KR20020029181A - 로로통 추출물, 백미 추출물에서 선택되는 1종 이상을유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 멜라닌 생성 억제 효과가 우수한 로로통 추출물, 백미 추출물에서 선택되는 1종 이상을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 로로통, 백미 추출물에서 선택되는 1종 이상을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 미백 효과 및 색소 침착 저해 효과를 보이며 피부내에서 어떤 부작용도 나타나지 않아 안전하고 기미나 주근깨 개선효과가 우수하다.

Description

로로통 추출물, 백미 추출물에서 선택되는 1종 이상을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물{Cosmetic composition containing Liquidambar taiwaniana Hance extracts and Cynanchum atratum Bunge extracts}
본 발명은 로로통 추출물, 백미 추출물에서 선택되는 1종 이상을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 본 발명은 멜라닌 생성 억제 효과가 우수한 로로통 추출물, 백미 추출물에서 선택되는 1종 이상을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
희고 고운 피부를 갖고자 하는 것은 모든 사람의 한결같은 소망이다. 사람의 피부색은 피부내 멜라닌(melanin)의 농도와 분포에 따라 유전적으로 결정되나, 태양 자외선이나 피로, 스트레스 등의 환경적 또는 생리적 조건에 의해서도 영향을 받는다. 멜라닌은 아미노산의 일종인 티로신(tyrosine)에 티로시나제(tyrosinase)라는 효소가 작용하여 도파(DOPA), 도파퀴논(dopaquinone)으로 바뀐 후 비효소적인 산화반응을 거쳐 만들어 진다. 그러나 멜라닌이 만들어지는 경로는 알려져 있으나, 티로시나제가 작용하는 이전 단계인 멜라닌 합성을 유도하는 메카니즘(mechanism)이 무엇인지에 대해서는 아직도 자세히 밝혀지지 않고 있다. 한편 멜라닌 색소의합성을 저해함으로서 피부 톤을 밝게하여 피부 미백을 실현할 수 있을뿐만 아니라 자외선, 호르몬, 유전에 기인한 기미, 자외선, 유전에 기인한 주근깨 등의 피부 과색소 침착증의 개선이 가능하다. 이에 종래에는 하이드로퀴논(hydroquinone)이나 아스콜빈산(ascorbic acid), 고지산(kojic acid), 글루타치온(glutathione)같은 티로시나제에 저해 활성을 갖는 물질을 연고나 화장료에 배합하여, 피부 미백이나 기미, 주근깨 개선의 목적에 사용하여 왔으나, 하이드로퀴논의 미백효과는 인정되지만 피부자극성이 심하여 사용량이 극히 제한된다. 또한 아스콜빈산은 산화되기 쉬워 이를 배합한 화장료는 변색, 변취되는 등의 문제를 야기하며 글루타치온, 시스테인 등의 티올계 화합물은 특유의 불쾌한 냄새가 나며 경피흡수에 문제가있다. 또한 이들의 배당체 및 유도체들은 극성이 높아 화장료의 배합 성분으로 사용하기에는 문제가 있다. 또한 태반 추출물 등은 미백 효과가 불충분하다는 문제가 있다.
로로통은 금루매과의 식물인 풍향 Liquidambar taiwaniana Hance의 열매로 맛은 씁쓸하고 떫으며 성은 평하며 독이 없다. 로로통는 거풍통락하고 이수제습하는 효능이 있으며 손발경련, 위통, 수종, 무월경, 악창, 옴, 습진을 치료하는데 사용하였다.(중약대사전) 로로통 추출물을 포함하는 보습용 화장료 조성물에 대한 연구가 있으나(JP08268837) 본 발명과는 무관하다.
백미는 박주가리과에 속하는 다년생 초본으로 라틴명은 Radix Cynanchi Atrati이고 학명은 Cynanchum atratum Bunge. 로서 맛은 짜고 성질은 한하며 독이없다. 또한 백미는 열을 내리고 혈을 식히는 효능이 있으며 해열, 이뇨, 소종 풍습통 등을 치료한다(중약대사전, 원색약물대사전) 로로통의 성분연구에 의하면Atratogenin A, B, (Zhongguo Zhongyao Zazhi (1989), 14(3), 138-42), 및 Glaucogenin A, C, H 및 Cynatratoside F(I)이 분리 보고 된바 있다(Chem. Pharm. Bull. (1985), 33(10), 4188-92)
따라서, 본 발명자들은 멜라닌 합성 유도 자체를 억제하는 물질까지 스크리닝(screening)할 수 있는 쥐의 멜라노마 세포(B16 mouse melanoma cell)를 이용하여 천연에서 자생하는 동식물들을 대상으로 새로운 미백제를 개발하고자, 연구를 거듭한 결과, 로로통 추출물, 백미 추출물에 매우 강력한 멜라닌 생성 억제 효과와 미백 효과가 있음을 밝혀내어 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명은 약재로 구입할 수 있는 로로통, 백미를 탄소수 1-4개의 무수 또는 함수 저급알코올 또는 에틸아세테이트 또는 아세톤 등의 유기용매로 1차 추출한 후 감압 농축한 다음 동결건조하거나 분무건조하여 1차 추출물을 제조하였다. 이러한 방법으로 제조된 로로통, 백미 추출물은 쥐의 멜라노마 세포(B-16 mouse melanoma cell)에서 매우 강력한 멜라닌 합성 저해 효과를 나타낸다. 또한 건조된 로로통, 백미추출물로 피부외용 연고나 화장료를 제조하여 사람의 피부에 도포하였을 때, 피부 미백 효과가 매우 우수하다.
본 발명을 상세하게 설명하면 다음과 같다.
생약재로 시판되는 로로통, 백미를 구입하여 잘게 분쇄하고 분쇄물 건조 중량에 대하여 5-20부피의 물이나, 탄소수 1-4개의 무수 또는 함수 저급알코올, 에틸아세테이트 또는 아세톤으로 환류 냉각기가 달린 추출기에서 50-100oC로 1-5시간 가열하여 추출한다. 여과포로 여과한 후 잔사를 같은 방법으로 1회이상씩 더 추출한다. 추출액을 합하여 감압농축한 후 동결건조나 분무 건조하여 건조추출물을 얻는다.
건조된 로로통, 백미 추출물을 쥐의 멜라노마 세포(B-16 melanoma cell)에 처리하였을 때, 매우 강력한 멜라닌 합성 저해효과를 나타내었다.
상기와 같이 얻어진 로로통, 백미 추출물을 함유하는 피부외용연고나 로션같은 여러 화장료를 제조한다. 로로통, 백미 추출물을 함유한 피부 외용연고나 로션 등의 화장료를 제조하여 사람의 피부에 도포하였을 때 피부 미백 효과가 매우 우수하였다. 또한 어떤 부작용도 발생하지 않아 로로통, 백미 추출물이 안전하고 효과가 매우 뛰어난 기미나 주근깨 개선 및 피부 미백제임을 알 수 있다.
피부외용연고나 화장료 제조시에 함유되는 로로통, 백미 추출물의 함량은 건조 중량으로 0.0001-10.0중량%, 바람직하게는 0.0005-10.0중량%가 적당하다. 0.0001중량%이하의 농도에서는 뚜렷한 효과를 기대할 수 없었고, 10중량%이상의 농도에서는 함유량의 증가에 따라 뚜렷한 효과의 증가가 나타나지 않았다.
다음으로 실시예에 의거하여 본 발명을 자세히 설명하고자 하며, 본 발명이 실시예에만 한정되는 것이 아님을 밝혀둔다.
실시예 1-12
시판되는 로로통, 백미를 구입하여 분쇄한 분쇄물 100g을 물이나, 탄소수 1-4개의 무수 또는 함수 저급알코올, 에틸아세테이트 또는 아세톤등의 용매 3L에 넣고, 냉각콘덴서가 달린 환류 추출기에서 3시간 끓여 추출한 다음, 100메쉬 여과포로 여과한 후 잔사를 같은 방법으로 1회 더 추출하였다. 각각의 추출액을 합하여 상온에서 화트만(Whatman) 2번 여과지로 여과하여 불용성물질을 제거한 후, 냉각 콘덴서가 달린 증류장치에서 60oC로 감압농축한 후 동결건조하여 표1과 같이 각각의 건조 중량을 얻었다.
추출용매 및 추출물의 건조중량
로로통 백미
80%메탄올 7.5g(실시예1) 9.8g(실시예7)
정제수 6.8g(실시예2) 8.2g(실시예8)
85%에탄올 8.0g(실시예3) 9.3g(실시예9)
70%아세톤 6.9g(실시예4) 7.3g(실시예10)
에칠아세테이트 6.3g(실시예5) 7.2g(실시예11)
포화노말부탄올 7.7g(실시예6) 8.6g(실시예12)
실험예 1
상기 실시예 1-12에 따라 얻어진 각 추출물들을 쥐의 멜라노마 세포(B-16 mouse melanoma cell)의 배양액에 첨가하여 세포수준에서의 미백 효과를 실험하였다.(Lotan R., Lotan D. Cancer Res. 40:3345-3350, 1980). 실시예 1-12에 따라 얻어진 각 추출물들을 최종농도가 0.005 %가 되도록 하여 하이드로퀴논 수용액과 함께 각각 B-16멜라노마 세포의 배양배지에 첨가하여 3일간 배양한 후 세포들을 트립신(trypsin)처리하여 배양용기로 부터 떼어내 원심분리한 후 멜라닌을 추출하였다. 이것에 수산화 나트륨 용액(1N농도) 1ml를 가하여 10분간 끓여 멜라닌을 녹이고 분광 광도계를 이용, 400나노미터(nm)에서 흡광도를 측정하여 생성된 멜라닌의 양을 단위 세포수당(106cell)의 흡광도로 나타내는 방법으로 수행하였으며, 대조군에 대한 상대적인 멜라닌 생성량을 저해율(%)로 계산하고 결과를 표 2에 정리하였다.
하기 표 2의 결과에서 볼 수 있듯이, 실시예 1-12에 따라 얻어진 각 시료들은 전혀 정제되지 않은 추출물임을 감안하면 기존에 알려진 미백물질인 하이드로퀴논과 비교할 때 배양된 쥐의 멜라노마 세포에 대하여 매우 강력한 멜라닌 생성 억제능이 있음을 알 수 있다.
로로통, 백미 추출물의 세포수준에서의 멜라닌 생성 저해효과
시료 멜라닌 생성 저해율(%)
대조군(무첨가) 0.048±0.003 -
실시예 1(최종농도 0.005%) 0.030±0.003 38%
실시예 2(최종농도 0.005%) 0.033±0.003 31%
실시예 3(최종농도 0.005%) 0.028±0.002 42%
실시예 4(최종농도 0.005%) 0.026±0.002 46%
실시예 5(최종농도 0.005%) 0.023±0.003 53%
실시예 6(최종농도 0.005%) 0.030±0.003 38%
실시예 7(최종농도 0.005%) 0.034±0.004 29%
실시예 8(최종농도 0.005%) 0.036±0.002 25%
실시예 9(최종농도 0.005%) 0.033±0.002 31%
실시예10(최종농도 0.005%) 0.027±0.002 44%
실시예11(최종농도 0.005%) 0.025±0.002 48%
실시예12(최종농도 0.005%) 0.022±0.002 54%
하이드로퀴논(최종농도0.0001% ) 0.025±0.002 48%
* 반복수 = 3
실험예 2
실험예 1과 같은 방법으로 배양된 쥐의 멜라노마 세포에 대하여 실시예1, 7의 추출물에 대하여 농도에 따른 멜라닌 생성 억제능을 조사하였으며 결과는 표 3과 같다.
농도에 따른 세포수준에서의 멜라닌 생성 저해효과
시료 적용농도(%) 멜라닌생성량 저해율(%)
대조군(무첨가) - 0.048±0.004 -
실시예 1 최종농도(0.0005 %) 0.040±0.002 17%
최종농도(0.005%) 0.030±0.003 38%
최종농도(0.05 %) 0.026±0.002 46%
최종농도(0.5%) 0.022±0.001 54%
실시예 7 최종농도(0.0005 %) 0.041±0.002 7%
최종농도(0.005%) 0.034±0.004 29%
최종농도(0.05 %) 0.028±0.002 42%
최종농도(0.5%) 0.022±0.001 54%
하이드로퀴논 (0.0001%) 0.025±0.002 48%
●반복수=3
상기 표 3의 결과에서 볼 수 있듯이, 로로통, 백미 추출물은 배양된 쥐의 멜라노마 세포에 대하여 매우 강력한 멜라닌 생성 억제능을 가지고 있음을 알 수 있다. 하이드로퀴논은 저농도에서 강력한 멜라닌 생성 억제능을 가지지만 세포 독성이 심해 0.0001%이상에서는 실험을 할 수 없는 것에 반하여, 본 발명에서의 추출물들은 0.05%농도 이상에서도 세포독성을 나타내지 않으면서 사용가능한 최대량의 하이드로퀴논보다 높은 멜라닌 생성 억제 효과를 갖는다. 또한 로로통, 백미 추출물이 단일물질이 아니고 혼합물질이라는 것을 고려할 때 매우 높은 멜라닌 생성 억제능을 가지고 있으므로, 기미나 주근깨 개선 또는 피부미백에 매우 유용하게 사용될 수 있다.
이하, 로로통, 백미 추출물을 함유하는 화장료의 처방예를 제조예에 의해 나타내었다.
제조예 1-2 및 비교예 1
로로통, 백미 추출물을 함유하는 피부 외용연고 처방예는 다음과 같다.
여기서, 로로통, 백미 추출물은 각각 실시예 5, 11의 것을 말한다.
조성물 제조예(중량%) 비교예
1 2 1
-추 출 물로로통 추출물백미 추출물-디에틸 세바케이트-경납-폴리옥시에틸렌올레일에테르포스페이트-벤조산 나트륨-바셀린 10-856적량to 100 -10856적량to 100 --856적량to 100
제조예 3-4및 비교예 2
로로통, 백미 추출물을 함유하는 화장료 중 크림의 처방예는 다음과 같다. 여기서 로로통, 백미 추출물은 각각 실시예 5, 11의 것을 말한다.
조성물 제조예(중량%) 비교예
3 4 2
-추 출 물로로통 추출물백미 추출물- 스테아린산-세탄올-수산화칼륨-글리세린-프로필렌글리콜-방부제-향-정제수 1.0-15.01.00.75.03.0적량적량to 100 -1.015.01.00.75.03.0적량적량to 100 --15.01.00.75.03.0적량적량to 100
제조예 5-6 및 비교예 3
로로통, 백미 추출물을 함유하는 화장료 중 유연화장수의 처방예는 다음과같다. 여기서 로로통, 백미 추출물은 각각 실시예 5, 11의 것을 말한다.
조성물 제조예(중량%) 비교예
5 6 2
-추 출 물로로통 추출물백미 추출물- 에탄올-폴리라우린산폴리옥시에틸렌소르비탄-파라옥시안식향산메칠-글리세린-1,3-부틸렌글리콜-향-색소-정제수 0.2-10.01.00.25.06.0적량적량to 100 -0.210.01.00.25.06.0적량적량to 100 --10.01.00.25.06.0적량적량to 100
제조예 7-8 및 비교예 4
로로통, 백미 추출물 함유하는 화장료 중 영양화장수의 처방예는 다음과 같다. 여기서 로로통, 백미 추출물은 각각 실시예 5, 11의 것을 말한다.
조성물 제조예(중량%) 비교예
7 8 4
-추 출 물로로통 추출물백미 추출물-바셀린-세스퀴올레인산소르비탄-폴리옥시에틸렌올레일에틸-파라옥시안식향산메칠-프로필렌글리콜-에탄올-카르복시비닐폴리머-수산환칼륨-색소-향-정제수 0.1-2.00.81.2적량5.03.218.00.1적량적량to 100 -0.12.00.81.2적량5.03.218.00.1적량적량to 100 --2.00.81.2적량5.03.218.00.1적량적량to 100
제조예 9-10 및 비교예 5
로로통, 백미 추출물을 함유하는 화장료 중 팩의 처방예는 다음과 같다. 여기서 로로통, 백미 추출물은 각각 실시예 5, 11의 것을 말한다.
조성물 제조예(중량%) 비교예
9 10 5
-추 출 물로로통 추출물백미 추출물- 글리세린-프로필렌글리콜-폴리비닐알코올-에탄올-폴리옥시에틸렌올레일에칠-파라옥시안식향산메칠-향-색소-정제수 0.5-5.04.015.08.01.00.2적량적량to 100 -0.55.04.015.08.01.00.2적량적량to 100 --5.04.015.08.01.00.2적량적량to 100
제조예 11-12 및 비교예 6
로로통, 백미 추출물을 함유하는 화장료 중 에셋스의 처방예는 다음과 같다. 여기서 로로통, 백미 추출물은 각각 실시예 5, 11의 것을 말한다.
조성물 제조예(중량%) 비교예
11 12 6
-추 출 물로로통 추출물백미 추출물-프로필렌글리콜-글리세린-히아루론산나트륨수용액(1%)-에탄올-폴리옥시에틸렌경화피마자유-파라옥시안식향산메칠-향-정제수 5-10.010.05.05.01.00.1적량to 100 -510.010.05.05.01.00.1적량to 100 --10.010.05.05.01.00.1적량to 100
실험예 3
건강한 남여 20명씩을 선정하여 양팔의 하박부에 직경 7mm크기의 구멍이 6개씩 2줄로 파인 알루미늄 호일을 붙이고, 팔에서 10cm 떨어진 거리에서 ORIEL solar simulator 1000W를 사용하여 60mJ/cm2의 광량을 조사하였다. 조사전에 70% 에탄올 수용액으로 조사부위를 잘 세척하였다. 조사하기 3일전부터 조사 후 3주째까지 1일 2회씩 제조예 1-12및 비교예 1-6에 따라 제조된 로로통, 백미 추출물을 함유한 시료와 각각의 추출물이 함유되지 않은 기제를 한 쌍으로 같은 줄에 도포하였다.(제조예 9, 10, 및 비교예 5의 팩 처방의 경우 도포한 다음 15분 후에 떼어내었다.) 각각에 대하여 제조예와 비교예의 색소침착도를 육안으로 판정하고, 제조예가 비교예에 비해 색소침착을 억제한 정도를 뚜렷한 효과, 효과있음, 차이없음의 3단계로 평가하였으며, 그 결과는 표 4과 같다.
로로통, 백미 추출물을 함유한 연고 및 화장료의 색소 침착 저해 효과
실험물질 뚜렷한 효과(명) 효과있음(명) 차이없음(명)
제조예 1 4 8 8
제조예 2 4 9 7
제조예 3 3 8 9
제조예 4 3 7 10
제조예 5 2 9 8
제조예 6 2 8 10
제조예 7 2 8 10
제조예 8 2 9 9
제조예 9 2 10 8
제조예 10 3 8 9
제조예 11 3 8 9
제조예 12 3 9 8
상기 표 4의 결과에서 볼 수 있듯이, 제조예 1-12에 따라 제조된 로로통, 백미 추출물이 함유된 미백연고 및 화장료는 피시험자 20명 중에서 최소 10명 이상에 대하여 미백 효과를 나타내었으며, 특히 많은 양의 로로통, 백미 추출물이 적용된제조예 1, 2와 비교예1의 비교 실험에서는 60%가 색소 침착 저해 효과를 보이고, 피부내에서 어떤 부작용도 나타나지 않아, 로로통, 백미 추출물이 안전하고 효과가 매우 뛰어난 기미나 주근깨 개선 또는 피부미백용 화장료 임을 알 수 있다.
이상 설명하고 실시예와 비교예를 통하여 알 수 있는 바와 같이, 본 발명의 로로통, 백미 추출물에서 선택되는 1종 이상을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 미백 효과 및 색소 침착 저해 효과를 보이며 피부내에서 어떤 부작용도 나타나지 않아 안전하고 기미나 주근깨 개선효과가 우수하다.

Claims (3)

  1. 로로통 추출물, 백미 추출물에서 선택되는 1종 이상을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 기미, 주근깨 개선 및 피부 미백효과를 나타내는 화장료 조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 로로통 추출물, 백미 추출물을 건조 중량으로 0.0001-10.0중량% 함유하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  3. 제 1항에 있어서, 로로통 추출물, 백미 추출물은 물, 탄소수 1-4의 저급 알코올, 에틸아세테이트 또는 아세톤으로 1회 이상 추출하고, 추출액을 감압증류한 후 동결건조하거나 분사건조하여 얻은 추출물임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
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