상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에 따른 조성물은 사상자, 백자인 및 상표초로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 함유하는 것을 특징으로 한다.
이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.
본 발명에서 사용된 사상자, 백자인 및 상표초에 관한 일반적인 성상, 응용 및 확인 시험법은 다음과 같다.
사상자(Torilis Fructus)는 Torilis japonica Decanodolle(미나리과)의 과실로 타원형의 상현과로서 각 분과는 편평하고 길이 2~4㎜, 지름 1㎜이다. 분과의 바깥면은 회황색~회갈색으로 끝부분에 작은 돌기가 있고, 밑부분에는 가는 과병이 붙어있다. 등쪽면은 3개의 늑선이 있고 봉합면은 평탄하나 2개의 갈색 늑선이 있다. 사상자는 향기가 있고 맛은 조금 맵고 혀를 자극한다(대한약전외 한약 규격집). 남자의 음위. 습양, 부인음종, 관절통, 자궁냉증 등의 치료에 사용된다(동양학 개론).
백자인(Thujae semen)은 측백나무(Thuja orientalis)의 종자로 난원형~긴 타원형이거나 또는 긴 원주형이고 길이 3~5㎜, 지름 2~3㎜이다. 바깥면은 엷은 황색~황백색이고, 오래된 것은 점차 변하여 황갈색이 되며 기름이 스며 나온다. 종자의 바깥면은 흔히 얇은 막질의 내종피로 싸여있고, 끝은 대개 뾰족하며, 원삼 능형으로 진한 갈색의 점이 있다. 아래쪽은 둔한 원형으로 색이 엷다. 이약의 횡단면을 현미경으로 살펴보면 백색~황백색이고 배유가 많으며 풍부한 지방질이 함유되어 있다(대한약전외 한약 규격집). 달고 평하며 독이 없고 향기롭다. 작용은 심비를 보하고 정신을 편안하게 하며 피를 돕고 땀을 멎게한다. 간장과 신장을 윤택하게 하며, 허리가 무겁고 아픈 것을 치료한다. 백자인은 양심안신(養心安神), 윤장통편(潤腸通便)의 효능이 있다(동양학 개론).
상표초(Mantidid ootheca)는 당랑소, 단표초라기도 하며, 사마귀과의 Mantidae의 알이 들어 있는 벌레집을 찐 것이다. 이 생약은 원주형~반원형으로 여러 개의 막으로 된 엷은 층이 쌓여 배열되어 있고, 길이 24~45㎜, 너비 2~3㎝, 두께 15~20㎜이다. 바깥면은 엷은 갈색~황갈색이고, 위쪽면은 액간 융기되어 있으며, 아래면은 평탄하거나 식물의 줄기에 붙었던 자국이 있다. 성질은 달고 짜며 평하고 독이 없다. 양위 유정, 조설, 유노실금, 월경 폐지증에 사용한다.(대한약전외 한약 규격집, 동약학 개론;서경 출판사).
본 발명은 상기한 효능이 있는 사상자, 백자인 및 상표초의 추출물을 유효성분으로 하여 피부에서의 피지의 분비를 억제할 수 있는 조성물을 제공한다.
본 발명에서 사용된 사상자, 백자인 및 상표초의 추출물은 생약재로부터 침출, 전출 또는 침출액을 다시 일부 또는 전부 농축하고, 혹은 다시 그 농축물을 건조하여 제조한 침제, 전제, 정기, 유동 엑기스 등(이하 추출 엑기스라 함)과, 생약재중에 함유되고 주 효과를 발휘하는 화학 물질 그 자체도 포함한다.
본 발명의 생약재 추출물의 추출방법은 생약재를 저급 알코올, 헥산, 에틸아세테이트 또는 디에틸에테르로 추출하거나, 무수 또는 함수 에탄올 또는 메탄올 추출물 중 헥산, 에틸아세테이트, 물층의 분획을 추출한 것이다. 좀더 상세히 설명하면 다음과 같다. 시판되고 있는 사상자, 백자인 및 상표초를 구입하여 잘게 분쇄하고, 분쇄물 건조중량에 대하여 에탄올, 메탄올 등의 유기용매를 단독으로 3~5배의 용량으로 가한 뒤, 냉각콘덴서가 장치된 추출기에서 50~100℃의 온도로 1~10시간 동안 가열하여 추출하거나, 생약재를 상기 용매에 0~40℃의 온도에서 1~30일간 침적하여 유효성분을 추출할 수 있다. 이렇게 추출한 3종의 생약 추출물은 감압 증발기를 사용하여 완전히 건조시켜 건조분말로 만들어 사용하였다.
이들을 사용하여 피지의 과다 분비의 원인인 활성남성호르몬의 생성을 억제하기 위하여 그 생성에 직접적으로 관여하는 효소인 5-알파-리덕타아제의 활성 억제력, 지질합성(Lipogenesis) 억제력 및 토끼를 이용한 면포감소 시험을 실시한 결과, 이들 생약재 추출물은 5-알파-리덕타아제의 활성 및 지질의 합성을 억제할 수 있고, 면포를 감소시킬 수 있다는 것을 발견하였다.
따라서, 이러한 효능을 갖는 사상자, 백자인 및 상표초로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 함유하는 조성물은 피지의 과다 분비가 억제되므로, 피지의 과다 분비로 인하여 발생하는 질환, 예를 들면, 여드름, 지루성 피부염, 남성형 탈모, 지루성 피부염에 의한 비듬, 여드름에 의해 모공확대 등이 예방 또는 치료될 수 있다.
본 발명의 조성물은 조성물 총 중량에 대하여, 사상자, 백자인 및 상표초로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 0.001~10중량%의 양으로 함유하는 것이 바람직하다. 이는 0.001중량% 미만으로 사용하는 경우 피지분비 억제 효과가 없으며, 10중량%를 초과하여 사용하는 경우에는 피부에 자극을 유발할 수 있기 때문이다.
본 발명의 조성물은 피부에 적용할 수 있는 통상적인 제형으로 제형화될 수 있으며, 예를 들면 화장수, 크림, 로션, 스킨로션, 팩, 파운데이션 등과 같은 화장품 뿐만 아니라 액상비누, 고형비누, 세안 폼(foam)과 같은 인체세정제 등으로 제형화될 수 있다. 이들 각 제형은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다.
이하 실시예 및 시험예를 들어 본 발명을 상세히 설명하지만, 본 발명이 이들예로만 한정되는 것은 아니다.
[실시예 1] 사상자 추출물의 제조
사상자 100g에 70% 메탄올을 150㎖를 가하고 냉각 콘텐서가 달려있는 추출기에서 2시간 가량 끓여서 추출한 후 여과하여 찌꺼기를 제거하고 사상자 추출액을 만들었다. 이 추출물을 냉각콘덴서가 달린 증류장치를 이용하여 60℃에서 감압 농축하여 건조잔량을 2g 얻었다.
[실시예 2] 백자인 추출물 제조
백자인 100g에 비극성 용매인 헥산 200㎖를 가하고 냉각 콘텐서가 달려있는 추출기에서 2시간 가량 끓여서 추출한 후 여과하여 찌꺼기를 제거하고 백자인 추출액을 만들었다. 이 추출물을 냉각콘덴서가 달린 증류장치를 이용하여 60℃에서 감압 농축하여 건조잔량을 5g 얻었다.
[실시예 3] 상표초 추출물의 제조
상표초 100g에 에틸아세테이트 200㎖를 가하고 냉각콘텐서가 달려있는 추출기에서 2시간 가량 끓여서 추출한 후 여과하여 찌꺼기를 제거하고 상표초 추출액을 만들었다. 이 추출물을 냉각콘덴서가 달린 증류장치를 이용하여 60℃에서 감압 농축하여 건조잔량을 8g 얻었다.
[시험예 1] 5-알파-리덕타제 활성 억제 효과
성숙한 Sprogue-Dawley 웅성랫트(생후 7-8주)를 디에틸에테르로 치사시킨 후, 복부 전립선을 떼내어 결합조직을 제거하고, 완충액(0.32M sucrose, 0.1mM dithiothreitol, 20mM sodium acetate)을 첨가하여 잘게 자른 다음, 분쇄기로 현탁화하였다. 현탁액은 원심 분리하여 상층액을 취해 5-알파-리덕타제를 부분정제하여, 이 효소의 활성도 억제 실험을 수행하였다.
위에서 얻은 상층액의 일부를 취하여 0.2M 일염기산과 0.2M 이염기산이 들어 있는 완충액에 넣은 후, 동위원소인3H가 붙어있는 기질(테스토스테론)과 함께 반응시켜 생성물인 다이하이드로테스토스테론의 생성량을 측정하였다.
반응용액은 1mM 디티오트레이톨, 40mM 나트륨 포스페이트(pH 6.5), 50μM NADPH, [1,2,6,7-3H] 테스토스테론/테스토스테론(2.2×109몰), 효소 현탁액(0.8㎎) 단백질을 565㎕ 포함되게 하였다.
시료 일정량을 10% 에탄올에 녹여 한 반응당 100㎍/10% 에탄올 10㎕ 상태로 가하고, 대조 실험으로는 같은 부피의 용매, 양성 대조 실험으로는 리보플라빈을 이용하였다.
반응은 효소 현탁액을 부가함과 함께 시작하여 37℃에서 30분간 진행시킨후, 1㎖의 에틸아세테이트를 가하여 추출하였으며, 100㎕의 에틸아세테이트상을 실리카 플라스틱 시트 카이젤겔 60 에프 254(Silica plastic sheet kieselgel 60 F254)상에서, 전개용매계는 아세테이트-사이클로 헥산(1:1)으로 하여 전개하였다.
플라스틱 시트를 공기 건조한 후, 동위원소의 양을 측정하기 위해 바스 시스템을 사용하였는데, 건조된 플라스틱 시트와 엑스레이 필름을 함께 바스 카셋트에 넣어 1주일 후에 필름에 남아있는 테스토스테론과 디하이드로테스토스테론의 동위원소양을 측정하였다.
각각의 저해율에 대한 결과는 표 1에 나타내었다. 한편, 하기 표 1에서 시료에서 각 실시예들의 혼합비율은 1:1이다.
시료 |
T(dpm) |
DHT(dpm) |
전환율(%) |
저해율(%) |
실시예 1 |
7730 |
2355 |
23.4 |
44 |
실시예 2 |
9330 |
2721 |
22.6 |
46 |
실시예 3 |
6878 |
2100 |
23.4 |
44 |
실시예 1+실시예 2 |
6850 |
1220 |
15.1 |
64 |
실시예 1+실시예 3 |
7350 |
1400 |
16.0 |
62 |
실시예 2+실시예 3 |
7255 |
1117 |
13.3 |
68 |
실시예 1+실시예 2+실시예 3 |
9412 |
1133 |
10.7 |
74.5 |
대조군 |
7530 |
5546 |
42 |
- |
양성 대조군 |
6300 |
2533 |
28.7 |
31.6 |
(1) T : 테스토스테론 영역에서 나타난3H 레디오 엑티버티(2) DHT: 디하이드로테스토스테론 영역에서 나타난3H 레디오 엑티버티(3) 전환율: DHT 영역의 레디오 엑티버티/토탈 레디오 엑티버티(4) 저해율: 100×(대조군의 전환율- 시료의 전환율)/대조군의 전환율 |
상기 표 1로부터, 사상자, 백자인 및 상표초로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물은 5-알파 리덕테이즈 억제 효과가 있음을 알 수 있다.
[시험예 2] 지질합성(lipogenesis) 억제효과
지질 합성에 필요한 탄소 원소의 소비(uptake) 정도를 정량하여 지질합성 저해 정도를 평가하는 방법으로 피지선에서의 지질합성 정도를 평가하였다.
즉, 피지선이 많은 햄스터 귀 조직을 생검(biopsy)하여 C14이 라벨된 배지에서 6시간 동안 방사능 측정기로 대조군과 시료군을 비교 정량하여 저해 정도를 평가하였다. 시료군으로는 햄스터 오른쪽 귀 조직을 이용 배지에 시료 용액 0.01%를 가하여 사용하였고, 대조군으로는 햄스터 왼쪽 귀 조직을 이용 배지에 생리 식염수 0.01%를 가하여 사용하였다. 그 결과는 표 2와 같다.
한편, 표 2에서 저해율은 하기 수학식 1에 따라 계산한 것이고, 그 값은 4 마리의 햄스터에 대한 평균값이다.
시료 |
저해율(%) |
실시예 1 |
55 |
실시예 2 |
43 |
실시예 3 |
47 |
실시예 1+실시예 2 |
58 |
실시예 1+실시예 3 |
66 |
실시예 2+실시예 3 |
75 |
양성 대조군(레티노인산) |
52 |
상기 표 2로부터, 사상자, 백자인 및 상표초 추출물이 지질 생합성 억제 효과가 있음을 알 수 있고, 각각에 있어서보다는 혼합물로 사용시 효과가 증가됨을 알 수 있다.
이러한 결과들은 남성 호르몬 억제 시험인 시험예 1의 결과와 비슷한 양상을보였다.
[시험예 3] 면포 감소 효과
면포감소효과를 확인하기 위하여 본 발명에 사용된 생약재인 사상자, 백자인 및 상표초 추출물의 건조분말(실시예 1~3)을 1,3-부틸렌글리콜에 용해시켜 1% 용액이 되도록 한 후, 토끼 임상실험용 시험물질로 사용하였다.
흰 토끼의 귀에 면포 유발 물질인 50% 올레인산/파라핀오일 0.2㎖를 오전에 도포하여 면봉으로 문질러 준다. 하루 두 번 오전(50% 올레인산/파라핀오일), 오후(물질)에 도포하며 총 실험 기간인 한달 동안 도포한다. 면포는 약 10일 전후부터 발생되는데, 물질을 0.2㎖씩 오후에 도포해준 결과 2주후부터는 점차적으로 면포의 수 및 크기가 감소하였다.
각 조직을 바이옵시하여 각질을 벗겨낸 후, 면포 크기를 현미경 하에서 측정하였다. 그 결과를 표 3에 나타내었다.
시료 |
평균 명포 크기 측정(0.1㎜) N=3 |
미처리 |
1.78 |
올레인산(OA) |
3.5 |
OA+실시예 1 |
3.0 |
OA+실시예 2 |
2.5 |
OA+실시예 3 |
2.8 |
OA+실시예 1+실시예 2 |
2.5 |
OA+실시예 1+실시예 3 |
2.3 |
OA+실시예 2+실시예 3 |
2.4 |
OA+실시예 1+실시예 2+실시예 3 |
2.1 |
표 3으로부터, 본 발명에 따른 생약재로 처리한 토끼의 면포가 현저히 감소되었다는 것을 알 수 있다. 즉, 생약재에 의해 피지감소가 나타나고, 결과적으로 피부 과각질화를 감소시켜 면포가 감소되었음을 추정할 수 있다.
상기 시험예 1~3으로부터, 본 발명의 조성물에 함유되는 사상자, 백자인 및 상표초 추출물은 피지 분비 억제에 효과가 있는 물질임을 알 수 있다.
[시험예 4] 피지분비 억제 및 여드름 완화 효과
여드름으로 고민하는 남녀 10명과 별도로 얼굴에 피지분비가 많다고 느끼는 남녀 9명을 선정하여 아래의 제형예 1에 따른 처방으로 4주간 여드름 부위와 얼굴의 피지 분비가 많은 곳을 매일 바르게 하였다.
효과의 판정은 시험에 참가한 본인이 느끼는 정도에 따라 점수화하였고, 피지분비 억제는 피지량 측정기를 사용하여 측정하였다. 피지분비 억제 효과에 대한 결과는 표 4에 나타내었고, 여드름 완화효과는 표 5에 나타내었다.
[제형예 1] 영양 화장수
성분 |
함량(중량%) |
사상조+백자인+상표초 |
1.00 |
밀납 |
4.00 |
폴리솔베이트 |
1.50 |
솔비탄세스퀴올레이트 |
0.70 |
유동파라핀 |
5.00 |
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 |
5.00 |
글리세린 |
3.00 |
부틸렌글리콜 |
3.00 |
프로필렌글리콜 |
3.00 |
카르복시비닐폴리머 |
0.10 |
트리에탄올아민 |
0.20 |
방부제 |
적량 |
색소 |
적량 |
향료 |
적량 |
정제수 |
to 100 |
피지분비 억제 효과
시험자 |
시험전피지량(㎍/㎠h) |
시험 2주경과 후 |
시험 4주 경과 후 |
1 |
77 |
65 |
63 |
2 |
55 |
38 |
43 |
3 |
35 |
43 |
45 |
4 |
88 |
71 |
62 |
5 |
71 |
65 |
55 |
6 |
23 |
33 |
38 |
7 |
48 |
43 |
44 |
8 |
65 |
40 |
46 |
9 |
79 |
66 |
61 |
여드름 완화효과
시험자 |
시험전 상태 |
시험 2주경과 후 |
시험 4주 경과 후 |
1 |
1 |
- |
+ |
2 |
3 |
++ |
++ |
3 |
2 |
+ |
++ |
4 |
1 |
+ |
+ |
5 |
2 |
- |
+ |
6 |
3 |
- |
++ |
7 |
2 |
++ |
+++ |
8 |
1 |
+ |
++ |
9 |
2 |
+ |
+ |
10 |
2 |
+ |
++ |
* 시험전 상태:1-여드름 조금 있음2-여드름 약간 있음3-여드름 심함* 효과 판정; -: 효과 거의 없음+: 약간의 효과 있음++: 많이 줄어듬+++: 완전히 치유됨 |
상기 표 4 및 5의 결과로부터, 본 발명에 따른 조성물은 피지를 억제할 수 있고, 따라서 여드름을 완화시킬 수 있음을 알 수 있다.
이하. 본 발명의 조성물의 제형을 예를 들지만, 본 발명이 이들 제형예로만 한정되는 것은 아니다.
[제형예 2] 크림
원료명 |
중량% |
사상자유동 파라핀세토스테아릴알코올밀납메틸폴리실록산친유형모노스테아린산 스테아레이트스테아린산소리비탄세스퀴올레이트모노스테아린산폴리옥시에칠렌소르비탄(E.O=20)메틸파라벤프로필파라벤향료에틸렌디아민테트라초산디나트륨글리세린프로필렌글리콜트리에탄올아민이미다졸리디닐우레아정제수 |
0.115.02.03.00.52.02.00.81.01.20.20.10.20.025.05.00.20.3to 100 |
[제형예 3] 로션
원료명 |
중량% |
백자인멀티왁스스테릭엑시드유동파라핀디하이데그왁스비왁스 17니콜 MGS-B아라셀 #165글리세린메틸파라벤프로필파라벤리퀴드파라벤트윈 #60카보머정제수 |
0.13.60.55.00.80.051.90.77.00.120.035.00.50.12to 100 |
[제형예 4] 유연 화장수
원료명 |
중량% |
상표초생귀나린메틸폴리실록산메틸파라벤향료폴리옥시에틸렌노릴페닐에텔폴리옥시에틸렌경화피마자유초산토코페롤에탄올글리세린에틸렌디아민테트라초산디나트륨프로필렌글리콜트리에탄올아민정제수 |
0.10.050.50.20.20.30.50.110.08.00.023.00.2to 100 |
[제형예 5] 팩
원료명 |
중량% |
백자인+상표초구연산폴리비닐알코올셀룰로오스검글리세린폴리옥시에틸렌글리콜 400옥틸도데실에텔(E.O.=16)에탄올방부제색소향정제수 |
0.11.014.00.11.01.00.40.6적량적량적량to 100 |
[제형예 6] 팩
원료명 |
중량% |
사상자+상표초구연산폴리비닐알코올셀룰로오스검글리세린폴리옥시에틸렌글리콜 400옥틸도데실에텔(E.O.=16)에탄올방부제색소향정제수 |
0.11.014.00.11.01.00.40.6적량적량적량to 100 |
[제형예 7] 고형 비누
원료명 |
중량% |
사상자+백자인+상표초이산화티탄폴리에틸렌글리콜글리세린에틸렌디아민테트라아세트산나트륨색소비누향화장비누베이스(수분 13%, 중량부) |
0.10.20.80.50.051.0적량적량to 100 |