KR102657559B1 - 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함하는 항산화 활성이 증진된 복합 추출물의 제조방법 및 그 복합 추출물을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함하는 항산화 활성이 증진된 복합 추출물의 제조방법 및 그 복합 추출물을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 조성물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함하는 항산화 활성이 증진된 복합 추출물의 제조방법 및 그 복합 추출물을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 조성물에 관한 것이다.
산소 호흡을 하는 생명체는 산화적 스트레스를 피할 수 없으며, 이러한 산화적 스트레스는 발암, 노화, 염증 반응 등의 다양한 질병과 연관되어 있다. 따라서, 이러한 산화적 스트레스를 제거하기 위한 다양한 항산화제가 개발되어 왔으며, 대표적으로 비타민 C와 BHT(butylated hydroxy toluene), tocopherol, cysteine, glutathione 등이 알려져 있다. 그러나, 기존의 화학합성 항산화제의 잠재적 위험성과 항산화제 공급의 경제적 어려움이 증가되면서 소비자들은 값싼 천연재료 유래의 항산화제를 원하게 되었고, 경제성과 안전성이 확보된 새로운 강력한 항산화제의 필요성은 지속적으로 증가되고 있다.
또한, 현대인에게 가장 흔한 질병 중 하나인 당뇨병은 인슐린의 분비량이 부족하거나 정상적인 기능이 이루어지지 않는 등의 대사 질환의 일종으로서, 혈중 포도당 농도가 높은 것이 특징이며, 고혈당으로 인하여 여러 증상 및 징후를 일으킨다. 당뇨병은 제1형과 제2형으로 구분되는데, 제1형 당뇨병은 유전적 영향에 의해 인슐린을 전혀 생산하지 못하는 것이 원인이 되어 발생하며, 제2형 당뇨병은 인슐린 기능이 떨어진 인슐린 저항성(insulin resistance)이 원인으로 알려져 있다. 특히, 제2형 당뇨는 식생활의 서구화에 따른 고열량, 고지방, 고단백의 식단, 운동 부족, 스트레스 등 환경적인 요인이 크게 작용하는 것으로 알려져 있다. 당뇨병의 치료를 위해서는 제1형 당뇨병의 경우에는 인슐린 주사가 필수적이며, 제2형 당뇨병의 경우에는 생활 습관 교정 및 약물 치료가 필요하며, 대표적으로 인슐린 분비 촉진제(예를 들어, 레파글리나이드, 미티글이나이드) 및 소장에서의 탄수화물 흡수 지연제(예를 들어, 아카보즈, 보글리보스) 등이 사용되고 있다.
얌빈(Pachyrhizus erosus)은 병충해에 강하며 재배하기 쉬워 현재는 멕시코뿐만 아니라 전 세계적으로 광범위하게 재배되고 있는 중요한 식용 뿌리 식물이다. 현재는 여러 지역에서 재배하고 있으며, 다이어트 및 항당뇨 식품으로 수요가 증가되고 있는 실정이다.
한국공개특허공보 제 2017-0072055호에서는 얌빈을 이용하여 항산화 조성물을 제공하고자 하는 기술이 공지되어 있으나, 상기 얌빈의 종자에 존재하는 독성을 완전하게 제거하지 못하여, 얌빈의 과육 내지 껍질만 이용하여, 얌빈의 유효성분을 그대로 이용할 수 없는 문제가 있었다.
한편, 배는 예로부터 한방의 중요 약재로 활용될 만큼 인체에 유익한 과일로 알려져 왔고, 본초강목, 동의보감 등에 의하면 배는 맛은 달고 차가우며, 무독하고, 즙을 내어 복용하면 효율성이 뛰어 난 것으로 알려져 왔고 특히 기관지 등에 좋고 감기 등으로 목이 아플때 도움이 된다고 알려져 있다. 그 외에도 배는 담, 가래, 기침, 해열, 진통, 이뇨 촉진(다이어트 효과), 숙취해소, 종기 등의 치료에 효능이 알려져 있고, 최근에는 항암제로서의 효과도 발표되고 있다. 그러나, 배를 적절히 처리하여 건강 기능성을 증대시키거나 특정 질환에 유효한 제품으로 개발하려는 시도는 아직 주목할 만한 성과가 없는 실정이다.
본 발명은 얌빈 추출물과 배 추출물이 포함된 복합 추출물에 의해 유의적인 항산화 활성과 항당뇨 활성이 발현되어, 약학적 조성물로 사용할 수 있도록 하는 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함하는 항산화 활성이 증진된 복합 추출물의 제조방법 및 그 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 얌빈 추출물과 배 추출물이 포함된 항산화 활성이 증진된 복합 추출물을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 조성물을 제공하는 것을 특징으로 한다.
상기 복합 추출물은 발효 균주에 의해 발효된 후 추출된 발효 추출물인 것을 특징으로 한다.
상기 발효 균주는 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 커바투스(Lactobacillus curvatus), 락토바실러스불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스 파라카세이(Lactobacillus paracasei), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 비피도박테리움 브레베(Bifidobacterium breve), 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)으로 이루어지는 군에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 한다.
상기 복합 추출물은 소계 추출물, 차요테 추출물, 차조기 추출물 및 구장잎 추출물로 이루어지는 군에서 선택되는 어느 하나 이상을 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 한다.
상기 복합추출물은 얌빈 추출물 40~70중량%, 배 추출물 10~30중량%. 소계 추출물 1~10중량%, 차요테 추출물 1~10중량%, 차조기 추출물 1~10중량% 및 구장잎 추출물 1~10중량%를 포함하여 구성되는 것을 특징으로 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함하는 것을 특징으로 한다.
상기 복합 추출물은 20 내지 80 KHz를 가지는 파장과 200 내지 1,500 watt 출력을 갖는 초음파에 의해 추출되는 것을 특징으로 하는 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함하는 것을 특징으로 한다.
상기 항당뇨 조성물은 약학적 조성물 또는 건강 기능 식품 조성물인 것을 특징으로 한다.
a) 얌빈과 배가 포함된 추출 재료를 세척한 후, 세절 및 건조하는 전처리 단계;b) 전처리된 추출 재료를 열수 추출한 후, 감압농축하여 1차 추출물을 수득하는 단계;c) 상기 1차 추출물에 발효 균주를 가한 후, 일정시간 발효하여 발효물을 수득하는 단계;d) 상기 발효물을 원심분리한 후, 초음파 추출법을 이용하여 2차 추출물을 수득하는 단계;를 포함하여 추출된 것을 특징으로 한다.
상기 추출 재료는 소계, 차요테, 차조기 및 구장잎이 더 포함되는 것을 특징으로 한다.
발효 균주는 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 커바투스(Lactobacillus curvatus), 락토바실러스불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스 파라카세이(Lactobacillus paracasei), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 비피도박테리움 브레베(Bifidobacterium breve), 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)으로 이루어지는 군에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 한다.
본 발명은 얌빈 추출물과 배 추출물이 포함된 복합 추출물에 의해 유의적인 항산화 활성과 항당뇨 활성이 발현되어, 약학적 조성물 내지 건강 기능 식품 조성물로 사용할 수 있게 하는 효과가 있다.
또한, 본 발명은 복합 추출물을 이용함으로써, 폴리페놀과 총 플라보노이드 함량의 증대 등 유효성분의 함량이 현저하게 증진된 항산화 활성을 갖는 항당뇨 조성물을 제공할 수 있는 효과가 있다.
도1 은 본 발명의 일 실시예에 따른 항당뇨 조성물의 DPPH라디칼 소거 활성을 나타낸 그래프이다.
도2 은 본 발명의 일 실시예에 따른 항당뇨 조성물의 ABTS라디칼 소거 활성을 나타낸 그래프이다.
도3 은 본 발명의 일 실시예에 따른 항당뇨 조성물의 폴리페놀함량을 나타낸 그래프이다.
도4 은 본 발명의 일 실시예에 따른 항당뇨 조성물의 플라보노이드 함량을 나타낸 그래프이다.
도2 은 본 발명의 일 실시예에 따른 항당뇨 조성물의 ABTS라디칼 소거 활성을 나타낸 그래프이다.
도3 은 본 발명의 일 실시예에 따른 항당뇨 조성물의 폴리페놀함량을 나타낸 그래프이다.
도4 은 본 발명의 일 실시예에 따른 항당뇨 조성물의 플라보노이드 함량을 나타낸 그래프이다.
본 발명을 충분히 이해하기 위해서 본 발명의 바람직한 실시예를 참조하여 설명한다. 본 발명의 실시예는 여러가지 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 아래에서 상세히 설명하는 실시예로 한정되는 것으로 해석되어서는 안된다. 본 실시예는 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위하여 제공되는 것이다.
본 발명은 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함하는 항산화 활성이 증진된 복합 추출물을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 조성물을 제공할 수 있다.
상기 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함하는 항산화 활성이 증진된 복합 추출물은 항당뇨 조성물의 전체 중량 대비 1 내지 10중량% 함유되는 것이 바람직하고, 더욱 바람직하게 5 중량% 함유되는 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 얌빈과 배는 재배한 것, 채취한 것, 또는 시판되는 것 등이 제한 없이 사용될 수 있다.
본 명세서에서 “추출물”이라 함은, 천연물로부터 그 안의 성분을 뽑아냄으로써, 얻어진 물질이라면, 뽑아내는 방법이나 성분의 종류와 무관하게 모두 포함한다. 예컨대, 물이나 유기 용매를 이용하여 천연물로부터 용매에 용해되는 성분을 추출해 낸 것, 천연물의 특정 성분만을 추출하여 얻어진 것 등을 모두 포함하는 광의의 개념이다. 본 발명의 일구현예에서, 상기 유기 용매는, 특별히 제한되는 것은 아니며, 메탄올, 에탄올, 이소프로필알코올, n-프로필 알코올, n-부탄올 및 이소부탄올 등의 C1~C5의 저급 알코올, 글리세롤, 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸 렌글리콜 등의 다가 알코올, 메틸아세테이트, 에틸아세테이트, 벤젠, n-헥산, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 클로로포름 등의 탄화수소계 용매, 그리고 석유에테르, 메틸아세테이트, 벤젠, 헥산, 클로로포름, 메틸렌클로라이드, 디메틸에테르, 에틸아세테이트 등의 비극성 유기용매 등 일 수 있다.
일 구현예에서, 추출물은 물을 이용하여 추출한 추출액 일 수 있다. 또 다른 일 구현예에서, 추출물은 C1~C5 알코올을 이용하여 추출한 추출액 일 수 있다. 또 다른 일 구현예에서, 추출물은 에탄올을 이용하여 추출한 추출액 일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다
본 발명의 일측면에서, 상기 C1~C5 알코올 수용액의 농도는 40% 내지 90% (v/v)일수 있다. 일 구현예에서, 상기 C1~C5 알코올 수용액의 농도는 40% 이상, 45% 이상, 50% 이상, 55% 이상, 60% 이상, 65% 이상, 66% 이상, 67%이상, 68% 이상, 69% 이상, 70% 이상, 71% 이상, 72% 이상, 73% 이상, 74% 이상, 75% 이상 또는 80% 이상일 수 있다. 또한, 상기 C1~C5 알코올 수용액의 농도는 90% 이하, 85% 이하, 80% 이하, 75% 이하, 74% 이하, 73% 이하, 72% 이하, 71% 이하, 70% 이하, 69% 이하, 68% 이하, 67% 이하, 65% 이하 또는 60% 이하일 수 있다. C1~C5 알코올 수용액의 농도가 상기 범위 내일 때, 항당뇨 및 항산화 효과가 우수하다.
본 발명의 상기 복합 추출물은 발효 균주에 의해 발효된 후 추출된 발효 추출물인 것을 특징으로 한다.
상기 복합 추출물이 발효 균주에 의해 발효과정을 거치게 될 경우, 복합 추출물을 구성하는 원료의 약리활성을 증진시킬 수 있으므로, 복합 추출물의 최종 수율이 개선되어, 복합 추출물의 경제적 이용가치를 높일 수 있는 효과가 있다.
이때, 상기 발효 균주는 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 커바투스(Lactobacillus curvatus), 락토바실러스불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스 파라카세이(Lactobacillus paracasei), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 비피도박테리움 브레베(Bifidobacterium breve), 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)으로 이루어지는 군에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하며, 더욱 바람직하게, 락토바실러스불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus)을 접종하여, 30~45℃에서 2~10시간 동안 발효하여 발효추출물을 수득할 수 있도록 함이 바람직하다.
상기 복합 추출물은 소계 추출물, 차요테 추출물, 차조기 추출물 및 구장잎 추출물로 이루어지는 군에서 선택되는 어느 하나 이상을 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하며, 가장 바람직하게, 상기 복합추출물은 얌빈 40~70중량%, 배 10~30중량%. 소계 1~10중량%, 차요테 1~10중량%, 차조기 1~10중량% 및 구장잎 1~10중량%를 포함하여 구성되는 것을 특징으로 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함될 수 있다.
상기 소계, 차요테, 차조기, 구장잎이 상기 복합추출물에 포함될 경우, 각 추출물이 갖고 있는, 항염, 항산화, 항균 등의 복합 상승적 효과 뿐만 아니라, 얌빈 내지 배에 함유된 약학적 성분의 용출을 촉진하여, 동일 중량대비 발현되는 항당뇨 내지 항산화 효과를 증진시킬 수 있는 효과가 있다.
항산화 성분인 폴리페놀을 고농도로 함유함으로써 높은 항산화 효과를 발휘할 수 있다.
상기 복합 추출물은 20 내지 80 KHz를 가지는 파장과 200 내지 1,500 watt 출력을 갖는 초음파에 의해 추출되는 것을 특징으로 하는 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함하는 것을 특징으로 한다.
즉, 상기 복합 추출물은 초음파 진동에 의해 발생되는 에너지로 추출되는 것이 바람직하다. 이는 독성물질을 제거하고, 추출 효율을 더욱 증진 시키기 위함이다.
더욱 구체적으로, 복합 추출물에 포함된 얌빈의 잎, 줄기, 콩 및 열매에는 불용성인 로테논이라는 독성물질이 소량으로 포함되어, 추출 과정에서 상기 로테논 제거 공정을 거치지 않을 경우, 상기 복합 추출물이 인체에 유해하게 작용될 수 있는 문제가 있다. 본 발명에서는 상기 불용성인 로테논을 초음파의 진동 및 파장에 의해 분해시킴으로써, 인체에 무해하게 된다.
즉, 초음파가 추출 용매 속에서 시료에 포함된 불용성 물질을 파괴할 수 있다. 또한, 상기 불용성 물질을 파괴할 때 발생되는 높은 국부온도로 인하여 주위에 위치하는 반응물 입자들의 운동에너지를 크게 하기 때문에 반응에 필요한 충분한 에너지를 얻게 되고, 초음파 에너지의 충격 효과로 높은 압력을 유도하여, 시료에 함유된 물질과 용매의 혼합 효과를 높여 추출 효율을 증가시킬 수 있는 효과가 있다.
이때, 과도한 출력의 초음파는 복합 추출물에 포함된 인체에 이로운 성분을 파괴 할 수 있고, 현저히 낮은 출력을 갖는 초음파는 로테논 제거 효과가 미미할 수 있으므로, 상기 초음파는 20 내지 80 KHz를 가지는 파장과 200 내지 1,500 watt 출력을 갖는 것을 이용하는 것이 바람직하다.
예시적인 일 구현에 따르면, 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함하는 복합 추출물의 제조방법은 하기와 같으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 항당뇨 조성물의 유효성분으로서, 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함하는 복합 추출물은 a) 얌빈과 배가 포함된 추출 재료를 세척한 후, 세절 및 건조하는 전처리 단계; b) 전처리된 추출 재료를 열수 추출한 후, 감압농축하여 1차 추출물을 수득하는 단계; c) 상기 1차 추출물에 발효 균주를 가한 후, 일정시간 발효하여 발효물을 수득하는 단계; d) 상기 발효물을 원심분리한 후, 초음파 추출법을 이용하여 2차 추출물을 수득하는 단계;를 포함하여 추출된 것을 특징으로 한다.
상기 추출 재료는 소계, 차요테, 차조기 및 구장잎이 더 포함될 수 있으며, 상기 발효 균주는 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 커바투스(Lactobacillus curvatus), 락토바실러스불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스 파라카세이(Lactobacillus paracasei), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 비피도박테리움 브레베(Bifidobacterium breve), 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)으로 이루어지는 군에서 선택되는 어느 하나이며, 더욱 바람직하게, 락토바실러스불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus)일 수 있다.
또한 본 발명은 상기 기재된 제조방법으로 제조된 항산화 활성이 증진된 복합 추출물을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 조성물을 제공할 수 있다.
상기 항당뇨 조성물은 약학적 조성물 또는 건강 기능 식품 조성물일 수 있다.
상기 항당뇨 조성물이 약학적 조성물로서 이용될 경우, 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
제제화할 경우에는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제 등을 통상 사용한다. 경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함될 수 있다. 이러한 고형 제제에는 상기 유효성분 외에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calciumcarbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴을 포함할 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 포함될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 있으며, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 액상 파라핀 이외에 여러가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제,현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함될 수 있다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 라우린지, 카카오지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 명세서에 개시된 상기 약학적 조성물의 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다를 수 있으며, 당해 기술분야에서 통상적으로 사용되는 범위에서 선택될 수 있다. 일측면에서 유효성분의 1일 투여량은 건조 중량 기준으로 0.0001~0.5g/kg일 수 있고, 일측면에서는 0.001~0.1g/kg 투여될 수 있다.
상기 약학적 조성물은 공복 시 혈당 및 당화혈색소를 감소시키고, 혈중 인슐린 수준을 증가시키는 것을 특징으로 하는 당뇨 예방 및 치료용 약학적 조성물임이 바람직하다.
한편, 상기 항당뇨 조성물이 건강 기능 식품 조성물로서 이용될 경우, 전체 건강 기능 식품 중량의 10 내지 90 중량%를 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 일 측면에서 식품조성물로 섭취 시 유효성분의 1일 투여량은 건조 중량 기준으로 0.0001~0.1g/kg 일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다
일실시예에서 상기 조성물은 본 발명이 목적으로 하는 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 주 효과에 상승효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 함유할 수 있다. 예를 들어, 물성 개선을 위하여 향료, 색소, 살균제, 산화 방지제, 방부제, 보습제, 점증제, 무기염류, 유화제 및 합성 고분자 물질 등의 첨가제를 더 포함할 수 있다. 그 외에도, 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당 및 해초 엑기스 등의 보조 성분을 더 포함할 수도 있다. 상기 성분들은 제형 또는 사용 목적에 따라서 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 그 첨가량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 선택될 수 있다. 예를 들어, 상기 성분들의 첨가량은, 조성물 전체 중량을 기준으로, 0.01-5 중량%, 보다 구체적으로는 0.01-3 중량% 범위일 수 있다.
본 발명에 따른 조성물의 제형은 용액, 유화물, 점성형 혼합물, 타블렛, 분말, 정제, 칼셉, 액상, 과립, 환, 편상, 페이스트상, 시럽, 겔, 젤리, 바 또는 가식성 필름 등의 다양한 형태일 수 있으며, 이는 단순 음용, 주사투여, 스프레이 방식 또는 스퀴즈 방식 등의 다양한 방법으로 투여될 수 있다.
이하 본 발명의 실시예에 따른 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함하는 복합 추출물 제조방법에 대하여 자세히 설명한다.
하기와 같이 실시예를 제조하였다.
구분 | 복합 추출물의 제조 | 복합 추출물 발효여부 | 추출법 |
실시예1 | 얌빈 700g 배 300g |
YES (락토바실러스불가리쿠스) |
열수 추출+ 초음파 추출 |
실시예2 | 얌빈 추출물 500g 배 추출물 500g |
YES (락토바실러스불가리쿠스) |
열수 추출+ 초음파 추출 |
실시예3 | 얌빈 추출물 300g 배 추출물 700g |
YES (락토바실러스불가리쿠스) |
열수 추출+ 초음파 추출 |
실시예4 | 얌빈 추출물 600g 배 추출물 200g 소계 추출물 100g 차요테 추출물 100g |
YES (락토바실러스불가리쿠스) |
열수 추출+ 초음파 추출 |
실시예5 | 얌빈 추출물 600g 배 추출물 200g 소계 추출물 50g 차요테 추출물 50g 차조기 추출물 50g 구장잎 추출물 50g |
NO | 열수 추출+ 초음파 추출 |
실시예6 | 얌빈 추출물 600g 배 추출물 200g 소계 추출물 50g 차요테 추출물 50g 차조기 추출물 50g 구장잎 추출물 50g |
NO | 열수추출 |
실시예7 | 얌빈 추출물 600g 배 추출물 200g 소계 추출물 50g 차요테 추출물 50g 차조기 추출물 50g 구장잎 추출물 50g |
NO | 초음파추출 |
실시예8 | 얌빈 추출물 600g 배 추출물 200g 소계 추출물 50g 차요테 추출물 50g 차조기 추출물 50g 구장잎 추출물 50g |
YES (락토바실러스불가리쿠스) |
열수 추출+ 초음파 추출 |
실시예9 | 얌빈 추출물 600g 배 추출물 200g 소계 추출물 50g 차요테 추출물 50g 차조기 추출물 50g 구장잎 추출물 50g |
YES (락토바실러스 브레비스) |
열수 추출+ 초음파 추출 |
실시예10 | 얌빈 추출물 600g 배 추출물 200g 소계 추출물 50g 차요테 추출물 50g 차조기 추출물 50g 구장잎 추출물 50g |
YES (락토바실러스 카제이) |
열수 추출+ 초음파 추출 |
실시예11 | 얌빈 추출물 600g 배 추출물 200g 소계 추출물 50g 차요테 추출물 50g 차조기 추출물 50g 구장잎 추출물 50g |
YES (락토바실러스 커바투스) |
열수 추출+ 초음파 추출 |
실시예12 | 얌빈 추출물 600g 배 추출물 200g 소계 추출물 50g 차요테 추출물 50g 차조기 추출물 50g 구장잎 추출물 50g |
YES (락토바실러스 파라카세이) |
열수 추출+ 초음파 추출 |
실시예13 | 얌빈 추출물 600g 배 추출물 200g 소계 추출물 50g 차요테 추출물 50g 차조기 추출물 50g 구장잎 추출물 50g |
YES (락토바실러스 플란타룸) |
열수 추출+ 초음파 추출 |
실시예14 | 얌빈 추출물 600g 배 추출물 200g 소계 추출물 50g 차요테 추출물 50g 차조기 추출물 50g 구장잎 추출물 50g |
YES (비피도박테리움 브레베) |
열수 추출+ 초음파 추출 |
실시예15 | 얌빈 추출물 600g 배 추출물 200g 소계 추출물 50g 차요테 추출물 50g 차조기 추출물 50g 구장잎 추출물 50g |
YES (비피도박테리움 롱검) |
열수 추출+ 초음파 추출 |
실시예16 | 얌빈 추출물 600g 배 추출물 200g 소계 추출물 50g 차요테 추출물 50g 차조기 추출물 50g 구장잎 추출물 50g |
YES (락토바실러스불가리쿠스) |
초음파추출 |
실시예17 | 얌빈 추출물 600g 배 추출물 200g 소계 추출물 50g 차요테 추출물 50g 차조기 추출물 50g 구장잎 추출물 50g |
YES (락토바실러스불가리쿠스) |
열수추출 |
<실시예 1>
a) 복합 추출물을 구성하는 추출 재료로서, 얌빈과 배를 3~5% 염수로 1차 세척한 후, 입자크기가 40㎛ 이하인 기포가 60% 이상인 마이크로기포수로 2차 세척하였고, 5~10cm의 크기로 세절하고, 마이크로웨이브파를 이용하여, 50℃~70℃의 온도에서 5~10분간 건조하는 전처리 단계를 진행하였다. 그 다음, b) 전처리된 얌빈과 700g과 배 300g을 정확히 측정한 후, 정제수 1000g을 첨가하여 100~120℃의 온도에서 2시간 동안 열수 추출한 후, 감압 농축하여, 1차 추출물을 수득하였다. 이후, c) 상기 1차 추출물에 발효 균주(락토바실러스불가리쿠스)를 가한 후, 30~45℃에서 5시간동안 발효하여, 발효물을 수득하였다. 다음으로, d) 발효된 발효물이 더 이상 발효 되지 않도록, 원심분리하여, 발효 균주가 제거되도록 한 후, 상기 발효물을 증류수와 함께 초음파 추출기에 넣어, 20 내지 80 KHz를 가지는 파장과 200 내지 1,500 watt 출력을 갖는 초음파를 가하여 2차 추출물을 수득하였다.
<실시예 2, 3, 4>
실시예 2의 경우, 복합 추출물을 구성하는 추출재료로서, 얌빈 500g 및 배 500g을 사용하였다는 점, 실시의 3의 경우, 얌빈 300g 및 배 700g을 사용하였다는 점을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 제조하였다. 실시예 4의 경우, 복합 추출물을 구성하는 추출재료로서, 얌빈 600g, 배 200g, 소계 100g, 차요테 100g을 사용하였다는 점을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 제조하였다.
<실시예 5>
복합 추출물을 구성하는 추출 재료로서, 얌빈, 배, 소계, 차요테, 차조기 및 구장잎을 3~5% 염수로 1차 세척한 후, 입자크기가 40㎛ 이하인 기포가 60% 이상인 마이크로기포수로 2차 세척한 후, 5~10cm의 크기로 세절하고, 마이크로웨이브파를 이용하여, 50℃~70℃의 온도에서 5~10분간 건조하는 전처리 단계를 진행하였다. 그 다음, 전처리된 얌빈 600g, 배 200g, 소계 50g, 차요테 50g, 차조기 50g 및 구장잎 50g을 정확히 측정한 후, 정제수 1000g을 첨가하여 100~120℃의 온도에서 2시간 동안 열수 추출한 후, 감압 농축하여, 1차 추출물을 수득하였다. 이후, 1차 추출물을 증류수와 함께 초음파 추출기에 넣어, 20 내지 80 KHz를 가지는 파장과 200 내지 1,500 watt 출력을 갖는 초음파를 가하여 2차 추출물을 수득하였다.
<실시예 6>
복합 추출물을 구성하는 추출 재료로서, 얌빈, 배, 소계, 차요테, 차조기 및 구장잎을 3~5% 염수로 1차 세척한 후, 입자크기가 40㎛ 이하인 기포가 60% 이상인 마이크로기포수로 2차 세척한 후, 5~10cm의 크기로 세절하고, 마이크로웨이브파를 이용하여, 50℃~70℃의 온도에서 5~10분간 건조하는 전처리 단계를 진행하였다. 그 다음, 전처리된 얌빈 600g, 배 200g, 소계 50g, 차요테 50g, 차조기 50g 및 구장잎 50g을 정확히 측정한 후, 정제수 1000g을 첨가하여 100~120℃의 온도에서 2시간 동안 열수 추출한 후, 감압 농축하여, 추출물을 수득하였다.
<실시예 7>
복합 추출물을 구성하는 추출 재료로서, 얌빈, 배, 소계, 차요테, 차조기 및 구장잎을 3~5% 염수로 1차 세척한 후, 입자크기가 40㎛ 이하인 기포가 60% 이상인 마이크로기포수로 2차 세척한 후, 5~10cm의 크기로 세절하고, 마이크로웨이브파를 이용하여, 50℃~70℃의 온도에서 5~10분간 건조하는 전처리 단계를 진행하였다. 그 다음, 전처리된 얌빈 600g, 배 200g, 소계 50g, 차요테 50g, 차조기 50g 및 구장잎 50g을 정확히 측정한 후, 정제수 1000g과 함께 초음파 추출기에 넣어, 20 내지 80 KHz를 가지는 파장과 200 내지 1,500 watt 출력을 갖는 초음파를 가하여 추출물을 수득하였다.
<실시예 8-15>
a) 복합 추출물을 구성하는 추출 재료로서, 얌빈, 배, 소계, 차요테, 차조기 및 구장잎을 3~5% 염수로 1차 세척한 후, 입자크기가 40㎛ 이하인 기포가 60% 이상인 마이크로기포수로 2차 세척하였고, 5~10cm의 크기로 세절하고, 마이크로웨이브파를 이용하여, 50℃~70℃의 온도에서 5~10분간 건조하는 전처리 단계를 진행하였다. 그 다음, b) 전처리된 얌빈 600g, 배 200g, 소계 50g, 차요테 50g, 차조기 50g 및 구장잎 50g을 정확히 측정한 후, 정제수 1000g을 첨가하여 100~120℃의 온도에서 2시간 동안 열수 추출한 후, 감압 농축하여, 1차 추출물을 수득하였다. 이후, c) 상기 1차 추출물에 발효 균주(실시예8: 락토바실러스불가리쿠스, 실시예9: 락토바실러스 브레비스, 실시예10: 락토바실러스 카제이, 실시예11: 락토바실러스 커바투스, 실시예12: 락토바실러스 파라카세이, 실시예13: 락토바실러스 플란타룸, 실시예14: 비티도박테리움 브레베, 실시예15: 비티도박테리움 롱검)를 가한 후, 30~45℃에서 5시간동안 발효하여, 발효물을 수득하였다. 다음으로, d) 발효된 발효물이 더 이상 발효 되지 않도록, 원심분리하여, 발효 균주가 제거되도록 한 후, 상기 발효물을 증류수와 함께 초음파 추출기에 넣어, 20 내지 80 KHz를 가지는 파장과 200 내지 1,500 watt 출력을 갖는 초음파를 가하여 2차 추출물을 수득하였다.
<실시예 16>
a) 복합 추출물을 구성하는 추출 재료로서, 얌빈, 배, 소계, 차요테, 차조기 및 구장잎을 3~5% 염수로 1차 세척한 후, 입자크기가 40㎛ 이하인 기포가 60% 이상인 마이크로기포수로 2차 세척하였고, 5~10cm의 크기로 세절하고, 마이크로웨이브파를 이용하여, 50℃~70℃의 온도에서 5~10분간 건조하는 전처리 단계를 진행하였다. 그 다음, 전처리된 얌빈 600g, 배 200g, 소계 50g, 차요테 50g, 차조기 50g 및 구장잎 50g을 정확히 측정한 후, b) 발효 균주(락토바실러스불가리쿠스)를 가해, 30~45℃에서 5시간동안 발효하여, 발효물을 수득하였다. 다음으로, c) 발효된 발효물이 더 이상 발효 되지 않도록, 원심분리하여, 발효 균주가 제거되도록 한 후, 상기 발효물을 증류수와 함께 초음파 추출기에 넣어, 20 내지 80 KHz를 가지는 파장과 200 내지 1,500 watt 출력을 갖는 초음파를 가하여 추출물을 수득하였다.
<실시예 17>
복합 추출물을 구성하는 추출 재료로서, 얌빈, 배, 소계, 차요테, 차조기 및 구장잎을 3~5% 염수로 1차 세척한 후, 입자크기가 40㎛ 이하인 기포가 60% 이상인 마이크로기포수로 2차 세척하였고, 5~10cm의 크기로 세절하고, 마이크로웨이브파를 이용하여, 50℃~70℃의 온도에서 5~10분간 건조하는 전처리 단계를 진행하였다. 그 다음, 전처리된 얌빈 600g, 배 200g, 소계 50g, 차요테 50g, 차조기 50g 및 구장잎 50g을 정확히 측정한 후, 발효 균주(락토바실러스불가리쿠스)를 가해, 30~45℃에서 5시간동안 발효하여, 발효물을 수득하였다. 다음으로, 발효된 발효물이 더 이상 발효 되지 않도록, 원심분리하여, 발효 균주가 제거되도록 한 후, 상기 발효물에 정제수 1000g을 첨가하여 100~120℃의 온도에서 2시간 동안 열수 추출한 후, 감압 농축하여, 추출물을 수득하였다.
삭제
하기와 같이 비교예를 제조하였다.
구분 | 성분 | 주성분 발효여부 | 추출법 |
비교예1 | 얌빈 추출물 | YES (락토바실러스불가리쿠스) |
열수 추출+ 초음파 추출 |
비교예2 | 배 추출물 | YES (락토바실러스불가리쿠스) |
열수 추출+ 초음파 추출 |
<비교예 1>
a) 얌빈을 3~5% 염수로 1차 세척한 후, 입자크기가 40㎛ 이하인 기포가 60% 이상인 마이크로기포수로 2차 세척하였고, 5~10cm의 크기로 세절하고, 마이크로웨이브파를 이용하여, 50℃~70℃의 온도에서 5~10분간 건조하는 전처리 단계를 진행하였다. 그 다음, b) 전처리된 얌빈 1000g을 정확히 측정한 후, 정제수 1000g을 첨가하여 100~120℃의 온도에서 2시간 동안 열수 추출한 후, 감압 농축하여, 1차 추출물을 수득하였다. 이후, c) 상기 1차 추출물에 발효 균주(락토바실러스불가리쿠스)를 가한 후, 30~45℃에서 5시간동안 발효하여, 발효물을 수득하였다. 다음으로, d) 발효된 발효물이 더 이상 발효 되지 않도록, 원심분리하여, 발효 균주가 제거되도록 한 후, 상기 발효물을 증류수와 함께 초음파 추출기에 넣어, 20 내지 80 KHz를 가지는 파장과 200 내지 1,500 watt 출력을 갖는 초음파를 가하여 2차 추출물을 수득하였다.
<비교예 2>
a) 배 3~5% 염수로 1차 세척한 후, 입자크기가 40㎛ 이하인 기포가 60% 이상인 마이크로기포수로 2차 세척하였고, 5~10cm의 크기로 세절하고, 마이크로웨이브파를 이용하여, 50℃~70℃의 온도에서 5~10분간 건조하는 전처리 단계를 진행하였다. 그 다음, b) 전처리된 배 1000g을 정확히 측정한 후, 정제수 1000g을 첨가하여 100~120℃의 온도에서 2시간 동안 열수 추출한 후, 감압 농축하여, 1차 추출물을 수득하였다. 이후, c) 상기 1차 추출물에 발효 균주(락토바실러스불가리쿠스)를 가한 후, 30~45℃에서 5시간동안 발효하여, 발효물을 수득하였다. 다음으로, d) 발효된 발효물이 더 이상 발효 되지 않도록, 원심분리하여, 발효 균주가 제거되도록 한 후, 상기 발효물을 증류수와 함께 초음파 추출기에 넣어, 20 내지 80 KHz를 가지는 파장과 200 내지 1,500 watt 출력을 갖는 초음파를 가하여 2차 추출물을 수득하였다.
■실험예
실험예1: 항산화 활성 평가
1) 실험방법
실시예 1 내지 17에서 제조한 복합 추출물과 비교예 1, 비교예 2의 항산화 효능을 DPPH 시험법을 이용하여 측정하였다. 먼저, 빛을 파단한 상태에서 DPPH(1,1-diphenyl-2-2hydrazyl)를 0.1 mM 농도가 되도록 methanol에 녹여 DPPH(1,1-diphenyl-2-2hydrazyl) 시약을 준비하였다.
이후, DPPH(1,1-diphenyl-2-2hydrazyl) 시약에 제조예 4에서 제조한 복합 추출물을 각각 100 ㎍/㎖의 농도로 첨가하고 빛을 차단한 조건에서 30분 동안 반응시킨 후, 마이크로플레이트 판독기(Microplate reader)를 이용하여 517 ㎚의 파장에서 흡광도를 측정하였다. 한편, 양성 대조군으로 DPPH(1,1-diphenyl-2-2hydrazyl) 시약에 아스코르브산(Ascorbic acid)을 100 ㎍/㎖의 농도로 첨가하였다. 이후, Blois(Blois, 1958)의 방법에. 준하여, DPPH 라디칼 소거능(DPPH radical scavenging activity, %)을 산출하였다.
2) 실험결과
그 결과를 도 1과 하기의 표에 나타내었다.
구분 | DPPH 라디칼 소거활성(%) |
실시예1 | 44 |
실시예2 | 39 |
실시예3 | 37 |
실시예4 | 50 |
실시예5 | 66 |
실시예6 | 60 |
실시예7 | 63 |
실시예8 | 89 |
실시예9 | 79 |
실시예10 | 79 |
실시예11 | 80 |
실시예12 | 73 |
실시예13 | 75 |
실시예14 | 69 |
실시예15 | 70 |
실시예16 | 81 |
실시예17 | 79 |
비교예1 | 20 |
비교예2 | 14 |
실험예2: ABTS 양이온 라디칼 소거능(cation radical scavenging activity) 측정
1) 실험방법
상기 방법에 따라 실시예 1 내지 17, 비교예 1, 비교예 2의 방법으로 제조된 시료를 1 ㎎/㎖로 조제한 후, ABTS 라디칼 소거활성을 이용해 항산화 효능를 측정하였다. ABTS 라디칼을 이용한 항산화력 측정은 7 mM ABTS와 2.45 mM Potassium persulfate를 DW에 녹인 다음 12시간 동안 차광하여 보관하였다. 이 반응액을 415 nm에서 에탄올을 이용하여 흡광도 0.70±02로 보정하였다. ABTS 95 μL에 실시예 1 내지 17, 비교예 1, 비교예 2의 시료를 첨가하여 15분 반응 후, 732 nm에서 흡광도를 측정하여 ABTS 라디칼 소거능을 계산하여 산출하였다.
2) 실험결과
그 결과를 도2와 하기의 표에 나타내었다.
구분 | ABTS 라디칼 소거능(%) |
실시예1 | 49 |
실시예2 | 44 |
실시예3 | 42 |
실시예4 | 55 |
실시예5 | 71 |
실시예6 | 65 |
실시예7 | 68 |
실시예8 | 93 |
실시예9 | 84 |
실시예10 | 84 |
실시예11 | 85 |
실시예12 | 78 |
실시예13 | 80 |
실시예14 | 74 |
실시예15 | 75 |
실시예16 | 86 |
실시예17 | 84 |
비교예1 | 25 |
비교예2 | 19 |
실험예3: 폴리페놀 함량 측정
1) 실험방법
폴린-데니스(Folin-Denis) 방법에 따라 분석하였다. 실시예 1 내지 17, 비교예 1, 비교예 2의 방법으로 제조된 시료를 1 ㎎/㎖로 조제한 후, 이 시료액 1 ㎖에 증류수 3 ㎖를 넣고 Folin &Ciocalteu's phenolreagent 1 ㎖를 첨가한 후 27℃ 쉐이킹배스(Shaking bath)에서 혼합하였다. 5분 후 NaCO3포화용액 1 ㎖를 넣고혼합하여 실온에서 1시간 방치한 후 765 nm에서 분광광도계(UV-1650PC, SHIMADZU)로 흡광도를 측정하였다. 폴리페놀 함량은 카테킨(catechin), 탄닌산(tannic acid), 클로로겐산(chlorogenic acid)의 농도를 이용하여 검량선을 작성한 다음 정량하였다.
2) 실험결과
총 폴리페놀 함량의 결과를 도3과 하기의 표에 나타내었다.
구분 | 폴리페놀 함량(㎍/mg)_ |
실시예1 | 152.6 |
실시예2 | 134.5 |
실시예3 | 100.4 |
실시예4 | 160.5 |
실시예5 | 195.4 |
실시예6 | 173.5 |
실시예7 | 180.4 |
실시예8 | 330.2 |
실시예9 | 254.2 |
실시예10 | 255.3 |
실시예11 | 280.4 |
실시예12 | 230.4 |
실시예13 | 244.9 |
실시예14 | 229.4 |
실시예15 | 224.8 |
실시예16 | 290.3 |
실시예17 | 253.2 |
비교예1 | 78.4 |
비교예2 | 47.5 |
실험예4: 플라보노이드 함량 측정
1) 실험방법
실시예 1 내지 17, 비교예 1, 비교예 2의 방법으로 제조된 시료의 총 플라보노이드 함량 측정은 각 시료 0.1 g에 75% 메탄올을 가하여 실온에서 하룻밤 동안 추출한 다음 이 검액 1.0 ㎖를 시험관에 취하고 10㎖의 디에틸렌 글리콜(diethylen glycol)을 가하여 잘 혼합하였다. 다시 여기에 1N NaOH 0.1 ㎖를 잘 혼합시켜 37℃의 항온수조(water bath)에서 1시간 동안 반응시킨 후 415 nm에서 흡광도를 측정하였다. 공시험은 시료 용액 대신 50% 메탄올 용액을 동일하게 처리하였으며, 표준곡선은 나린진(Sigma co., USA)을 이용하여 작성하고 이로부터 총 플라보노이드 함량을 구하였다.
2) 실험결과
실시예 1 내지 17, 비교예 1, 비교예 2의 방법으로 제조된 시료의 총 플라보노이드 함량을 도4와 하기 표에 나타내었다.
구분 | 플라보노이드 함량(㎍/mg) |
실시예1 | 172.6 |
실시예2 | 154.2 |
실시예3 | 120.4 |
실시예4 | 184.6 |
실시예5 | 215.5 |
실시예6 | 194.3 |
실시예7 | 200.4 |
실시예8 | 354.2 |
실시예9 | 276.4 |
실시예10 | 275.3 |
실시예11 | 300.5 |
실시예12 | 250.4 |
실시예13 | 264.9 |
실시예14 | 231.6 |
실시예15 | 244.7 |
실시예16 | 310.4 |
실시예17 | 274.5 |
비교예1 | 98.4 |
비교예2 | 65.5 |
실험예5: 항당뇨 활성
1) 실험방법
실시예 1 내지 17, 비교예 1, 비교예 2의 방법으로 제조된 시료의 항당뇨 활성을 α-glucosidase 저해 활성 및 β-amylase 저해 활성으로 평가하였다.
먼저, α-glucosidase 저해활성은 pNPG(p-nitrophenol glucoside; Sigma Co., USA)를 이용하여 평가하였으며, 시료 2.5μl와 50mM Sodium acetate buffer(pH 5.6)로 희석한 α-glucosidase(0.25U/ml) 25μl를 혼합하여 37℃에서 10분간 1차 반응하고, 1mM pNPG 용액 25μl를 가하여 60℃에서 10분간 2차 반응하였다. 이후, 1M NaOH25μl를 가하여 반응을 정지시키고, 405nm에서 흡광도를 측정하여 저해율을 계산하였다
(1) 저해율 (%) = [1-(시료 첨가구 효소활성/대조구 첨가구 효소활성)] x 100
한편, β-amylase(4-alpha-D-glucan maltohydrolase) 저해활성은 시료 2.5μL와 50mM phosphate buffer(pH6.8)로 희석한 β-amylase(0.25U/mL) 25μL를 혼합하여 37℃에서 10분간 1차 반응한 후, 0.5% soluble starch(Samchun Chemicals Co., Korea) 25μL를 가하여 37℃에서 10분간 2차 반응한 후 100℃에서 5분간 가열하여 반응을 정지시켰으며, 반응액에 150μL의 DNS(3,5-dinitrosalicylic acid, Sigma Co., st. Louis, USA)용액을 가하여 100℃에서 5분간 가열하여 발색한 후 상온에서 방냉하였다. 발색액은 540nm에서 흡광도를 측정하여 저해율을 계산하였다.
(2) 저해율 (%) = [1-(시료 첨가구 효소활성/대조구 첨가구 효소활성)] x 100
2) 실험결과
실시예 1 내지 17, 비교예 1, 비교예 2의 방법으로 제조된 시료의 α-glucosidase 저해 활성 및 β-amylase 저해 활성을 하기의 표에 나타내었다.
구분(mg/ml) | α-glucosidase 저해율(%) | β-amylase 저해율(%) |
실시예1(0.5) | 24.8±1.0 | 21.8±1.0 |
실시예2(0.5) | 21.6±2.1 | 18.6±2.1 |
실시예3(0.5) | 19.5±3.2 | 16.5±4.5 |
실시예4(0.5) | 29.8±3.5 | 26.8±4.8 |
실시예5(0.5) | 35.8±1.0 | 32.8±2.3 |
실시예6(0.5) | 32.8±0.5 | 29.8±1.5 |
실시예7(0.5) | 33.8±2.1 | 30.8±3.6 |
실시예8(0.5) | 45.8±4.1 | 42.8±3.4 |
실시예9(0.5) | 39.4±4.5 | 36.4±1.3 |
실시예10(0.5) | 39.7±3.2 | 36.7±2.1 |
실시예11(0.5) | 40.3±4.4 | 37.3±1.3 |
실시예12(0.5) | 37.3±1.0 | 34.3±2.0 |
실시예13(0.5) | 38.1±4.3 | 35.1±2.1 |
실시예14(0.5) | 36.9±1.2 | 33.9±2.2 |
실시예15(0.5) | 36.2±1.0 | 33.2±0.1 |
실시예16(0.5) | 41.5±2.3 | 38.5±2.5 |
실시예17(0.5) | 39.5±1.5 | 36.5±1.5 |
비교예1(0.5) | 5.5±4.5 | 2.5±4.4 |
비교예2(0.5) | 1.3±1.5 | 0.3±1.4 |
실험예6: 이눌린 함량 측정
1) 실험방법
실시예 1 내지 17, 비교예 1, 비교예 2의 방법으로 제조된 시료를 동일한 양으로 분주한 후, 이눌린 함량을 측정하였다. 상기 이눌린은 체내 혈당을 낮춰주게 되어, 이눌린 함량이 높을수록 항당뇨 효과가 있는 것으로 판단할 수 있다. 본 실험에서 이눌린 함량은 abcam사의 ab241026 Inulin assay kit를 활용하여 측정하였으며 sample 50uL에 10uL enzyme mix를 넣고 45도에서 30 min 동안 반응시켰다. 이후, 50ul reaction mix를 첨가한뒤 30도 30min으로 반응한 뒤 15ul sigmal enhancer를 넣고 fluorescence in endpoint mode (Ex/Em: 535/587 nm)에서 측정하였다.
2) 실험결과
구분 | 이눌린 함량 (㎍/mg) |
실시예1 | 304.42±18.12 |
실시예2 | 174.58±23.54 |
실시예3 | 255.97±14.13 |
실시예4 | 350.12±15.14 |
실시예5 | 420.47±21.22 |
실시예6 | 405.10±16.02 |
실시예7 | 415.50±34.15 |
실시예8 | 851.50±28.27 |
실시예9 | 505.42±12.15 |
실시예10 | 526.12±18.24 |
실시예11 | 570.12±44.32 |
실시예12 | 462.15±15.11 |
실시예13 | 490.57±10.21 |
실시예14 | 432.12±12.13 |
실시예15 | 441.11±21.13 |
실시예16 | 590.15±13.11 |
실시예17 | 519.12±15.14 |
비교예1 | 28.15±41.12 |
비교예2 | 0.25±15.25 |
10: 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함하는 항산화 활성이 증진된 복합 추출물을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 조성물
Claims (8)
- 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함하는 항산화 활성이 증진된 복합 추출물을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 조성물에 있어서,
상기 복합 추출물은 발효 균주에 의해 발효된 후 추출된 발효 추출물이며,
상기 복합 추출물은 얌빈 추출물 40~70중량%, 배 추출물 10~30중량%. 소계 추출물 1~10중량%, 차요테 추출물 1~10중량%, 차조기 추출물 1~10중량% 및 구장잎 추출물 1~10중량%를 포함하여 구성되는 것을 특징으로 하는 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함하는 항산화 활성이 증진된 복합 추출물을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 조성물. - 삭제
- 제 1항에 있어서,
상기 발효 균주는 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 커바투스(Lactobacillus curvatus), 락토바실러스불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스 파라카세이(Lactobacillus paracasei), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 비피도박테리움 브레베(Bifidobacterium breve), 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)으로 이루어지는 군에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함하는 항산화 활성이 증진된 복합 추출물을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 조성물. - 삭제
- 삭제
- 제 1항 또는 제 3항에 있어서,
상기 항당뇨 조성물은 약학적 조성물인 것을 특징으로 하는 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함하는 항산화 활성이 증진된 복합 추출물을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 조성물. - 제 1항 또는 제 3항에 있어서,
상기 항당뇨 조성물은 건강 기능 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함하는 항산화 활성이 증진된 복합 추출물을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 조성물. - a) 복합 추출물을 구성하는 추출 재료로서, 얌빈, 배, 소계, 차요테, 차조기 및 구장잎을 세척한 후, 세절 및 건조하는 전처리 단계;
b) 전처리된 추출 재료를 열수 추출한 후, 얌빈 추출물 40~70중량%, 배 추출물 10~30중량%에 소계 추출물 1~10중량%, 차요테 추출물 1~10중량%, 차조기 추출물 1~10중량% 및 구장잎 추출물 1~10중량%가 포함되게 감압농축하여 1차 복합 추출물을 수득하는 단계;
c) 상기 1차 복합 추출물에 발효 균주를 가한 후, 2~10시간 동안 발효하여 발효물을 수득하는 단계;
d) 상기 발효물을 원심분리한 후, 초음파 추출법을 이용하여 2차 복합 추출물을 수득하는 단계;를 포함하여 추출된 것을 특징으로 하는 얌빈 추출물과 배 추출물을 포함하는 항산화 활성이 증진된 복합 추출물의 제조방법.
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