KR20000053123A - (4ｒ,5ｓ,6ｓ,7ｒ)-헥사히드로-1-[5-(3-아미노인다졸)메틸]-3-부틸-5,6-디히드록시-4,7-비스[페닐메틸]-2ｈ-1,3-디아제핀-2-온,이의 제조 방법 및 ｈｉｖ 프로테아제 억제제로서의 용도 - Google Patents

Abstract

본 발명은 HIV 프로테아제 억제제로 유용한 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약적으로 허용되는 염 또는 전구약물형, 이를 포함하는 제약 조성물 및 진단 키트, 및 바이러스 감염의 치료용으로, 또는 분석 표준이나 시약으로 이를 사용하는 방법에 관한 것이다.

<화학식 I>

Description

(4Ｒ,5Ｓ,6Ｓ,7Ｒ)-헥사히드로-1-[5-(3-아미노인다졸)메틸]-3-부틸-5,6-디히드록시-4,7-비스[페닐메틸]-2Ｈ-1,3-디아제핀-2-온, 이의 제조 방법 및 ＨＩＶ 프로테아제 억제제로서의 용도 {(4R,5S,6S,7R)-Hexahydro-1-[5-(3-Aminoindazol)Methyl]-3-Butyl-5,6-Dihydroxy-4,7-Bis[Phenylmethyl]-2H-1,3-Diazepin-2-One, Its Preparation and Its Use as HIV Protease Inhibitor}

2종의 상이한 레트로바이러스, 즉 인간 면역결핍 바이러스 (HIV) 1형 (HIV-1) 또는 2형 (HIV-2)이 면역 억제성 질환, 즉 후천성 면역결핍 증후군 (AIDS)에 병인학적으로 연관되어 있다. HIV 혈청 양성 개체들은 초기에는 증상이 없지만, 통상 AIDS 관련 복합증 (ARC)에 이어 AIDS로 발전한다. 감염된 개체는 심각한 면역 억제를 나타내고, 이로 인해 이들을 쇠약하게 하고 궁극적으로 치명적인 기회감염에 걸리기 쉽게 된다.

AIDS는 자신들의 복잡한 생활환에 따르는 HIV-1 또는 HIV-2 바이러스의 최종 결과이다. 바이러스 입자 생활환은 바이러스 입자의 보호피막 표면의 당단백질과 림프구 세포상의 CD4 당단백질의 결합을 통해 바이러스 입자가 스스로를 숙주 인간 T-4 림프구 면역 세포에 부착시키면서 시작한다. 일단 부착한 바이러스 입자는 자신의 당단백질 피막을 벗고, 숙주 세포의 세포막을 뚫고 들어가서, 자신의 RNA를 드러낸다. 바이러스 입자 효소인 역전사효소가 RNA를 한가닥 DNA로 전사하는 공정을 지시한다. 바이러스성 RNA는 분해되고 두번째 DNA 가닥이 생성된다. 이제 두가닥으로 된 DNA가 인간 세포의 유전자에 통합되고 이들 유전자들이 세포 복제에 사용된다.

이때, 인간 세포는 자신의 RNA 폴리머라제를 사용하여, 통합된 DNA를 바이러스성 RNA로 전사하여 복제 공정을 행한다. 바이러스성 RNA는 전구체 gag-pol 융합 폴리단백질로 번역된다. 그 다음 이 폴리단백질이 HIV 프로테아제 효소에 의해 절단되어 성숙한 바이러스성 단백질을 생성한다. 따라서, HIV 프로테아제는 바이러스 입자를 완전한 감염성의 바이러스로 성숙시키게 되는 연속적인 절단 반응을 제어하는 역할을 한다.

바이러스 입자는 생활환 중 대부분을 면역 세포내에 잠복해 있는 상태로 보내기 때문에 침입하는 바이러스를 죽이는 통상의 인간 면역계 반응은 부담을 안는다. 또한, 새로운 바이러스 입자의 제조에 사용되는 효소인 바이러스성 역전사효소는 그다지 특이적이지 않아서, 바이러스 보호 피막의 표면상에 존재하는 당단백질이 지속적으로 변하게 하는 전사 실수를 일으킨다. 이런 특이성 결여는 하나의 당단백질에 대해 특이적으로 생성된 항체가 다른 당단백질에 대해서는 쓸모없을 수 있어서, 바이러스에 대항할 수 있는 항체의 수가 감소하기에, 면역계의 유효성을 감소시킨다. 바이러스는 면역 반응계가 계속해서 약화되는 동안 계속 복제한다. 결국, HIV는 인간의 면역계에 거의 자유롭게 군림하여 기회감염이 시작될 수 있게하며, 항바이러스제, 면역조절제 또는 이들 모두를 투여하지 않으면 죽음을 초래할 수 있다.

바이러스의 생활환 중에는 항바이러스 약물의 공략 가능 목표로 확인된 적어도 3개의 결정적인 지점이 있다. (1) T-4 림프구 또는 대식 세포의 부위에 대한 바이러스 입자의 최초 부착, (2) 바이러스성 DNA를 생성하는 바이러스성 RNA의 전사 (역전사효소, RT), 및 (3) 복제 기간 중 새로운 바이러스 입자의 조립 (예, HIV 아스파트산 프로테아제 또는 HIV 프로테아제).

레트로바이러스의 게놈은 pol 및 gag 유전자 산물과 같은 폴리단백질 전구체 1종 이상의 단백질 분해 프로세싱을 담당하는 프로테아제를 코딩한다. 이는 문헌 [Wellink, Arch. Virol. 98 1 (1988)]에서 알 수 있다. 레트로바이러스성 프로테아제는 통상 gag 전구체를 코어 단백질로, 그리고 pol 전구체를 역전사효소 및 레트로바이러스성 프로테아제로 프로세싱한다.

레트로바이러스성 프로테아제에 의한 전구체 폴리단백질의 정확한 프로세싱은 감염성 바이러스 입자의 조립에 필수적이다. 프로테아제 결손 바이러스를 생성하는 시험관내 돌연변이가 감염성이 결여된 미숙한 코어의 생성을 유도한다는 것이 밝혀졌다. 이는 문헌 [Crawford et al., J. Virol. 53 899 (1985); Katoh et al., Virology 145 280 (1985)]에서 알 수 있다. 그러므로, 레트로바이러스성 프로테아제 억제는 항바이러스 요법의 주목할 만한 공략 목표이다. 문헌 [Mitsuya, Nature 325 775 (1987)]에서 알 수 있다.

바이러스성 프로테아제를 억제할 수 있다면 바이러스 복제를 차단하는 방법, 또 그에 따라 현행 치료법과 비교해서 보다 부작용이 적을 수 있고, 더욱 효과적이며 약물 저항성 경향이 적은, AIDS와 같은 바이러스성 질병의 치료법을 얻게 된다. 이 결과, 3종의 HIV 프로테아제 억제제들, 즉 로슈 (Roche)사의 사퀴나비르, 애보트 (Abbott)사의 리토나비르 및 머크 (Merck)사의 인디나바르가 시판되고 있으며, 버텍스 (Vertex)사의 VX-478, 애거론 (Agouron)사의 넬피나비르, 저팬 에너지 (Japan Energy)사의 KNI-272 및 시바-가이기 (Ciba-Geigy)사의 CGP 61755 등 다수의 잠재적인 프로테아제 억제제들이 임상 시험중이다.

현재 시판되거나 임상 시험중인 프로테아제 억제제에 의해 밝혀진 것처럼, 광범위한 종류의 화합물들이 잠재적인 HIV 프로테아제 억제제로서 연구되었다. 하나의 코어 (시클릭 우레아)에 큰 관심이 쏠리고 있다. 예컨대 국제 특허 공개 제WO94/19329호에서 램 (Lam) 등은 아래 화학식의 시클릭 우레아 및 이들 우레아의 제조 방법을 일반적으로 기재하고 있다. 비록 본 발명의 화합물이 램 등이 출원한 명세서의 기재 내용에 속하는 것이지만, 이들은 구체적으로 개시하지는 않았다.

현재 프로테아제 억제제가 성공적으로 사용되고 있음에도 HIV 환자들이 단일 프로테아제 억제제에 대해 내성을 갖게 될 수 있다는 것이 밝혀졌다. 따라서, HIV 감염에 더 강력히 대항하기 위해서는 추가의 프로테아제 억제제를 개발할 필요성이 있다.

발명의 요약

따라서, 본 발명의 목적은 신규 프로테아제 억제제를 제공하는 것이다.

본 발명의 또다른 목적은 제약적으로 허용되는 담체 및 치료 유효량의 본 발명의 화합물 또는 그의 제약적으로 허용되는 염 또는 전구약물형 1종 이상을 함유하는 프로테아제 억제 활성을 가진 제약 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또다른 목적은 본 발명에 따른 화합물 또는 그의 제약적으로 허용되는 염 또는 전구약물형 1종 이상의 치료 유효량을 하기 치료를 필요로 하는 숙주에게 투여하는 것을 포함하는 HIV 감염의 신규 치료법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또다른 목적은 (a) 본 발명의 화합물 1종 이상 및

(b) HIV 역전사효소 억제제 및 HIV 프로테아제 억제제로 구성되는 군으로부터 선택된 화합물 1종 이상

의 치료 유효 혼합물을 치료를 필요로 하는 숙주에게 투여하는 것을 포함하는 HIV 감염의 신규 치료법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또다른 목적은 본 발명의 화합물의 유효량으로 체액 시료를 처리하는 것을 포함하는, 체액 시료에 존재하는 HIV를 억제하는 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또다른 목적은 잠재적인 약이 HIV 프로테아제, HIV 성장 또는 이들 모두를 억제하는 능력을 측정하기 위한 시험 또는 분석에서 표준 물질 또는 시약으로 사용하기에 유효한 양으로 본 발명의 화합물 1종 이상을 함유하는 키트 또는 용기를 제공하는 것이다.

아래의 상세한 설명에 의해 명확해질 상기 및 그외의 목적들은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약적으로 허용되는 염 또는 전구약물형이 효과적인 프로테아제 억제제라는 본 발명자들의 발견에 의해 이루어졌다.

본 발명은 HIV 프로테아제의 억제제로 유용한 1-(3-아미노인다졸-5-일)-3-부틸-시클릭 우레아, 이를 함유하는 제약 조성물 및 진단 키트, 및 바이러스 감염의 치료용으로, 또는 분석 표준이나 시약으로 이를 사용하는 방법에 관한 것이다.

따라서, 본 발명의 제1양태는 화학식 I의 신규 화합물 또는 그의 제약적으로 허용되는 염 또는 전구약물형을 제공하는 것이다.

<화학식 I>

본 발명의 제2양태는 제약적으로 허용되는 담체 및 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약적으로 허용되는 염 또는 전구약물형의 치료 유효량을 함유하는 신규 제약 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 제3양태는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약적으로 허용되는 염 또는 전구약물형의 치료 유효량을 하기 치료를 필요로 하는 숙주에게 투여하는 것을 포함하는, HIV 감염의 신규 치료법을 제공하는 것이다.

본 발명의 제4양태는 (a) 화학식 I의 화합물 및

(b) HIV 역전사효소 억제제 및 HIV 프로테아제 억제제로 구성되는 군으로부터 선택된 화합물 1종 이상

의 치료 유효량을 치료를 필요로 하는 숙주에게 함께 투여하는 것을 포함하는, HIV 감염의 신규 치료법을 제공하는 것이다.

또다른 바람직한 양태에서, 역전사효소 억제제는 뉴클레오시드 역전사효소 억제제이다.

더욱 바람직한 양태에서, 뉴클레오시드 역전사효소 억제제는 AZT, 3TC, ddI, ddC 및 d4T로부터 선택된 것이고, 프로테아제 억제제는 사퀴나비르, 리토나비르, 인디나비르, VX-478, 넬피나비르, KNI-272, CGP-61755 및 U-103017로부터 선택된 것이다.

더더욱 바람직한 양태에서, 뉴클레오시드 역전사효소 억제제는 AZT 및 3TC로부터 선택된 것이고, 프로테아제 억제제는 사퀴나비르, 리토나비르 및 인디나비르로부터 선택된 것이다.

더욱 더 바람직한 양태에서, 뉴클레오시드 역전사효소 억제제는 AZT이다.

또다른 더욱 더 바람직한 양태에서, 프로테아제 억제제는 인디나비르이다.

본 발명의 제5양태는 하나 이상의 멸균 용기내에

(a) 화학식 I의 화합물 및

(b) HIV 역전사효소 억제제 및 HIV 프로테아제 억제제로 구성되는 군으로부터 선택된 화합물 1종 이상

의 치료 유효량을 포함하는, HIV 감염의 치료에 유용한 제약 키트를 제공하는 것이다.

본 발명의 제6양태는 화학식 I의 화합물의 유효량으로 체액 시료를 처리하는 것을 포함하는, 체액 시료에 존재하는 HIV의 신규 억제법을 제공하는 것이다.

본 발명의 제7양태는 잠재적인 약이 HIV 프로테아제, HIV 성장 또는 이들 모두를 억제하는 능력을 측정하기 위한 시험 또는 분석에서 표준 물질 또는 시약으로 사용하기에 유효한 양으로 화학식 I의 화합물을 포함하는 신규 키트 또는 용기를 제공하는 것이다.

정의

본 명세서에서 사용된 경우, 다음의 용어들 및 표현들은 지시된 의미를 가진다. 본 발명의 화합물들이 비대칭으로 치환된 탄소원자를 함유하고 광학적으로 활성인 형태나 라세미체 형태로 단리될 수 있음은 알 수 있을 것이다. 광학적으로 활성인 형태의 제조법은 당업계에 공지되어 있고, 예컨대 라세미체의 분할, 또는 광학적으로 활성인 출발물질로부터의 합성이 있다. 특수한 입체화학적 형태 또는 이성질체 형태를 구체적으로 지시하지 않는 한, 본 발명에서는 한 구조의 모든 키랄, 부분입체이성질체, 라세미체 형태 및 모든 기하이성질체 형태를 모두 의도한다.

본 명세서에서 "HIV 역전사효소 억제제"란 HIV 역전사효소 (RT)의 뉴클레오시드 및 비뉴클레오시드 억제제 모두를 일컫는다. 뉴클레오시드 RT 억제제의 예로는 AZT, ddC, ddI, d4T 및 3TC가 있으나, 이들로 제한하는 것은 아니다. 비뉴클레오시드 RT 억제제의 예로는 비비라딘 (파마시아 앤드 업죤사제 U90152S), TIBO 유도체, BI-RG-587, 네비라핀, L-697,661, LY 73497 및 Ro 18,893 (로슈)이 있으나, 이들로 제한하는 것은 아니다.

본 명세서에서 "HIV 프로테아제 억제제"는 HIV 프로테아제를 억제하는 화합물을 일컫는다. 예로는 사퀴나비르 (로슈사제, Ro31-8959), 리토나비르 (애보트사제, ABT-538), 인디나비르 (머크사제, MK-639), VX-478 (버텍스/글락소 웰컴사제), 넬피나비르 (애거론사제, AG-1343), KNI-272 (저팬 에너지사제), CGP-61755 (시바-가이기사제) 및 U-103017 (파마시아 앤드 업죤사제)이 있으나, 이들로 제한하는 것은 아니다. 이의 추가 예로는 국제 특허 공개 제93/07128호, 동 제94/19329호, 동 제94/22840호 및 PCT 출원 번호 제US96/03426호에 기재된 시클릭 프로테아제 억제제들이 있다.

본 명세서에서 "제약적으로 허용되는 염"이란 산염 또는 염기염을 만듦으로써 모화합물이 수식된, 개시된 화합물의 유도체를 일컫는다. 제약적으로 허용되는 염의 예로는 이들로 제한되는 것은 아니나, 아민과 같은 염기성 잔기의 무기 또는 유기산염, 카르복실산과 같은 산성 잔기의 알칼리 또는 유기염 등이 있다. 제약적으로 허용되는 염으로는 예컨대 무독성 무기 또는 유기산으로부터 형성된 모화합물의 통상적인 무독성염 또는 4급 암모늄염이 있다. 이러한 통상적인 무독성 염의 예로는 염산, 브롬화수소산, 황산, 술팜산, 인산, 질산 등의 무기산으로부터 유도된 것들, 및 아세트산, 프로피온산, 숙신산, 글리콜산, 스테아르산, 락트산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 아스코르브산, 파모산, 말레산, 히드록시말레산, 페닐아세트산, 글루탐산, 벤조산, 살리실산, 술파닐산, 2-아세톡시벤조산, 푸마르산, 톨루엔술폰산, 메탄술폰산, 에탄 디술폰산, 옥살산, 이세티온산 등과 같은 유기산으로부터 제조된 염들이 있다.

본 발명의 제약적으로 허용되는 염들은 통상적인 화학적 방법에 의해 염기성 또는 산성 부분을 함유하는 모화합물로부터 합성될 수 있다. 일반적으로, 이러한 염들은 이들 화합물의 유리 산 또는 염기 형태를 물 또는 유기 용매, 또는 이들의 혼합물 (일반적으로 에테르, 에틸 아세테이트, 에탄올, 이소프로판올 또는 아세토니트릴과 같은 비수성 매질이 바람직함) 중에서 적절한 염기 또는 산의 화학식량과 반응시켜 제조할 수 있다. 적절한 염들의 목록은 참고로 본 명세서에 인용한 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Rublishing Company, Easton, PA, 1985, p. 1418]에서 찾을 수 있다.

"제약적으로 허용되는"이란 구문은 정상적인 의학적 판단의 범위내에서, 합리적인 잇점/위험비에 상응하여 과도한 독성, 자극, 알러지 반응 또는 그외의 문제 또는 합병증 없이 인간 및 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합한 화합물, 재료, 조성물 및(또는) 투여형을 지칭하는 것으로 사용된다.

"전구약물"이란 이 전구약물을 포유동물 대상에게 투여하였을 때, 생체내에서 본 발명의 화학식 I 또는 그외의 화학식, 또는 화합물에 따른 활성 모약물을 방출하는 임의의 공유결합된 담체를 포함하는 의미이다. 본 발명의 화합물 (예, 화학식 I의 화합물)의 전구약물은 화합물에 존재하는 관능기를, 변형된 부분이 평이한 조작이나 생체내에서 절단되어 모화합물이 생성되도록 변형시켜 제조된다. 전구약물은 히드록시 또는 아미노기가, 이 전구약물을 포유동물에게 투여했을 때 절단되어 각각 유리 히드록실 또는 유리 아미노를 형성하는 임의의 기에 결합된 본 발명의 화합물을 포함한다. 전구약물형의 예로는 이에 제한되는 것은 아니나, 화학식 I의 화합물에 있는 알콜 및 아민 관능기의 아세테이트, 포르메이트 또는 벤조에이트 유도체; 화학식 I의 화합물에 있는 알콜 관능기의 포스페이트 에스테르, 디메틸글리신 에스테르, 아미노알킬벤질 에스테르, 아미노알킬 에스테르 및 카르복시알킬 에스테르 등이 있다. 추가 예로는 화학식 I의 2개의 히드록시기가 연결되어 에폭시드, -OCH₂SCH₂O-, -OC(=O)O-, -0CH₂O-, -OC(=S)O-, -OC(=O)C(=O)O-, -OC(CH₃)₂O-, -OC((CH₂)₃NH₂)(CH₃)O-, OC(OCH₃)(CH₂CH₂CH₃)O- 또는 -OS(=O)O-를 형성한 화합물들이 있다.

"안정한 화합물" 및 "안정한 구조"란 반응 혼합물로부터 유용한 순도로 단리하고, 유효 치료제로 제제화할 때 활성을 유지할 정도로 충분히 강한 화합물을 지칭하는 의미이다. 안정한 화합물들만을 본 발명의 화합물로 고려한다.

"치환된"이란 "치환된"이란 표현으로 지시된 원자상의 수소 1개 이상이 지시된 원자의 정상 원자가가 넘지 않게 지시된 기(들)로부터 선택되며, 치환으로 안정한 화합물이 생성되는 것을 의미한다. 치환기가 케토 (즉, =O)기인 경우, 원자상의 2개의 수소가 대체된다.

"치료 유효량"이란 숙주에서 HIV 감염을 억제하고 HIV 감염의 증상을 치료하기에 유효한 본 발명의 화합물의 양 또는 청구된 화합물의 혼합물의 양을 포함하는 의미이다. 화합물의 혼합물은 시너지 효과를 일으키는 혼합물이 바람직하다. 예컨대 문헌 [Chou and Talalay, Adv. Enzyme Regul. 22:27-55 (1984)]에 기재된 바로 시너지란 혼합물로 투여하였을 경우에 화합물들이 단일 약제로 단독 투여하였을 때의 화합물들의 효과를 합한 것보다 더 큰 효과 (이 경우, HIV 복제를 억제)를 보일 때를 말하는 것이다. 일반적으로 시너지 효과는 화합물의 농도가 최적 미만일 때 가장 명확하게 증명된다. 시너지는 개별 성분들과 비교하여 혼합물의 보다 낮은 세포독성, 증가된 항바이러스 효과 또는 그밖의 다른 유익 효과로 정의될 수 있다.

본 발명의 그외의 특징은 본 발명을 예시하기 위해 주어졌으며 이로 제한하는 것은 아닌 아래의 예시적인 양태의 설명을 통해 명백해질 것이다.

실시예에서 사용된 약어들을 다음과 같이 정의한다.

"℃"는 섭씨, "d"는 이중선, "dd"는 이중선의 이중선, "eq"는 당량, "g"는 그램, "mg"은 밀리그램, "㎖"는 밀리리터, "H"는 수소, "hr"은 시간, "m"은 복합체, "M"은 몰농도, "min"은 분, "MHz"는 메가헤르쯔, "MS"는 질량 스펙트로스코피, "nmr" 또는 "NMR"은 핵자기 공명 스펙트로스코피, "t"는 삼중체 및 "TLC"는 박층 그로마토그래피를 나타낸다.

<실시예 1>

(4R,5S,6S,7R)-헥사히드로-1-[5-(3-아미노인다졸)메틸]-3-부틸-5,6-디히드록시-4,7-비스[페닐메틸]-2H-1,3-디아자핀-2-온 (I)의 제조

화합물 A는 공지된 방법으로 제조할 수 있다. 예컨대, 화합물 A의 제조방법은 문헌 [Rossano et al., Tetr. Lett. 1995, 36(28), 4967, 4968]의 반응식 1에 개시되어 있으며, 이 내용을 참고로 본 명세서에 인용하였다. 화합물 A의 또다른 제법은 미국 특허 제5,530,124호의 실시예 6에 개시되어 있고, 그 내용을 참고로 본 명세서에 인용하였다.

파트 A: 1,2-디클로로에탄 (100 ㎖) 중의 화합물 1 (10.0 g; 27.3 mmol)로 된 현탁액에 메틸트리플레이트 (3.4 ㎖, 30 mmol)를 가하였다. 밤새 환류시킨 후, 반응물을 포화 NaHCO₃, 포화 NaCl로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고 증발시켜 노란색 오일 12.5 g을 남겼다. 칼럼 크로마토그래피 (플래시 SiO₂, 25% EtOAc/헥산)하여 옅은 노란색 오일로 된 화합물 2 7.86 g을 생성하였고, 이를 결정화되게 두었다 (75% 수율). 융점 = 97 - 100℃. MH⁺= 381.

파트 B: 무수 DMF 30 ㎖ 중의 화합물 1 (10.0 g, 26.3 mmol)로 된 용액에 수소화나트륨 (1.58 g, 65.8 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 45분간 교반하고 무수 DMF 10 ㎖ 중의 1-요오도부탄 (9.68 g, 52.6 mmol)으로 된 용액을 적가하였다. 첨가한 후, 실온에서 밤새 계속 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고 메탄올 5 ㎖를 과량의 수소화나트륨에 가하여 켄칭시켰다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트 200 ㎖ 및 물 150 ㎖로 나누었다. 유기상을 분리하고 물 (4 x 100 ㎖), 염수 100 ㎖로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 플래시 크로마토그래피 (25% EtOAc/헥산)로 정제하여 n-부틸 이소우레아 2 (10.5 g, 92% 수율)를 생성하였다. MS(NH₃-CI/DDIP) (M+H⁺) 437.2 (100%);¹H NMR (300 MHz, CDCl₃, 25℃) δ 7.23 (m, 10H), 4.19 (m, 3H), 3.64 (m, 1H), 3.44 (s, 3H), 3.36 (m, 1H), 3.02 (m, 2H), 2.76 (m, 2H), 2.04 (m, 1H), 1.52 (s, 3H), 1.49 (s, 3H), 1.21 (m, 4H), 0.82 (t, J = 7.0 Hz, 3H).

파트 C: (4R,5S,6S,7R)-헥사히드로-1-[(3-시아노-4-플루오로페닐)메틸]-5,6-O-이소프로필리덴-4,7-비스-(4-페닐메틸)-3-페닐메틸-2H-1,3-디아자핀-2-온 (3)

아세토니트릴 40 ㎖ 중의 화합물 2 (5.0 g, 11.5 mmol)로 된 용액에 4-플루오로-3-시아노벤질 브로마이드 (3.68 g, 17.25 mmol)를 가하였다. 반응 혼합물을 밤새 환류시켰다. 용매를 감압하에서 제거한 후, 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (35% EtOAc/헥산)로 정제하여 백색 고체로 된 시클릭 우레아 3 (4.5 g, 71% 수율)을 생성하였다. MS(NH₃-CI/DDIP) (M+H⁺) 556.3 (100%);¹H NMR (300 MHz, CDCl₃, 25℃) δ 7.41 (m, 1H), 7.28 (m, 7H), 7.13 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 7.05 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 4.50 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 4.07 (m, 2H), 3.70 (m, 3H), 3.44 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 2.90 (m, 4H), 2.12 (m, 1H), 1.50 (s, 6H), 1.26 (m, 4H), 0.83 (t, J = 7.0 Hz, 3H).

파트 D: (4R,5S,6S,7R)-헥사히드로-1-[5-(3-아미노인다졸)메틸]-3-부틸-5,6-디히드록시-4,7-비스(페닐메틸)-2H-1,3-디아자핀-2-온 (I)

n-부탄올 (20 ㎖) 중의 화합물 3 (4.5 g, 8.11 mmol)으로 된 용액에 히드라진 수화물 (0.81 g, 16.2 mmol)을 가하였다. 혼합물을 6시간 동안 환류시켰다. 용매와 과량의 히드라진을 감압하에서 제거하였다. 잔류물을 무수 메탄올 20 ㎖에 용해시키고 다이옥산 2 ㎖ 중의 4 M HCl을 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 메탄올을 제거하고 잔류물을 에틸 아세테이트 80 ㎖ 및 포화 중탄산나트륨 50 ㎖ 사이에서 나누었다. 유기상을 분리하고 물 (2 x 50 ㎖)로 세척하고 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 플래시 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체로 된 화합물 I (3.0 g, 72% 수율)을 생성하였다. 융점 129 - 131℃; MS(NH₃-CI/DDIP) (M+H⁺) 528.3 (100%); C₃₁H₃₇N₅O₃ ⁺¹에 대한 HRMS 이론치 528.2975, 실측치 528.2958;¹H NMR (300 MHz, CD₃OD, 25℃) δ 7.19 (m, 12H), 6.98 (d, J = 1.5 Hz, 2H), 4.74 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 3.85 (dd, J = 10.25, 4.76 Hz, 1H), 3.65 (m, 1H), 3.56 (m, 4H), 3.15 (m, 2H), 2.96 (m, 3H), 2.07 (m, 2H), 1.37 (m, 2H), 1.22 (m, 2H), 0.84 (t, J = 7.0 Hz, 3H).

유용성

화학식 I의 화합물은 HIV 프로테아제 억제 활성을 가지기에 HIV 감염 및 이와 관련된 질병의 치료를 위한 항바이러스제로서 유용하다. 화학식 I의 화합물은 HIV 프로테아제 억제 활성을 가지고 HIV 성장 억제제로서 유효하다. 바이러스의 성장 또는 감염성을 억제하기 위한 본 발명의 화합물의 능력은 예컨대 아래에 기재된 분석을 사용하는 바이러스의 성장 또는 감염성의 표준 분석에서 설명된다.

본 발명의 화학식 I의 화합물들은 또한 HIV를 함유하거나 HIV 노출될 것으로 예상되는 생체 밖 시료에서의 HIV 억제에도 유용하다. 따라서, 본 발명의 화합물들은 HIV를 함유하거나, 이를 함유하거나 노출될 것으로 예상되는 체액 시료 (예컨대, 혈청 또는 정액 시료)에 존재하는 HIV를 억제하는데 사용될 수 있다.

또한 본 발명에 따라 제공된 화합물들은 예컨대 제약 연구 프로그램에서, 바이러스 클론 복제 및(또는) HIV 프로테아제를 억제하는 시약의 효능을 측정하기 위한 시험 또는 분석에 사용하는 표준 또는 참조 화합물로도 유용하다. 따라서, 본 발명의 화합물은 상기 분석에서 대조 화합물 또는 참조 화합물, 및 품질 대조 표준으로 사용될 수 있다. 본 발명의 화합물은 상기 표준 또는 참조 화합물로 사용하기 위해 상용 키트 또는 용기에 담겨서 제공될 수 있다.

본 발명의 화합물들이 HIV 프로테아제에 대해 특이성을 나타내기에, 본 발명의 화합물들은 HIV 프로테아제의 검출을 위한 진단 분석에서 진단용 시약으로 유용할 수 있다. 따라서, 본 발명의 화합물에 의한 분석 (예컨대, 상기된 분석)에서 프로테아제 활성의 억제는 HIV 프로테아제 및 HIV 바이러스가 존재함을 시사할 것이다.

본 명세서에서 사용된 "㎍"은 마이크로그램, "㎎"은 밀리그램, "g"은 그램, "㎕"은 마이크로리터, "㎖"는 밀리리터, "L"은 리터, "nM"은 나노몰농도, "μM"은 마이크로몰농도, "mM"은 밀리몰농도, "M"은 몰농도 및 "nm"은 나노미터를 일컫는다. "시그마"는 미국 미저리주 세인트 루이스에 소재한 시그마-알드리히 (Sigma-Aldrich Corp.)사를 의미한다.

HIV RNA 분석

DNA 플라스미드 및 시험관내 RNA 전사산물:

PTZ 19R로 클로닝한 BH10 (bp 113 - 1816) 중 gag과 pol 서열을 모두 함유하는 플라스미드 pDAB 72를 문헌 [Erickson-Viitanen et al. AIDS Research and Human Retroviruses 1989, 5, 577]에 기재된 방법에 따라 제조하였다. 이 플라스미드를 Bam HI를 사용하여 선형화하고 T7 RNA 폴리머라제를 사용하는 리보프로브 제미니 (Riboprobe Gemini) 시스템 II 키트 (프로메가 (Promega)사제)를 이용하여 시험관내 RNA 전사산물을 생성하였다. 합성한 RNA를 RNase가 없는 DNase (프로메가사제)로 처리하여 정제하고, 페놀-클로로포름으로 추출하고 에탄올로 침전시켰다. RNA 전사산물을 물에 용해시키고 -70℃에 저장하였다. RNA의 농도를 A₂₆₀으로 측정하였다.

프로브:

올리고뉴클레오티드의 5' 말단에 바이오틴을 첨가하여, 문헌 [Cocuzza, Tet. Lett. 1989, 30, 6287]에 기재된 바이오틴-포스포르아미디트를 사용하는 어플라이드 바이오시스템 (Applied Biosystems; 미국 캘리포니아주 포스터 시티에 소재) DNA 합성기에서 바이오티닐화된 캡쳐 프로브를 합성한 후, 이를 HPLC로 정제하였다. gag 바이오티닐화된 캡쳐 프로브 (5'-바이오틴-CTAGCTCCCTGCTTGCCCATACTA 3')는 HXB2의 뉴클레오티드 889 - 912에 상보적이고, pol 바이오티닐화된 캡쳐 프로브 (5'-바이오틴-CCCTATCATTTTTGGTTTCCAT 3')는 HXB2의 뉴클레오티드 2374 - 2395에 상보적이었다. 리포터 프로브로 사용된 알칼리 포스파타제 접합된 올리고뉴클레오티드를 사인진 (Syngene; 미국 캘리포니아주 샌디에고에 소재)에 의해 제조하였다. pol 리포터 프로브 (5' CTGTCTTACTTTGATAAAACCTC 3')는 HXB2의 뉴클레오티드 2403 - 2425에 상보적이었다. gag 리포터 프로브 (5' CCCAGTATTTGTCTACAGCCTTCT 3')는 HXB2의 뉴클레오티드 950 - 973에 상보적이었다. 모든 뉴클레오티드 위치들은 제네틱스 컴퓨터 그룹 시퀀스 어날리시스 소프트웨어 팩키지 (Genetics Computer Group Sequence Analysis Software Package; 문헌 [Devereau Nucleic Acids Research 1984, 12, 387]을 참조)를 통해 접근한 젠뱅크 제네틱 시퀀스 데이타 뱅크 (GenBank Genetic Sequence Data Bank)의 위치에 따른다. 리포터 프로브는 2 x SSC (0.3 M NaCl, 0.03 M 시트르산나트륨), 0.05 M 트리스 (pH 8.8) 및 1 ㎎/㎖ BSA 중의 0.5 μM 스톡 (stock)으로 제조하였다. 바이오닐화된 캡쳐 프로브는 수중의 100 μM 스톡으로 제조하였다.

스트렙타비딘 코팅된 플레이트:

듀폰 바이오테크놀로지 시스템 (미국 매사츄세츠주 보스턴에 소재)으로부터 스트렙타비딘 코팅된 플레이트를 구입하였다.

세포 및 바이러스 스톡:

MT-2 세포에 있어서 5% 소 태아 혈청 (FCS) 또는 MT-4 세포에 있어서 10% FCS, 2 mM L-글루타민 및 겐타마이신 50 ㎍/㎖를 보충한 RPMI 1640에 MT-2 및 MT-4 세포들을 두었다 (모두 Gibco사로부터 구입). HIV-1 RF를 동일 배지내의 MT-4 세포에서 증식시켰다. MT-4 세포를 급성 감염시킨 약 10일 후에 바이러스 스톡을 제조하고 이를 -70℃에서 분획물로 저장하였다. HIV-1 (RF) 스톡의 감염 역가는 MT-2 세포에 대한 용균구 분석 (아래를 참조)으로 측정하였을 때 1 - 3 x 10⁷PFU (용균구 형성 단위)/㎖였다. 감염에 사용된 바이러스 스톡의 각 분획물을 단지 1회 녹였다.

항바이러스 효능을 평가하기 위해, 감염되는 세포들을 감염시키기 하루 전에 부차 배양하였다. 감염시킨 날, 세포를 벌크 감염인 경우 5% FCS를 함유한 RPMI 1640 중에 5 x 10⁵세포/㎖로, 또는 마이크로타이터 플레이트에서의 감염인 경우 5% FCS를 함유한 둘베코 (Dulbecco) 개질된 이글스 (Eagles) 배지에서 2 x 10⁶세포/㎖로 재현탁시켰다. 바이러스를 가하고 3일간 37℃에서 계속 배양시켰다.

HIV RNA 분석

3 M 또는 5 M GED 중의 세포 용해물 또는 정제된 RNA를 최종 구아니디늄 이소티오시아네이트 농도 5 M 및 최종 바이오틴 올리고뉴클레오티드 농도 30 nM로 5 M GED 및 캡쳐 프로브와 혼합하였다. 밀봉된 U자형 바닥의 96개 웰 조직 배양 플레이트 (Nunc 또는 Costar)에서 16 내지 20시간 동안 37℃에서 혼성화시켰다. RNA 혼성화 반응물을 3배의 증류수를 사용하여 최종 구아니디늄 이소티오시아네이트 농도 1 M로 희석하였고 분획물 (150 ㎕)을 스트렙타비딘 코팅된 마이크로타이터 플레이트 웰에 옮겼다. 캡쳐 프로브 및 캡쳐 프로브-RNA 하이브리드의 고정된 스트렙타비딘에 대한 결합을 실온에서 2시간 동안 진행한 후, 플레이트를 듀폰 엘리사 플레이트 세척 완충액 (인산염이 완충된 염수 (PBS), 0.05% Tween 20)으로 6회 세척하였다. 리포터 프로브의 캡쳐 프로브와 혼성화된 목표 RNA의 고정 복합체에 대한 두번째 혼성화는 4 x SSC, 0.66% 트리톤 (Triton) x 100, 6.66% 탈이온된 포름아미드, 1 ㎎/㎖ BSA 및 5 nM 리포터 프로브를 함유하는 혼성화 칵테일 120 ㎕를 첨가하면서, 세척된 스트렙타비딘 코팅된 웰에서 행하였다. 37℃에서 1시간 동안 혼성화시킨 후, 플레이트를 다시 6번 세척하였다. 완충액 δ (2.5 M 디에탄올아민 (pH 8.9, JBL Scientific), 10 mM MgCl₂, 5 mM 아세트산아연 이수화물 및 5 mM N-히드록시에틸-에틸렌-디아민-트리아세트산) 중의 0.2 mM 4-메틸움벨리페릴 포스페이트 (MUBP, JBL Scientific) 100 ㎕를 첨가하여 고정 알칼리 포스파타제 활성을 측정하였다. 플레이트를 37℃에서 인큐베이션하였다. 365 nM에서 여기되는 마이크로플레이트 형광계 (Dynateck사제)를 사용하여 450 nM에서 형광도를 측정하였다.

HIV-1 감염된 MT-2 세포에서 마이크로플레이트 기재의 화합물 평가

평가하고자 하는 화합물을 DMSO에 용해시키고, 시험하고자 하는 최대 농도의 2배 및 2%의 최대 DMSO 농도로 배양 배지에서 희석하였다. 또한 배양 배지 중의 화합물에 대한 추가의 3배 연속 희석을 U 자형 바닥 마이크로타이터 플레이트 (Nunc)에서 직접 행하였다. 화합물을 희석한 후, MT-2 세포 (50 ㎕)를 최종 농도 5 x 10⁵/㎖ (1 x 50⁵/웰)로 가하였다. 세포를 CO₂인큐베이터에서 37℃에서 30분간 화합물과 함께 인규베이션하였다. 항바이러스 효능을 평가하기 위해, HIV-1 (RF) 바이러스 스톡 (50 ㎕)의 적절한 희석액을 세포와 시험 화합물의 희석액을 함유하는 배양 웰에 가하였다. 각 웰에서의 최종 부피는 200 ㎕였다. 플레이트당 8개의 웰을 바이러스 대신 배지 50 ㎕를 가하여 감염되지 않은 채로 둔 반면, 8개의 웰을 항바이러스 화합물이 전혀 존재하지 않는 상태에서 감염시켰다. 화합물 독성을 평가하기 위해, 유사 플레이트를 바이러스로 감염시키지 않은채 배양하였다.

CO₂인큐베이터 내부의 습기가 있는 챔버에서 37℃에서 3일간 배양한 후, 웰당 25 ㎕를 제외한 나머지 배지를 HIV 감염된 플레이트로부터 제거하였다. 바이오티닐화된 캡쳐 프로브를 함유하는 5 M GED 37 ㎕를 GED 3 M 및 캡쳐 프로브 30 nM의 최종 농도로 정착된 세포 및 각 웰 중의 나머지 배지에 가하였다. 플레이트 봉합제 (Costar)를 사용하여 플레이트를 봉하고 37℃ 인큐베이터에서 16 내지 20시간 동안 인큐베이션하여 바이러스 배양물을 위해 사용된 것과 동일한 마이크로플레이트 웰에서 세포 용해물내의 HIV RNA에 대한 캡쳐 프로브의 혼성화를 행하였다. 증류수를 각 웰에 첨가하여 혼성화 반응물을 3배로 희석하고 희석 혼합물 150 ㎕를 스트렙타비딘 코팅된 마이크로타이터 플레이트로 옮겼다. HIV RNA를 상기와 같이 정량분석하였다. 용균된 비감염 세포를 함유하는 웰에 이미 알고 있는 양의 pDAB 72 시험관내 RNA 전사산물을 가하여 작성한 표준 곡선을 각 마이크로타이터 플레이트에 대해 계속하여 감염중에 제조된 바이러스성 RNA의 양을 측정하였다.

항바이러스 활성에 대한 화합물의 평가에 사용된 바이러스 접종물을 표준화하기 위해, 0.2 ㎍/㎖의 디데옥시시티딘 (ddC)에 대한 IC₉₀값 (HIV RNA 수준을 90% 감소시키는데 필요한 화합물 농도)을 주는 바이러스 희석액을 선택하였다. 이 방법을 따를 경우, ddC 보다 효능이 높거나 낮은 다른 항바이러스 화합물의 IC₉₀값을 HIV-1 (RF)의 수개 스톡을 사용하여 재현할 수 있었다. 바이러스의 이 농도는 분석 웰당 ∼3 x 10⁵PFU (MT-2 세포에 대한 용균구 분석으로 측정)에 해당하였고 통상 임의의 바이러스 접종물에서 얻을 수 있는 최대 바이러스 RNA 수준의 약 75%를 생성하였다. HIV RNA 분석에 있어서, IC₉₀값을 동일 배양 플레이트 (평균 8개 웰)에서 감염되고 처리하지 않은 세포로부터의 최종 신호에 대한 RNA 분석에서의 최종 신호 (감염된 세포 시료로부터의 신호 - 감염되지 않은 세포 시료로부터의 신호)의 백분율 감소로 측정하였다. 3개의 척도에 따라 개별 감염 및 RNA 분석의 타당성을 판단하였다. 바이러스 감염은 pDAB 72 시험관내 RNA 전사산물 2 ng으로부터 생성된 신호와 같거나 더 큰 RNA 분석 신호를 발생시켜야 한다. 각 분석 실시에서 측정된 ddC에 대한 IC₉₀은 0.1 내지 0.3 ㎍/㎖라야 한다. 끝으로, 유효한 프로테아제 억제제에 의해 생성된 바이러스 RNA의 안정 수준은 억제되지 않은 감염에서 얻은 수준의 10% 미만이어야 한다. 화합물은 그의 IC₉₀값이 1 μM 미만인 것으로 밝혀졌을 때 활성인 것으로 간주한다.

바이러스 효능 시험에 있어서, 초기에 2배 농도의 화합물 용액을 일렬의 웰에 첨가하는 마이크로타이터 플레이트에서의 모든 조작은 펄킨 엘머/세투스 프로페트 (Perkin Elmer/Cetus ProPette)를 사용하여 행하였다.

투여량 및 제제

활성제가 포유동물의 체내에서 약제의 작용부위, 즉 바이러스 프로테아제와 접촉하도록 하는 모든 수단에 의해 본 발명의 항바이러스 화합물을 바이러스 감염에 대한 치료시 투여할 수 있다. 이들은 제약 관련 용도에 이용할 수 있는 모든 통상적인 수단에 의해 개별 치료제로서 또는 치료제들의 혼합물로 투여될 수 있다. 이들을 단독으로 투여할 수도 있으나, 선택된 투여 경로 및 표준 제약 실제를 기초로 하여 택한 제약 담체와 함께 투여하는 것이 바람직하다.

물론, 투여량은 특정 약제의 약물동태학적 특성, 및 투여 방식 및 경로; 투약자의 연령, 건강상태 및 체중; 증상의 특징 및 정도; 동반하는 치료법의 종류; 치료의 빈도; 및 원하는 효과와 같은 공지의 인자들에 따라 달라질 것이다. 활성 성분의 일일 투여량은 체중 kg 당 약 0.001 내지 약 1000 밀리그램이고, 바람직한 투여량은 약 0.1 내지 30 ㎎/kg일 것으로 예상할 수 있다.

투여에 적합한 조성물의 투여형은 단위 투여형 당 약 1 ㎎ 내지 약 100 ㎎의 활성 성분을 함유한다. 이들 제약 조성물에서 활성 성분은 통상 조성물 총 중량을 기준으로 약 0.5 내지 95 중량%의 양으로 존재할 것이다. 활성 성분은 캡슐, 정제 및 분말제 등의 고상 투여형이나 엘릭시르제, 시럽제 및 현탁액 등의 액상 투여형으로 경구 투여할 수 있다. 또한 이를 멸균 액상 투여형으로 비경구 투여할 수도 있다.

젤라틴 캡슐은 활성 성분, 및 락토스, 전분, 셀룰로스 유도체, 스테아르산마그네슘, 스테아르산 등과 같은 분말 담체를 함유한다. 압축 정제를 제조하기 위해 유사한 희석제를 사용할 수도 있다. 정제 및 캡슐 모두를 시간의 경과에 따라 약물을 지속적으로 방출시키는 지속 방출형 제품으로 제조할 수 있다. 모든 불쾌한 맛을 가리고 대기로부터 정제를 보호하기 위해 압축 정제를 당 코팅 또는 막 코팅하거나, 위장 트랙 중에서 선택적으로 붕해하도록 장용 코팅할 수도 있다. 경구 투여용 액상 투여형은 환자의 거부감을 줄이기 위해 착색제 및 풍미제를 함유할 수 있다.

일반적으로, 물, 적합한 오일, 염수, 수성 덱스트로스 (글루코스), 및 관련 당 용액 및 글리콜 (예, 프로필렌 글리콜 또는 폴리에틸렌 글리콜)이 비경구용 액제에 적합한 담체이다. 비경구 투여용 용액은 활성 성분의 수용성 염, 적합한 안정화제, 및 필요할 경우 완충 물질을 함유하는 것이 바람직하다. 나트륨 비술피트, 아황산나트륨, 또는 아스코르브산 단독이거나 이들의 혼합물과 같은 산화방지제가 적합한 안정화제이다. 또한 시트르산 및 그의 염, 및 나트륨 EDTA도 사용된다. 또한, 비경구용 액제는 벤즈알코늄 클로라이드, 메틸- 또는 프로필-파라벤 및 클로로부탄올 등의 보존제를 함유할 수 있다. 적합한 제약적 담체는 앞서 인용된 이 분야의 표준 참고서인 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences]에 기재된 것들이다.

본 발명의 화합물을 투여하기에 유용한 투여형은 아래에 예시될 것이다.

캡슐

각각 100 ㎎의 분말 활성 성분, 150 ㎎의 락토스, 50 ㎎의 셀룰로스 및 6 ㎎의 스테아르산마그네슘을 표준 2조 경질 젤라틴 캡슐에 채움으로써 수많은 단위 캡슐을 제조할 수 있다.

연질 젤라틴 캡슐

대두유, 목화씨유 또는 올리브유와 같은 식용유 중의 활성 성분 혼합물을 제조하고 양변위 펌프를 사용하여 젤라틴에 주입함으로써 활성 성분 100 ㎎을 함유하는 연질 젤라틴 캡슐을 형성할 수 있다. 그 다음 캡슐을 세척하고 건조시켜야 한다.

정제

통상적인 방법으로 투여 단위가 활성 성분 100 ㎎, 콜로이드성 이산화규소 0.2 ㎎, 스테아르산마그네슘 5 ㎎, 미정질 셀룰로스 275 ㎎, 전분 11 ㎎ 및 락토스 98.8 ㎎인 수많은 정제를 제조할 수 있다. 적절한 코팅을 입혀서 복용하기 좋게 하거나 흡수를 지연시킬 수 있다.

현탁액제

미분된 활성 성분 25 ㎎, 나트륨 카르복시메틸 셀룰로스 200 ㎎, 나트륨 벤조에이트 5 ㎎, 소르비톨 용액 1.0 g, U.S.P., 및 바닐린 0.025 ㎎을 함유하는 각 5 ㎖의 경구 투여용 수현탁액제를 제조할 수 있다.

주사용 제제

물과 10 부피% 프로필렌 글리콜 중에서 활성 성분 1.5 중량%를 교반하여 주사 투여에 적합한 비경구용 조성물을 제조할 수 있다. 통상적으로 사용된 기술로 이 용액을 멸균시킨다.

성분 (a) 및 (b)의 혼합물

본 발명의 각 치료제 성분은 독립적으로 상기된 어떠한 투여형으로도 존재할 수 있고, 또한 상기된 것과 같은 다양한 방식으로 투여될 수도 있다. 아래의 명세서에서 성분 (b)는 앞서 기재된 것과 같은 하나 이상의 약제를 대표하는 것으로 이해되는 것이다. 따라서, 성분 (a) 및 (b)가 동일하거나 별도의 치료제인 경우, 성분 (b)의 각 약제는 동일하거나 별도로 치료할 수 있다.

본 발명의 성분 (a) 및 (b)는 혼합 생성물로서 단일 투여 단위 (즉, 하나의 캡슐, 정제, 분말제, 액제 드에 함께 혼합)에 함께 제제화될 수 있다. 성분 (a) 및 (b)가 단일 투여 단위에서 함께 제제화되지 않은 경우, 성분 (a)는 성분 (b)와 동시에 투여되거나 임의의 순서에 따라 투여 (예, 본 발명의 성분 (a)를 먼저 투여하고 성분 (b)를 투여하거나 이의 역순으로 투여할 수 있슴)될 수 있다. 성분 (b)가 하나 이상의 약제 (예, 하나의 RT 억제제와 하나의 프로테아제 억제제)를 함유하는 경우, 이들 약제들은 함께 또는 임의의 순서로 투여될 수 있다. 동시에 투여하지 않는 경우, 성분 (a) 및 (b)의 투여 간격은 약 한시간 미만인 것이 바람직하다. 성분 (a) 및 (b)의 바람직한 투여 경로는 경구이다. 본 명세서에서 사용된 경구용 약제, 경구용 억제제, 경구용 화합물 등은 경구 투여될 수 있는 화합물을 지칭한다. 비록 성분 (a) 및 (b) 모두를 동일 경로 (즉, 예컨대 둘다 경구 투여)나 동일 투여형으로 투여하는 것이 바람직하지만, 필요할 경우 이들을 각기 상이한 경로 (즉, 예컨대 혼합 생성물 중 한 성분은 경구 투여하고, 다른 성분은 정맥내 투여할 수 있슴) 또는 상이한 투여형으로 투여할 수도 있다.

당업계의 숙련된 개업의가 인식하는 것처럼, 본 발명의 혼합물 치료제의 투여량은 앞서 기재된 것과 같이 특정 약제의 약물동태학적 특성, 투여 방식 및 경로, 투약자의 연령, 건상 상태 및 체중, 증상의 특징 및 정도, 병행하는 치료법의 종류, 치료의 빈도, 및 원하는 효과와 같은 다양한 인자에 따라 변할 수 있다.

본 발명의 성분 (a) 및 (b)의 적절한 투여량은 당업계의 숙련된 개업의가 본 명세서를 기초로 하여 쉽게 확인할 수 있을 것이다. 일반 지침에 따라, 통상적으로 각 성분의 일일 투여량은 약 100 ㎎ 내지 약 1.5 g일 수 있다. 성분 (b)가 화합물 1종 이상을 나타낼 경우, 성분 (b)의 각 약제의 일일 투여량은 약 100 ㎎ 내지 약 1.5 g일 수 있다. 일반 지침에 따라, 성분 (a) 및 성분 (b)의 화합물을 혼합물로 투여하는 경우, 각 성분의 투여량은 이 성분들이 HIV 감염의 치료를 위한 단일 약제로서 단독 투여되는 경우의 일반적인 투여량에 비해 약 70 내지 80% 감소될 수 있다.

본 발명의 혼합 생성물은, 비록 활성 성분들을 단일 투여 단위로 혼합할지라도, 활성 성분들간의 물리적 접촉이 최소화되도록 제제화될 수 있다. 예컨대 생성물을 경구 투여하는 경우, 접촉을 최소화하기 위해 하나의 활성 성분을 장용 코팅할 수 있다. 활성 성분 중 하나를 장용 코팅함으로써, 혼합된 활성 성분들간의 접촉을 최소화할 수 있을 뿐아니라, 이들 성분들 중 하나가 위에서 방출하지 않고 소장에서 방출하는 식으로 위장 트랙에서 이들 성분들 중 하나의 방출을 조절할 수도 있다.

경구 투여가 바람직한 본 발명의 또다른 양태는 위장 트랙을 통해 지속적인 방출을 수행하고 혼합된 활성 성분들간의 물리적 접촉을 최소화하는 지속 방출 물질로 활성 성분 중 하나를 코팅한 혼합 생성물을 제공한다. 또한, 지속 방출 성분은 이 성분의 방출이 오직 소장에서만 일어나게 하기 위해 추가로 장용 코팅될 수도 있다. 또 하나의 접근은 하나의 성분을 지속 및(또는) 장용 방출 중합체로 코팅하고, 다른 성분을 저점도 히드록시프로필 메틸셀룰로스와 같은 중합체 또는 당업계에 공지된 다른 적절한 물질로 코팅하여 활성 성분들을 더 분리하는 혼합 생성물의 제제를 포함할 것이다. 중합체 코팅은 다른 성분과의 상호 작용에 대한 부가 장벽을 형성하는 작용을 한다. 코팅 또는 다른 물질을 통해 성분 (a) 및 (b)간의 접촉이 방지된 각 제제에서, 또한 성분 (b)의 개별 약제간의 접촉도 방지될 수 있다.

하나의 활성 성분이 장용 코팅된 본 발명의 혼합 생성물의 투여형은 장용 코팅된 성분 및 다른 활성 성분을 함께 혼합하여 정제로 압축하거나 장용 코팅된 성분을 하나의 정제층으로 압축하고 다른 활성 성분을 부가층으로 압축하는 식의 정제 형태일 수 있다. 2개 층들을 더 분리하기 위해, 선택적으로 하나 이상의 위약층을 만들어서 이 위약층이 활성 성분들로 된 층들 사이에 존재하게 할 수 있다. 또한, 본 발명의 투여형은 하나의 활성 성분을 정제 또는 다수의 미정제, 입자, 과립 또는 비페릴의 형태로 압축한 다음 장용 코팅하는 캡슐의 형태일 수 있다. 이들 장용 코팅된 미정제, 입자, 과립 또는 비페릴을 캡슐에 넣거나 다른 활성 성분의 과립화와 함께 캡슐로 압축한다.

단일 투여형으로 투여하던지 별도의 형태이나 동시에 또는 동일 방식에 의해 동시에 투여하던지 간에, 본 발명의 혼합 생성물의 성분들간의 접촉을 최소화하는 상기 및 기타 방법들은 본 발명을 기초로하여 당업계의 숙련자들이 쉽게 알 수 있을 것이다.

하나 이상의 멸균 용기에 성분 (a)의 화합물 및 성분 (b)의 화합물 1종 이상을 포함하는 치료 유효량의 제약 조성물을 함유하는 HIV 감염의 치료에 유용한 제약 키트도 또한 본 발명의 영역에 속한다. 용기의 멸균은 당업계의 숙련자들에게 잘 알려진 통상의 멸균법을 이용하여 수행될 수 있다. 성분 (a) 및 성분 (b)는 동일한 멸균 용기나 별도의 멸균 용기에 담을 수 있다. 재료들의 멸균 용기는 별도의 용기, 또는 필요할 경우 1개 이상의 다중 부분으로 된 용기로 이루어질 수도 있다. 성분 (a) 및 (b)는 별도로 있거나, 상기와 같이 단일 투여형 또는 단위로 물리적으로 혼합될 수도 있다. 이러한 키트는 필요할 경우 다양한 통상적인 제약 키트 부품, 예컨대 제약적으로 허용되는 담체 1종 이상, 성분들의 혼합을 위한 추가 바이알 등을 더 포함할 수 있으며, 이는 당업계의 숙련자들이 쉽게 이해할 것이다. 인서트 또는 라벨과 같이, 투여하는 성분들의 양, 투여 안내 및(또는) 성분 혼합 안내를 나타내는 지시문도 또한 키트에 포함시킬 수 있다.

상기 기술에 비추어 본 발명의 수많은 변형 및 변법이 가능한 것은 명백하다. 그러므로, 첨부된 특허 청구의 범위내에서 본 명세서에 구체적으로 기재된 것외에도 본 발명이 실시될 수 있음이 이해된다.

Claims (15)

1. 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약적으로 허용되는 염 또는 전구약물형.

   <화학식 I>
2. 제1항에 있어서, 화학식 I의 화합물.
3. 제약적으로 허용되는 담체 및 제1항에 따른 화합물 또는 그의 제약적으로 허용되는 염 또는 전구약물형의 치료 유효량을 함유하는 제약 조성물.
4. 제3항에 있어서, 상기 화합물이 화학식 I의 화합물인 조성물.
5. 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약적으로 허용되는 염 또는 전구약물형의 치료 유효량을 치료를 필요로 하는 숙주에게 투여하는 것을 포함하는 HIV 감염의 치료법.

   <화학식 I>
6. 제5항에 있어서, 상기 화합물이 화학식 I의 화합물인 조성물.
7. (a) 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약적으로 허용되는 염 또는 전구약물형 및

   (b) HIV 역전사효소 억제제 및 HIV 프로테아제 억제제로 구성되는 군으로부터 선택된 화합물 1종 이상

   의 치료 유효량을 치료를 필요로 하는 숙주에게 함께 투여하는 것을 포함하는 HIV 감염의 치료법.

   <화학식 I>
8. 제7항에 있어서, 상기 화합물이 화학식 I의 화합물인 치료법.
9. 제7항에 있어서, 역전사효소 억제제가 뉴클레오시드 역전사효소 억제제인 치료법.
10. 제9항에 있어서, 뉴클레오시드 역전사효소 억제제가 AZT, 3TC, ddI, ddC 및 d4T로부터 선택된 것이고, 프로테아제 억제제가 사퀴나비르, 리토나비르, 인디나비르, VX-478, 넬피나비르, KNI-272, CGP-61755 및 U-103017로부터 선택된 것인 치료법.
11. 제10항에 있어서, 뉴클레오시드 역전사효소 억제제가 AZT 및 3TC로부터 선택된 것이고 프로테아제 억제제가 사퀴나비르, 리토나비르 및 인디나비르로부터 선택된 것인 치료법.
12. 제11항에 있어서, 뉴클레오시드 역전사효소 억제제가 AZT인 치료법.
13. 제11항에 있어서, 프로테아제 억제제가 인디나비르인 치료법.
14. 하나 이상의 멸균 용기내에

    (a) 제1항에 따른 화합물 및

    (b) HIV 역전사효소 억제제 및 HIV 프로테아제 억제제로 구성되는 군으로부터 선택된 화합물 1종 이상

    의 치료 유효량을 함유하는, HIV 감염의 치료에 유용한 제약 키트.
15. 제14항에 있어서, 성분 (a)가 화학식 I의 화합물인 키트.