KR102576779B1 - 아시아티코사이드 함량이 증대된 병풀 추출물 및 이의 용도 - Google Patents

아시아티코사이드 함량이 증대된 병풀 추출물 및 이의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR102576779B1
KR102576779B1 KR1020230041501A KR20230041501A KR102576779B1 KR 102576779 B1 KR102576779 B1 KR 102576779B1 KR 1020230041501 A KR1020230041501 A KR 1020230041501A KR 20230041501 A KR20230041501 A KR 20230041501A KR 102576779 B1 KR102576779 B1 KR 102576779B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
centella asiatica
increased
asiaticoside
cultivating
asiaticoside content
Prior art date
Application number
KR1020230041501A
Other languages
English (en)
Inventor
박영민
권민수
이기만
박진홍
조성민
이다희
Original Assignee
록야 주식회사
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 록야 주식회사 filed Critical 록야 주식회사
Priority to KR1020230041501A priority Critical patent/KR102576779B1/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102576779B1 publication Critical patent/KR102576779B1/ko

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/23Apiaceae or Umbelliferae (Carrot family), e.g. dill, chervil, coriander or cumin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01GHORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G31/00Soilless cultivation, e.g. hydroponics
    • A01G31/02Special apparatus therefor
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789Magnoliopsida [dicotyledons]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00Drugs for disorders of the nervous system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00Function of food ingredients
    • A23V2200/30Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/322Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the health of the nervous system or on mental function
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00Function of food ingredients
    • A23V2200/30Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/324Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the immune system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/52Stabilizers
    • A61K2800/522Antioxidants; Radical scavengers

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

본 발명은 아시아티코사이드 함량이 증대된 병풀 추출물 및 이의 용도에 관한 것으로, 본 발명에 따른 병풀 추출물은 스마트팜에서 특정 조건으로 수경재배한 병풀을 이용함에 따라, 유용성분인 아시아티코사이드 함량이 증진되어 우수한 항염증, 항산화, 신경세포 보호 효능을 갖는다.

Description

아시아티코사이드 함량이 증대된 병풀 추출물 및 이의 용도{Centella asiatica extract with increased asiaticoside and uses therof}
본 발명은 아시아티코사이드(asiaticoside) 함량이 증대된 병풀 추출물 및 이의 용도에 관한 것이다.
병풀[Centella asiatica]은 미나리과(Umbelliferae), 병풀속(Centellae)의 다년생 포복성 초본 식물로, 아프리카 마다가스카르섬이 원산지이며, 스리랑카, 인도네시아 등의 습지에 서식하는 식물이다. 대한민국에서는 제주도 및 남부 지방의 고온 다습한 환경에서 자생하는 것으로 알려져 있다.
병풀은 예로부터 동양에서 약용식물로 사용되었는데, 피부, 중추신경, 위장 장애 관리에 사용되어왔다. 병풀의 주요 유효성분으로 asiaticoside, madecassosside, asiatic acid, madecassic acid 등의 triterpene이 있는데, 이 중 아시아티코사이드(asiaticoside)는 항염증, 항산화, 간 보호, 항종양, 치매환자의 amyloidogenesis 억제, 뇌질환, 신경보호, 피부 재생 및 상처 치유 효능이 있는 것으로 알려져 있다.
다양한 생리활성 효능이 있는 병풀은 최근 의약품, 화장품 및 기능성 식품 분야에서 수요가 급격하게 증가하고 있다. 하지만 병풀은 국내에서 재배 및 채취가 어려워 대부분을 인도, 스리랑카, 마다가스카르 등에서 수입하고 있으며, 수입량이 매해 증가하는 추세이다.
등록특허 제10-0444330호(2004.08.04)에는 병풀의 재배방법이 기재되어 있다. 등록특허 제10-2013274호(2019.08.16)에는 병풀 추출물을 포함하는 화장료 조성물이 기재되어 있다.
본 발명에서는 아시아티코사이드(asiaticoside) 함량이 증대된 병풀 추출물 및 이의 용도를 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 PPFD(Photosynthetic Photon Flux Density) 175~200 μmol/m2/s의 조명 및 전기전도도가 1.2~1.8 dS/m이고, 수온이 17~22℃이며, pH가 5.5∼6.5인 양액을 이용하여, 24~26℃의 온도, 60~70%의 습도, 이산화탄소 농도 850~950ppm의 내기(內氣) 조건에서 수경재배한 병풀을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 병풀에 에탄올을 가하여 추출한 병풀 추출물을 제공한다.
본 발명은 상기 병풀을 50~70℃에서 12~18시간 동안 건조하는 단계 (a); 및 상기 단계 (a)의 건조된 병풀에 에탄올을 가하여 70~90℃에서 1~5시간 동안 추출하는 단계 (b);를 통해 제조된 병풀 추출물을 제공한다.
본 발명은 상기 병풀 추출물을 함유하는 염증질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명은 상기 병풀 추출물을 함유하는 염증질환 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명은 상기 병풀 추출물을 함유하는 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명은 상기 병풀 추출물을 함유하는 항산화용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명은 상기 병풀 추출물을 함유하는 항산화용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명은 상기 병풀 추출물을 함유하는 신경 세포 보호용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명은 상기 병풀 추출물을 함유하는 신경 세포 보호용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 병풀 추출물은 스마트팜에서 특정의 조건으로 재배한 병풀을 이용함에 따라, 유용성분인 아시아티코사이드 함량이 증진되어, 항염증, 항산화, 신경세포 보호 효능이 우수하다.
도 1은 스마트팜 수경재배시설에서 재배한 병풀과 노지에서 재배한 병풀을 보여준다.
도 2는 Mouse macrophage cell(마우스 대식세포)에 스마트팜에서 수경재배한 병풀의 추출물과 노지에서 재배한 병풀의 추출물을 처리한 후, LPS로 염증 반응을 유도하고, NO 농도를 확인하여, 항염 효능을 비교한 결과를 보여준다.
도 3은 Mouse macrophage cell(마우스 대식세포)에 스마트팜에서 수경재배한 병풀의 추출물과 노지에서 재배한 병풀의 추출물을 처리한 후, LPS로 염증 반응을 유도하고, TNF-α 발현량을 확인하여, 항염 효능을 비교한 결과를 보여준다.
도 4는 Mouse macrophage cell(마우스 대식세포)에 스마트팜에서 수경재배한 병풀의 추출물과 노지에서 재배한 병풀의 추출물을 처리한 후, LPS로 염증 반응을 유도하고, IL-6 발현량을 확인하여, 항염 효능을 비교한 결과를 보여준다.
도 5는 SH-SY5Y cell(인간 신경모세종세포)에 스마트팜에서 수경재배한 병풀의 추출물과 노지에서 재배한 병풀의 추출물을 처리한 후, H2O2로 산화스트레스를 가하고, 세포 생존율을 측정하여, 신경 세포 보호 효능을 비교한 결과를 보여준다.
본 발명은 PPFD(Photosynthetic Photon Flux Density) 175~200 μmol/m2/s의 조명 및 전기전도도가 1.2~1.8 dS/m이고, 수온이 17~22℃이며, pH가 5.5∼6.5인 양액을 이용하여, 24~26℃의 온도, 60~70%의 습도, 이산화탄소 농도 850~950ppm의 내기(內氣) 조건에서 수경재배한 병풀을 제공한다.
병풀은 다양한 유용성분들을 다량 함유하고 있어, 의약품, 화장품 및 기능성 식품 분야에서 사용되고 있는 식물이다. 병풀의 주요 유용성분으로는 아시아티코사이드(asiaticoside)가 있는데, 아시아티코사이드(asiaticoside)는 항염증, 항산화, 간 보호, 항종양, 치매환자의 amyloidogenesis 억제, 뇌질환, 신경보호, 피부 재생 및 상처 치유 효능이 있는 것으로 알려져 있다.
본 발명에서는 병풀을 수경재배하는 경우, 노지에서 병풀을 재배하는 경우 보다, 아시아티코사이드(asiaticoside) 함량이 증대되는 것을 확인할 수 있었고, 항염증 효능, 항산화 효능, 세포 보호 효능 또한 더욱 우수한 것을 확인하여 본 발명을 완성한 것이다. 한편, 하기 실시예에 따르면, 본 발명의 병풀 추출물은 특정 조건에서 수경재배한 병풀을 사용하여, 노지에서 재배한 병풀을 사용하는 것 대비 아시아티코사이드(asiaticoside) 함량이 2배 이상 증대되었다.
본 발명에서 사용한 '양액'라는 용어는 식물 성장에 필요한 여러 성분이 농축되어 있는 소위 '농축액 또는 원액'을 물(원수)에 희석해서 제조한 것이다. 본 발명에서 사용하는 농축액은 특정의 것으로 한정되는 것은 아니나, 바람직하게는 KAST 엽채류 양액을 이용할 수 있다.
광합성 광량자속밀도(Photosynthetic Photon Flux Density, PPFD)는 광합성을 유발하는 가시광선영역(400~800㎚) 광의 단위 시간, 단위 면적당 양자수를 나타내는 것으로, 적절한 PPFD 수치를 갖는 조명의 선택은 저가의 낮은 광도와 PPFD 측정 값이 없는 단순 혼합광의 적용에서 문제되는 웃자람 현상을 예방할 수 있다.
즉, 씨앗 파종 후 발아까지는 적정한 수분과 온도만 맞으면 별문제 없이 발아가 이뤄진다. 다만, 떡잎이 나오고 잎이 자라면서 식물이 성장함에 있어 식물은 뿌리로부터 물과 양분을 공급받고 잎으로부터 이산화탄소를 흡수하면서 동시에 광합성을 위한 적정수준의 광량이 필요하다. 이때 공급되는 광량이 이에 미치지 못하는 경우 광합성이 미흡하여 잎은 자라지 못하고, 뿌리를 통해 흡수되는 수분과 양분만으로 줄기만 자라면서 결국 콩나물처럼 얇게 줄기만 자라다가 더 이상의 성장을 하지 못하고 죽는 경우가 많아, PPFD 측정 값을 갖는 조명의 선택이 필요하다.
이때, PPFD 값이 높을수록 식물의 광합성 효율이 정비례하는 것은 아니고, 광보상점 이상의 광량자밀도에서 식물마다 최적 생육조건에 맞는 광합성 효율값이 있기 때문에 적절한 PPFD 수치를 갖는 조명의 선택이 필요하다. 이에, 본 발명에서는 175~200 μM/m2/s의 PPFD 측정값을 갖는 조명을 이용함에 따라 유용성분인 아시아티코사이드(asiaticoside) 함량이 증대된 병풀을 재배할 수 있었다.
한편, 상기 병풀의 수경재배방식은 담액경, 배지경, 분무경, 아쿠아포닉스, 박막식 등 재배방식에 제한을 두지 않으나, 바람직하게는 담액경 방법에 의한 수경재배방법을 이용하는 것이 좋다.
담액경은 식물 뿌리가 양액 속에 담겨 있는 방식으로 공기와 양분을 공급하여 재배하는 방식을 말하고, 배지경은 인공토양(배지) 등에 식물이 심어져 물과 양분을 공급받는 방식을 말하며, 분무경은 공기에 노출시킨 식물의 뿌리에 양액을 분무하여 재배하는 방식을 발한다. 또한, 아쿠아포닉스는 물고기와 작물을 함께 길러 수확하는 방식으로, 물고기를 키우면서 발생되는 유기물을 이용해 식물을 수경재배하는 순환형 시스템을 말하며, 박막식은 1~2㎜의 필름을 경사진 베드에 깔고, 그 위로 양액을 조금씩 흘려보내면서 재배하는 방식을 말한다.
한편, 본 발명의 수경재배방법은 병풀을 정식한 후에 적용하는 것인데, 상기 정식은 병풀의 자묘를 정식하는 것일 수 있다. 이때, 상기 병풀은 자묘를 정식한 후, 6주 후에 수확한 것일 수 있다
한편, 본 발명은 PPFD(Photosynthetic Photon Flux Density) 175~200 μmol/m2/s의 조명 및 전기전도도가 1.2~1.8 dS/m, pH는 5.5∼6.5인 양액을 이용하고, 온도는 24~26℃, 습도는 60~70%의 조건에서 수경재배한 병풀을 50~70℃에서 12~18시간 동안 건조하는 단계 (a); 및 상기 단계 (a)의 건조된 병풀에 에탄올을 가하여 70~90℃에서 1~5시간 동안 추출하는 단계 (b);를 통해 제조된 병풀 추출물을 제공한다.
상기 단계 (a)에서 50℃, 12시간 미만으로 건조를 수행할 경우, 잎이 충분히 건조되지 않아 바람직하지 않고, 70℃, 18시간을 초과하여 건조를 수행할 경우 유용성분이 변성되어 바람직하지 못하다.
상기 단계 (a)에서 병풀은 병풀의 뿌리, 줄기, 잎을 전체 사용한 것일 수 있는데, 바람직하게 줄기 및 잎을 사용하는 것이 좋다.
상기 단계 (b)에서 에탄올은 바람직하게는 60~80%(v/v) 에탄올을 이용하는 것이 좋고, 원물 건조 중량대비 16~24배수의 에탄올을 가하는 것이 좋다.
상기 단계 (b)에서 70℃, 1시간 미만으로 추출을 수행할 경우 유용성분의 추출이 미미하여 바람직하지 못하고, 90℃, 5시간을 초과하여 추출을 수행할 경우 추출되는 유용성분의 양 대비 많은 에너지가 소비되어 경제적이지 못하다.
이때, 상기 병풀 추출물은, 바람직하게는 상기 단계 (b)의 병풀 추출물을 50~70℃에서 10~30 Brix로 농축하는 단계 (c);를 더 포함하여 제조된 것이 좋다.
한편, 본 발명은 상기 병풀 추출물을 함유하는 신경 세포 보호용 또는 염증질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다. 하기 실시예에 따르면, 본 발명 병풀 추출물은 항염증 효능 및 신경 세포 보호 효능이 우수하다.
상기 염증질환은, 일 예로 패혈증(sepsis), 파종혈관내응고(disseminated intravascular coagulation; DIC), 동맥경화(atherosclerosis), 퇴행성 관절염(degenerative arthritis), 치주염(periodontitis), 임파선염(lymphadenopathy), 림프관염(lymphangitis), 제1형 당뇨병(type 1 diabetes), 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis), 다발경화증(multiple sclerosis), 암(cancer), 대사성 질환(metabolic disease), 신경퇴행성 질환(neurodegenerative disease), 전신경화증(systemic sclerosis), 다발성근염(polymyositis), 피부근염(polymyositis), 봉입체근염(inclusion body myositis), 알러지(allergy), 알츠하이머병(alzheimer's disease), 강직성 척추염(ankylosing spondylitis), 천식(asthma), 손목 터널 증후군(carpal tunnel syndrome), 셀리악병(celiac disease), 크론병(crohn's disease), 게실염(intestinal diverticulum), 습진(eczema), 섬유증(fibrosis), 루푸스(systemic lupus erythematosus), 췌장염(pancreatitis), 파킨슨병(Parkinson's disease), 건선(psoriasis), 류마티스성 다발근통(Polymyalgia rheumatica), 공피증(dermatosclerosis), 혈관염(vasculitis), 위염(gastritis), 피부염(dermatitis), 척수염(myelitis), 구내염(stomatitis), 관절염(arthritis), 비염(rhinitis), 편도염(tonisiltis), 결막염(conjunctivitis), 방광염(cystitis), 신장염(nephritis), 췌장염(pancreatitis), 간염(hepatitis), 충수염(appendicitis), 폐렴(pneumonia) 및 장염(gastroenteritis) 중 선택되는 어느 하나일 수 있으나, 이에 제한되지 않으며 염증성 반응을 수반하는 모든 질환을 제한 없이 포함할 수 있다.
상기 신경 세포 보호용 약학 조성물은, 구체적으로, 퇴행성 신경질환 예방 및 치료용 조성물일 수 있다. 이때, 상기 퇴행성 신경질환은 알츠하이머병(Alzheimer's disease), 파킨슨병(Parkinson'sdisease), 루게릭병(Lou Gehrig disease), 헌팅톤병(Huntington's disease), 다발성 경화증(Multiplesclerosis), 뇌졸중(stroke), 또는 치매(dementia)일 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "예방"이란 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 염증질환을 억제하거나 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "치료"란 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 염증질환에 의한 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
상기 약학적 조성물은 경구 투여 또는 비경구 투여 방식으로 투여할 수 있으며, 경구 투여 또는 비경구 투여를 위한 적합하고 다양한 제형으로 제제화되어 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물을 이용한 경구 투여용 제제의 비제한적인 예로는, 유성 현탁액, 트로키제(troches), 로젠지(lozenge), 정제, 수용성 현탁액, 조제 분말, 과립, 에멀젼, 하드 캡슐, 소프트 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르제 등을 들 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물을 경구 투여용으로 제제화하기 위하여, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아밀로펙틴, 셀룰로오스 락토오스, 사카로오스 또는 젤라틴 등과 같은 결합제; 스테아르산 마그네슘, 스테아르산 칼슘, 스테아릴 푸마르산 나트륨 또는 폴리에틸렌 글리콜 왁스 등과 같은 윤활유; 디칼슘 포스페이트 등과 같은 부형제; 옥수수 전분 또는 고구마 전분 등과 같은 붕해제 등을 사용할 수 있으며, 방향제, 시럽제, 감미제 등도 사용할 수 있다. 나아가 캡슐제의 경우에는 상기 언급한 물질 외에도 지방유와 같은 액체 담체 등을 추가로 사용할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 비경구 투여 방법으로는, 근육 내 투여, 경피 투여, 정맥 내 투여, 복강 내 투여 또는 피하 투여 등을 이용할 수 있으며, 상기 조성물을 질환 부위에 도포하거나 분무, 흡입하는 방법 또한 이용할 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 약학적 조성물을 이용한 비경구용 제제의 비제한적인 예로는, 주사액, 좌제, 연고, 도포용 파우더, 오일, 호흡기 흡입용 분말, 스프레이용 에어로졸제, 크림 등을 들 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물을 비경구 투여용으로 제제화하기 위하여, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결 건조 제제, 외용제 등을 사용할 수 있으며, 상기 비수성용제, 현탁제로는 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물을 주사액으로 제제화하는 경우, 본 발명의 약학적 조성물을 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고 이를 앰플(ampoule) 또는 바이알(vial)의 단위 투여용으로 제제화할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물을 에어로졸제로 제제화하는 경우, 수분산된 농축물 또는 습윤 분말이 분산되도록 추진제 등이 첨가제와 함께 배합할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물을 연고, 오일, 크림, 도포용 파우더, 피부 외용제 등으로 제제화하는 경우에는, 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 산화 아연 등을 담체로 사용하여 제제화할 수 있다.
한편, 상기 약학 조성물에 있어서, 상기 병풀 추출물에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다. 또한, 본 발명의 약학적 조성물은 병풀 추출물 이외에 약학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명에서 사용될 수 있는 담체의 종류는 특별히 제한되지 아니하며 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다. 상기 담체의 비제한적인 예로는, 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사 용액, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 말토덱스트린, 글리세롤, 에탄올 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 약학적 조성물은 필요한 경우, 항산화제, 부형제, 희석제, 완충액 또는 정균제 등 기타 약학적으로 허용 가능한 첨가제들을 첨가하여 사용할 수 있으며, 계면 활성제, 결합제, 충진제, 증량제, 습윤제, 붕해제, 분산제 또는 윤활제 등을 부가적으로 첨가하여 사용할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물에 있어서, 병풀 추출물은 약학적 조성물의 전체의 중량을 기준으로 0.00001중량% 내지 99.99중량%로 포함될 수 있으며, 바람직하게는 0.1중량% 내지 90중량%, 보다 바람직하게는 0.1중량% 내지 70중량%, 더욱 바람직하게는 0.1중량% 내지 50중량%로 포함될 수 있으나, 이에 한정되지 않으며 투여 대상의 상태, 구체적인 병증의 종류, 진행 정도 등에 따라 다양하게 변경될 수 있다. 필요한 경우, 약학적 조성물의 전체 함량으로도 포함될 수 있다.
즉, 본 발명의 약학적 조성물의 약학적 유효량, 유효 투여량은 약학적 조성물의 제제화 방법, 투여 방식, 투여 시간 및/또는 투여 경로 등에 의해 다양해질 수 있으며, 약학적 조성물의 투여로 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 투여 대상이 되는 개체의 종류, 연령, 체중, 일반적인 건강 상태, 질병의 증세나 정도, 성별, 식이, 배설, 해당 개체에 동시 또는 이시에 함께 사용되는 약물 기타 조성물의 성분 등을 비롯한 여러 인자 및 의약 분야에서 잘 알려진 유사 인자에 따라 다양해질 수 있으며, 당해 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 목적하는 치료에 효과적인 투여량을 용이하게 결정하고 처방할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 약학적 조성물의 일일 투여량은 약 0.01 내지 1,000mg/kg이고, 바람직하게는 0.1 내지 100mg/kg이며, 하루 일회 내지 수회에 나누어 투여할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 투여는 하루에 1회 투여될 수 있고, 수 회에 나누어 투여될 수도 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양으로 투여할 수 있으며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
한편, 본 발명은 상기 병풀 추출물을 함유하는 항산화용, 피부염증 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다. 하기 실시예에 따르면, 본 발명 병풀 추출물은 항산화 효능 및 항염증 효능이 우수하다.
이때, 상기 피부염증 예방 또는 개선용 화장료 조성물에 있어, 상기 피부염증은, 일 예로 아토피성 피부염(atopic dermatitis), 접촉성 피부염(contact dermatitis), 지루성 피부염(seborrhea) 및 여드름 중 선택되는 어느 하나인 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않으며 피부에서 일어나는 염증성 반응을 수반하는 모든 피부 염증성 질환을 제한 없이 포함할 수 있다.
이때, 상기 항산화용 화장료 조성물은, 바람직하게는 활성산소에 의해 유발되는 피부 노화를 예방하기 위해 사용하는 것일 수 있다. 일반적으로 화장품의 항산화제라 함은 산화작용으로 손상된 피부 기능과 구조가 파괴되고 소진되는 현상을 상당 정도 감소시키거나 예방하는 능력을 갖고 있고, 자외선 노출로 인해 손상된 피부를 회복시켜주는 것을 목적으로 한다.
활성산소종은 피부 세포 및 조직 손상을 주도하여 노화, 특히 피부노화의 원인 물질로 작용하고 있다. 이들은 항산화 효소와 비효소적 항산화제들로 구성된 항산화 방어망을 파괴함으로써 산화제/항산화제 균형을 산화상태 쪽으로 기울게 한다. 그렇게 계속된 산화적 스트레스는 피부의 과잉 색소침착, 지질 과산화, 단백질 산화, 간질 성분을 파괴시키는 단백질 분해효소의 활성화, 탄력 섬유인 콜라겐과 엘라스틴의 사슬절단 및 비정상적인 교차결합, 히아루론산 사슬의 절단, 멜라닌 생성반응 촉진, DNA 산화와 같은 생체구성성분들의 손상을 야기시킨다. 그러다가 결국에는 탄력감소, 주름살 및 기미, 주근깨 등으로 특징 지워지는 피부노화가 가속화된다.
따라서, 상기 활성산소에 의해 유발되는 피부 노화는, 바람직하게는 피부 주름, 피부 탄력 저하, 피부의 과잉 색소 침착 및 피부 보습력 저하 중 선택되는 어느 하나 이상으로 특정될 수 있다.
한편, 본 발명의 병풀 추출물을 함유하는 화장료 조성물에서 상기 병풀 추출물은 액상 중량으로서는 화장료 조성물 총 중량에 대하여 바람직하게는 0.1중량% 내지 30.0중량%, 보다 바람직하게는 0.1중량% 내지 20.0중량%로 포함될 수 있다.
한편, 본 발명의 변풀 추출물을 함유하는 화장료 조성물에서 상기 병풀 추출물은 농축 중량으로서는 화장료 조성물 총 중량에 대하여 바람직하게는 0.01중량% 내지 10중량%, 보다 바람직하게는 0.01중량% 내지 5중량%, 가장 바람직하게는 0.01중량% 내지 3중량%로 포함될 수 있다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 본 발명의 병풀 추출물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함될 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체가 포함될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 팩, 마사지크림 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 제형 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비 함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.
한편, 본 발명은 상기 병풀 추출물을 함유하는 신경 세포 보호용, 항산화용, 염증질환 개선용 식품 조성물을 제공한다. 하기 실시예에 따르면, 본 발명의 병풀 추출물은 신경 세포 보호 효능, 항산화 효능 및 항염증 효능이 우수하다.
본 발명의 용어, "개선"이란, 본 발명의 조성물의 투여로 염증질환이 호전 또는 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 식품 조성물은 일 예로, 면류, 껌류, 유제품류, 아이스크림류, 육류, 곡류, 카페인 음료, 일반음료, 초콜릿, 빵류, 스낵류, 과자류, 사탕, 피자, 젤리, 알코올성 음료, 술, 건강기능식품 중 선택되는 어느 하나의 형태로 제조된 것일 수 있으나, 반드시 이에 한정되는 것은 아니다.
이하, 본 발명의 내용을 하기 실시예 및 실험예를 통하여 보다 상세하게 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예 및 실험예에만 한정되는 것은 아니고 그와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.
[실시예 1: 병풀 재배]
1-1) 스마트팜 수경재배시설에서 병풀 재배
LED, 온도, 습도, CO2 농도, 양액 농도 등이 자동 제어되는 완전제어형 4단 스마트팜 수경 재배시설을 사용하여, 제주에서 자생하던 병풀을 재배하였다.
구체적으로, 재배랙에 15cm 간격으로 병풀 자묘를 정식하여 수경 재배하였다. LED는 태양광과 유사한 full-spectrum LED를 사용하였고, 광합성 광량자속 밀도(photosynthetic photon flux density, PPFD)는 185 μmol/m2/s으로 유지시켰다. 내기 온도는 25±1℃, 습도는 65±5%로 설정하였고, CO2는 900 ppm으로 유지시켰다. 양액은 KAST 엽채류 양액을 구매하여 사용하였는데, 전기전도도(electric conductivity, EC)는 1.5 dS/m, pH는 5.5∼6.5, 수온은 17~22℃이 되도록 설정하여 희석하고, 센서를 통해 자동으로 분사되도록 하였다. 이후, 정식한 후 6주가 지난 시점에 수확을 실시하였다 (도 1).
1-2) 노지에서 병풀 재배
노지에서 30 cm x 15 cm 간격으로 근경을 정식한 후, 7일 간격으로 급수 및 제초를 진행하였다. 정식한 후 6주가 지난 시점에 수확을 실시하였다 (도 1).
[실시예 2: 병풀 추출물 제조]
상기 실시예 1에서 수확한 병풀의 지상부(잎, 줄기)를 정제수에 2회 세척하고 60℃ 열풍건조기(BioFree, Seoul, Korea)로 15시간 건조하였다. 20 중량 배수의 70% 에탄올(Daejung, Siheung, Korea)을 혼합한 후, 환류냉각기가 달린 추출기를 사용하여 80℃에서 3시간 동안 추출하였다. 이후, 여과지(Whatman, no. 1)를 사용하여 침전물을 제거하고, 60℃에서 감압농축기를 사용하여 20 Brix의 농도로 농축한 후, 48시간 동안 동결 건조(Ilshin, Dongducheon, Korea)하여 스마트팜 수경재배 병풀 추출물과 노지 재배 병풀 추출물을 각각 제조하였다.
[실험예 1: 스마트팜 수경재배 병풀의 아시아티코사이드 함량 확인]
아시아티코사이드(asiaticoside)는 병풀의 대표적인 유용성분으로, 항산화, 항염증, 상처 치유, 치매 개선, 비만 억제, 피부 재생, 상처 치유 등 다양한 효능이 있는 성분으로 알려져 있다. 본 실험예에서는 상기와 같은 아시아티코사이드(asiaticoside)를 지표성분으로 설정하여, 병풀 재배방법 차이에 따른 함량 차이를 확인하고자 했다.
이를 위해, 상기 실시예 2에서 제조한 병풀 추출물을 70% 에탄올에 희석하고, 0.45 μm 필터(syringe filter)로 여과한 후, HPLC 분석하여 아시아티코사이드(asiaticoside) 함량을 측정하였다 (표 1).
물질 함량(mg/g)
아시아티코사이드 스마트팜 수경재배 병풀 추출물 노지 재배 병풀 추출물
49.75±0.23 22.38±0.14
상기 표 1을 보면, 노지 재배 병풀 추출물 대비 스마트팜 수경 재배 병풀 추출물이 아시아티코사이드(asiaticoside) 함량이 더욱 높은 것을 확인할 수 있다.
[실험예 2: 스마트팜 수경재배 병풀 추출물의 항염 효능 확인]
본 실험예에서는 스마트팜 수경재배 병풀 추출물의 우수한 항염 효능을 확인하고자 했다. 이를 위해, Mouse macrophage cell(마우스 대식세포)인 RAW 264.7 cell에, 상기 실시예 2에서 제조한 병풀 추출물을 첨가하고, LPS를 처리하여 염증 반응을 유도한 후, 염증 반응의 지표가 되는 NO 및 염증성 사이토카인의 발현량을 측정하였고, 비교하였다.
2-1) 대식세포 준비
Mouse macrophage cell(마우스 대식세포)인 RAW 264.7 cell 분양받아 준비하였다. RAW 264.7 cell을 10% FBS와 1% P/S가 함유된 DMEM 배지를 사용하여 37℃, 5% CO2 incubator(Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA)에서 배양하였다.
2-2) 세포독성 확인
상기 실시예 2에서 제조한 병풀 추출물의 세포독성을 확인하기 위해, RAW 264.7 cell에 대하여 diphenyl tetrazolium bromide(MTT) assay를 실시하였다.
구체적으로, 96 well plate에 RAW 264.7 cell을 2×104 cells/well로 분주하고 24시간 동안 37℃, 5% CO2 incubator에 배양하였다. 이후, 상등액을 제거하고, 상기 실시예 2에서 제조한 병풀 추출물을 70% 에탄올로 희석하여 첨가하였다. 24시간 후, MTT 시약(5 mg/mL in PBS)을 각 well에 10 μL 씩 첨가하고 incubator에서 4시간 동안 반응시켰다. 이후 상등액을 제거하고, DMSO 100 μL를 넣고, 실온에 10분간 반응시킨 후, microplate reader(SpectraMax® ABS Plus, Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)를 이용하여 540 nm 흡광도를 확인하였다.
이를 통해, 스마트팜 재배 병풀 추출물과 노지 재배 병풀 추출물은 실험된 모든 농도(1.5625~200 ㎍/mL) 내에서 세포독성이 없는 것을 확인할 수 있었다.
2-3) 항염 효능 확인
먼저 24 well plate에 RAW 264.7 cell을 3×105 cells/well로 분주하고 24시간 배양하였다. 상등액을 모두 제거한 후, 상기 실시예 2에서 제조한 병풀 추출물을 70% 에탄올로 희석하여 첨가하였다. 1시간이 지난 후, lipopolysaccharide(LPS)를 1μg/mL 처리하고, 37℃, 5% CO2 incubator에서 24시간 동안 배양하고 상등액을 수득하였다.
NO 발현량 측정을 위해, 96 well plate에 상기 상등액 100 μL와 Griess reagent(Sigma- Aldrich, St. Louis, MO, USA) 100 μL를 혼합하고 실온에서 10분간 반응시킨 후, 540 nm에서 흡광도를 측정하여 상대적인 NO 농도를 계산하였다 (도 2).
도 2를 보면, 스마트팜 수경재배 병풀 추출물을 처리한 군에서, NO 농도가 더욱 낮은 것을 확인할 수 있다. 상기와 같은 결과는, 노지 재배 병풀 추출물 대비 스마트팜 수경재배 병풀 추출물의 항염 효능이 더욱 우수하다는 것을 의미한다.
한편, 염증성 사이토카인 발현량을 측정하기 위해, 상기 상등액에 ELISA kit를 사용하여, TNF-α와 IL-6의 상대적 발현량을 측정하였다 (도 3, 도 4).
도 3 및 도 4를 보면, 스마트팜 수경재배 병풀 추출물을 처리한 군에서, TNF-α와 IL-6 발현량이 더욱 낮은 것을 확인할 수 있다. 상기와 같은 결과는, 노지 재배 병풀 추출물 대비 스마트팜 수경재배 병풀 추출물의 항염 효능이 더욱 우수하다는 것을 의미한다.
[실험예 3: 스마트팜 수경재배 병풀 추출물의 항산화 효능 및 신경 세포 보호 효능 확인]
본 실험예에서는 스마트팜 수경재배 병풀 추출물의 우수한 항산화 효능 및 신경 세포 보호 효능을 확인하고자 했다.
3-1) 세포 준비
human neuroblastoma cell(인간 신경모세종세포)인 SH-SY5Y cell을 분양받아 준비하였다. SH-SY5Y cell을 10% FBS와 1% P/S가 함유된 DMEM 배지를 사용하여 37℃, 5% CO2 incubator(Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA)에서 배양하였다.
3-2) H2O2 처리에 따른 세포 생존율 확인
96 well plate에 SH-SY5Y cell을 5×104 cells/well로 분주하고, 24시간 동안 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양하였다. 상등액을 제거하고, H2O2를 농도별로 처리한 후, 24시간 동안 배양하였다. 각 well에 MTT 시약을 10 μL씩 첨가하고, incubator에서 4시간 동안 배양하였다. DMSO 100 μL를 처리하고, 실온에서 10분간 반응시킨 후, 540 nm 흡광도를 측정하여, 세포 생존율을 확인하였다.
이를 통해, H2O2를 200 μM 농도로 처리하는 경우 신경세포 생존율이 50%가 되는 것을 확인할 수 있다. 따라서, 이하 실험에서는 H2O2을 200 μM 농도로 처리하는 경우를 IC50으로 설정하여 실험하였다.
3-3) 병풀 추출물 및 H2O2 처리에 따른 세포 생존율 확인(신경 세포 보호 효능 확인)
96 well plate에 SH-SY5Y cell을 5×104 cells/well로 분주하고, 24시간 동안 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양하였다. 상등액을 제거하고, H2O2를 200 μM 농도로 처리하여 산화스트레스를 유발시켰다. 1시간 후, 상기 실시예 2에서 제조한 병풀 추출물을 70% 에탄올로 희석하여 첨가하고, 24시간 동안 배양하였다. 각 well에 MTT 시약을 10 μL씩 첨가하고, incubator에서 4시간 동안 배양하였다. DMSO 100 μL를 처리하고, 실온에서 10분간 반응시킨 후, 540 nm 흡광도를 측정하여, 신경세포 생존율을 확인하였다 (도 5).
도 5를 보면, 스마트팜 수경재배 병풀 추출물을 처리한 군에서, 세포 생존율이 더욱 높은 것을 확인할 수 있다. 상기와 같은 결과는, 노지 재배 병풀 추출물 대비 스마트팜 수경재배 병풀 추출물의 신경세포에 대한 보호 효능이 더욱 우수하다는 것을 의미한다.
3-4) 병풀 추출물의 항산화 활성 측정
상기 실시예 2에서 제조한 병풀 추출물의 총 폴리페놀(polyphenol) 함량, DPPH ridical 소거능, SOD 활성을 측정 및 비교하여, 스마트팜 수경재배 병풀 추출물의 우수한 항산화 활성을 확인하였다.
구체적으로, 총 폴리페놀 함량은 하기와 같이 확인하였다. 96 well plate에 상기 실시예 2에서 제조한 병풀 추출물을 70% 에탄올로 희석하고, 160 μL씩 분주하였다. 2N Folin & Ciocalteu’s phenol reagent(Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA)와 정제수를 1:2의 비율로 섞은 용액을 10 μL 씩 첨가하여 3분 동안 반응시켰다. 이후 1.8 M sodium carbonate를 30 μL를 첨가하여 40분간 반응시키고, 765 nm 흡광도를 측정하였다 (표 2).
DPPH radical 소거능은 하기와 같이 확인하였다. 96 well plate에 농도별 상기 실시예 2에서 제조한 병풀 추출물을 70% 에탄올로 희석하고, 100 μL를 분주하였다. 에탄올에 용해한 DPPH(0.15 mM) 50 μL를 첨가하여 10분간 반응시켰다. 이후 microplate reader를 이용하여 517 nm 흡광도를 측정하여 백분율(%)로 나타내었다.
SOD 활성은 하기와 같이 확인하였다. 실시예 2에서 제조한 병풀 추출물을 70% 에탄올로 희석하고, SOD kit의 protocol에 따라 실험한 후, 450 nm 흡광도를 측정하여, 백분율(%)로 나타내었다.
병풀 추출물 농도
(μg/mL)
총 폴리페놀 함량
(μg/mL)
DPPH radical 소거능
(%)
SOD 활성
(%)
스마트팜 수경 재배 노지 재배 스마트팜 수경 재배 노지 재배 스마트팜 수경 재배 노지 재배
25 2.25±0.09 1.02±0.01 25.65±1.41 15.75±3.73 4.80±0.50 0.97±0.00
50 4.08±0.03 2.01±0.05 32.59±1.59 18.55±1.19 9.00±1.26 2.79±0.17
100 7.73±0.04 3.73±0.02 43.29±2.94 23.09±2.51 15.22±0.67 8.32±0.95
상기 표 2를 보면, 노지 재배 병풀 추출물 대비 스마트팜 수경 재배 병풀 추출물이 총 폴리페놀 함량이 높고, DPPH radical 소거능 및 SOD 활성이 더욱 높게 나타나는 것을 확인할 수 있다. 상기와 같은 결과는 노지 재배 병풀 추출물 대비 스마트팜 수경 재배 병풀 추출물의 항산화 활성이 더욱 우수하다는 것을 의미한다.

Claims (10)

  1. PPFD(Photosynthetic Photon Flux Density) 175~200 μmol/m2/s의 조명 및 전기전도도가 1.2~1.8 dS/m이고, 수온이 17~22℃이며, pH가 5.5∼6.5인 양액을 이용하여, 24~26℃의 온도, 60~70%의 습도, 이산화탄소 농도 850~950ppm의 내기(內氣) 조건에서 담액경 방식으로 수경재배하여 노지재배에 비하여 아시아티코사이드 함량이 증진된 병풀을 재배하는 방법.
  2. PPFD(Photosynthetic Photon Flux Density) 175~200 μmol/m2/s의 조명 및 전기전도도가 1.2~1.8 dS/m이고, 수온이 17~22℃이며, pH가 5.5∼6.5인 양액을 이용하여, 24~26℃의 온도, 60~70%의 습도, 이산화탄소 농도 850~950ppm의 내기(內氣) 조건에서 담액경 방식으로 수경재배하여 노지재배에 비하여 아시아티코사이드 함량이 증진된 병풀을 재배한 후, 상기 아시아티코사이드 함량이 증진된 병풀에 에탄올을 가하여 아시아티코사이드의 함량이 증진된 병풀 추출물 제조방법.
  3. 제2항에 있어서,
    상기 아시아티코사이드 함량이 증진된 병풀을 50~70℃에서 12~18시간 동안 건조하는 단계 (a); 및
    상기 단계 (a)의 건조된 병풀에 에탄올을 가하여 70~90℃에서 1~5시간 동안 추출하는 단계 (b);를 통해 아시아티코사이드의 함량이 증진된 병풀 추출물 제조방법.
  4. PPFD(Photosynthetic Photon Flux Density) 175~200 μmol/m2/s의 조명 및 전기전도도가 1.2~1.8 dS/m이고, 수온이 17~22℃이며, pH가 5.5∼6.5인 양액을 이용하여, 24~26℃의 온도, 60~70%의 습도, 이산화탄소 농도 850~950ppm의 내기(內氣) 조건에서 담액경 방식으로 수경재배하여 노지재배에 비하여 아시아티코사이드 함량이 증진된 병풀을 재배한 후, 상기 아시아티코사이드 함량이 증진된 병풀에 에탄올을 가하여 아시아티코사이드의 함량이 증진된 병풀 추출물을 제조하는 과정을 포함하는 것을 특징으로 하는 패혈증(sepsis), 파종혈관내응고(disseminated intravascular coagulation; DIC), 동맥경화(atherosclerosis), 퇴행성 관절염(degenerative arthritis), 치주염(periodontitis), 임파선염(lymphadenopathy), 림프관염(lymphangitis), 제1형 당뇨병(type 1 diabetes), 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis), 다발경화증(multiple sclerosis), 암(cancer), 대사성 질환(metabolic disease), 신경퇴행성 질환(neurodegenerative disease), 전신경화증(systemic sclerosis), 다발성근염(polymyositis),피부근염(polymyositis), 봉입체근염(inclusion body myositis), 알러지(allergy), 알츠하이머병(alzheimer's disease), 강직성 척추염(ankylosing spondylitis), 천식(asthma), 손목 터널 증후군(carpal tunnel syndrome), 셀리악병(celiac disease), 크론병(crohn's disease), 게실염(intestinal diverticulum), 습진(eczema), 섬유증(fibrosis), 루푸스(systemic lupus erythematosus), 췌장염(pancreatitis), 파킨슨병(Parkinson's disease), 건선(psoriasis), 류마티스성 다발근통(Polymyalgia rheumatica), 공피증(dermatosclerosis), 혈관염(vasculitis), 위염(gastritis), 피부염(dermatitis), 척수염(myelitis), 구내염(stomatitis), 관절염(arthritis), 비염(rhinitis), 편도염(tonisiltis), 결막염(conjunctivitis), 방광염(cystitis), 신장염(nephritis), 췌장염(pancreatitis), 간염(hepatitis), 충수염(appendicitis), 폐렴(pneumonia) 및 장염(gastroenteritis) 중 선택되는 어느 하나인 염증질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물의 제조방법.
  5. PPFD(Photosynthetic Photon Flux Density) 175~200 μmol/m2/s의 조명 및 전기전도도가 1.2~1.8 dS/m이고, 수온이 17~22℃이며, pH가 5.5∼6.5인 양액을 이용하여, 24~26℃의 온도, 60~70%의 습도, 이산화탄소 농도 850~950ppm의 내기(內氣) 조건에서 담액경 방식으로 수경재배하여 노지재배에 비하여 아시아티코사이드 함량이 증진된 병풀을 재배한 후, 상기 아시아티코사이드 함량이 증진된 병풀에 에탄올을 가하여 아시아티코사이드의 함량이 증진된 병풀 추출물을 제조하는 과정을 포함하는 것을 특징으로 하는 염증질환 개선용 식품 조성물 제조방법.
  6. PPFD(Photosynthetic Photon Flux Density) 175~200 μmol/m2/s의 조명 및 전기전도도가 1.2~1.8 dS/m이고, 수온이 17~22℃이며, pH가 5.5∼6.5인 양액을 이용하여, 24~26℃의 온도, 60~70%의 습도, 이산화탄소 농도 850~950ppm의 내기(內氣) 조건에서 담액경 방식으로 수경재배하여 노지재배에 비하여 아시아티코사이드 함량이 증진된 병풀을 재배한 후, 상기 아시아티코사이드 함량이 증진된 병풀에 에탄올을 가하여 아시아티코사이드의 함량이 증진된 병풀 추출물을 제조하는 과정을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부염증 예방 또는 개선용 화장료 조성물 제조방법.
  7. PPFD(Photosynthetic Photon Flux Density) 175~200 μmol/m2/s의 조명 및 전기전도도가 1.2~1.8 dS/m이고, 수온이 17~22℃이며, pH가 5.5∼6.5인 양액을 이용하여, 24~26℃의 온도, 60~70%의 습도, 이산화탄소 농도 850~950ppm의 내기(內氣) 조건에서 담액경 방식으로 수경재배하여 노지재배에 비하여 아시아티코사이드 함량이 증진된 병풀을 재배한 후, 상기 아시아티코사이드 함량이 증진된 병풀에 에탄올을 가하여 아시아티코사이드의 함량이 증진된 병풀 추출물을 제조하는 과정을 포함하는 것을 특징으로 하는 항산화용 식품 조성물 제조방법.
  8. PPFD(Photosynthetic Photon Flux Density) 175~200 μmol/m2/s의 조명 및 전기전도도가 1.2~1.8 dS/m이고, 수온이 17~22℃이며, pH가 5.5∼6.5인 양액을 이용하여, 24~26℃의 온도, 60~70%의 습도, 이산화탄소 농도 850~950ppm의 내기(內氣) 조건에서 담액경 방식으로 수경재배하여 노지재배에 비하여 아시아티코사이드 함량이 증진된 병풀을 재배한 후, 상기 아시아티코사이드 함량이 증진된 병풀에 에탄올을 가하여 아시아티코사이드의 함량이 증진된 병풀 추출물을 제조하는 과정을 포함하는 것을 특징으로 하는 항산화용 화장료 조성물 제조방법.
  9. PPFD(Photosynthetic Photon Flux Density) 175~200 μmol/m2/s의 조명 및 전기전도도가 1.2~1.8 dS/m이고, 수온이 17~22℃이며, pH가 5.5∼6.5인 양액을 이용하여, 24~26℃의 온도, 60~70%의 습도, 이산화탄소 농도 850~950ppm의 내기(內氣) 조건에서 담액경 방식으로 수경재배하여 노지재배에 비하여 아시아티코사이드 함량이 증진된 병풀을 재배한 후, 상기 아시아티코사이드 함량이 증진된 병풀에 에탄올을 가하여 아시아티코사이드의 함량이 증진된 병풀 추출물을 제조하는 과정을 포함하는 것을 특징으로 하는 알츠하이머병(Alzheimer's disease), 파킨슨병(Parkinson'sdisease), 루게릭병(Lou Gehrig disease), 헌팅톤병(Huntington's disease), 다발성 경화증(Multiplesclerosis), 뇌졸중(stroke), 및 치매(dementia) 중 선택되는 어느 하나인 퇴행성 신경질환 예방 또는 치료용 약학 조성물 제조방법.
  10. PPFD(Photosynthetic Photon Flux Density) 175~200 μmol/m2/s의 조명 및 전기전도도가 1.2~1.8 dS/m이고, 수온이 17~22℃이며, pH가 5.5∼6.5인 양액을 이용하여, 24~26℃의 온도, 60~70%의 습도, 이산화탄소 농도 850~950ppm의 내기(內氣) 조건에서 담액경 방식으로 수경재배하여 노지재배에 비하여 아시아티코사이드 함량이 증진된 병풀을 재배한 후, 상기 아시아티코사이드 함량이 증진된 병풀에 에탄올을 가하여 아시아티코사이드의 함량이 증진된 병풀 추출물을 제조하는 과정을 포함하는 것을 특징으로 하는 신경 세포 보호용 식품 조성물 제조방법.
KR1020230041501A 2023-03-29 2023-03-29 아시아티코사이드 함량이 증대된 병풀 추출물 및 이의 용도 KR102576779B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020230041501A KR102576779B1 (ko) 2023-03-29 2023-03-29 아시아티코사이드 함량이 증대된 병풀 추출물 및 이의 용도

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020230041501A KR102576779B1 (ko) 2023-03-29 2023-03-29 아시아티코사이드 함량이 증대된 병풀 추출물 및 이의 용도

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR102576779B1 true KR102576779B1 (ko) 2023-09-11

Family

ID=88020177

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020230041501A KR102576779B1 (ko) 2023-03-29 2023-03-29 아시아티코사이드 함량이 증대된 병풀 추출물 및 이의 용도

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR102576779B1 (ko)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100444330B1 (ko) 2002-07-10 2004-08-16 고경민 병풀 식물체의 재배방법
KR102013274B1 (ko) 2019-03-12 2019-08-22 (주)클래시스 집속초음파 기술을 이용하여 수득된 병풀 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물
KR20200042618A (ko) * 2018-10-16 2020-04-24 주식회사 제넨셀 병풀 추출물을 포함하는 망막 질환의 예방 또는 치료용 조성물
KR20200104158A (ko) * 2019-02-26 2020-09-03 주식회사 아미코스메틱 아쿠아포닉스 재배기술을 이용한 병풀 추출물을 포함하는 화장료 조성물

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100444330B1 (ko) 2002-07-10 2004-08-16 고경민 병풀 식물체의 재배방법
KR20200042618A (ko) * 2018-10-16 2020-04-24 주식회사 제넨셀 병풀 추출물을 포함하는 망막 질환의 예방 또는 치료용 조성물
KR20200104158A (ko) * 2019-02-26 2020-09-03 주식회사 아미코스메틱 아쿠아포닉스 재배기술을 이용한 병풀 추출물을 포함하는 화장료 조성물
KR102013274B1 (ko) 2019-03-12 2019-08-22 (주)클래시스 집속초음파 기술을 이용하여 수득된 병풀 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101828584B1 (ko) 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합추출물을 포함하는 항산화 또는 미백용 조성물
KR101781027B1 (ko) 구기자 캘러스 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부상태 개선용 조성물
JP4948044B2 (ja) プラーク形成抑制剤、または抗う蝕菌剤
KR101156623B1 (ko) 항균제, 이를 포함하는 구강용 조성물 및 음식품
KR102065185B1 (ko) 항균, 항염, 피부주름 개선, 및 피부 미백 활성을 갖는 피부상태 개선용 조성물
KR20170017318A (ko) 수경재배 인삼 잎 추출물을 함유하는 아토피 피부염 개선용 화장료조성물
KR20240004199A (ko) 올벚나무 추출물, 이의 분획물을 포함하는 항균용 조성물
KR101591499B1 (ko) 아마란스 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 피부 미백용 조성물
US20200078290A1 (en) Cosmetic Composition Comprising Extract Of Medicinal Herbs As Active Ingredient
KR101420211B1 (ko) 새싹추출물 및 새순추출물을 이용한 피부 외용제 조성물
KR102576779B1 (ko) 아시아티코사이드 함량이 증대된 병풀 추출물 및 이의 용도
KR20100089409A (ko) 여드름 개선용 화장료 조성물
KR101178228B1 (ko) 소취제, 이를 포함하는 구강용 조성물 및 음식품
WO2019009663A1 (ko) 무좀 예방 및 개선용 조성물
KR102527379B1 (ko) 클로로겐산이 증대된 몰로키아 추출물 및 이의 용도
KR101889331B1 (ko) 섬오가피나무 줄기 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 화합물을 유효성분으로 함유하는 항산화, 항염증 또는 항균용 조성물
KR20150101162A (ko) 개망초 (Erigeron annuus (L.) Pers.) 추출물 또는 브레비스카핀 (breviscapine) 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 항염 조성물
KR102154139B1 (ko) 고로쇠나무 수액의 발효액, 카카오닙스 추출물 및 석류피 추출물을 포함하는 조성물
KR20130136753A (ko) 박태기나무 또는 붉은호장근 추출물을 포함하는 미백 화장료 조성물
KR20140011583A (ko) 대두 태좌 조직 배양물 또는 그 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물
KR101797843B1 (ko) 섬오가피나무 줄기 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 화합물을 유효성분으로 함유하는 항염증 또는 항균용 조성물
KR102604076B1 (ko) 수수꽃다리 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증 및 피부 재생용 조성물
KR100584039B1 (ko) 덩굴차 추출물을 이용한 아토피성 피부염 치료용 조성물및 화장품
KR102448072B1 (ko) 항산화 활성을 가지는 병꽃나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부염 개선용 조성물
KR102105166B1 (ko) 솜다리의 기내배양을 이용한 대량 생산방법 및 솜다리 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 항염증 및 항주름용 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant