KR20000029995A - 알상태에서조류의성별을분류하는방법 - Google Patents
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Abstract
알 상태에서 조류의 성을 결정하는 방법은 새알의 배외액에 성관련 호르몬이 상승된 농도로 존재하는지 또는 존재하지 않는지를 검출하는 단계와, 상승된 농도의 성관련 호르몬의 존재로부터 알 속의 새의 성별을 결정하는 단계를 포함한다. 성관련 호르몬은 에스트로겐인 것이 바람직하다. 또한, 배외액은 요막액인 것이 바람직하다. 본 발명의 방법은 배양기에서 부화기로 알을 이송하는 동안 또는 이송 전에 실시되는 것이 바람직하다.
Description
상업용 새는 일반적으로 부하 후에 그 성별이 분류된다. 대체로 손을 사용하여 육안 검사에 의해 조류의 성별을 분류하는데, 이 방법은 시간이 많이 소모되며 지루하고 부정확한 방법일 수 있다. 조류의 성별을 적절하게 분류하지 못하면 양계와 알 생산에 있어서 문제를 일으킬 수 있기 때문에, 새를 육안 검사에 의하지 않고 그 성별을 분류하는 신뢰할만한 방법이 있으면 매우 유용할 것이다.
따라서, 본 발명의 목적은 조류의 성별을 분류하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또다른 목적은 육안 검사에 의하지 않고 조류의 성별을 분류하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또다른 목적은 알 상태에서 조류의 성별을 분류하는 방법을 제공하는 것이다.
발명의 요약
본 발명의 전술한 목적 및 다른 목적은 본 명세서에서 개시한 바와 같이 알 상태에서 조류의 성별을 결정하는 방법에 의해 달성될 수 있다.
제1 태양으로서, 본 발명은 알 상태에서 조류의 성별을 결정하는 방법을 제공하는데, 이 방법은 새알의 배외액(Extra-embryonic fluid)에 성관련 호르몬이 상승된 농도로 존재하는지의 여부를 검출하는 단계와 배외액에 관련 호르몬이 상승된 농도로 존재하는 사실로부터 알 상태에서 새의 성별을 결정하는 단계를 포함한다.
제2 태양으로서, 본 발명은 다수의 새알을 알 생태에서 새의 성별로 분류하는 방법을 제공하는데, 이 방법은 각각의 새알의 배외액에 성관련 호르몬이 상승된 농도로 존재하는지의 여부를 검출하는 단계와, 다수의 알을 성관련 호르몬을 상승된 농도로 갖는 제1 소집단과 성관련 호르몬을 상승된 농도로 가지지 않는 제2 소집단으로 분리하여, 제1 소집단이 하나의 성을 가진 새를 포함하도록 하고, 제2 소집단이 다른 성을 가진 새를 포함하도록 하는 단계를 포함한다.
제3 태양으로서, 본 발명은 알 상태에서 새의 성별을 결정하는 방법을 제공하는데, 그 방법은 새알의 배외액에 에스트로겐이 상승된 농도로 존재하는지의 여부를 검출하는 단계와, 배외액에 에스트로겐이 상승된 농도로 존재하면 알상태에서 새의 성을 암컷으로 결정하는 단계를 포함한다.
본 발명의 또다른 태양은 다수의 새알을 알 상태에서 성별로 분류하는 방법을 제공하는 것인데, 이 방법은 각각의 새알의 배외액에 에스트로겐이 상승된 농도로 존재하는지의 여부를 검출하는 단계와, 에스트로겐을 상승된 농도로 가진 알을 제1 소집단으로, 에스트로겐을 상승된 농도로 가지지 않는 알을 제2 소집단으로 분리하여, 제1 소집단이 암컷인 새를 포함하도록 하고, 제2 소집단이 숫컷인 새를 포함하도록 하는 단계를 포함한다.
본 발명의 전술한 태양 및 또다른 태양을 다음의 발명의 상세한 설명에서 더욱 상세하게 개시한다.
본 출원은 1996년 10월 4일자로 출원된 미국 가출원 번호 60/027,000호에 따른 이익을 주장한다.
본 발명은 조류의 성별을 분류하는 방법에 관한 것이며, 상세하게는 알 상태에서 조류의 성별을 분류하는 방법에 관한 것이다.
본 명세서에 개시된 방법은 알의 배외액에 성관련 호르몬이 상승된 농도로 존재하는지 또는 존재하지 않는지의 여부를 검출하여 알 상태에서 새를 성별로 분류하는 것이다. 본 명세서에서 사용한 "성관련 호르몬"이란 용어는 부수적인 성 구조 (accesory sex structure) 및/또는 2차 성징을 자극하는 모든 호르몬을 의미한다. 예를 들면, 성관련 호르몬에는 에스트로겐과 안드로겐이 포함된다. "성관련 호르몬"의 또다른 의미는 하나의 특정 성을 가진 새에는 상대적으로 고농도로 존재하고, 다른 성을 가진 새에는 상대적으로 낮은 농도로만 존재하는 호르몬을 말한다. 예를 들면, 발정기를 조절하고 임신을 유지하는 역할을 하는 프로게스토겐 역시 "성관련 호르몬"에 포함된다. "성관련" 호르몬의 또다른 의미는 새의 하나의 성에 대한 특성을 나타내어 다른 하나의 성으로부터 하나의 성을 구별하는데 사용될 수 있는 호르몬을 말한다. 본 명세서에서 개시한 방법은 하나 이상의 성관련 호르몬의 농도를 검출함으로써 실시될 수 있다. 그러나, 일반적으로는 하나의 성관련 호르몬이 상승된 농도로 존재하는지의 여부를 검출하는 것을 포함하는 방법이 바람직하다.
에스트로겐은 에스트라디올, 에스트라디올 17β, 에스트리올과 에스트론을 포함하나, 그것에 한정되지는 않는다. 디하이드로에피안드로스테론과 같은 에스트로겐 전구체, 에스토로겐 분해시의 대사 부산물 및 자연 발생하는 에스트로겐 유도체와 변형물 역시 에스트로겐에 포함된다. 안드로겐은 테스토스테론과 디하이드로테스토스테론을 포함하나, 그것에 한정되지 않는다. 안드로스텐디온, 안드로스텐디올과 안드로스탄디올과 같은 안드로겐 전구체, 안드로겐 분해시의 대사 부산물 및 자연 발생하는 안드로겐 유도체와 변형물 역시 안드로겐에 포함된다. 프로게스토겐은 프로게스테론과 17-OH 프로게스테론을 포함하나, 그것에 한정되지 않는다. 프레그네놀론과 같은 프로게스테론 전구체, 프레그난디올과 같은 프로게스테론 분해시 대사 부산물 및 자연 발생하는 프로게스테론 유도체와 변형물 역시 프로게스토겐에 포함된다.
알 상태에서 조류의 성별을 분류하는 바람직한 방법은 알의 배외액에 에스트로겐이 상승된 농도로 존재하는지 또는 존재하지 않는지의 여부를 검출하는 것을 포함한다. 배외액에 에스트로겐이 상승된 농도로 존재하는 것은 암컷 새임을 나타낸다. 알에서 배외액으로 분비되는 에스트로겐은 모두 본 발명을 수행하는데 이용될 수 있는데, 그중 에스트라디올이 바람직하다. 당해 기술분야의 통상의 지식인이라면, 성관련 페로몬, 단백질 또는 효소가 상승된 농도로 존재하는지 또는 존재하지 않는지의 여부를 검출함으로써 새를 성별로 분류하는 방법 역시 본 명세서에서 개시한 본 발명의 방법에 포함된다는 것을 인정할 것이다. 이러한 페로몬 단백질 또는 효소는 하나의 성을 가진 새에서는 상대적으로 높은 농도로 존재하고, 반대되는 성을 가진 새에서는 상대적으로 낮은 농도로 존재한다. 그러므로, 성관련 페로몬, 단백질과 효소도 성을 구별하는데 이용될 수 있다.
본 발명의 다른 태양에 따르면, 본 명세서에서 개시한 본 발명의 방법은 새알의 배외액에서 성관련 호르몬의 농도를 측정하여 그 측정된 농도를 소정의 표준농도와 비교함으로써 알 상태에서 새의 성별을 결정하는 방법을 제공하는데, 측정농도가 표준값 이상이면 알 속의 새는 하나의 성을 가지는 것을 나타내며, 표준값 이하면 알 속의 새는 다른 성을 가지는 것을 나타낸다. 소정의 표준값은 시험되는 새의 종, 시험할 때의 알의 성숙 정도, 허용가능한 오차율 및 시험되는 호르몬에 따라 달라질 것이다. 당해 기술분야에서 이용가능한 방법을 이용하여 특정한 상태에서 유용한 표준값을 결정하기 위한 실험을 실행할 수 있고, 당해 기술분야의 통상의 지식인에게 이 실험은 명백한 것이다 (예를 들어, 본 명세서의 실시예 1-6을 보라). 바람직한 방법에 있어서, 알은 계란, 호르몬은 에스트로겐, 배외액은 요막액(Allantoic fluid)이다.
본 명세서에 사용된 "새" 또는 "조류"라는 용어는 모든 조류의 종의 암컷과 숫컷을 포함하는 의미이지만, 우선적으로는 알 또는 고기를 위해 상업적으로 길러지는 가금(家禽)을 포함하는 의미이다. 따라서. "새"와 "조류"라는 용어는 특히 꿩, 메추라기, 거위, 오리, 칠면조, 닭 각각의 새끼, 암컷, 수컷을 포함하는 의미이다. 닭과 칠면조가 바람직하며, 가장 바람직한 것은 닭이다.
본 명세서에 사용된 "알 상태"라는 용어는 부화하기 전의 알에 들어있는 새를 의미한다. 닭, 칠면조, 오리, 거위, 메추라기, 꿩 각각의 알을 포함하여 어떤 종류의 새알에 대해서도 본 발명의 방법이 실시될 수 있다. 닭과 칠면조의 알이 바람직하며, 가장 바람직한 것은 계란이다.
본 발명의 방법에 의해 분류되는 알은 바람직하게는 배양 기간의 후반부, 더욱 바람직하게는 배양 기간의 4분의 3에 있는 수정란이다. 바람직하게는 배양 기간이 약 11일 내지 19일, 더욱 바람직하게는 약 13일 내지 17일, 가장 바람직하게는 약 13일 내지 15일 범위에 있는 계란에 대해 본 발명의 검출 또는 분류 단계를 실시할 수 있다. 칠면조 알의 경우에는 바람직하게는 배양 기간이 약 14일 내지 24일, 더욱 바람직하게는 약 16일 내지 20일, 가장 바람직하게는 약 16일 내지 19일 범위에 있는 알에 대해 본 발명의 검출 단계를 실시할 수 있다. 당해 기술분야의 통상의 지식인이라면, 선택된 시기의 배외액의 성관련 호르몬의 농도가 새의 성에 관해 신뢰할만한 예견자인 한, 본 발명이 소정 시기에 실시될 수 있다는 것을 이해할 것이다.
본 명세서에서 개시한 새의 성별 분류 방법에 따르면, 알 속의 배외액에서 하나 또는 그 이상의 성관련 호르몬의 농도를 측정하는데, 성관련 호르몬의 농도는 새의 성을 표시한다. 배외액의 출처는 요막액, 양막액(Amniotic fluid), 난황액(Yolk fluid), 난백액(Albumen fluid) 또는 혈액을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 배외액의 출처가 하나로 동일해야 될 필요는 없고, 예를 들어, 분석에 필요한 충분한 양을 얻기 위해 상기 두 종류 이상의 배외액을 조합하는 것이 이로울 수 있다. 바람직한 배외액은 요막액이다.
본 발명의 방법은 개개의 알에 대해 실시될 수 있지만, 상업적 용도에서는 다수의 알에 대해 실시된다. 일반적으로 상업적 용도에서는 다수의 알을 하나의 배양기에서 배양한다. 대략 배양 기간의 마지막 4분기의 초기에 배양기에서 부화기로 알을 옮긴다. 이 단계를 "이송 단계"라고 한다. 각각의 알의 배외액에서 성관련 호르몬이 상승된 농도로 존재하는지 또는 존재하지 않는지의 검출은 이송 단계 전 또는 후에 실시할 수 있다. 이송할 때에도 검출 단계를 실시할 수 있다. 바람직하게는 이송할 때 또는 이송 전에 검출 단계를 실시한다. 성관련 호르몬의 농도를 검출하는 방법중 일부는 진단적 분석이 실시되고 있는 동안에 시간을 지연시킬 것이다. 본 발명의 실시예에 따르면, 호르몬에 대한 분석이 완료된 후에 알을 성별로 분류하고 부화기로 이송하는 단계가 동시에 이루어지는 것이 바람직하다.
검출 단계는 성관련 호르몬의 농도의 차이를 검출할 수 있는 적합한 방법에 의해 실시될 수 있다. 검출 단계에서는 알의 껍질 또는 속껍질을 통한 적외선분광 분석법, 적절한 표적 영역 (예를 들면, 표적 유체가 요막액인 경우 요막낭)으로의 바이오센서 삽입방법, 또는 알 속에 바늘을 삽입하여 유체 샘플을 뽑아낸 다음 방사성면역분석하는 방법, 적외선분광분석법, 광음향분석법(photoacoustics), 인공 코 이용법(artficial nose techniques), 면역센서 분석법(immunosensor technique)과 같은 방법으로 분석하는 방법과 같은 비침습성 (noninvasive) 기술이 이용될 수 있다.
성관련 호르몬의 "상승된" 농도란 원하는 성을 가진 알에 대해 정상 범위 이상인 농도를 의미한다. 예를 들면, 에스트로겐의 "상승된" 농도란 암컷 새를 포함하는 알에 대해 정상 범위 이상의 농도를 의미한다. 또 다른 의미로는, 성관련 호르몬의 상승된 농도란 알 상태에서 새의 성별을 구별하기에 충분히 높은 농도를 의미한다. 예를 들면, 에스트로겐의 농도가 수컷으로부터 암컷을 구별하기에 충분히 높은 것을 의미한다. 또 다르게 말하면, 성관련 호르몬의 상승된 농도란 알 상태에서 소정 농도 이상의 농도를 의미하는데, 소정 농도란 알 상태에서 새의 성에 관해 신뢰할만한 예견자로서 사용될 수 있는 농도를 의미한다. 에스트로겐의 "상승된" 농도는 표적 유체내에서 ㎖당 20, 40, 80, 100피코그램(picogram) 또는 그 이상의 에스트로겐 농도로 간주될 수 있다. 마찬가지로, 성관련 호르몬의 "상승된" 농도는 표적 유체내에서 ㎖당 20, 40, 80, 100, 200피코그램 또는 그 이상의 농도로 간주될 수 있다.
검출 단계를 거친 후에는, 복수개의 알을. 관계된 성관련 호르몬의 상승된 농도를 가지고 있는 알을 제1 소집단으로, 이와 동일한 성관련 호르몬을 가지고 있지 않은 알을 제2 소집단으로 분류함으로써 새를 성별로 분류한다. 예를 들면, 지시 호르몬이 에스트로겐이라면, 제1 소집단은 암컷 새를 포함하고, 제2 소집단은 수컷 새를 포함한다. 알에서 샘플을 뽑아내고 진단적 시험의 결과를 얻는 사이에 시간이 지연되는 경우, 라벨, 왁스 연필 또는 다른 표시, 또는 뽑아낸 샘플과 관련된 표시에 상응하는 다른 적합한 표시 수단을 가지고 알을 표시할 수 있고, 진단적 시험의 결과가 유용할 때 알을 분류한다.
알을 제1 및 제2 소집단으로 분리한 후, 소집단 별로 배양시켜 부화시킨다. 이 단계는 분리된 부화기에 알을 단순히 가져다두면 되므로 간편하게 수행될 수 있다.
본 발명은 다음의 비제한 실시예에서 더욱 상세하게 설명될 수 있다.
실시예 1-6
요막액과 양막액을 11일 또는 17일된 닭의 배(胚)에서 샘플링하였다. 17일된 배의 경우에는 검시한 다음 생식선(生殖腺)의 육안 관찰에 의해 성을 결정하였다. 11일된 배에서는 혈액 샘플을 수집하여 동결시켜 배의 성을 결정하는 W 특이적 염색체에 대한 PCR 분석을 위해 보관하였다. 샘플들에 대해 방사성면역분석법 (Coat-A-Count Estradiol Kit, Diagnostic Products Corporation)을 이용하여 샘플 속의 에스트라디올의 양을 결정하였다. 그 결과는 표 1에 제시되어 있다.
배의 일령 | 유체 | 성별 | 에스트라디올(pg/ml) |
17 | 요막액 | F | 260414266 |
17 | 요막액 | M | UDUD15 |
17 | 양막액 | F | 41711 |
17 | 양막액 | M | UD9UD |
11 | 요막액 | TBD | 2469UD12UDUDUD27 |
11 | 양막액 | TBD | UDUDUDUDUDUD |
UD (Undetectable)는 검출불가능을 의미함.
TBD (To Be Determined)는 결정될 예정임을 의미함.
전술한 실시예는 본 발명을 설명하기 위한 것이고, 그 실시예에 의해 본 발명이 제한되는 것으로 해석되는 것은 아니다. 본 발명은 다음의 청구항들과 청구항들에 포함되는 균등물에 의해 한정된다.
Claims (36)
- 알 상태에서 조류의 성별을 결정하는 방법에 있어서,새알의 배외액에서 성관련 호르몬이 상승된 농도로 존재하는지 또는 존재하지 않는지를 검출하는 단계; 및상기 배외액에서 상기 성관련 호르몬이 상승된 농도로 존재하는 것으로부터 알 속의 새의 성을 결정하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 배외액이 요막액인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 검출 단계가 방사성면역분석법, 적외선분광분석법, 광음향분석법, 인공코 이용법 및 면역센서 분석법으로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법에 의해 실시되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 알이 계란인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 검출 단계가 배양기 후반부 동안에 실시되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제4항에 있어서, 상기 검출 단계가 배양기의 11일 내지 19일 사이에 실시되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제4항에 있어서, 상기 검출 단계가 배양기의 13일 내지 17일 사이에 실시되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 알 상태에서 새의 성에 따라 다수의 알을 분류하는 방법에 있어서,상기 알들의 각각의 배외액에서 성관련 호르몬이 상승된 농도로 존재하는지 또는 존재하지 않는지를 검출하는 단계; 및알들의 제1 소집단은 하나의 성을 가진 새들을 포함하고 알들의 제2 소집단은 다른 성을 가진 새를 포함하도록, 상기 다수의 알을 상승된 농도의 성관련 호르몬을 가진 알들로 된 상기 제1 소집단과 성관련 호르몬을 상승된 농도로 가지지 않는 알들로 된 상기 제2 소집단으로 분류하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제8항에 있어서, 상기 검출 단계에 선행하여 상기 알들을 하나의 공통 배양기에서 배양하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제8항에 있어서, 상기 분류 단계 후에 알을 부화시키기 위해 상기 알들의 제1 소집단과 상기 알들의 제2 소집단을 따로따로 배양하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제8항에 있어서, 상기 검출 단계 후에 상기 새를 부화기로 이송하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제8항에 있어서, 상기 검출 단계와 동시에 상기 새를 부화기로 이송하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제8항에 있어서, 상기 알이 계란인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제8항에 있어서, 상기 검출 단계가 배양기 후반부 동안에 실시되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제13항에 있어서, 상기 검출 단계가 배양기의 11일 내지 19일 사이에 실시되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제13항에 있어서, 상기 검출 단계가 배양기의 13일 내지 17일 사이에 실시되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제8항에 있어서, 상기 배외액이 요막액인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 8항에 있어서, 상기 검출 단계가 방사성면역분석법, 적외선분광분석법, 광음향분석법, 인공코 이용법 및 면역센서 분석법으로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법에 의해 실시되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 알 상태에서 조류의 성별을 결정하는 방법에 있어서,새알의 배외액에 에스트로겐이 상승된 농도로 존재하는지 또는 존재하지 않는 지를 검출하는 단계; 및상기 배외액에 에스트로겐이 상승된 농도로 존재하는 경우에 알 속의 새의 성을 암컷으로 결정하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제19항에 있어서, 상기 배외액이 요막액인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제19항에 있어서, 상기 검출 단계가 방사성면역분석법, 적외선분광분석법, 광음향분석법, 인공코 이용법 및 면역센서 분석법으로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법에 의해 실시되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제19항에 있어서, 상기 알이 계란인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제19항에 있어서, 상기 검출 단계가 배양기 후반부 동안에 실시되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제22항에 있어서, 상기 검출 단계가 배양기의 11일 내지 19일 사이에 실시되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제22항에 있어서, 상기 검출 단계가 배양기의 13일 내지 17일 사이에 실시되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 알 상태에서 새의 성별에 따라 다수의 알을 분류하는 방법에 있어서,상기 알들의 각각의 배외액에서 성관련 호르몬이 상승된 농도로 존재하는지 또는 존재하지 않는지를 검출하는 단계; 및다수의 알들을 제1 소집단은 암컷인 새들을 포함하고 제2 소집단은 수컷인 새를 포함하도록, 상기 다수의 알을 상승된 농도의 성관련 호르몬을 가진 알들로 된 상기 제1 소집단과 성관련 호르몬을 상승된 농도로 가지지 않는 알들로 된 상기 제2 소집단으로 분류하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제26항에 있어서, 상기 검출 단계에 선행하여 상기 알들을 하나의 공통 배양기에서 배양하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제26항에 있어서, 상기 분류 단계 후에 알을 부화시키기 위해 상기 알들의 제1 소집단과 상기 알들의 제2 소집단을 따로따로 배양하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제26항에 있어서, 상기 검출 단계 후에 부화기에 상기 새들을 이송하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제26항에 있어서, 상기 검출 단계와 동시에 부화기에 상기 새들을 이송하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제26항에 있어서, 상기 알이 계란인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제26항에 있어서, 상기 검출 단계가 배양기 후반부 동안에 실시되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제31항에 있어서, 상기 검출 단계가 배양기의 11일 내지 19일 사이에 실시되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제31항에 있어서, 상기 검출 단계가 배양기의 13일 내지 17일 사이에 실시되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제26항에 있어서, 상기 배외액이 요막액인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제26항에 있어서, 상기 검출 단계가 방사성면역분석법, 적외선분광분석법, 광음향분석법, 인공코 이용법 및 면역센서 분석법으로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법에 의해 실시되는 것을 특징으로 하는 방법.
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