KR20010041765A

KR20010041765A - ＩｇＥ 항체생산 억제제 및 자기면역질환 억제제

Info

Publication number: KR20010041765A
Application number: KR1020007010011A
Authority: KR
Inventors: 고바야시후지오; 구와하라시게끼; 고모리따나루야스; 나이또고지; 이마다데루아끼; 요시까와쯔또무
Original assignee: 가마쿠라 아키오; 웰파이드 코포레이션
Priority date: 1998-03-11
Filing date: 1999-03-10
Publication date: 2001-05-25
Also published as: CA2323443A1; CN1160075C; EP1062949A4; CN1550232A; EP1062949A1; WO1999045928A1; CN1292700A; US6528514B1; AU2746999A

Abstract

하기 일반식 (1) 로 표시되는 복소환식 아미드 화합물 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 함유하는 것을 특징으로 하는 IgE 항체생산 억제제 및 자기면역질환 억제제:

[화학식 1]

[식중, R 은 수소, 알킬, -CHO, -COOH, 등을 나타내고; R⁵, R⁶, R⁷은 각각 수소, 알킬, 아릴 등을 나타내고; M 은 탄소 또는 질소를 나타내고; Y 는 아릴 등을 나타내고; Z 는 수소, 알킬, 아릴 등을 나타낸다].

Description

ＩｇＥ 항체생산 억제제 및 자기면역질환 억제제 {IgE ANTIBODY PRODUCTION INHIBITORS AND AUTOIMMUNE DISEASES INHIBITORS}

기관지 천식, 알레르기성 비염, 알레르기성 피부염 등의 알레르기 질환은 그 환자가 급증함에 수반하여 최근 사회문제로까지 발전하고 있다. 이들 알레르기 질환은 I 형 알레르기 반응으로서 분류되어 있으며, 그 발증 메카니즘은 일반적으로 이하와 같은 것으로 되어 있다.

즉, 제 1 단계에서, 체내에 항원이 침입하여 마크로파지, T 세포, B 세포 등의 상호작용에 의해 I 형 알레르기 반응에 깊이 관여하는 IgE 항체가 생산되고, 이 IgE 항체가 조직의 비만세포나 혈중의 호염기구가 갖는 리셉터에 결합하여 감작이 행해진다. 다음의 제 2 단계에서, 항원이 다시 침입해 오면, 이것이 리셉터에 결합하고 있는 IgE 항체와 결합하고, 이 항원항체반응이 계기가 되어 탈과립이 생기며, 히스타민이나 SRS-A 등의 화학전달물질이 세포외로 방출된다. 또한 제 3 단계에서, 방출된 화학전달물질이 그 평활근 수축작용, 모세관 투과성 촉진작용, 분비촉진작용 등에 기초하여 여러 가지의 알레르기 반응을 야기하게 된다.

이제까지 연구개발되어 상시되고 있는 알레르기 질환 치료제, 알레르기 질환 예방제는 그 대부분이 상기 제 2 단계 또는 상기 제 3 단계에 작용하는 약제였다. 알레르기 질환의 근본원인은 생체내에 IgE 항체가 생산되는 것에 있으며, 이 IgE 항체의 생산을 저지 또는 억제할 수 있는 약제가 있으면, 상기한 발증 메카니즘에 감안하여 원인치료적으로 절대의 효과를 갖는 약제를 기대할 수 있는 상황이다.

또, 전신성 홍반 낭창, 하시모또 갑상선염, 중증 근무력증, 류머티즘형 관절염, 기란-발레 증후군, 사구체 신장염, 전신성 엘리테마토데스 등의 자기면역질환은 세포성 면역 및 체액성 면역의 이상조절을 수반하며, 혈액중의 자기항원에 대한 T 세포, B 세포 및 마크로파지의 이펙터 기능의 이상이나 증강에 관여하고 있는 것이 많다. 이들 세포성분의 자기항원에 대한 활성화는 자기내성에 관련된 피드 백 기구의 파괴에 관계하는 것이라고도 생각되고 있다.

자기면역질환은 신체 각 부의 기관의 1 또는 2 이상의 특정부위에 증상을 나타내는 것인데, 그들 증상은 각 분위에서 많은 유사점을 갖고 있는 것이 특징적이다. 또, 그들 증상은 항상 만성적이고, 또한 때로는 불가해한 진정을 하거나 돌발적 재현을 하며, 다른 기관의 증상과도 연쇄반응이 있는 등의 특징적 경향을 나타내는 것이다.

이와 같은 자기면역질환에 있어서는, 혈액중에 있어서의 자기항체의 존재, 클래스 II 항원의 부적당한 발현, 마크로파지 활성화, 표적 기관으로의 T 세포 침윤 등이 일어난다고 되어 있다. 그러나, 자기면역질환의 활성화가 어떻게 하여 발생하는지에 대하여 그 계기 기구는 해명되어 있지 않으며, 자기면역질환의 진행의 기구도 명확히 되어 있지는 않다. 따라서, 자기면역질환의 예방법도 치료법도 매우 불만족스러운 상황에 있다.

이제까지 자기면역질환을 억제하기 위해 금염, 메트트렉세이트, 항말라리아약, 당질 코르티코이드 (메틸프레드니조론) 등의 약물의 투여 ; 혈장교환 치료법 ; 내성 유도법 등의 여러 가지의 치료법이 행해져 왔는데, 효력의 면에서, 또 부작용의 면에서 양호한 결과를 얻기에는 이르러 있지 않다.

그래서, 자기면역질환을 억제할 수 있고, 또한 부작용이 발생할 우려가 없는 약물의 개발이 급선무가 되고 있다.

본 발명은 특정한 구조식을 갖는 복소환식 아미드 화합물 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효성분으로서 함유하는 것을 특징으로 하는 IgE 항체생산 억제제 및 자기면역질환 억제제에 관한 것이다.

도 1 은 시험예 2의 관절염 (뒷다리 발바닥 용적) 의 억제효과의 결과를 나타내는 도면이다.

도 2 는 시험예 2의 관절염 (중증도 스코어) 의 억제효과의 결과를 나타내는 도면이다.

도 3 은 시험예 2의 항ssDNA 항체량의 측정결과를 나타내는 도면이다.

도 4 는 시험예 2의 항II형 콜라겐 항체량의 측정결과를 나타내는 도면이다.

발명의 상세한 개시

본 발명의 제 1 태양은 하기 일반식 (1) 로 표시되는 복소환식 아미드 화합물 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효성분으로서 함유하는 것을 특징으로 하는 IgE 항체생산 억제제이다.

[화학식 1]

[식중, R 은 수소원자, 알킬, -CHO, -COOH, -CONH₂, -COR¹, -COOR¹, -CONHOR¹, -CONHR¹, CONR¹R^1', -CONHSO₂R¹, -COSR¹, -COCOR², -COCOOR², -CONHCOOR², -COCONR³R⁴, -CSXR¹, -SO₂WR¹, -SO₂NR¹R^1'또는 -SO₂E 를 나타내고;

R¹, R^1'는 동일 또는 상이하며, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 헤테로사이클 또는 헤테로사이클알킬을 나타내고;

R², R³, R⁴는 동일 또는 상이하며, 수소원자, 알킬 또는 아릴알킬을 나타내고, -NR³R⁴에서의 R³과 R⁴는 하나가 되어 헤테로사이클을 나타내도 되고;

X 는 단결합, 산소원자, 황원자 또는 -NH- 를 나타내고;

W 는 단결합, -NH-, -NHCO-, -NHCOO- 또는 -NHCONH- 를 나타내고;

E 는 수산기 또는 아미노를 나타내고;

R⁵, R⁶, R⁷은 동일 또는 상이하며, 수소원자 또는 알킬을 나타내거나, 또는 R⁵, R⁶, R⁷중 하나는 아릴, 아릴알킬, 아릴알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로아릴알케닐을 나타내고, 나머지 2 개는 수소원자를 나타내며;

M 은 탄소원자 또는 질소원자를 나타내고, M 이 질소원자를 나타내는 경우에는 R⁶은 존재하지 않고;

Y 는 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴을 나타내고;

Z 는 수소원자, -CF₂R⁸, -CF₂CONR⁹R¹⁰, -CF₂COOR⁹, -COOR⁹, -CONR⁹R¹⁰, 하기식 (ⅰ) 로 표시되는 기, 하기식 (ⅱ) 로 표시되는 기, 또는 하기식 (ⅲ) 으로 표시되는 기를 나타내고;

R⁸은 수소원자, 할로겐, 알킬, 퍼플루오로알킬, 아미노알킬, 알킬아미노알킬, 디알킬아미노알킬, 알콕시알킬, 히드록시알킬, 아릴, 아릴알킬, 아릴알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로아릴알케닐을 나타내고; R⁹, R¹⁰은 동일 또는 상이하며, 수소원자, 알킬, 알케닐, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로사이클알킬, 아릴, 아릴알킬, 아릴알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로아릴알케닐을 나타내고, -NR⁹R¹⁰에서의 R⁹와 R¹⁰은 하나가 되어 헤테로사이클을 나타내도 되고;

[화학식 i]

[화학식 ii]

[화학식 iii]

식중, a, b, c, d 는 모두 탄소원자를 나타내거나, 또는 어느 하나는 질소원자를 나타내고, 나머지 3 개는 탄소원자를 나타내고;

R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴는 동일 또는 상이하며, 수소원자, 알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 할로겐, 트리플루오로메틸, 시아노, 니트로, -NR¹⁷R^17', -NHSO₂R¹⁷, -OR¹⁷, -COOR¹⁷, -CONHSO₂R¹⁷또는 -CONR¹⁷R^17'를 나타내며, 단, a, b, c, d 의 어느 하나가 질소원자를 나타내는 경우에는 당해 질소원자를 나타내는 a, b, c, d 에 결합하는 R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴는 존재하지 않고;

R¹⁵, R¹⁶은 동일 또는 상이하며, 수소원자, 알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 할로겐, 트리플루오로메틸, 시아노, 니트로, -NR¹⁷R^17', -NHSO₂R¹⁷, -OR¹⁷, -COOR¹⁷, -CONHSO₂R¹⁷또는 -CONR¹⁷R^17'를 나타내고;

R¹⁷, R^17'는 동일 또는 상이하며, 수소원자, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 트리플루오로메틸을 나타내고, -NR¹⁷R^17'에서의 R¹⁷과 R^17'는 하나가 되어 헤테로사이클을 나타내도 되고;

A 는 산소원자, 황원자 또는 -NR¹⁸- 를 나타내고; R¹⁸은 수소원자, 알킬, 시클로알킬 또는 시클로알킬알킬을 나타내고;

n 은 0 또는 1 을 나타내며;

그리고, 상기 알킬, 상기 시클로알킬, 상기 시클로알킬알킬, 상기 아릴, 상기 아릴알킬, 상기 아릴알케닐, 상기 헤테로아릴, 상기 헤테로아릴알킬, 상기 헤테로아릴알케닐, 상기 헤테로사이클 및 상기 헤테로사이클알킬은 1 개 이상의 치환기에 의해 치환되어 있어도 된다].

R, R¹, R^1', R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷, R^17'및 R¹⁸에서의 알킬로서는 특별히 한정되지 않지만, 탄소수 1 ∼ 6 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, n-펜틸, 이소펜틸, n-헥실 등을 들 수 있다.

R¹, R^1', R⁹, R¹⁰, R¹⁷, R^17', R¹⁸및 Y 에서의 시클로알킬로서는 특별히 한정되지 않지만, 탄소수 3 ∼ 7 의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸 등을 들 수 있다.

R¹, R^1', R⁹, R¹⁰, R¹⁷, R^17'및 R¹⁸에서의 시클로알킬알킬로서는 특별히 한정되지 않지만, 시클로알킬부가 상술한 것 등이고, 알킬부가 탄소수 1 ∼ 3 의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 시클로프로필메틸, 2-시클로부틸에틸, 3-시클로펜틸프로필, 시클로헥실메틸, 2-시클로헥실에틸, 시클로헵틸메틸 등을 들 수 있다.

R¹, R^1', R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷, R^17'및 Y에서의 아릴로서는 특별히 한정되지 않고, 예컨대 페닐, 나프틸 ; 인데닐 등의 오르토 융합한 이환식의 기로서, 8 ∼ 10 개의 환원자를 가지며, 적어도 하나의 환이 방향환인 것 등을 들 수 있다.

R¹, R^1', R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷및 R^17'에서의 아릴알킬로서는 특별히 한정되지 않지만, 아릴부가 상술한 것 등이고, 알킬부가 탄소수 1 ∼ 3 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 벤질, 페네틸, 3-페닐프로필, 1-나프틸메틸, 2-나프틸메틸, 2-(1-나프틸)에틸, 2-(2-나프틸)에틸, 3-(1-나프틸)프로필, 3-(2-나프틸)프로필 등을 들 수 있다.

R⁵, R⁶, R⁷에서의 아릴알케닐로서는 특별히 한정되지 않지만, 아릴부가 상술한 것 등이고, 알케닐부가 탄소수 2 ∼ 6 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 3-페닐-2-프로페닐, 4-페닐-3-부테닐, 5-페닐-4-펜테닐, 6-페닐-5-헥세닐, 3-(1-나프틸)-2-프로페닐, 4-(2-나프틸)-3-부테닐 등을 들 수 있다.

R⁸, R⁹, R¹⁰에서의 아릴알케닐로서는 특별히 한정되지 않지만, 아릴부가 상술한 것 등이고, 알케닐부가 탄소수 3 ∼ 6 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 3-페닐-2-프로페닐, 4-페닐-3-부테닐 등을 들 수 있다.

R¹, R^1', R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷, R^17'및 Y 에서의 헤테로아릴로서는 특별히 한정되지 않지만, 예컨대 탄소원자 및 1 ∼ 4 개의 헤테로원자 (산소원자, 황원자 또는 질소원자) 를 갖는 5 ∼ 6 원 환기 ; 이로부터 유도되는 8 ∼ 10 개의 환원자를 갖는 오르토 융합한 이환식 헤테로아릴 ; 벤즈유도체 ; 벤즈유도체에 프로페닐렌기, 트리메틸렌기, 또는 테트라메틸렌기를 융합하여 안내되는 것 ; 벤즈유도체의 N-옥시드 등이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 피롤릴, 푸릴, 티에닐, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 피라졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 1,3,5-옥사디아졸릴, 1,2,4-옥사디아졸릴, 1,2,4-티아디아졸릴, 피리딜, 피라닐, 피라지닐, 피리미지닐, 피리다지닐, 1,2,4-트리아지닐, 1,2,3-트리아지닐, 1,3,5-트리아지닐, 벤족사졸릴, 벤조티아졸릴, 벤조이미다졸릴, 티아나프테닐, 이소티아나프테닐, 벤조푸라닐, 이소벤조푸라닐, 클로메닐, 이소인돌릴, 인돌릴, 인다졸릴, 이소퀴놀릴, 퀴놀릴, 프타라지닐, 퀴녹사리닐, 퀴나졸리닐, 신놀리닐, 벤족사지닐 등을 들 수 있다.

R¹, R^1', R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷및 R^17'에서의 헤테로아릴알킬로서는 특별히 한정되지 않지만, 헤테로아릴부가 상술한 것 등이고, 알킬부가 탄소수 1 ∼ 3 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 2-피롤릴메틸, 2-피리딜메틸, 3-피리딜메틸, 4-피리딜메틸, 2-티에닐메틸, 2-(2-피리딜)에틸, 2-(3-피리딜)에틸, 2-(4-피리딜)에틸, 3-(2-피롤릴)프로필 등을 들 수 있다.

R⁵, R⁶, R⁷에서의 헤테로아릴알케닐로서는 특별히 한정되지 않지만, 헤테로아릴부가 상술한 것 등이고, 알케닐부가 탄소수 2 ∼ 6 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 3-(2-피리딜)-2-프로페닐, 4-(3-피리딜)-3-부테닐, 5-(2-피롤릴)-4-펜테닐, 6-(2-티에닐)-5-헥세닐 등을 들 수 있다.

R⁸, R⁹, R¹⁰에서의 헤테로아릴알케닐로서는 특별히 한정되지 않지만, 헤테로아릴부가 상술한 것 등이고, 알케닐부가 탄소수 3 ∼ 6 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 3-(2-피리딜)-2-프로페닐, 4-(2-피리딜)-3-부테닐 등을 들 수 있다.

R¹, R^1'에서의 헤테로사이클이란, 탄소원자 및 1 ∼ 4 개의 헤테로원자 (산소원자, 황원자 또는 질소원자) 를 갖는 4 ∼ 6 원 환기이다. 상기 헤테로사이클로서는 특별히 한정되지 않고, 예컨대 아제티지닐, 피롤리지닐, 피페리지닐, 피페리디노, 피페라지닐, 모르폴리닐, 모르폴리노, 티오모르폴리닐, 옥소티오모르폴리닐, 디옥소티오모르폴리닐, 테트라히드로피라닐, 디옥사시클로헥실 등을 들 수 있다.

-NR³R⁴, -NR⁹R¹⁰및 -NR¹⁷R^17'로 표시되는 헤테로사이클이란, 탄소원자 및 적어도 1 개의 질소원자를 가지며, 또한 다른 헤테로원자 (산소원자 또는 황원자) 를 갖고 있어도 되는 4 ∼ 6 원 환기이다. 상기 -NR³R⁴, -NR⁹R¹⁰및 -NR¹⁷R^17'로 표시되는 헤테로사이클로서는 특별히 한정되지 않고, 아제티지닐, 피롤리지닐, 피페리디노, 피페라지닐, 모르폴리노, 티오모르폴리노, 옥소티오모르폴리노, 디옥소티오모르폴리노 등을 들 수 있다.

R¹, R^1', R⁹및 R¹⁰에서의 헤테로사이클알킬로서는 특별히 한정되지 않지만, 헤테로사이클부가 상술한 R¹, R^1'에서의 헤테로사이클로서 예시한 것 등이고, 알킬부가 탄소수 1 ∼ 3 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 아제티지닐에틸, 피롤리지닐프로필, 피페리지닐메틸, 피페리디노에틸, 피페라지닐에틸, 모르폴리닐프로필, 모르폴리노메틸, 티오모르폴리닐에틸, 옥소티오모르폴리닐에틸, 디옥소티오모르폴리닐에틸, 테트라히드로피라닐프로필, 디옥사시클로헥실메틸 등을 들 수 있다.

R⁸, R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴, R¹⁵및 R¹⁶에서의 할로겐으로서는 특별히 한정되지 않고, 예컨대 불소, 염소, 브롬, 요오드 등을 들 수 있다.

R⁸에서의 퍼플루오로알킬로서는 특별히 한정되지 않지만, 탄소수 1 ∼ 6 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 트리플루오로메틸, 펜타플루오로에틸, 헵타플루오로프로필 등을 들 수 있다.

R⁸에서의 아미노알킬로서는 특별히 한정되지 않지만, 알킬부가 탄소수 1 ∼ 6 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 아미노메틸, 아미노에틸, 아미노프로필, 아미노부틸, 아미노펜틸, 아미노헥실 등을 들 수 있다.

R⁸에서의 알킬아미노알킬로서는 특별히 한정되지 않지만, 알킬부가 각각 탄소수 1 ∼ 6 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 메틸아미노메틸, 메틸아미노에틸, 에틸아미노프로필, 에틸아미노부틸, 메틸아미노펜틸, 메틸아미노헥실 등을 들 수 있다.

R⁸에서의 디알킬아미노알킬로서는 특별히 한정되지 않지만, 알킬부가 각각 탄소수 1 ∼ 6 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 디메틸아미노메틸, 디메틸아미노에틸, 디에틸아미노프로필, 디에틸아미노부틸, 디메틸아미노펜틸, 디메틸아미노헥실 등을 들 수 있다.

R⁸에서의 알콕시알킬로서는 특별히 한정되지 않지만, 알콕시부가 탄소수 1 ∼ 6 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 것이 바람직하며, 상기 알콕시부의 알킬부가 탄소수 1 ∼ 6 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 메톡시메틸, 메톡시에틸, 에톡시프로필, 에톡시부틸, 메톡시펜틸, 메톡시헥실 등을 들 수 있다.

R⁸에서의 히드록시알킬로서는 특별히 한정되지 않지만, 알킬부가 탄소수 1 ∼ 6 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 히드록시메틸, 히드록시에틸, 히드록시프로필, 히드록시부틸, 히드록시펜틸, 히드록시헥실 등을 들 수 있다.

R⁹및 R¹⁰에서의 알케닐로서는 특별히 한정되지 않지만, 탄소수 3 ∼ 6 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 2-프로페닐, 3-부테닐, 4-펜테닐, 5-헥세닐 등을 들 수 있다.

그리고, 상기 알킬, 상기 시클로알킬, 상기 시클로알킬알킬, 상기 아릴, 상기 아릴알킬, 상기 아릴알케닐, 상기 헤테로아릴, 상기 헤테로아릴알킬, 상기 헤테로아릴알케닐, 상기 헤테로사이클, 및 상기 헤테로사이클알킬은 이하에 나타내는 치환기 중 1 개 이상의 치환기에 의해 치환되어 있어도 된다.

상기 치환기로서는, 예컨대 할로겐, 수산기, 니트로, 시아노, 트리플루오로메틸, 알킬, 알콕시, 알킬티오, 포르밀, 아실옥시, 옥소, 페닐, 아릴알킬, -COOR^a, -CH₂COOR^a, -OCH₂COOR^a, -CONR^bR^c, -CH₂CONR^bR^c, -OCH₂CONR^bR^c, -COO(CH₂)₂NR^eR^f, -SO₂T¹, -CONR^dSO₂T¹, -NR^eR^f, -NR^gCHO, -NR^gCOT², -NR^gCOOT², -NR^hCQNRⁱR^j, -NR^kSO₂T³, -SO₂NR^lR^m, -SO₂NRⁿCOT⁴등을 들 수 있다.

상기 할로겐으로서는 특별히 한정되지 않고, 예컨대 상기 일반식 (1) 의 설명에서 예시한 것 등을 들 수 있다.

상기 알킬로서는 특별히 한정되지 않고, 예컨대 상기 일반식 (1) 의 설명에서 예시한 것 등을 들 수 있다.

상기 아릴알킬로서는 특별히 한정되지 않고, 예컨대 상기 일반식 (1) 의 설명에서 예시한 것 등을 들 수 있다.

상기 알콕시로서는 특별히 한정되지 않지만, 탄소수 1 ∼ 6 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 부톡시, 펜틸옥시, 헥실옥시 등을 들 수 있다.

상기 알킬티오로서는 특별히 한정되지 않지만, 탄소수 1 ∼ 6 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 메틸티오, 에틸티오, 프로필티오, 부틸티오, 펜틸티오, 헥실티오 등을 들 수 있다.

상기 아실옥시로서는 특별히 한정되지 않지만, 탄소수 1 ∼ 6 의 직쇄상 또는 분지쇄상의 것이 바람직하다. 구체적으로는, 예컨대 포르밀옥시, 아세틸옥시, 프로피오닐옥시, 부틸릴옥시, 발레릴옥시, 피발로일옥시, 헥사노일옥시 등을 들 수 있다.

R^a, R^b, R^c, R^d, R^e, R^f, R^g, R^h, Rⁱ, R^j, R^k, R^l, R^m및 Rⁿ은 수소원자, 알킬 또는 아릴알킬을 나타낸다. 상기 알킬로서는 특별히 한정되지 않고, 예컨대 상기 일반식 (1) 의 설명에서 예시한 것 등을 들 수 있다. 상기 아릴알킬로서는 특별히 한정되지 않고, 예컨대 상기 일반식 (1) 의 설명에서 예시한 것 등을 들 수 있다.

그리고, -NR^bR^c, -NR^eR^f, -NRⁱR^j및 -NR^lR^m은 당해 인접한 질소원자와 하나가 되어 헤테로사이클을 나타내도 된다. 상기 헤테로사이클로서는 특별히 한정되지 않고, 예컨대 상술한 -NR³R⁴, -NR⁹R¹⁰및 -NR¹⁷R^17'로 표시되는 헤테로사이클로서 예시한 것 등을 들 수 있다.

또한, -NR^eR^f는 =O 을 갖는 헤테로아릴을 나타내도 된다. 상기 헤테로아릴로서는 특별히 한정되지 않고, 예컨대 2-피롤리디논-1-일, 숙신이미드, 옥사졸리딘-2-온-3-일, 2-벤족사졸리논-3-일, 프탈이미드, 시스-헥사히드로프탈이미드 등을 들 수 있다.

T¹, T², T³및 T⁴는 상술한 R¹과 동일한 기를 나타낸다. T¹, T², T³및 T⁴는 추가로 상기 치환기에 의해 치환되어 있어도 된다.

Q 는 =O 또는 =S 를 나타낸다.

예컨대, 상기 일반식 (1) 의 R 이 알킬인 경우, R 이 -COR¹(R¹은 알킬) 인 경우, 당해 알킬이 -COOR^a에 의해 치환되어 있는 화합물을 들 수 있다.

또, 상기 일반식 (1) 의 Z 에 있어서, -CF₂CONR⁹R¹⁰은 -CF₂CON(R^9')-D¹-CONR¹⁹R²⁰으로 표시되는 기이어도 된다. 이 경우, R^9'는 수소원자, 알킬 또는 아릴알킬을 나타낸다. R¹⁹, R²⁰은 동일 또는 상이하며, 수소원자, 알킬, 알케닐, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로사이클알킬, 아릴, 아릴알킬, 아릴알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로아릴알케닐을 나타내고, -NR¹⁹R²⁰에서의 R¹⁹와 R²⁰은 하나가 되어 헤테로사이클을 나타내도 된다.

D¹은 하기식 (ⅳ) 로 표시되는 기, 하기식 (ⅴ) 로 표시되는 기, 또는 하기식 (ⅵ) 로 표시되는 기를 나타낸다.

[식중, R²¹, R²²는 동일 또는 상이하며, 수소원자, 알킬, 아릴알킬 또는 헤테로아릴알킬을 나타낸다. 또, R²¹과 R²²는 하나가 되어 탄소수 2 ∼ 6 의 메틸렌쇄를 나타내도 되고;

m 은 1, 2, 3, 4, 5 또는 6 을 나타내고;

G 는 단결합, 산소원자, 황원자 또는 -NR²³- 을 나타내고; R²³은 수소원자, 알킬 또는 아릴알킬을 나타내고;

p, r 은 동일 또는 상이하며, 0, 1, 2 또는 3 을 나타내고;

s, t 는 이들의 합이 1 ∼ 6 이 되는 정수를 나타낸다].

상기 알킬, 상기 아릴알킬, 상기 알케닐, 상기 시클로알킬, 상기 시클로알킬알킬, 상기 헤테로사이클알킬, 상기 아릴, 상기 아릴알킬, 상기 아릴알케닐, 상기 헤테로아릴, 상기 헤테로아릴알킬, 상기 헤테로아릴알케닐, 상기 헤테로사이클로서는 특별히 한정되지 않고, 예컨대 상기 일반식 (1) 의 설명에서 예시한 것 등을 들 수 있다. 이들은 추가로 상기 치환기에 의해 치환되어 있어도 된다.

또한, 상기 일반식 (1) 의 Z 에 있어서, -CF₂CONR⁹R¹⁰은 -CF₂CON(R^9'')-(CH₂)_u-COOR²⁴로 표시되는 기, 또는 -CF₂CON(R^9'')-D²로 표시되는 기이어도 된다. 이 경우, R^9''는 수소원자, 알킬 또는 아릴알킬을 나타낸다. R²⁴는 수소원자, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 헤테로사이클 또는 헤테로사이클알킬을 나타낸다. u 는 1, 2 또는 3 을 나타낸다. D²는 하기식 (ⅶ) 로 표시되는 기를 나타낸다.

[식중, R²⁵는 수소원자, 알킬, 알콕시 또는 할로겐을 나타낸다].

상기 알킬, 상기 시클로알킬, 상기 시클로알킬알킬, 상기 아릴, 상기 아릴알킬, 상기 헤테로아릴, 상기 헤테로아릴알킬, 상기 헤테로사이클, 상기 헤테로사이클알킬, 상기 알콕시, 상기 할로겐으로서는 특별히 한정되지 않고, 예컨대 상기 일반식 (1) 의 설명에서 예시한 것 등을 들 수 있다. 이들은 추가로 상기 치환기에 의해 치환되어 있어도 된다.

상기 일반식 (1) 로 표시되는 화합물은 -(CH₂)_n-Y 기가 결합하고 있는 부제탄소에 의해 광학활성체 및 라세미체로서 존재할 수 있는데, 당해 라세미체는 공지된 수법에 의해 각 광학활성체로 분리할 수 있다. 또, 상기 일반식 (1) 로 표시되는 화합물이 추가로 부가적인 부제탄소를 갖고 있는 경우에는 디아스테레오머 혼합물로서 또는 단일의 디아스테레오머로서 존재할 수 있다. 이들 또한 공지된 수법에 의해 각각 분리할 수 있다.

상기 일반식 (1) 로 표시되는 화합물은 다형 (polymorphism) 을 나타낼 수 있으며, 또 1 보다 많은 호변 이성체로서 존재할 수 있다. 또한, 상기 일반식 (1) 로 표시되는 화합물은, 예컨대 케톤용매화물, 수화물 등의 용매화물로서 존재할 수 있다. 따라서, 상기 일반식 (1) 로 표시되는 화합물은 상술한 어떠한 입체 이성체, 광학 이성체, 다형체, 호변 이성체, 용매화물 및 이들의 임의의 혼합물 등을 포함하는 것이다.

본 명세서에 있어서, 약리학적으로 허용되는 염으로서는 특별히 한정되지 않고, 이 분야에서 관용되고 있는 것을 사용할 수 있으며, 예컨대 염산, 황산, 질산, 인산, 불화 수소산, 브롬화 수소산 등의 광산의 염 ; 포름산, 아세트산, 타르타르산, 젖산, 시트르산, 푸말산, 말레인산, 숙신산, 메탄술폰산, 에탄술폰산, 벤젠술폰산, 톨루엔술폰산, 나프탈렌술폰산, 칸파술폰산 등의 유기산의 염 ; 나트륨, 칼륨, 칼슘 등의 알칼리 금속 또는 알칼리 토류금속의 염 등을 들 수 있다.

상기 일반식 (1) 로 표시되는 화합물은 키마아제 저해작용을 갖는 화합물로서, 예컨대 국제공개공보 (WO 96/39373 호), 일본 공개특허공보 평10-7661 호, PCT/JP97/03839 호 국제출원명세서, 일본 특허출원 평9-353572 호 특허명세서에 기재되어 있다. 이들 화합물의 제조방법도 상기 공보 및 상기 명세서에 기재되어 있다.

키마아제에 대해서는 비만세포에 국재하는 키마아제의 활성을 저해하면, IgE 수용체를 통한 당해 비만세포로부터의 히스타민의 유리가 억제되는 것이 알려져 있고 (Kido H. 들. Biochem. Int., 10 권, 863 ∼ 871 면. 1985 년), 또 일본 공개특허공보 평8-208654 호에는 히스타민 유리억제작용을 나타내는 키마아제 저해작용을 갖는 화합물이 개시되어 있다.

그러나, 본 발명에서의 복소환식 아미드 화합물은 우수한 키마아제 저해작용을 나타내지만, 그 히스타민 유리억제작용은 매우 약한 (1 mM 에서도 억제작용이 관찰되지 않는 화합물도 있음) 것이 본 발명자들의 연구과정에서 명확하게 되어 있고, 본 발명의 복소환식 아미드 화합물이 히스타민 유리억제작용과는 전혀 다른 매우 양호한 IgE 항체생산 억제작용을 갖는 것, 당해 작용에 기초하여 IgE 항체생산 억제제의 유효성분으로서 매우 유효한 것은 상기와 같은 히스타민 유리억제작용에 대한 지견으로부터는 전혀 안내할 수 없는 예상외의 발견이라고 할 수 있다.

본 발명의 IgE 항체생산 억제제는 상기 일반식 (1) 로 표시되는 복소환식 아미드 화합물 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효성분으로 하고, 이것을 제제화하는데 있어서 통상 사용되는 적당한 희석제나 다른 첨가제와 함께 적당한 제제형태로 조제한 후, 그 제제형태에 따른 적당한 투여방법에 의해 인간 또는 동물에 대하여 투여할 수 있다.

본 발명의 상기 일반식 (1) 로 표시되는 복소환식 아미드 화합물 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 의약 또는 동물약으로서 투여하는 경우, 그대로 또는 의약적으로 허용되는 무독성 또한 불활성의 담체중에, 예컨대 0.1 ∼ 99.5 %, 바람직하게는 0.5 ∼ 90 % 함유하는 의약조성물로 하여 인간을 포함하는 동물에 투여된다.

상기 담체로서는 고형, 반고형 또는 액상의 희석제, 충전제, 및 그 외의 처방용 조제 1 종 이상이 사용된다. 본 발명의 화합물 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염은 투여단위형태로 투여하는 것이 바람직하다. 본 발명의 화합물 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염은 경구적 또는 비경구적으로 안전하게 투여할 수 있다. 비경구의 투여형태로서 조직내 투여 등의 국소투여, 피하투여, 근육내 투여, 동ㆍ정맥내 투여 등을 들 수 있다.

경구투여는 통상의 방법에 따라 조제한 고형 또는 액상의 용량단위, 예컨대 말제, 산제, 정제, 당의제, 캡슐제, 과립제, 현탁제, 액제, 시럽제, 드롭제, 설하정(舌下錠) 그 외의 제형에 의해 행할 수 있다.

필요에 따라, 경구투여를 위한 용량단위처방은 마이크로캡슐화해도 된다. 이 처방은 또 피복을 하거나, 고분자ㆍ왁스 등 속에 매립함으로써 작용시간의 연장이나 지속방출을 초래할 수도 있다.

비경구투여는 통상의 방법에 의해 조제된 액상 용량단위형태, 예컨대 용액이나 현탁액 형태의 주사제를 사용함으로써 행할 수 있다.

이들 투여방법 중, 경구투여, 주사에 의한 정맥내 투여가 바람직하다. 투여시에는 이들 투여방법에 적합한 제형으로 투여되는 것은 물론이다.

본 발명의 화합물의 투여량은 연령, 체중 등의 환자의 상태, 병의 성질과 정도 등을 고려한 후 설정하는 것이 바람직한데, 자기면역질환 억제제로서 인간으로 경구적으로 투여하는 경우에는 성인에 대하여 0.1 ∼ 100 ㎎/㎏/일, 바람직하게는 0.5 ∼ 10 ㎎/㎏/일을 1 회 ∼ 수회에 걸쳐 투여하면 되고, 비경구적으로 투여하는 경우에는 투여방법에 따라 크게 다른데, 통상 0.001 ∼ 10 ㎎/㎏/일을 1 회 ∼ 수회에 걸쳐 투여하면 된다.

본 발명의 제 1 태양인 IgE 항체생산 억제제는 바람직하게는 기관지 천식 예방제, 알레르기성 비염 예방제, 알레르기성 피부염 예방제, 기관지 천식 치료제, 알레르기성 비염 치료제 또는 알레르기성 피부염 치료제이다.

기관지 천식 예방제, 알레르기성 비염 예방제, 알레르기성 피부염 예방제, 기관지 천식 치료제, 알레르기성 비염 치료제 또는 알레르기성 피부염 치료제로서 경구적으로 투여하는 경우에는 0.1 ∼ 100 ㎎/㎏/일, 바람직하게는 0.1 ∼ 1 ㎎/㎏/일을 1 회 ∼ 수회에 걸쳐 투여하면 되고, 비경구적으로 투여하는 경우에는 통상 0.001 ∼ 1 ㎎/㎏/일을 1 회 ∼ 수회에 걸쳐 투여하면 된다.

본 발명의 IgE 항체생산 억제제는 인간 이외의 동물, 예컨대 닭, 돼지, 소 등의 가금 및 가축동물 및 어류에 대해서도 경구적 또는 비경구적으로 투여할 수 있다. 경구투여하는 경우, 일반적으로는 통상 사용되고 있는 담체 (예컨대 탈지 쌀겨, 탈지 대두분, 밀기울, 젖당, 물 등) 를 혼합한 것을 투여하거나, 또는 이와 같이 하여 혼합물로 한 것, 또는 본 발명 화합물 단독을 동물사료 또는 물과 혼합하여 투여하는 방법이 바람직하다. 상기 동물사료로서는 동물의 사료로서 일반적으로 사용되는 것이면 어느것이나 되고, 예컨대 옥수수, 밀기울, 쌀, 보리, 면실박(粕), 마이로, 대두박, 어분, 탈지 쌀겨, 유지, 탄산칼슘, 인산칼슘, 염화나트륨, 비타민제, 황산마그네슘, 황산철 등을 들 수 있으며, 이들의 일부 또는 전부가 혼합하여 사용된다.

본 발명 화합물의 사료중의 함유량은 1 일당 50 ∼ 2000 ppm 의 범위가 적당하다.

비경구투여하는 경우에는 상기 의약으로서 비경구투여하는 경우와 동일한 방법으로 사용할 수 있다.

본 발명 화합물의 투여량은 통상 경구투여의 경우, 10 ∼ 400 ㎎/㎏/일이고, 비경구투여의 경우, 5 ∼ 200 ㎎/㎏/일이고, 이것을 수일간 연속투여하는 것이 바람직하다.

본 발명의 제 2 태양은 상기 일반식 (1) 로 표시되는 복소환식 아미드 화합물 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효성분으로서 함유하는 것을 특징으로 하는 자기면역질환 억제제이다.

본 명세서에 있어서, 「자기면역질환 억제제」란, 일반적으로 받아들여지고 있는 의미를 포함하도록 정의되며, 이것에는 자기면역질환의 진행을 예방하기 위한 약제와 치료하기 위한 약제의 양측을 포함한다.

본 발명에 있어서, 자기면역질환으로서는 전신성 홍반 낭창, 하시모또 갑상선염, 중증 근무력증, 류머티즘형 관절염, 기란-발레 증후군, 사구체 신장염, 전신성 엘리테마토데스, 전신성 홍반 낭창, 하시모또 갑상선염, 중증 근무력증, 류머티즘형 관절염, 기란-발레 증후군, 사구체 신장염 또는 전신성 엘리테마토데스 등을 들 수 있다.

본 발명의 상기 일반식 (1) 로 표시되는 복소환식 아미드 화합물 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염은 나중에 시험예에서 상세히 서술하는 바와 같이, 매우 양호한 관절염 억제작용, 자기항체생산 억제작용 등을 갖는다. 따라서, 본 발명에 관계되는 상기 일반식 (1) 로 표시되는 복소환식 아미드 화합물 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염은 자기면역질환 억제제의 유효성분으로서 매우 유용하다.

본 발명의 자기면역질환 억제제는 상기 일반식 (1) 로 표시되는 복소환식 아미드 화합물 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효성분으로 하고, 이것을 제제화하는데 있어서 통상 사용되는 적당한 희석제나 다른 첨가제와 함께 적당한 제제형태로 조제한 후, 그 제제형태에 따른 적당한 투여방법에 의해 인간 또는 동물에 대하여 투여할 수 있다.

본 발명의 제 2 태양의 자기면역질환 억제제의 제제법, 제제형태, 투여형태, 투여량 등은 본 발명의 제 1 태양에 준한다.

본 발명의 제 2 태양인 자기면역질환 억제제는 바람직하게는 전신성 홍반 낭창 예방제, 하시모또 갑상선염 예방제, 중증 근무력증 예방제, 류머티즘형 관절염 예방제, 기란-발레 증후군 예방제, 사구체 신장염 예방제, 전신성 엘리테마토데스 예방제, 전신성 홍반 낭창 치료제, 하시모또 갑상선염 치료제, 중증 근무력증 치료제, 류머티즘형 관절염 치료제, 기란-발레 증후군 치료제, 사구체 신장염 치료제 또는 전신성 엘리테마토데스 치료제이다.

본 발명의 IgE 항체생산 억제제 및 자기면역질환 억제제를 상기 경구적 또는 비경구적으로 치료 및/또는 예방의 목적을 위해 인간을 포함하는 동물에 적용하고, 처리 (Treating) 하는 방법 또한 본 발명의 하나이다.

상기 본 발명의 IgE 항체생산 억제제 및 자기면역질환 억제제를 공업적 생산 (Manufacturing) 하기 위해 본 발명에 관계되는 상기 일반식 (1) 로 표시되는 복소환식 아미드 화합물 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 사용하는 것 또한 본 발명의 하나이다.

본 발명의 IgE 항체생산 억제제 및 자기면역질환 억제제는 상기 일반식 (1) 로 표시되는 복소환식 아미드 화합물 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효성분으로서 함유하고 있는 한, 그 외의 성분을 함유하거나 하지 않거나에 관계없이 본 발명의 범위에 들어가는 것이다.

본 발명의 IgE 항체생산 억제제 및 자기면역질환 억제제는 의약조성물로서 인간을 포함하는 동물에 투여할 수 있는 것이므로, 각각 IgE 항체생산 억제 의약조성물 및 자기면역질환 억제 의약조성물이라고 할 수 있는 것이다.

발명의 요약

본 발명은 상기와 같은 현 상황에 감안하여 의약품으로서 유용한 IgE 항체생산 억제작용을 갖는 물질을 유효성분으로 하는 IgE 항체생산 억제제를 제공하는 것을 목적으로 하는 것이다. 또한, 본 발명은 상기와 같은 현 상황에 감안하여 완전히 새로운 자기면역질환 억제제를 창성하는 것을 목적으로 하는 것이다.

X 는 단결합, 산소원자, 황원자 또는 -NH- 를 나타내고;

W 는 단결합, -NH-, -NHCO-, -NHCOO- 또는 -NHCONH- 를 나타내고;

E 는 수산기 또는 아미노를 나타내고;

R⁵, R⁶, R⁷은 동일 또는 상이하며, 수소원자 또는 알킬을 나타내거나, 또는 R⁵, R⁶, R⁷중 하나는 아릴, 아릴알킬, 아릴알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로아릴알케닐을 나타내고, 나머지 2 개는 수소원자를 나타내고;

M 은 탄소원자 또는 질소원자를 나타내고, M 이 질소원자를 나타내는 경우에는 R⁶은 존재하지 않으며;

Y 는 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴을 나타내고;

R⁸은 수소원자, 할로겐, 알킬, 퍼플루오로알킬, 아미노알킬, 알킬아미노알킬, 디알킬아미노알킬, 알콕시알킬, 히드록시알킬, 아릴, 아릴알킬, 아릴알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로아릴알케닐을 나타낸다. R⁹, R¹⁰은 동일 또는 상이하며, 수소원자, 알킬, 알케닐, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로사이클알킬, 아릴, 아릴알킬, 아릴알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로아릴알케닐을 나타내고, -NR⁹R¹⁰에서의 R⁹와 R¹⁰은 하나가 되어 헤테로사이클을 나타내도 되고;

식 중, a, b, c, d 는 모두 탄소원자를 나타내거나, 또는 어느 하나는 질소원자를 나타내고, 나머지 3 개는 탄소원자를 나타내고;

R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴는 동일 또는 상이하며, 수소원자, 알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 할로겐, 트리플루오로메틸, 시아노, 니트로, -NR¹⁷R^17', -NHSO₂R¹⁷, -OR¹⁷, -COOR¹⁷, -CONHSO₂R¹⁷또는 -CONR¹⁷R^17'를 나타내고; 단, a, b, c, d 의 어느 하나가 질소원자를 나타내는 경우에는 당해 질소원자를 나타내는 a, b, c, d 에 결합하는 R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴는 존재하지 않고;

A 는 산소원자, 황원자 또는 -NR¹⁸- 를 나타내고, R¹⁸은 수소원자, 알킬, 시클로알킬 또는 시클로알킬알킬을 나타내고;

n 은 0 또는 1 을 나타내며;

본 발명의 제 1 태양은 바람직하게는 IgE 항체생산 억제제가 기관지 천식 예방제, 알레르기성 비염 예방제, 알레르기성 피부염 예방제, 기관지 천식 치료제, 알레르기성 비염 치료제 또는 알레르기성 피부염 치료제이다.

본 발명의 제 2 태양은 바람직하게는 자기면역질환 억제제가 전신성 홍반 낭창 예방제, 하시모또 갑상선염 예방제, 중증 근무력증 예방제, 류머티즘형 관절염 예방제, 기란-발레 증후군 예방제, 사구체 신장염 예방제, 전신성 엘리테마토데스 예방제, 전신성 홍반 낭창 치료제, 하시모또 갑상선염 치료제, 중증 근무력증 치료제, 류머티즘형 관절염 치료제, 기란-발레 증후군 치료제, 사구체 신장염 치료제 또는 전신성 엘리테마토데스 치료제이다.

발명을 실시하기 위한 최량의 형태

이하에 본 발명의 시험예, 제조실시예 등을 들어 본 발명을 더욱 상세하게 설명하는데, 본 발명은 이들 실시예에만 한정되는 것은 아니다.

그리고, 참고예 및 실시예중,¹H-NMR 은 500 MHz 로 측정하였다.¹H-NMR 의 케미컬시프트는 내부표준으로서 TMS 를 사용하고, 상대적인 델타 (δ) 값을 parts per million (ppm) 으로 나타냈다. 커플링정수는 자명한 다중도를 헤르츠 (Hz) 로 나타내고, s (싱글렛), d (더블렛), t (트리플렛), q (쿼텟), m (멀티플렛), dd (더블 더블렛), brs (브로드 싱글렛), ABq (AB 형 쿼텟) 등으로 나타냈다. 박층 크로마토그래피 (TLC) 및 칼럼 크로마토그래피는 메르크샤 제조의 실리카겔을 사용하여 행하였다. 농축은 도쿄리까기까이샤 제조의 로터리 이배퍼레이터를 사용하여 행하였다.

참고예 1 [5-벤질옥시카르보닐아미노-2-(4-플루오로페닐)-6-옥소-1,6-디히드로-1-피리미지닐]아세트산의 합성

공정 (1) : 4-플루오로벤조니트릴 (50.9 g, 0.420 몰) 의 에탄올 (500 ㎖) 용액중에 빙냉하, 염화수소를 불어넣어 포화시킨 후, 실온에서 21 시간 교반하였다. 감압하에 용매를 증류제거하고, 얻어진 결정을 에테르로 세정하고, 진공하에서 건조시켜 목적화합물인 에틸4-플루오로벤즈이미데이트히드로클로리드를 백색 결정으로서 78.8 g (수율 92 %) 얻었다.

공정 (2) : 공정 (1) 의 목적화합물 (78.8 g, 0.387 몰) 의 에탄올 (350 ㎖) 용액에 빙냉하, 아미노아세토알데히드디에틸아세탈 (62 ㎖, 0.43 몰) 을 적가한 후, 5 ℃ 에서 16 시간 교반하였다. 에탄올을 감압하에 증류제거하고, 얻어진 농축물을 1 N 수산화나트륨 수용액 (750 ㎖) 에 첨가하여 클로로포름으로 추출하였다. 추출액을 황산마그네슘으로 건조시켜 감압하에 용매를 증류제거하고, 목적화합물인 N-(2,2-디에톡시에틸)-4-플루오로벤즈아미딘을 포함하는 무색 유상물질을 얻었다.

공정 (3) : 공정 (2) 의 목적화합물 (상기 반응에서 얻어진 조(粗)생성물) 의 에탄올 (150 ㎖) 용액에 실온에서 디에틸에톡시메틸렌마로네이트 (86 ㎖, 0.43 몰) 를 적가하였다. 적가후, 100 ℃ 로 가온하여 3 시간 교반하였다. 감압하에 용매를 증류제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (1:1 아세트산에틸-헥산) 에 의해 분리정제하여 목적화합물인 에틸1-(2,2-디에톡시에틸)-2-(4-플루오로페닐)피리미딘-6(1H)-온-5-카르복실레이트를 담황색 유상물질로서 135 g [공정 (1) 의 목적화합물로부터의 수율 92 %] 얻었다.

공정 (4) : 공정 (3) 의 목적화합물 (135 g, 0.358 몰) 의 피리딘 (480 ㎖) 용액에 요오드화 리튬 (120 g, 0.895 몰) 을 첨가하고, 100 ℃ 로 가온하여 16 시간 교반하였다. 감압하에서 유기용매를 증류제거한 후, 톨루엔 (100 ㎖) 을 첨가하고, 남은 흔적의 피리딘을 감압하에서 증류제거하였다. 잔사를 포화탄산수소나트륨 수용액 (500 ㎖) 에 첨가하고, 아세트산에틸로 카르복실산 이외의 유기물을 추출하였다. 불용물을 여과에 의해 제거한 후, 수층을 분리하였다. 그 수층과 불용물을 합치고, 2 N 염산 (약 1L) 을 첨가하여 pH 를 3 으로 하고, 아세트산에틸로 추출하였다. 추출액을 포화식염수로 세정하고, 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압하에서 용매를 증류제거하여 목적화합물인 1-(2,2-디에톡시에틸)-2-(4-플루오로페닐)피리미딘-6(1H)-온-5-카르복실산을 포함하는 다갈색 유상물질을 얻었다.

공정 (5) : 공정 (4) 의 목적화합물 (상기 반응에서 얻어진 조생성물) 및 트리에틸아민 (87.5 ㎖, 0.63 몰) 의 1,4-디옥산 (900 ㎖) 용액에 실온에서 디페닐포스포릴아지드 (84 ㎖, 0.37 몰) 를 적가하였다. 적가후, 110 ℃ 로 가온하여 2 시간 교반하였다. 실온까지 냉각하고, 벤질알콜 (44 ㎖, 0.43 몰) 을 첨가하였다. 반응액을 다시 110 ℃ 로 가온하여 4 시간 교반한 후, 실온까지 냉각하고, 1,4-디옥산을 감압하에 증류제거하였다. 잔사를 포화염화암모늄 수용액 (1L) 에 첨가하여 아세트산에틸로 추출하였다. 추출액을 1 N 수산화나트륨 수용액 및 포화식염수로 순차적으로 세정하고, 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압하에 농축하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (1:2 아세트산에틸-헥산) 에 의해 분리하여 목적화합물인 [5-벤질옥시카르보닐아미노-2-(4-플루오로페닐)-1,6-디히드로-6-옥소-1-피리미지닐]아세토알데히드디에틸아세탈과 벤질알콜의 혼합물을 담황색 유상물질로서 126 g (목적화합물로서의 수율 69 %) 얻었다.

공정 (6) : 공정 (5) 의 목적화합물 [벤질알콜과의 혼합물 126 g, 공정 (5) 의 목적화합물로서 0.247 몰] 의 THF (650 ㎖) 용액에 1 N 염산 (500 ㎖) 을 첨가하여 70 ℃ 에서 14 시간 교반하였다. 반응액을 실온까지 냉각하고, 감압하에 THF 를 증류제거하였다. 얻어진 농축액에 포화탄산수소나트륨 수용액을 첨가하여 pH 7 로 한 후, 아세트산에틸로 추출하였다. 추출액을 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압하에서 용매를 증류제거하여 목적화합물인 [5-벤질옥시카르보닐아미노-2-(4-플루오로페닐)-1,6-디히드로-6-옥소-1-피리미지닐]아세토알데히드를 포함하는 백색 고체를 얻었다.

공정 (7) : 공정 (6) 의 목적화합물 (상기 반응에서 얻어진 조생성물), 2-메틸-2-프로판올 (900 ㎖) 및 2-메틸-2-부텐 (106 ㎖, 1.00 몰) 의 혼합물에 인산 2수소나트륨 2수화물 (180 g, 1.15 몰) 및 아염소산나트륨 (80 % 함유, 136 g, 1.20 몰) 의 수 (400 ㎖) 용액을 첨가하고, 실온에서 2 시간 교반하였다. 불용물을 여과에 의해 제거하고, 감압하에 유기용매를 증류제거하고, 얻어진 농축액을 2 N 염산 (650 ㎖) 에 첨가한 후, 아세트산에틸로 추출하였다. 추출액을 포화식염수로 세정하고, 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압하에 농축하였다. 잔사에 아세트산에틸-헥산 (1:1) 을 첨가하여 결정화시키고, 표제화합물인 [5-벤질옥시카르보닐아미노-2-(4-플루오로페닐)-6-옥소-1,6-디히드로-1-피리미지닐]아세트산을 백색 고체로서 10.6 g 얻었다. 먼저 얻어진 불용물을 1 N 염산 (500 ㎖) 에 첨가하여 아세트산에틸로 추출하고, 추출액을 포화식염수로 세정하여 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압하에서 용매를 증류제거하여 추가로 표제화합물인 [5-벤질옥시카르보닐아미노-2-(4-플루오로페닐)-6-옥소-1,6-디히드로-1-피리미지닐]아세트산을 백색 고체로서 67.7 g (합계 수율 80 %) 얻었다.

얻어진 화합물의¹H-NMR, IR 측정치를 이하에 나타냈다.

참고예 2 2-아미노-1-히드록시-1-[5-(메톡시카르보닐)벤즈옥사졸-2-일]-3-페닐프로판의 합성

공정 (1) : 4-히드록시-3-니트로벤조산 (15.8 g, 86.3 밀리몰) 의 1,2-디클로로에탄 (150 ㎖) 용액에 메탄올 (14 ㎖) 및 농황산 (0.5 ㎖) 을 첨가하고, 80 ℃ 로 가온하여 교반하였다. 도중에서 메탄올 (9 ㎖) 을 추가하여 21 시간 교반하였다. 반응액을 포화탄산수소나트륨 수용액 (400 ㎖) 에 첨가하고, 클로로포름으로 추출하였다. 추출액을 포화식염수로 세정하여 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압하에서 농축하고, 목적화합물인 4-히드록시-3-니트로벤조산메틸을 황색 고체로서 11.5 g (수율 68 %) 얻었다.

공정 (2) : 공정 (1) 의 목적화합물 (11.4 g, 57.8 밀리몰) 의 아세트산에틸 (300 ㎖) 용액에 질소분위기하, 10 % 파라듐탄소 (1.80 g) 를 첨가하고, 수소분위기하, 실온에서 18 시간 교반하였다. 촉매를 여과로 제거하고, 아세트산에틸로 세정한 후, 여과액을 감압하에서 농축하였다. 얻어진 고형물을 에테르-헥산 (1:1) 으로 세정하고, 진공하에서 건조시켜 3-아미노-4-히드록시벤조산메틸을 담갈색 고체로서 9.34 g (수율 97 %) 얻었다.

공정 (3) : 클로로포름 (10 ㎖) 과 에탄올 (9.5 ㎖, 0.16 몰) 의 혼합액에 빙냉하, 염화아세틸 (10 ㎖, 0.14 몰) 을 10 분간 적가하였다. 0 ℃ 에서 30 분간 교반한 후, 공정 (2) 의 목적화합물 (1.50 g, 4.83 밀리몰) 의 클로로포름 (10 ㎖) 용액을 첨가하였다. 0 ℃ 에서 3 시간 교반한 후, 용매를 감압하에서 증류제거하여 담황색 고체를 얻었다. 얻어진 고체에 에탄올 (35 ㎖) 과 3-아미노-4-히드록시벤조산메틸 (1.94 g, 11.6 밀리몰) 을 첨가하고, 90 ℃ 로 가온하여 18 시간 교반하였다. 용매를 감압하에서 증류제거한 후, 얻어진 농축물을 0.5 N 수산화나트륨 수용액 (50 ㎖) 에 첨가하여 아세트산에틸로 추출하였다. 추출액을 0.5 N 염산, 포화탄산수소나트륨 수용액 및 포화식염수로 순차적으로 세정하고, 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압하에서 농축하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (100:1 클로로포름-메탄올) 에 의해 분리정제하여 2-벤질옥시카르보닐아미노-1-히드록시-1-[5-(메톡시카르보닐)벤즈옥사졸-2-일]-3-페닐프로판을 담갈색 고체로서 1.80 g (수율 81 %) 얻었다.

공정 (4) : 공정 (3) 의 목적화합물 (1.65 g, 3.58 밀리몰) 의 메탄올 (25 ㎖) 용액에 질소분위기하, 10 % 파라듐탄소 (378 ㎎) 를 첨가하고, 수소분위기하, 실온에서 24 시간 교반하였다. 촉매를 여과로 제거하고, 메탄올로 세정한 후, 여과액을 감압하에서 농축하여 2-아미노-1-히드록시-1-[5-(메톡시카르보닐)벤즈옥사졸-2-일]-3-페닐프로판을 담갈색 고체로서 1.14 g (수율 98 %) 얻었다.

얻어진 화합물의¹H-NMR, IR 측정치를 이하에 나타냈다.

참고예 3 2-아미노-1-히드록시-1-[5-(메톡시카르보닐)벤즈옥사졸-2-일]-3-페닐프로판의 합성

공정 (3) : L-페닐알라닌올 (20.2 g, 0.134 몰), 탄산나트륨 (21.2 g, 0.200 몰) 및 1,4-디옥산 (150 ㎖) 의 혼합물에 염화벤질옥시카르보닐 (19.1 ㎖, 0.134 몰) 의 1,4-디옥산 (50 ㎖) 용액을 첨가하여 실온에서 3 시간 교반하였다. 반응액에 물 (300 ㎖) 을 첨가하고, 얻어진 혼합물을 빙냉한 0.5 N 염산 (500 ㎖) 에 첨가하였다. 석출한 결정을 여과하여 취하고, 헥산으로 세정한 후, 건조시켜 목적화합물인 N-벤질옥시카르보닐-L-페닐알라닌올을 백색 결정으로서 28.8 g (수율 76 %) 얻었다.

공정(4) : 공정 (3) 의 목적화합물 (10.7 g, 37.5 밀리몰) 및 트리에틸아민 (21.3 ㎖, 153 밀리몰) 의 디클로로메탄 (100 ㎖) 용액에 삼산화 황피리딘 착체 (23.9 g, 150 밀리몰) 의 디메틸술폭시드 (DMSO) (100 ㎖) 용액을 -10 ℃ 에서 첨가하였다. 얻어진 용액을 10 ∼ 20 ℃ 에서 45 분간 교반한 후, 포화식염수 (400 ㎖) 에 첨가하여 에테르로 추출하였다. 추출액을 1 N 염산, 포화탄산수소나트륨 수용액 및 포화식염수로 순차적으로 세정하고, 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압하에서 농축하여 목적화합물인 N-벤질옥시카르보닐-L-페닐알라닌알을 백색 고체로서 10.6 g (정량적) 얻었다.

공정 (5) : 공정 (4) 의 목적화합물 (5.00 g, 17.6 밀리몰) 및 아세톤시아노히드린 (4.8 ㎖, 53 밀리몰) 의 디클로로메탄 (50 ㎖) 용액에 트리에틸아민 (1.5 ㎖, 11 밀리몰) 을 첨가하고, 실온에서 4 시간 교반하였다. 용매를 감압하에서 증류제거하고, 얻어진 농축물을 물 (100 ㎖) 에 첨가하여 아세트산에틸로 추출하였다. 추출액을 포화식염수로 세정하고, 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압하에서 농축하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (2:1 헥산-아세트산에틸) 에 의해 분리정제하고, 목적화합물인 N-벤질옥시카르보닐-L-페닐알라닌알시아노히드린을 담황색 고체로서 5.15 g (수율 94 %) 얻었다.

공정 (6) : 클로로포름 (10 ㎖) 과 에탄올 (9.5 ㎖, 0.16 몰) 의 혼합액에 빙냉하, 염화아세틸 (10 ㎖, 0.14 몰) 을 10 분간 적가하였다. 0 ℃ 에서 30 분간 교반한 후, 공정 (5) 의 목적화합물 (1.50 g, 4.83 밀리몰) 의 클로로포름 (10 ㎖) 용액을 첨가하였다. 0 ℃ 에서 3 시간 교반한 후, 용매를 감압하에서 증류제거하여 담황색 고체를 얻었다. 얻어진 고체에 에탄올 (35 ㎖) 과 공정 (2) 의 목적화합물 (1.94 g, 11.6 밀리몰) 을 첨가하고, 90 ℃ 로 가온하여 18 시간 교반하였다. 용매를 감압하에서 증류제거한 후, 얻어진 농축물을 0.5 N 수산화나트륨 수용액 (50 ㎖) 에 첨가하여 아세트산에틸로 추출하였다. 추출액을 0.5 N 염산, 포화탄산수소나트륨 수용액 및 포화식염수로 순차적으로 세정하고, 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압하에서 농축하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (100:1 클로로포름-메탄올) 에 의해 분리정제하여 목적화합물인 2-벤질옥시카르보닐아미노-1-히드록시-1-[5-(메톡시카르보닐)벤즈옥사졸-2-일]-3-페닐프로판을 담갈색 고체로서 1.80 g (수율 81 %) 얻었다.

공정 (7) : 공정 (6) 의 목적화합물 (1.65 g, 3.58 밀리몰) 의 메탄올 (25 ㎖) 용액에 질소분위기하, 10 % 파라듐탄소 (378 ㎎) 를 첨가하고, 수소분위기하, 실온에서 24 시간 교반하였다. 촉매를 여과로 제거하고, 메탄올로 세정한 후, 여과액을 감압하에서 농축하여 표제화합물인 2-아미노-1-히드록시-1-[5-(메톡시카르보닐)벤즈옥사졸-2-일]-3-페닐프로판을 담갈색 고체로서 1.14 g (수율 98 %) 얻었다.

얻어진 화합물의¹H-NMR, IR 측정치를 이하에 나타냈다.

실시예 1 2-[5-아미노-2-(4-플루오로페닐)-6-옥소-1,6-디히드로-1-피리미지닐]-N-[1-[[5-(메톡시카르보닐)벤즈옥사졸-2-일]카르보닐]-2-페닐에틸]아세타미드 (화합물 1) 의 합성

공정 (1) : 참고예 1 에서 얻어진 [5-벤질옥시카르보닐아미노-2-(4-플루오로페닐)-6-옥소-1,6-디히드로-1-피리미지닐]아세트산 (1.30 g, 3.27 밀리몰) 및 참고예 2 에서 얻어진 2-아미노-1-히드록시-1-[5-(메톡시카르보닐)벤즈옥사졸-2-일]-3-페닐프로판 (1.08 g, 3.31 밀리몰) 의 DMF (10 ㎖) 용액에 HOBT (884 ㎎, 6.54 밀리몰) 및 WSCI 의 염산염 (752 ㎎, 3.92 밀리몰) 을 첨가하고, 실온에서 4.5 시간 교반하였다. 반응액을 0.5 N 염산 (80 ㎖) 에 첨가하여 아세트산에틸로 추출하였다. 이 때 석출된 고체를 여과하여 취하고, 진공하에서 건조시켜 2-[5-벤질옥시카르보닐아미노-2-(4-플루오로페닐)-6-옥소-1,6-디히드로-1-피리미지닐]-N-[1-[[5-(메톡시카르보닐)벤즈옥사졸-2-일]히드록시메틸]-2-페닐에틸]아세타미드를 백색 고체로서 1.26 g 얻었다. 여과액을 포화탄산수소나트륨 수용액 및 포화식염수로 순차적으로 세정하고, 감압하에서 농축하였다. 얻어진 고체를 에테르로 세정한 후, 진공하에서 건조시켜 추가로 2-[5-벤질옥시카르보닐아미노-2-(4-플루오로페닐)-6-옥소-1,6-디히드로-1-피리미지닐]-N-[1-[[5-(메톡시카르보닐)벤즈옥사졸-2-일]히드록시메틸]-2-페닐에틸]아세타미드를 담갈색 고체로서 408 ㎎ (합계 1.66 g, 합계 수율 72 %) 얻었다.

공정 (2) : 공정 (1) 의 목적화합물 (1.56 g, 2.21 밀리몰) 의 DMSO (20 ㎖) 및 톨루엔 (20 ㎖) 혼합용액에 WSCI 의 염산염 (5.09 g, 26.6 밀리몰) 및 디클로로아세트산 (0.87 ㎖, 11 밀리몰) 을 첨가하고, 실온에서 7 시간 교반하였다. 반응액을 1 N 염산 (100 ㎖) 에 첨가하여 아세트산에틸로 추출하였다. 추출액을 포화탄산수소나트륨 수용액 및 포화식염수로 세정하였다. 이 때 석출된 고체를 여과하여 취하고, 진공하에서 건조시켜 2-[5-벤질옥시카르보닐아미노-2-(4-플루오로페닐)-6-옥소-1,6-디히드로-1-피리미지닐]-N-[1-[[5-(메톡시카르보닐)벤즈옥사졸-2-일]카르보닐]-2-페닐에틸]아세타미드를 백색 고체로서 1.06 g 얻었다. 여과액을 감압하에서 농축하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (5:1 디클로로메탄-아세트산에틸) 에 의해 분리정제하여 추가로 2-[5-벤질옥시카르보닐아미노-2-(4-플루오로페닐)-6-옥소-1,6-디히드로-1-피리미지닐]-N-[1-[[5-(메톡시카르보닐)벤즈옥사졸-2-일]카르보닐]-2-페닐에틸]아세타미드를 담황색 고체로서 222 ㎎ (합계 1.28 g, 수율 82 %) 얻었다.

공정 (3) : 공정 (2) 의 목적화합물 (462 ㎎, 0.657 밀리몰) 및 아니솔 (0.21 ㎖, 1.9 밀리몰) 의 디클로로메탄 (13 ㎖) 용액에 빙냉하, 트리플루오로메탄술폰산 (0.35 ㎖, 4.0 밀리몰) 을 첨가한 후, 0 ℃ ∼ 실온에서 1 시간 교반하였다. 빙냉하, 포화탄산수소나트륨 수용액 (13 ㎖) 을 첨가하여 30 분간 교반한 후, 반응액을 포화탄산수소나트륨 수용액 (50 ㎖) 에 첨가하여 아세트산에틸로 추출하였다. 추출액을 포화식염수로 세정하고, 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압하에서 농축하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (30:1 클로로포름-메탄올) 에 의해 분리정제하여 2-[5-아미노-2-(4-플루오로페닐)-6-옥소-1,6-디히드로-1-피리미지닐]-N-[1-[[5-(메톡시카르보닐)벤즈옥사졸-2-일]카르보닐]-2-페닐에틸]아세타미드 (화합물 1) 를 담황색 결정으로서 368 ㎎ (수율 98 %) 얻었다.

얻어진 화합물 1 의 융점,¹H-NMR, IR, MS 측정치를 이하에 나타냈다.

MS (SIMS, 양성) m/z 570 (MH⁺)

얻어진 화합물 1 의 인간 심장 키마아제에 대한 저해활성을 인간 심장 키마아제의 아미다아제 활성에 대한 저해활성으로 측정하고, 그 유효성을 이하와 같이 평가하였다.

최종농도 2.5 mM 의 합성기질 숙시닐-알라닐-알라닐-프롤릴-페닐알라닌-p-니트로아닐리드 존재하에서의 5 nM 의 키마아제에 대한 규정농도계열 (〈 ×1, 〈 ×10, 〈 ×100 배 당량) 의 화합물 1 에 의한 활성잔존분율의 변화로 저해활성을 정량하였다. 저해효력의 해석은 2분자 평형 반응선형화식을 이용한 Easson-Stedman 플롯 (Proc. Roy. Soc. B., 121 권, 141 면, 1936 년) 의 최소 2승 회귀에 의해 행하였다. 이 해석으로 얻어진 겉보기 저해정수 (Kiapp) 와, 반응액 기질 종농도 및 별도로 구한 Km 값으로부터 산출되는 저해정수 (Ki) 에 의해 저해활성을 평가하였다. 효소반응 초속도의 정량은 기질이 가수분해되어 생기는 p-니트로아닐린의 생성량을, 650 ㎚ 파장광에서의 흡광도를 뺀, 405 ㎚ 에서의 흡광도의 증가로 분광광학적으로 검출하였다. 화합물 1 의 키마아제 저해활성은 저해제 비존재하의 효소활성에 대한 저해제 존재하의 활성잔존분율로 산출하고, 효소에 대하여 사용한 기질농도에서의 초속도 보증 흡광도 미만에서 측정치의 주입을 끝내고 해석을 행하였다.

반응액 조성은, 조성이 Tris-HCl (100 mM) - KCl (2M) 인 완충액 (pH 7.5) 140 ㎕ 에, 20 ㎕ 의 10 % 디메틸술폭시드 (DMSO) 에 용해한 화합물 1, 20 ㎕ 의 DMSO 에 용해한 기질, 및 20 ㎕ 의 키마아제를 첨가하여 총량 200 ㎕ 로 하였다.

효소의 첨가직후의 흡광도로부터, 정확하게 등시간 간격으로 흡광도의 증가를 프로그레시브 커브로 기록하였다.

이상의 데이터로부터, 필요에 따라 반응종료시점의 흡광도로부터 첨가직후의 흡광도의 차이로 저해제 비첨가의 대조에 대한 저해제 첨가검체의 잔존활성을 정량하여 해석을 행하거나, 또는 일정시간 새김폭 (≥ 20 분) 으로 대조 및 저해제 첨가검체의 반응속도를 산출하고, 10 ∼ 30 분마다 속도산출을 시프트하여 각각 전체 반응시간에 걸쳐 평균화한 각각의 반응속도로부터 동일하게 잔존활성분율을 정량하는 방법으로 저해활성을 해석하였다.

화합물 1 의 인간 심장 키마아제 저해활성시험의 결과는 키마아제 저해활성 (Ki) 0.023 μM 이었다.

실시예 2 2-[5-아미노-2-(3-클로로페닐)-1,6-디히드로-6-옥소-1-피리미지닐]-N-[1-벤질-3-[N-(벤질)카르바모일]-3,3-디플루오로-2-옥소프로필]아세타미드 (화합물 2) 의 합성

공정 (1) : 3-클로로벤조니트릴 (25.5 g, 0.185 몰) 의 에탄올 (250 ㎖) 용액에 빙냉하, 염화수소를 불어넣어 포화시킨 후, 실온에서 17 시간 교반하였다. 반응액을 감압하에서 용매 증류제거하고, 얻어진 고형물을 에테르 (200 ㎖) 에 현탁시킨 후, 여과하여 취하고, 에테르 (200 ㎖) 로 세정하고 진공하 60 ℃ 에서 건조시켜 에틸3-클로로벤즈이미데이트히드로클로리드를 백색 결정으로서 38.3 g (94 %) 얻었다.

공정 (2) : 공정 (1) 의 목적화합물 (38.0 g, 0.173 몰) 의 에탄올 (130 ㎖) 용액에 빙냉하, 아미노아세토알데히드디에틸아세탈 (29 ㎖, 0.20 몰) 을 적가한 후, 5 ℃ 에서 17 시간 교반하였다. 에탄올을 감압하에서 증류제거하고, 얻어진 농축물을 1 M 수산화나트륨 수용액 (300 ㎖) 에 첨가하여 클로로포름으로 추출하였다. 추출액을 무수황산마그네슘으로 건조시키고, 감압하에서 용매 증류제거하여 3-클로로-N-(2,2-디에톡시에틸)벤즈아미딘을 포함하는 무색 투명오일을 62.6 g 얻었다.

공정 (3) : 공정 (2) 의 목적화합물 (상기 반응에서 얻은 조생성물, 62.6 g) 의 에탄올 (75 ㎖) 용액에 디에틸에톡시메틸렌마로네이트 (40 ㎖, 0.20 몰) 를 첨가하여 3 시간 가열환류하였다. 감압하에서 용매를 증류제거하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (1:1 헥산-아세트산에틸) 에 의해 분리정제하여 에틸2-(3-클로로페닐)-1-(2,2-디에톡시에틸)피리미딘-6(1H)-온-5-카르복실레이트를 담황색 오일로서 66.4 g (에틸3-클로로벤즈이미데이트히드로클로리드로부터의 수율 97 %) 얻었다.

공정 (4) : 공정 (3) 의 목적화합물 (66.1 g, 0.167 몰) 의 피리딘 (200 ㎖) 용액에 요오드화 리튬 (56.0 g, 0.418 몰) 을 첨가하여 18 시간 가열환류하였다. 감압하에서 피리딘을 증류제거한 후, 톨루엔 (100 ㎖) 을 첨가하여 남은 흔적의 피리딘을 감압하 증류제거하였다. 잔사에 포화탄산수소나트륨 수용액 (200 ㎖) 과 아세트산에틸 (100 ㎖) 을 첨가하고, 실온하에서 30 분간 교반하였다. 석출물을 여과로 제거하고, 수층을 나누었다. 유기층중의 카르복실산을 포화탄산수소나트륨 수용액 (100 ㎖) 으로 추출하였다. 모든 수층과 먼저 제거한 석출물을 합치고, 2 M 염산 (약 500 ㎖) 을 첨가하여 pH 4 로 하고, 아세트산에틸로 추출하였다. 추출액을 포화식염수로 세정하고, 무수황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압하에서 농축하여 2-(3-클로로페닐)-1-(2,2-디에톡시에틸)피리미딘-6(1H)-온-5-카르복실산을 포함하는 농다갈색 오일을 53.7 g (88 %) 얻었다.

공정 (5) : 공정 (4) 의 목적화합물 (53.4 g, 0.146 몰) 및 트리에틸아민 (41 ㎖, 0.29 몰) 의 디옥산 (400 ㎖) 용액에 실온에서 디페닐포스포릴아지드 (36 ㎖, 0.16 몰) 를 적가하였다. 적가후, 110 ℃ 로 가온하여 2 시간 교반하였다. 실온까지 냉각하고, 벤질알콜 (20 ㎖, 0.19 몰) 을 첨가하였다. 반응액을 다시 110 ℃ 로 가온하여 5 시간 교반한 후, 실온까지 냉각하고, 감압하에서 농축하였다. 잔사를 포화염화암모늄 수용액 (500 ㎖) 에 첨가하여 아세트산에틸로 추출하였다. 추출액을 1 M 수산화나트륨 수용액 (450 ㎖) 과 포화식염수로 세정하고, 무수황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압하에서 농축하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (2:1 헥산-아세트산에틸) 에 의해 분리정제하여 [5-벤질옥시카르보닐아미노-2-(3-클로로페닐)-1,6-디히드로-6-옥소-1-피리미지닐]아세토알데히드디에틸아세탈과 벤질알콜의 1:0.36 의 혼합물을 담황색 고체로서 58.8 g (79 %) 얻었다.

공정 (6) : 공정 (5) 의 목적화합물 (벤질알콜과의 혼합물, 58.6 g, 0.115 몰) 의 THF (300 ㎖) 및 1 M 염산 (250 ㎖) 의 혼합용액을 70 ℃ 로 가온하여 20 시간 교반하였다. 감압하에서 THF 를 증류제거하고, 그 농축액을 포화탄산수소나트륨 수용액으로 중화한 후, 아세트산에틸로 추출하였다. 추출액을 무수황산마그네슘으로 건조시키고, 감압하에서 용매 증류제거하여 [5-벤질옥시카르보닐아미노 -2-(3-클로로페닐)-1,6-디히드로-6-옥소-1-피리미지닐]아세토알데히드를 포함하는 담황색 오일을 52.0 g 얻었다.

공정 (7) : 공정 (6) 의 목적화합물 (상기 반응에서 얻어진 조생성물, 52.0 g), 2-메틸-2-프로판올 (750 ㎖) 및 2-메틸-2-부텐 (122 ㎖, 1.15 몰) 의 혼합물에 인산 2수소나트륨 2수화물 (131 g, 0.840 몰) 과 아염소산나트륨 (80 % 함유, 91.0 g, 0.805 몰) 의 수 (300 ㎖) 용액을 첨가하고, 실온에서 3 시간 교반하였다. 감압하에서 유기용매를 증류제거하고, 잔사를 2 M 염산 (450 ㎖) 에 첨가하여 아세트산에틸로 추출하였다. 추출액을 포화식염수로 세정하고, 무수황산마그네슘으로 건조시키고, 감압하에서 용매 증류제거하면 담황색 오일이 얻어졌다. 그것을 아세트산에틸-헥산 (1:2, 150 ㎖) 에 용해시켜 실온에서 교반하였다. 석출한 결정을 여과하여 취하고, 진공하 60 ℃ 에서 건조시켜 [5-벤질옥시카르보닐아미노-2-(3-클로로페닐)-1,6-디히드로-6-옥소-1-피리미지닐]아세트산을 백색 결정으로서 40.3 g [[5-벤질옥시카르보닐아미노-2-(3-클로로페닐)-1,6-디히드로-6-옥소-1-피리미지닐]아세토알데히드디에틸아세탈로부터의 수율 85 %] 얻었다.

공정 (8) : N-벤질옥시카르보닐-DL-페닐알라닌 (155 g, 0.518 몰) 의 DMF (800 ㎖) 용액에 유발 분쇄한 탄산수소칼륨 (104 g, 1.04 몰) 및 요오드화메틸 (53 ㎖, 0.86 몰) 을 첨가하여 실온에서 5 시간 교반하였다. 반응액을 물 (1800 ㎖) 에 첨가하여 아세트산에틸-헥산 (4:1) 으로 추출하였다. 추출액을 물 (500 ㎖) 로 2 회, 5 % 아황산나트륨 수용액 (500 ㎖) 및 포화식염수로 세정하고, 무수황산마그네슘으로 건조시키고, 감압하에서 용매 증류제거하여 N-벤질옥시카르보닐-DL-페닐알라닌메틸에스테르를 무색 투명한 오일로서 164 g (100 %) 얻었다.

공정 (9) : 공정 (8) 의 목적화합물 (109 g, 0.345 몰) 의 THF (500 ㎖) 용액에 유발 분쇄한 염화리튬 (29.2 g, 0.689 몰), 테트라히드로붕산나트륨 (26.1 g, 0.690 몰) 을 첨가한 후, 그 현탁액에 에탄올 (1000 ㎖) 을 40 분에 걸쳐 적가하고, 실온에서 14 시간 교반하였다. 반응액에 10 % 시트르산 수용액 (700 ㎖) 을 첨가하여 실온에서 30 분간 교반하고, 감압하에서 유기용매를 증류제거하였다. 그 잔사를 물 (700 ㎖) 에 첨가하여 디클로로메탄으로 추출하였다. 추출액을 포화식염수로 세정하고, 무수황산마그네슘으로 건조시켜 감압하에서 용매 증류제거하면 백색 결정을 얻었다. 그것을 아세트산에틸-헥산 (1:2.7, 370 ㎖) 으로부터 재결정하여 N-벤질옥시카르보닐-DL-페닐알라닌올을 백색 결정으로서 87.8 g (89 %) 얻었다.

공정 (10) : 공정 (9) 의 목적화합물 (87.8 g, 0.308 몰), 2,2,6,6-테트라메틸-1-피페리지닐옥시, 프리라디칼 (480 ㎎, 3.07 밀리몰), 및 브롬화나트륨 (31.7 g, 0.308 몰) 의 아세트산에틸 (900 ㎖) 과 톨루엔 (900 ㎖) 혼합용액에 6 % 하이포 아염소산나트륨 수용액 (PURELOX, 410 ㎖, 0.34 몰) 과 탄산수소나트륨 (75 g, 0.89 몰) 의 수 (540 ㎖) 용액을 빙냉하, 1.5 시간에 걸쳐 적가하여 1 시간 교반하였다. 반응액을 아세트산에틸로 추출하고, 추출액을 요오드화칼륨 (2.5 g, 15 밀리몰) 을 함유한 10 % 황산수소칼륨 수용액 (400 ㎖), 10 % 티오황산나트륨 수용액 (2 ×200 ㎖), 0.2 M 인산완충액 (pH 7, 500 ㎖) 및 포화식염수로 순차적으로 세정하고, 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압하에서 용매 증류제거하였다. 잔사에 아세트산에틸 (150 ㎖) 과 헥산 (500 ㎖) 을 첨가하여 실온 ∼ 0 ℃ 에서 5 시간 교반하였다. 석출한 결정을 여과하여 취하고, 헥산-아세트산에틸 (3:1, 300 ㎖) 로 세정하고, 진공하에서 건조시켜 N-벤질옥시카르보닐-DL-페닐알라닌알을 백색 결정으로서 63.28 g (73 %) 얻었다.

공정 (11) : 공정 (10) 의 목적화합물 (42.8 g, 0.151 몰), 아연분말 (15.9 g, 0.243 몰) 및 THF (105 ㎖) 의 혼합물에 26 ∼ 49 ℃ 에서 2 시간에 걸쳐 브로모디플루오로아세트산에틸 (31.6 ㎖, 0.246 몰) 을 적가하였다. 얻어진 혼합물을 실온에서 2 시간 교반하였다. 반응액에 포화염화암모늄 수용액 (110 ㎖) 을 첨가하여 수분간 교반한 후, 얻어진 혼합물을 포화염화암모늄 수용액 (650 ㎖) 에 첨가하여 아세트산에틸 (500 ㎖, 2 ×300 ㎖) 로 추출하였다. 추출액을 포화식염수 (400 ㎖) 로 세정하고, 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압하에서 농축하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (2:1 헥산-아세트산에틸) 로 분리정제하여 4-벤질옥시카르보닐아미노-2,2-디플루오로-3-히드록시-5-페닐펜탄산에틸을 담황색 오일로서 56.15 g (디아스테레오머 혼합물, 75 %) 얻었다.

공정 (12) : 공정 (11) 의 목적화합물 (12 g, 30 밀리몰) 의 THF (85 ㎖) 용액에 실온에서 벤질아민 (16.5 ㎖, 0.151 몰) 을 3 분간 적가하였다. 얻어진 용액을 실온에서 21 시간 교반하였다. 석출한 백색 고체를 여과하여 취하고, 아세트산에틸로 세정하였다 (3 ×15 ㎖) (2.455 g). 여과액을 아세트산에틸 (455 ㎖) 로 희석하고, 1 M 염산 (3 ×120 ㎖) 및 포화식염수 (2 ×120 ㎖) 로 세정, 황산마그네슘으로 건조후, 감압하에서 농축하여 담황색 고체의 잔사 (10.70 g) 를 얻었다. 먼저 얻어진 백색 고체와 이 잔사를 합쳐 (디아스테레오머 혼합물, 13.155 g) 다음의 반응에 사용하였다.

공정 (13) : 공정 (12) 의 생성물 (13.155 g) 의 메탄올 (350 ㎖) 및 디옥산 (350 ㎖) 용액에 질소분위기하에서 1 M 염산 (42 ㎖) 및 10 % 파라듐탄소 (4.039 g, 31 wt%) 를 첨가하고, 수소분위기하, 실온에서 18 시간 교반하였다. 촉매를 여과로 제거하고, 메탄올 (10 ×40 ㎖) 로 세정하였다. 여과액과 세정액을 합쳐 감압하에서 농축하고, 얻어진 잔사를 아세트산에틸 (500 ㎖) 에 용해시켜 포화탄산수소나트륨 수용액 (200 ㎖) 으로 세정하였다. 수층을 아세트산에틸 (2 ×300 ㎖) 로 추출하였다. 얻어진 유기층을 합쳐 포화탄산수소나트륨 수용액 (200 ㎖) 및 포화식염수 (300 ㎖) 로 세정하고, 황산나트륨으로 건조시킨 후, 감압하에서 농축하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (94:6 클로로포름-메탄올) 로 분리정제하여 4-아미노-2,2-디플루오로-3-히드록시-5-페닐펜타노일벤질아민을 백색 고체로서 5.928 g (디아스테레오머 혼합물, 60 %, 2 공정 통산 수율) 얻었다.

공정 (14) : 공정 (7) 의 목적화합물 (39.83 g, 96.25 밀리몰), 공정 (13) 의 목적화합물 (32.13 g, 96.09 밀리몰), 1-히드록시벤조트리아졸 (HOBT) 1수화물 (29.62 g, 0.1934 몰) 및 DMF (590 ㎖) 의 혼합물에 1-[3-(디메틸아미노)프로필]-3-에틸카르보디이미드 염산염 (WSCIHCl) (20.57 g, 0.1073 몰) 을 첨가하여 실온에서 24 시간 교반하였다. 반응액을 0.5 M 염산 (1800 ㎖) 에 첨가하여 아세트산에틸 (1800 ㎖) 로 추출하였다. 유기층의 석출물을 여과하여 취하고, 아세트산에틸 (50 ㎖, 2 ×20 ㎖) 로 세정, 실온에서 감압하에서 건조시켜 2-[5-벤질옥시카르보닐아미노-2-(3-클로로페닐)-1,6-디히드로-6-옥소-1-피리미지닐]-N-[1-벤질-3-[N-(벤질)카르바모일]-3,3-디플루오로-2-히드록시프로필]아세타미드를 백색 고체로서 18.34 g (5.1 wt% 의 DMF 를 함유) 얻었다. 수층을 아세트산에틸 (2 ×800 ㎖) 로 추출하였다. 얻어진 유기층을 합쳐 포화탄산수소나트륨 수용액 (800 ㎖) 및 포화식염수 (700 ㎖) 로 세정하고, 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압하에서 농축하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (98:2 클로로포름-메탄올) 로 분리정제하여 2-[5-벤질옥시카르보닐아미노-2-(3-클로로페닐)-1,6-디히드로-6-옥소

-1-피리미지닐]-N-[1-벤질-3-[N-(벤질)카르바모일]-3,3-디플루오로-2-히드록시프로필]아세타미드를 담황색 고체로서 59.24 g (13 wt% 의 DMF 를 함유) 얻었다. 합계 69 g (디아스테레오머 혼합물, 98 %) 의 목적화합물을 얻었다.

공정 (15) : 공정 (14) 의 목적화합물 (69 g, 95 밀리몰), WSCIHCl (99.87 g, 0.5209 몰) 의 DMSO (590 ㎖) 및 톨루엔 (590 ㎖) 용액에 빙냉하, 디클로로아세트산 (15.6 ㎖) 을 20 분간 적가하였다. 얻어진 혼합물을 빙냉하에서 2.5 시간 교반한 후, 0.5 M 염산 (1800 ㎖) 에 첨가하여 아세트산에틸 (1800 ㎖, 2 ×800 ㎖) 로 추출하였다. 추출액을 포화탄산수소나트륨 수용액 (800 ㎖) 및 포화식염수 (800 ㎖) 로 세정하고, 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압하에서 농축하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (99:1 클로로포름-메탄올) 로 분리정제하여 2-[5-벤질옥시카르보닐아미노-2-(3-클로로페닐)-1,6-디히드로-6-옥소-1-피리미지닐]-N-[1-벤질-3-[N-(벤질)카르바모일]-3,3-디플루오로-2-옥소프로필]아세타미드를 백색 고체로서 52.95 g (77 %) 얻었다.

공정 (16) : 공정 (15) 의 목적화합물 (52.93 g, 72.69 밀리몰), 아니솔 (24 ㎖, 0.22 몰) 의 디클로로메탄 (1000 ㎖) 용액에 빙냉하, 트리플루오로메탄술폰산 (31 ㎖, 0.35 몰) 을 19 분간 적가하였다. 얻어진 혼합물을 빙냉하에서 30 분간 교반한 후, 빙욕을 제거하여 서서히 실온으로 올리고, 실온에서 30 분간 교반하였다. 반응액을 빙냉하고, 포화탄산수소나트륨 수용액 (800 ㎖) 을 첨가하였다. 플라스코에 부착되어 있는 물질이 없어질때까지 교반한 후, 포화탄산수소나트륨 수용액 (1000 ㎖) 에 첨가하고, 클로로포름 (1000 ㎖) 을 첨가하였다. 얻어진 혼합물을 2 개로 나누고, 각각을 아세트산에틸 (1800 ㎖, 2 ×600 ㎖) 로 추출하였다. 합친 추출액을 포화식염수로 세정하고, 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압하에서 농축하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (96:4 클로로포름-메탄올) 에 의해 분리하여 백색 고체를 41.47 g (14 wt% 의 클로로포름을 함유) 얻었다. 이 고체를 클로로포름-메탄올-헥산 및 아세트산에틸-헵탄으로부터 재결정하여 표제화합물을 담황색 고체로서 30.44 g (71 %) 얻었다.

얻어진 화합물 2 의 융점,¹H-NMR, IR, MS, 원소분석 측정치를 이하에 나타냈다.

융점 : 115 - 118.5 ℃

MS (ESI) m/z 594 (MH⁺)

원소분석 : 이론치 C=60.66 H=4.41 N=11.79

실측치 C=60.87 H=4.46 N=11.83

시험예 1 화합물 1 의 약리시험

(1) IgE 항체량의 측정

1 ㎎/㎖/㎏ 의 HgCl₂를 BN 계 웅성 쥐 (1 군 8 마리) 의 등부 피하에 투여하였다 (HgCl₂군). 별도로, 동일하게 HgCl₂를 투여한 BN 계 웅성 쥐 (1 군 8 마리) 에 HgCl₂투여일로부터 6 일간 연속하여 화합물 1 ∼ 4 를 매일 30 ㎎/㎏ 경구투여하였다 (각각 화합물 1 투여군, 화합물 2 투여군, 화합물 3 투여군, 화합물 4 투여군). 여기에서, 화합물 3 은 2-[5-아미노-2-(3-메톡시페닐)-6-옥소-1,6-디히드로-1-피리미지닐]-N-[1-[(벤즈옥사졸-2-일)카르보닐]-2-페닐에틸]아세타미드이고, 화합물 4 는 2-[5-아미노-2-(3-메톡시페닐)-6-옥소-1,6-디히드로-1-피리미지닐]-N-[1-[[5-(메톡시카르보닐)벤즈옥사졸-2-일]카르보닐]-2-페닐에틸]아세타미드이다. HgCl₂투여 7 일째에 CO₂도살후, 개흉(開胸)하여 심채혈(心埰血)하고, 원심하여 혈청을 채취하였다. 혈청검체는 -20 ℃ 로 보존한 후, 이하와 같이 하여 IgE 항체의 양을 측정하였다.

항쥐 IgE 모노클로날 항체 [MCARE-01] (세이가가꾸고오교샤 제조, 01404) 를 0.02 % 의 NaN₃/PBS 에서 5 ㎍/㎖ 으로 희석하고, ELISA 플레이트에 50 ㎕ 를 첨가하여 4 ℃ 에서 하룻밤 코트하였다. 각 웰을 세정후, 3 % 탈지유/TBS 에 의해 실온에서 1 시간 이상 블로킹하였다. 추가로 세정후, 1 % BSA/TBS 에서 200 배 희석한 검체를 각 웰에 50 ㎕ 씩 첨가하여 실온에서 2 시간 인큐베이트하였다. 각 웰을 세정하여 1 % BSA/TBS 에서 5000 배 희석한 ALP 표지 항쥐 κ＆λ쇄 모노클로날 항체 (시그마샤 제조, 113H4804 로트) 를 50 ㎕ 첨가하고, 실온에서 2 시간 인큐베이트하였다. 추가로 각 웰을 세정하여 p-니트로페닐포스페이트 (0.1 M 디에탄올아민중, 1 ㎎/㎖, pH 9.8) 를 기질액으로서 웰에 50 ㎕ 첨가하였다. 발색후, 등량의 0.5 M 의 NaOH 로 반응을 정지시켜 405 ㎚ 의 파장으로 OD 를 측정하였다. 그리고, 표준 쥐 IgE 로서 케미콘샤 제조 쥐 IgE 를 사용하였다.

결과를 표 1 에 나타냈다.

군	혈청 IgE 항체량 (㎎/㎖)	억제율 (%)
HgCl₂군	86.24 ±7.99	-
화합물 1 투여군	62.24 ±5.08*	27.8
화합물 2 투여군	67.04 ±7.57	22.3
화합물 3 투여군	65.25 ±6.71*	24.3
화합물 4 투여군	66.10 ±8.46*	23.4
주) * ; P 〈 0.05 ** ; P 〈 0.01

이상의 결과로부터, 화합물 1, 화합물 3 및 화합물 4 는 HgCl₂투여군에서 유의한 증가가 관찰된 IgE 항체량을 유의하게 억제하고 있는 것을 알았다. 또, 화합물 2 도 마찬가지로 IgE 항체생산 억제효과를 나타내는 것을 알았다.

시험예 2 화합물 1 의 약리시험

(1) 관절염의 측정

1 ㎎/㎖/㎏ 의 HgCl₂를 BN 계 웅성 쥐 (1 군 8 마리) 에 1 일 ∼ 10 일간, 격일로 5 회, 등부 피하투여하였다 (HgCl₂투여군). 별도로, 동일하게 HgCl₂를 투여하면서 화합물 1 을 매일 30 ㎎/㎏ 경구투여하였다 (화합물 1 투여군). 노멀군에는 HgCl₂대신에 PBS 를 투여하였다. 1 일, 12 일, 14 일, 16 일 및 18 일에 좌우 뒷다리 발바닥 용적의 측정과 관절염의 중증도를 스코어화하여 측정하였다.

좌우 뒷다리 발바닥 용적은 쥐의 왼쪽 뒷다리 발바닥 및 오른쪽 뒷다리 발바닥을 수중에 침지하고, 증가하는 물의 양을 계측함으로써 그 증가율 (%) 을 측정하였다.

결과를 도 1 에 나타냈다. 「LEFT」 는 왼쪽 뒷다리 발바닥 용적을, 「RIGHT」는 오른쪽 뒷다리 발바닥 용적을 나타낸다. 종축은 용적증가율 (%) 을 나타낸다. 횡축은 시험개시일로부터의 측정일의 일수를 나타낸다. □ 는 노멀군 (PBS 투여군) 을 나타내고, Ｏ 는 HgCl₂투여군을 나타내며, 검은 칠을 한 Ｏ 는 HgCl₂및 화합물 1 투여군을 나타낸다. ** 는 위험율 0.01 이하로, * 는 위험율 0.05 이하로 HgCl₂투여군에 대하여 유의차를 갖고 있던 것을 의미한다.

화합물 1 은 HgCl₂투여군에서 유의한 증가가 관찰된 좌우 뒷다리 발바닥 용적의 증가율을 유의하게 억제하고 있는 것을 알았다.

관절염의 중증도의 스코어는 각 다리에 대하여 이하의 기준에 의해 측정하여 사지의 스코어의 합계로 하고 (최대치는 16), 1 군 8 마리의 스코어의 평균치를 산출하였다.

0 : 증상 없음

1 : 손, 발가락 등의 소관절이 부어 오르고 발적(發赤) 있음

2 : 2 개 이상의 손, 발가락 등의 소관절 또는 손목, 발목 등의 비교적 큰 관절이 부어 오르고 발적 있음

3 : 손발 전체가 부어 오르고 발적 있음

4 : 손발 전체가 부어 오르고 발적이 최대한에 달해 있음

결과를 도 2 에 나타냈다. 종축은 사지의 스코어 합계의 평균치를 나타낸다. 횡축은 시험개시일로부터의 측정일의 일수를 나타낸다. □ 는 노멀군 (PBS 투여군) 을 나타내고, Ｏ 는 HgCl₂투여군을 나타내며, 검은 칠을 한 Ｏ 는 HgCl₂및 화합물 1 투여군을 나타낸다. ## 는 PBS 군에 대하여 위험율 0.01 % 이하로 유의의 차를 갖고 있던 것을 의미하고, ** 는 위험율 0.01 이하로 HgCl₂투여군에 대하여 유의차를 갖고 있던 것을 의미한다.

화합물 1 은 HgCl₂에 의해 증가한 관절염 중증도의 스코어를 유의하게 저하시키는 것이 명확했다.

(2) 자기면역항체의 측정

1 ㎎/㎖/㎏ 의 HgCl₂를 BN 계 웅성 쥐 (1 군 8 마리) 에 1 일 ∼ 10 일간, 격일로 5 회, 등부 피하투여하였다 (HgCl₂투여군). 별도로, 동일하게 HgCl₂를 투여하면서 화합물 1 을 매일 30 ㎎/㎏ 경구투여하였다 (화합물 1 투여군). 노멀군에는 PBS 를 투여하였다. 12 일, 14 일, 16 일에 꼬리정맥으로부터 채혈하고, 원심하여 혈청을 채취하였다.

(2-1) 항ssDNA 항체의 측정

96 웰 플레이트에 분자량 2000 ∼ 4000 의 ε-폴리-L-리진 (와코준야꾸샤 제조, ECN6644, 25 ㎍/㎖, PBS 중) 을 50 ㎕ 에서 3 시간, 실온에서 코트하였다. PBS 로 3 회 세정후, 송아지 흉선 1중쇄 DNA (Calf thymus single stranded DNA) (시그마샤 제조, 43H67951) 를 0.02 % 의 NaN₃/PBS 에서 5 ㎍/㎖ 으로 희석하고, ELISA 플레이트에 50 ㎕ 를 첨가하여 4 ℃ 에서 하룻밤 코트하였다.

세정후, 1 % BSA/PBS 에서 50 배 희석한 검체를 각 웰에 50 ㎕ 씩 첨가하여 실온에서 2 시간 인큐베이트하였다. 백 그라운드로서 검체를 넣지 않은 웰을 준비하였다. 각 웰을 세정하여 o-페닐렌디아민 (시그마샤 제조, POD 기질, 1 ㎎/㎖) 과 과산화수소를 사용한 기질액을 50 ㎕/웰 첨가하고, 발색후, 등량의 1 M 황산으로 반응을 정지시켜 490 ∼ 650 ㎚ 의 파장으로 OD 를 측정하였다 (컨트롤로서 1 일째의 것을 사용함). 항ssDNA 항체는 백 그라운드와의 차 (△OD) 로 산출하였다.

결과를 도 3 에 나타냈다. 종축은 흡광도차 (△OD) 를 나타낸다. 횡축은 시험개시일로부터의 측정일의 일수를 나타낸다. □ 는 노멀군 (PBS 투여군) 을 나타내고, Ｏ 는 HgCl₂투여군을 나타내며, 검은 칠을 한 Ｏ 는 HgCl₂및 화합물 1 투여군을 나타낸다. ### 는 PBS 군에 대하여 위험율 0.001 % 이하로 유의한 차를 갖고 있던 것을 의미하고, * 는 위험율 0.05 이하로 HgCl₂투여군에 대하여 유의차를 갖고 있던 것을 의미한다.

화합물 1 은 HgCl₂에 의해 증가한 항ssDNA 항체의 양을 유의하게 억제한 것이 명확했다.

(2-2) 항II형 콜라겐 항체의 측정

II 형 콜라겐 (콜라겐 기술연수회 제조, 64-50823) 을 0.02 % 의 NaN₃/PBS 에서 50 ㎍/㎖ 으로 희석하고, ELISA 플레이트에 50 ㎕ 를 첨가하여 4 ℃ 에서 하룻밤 코트하였다. 세정후, 1 % BSA/PBS 에서 50 배 희석한 검체를 각 웰에 50 ㎕ 씩 첨가하여 실온에서 2 시간 인큐베이트하였다. 백 그라운드로서 검체를 넣지 않은 웰을 준비하였다. 각 웰을 세정하여 o-페닐렌디아민 (시그마샤 제조, POD 기질, 1 ㎎/㎖) 과 과산화수소를 사용한 기질액을 50 ㎕/웰 첨가하고, 발색후, 등량의 1 M 황산으로 반응을 정지시켜 490 ∼ 650 ㎚ 의 파장으로 OD 를 측정하였다 (컨트롤로서 1 일째의 것을 사용함). 항II형 콜라겐 항체는 백 그라운드와의 차 (△OD) 로 산출하였다.

결과를 도 4 에 나타냈다. 종축은 흡광도차 (△OD) 를 나타낸다. 횡축은 시험개시일로부터의 측정일의 일수를 나타낸다. □ 는 노멀군 (PBS 투여군) 을 나타내고, Ｏ 는 HgCl₂투여군을 나타내며, 검은 칠을 한 Ｏ 는 HgCl₂및 화합물 1 투여군을 나타낸다. ### 는 PBS 군에 대하여 위험율 0.001 % 이하로 유의한 차를 갖고 있던 것을 의미하고, * 는 위험율 0.05 이하로, ** 는 위험율 0.01 이하로 HgCl₂투여군에 대하여 유의차를 갖고 있던 것을 의미한다.

화합물 1 은 HgCl₂에 의해 증가한 항II형 콜라겐 항체의 양을 유의하게 억제한 것이 명확했다.

제제예 1 정제

(1) 화합물 1 10 ㎎

(2) 직타용 미립 No.209 (후지가가꾸샤 제조) 46.6 ㎎

메타규산알루민산마그네슘 20 %

옥수수전분 30 %

젖당 50 %

(3) 결정 셀룰로오스 24.0 ㎎

(4) 카르복시메틸셀룰로오스ㆍ칼슘 4.0 ㎎

(5) 스테아린산마그네슘 0.4 ㎎

(1), (3) 및 (4) 는 모두 미리 100 메쉬의 체에 통과시켰다. 이 (1), (3) 및 (4) 와 (2) 를 각각 건조시켜 일정 함수율까지 내린 후, 상기 중량비율로 혼합기를 사용하여 혼합하였다. 전질 균등으로 한 혼합분말에 (5) 를 첨가하여 단시간 (30 초) 혼합하고, 혼합분말을 타정 (펀치 : 6.3 ㎜φ, 6.0 ㎜R) 하여 1 정 85 ㎎ 의 정제로 하였다.

이 정제는 필요에 따라 통상 사용되는 위용성(胃溶性) 필름 코팅제 (예컨대, 폴리비닐아세탈디에틸아미노아세테이트) 나 식용성 착색체로 코팅된 것이어도 된다.

제제예 2 캡슐제

(1) 화합물 1 50 g

(2) 젖당 935 g

(3) 스테아린산마그네슘 15 g

상기 성분을 각각 칭량한 후, 균일하게 혼합하고, 혼합분말체를 하드젤라틴캡슐에 200 ㎎ 씩 충전하였다.

제제예 3 주사제

(1) 화합물 1 의 염산염 5 ㎎

(2) 자당 100 ㎎

(3) 생리식염수 10 ㎖

상기 혼합액을 멤브레인필터로 여과후, 다시 제균 여과하고, 그 여과액을 무균적으로 바이알에 분주하여 질소가스를 충전한 후, 밀봉하여 정맥내 주사제로 하였다.

본 발명의 특정한 구조식을 갖는 복소환식 아미드 화합물 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효성분으로 하는 IgE 항체생산 억제제는 매우 우수한 IgE 항체생산 억제작용을 갖고 있으며, 기관지 천식 예방제, 알레르기성 비염 예방제, 알레르기성 피부염 예방제, 기관지 천식 치료제, 알레르기성 비염 치료제, 알레르기성 피부염 치료제 등에 매우 유용하다.

또, 본 발명의 특정한 구조식을 갖는 복소환식 아미드 화합물 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효성분으로 하는 자기면역질환 억제제는 매우 우수한 관절염 억제작용, 자기항체생산 억제작용 등을 갖고 있으며, 자기면역질환 억제제로서, 특히 전신성 홍반 낭창 예방제, 하시모또 갑상선염 예방제, 중증 근무력증 예방제, 류머티즘형 관절염 예방제, 기란-발레 증후군 예방제, 사구체 신장염 예방제, 전신성 엘리테마토데스 예방제, 전신성 홍반 낭창 치료제, 하시모또 갑상선염 치료제, 중증 근무력증 치료제, 류머티즘형 관절염 치료제, 기란-발레 증후군 치료제, 사구체 신장염 치료제, 전신성 엘리테마토데스 치료제 등으로서 매우 유용하다.

Claims

하기 일반식 (1) 로 표시되는 복소환식 아미드 화합물 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효성분으로서 함유하는 것을 특징으로 하는 IgE 항체생산 억제제.

[화학식 1]

[식중, R 은 수소원자, 알킬, -CHO, -COOH, -CONH₂, -COR¹, -COOR¹, -CONHOR¹, -CONHR¹, CONR¹R^1', -CONHSO₂R¹, -COSR¹, -COCOR², -COCOOR², -CONHCOOR², -COCONR³R⁴, -CSXR¹, -SO₂WR¹, -SO₂NR¹R^1'또는 -SO₂E 를 나타내고;

R¹, R^1'는 동일 또는 상이하며, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 헤테로사이클 또는 헤테로사이클알킬을 나타내고;

R², R³, R⁴는 동일 또는 상이하며, 수소원자, 알킬 또는 아릴알킬을 나타내고, -NR³R⁴에서의 R³과 R⁴는 하나가 되어 헤테로사이클을 나타내도 되고;

X 는 단결합, 산소원자, 황원자 또는 -NH- 를 나타내고;

W 는 단결합, -NH-, -NHCO-, -NHCOO- 또는 -NHCONH- 를 나타내고;

E 는 수산기 또는 아미노를 나타내고;

R⁵, R⁶, R⁷은 동일 또는 상이하며, 수소원자 또는 알킬을 나타내거나, 또는 R⁵, R⁶, R⁷중 하나는 아릴, 아릴알킬, 아릴알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로아릴알케닐을 나타내고, 나머지 2 개는 수소원자를 나타내고;

M 은 탄소원자 또는 질소원자를 나타내고, M 이 질소원자를 나타내는 경우에는 R⁶은 존재하지 않으며;

Y 는 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴을 나타내고;

Z 는 수소원자, -CF₂R⁸, -CF₂CONR⁹R¹⁰, -CF₂COOR⁹, -COOR⁹, -CONR⁹R¹⁰, 하기식 (ⅰ) 로 표시되는 기, 하기식 (ⅱ) 로 표시되는 기, 또는 하기식 (ⅲ) 으로 표시되는 기를 나타내고;

R⁸은 수소원자, 할로겐, 알킬, 퍼플루오로알킬, 아미노알킬, 알킬아미노알킬, 디알킬아미노알킬, 알콕시알킬, 히드록시알킬, 아릴, 아릴알킬, 아릴알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로아릴알케닐을 나타낸다. R⁹, R¹⁰은 동일 또는 상이하며, 수소원자, 알킬, 알케닐, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로사이클알킬, 아릴, 아릴알킬, 아릴알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로아릴알케닐을 나타내고, -NR⁹R¹⁰에서의 R⁹와 R¹⁰은 하나가 되어 헤테로사이클을 나타내도 되고;

[화학식 i]

[화학식 ii]

[화학식 iii]

식 중, a, b, c, d 는 모두 탄소원자를 나타내거나, 또는 어느 하나는 질소원자를 나타내고, 나머지 3 개는 탄소원자를 나타내고;

R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴는 동일 또는 상이하며, 수소원자, 알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 할로겐, 트리플루오로메틸, 시아노, 니트로, -NR¹⁷R^17', -NHSO₂R¹⁷, -OR¹⁷, -COOR¹⁷, -CONHSO₂R¹⁷또는 -CONR¹⁷R^17'를 나타내고; 단, a, b, c, d 의 어느 하나가 질소원자를 나타내는 경우에는 당해 질소원자를 나타내는 a, b, c, d 에 결합하는 R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴는 존재하지 않고;

R¹⁵, R¹⁶은 동일 또는 상이하며, 수소원자, 알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 할로겐, 트리플루오로메틸, 시아노, 니트로, -NR¹⁷R^17', -NHSO₂R¹⁷, -OR¹⁷, -COOR¹⁷, -CONHSO₂R¹⁷또는 -CONR¹⁷R^17'를 나타내고;

R¹⁷, R^17'는 동일 또는 상이하며, 수소원자, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 트리플루오로메틸을 나타내고, -NR¹⁷R^17'에서의 R¹⁷과 R^17'는 하나가 되어 헤테로사이클을 나타내도 되고;

A 는 산소원자, 황원자 또는 -NR¹⁸- 를 나타내고, R¹⁸은 수소원자, 알킬, 시클로알킬 또는 시클로알킬알킬을 나타내고;

n 은 0 또는 1 을 나타내며;

그리고, 상기 알킬, 상기 시클로알킬, 상기 시클로알킬알킬, 상기 아릴, 상기 아릴알킬, 상기 아릴알케닐, 상기 헤테로아릴, 상기 헤테로아릴알킬, 상기 헤테로아릴알케닐, 상기 헤테로사이클 및 상기 헤테로사이클알킬은 1 개 이상의 치환기에 의해 치환되어 있어도 된다].
제 1 항에 있어서, IgE 항체생산 억제제가 기관지 천식 예방제, 알레르기성 비염 예방제, 알레르기성 피부염 예방제, 기관지 천식 치료제, 알레르기성 비염 치료제 또는 알레르기성 피부염 치료제인 IgE 항체생산 억제제.
하기 일반식 (1) 로 표시되는 복소환식 아미드 화합물 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 유효성분으로서 함유하는 것을 특징으로 하는 자기면역질환 억제제.

[화학식 1]

[식중, R 은 수소원자, 알킬, -CHO, -COOH, -CONH₂, -COR¹, -COOR¹, -CONHOR¹, -CONHR¹, CONR¹R^1', -CONHSO₂R¹, -COSR¹, -COCOR², -COCOOR², -CONHCOOR², -COCONR³R⁴, -CSXR¹, -SO₂WR¹, -SO₂NR¹R^1'또는 -SO₂E 를 나타내고;

R¹, R^1'는 동일 또는 상이하며, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 헤테로사이클 또는 헤테로사이클알킬을 나타내고;

R², R³, R⁴는 동일 또는 상이하며, 수소원자, 알킬 또는 아릴알킬을 나타내고, -NR³R⁴에서의 R³과 R⁴는 하나가 되어 헤테로사이클을 나타내도 되고;

X 는 단결합, 산소원자, 황원자 또는 -NH- 를 나타내고;

W 는 단결합, -NH-, -NHCO-, -NHCOO- 또는 -NHCONH- 를 나타내고;

E 는 수산기 또는 아미노를 나타내고;

R⁵, R⁶, R⁷은 동일 또는 상이하며, 수소원자 또는 알킬을 나타내거나, 또는 R⁵, R⁶, R⁷중 하나는 아릴, 아릴알킬, 아릴알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로아릴알케닐을 나타내고, 나머지 2 개는 수소원자를 나타내고;

M 은 탄소원자 또는 질소원자를 나타내고, M 이 질소원자를 나타내는 경우에는 R⁶은 존재하지 않으며;

Y 는 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴을 나타내고;

Z 는 수소원자, -CF₂R⁸, -CF₂CONR⁹R¹⁰, -CF₂COOR⁹, -COOR⁹, -CONR⁹R¹⁰, 하기식 (ⅰ) 로 표시되는 기, 하기식 (ⅱ) 로 표시되는 기, 또는 하기식 (ⅲ) 으로 표시되는 기를 나타내고;

R⁸은 수소원자, 할로겐, 알킬, 퍼플루오로알킬, 아미노알킬, 알킬아미노알킬, 디알킬아미노알킬, 알콕시알킬, 히드록시알킬, 아릴, 아릴알킬, 아릴알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로아릴알케닐을 나타낸다. R⁹, R¹⁰은 동일 또는 상이하며, 수소원자, 알킬, 알케닐, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 헤테로사이클알킬, 아릴, 아릴알킬, 아릴알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로아릴알케닐을 나타내고, -NR⁹R¹⁰에서의 R⁹와 R¹⁰은 하나가 되어 헤테로사이클을 나타내도 되고;

[화학식 i]

[화학식 ii]

[화학식 iii]

식 중, a, b, c, d 는 모두 탄소원자를 나타내거나, 또는 어느 하나는 질소원자를 나타내고, 나머지 3 개는 탄소원자를 나타내고;

R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴는 동일 또는 상이하며, 수소원자, 알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 할로겐, 트리플루오로메틸, 시아노, 니트로, -NR¹⁷R^17', -NHSO₂R¹⁷, -OR¹⁷, -COOR¹⁷, -CONHSO₂R¹⁷또는 -CONR¹⁷R^17'를 나타내고; 단, a, b, c, d 의 어느 하나가 질소원자를 나타내는 경우에는 당해 질소원자를 나타내는 a, b, c, d 에 결합하는 R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴는 존재하지 않고;

R¹⁵, R¹⁶은 동일 또는 상이하며, 수소원자, 알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 할로겐, 트리플루오로메틸, 시아노, 니트로, -NR¹⁷R^17', -NHSO₂R¹⁷, -OR¹⁷, -COOR¹⁷, -CONHSO₂R¹⁷또는 -CONR¹⁷R^17'를 나타내고;

R¹⁷, R^17'는 동일 또는 상이하며, 수소원자, 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬 또는 트리플루오로메틸을 나타내고, -NR¹⁷R^17'에서의 R¹⁷과 R^17'는 하나가 되어 헤테로사이클을 나타내도 되고;

A 는 산소원자, 황원자 또는 -NR¹⁸- 를 나타내고, R¹⁸은 수소원자, 알킬, 시클로알킬 또는 시클로알킬알킬을 나타내고;

n 은 0 또는 1 을 나타내며;

그리고, 상기 알킬, 상기 시클로알킬, 상기 시클로알킬알킬, 상기 아릴, 상기 아릴알킬, 상기 아릴알케닐, 상기 헤테로아릴, 상기 헤테로아릴알킬, 상기 헤테로아릴알케닐, 상기 헤테로사이클 및 상기 헤테로사이클알킬은 1 개 이상의 치환기에 의해 치환되어 있어도 된다].
제 3 항에 있어서, 자기면역질환 억제제가 전신성 홍반 낭창 예방제, 하시모또 갑상선염 예방제, 중증 근무력증 예방제, 류머티즘형 관절염 예방제, 기란-발레 증후군 예방제, 사구체 신장염 예방제, 전신성 엘리테마토데스 예방제, 전신성 홍반 낭창 치료제, 하시모또 갑상선염 치료제, 중증 근무력증 치료제, 류머티즘형 관절염 치료제, 기란-발레 증후군 치료제, 사구체 신장염 치료제 또는 전신성 엘리테마토데스 치료제인 자기면역질환 억제제.