에 있어서, R1, R2 및 R3은 수소이고, R4는 수소, 메틸, 에틸, 아미노에틸, 디메틸아미노에틸, 피리딜에틸, 피페리디닐, 피롤리디닐에틸, 피페라지닐에틸 및 모르폴리닐에틸로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
  20. 제 18 항에 있어서, R1, R2, R3 및 R4는 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
  21. 제 18 항에 있어서, A1은 화학식 IV를 갖는 것을 특징으로 하는 화합물.
    (화학식 IV)
    상기 식에서,
    R9 및 R10은 수소, 히드록시, 니트로, 아미노, 시아노, 할로, 티오아미도, 아미디노, 옥사미디노, 알콕시아미디노, 이미디노, 구아니디닐, 술폰아미도, 카르복실, 포르밀, 저급알킬, 아미노저급알킬, 저급알킬아미노저급알킬, 할로저급알킬, 저급알콕시, 할로저급알콕시, 저급알콕시알킬, 저급알킬아미노저급알콕시, 저급알킬카르보닐, 저급아랄킬카르보닐, 저급헤테로아랄킬카르보닐, 알킬티오, 아릴 및 아랄킬로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택된다.
  22. 제 18 항에 있어서, R5 및 R8 중 적어도 하나는 화학식 V의 치환된 또는 비치환된 부분인 것을 특징으로 하는 화합물.
    (화학식 V)
    상기 식에서,
    R11, R12, R13, R14, 및 R15는 수소, 니트로, 아미노, 시아노, 할로, 티오아미도, 카르복실, 히드록시, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 저급알콕시, 저급알콕시알킬, 할로저급알킬, 할로저급알콕시, 아미노알킬, 알킬아미노, 아미노알킬알키닐, 알킬아미노알킬알키닐, 알킬티오, 알킬카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아랄킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 아미노카르보닐, 저급알킬아미노카르보닐, 아미노아랄킬, 저급알킬아미노알킬, 아릴, 헤테로아릴, 시클로헤테로알킬, 아랄킬, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 아랄킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시알킬, 알킬카르보닐옥시알킬, 헤테로아릴카르보닐옥시알킬, 아랄킬카르보닐옥시알킬, 및 헤테로아랄킬카르보닐옥시알킬로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택된다.
  23. 제 22 항에 있어서, R11, R12, R14 및 R15는 수소이고, R13은 할로, 저급알킬, 히드록시, 저급알콕시, 할로저급알킬, 아미노카르보닐, 알킬아미노카르보닐 및 시아노로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
  24. 제 22 항에 있어서, R11, R13, 및 R15는 수소이고, R12 및 R14는 할로, 저급알킬, 히드록시, 저급알콕시, 할로저급알킬 및 시아노로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
  25. 제 22 항에 있어서, R11, R12, R14, 및 R15는 수소이고, R13은 헤테로아릴인 것을 특징으로 하는 화합물.
  26. 제 22 항에 있어서, R11, R12, R14, 및 R15는 수소이고, R13은 헤테로시클로알킬인 것을 특징으로 하는 화합물.
  27. 제 22 항에 있어서, R11, R12, R13, R14, 및 R15 중 적어도 하나는 할로이고, R11, R12, R13, R14, 및 R15 중 나머지는 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
  28. 제 18 항에 있어서, R5 및 R8 중 적어도 하나는 디클로로페닐, 디플루오로페닐, 트리플루오로메틸페닐, 클로로플루오로페닐, 브로모클로로페닐, 에틸페닐, 메틸클로로페닐, 이미다졸릴페닐, 시아노페닐, 모르폴리노페닐 및 시아노클로로페닐로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
  29. 제 18 항에 있어서, R6은 치환된 또는 비치환된 아릴 또는 헤테로아릴인 것을 특징으로 하는 화합물.
  30. 제 18 항에 있어서, R6은 치환된 또는 비치환된 피리딜, 피리미디닐, 피페라지닐, 티아졸릴, 인돌릴, 이미다졸릴, 옥사디아졸릴, 테트라졸릴, 피라지닐, 트리아졸릴, 티에닐, 푸라닐, 퀴놀리닐, 피롤리오피리딜, 벤조티아졸릴, 벤조피리딜, 벤조트리아졸릴, 및 벤즈이미다졸릴인 것을 특징으로 하는 화합물.
  31. 제 18 항에 있어서, R6은 하기 구조를 갖는 모노케토피페라지닐 기인 것을 특징으로 하는 화합물.
    상기 식에서, R15 및 R16은 수소, 저급알킬, 저급알키닐, 아릴, 헤테로아릴,아릴저급알킬, 저급알킬아릴저급알킬, 할로저급알킬, 할로아릴저급알킬 탄소고리 및 헤테로고리로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 R8은 다른 R16 또는 R15와 함께 탄소고리, 헤테로고리 또는 아릴 고리를 형성할 수 있고; o는 1 내지 6의 정수이다.
  32. 제 31 항에 있어서, R15는 저급알킬이거나, 또는 R15는 R16과 함께 하기 구조를 갖는 기를 형성하는 것을 특징으로 하는 화합물.
  33. 제 18 항에 있어서, R5 및 R8은 독립적으로 수소 또는 저급알킬인 것을 특징으로 하는 화합물.
  34. 화학식 III을 갖는 화합물, 그것의 토토머 또는 그것의 제약학적으로 허용되는 염.
    (화학식 III)
    상기 식에서,
    W는 존재하지 않거나, 또는
    -0-, -S-, -S(O)-, -SO2-, -NH-, -NH-CO-, -NR'CO-, NHSO2-, NR'SO2-, -CO-, -C02-, -CH2-, -CHF-, -CF2-, -CONH-, -CONR'- 및 -NR'-로 구성되는 군으로부터 선택되며, 여기서 R'는 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클릴이고;
    R2 및 R3은 수소, 히드록실, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 시클로저급알킬, 고리 아미노알킬, 알킬아미노알킬, 저급알콕시, 아미노, 알킬아미노, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아랄킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아랄킬카르보닐, 아릴, 및 헤테로아릴로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    R5 및 R8은 수소, 할로, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 시클로알킬, 알콕시, 아미노, 아미노알콕시, 카르보닐옥시, 아미노카르보닐옥시, 알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 헤테로아랄킬카르보닐아미노, 시클로이미도, 헤테로시클로이미도, 아미디노, 시클로아미디노, 헤테로시클로아미디노, 구아니디닐, 아릴, 비아릴, 헤테로아릴, 헤테로아릴아릴, 헤테로아릴헤테로아릴, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로카르보닐옥시, 헤테로아릴카르보닐옥시, 및 아릴술폰아미도로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    R6은 수소, 및 선택적으로 치환된 아릴, 헤테로아릴, 및 헤테로시클로로 구성되는 군으로부터 선택되고;
    R7은 수소, 히드록시, 할로, 카르복실, 니트로, 아미노, 아미도, 아미디노, 이미도, 시아노, 술포닐, 메탄술포닐, 및 치환된 또는 비치환된 알킬, 알콕시, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아랄킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아랄킬카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 아랄킬카르보닐옥시, 헤테로아릴카르보닐옥시, 헤테로아랄킬카르보닐옥시, 알킬아미노카르보닐옥시, 아릴아미노카르보닐옥시, 포르밀, 저급알킬카르보닐, 저급알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 아미노아릴, 알킬술포닐, 술폰아미도, 아미노알콕시, 알킬아미노, 헤테로아릴아미노, 알킬카르보닐아미노, 알킬아미노카르보닐아미노, 아릴아미노카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 시클로아미도, 시클로티오아미도, 시클로아미디노, 헤테로시클로아미디노, 시클로알킬, 시클로이미도, 헤테로시클로이미도, 구아니디닐, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클로, 헤테로시클로알킬, 아릴술포닐, 및 아릴술폰아미도로 구성되는 군으로부터 선택되고;
    R9 및 R10은 수소, 히드록시, 니트로, 아미노, 시아노, 할로, 티오아미도, 아미디노, 옥사미디노, 알콕시아미디노, 이미디노, 구아니디닐, 술폰아미도, 카르복실, 포르밀, 저급알킬, 아미노저급알킬, 저급알킬아미노저급알킬, 할로저급알킬, 저급알콕시, 할로저급알콕시, 저급알콕시알킬, 저급알킬아미노저급알콕시, 저급알킬카르보닐, 저급아랄킬카르보닐, 저급헤테로아랄킬카르보닐, 알킬티오, 아릴, 및 아랄킬로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    가장 바람직하게, A는 아미노피리딜, 니트로피리딜, 아미노니트로피리딜, 시아노피리딜, 시아노티아졸릴, 아미노시아노피리딜, 트리플루오로메틸피리딜, 메톡시피리딜, 메톡시니트로피리딜, 메톡시시아노피리딜, 및 니트로티아졸릴로 구성되는 군으로부터 선택된다.
  35. 제 34 항에 있어서, R1, R2 및 R3은 수소이고, R4는 수소, 메틸, 에틸, 아미노에틸, 디메틸아미노에틸, 피리딜에틸, 피페리디닐, 피롤리디닐에틸, 피페라지닐에틸 및 모르폴리닐에틸로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
  36. 제 34 항에 있어서, R1, R2, R3 및 R4는 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
  37. 제 34 항에 있어서, R5 및 R7 중 적어도 하나는 화학식 V의 치환된 또는 비치환된 부분인 것을 특징으로 하는 화합물.
    (화학식 V)
    상기 식에서,
    R11, R12, R13, R14, 및 R15는 수소, 니트로, 아미노, 시아노, 할로, 티오아미도, 카르복실, 히드록시, 및 선택적으로 치환된 저급알킬, 저급알콕시, 저급알콕시알킬, 할로저급알킬, 할로저급알콕시, 아미노알킬, 알킬아미노, 아미노알킬알키닐, 알킬아미노알킬알키닐, 알킬티오, 알킬카르보닐아미노, 아랄킬카르보닐아미노, 헤테로아랄킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 아미노카르보닐, 저급알킬아미노카르보닐, 아미노아랄킬, 저급알킬아미노알킬, 아릴, 헤테로아릴, 시클로헤테로알킬, 아랄킬, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 아랄킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시알킬, 알킬카르보닐옥시알킬, 헤테로아릴카르보닐옥시알킬, 아랄킬카르보닐옥시알킬, 및 헤테로아랄킬카르보닐옥시알킬로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택된다.
  38. 제 37 항에 있어서, R11, R12, R14 및 R15는 수소이고, R13은 할로, 저급알킬, 히드록시, 저급알콕시, 할로저급알킬, 아미노카르보닐, 알킬아미노카르보닐 및 시아노로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
  39. 제 37 항에 있어서, R11, R13, 및 R15는 수소이고, R12 및 R14는 할로, 저급알킬, 히드록시, 저급알콕시, 할로저급알킬 및 시아노로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
  40. 제 37 항에 있어서, R11, R12, R14, 및 R15는 수소이고, R13은 헤테로아릴인 것을 특징으로 하는 화합물.
  41. 제 37 항에 있어서, R11, R12, R14, 및 R15는 수소이고, R13은 헤테로시클로알킬인 것을 특징으로 하는 화합물.
  42. 제 37 항에 있어서, R11, R12, R13, R14, 및 R15 중 적어도 하나는 할로이고, R11, R12, R13, R14, 및 R15 중 나머지는 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
  43. 제 34 항에 있어서, R5 및 R8 중 적어도 하나는 디클로로페닐, 디플루오로페닐, 트리플루오로메틸페닐, 클로로플루오로페닐, 브로모클로로페닐, 에틸페닐, 메틸클로로페닐, 이미다졸릴페닐, 시아노페닐, 모르폴리노페닐 및 시아노클로로페닐로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
  44. 제 34 항에 있어서, R6은 치환된 또는 비치환된 아릴 또는 헤테로아릴인 것을 특징으로 하는 화합물.
  45. 제 34 항에 있어서, R6은 치환된 또는 비치환된 피리딜, 피리미디닐, 피페라지닐, 티아졸릴, 인돌릴, 이미다졸릴, 옥사디아졸릴, 테트라졸릴, 피라지닐, 트리아졸릴, 티에닐, 푸라닐, 퀴놀리닐, 피롤리오피리딜, 벤조티아졸릴, 벤조피리딜, 벤조트리아졸릴, 및 벤즈이미다졸릴인 것을 특징으로 하는 화합물.
  46. 제 34 항에 있어서, R6은 하기 구조를 갖는 모노케토피페라지닐 기인 것을 특징으로 하는 화합물.
    상기 식에서, R15 및 R16은 수소, 저급알킬, 저급알키닐, 아릴, 헤테로아릴,아릴저급알킬, 저급알킬아릴저급알킬, 할로저급알킬, 할로아릴저급알킬 탄소고리 및 헤테로고리로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 R8은 다른 R16 또는 R15와 함께 탄소고리, 헤테로고리 또는 아릴 고리를 형성할 수 있고; o는 1 내지 6의 정수이다.
  47. 제 46 항에 있어서, R15는 저급알킬이거나, 또는 R15는 R16과 함께 하기 구조를 갖는 기를 형성하는 것을 특징으로 하는 화합물.
  48. 제 34 항에 있어서, R5 및 R8은 독립적으로 수소 또는 저급알킬인 것을 특징으로 하는 화합물.
  49. 제약학적으로 허용되는 담체와 함께 투여되었을 때 사람 또는 동물 피험체에서 GSK3 활성을 억제하는데 효과적인 양의 제 1 항의 화합물을 포함하는 조성물.
  50. 제약학적으로 허용되는 담체와 함께 투여되었을 때 사람 또는 동물 피험체에서 GSK3 활성을 억제하는데 효과적인 양의 제 18 항의 화합물을 포함하는 조성물.
  51. 제약학적으로 허용되는 담체와 함께 투여되었을 때 사람 또는 동물 피험체에서 GSK3 활성을 억제하는데 효과적인 양의 제 34 항의 화합물을 포함하는 조성물.
  52. 제 49 항의 조성물을 사람 또는 동물 피험체에게 투여하는 것을 포함하는 사람 또는 동물 피험체에서 GSK3 활성을 억제하는 방법.
  53. 제 50 항의 조성물을 사람 또는 동물 피험체에게 투여하는 것을 포함하는 사람 또는 동물 피험체에서 GSK3 활성을 억제하는 방법.
  54. 제 51 항의 조성물을 사람 또는 동물 피험체에게 투여하는 것을 포함하는 사람 또는 동물 피험체에서 GSK3 활성을 억제하는 방법.
  55. 제 1 항의 화합물을 세포에서 GSK3 활성을 억제하는데 효과적인 양으로 세포에 투여하는 것을 포함하는 세포치료방법.
  56. 제 18 항의 화합물을 세포에서 GSK3 활성을 억제하는데 효과적인 양으로 세포에 투여하는 것을 포함하는 세포치료방법.
  57. 제 34 항의 화합물을 세포에서 GSK3 활성을 억제하는데 효과적인 양으로 세포에 투여하는 것을 포함하는 세포치료방법.
  58. 제 1 항의 화합물을 피험체에서 GSK3 활성을 억제하는데 효과적인 양으로 사람 또는 동물 피험체에게 투여하는 것을 포함하는 사람 또는 동물 피험체에서 GSK3 -매개 장애를 치료하는 방법.
  59. 제 58 항에 있어서, 조성물은 경구, 피하, 경피, 경점막, 이온삼투, 정맥내, 경막내, 구강, 설하, 비강내 및 직장 투여로 구성되는 군으로부터 선택된 투여 방식에 의해 투여하는 것을 특징으로 하는 방법.
  60. 제 58 항에 있어서, 상기 GSK3-매개 장애는 당뇨병, 알츠하이머병, 비만, 죽상경화성 심혈관 질환, 본태고혈압, 다낭난소 증후군, 증후군 X, 허혈, 외상성 뇌손상, 양극성 장애, 면역결핍 및 암으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
  61. 제 58 항에 있어서, 피험체에게 하나 이상의 추가 활성제를 투여하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  62. 제 58 항에 있어서, GSK3-매개 장애는 당뇨병이고, 추가 활성제는 인슐린, 트로글리타존, 로시글리타존, 피오글리타존, 글리피지드 및 메트포르민으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
  63. 제 1 항의 화합물을 피험체에서 tau 인산화를 억제하는데 효과적인 양으로 사람 또는 동물 피험체에게 투여하는 것을 포함하는 사람 또는 동물 피험체의 치료방법.
  64. 제 63 항에 있어서, 화합물은 1-{3-[(6-아미노-5-니트로피리딘-2-일)아미노]프로필}-4-(2,4-디클로로페닐)-N-[(1S)-2-히드록시-1-메틸에틸]-1H-피롤-3-카르복사미드인 것을 특징으로 하는 방법.
  65. 제약으로서의 용도를 위한 제 1 항, 제 18 항 또는 제 34 항의 화합물.
  66. 사람 또는 동물 피험체에서 GSK3 활성의 억제를 위한 의약의 제조에서 제 1 항, 제 18 항 또는 제 34 항의 화합물의 사용.
  67. 당뇨병, 알츠하이머병 및 다른 신경변성 장애, 비만, 죽상경화성 심혈관 질환, 본태고혈압, 다낭난소 증후군, 증후군 X, 허혈, 외상성 뇌손상, 양극성 장애 및 암의 치료를 위한 의약의 제조에서 제 1 항, 제 18 항 또는 제 34 항의 화합물의 사용.
  68. tau 인산화의 억제를 위한 의약의 제조에서 제 1 항, 제 18 항 또는 제 34 항의 화합물의 사용.
  69. 제 68 항에 있어서, 화합물은 1-{3-[(6-아미노-5-니트로피리딘-2-일)아미노]프로필}-4-(2,4-디클로로페닐)-N-[(1S)-2-히드록시-1-메틸에틸]-1H-피롤-3-카르복사미드인 것을 특징으로 하는 사용.
KR1020057003094A 2002-08-23 2003-08-21 글리코겐 신타제 키나제 3의 피롤 기제 억제제 KR20050038631A (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US40584602P 2002-08-23 2002-08-23
US60/405,846 2002-08-23

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20050038631A true KR20050038631A (ko) 2005-04-27

Family

ID=31946938

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020057003094A KR20050038631A (ko) 2002-08-23 2003-08-21 글리코겐 신타제 키나제 3의 피롤 기제 억제제

Country Status (11)

Country Link
US (2) US7250443B2 (ko)
EP (1) EP1537099B1 (ko)
JP (1) JP2006501243A (ko)
KR (1) KR20050038631A (ko)
CN (1) CN1688573A (ko)
AT (1) ATE477251T1 (ko)
AU (1) AU2003268184A1 (ko)
CA (1) CA2496246A1 (ko)
DE (1) DE60333762D1 (ko)
TW (1) TW200413352A (ko)
WO (1) WO2004018455A1 (ko)

Families Citing this family (65)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MY106991A (en) * 1989-09-04 1995-08-30 Pfizer Novel cephalosporin derivatives or compounds
EP1568698A1 (en) 2004-02-27 2005-08-31 Aventis Pharma Deutschland GmbH Pyrrole-derivatives as factor Xa inhibitors
WO2006034207A2 (en) * 2004-09-17 2006-03-30 Vanderbilt University Use of gsk3 inhibitors in combination with radiation therapies
US20060204980A1 (en) * 2004-12-28 2006-09-14 Altieri Dario C Colorectal cancer therapies
CN101203529A (zh) 2005-02-18 2008-06-18 诺华疫苗和诊断公司 来自脑膜炎/脓毒症相关性大肠杆菌的蛋白质和核酸
SG160329A1 (en) 2005-02-18 2010-04-29 Novartis Vaccines & Diagnostic Proteins and nucleic acids from meningitis/sepsis-associated escherichia coli
EP2614709A1 (en) 2005-07-18 2013-07-17 Novartis AG Small animal model for HCV replication
NZ594482A (en) 2005-11-04 2012-11-30 Novartis Vaccines & Diagnostic Influenza vaccines with reduced amount of oil-in-water emulsion as adjuvant
US8697087B2 (en) 2005-11-04 2014-04-15 Novartis Ag Influenza vaccines including combinations of particulate adjuvants and immunopotentiators
JP2009514839A (ja) 2005-11-04 2009-04-09 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス エスアールエル サイトカイン誘導剤を含むアジュバントインフルエンザワクチン
ES2420829T3 (es) 2005-11-04 2013-08-27 Novartis Vaccines And Diagnostics S.R.L. Vacunas adyuvantadas con antígeno de no virión preparadas a partir de virus de la gripe cultivados en cultivo celular
EA015271B1 (ru) 2006-01-27 2011-06-30 Новартис Вэксинс Энд Диагностикс Гмбх & Ко Кг Противогриппозные вакцины, содержащие гемагглютинин и белки матрикса
CA2646539A1 (en) 2006-03-23 2007-09-27 Novartis Ag Imidazoquinoxaline compounds as immunomodulators
US8063063B2 (en) 2006-03-23 2011-11-22 Novartis Ag Immunopotentiating compounds
EP2004226A1 (en) 2006-03-24 2008-12-24 Novartis Vaccines and Diagnostics GmbH & Co. KG Storage of influenza vaccines without refrigeration
US20100285062A1 (en) 2006-03-31 2010-11-11 Novartis Ag Combined mucosal and parenteral immunization against hiv
EP2054431B1 (en) 2006-06-09 2011-08-31 Novartis AG Conformers of bacterial adhesins
DE102006027229A1 (de) * 2006-06-09 2007-12-20 Grünenthal GmbH 1,3-Disubstituierte 4-Methyl-1H-pyrrol-2-carbonsäureamide und ihre Verwendung zur Herstellung von Arzneimitteln
GB0614460D0 (en) 2006-07-20 2006-08-30 Novartis Ag Vaccines
EP2064230A2 (en) 2006-08-16 2009-06-03 Novartis AG Immunogens from uropathogenic escherichia coli
KR20090057015A (ko) 2006-09-11 2009-06-03 노파르티스 아게 난을 사용하지 않는 인플루엔자 바이러스 백신의 제조
US20110045022A1 (en) 2006-12-06 2011-02-24 Theodore Tsai Vaccines including antigen from four strains of influenza virus
GB0700562D0 (en) 2007-01-11 2007-02-21 Novartis Vaccines & Diagnostic Modified Saccharides
UY30892A1 (es) 2007-02-07 2008-09-02 Smithkline Beckman Corp Inhibidores de la actividad akt
PL2185191T3 (pl) 2007-06-27 2013-02-28 Novartis Ag Szczepionki przeciwko grypie o małej zawartości dodatków
GB0713880D0 (en) 2007-07-17 2007-08-29 Novartis Ag Conjugate purification
GB0714963D0 (en) 2007-08-01 2007-09-12 Novartis Ag Compositions comprising antigens
GB0810305D0 (en) 2008-06-05 2008-07-09 Novartis Ag Influenza vaccination
GB0818453D0 (en) 2008-10-08 2008-11-12 Novartis Ag Fermentation processes for cultivating streptococci and purification processes for obtaining cps therefrom
EA201071086A1 (ru) 2008-03-18 2011-04-29 Новартис Аг Усовершенствованный способ получения вакцинных антигенов вируса гриппа
SG172926A1 (en) * 2009-01-30 2011-08-29 Glaxosmithkline Llc Crystalline n-{(1-s)-2-amino-1-[(3-fluorophenyl)methyl]ethyl}-5-chloro-4-(4-chloro-1-methyl-1h-pyrazol-5-yl)-2-thiophenecarboxamide hydrochloride
US8568732B2 (en) 2009-03-06 2013-10-29 Novartis Ag Chlamydia antigens
EP3263128A3 (en) 2009-04-14 2018-01-24 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Compositions for immunising against staphylococcus aureus
USH2283H1 (en) 2009-04-27 2013-09-03 Novartis Ag Vaccines for protecting against influenza
WO2010129208A1 (en) * 2009-05-05 2010-11-11 Merck Sharp & Dohme Corp. P38 kinase inhibiting agents
SG177533A1 (en) 2009-07-07 2012-02-28 Novartis Ag Conserved escherichia coli immunogens
WO2011008974A2 (en) 2009-07-15 2011-01-20 Novartis Ag Rsv f protein compositions and methods for making same
MX2012000734A (es) 2009-07-16 2012-01-27 Novartis Ag Inmunogenos destoxificados de escherichia coli.
GB0918392D0 (en) 2009-10-20 2009-12-02 Novartis Ag Diagnostic and therapeutic methods
GB0919690D0 (en) 2009-11-10 2009-12-23 Guy S And St Thomas S Nhs Foun compositions for immunising against staphylococcus aureus
AR079234A1 (es) * 2009-12-01 2012-01-04 Abbott Lab Derivados heterociclicos condensados nitrogenados, composiciones farmaceuticas que los contienen y uso de los mismos para tratar afecciones oncologicas, del sistema nervioso y/o del sistema inmune.
WO2011080595A2 (en) 2009-12-30 2011-07-07 Novartis Ag Polysaccharide immunogens conjugated to e. coli carrier proteins
CN102933267B (zh) 2010-05-28 2015-05-27 泰特里斯在线公司 交互式混合异步计算机游戏基础结构
GB201009861D0 (en) 2010-06-11 2010-07-21 Novartis Ag OMV vaccines
US9192661B2 (en) 2010-07-06 2015-11-24 Novartis Ag Delivery of self-replicating RNA using biodegradable polymer particles
HUE043879T2 (hu) 2011-01-26 2019-09-30 Glaxosmithkline Biologicals Sa RSV-immunizálási rend
DK3275892T3 (da) 2011-05-13 2020-04-06 Glaxosmithkline Biologicals Sa Præfusions-rsv-f-antigener
CN103764171B (zh) 2011-07-08 2016-08-17 诺华股份有限公司 酪氨酸连接方法
EP2554662A1 (en) 2011-08-05 2013-02-06 M Maria Pia Cosma Methods of treatment of retinal degeneration diseases
CA2854934A1 (en) 2011-11-07 2013-05-16 Novartis Ag Carrier molecule comprising a spr0096 and a spr2021 antigen
PL2800737T3 (pl) 2012-01-06 2020-11-02 Novus International Inc. Środki powierzchniowo czynne na bazie sulfotlenku
WO2013108272A2 (en) 2012-01-20 2013-07-25 International Centre For Genetic Engineering And Biotechnology Blood stage malaria vaccine
CN105307684A (zh) 2012-10-02 2016-02-03 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 非直链糖缀合物
RS56886B1 (sr) 2012-11-30 2018-04-30 Glaxosmithkline Biologicals Sa Antigeni pseudomonasa i kombinacije antigena
EP2870974A1 (en) 2013-11-08 2015-05-13 Novartis AG Salmonella conjugate vaccines
CA2945263A1 (en) 2014-04-09 2015-10-15 Christopher Rudd Use of gsk-3 inhibitors or activators which modulate pd-1 or t-bet expression to modulate t cell immunity
US10031153B2 (en) 2014-06-27 2018-07-24 Schlumberger Technology Corporation Magnetic ranging to an AC source while rotating
US10094850B2 (en) 2014-06-27 2018-10-09 Schlumberger Technology Corporation Magnetic ranging while rotating
BR112017009701B1 (pt) 2014-12-08 2021-09-08 Fmc Corporation Composto e métodos de preparação de compostos
GB201519573D0 (en) 2015-11-05 2015-12-23 King S College London Combination
CN108291055B (zh) 2015-11-12 2021-07-06 诺华丝国际股份有限公司 作为溶剂的含硫化合物
EP3231434A1 (en) 2016-04-14 2017-10-18 Fundacio Centre de Regulacio Genomica Method of treatment of parkinsonism
US11331313B2 (en) 2017-05-22 2022-05-17 Whitehead Institute For Biomedical Research KCC2 expression enhancing compounds and uses thereof
US10584306B2 (en) 2017-08-11 2020-03-10 Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Surfactant microemulsions
US20220133740A1 (en) 2019-02-08 2022-05-05 Frequency Therapeutics, Inc. Valproic acid compounds and wnt agonists for treating ear disorders

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2488336A (en) 1947-07-09 1949-11-15 Du Pont Production of nu-alkyl pyrroles
DE1445762A1 (de) 1964-04-29 1969-01-16 Bayer Ag Verfahren zur Herstellung von Chinonderivaten
US3534061A (en) 1967-12-04 1970-10-13 Parke Davis & Co N-(alpha-(p-methoxyphenyl)-beta-nitrostyryl)-phenoxyalkyl pyrroles
JPH0681752B2 (ja) * 1986-04-02 1994-10-19 大塚製薬株式会社 カルボスチリル誘導体
US4985560A (en) * 1990-01-12 1991-01-15 American Home Products Corporation Pyridazino(4,5-b)indolizines
US5376668A (en) * 1990-08-21 1994-12-27 Novo Nordisk A/S Heterocyclic compounds
WO1997020821A1 (en) * 1995-12-01 1997-06-12 Novartis Ag Heteroaryl derivatives
JP4533534B2 (ja) * 1998-06-19 2010-09-01 ノバルティス バクシンズ アンド ダイアグノスティックス，インコーポレーテッド グリコーゲンシンターゼキナーゼ３のインヒビター
GB9915437D0 (en) * 1999-07-01 1999-09-01 Cerebrus Ltd Chemical compounds III
DE60037905T2 (de) * 1999-12-17 2009-01-29 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc., Emeryville Pyrazin-basierte hemmer der glycogen-synthase-kinase 3
DE60022388T2 (de) 1999-12-17 2006-06-14 Chiron Corp Bizyklische inhibitoren von glycogensynthasekinase 3
EE05082B1 (et) * 2000-01-19 2008-10-15 Cadila Healthcare Ltd. Pürroolirea ühend, selle valmistamine ja kasutamine lipiidi- ja kolesteroolitaset alandava ravimi valmistamiseks ning seda sisaldav farmatseutiline kompositsioon
CN1179945C (zh) * 2000-03-09 2004-12-15 小野药品工业株式会社 吲哚衍生物、其制备方法及用途
EP1284260A4 (en) * 2000-05-22 2004-03-31 Takeda Chemical Industries Ltd TYROSINE PHOSPHATASE INHIBITORS

Also Published As

Publication number Publication date
AU2003268184A1 (en) 2004-03-11
EP1537099A1 (en) 2005-06-08
ATE477251T1 (de) 2010-08-15
CA2496246A1 (en) 2004-03-04
TW200413352A (en) 2004-08-01
EP1537099B1 (en) 2010-08-11
US7671049B2 (en) 2010-03-02
DE60333762D1 (de) 2010-09-23
JP2006501243A (ja) 2006-01-12
WO2004018455A1 (en) 2004-03-04
CN1688573A (zh) 2005-10-26
US20040077707A1 (en) 2004-04-22
US20070244109A1 (en) 2007-10-18
US7250443B2 (en) 2007-07-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR20050038631A (ko) 글리코겐 신타제 키나제 3의 피롤 기제 억제제
JP4636486B2 (ja) 脈管形成阻害活性を有するアリール尿素
KR100711817B1 (ko) 글리코겐 신타아제 키나제 3의 2고리 저해제
JP4533534B2 (ja) グリコーゲンシンターゼキナーゼ３のインヒビター
US6989382B2 (en) Carbocycle based inhibitors of glycogen synthase kinase 3
ES2296667T3 (es) Inhibidores basados en pirazina de glicogeno sintasa quinasa-3.
JP2001526230A (ja) ヘテロアリール置換イミダゾール化合物、その医薬組成物および使用
JPH11302277A (ja) ピラゾール誘導体、その製法および医薬としてのその使用
JP2001506230A (ja) 新規ピペラジン含有化合物
WO2002088122A1 (fr) Composes heterocycliques
US6127343A (en) Somatostatin agonists and antagonists
US6962996B2 (en) Inhibitors of p38
WO1998058646A1 (en) Use of somatostatin agonists and antagonists for treating diseases related to the eye
EP1607396A1 (en) Bicyclic inhibitors of glycogen synthase kinase 3

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E601 Decision to refuse application