KR20010043147A

KR20010043147A - 멜라닌 생성을 촉진하는 화합물의 확인을 위한 분석법 및그 분석법에 의해 확인되는 레티노이드류 화합물

Info

Publication number: KR20010043147A
Application number: KR1020007012047A
Authority: KR
Inventors: 룽타디파
Original assignee: 갈데르마 리써어치 앤드 디벨로프먼트,에스.엔.씨.
Priority date: 1998-05-06
Filing date: 1999-05-06
Publication date: 2001-05-25
Also published as: CA2324001A1; CA2324001C; JP3669925B2; CN1247192C; NO20004723D0; NO20004723L; CN1299274A; IL138772A0; BR9909599A; JP2002513756A; ID26632A; WO1999056740A1; EP1082111A4; KR100538417B1; AU762364B2; AU3882999A; ZA200005026B; EP1082111A1; AR018340A1

Abstract

피부의 색소 침착을 변경시키는 화합물을 선택하기 위한 실험실적 분석법이 제공된다. 또한, 치환 방향족 또는 복소환식 카르복실산, 또는 그것의 유도체, 또는 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는, 신규 계열의 전-색소성 화합물이 제공되며, 이는 유리형 또는 보호형인 페놀, 나프톨, 티오페놀, 티오나프톨 관능기를 포함하지 않는다. 바람직한 구현예에서, 상기 화합물을 RXR 에 대한 활성을 나타낸다. 상기 화합물은 화장용 또는 피부학적 조성물에서, 인간의 피부 및/또는 모발의 색소 침착의 변경 및, 피부 또는 모발 색소 침착에 영향을 주는 장애 및 질환 상태의 치료를 위해 사용될 수 있다.

Description

멜라닌 생성을 촉진하는 화합물의 확인을 위한 분석법 및 그 분석법에 의해 확인되는 레티노이드류 화합물 {ASSAY FOR IDENTIFICATION OF COMPOUNDS THAT PROMOTE MELANIN PRODUCTION AND RETINOID-LIKE COMPOUNDS IDENTIFIED BY SAID ASSAY}

정상 피부색은 갈색 색소인 멜라닌이 주요 성분인, 상이한 색소의 혼합물의 배합 발현의 결과이다. 멜라닌은 외피 내에서 발견되는 특정 세포인 멜라닌세포에 의해 합성된다. 멜라닌세포는 멜라노솜이라 명명되는 세포소기관 내에서 멜라닌을 합성한다. 멜라노솜이 멜라닌으로 포화되는 경우, 그것은 멜라노솜의 수상돌기의 팔로 수송되고, 주위의 케라틴세포로 옮겨진다. 그 후, 케라틴세포는 피부에 갈색 색소침착을 일으키면서, 피부의 표면으로 이동한다. 케라틴세포 내의 멜라닌의 양은 피부 및 모발 내의 색소침착의 정도를 결정한다.

피부 및 모발 색소 침착에 대한 멜라닌의 효과로 인하여, 멜라닌 생성 및/또는 주위 케라틴세포로의 멜라닌의 수송에 영향을 미치는 화합물을 확인하는 것을 목표로 하는 연구가 수행되었다. 이러한 화합물은 모발 및 피부 색소 침착을 변경시키기 위한 잠재 적용성을 가진다. 에컨대, 멜라닌세포 자극 호르몬 (MSH), 및 테오필린과 같은 화합물이 색소 침착을 유도하는 것이 공지되어 있다. 또한, MSH 의 유사체는 피부 색소 침착을 촉진시키기 위한 임상 효능에 대해 시험중이다. 또한, 알파-지질단백질이 피부 내의 멜라닌 생성을 자극할 수 있다는 것이 보고되었다 (Jpn. Kokai Tokyo, Koho, JP 82-153348, GB 2124900, Empresa Cubana Importadora y Exportadora de Productos Medicos, 쿠바). 이와 반대로, 색소 침착을 억제하기 위한, 예컨대 흑피증을 치료하기 위한 일부의 화합물, 예컨대 히드로퀴논 (HQ), 및 모노벤젠 에테르 (Pathak 등, J. American Academy Dermotol. 15:894-899 (1986); Smith 등, Pigment Cell Research, 1:386-389 (1988)), 및 알부틴, HQ 의 글루코 축합물 (Proceeding Japan Soc. Invest. Dermotol. 12:138-139 (1988)) 의 용도가 또한 공지되어 있다.

또한, 국산 (kojic acid) 및 그것의 유도체 및/또는 발레르산이 멜라닌 형성을 억제한다는 것이 보고되었다(Japan Kokai Tokyo Koho, JP 03011010; Oyama, Yasuaki, Sansei Pharmaceutical Co., Ltd., 일본).

또한, 불포화 지방산 없이 또는 불포화 지방산과 함께 배합된, 프로피온산, 부티르산 및 발레르산 및 그것들의 염은, 멜라닌의 생성을 촉진하는, 티로시나제의 형성을 억제한다 (Mishima 등, EPA 345081, Hayashibara Biochemical Laboratories, Inc., 일본).

EP 0 509 241 및 WO 93/19729 는, 색소침착과잉 또는 피부를 탠닝 (tanning) 하는 것이 충분한 시간 동안 유효량의 트랜스-레틴산을 거기에 국소적으로 적용함으로써 수행될 수 있다는 것을 개시하고 있다. 그럼에도 불구하고, 이 방법에 사용되는 화합물은 자극을 유도한다.

신규 멜라닌 합성을 억제하는 화합물 및 잠재적인 항-멜라노솜, 세포독성 화합물을 확인하기 위한, 보고에 따른 적절한 실험실적 방법은 [Dooley 등, Pharmcol., 7:188-200 (1994)] 에 보고되었다. 이러한 방법은 멜라닌 세포 기원, Mel-Ab (Dooley 등, Oncogene, 3:531-535 (1988)), 및 기타 섬유아세포 기원의 2 개의 불사화된(immortalized) 쥐의 세포계를 이용한다. Mel-Ab 세포는 배양액에서 급속하게 성장하고, 복제량의 멜라닌을 생성하는, 자연적으로 불사화된 쥐의 C57BL＼6 멜라닌 세포계로부터 유래한다. 보고에 의하면, 이러한 분석법은 멜라닌 세포에 독특한 멜라닌 생합성 경로에서의 중간체와 유사한 경로를 갖는 화합물을 선별하기 위해 사용되었다. 특히, 1,3-디히드록시벤젠, 1,4-디히드록시벤젠, 1,4-디메톡시벤젠, 및 1,4-벤조퀴논 뿐만 아니라, 티로신에 관련된 파라-치환된 페놀 및 DOPA 에 관련된 1,2-디히드록시벤젠이 선별되었다. 보고에 따른 색소 침착을 변경시키는 여러가지 화합물이, 이러한 선별을 이용하여 확인되었다. 그러나, 본 발명과 달리, 이러한 실험실적 선별은 정상 인간의 멜라닌 세포가 아닌, 불사화된 쥐의 세포를 대신 이용한다.

그러나, 색소 침착 및 멜라닌 생성 및/또는 수송을 수행하는 기타 화합물이 확인될 수 있다면, 매우 유리할 것이다. 피부에 매우 내성이고 비자극성인 화합물이 확인될 수 있다면, 또한 매우 유리할 것이다. 또한, 그러한 화합물의 확인을 위해 제공되는, 향상된 실험실 선별 분석법이 개발된다면 유용할 것이다.

[발명의 간단한 설명 및 목적]

따라서, 멜라닌 세포, 바람직하게는 인간의 멜라닌 세포에 의한 멜라닌의 발현을 변경 (강화 또는 억제) 시킬 수 있는 화합물의 확인을 위한 신규 분석법을 제공하는 것이 본 발명의 목적이다.

상기 분석법에 의해 확인되는 멜라닌-촉진 또는 억제량의 하나 이상의 화합물을 포함하는, 피부학적/화장용/약제학적 조성물을 제공하는 것이 본 발명의 또다른 목적이다.

인간의 멜라닌 세포에 의한 멜라닌 생성을 변경 (강화 또는 억제) 시키는, 멜라닌 강화 또는 억제량의 하나 이상의 화합물을 포함하는, 국소 적용가능한 피부학/화장품/약제학적 조성물을 제공하는 것이 본 발명의 더욱 구체적인 목적이다.

멜라닌-강화 또는 억제량의 하나 이상의 치환 방향족 또는 복소환식 카르복실산 또는 그것의 유도체를 포함하는 피부학적/화장용/약제학적 조성물을 제공하는 것이 본 발명의 더욱 더 구체적인 목적이다 (단, 상기 카르복실산은 유리 페놀, 나프톨, 티오페놀, 또는 티오나프톨 관능기를 포함하거나, 보호기에 의해 보호되는 것임).

하나 이상의 멜라닌-영향성 (증가 또는 억제) 레티노이드 화합물을 포함하는 유효량의 조성물을 피부 및/또는 모발의 색소 침착을 유도하기에 충분한 시간 동안 국소 적용하는 것을 포함하는, 치료를 필요로 하는 대상물 내의, 피부 및/또는 모발의 색소 침착을 변경시키는 방법을 제공하는 것이 본 발명의 또 다른 구체적인 목적이다.

하나 이상의 치환 방향족 또는 복소환식 카르복실산 또는 그것의 유도체를 포함하는 유효량의 조성물을 피부 및/또는 모발의 색소 침착에 영향을 미치기에 충분한 시간 동안 국소 적용하는 것을 포함하는, 치료를 필요로 하는 대상물 내의 , 피부 및/또는 모발의 색소 침착을 변경, 증가 또는 감소시키는 방법을 제공하는 것이 본 발명의 더욱 구체적인 목적이다 (단, 상기 카르복실산은 유리 또는 보호 페놀, 나프톨, 티오페놀, 또는 티오나프톨기를 포함하지 않음).

도 1 은 멜라닌 생성에 영향을 미치는 본 발명에 따라 확인된 화합물을 위한 구조를 포함하고;

도 2 내지 도 4 는 본 발명의 화합물을 사용하여 치료될 수 있는 색소성 질환을 나열한다.

첫 번째 구현예에서, 본 발명은 인간의 멜라닌 세포에 의한 멜라닌의 발현을 변경 (증가 또는 억제) 시키는 화합물, 바람직하게는 인간의 멜라닌 세포에 의한 멜라닌 생성을 증가시키는 화합물을 확인하기 위한 신규 분석법을 제공한다.

통상, 본 분석법은, 상기 배양된 인간의 멜라닌 세포의 수 (증식) 에 기초한 멜라닌 함량을 표준화하고, 세포 당 멜라닌 생성의 증가 또는 감소에 기초한 멜라닌 생성에 영향을 주는 화합물(들)을 확인하면서, 배양액 내의 인간의 멜라닌 세포의 성장 또는 증식에 대한 특정 화합물 또는 화합물의 배합의 효과, 및 상기 배양된 인간의 멜라닌 세포에 의한 멜라닌 생성에 대한 상기 동일한 화합물의 효과를 시험할 것이다.

더욱 구체적으로, 본 분석법은 하기를 포함할 것이다:

(i) 멜라닌 생성에 대한 효과를 위해 하나 이상의 선별되는 화합물로 2 개 이상의 인간의 멜라닌 세포 배양액을 접촉시키고;

(ii) 상기 인간의 멜라닌 세포 배양액 중 하나에 포함된 멜라닌 세포의 증식을 측정하고;

(iii) 두 번째 인간의 멜라닌 세포 배양액에 포함된 멜라닌의 양을 측정하고;

(iv) 멜라닌 생성 (증가 또는 감소) 에 대한 상기 화합물(들)의 효과를 결정하기 위해, 단계 (ii) 및 (iii) 에서 수득한 데이타를 비교하고, 상기 배양액 내에 포함된 멜라닌 세포의 수에 기초한 데이타를 표준화하고;

(v) 또한 상기 화합물이 없는 것을 제외하고는 이전 배양액과 동일한 조건 하에서 배양된, 대조군 인간 멜라닌 세포 배양액 내의 증식 및 멜라닌 생성과, 단계 (ii) 및 (iii) 에서 수득한 데이타를 비교하고;

(vi) 상기 화합물과 접촉하지 않는 대조군 배양액에 비해, 상기 화합물의 존재시에 배양되는 멜라닌 세포에 의한 멜라닌 생성의 증가 또는 감소에 기초한, 인간의 멜라닌 세포에 의한 멜라닌 발현을 변경 (증가 또는 감소) 시키는 것으로서, 선별된 화합물을 확인함.

상기 방법은 바람직하게는, 적절한 원 (source) 으로부터 인간의 멜라닌 세포, 예컨대 신생아 피부 멜라닌 세포를 수득함으로써 수행될 것이다. 그 후, 이러한 멜라닌 세포는 2 개의 세포 배양 챔버, 예컨대 96-웰 플레이트 및 24-웰 플레이트 내로 동시에 접종 (seed) 된다. 이러한 세포들이 웰의 표면에 부착되도록 한 후, 각각의 웰이 고정량의 특정 화합물(들) 로 배양되고, 멜라닌 발현에 대한 그것의 효과가 측정된다. 이러한 배양은, 만약 존재한다면, 상기 배양된 멜라닌 세포에 의한 멜라닌 생성에 대한 상기 화합물(들) 의 효과를 측정하기 위해 충분한 시간 동안 수행될 것이다.

그 후, 배양은 약 1 분 내지 약 1 개월, 더욱 바람직하게는 약 1 시간 내지 약 2 주, 가장 바람직하게는 약 12 시간 내지 1 주에서 변화할 것이다. 배양 후, 상기 배양액 중 하나에서 세포의 증식이 평가된다. 이것은 예컨대 흡광도와 같은 적절한 방법에 의해 수행될 것이다.

바람직한 구현예에서, 96-웰 플레이트 내의 세포를 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-5-(3-카르복시메톡시페닐)-2-(4-술포페닐)-2H-테트라졸륨 (세포의 증식을 비색적으로 측정하기 위해 통상 사용되는 테트라졸륨 염료) (MTS) 로 처리하고, 상기 96-웰 플레이트 내의 세포의 증식을 측정하기 위해 490 nm 에서 플레이트의 흡광도를 판독한다. 그 후, 그 결과를 동일한 조건 하에서 배양된 후, MTS 용액으로 처리되었으나 시험 화합물로 처리되지 않은, 대조군 멜라닌 세포 배양액과 비교한다.

그 후, 동일한 조건하에서 시험 화합물과 함께 배양된, 인간의 멜라닌 세포배양액을 포함하는 두 번째 배양액, 예컨대 24-웰 플레이트를, 거기에 포함된 세포에 의해 발현되는 멜라닌의 양을 측정하기 위해 시험한다. 이것은 공지된 방법에 의해 수행할 수 있다. 본 발명에서, 이것은 바람직하게는, 세포를, 예컨대 인산염 완충 식염수 (PBS) 로 세척하고, 세척한 세포를 알칼리 용액, 예컨대 1N NaOH 로 용해시키고, 예컨대 405 nm 에서 알칼리 용해성 멜라닌의 흡광도를 측정함에 의해, 거기에 포함된 알칼리 용해성 멜라닌의 양을 측정함으로써 수행된다. 그 후, 상기 데이타를 바람직하게는 상기 시험 화합물이 없는 것을 제외하고는 동일한 조건 하에서 성장한, 대조군 멜라닌 세포 배양액과 비교한다.

양쪽의 멜라닌 세포 배양액로부터 수득된 데이타를, 만약 존재한다면, 멜라닌 세포에 의한 멜라닌 생성 및 멜라닌의 축적에 대한 특정 화합물(들)의 효과를 측정하기 위해, 멜라닌 세포 증식 (세포 수) 에 기초하여 표준화한다.

본 발명에 따른 멜라닌 발현을 변경시키는 화합물은, 배양된 인간의 멜라닌 세포 내의 멜라닌 생성 및 축적에 영향을 미치는 화합물이다. 바람직하게, 이러한 화합물은 대조군 멜라닌 세포 배양액에 비해 10 % 이상 멜라닌 발현을 변경시킬 것이다. 더욱 바람직하게, 이러한 화합물은 20 % 이상 멜라닌 생성에 영향을 미칠 것이다. 가장 바람직하게, 화합물은 약 150 내지 250 % 이상 멜라닌 생성 및 축적에 영향을 미칠 것이다.

따라서, 본 발명은 인간의 멜라닌 세포에 의한 멜라닌 생성 및 축적을 증가시키거나 감소시키는, 화합물 또는 그것들의 배합물의 확인에 관한 것이다. 멜라닌 생성 및 축적을 증가시키는 화합물은, 예컨대 피부의 탠닝 또는 갈색화의 촉진 및 모발의 회색화의 치료 또는 예방을 위해 사용될 수 있다. 또한, 상기 화합물은 색소침착감소, 예컨대 백반과 관련된 질환 또는 상태를 치료하는데 사용될 수 있다.

멜라닌 생성을 감소시키는 화합물은 색소침착과잉과 관련된 질환 또는 상태를 갖는 대상의 치료를 위해 사용될 수 있다. 이러한 질환 또는 상태는 흑피증 또는 나이-관련된 색소침착과잉, 및 갈색반을 포함한다.

또한, 멜라닌 생성 및/또는 축적을 억제하는 화합물은 노화, 예컨대 노인의 손 및 얼굴에서 종종 관찰되는 "간 반점 (liver spot)" 과 관련된 색소침착과잉을 치료 및/또는 예방하기 위해 사용될 수 있다. 색소 침착 장애와 관련된 질환 및 상태의 목록은 여기에 전체 참조로 포함된, [Dermatology in General Medicine (Fitzpatric, T.B. 등) 에서 발견될 수 있다.

본 발명의 화합물은 색소침착감소 문제, 예컨대 백반, 염증후 색소침착감소 또는 탈색의 치료, 피부 이식 후 색소침착감소 또는 탈색의 치료, 자외선에의 과다노출로 인한 색소침착감소 또는 탈색의 치료, 반흔화후 색소침착감소 또는 탈색의 치료, 또는 노화 또는 흑점으로 인한 색소침착감소 또는 탈색의 치료에 유용할 수 있다.

멜라닌 생성을 감소시키는 화합물은 흑피증 또는 나이와 관련된 색소침착과잉의 치료에 유용할 수 있다.

또한, 멜라닌 생성 또는 축적에 영향 (증가 또는 감소) 을 주는 화합물들의 배합물, 특히 멜라닌 생성 또는 축적에 상승적인 효과를 갖는 배합물을 확인하기 위해, 본 분석법이 사용될 수 있다.

상기 논의된 바와 같이, 두 번째 구현예에서, 본 발명은, 본 발명에 따른 하나 이상의 멜라닌-영향성 화합물을 포함하는 약제학적/피부학적/화장용 화합물에 관한 것이다. 이 점에 관해서, 정상 인간의 멜라닌 세포에 의한 멜라닌 생성 및/또는 축적을 촉진하는 본 분석 방법을 사용하여 신규 계열의 화합물이 발견되었다. 상기 화합물은 그것이 피부에 매우 내성이고 비자극성이라는 점에서 또한 유리하다. 이것은, 본 분석법을 사용하여 선별된 많은 다른 레티노이드 화합물이 유사한 조건하에서 색소침착에 영향을 미치지 않았기 때문에 놀라운 일이다. 이러한 화합물은 레티노이드 시그날링 경로를 거쳐 멜라닌 생성 및/또는 축적에 영향을 미치는 것으로 가정된다.

바람직한 구현예에서, 본 발명은 많은 하나 이상의 치환 방향족 또는 복소환식 카르복실산을 포함하는 약제학적/화장용/피부학적 화합물, 또는 그것의 유도체를 제공한다 (단, 상기 카르복실산은 유리형 또는 보호형의 페놀, 나프톨, 티오페놀, 또는 티오나프톨 관능기를 포함하지 않음). 이러한 카르복실산으로는 예로서, 벤조산, 프로피올산, 니코틴산, 아크릴산, 부텐산 및 나프토산을 들 수 있다.

바람직한 구현예에서, 본 발명의 치환 방향족 또는 복소환식 카르복실산은 RXR 에 대한 활성을 나타낼 것이다. 본 발명에 있어서, RXR 활성을 나타내는 화합물은 5000 nM 미만, 바람직하게는 1000 nM 미만의 RXR 에 대한 결합을 나타낸는 화합물이다. RXR 에 대한 결합의 측정은 당업자에 의해 잘 알려져 있고, 예컨대 하기에 보고되어 있다: (1) [RETINOIDS, Progress in Research and Clinical Applications, 제 10 장 (pp 261-267), Marcel Dekker Inc, Maria A. Livrea et Lester Packer 출판] 중 "Selective Synthetic Ligands for Nuclear Retinoic Acid Receptor Subtypes" ; (2) [Pharmacol Skin, Basel, Karger, 1993, Vol.5, pp 117-127] 중 "Synthetic Retinoids: Receptor Selectivity and Biological Activity"; (3) [Skin Pharmacology, 1992, Vol.5, pp 57-65] 중 "Selective Synthetic Ligands for Human Nuclear Retinoic Acid Receptors"; (4) [Biochemical and Biophysical Research Communications, Vol.186, No.2, 1992 년 7 월, pp 977-983] 중 "Identification of Synthetic Retinoids with Selectivity for Human Nuclear Retinoic Acid Receptor-γ"; 및 (5) [Mol. Pharmacol., Vol.40, pp 556-562] 중 "Selective High Affinity RAR-α or RAR-βRetinoic Acid Receptor Ligands".

또한, 더욱 바람직한 구현예에서, RXR 에 대한 활성을 나타내는 화합물은 RXR 에 대한 작동제 활성을 나타낸다. 이러한 RXR 에 대한 작동제 활성은, 예컨대 여기에 참조로 전체 내용이 포함된, USP 번호 제 5,696,104 호에 보고된 방법에 의해 측정될 수 있다.

더욱 구체적으로, 본 발명에 따라서, 놀랍게도 인간의 멜라닌 세포에 의해 멜라닌 생성 및/또는 축적을 촉진하는 것으로 발견된 화합물은 하기를 포함한다:

4-[1-(5,6,7,8-테트라히드로-5,5,8,8-테트라메틸-2-나프틸)에테닐]벤조산 (CD 번호 제 2771 호);

3-[3-(5,5,8,8-테트라메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일)-페닐]-아크릴산 (CD 번호 제 2908 호);

3-[3-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일)-페닐]-부트-2-엔산 (CD 번호 제 3206 호);

6-[1-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일)-시클로프로필]-니코틴산 (CD 번호 제 3127 호);

3-[3-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일)-페닐]-아크릴산 (CD 번호 제 2915 호);

4-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-카르보닐)-벤조산 (CD 번호 제 2608 호);

4-(3-브로모-5,5,8,8-테트라메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일옥시)-벤조산 (CD 번호 제 2661 호);

5-[(E)-2-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일)-프로펜일]-티오펜-3-카르복실산 (CD 번호 제 2425 호);

3-[3-(5,5,8,8-테트라메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일술파닐)-페닐]-아크릴산 (CD 번호 제 3132 호);

6-(3-부틸-5,5,8,8-테트라메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일술파닐)-니코틴산 (CD 번호 제 3292 호);

4-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-2-나프틸티오)벤조산 (CD 번호 제 2624 호);

3-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-2-나프틸)페닐 프로피온산 (CD 번호 제 2906 호); 및

6-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-2-나프틸티오)니코틴산 (CD 번호 제 2809 호).

상기 기록된 바와 같이, 약제학적/피부학적/화장용 조성물은 피부 및/또는 모발에 국소 적용하기에 적절한 형태일 것이다. 바람직한 구현예에서, 이러한 조성물은 피부의 인조 탠닝 및/또는 갈색화에 적절한 형태일 것이다.

이러한 조성물은 통상 이러한 형태의 조성물로 제형화된, 다른 약제학적으로, 화장용으로, 또는 피부학적으로 허용가능한 성분, 예컨대 이온성 또는 비이온성 농후제, 연화제, 항산화제, 불투명화제, 안정화제, 점활제, UV-A 및/또는 UV-B 영역에서 활성인 유기 자외선차단제, 광보호 무기 안료 및 비안료 (non-pigment), 보습제, 비타민, 방향제, 보존제, 충진제, 봉쇄제, 염료, 및 착색제를 포함할 수 있다.

자연적으로, 당업자는 본 발명의 조성물과 본래 관련된 유리한 성질이 구상된 첨가(들)에 의해 악영향을 받지 않도록, 상기(들)의 적절한 상보 화합물 및/또는 그것의 양을 선택하기 위해 주의해야 한다.

본 발명의 조성물은 멜라닌 세포에 의한 멜라닌 생성 및/또는 축적에 영향을 미치는 하나 이상의 화합물, 예컨대 상승적 배합물을 포함할 수 있다. 또한, 상기 화합물은 색소 침착을 촉진 또는 억제하는 다른 화합물, 예컨대 디히드록시아세톤 (DHA), 또는 그것의 유도체를 포함할 수 있다. 적절한 화합물은 US 출원번호 제 08/819,084 호 (Tuloup 등에 의해 1997 년 3 월 18 일 출원되고, L'OREAL 에 권리가 이전됨) 에 개시되어 있다. 또한, 색소 침착을 촉진하는 MSH 및 그것의 유사체가 포함될 수 있다. 이와 반대로, 색소 침착을 억제하는 화합물, 예컨대 HQ, 모노벤젠 에테르 및 알부틴은 색소 침착을 억제하는 본 분석법을 사용하여 확인된 화합물과 함께 포함될 수 있다.

본 조성물은 인간의 피부 및/또는 모발에 국소 적용하기에 적절한 형태이다. 적절한 형태로는, 크림, 밀크, 크림-겔, 유체 로숀, 수중유 유화액 또는 유중수 유화액, 매개체 분산액, 또는 당분야에서 통상 사용되는 임의의 다른 형태일 수 있다.

본 조성물에 포함된 하나 이상의 멜라닌-영향성 화합물의 양은, 조성물의 총 중량에 대해 통상 약 0.0001 중량 % 내지 약 30 중량 % 의 범위이고, 바람직하게는 조성물의 총 중량에 대해 약 0.5 중량 % 내지 약 15 중량 % 의 농도 범위일 것이고, 더욱 바람직하게는 조성물의 총 중량에 대해 약 0.001 중량 % 내지 5 중량 % 범위일 것이다.

본 발명은 또한 발명에 따른 많은 멜라닌-영향성 화합물의 국소 적용을 포함하는, 화장용, 피부학적 또는 치료적 처리 요법을 포함한다. 유효량은 피부 및/또는 모발의 색소 침착에 영향 (증가 또는 감소) 을 미치기에 충분한 양이다. 이러한 요법은 피부 및/또는 모발의 색소 침착에 영향을 미치는 다른 화합물과 배합하여 수행될 수 있다. 상기 요법은 색소 침착에 대한 원하는 효과가 달성될 때까지, 반복적으로 수행될 수 있다. 본 화합물이 피부에 자극을 주지 않는 경우, 만성 투여가 적절해야 한다.

논의된 바와 같이, 본 발명은, 특히 모발의 착색을 촉진하기에 적절한, 본 발명에 따른 하나 이상의 화합물을 포함하는 조성물을 포함한다. 이러한 조성물로는 통상 모발 제형물 내에 포함되는 다른 성분, 예컨대 컨디셔닝제, 안료 및 색 첨가제, 스트레이트제, 퍼머제, 계면 활성제, 향료, 알코올 등을 들 수 있다.

발명의 이해를 보다 손쉽게 하고자, 하기 실시예가 제공된다.

실시예 1

신생아 피부로부터 정상 인간의 멜라닌 세포를, 분석을 위해 사용하였다.

일차 선별을 위해, 세포를 웰의 표면을 따라 동시에 96-웰 플레이트 및 24-웰 플레이트에 적절히 접종하고, 5 일 동안 시험 화합물로 처리하였다. 정밀도를 확실히 하기 위해, Robot 을 사용하여, 플레이트에 화합물을 첨가하였다 (각 웰에 동일한 양). 5 일 처리의 종결시, 96-웰 플레이트 내의 세포를 MTS 용액으로 처리하고, 플레이트를 490 nm 에서 판독하여, 세포의 성장에 대한 화합물의 효과를 측정하였다. 24-웰 플레이트 내의 세포를 PBS 로 헹군 후, 1N NaOH 로 용해시켜, 알칼리 용해성 멜라닌의 흡광도를 405 nm 에서 측정하였다.

96-웰 플레이트로부터의 데이타를 분석하여, 세포의 증식에 대한 각각의 화합물의 효과를 측정하고, 24-웰 플레이트로부터의 데이타를 사용하여, 세포의 멜라닌 함량에 대한 화합물의 효과를 측정하였다. 그 후, 멜라닌 함량을 세포의 증식으로 표준화하였다.

이러한 방법을 사용하여, 정상 인간 멜라닌 세포의 멜라닌 함량을 증가시키는 하기 화합물을 확인하였다. 상기 결과에 기초하여, 인간의 멜라닌 세포에 의한 멜라닌 생성을 변경 (증가 또는 감소) 시키는, 다른 화합물, 예컨대 레티노이드를 확인할 수 있다는 것이 기대된다.

CD 번호	(표준화된) 멜라닌 함량의 최대 증가	설명
2771	2 μM 에서 250 %
2908	2 μM 에서 200 %
3206	0.5 μM 에서 198 %
2624	2 μM 에서 181 %
3127	0.1 μM 에서 179 %
2906	0.1 μM 에서 171 %
2915	0.1 μM 에서 165 %
2608	2 μM 에서 157 %
2661	1 μM 에서 155 %
2425	1 μM 에서 149 %
2809	0.5 μM 에서 145 %
3132	2 μM 에서 142 %
3292	1 μM 에서 121 %

이에 본 발명의 분석법을 사용하면서, 본 발명자들은 정상 인간 멜라닌 세포에 대한 신규 계열의 전-색소성 (pro-pigmentary) 화합물을 확인하였다 (이로써 멜라닌 생성을 증가시킴). 이러한 분자들은 레티노이드 시그날링 경로를 통해 작용할 수 있다고 가정된다. 전-색소성 활성을 갖는 레티노이드류 분자의 계열의 발견은, 다른 레티노이드 시그날링 분자는 유사한 조건 하에서 색소 침착을 유도하지 않으므로, 특히 놀라운 일이다. 이 발견은, 화합물이 피부에 매우 내성이고 비자극성이므로, 또한 유리하다. 따라서, 상기 화합물은 인간 대상의 피부 및/또는 모발 내의 색소 침착을 변경시키는데, 잠재적 적용성을 갖는다.

실시예 2

제제예

1. 경구 경로

(a) 하기 조성물을 0.8 g 정제의 형태로 제조하였다:

화학식 (2) 의 화합물 0.005 g

전젤라틴화된 전분 0.265 g

미결정질 셀룰로오스 0.300 g

락토오스 0.200 g

마그네슘 스테아레이트 0.030 g

염증후 색소침착감소의 치료를 위해, 치료되는 경우의 심각도에 따라 3 내지 6 개월 동안, 1 일 성인 1 명당 1 내지 3 개의 정제를 투여하였다.

(b) 5 ml 바이알에 충진시키기 위해 고안된 음료용 현탁액을 제조하였다.

화학식 (4) 의 화합물 0.050 g

글리세롤 0.500 g

70 % 소르비톨 0.500 g

소듐 삭카리네이트 0.010 g

메틸 파라-히드록시벤조에이트 0.040 g

풍미제 적당량

정제수 합량 5 ml

피부 이식 후 색소침착감소의 치료를 위해, 치료되는 경우의 심각도에 따라 3 개월 동안 1 일 성인 1 명당 1 개의 바이알을 투여하였다.

(c) 젤라틴 캡슐 내에 충진되도록 고안된 하기 제형물을 제조하였다:

화학식 (5) 의 화합물 0.025 g

옥수수 전분 0.060 g

락토오스 합량 0.300 g

사용된 젤라틴 캡슐은 젤라틴, 산화티탄, 및 보존제를 포함하였다.

백반의 치료시, 30 일 동안 1 일 성인 1 명당 1 개의 젤라틴 캡슐을 투여하였다.

2. 국소 경로

(a) 하기 비이온성 유중수 크림을 제조하였다:

화학식 (8) 의 화합물 0.100 g

상품명 "무수 Eucerin" 으로 BDF 사에 의해 시판되는,

유화 라놀린 알코올, 왁스, 및 정제 오일의 혼합물 39.900 g

메틸 파라-히드록시벤조에이트 0.075 g

프로필 파라-히드록시벤조에이트 0.075 g

멸균 탈이온수 합량 100.000 g

이 크림을 30 일 동안 1 일 1 회 또는 2 회 색소침착감소된 이식 피부에 적용하였다.

(b) 하기 제형물을 만들어서 겔을 제조하였다:

화학식 (11) 의 화합물 0.050 g

에리트로마이신 베이스 4.000 g

부틸히드록시톨루엔 0.500 g

상품명 "Klucel HF" 로 Hercules 사에 의해 시판되는,

히드록시프로필셀룰로오스 2.000 g

에탄올 (95°) 합량 100.000 g

이 겔을 치료되는 경우의 심각도에 따라, 6 내지 12 주 동안 1 일 1 회 내지 3 회 색소침착감소된 이식 피부에 적용하였다.

(c) 하기 성분을 함께 혼합함으로써, 염증후 색소침착감소를 고치기 위한 로숀을 제조하였다:

화학식 (2) 의 화합물 0.030 g

프로필렌 글리콜 5.000 g

부틸히드록시 톨루엔 0.100 g

에탄올 (95°) 합량 100.000 g

이 로숀을 1 일 2 회 적용하고, 2 내지 6 주의 기간 내에 의미 있는 향상을 관찰하였다.

(d) 하기 성분을 함께 혼합함으로써, 일광의 해로운 효과에 대항하기 위한 화장용 조성물을 제조하였다:

화학식 (4) 의 화합물 1.000 g

벤질리덴캄포르 4.000 g

지방산 트리글리세리드 31.000 g

글리세릴 모노스테아레이트 6.000 g

스테아르산 2.000 g

세틸 알코올 1.200 g

라놀린 4.000 g

보존제 0.300 g

프로필렌 글리콜 2.000 g

트리에탄올아민 0.500 g

방향제 0.400 g

탈이온수 합량 100.000 g

이 조성물을 매일 적용하여, 가능하다면 광선 유도성 노화에 대항하도록 만들었다.

(e) 하기 비이온성 수중유 크림을 제조하였다:

화학식 (3) 의 화합물 0.500 g

비타민 D3 0.020 g

세틸 알코올 4.000 g

글리세릴 모노스테아레이트 2.500 g

PEG-50 스테아레이트 2.500 g

카리트 버터 9.200 g

프로필렌 글리콜 2.000 g

메틸 파라-히드록시벤조에이트 0.075 g

프로필 파라-히드록시벤조에이트 0.075 g

멸균 탈이온수 합량 100.000 g

이 크림을 30 일 동안 1 일 1 회 또는 2 회, 백반의 영향을 받는 피부에 적용하였다.

(f) 하기 성분을 함께 혼합함으로써 국소 겔을 제조하였다:

화학식 (17) 의 화합물 0.050 g

에탄올 43.000 g

α-토코페롤 0.050 g

"Goodrich" 에 의해 상품명 Carbopol 941 로 시판되는,

카르복시비닐 중합체 0.500 g

20 중량 % 수용액으로서 트리에탄올아민 3.800 g

물 9.300 g

프로필렌 글리콜 합량 100.00 g

이 겔을 치료되는 경우의 심각도에 따라 6 내지 12 주 동안 1 일 1 회 내지 3 회, 백반의 영향을 받는 피부에 적용하였다.

(g) 하기 성분을 함께 혼합함으로써, 모발의 재착색을 위한 헤어 로숀을 제조하였다:

화학식 (9) 의 화합물 0.05 g

상품명 Minoxidil 로 시판되는 화합물 1.00 g

프로필렌 글리콜 20.00 g

에탄올 34.92 g

폴리에틸렌 글리콜 (분자량 = 400) 40.00 g

부틸히드록시아니솔 0.01 g

부틸히드록시톨루엔 0.02 g

물 합량 100.000 g

이 로숀을 상당한 탈색으로 고통받는 두피에 3 개월 동안 1 일 2 회 적용하였다.

(h) 하기 성분을 함께 혼합함으로써, 반흔화후 크림을 제조하였다:

화학식 (13) 의 화합물 0.050 g

레틴산 0.010 g

"Gattefosse" 에 의해 상품명 Gelot 64 로 시판되는, 글리세릴

스테아레이트 및 폴리에틸렌 글리콜 스테아레이트의 혼합물 15.000 g

"Gattefosse" 에 의해 상품명 Labrafil M2130 CS 로 시판되는,

6 몰의 산화에틸렌으로 폴리옥시에틸렌화된 커넬 오일 8.000 g

퍼히드로스쿠알렌 10.000 g

보존제 적당량

폴리에틸렌 글리콜 (분자량 = 400) 8.000 g

에틸렌디아민 테트라아세트산의 디소듐염 0.050 g

정제수 합량 100.000 g

이 크림을 6 내지 12 주 동안 1 일 1 내지 3 회 적용하였다.

(i) 하기 제형물을 만들어서, 수중유 크림을 제조하였다:

화학식 (4) 의 화합물 0.020 g

베타메타손 17-발레레이트 0.050 g

S-카르복시메틸시스테인 3.000 g

"Atlas" 에 의해 상품명 Myrj 52 로 시판되는,

폴리옥시에틸렌 스테아레이트 (40 몰의 산화에틸렌) 4.000 g

"Atlas" 에 의해 상품명 Tween 20 으로 시판되는,

20 ml 의 산화에틸렌으로 폴리옥시에틸렌화된

소르비탄 모노라우레이트 1.800 g

"Gattefosse" 에 의해 상품명 Geleol 로 시판되는,

글리세릴 모노- 및 디-스테아레이트의 혼합물 4.200 g

프로필렌 글리콜 10.000 g

부틸히드록시아니솔 0.010 g

부틸히드록시톨루엔 0.020 g

세토스테아릴 알코올 6.200 g

보존제 적당량

"Dynamit Nobel" 에 의해 상품명 Miglyol 812 로 시판되는,

카프릴산/카프르산 트리글리세리드의 혼합물 4.000 g

트리에탄올아민 (99 중량 %) 2.500 g

물 합량 100.000 g

이 크림을 노화로 인한 색소침착 문제로 영향을 받는 피부에 1 일 2 회 적용하였다.

(j) 하기 수중유 형의 크림을 제조하였다:

락트산 5.000 g

화학식 (13) 의 화합물 0.020 g

"Atlas" 에 의해 상품명 Myrj 52 로 시판되는,

폴리옥시에틸렌 스테아레이트 (40 몰의 산화에틸렌) 4.000 g

"Atlas" 에 의해 상품명 Tween 20 으로 시판되는,

20 몰의 산화에틸렌으로 폴리옥시에틸렌화된

소르비탄 모노라우레이트 1.800 g

"Gattefosse" 에 의해 상품명 Celeol 로 시판되는,

글리세릴 모노- 및 디-스테아레이트의 혼합물 4.200 g

프로필렌 글리콜 10.000 g

부틸히드록시아니솔 0.010 g

부틸히드록시톨루엔 0.020 g

세토스테아릴 알코올 6.200 g

보존제 적당량

퍼히드로스쿠알렌 18.000 g

"Dynamit Nobel" 에 의해 상품명 Miglyol 812 로 시판되는,

카프릴산/카프르산 트리글리세리드의 혼합물 4.000 g

물 합량 100.000 g

(k) 분무용 피부 로숀:

화학식 (15) 의 화합물 5.000 g

에탄올 30.000 g

탈이온수 합량 100.000 g

(l) 헤어 로숀:

화학식 (18) 의 화합물 3.000 g

프로필렌 글리콜 30.000 g

에틸 알코올 40.500 g

물 합량 100.000 g

이 로숀을 매 적용시 1 ml 의 비율로 1 일 1 회 또는 2 회 두피에 적용하였다.

(m) 농축 로숀:

화학식 (1) 의 화합물 5.000 g

카와인 (Kawaine) 2.000 g

히드록시프로필셀룰로오스

(Hercules 의 Klucel G (상품명)) 3.500 g

에틸 알코올 합량 100.000 g

이 농축 로숀을 매 적용시 1 ml 의 비율로 1 일 1 회 또는 2 회 두피에 적용하였다.

(n) 니오소말 (Niosomal) 로숀:

Chimexan ML (상품명) 0.475 g

콜레스테롤 0.475 g

모노소듐 스테아로일글루타메이트 0.050 g

화학식 (3) 의 화합물 0.100 g

보존제 적당량

염료 적당량

방향제 적당량

탈이온수 합량 100.000 g

(o) 로숀:

화학식 (17) 의 화합물 5.000 g

프로필렌 글리콜 모노메틸 에테르

(Dow Chemical 의 Dowanol PM (상품명)) 20.000 g

히드록시프로필셀룰로오스 (Hercules 의 Klucel G) 3.000 g

에틸 알코올 40.000 g

Minoxidil 2.000 g

물 합량 100.000 g

본 발명은 특정 구현예에 관해 기재되어 있으나, 본 발명의 정신을 벗어나지 않으면서 당업자에 의해 그것의 많은 변형 및 변화가 만들어질 수 있는 것으로 여겨진다. 따라서, 첨부된 청구항에 의해, 본 발명의 진정한 정신 및 영역 내에 속한 모든 변형 및 변화가 포함되도록 의도된다.

Claims

유효량의 하나 이상의 치환 방향족 또는 복소환식 카르복실산, 그것의 유도체 또는 약제학적으로 허용가능한 염을, 피부 및/또는 모발 색소 침착에 영향을 미치기에 충분한 시간 동안 국소 적용하는 것을 포함하는, 인간의 피부 및/또는 인간의 모발의 색소 침착을 변경 (촉진 또는 억제) 시키기 위한 화장용, 피부학적 및/또는 치료적 방법 (단, 상기 카르복실산은 유리 또는 보호기에 의해 보호되는, 페놀, 나프톨, 티오페놀, 또는 티오나프톨 관능기를 포함하지 않음).
제 1 항에 있어서, 상기 화합물이 인간의 피부 및/또는 모발의 색소 침착을 촉진하는 레티노이드 시그날링 분자인 방법.
제 1 항에 있어서, 상기 화합물이 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법:

4-[1-(5,6,7,8-테트라히드로-5,5,8,8-테트라메틸-2-나프틸)에테닐]벤조산;

3-[3-(5,5,8,8-테트라메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일)-페닐]-아크릴산;

3-[3-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일)-페닐]-부트-2-엔산;

6-[1-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일)-시클로프로필]-니코틴산;

3-[3-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일)-페닐]-아크릴산;

4-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-카르보닐)-벤조산;

4-(3-브로모-5,5,8,8-테트라메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일옥시)-벤조산;

5-[(E)-2-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일)-프로펜일]-티오펜-3-카르복실산;

3-[3-(5,5,8,8-테트라메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일술파닐)-페닐]-아크릴산;

6-(3-부틸-5,5,8,8-테트라메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일술파닐)-니코틴산;

4-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-2-나프틸티오)벤조산;

3-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-2-나프틸)페닐 프로피온산; 및

6-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-2-나프틸티오)니코틴산.
제 1 항에 있어서, 인간 피부의 갈색화 또는 탠닝 (tanning) 을 촉진하기 위해 사용되는 방법.
제 1 항에 있어서, 인간 모발의 착색을 촉진하기 위해 사용되는 방법.
제 1 항에 있어서, 상기 화합물이 조성물의 중량에 대해 상기 화합물 0.001 내지 30 중량 % 를 포함하는 국소 적용가능한 조성물 내에 포함되는 방법.
제 1 항에 있어서, 상기 화합물의 양이 조성물의 중량에 대해 0.5 내지 15 % 의 범위인 방법.
하기를 포함하는, 국소 적용시 인간의 피부 및/또는 모발의 색소 침착을 변경시키는 약제학적/화장용/피부학적 조성물:

(i) 인간의 피부 및/또는 모발의 색소 침착을 변경시키기 위한 유효량의 하나 이상의 치환 방향족 또는 복소환식 카르복실계 화합물, 그것의 유도체 또는 약제학적으로 허용가능한 염 (단, 상기 화합물은 유리 또는 보호 페놀, 나프톨, 티오페놀, 또는 티오나프톨기를 포함하지 않음); 및

(ii) 약제학적으로, 화장용으로, 또는 피부학적으로 허용가능한 담체.
제 8 항에 있어서, 상기 화합물이 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 조성물:

4-[1-(5,6,7,8-테트라히드로-5,5,8,8-테트라메틸-2-나프틸)에테닐]벤조산;

3-[3-(5,5,8,8-테트라메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일)-페닐]-아크릴산;

3-[3-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일)-페닐]-부트-2-엔산;

6-[1-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일)-시클로프로필]-니코틴산;

3-[3-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일)-페닐]-아크릴산;

4-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-카르보닐)-벤조산;

4-(3-브로모-5,5,8,8-테트라메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일옥시)-벤조산;

5-[(E)-2-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일)-프로펜일]-티오펜-3-카르복실산;

3-[3-(5,5,8,8-테트라메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일술파닐)-페닐]-아크릴산;

6-(3-부틸-5,5,8,8-테트라메틸-5,6,7,8-테트라히드로-나프탈렌-2-일술파닐)-니코틴산;

4-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-2-나프틸티오)벤조산;

3-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-2-나프틸)페닐 프로피온산; 및

6-(3,5,5,8,8-펜타메틸-5,6,7,8-테트라히드로-2-나프틸티오)니코틴산.
제 8 항에 있어서, 상기 화합물의 양이 조성물의 중량에 대해 0.001 내지 3 중량 % 의 범위인 조성물.
제 8 항에 있어서, 상기 화합물의 양이 조성물의 중량에 대해 0.5 내지 15 중량 % 의 범위인 조성물.
제 8 항에 있어서, 크림, 밀크, 크림-겔, 유체 로숀, 수중유 유화액, 유중수 유화액, 및 매개체 분산액으로 이루어진 군으로부터 선택되는 국소 적용에 적절한 형태인 조성물.
제 8 항에 있어서, 피부 및/또는 모발 색소 침착에 영향을 주는 다른 화합물을 포함하는 조성물.
제 8 항에 있어서, 이온성 또는 비이온성 농후제, 연화제, 항산화제, 불투명화제, 안정화제, 점활제, UV-A 및/또는 UV-B 영역에서 활성인 유기 자외선차단제, 광보호 무기 안료 및 비안료 (non-pigment), 보습제, 비타민, 방향제, 보존제, 충진제, 봉쇄제, 염료, 및 착색제로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 대체물을 추가로 함유하는 조성물.
하기 단계를 포함하는 인간의 피부 및/또는 모발의 색소 침착을 변경 (증가 또는 감소) 시키는 화합물 또는 화합물들의 배합물을 선택하기 위한 실험실적 (in vitro) 방법:

(i) 화합물 또는 화합물들의 배합물과 2 개 이상의 멜라닌 세포 배양액을 접촉시켜, 인간의 피부 및/또는 모발의 색소 침착에 대한 그것의 효과를 평가하고;

(ii) 상기 화합물 또는 화합물들의 배합물이 없는 것을 제외하고는 상기 배양액과 동일한 조건 하에서 배양된, 대조군 멜라닌 세포에 대해, 상기 배양액 중 하나에 포함된 멜라닌 세포의 증식에 대한 상기 화합물 또는 화합물들의 배합물의 효과를 측정하고;

(iii) (ii) 단계와 동시에 또는 실질적으로 동시에, 상기 화합물 또는 화합물들의 배합물로 배양된, 두 번째 배양액에 포함된 세포의 멜라닌 함량을 측정하고, 그 멜라닌 함량을 상기 화합물 또는 화합물들의 배합물이 없는 것을 제외하고는 동일한 조건하에서 성장한, 대조군 배양액과 비교하고;

(iv) 만약 존재한다면, 멜라닌 세포의 멜라닌 생성 (증가 또는 감소) 에 대한 화합물(들) 의 효과를 구하기 위해, 단계 (ii) 및 (iii) 에서 수득한 데이타를 비교하고, 상기 배양액 내에 포함된 멜라닌 세포의 수에 기초한 상기 데이타를 표준화함.
제 15 항에 있어서, 상기 멜라닌 세포 배양액이 인간의 멜라닌 세포를 포함하는 방법.
제 16 항에 있어서, 상기 인간의 멜라닌 세포가 신생아의 피부로부터 수득되는 방법.
제 15 항에 있어서, 단계 (ii) 가 상기 제 1 배양액 내 멜라닌 세포의 증식을 흡광도에 의해 측정하는 것을 포함하는 방법.
제 18 항에 있어서, 단계 (ii) 가 (MTS) 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-5-(3-카르복시메톡시페닐)-2-(4-술포페닐)-2H-테트라졸륨 용액으로 상기 세포를 처리하고, 상기 MTS-처리된 세포의 흡광도를 490 nm 에서 측정하는 것을 포함하는 방법.
제 15 항에 있어서, 단계 (iii) 에서 세포를 용리시키고, 세포를 알칼리 용액으로 처리하고, 405 nm 에서 흡광도를 측정함으로써, 거기에 포함된 알칼리 용해성 멜라닌의 양을 구하는 방법.
제 15 항에 있어서, 상기 화합물 또는 화합물들의 배합물로 처리되지 않은 대조군 멜라닌 세포 배양액에 대해 멜라닌 함량을 20 % 이상 변경시키는 것에 기초하여, 상기 화합물 또는 화합물들의 배합물을 선택하는 방법.
제 21 항에 있어서, 상기 화합물 또는 화합물들의 배합물이 대조군 멜라닌 세포 배양액에 대한 멜라닌 함량을 50 % 이상 변화시키는 방법.
제 22 항에 있어서, 상기 화합물 또는 화합물들의 배합물이 대조군 멜라닌 세포 배양액에 대한 멜라닌 함량을 150 % 이상 변화시키는 방법.
제 22 항에 있어서, 상기 화합물 또는 화합물들의 배합물이 멜라닌 함량을 250 % 이상 변화시키는 방법.
제 1 항에 있어서, 상기 화합물이 RXR 에 대한 활성을 나타내는 방법.
제 8 항에 있어서, 상기 화합물이 RXR 에 대한 활성을 나타내는 조성물.
제 25 항에 있어서, 상기 화합물이 5000 nM 미만의 RXR 에 대한 결합을 나타내는 방법.
제 26 항에 있어서, 상기 화합물이 5000 nM 미만의 RXR 에 대한 결합을 나타내는 조성물.