KR20040008871A - 피부보호 및 피부질환 개선용 조성물 및 그 제조방법 - Google Patents

피부보호 및 피부질환 개선용 조성물 및 그 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 유효성분으로서, 당귀, 천궁, 생지황, 하수오, 황기, 감초, 길경, 포공영, 백작약, 백출, 갈근, 박하, 사인, 진피, 율무 및 건율을 혼합한 후 물로 추출하거나 각각 물로 추출한 후 혼합하여 얻은 수추출물 또는 그의 건조분말을 함유하는 피부보호 및 피부질환 개선용 조성물 및 그 제조방법에 관한 것이다.

Description

피부보호 및 피부질환 개선용 조성물 및 그 제조방법{Composition for protection of skin and improvement of skin diseases and process for preparation thereof}
본 발명은 피부보호 및 피부질환 개선용 생약 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 유효성분으로서, 당귀, 천궁, 생지황, 하수오, 황기, 감초, 길경, 포공영, 백작약, 백출, 갈근, 박하, 사인, 진피, 율무 및 건율(말린 밤)을 혼합한 후 물로 추출하거나 각각 물로 추출한 후 혼합하여 얻은 수추출물 또는 그의 건조분말을 함유하는, 아토피 피부염 등의 알레르기 피부질환, 및 건선, 습진, 여드름을 포함하는 피부염증 질환은 물론 노화 등에 의한 피부 주름 등을 개선하기 위한 조성물 및 그의 제조방법에 관한 것이다.
인체의 피부는 물리· 화학적으로 외계로부터 신체를 보호하는 동시에 전신의 대사에 필요한 생화학적 기능을 영위하는 생명유지에 필수 불가결한 기관이다.사람의 머리털, 손· 발톱을 포함한 피부에 나타나는 모든 이상 소견을 피부질환, 즉 피부병이라 한다. 피부는 신체의 표면을 덮고 있으므로 외계로부터 자극이나 여러 병원체에 직접 접촉될 기회가 많고, 체내로부터 큰 영향을 받는다. 더욱이 피부의 근소한 변화도 눈으로 보고 손으로 만질 수 있으며, 병변부의 일부를 채취하여 병리조직학적으로 검사하거나 미생물의 검색 등과 같은 검사를 하기가 쉬워, 개개 질병의 진단을 명확하게 하는 것이 용이하므로, 그 종류는 다른 장기의 것에 비하여 상당한 수에 이르며 병명도 복잡 다양하다. 비교적 흔한 피부질환에는 아토피 피부염, 접촉피부염, 지루성 피부염, 두드러기, 무좀, 완선, 건선, 단순· 대상포진, 피부건조증, 주부습진, 여드름 등이 있다.
이러한 피부질환의 내인으로는 위장장애· 간장병· 신장병· 물질대사장애· 혈액질환· 내장종양· 내분비장애 등을 들 수 있고, 외인으로는 외계로부터 직접 피부에 작용하는 마찰· 압박· 타박 등의 기계적 자극을 비롯하여, 동물성· 식물성· 광물성의 독물, 그 밖에 약품· 방사선· 온열· 한랭, 또는 세균· 사상균· 원충· 바이러스 등의 미생물이나 피부기생동물 등을 들 수 있다. 또한 유전성 피부질환 및 모반(母斑)· 모반증 등은 그 원인이 유전자에 의한 것이므로 내인성 피부병에 포함된다.
피부질환 중, 특히 아토피 피부염은 알레르기 반응으로 인한 질환으로 이러한 알레르기 반응은 초기의 특이적 면역반응과 후기의 염증반응으로 나뉜다. 알레르기 반응은 거의 대부분 비만세포를 매개로 하여 일어나며, 세포막에 존재하는 고친화성의 IgE 수용체(FcεRI)를 통해서 활성화된다. IgE 수용체에 결합되어 있는IgE 항체가 항원에 의하여 가교(bridge)를 형성하면 포스포리파아제 C, 단백질 인산화효소 C, 칼슘 이온의 작용을 거쳐 과립에 저장되어 있던 히스타민(histamine), 콘드로이틴(chondroitin) 황산염, 헤파린(heparin), 단백질 분해효소 등이 유리됨으로써 반응 초기 단계를 매개한다. 히스타민을 포함한 화학 전달물질들은 알레르기 반응의 초기에 볼 수 있는 여러 가지 임상증상을 유발하는 원인물질들이며, 가장 많은 양을 차지하는 것은 히스타민이다. 따라서 알레르기 반응에서 히스타민에 의한 작용이 중요하며, 그 증상으로는 혈관 확장, 부종 등이 있다. 프로스타글란딘(prostaglandin), 혈소판 활성인자(platelet-activating factor) 등도 알레르기 반응에서 주목받고 있는 화학 전달물질들이다. 화학 전달물질의 작용으로 인하여 나타나는 증상으로는 담마진, 소양증, 피부발적 등의 피부증상을 들 수 있다.
현재 환경오염, 식생활 습관 및 유전적인 원인 등으로 피부 트러블 및 피부질환 환자수가 계속적으로 증가하고 있다. 미국의 경우 전 인구의 5∼12%가 피부질환으로 고통 받고 있으며 우리나라의 경우에도 약 200∼300만 명의 피부질환 환자가 있다. 그럼에도 불구하고 현재 그 치료제나 개선제로는 심각한 부작용을 나타내는 스테로이드 제제가 대부분이고, 최근에는 면역억제제가 개발되어 있으나, 아직까지는 부작용 염려 없이 완치 효과를 발휘하는 특별한 치료제나 개선제는 개발되어 있지 않은 실정이다. 이러한 피부질환 치료제의 세계 시장규모는 13억 달러에 달하고 있지만, 면역기능 저하, 피부위축, 어린이 성장방해, 모세혈관 확장, 여드름, 부신피질기능 억제 등 부작용이 수반되므로 임상적 사용에 매우 주의하지 않으면 안 된다. 또한, 현재 항염증 또는 피부질환 치료효과 등이 알려진 생약들의 유효성분을 추출하여 피부질환 치료제로 개발된 예들이 알려져 있으나, 대부분 가려움증이나 염증 등을 경감시켜 줄 뿐 질병을 완치시키지는 못한다.
한편, 생리적 자연현상인 세포 노화로 인해 피부를 구성하고 있는 기본 단위인 피부 세포의 분열이 정상적으로 이루어지지 않고 재생기간이 점차 길어져 피부가 탄력을 잃으며, 노화 각질이 쌓이고 피부가 건조해지면서 주름이 생기기 시작한다. 현재, 노화로 인한 피부 주름을 회복시키기 위해 수술이나 연고 및 비타민 C 요법 등을 사용하고 있지만 인간의 오랜 숙원인 팽팽하고 탄력 있는 피부를 유지시키기에는 역부족이다. 또한, 수 년 전부터 과일 산이나 김치 추출물과 같은 천연물을 이용한 피부 노화 방지 및 피부 개선제가 개발되고 있으나, 남성호르몬인 안드로겐 억제작용 및 그에 따른 피지분비 증가 억제작용에 의한 피부 개선제로서의 기능을 수행할 뿐 피부질환에 대한 치료제로서의 효과는 전혀 나타내지 못하고 있는 실정이다.
최근에는 의학적 치료와 스킨 케어(skin care)가 접목된, 소위 "메디칼 스킨 케어(medical skin care)"가 우리나라뿐만 아니라 미국, 유럽, 일본 등지에서 피부 치료를 위해 크게 발전해가고 있다. 그러나 겉으로 드러나는 여드름, 기미, 주근깨 등을 개선시킬뿐 알레르기 피부질환이나 면역기능 저하 및 노화 등으로 인한 질환에는 효과가 불분명하다.
한편, 면역세포에서 분비되는 인터페론-γ는 단구와 대식세포에서 항원 특이적· 비특이적 면역반응을 통해 면역조절능을 증가시키는 중요한 역할을 한다. 인터페론-γ 분비가 감소되면 IgE 생성 증가 또는 항원 제거 능력 감소로 아토피 증상이 심해진다. 또한 인터페론-γ는 T 림프구에 작용하여 이들의 분화와 성숙을 증진시킨다. 또한 CD4 T 림프구에서 Th1 림프구의 분화를 촉진시키며, Th2 림프구의 증식을 억제한다. 이러한 효과는 IL-12를 분비하도록 단핵식균세포를 활성화시키고, T 림프구가 기능적인 IL-12 수용체를 발현하도록 활성화시킴으로써 매개된다.
따라서 인체 내 인터페론-γ 생성에 의한 면역기능 향상을 통해 젊은 피부를 유지시킬 수 있음과 함께, 히스타민 생성 조절에 의한 알레르기와 같은 피부질환을 근본적으로 개선할 수 있는 제품의 개발이 절실히 요구되어 왔다.
본 발명자들은 종래의 피부 트러블을 포함한 피부질환 치료제들이 갖는 문제점을 해결함과 동시에 면역기능 저하, 신기능 저하, 호르몬 분비 이상 등의 부작용도 없는 조성물을 개발해내기 위해 지속적인 연구를 수행하였다. 그 결과, 기존의 알레르기 반응에 탁월한 단일물질들을 혼합하여 사용한 경우 피부질환 개선과 아울러 면역기능 조절에도 효과가 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
따라서 본 발명은 단순한 피부개선이나 일시적 치료가 아닌, 인체 면역기능 조절에 의해 피부 트러블의 원인을 근본적으로 치료하는 조성물 및 그의 제조방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
도 1은 본 발명에 따른 조성물의 인터페론-γ 생성 효과를 보여주는 그래프이다.
본 발명은 유효성분으로서, 당귀, 천궁, 생지황, 하수오, 황기, 감초, 길경, 포공영, 백작약, 백출, 갈근, 박하, 사인, 진피, 율무 및 건율을 혼합한 후 물로추출하거나 각각 물로 추출한 후 혼합하여 얻은 수추출물 또는 그의 건조분말을 함유하는, 피부보호 및 피부질환 개선용 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서 원료생약으로 사용되는 당귀는 보혈화혈, 조경지통, 윤장통변하고; 천궁은 활혈행기, 거풍지통하고; 생지황은 청열양혈, 생진지갈하고; 하수오는 보간신, 익정혈, 통변, 해창독하고; 황기는 보기, 탁독, 배농, 지통작용이 있고; 감초는 진해, 거담, 해독, 진경, 항염, 진통, 항과민 효능이 있으며; 길경은 거담배농, 청리두목인후하고; 포공영은 청열해독, 소옹산결, 항균, 항바이러스, 항진균, 이뇨능이 있으며; 기타 성분들은 고표지한, 정천지해, 생기, 소산풍열, 조중행기, 조중지사, 청열배농, 이수소종 등의 효능 중 일부를 갖는다.
본 발명에 있어서, 각 생약들은 통상의 방법에 의해 그 유효성분들을 각각 추출하거나, 생약들을 혼합한 후 한꺼번에 추출하고, 필요한 경우 이를 농축건조시켜 분말화한다. 본 발명에 있어서, 바람직하게는 각 생약들을 규정된 중량비로 혼합한 후, 물로 추출한다.
본 발명에 따른 조성물은 바람직하게는 약제학적으로나 식품 또는 화장용으로 허용되는 담체를 추가로 함유한다. 본 발명의 조성물에서 사용될 수 있는 약제학적으로 허용되는 담체는 약제학적 분야에서 통상적인 것으로, 예를 들면 경구투여용 제제의 경우에는 결합제, 활택제, 붕해제, 부형제, 가용화제, 안정화제 등이 있고, 국소투여용 제제의 경우에는 기제, 부형제, 윤활제, 보존제 등이 있다. 필요에 따라서는, 환제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태로 제조할 수 있고, 필요에 따라, 사용시에 다른 제형으로 바꾸어 사용할 수도 있다.
본 발명에 따른 조성물의 제조 원료는 당귀, 천궁, 생지황, 하수오, 황기, 감초, 길경, 포공영, 백작약, 백출, 갈근, 박하, 사인, 진피, 율무 및 건율을 바람직하게는 2∼8 : 2∼8 : 2∼8 : 1∼6 : 3∼12 : 1∼6 : 2∼8 : 8∼16 : 2∼8: 2∼8: 1∼8 : 1∼8 : 0.5∼4 : 0.5∼4 : 1∼16 : 0.5∼20의 중량비로 포함된 것이다.
상기 생약들의 조성비는 반복된 실험결과를 토대로 얻어진 것이며 그 하한치보다 낮을 경우에는 그 성분의 생리활성효과가 감소하며 그 상한치보다 높을 경우에는 타성분의 생리활성효과가 감소될 수 있어 조성물의 상승작용 및 협동작용이 저하될 우려가 있다.
본 발명의 조성물은 피부보호 및 피부질환 개선제로서 사용될 수 있으며, 이러한 효과는 하기 실험예 1 내지 4로부터 확인된다. 본 발명에 따른 조성물은 면역 관련세포로부터 사이토카인 및 화학적 매개물질의 생성을 조절하여 피부보호 및 피부질환 개선효과를 증강하는 것으로 추정된다.
본 발명의 조성물은 예를 들어 당귀 2∼8 g, 천궁 2∼8 g, 생지황 2∼8 g, 하수오 1∼6 g, 황기 3∼12 g, 감초 1∼6 g, 길경 2∼8 g, 포공영 8∼16 g, 백작약 2∼8 g , 백출 2∼8 g, 갈근 1∼8 g, 박하 1∼8 g, 사인 0.5∼4 g, 진피 0.5∼4 g, 율무 1∼16 g 및 건율 0.5∼20 g의 혼합물에 물 800 ㎖를 붓고 약 2 시간 동안 달여 약 150 ㎖로 농축시켜 탕제로 만든다.
본 조성물의 통상적인 1 회 투여용량은 상기 탕제 기준 체중 1 ㎏ 당 1.5∼2.5 ㎖이며 이를 1 일 3 회 복용한다. 예를 들어, 체중 60 ㎏인 성인의 경우, 1 회 90∼150 ㎖씩 1 일 3 회 복용한다. 이 용량의 액제를 동결건조 분말로 할 경우 0.5∼1 g/1 회에 달한다. 그러나 본 조성물의 복용량은 환자의 체중, 연령, 성별, 병증의 경중정도와 소화상태에 따라 적의 증감될 수 있다. 기타 제제에 있어서도 상기 액제 복용량을 고려하여 산출된 적정량을 경구 투여한다.
이하, 본 발명을 하기 실시예에 의하여 보다 구체적으로 설명하지만 이들에 의해 본 발명의 범위가 어떤 식으로든 제한되는 것은 아니다.
실시예 1: 액제의 제조
당귀 4 g, 천궁 4 g, 생지황 4 g, 하수오 3 g, 황기 6 g, 감초 3 g, 길경 4 g, 포공영 8 g, 백작약 4 g, 백출 4 g, 갈근 4 g, 박하 4 g, 사인 2 g, 진피 2 g, 율무 8 g 및 건율 10 g의 혼합물에 물 800 ㎖를 붓고 약 2 시간 동안 달여 약 150 ㎖로 농축시켜 액제로 만들었다.
실시예 2: 기타 제제의 제조
통상의 방법에 따라 실시예 1의 추출물로 환제, 과립제, 정제 및 캅셀제를 제조하였다.
실시예 3: 식품의 제조
실시예 1의 추출물을 동결건조한 후 그 분말을 초콜렛과 혼합하여 통상의 방법에 따라 식품으로 제조하였다.
실험예 1: 본 발명에 따른 조성물의 히스타민 방출 억제효과 측정
본 발명에 따른 조성물의 히스타민 방출 억제효과를 측정하기 위하여, 아래와 같은 실험을 수행하였다.
흰쥐(mouse) 복강에 30 ㎖ 정도의 타이로드(Tyrode) 완충용액 B(137 mM NaCl, 5.3 mM 글루코스, 12 mM NaHCO3, 2.7 mM KCl, 0.3 mM NaH2PO4)를 주입하고 복부를 90 초 정도 마사지하였다. 그 후 복막을 조심스럽게 열어 파스퇴르 피펫으로 복강내 세포를 함유하고 있는 타이로드 완충용액 B를 수거하였다. 이어서 상기 세포 함유 용액을 150×g로 10 분 동안 원심분리하여 세포를 침전시켰다. 침전된 세포에 타이로드 완충용액 B를 가하여 피펫팅한 후, 22.5% 메트리자마이드(metrizamide) 용액위에 살짝 적층하고 400×g에서 15 분 동안 원심분리하여 침전된 세포만을 얻었다. 상기 침전된 세포에 α-MEM(minimum essential medium)/50% FBS(fetal bovine serum)를 가하고, 피펫팅하여 톨루이딘 블루 염색 방법을 통해 비만세포가 95% 이상이고 트립판 블루 염색에 의해 생존능력이 97% 이상임을 확인하고, 실험에 사용하였다.
상기 정제된 비만세포에 α-MEM/50% FBS를 가하고 조심스럽게 피펫팅한 후, 2×105개의 세포가 되도록 분주하였다. 세포를 안정화시키기 위하여 실시예 1의 조성물을 처리하기 전에 37 ℃에서 10 분 동안 미리 배양하고, 실시예 1의 조성물수용액을 각각 0.01, 0.1, 1.0 ㎎/㎖(증류수 1 ㎖당 실시예 1의 조성물 0.01, 0.1, 1 ㎎을 녹인 것)가 되도록 가하고 37 ℃에서 30 분 동안 처리하였다. 그 후 곧 바로 '화합물 48/80'(Baltzly et al, 1949. A family of long acting depressors. Journal of American Chemical Society 71, 1301-1305) 각각 5.0 ㎍/㎖(부피당 시약의 양)을 10 분 동안 처리하였다. 반응 종료 후 400×g에서 원심분리하여 상층액과 세포를 분리하였다.
히스타민 정량은 OPA 스펙트로플루오로메트리(O-phthaldialdehyde spectrofluorometry) 방법으로 438 ㎚에서 측정하였으며, 히스타민 분비의 억제율을 하기 식을 사용하여 계산하였다:
억제율(%)=[(A-B)×100]/A
A: 약물을 부가하지 않았을 때의 히스타민 양
B: 약물을 부가하였을 때의 히스타민 양
그 결과를 표 1에 나타내었다.
본 발명에 따른 조성물의 화합물 48/80 유도성 히스타민 방출에 대한 효과
실시예 1의 조성물(㎎/㎖) 억제율(%)
무처리(식염수) -
0.01 20.54±3
표 1에 나타낸 바와 같이, '화합물 48/80'에 의하여 유도된 복강 비만세포로부터 히스타민의 분비가 본 발명의 조성물 0.01 ㎎/㎖의 농도에서 약 20% 억제됨을 확인할 수 있었다.
실험예 2: 본 발명에 따른 조성물의 피부 알레르기 반응에 대한 효과 측정
본 발명에 따른 조성물의 수동적 피부 알레르기 반응에 대한 효과를 조사하기 위하여, 아래와 같은 방법으로 인위적인 피부 알레르기(passive cutaneous anaphylaxis, PCA) 반응을 일으켰다.
실험동물로서 4∼6 주령의 체중 5∼35 g인 ICR계 흰쥐를 실험 군별로 5 마리씩 사용하여 반복 실험하였다. 먼저 충분히 섭식시킨 후 24 시간이 경과한 상기 흰쥐를 대상으로 하였다. 상기 흰쥐는 대한 동물센터로부터 입수하였다.
항-DNP(dinitrophenyl) IgE를 상기 흰쥐의 피내에 주입하여 피부를 감작시킨 다음, 48 시간 후에 항원 DNP-HSA(dinitrophenyl-human serum albumin)를 꼬리에 정맥 주사하여 IgE 의존성 피부 반응을 유발하였다. 이때 DNP-HSA는 PBS(phosphate buffered saline)로 희석하였다. 흰쥐의 등에 항-DNP IgE 100 ng을 주입하고 48 시간 경과 후 4% 에반스 블루(evans blue)와 DNP-HSA를 1:1로 혼합한 용액을 쥐의 꼬리정맥에 주사하였다. 항원(DNP-HSA)을 투여하기 1 시간 전에 실시예 1의 추출물 0.01, 0.1 및 1 g/체중 ㎏을 흰쥐에 각각 구강 투여하였다.
흰쥐를 치사시킨 후 반응이 일어난 부위를 절단하여 0.1 N 수산화칼륨 500 ㎕를 첨가한 후, 아세톤과 인산(5:13(w:w)) 혼합용액을 4.5 ㎖씩 가하여 색소를 추출하였다. 620 ㎚에서 추출물의 흡광도를 측정하였으며, 에반스 블루 표준 곡선을 이용하여 색소량을 측정하였다. 그 결과를 표 2에 나타내었다.
본 발명에 따른 조성물의 수동적 피부 알레르기 반응에 대한 효과(*P<0.05)
실시예 1의 조성물(g/㎏) 염색량(㎍/부위) 억제율(%)
무처리(식염수) 1.373±0.131 -
0.01 0.627±0.075 54.31±4*
0.1 1.0097±0.071 26.49±2*
1 1.001±0.074 27.11±2
표 2에 나타낸 바와 같이, 0.01 g/㎏ 농도의 조성물에서 수동적 피부 알레르기 반응을 가장 많이 억제하는 것으로 나타났다. 이러한 결과는 본 발명에 따른 조성물의 경구투여를 통해 국소, 즉 피부 알레르기 반응을 현저하게 억제할 수 있음을 의미한다.
실험예 3: 본 발명에 따른 조성물의 이개 부종반응에 대한 효과 측정
실험동물로서 4∼6 주령의 체중 25∼35 g인 ICR계 흰쥐를 실험 군별로 4 마리씩 사용하여 반복 실험하였다. 먼저 충분히 섭식시킨 후 24 시간 경과한 상기 흰쥐를 대상으로 하였다. 상기 흰쥐는 대한 동물센터로부터 입수하였다.
먼저 실시예 1의 조성물을 농도별로(0.01, 0.1 및 1 g/㎏) 경구 투여한 후 1 시간 동안 반응시켰다. 그 후 화합물 48/80(20 g/ℓ)을 미세 주사기를 사용하여 쥐 귀 피하 내부에 주입하고 40 분 후에 이개 부종반응이 일어난 부위의 귀 두께를 측정하였다. 그 결과를 표 3에 나타내었다.
본 발명에 따른 조성물의 화합물 48/80 유도성 이개 부종반응에 대한 효과(*P=0.004, **P=0.001)
실시예 1의 조성물(g/㎏) 귀 두께(㎜) 억제율(%)
무처리(식염수) 0.253±0.016 -
0.01 0.177±0.015 30.42±1.4
0.1 0.133±0.004 47.231±1.84*
1 0.117±0.012 56.71±4.7**
표 3에서 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 조성물은 낮은 농도에서는 유의한 효과가 없고, 1 g/㎏의 농도에서 이개 부종반응을 가장 많이 억제함을 알 수 있었으며,P<0.005로 유의한 결과를 얻었다.
실험예 4: 본 발명에 따른 조성물의 인터페론-γ 생성 효과 측정
본 발명에 따른 조성물이 면역증강 기능을 담당하고 있는 인터페론-γ 생성을 유도하는지 여부를 아래와 같이 조사하였다.
배양액 RPMI 1640/FBS에 T 세포주 Molt-4를 5% CO2, 37 ℃에서 배양한 후 3×105개의 세포가 되도록 분주하였다. 세포를 안정화시키기 위하여 실시예 1의 조성물을 처리하기 전에 37 ℃에서 10 분 동안 미리 배양하고, 실시예 1의 조성물 수용액을 각각 0.01, 0.1, 1.0 ㎎/㎖(증류수 1 ㎖당 실시예 1의 조성물 0.01, 0.1, 1 ㎎을 녹인 것)가 되도록 가한 다음 24 시간동안 반응시켰다. 반응 종료 후 400×g에서 원심분리하여 상층액과 세포를 분리하였다. 분리된 상층액 중 인터페론-γ의 단백질 수준을 조사하기 위하여 ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)를 아래와 같이 실행하였다.
인터페론-γ에 대한 단일클론 항체인 항-인간 인터페론-γ(1 ㎍/㎖)를 PBS(pH 7.4)로 희석하여, 96-웰 플레이트에 100 ㎕씩 각각 코팅한 다음, 4 ℃에서 12 시간 동안 방치하였다. 상기 플레이트를 0.05% 트윈이 포함된 PBS로 세척한 다음, 1% BSA, 5% 슈크로스, 0.05% NaN3를 함유한 PBS로 1 시간 동안 차단시켰다. 여러 차례 세척한 다음, 원심 분리하여 얻은 상층액과 표준 곡선으로 사용할 재조합 인터페론-γ를 첨가한 후 37 ℃에서 2 시간 동안 방치하였다. 이어서 각 웰을 다시 세척하고 2차 항체 바이오틴(biotin)이 결합된 인터페론-γ(0.2 ㎍/㎖)를 첨가하여 다시 37 ℃에서 2 시간 동안 방치하였다. 웰을 세척한 다음, 아비딘(avidine)이 연결된 과산화효소를 첨가하고 37 ℃에서 20 분 동안 방치하였다. 웰을 다시 세척한 다음, ABTS(2,2′-AZINO-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-6-sulfonic acid)) 기질을 첨가하고, 발색반응을 ELISA 판독기를 사용하여 405 ㎚에서 측정하였다.
그 결과를 도 1에 나타내었다. 도 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 조성물 0.01 ㎎/㎖에서 인터페론-γ 생성을 가장 많이 증가시킴을 알 수 있었다(B, 무처리; *P=0.014).
이상 살펴본 바와 같이, 본 발명의 조성물은 히스타민 분비를 억제하고, 수동적 피부 알레르기 반응 및 이개 부종반응 등의 알레르기 반응을 억제함으로써,아토피 피부염과 같은 알레르기 피부질환 등의 치료제로 사용될 수 있으며, 인체 면역 기능 조절에 중요한 인터페론-γ 생성을 증가시킴으로써 면역 기능 악화 혹은 저하에 의한 노화로 인한 주름, 건선, 피부건조증, 피부가려움증, 만성 습진 및 여드름의 치료 보조제로서 효과적으로 사용될 수 있다. 또한, 복용시 인체의 피부를 매우 부드럽게 하므로, 피부미용에도 효과적인 경구용 화장품으로 사용될 수 있다.

Claims (7)

  1. 유효성분으로서, 당귀, 천궁, 생지황, 하수오, 황기, 감초, 길경, 포공영, 백작약, 백출, 갈근, 박하, 사인, 진피, 율무 및 건율을 혼합한 후 물로 추출하거나 각각 물로 추출한 후 혼합하여 얻은 수추출물 또는 그의 건조분말을 함유하는, 알레르기 치료 및 면역증강용 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 당귀, 천궁, 생지황, 하수오, 황기, 감초, 길경, 포공영, 백작약, 백출, 갈근, 박하, 사인, 진피, 율무 및 건율의 중량비가 2∼8 : 2∼8 : 2∼8 : 1∼6 : 3∼12 : 1∼6 : 2∼8 : 8∼16 : 2∼8: 2∼8: 1∼8 : 1∼8 : 0.5∼4 : 0.5∼4 : 1∼16 : 0.5∼20인 조성물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 의약, 식품 또는 화장품으로 사용하기 위한 조성물.
  4. 제3항에 있어서, 액상제제로 제형화되는 조성물.
  5. 당귀, 천궁, 생지황, 하수오, 황기, 감초, 길경, 포공영, 백작약, 백출, 갈근, 박하, 사인, 진피, 율무 및 건율을 혼합한 후 물로 추출하거나 각각 물로 추출한 후 혼합하여 얻은 수추출물, 또는 그 수추출물을 건조하여 얻은 분말을 약제학적으로나 식품 또는 화장용으로 허용되는 담체와 혼합하여 제1항 또는 제2항에 따른 조성물을 제조하는 방법.
  6. 제1항 또는 제2항에 따른 조성물을 함유하는 피부보호 및 피부질환 개선제.
  7. 제6항에 있어서, 경구용 또는 피부도포용 피부보호 및 피부질환 개선제.
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