KR20000029605A

KR20000029605A - 칼륨채널억제제

Info

Publication number: KR20000029605A
Application number: KR1019997000669A
Authority: KR
Inventors: 네일 알렉산더 캐슬; 신 패트릭 홀린스헤드; 필립 플로이드 휴즈; 요세 세라핀 멘도자; 조세프 웬델 윌슨; 조지 아마또; 서지 뷰도인; 마이클 그로스; 그랜트 맥나우톤-스미쓰
Original assignee: 이카겐, 인크.; 피터 지. 스트링거; 일라이 릴리 앤드 캄파니
Priority date: 1996-07-26
Filing date: 1997-07-23
Publication date: 2000-05-25
Also published as: BR9710587A; US6083986A; DE69725153D1; JP2002513385A; EP0923543A1; HUP0003250A3; CA2261814A1; AU734711B2; EP0923543B1; ATE250571T1; AU3803597A; IL128205A; WO1998004521A1; HK1020334A1; IL128205A0; DE69725153T2; HUP0003250A1

Abstract

하기 화학식 I의 화합물, 그의 제약상 허용되는 그의 염, 또는 전구의약은 칼륨 채널 억제제로서 또는 심장 부정맥증 및 세포 증식성 질환의 치료에 유용하다.

＜화학식 I＞

식중, R¹은 수소, 알킬 또는 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로시클릴 및 선택적으로 치환된 카르보시클로알킬로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

R²는 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로시클릴 및 선택적으로 치환된 카르보시클로알킬로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

R³은 수소 또는 메틸이고,

R⁴는 수소 또는 메틸이며,

X¹은 C=O, C=S, 또는 SO₂이고,

X²는 C=O 또는 SO₂이고,

Y¹은 O, (CH₂)_p, CH₂O, HC=CH 또는 NH (여기서, p는 0, 1 또는 2이다)이고,

Y²는 O, (CH₂)_q, HC=CH 또는 NH (여기서, q는 0 또는 1이다)이고,

Z는 수소, OR⁵또는 NR⁶R⁷[여기서, R⁵는 수소, (CH₂)_m-R⁸또는 C(O)-(CH₂)_m-R⁸(여기서, m은 1 내지 5이며, R⁸은 N(R⁹)₂, N(R⁹)₃L 또는 CO₂R⁹로, 각각의 R⁹는 독립적으로 수소 또는 알킬로 부터 선택되며, L은 반대이온이다)이고, R⁶은 수소 또는 알킬이고, R⁷은 수소, 알킬 또는 CO₂R¹⁰이며, 여기서 R¹⁰은 알킬이다]이다.

Description

칼륨 채널 억제제 {Potassium Channel Inhibitors}

채널의 한 유형으로서 칼륨 채널은 진핵 세포 및 원핵 세포에서 독특하게 발현되며, 전기적 및 비전기적 세포내 기능의 조절에 있어서 중요한 인자이다. 이들 채널의 아유형은 아미노산 서열 및 기능을 기준으로 명명되며, 예를 들면 전압 게이트 칼륨 채널 (예를 들면, Kv1, Kv2, Kv3, Kv4) 및 내부 정류기 칼륨 채널 (예를 들면, Kir1, Kir2, Kir3, Kir4, Kir5, Kir6)이 포함된다. 이들 유형들은 그들의 잠정적인 기능으로의 약학 및 세포 및 조직에서의 분포로서 특정되어진다 (Chandy and Gutman, "Voltage-gated potassium channel genes" in Handbook of Receptors and Channels-Ligand and Voltage-gated Ion Channels, ed. R.A.North, 1995; Doupnik et al., Curr. Opin. Neurobiol. 5:268, 1995).

칼륨 채널 억제제는 세포막을 통한 칼륨 이온의 이동을 감소시킨다. 결과적으로, 이러한 억제제는 억제제된 또는 차단된 칼륨 채널을 함유하는 세포에서의 전기작용 전위 또는 막 전위 탈분극의 지연을 유도한다. 전기작용 전위의 지연은 특정한 질병, 예를 들면 심장 부정맥증 (Colatsky et al., Circulation 82:2235, 1990)을 치료하기 위한 바람직한 기작이다. 막 전위의 탈분극은 면역계에 관여하는 것과 같은 특정의 다른 질환을 치료하기 위한 바람직한 기작이다 (Kaczorowski and Koo, Perspectives in Drug Discovery and Design, 2:233, 1994).

특히, 칼륨 채널의 차단은 심장 전기적 활성 (Lynch et al., FASEB J. 6:2952, 1992; Sanguinetti, Hypertension 19: 228, 1992; Deal et al., Physiol. Rev. 76:49, 1996), 신경전달 (Halliwell, "K+ channels in the central nervous system" in Potassium Channels Ed. N.S. Cook, pp348, 1990), 및 T 세포 활성 (Chandy et al., J. Exp. Med. 160:369, 1984; Lin et al., J. Exp Med. 177:637, 1993)을 포함하여 여러 생물학적 과정을 조절하는 것으로 나타났다. 이들 효과는 칼륨 채널의 특정한 아형에 의하여 매개된다.

우리는 질환의 치료에 대한 후보 칼륨 채널 목표물을 만드는 기능적이고, 약학적이며, 조직 분포 특성을 나타내는 여러 유형의 칼륨을 클로닝하고 발현시켰다. 예를 들면, Kv1.5 α-서브유닛 유전자 산물을 함유하는 것으로 보고된 I_Kur로 부르는 지연된 정류기 전압 게이트 칼륨 채널은 일반적으로 인간 심방 작용 전위의 재분극에 있어서 중요한 것으로 생각되며, 따라서, 심장 부정맥증, 특히 심방에서 발생하는 부정맥증의 치료를 위한 후보 칼륨 채널 목표물이다 (Wang et al., Circ. Res. 73:1061, 1993; Fedida et al., Circ. Res. 73:210, 1993; Wang et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 272:184, 1995; Amos et al., J. Physiol., 491:31, 1996). 이와 유사하게, I_Kn(Kv1.3 α-서브유닛 유전자 산물을 함유)은 인간 T-임파구의 휴지 막 전위를 결정하므로 (Leonard et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 89:10094, 1992; Kaczorowski and Koㅐ, Perspectives in Drug Discovery and Design, 2:233, 1994), 면역 반응성 질환에서 면역 반응의 T-세포 활성화를 방지하기 위한 후보 칼륨 채널 목표물이다 (Lin et al., J. Exp. Med. 177:637, 1993).

본 발명은 칼륨 채널 기능의 억제제로서 유용한 화합물에 관한 것이다. 본 발명의 화합물은 특히 전압 게이트 칼륨 채널의 억제제로서 활성이다. 따라서, 본 발명의 칼륨 채널 억제제는 세포 작용 전위의 지연이 이로운 질환, 예를 들면 심장 부정맥증을 들 수 있으나 이에 제한되지는 않는 질환의 치료에 이용될 수 있다. 이외에, 본 발명의 화합물은 세포막의 탈분극화의 유도가 이로운 질환, 예를 들면 세포증식성 질환을 들 수 있으나 이에 제한되지 않는 질환의 치료에 이용될 수 있다.

따라서, 본 발명의 목적은 인간을 포함하는 포유류 질환의 치료, 특히 심장 I_Kur칼륨 흐름을 담당하는 칼륨 채널, 또는 T-임파구 I_Kn칼륨 흐름을 담당하는 칼륨 채널, 및 Kv1.5 또는 Kv1.3 α-서브유닛 유전자 산물을 함유하는 칼륨 채널과 같은 세포막 칼륨 채널을 억제에 의하여 치료될 수 있는 질환의 치료에 유용한 화합물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 본 발명의 화합물을 필요로 하는 포유류에게 투여하는 것을 포함하는, 칼륨 채널 기능의 억제와 반응하여 인간을 포함하는 포유류의 질환을 치료하는 방법을 제공하는 것이다.

본 발명은 폭넓게는 칼륨 채널 억제제로서 유용한 유형의 화합물에 관한 것이다.

도 1은 인간 Kv1.3 전위 채널 (CHO-Kv1.3)을 발현하는 차이니스 햄스터 오바리 (CHO) 세포의 막 전위에 대한 3 nM의 마가톡신 및 10 μM의 1-(p-에틸페닐)술피미드-2-히드록시-6-(m-메톡시)벤즈아미도-인단 (화합물 4)의 영향을 비교하는 도이다. 비감염된 CHO 세포에서의 막전위에 대한 10 μM의 화합물 4의 영향을 나타냈다.

도 2는 인간 Kv1.3 또는 Kv1.5 칼륨 채널을 발현하는 CHO 세포에서 60 mM KCl에 의하여 야기된 루비듐 86 (⁸⁶Rb) 방출의 증가에 대한 10 μM의 화합물 4의 억제 효과를 비교한다.

도 3은 전압 클램프된 Kv1.3 또는 Kv1.5 칼륨 채널을 발현하는 CHO 세포에서 화합물 4에 의한 칼륨 흐름의 억제를 설명한다.

도 4는 의약의 부재 (대조군), 화합물 4 1 μM의 시용 2분후, 및 의약 세척후에 쥐 심장 근세포에서 유도된 작용 전위를 나타낸다.

도 5는 파이토케모어글루티닌 (PHA) (1.25 Ehsms 2.5 ㎍/ml) 유도된 인간 T-임파구로의 3H-타이미딘 도입의 축적에 대한 10 μM의 화합물 4, 1 nM의 마가톡신 (MgTx) 및 50 nM의 카리브도톡신 (CTX)의 억제 효과를 비교한다.

본 발명에서 화합물, 및 전압의존성 칼륨 채널, 특히 심장 부정맥증, 특히 심방에서 출현하는 부정맥증 (예를 들면, 심방 조동 및 심방세동)의 치료를 위한 목표물로서 작용할 수 있는 칼륨 채널 (즉, I_kurKv1.5) (Wang et al., Circ. Res. 73:1061, 1993; Fedida et al., Circ. Res. 73:210, 1993; Wang et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 272:184, 1995) 뿐만 아니라, 면역성 질환의 치료를 위한 목표물로서 작용할 수 있는 칼륨 채널 (즉, I_knKv1.3) (Kaczorowski and Koo, Perspectives in Drug Discovery and Design 2:233, 1994) 기능의 억제제로서의 그의 이용성이 설명된다. 결과적으로, 본 발명은 또한 본 발명의 화합물을 사용하여 심장 부정맥증 및 여러 면역성 질환과 같은 칼륨 채널 기능의 억제와 반응하는 질환의 치료하는 방법을 제공한다.

본 발명은 특히 하기 화학식 I의 화합물이 칼륨 채널 기능의 억제제라는 발견을 기초로한다. 특히, 이들 화합물은 인간 칼륨 채널/흐름 I_Kur, I_Kn, Kv1.5, Kv1.3에 대한 활성을 나타낸다. 그 결과, 이들 화합물은 심장 부정맥증 및 세포 증식성 질환의 치료에 유용하다.

따라서, 첫번째 관점으로 본 발명은 칼륨 채널 억제 활성을 갖는 하기 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.

R³은 수소 또는 메틸이고,

R⁴는 수소 또는 메틸이며,

X¹은 C=O, C=S, 또는 SO₂이고,

X²는 C=O 또는 SO₂이고,

Y¹은 O, (CH₂)p, CH₂O, HC=CH 또는 NH (여기서, p는 0, 1 또는 2이다)이고,

Y²는 O, (CH₂)_q, HC=CH 또는 NH (여기서, q는 0 또는 1이다)이고,

Z는 수소, OR⁵또는 NR⁶R⁷[여기서, R⁵는 수소, (CH₂)_m-R⁸또는 C(O)-(CH₂)m-R⁸(여기서, m은 1 내지 5이며, R⁸은 N(R⁹)₂, N(R⁹)₃L 또는 CO₂R⁹로, 각각의 R⁹는 독립적으로 수소 또는 알킬로 부터 선택되며, L은 반대이온이다)이고, R⁶은 수소 또는 알킬이고, R⁷은 수소, 알킬 또는 CO₂R¹⁰이며, 여기서 R¹⁰은 알킬이다]이다.

적합한 반대이온 L은 하기에 설명되며, 비제한적인 예로서 브롬, 염소, 아세테이트 및 토실레이트를 포함한다.

또 다른 관점에서, 본 발명은 칼륨 채널 억제 활성을 갖는 하기 화학식 II의 화합물에 관한 것이다.

식중, R¹은 수소 또는 페닐 및 β-나프틸의 군으로부터 선택되는 선택적으로 치환된 아릴이며,

R²는 선택적으로 치환된 페닐, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로시클릴 및 선택적으로 치환된 카르보시클로알킬로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

m은 0 또는 1이고,

X는 O 또는 S이고,

Y는 (CH₂)_p, (CH₂O)_q및 (NH)_r(여기서, p는 0, 1 또는 2이고, q는 0 또는 1 이고, r은 0 또는 1 이다)이다.

바람직하게는, R²는 페닐 그 자체, 또는 2(오르쏘), 3(메타) 또는 4(파라) 위치에서 하나 이상의 기로 치환된 페닐로 상기 기는 탄소수 1 내지 6의 알킬, 탄소수 1 내지 6의 알콕시, 시아노, 할로 및 트리플루오로메틸이다.

하기 화학식 III의 화합물이 더욱 바람직하다.

식중, R¹, R²및 p는 상기 정의된 것과 동일한 의미를 갖는다. R¹은 바람직하게는 페닐 및 β-나프틸로부터 선택된 아릴기로, 더욱 바람직하게는 탄소수 1 내지 6의 알킬, 탄소수 1 내지6의 알콕시뿐만 아니라, 시아노, 트리플루오로메틸 및 할로와 같은 기로 치환된 아릴기이다. 유사하게, R²는 선택적으로 치환된 페닐, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로시클릴 또는 선택적으로 치환된 카르보시클로알킬로, 이들 각각은 탄소수 1 내지 6의 알킬, 탄소수 1 내지 6의 알콕시, 시아노, 할로 및 트리플루오로메틸로 치환될 수 있다.

화학식 I 및 II에서 설명된 분자의 예는 하기의 것을 포함한다.

화학식 III에서 설명된 화합물의 예는 화합물 2, 4, 6, 8, 10, 11, 12, 13, 15, 16, 17, 19, 20, 24, 26, 27 및 28을 포함한다.

화학식 I 화합물의 유의한 군은 하기 화학식 IV에서 설명된다.

식중, 변수는 화학식 I에서 설명한 것이며, 바람직하게는 다음과 같다: R¹은 바람직하게는 선택적으로 치환된 아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴의 군으로 부터 선택되고, R²는 선택적으로 치환된 아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴의 군으로 부터 선택되고, Z은 바람직하게는 수소 또는 OR⁵로, 여기서 R⁵는 상기 정의된 바와 같다. R¹및 R²는 바람직하게는 생리적 pH에서 비이온화되는 잔기이다.

단독 또는 조합으로 본원에 사용된 "알킬"이라는 용어는 탄소 원자수 1 내지 10의 직쇄 또는 분지쇄 포화 탄화수소기를 가리키고, "탄소수 1 내지 6의 알킬" 및 "저급 알킬"이라는 용어는 탄소 원자수 1 내지 6의 기, 예를 들어 메틸, 알킬, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸, t-부틸 등을 가리킨다.

단독 또는 조합으로 본원에 사용된 "알콕시"라는 용어는 -O- 결합을 통해 모분자에 공유결합된 탄소 원자수 1 내지 10의 직쇄 또는 분지쇄 알킬기를 가리키고, "탄소수 1 내지 6의 알콕시" 및 "저급 알콕시"라는 용어는 탄소 원자수 1 내지 6의 기, 예를 들어 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소프로폭시, 부톡시, t-부톡시 등을 가리킨다.

"알콕시알킬"이라는 용어는 알콕시기로 치환된 알킬기를 가리킨다.

"할로알킬"이라는 용어는 치환된 알킬, 바람직하게는 1개 이상의 할로겐 원자로 치환된 저급 알킬, 바람직하게는 할로겐 원자 1 내지 3개의 할로겐 원자로 치환된 C₁내지 C₄알킬이다. 할로알킬의 한 예는 트리플루오로메틸이다.

단독 또는 조합으로 본원에 사용된 "알카노일"라는 용어는 알칸카르복실산으로부터 유래된 아실 라디칼, 바람직하게는 저급 알칼카르복실산을 가리키고,이러한 것의 예로는 아세틸, 프로피오닐, 부티릴, 발레릴 및 4-메틸발레릴이 있다.

"아미노카르보닐"이라는 용어는 아미노기가 바람직하게는 치환체로서 저급 알킬을 함유하는 1차, 2차(모노-치환된 아미노) 또는 3차 아미노(디-치환된 아미노)기일 수 있는 아미노-치환된 카르보닐(카바모일 또는 카르복사미드)을 의미한다.

"카르복시클로알킬"이라는 용어는 탄소 원자수 3 내지 15의 안정하고, 포화되거나 또는 부분적으로 불포화된 모노시클릭 브릿지된 모노시클릭, 비시클릭 및 스피로 고리 히드로카르빌, 예를 들어 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 비시클로헥실, 비시클로옥틸, 비시클로노닐, 스피로노닐 및 스피로데실을 가리킨다. "카르보시클로알킬"에 대해 언급하는 경우, 본원에서 "임으로 치환된"이라는 용어는 카르보시클로알킬기가 1개 이상의 치환 가능한 고리 위치에서 알킬(바람직하게는, 저급 알킬), 알콕시(바람직하게는, 저급 알콕시), 니트로, 모노알킬아미노(바람직하게는, 저급 알킬아미노), 디알킬아미노(바람직하게는, 디[저급]알킬아미노), 시아노, 할로, 할로알킬(바람직하게는, 트리플루오로메틸), 알카노일, 아미노카르보닐, 모노알킬아미노카르보닐, 디알킬아미노카르보닐, 알킬 아미도(바람직하게는, 저급 알킬 아미도), 알콕시알킬(바람직하게는, 저급 알콕시[저급]알킬), 알콕시카르보닐(바람직하게는, 저급 알콕시카르보닐), 알킬카르보닐옥시(바람직하게는, 저급 알킬카르보닐옥시), 및 할로, 저급 알킬 및 저급 알콕시기로 선택적으로 치환된 아릴(바람직하게는, 페닐)로부터 각각 선택된 1개 이상의 기로 치환될 수 있다는 것을 나타낸다.

본 원에 사용된 "헤테로시클릴"이라는 용어는 탄소 원자와, 질소, 황 및(또는) 산소로부터 선택된 다른 원자를 함유하는 안정하고, 포화되거나 또는 부분적으로 불포화된 모노시클릭 브릿지된 모노시클릭, 비시클릭 및 스피로 고리계를 가리킨다. 바람직하게는, 헤테로시클릴은 탄소 원자로 이루어지고, 질소, 산소 및(또는) 황으로부터 선택된 1, 2 또는 3개의 헤테로 원자를 함유하는 5 또는 6원 모노시클릭 고리 또는 8-11원 비시클릭 고리이다. "헤테로시클릴"에 대해 언급하는 경우, 본원에서 "임으로 치환된"이라는 용어는 헤테로시클릴기가 1개 이상의 치환 가능한 고리 위치에서 알킬(바람직하게는, 저급 알킬), 알콕시(바람직하게는, 저급 알콕시), 니트로, 모노알킬아미노(바람직하게는, 저급 알킬아미노), 디알킬아미노(바람직하게는, 디[저급]알킬아미노), 시아노, 할로, 할로알킬(바람직하게는, 트리플루오로메틸), 알카노일, 아미노카르보닐, 모노알킬아미노카르보닐, 디알킬아미노카르보닐, 알킬 아미도(바람직하게는, 저급 알킬 아미도), 알콕시알킬(바람직하게는, 저급 알콕시[저급]알킬), 알콕시카르보닐 (바람직하게는, 저급 알콕시카르보닐), 알킬카르보닐옥시(바람직하게는, 저급 알킬카르보닐옥시), 및 할로, 저급 알킬 및 저급 알콕시기로 선택적으로 치환된 아릴 (바람직하게는, 페닐)로부터 각각 선택된 1개 이상의 기로 치환될 수 있다는 것을 나타낸다.

본원에 사용된 "헤테로아릴"이라는 용어는 탄소 원자와, 질소, 황 및(또는) 산소를 함유하는 안정한 방향족 모노시클릭 또는 비시클릭 고리계를 가리킨다. 바람직하게는, 헤테로아릴은 탄소 원자로 이루어지고 질소, 산소 및(또는) 황으로부터 선택된 1, 2 또는 3개의 헤테로원자를 함유하는 5 또는 6원 모노시클릭 고리(선택적으로 벤조융합된) 또는 8 내지 11원 비시클릭 고리이다. "헤테로아릴"에 대해 언급하는 경우, "임으로 치환된"이라는 용어는 헤테로아릴기가 1개 이상의 치환 가능한 고리 위치에서 알킬(바람직하게는, 저급 알킬), 알콕시(바람직하게는, 저급 알콕시), 니트로, 모노알킬아미노(바람직하게는, 저급 알킬아미노), 디알킬아미노(바람직하게는, 디[저급]알킬아미노), 시아노, 할로, 할로알킬(바람직하게는, 트리플루오로메틸), 알카노일, 아미노카르보닐, 모노알킬아미노카르보닐, 디알킬아미노카르보닐, 알킬 아미도(바람직하게는, 저급 알킬 아미도), 알콕시알킬(바람직하게는, 저급 알콕시[저급]알킬), 알콕시카르보닐 (바람직하게는, 저급 알콕시카르보닐), 알킬카르보닐옥시(바람직하게는, 저급 알킬카르보닐옥시), 및 할로, 저급 알킬 및 저급 알콕시기로 선택적으로 치환된 아릴(바람직하게는, 페닐)로부터 각각 선택된 1개 이상의 기로 치환될 수 있다는 것을 나타낸다. 이러한 헤테로아릴기의 예는 이속사졸릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 피리딜, 푸릴, 피리미디닐, 피라졸릴, 피리다지닐, 푸라자닐 및 티에닐이다. 헤테로아릴기는 탄소 원자를 통하거나, 또는 헤테로아릴의 모든 헤테로원자를 통해 안정한 구조를 초래하는 모 구조에 결합될 수 있다.

종래 확인된 칼륨 채널 억제제 화합물의 말단 잔기 R¹및 R²에 선택적으로 치환된 헤테로시클릴 및 헤테로아릴기의 특이적 화학적 성질은 중요하지 않으나, 상기와 같은 폭 넓은 다양한 치환기가 예상된다. 바람직하게는, 헤테로시클릴 및 헤테로아릴기에 대한 치환체는 치환 헤테로시클릴 및 헤테로아릴을 포함하여 탄소 및 헤테로 원자의 총수가 20 이하가 되도록 선택된다.

치환체 잔기를 입증하기 위해 본 원에 사용된 "할로" 및 '할로겐"이라는 용어는 플루오르, 염소, 브롬 또는 요오드, 바람직하게는 염소 또는 플루오르를 가리킨다.

단독 또는 조합으로 사용된 "아릴"이라는 용어는 비치환되거나 또는 선택적으로 치환된 모노시클릭 또는 비시클릭 방향족 탄화수소 고리계를 가리킨다. 선택적으로 치환된 페닐 또는 나프틸기가 바람직하다. 아릴기는 1개 이상의 치환 가능한 고리 위치에서 알킬(바람직하게는, 저급 알킬), 알콕시(바람직하게는, 저급 알콕시), 니트로, 모노알킬아미노(바람직하게는, 저급 알킬아미노), 디알킬아미노(바람직하게는, 디[저급]알킬아미노), 시아노, 할로, 할로알킬(바람직하게는, 트리플루오로메틸), 알카노일, 아미노카르보닐, 모노알킬아미노카르보닐, 디알킬아미노카르보닐, 알킬 아미도(바람직하게는, 저급 알킬 아미도), 알콕시알킬(바람직하게는, 저급 알콕시[저급]알킬), 알콕시카르보닐(바람직하게는, 저급 알콕시카르보닐), 알킬카르보닐옥시(바람직하게는, 저급 알킬카르보닐옥시), 및 할로, 저급 알킬 및 저급 알콕시기로 선택적으로 치환된 아릴(바람직하게는, 페닐)로부터 각각 선택된 1개 이상의 기로 선택적으로 치환될 수 있다. 바람직하게는, 아릴기는 바람직하게는 탄소수 1 내지 6의알킬, 탄소수 1 내지 6의알콕시는 물론 시아노, 트리플루오로메틸 및 할로로부터 선택된 4개 이하의 기, 보통은 1 또는 2개의 기로 선택적으로 치환된 페닐이다.

단독 또는 조합으로 사용된 "아랄킬"이라는 용어는 1개의 수소 원자가 상기 정의된 아릴 라디칼로 치환된 상기 정의된 알킬 라디칼을 가리키고, 이것으로는 벤질 및 2-페닐에틸이 있다.

단독 또는 조합으로 사용된 "알콕시카르보닐"이라는 용어는 알콕시가 상기 정의된 바와 같은 식 -C(O)-알콕시의 라디칼을 의미한다.

단독 또는 조합으로 사용된 "알킬카르보닐옥시"라는 용어는 알킬이 상기 정의된 바와 같은 식 -O-C(O)-알킬의 라디칼을 의미한다.

"알케닐"이라는 용어는 1개 이상의 이중 결합, 바람직하게는 1 또는 2개의 이중 결합을 함유하는 탄소 원자수 2 내지 7의 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소를 의미한다. 알케닐의 예로는 에테닐렌, 프로페닐렌, 1,3-부타디에닐 및 1,3,5-헥사트리에닐이 있다.

달리 정의되지 않는 한, 본 원에 사용된 "선택적으로 치환된"이라는 용어는 1개 이상의 위치에서 탄소수 1 내지 6의알킬, 탄소수 1 내지 6의알콕시, 선택적으로 치환된 페닐, 시아노, 할로, 트리플루오로메틸, 탄소수 1 내지 6의알콕시카르보닐, 탄소수 1 내지 6의알킬 카르보닐옥시, 모노- 및 비스-(탄소수 1 내지 6의알킬)-카르복사미드, 탄소수 1 내지 6의알킬 아미도, 니트로 및 모노- 및 비스-(탄소수 1 내지 6의 알킬)-아미노로부터 선택된 1개 이상의 기에 의한 고리계의 치환을 가리킨다.

본 원에 사용된 "치료"라는 용어는 본 발명의 화합물을 투여하여 칼륨 채널의 작용 또는 활성을 변성시켜 질환, 질병 또는 장애와 관련된 증상 또는 합병증의 발병을 방지하고, 질환, 질병 또는 장애에 의해 초래되는 증상 또는 합병증을 경감시키거나, 또는 질환, 질병 또는 장애를 전부 제거하는, 질환, 질병 또는 장애를 겪는 환자의 관리 및 치료를 설명하는 것이다.

칼륨 채널 억제제로 유용한 본 발명에 따른 상기 화학식의 인단 화합물은 다음 연속 단계에 따라 제조될 수 있다.

(1) 1-인다논을 니트로화시켜 니트로인다논을 생성시킨 후 소수 성분 부산물로부터 분리시키는 단계,

(2) (1) 단계의 생성물을 환원시켜 상응하는 알콜을 생성시키는 단계,

(3) (2) 단계의 생성물을 산 촉매된 탈수 반응을 시켜 상응하는 인덴을 생성시키는 단계,

(4) (3) 단계의 생성물의 이중 결합을 산화시켜 에폭시드를 생성시키는 단계,

(5) (4) 단계의 에폭시드를 수산화암모늄과 반응시켜 아미노 알콜을 생성시키는 단계,

(6) 아미노 알콜의 아미노기를 통상적인 보호기로 보호시키는 단계. 폭 넓은 다양한 아미노 보호기는 모 화합물 상의 다른 관능기가 반응하는 동안 -NH₂관능기를 차단 또는 보호하는데 통상적으로 사용된다. 사용되는 보호기의 종류는 유도된 -NH₂기가 연속 반응(들)의 조건(들)에 안정한 한 중요하지는 않으며 잔류 분자의 파괴됨 없이 적절한 지점에서 제거될 수 있다[T.W. Greene and P.Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Chapter 7(1991)]. 바람직한 아미노 보호기는 t-부톡시카르보닐(Boc), 프탈이미드, 시클릭 알킬 및 벤질옥시카르보닐이다.

(7) 아미노 알콜의 히드록실기를 통상적인 보호기로 보호시키는 단계. 폭 넓은 다양한 히드록시 보호기는 모 화합물 상의 다른 관능기가 반응하는 동안 -OH 관능기를 차단 또는 보호하는데 통상적으로 사용된다. 사용되는 보호기의 종류는 유도체화된 -OH기가 연속 반응(들)의 조건(들)에 안정한 한 중요하지는 않으나 잔류 분자의 파괴됨 없이 적절한 지점에서 제거될 수 있다[T.W. Greene and P.Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Chapter 7(1991)]. 적절한 "히드록시 보호기"는 반응이 화합물 상의 다른 관능기에서 수행되는 동안 히드록시기를 차단 또는 보호하는데 통상적으로 사용되는 에테르 또는 에스테르 유도체의 히드록시기 중 하나를 포함한다. 히드록시 보호기로는 t-부틸디페닐실릴옥시(TBDPS), t-부틸디메틸실릴옥시(TBDMS),트리페닐메틸(트리틸), 모노-메톡시트리틸 또는 디-메톡시트리틸, 또는 알킬 에스테르 또는 아릴 에스테르가 있다.

(8) (7) 단계의 생성물의 보호된 아미노기를 탈보호시켜 아미노 관능성 인단을 생성시키는 단계,

(9) (8) 단계의 생성물을 R¹-SO₂- 잔기(여기서, R¹은 화학식 (Ⅰ)에 정의된 R¹와 동등함)에 결합된 술포닐 클로라이드와 반응시키는 단계. 아미노 알콜을 산 포촉제 존재하에서 술포닐 클로라이드(R¹SO₂Cl) 또는 술포닐 무수물과, 적절한 용매 중에서 반응시킨다. 반응이 수행될 수 있는 적절한 용매로는 메틸렌 클로라이드 및 테트라히드로푸란이 있다. 적절한 산 포촉제로는 트리에틸아민 및 피리딘이 있다.

(10) (9) 단계의 술포닐화 생성물을 환원시켜 상응하는 아닐린을 생성시키는 단계,

(11) (10) 단계의 생성물을 RCOCl(여기서, R은 화학식 (Ⅰ)에 정의된 R²와 동등함)을 사용하여 아실화시켜 다른 치환기를 결합시키는 단계, 및

(12) 아실화 생성물의 탈보호된 히드록시기를 탈보호시켜 목적 화합물을 생성시키는 단계.

본 발명의 범위에 속하는 화합물 중에 2개 이상의 키랄 중심이 존재하므로 이러한 화합물은 다양한 입체이성질체형으로 존재할 것이라고 인식된다. 출원인들은 본 발명의 범위 내에 다양한 모든 입체이성질체를 포함하고자 한다. 즉, 본 발명은 화학식 Ⅰ-Ⅳ의 화합물의 시스 및 트랜스 이성질체와 상응하는 거울상 이성질체를 포함할 것이다. 화합물이 라세미체로 제조될 수 있고 그와 같이 용이하게 사용될 수 있을지라도, 개별 거울상 이성질체는 또한 단리될 수 있거나 또는 바람직하게는 필요에 따라 공지된 기술로 합성될 수 있다. 이러한 라세미체 및 개별 거울상 이성질체 및 그의 혼합물은 본 발명의 범위 내에 속할 것이다.

본 발명은 또한 화학식 Ⅰ의 화합물의 제약상 허용 가능한 전구의약을 포함한다. 전구의약은 화학적으로 변형되고 그 작용 부위에서 생물학적으로 불활성일 수 있으나 1종 이상의 효소적 처리 또는 다른 생체 내 처리에 의해 모 생물활성 형태로 분해 또는 변형되는 약물이다. 일반적으로, 전구의약은 모 약물 보다 약물 동력학 프로필이 상이한데, 예를 들어, 점막 상피를 통해 보다 쉽게 흡수될 수록 염 형성 또는 용해도 및(또는) 전신 안정성(예를 들어, 증가된 혈장 반감기)이 우수하다.

당업자들은 전구의약을 생성시키는 모 약물의 화학적 변형으로는 (1) 에스터라제 또는 리파제에 의해 절단되기 쉬운 말단 에스테르 또는 아미드 유도체, (2) 특이적 또는 비특이적 프로테아제에 의해 인식될 수 있는 말단 펩티드, 또는 (3) 막 선택을 통해 작용 부위에 전구의약이 축적되게 하는 유도체 및 상기 기술의 조합이 있음을 인식한다. 선택을 위한 통상적인 절차 및 전구의약 유도체의 제조는 문헌[H.Bundgaard, Design of Prodrugs, (1985)]에 기재되어 있다. 당업자들은 전구의약의 제법에 매우 정통해 있고 그 의미를 잘 숙지하고 있다.

본 발명의 화합물은 그의 순수 형태, 또는 무기산 또는 유기산으로부터 유래된 제약상 허용 가능한 염 형태로 사용될 수 있다. 본 발명의 화합물의 제약상 허용 가능한 산 부가염을 형성시키는데 사용될 수 있는 산의 예로는 무기산(예를 들어, 염산, 황산 및 인산) 및 유기산(예를 들어, 옥살산, 말레산, 숙신산 및 시트르산)이 있다. 따라서, 이로부터 형성되는 염으로는 아세테이트, 아디페이트, 알기네이트, 시트레이트, 아스파테이트, 벤조에이트, 벤젠술포네이트, 비술페이트, 부티레이트, 캄포레이트, 캄포술포네이트, 디글루코네이트, 시클로펜탄프로피오네이트, 도데실술페이트, 에탄술페이트, 글루코헵타노에이트, 글리세로포스페이트, 헤미술페이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 푸마레이트, 히드로클로라이드, 히드로브로마이드 히드로요오다이드, 2-히드록시-에탄술포네이트, 락테이트, 말리에이트, 메탄술포네이트, 니코티네이트, 2-나프탈렌술포네이트, 옥살레이트, 파모에이트, 펙티네이트, 퍼술페이트, 3-페닐프로피오네이트, 피오레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 숙시네이트, 타르트레이트, 티오시아네이트, p-톨루엔술포네이트 및 운데카노에이트가 있으나, 이에 제한되지는 않는다.

또한, 염기성 질소 함유기는 저급 알킬 할라이드(예를 들어, 메틸, 에틸, 프로필 및 부틸 클로라이드, 브로마이드 및 요오다이드); 디알킬 술페이트(예를 들어, 디메틸, 디에틸, 디부틸 및 디아밀 술페이트), 장쇄 할라이드(예를 들어, 데실, 라우릴, 미리스틸 및 스테아릴 클로라이드, 오미드 및 요오다이드), 아랄킬 할라이드(예를 들어, 벤질 및 페네틸 브로마이드)와 기타 등의 시약에 의해 4가화될 수 있다. 일반적으로, 그로부터 수용성 또는 지용성 생성물, 또는 분산성 생성물이 수득된다.

본 발명의 화합물의 제약상 허용가능한 염은 또한 예를 들어 물, 메탄올, 에탄올 디메틸포름아미드, 에틸 아세테이트 등과의 다양한 용매화물로도 존재할 수 있다. 이러한 용매화물의 혼합물은 또한 제조될 수 있다. 이러한 용매화물은 본 발명의 범위에 속한다.

본 발명의 화합물의 칼륨 채널 억제 활성의 약리상 프로필은 통상적인 실험, 예를 들어 하기 실시예에 예시된 공정 및 기술로 당업자들에 의해 쉽게 평가될 수 있다. 특정 화합물의 활성을 평가하기 위한 분석은 특정 칼륨 채널을 발현하도록 안정하게 형질감염된 세포는 물론 천연 포유동물 세포를 사용할 수 있다. 특히, 특정 칼륨 채널을 발현하도록 안정하게 형질감염된 세포를 비스-(1,3-디부틸바르비투르산)트리메틸옥소놀과 같은 전압 의존성 형광 염료로 처리하여 칼륨 채널 억제제 화합물의 억제 활성을 가능하다면 공지된 억제제와 비교하여 측정하는데 사용할 수 있다. 별법으로, 이러한 세포를 검출 가능한 종, 예를 들어⁸⁶Rb로 프라이밍시킨 후 이어서 칼륨 채널을 활성화시킬 수 있는 다른 적절한 조건하에서 특정 화합물로 자극시켜 화합물의 칼륨 억제 활성을 평가할 수 있다. 화합물의 칼륨 채널 억제 활성은 또한 단리된 포유동물 세포와 공지된 패치 클램프 기술(patch clamp technique)[Hamill et al., Pflugers Archiv 391:85, 1981]에 의한 전체 세포 윤곽을 이용하여 결정할 수 있다. 이들과 다른 공지된 기술은 본 발명의 칼륨 채널 억제제 화합물의 활성 수준을 평가하는데 당업자들에게 용이하게 사용될 수 있다.

본 발명의 화합물은 통상적인 무독성 제약상 허용가능한 담체, 보조제와 필요하다면 부형제를 함유하는 단위 제형으로 경구, 비경구, 설하, 비강내, 흡입 분무, 직장 또는 국소 투여를 비롯한 다양한 경로에 의해 투여될 수 있다. 본 원에 사용된 비경구라는 용어는 피하 주사, 정맥내, 근육내, 심장내 주사 또는 주입 기술을 포함한다. 국소 투여는 또한 경피 투여, 예를 들어 경피 패치 또는 이온영동 패치를 사용하는 것도 포함할 수 있다.

주사 가능한 제제, 예를 들어 멸균 주사 가능한 수성 또는 유지성 현탁액은 적절한 분산제 또는 습윤제 및 현탁화제를 사용하여 공지된 방법에 따라 제형될 수 있다. 멸균 주사 가능한 제제는 또한 예를 들어, 1,2-프로판디올 중 용액과 같이, 무독성 비경구적으로 허용 가능한 희석제 또는 용매 중 멸균 주사 가능한 용액 또는 현탁액일 수 있다. 허용 가능한 부형제 및 용매 중에서 사용될 수 있는 것은 물, 링게르액 및 등장성 염화나트륨 용액이다. 또한, 멸균 비휘발성유는 용매 또는 현탁화 매질로 통상적으로 사용된다. 이 목적을 위해, 합성 모노글리세리드 또는 디글리세리드를 비롯한 어떠한 순한 비휘발성유이든지 사용될 수 있다. 또한, 올레산과 같은 지방산도 주사 가능한 제제 중에 사용될 수 있음이 밝혀졌다.

약물의 직장 투여용 좌약은 상온에서는 고체이나 직장 온도에서는 액체이므로 직장에서 용융되어 약물을 방출시키는 적절한 무자극성 부형제(예를 들어, 코코아 버터 및 폴리에틸렌 글리콜)와 약물을 혼합시킴으로써 제조될 수 있다.

경구 투여용 고체 제형으로는 캡슐, 정제, 환제, 분말 및 과립이 있을 수 있다. 이러한 고체 제형 중의 활성 화합물을 1종 이상의 불활성 희석제, 예를 들어 수크로스, 락토스 또는 전분과 혼합시킬 수 있다. 이러한 고체 제형은 또한 통상의 실시와 마찬가지로 불활성 희석제 외에 추가 물질, 예를 들어 스테아르산 마그네슘과 같은 윤활제를 포함할 수 있다. 캡슐, 정제 및 환제의 경우, 제형은 또한 완충제를 함유할 수 있다. 정제 및 환제는 추가로 장용피에 의해 제조될 수 있다.

경구 투여용 액체 제형으로는 당업계에서 통상적으로 사용되는 불활성 희석제, 예를 들어 물을 함유하는 제약상 허용 가능한 에멀젼, 용액, 현탁액, 시럽 및 엘릭서가 있을 수 있다. 이러한 조성물은 또한 보조제, 예를 들어 습윤제, 유화제 및 현탁화제와, 습윤제, 풍미제 및 방향제를 포함할 수 있다.

본 발명의 화합물은 또한 리포솜 형태로 투여될 수 있다. 당업계에 공지된 바와 같이, 리포솜은 일반적으로 포스포리피드 또는 다른 지질 물질로부터 유래된다. 리포솜은 수성 매질 중에 분산된 단일층상 수화된 액체 결정체 또는 다중층상 수화된 액체 결정체로 형성된다. 리포솜을 형성할 수 있는 무독성 생리상 허용 가능하며 대사 가능한 지질은 어떠한 것이든지 사용될 수 있다. 리포솜 형태 중 본 발명의 조성물은 본 발명의 화합물 외에 안정화제, 방부제, 부형제 등을 함유할 수 있다. 바람직한 지질은 천연 및 합성 모두의 포스포리피드 및 포스파티딜 콜린(레시틴)이다. 리포솜 형성 방법은 당업계에 공지되어 있다(예를 들어, 문헌 [Prescott, Ed., Methods in Cell Biology, Volume ⅩⅣ, Academic Press, New York, N.Y.(1976),p. 33 이하 참조]).

덜 바람직한 화합물 중에서 바람직한 화합물을 선택하기 위해, 부표제인 생물학적 분석 아래에 상술된 생체외 분석을 예로 사용한다. 통상적으로, 바람직한 화합물은 설명된 생체 외 분석에 있어서 약 10 nM 내지 약 1 μM의 농도 범위에서 반최대 차단 활성을 초래할 것이다. 당업자들은 최종 및 최적 용량과 양생법이 어떠한 주어진 약물에 대해서든지 경험적으로 결정될 것임을 인식할 것이다.

단일 용량 또는 분할 용량으로 숙주에 투여되는 전체 1일 용량은 예를 들어, 1일을 기준으로 하여 kg 체중 당 활성 성분 0.001 내지 100 mg, 더욱 통상적으로는, 0.01내지 10 mg/kg/일의 양일 수 있다. 투여량 단위 조성물은 1일 용량을 제조하도록 그 약수의 양을 포함할 수 있다. 활성 성분의 치료상 유효한 혈청 농도는 10 nM 내지 10 μM(5 ng/ml 내지 5 μg/ml)일 것으로 예상된다.

단일 제형을 제조하는데 담체 물질과 합해질 수 있는 활성 성분의 양은 치료할 숙주 및 투여의 특정 방식에 따라 달라질 것이다.

그러나, 어떠한 특정 환자이든지 그에 대한 특정 용량 수준은 사용되는 특정 화합물의 활성, 연령, 체중, 종합적인 건강 상태, 성 및 환자의 식이요법, 투여 시간, 투여 방식, 배설율, 약물 배합의 사용 여부, 및 특정 질병의 심도를 비롯한 여러 요인에 좌우될 것이다.

본 발명은 하기 실시예에서 보다 상세히 설명된다. 이들 실시예는 본 발명을 예시하고자 하는 것이지 그를 제한하는 것으로 여겨지지는 않는다. 달리 지시되지 않는 한, 부 및 백분율에 대한 모든 언급은 중량을 기준으로 하고 모든 온도는 섭씨 도로 표현된다. 본 발명의 범위는 하기 실시예만으로 구성되지는 않는다.

＜화합물 제조＞

＜제조예 1＞

1. 진한 H₂SO₄(84 ml) 중 1-인다논(25 g, 0.189 몰) 용액에 H₂SO₄(40 ml) 중 KNO₃(8.33 g, 0.0824 몰) 용액을 0 ℃에서 첨가하여 내부 온도를 15 ℃ 이하로 유지시켰다. 0 ℃에서 1 시간 동안 교반시킨 후 반응 혼합물을 분쇄된 얼음에 붓고 30 분 동안 세게 교반시켰다. 이어서 현탁액을 여과시키고 공기 중에서 건조시키고 LC (95% 에틸 아세테이트/툴루엔)으로 여과하여 질산염화 인다논(18.90 g, 56%)을 엷은 황색 고체로 수득하였다.

2. 메탄올(300 ml) 중 질산염화 생성물 (18.90 g, 0.107 몰)의 용액을 0 ℃까지 냉각시키고 NaBH₄(4.04 g, 0.107 몰)를 조금씩 수 회 첨가하였다. 이어서 반응물을 25 ℃에서 밤새 교반시켰다. 용액을 메탄올성 HCl(200 ml)로 0 ℃에서 켄칭시키고, 감압하에서 농축시키고 CH₂Cl₂에 재용해시키고 H₂O로 세척하고 유기층을 재농축시켜 조 알콜을 갈색 고체로 수득하였다.

3. 톨루엔(300 ml) 중 조 알콜 용액에 촉매량의 p-톨루엔술폰산을 첨가하고 반응물을 딘 스타르크(Dean Stark)를 이용하여 환류에서 1 시간 동안 가열하여, H₂O를 제거하였다. 유기층을 포화 수성 NaHCO₃(3 X 200 ml)로 세척하고 MgSO₄상에서 건조시키고 진공하에서 용매를 제거하고, 생성물을 메탄올로부터 재결정화하여 상응하는 인덴(2 단계에 걸쳐 13.41 g, 78%)을 황갈색 고체로 수득하였다.

4. 디클로로메탄(350 ml) 중 인덴(10.53 g, 0.0653 몰)의 용액에 m-CPBA(929 g, 0.0924 몰)을 0 ℃에서 1 시간에 걸쳐 조금씩 수 회 첨가하였다. 25 ℃에서 밤새 교반시킨 후 혼합물을 포화 수성 Na₂SO₃(2 X 200 ml), 포화 수성 NaHCO₃(2 X 200 ml)로 세척하고, 면 마개로 여과시키고 진공하에서 농축시켰다.

5. 진한 NH₄OH(250 ml) 중 생성된 에폭시드의 현탁액을 유조 중에서 45 ℃에서 밤새 가열하였다. 다음 날, 무수 H₂O를 첨가하고 염기성 수성층을 NaCl로 포화시켰다. 탁한 반응 혼합물을 TLC에 의해 더이상 생성물이 보이지 않을 때까지 THF로 추출하였다. 유기층을 합하고 MgSO₄상에서 건조시키고 농축시키고 에틸 아세테이트로부터 재결정화하여 상응하는 아미노 알콜(2 단계에 걸쳐 11.54 g, 91%)을 부푼 황갈색 고체로 수득하였다.

6. THF(200 ml) 중 아민 알콜(8.34 g, 0.0429 몰)의 용액에 THF(50 ml) 중 디-t-부틸디카르보네이트(11.25 g, 0.0515 몰)의 용액을 첨가하였다. 1 시간 동안 25 ℃에서 교반시킨 후 용매를 감압하에서 제거하고 생성된 고체를 에틸 아세테이트로부터 재결정화하여 상응하는 아미노 보호된 화합물(11.34 g, 90%)을 백색 고체로 수득하였다.

7. N₂분위기 하에서 상부 교반기 및 부가 깔대기가 구비된 3L 3목 둥근 바닥 플라스크를 카르복실화 폴리스티렌 수지(70 g, 2.77 나노몰 CO₂H/g 수지), 무수 디클로로메탄(1000 ml) 및 무수 DMF(10 ml)로 충전시켰다. 이어서, 옥살릴 클로라이드(60.75 ml, 0.582 몰)를 부가 깔대기를 통해 서서히 적가하였다. 질소 하, 환류에서 밤새 교반시킨 후, 용매를 가스 분산 튜브를 이용하여 진공하에서 제거하였다. 이어서 수지를 무수 디클로로메탄(3 X 500 ml)으로 세척하였다. 최종 세척이 끝나면, 수지를 진공에서 2-3 시간 동안 건조시켰다. 이 때, 중합체를 무수 THF(1000 ml)에 재현탁시킨 후 무수 피리딘(314 ml, 3.88 몰), DMAP(11.85 g, 0.0970 몰) 및 아미노 보호된 화합물(85.62 g, 0.291 몰)을 첨가하였다. 혼합물을 불활성 분위기하, 환류에서 10 일 동안 가열하였다. 용매를 진공여과로 제거하고 수지를 THF(3 X 300 ml), CH₂Cl₂(3 X 300 ml)로 세척하고, 진공 오븐에서 밤새 건조시켜 수지 결합된 아미노 보호된 인단(122.18 g)을 황갈색 수지로 수득하였다.

8. 교반 막대가 구비된 둥근 바닥 플라스크에 수지 결합된 인단(28 mg, 0.02827 몰), 디클로로메탄 0.500 ml 및 TFA(0.109 ml, 0.14135 나노몰)을 넣었다. 반응 혼합물을 25 ℃에서 밤새 교반시키고 여과하여 수지를 모으고 10% TEA/CH₂Cl₂에 재현탁시키고 15 분 동안 교반시키고 다시 여과시키고, 마지막으로 디클로로메탄으로 세척하여 아미노 탈보호된 종을 수득하였다.

9. 10 ml 둥근 바닥 플라스크에 수지 결합된 아미노 탈보호된 종(0.02827 밀리몰)에 이어서 디클로로메탄 중 피리딘(0.03659 ml, 0.4524 밀리몰) 및 DMAP(0.518 mg, 0.004241 밀리몰)의 용액 0.5 ml을 넣었다. 이어서 디클로로메탄 (0.1838 ml, 0.1838 밀리몰) 중 친전자체(예를 들어, 아로일 클로라이드)의 1 M 용액을 첨가하고 생성된 혼합물을 25 ℃에서 밤새 교반시켰다. 이 때 용매를 진공 여과시켜 제거하고 수지를 CH₂Cl₂, DMF, 메탄올, DMF, 메탄올 및 CH₂Cl₂로 세척하였다.

10. DMF(0.625 ml) 중 상응하는 아실화 화합물(0.02827 밀리몰)의 용액에 SnCl₂X 2H₂O(102 mg, 0.4524 밀리몰)에 첨가하여 니트로기를 아미노기로 변환시켰다. 25 ℃에서 48 시간 동안 교반시킨 후 수지를 여과시켜 단리하고 CH₂Cl₂, DMF, 메탄올, DMF, 메탄올 및 CH₂Cl₂로 세척하였다.

11. 10 ml 둥근 바닥 플라스크에 아미노 관능성 화합물(0.02827 밀리몰)에 이어서 디클로로메탄 중 피리딘(0.03659 밀리몰) 및 DMAP(0.518 mg, 0.004241 밀리몰)의 용액 0.5 ml을 넣었다. 이어서 디클로로메탄(0.1838 ml, 0.1838 밀리몰) 중 친전자체(예를 들어, 술포닐 클로라이드)의 1 M 용액을 첨가하고 생성된 혼합물을 25 ℃에서 밤새 교반시켰다. 이 때 용매를 진공 여과시켜 제거하고 수지를 CH₂Cl₂로 세척하였다.

12. 11 단계의 화합물(0.02827 밀리몰)을 함유하는 플라스크에 메탄올(0.375 ml, 0.375 밀리몰) 및 THF(0.400 ml) 중 NaOH의 1 M 용액을 첨가하였다. 25 ℃에서 밤새 교반시킨 후 반응물을 메탄올(0.100 ml, 0.400 밀리몰) 중 4 M HCl로 중화시키고 수지를 여과시키고 여액을 감압하에서 농축시켜 목적하는 표적 화합물을 수득하였다.

＜제조예 2＞

트랜스-1-벤즈아미도-2-아세톡시-6-아미노인단

아세틸 클로라이드(1.2 부)를 적가하면서 트랜스-1-t-부틸옥시카르바미도-2-히드록시-6-니트로인단 1 부를 피리딘(16 부), 4-디메틸아미노피리딘(0.15 부) 및 THF의 혼합물에 용해시켰다. 수 시간 후 반응물을 냉수로 처리하고 유기층을 분리하였다. 유기 용액을 냉 1N HCl로 세척하고 유기층을 건조시키고 용매를 증발시켜 트랜스-1-t-부틸옥시카르바미도-2-아세톡시-6-니트로인단을 생성시켰다. THF 중 아미노- 및 히드록시-보호된 니트로인단의 용액을 무수 HCl 스트림으로 5 분 동안 처리한 후 이어서 1 시간 더 교반시켰다. 용액을 냉 포화 중탄산나트륨으로 조심스럽게 처리하고 유기층을 물로 세척하고 건조시키고 용매를 중발시켜 트랜스-1-아미노-2-아세톡시-6-니트로인단을 생성시켰다. 피리딘(16 부), 4-디메틸아미노피리딘(0.15 부) 및 CH₂Cl₂의 혼합물 중 아미노 탈보호된 화합물의 용액을 벤조일 클로라이드(1.2 부) 용액으로 처리하고 반응물을 밤새 교반시켰다. 반응물을 빙수에 붓고 유기층을 분리하고, 1 N HCl 및 염수로 연속으로 세척하였다. 유기층을 건조시키고 용매를 증발시켜 트랜스-1-벤즈아미도-2-아세톡시-6-니트로인단을 생성시켰다. DMF 중 이 아실화된 생성물(1 부)의 용액을 SnCl₂·2H₂O(16 부)로 처리하고 밤새 교반시켰다. 반응물을 빙수에 붓고 반응물을 염기성으로 만들고, 혼합물을 CH₂Cl₂로 추출하였다. 유기 추출물을 염수로 세척하고 용액을 건조시키고 용매를 증발시켜 트랜스-1-벤즈아미도-2-아세톡시-6-아미노인단을 수득하였다.

＜제조예 3＞

트랜스-1-벤즈아미도-2-히드록시-6-카르복스아미도-인단

EtOAc 중의, 제조예 2에 설명한 바와 같이 제조한 트랜스-1-벤즈아미도-2-아세톡시-6-니트로인단 (1부)의 용액을 PtO₂의 존재하에서 몇 시간 동안 H₂(60 psi)로 처리하였다. 상기 촉매를 제거하고, 용매를 증발시켜 트랜스-1-벤즈아미도-2-아세톡시-6-아미노인단을 얻었다. 피리딘 (16부), 4-디메틸아미노피리딘 (0.15부) 및 CH₂Cl₂의 혼합물 중의 상기 아미노인단 (1부)의 용액을 염화 아로일 (RCOCl) (1.2부)의 용액으로 처리하고, 반응물을 밤새 교반하였다. 반응물을 빙수에 붓고, 유기층을 분리하고, 포화 탄산수소 나트륨 및 염수로 연속적으로 세척하였다. 유기물을 건조시키고, 용매를 증발시켜 트랜스-1-벤즈아미도-2-아세톡시-6-카르복스아미노-인단을 얻었다. 메탄올 중 1M NaOH 중의 상기 인단의 용액을 밤새 교반하였다. 이 반응물을 빙수에 넣고 CH₂Cl₂로 추출하였다. 유기 추출물을 염수로 세척하고, 건조시키고, 용매를 증발시켜 트랜스-1-벤즈아미도-2-히드록시-6-카르복스아미도-인단을 얻었다.

＜제조예 4＞

트랜스-1-벤즈아미도-2-히드록시-6-카르복스아미도-인단

DMF 중의 벤즈아미드 (2부)의 용액을 NaH (2부)로 처리하고, 가스 방출이 멈출 때 까지 반응물을 교반하였다. 이 반응물에 1,2-에폭시-6-니트로인단 (1부)를 첨가하고, 반응물을 60 ℃에서 밤새 교반하였다. 이 반응물을 빙수에 붓고, CH₂Cl₂로 추출하였다. 유기 추출물을 물로 세척하고, 건조시키고, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 크로마토그래피하여 트랜스-1-벤즈아미도-2-히드록시-6-니트로인단을 얻었다. 피리딘 (16부), 4-디메틸아미노피리딘 (0.15부), 및 THF 또는 CH₂Cl₂와 같은 불활성 유기 용매의 혼합물 중의 니트로인단 (1부)의 용액에 염화 아세틸 (1.2부)를 적가하였다. 몇 시간 후, 상기 반응물을 냉수로 처리하고, 유기층을 분리하였다. 유기 용액을 1N HCl로 세척하고, 유기층을 건조시키고, 용매를 증발시켜 트랜스-1-벤즈아미도아미도-2-아세톡시-6-니트로인단을 얻었다. 제조예 2에서와 같은 보호 인단 가공으로 트랜스-1-벤즈아미도-2-히드록시-6-카르복스아미도-인단을 얻었다.

＜제조예 5＞

1-벤즈아미도-6-카르복스아미도인단

EtOH 중의 6-니트로인단-1-온 (1부) 및 레이니-Ni의 혼합물을 수소 (60 psi)로 몇시간 동안 처리하였다. 촉매를 제거하고, 용매를 증발시켜 6-아미노인단-1-온을 얻었다. 피리딘 (16부), 4-디메틸아미노피리딘 (0.15부) 및 CH₂Cl₂의 혼합물 중의 아미노인다논 (1부)의 용액을 염화 아실 (1.2부)의 용액으로 처리하고, 반응물을 밤새 교반하였다. 반응물을 빙수에 붓고, 유기층을 분리하고, 포화 탄산수소 나트륨 및 염수로 연속적으로 세척하였다. 유기물을 건조시키고, 용매를 증발시켜 6-카르복스아미도-인단-1-온을 얻었다. EtOH 및 NH (5부)의 혼합물 중의 이 생성물 (1부)의 용액을 Pd-C-황화물의 존재하에서 수소 (60psi)로 처리하였다. 몇 시간 후, 촉매를 제거하고, 용매를 증발시켜 1-아미노-6-카르복스아미도-인단을 얻었다. 피리딘 (16부), 4-디메틸아미노피리딘 (0.15부), 및 CH₂Cl₂의 혼합물 중의 인단 (1부)의 용액을 염화 벤조일 (1.2부)의 용액으로 처리하고, 반응물을 밤새 교반하였다. 상기 반응물을 빙수에 붓고, 유기층을 분리시키고, 포화 탄산수소 나트륨 및 염수로 연속적으로 세척하였다. 유기물을 건조시키고, 용매를 증발시켜 1-벤즈아미도-6-카르복스아미도-인단을 얻었다.

표준 플래쉬 크로마토그래피 기술을 사용하여 칼럼 크로마토그래피하였다. 적당한 플래쉬 크로마토그래피 기술이 설명된 공지된 문헌은 문헌 [Still, W. C. Kahn, 및 Nitra, J. Org. Chem, 43:2932 (1978)]이다. 생성물을 함유하는 분획을 통상적으로 감압하게 증발시켜 생성물을 얻었다.

메탄올, 피리딘 또는 다른 적당한 용매를 사용하여 광회전을 얻었다.

유리 염기를 디에틸 에테르 중에 넣어 특정 화합물의 히드로크로라이드 염을 제조하였다. 에테르 용액을 교반하는 동안, 용액이 산성이 될 때 까지 디에틸 에테르 중의 HCl 용액을 적가하였다. 별법으로, 에테르 용액을 건조 HCl 가스로 처리하였다.

아세트산 에틸 중에 유리 염기를 넣음으로써 특정 화합물의 말레이트 염을 제조하고, 말레산으로 처리하였다. 형성된 침전물을 여과 건조시켜, 유리 염기의 상응하는 말레이트 염을 얻었다.

＜제조예 6＞

화합물 4의 합성

얼음으로 냉각시킨 진한 H₂SO₄(100 ㎖)에 1-인다논 (15 g, 0.11 ㏖)을 첨가한 후, 진한 H₂SO₄(50 ㎖) 중의 용액으로서 KNO₃(17 g, 1.5 당량)을 천천히 (2 시간) 첨가하였다. 생성된 혼합물을 꽉찬 얼음 입자 중에 붓고, 물 (총 수성층은 1ℓ였음) 및 Et₂O (1ℓ)로 희석하였다. Et₂O층을 분리하고, 물로 세척하였다 (2×200㎖). 모아진 수성층을 KOH (75 g)로 천천히 처리하고, CH₂Cl₂로 추출하였다 (2×500 ㎖). 모아진 CH₂Cl₂층을 물 (500 ㎖)로 세척하였다. 모아진 유기층을 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 실리카 겔 (30 g)으로 처리하였다. 생성된 고체를 실리카 겔 칼럼 (2.5"×13")에 적용하고, 플래쉬 크로마토그래피로 정화하였다. 용매를 제거하여 고체로서의 생성물을 얻었다 (14.5 g, 74 %). R_f(실리카 겔): 0.23 (30 % EtOAc, 70 % 헥산).¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 8.42 (s, 1H), 8.37 (dd, J=2.1, 8.4, 1H), 7.65 (d, J= 8.3, 1H), 3.26 (m, 2H), 2.78 (m, 2H).¹³C NMR (75 MHz, CDCl₃) δ 204.71, 160.94, 147.76, 138.04, 128.73, 127.88, 118.90, 36.49, 25.98.

6-니트로-1-인다논 (14.5 g, 0.082 ㏖)을 MeOH (160 ㎖) 중에 용해시키고, 0℃로 냉각시켰다. NaBH₄(3.2 g, 1 당량, 과립형)을 5부분으로 나누어 20분 간격으로 첨가하였다. 생성된 혼합물을 12시간 동안 교반하고, 천천히 실온으로 만들었다. 그 다음, 이 혼합물을 0℃로 다시 냉각시키고, 6N HCl (40 ㎖, 3 당량)을 적가하여 처리하고, 물 (800 ㎖) 및 CH₂Cl₂(400 ㎖)로 희석하였다. 수성층을 분리하고, CH₂Cl₂로 추출하였다 (2×100㎖). 모아진 유기층을 건조시키고 (NaSO₄), 여과하였다. 용매를 제거하여 고체로서의 생성물 (14.6 g, 99 %)을 얻었고, 이를 다음 단계에서 추가의 정제 없이 사용하였다. R_f(실리카 겔): 0.15 (5% EtOAc, 45 % 헥산, 50 % CH₂Cl₂).

1-히드록시-6-니트로인단 (14.6 g, 0.082 ㏖)을 PhMe (80 ㎖) 중의 p-TsOHH₂O (1.5 g, 0.1 당량)으로 3 시간 동안 90 ℃에서 가열시켰다. 용매를 대부분 제거하고, 생성된 혼합물을 CH₂Cl₂(240 ㎖)로 희석하였다. m-CPBA (34 g, 1.2 당량)을 4부분으로 나누어 20분에 걸쳐 첨가하였다. 이 혼합물을 12시간 동안 교반하고, 포화 NaHCO₃수용액 (400 ㎖)으로 처리하고, 추가 30 분 동안 교반한 다음, H₂O (200 ㎖) 및 CH₂Cl₂(100 ㎖)로 희석하였다. 수성층을 분리하고, CH₂Cl₂로 추출하였다(2×100 ㎖). 모아진 유기층을 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하였다 (실리카 겔 2"). 용매를 제거하여 고체로서의 생성물 (14 g, 96 %)을 얻었고, 이를 다음 단계에서 추가의 정제 없이 사용하였다. R_f(실리카 겔): 0.49 (5 % EtOAc, 45 % 헥산, 50 % CH₂Cl₂).¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 8.34 (s, 1H), 8.16 (d, J= 8.2, 1H), 7.38 (d, J= 8.2, 1H), 4.35 (d, J=1.9, 1H), 4.22 (d, J=2.7, 1H), 3.31 (d, J=18.9, 1H), 3.06 (dd, J=2.5, 18.8, 1H).

6-니트로-1,2-에폭시인단 (3.0 g, 17 mmol)을 진한 NH₄OH (60 ㎖) 중에 현탁시키고, 35 ℃에서 12 시간 동안, 50 ℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 생성된 암색 혼합물을 염수 (170 ㎖)로 희석하고, NaCl로 포화시키고, 경미하게 감압하여, 15 % I-PrOH/CHCl₃(170 ㎖)와 함께 교반하였다. 수성층을 분리하고, 15 % I-PrOH/CHCl₃로 추출하였다 (4×50 ㎖). 모아진 유기층을 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하였다. 용매를 제거하여, 황갈색 고체로서의 생성물 (3.0 g, 91 %)을 얻었고, 이를 다음 단계에서 추가의 정제 없이 사용하였다. R_f(실리카 겔): 0.20 (2% AcOH, 18 % MeOH, 80 % CHCl₃).

얼음으로 냉각시킨, 건조 CH₂Cl₂(6 ㎖) 중의 아미노인단 유도체 (390 ㎎, 2.0 mmol)의 현탁액에 NEt₃(0.33 ㎖, 1.2 당량)을 첨가한 후, CH₂Cl₂(2 ㎖) 중의 용액으로서 염화 술포닐 (451 ㎎, 1.1 당량)을 천천히 첨가하였다. 빙욕을 제거하고, 불균질 혼합물을 3 시간 동안 교반하였다. 생성된 균질 혼합물을 CH₂Cl₂(8 ㎖), 물 (8 ㎖) 및 포화 NH₄Cl (2 ㎖)로 희석하였다. 침전된 생성물과 함께 유기층을 수성층으로부터 분리하였다. 수성층을 CH₂Cl₂로 추출하였다(3×2㎖). 모아진 유기층을 I-PrOH (3 ㎖)로 처리하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하였다. 대부분의 용매를 제거하고, 생성된 고체에 헥산/CH₂Cl₂(1/1, 20 ㎖)를 첨가하였다. 고체를 여과하고, 헥산/CH₂Cl₂(1/1, 10 ㎖)로 세척하고, 고도로 가압하여 생성물 (600 ㎎, 83 %)를 얻었다. R_f(실리카 겔): 0.27 (30 % EtOAc, 20 % 헥산, 50 % CH₂Cl₂).¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 7.97 (d, J=8.3, 1H), 7.81 (d, J= 8.2, 2H), 7.33 (d, J=7.9, 2H), 7.21-7.26 (m, 2H), 4.49 (d, J=6.1, 1H), 4.36 (dd, J=7.2, 13.8, 1H), 3.30 (bs, 2H), 3.21 (dd, J=7.1, 16.7, 1H), 2.78 (dd, J=7.4, 16.8, 1H), 2.69 (q, J=7.7, 2H), 1.21 (t, J=7.5, 3H).¹³C NMR (75 MHz, CDCl₃) δ 150.35, 147.44, 147.35, 141.41, 137,57, 128.84, 126.96, 125.60, 123.87, 119.57, 79.33, 64.55, 37.66, 28.53, 14.62.

무수 EtOH (70 ㎖) 중의 니트로인단 유도체 (5.2 g, 14 mmol)의 현탁액에 SnCl_2·2H₂O (13 g, 14 당량)을 첨가하였다. 50 ℃에서 12시간 동안 혼합물을 가열한 후, 대부분의 EtOH를 제거하고, 생성된 잔류물을 CHCl₃(70 ㎖), 포화 NaHCO₃(140 ㎖), 및 물 (70 ㎖)로 처리하였다. 이 혼합물을 30 분 동안 교반한 후, 15 % I-PrOH/CHCl₃(70 ㎖) 및 물 (70 ㎖)로 희석하였다. 수성층 (침전된 주석 부산물 함유)를 15 % I-PrOH/CHCl₃로 추출하였다(3×70 ㎖). 모아진 유기층을 건조시키고 (Na₂SO₄) 여과하였다. 용매를 제거하여 고체로서의 생성물 (4.5 g, 97 %)을 얻었고, 이를 다음 단계에서 추가의 정제 없이 사용하였다. R_f(실리카 겔): 0.23 (30 % EtOAc, 20 % 헥산, 50 % CH₂Cl₂).

얼음으로 냉각시킨, 건조 CH₂Cl₂(21 ㎖) 중의 6-아미노인단 유도체 (2.3 g, 6.9 mmol)의 현탁액에 산 염화물 (1.2 g, 1.05 당량)을 첨가하고, NEt₃(1.2 ㎖, 1.2 당량)을 천천히 첨가하였다. 빙욕을 제거한 1시간 후, 생성된 균질 혼합물을 CH₂Cl₂(20 ㎖), 물 (35 ㎖), 및 포화 NH₄Cl (7 ㎖)로 처리하였다. 수성층을 분리시키고, CH₂Cl₂로 추출하였다(3×20 ㎖). 모아진 CH₂Cl₂층을 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고 실리카 겔 (7 g)로 처리하였다. 용매를 증발시켜 고체를 얻었고, 이를 실리카 겔 칼럼 (1.5"×9")에 적용하고, 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 용매를 제거하여 결정성 고체로서의 생성물 (3.0 g, 93 %)을 얻었다. R_f(실리카 겔): 0.16 (30 % EtOAc, 20 % 헥산, 50 % CH₂Cl₂).¹H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.16 (s, 1H), 8.09 (d, J=8.3, 1H), 7.80 (d, J=8.4, 2H), 7.37-7.59 (m, 7H), 7.10-7.15 (m, 2H), 5.03 (d, J=5.6, 1H), 4.40-4.45 (m, 1H), 4.03-4.09 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.02 (dd, J=6.8, 15.8, 1H), 2.64 (q, J=7.5, 2H), 2.50-2.57 (m, 1H), 1.16 (t, J=7.7, 3H). HRMS (FAB) C₂₅H₂₇N₂O₅S (MH⁺)에 대한 m/e 계산치: 467.1640, 측정치: 467.1648.

헥산/에탄올/메탄올 (60/20/20)으로 용리하면서 키랄팩 (Chiralpak) AS 칼럼 [키랄 테크날러지사 (Chiral Technologies) 제품]으로 HPLC에 의해 화합물 4의 거울상이성질체의 분리를 수행하였다. 4.6 ㎜×250 ㎜ 칼럼 및 유속 1㎖/분으로의 거울상이성질체의 분석적 분리로 체류 시간 6.7 (1R, 2R) 및 11.1 (1S, 2S)분을 얻었다.

별법으로, 하기 설명된 비대칭 에폭시화 반응을 통해 거울상 선택적으로 화합물 4를 제조할 수 있다.

CH₂Cl₂(5 ㎖) 중의 5-니트로인덴 (1.28 g, 7.94 mmol)의 용액에 4-페닐피리딘-N-옥시드 415 ㎎ (2.42 mmol)을 첨가한 다음, (S,S)-N,N'-비스-(3,5-디-tert-부틸살리시덴)-1,2-시클로헥산디아미노망간 (III) 클로라이드 154 ㎎ (0.24 mmol)을 첨가하였다. 0 ℃로 냉각시킨 후, 0.05M NaH₂PO₄12 ㎖를 첨가하고, 얼음으로 냉각시킨 10 내지 13 % NaOCl을 첨가하였다. 0 ℃에서 1 시간 후, 반응 혼합물을 여과하고 (셀라이트), CH₂Cl₂(200 ㎖)로 세척하였다. 수성층을 분리하고, CH₂Cl₂(50 ㎖)로 추출하였다. 모아진 유기상을 H₂O (50 ㎖) 및 염수 (50 ㎖)로 세척한 다음, Na₂SO₄로 건조시켰다. 실리카 겔을 사용한 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 (1:1, 헥산:Et₂O), 황색 고체로서의 (1S, 2R)-에폭시드 (988 ㎎, 71 %, 70 % ee)를 얻었다.

헥산/이소프로필 알콜 (80/20; 1㎖/분)으로 용리하면서, 키랄셀 (Chiralcel) OB-H 칼럼 (키랄 테크날러지사 제품)으로 HPLC에 의해 거울상 이성질체적 과량이 결정되었다. 4.6 ㎜×250 ㎜ 칼럼으로의 거울상이성질체의 체류 시간은 33.6 및 36.3분이었다. 그 다음, 거울상이성질체가 풍부한 에폭시드를 사용하여, 상기 설명한 바와 같이 거울상이성질체가 풍부한 화합물 4를 제조하였다. I-PrOH-헥산으로부터 화합물 4의 재결정에 의해 추가의 거울상이성질체가 풍부한 물질 (90 % 이상 ee)을 얻었다.

＜제조예 7 ＞

화합물 24의 합성

카르복실산 (36 ㎎, 1.1 당량) 및 CH₂Cl₂(2.5 ㎖)의 균질 혼합물에 HOBt (39 ㎎, 1.2 당량)을 첨가한 다음, EDC (60 ㎎, 1.3 당량)을 첨가하였다. 균질 혼합물이 생성된 20 분 후, 6-아미노인단 유도체 (80 ㎎, 0.24 mmol)로 처리하였다. 6 시간 동안 교반한 후, 상기 혼합물을 CHCl₃(2㎖), 염수 (2㎖), 및 포화 NaHCO₃(2㎖)로 희석하였다. 수성층을 분리하고, CHCl₃로 추출하였다 (3×2㎖). 모아진 유기층을 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 실리카 겔 (300 ㎎)로 처리하였다. 용매를 제거하여 고체를 얻고, 이를 실리카 겔 (0.5"×7")에 적용하고 풀래시 크로마토그래피로 정제하였다. 용매를 제거하여 고체로서의 생성물을 얻었다 (108 ㎎, 100 %). R_f(실리카 겔): 0.45 (50 % EtOAc, 50 % CH₂Cl₂).¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 9.95 (s, 1H), 7.98 (d, J=7.7, 1H), 7.87 (d, J=8.2, 2H), 7.73 (dd, J=7.6, 7.6, 1H), 7.37 (d, J=8.1, 1H), 7.20-7.35 (m, 4H), 7.08 (d, J=8.1, 1H), 6.93 (d, J=5.6, 1H), 4.30-4.50 (m, 2H), 3.13 (dd, J=6.7, 15.4, 1H), 2.50-2.80 (m, 6H), 1.14 (t, J=7.6, 3H).¹³C NMR (75 MHz, CDCl₃) δ 162.53, 157.36, 149.69, 148.57, 139.70, 137.84, 137.28, 136.29, 135.68, 128.62, 127.32, 126.42, 125.38, 120.86, 119.47, 116.14, 80.41, 65.17, 37.06, 28.50, 23.94 14.72.

＜제조예 8＞

화합물 22의 합성

건조 CH₂Cl₂(10 ㎖) 중의 6-아미노인단 유도체 (0.174 g, 0.373 mmol)의 현탁액을 EDC-HCl (0.120 g, 0.626 mmol), 4-DMAP (0.100 g, 0.819 mmol), NEt₃(0.080 ㎖, 0..57 mmol) 및 모노-메틸 숙신산염 (0.079 g, 0.60 mmol)로 처리하였다. 생성된 균질 반응 혼합물을 실온에서 2.5 시간 동인 교반하고, H₂O (15 ㎖), 포화 NH₄Cl (15 ㎖) 및 CH₂Cl₂(20 ㎖)로 처리하였다. 유기층을 분리하고, 염수로 세척하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과 농축하였다. 실리카 플래쉬 크로마토그래피하여 백색 고체로서의 생성물 (0.190 g, 88 %)을 얻었다. R_f(실리카 겔): 0.75 (20 % 헥산, 20 % CH₂Cl₂, 60 % EtOAc).¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 9.59 (s, 1H), 7.88 (d, J=8.4 MHz, 2H), 7.68-7.56 (m, 3H), 7.47 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.42-7.39 (m, 1H), 7.19-7.11 (m, 3H), 5.17 (q, J=6.9 Hz, 1H), 4.90 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.63 (s, 3H), 3.29 (dd, J= 8.7 및 15.9 Hz, 1H), 2.81-2.26 (m, 8H), 1.25 (t, J=7.8 Hz, 3H); HRMS (FAB) C₃₀H₃₃N₂O₈S (MH⁺)에 대한 m/e 계산치: 581.1958, 측정치: 581.1958.

＜제조예 9＞

화합물 25의 합성

MeOH (25 ㎖) 중의 6-니트로-1-인다논 (2.0 g, 12 mmol)의 용액에 NH₄OAc (9.4 g, 10 당량)을 첨가한 후, NaCNBH₃(830 ㎎, 1.1 당량)을 첨가하였다. 이 혼합물을 45 ℃에서 40 시간 동안 교반한 다음 여과하였다 (셀라이트). 용매를 제거하고, 생성된 잔류물에 물 (60 ㎖) 및 Et₂O (60 ㎖)를 첨가하였다. 수성층을 분리하고, 6N NaOH (24 ㎖)로 처리하고, NaCl로 포화시키고, CHCl₃로 추출하였다 (1×50 ㎖, 다음에 3×30 ㎖). 모아진 CHCl₃층을 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 4N HCl/디옥산 (2㎖, 0.6 당량)으로 처리하였다. 용매를 제거하여 고체를 얻었고, 이를 건조 Et₂O (120 ㎖, 1시간)와 함께 교반하고 여과하였다. 그리하여, 생성물의 HCl염을 고체로서 얻었고 (900 ㎎, 35 %), 다음 단계에서 추가의 정제 없이 사용하였다. R_f(실라카 겔): 0.13 (1% AcOH, 9% MeOH, 90 % CHCl₃).¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 8.47 (d, J=1.7, 1H), 8.25 (dd, J=2.1, 8.4, 1H), 7.59 (d, J=8.4, 1H), 4.90-5.10 (m, 1H, 용매 간섭), 3.20-3.35 (m, 1H), 3.05-3.20 (m, 1H), 2.65-2.80 (m, 1H), 2.15-2.30 (m, 1H).¹³C NMR (75 MHz, CD₃OD) δ 152.10, 147.60, 140.26, 125.96, 124.55, 119.78, 54.71, 30.23, 29.73.

건조 CH₂Cl₂(8 ㎖) 중의 1-아미노-6-니트로인단 (900 ㎎, 4.2 mmol)의 현탁액에 NEt₃(1.4 ㎖, 2.4 당량)을 첨가하였다. 그 다음, 생성된 균질 혼합물을 염화 술포닐 (940 ㎎, 1.1 당량)으로 처리하고, 3 시간 동안 교반하였다. 생성된 불균질 혼합물을 CH₂Cl₂(8㎖), 물 (8 ㎖), 및 포화 NH₄Cl (4㎖)로 희석하였다. 수성층을 분리하고 CH₂Cl₂로 추출하였다(3×4 ㎖). 모아진 유기층을 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 실리카 겔 (4g)로 처리하였다. 용매를 제거하여 고체를 얻었고, 이를 실리카 겔 (1.5"×9.5") 칼럼에 적용하고, 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 용매를 제거하여 고체로서의 생성물 (1.28 g, 88%)을 얻었다. R_f(실라카 겔): 0.29 (30% EtOAc, 70 % 헥산).¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 7.98 (dd, J=1.9, 8.2, 1H), 7.70-7.85 (m, 3H), 7.25-7.40 (m, 3H), 5.77 (d, J=9.2, 1H), 4.82 (dd, J=7.9, 16.3, 1H), 2.85-3.00 (m, 1H), 2.65-2.85 (m, 3H), 2.25-2.40 (m, 1H), 1.75-1.90 (m, 1H), 1.26 (t, J=7.6, 3H).¹³C NMR (75 MHz, CDCl₃) δ 150.45, 149.64, 147.39, 144.16, 137.88, 128.82, 127.04, 125.32, 123.66, 119.62, 57.85, 34.36, 29.92, 28.60, 14.78.

6-니트로인단 유도체 (1.09 g, 3.15 mmol) 및 SnCl₂·H₂O (3.6 g, 5 당량)을 무수 EtOH (7 ㎖) 중에서 12 시간 동안 50 ℃에서 가열하였다. 대부분의 EtOH를 제거하고, 생성된 잔류물을 CH₂Cl₂(30 ㎖), 물 (30 ㎖), 및 포화 NaHCO₃수용액 (30 ㎖)로 희석하였다. 30분 동안 교반한 후, 수성층을 분리하고 CH₂Cl₂로 추출하였다(3×30 ㎖). 모아진 유기층을 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 실리카 겔 (2g)로 처리하였다. 용매를 제거하여 고체를 얻었고, 이를 실리카 겔 (1.0"×11") 칼럼에 적용하고, 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 용매를 제거하여 고체로서의 생성물 (906 ㎎, 91%)을 얻었다. R_f(실라카 겔): 0.16 (15% EtOAc, 35 % 헥산, 50 % CH₂Cl₂).¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 7.84 (2H), 7.35 (2H), 6.93 (1H), 6.53 (1H), 6.39 (1H), 5.20 (1H), 4.70 (1H), 3.51 (2H), 2.50-2.85 (4H), 2.24 (1H), 1.66 (1H), 1.28 (3H).¹³C NMR (75 MHz, CDCl₃) δ 149.52, 145.46, 143.37, 138.52, 132.53, 128.60, 127.24, 125.20, 115.55, 110.73, 58.57, 34.72, 28.92, 28.62, 15.01. HRMS (FAB) C₁₇H₂₀N₂O₂S (M)에 대한 m/e 계산치: 316.1245, 실측치: 316.1245.

건조 CH₂Cl₂(3㎖) 중의 6-아미노인단 유도체 (200 ㎎, 0.63 mmol)의 용액에 산 염화물 (120 ㎎, 1.1 당량)을 첨가하고, NEt₃(0.11 ㎖, 1.2 당량)을 첨가하였다. 이 혼합물을 밤새 교반한 후, 물 (6㎖), 포화 NH₄Cl 수용액 (1㎖) 및 CHCl₃(100 ㎖)로 희석하였다. CHCl₃층을 분리하고, 건조시키고 (Na₂SO₄) 여과하였다. 용매를 제거하여 고체를 얻고, 이를 Et₂O로 세척하였다. 이러한 방법으로 백색 고체로서의 생성물을 얻었다 (260 ㎎, 92 %). R_f(실리카 겔): 0.28 (15 % EtOAc, 35 % 헥산, 50 % CH₂Cl₂).¹H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.18 (s, 1H), 8.07 (d, J=9.1, 1H), 7.78 (d, J=8.1, 2H), 7.69 (s, 1H), 7.62 (d, J=8.1), 7.35-7.55 (m, 5H), 7.10-7.20 (m, 2H), 4.60-4.75 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 2.50-2.80 (m, 4H), 1.80-1.95 (m, 1H), 1.45-1.60 (m, 1H), 1.18 (t, J=7.6, 3H), HRMS (FAB) C₂₅H₂₇N₂O₄S (MH⁺)에 대한 m/e 계산치: 451.1691, 실측치: 451.1692.

＜제조예 10＞

화합물 4의 시스 유사체의 합성

-40 ℃에서 CH₃CN (6.8 ㎖) 중의 산화 5-니트로인덴 (735 ㎎, 4.15 mmol)의 슬러리에 트리플루오로메탄술폰산 (0.73 ㎖, 8.3 mmol)을 적가하였다. 30분 후, 반응 혼합물을 1시간 동안 실온으로 가온시킨 후, 물 (4 ㎖)를 첨가하였다. 10분 후, 상압 증류에 의해 아세토니트릴을 제거하였다 (용기의 온도 100 ℃). 수성 잔류물을 추가 5 시간 동안 100 ℃에서 유지시킨 다음, 실온으로 냉각시켰다. 수성상을 CH₂Cl₂(10 ㎖)로 추출한 다음, 1N NaOH를 사용하여 pH 13으로 염기성화하고, CH₂Cl₂로 추출하였다 (3×10㎖). 유기물을 모으고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (5% MeOH/95 % EtOAc)하여 갈색 고체로서의 시스 아미노 알콜을 얻었다 (518 ㎎, 64 %).¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 8.17 (s, 1H), 8.13 (d, J=7.1, 1H), 7.38 (d, J=8.1 Hz, 1H), 4.50-4.45 (m, 1H), 4.45-4.40 (m, 1H), 3.52-3.49 (m, 1H), 3.17-3.03 (m, 1H), 1.43 (s, 9H). 화합물 4의 합성에 설명된 방법을 사용하여 이 생성물을 화합물 4의 시스-유사체로 전환시켰다.

＜제조예 11＞

화합물 21의 합성

톨루엔 (10 ㎖) 중의 5-니트로인덴 (800 ㎎, 4.97 mmol) 및 tert-부틸-N,N-디클로로-카바메이트 (924 ㎎, 4.97 mmol)의 용액을 50 ℃에서 5 시간 동안 가열하였다. 생성된 용액을 0 ℃로 냉각시키고 메타중아황산 나트륨의 포화 용액 (10 ㎖)와 함께 20분 동안 교반하였다. 유기물을 에테르로 추출하고 (2×10 ㎖), 건조시키고 (Na₂SO₄), 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (80 % 헥산/20 % Et₂O)하여 원하는 생성물을 무색 오일로서 얻었다 (312 ㎎, 22%).¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 8.27 (s, 1H), 8.17 (dd, J=8.3, 2.0 Hz, 1H), 7.40 (d, J=8.4 Hz, 1H), 5.28 (bs, 1H), 4.84 (bs, 1H), 4.45 (m, 1H), 3.52 (dd, J=17.0, 7.3 Hz, 1H), 3.04-2.98 (m, 1H), 1.46 (s, 9H).

실온에서 DMSO (3 ㎖) 중의 니트로인단 유도체 (715 ㎎, 2.28 mmol)의 용액을 교반하면서 아지드화 나트륨 (222 ㎎, 3.43 mmol)을 첨가하였다. 생성된 자주색 용액을 50 ℃에서 14 시간 동안 가열하고, 실온으로 냉각시키고, 물 (5 ㎖)로 희석하였다. 유기물을 EtOAc로 추출하고 (4×5 ㎖), 건조시키고 (Na₂SO₄), 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (80 % 헥산/20 % Et₂O)하여 원하는 생성물을 무색 오일로서 얻었다 (675 ㎎, 68 %).¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 8.17 (s, 1H), 8.13 (m, 1H), 7.38 (d, J=8.1 Hz, 1H), 5.74 (bs, 1H), 4.93 (d, J=5.9 Hz, 1H), 4.61-4.50 (m, 1H), 3.20 (dd, J=16.6, 7.4 Hz, 1H), 2.92 (dd, J=16.6, 9.0 Hz, 1H), 1.43 (s, 9H).

실온에서 THF (4 ㎖) 중의 아지도니트로인단 유도체 (300 ㎎, 0.94 mmol)의 용액을 교반하면서 트리페닐포스핀 (270 ㎎, 1.03 mmol)을 첨가하였다. 1시간 후, 용매를 감압하에 제거하고, MeOH (4 ㎖)로 대체하였다. 새로운 용액을 0 ℃로 냉각시키고, 보로히드라이드 나트륨 (36 ㎎, 0.94 mmol)을 나누어서 첨가하였다. 30 분 후, 0 ℃에서, 빙초산 5 방울을 첨가하였다. 반응물을 농축 건조시키고, EtOAc (20 ㎖) 중에 용해시켰다. 유기상을 1N HCl로 세척하고 (2×10 ㎖), 수성상은 1N NaOH를 사용하여 pH 11로 염기성화하고, EtOAc로 재추출하였다 (3×10 ㎖). 유기상을 모아서, 건조시키고 (Na₂SO₄), 감압하에 농축시켜 원하는 생성물을 담갈색 고체로서 얻었다 (196 ㎎, 71 %).¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 8.17 (s, 1H), 8.06 (dd, J=8.2, 1.9 Hz, 1H), 7.32 (d, J=8.3 Hz, 1H), 5.27 (bs, 1H), 4.41 (bs, 2H), 3.28-3.21 (m, 1H), 2.94-2.87 (m, 1H), 1.42 (s, 9H).

0 ℃에서 THF (5 ㎖) 중의 아미노니트로인단 유도체 (330 ㎎, 1.12 mmol) 및 트리에틸아민 (171 ㎕, 1.23 mmol)의 용액을 교반하면서 p-에틸술포닐클로라이드 (240 ㎎, 1.17 mmol)을 첨가하였다. 그 다음, 반응물을 50 ℃에서 2 시간 동안 가열하고, 냉각시키고, EtOAc (15 ㎖)를 첨가하였다. 유기물을 염수 (10 ㎖)로 세척하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (50 % 헥산/50 % Et₂O)하여 원하는 생성물을 백색 고체로서 얻었다 (247 ㎎, 48 %).¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 8.07 (d, J=8.4, 2.1 Hz, 1H), 7.77 (d, J=8.0 Hz, 2H), 7.39-7.31 (m, 4H), 5.20-4.98 (m, 2H), 4.81-4.73 (m, 1H), 4.44 (p, J=6.7 Hz, 1H), 3.25 (dd, J=16.7, 6.5 Hz, 1H), 2.89 (dd, 17.2, 6.4 Hz, 1H), 2.72 (q, J=7.5 Hz, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.29 (t, J=7.6 Hz, 3H).

0 ℃에서 THF/메탄올 (1:1, 3 ㎖) 중의 니트로인단 유도체 (168 ㎎, 0.36 mmol) 및 염화 니켈 (10 ㎎, 0.08 mmol)의 현탁액을 교반하면서 보로히드라이드 나트륨 (68 ㎎, 1.7 mmol)을 나누어서 첨가하였다. 20분 후, 반응 혼합물을 물 (5 ㎖)로 켄칭시키고, EtOAc로 추출하고 (3×10 ㎖), 건조하고 (Na₂SO₄), 감압하에 농축시켜 원하는 생성물을 담갈색 고체로서 얻었다 (156 ㎎, 99 %).¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 7.81 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.36 (d, J=8.1 Hz, 1H), 6.92 (d, J=7.9 Hz, 1H), 6.53 (d, J=7.0 Hz, 1H), 6.11 (bs, 1H), 5.04-4.92 (bs, 2H), 4.63-4.55 (bs, 1H), 4.32-4.24 (m, 1H), 3.04-2.94 (m, 1H), 2.75 (q, J=7.5 Hz, 2H), 2.68-2.55 (m, 1H), 1.43(s, 9H), 1.25 (t, J=7.5 Hz, 3H).

0 ℃에서 THF (3 ㎖) 중의 아미노인단 유도체 (20 ㎎, 0.046 mmol) 및 트리에틸아민 (7.7 ㎕, 0.055 mmol)의 현탁액을 교반하면서 m-아니소일클로라이드 (6.5 ㎕, 0.046 mmol)을 첨가하였다. 30분 후, 반응 혼합물을 EtOAc (10 ㎖)로 희석하고, 염수 (10 ㎖)로 세척하고, 건조하고 (Na₂SO₄), 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (50 % 헥산/50 % EtOAc)하여 원하는 생성물을 백색 고체로서 얻었다 (22 ㎎, 84 %).¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 7.84 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.70-7.61 (m, 2H), 7.40-7.34 (m, 4H), 7.18 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.11-6.91 (m, 2H), 4.98 (d, J=8.0 Hz, 1H), 4.98-4.90 (bs, 1H), 4.69 (t, J=7.0 Hz, 1H), 4.39-4.30 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.14 (dd, J=15.9, 6.7 Hz, 1H), 2.76 (dd, J=15.9, 5.1 Hz, 1H), 2.71 (q, J=7.7 Hz, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.24 (t, J=7.6 Hz, 3H).

0 ℃에서 CH₂Cl₂(2 ㎖) 중의 중간체 (22 ㎎, 0.04 mmol)의 용액을 교반하면서 트리플루오로아세트산 (0.5 ㎖)을 첨가하였다. 빙욕을 제거하고, 반응물을 실온에서 1시간 동안 가온하였다. 용매를 감압하에 제거하고, EtOAc (5 ㎖)로 대체하였다. 포화 NaHCO₃수용액을 유기 용액에 첨가하고, 2상계를 30 분 동안 세차게 흔들었다. 유기층을 분리하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 감압하에 농축시켜 원하는 생성물을 회백색 고체로서 얻었다 (11 ㎎, 61 %).¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 10.1 (s, 1H), 7.81 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.69-7.40 (m, 7H), 7.15-7.11 (m, 2H), 5.73 (s, 2H), 4.53 (d, J=5.6 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 2.85 (dd, J=15.8, 6.2 Hz, 1H), 2.65 (q, J=7.5 Hz, 2H), 2.53-2.44 (m, 1H), 1.16 (t, J=7.6 Hz, 3H)

＜제조예 12＞

화합물 4의 입체 이성질체의 합성:

진한 H₂SO₄30 g 및 진한 HNO₃의 용액을 -20 ℃에서 인단 10 g (81.6 밀리몰)의 교반 용액에 2 시간에 걸쳐 적가하였다. 생성된 자주색 용액을 추가의 시간 동안 교반한 후에 물 20 g을 적가하였다. 유기층을 EtOAc 3 x 20 ㎖로 추출하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 감압하에 농축하였다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (80 % 헥산/20 % Et₂O)하여 두 생성물의 2:3 혼합물 5.33 g (37 %)을 점성 오일로서 얻었다. 이 물질을 추가의 정제없이 다음 단계에 바로 사용하였다.

50 % 수성 아세트산 84 ㎖ 중의 CrO₃7.59 g (75.9 밀리몰)의 용액을 실온에서 아세트산 75 ㎖ 중의 두 니트로인단 3.0 g (18.4 밀리몰)의 교반 용액에 적가하였다. 적가한 후에, 24 시간 동안 추가로 교반하였다. 이소프로필 알코올 50 ㎖을 천천히 가한 후에, 녹색 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반하였다. 유기층을 Et₂O 4 x 20 ㎖로 추출하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 감압하에 농축하였다. 플래쉬 크로마토그래피 (30 % EtOAc/70 % 헥산 내지 50 % EtOAc/50 % 헥산)하여 개별적인 화합물 셋을 3:3:1 (A:B:C) 비율로 얻었다 (합한 수율 22 %). 화합물 A의¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 8.36 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 8.25 (dd,J = 7.0, 2.0 Hz, 1H), 7.92 (d,J = 7.0 Hz, 1H), 3.32 - 3.27 (m, 2H), 2.88 - 2.83 (m, 2H).

삼염화로듐 1 ㎎ (촉매량)을 실온에서 무수 에탄올 8 ㎖ 중의 7-니트로인덴 150 ㎎ (0.93 밀리몰)의 용액에 가하였다. 생성된 용액을 14 시간 동안 가열 환류한 후에, 용매를 제거하고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (5 % Et₂O/95 % 헥산)로 정제하여 원하는 생성물 64 ㎎ (43 %)을 연갈색 고체로서, 또한 출발 물질 76 ㎎ (51 %)을 얻었다. 생성물의¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 8.15 (d,J = 6.6 Hz, 1H), 7.74 - 7.70 (m, 2H), 7.34 (t,J = 6.6 Hz, 1H), 6.95 - 6.90 (m, 1H), 3.54 (s, 2H).

화합물 4의 이러한 입체 이성질체를 화합물 4의 제조예에 사용된 것과 동일한 일반적 방법에 따라 합성하였다.¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 8.24 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.81 (d,J = 8.2 Hz, 2H), 7.59 (d,J = 1.1 Hz, 1H), 7.50 - 7.36 (m, 6H), 7.09 (dd,J = 8.1, 2.5 Hz, 1H), 6.66 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 5.10 (bs, 1H), 4.36 (dd,J = 8.1, 5.1 Hz, 1H), 4.10 (q,J = 6.0 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.07 (dd,J = 15.8, 6.6 Hz, 1H), 2.70 (q,J = 7.5 Hz, 2H), 2.59 (dd,J = 15.6, 5.8 Hz, 1H), 1.23 (t,J = 7.5 Hz, 3H).

화합물 4의 이러한 입체 이성질체를 화합물 4의 제조예에 사용된 것과 동일한 일반적 방법에 따라 합성하였다.¹H NMR (300 MHz, CD₃Cl₃) δ 7.91 (d,J = 8.3 Hz, 3H), 7.61 (s, 1H), 7.42 - 7.35 (m, 5H), 7.22 (t,J = 7.9 Hz, 2H), 7.10 (dd,J = 7.9, 1.38 Hz, 1H), 6.72 (d,J = 7.4 Hz, 1H), 5.02 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 4.56 - 4.51 (m, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.38 (s, 1H), 3.25 (dd,J = 15.7, 7.7 Hz, 1H), 2.81 - 2.72 (m, 3H), 1.28 (t,J = 7.5 Hz, 3H).

＜생물 분석＞

1. 인간 전압-게이트된 칼륨 채널을 발현시키는 CHO (Chinese Hamster Ovary) 세포의 클로닝, 제조 및 시험

인간 전압-게이트된 칼륨 채널을 폴리머라제 연쇄 반응 (PCR)에 의해 게놈 HeLa 세포성 DNA로부터 클로닝하고, 서열 분석하여 그의 조성을 확인한 다음, 당 기술 분야의 숙련인에게 잘 알려진 방법을 사용하여 CHO 내에서 우세하게 발현시켰다.

구체적으로는, HeLa 세포 (약 1000 개)를 인산염 완충 생리 식염수중에서 세척하고, 펠렛화하고, 무균수 50 ㎕ 중에서 용해시켰다. 특정 말단 프라이머를 포함하는 PCR 시약을 용해물에 직접 가하고, 이 혼합물을 40 회 온도 주기로 처리하였다. 반응 생성물을 아가로스겔 상에서 분리하고, 증폭된 생성물의 예상 크기에 상응하는 DNA 밴드를 단리하여 클로닝 벡터 pCRII (Invitrogen) 중으로 서브클로닝하였다. 구조물을 대장균 중에서 증폭시켜 얼마간의 독립 서브클론을 단리하고 서열 분석하여 클로닝된 채널의 동일성을 확인하였다. 이러한 클론 중 오류가 없는 것을 함께 라이게이션시켜 완전한 cDNA 구조물을 제조하고, 이 구조물을 진핵 세포 발현 벡터 pCDNA3 (Invitrogen) 중으로 서브클로닝하였다. 완전한 구조물은 직접 단백질 합성에 대해 출발 부위에 코작 (Kozak) 서열을 함유하였다. CHO 세포를 구조물로 형질 전환시키고, 배양 배지에 G418을 첨가하여 안정한 발현 세포를 선별하였다. 3 주 후에, 안정하게 형질 전환된 세포를 제한 밀도로 접종하여 단일 클론을 단리하고 전면 생장시켰다.

안정한 클론을⁸⁶루비듐 (⁸⁶Rb) 이온 흐름 분석을 사용하여 전압-게이트된 칼륨 채널 발현에 대해 시험하였다 (하기 방법 참조). 칼륨 채널 Kv1.3의 경우에는 4개의 포지티브 클론 및 1개의 네가티브 대조군을 Kv1.3 채널의 선택적 차단제로 공지된 마르가톡신에 의한 방출의 억제에 대해 루비듐 방출로 시험하였다. 모든 포지티브 클론은 기저 수준의 7 내지 10 배인 KCl-자극된⁸⁶Rb 방출을 나타냈고, 이는 마르가톡신이 존재하여 약 95 %를 억제한 것이다. 이러한 클론을 전기 생리학적 방법에 의해 추가로 시험하였고, 칼륨 채널의 발현과 일치하는 특성을 갖는 것으로 나타났다.

2. 세포 단층으로부터의⁸⁶루비듐 방출

인간 Kv1.5 또는 Kv1.3으로 안정하게 형질 전환된 CHO 세포뿐만 아니라 형질 전환되지 않은 세포도 24 웰 조직 배양 플레이트 중에서 약 90 % 전면 생장하였다. 조직 배양 생장 배지를 제거하고, 1 μCi/㎖의 농도로⁸⁶Rb를 함유하는 이스코브스 (Iscoves) 변형 DMEM 1 ㎖로 대체하고 37 ℃에서 3 시간 동안 인큐베이션하여 동위 원소가 세포내로 흡수되도록 하였다. 인큐베이션 말기에,⁸⁶Rb 용액을 흡출하고, 세포를 EBSS (Earls Balanced Salt Solution)로 3회 세척하였다. 세포를 실온에서 웰 당 EBSS 또는 시험 화합물을 함유하는 EBSS 0.6 ㎖ 중에서 15 분 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션 말기에 시료 0.3 ㎖를 분석을 위해 채취하여⁸⁶Rb의 기저 방출량을 평가하였다. 각각의 웰에 125 mM KCl (NaCl을 KCl로 대체하였음; 각 웰중의 KCl 최종 농도는 65 mM임) 및 시험 화합물을 함유하는 변형된 KCl-고농도 EBSS 0.3 ㎖를 가하였다. 높은 KCl 농도를 이용하여 세포를 Kv1.3 및 Kv1.5를 활성화시키는 막 전위에 대해 탈분극시켰다. 인큐베이션한 지 15 분 후에, 분석을 위해 시료 0.3 ㎖를 더 채취하였다. 마지막으로, EBSS 중의 0.2 % 소듐 도데실 술페이트 0.3 ㎖를 각 웰에 가하여 세포를 용해시켰다. 용해물 중 0.3 ㎖를 분석을 위해 취하여⁸⁶Rb의 최종 세포 함량을 측정하였다. 시료를 세렌코프 (Cerenkov) 방출에 의해 월락 마이크로베타 액체 신틸레이션 (Wallac Microbeta Liquid Scintillation) 카운터로 측정하였다. 방출을⁸⁶Rb의 초기 세포 함량의 비율로서 나타냈다.

3. 세포막 전위의 형광성 측정

인간 전압-게이트된 칼륨 채널을 코딩하는 유전자를 사용하여 안정하게 형질 전환된 CHO 세포를 96 웰 조직 배양 플레이트 중에서 80 내지 90 % 전면 생장도로 생장시켰다. 실험하는 날에, 세포를 전압-민감성 옥소놀인 비스-(1,3-디부틸바르비투르산)트리베틴 옥소놀 (DiBac₄(3)) 5 μM을 함유하는 변형된 EBSS (116 mM NaCl, 5.4 mM KCl, 1.8 mM CaCl₂, 0.8 mM MgCl₂, 20 mM HEPES, 5 mM 글루코스; pH 7.4, 300 mOsm)와 반복적으로 접촉시켰다. DiBac₄(3)는 막전위-의존적 방법으로 세포내 단백질에 결합하여 형광 물질의 유효 농도를 변화시킨다. 형광성의 증가는 막의 탈분극을 나타내는 반면, 형광성의 감소는 막의 과분극을 나타낸다 (Epps et al., Chemistry and Physics of Lipids, 69:137, 1994). 각 웰중의 세포를 37 ℃에서 EBSS + 5μM DiBac₄(3) 중에서 30 분 동안 인큐베이션하였다. 96 웰 플레이트 를 레이저-기재 형광 영상 플레이트 판독기 (NovelTech Inc.) 내에서 35 ℃의 온도 조절 챔버중에 위치시켰다. 데이터를 20 내지 40 분 동안 60 초 마다 수집하였다. 약물 유도된 형광 신호의 변화를 비교 정량 분석하기 위해, 변화를 EBSS + 약물 및 EBSS 부재의 5 μM DiBac₄(3) + 5 μM DiBac₄(3) + 약물 함유 30 mM KCl의 첨가와 비교하여 세포를 30 mM KCl에 노출시켜 유도된 형광성 증가율로서 나타냈다 (세포외 KCl의 증가는 세포를 탈분극시키는 것으로 공지되어 있다). 상기 기재한 분석에서 DiBac₄(3)를 효과적으로 사용하기 위해서, 염료 함유 용액이 플라스틱 및 단백질과 접촉하는 것을 최소화하였다.

4. 전기 생리학적 연구

세포, 세포주의 천연 채널 및 클로닝되고 세포 (예를 들면, CHO 세포)내에서 발현된 채널뿐만 아니라 단리된 심근 세포의 전기 생리학적 기록을 패치 클램프 기술을 사용하여 수행하였다 (Hamill et al., Pflugers Archiv 391:85, 1981). 세포주를 상기 기재한 것 (클로닝 등)과 같이 제조하였다. 쥐 및 인간 심근 세포를 문헌 [Castle and Slawsky, J. Pharmacol. Exp. Ther, 264:1450, 1993 및 Wang et al., Circ. Res., 73:1061, 1993]에 기재된 방법을 사용하여 각각 단리하였다. 세포를 유리 커버슬립 상에 커버슬립 당 2 x 10⁴개 세포로 플레이팅하여, 배양된 세포에 대해서는 24 내지 48 시간내에, 단리된 심근 세포에 대해서는 6 시간내에 사용하였다. 커버슬립을 역상 현미경의 기계 스테이지상의 작은 챔버중에 위치시켜 세포외 기록 용액으로 관류시켰다 (2 ㎖/분). 약물은 세포로부터 약 200 ㎛ 떨어져 위치하는 일련의 좁은 내경 유리 모세관을 통하여 적용하였다. 전압-클램프 펄스의 사용, 데이터 취득 및 분석은 pCLAMP 6.0 소프트웨어를 사용하여 75 MHz 펜티엄 컴퓨터에 의해 조절하였다 (Axon Instruments Inc. Foster Citym CA).

5. 임파구 증식 연구

T-임파구 증식 분석은 임파구 분리 배지 (Organon Teknika) 상에서의 원심분리에 이어 나일론 울 상에서의 비-T 세포의 부착에 의해 단리한 인간 말초 T-임파구를 사용하여 수행하였다 (단리한 후에, T-임파구는 트립판 블루 염료 배제법에 의해 98 %를 넘는 생존율을 갖는 것으로 밝혀졌다). 세포를 10 % 송아지 태반 혈청을 함유하는 RPMI 배지중에 1 x 10⁶개 세포/㎖의 농도로 재현탁시켰다. 세포 100 ㎕를 96 웰 플레이트의 각 웰에 분배하였다. 세포를 여러 길항제의 존재 또는 부재하에 피토헤모글루티닌 (최종 농도는 1.25 또는 2.5 ㎍/㎖)으로 3 일 동안 자극하였다. 4일 째에 세포를 [³H]티미딘으로 18 시간 동안 추가로 펄스 처리하고, 과도한 세척을 하지 않고 유리 섬유 필라멘트 상에서 회수하였다. 매트는 멜트-온 (melt-on) 신틸레이팅제를 사용하여 월락 마이크로베타 액체 신틸레이션 카운터중에서 계측하였다. 약물 처리가 세포 독성을 유발하는지의 여부를 평가하기 18 시간 전의 끝 부분에서 추가의 웰을 계측하였다.

＜실시예 1＞

세포 단층내 막전위에 미치는 화합물 4의 효과

화합물 4 및 관련된 분자에 의한 전압-게이트된 칼륨 채널의 억제를 인간 Kv1.5 또는 Kv1.3 칼륨 채널에 대한 cDNA로 영구적으로 형질 전환시킨 CHO 세포의 단층내의 세포막 탈분극을 유도하는 능력에 의해 초기에 평가하였다. 인단 화합물 4 및 관련된 분자의 작용을 전압-의존적 형광 염료 DiBac를 사용하여 검출되는 막전위를 변화시키는 Kv1.5 또는 Kv1.3의 공지된 억제제의 효과와 비교하고, 30 mM KCl에 유도되는 탈분극에 대해 정규화하였다. 예를 들면, 도 1은 인간 Kv1.3을 발현시키는 CHO 세포의 단층내의 막전위에 미치는 화합물 4의 효과를 도시한 것으로, 10 μM에서 Kv1.3-특이적 차단 독소인 마르가톡신에 의해 유도된 것과 크기면에서 유사한 탈분극을 나타낸다. 값은 4개의 관찰값의 평균 ± 표준 오차이다. 제제의 첨가는 화살표로 나타낸다. 기준선 형광성은 텅빈 부호로 나타낸다. 형질 전환되지 않은 세포에서는 화합물 4에 의해 유도되는 탈분극이 없었다.

＜실시예 2＞

Kv1.5 또는 Kv1.3을 발현시키는 세포 단층으로부터의⁸⁶루비듐 방출에 미치는 화합물 4의 효과

인간 Kv1.5 또는 Kv1.3을 발현시키는 CHO 세포의 미리 올려 놓은 단층으로부터의⁸⁶Rb의 방출에 미치는 화합물 4의 효과를 도 2에 나타냈다. 값은 15 분 동안에 방출된⁸⁶Rb의 양의 평균 ± 표준 오차 (n = 4)를 의미하고, 초기 세포 함량의 비율로서 나타냈다. Kv1.5 또는 Kv1.3의 KCl 유도된 방출량 및 활성화 사이의 관계는 형질 전환되지 않은 CHO 세포가 KCl의 존재하의⁸⁶Rb 방출량을 증가시키지 않는다는 관찰에 의해 지지되었다. 5 nM 마르가톡신의 차등 효과는 Kv1.3 또는 Kv1.5를 발현시키는 CHO 세포로부터의⁸⁶Rb 방출의 채널 특이적 활성화를 확인시켜 주었다. 60 mM KCl에 노출된 후의⁸⁶Rb 방출 속도의 증가는 Kv1.5 또는 Kv1.3을 발현시키는 세포에서 일어났지만, 형질 전환되지 않은 (야생형) 세포에서는 일어나지 않았다. Kv1.3을 발현시키는 세포에서,⁸⁶Rb 방출 속도의 60 mM KCl 유발 증가는 5 nM 마르가톡신 또는 10 μM 화합물 4에 예비 노출시킴으로써 완전히 제거할 수 있었다. 유사하게, 10 μM 화합물 4는 Kv1.5를 발현시키는 CHO 세포에서의⁸⁶Rb 방출 속도의 60 mM KCl 유발 증가를 완전히 억제하였다.

＜실시예 3＞

Kv1.5 또는 Kv1.3 칼륨 채널에 미치는 화합물 4 및 관련된 화합물의 효과

이온 흐름에 미치는 화합물 4 및 관련된 화합물의 억제 작용은 상기한 전체 세포 패치 클램프 평가를 사용하여 직접 측정하였다. 예를 들면, CHO 세포에서의 Kv1.5 또는 Kv1.3 채널을 통한 이온 흐름에 미치는 화합물 4의 억제 작용을 도3에 도시하였다. -80 mV 내지 +60 mV의 500 ms 전압 클램프 단계를 개별 세포들에 Kv1.5에 대해서는 20 초 마다, Kv1.3에 대해서는 60 초 마다 가하였다. 10 μM 화합물 4로 5 분 동안 예비 인큐베이션시킨 후, 약물의 부재하에 기록된 흐름 자취를 나타내었다. 화합물 4 및 Kv1.5의 억제제로서의 대표적인 구조적 유사 물질의 효능을 표 1에 나타냈다.

화합물	50 % 채널 억제 (IC₅₀)
4	0.1 μM (대략적인 값)
2	1 μM (대략적인 값)
16	1 μM (대략적인 값)
13	1 μM (대략적인 값)
11	1 μM (대략적인 값)
15	1 μM (대략적인 값)
17	＞ 1 μM (대략적인 값)
12	＞ 1 μM (대략적인 값)
10	＞ 1 μM (대략적인 값)

화학식 I, II 및 III의 예로서 예시한 다른 화합물은 5 μM는 넘지만 50 μM 미만인 IC₅₀값을 나타냈다.

＜실시예 4＞

인간 심방 근세포에서의 I_kur에 미치는 화합물 4의 효과

I_kur또는 I_km로 다양하게 일컬어지는 심방 이온 전류를 나타내는 지연된 정류 전압-게이트된 칼륨 채널은 Kv1.5 α-서브유닛 유전자 산물을 함유하는 것으로 보고되어 왔다. I_kur(또는 I_km)은 일반적으로는 인간 심방 작용 전위의 재분극화에 중요하다고 생각되고 있다 (Wang et al., Circ. Res. 73:1062, 1993; Fedida et al., Circ. Res. 73:210, 1993; Wang et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 272:184, 1995). 1 μM의 화합물 4는 단리된 인간 심방 근세포에서 I_kur흐름을 50 % 넘게 억제하는 것으로 밝혀졌다.

＜실시예 5＞

심장 작용 전위에 미치는 화합물 4의 효과

심장에서의 칼륨 채널 억제의 기능적 결과는 작용 전위 지속기의 연장이다. 작용 전위 지속기의 증가 및 심장에서의 전기 퇴진능을 전파시키는 유효 저항기의 연장은 칼륨 채널을 차단하는 제제의 항 부정맥 특성에 대해 기전적으로 설명한다. 1 μM의 화합물 4는 단리된 인간 심방 근세포에서의 작용 전위를 50 % 이상 연장시킨다. 유사하게, 도 4는 1μM 화합물 4가 쥐 심근세포에서 작용 전위를 연장시킴을 나타낸다.

＜실시예 6＞

화합물 4의 임파구 증식 평가

인간 임파구에서의 I_ka(Kv1.3) 억제의 기능적 결과는 항체 유발 세포의 증식을 억제하는 것이다 (Chandy et al., J. Exp. Med. 160:369, 1984; Lin et al., J. Exp. Med. 177:637, 1993). 따라서, 그러한 작용은 면역 억제될 수 있어서, 면역 세포 활성화 및 증식을 억제 또는 치료해야 하는 증상을 치료하게 한다. 화합물 4를 시험관내 임파구 증식 평가로 시험하여 그의 Kv1.3-차단 작용이 인간 세포계의 기능을 변화시키는지를 평가하였다. 도 4에 나타낸 바와 같이, 마르가톡신, 차리브도톡신 및 화합물 4는 모두 PHA 단독인 대조군과 비교할 때 유사한 정도로 임파구 증식을 억제하였다. 10 μM 화합물 4에 노출시킨 지 90 시간 후에, 세포 생존율이 감소되지 않았으므로 화합물 4는 인간 T-임파구에 독성이 아니었다.

본 발명의 원리, 바람직한 실시태양 및 작용 방식은 상기 명세서에 기재하였다. 본 원에서 보호받고자 하는 본 발명은 제한적 보다는 예시적으로 것으로 간주되므로, 개시된 특정 형태로서 한정되는 것으로 파악해서는 않된다. 본 발명은 그 본질로부터 벗어나지 않으면서 당 기술 분야의 숙련인들에 의해 변화 및 변경될 수 있다. 당 기술 분야의 숙련인들은 상기된 바와 같이 방법에서의 변형을 인지할 것이며, 본 발명의 화합물을 제조하고 사용하는 상기 개시를 바탕으로 한 적절한 변형을 인지할 것이다.

전술된 명세서에서 하기 약어를 사용하였다.

Claims

칼륨 채널 억제 활성을 갖는 하기 화학식의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구의약.

식중, R¹은 수소, 알킬 또는 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로시클릴 및 선택적으로 치환된 카르보시클로알킬로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

R²는 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로시클릴 및 선택적으로 치환된 카르보시클로알킬로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

R³은 수소 또는 메틸이고,

R⁴는 수소 또는 메틸이며,

X¹은 C=O, C=S, 또는 SO₂이고,

X²는 C=O 또는 SO₂이고,

Y¹은 O, (CH₂)_p, CH₂O, HC=CH 또는 NH (여기서, p는 0, 1 또는 2이다)이고,

Y²는 O, (CH₂)_q, HC=CH 또는 NH (여기서, q는 0 또는 1이다)이고,

Z는 수소, OR⁵또는 NR⁶R⁷[여기서, R⁵는 수소, (CH₂)_m-R⁸또는 C(O)-(CH₂)_m-R⁸(여기서, m은 1 내지 5이며, R⁸은 N(R⁹)₂, N(R⁹)₃L 또는 CO₂R⁹로, 각각의 R⁹는 독립적으로 수소 또는 알킬로 부터 선택되며, L은 반대이온이다)이고, R⁶은 수소 또는 알킬이고, R⁷은 수소, 알킬 또는 CO₂R¹⁰이며, 여기서 R¹⁰은 알킬이다]이며,

단, Z이 수소일 때, Y¹이 (CH₂)p (p=0)이고, Y²가 (CH₂)_q(q=0)이며, R¹및 R²가 모두 메틸이면서 X¹및 X²모두가 C=O일 수는 없다.
칼륨 채널 억제 활성을 갖는 하기 화학식의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구의약.

식중, R¹은 선택적으로 치환된 아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

R²는 선택적으로 치환된 아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

Y¹은 O, (CH₂)_p, CH₂O, HC=CH 또는 NH (여기서, p는 0, 1 또는 2이다)이고,

Z는 수소 또는 OR⁵[여기서, R⁵는 수소, (CH₂)_m-R⁸또는 C(O)-(CH₂)_m-R⁸(여기서, m은 1 내지 5이며, R⁸은 N(R⁹)₂, N(R⁹)₃L 또는 CO₂R⁹로, 각각의 R⁹는 독립적으로 수소 또는 알킬로 부터 선택되며, L은 반대이온이다)이다]이다.
칼륨 채널 억제 활성을 갖는 하기 화학식의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구의약.

식중, R¹은 수소, 또는 페닐 및 β-나프틸의 군으로부터 선택되는 선택적으로 치환된 아릴이며,

R²는 선택적으로 치환된 페닐, 선택적으로 치환된 헤테로시클릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 카르보시클로알킬로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

m은 0 또는 1이고,

X는 O 또는 S이고,

Y는 (CH₂)_p, (CH₂O)_q및 (NH)_r(여기서, p는 0, 1 또는 2이고, q는 0 또는 1 이고, r은 0 또는 1 이다)이다.
제3항에 있어서, 하기 화학식의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구의약.

식중, R¹, R²및 p는 제3항에서 정의된 바와 동일하다.
하기 화학식의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구의약 및 제약상 허용되는 희석제 또는 담체를 포함하는 제약 조성물.

식중, R¹은 수소, 알킬 또는 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로시클릴 및 선택적으로 치환된 카르보시클로알킬로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

R²는 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로시클릴 및 선택적으로 치환된 카르보시클로알킬로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

R³은 수소 또는 메틸이고,

R⁴는 수소 또는 메틸이며,

X¹은 C=O, C=S, 또는 SO₂이고,

X²는 C=O 또는 SO₂이고,

Y¹은 O, (CH₂)_p, CH₂O, HC=CH 또는 NH (여기서, p는 0, 1 또는 2이다)이고,

Y²는 O, (CH₂)_q, HC=CH 또는 NH (여기서, q는 0 또는 1이다)이고,

Z는 수소, OR⁵또는 NR⁶R⁷[여기서, R⁵는 수소, (CH₂)_m-R⁸또는 C(O)-(CH₂)_m-R⁸(여기서, m은 1 내지 5이며, R⁸은 N(R⁹)₂, N(R⁹)₃L 또는 CO₂R⁹로, 각각의 R⁹는 독립적으로 수소 또는 알킬로 부터 선택되며, L은 반대이온이다)이고, R⁶은 수소 또는 알킬이고, R⁷은 수소, 알킬 또는 CO₂R¹⁰이며, 여기서 R¹⁰은 알킬이다]이고,

단, Z이 수소일 때, Y¹이 (CH₂)p (p=0)이고, Y²가 (CH₂)_q(q=0)이며, R¹및 R²가 모두 메틸이면서 X¹및 X²모두가 C=O일 수는 없다.
하기 화학식의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구의약, 및 제약상 허용되는 희석제 또는 담체를 포함하는 제약 조성물.

식중, R¹은 선택적으로 치환된 아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

R²는 선택적으로 치환된 아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로 부터 선택되고,

Y¹은 O, (CH₂)_p, CH₂O, HC=CH 또는 NH (여기서, p는 0, 1 또는 2이다)이고,

Z는 수소 또는 OR⁵[여기서, R⁵는 수소, (CH₂)_m-R⁸또는 C(O)-(CH₂)_m-R⁸(여기서, m은 1 내지 5이며, R⁸은 N(R⁹)₂, N(R⁹)₃L 또는 CO₂R⁹로, 각각의 R⁹는 독립적으로 수소 또는 알킬로 부터 선택되며, L은 반대이온이다)이다]이다.
하기 화학식의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구의약 및 제약상 허용되는 희석제 또는 담체를 포함하는 제약 조성물.

식중, R¹은 수소, 또는 페닐 및 β-나프틸의 군으로부터 선택되는 선택적으로 치환된 아릴이며,

R²는 선택적으로 치환된 페닐, 선택적으로 치환된 헤테로시클릴 및 선택적으로 치환된 카르보시클로알킬로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

m은 0 또는 1이고,

X는 O 또는 S이고,

Y는 (CH₂)_p, (CH₂O)_q및 (NH)_r(여기서, p는 0, 1 또는 2이고, q는 0 또는 1 이고, r은 0 또는 1 이다)이다.
하기 화학식의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구의약, 및 제약상 허용되는 희석제 또는 담체를 포함하는 제약 조성물.

식중, R¹, R², m 및 p는 제7항에서 정의된 바와 동일하다.
칼륨 채널을 보유하는 세포막을 칼륨 채널의 전도성을 차단하기에 유효한 양으로 존재하는 하기 화학식의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구의약에 노출시키는 것을 포함하는 칼륨 채널을 보유하는 세포막을 통한 칼륨 수송을 억제하는 방법.

식중, R¹은 수소, 알킬 또는 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로시클릴 및 선택적으로 치환된 카르보시클로알킬로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

R²는 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로시클릴 및 선택적으로 치환된 카르보시클로알킬로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

R³은 수소 또는 메틸이고,

R⁴는 수소 또는 메틸이며,

X¹은 C=O, C=S, 또는 SO₂이고,

X²는 C=O 또는 SO₂이고,

Y¹은 O, (CH₂)_p, CH₂O, HC=CH 또는 NH (여기서, p는 0, 1 또는 2이다)이고,

Y²는 O, (CH₂)_q, HC=CH 또는 NH (여기서, q는 0 또는 1이다)이고,

Z는 수소, OR⁵또는 NR⁶R⁷[여기서, R⁵는 수소, (CH₂)_m-R⁸또는 C(O)-(CH₂)m-R⁸(여기서, m은 1 내지 5이며, R⁸은 N(R⁹)₂, N(R⁹)₃L 또는 CO₂R⁹로, 각각의 R⁹는 독립적으로 수소 또는 알킬로 부터 선택되며, L은 반대이온이다)이고, R⁶은 수소 또는 알킬이고, R⁷은 수소, 알킬 또는 CO₂R¹⁰이며, 여기서 R¹⁰은 알킬이다]이다.
제9항에 있어서, 상기 칼륨 채널이 전압 게이트 칼륨 채널인 방법.
제10항에 있어서, 상기 칼륨 채널이 심장 I_Kur칼륨 흐름을 담당하는 칼륨 채널, 또는 T-임파구 I_Kn칼륨 흐름을 담당하는 칼륨 채널, 및 Kv1.5 또는 Kv1.3 α-서브유닛 유전자 산물 중 하나를 함유하는 칼륨 채널로 부터 선택되는 것인 방법.
칼륨 채널을 보유하는 세포막을 칼륨 채널의 전도성을 차단하기에 유효한 양으로 존재하는 하기 화학식의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구의약에 노출시키는 것을 포함하는 칼륨 채널을 보유하는 세포막을 통한 칼륨 수송을 억제하는 방법.

식중, R¹은 선택적으로 치환된 아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

R²는 선택적으로 치환된 아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로 부터 선택되고,

Y¹은 O, (CH₂)_p, CH₂O, HC=CH 또는 NH (여기서, p는 0, 1 또는 2이다)이고,

Z는 수소 또는 OR⁵[여기서, R⁵는 수소, (CH₂)_m-R⁸또는 C(O)-(CH₂)_m-R⁸(여기서, m은 1 내지 5이며, R⁸은 N(R⁹)₂, N(R⁹)₃L 또는 CO₂R⁹로, 각각의 R⁹는 독립적으로 수소 또는 알킬로 부터 선택되며, L은 반대이온이다)이다]이다.
제12항에 있어서, 상기 칼륨 채널이 전압 게이트 칼륨 채널인 방법.
제13항에 있어서, 상기 칼륨 채널이 심장 I_Kur칼륨 흐름을 담당하는 칼륨 채널, 또는 T-임파구 I_Kn칼륨 흐름을 담당하는 칼륨 채널, 및 Kv1.5 또는 Kv1.3 α-서브유닛 유전자 산물 중 하나를 함유하는 칼륨 채널로 부터 선택되는 것인 방법.
칼륨 채널을 보유하는 세포막을 칼륨 채널의 전도성을 차단하기에 유효한 양으로 존재하는 하기 화학식의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구의약에 노출시키는 것을 포함하는 칼륨 채널을 보유하는 세포막을 통한 칼륨 수송을 억제하는 방법.

식중, R¹은 수소, 또는 페닐 및 β-나프틸의 군으로부터 선택되는 선택적으로 치환된 아릴이며,

R²는 선택적으로 치환된 페닐, 선택적으로 치환된 헤테로시클릴 및 선택적으로 치환된 카르보시클로알킬로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

m은 0 또는 1이고,

X는 O 또는 S이고,

Y는 (CH₂)_p, (CH₂O)_q및 (NH)_r(여기서, p는 0, 1 또는 2이고, q는 0 또는 1 이고, r은 0 또는 1 이다)이다.
제15항에 있어서, 상기 칼륨 채널이 전압 게이트 칼륨 채널인 방법.
제16항에 있어서, 상기 칼륨 채널이 심장 I_Kur칼륨 흐름을 담당하는 칼륨 채널, 또는 T-임파구 I_Kn칼륨 흐름을 담당하는 칼륨 채널, 및 Kv1.5 또는 Kv1.3 α-서브유닛 유전자 산물 중 하나를 함유하는 칼륨 채널로 부터 선택되는 것인 방법.
약학적으로 유효한 양의 하기 화학식의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구의약을 그를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 심장 부정맥증의 치료 방법.

식중, R¹은 수소, 알킬 또는 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로시클릴 및 선택적으로 치환된 카르보시클로알킬로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

R²는 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로시클릴 및 선택적으로 치환된 카르보시클로알킬로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

R³은 수소 또는 메틸이고,

R⁴는 수소 또는 메틸이며,

X¹은 C=O, C=S, 또는 SO₂이고,

X²는 C=O 또는 SO₂이고,

Y¹은 O, (CH₂)p, CH₂O, HC=CH 또는 NH (여기서, p는 0, 1 또는 2이다)이고,

Y²는 O, (CH₂)_q, HC=CH 또는 NH (여기서, q는 0 또는 1이다)이고,

Z는 수소, OR⁵또는 NR⁶R⁷[여기서, R⁵는 수소, (CH₂)_m-R⁸또는 C(O)-(CH₂)_m-R⁸(여기서, m은 1 내지 5이며, R⁸은 N(R⁹)₂, N(R⁹)₃L 또는 CO₂R⁹로, 각각의 R⁹는 독립적으로 수소 또는 알킬로 부터 선택되며, L은 반대이온이다)이고, R⁶은 수소 또는 알킬이고, R⁷은 수소, 알킬 또는 CO₂R¹⁰이며, 여기서 R¹⁰은 알킬이다]이다.
약학적으로 유효한 양의 하기 화학식의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구의약을 그를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 세포 증식성 질환의 치료 방법.

식중, R¹은 수소, 알킬 또는 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로시클릴 및 선택적으로 치환된 카르보시클로알킬로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

R²는 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로시클릴 및 선택적으로 치환된 카르보시클로알킬로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

R³은 수소 또는 메틸이고,

R⁴는 수소 또는 메틸이며,

X¹은 C=O, C=S, 또는 SO₂이고,

X²는 C=O 또는 SO₂이고,

Y¹은 O, (CH₂)_p, CH₂O, HC=CH 또는 NH (여기서, p는 0, 1 또는 2이다)이고,

Y²는 O, (CH₂)_q, HC=CH 또는 NH (여기서, q는 0 또는 1이다)이고,

Z는 수소, OR⁵또는 NR⁶R⁷[여기서, R⁵는 수소, (CH₂)_m-R⁸또는 C(O)-(CH₂)m-R⁸(여기서, m은 1 내지 5이며, R⁸은 N(R⁹)₂, N(R⁹)₃L 또는 CO₂R⁹로, 각각의 R⁹는 독립적으로 수소 또는 알킬로 부터 선택되며, L은 반대이온이다)이고, R⁶은 수소 또는 알킬이고, R⁷은 수소, 알킬 또는 CO₂R¹⁰이며, 여기서 R¹⁰은 알킬이다]이다.
약학적으로 유효한 양의 하기 화학식의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구의약을 그를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 심장 부정맥증의 치료 방법.

식중, R¹은 선택적으로 치환된 아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

R²는 선택적으로 치환된 아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로 부터 선택되고,

Y¹은 O, (CH₂)_p, CH₂O, HC=CH 또는 NH (여기서, p는 0, 1 또는 2이다)이고,

Z는 수소 또는 OR⁵[여기서, R⁵는 수소, (CH₂)_m-R⁸또는 C(O)-(CH₂)_m-R⁸(여기서, m은 1 내지 5이며, R⁸은 N(R⁹)₂, N(R⁹)₃L 또는 CO₂R⁹로, 각각의 R⁹는 독립적으로 수소 또는 알킬로 부터 선택되며, L은 반대이온이다)이다]이다.
약학적으로 유효한 양의 하기 화학식의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구의약을 그를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 세포 증식성 질환의 치료 방법.

식중, R¹은 선택적으로 치환된 아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

R²는 선택적으로 치환된 아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로 부터 선택되고,

Y¹은 O, (CH₂)_p, CH₂O, HC=CH 또는 NH (여기서, p는 0, 1 또는 2이다)이고,

Z는 수소 또는 OR⁵[여기서, R⁵는 수소, (CH₂)_m-R⁸또는 C(O)-(CH₂)_m-R⁸(여기서, m은 1 내지 5이며, R⁸은 N(R⁹)₂, N(R⁹)₃L 또는 CO₂R⁹로, 각각의 R⁹는 독립적으로 수소 또는 알킬로 부터 선택되며, L은 반대이온이다)이다]이다.
약학적으로 유효한 양의 하기 화학식의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구의약을 그를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 심장 부정맥증의 치료 방법.

식중, R¹은 수소, 또는 페닐 및 β-나프틸의 군으로부터 선택되는 선택적으로 치환된 아릴이며,

R²는 선택적으로 치환된 페닐, 선택적으로 치환된 헤테로시클릴 및 선택적으로 치환된 카르보시클로알킬로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

m은 0 또는 1이고,

X는 O 또는 S이고,

Y는 (CH₂)_p, (CH₂O)_q및 (NH)_r(여기서, p는 0, 1 또는 2이고, q는 0 또는 1 이고, r은 0 또는 1 이다)이다.
약학적으로 유효한 양의 하기 화학식의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구의약을 그를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 세포 증식성 질환의 치료 방법.

식중, R¹은 수소, 또는 페닐 및 β-나프틸의 군으로부터 선택되는 선택적으로 치환된 아릴이며,

R²는 선택적으로 치환된 페닐, 선택적으로 치환된 헤테로시클릴 및 선택적으로 치환된 카르보시클로알킬로 이루어진 군으로 부터 선택되며,

m은 0 또는 1이고,

X는 O 또는 S이고,

Y는 (CH₂)_p, (CH₂O)_q및 (NH)_r(여기서, p는 0, 1 또는 2이고, q는 0 또는 1 이고, r은 0 또는 1 이다)이다.