KR102640765B1 - 스컬캅플라본 ii 또는 이의 유도체를 함유하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

스컬캅플라본 ii 또는 이의 유도체를 함유하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 화학식 1로 표시되는 스컬캅플라본 Ⅱ의 유도체를 함유하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 조성물의 유효성분인 스컬캅플라본 Ⅱ는 시험관내 및 생체내 실험에서 아토피 피부염에 대한 뛰어난 염증 억제 효과 및 가려움증 개선 효과를 나타내므로, 종래의 치료제들을 대체하거나 이와 병용이 가능한 아토피 피부염의 예방 또는 치료제로서 유용하게 사용될 수 있다.
[화학식 1]

상기에서, R1 내지 R4는 명세서에서 정의된 것과 같다.

Description

스컬캅플라본 II 또는 이의 유도체를 함유하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 조성물{Composition for Prevention or Treatment of Atopic Dermatitis Comprising Skullcapflavone II or Derivatives Thereof}
본 발명은 스컬캅플라본(skullcapflavone) Ⅱ 또는 이의 유도체를 유효성분으로 함유하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
아토피 피부염은 유아 및 어린이에게 높은 빈도(전 인구의 0.5%, 어린이 경우 5∼10%)로 나타나는 피부염증 질환으로서, 유전적 요소와 면역계 이상에 의한 발병도 주요 원인이지만, 현대사회에서는 외부로부터 침입한 균에 의한 감염, 정서적 요인 및 환경적 요인 등이 더욱 문제가 되고 있다. 특히 재발성의 만성 피부질환으로서 최근에는 청소년 이후 성인에 이르기까지 많은 사람들이 고통을 겪고 있는 질환이다. 일반적으로 건조한 피부와 아토피성 염증질환은 피부 각질의 손상을 야기함으로써 피부의 고유한 보호기능을 손상시키고, 손상된 피부는 쉽게 균에 감염되기 때문에 아토피 증상이 악화되게 된다.
현재 아토피 피부염에 대한 치료제로는 국소 스테로이드제, 면역억제제, 항히스타민제 및 세균감염을 예방하기 위한 항생제 연고 등이 사용되고 있으나, 이들 약물들은 다양한 부작용이 보고되어 있을 뿐만 아니라, 아토피 피부염에 대한 근본적인 치료제는 아니므로 이들을 지속적으로 적용하기가 곤란하다. 예컨대, 현재 가장 널리 사용 중인 아토피 피부염 치료제들인 스테로이드제는 치료 효과는 뛰어나나 장기간 사용시 부작용이 발생하게 되는 단점이 있고, 칼시뉴린 억제제는 부작용은 적은 편이나 치료 효과가 적으며, 가려움증에 대해서는 효과가 별로 없다. 최근 새로 출시되고 있는 항체 치료제 등은 효과는 뛰어난 편이고 부작용도 적지만, 항체 치료제의 특성상 비용이 매우 비싸다는 단점이 있다.
특히, 아토피 피부염은 만성 피부 질환이기 때문에 스테로이드제를 장기간 및 고용량 사용할 경우 다양한 부작용이 나타날 수 있고, 사용하면 할수록 내성이 생겨 그 효과가 떨어지게 되며, 고용량으로 사용하게 됨으로써 감염에 대한 감수성이 증가하여 흔히 보기 힘든 심각한 감염증을 일으킬 수도 있다. 예를 들어, 스테로이드제는 당뇨, 백내장, 고혈압을 악화시키고, 혈액 내 콜레스테롤과 중성지방의 수치를 증가시키며, 어린이에 있어서는 성장을 억제하고 6개월 이상 복용시 어른이 되었을 때의 키가 줄어들기도 한다. 또한, 고관절, 견관절, 슬관절, 기타 다른 관절에서 뼈의 무혈관성 괴사를 일으킬 수 있으며, 위장관으로부터 칼슘의 흡수를 억제함으로써 뼈를 약화시켜 부러지기 쉽게 하고, 골다공증을 일으키기도 한다.
이와 같이, 종래 아토피 피부염에 대한 치료제는 모두 증상을 완화시키는 것에 초점을 맞추고 있으며, 근본적인 치료를 위한 접근방식의 치료제는 현재로서는 없는 상황이다. 이에, 종래 치료제들이 가진 단점을 극복하고자 여러 시도들이 이루어지고 있지만, 주로 현행 치료법의 한계를 극복하기 위한 대체 치료법들로서, 아토피 피부염을 포함하는 피부질환을 근본적으로 해결할 수 있는 치료제의 개발은 미미한 실정이다.
한편, 네오바이칼레인(neobaicalein)으로도 불리는 스컬캅플라본 Ⅱ는 폴리페놀 구조를 가진 자연 발생적인 플라보노이드 화합물이다. 종래 스컬캅플라본 Ⅱ는 피부 노화, 섬유증, 종양, 심장비대, 또는 관상동맥 질환과 같은 MMP 고발현을 원인으로 하는 질환, 천식, 성장기 발육부진, 골절, 과도한 파골세포의 골 흡수에 의한 골다공증, 류마티스성 관절염, 치주질환, 파제트병, 또는 전이성 골암과 같은 골 질환, 알레르기성 비염 등에 효과적임이 공개되어 있으나, 아토피 피부염과의 연관성에 대해서는 알려져 있지 않다.
이에, 본 발명자들은 스컬캅플라본 Ⅱ가 종래 치료제들과는 상이한 작용 기전을 갖고 있어 아토피 피부염의 예방 또는 치료에 효과적이고, 특히 가려움증의 완화에도 뛰어난 효능을 갖고 있어서, 아토피 피부염에 대한 획기적인 예방 또는 치료 효과를 얻을 수 있음을 밝힘으로써 본 발명을 완성하였다.
대한민국 공개특허공보 제10-2016-0109019호 대한민국 공개특허공보 제10-2020-0128266호 대한민국 공개특허공보 제10-2013-0120849호 대한민국 등록특허공보 제10-1765141호
본 발명의 목적은 아토피 피부염의 예방 또는 치료에 사용될 수 있는 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체를 함유하는 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 화학식 1로 표시되는 스컬캅플라본 Ⅱ의 유도체를 함유하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
[화학식 1]
상기에서, R1 내지 R4는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C4 알킬이다.
한 구현예에서, 상기 R1 내지 R4가 메틸인 화학식 2로 표시되는 스컬캅플라본 Ⅱ인 것이 바람직하지만 이에 한정되는 것은 아니다:
[화학식 2]
한 구현예에서, 상기 스컬캅플라본 Ⅱ의 유도체는 염증 관련 인자, 예컨대 TARC(Thymus and Activation Regulated Chemokine, CCL17), MDC(Macrophage-derived Chemokine, CCL22), CTSS(Cathepsin S), TSLP(Thymic Stromal Lymphopoietin), IL(Interleukin)-4, IL-5, IL-6, IL-10, 또는 TNF(Tumor Necrosis Factor)-α 단백질 또는 유전자 발현을 억제할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
다른 구현예에서, 상기 스컬캅플라본 Ⅱ의 유도체는 STAT1, p65, 또는 p38 단백질의 인산화를 억제할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
다른 구현예에서, 상기 스컬캅플라본 Ⅱ의 유도체는 염증 세포의 침윤을 억제할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 바람직한 구현예에서, 상기 염증 세포는 호염기구 또는 호중구일 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
한 구현예에서, 본 발명의 약학적 조성물은 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 외용제, 좌제, 멸균 주사용액, 등의 제형을 가질 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
또한, 본 발명은 화학식 1로 표시되는 스컬캅플라본 Ⅱ의 유도체를 함유하는 아토피 피부염의 개선용 건강식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 화학식 1로 표시되는 스컬캅플라본 Ⅱ의 유도체를 함유하는 아토피 피부염의 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
한 구현예에서, 상기 화장료 주성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 젤, 마스크, 팩, 분말, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 스프레이, 등의 제형을 가질 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
또한, 본 발명은 화학식 1로 표시되는 스컬캅플라본 Ⅱ의 유도체를 함유하는 조성물을 개체에게 투여하는 단계를 포함하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료 방법을 제공한다.
한 구현예에서, 상기 개체는 인간을 포함하는 포유동물일 수 있으나, 경우에 따라 인간을 제외한 포유동물에도 비제한적으로 적용될 수 있다.
본 발명의 조성물의 유효성분인 스컬캅플라본 Ⅱ는 시험관내 및 생체내 실험에서 아토피 피부염에 대한 뛰어난 염증 억제 효과 및 가려움증 개선 효과를 나타내므로, 종래의 치료제들을 대체하거나 이와 병용이 가능한 아토피 피부염 또는 가려움증을 나타내는 다른 피부과 질환들의 예방 또는 치료제로서 유용하게 사용될 수 있다.
다만, 본 발명의 효과는 상기에서 언급한 효과로 제한되지 아니하며, 언급되지 않은 또 다른 효과들은 하기의 기재로부터 당업자에게 명확히 이해될 수 있을 것이다.
도 1은 스컬캅플라본 Ⅱ(SFII) 처리에 의한 HaCaT 세포에서의 IFNγ 및 TNFα의 처리에 의한 TARC, MDC 및 CTSS의 단백질 발현 유도 억제 효과를 보여주는 그래프 및 전기영동 사진이다.
도 2는 SFII 처리에 의한 HaCaT 세포에서의 IFNγ 및 TNFα의 처리에 의한 TARC, MDC, CTSS, 및 IL-6의 mRNA 발현 유도 억제 효과를 보여주는 그래프이다.
도 3은 SFII 처리에 의한 HaCaT 세포에서의 IFNγ 및 TNFα의 처리에 의한 STAT1, p65, 및 p38의 인산화 유도 억제 효과를 보여주는 그래프 및 전기영동 사진이다.
도 4는 SFII 처리에 의한 일차 배양 각질형성 세포에서의 폴리 I:C의 처리에 의한 TSLP의 발현 유도 억제 효과를 보여주는 그래프이다.
도 5는 SFII 국소 도포에 의한 Balb/c 쥐에서의 MC903에 의해 유도된 아토피 피부염 유사 염증 반응의 억제 효과를 0.005% 덱사메타손 비교한 결과를 나타낸다.
도 6은 SFII 국소 도포에 의한 Balb/c 쥐에서의 MC903에 의해 유도된 아토피 피부염 유사 염증 반응의 억제 효과를 0.1% 히드로코르티손과 비교한 결과를 나타낸다.
도 7은 SFII 국소 도포에 의한 Balb/c 쥐에서의 MC903에 의해 유도된 아토피 피부염 유사 염증 반응의 억제 효과를 0.1% 히드로코르티손 및 0.1% 타크로리무스와 비교한 결과를 나타낸다.
도 8은 SFII 국소 도포에 의한 Balb/c 쥐에서의 MC903에 의해 유도된 아토피 피부염 유사 염증의 반응 억제 효과를 사이토카인 ELISA에 의해 분석한 결과를 보여주는 그래프이다.
도 9는 SFII 국소 도포에 의한 Balb/c 쥐에서의 MC903에 의해 유도된 아토피 피부염 유사 염증 반응의 억제 효과를 사이토카인 mRNA 발현에 의해 분석한 결과를 보여주는 그래프이다.
도 10은 SFII 국소 도포에 의한 Balb/c 쥐에서의 MC903에 의해 유도된 아토피 피부염 유사 염증 반응의 억제 효과를 염증 세포 침윤 마커 유전자 발현에 의해 분석한 결과를 보여주는 그래프이다.
도 11은 SFII 국소 도포에 의한 Balb/c 쥐에서의 MC903에 의해 유도된 아토피 피부염 유사 염증 반응의 억제 효과를 염증성 표피증식 인자의 mRNA 발현에 의해 분석한 결과를 보여주는 그래프이다.
도 12는 SFII 국소 도포에 의한 Balb/c 쥐에서의 MC903에 의해 유도된 아토피 피부염 유사 염증 반응의 억제 효과를 스크래치 행동(scratching behavior) 및 혈중 IgE 레벨에 의해 분석한 결과를 보여주는 그래프이다.
도 13은 SFII와 바이칼레인(baicalein, BE) 처리에 의한 HaCaT 세포에서의 IFNγ 및 TNFα의 처리에 의한 TARC, MDC 및 CTSS의 단백질 발현 유도 억제 효과를 비교한 결과를 보여주는 그래프 및 전기영동 사진이다.
도 14는 SFII 국소 도포에 의한 Balb/c 쥐에서의 MC903에 의해 유도된 아토피 피부염 유사 염증 반응의 억제 효과를 1.0% SFII, 0.72% 바이칼레인, 및 0.1% 히드로코르티손과 비교한 결과를 나타낸다.
도 15는 SFII 국소 도포에 의한 Balb/c 쥐에서의 MC903에 의해 유도된 아토피 피부염 유사 염증 반응의 억제 효과를 1.0% SFII, 0.72% 바이칼레인, 및 0.1% 히드로코르티손과 비교한 결과를 나타낸다.
도 16은 SFII 국소 도포에 의한 Balb/c 쥐에서의 MC903에 의해 유도된 아토피 피부염 유사 염증 반응의 억제 효과를 1.0% SFII, 0.72% 바이칼레인, 및 0.1% 히드로코르티손과 비교한 결과를 나타낸다.
도 17은 SFII 국소 도포에 의한 Balb/c 쥐에서의 MC903에 의해 유도된 아토피 피부염 유사 염증 반응의 억제 효과를 1.0% SFII, 0.72% 바이칼레인, 0.1% 히드로코르티손, 및 0,1% 타크로리무스와 비교한 실험의 결과를 요약한 것이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
1. 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체를 함유하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체를 함유하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
[화학식 1]
상기에서, R1 내지 R4는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C4 알킬이다.
본 발명에 있어서, 용어 '알킬'은 직쇄 또는 분쇄의 포화 탄화수소기를 의미하며, C1-C4 알킬은 탄소수 1 내지 4의 알킬 유닛을 갖는 알킬기를 의미하며, C1-C4 알킬이 치환된 경우 치환체의 탄소수는 포함되지 않은 것이다.
본 발명의 바람직한 구현예에서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 구체적으로 상기 R1 내지 R4가 C1 알킬, 즉 메틸인 화학식 2의 구조를 갖는 스컬캅플라본 Ⅱ일 수 있다.
[화학식 2]
본 발명에 있어서, '아토피 피부염'이란 용어는 그 발생의 직·간접적인 원인을 불문하고 본 기술분야에서 아토피 피부염으로 분류되는 모든 질환을 제한없이 포함하는 의미로 사용된다. 통상 아토피 피부염은 그 발병 시기 또는 그 발명 대상에 따라 유아형 아토피 피부염, 소아형 아토피 피부염, 성인형 아토피 피부염 및 임산부 아토피 피부염으로 분류되는데, 본 발명에서 아토피 피부염은 이러한 모든 유형의 아토피 피부염을 제한없이 포함하는 의미로 사용된다.
또한, '예방'이란 용어는 본 발명의 약학적 조성물의 투여로 인해 아토피 피부염의 발병을 억제 또는 지연시키거나 완화시키는 모든 과정을 나타내며, 질병의 발생을 차단하는 좁은 의미로 해석되어서는 안된다.
또한, '치료'란 용어는 본 발명의 약학적 조성물의 투여로 인해 아토피 피부염의 증세가 호전되거나 이롭게 되는 모든 과정을 나타내며, 해당 질환의 증상이 완전히 사라지는 좁은 의미로 해석되어서는 안된다.
한 구현예에서, 본 발명의 조성물의 유효성분인 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체는 염증 관련 인자, 예컨대 TARC, MDC, CTSS, TSLP, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, 또는 TNF-α 단백질 또는 유전자 발현을 억제할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
다른 구현예에서, 본 발명의 조성물의 유효성분인 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체는 STAT1, p65, 또는 p38 단백질의 인산화를 억제할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
다른 구현예에서, 본 발명의 조성물의 유효성분인 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체는 염증 세포의 침윤을 억제할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 바람직한 구현예에서, 상기 염증 세포는 호염기구 또는 호중구일 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
다른 구현예에서, 본 발명의 조성물의 유효성분인 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체는 피부병변 감소, 가려움증 개선 또는 아토피 피부염으로 인해 두꺼워진 피부두께의 감소 효과를 발휘할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 약학적 조성물은 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체 이외에도 본 발명이 목적으로 하는 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서, 바람직하게는 상기 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체의 효과에 상승 작용을 줄 수 있는 약학적으로 허용가능한 담체(carrier) 또는 첨가제 등을 추가로 포함할 수 있다. 예를 들어 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 또는 담체를 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 '약학적으로 허용가능한'의 의미는 유효성분의 활성을 억제하지 않으면서 적용(처방) 대상이 적응 가능한 이상의 독성을 지니지 않는다는 의미이다. 상기 '담체'는 세포 또는 조직 내로의 화합물의 부가를 용이하게 하는 화합물로서 정의된다.
상기 약학적 조성물의 투여 경로는 구강, 정맥내, 근육내, 동맥내, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 장관, 국소, 설하 또는 직장이 포함되고, 예컨대 도포에 의한 국부투여 방식으로 적용될 수 있다. 상기 비경구는 피하, 피내, 정맥내, 근육내, 병소내 주사 또는 주입기술을 포함한다.
본 발명의 바람직한 구현예에서, 본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여할 수 있다. 본 발명에 있어서, 상기 '약학적으로 유효한 양'은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 질병의 종류, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 본 기술분야의 통상의 기술자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 아토피 피부염의 예방 또는 치료를 목적으로 하는 개체이면 특별히 한정되지 않고, 어떠한 것이든 적용가능하다. 예를 들면, 본 발명의 약학적 조성물은 인간뿐만 아니라 원숭이, 개, 고양이, 토끼, 모르모트, 랫트, 마우스, 소, 양, 돼지, 염소 등과 같은 인간이 아닌 동물, 조류 및 어류 등 어느 것에 제한없이 사용가능하다.
본 발명의 약학적 조성물은 상기 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다. 상기 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
경구 투여를 위한 고형 제제에는 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 연질 캅셀제, 환 등이 포함된다. 산제는 본 발명의 유효 성분인 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체와 유당, 전분, 미결정셀룰로오스 등 약제학적으로 허용가능한 적당한 담체를 단순 혼합함으로써 제조될 수 있다. 과립제는 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체, 약학적으로 허용가능한 적당한 담체 및 폴리비닐피롤리돈, 하이드록시프로필셀룰로오스 등의 약학적으로 허용가능한 적당한 결합제를 혼합한 후, 물, 에탄올, 이소프로판올 등의 용매를 이용한 습식과립법 또는 압축력을 이용한 건식과립법을 이용하여 제조될 수 있다. 또한 정제는 상기 과립제를 마그네슘스테아레이트 등의 약학적으로 허용가능한 적당한 활택제와 혼합한 후, 타정기를 이용하여 타정함으로써 제조될 수 있다. 경구투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제로는 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 멸균된 수용액, 액제, 비수성용제, 현탁제, 에멀젼, 시럽, 좌제, 에어로졸 등의 외용제 및 멸균 주사제제의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 바람직하게는 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제의 피부 외용 약학적 조성물을 제조하여 사용할 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔, 마크로골, 트윈 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
상기 약학적 조성물은 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 보조제, 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 추가로 함유할 수 있으며, 통상적인 방법인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 따라 제형화할 수 있다.
상기 약학적 조성물의 투여량은 개체의 연령, 체중, 일반적인 건강, 성별, 투여시간, 투여 경로, 배출률, 약물 배합 및 특정 질환의 중증을 포함한 여러 요인에 따라 다양하게 변할 수 있다.
또한, 본 발명의 약학적 조성물은 단독으로, 또는 예컨대 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 종래의 방법들과 병용하여 사용할 수 있다. 또한 상기 약학적 조성물은 성인 기준으로 0.001 내지 200 ㎎/㎏ 범위 내의 투여량으로 투여될 수 있고, 상기 약학적 조성물이 외용제인 경우에는 0.001% 내지 10%의 유효성분을 함유하는 외용제를 성인기준으로 0.1 내지 5 ㎖/㎠의 양으로 1일 1회 내지 5회 도포하여 1개월 이상 계속하는 것이 바람직하나, 상기 투여량은 본 발명의 범위를 한정하는 것이 아니다.
상기 약학적 조성물을 단위 용량 형태로 제형화하는 경우, 유효성분으로서 본 발명의 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체는 약 0.01 내지 1,500 ㎎의 단위 용량으로 함유되는 것이 바람직하고, 성인 치료에 필요한 투여량은 투여의 빈도와 강도에 따라 하루에 약 1 내지 500 ㎎ 범위가 보통이나 이에 한정되는 것은 아니며, 일부 환자의 경우 더 높은 1일 투여량이 바람직할 수 있다.
2. 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체를 포함하는 아토피 피부염의 개선용 건강식품 조성물
본 발명의 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체를 포함하는 조성물이 건강식품 조성물로 이용되는 경우, 허용가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 건강식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서, 식품은 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 나타내는 것으로서, 구체적으로 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서, 각종 식품, 기능성 식품, 음료, 식품 첨가제 및 음료 첨가제를 모두 포함하는 의미로 사용된다. 상기 식품의 예로서 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 기능성 식품 등이 있다. 추가로, 본 발명의 식품에는 특수영양식품(예, 조제유류, 영유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예, 라면류, 국수류 등), 건강보조식품, 조미식품(예, 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예, 스넥류), 유가공품(예, 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예, 과실, 채소류 음료, 두유류, 발효음료류, 아이스크림류 등), 천연조미료(예, 라면 스프 등), 비타민 복합제, 알코올 음료, 주류 및 그 밖의 건강보조식품류를 포함하나 이에 한정되지 않는다. 상기 기능성 식품, 음료, 식품첨가제 또는 음료첨가제는 통상의 제조방법으로 제조될 수 있다.
본 발명에 있어서, '기능성 식품'이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체 방어 리듬 조절, 질병 방지와 회복 등에 관한 체내 조절 기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미하며, 구체적으로는 건강기능식품일 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 '건강기능식품'이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 나타낸다. 여기서 '기능'이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 본 기술분야에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조 시에는 본 기술분야에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 상기 건강기능식품의 제형 또한 건강기능식품으로 인정되는 제형이면 제한없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품용 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 본 발명의 건강기능식품은 피부 개선 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취가 가능하다.
또한, 상기 기능성 식품에는 식품학적으로 허용가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 기능성 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.
상기 건강기능식품은 본 발명의 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체 이외에 본 발명이 목적으로 하는 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서, 바람직하게는 상기 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체의 효과에 상승 작용을 줄 수 있는 다른 성분 등을 추가로 함유할 수 있다. 예를 들어 상기 유효성분 이외에 감미제, 풍미제, 생리활성 성분, 미네랄 등이 포함될 수 있다. 감미제는 식품이 적당한 단맛을 나게 하는 양으로 사용될 수 있으며, 천연의 것이거나 합성된 것일 수 있다. 구체적으로는 천연 감미제를 사용하는 경우인데, 천연 감미제로서는 옥수수 시럽 고형물, 꿀, 수크로오스, 프록토오스, 락토오스, 말토오스 등의 당 감미제를 들 수 있다. 풍미제는 맛이나 향을 개선하기 위해 사용될 수 있고, 천연의 것과 합성된 것 모두 사용될 수 있으나, 천연의 것을 사용하는 것이 바람직하다. 천연의 것을 사용할 경우에 풍미 이외에 영양 강화의 목적도 병행할 수 있다. 천연 풍미제로서는 사과, 레몬, 감귤, 포도, 딸기, 복숭아 등에서 얻어진 것이거나 녹차잎, 둥굴레, 대잎, 계피, 국화 잎, 자스민 등에서 얻어진 것일 수 있다. 또한, 인삼(홍삼), 죽순, 알로에 베라, 은행 등에서 얻어진 것을 사용할 수 있다. 천연 풍미제는 액상의 농축액이나 고형상의 추출물일 수 있다. 경우에 따라서 합성 풍미제가 사용될 수 있는데, 합성 풍미제는 에스테르, 알코올, 알데히드, 테르펜 등이 이용될 수 있다. 생리 활성 물질로서는 카테킨, 에피카테킨, 갈로카테킨, 에피갈로카테킨 등의 카테킨류나, 레티놀, 아스코르브산, 토코페롤, 칼시페롤, 티아민, 리보플라빈 등의 비타민류 등이 사용될 수 있다. 미네랄로서는 칼슘, 마그네슘, 크롬, 코발트, 구리, 불소화물, 게르마늄, 요오드, 철, 리튬, 마그네슘, 망간, 몰리브덴, 인, 칼륨, 셀레늄, 규소, 나트륨, 황, 바나듐, 아연 등이 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 식품 조성물은 상기 감미제 등 이외에도 필요에 따라 보존제, 유화제, 산미료, 점증제 등을 포함할 수 있다. 이러한 보존제, 유화제 등은 그것이 첨가되는 용도를 달성할 수 있는 한 극미량으로 첨가되어 사용되는 것이 바람직하다. 극미량이란 수치적으로 표현할 때 식품 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 약 0.0005 중량% 내지 약 0.5 중량% 범위를 의미한다. 사용될 수 있는 보존제로서는 나트륨 소르브산칼슘, 소르브산나트륨, 소르브산칼륨, 벤조산칼슘, 벤조산나트륨, 벤조산칼륨, EDTA(에틸렌디아민테트라아세트산) 등을 들 수 있다. 사용될 수 있는 유화제로서는 아카시아검, 카르복시메틸셀룰로스, 잔탄검, 펙틴 등을 들 수 있다. 사용될 수 있는 산미료로서는 연산, 말산, 푸마르산, 아디프산, 인산, 글루콘산, 타르타르산, 아스코르브산, 아세트산, 인산 등을 들 수 있다. 이러한 산미료는 맛을 증진시키는 목적 이외에 미생물의 증식을 억제할 목적으로 식품 조성물이 적정 산도로 되도록 첨가될 수 있다. 사용될 수 있는 점증제로서는 현탁화 구현제, 침강제, 겔형성제, 팽화제 등을 들 수 있다.
또한, 본 발명의 식품 조성물의 제조시에는 통상적으로 첨가되는 성분을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함한다. 상기 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올이다. 상기 향미제로는 천연 향미제 타우마틴, 스테비아 추출물 및 합성 향미제를 사용할 수 있다. 예컨대, 본 발명의 건강기능식품이 드링크제로 제조되는 경우에는 본 발명의 두충 추출물과 녹용 추출물 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 천연 추출액 등이 추가로 포함될 수 있다.
3. 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체를 포함하는 아토피 피부염의 개선용 화장료 조성물
본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 활용되는 경우, 상기 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 황산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 비제한적으로 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 본 기술분야에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액(무수 및 수계), 무수 생성물(오일 및 글리콜계), 유탁액, 페이스트, 젤, 마스크, 팩, 분말, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수(스킨), 영양 화장수(밀크로션), 영양 크림, 맛사지 크림, 에센스, 아이크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다. 이러한 경우, 상기 화장료 조성물의 접근성이 더욱 향상될 수 있으며, 보습 효과를 구현하여 아토피 피부염의 만성적인 재발을 예방할 수 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸타, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 하이드록사이드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타하이드록사이드, 벤토나이트, 아가 또는 트라가칸타 등이 이용될 수 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
상기 화장료 조성물이 비누 형태인 경우에는 첨가제로서 피부 보습제, 유화제, 경수연화제 등을 포함하여 제조될 수 있으며, 상기 비누의 기재로서는 야자유, 팜유, 대두유, 올리브유, 팜핵유, 호오바유 등의 식물유지나 우지, 돈지, 양지, 어유 등의 동물 유지가 사용될 수 있고, 보습제로서는 글리세린, 데티프리톨, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 헥실 글리콜, 이소프로필미리스테이트, 알로에베라, 솔비톨 등이 사용될 수 있으며, 유화제로서 천연오일, 왁스, 탄화수소류 등이 사용 가능하며, 경수 연화제로서는 테트라나트륨 이디티에이 등이 사용될 수 있으나 이에 한정되지 않는다.
상기 비누에는 첨가제로서 항균제, 거품억제제, 용매, 부식방지제, 향료, 색소, 금속이온 봉쇄제, 방부제 등을 추가적으로 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 사용될 경우, 상기 조성물 내의 상기 스컬캅플라본 Ⅱ 또는 이의 유도체는 30 μM 이상, 구체적으로는 35 μM 이상, 보다 구체적으로는 40 μM 이상의 농도로 포함될 수 있으나, 이는 화장료 조성물이 제조되는 형태에 따라 또 그것의 구체적인 적용 부위(얼굴이나 손)나 적용 용량에 따라 달라지는 것이므로 이에 한정되는 것은 아니다.
아토피 피부염의 발병 과정에서 각질형성 세포와 염증세포들에 의해 생산되는 염증인자들을 억제하면 아토피 피부염의 개선에 도움이 되며, 각질형성 세포에서 발현되는 TARC, MDC, TSLP, CTSS 등의 인자들이 염증세포들의 이동과 Th2 사이토카인의 생산을 촉진하고, Th2 염증 반응을 유발하여 아토피 피부염의 증상들을 일으키는데 관여하고, 또한 직간접적으로 신경을 자극하여 가려움증을 유발하는 데에도 관여하는 것으로 알려져 있다.
본 발명의 바람직한 구현예에서는 각질형성 세포주에서 IFNγ와 TNFα의 처리에 의해 유도되는 TARC, MDC, CTSS 등의 발현 증가가 스컬캅플라본 Ⅱ의 전처리에 의해 억제되는 효과를 관찰하였으며, 또한 일차 배양 각질형성 세포에서 폴리 I:C의 처리에 의해 유도되는 TSLP의 발현 증가가 스컬캅플라본 Ⅱ의 전처리에 의해 억제되는 효과를 관찰하였다(도 1 내지 도 4 참조).
또한, 본 발명의 다른 구현예에서는 아토피 피부염의 유사 염증 동물 모델에서 MC903에 의해 유도되는 아토피 피부염 유사 염증 반응의 억제 효과를 관찰한 결과, 귀 피부 두께 감소, 혈중 IgE 농도 감소, 호염기구 및 호중구 유도 감소, IL-4, IL-6, TSLP, TNFa, IL-10. IL-17a, S100A8 발현 감소를 나타내고, 특히 IgE 억제나 가려움증 억제 효과는 종래의 스테로이드 제제보다 더 나은 억제 효과를 나타냄을 확인하였다(도 5 내지 도 12 참조).
또한, 본 발명의 다른 구현예에서 스컬캅플라본 Ⅱ와 유사한 구조를 갖는 아토피 피부염의 개선 효과가 있는 것으로 알려져 있는 바이칼레인과의 효능을 비교한 결과, TARC, MDC, CTSS, TSLP, IL-4, IL-6, IL-10, TNF-α, 등과 같은 다양한 염증 인자들의 발현 억제 효과 실험에서 스컬캅플라본 Ⅱ가 바이칼레인에 비해 더 뛰어난 효능을 갖고 있음을 확인하였다(도 13 내지 도 17 참조).
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것이 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 스컬캅플라본 Ⅱ(SFII) 처리에 의한 염증 관련 단백질 발현 유도 억제 효과
SFII가 염증 관련 단백질 발현 유도를 억제할 수 있는지 여부를 확인하기 위하여, 피부 유래의 각질형성 세포주인 HaCaT 세포를 10% 우태아혈청(FBS)을 포함하는 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium) 배지에서 96-웰 또는 35 ㎜ 배양 접시에 가득 차도록 배양한 후, 24시간 동안 0% FBS-DMEM으로 절식(starvation)시켰다.
세포독성을 확인하는 LDH 분석법의 경우, 96-웰 배양 접시에서 세포의 배양 및 절식을 완료한 후, 신선한 0% FBS-DMEM 배지로 교환하면서 DMSO 또는 1-25 ㎍/㎖ 농도의 SFII를 처리하였고, 24시간 후에 배지를 회수하여 수용성 테트라졸졸륨 염(water soluble tetrazolium salt, WST)을 첨가하고 발색시킨 후, 450 nm 에서 흡광도를 측정하여 죽은 세포의 양을 평가하였다. DoGen사의 EZ-LDH 세포독성 분석 키트의 프로토콜에 따라 수행하였으며, 함께 배양한 시험 물질 미처리 대조군 세포를 전부 용해한 후 동일한 방법으로 동시에 발색하고, 이를 기준으로 죽은 세포의 비율을 계산하였다. 그 결과, 1-25 ㎍/㎖ 농도의 SFII는 HaCaT 세포에서 독성을 나타내지 않았다(도 1의 A).
다음으로, TARC, MDC, CTSS의 억제 효과를 확인하기 위하여, 35 ㎜ 배양 접시에서 세포의 배양 및 절식을 완료한 후, 신선한 0% FBS-DMEM 배지로 교환하면서 DMSO 또는 1-25 ㎍/㎖ 농도의 SFII를 30분간 전처리하였고, IFNγ(10 ng/㎖)와 TNFα(2 ng/㎖)를 처리한 후, 24시간 뒤에 배지와 용해물을 수집하였다. TARC와 MDC의 양은 DuoSet ELISA 키트(R&D Systems)를 이용하여 수집한 배지에서 측정하였고, CTSS의 경우 배지와 용해물에서 모두 웨스턴 블롯을 통해 CTSS의 양적 변화를 분석하였다. 그 결과, TARC, MDC, CTSS 모두 SFII의 전처리에 의해 1-25 ㎍/㎖의 농도 범위에서 농도의존적으로 그 발현이 억제됨을 확인하였다(도 1의 B 내지 D).
실시예 2. SFII 처리에 의한 염증 관련 유전자의 mRNA 발현 유도 억제 효과
SFII가 염증 관련 유전자의 mRNA 발현 유도를 억제할 수 있는지 여부를 확인하기 위하여, HaCaT 세포를 10% FBS를 포함하는 DMEM 배지에서 35 ㎜ 배양 접시에 가득 차도록 배양한 후, 24시간 동안 0% FBS-DMEM으로 절식시켰다.
TARC, MDC, CTSS, IL-6 유전자의 mRNA 억제 효과를 확인하기 위하여, 세포의 배양 및 절식을 완료한 후, 신선한 0% FBS-DMEM 배지로 교환하면서 DMSO 또는 1-25 ㎍/㎖ 농도의 SFII를 30분간 전처리하였고, IFNγ(10 ng/㎖)와 TNFα(2 ng/㎖)를 처리한 후, 24시간 뒤에 0.5 ㎖의 RNAiso 용액(Takara사)을 이용해 수집하였다. 제조사의 프로토콜에 따라 총 RNA를 분리한 후, 첫 번째 가닥 cDNA 합성 키트(Thermo Scientific사)를 이용하여 1 ㎍의 총 RNA를 cDNA로 합성하였다. AccuPower® 2X GreenStar™ qPCR 마스터 믹스(Bioneer사)에 20배 희석한 cDNA 2 ㎕를 혼합한 후, CFX96 기기(BioRad사)에서 95℃ 22초, 60℃ 60초의 반응 조건으로 각 유전자의 mRNA의 발현을 실시간 RT-PCR를 수행하였고, 비교(comparative) ΔΔCT 법으로 분석하였으며, 18S rRNA의 발현을 기준으로 보정하였다. 각 유전자에 대한 전방(forward) 및 후방(reverse) 프라이머 서열은 다음과 같다:
유전자 프라이머 염기서열 서열번호
TARC 전방 5'-TTG TAA CTG TGC AGG GCA GG-3' 1
후방 5'-TGA ACA CCA ACG GTG GAG GT-3' 2
MDC 전방 5'-GAA GCC TGT GCC AAC TCT CT-3' 3
후방 5'-GGG AAT CGC TGA TGG GAA CA-3' 4
CTSS 전방 5'-TGG GCT TTC AGT GCT GTG GG-3' 5
후방 5'-TCA ATG ATG TAC TGG AAA GC-3' 6
IL-6 전방 5'-GCA GAT GAG TAC AAA AGT CC-3' 7
후방 5'-GCA GAA TGA GAT GAG TTG TC-3' 8
18S rRNA 전방 5'-GTA ACC CGT TGA ACC CCA TT-3' 9
후방 5'-CCA TCC AAT CGG TAG TAG CG-3' 10
그 결과, TARC, MDC, CTSS, IL-6 유전자 모두 SFII의 전처리에 의해 1-25 ㎍/㎖의 농도 범위에서 농도의존적으로 억제되는 것을 확인하였다(도 2).
실시예 3. SFII 처리에 의한 STAT1, p65, 및 p38의 인산화 유도 억제 효과
SFII가 STAT1, p65, 및 p38의 인산화 유도를 억제할 수 있는지 여부를 확인하기 위하여, HaCaT 세포를 10% FBS를 포함하는 DMEM 배지에서 35 ㎜ 배양 접시에 가득 차도록 배양한 후, 24시간 동안 0% FBS-DMEM으로 절식시켰다.
STAT1, p65, 및 p38의 인산화 억제 효과를 확인하기 위하여, 세포의 배양 및 절식을 완료한 후, 신선한 0% FBS-DMEM 배지로 교환하면서 DMSO 또는 1-25 ㎍/㎖ 농도의 SFII를 30분간 전처리하였고, IFNγ(10 ng/㎖)와 TNFα(2 ng/㎖)를 처리한 후, 30분 뒤에 포스파타아제(phosphatase) 억제제가 포함된 1x SDS 용해 버퍼를 이용하여 수집하였다. 10분간 끓인 후, 동량의 샘플을 8% SDS-PAGE 겔에 각각 로딩하여 전기영동하였고, 니트로셀룰로오스 막으로 전달하였다. TBS-T 버퍼 중의 5% 탈지유로 블로킹하였고, p-STAT1, p-p65, 및 p-p38 또는 총 STAT1, p65, 및 p38의 항체를 TBS-T 버퍼에 1:2000의 비로 희석하여 냉장실에서 밤새 반응시켰다. 다음 날 HRP가 결합된 2차 항체를 TBS-T 버퍼에 1:10000의 비로 희석하여 상온에서 1시간 반응시킨 후, WestGlow™ PICO PLUS Chemiluminescent 기질(BioMax사)을 이용하여 Amersham Imager 680에서 발색하였다.
그 결과, STAT1, p65, 및 p38의 인산화는 SFII의 전처리에 의해 1-25 ㎍/㎖의 농도 범위에서 농도의존적으로 억제됨을 확인하였다(도 3).
실시예 4. SFII 처리에 의한 TSLP의 발현 유도 억제 효과
SFII가 일차 배양 각질형성 세포에서 폴리 I:C의 처리에 의한 TSLP 단백질의 발현 유도를 억제할 수 있는지 여부를 확인하기 위하여, 포피에서 분리한 일차 배양 각질형성 세포를 인간 각질세포 성장 보충물(Gibco사)을 함유하는 EpiLifeTM 배지(KGM, keratinocyte growth medium)에서 35 ㎜ 배양 접시에 90% 가량 차도록 배양하였다.
신선한 KGM 배지로 교환하면서, DMSO 또는 1-25 ㎍/㎖ 농도의 SFII를 30분간 전처리하였고, 폴리 I:C(15 ㎍/㎖)를 처리한 후, 24시간 뒤에 배지를 수집하였다. 배지로 분비된 TSLP의 양은 DuoSet ELISA 키트(R&D Systems사)를 이용해 수집한 배지에서 측정하였다.
그 결과, TSLP 단백질의 발현은 SFII의 전처리에 의해 1-25 ㎍/㎖의 농도 범위에서 농도의존적으로 억제됨을 확인하였다(도 4).
실시예 5. SFII 국소 도포에 의한 아토피 피부염 유사 염증 반응 억제 효과(0.005% 덱사메타손과 비교 실험)
7주령의 암컷 Balb/c 쥐의 양쪽 귀에 군 당 5마리씩 1 nM의 MC903을 7일간 매일 도포하여 아토피 피부염 유사 염증 반응을 유도하였다. 1%의 SFII, 0.005%의 덱사메타손, 또는 비히클(에탄올)을 13일간 매일 도포하며 병변 양상을 사진으로 기록하고 귀 두께를 재며 염증 양상을 관찰하였다. 13일째 되는 날 귀 조직을 생검하여 조직학적 분석을 수행하였고, 또한 단백질 및 mRNA를 추출하여 분자생물학 분석을 수행하였다.
그 결과, 1%의 SFII를 도포한 군과 0.005%의 덱사메타손을 도포한 군에서 병변 양상의 완화, 피부 두께 감소, 임상 점수 감소와 같은 현저한 염증 억제 효과를 나타내었다(도 5).
실시예 6. SFII 국소 도포에 의한 아토피 피부염 유사 염증 반응 억제 효과(0.1% 히드로코르티손과 비교 실험)
7주령의 암컷 Balb/c 쥐의 양쪽 귀에 군 당 5마리씩 1 nM의 MC903을 7일간 매일 도포하여 아토피 피부염 유사 염증 반응을 유도하였다. 1%의 SFII, 0.1%의 히드로코르티손, 또는 비히클(에탄올)을 13일간 매일 도포하며 병변 양상을 사진으로 기록하고 귀 두께를 재며 염증 양상을 관찰하였다. 13일째 되는 날 귀 조직을 생검하여 조직학적 분석을 수행하였고, 또한 단백질 및 mRNA를 추출하여 분자생물학 분석을 수행하였다.
그 결과, 1%의 SFII를 도포한 군과 0.1%의 히드로코르티손을 도포한 군에서 병변 양상의 완화, 피부 두께 감소, 임상 점수 감소와 같은 현저한 염증 억제 효과를 나타내었다(도 6).
실시예 7. SFII 국소 도포에 의한 아토피 피부염 유사 염증 반응 억제 효과(0.1% 히드로코르티손, 0.1% 타크로리무스와 비교 실험)
7주령의 암컷 Balb/c 쥐의 양쪽 귀에 군 당 5마리씩 1 nM의 MC903을 7일간 매일 도포하여 아토피 피부염 유사 염증 반응을 유도하였다. 0.5% 또는 1%의 SFII, 0.1%의 히드로코르티손, 0.1% 타크로리무스 또는 비히클 (에탄올)을 13일간 매일 도포하며 병변 양상을 사진으로 기록하고 귀 두께를 재며 염증 양상을 관찰하였다. 13일째 되는 날 귀 조직을 생검하여 조직학적 분석을 수행하였고, 또한 단백질 및 mRNA를 추출하여 분자생물학 분석을 수행하였다.
그 결과, 1%의 SFII를 도포한 군과 0.1%의 히드로코르티손, 0.1% 타크로리무스를 도포한 군에서 병변 양상의 완화, 피부 두께 감소와 같은 현저한 염증 억제 효과를 나타내었다(도 7).
실시예 8. SFII 국소 도포에 의한 아토피 피부염 유사 염증 반응 억제 효과(사이토카인 ELISA)
7주령의 암컷 Balb/c 쥐의 양쪽 귀에 군 당 5마리씩 1 nM의 MC903을 7일간 매일 도포하여 아토피 피부염 유사 염증 반응을 유도하였다. 1%의 SFII, 0.1%의 히드로코르티손, 0.005% 덱사메타손, 또는 비히클(에탄올)을 13일간 매일 도포하였고, 13일째 되는 날 귀 조직을 생검해 단백질을 추출하여 IL-4, IL-5, IL-6, 및 TSLP의 ELISA 분석을 수행하였다.
그 결과, 1%의 SFII를 도포한 군에서 IL-4, IL-6, 및 TSLP의 유의한 억제 효과가 관찰되었다(도 8).
실시예 9. SFII 국소 도포에 의한 아토피 피부염 유사 염증 반응 억제 효과(사이토카인 mRNA 발현)
7주령의 암컷 Balb/c 쥐의 양쪽 귀에 군 당 5마리씩 1 nM의 MC903을 7일간 매일 도포하여 아토피 피부염 유사 염증 반응을 유도하였다. 1%의 SFII, 0.1%의 히드로코르티손, 0.005% 덱사메타손, 또는 비히클(에탄올)을 13일간 매일 도포하였고, 13일째 되는 날 귀 조직을 생검해 RNA를 추출하였으며, IL-6, TNFα, 및 IL-10의 mRNA 분석을 위해 실시간 RT-PCR을 수행하였다. 각 유전자의 발현은 36B4의 발현으로 보정하였다.
그 결과, 1%의 SFII를 도포한 군에서 IL-6, TNFα, 및 IL-10의 유의한 억제 효과가 관찰되었다(도 9).
실시예 10. SFII 국소 도포에 의한 아토피 피부염 유사 염증 반응 억제 효과(염증세포 침윤 마커 유전자 mRNA 발현)
7주령의 암컷 Balb/c 쥐의 양쪽 귀에 군 당 5마리씩 1 nM의 MC903을 7일간 매일 도포하여 아토피 피부염 유사 염증 반응을 유도하였다. 1%의 SFII, 0.1%의 히드로코르티손, 0.005% 덱사메타손, 또는 비히클(에탄올)을 13일간 매일 도포하였고, 13일째 되는 날 귀 조직을 생검해 RNA를 추출하였으며, 비만세포의 마커인 Mcpt4, 호염기구의 마커인 Mcpt8, 및 호중구의 키모카인인 Cxcl1의 mRNA 분석을 위해 실시간 RT-PCR을 수행하였다. 각 유전자의 발현은 36B4의 발현으로 보정하였다.
그 결과, 1%의 SFII를 도포한 군에서 염증세포의 침윤과 관련된 Mcpt8 및 Cxcl1 유전자 mRNA 발현의 유의한 억제 효과가 관찰되었다(도 10).
실시예 11. SFII 국소 도포에 의한 아토피 피부염 유사 염증 반응 억제 효과(염증성 표피증식 인자 mRNA 발현)
7주령의 암컷 Balb/c 쥐의 양쪽 귀에 군 당 5마리씩 1 nM의 MC903을 7일간 매일 도포하여 아토피 피부염 유사 염증 반응을 유도하였다. 1%의 SFII, 0.1%의 히드로코르티손, 0.005% 덱사메타손, 또는 비히클(에탄올)을 13일간 매일 도포하였고, 13일째 되는 날 귀 조직을 생검해 RNA를 추출하였으며, 염증성 표피 증식 인자인 IL-17a와 S100a8의 mRNA 분석을 위해 실시간 RT-PCR을 수행하였다. 각 유전자의 발현은 36B4의 발현으로 보정하였다.
그 결과, 1%의 SFII를 도포한 군에서 IL-17a, S100a8의 유의한 억제 효과가 관찰되었다(도 11).
실시예 12. SFII 국소 도포에 의한 아토피 피부염 유사 염증 반응 억제 효과(스크래치 행동 및 혈중 IgE 레벨)
7주령의 암컷 Balb/c 쥐의 양쪽 귀에 군 당 5마리씩 1 nM의 MC903을 7일간 매일 도포하여 아토피 피부염 유사 염증 반응을 유도하였다. 0.5% 또는 1%의 SFII, 0.1%의 히드로코르티손, 0.1% 타크로리무스 또는 비히클(에탄올)을 13일간 매일 도포하였고, 13일째 되는 날 30분간 쥐의 스크래치 행동을 영상으로 촬영하여 계수하였으며, 혈액을 채취하여 혈중 IgE 레벨을 ELISA로 측정하였다.
그 결과, 1%의 SFII를 도포한 군에서 유의한 스크래치 행동 및 혈중 IgE 레벨의 억제 효과가 관찰되었다(도 12).
실시예 13. SFII와 바이칼레인(BE) 처리에 의한 염증 관련 단백질 발현 유도 억제 효과
SFII와 바이칼레인(BE)의 처리가 염증 관련 단백질의 발현에 미치는 영향을 비교하기 위하여, 피부 유래의 각질형성 세포주인 HaCaT 세포를 10% 우태아혈청(FBS)을 포함하는 DMEM 배지에서 35 ㎜ 배양 접시에 가득 차도록 배양한 후, 24시간 동안 0% FBS-DMEM으로 절식시켰다.
염증 관련 단백질인 TARC, MDC, 및 CTSS의 억제 효과를 관찰하기 위하여, 35 ㎜ 배양 접시에서 세포의 배양 및 절식을 완료한 후, 신선한 0% FBS-DMEM 배지로 교환하면서 DMSO 또는 2.7-67 μM 농도의 SFII 또는 BE를 30분간 전처리하였고, 24시간 후에 배지를 수집하였다. 발현된 TARC와 MDC의 양은 DuoSet ELISA 키트(R&D Systems사)를 이용하여 수집한 배지에서 측정하였고, CTSS의 경우에는 배지에서 웨스턴 블롯을 통해 CTSS의 양적 변화를 분석하였다.
그 결과, TARC, MDC, 및 CTSS 모두 SFII의 전처리에 의한 억제 효과가 BE의 전처리에 의한 억제 효과에 비해 유의하게 더 뛰어난 효과를 보임을 확인하였다(도 13).
실시예 14. SFII 국소 도포에 의한 아토피 피부염 유사 염증 반응 억제 효과(1.0% SFII, 0.72% 바이칼레인, 및 0.1% 히드로코르티손 비교 실험)
7주령의 암컷 Balb/c 쥐의 양쪽 귀에 군 당 5마리씩 1 nM의 MC903을 7일간 매일 도포하여 아토피 피부염 유사 염증 반응을 유도하였다. 1.0%의 SFII, 0.72% 바이칼레인, 0.1%의 히드로코르티손, 또는 비히클(에탄올)을 13일간 매일 도포하며 병변 양상을 사진으로 기록하고 귀 두께를 재며 염증 양상을 관찰하였다. 1.0% SKII(분자량: 374.34) 및 0.72% 바이칼레인(분자량: 270.24)은 모두 약 26.7 mM을 나타낸다. 13일째 되는 날 귀 조직을 생검하여 조직학적 분석을 수행하였고, 또한 단백질 및 mRNA를 추출하여 분자생물학 분석을 수행하였다.
그 결과, 1.0%의 SFII, 0.72% 바이칼레인, 및 0.1%의 히드로코르티손을 도포한 군에서 병변 양상의 완화, 피부 두께 감소, 가려움증 감소, 혈중 IgE 감소, 및 피부 IL-4, TSLP의 감소와 같은 염증 억제 효과를 나타내었고, 특히 SFII는 유사한 구조를 갖는 바이칼레인과 비교할 때 혈중 IgE 및 IL-4의 발현에 대하여 보다 현저한 염증 억제 활성을 나타내었다(도 14 및 도 15).
실시예 15. SFII 국소 도포에 의한 아토피 피부염 유사 염증 반응 억제 효과(사이토카인 mRNA 발현)
7주령의 암컷 Balb/c 쥐의 양쪽 귀에 군 당 5마리씩 1 nM의 MC903을 7일간 매일 도포하여 아토피 피부염 유사 염증 반응을 유도하였다. 1.0% SFII, 0.72% 바이칼레인, 및 0.1% 히드로코르티손, 또는 비히클(에탄올)을 13일간 매일 도포하였고, 13일째 되는 날 귀 조직을 생검해 RNA를 추출하였으며, TNFα, IL-10, CXCL1, MCPT8, S100a8, 및 IL-17a의 mRNA 분석을 위해 실시간 RT-PCR을 수행하였다. 각 유전자의 발현은 36B4의 발현으로 보정하였다.
그 결과, 1.0%의 SFII, 0.72% 바이칼레인, 및 0.1%의 히드로코르티손을 도포한 군에서 TNFα, IL-10, CXCL1, MCPT8, S100a8, 및 IL-17a의 유의한 억제 효과가 관찰되었고, 특히 SFII는 유사한 구조를 갖는 바이칼레인과 비교할 때 MCPT8 및 IL-17a의 발현에 대하여 보다 현저한 염증 억제 활성을 나타내었다(도 16).
상기 실시예들에서 확인된 SFII, 바이칼레인, 히드로코르티손, 및 타크로리무스에 의한 염증 억제 효과를 정리하여 도 17에 나타내었다. 도 17로부터 확인할 수 있는 것과 같이, SFII는 종래 항염증제로 사용되는 히드로코르티손 및 타크로리무스뿐만 아니라 SFII와 그 구조가 유사한 바이칼레인과 비교하여 다양한 항-염증성 인자의 발현 억제에 있어서 현저한 효과를 나타냄을 확인하였다.
제조예 1. 약학적 조성물의 제조
1.1. 시럽제의 제조
유효성분을 1%(중량/부피)로 함유하는 시럽을 다음과 같은 방법으로 제조하였다. 먼저, SFII, 사카린, 당을 온수 80 g에 용해시켰다. 상기 용액을 냉각시킨 후, 여기에 글리세린, 사카린, 향미료, 에탄올, 소르브산 및 증류수로 이루어진 용액을 제조하여 혼합하였다. 이 혼합물에 물을 첨가하여 100 ㎖가 되게 하였다.
상기 시럽제의 구성 성분은 다음과 같다.
SFII ·························· 1 g
사카린 ························ 0.8 g
당·························· 25.4 g
글리세린 ······················· 8.0 g
향미료························ 0.04 g
에탄올 ························ 4.0 g
소르브산 ······················· 0.4 g
증류수························· 정량
1.2. 정제의 제조
SFII 250 g을 락토오스 175.9 g, 감자전분 180 g 및 콜로이드성 규산 32 g과 혼합하였다. 상기 혼합물에 10% 젤라틴 용액을 첨가시킨 후, 분쇄해서 14 메쉬체를 통과시켰다. 이것을 건조시키고 여기에 감자전분 160 g, 활석 50 g 및 스테아르산 마그네슘 5 g을 첨가해서 얻은 혼합물을 정제로 만들었다.
상기 정제의 구성 성분은 다음과 같다.
SFII ························· 250 g
락토오스 ······················ 175.9 g
감자전분 ······················· 180 g
콜로이드성 규산 ···················· 32 g
10% 젤라틴 용액
감자전분 ······················· 160 g
활석·························· 50 g
스테아르산 마그네슘··················· 5 g
1.3. 주사액제의 제조
유효성분 10 ㎎/㎖을 함유하는 주사액제를 다음과 같은 방법으로 제조하였다.
SFII 1 g, 염화나트륨 0.6 g 및 아스코르브산 0.1 g을 증류수에 용해시켜서 100 ㎖을 만들었다. 상기 용액을 병에 넣고 가열하여 멸균시켰다.
상기 주사액제의 구성 성분은 다음과 같다.
SFII ·························· 1 g
염화나트륨 ······················ 0.6 g
아스코르브산 ····················· 0.1 g
증류수 ························ 정량
제조예 2. 화장료 조성물의 제조
2.1. 유화 제형의 화장품 제조
표 2에 기재된 조성으로 유화 제형의 화장품을 제조하였다. 제조 방법은 하기와 같다.
1) 1 내지 9의 원료를 혼합한 혼합물을 65∼70℃로 가열하였다.
2) 10의 원료를 상기 단계 1)의 혼합물에 투입하였다.
3) 11 내지 13의 원료의 혼합물을 65∼70℃로 가열하여 완전히 용해시켰다.
4) 상기 단계 3)을 거치면서, 상기 2)의 혼합물을 서서히 첨가하여 8,000 rpm에서 2∼3분간 유화시켰다.
5) 14의 원료를 소량의 물에 용해시킨 후 상기 단계 4)의 혼합물에 첨가하고 2분간 더 유화시켰다.
6) 15 내지 17의 원료를 각각 평량한 후 상기 단계 5)의 혼합물에 넣고 30초간 더 유화시켰다.
7) 상기 단계 6)의 혼합물을 유화 후 탈기과정을 거쳐 25∼35℃로 냉각시킴으로서 유화제형의 화장품을 제조하였다.
조성 유화 제형 1 유화 제형 2 유화 제형 3
1 스테라인산 0.3 0.3 0.3
2 스테아릴 알코올 0.2 0.2 0.2
3 글리세릴 모노스테아레이트 1.2 1.2 1.2
4 밀납 0.4 0.4 0.4
5 폴리옥시에틸렌솔비탄
모노라우린산 에스테르
2.2 2.2 2.2
6 파라옥시안식향산 메틸 0.1 0.1 0.1
7 파라옥시안식향산 프로필 0.05 0.05 0.05
8 세틸에틸헥사노에이트 5 5 5
9 트리글리세라이드 2 2 2
10 사이클로메티콘 3 3 3
11 증류수 to 100 to 100 to 100
12 진한 글리세린 5 5 5
13 트리에탄올아민 0.15 0.15 0.05
14 폴리아크릴산 중합체 0.12 0.12 0.12
15 색소 0.0001 0.0001 0.0001
16 0.10 0.10 0.10
17 SFII 0.0001 1 10
2.2. 가용화 제형의 화장품 제조
표 3에 기재된 조성으로 가용화 제형의 화장품을 제조하였다. 제조 방법은 하기와 같다.
1) 2 내지 6의 원료를 1의 원료(정제수)에 넣고 아지믹서를 이용하여 용해시켰다.
2) 8 내지 11의 원료를 7의 원료(알코올)에 넣고 완전용해시켰다.
3) 상기 단계 2)의 혼합물을 상기 단계 1)의 혼합물에 서서히 첨가하면서 가용화시켰다.
조성 가용화 제형 1 가용화 제형 2 가용화 제형 3
1 정제수 to 100 to 100 to 100
2 진한 글리세린 3 3 3
3 1,3-부틸렌글리콜 2 2 2
4 EDTA-2Na 0.01 0.01 0.01
5 색소 0.0001 0.0002 0.0002
6 SFII 0.1 5 5
7 알코올(95%) 8 8 8
8 파라옥시안식향산 메틸 0.1 0.1 0.1
9 폴리옥시에틸렌
하이드로제네이트디 에스테르
0.3 0.3 0.3
10 0.15 0.15 0.15
11 사이클로메티콘 - - 0.2
제조예 3. 건강식품의 제조
3.1. 밀가루 식품의 제조
SFII 0.5 내지 5.0 중량부를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하였다.
3.2. 스프 및 육즙(gravies)의 제조
SFII 0.1 내지 5.0 중량부를 스프 및 육즙에 첨가하여 건강 증진용 육가공 제품, 면류의 수프 및 육즙을 제조하였다.
3.3. 그라운드 비프(ground beef)의 제조
SFII 10 중량부를 그라운드 비프에 첨가하여 건강 증진용 그라운드 비프를 제조하였다.
3.4. 유제품(dairy products)의 제조
SFII 5 내지 10 중량부를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
3.5. 선식의 제조
현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
검정콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
상기에서 제조한 곡물류, 종실류 및 SFII를 다음의 비율로 배합하여 제조하였다.
곡물류(현미 30 중량부, 율무 15 중량부, 보리 20 중량부), 종실류(들깨 7 중량부, 검정콩 8 중량부, 검정깨 7 중량부), SFII(3 중량부), 영지(0.5 중량부), 지황(0.5 중량부)
3.6. 건강음료의 제조
액상과당(0.5%), 올리고당(2%), 설탕(2%), 식염(0.5%), 물(75%)과 같은 부재료와 SFII 5 g을 균질하게 배합하여 순간 살균을 한 후 이를 유리병, 패트병 등 소포장 용기에 포장하여 제조하였다.
3.7. 야채 주스의 제조
SFII 5 g을 토마토 또는 당근 주스 1,000 ㎖에 가하여 야채 주스를 제조하였다.
3.8. 과일 주스의 제조
SFII 1 g을 사과 또는 포도 주스 1,000 ㎖에 가하여 과일 주스를 제조하였다.
<110> SEOUL NATIONAL UNIVERSITY HOSPITAL Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology JUNGJINHO EFFECT Inc. <120> Composition for Prevention or Treatment of Atopic Dermatitis Comprising Skullcapflavone II or Derivatives Thereof <130> 2021-DPA-4201 <160> 10 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for TARC gene <400> 1 ttgtaactgt gcagggcagg 20 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for TARC gene <400> 2 tgaacaccaa cggtggaggt 20 <210> 3 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for MDC gene <400> 3 gaagcctgtg ccaactctct 20 <210> 4 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for MDC gene <400> 4 gggaatcgct gatgggaaca 20 <210> 5 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for CTSS gene <400> 5 tgggctttca gtgctgtggg 20 <210> 6 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for CTSS gene <400> 6 tcaatgatgt actggaaagc 20 <210> 7 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for IL-6 gene <400> 7 gcagatgagt acaaaagtcc 20 <210> 8 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for IL-6 gene <400> 8 gcagaatgag atgagttgtc 20 <210> 9 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for 18S rRNA gene <400> 9 gtaacccgtt gaaccccatt 20 <210> 10 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for 18S rRNA gene <400> 10 ccatccaatc ggtagtagcg 20

Claims (12)

  1. 화학식 2로 표시되는 스컬캅플라본 Ⅱ를 함유하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로서,
    국소 도포되는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물:
    [화학식 2]
  2. 삭제
  3. 청구항 1에 있어서,
    상기 스컬캅플라본 Ⅱ의 유도체는 TARC, MDC, CTSS, TSLP, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, 및 TNF-α로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 단백질 또는 유전자 발현을 억제하는 약학적 조성물.
  4. 청구항 1에 있어서,
    상기 스컬캅플라본 Ⅱ의 유도체는 STAT1, p65, 및 p38로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 단백질의 인산화를 억제하는 약학적 조성물.
  5. 청구항 1에 있어서,
    상기 스컬캅플라본 Ⅱ의 유도체는 염증 세포의 침윤을 억제하는 약학적 조성물.
  6. 청구항 5에 있어서,
    상기 염증 세포는 호염기구 또는 호중구인 약학적 조성물.
  7. 청구항 1에 있어서,
    산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 외용제, 좌제, 및 멸균 주사용액으로 이루어진 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 약학적 조성물.
  8. 삭제
  9. 삭제
  10. 화학식 2로 표시되는 스컬캅플라본 Ⅱ를 함유하는 아토피 피부염의 개선용 화장료 조성물로서,
    국소 도포되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물:
    [화학식 2]
  11. 삭제
  12. 청구항 10에 있어서,
    용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 젤, 마스크, 팩, 분말, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 및 스프레이로 이루어진 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 화장료 조성물.
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KR20160109019A (ko) 2015-03-09 2016-09-21 주식회사 이에이치엘바이오 지방-유래 줄기세포를 함유하는 정맥혈관 투여를 통한 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 조성물
KR101765141B1 (ko) 2016-07-20 2017-08-07 이화여자대학교 산학협력단 스컬캅플라본 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
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