KR20020075632A - 크립토탄시논을 함유하는 여드름 예방 및 치료용 화장료 - Google Patents

Abstract

본 발명은 여드름의 예방 및 치료용 화장료에 관한 것으로서, 본 발명에 따른 화장료는 크립토탄시논을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다. 크립토탄시논을 함유하는 화장료는 피부에 대한 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있을 뿐만 아니라, 5 알파-리덕타아제의 활성 억제에 의한 피지 분비량 조절, 항균 및 항염 작용이 뛰어나므로 여드름의 예방 및 치료에 효과적이다.

Description

크립토탄시논을 함유하는 여드름 예방 및 치료용 화장료 {Cosmetic for preventing and treating acnes containing Cryptotanshinone}

본 발명은 여드름 예방 및 치료용 화장료에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 피부에 대한 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있을 뿐만 아니라, 5 알파-리덕타아제의 활성 억제에 의한 피지 분비량 조절, 항균 및 항염 작용이 뛰어난 크립토탄시논(Cryptotanshinone)을 함유하여 여드름 예방 및 치료에 효과가 탁월한 화장료에 관한 것이다.

여드름은 주로 사춘기 연령대와 같은 젊은 남녀의 얼굴이나 가슴, 목 부위에 발생하는 모 피지선의 만성 염증성 질환으로서, 면포(comedone), 구진(papule), 농포(pustule), 낭종, 또는 결절을 형성하며, 심한 경우 반흔을 남길 수 있는 병변이다. 여드름에 의한 피부 손상이 심하면, 이로 인해 우울증이나 대인관계 기피 등의 정신적 피해를 주기도 한다.

여드름의 발병 원인은 아직까지 명확히 규명되어 있지 않으나, 유전적 요인과 환경적 요인을 배제한다면 다음의 세 요인에 의해 발병하는 것으로 인정되고 있다.

첫째, 피지가 비정상적으로 과잉 분비되는 경우이다. 과도한 피지분비는 남성 호르몬인 테스토스테론(testosterone)과 밀접한 관계가 있는데, 테스토스테론이 피부 세포내의 5 알파-리덕타아제에 의해 디하이드로테스토스테론(dihydrotestoste

rone;DHT)으로 전환되어 피지분비 세포의 활성을 증진시키므로써 피지 분비를 촉진시키는 것으로 알려져 있다(Rosenfield RL and Deplewski D. Role of androgen in the developmental biology of the pilosebaceous unit. The American Journal of Medicine 1995;16:80s-88s).

둘째, 모낭 벽이 과각화하여 모공이 폐쇄되는 경우이다. 생성된 피지는 피부 밖으로 원활하게 배출되어야 하지만, 모낭의 과각화로 인하여 모공이 막히면 피지의 원활한 배출이 억제되므로 모낭 내에 피지가 정체되어 미세면포를 형성하게 된다. 이 상태가 여드름 발병의 초기 단계이다.

셋째, 모낭 내 정체된 피지가 모낭 내 상주하는 혐기성 세균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)의 생장을 촉진시키므로써 여드름 병변을 악화시키는 경우이다. 피지선 내에 여드름 균이 증식됨에 따라 피지를 구성하는 트리글리세라이드(triglyceride)가 자유 지방산(free fatty acid)으로 전환되어 자극원(irritants)으로 작용하거나, 면포 유발성(comedogenic) 물질로 작용하므로써 여드름 생성을 촉진시키게 되고, 이에 따라 염증반응까지 수반하게 된다.(Sergio Nacht, Cosmetics Toiletries, 101, 47-55, 1986; Wei-Li Lee 등, Infection and Immunity, 35, 71-78, 1982).

따라서, 현재 여드름 치료 및 완화 효과에 대한 평가방법도 전술한 작용 기전을 토대로 하여, 피지분비 조절, 과각화 억제, 여드름 균에 대한 항균력 및 여드름 균에 의해 형성된 염증의 완화효과를 평가하는 방법이 이용되고 있다(Madli Puhvel, Cosmetics Toiletries, 98, 117-119, 1983; Kathy Perisho 등, J. of Invest. Dermatol., 90, 350-353, 1988; Hyeyoung Kim 등, Korean J. Ginseng Sci., 14, 391-398, 1990; R.A. Bojar 등, British J. of Dermatology, 132, 204-208, 1995; A. M. Kligman 등, British J. of Dermatology, 100, 699-702, 1979).

약물을 이용한 여드름 치료방법은 국소도포요법과 경구요법으로 크게 분류될 수 있는데, 여드름 증상이 경미할 경우 국소도포요법 만으로도 충분히 치료될 수 있으며, 의약품으로 사용되는 국소도포항생제로는 클린다마이신(clindarmycin)이 가장 효과적인 것으로 알려져 있고, 그 외 에리뜨로마이신(erythromycin)과 테트라사이클린(tetracycline)등이 혼합된 복합제가 주로 사용되고 있다.

또한, 일반적으로 사용되는 방법으로서, 살리실산 (salicylic acid)이나 비타민A 유도체인 레티노익산(retinoic acid) 제제를 사용해 모공의 과각질의 형성을 억제하거나, 이를 제거하여 분비를 원활하게 함으로써 여드름을 치료하거나, 또는 벤조일 퍼옥사이드(benzoyl peroxide), 트리크로산(triclosan), 황(sulfur) 또는 티트리오일(tea tree oil) 제제를 사용하여 피부 각질을 제거하고 항균작용을 통한 염증을 완화시키는 방법이 사용되고 있다. 그러나 살리실산 제제는 치료 효과 가 미미할 뿐만 아니라 피부 발적, 부종 또는 피부 기피증 등을 일으킬 수 있고, 레티노익산 제제는 과각화 억제를 통한 효과는 있으나, 접촉성 피부염, 홍반, 피부건조 및 박리현상 등이 일어날 수 있다. 또한, 벤조일 퍼옥사이드나 트리크로산 제제는알레르기성 접촉 피부염 및 상처를 남기고, 심한 홍반이 생기는 등의 부작용이 있어 사용에 주의가 필요하다. 한편, 비교적 최근에 소개된 아젤라익산(azelaic acid) 제제의 경우 약물 부작용은 감소되었으나 기존 치료제 제품에 비하여 치료효과가 떨어진다.

따라서, 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 상기 문제점을 해결하여, 피부에 대한 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있을 뿐만 아니라, 5 알파-리덕타아제의 활성 억제에 의한 피지 분비량 조절이 가능하고, 항균 및 항염 작용이 우수하여 여드름 예방 및 치료에 효과가 탁월한 화장료를 제공하는데 있다.

상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에 따른 여드름 예방 및 치료용 화장료는 크립토탄시논을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따른 화장료에 있어서, 크립토탄시논의 함량은 화장료 총 중량을 기준으로 0.001 내지 10중량%인 것이 바람직하다.

본 발명에 따른 화장료에는 살리실산, 레티노익산, 레티노익산 유도체, 벤조일 퍼옥사이드와 같은 과각화 억제 물질을 더 함유할 수 있으며, 이러한 화장료는 스킨, 로션, 크림, 파운데이션, 에센스, 젤, 팩, 폼 클렌징, 비누와 같은 다양한 제형으로 제조할 수 있다.

이하, 본 발명에 따른 여드름 예방 및 치료용 화장료에 대하여 상세히 설명한다.

크립토탄시논(cryptotanshinone)은 탄시논류의 일종으로서 그 구조식은 다음과 같다.

<구조식 1>

이러한 크립토탄시논(cryptotanshinone)은 인위적인 합성방법 또는 식물로부터 추출하는 방법으로 얻을 수 있다. 합성하여 제조하는 방법은 실험실 규모 정도의 소량 합성이 가능하나 합성효율이 떨어지므로 식물로부터 추출하는 방법이 유리한데, 예를 들어 다년생 초본식물 단삼(Salvia militiorrhira Bge.)의 뿌리에서 추출하여 정제하므로써 크립토탄시논을 얻을 수 있다.

크립토탄시논은 후술하는 여러 가지 임상 실험 결과, 종래 여드름 치료제와는 달리 피부에 대한 자극이 거의 없을 뿐만 아니라, 5 알파-리덕타아제의 활성을 억제하여 피지 분비량을 낮추고 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)의 생장을 저해하며 염증을 완화시키므로써 여드름을 예방하고 치료하는데 큰 효과를 나타낸다. 따라서, 본 발명에 따라 크립토탄시논을 스킨, 로션, 크림, 파운데이션, 에센스, 젤과 같은 화장료에 첨가하면 기본적인 화장료 기능 외에 여드름의 예방 및 치료효과도 동시에 해결할 수 있다. 또한, 크립토탄시논은 팩, 폼 클렌징, 비누와 같은 세정이 필요한 제품 등에도 다양하게 적용될 수 있다. 특히,화장료에 살리실산, 레티노익산, 레티노익산 유도체, 벤조일 퍼옥사이드와 같은 과각화를 억제 또는 제거할 수 있는 물질을 첨가하면 보다 효과적으로 여드름을 예방, 치료할 수 있다.

본 발명의 여드름 예방 및 치료용 화장료에 있어서, 크립토탄시논의 함량은 화장료 총 중량을 기준으로0.001 내지 10중량%인 것이 바람직하다. 크립토탄시논의 함량이 0.001중량% 미만이면 기대했던 것에 비해 여드름 치료 효과가 저하될 수 있으며, 10중량%를 초과하는 경우에는 화장료의 배합이 용이하지 않을 수 있다. 이러한 측면에서, 0.001 내지 2중량%의 크립토탄시논을 첨가하는 것이 더욱 바람직하다.

이하, 본 발명을 구체적으로 설명하기 위해 실험예 및 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 아래에서 상술하는 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어져서는 안된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해서 제공되어지는 것이다.

크립토탄시논의 피지분비 억제효과

실험예 1

다음과 같이 크립토탄시논의 5 알파-리덕타아제 활성 억제에 대한 실험을 실시하여 피지분비 억제효과를 확인하였다.

인산등장완충액(Phosphate Buffered Saline, PBS / pH 6.6) 30㎕에, 디티오쓰레이톨(dithiothreitol), NADPH, 방사성 동위원소가 결합되어 있는 테스토스테론(3H-1,2,4,5,6,7-testosterone) 10㎕, 5 알파-리덕타아제 효소 추출액 40㎕ 및 0.001% 농도의 크립토탄시논 20㎕을 각각 혼합하였다. 이어서, 상온에서 10분간 반응시킨 후 HPLC와 방사선 동위원소 측정기를 혼합 사용하여 전환된 디하이드로테스토스테론의 양을 측정하여 하기 계산식에 따라 크립토탄시논의 5 알파-리덕타아제 효소에 대한 활성 저해율(inhibition rate(%))을 계산하였고 그 결과를 하기 표 1에 나타냈다.

저해율(%) = (크립토탄시논 미첨가 시료에서 테스토스테론의 디하이드로테스토스테론 전환율)×100/(크립토탄시논 첨가 시료에서 테스토스테론의 디하이드로테스토스테론 전환율)

실험예 2~4

크립토탄시논의 농도를 표 1에 기재된 바와 같이 변화시킨 것을 제외하고는 실험예 1과 동일한 방법으로 실험하였다.

	크립토탄시논 농도(%)	저해율(%)
실험예 1	0.001	19.1
실험예 2	0.01	36.0
실험예 3	0.1	45.9
실험예 4	1.0	100

상기 표 1에 나타난 바와 같이, 크립토탄시논은 5 알파-리덕타아제의 활성을 억제하는데 매우 효과적임을 알 수 있다.

크립토탄시논의 프로피오니박테리움 아크네스에 대한 항균력 평가

실험예 5

크립토탄시논의 프로피오니박테리움 아크네스(이하, 피. 아크네스라 함)에 대한 항균력을 측정하기 위하여 정균 상태로 냉장 보관중인 피.아크네스를 실험 시작 3일 전에 비에치아이(BHI, Brain Heart Infusion)고체 평판배지에 배양한 후, 실험 당일 크립토탄시논이 일정농도 포함된 비에치아이 고체 평판배지에 미리 배양된 피.아크네스를 접종하였다. 그런 다음, 3일이 지난 후의 피.아크네의 수를 측정하여 최소억제농도(MIC)를 구하여 표 2에 나타냈다.

대비예 1

크립토탄시논 대신 벤조일퍼옥사이드를 사용한 것을 제외하고는 실험예 5와 동일한 방법으로 실험하였다.

	시료	MIC(Mole)
실험예 5	크립토탄시논	100~500ppm
대비예 1	벤조일퍼옥사이드	500~1000ppm

상기 표 2를 참조하면, 크립토탄시논은 종래의 여드름 치료제제의 유효성분으로 사용되고 있는 벤조일퍼옥사이드보다 우수한 피.아크네스의 성장 저해 효과를 가지고 있음을 알 수 있다.

크립토탄시논의 항염 효과 평가

실험예 6

피.아크네스에 의해서 염증이 형성되면 여드름이 더욱 악화되는데, 크립토탄시논의 항염효과(anti-inflammation effect)에 대한 평가를 하여 크립토탄시논의여드름 완화 효과 여부를 확인하였다. 실험방법은 다음과 같이 아라키돈산(arachidonic acid)을 이용하는 평가법(A. Crummey, G. P. Harper, E. A. Boyle and F. R. Mangan. Inhibition of arachidonic acid-induced ear oedema as a model for assessing topical anti-inflammatory compound. Agents and Actions 1987;20:69-76)을 이용하였다.

마우스 양쪽 귀를 시료 적용 전 에탄올로 깨끗하게 세척한 후, 시료 도포군에는 0.3% 농도의 크립토탄시논 시료 20㎕를, 대조군에는 에탄올을 20㎕를 1일 1회 4일간 지속적으로 도포하였다. 마지막으로 도포하고 1시간이 경과한 후에 좌측 귀에는 에탄올을, 우측 귀에는 아라키돈산을 2㎎/ear 도포하였고, 도포 1시간 후 귀의 부종(ear edema)정도를 마이크로미터를 이용하여 양쪽 귀에 대하여 3회씩 반복 측정하였다. 처리군의 좌측 귀는 시료자체에 의한 염증 유발 정도를 알아보기 위한 대조군으로 이용하였다.

항염효과는 아라키돈산 처리 대조군을 기준으로 크립토탄시논 시료 도포군의 부종억제 정도로 판정하였으며 그 결과를 하기 표 3에 나타냈다. 각 처리군에 사용된 마우스 수는 각각 7마리씩이며, 측정치는 7마리에 대한 평균값이다.

대비예 2~3

크립토탄시논 시료 대신 각각 스테아릴 글리시레티네이트(Stearyl Glycyrrhetinate) 및 인도메타신(Indomethacin)을 사용한 것을 제외하고는 실험예 6과 동일한 방법으로 실험하였다.

처리군	시료	농도(%)	용매	귀두께(㎛)	억제율(%)
				시료처리 전		시료처리 후
대조군	아라키돈산	2mg/ear	에탄올	272	493	-
실험예 6	크립토탄시논	0.3	에탄올	271	437	24.8
대비예 2	스테아릴글리시레티네이트	0.3	에탄올	268	454	15.8
대비예 3	인도메타신	0.3	에탄올	273	391	46.6

※ 억제율(%) = (A―B) / A × 100

A : 대조군 귀의 평균두께 변화(아라키돈산 처리 귀의 두께-비처리 귀의 두께)

B : 시료 도포군 귀의 평균두께 변화(시료처리 귀의 두께-비처리 귀의 두께)

표 3에 나타난 바와 같이, 크립토탄시논 시료는 24.8%의 높은 염증 억제율을 보였는데, 이는 항염효과가 좋다고 알려진 대비예 2의 스테아릴 글리시레티네이트 (Stearyl Glycyrrhetinate)보다 높으며, 의약품 성분으로서 항염효과가 매우 우수한 물질인 대비예 3의 인도메타신(Indomethacin)의 대략 1/2 정도의 우수한 항염효과를 가지는 것으로 나타났다. 또한, 부종 증가율로 유의차 검증시, 크립토탄시논은 아라키돈산과 99%의 유의수준의 의미 있는 효과를 가졌다.

이와 같은 실험예들로부터 크립토탄시논이 5 알파-리덕타아제 활성 억제 효과, 피.아크네스에 대한 항균 효과 및 항염 효과가 뛰어남을 알 수 있다.

이하에서는 젤, 로션, 에센스, 크림 등의 화장료에 크립토탄시논을 첨가하여 생체 내(in vivo)에서의 피지분비 억제, 면포 완화 및 여드름 개선에 대한 효능을 평가하였다. 그 외 스킨, 파운데이션, 팩등에 대해서도 실험을 실시하여 유사한 효과를 얻었으나, 여기서는 생략한다.

실시예 1 및 비교예 1

하기 표 4에 기재한 바와 같은 성분과 함량으로 젤을 제조하였다.

원료명	실시예 1(중량%)	비교예 1(중량%)
글리세린	3.0	3.0
디프로필렌글리콜	5.0	5.0
카르복시비닐폴리머	0.2	0.2
에탄올	10.0	10.0
폴리옥시에틸렌경화피마자유	0.3	0.3
트리에탄올아민	0.2	0.2
크립토탄시논	0.1	-
방부제	q.s	q.s
향료	q.s	q.s
색소	q.s	q.s
정제수	to 100	to 100

실시예 2 및 비교예 2

하기 표 5에 기재한 바와 같은 성분과 함량으로 로션을 제조하였다.

원료명	실시예 2(중량%)	비교예 2(중량%)
콜레스테릴에스터	2.0	2.0
세토스테아릴알코올	0.8	0.8
스테아린산	1.0	1.0
스쿠알란	8.0	8.0
정제호호바유	4.0	4.0
옥틸도데칸올	2.0	2.0
폴리솔베이트	1.0	1.0
세스퀴올레인산소르비탄	0.5	0.5
글리세린	5.0	5.0
카르복시비닐폴리머	0.2	0.2
트리에탄올아민	0.3	0.3
크립토탄시논	0.5	-
방부제	q.s	q.s
향료	q.s	q.s
색소	q.s	q.s
정제수	to 100	to 100

실시예 3 및 비교예 3

하기 표 6에 기재한 바와 같은 성분과 함량으로 에센스를 제조하였다.

원료명	실시예 3(중량%)	비교예 3(중량%)
에탄올	6.0	6.0
글리세린	5.0	5.0
폴리아크릴산	0.2	0.2
1,3-부틸렌글리콜	10.0	10.0
하이드록시에틸셀룰로스	0.1	0.1
카르복시에틸렌셀룰로스	0.1	0.1
트리에탄올아민	0.2	0.2
에틸렌옥사이드	0.3	0.3
크립토탄시논	0.3	-
방부제	q.s	q.s
향료	q.s	q.s
색소	q.s	q.s
정제수	to 100	to 100

실시예 4 및 비교예 4

하기 표 7에 기재한 바와 같은 성분과 함량으로 크림을 제조하였다.

원료명	실시예 4(중량%)	비교예 4(중량%)
마이크로스탈린산	0.5	0.5
세토스테아릴알코올	3.0	3.0
스테아린산	2.0	2.0
스쿠알란	5.0	5.0
스테아린산글리세린	2.0	2.0
옥틸도데칸올	3.0	3.0
폴리솔베이트	1.5	1.5
세스퀴올레인산소르비탄	0.5	0.5
유동파라핀	8.0	8.0
옥틸도데실미리스테이트	4.0	4.0
글리세린	6.0	6.0
디프로필렌글리콜	5.0	5.0
크립토탄시논	0.5	-
방부제	q.s	q.s
향료	q.s	q.s
색소	q.s	q.s
정제수	to 100	to 100

인체피부에 대한 1차 자극시험(폐쇄 첩포시험)

상기 실시예에 따른 화장품이 인체에 유해한지 여부를 알아보기 위하여 하기와 같이 인체 첩포 시험(Human patch test)으로 인체 피부에 대한 1차 자극시험을 하였다.

건강한 성인 남녀 50명을 대상으로 CTFA 가이드라인(The Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association. Inc. Washington, D.C., 20036, 1991)에 따라 실시하였다. 핀 챔버(Finn Chamber)에 실시예 및 비교예에 따른 화장료 20㎕를 적하시킨 후, 시험 부위인 인체의 등에 얹어 테이프로 고정시켰다. 이어서, 24시간 동안 첩포한 후 첩포를 제거하고 다시 4시간이 경과한 다음, 시험 부위의 피부 반응을 다음 기준에 따라 육안으로 판독하여 그 결과를 하기 표 8에 나타냈다.

<판정 기준>

- : 홍반이나 특이한 현상 없음

+- ; 주위보다 약간 붉어짐

+ ; 주위보다 현저히 붉어짐

++ ; 주위보다 심하게 붉어지고 부풀어 오름

자극도 = [{(+-)수×1} + {(+)수×2} + {(++)수×3}]/피시험자 수

시료	피시험자 수	판정결과	자극도
		++	+	+-	-
실시예 1	50	0	0	1	49	0.02
비교예 1	50	0	0	3	47	0.06
실시예 2	50	0	0	1	49	0.02
비교예 2	50	0	0	2	48	0.04
실시예 3	50	0	0	0	50	0.00
비교예 3	50	0	0	1	49	0.02
실시예 4	50	0	0	0	50	0.00
비교예 4	50	0	0	2	48	0.04

상기 표 8에 나타난 바와 같이, 크립토탄시논이 포함된 실시예 1 내지 4의 화장료는 크립토탄시논이 포함되지 않은 비교예 1 내지 4의 화장료보다 오히려 자극도가 낮게 나타났다. 이는 전술한 항염효과 실험에서 나타난 바와 같이 크립토탄시논의 뛰어난 염증 완화 효과에서 기인된 것이라고 생각된다. 따라서 크립토탄시논은 화장품 제형에 적용시 피부에 대해 매우 안전한 물질임을 확인할 수 있었다.

피지분비 억제 평가 시험

피지분비 억제 효과를 평가하기 위해 무작위로 건강한 성인 남녀 40명을 선출하여 피지테이프(sebutape, CuDerm Corp., TX, USA)를 이용한 피지분비 억제 효과를 관찰하였다. 실험방법은 다음과 같다.

먼저, 실험에 사용될 부위인 이마 부위에서의 정상적인 피지분비 속도를 피지테이프를 이용하여 측정한 후, 실시예 1 내지 3 및 비교예 1 내지 3을 3주간 바른 다음 정상 피지분비 속도를 측정한 동일한 부위에서 피지테이프를 이용하여 피지분비 속도를 측정하였다. 피지테이프를 30분간 붙인 후 떼어내어 피지테이프에 분비된 피지의 양을 영상분석기를 이용하여 측정하였고, 피지분비 속도를 이용하여 판정하여 그 결과를 하기 표 9에 나타냈다. 피지분비 속도의 단위는 ㎍/㎠/min으로 단위시간 및 단위면적당 분비되는 피지의 양을 의미한다.

시료	피지분비 속도(㎍/㎠/min)	(비교예-실시예)/비교예×100
실시예 1	0.89	38.6%
비교예 1	1.45
실시예 2	0.82	40.6%
비교예 2	1.38
실시예 3	0.92	39.5%
비교예 3	1.52

상기 표 9를 참조하면, 본 발명에 따른 실시예 1 내지 3의 시료가 비교예 1 내지 3의 시료에 비하여 피지분비 속도 감소 효과가 우수함을 알 수 있다. 이에 따라 분비되는 피지 분비량 감소 효과도 더욱 우수해진다. 이는 전술한 실험예에 나타난 바와 같이, 크립토탄시논의 5 알파-리덕타아제 활성 억제에 그 원인이 있는 것으로 여겨진다.

토끼의 귀를 이용한 면포형성 억제효과 평가

여드름 효능 평가법으로 널리 알려져 있는 토끼 귀를 이용한 실험방법을 이용하여 면포형성 억제효과를 평가하였다(A.M.Kligman등, British Journal of Dermatology, 100, 699-702, 1979). 이 면포발생 실험은 사람에서의 여드름 형성과는 다소 다르지만 현재로서 면포를 생성시켜 여드름의 염증이 일어나기 전단계와 같은 양상을 만들어주는 가장 근접한 실험 방법이다.

먼저, 토끼 한쪽 귀에는 실시예 1 내지 3의 시료를, 다른 쪽 귀에는 비교예 1 내지 3의 시료를 각각 0.5㎖씩 도포한 뒤, 5시간 후 이소프로필미리스테이트 (Isopropyl myristate)를 0.5㎖씩 도포했다. 이 처리를 2주간 매일 반복한 후 하기 기준에 따라 '0', '0.5', '1', '1.5', '2', '2.5', '3'의 7단계로 구분하여 육안적 판정을 통하여 면포형성 억제효과를 평가하였고, 또한 토끼 귀에서 홀마운트(whole mount)를 제작하여 그 면포의 면적(㎟ 기준)을 영상분석기를 이용하여 측정하고 평가하여 그 결과를 하기 표 10 및 표 11에 각각 나타냈다. 실험예에 사용된 토끼의 수는 각각 7마리씩 사용하였다.

<육안적 판정 기준>

0 : 대조군과 차이가 없음

0.5 : '0'과 '1'의 중간 정도 증상

1 : 충혈, 모세관 출혈, 약한 모공각화증 및 모공비대증을 볼 수 있음

1.5 : '1'과 '2'의 중간정도 증상

2 : 중등도의 모공 각화증 및 모공 비대

2.5 : '2'와 '3'의 중간정도 증상

3 : 심한 모공 각화증 및 모공 비대, 전형적인 면포 관찰

시료	육안적 판정	(비교예-실시예)/비교예×100
실시예 1	1.52	39.4%
비교예 1	2.51
실시예 2	1.64	42.5%
비교예 2	2.85
실시예 3	1.66	40.5%
비교예 3	2.79

시료	면포면적 비교	(비교예-실시예)/비교예×100
실시예 1	1.340	36.4%
비교예 1	2.107
실시예 2	1.398	39.7%
비교예 2	2.318
실시예 3	1.438	37.5%
비교예 3	2.301

상기 결과를 참조하면, 육안적인 판정에서나 영상 분석기를 이용한 면포 면적의 비교에 있어서, 실시예 1 내지 3의 시료가 비교예 1 내지 비교예 3의 시료보다 면포형성 억제효과가 뛰어나 여드름 예방에 매우 효과가 있을 것이라 예상된다.

토끼의 귀를 이용한 면포 완화효과 평가

전술한 토끼 귀를 이용한 면포형성 억제효과 평가법을 이용하여 크립토탄시논의 면포 완화 효과 평가를 실시하였다.

먼저, 2주간 토끼 귀에 이소프로필미리스테이트(Isopropyl myristate)를 0.5㎖씩 도포하여 면포를 유발시킨 후, 한쪽 귀에는 실시예 1 내지 3의 시료를, 다른 쪽 귀에는 비교예 1 내지 3의 시료를 각각 0.5㎖씩 2주간 도포했다. 2주간 도포 후 하기 기준에 따라 '0', '0.5', '1', '1.5', '2', '2.5', '3'의 7단계로 구분하여 육안적 판정을 통하여 면포 완화효과를 평가하였고, 또한 토끼 귀에서 홀마운트(whole mount)를 제작하여 그 면포의 면적(㎟ 기준)을 영상분석기를 이용하여 측정하고 평가하여 그 결과를 하기 표 12 및 표 13에 각각 나타냈다. 실험예에 사용된 토끼의 수는 각각 7마리씩 사용하였다.

<육안적 판정 기준>

0 : 대조군과 차이가 없음

0.5 : '0'과 '1'의 중간 정도 증상

1 : 충혈, 모세관 출혈, 약한 모공각화증 및 모공비대증을 볼 수 있음

1.5 : '1'과 '2'의 중간정도 증상

2 : 중등도의 모공 각화증 및 모공 비대

2.5 : '2'와 '3'의 중간정도 증상

3 : 심한 모공 각화증 및 모공 비대, 전형적인 면포 관찰

시료	육안적 판정	(비교예-실시예)/비교예×100
실시예 1	1.05	39.7%
비교예 1	1.74
실시예 2	1.01	42.9%
비교예 2	1.77
실시예 3	1.08	40.3%
비교예 3	1.81

시료	면포면적 비교	(비교예-실시예)/비교예×100
실시예 1	1.053	36.9%
비교예 1	1.668
실시예 2	1.017	38.7%
비교예 2	1.658
실시예 3	1.067	37.4%
비교예 3	1.704

상기 결과를 참조하면, 육안적인 판정에서나 영상 분석기를 이용한 면포 면적의 비교에 있어서, 실시예 1 내지 3의 시료가 비교예 1 내지 비교예 3의 시료보다 면포 완화효과가 뛰어남을 알 수 있다.

상기 면포형성 억제 및 완화 효과는 전술한 실험예들에서 증명된 크립토탄시논의 피지분비 억제, 염증 완화 및 피. 아크네스에 대한 항균효과의 종합적인 결과로 여겨진다. 상기 토끼의 귀를 이용한 면포 형성 억제 및 완화 실험을 통해 본 발명에 따른 실시예1 내지 3의 시료는 여드름의 예방 및 완화에 현저한 효과가 있다는 것을 알 수 있었다. 이에 실제 임상에서 여드름 완화 효과가 있는지 알아보고자 다음과 같은 실험을 실시하였다.

여드름 완화효과 평가

본 발명에 따른 화장료의 여드름 완화 효과를 보고자, 여드름을 가지고 있는 20세에서 30세 사이의 건강한 성인 남녀 120명에 대하여 블라인드 테스트(blind test)를 실시하였다.

120명의 남녀를 무작위로 20명씩 여섯개의 군으로 나누고 동일한 용기에다 실시예 1 내지 3 및 비교예 1 내지 3의 시료를 담은 후, 각각의 그룹에 실시예 1 내지 3 및 비교예 1 내지 3을 1일 2회씩 2개월간 사용하도록 하였다. 평가는 2주간격으로 여드름 증상의 악화 및 완화 여부에 대한 피시험자의 설문 조사와 피부과 의사 2명의 육안적 소견을 종합하여 실시하였으며, 최종 2개월차에 평가를 완료하였다. 그 결과를 다음 표 14에 나타냈다.

시료	효과 있슴(명)	약간 효과 있슴(명)	모르겠다(명)	효과 없슴(명)
실시예 1	10/20	6/20	3/20	1/20
비교예 1	0/20	2/20	2/20	16/20
실시예 2	13/20	7/20	0/20	0/20
비교예 2	0/20	2/20	3/20	15/20
실시예 3	12/20	6/20	2/20	0/20
비교예 3	0/20	2/20	1/20	17/20

상기 표 14를 참조하면, 실시예 1 내지 3의 시료는 여드름 완화효과를 인정할 수 있는 '효과 있음' 및 '약간 효과 있음'이 80∼100%였으며, 크립토탄시논 유효성분이 전혀 없는 비교예 1 내지 3은 약10 %정도였다. 따라서, 본 발명에 따른 화장료가 뛰어난 여드름 완화효과를 보여주고 있음을 알 수 있다.

본 발명의 크립토탄시논을 함유하는 여드름 예방 및 치료용 화장료는 피부에 대한 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있을 뿐만 아니라, 5 알파-리덕타아제의 활성 억제에 의한 피지 분비량 조절, 항균 및 항염 작용이 뛰어나므로 여드름의 예방 및 치료에 매우 유용하다.

Claims (5)

1. 크립토탄시논을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 여드름 예방 및 치료용 화장료.
2. 제1항에 있어서, 상기 크립토탄시논의 함량은 화장료 총 중량을 기준으로 0.001 내지 10중량%인 것을 특징으로 하는 여드름 예방 및 치료용 화장료.
3. 제1항에 있어서, 과각화 억제 물질을 더 함유하는 것을 특징으로 하는 여드름 예방 및 치료용 화장료.
4. 제1항에 있어서, 상기 과각화 억제 물질은 살리실산, 레티노익산, 레티노익산 유도체 및 벤조일 퍼옥사이드로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 여드름 예방 및 치료용 화장료.
5. 제1항에 있어서, 상기 화장료가 스킨, 로션, 크림, 파운데이션, 에센스, 젤, 팩, 폼 클렌징 및 비누로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형으로 형성된 것을 특징으로 하는 여드름 예방 및 치료용 화장료.