KR102511165B1 - 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유한 흑미 유산균 발효물 성분을 포함하는 골 질환 예방 및 치료용 조성물 - Google Patents
아로니아 및 블루베리 추출물을 함유한 흑미 유산균 발효물 성분을 포함하는 골 질환 예방 및 치료용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미(black rice)를 유산균으로 발효시킨 발효 추출물의 골다공증 예방, 개선 및 치료 용도에 관한 것으로, 구체적으로, 본 발명의 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미의 발효 추출물은 혈청 ALP 활성 및 혈청 인 함량 증가를 억제하고, 혈청 칼슘 수준 감소를 억제하는 효과를 나타냄으로써, 골다공증을 비롯한 골 질환의 예방, 치료 또는 개선에 유용하게 사용할 수 있다.
Description
본 발명은 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유한 흑미 유산균 발효물 성분을 포함하는 골 질환 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.
골은 석회화된 견고한 표면과 골수로 불리는 내부의 세포 성분이 결합된 특수조직이다. 생리적으로 상이한 이 두 구조의 결합은 일생을 두고 지속되는 골의 재형성(bone remodeling) 과정에 기인한 것인데，이는 골에 가해지는 호르몬이나 물리적 자극에 의해 골수에 있는 파골세포(osteoclast)들의 골의 표면으로 모여 골을 파들어가면서 파괴하는 골흡수(bone resorption)가 일어난 자리에 모여든 조골세포(osteoblast)에 의한 골기질의 합성(bone formation)으로 설명된다.
골은 조골세포와 파골세포 활성의 균형을 유지함으로 골량이 일정하게 유지되며 이들의 활성으로 골의 재생이 지속적으로 일어난다. 그러나 조골세포보다 파골세포의 활성이 증가할 때 골량이 감소하여 골다공증을 유발한다.
골 질환 중 현재 가장 중요한 사회적 문제 중 하나인 골다공증은 낮은 골양과 골기질의 파괴로 골절의 위험과 골의 취약성이 증가되는 골격질환을 말한다. 골다공증은 폐경기 이후 여성에서 특히 빈번하게 발생하며 이는 에스트로겐의 분비 감소에 의하여 뼈의 양이 현저하게 감소되는 질환이다. 뼈의 양 감소는 개인차, 또는 다른 여러 가지 원인으로 인해 그 정도의 차이가 있지만, 병적으로 과다하게 뼈의 양이 감소하여 일정치 이하로 저하되면 작은 충격에도 쉽게 골절이 생기게 된다. 골다공증은 그 증세 자체보다는 뼈의 약화에 따라 초래되는 각종 골절, 특히 대퇴골 골절 또는 척추골절 등으로 장기간 활동을 제한하여 건강한 생활을 영위할 수 없고, 결과적으로 노인층 사망의 15%에 대한 원인이 되는 것으로 알려져 있다.
현재 골다공증 치료제로 사용되고 있는 물질로는 에스트로겐(estrogen), 남성화 스테로이드 호르몬(androgenic anabolic steroid), 칼슘 제제, 인산염, 불소 제제, 이프리플라본(Ipriflavone), 비타민 D3 등이 있다. 에스트로겐이나 골다공증 치료제로 알려진 Estradiol은 조골세포의 세포고사를 억제하여 세포의 생존기간을 증가시키고 파골세포의 세포고사를 촉진하여 세포의 생존기간을 감소시켜 폐경증상의 치료와 골밀도 유지에 어느 정도 효과적인 방법이나 유방암, 자궁내막 증식증 등을 유발하는 부작용이 있다.
골다공증은 약물의 단기 투여만으로는 치료할 수 없고 약물의 장기 투여가 필수적인 질환이므로, 약물을 장기 투여할 때에도 상기와 같은 부작용이 없고 에스트로겐을 대체할 수 있을 만큼 우수한 약효를 갖는 새로운 물질의 개발이 요구되고 있다. 이에 따라, 콩 및 콩 가공품 등 식품에 함유된 제니스테인(genistein)이나 다이드제인(daidzein) 등의 피토에스트로겐(phytoestrogen)을 응용하여 장기간 복용할 수 있고 상대적으로 부작용이 적은 골다공증 예방 및 치료제를 개발하고자 많은 연구가 진행중이다.
이에, 본 발명자들은 골다공증을 포함한 골 질환을 예방하고 치료할 수 있는 부작용이 적은 골 질환 치료제를 개발하기 위한 연구를 수행한 결과, 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유한 흑미 발효 추출물이 골 손실 억제, 골밀도 감소 억제 및 파골세포 분화능 억제 효과를 나타냄으로서 골다공증을 비롯한 골 질환 예방 또는 치료 효과가 우수함을 알아내고 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미(black rice)의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 골 질환의 예방, 치료 또는 개선용 약학적, 건강기능식품 및 건강식품 조성물을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 다른 목적은 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미의 발효 추출물의 제조방법을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여,
본 발명은 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미(black rice)의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 골 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 흑미를 아로니아 및 블루베리 추출물에 침지하는 단계(단계 1); 상기 단계 1에서 처리된 흑미에 유산균을 접종하여 발효하는 단계(단계 2); 및 상기 단계 2에서 발효된 흑미를 건조 후 추출하는 단계(단계 3);를 포함하는 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미의 발효 추출물의 제조방법을 제공한다.
나아가, 본 발명은 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미(black rice)의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 골 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
더 나아가, 본 발명은 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미(black rice)의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 골 질환의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 따르면, 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미(black rice)의 발효 추출물은 뼈의 손실 억제, 골밀도 및 TRAP 효소의 감소 저해, 파골세포 분화 저해 효과를 나타내며, 혈청 ALP 활성 및 혈청 인 함량 증가를 억제하고, 혈청 칼슘 수준 감소를 억제하는 효과를 나타냄으로써, 골다공증 등 골 질환의 예방, 치료 또는 개선에 유용하게 사용될 수 있다.
도 1는 본 발명의 대조군(Con), 모의 대조군(Sham), 음성 대조군(NC), 양성 대조군(PC), 실시예 1의 흑미 발효 추출물 250mg/kg 처리군(LABB250), 흑미 발효 추출물 500mg/kg 처리군(LABB500) 및 비교예 1 내지 6 처리군에 대한 (A) 혈청 ALP(alkaline phosphatase) 활성 및 (B) 혈청 인 함량(phosphate conc.) 측정 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2은 본 발명의 대조군(Con), 모의 대조군(Sham), 음성 대조군(NC), 양성 대조군(PC), 실시예 1의 흑미 발효 추출물 250mg/kg 처리군(LABB250), 실시예 1의 흑미 발효 추출물 500mg/kg 처리군(LABB500) 및 비교예 1 내지 6 처리군에 대한 혈청 내 칼슘(Ca2+) 수준(μM) 측정 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2은 본 발명의 대조군(Con), 모의 대조군(Sham), 음성 대조군(NC), 양성 대조군(PC), 실시예 1의 흑미 발효 추출물 250mg/kg 처리군(LABB250), 실시예 1의 흑미 발효 추출물 500mg/kg 처리군(LABB500) 및 비교예 1 내지 6 처리군에 대한 혈청 내 칼슘(Ca2+) 수준(μM) 측정 결과를 나타낸 그래프이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
골 질환의 예방 또는 개선용 건강식품 및 건강기능식품 조성물
본 발명은 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미(black rice)의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 골 질환의 예방 또는 개선용 건강식품 및 건강기능식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미(black rice)의 발효 추출물은 흑미에 아로니아 및 블루베리 추출물이 스며들어 함유되게 한 뒤, 이 흑미에 유산균을 접종하여 발효시킨 후 추출한 추출물을 의미한다. 구체적으로, 흑미를 아로니아 및 블루베리 추출물에 침지하는 단계(단계 1); 상기 단계 1에서 처리된 흑미에 유산균을 접종하여 발효하는 단계(단계 2); 및 상기 단계 2에서 발효된 흑미를 건조 후 추출하는 단계(단계 3);를 포함하는 방법으로 제조되는 것일 수 있다. 이때, 상기 단계 2는, 아로니아 및 블루베리 추출물이 스며든 흑미만을 발효하는 것일 수 있고, 아로니아 및 블루베리 추출물을 새로 혼합한 다음 발효시키는 것일 수 있다. 이하, 상기 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미의 발효 추출물은 흑미 발효 추출물 또는 LABB라 표기하였다.
본 발명의 상기 흑미(black rice)의 학명은 Oryza sative L.이며, 태국이 원산으로 국내에서는 1991년부터 진도에서 본격적인 재배가 시작되어 왔다. 흑미에는 셀레늄이 다량 함유돼 있어, 암의 예방효과가 있다. 중국의 최신 문헌에는 직장암 환자 40명에게 흑미를 장기간 먹여 관찰한 결과 병세가 호전됐다는 연구 보고가 있다. 또한, 흑미가 암세포 제거와 위궤양 치료, 당뇨병 등에 효능이 있다는 연구 결과가 발표된 바 있다.
본 발명의 상기 아로니아(Aronia melanocarpa)은 장미과에 속하는 베리류로서, 동북 아메리카 및 동유럽에서 자생하고 있다. 검붉은색을 띠는 아로니아는 근래에는 전 세계에 널리 재배되고 있으며, 원예종에서 2품종간에 교배육종으로 재배되고 있다. 아로니아는 특히, 안토시아닌이 자연계 식물들 중에서 가장 높은 군에 속한다고 알려져있다. 이러한 아로니아는 연구를 통해 뛰어난 항산화 효과와 항염증과 면역의 증강에 효능을 보일 뿐만 아니라, 당뇨 및 각 종 심혈관계 질환과 향장 관련 효능에 대해서도 많은 연구가 이루어졌다.
본 발명의 상기 블루베리(Blueberry)는 진달래과 산앵도나무속의 관목으로 우리나라에는 정금나무, 산앵도나무 등이 있다. 북반구를 중심으로 150~200종 분포하고 있으며 현재 경제적으로 세계에서 사용되고 있는 것으로는 로부시 블루베리(Lowbush blueberry), 하이부시 블루베리(Highbush blueberry), 레비트아이 블루베리(Rabbiteye blueberry) 3품종이 주종을 이루고 있다. 블루베리는 시력개선효과, 망막의 변성과 백내장 방지 효과, 혈중콜레스테롤 및 혈당 감소시키는 효능을 가진다고 알려져 있다.
그러나, 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미를 유산균으로 발효시킨 발효 추출물의 골다공증 예방, 개선 또는 치료 효과에 대해서는 그 효능이 밝혀진 바가 없다.
본 발명에서 사용되는 용어 "추출물(extract)"은 추출 대상을 적절한 침출액으로 짜내고 침출액을 증발시켜 농축한 제제를 의미하는 것으로, 이에 제한되지는 않으나, 추출처리에 의해 얻어지는 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 이들의 조정제물 또는 정제물일 수 있다. 상기 흑미 발효 추출물은 통상의 기술분야에 공지된 일반적인 추출방법, 분리 및 정제방법을 이용하여 제조할 수 있다. 상기 추출방법으로는, 이에 제한되지는 않으나, 바람직하게 열탕 추출, 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 방법을 사용할 수 있다.
본 발명에서, 상기 추출용매는 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매 등을 사용할 수 있으며, 상기 유기용매는 탄소수 1 내지 4의 알코올이나, 에틸아세테이트 또는 아세톤 등의 극성용매, 헥산 또는 디크로로메탄의 비극성용매 또는 이들의 혼합용매를 사용할 수 있다. 또한, 바람직하게는 물, 탄소수 1 내지 탄소수 4의 알코올 또는 이들의 혼합용매를 사용할 수 있으며, 더 바람직하게는 물 및 탄소수 1 내지 탄소수 4의 알코올의 혼합용매를 사용할 수 있고, 보다 바람직하게는 물 및 에탄올 혼합용매를 사용할 수 있다. 본 발명의 일실시예에서는 상기 용매로서 70% 에탄올 수용액을 이용하여 추출한 뒤 감압 농축하여 흑미 발효 추출물을 제조하였다.
본 발명에 따른 상기 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유한 흑미 발효 추출물은 뼈의 손실을 억제 또는 회복시키고, 골밀도의 감소를 억제하여 골 질환에 대한 예방, 개선 또는 치료 효과를 나타내는 것일 수 있다.
본 발명에서, 상기 골 질환은 골다공증(osteoprosis), 골감소증(osteopenia), 골연화증(osteomalacia), 골이영양증(osteodystrophy), 구루병(rickets) 및 치주질환(periodontal disease)으로 이루어진 군에서 선택된 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예서는 본 발명에 따른 흑미 발효 추출물이 혈청 ALP 활성 및 혈청 인 함량 증가를 억제하고, 혈청 칼슘 수준의 감소를 억제하여 증가시키는 것을 확인하였다(실험예 2 내지 3 참조).
건강식품 및 건강기능식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 본 발명의 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유한 흑미 발효 추출물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 드링크제, 육류, 소시지, 빵, 비스킷, 떡, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 알코올 음료 및 비타민 복합제, 유제품 및 유가공 제품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품 및 건강기능식품을 모두 포함한다. 아울러 본 발명의 흑미 발효 추출물을 활성성분으로 포함하는 조성물은 당업자의 선택에 따라 건강기능식품에 함유될 수 있는 적절한 기타 보조 성분과 공지의 첨가제를 혼합하여 제조할 수 있다. 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림 류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 본 발명에 따른 추출물을 주성분으로 하여 제조한 즙, 차, 젤리 및 주스 등에 첨가하여 제조할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "건강기능식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 '기능성'이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 통상의 기술분야에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조 가능하며, 상기 제조시에는 통상의 기술분야에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 상기 건강기능식품의 제형 또한 건강기능식품으로 인정되는 제형이면 제한없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품용 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 본 발명의 건강기능식품은 골 질환 치료제의 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취가 가능하다.
본 발명의 조성물을 건강기능식품 조성물 또는 건강식품 조성물로 사용하는 경우, 상기 흑미 발효 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상의 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 상기 조성물은 유효성분 이외에 식품학적으로 허용가능한 식품보조첨가제를 포함할 수 있으며, 유효성분의 혼합량은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "식품보조첨가제"란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 건강기능식품 또는 건강식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 상기 예들에 의해 본 발명의 식품보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.
상기 외에 본 발명의 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유한 흑미 발효 추출물을 포함하는 건강식품 및 건강기능성식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강식품 및 건강기능성식품 조성물은 천연 과일쥬스 및 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미 발효 추출물을 포함하는 건강식품 및 건강기능성식품 조성물 100 중량부 당 0.1 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미의 발효 추출물의 제조방법
본 발명은 흑미를 아로니아 및 블루베리 추출물에 침지하는 단계(단계 1);
상기 단계 1에서 처리된 흑미에 유산균을 접종하여 발효하는 단계(단계 2); 및
상기 단계 2에서 발효된 흑미를 건조 후 추출하는 단계(단계 3);를 포함하는 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미의 발효 추출물의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 상기 단계 1의 아로니아 추출물 및 블루베리 추출물은, 아로니아 또는 블루베리로부터 용매추출하여 수득된 추출물을 그대로 사용하는 것일 수 있고, 바람직하게는 상기 아로니아 추출물 또는 블루베리 추출물을 증류수(물)와 혼합하여 녹인 혼합용액인 것일 수 있다. 상기 혼합용액은 전체 혼합용액 부피 대비 아로니아 및 블루베리 추출물이 1 내지 10%(w/v) 혼합된 혼합용액인 것일 수 있고, 바람직하게는 3 내지 7%(w/v) 혼합된 혼합용액인 것일 수 있다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 상기 단계 1은, 흑미 전체 중량 대비 1 내지 10배 부피에 해당하는 아로니아 및 블루베리 추출물을 사용하는 것일 수 있고, 바람직하게는 1 내지 5배 부피에 해당하는 아로니아 및 블루베리 추출물을 사용하는 것일 수 있고, 더 바람직하게는 1 내지 3배 부피에 해당하는 아로니아 및 블루베리 추출물을 사용하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
또한, 상기 아로니아 및 블루베리 추출물은 아로니아 및 블루베리를 각각 용매로 추출한 후 혼합한 추출물일 수 있다. 또한, 아로니아 또는 블루베리 추출물을 증류수(물)와 혼합하여 녹인 각각의 혼합용액을 제조하고 이를 혼합하여 제조된 것일 수 있고, 아로니아 및 블루베리 추출물을 혼합 후 증류수와 혼합하여 녹인 혼합용액일 수 있으며, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 상기 단계 1은, 흑미를 아로니아 및 블루베리 추출물에 10 내지 32시간, 바람직하게는 12 내지 28시간 침지하는 것일 수 있고, 침지한 다음 수분을 걸러내는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 상기 단계 2는, 단계 1에 의해 아로니아 및 블루베리 추출물이 스며든 흑미만을 발효하는 것일 수 있고, 상기 흑미에 아로니아 및 블루베리 추출물을 다시 새로 추가하여 혼합한 혼합물을 발효시키는 것일 수 있다. 이때, 상기 다시 추가되는 아로니아 및 블루베리 추출물은, 단계 1의 흑미 전체 중량 대비 1 내지 5배 부피에 해당하는 아로니아 및 블루베리 추출물을 추가하는 것일 수 있고, 바람직하게는 1 내지 3배 부피에 해당하는 아로니아 및 블루베리 추출물을 추가하는 것일 수 있고, 더 바람직하게는 1 내지 1.5 부피에 해당하는 아로니아 및 블루베리 추출물을 추가하는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 상기 단계 2의 유산균으로는 분리균주 또는 시판중인 다양한 유산균을 제한없이 사용할 수 있다. 구체적으로, 락토바실러스, 비피도박테리움, 스트렙토코커스, 류코노스톡, 페디오코커스 및 락토코커스 속(屬)의 미생물이 제한 없이 사용될 수 있고, 바람직하게는 락토바실러스 속 균주를 사용할 수 있다. 더 바람직하게는 상기 유산균은 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 애시도필루스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus) 및 락토바실러스 델브루에키 아종 락티스(Lactobacillus delbruekii subsp. lactis)로 구성된 군으로부터 선택되는 미생물일 수 있고, 보다 바람직하게는 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei)일 수 있다.
유산균 배양 배지 역시 각각의 유산균에 맞게 MRS(Man-Rogosa-Sharpe), 락토오스, M17 및 APT 배지(Asparagine Enrichment Broth)로 부터 선택될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 상기 단계 2의 발효는 30 내지 45℃의 온도에서 1 내지 10일간 발효하는 것일 수 있고, 바람직하게는 35 내지 40℃의 온도에서 1 내지 5일간 발효하는 것일 수 있으며, 더 바람직하게는 35 내지 39℃의 온도에서 2 내지 4일간 발효하는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 상기 단계 3의 추출은 물, 탄소수 1 내지 탄소수 4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출하는 것일 수 있고, 바람직하게는 물 및 탄소수 1 내지 탄소수 4의 알코올의 혼합용매로 추출하는 것일 수 있고, 더 바람직하게는 물 및 에탄올 혼합용매로 추출하는 것일 수 있다. 본 발명의 일실시예에서는 70% 에탄올 수용액을 이용하여 추출한 뒤 감압 농축하여 흑미 발효 추출물을 제조하였다.
골 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
본 발명은 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미(black rice)의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 골 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서, 상기 골 질환은 골다공증(osteoprosis), 골감소증(osteopenia), 골연화증(osteomalacia), 골이영양증(osteodystrophy), 구루병(rickets) 및 치주질환(periodontal disease)으로 이루어진 군에서 선택된 것일 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "예방"이란 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 골 질환의 발생, 확산 및 재발을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미하고, "치료"란 상기 약학적 조성물의 투여에 의해 골 질환의 의심 및 발병 개체의 증상이 호전되거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "치료"란 본 발명의 흑미 발효 추출물을 포함하는 조성물의 투여로 골 질환의 증세를 호전시키거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다. 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면, 대한의학협회 등에서 제시된 자료를 참조하여 본원의 조성물이 효과가 있는 질환의 정확한 기준을 알고, 개선, 향상 및 치료된 정도를 판단할 수 있을 것이다.
본 발명의 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유한 흑미 발효 추출물은 임상 투여시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있으며, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제조된다.
경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환자, 산제, 과립제, 캡슐제, 트로키제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 하나 이상의 본 발명의 왕불류행 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스(sucrose), 락토오스(lactose) 또는 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁용제, 유제, 동결건조제제, 좌제 등이 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 아로니아 및 블루베리를 함유한 흑미 발효 추출물의 인체에 대한 효과적인 투여량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환 정도에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로 약 0.01-1000 mg/kg/일이며, 바람직하게는 0.1-500 mg/kg/일 수 있고, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정시간 간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 유효성분으로서 흑미 발효 추출물 이외에 공지된 골 질환 치료제를 추가로 포함할 수 있고, 이들 질환의 치료를 위해 공지된 다른 치료와 병용될 수 있다.
본 발명의 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미 발효 추출물은 천연 식물을 원료로 하므로 약학적 조성물 또는 식품 조성물로 사용할 경우에도 일반적인 합성 화합물에 비하여 부작용이 덜할 수 있으므로, 안전하게 약학적 조성물, 건강기능식품 및 건강식품에 포함되어 유용하게 사용될 수 있다.
하기의 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세하게 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명의 내용을 구체화하기 위한 것일 뿐 이에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.
<준비예 1> 아로니아 추출물 제조
아로니아(Aronia melanocarpa)를 중량 대비 10배 부피의 70% 에탄올을 첨가하여 실온에서 24시간동안 추출하였으며, 추출과정을 3회 반복하였다. 추출된 추출액을 모아 Whatman no. 2 여과지로 여과하고, 회전식 진공증발기(RV10D, IKA, Staufen, Germany)로 40℃에서 감압 농축한 후 이 농축액을 동결 건조하여, 아로니아 추출물을 제조하였다. 제조된 아로니아 추출물을 증류수와 혼합하여, 전체 혼합용액의 부피 대비 아로니아 추출물이 5 중량%(w/v) 함유된 5% 아로니아 추출물을 제조하였다.
<준비예 2> 블루베리 추출물 제조
블루베리를 건조시킨 후, 건조된 블루베리 100g 당 70% 에탄올을 700ml씩 첨가한 뒤, 90℃에서 3시간 동안 3회 환류추출하여 추출액을 수득하였다. 상기 추출액을 여과하고 40℃에서 감압 농축하였다. 농축 후 -80 내지 -110℃로 7일 동안 동결건조하여 최종 블루베리 추출물(Blueberry extract, BBE)을 제조하였다. 제조된 블루베리 추출물을 증류수와 혼합하여, 전체 혼합용액의 부피 대비 블루베리 추출물이 5 중량%(w/v) 함유된 5% 블루베리 추출물을 제조하였다.
<실시예 1> 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미 발효 추출물 제조
상기 준비예 1 및 준비예 2에서 제조한 5%(w/v) 아로니아(Aronia melanocarpa) 추출물 및 5%(w/v) 블루베리 추출물은 1:1의 부피비로 혼합하여 아로니아 및 블루베리 추출물을 제조하였다.
유산균 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei, L. casei)를 한국미생물보존센터(KCCM)에서 제공받아, 고체배지인 Lactobacilli MRS agar medium(Difco, Sparks, MD, USA)에 3일간 배양 후 이를 다시 액체배지인 Lactobacilli MRS broth medium(Difco)에 접종하여 액체 배양하였다. 상기 L. casei를 배양한 L. casei 액체 배양액은 흡광도가 1.0(550nm)일 때 흑미 고상 발효에 사용하였다.
흑미(black rice, Oryza sativa L.; 국내산) 100g을 상기 준비예 1에서 제조된 5%(w/v) 아로니아(Aronia melanocarpa) 및 블루베리 추출물 200mL에 24시간 침지한 후 수분을 거르고 다시 5%(w/v) 아로니아 및 블루베리 추출물 125ml을 넣어 125℃에서 15 분 동안 오토클레이브(autoclave) 하였다.
그 다음, L. casei 액체 배양액을 아로니아 및 블루베리 추출물이 스며든 흑미에 접종(inoculation)하고 37℃에서 3일간 고상발효를 실시하고, 40℃에서 열풍 건조 및 분쇄하여 흑미 발효물을 수득하였다.
상기 흑미 발효물 부피 대비 10배 부피에 해당하는 양의 70% 에탄올을 첨가하여 실온에서 24시간동안 추출하였으며, 추출과정을 3회 반복하였다. 상기 추출된 추출액을 모아서, Whatman no. 2 여과지로 여과하고, 회전식 진공증발기(RV10D, IKA, Staufen, Germany)로 40℃에서 감압 농축한 후 이 농축액을 동결 건조하여, 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미 발효 추출물(이하, 흑미 발효 추출물 또는 LABB로 표기)을 제조하였다.
<비교예 1> 아로니아 및 블루베리 추출물 미함유하는 흑미 발효 추출물 제조
상기 실시예 1과 동일한 방법으로 제조하되, 흑미를 아로니아 및 블루베리 추출물에 침지하는 과정 및 아로니아 및 블루베리 추출물을 다시 첨가하는 과정을 제외하고, L. casei 배양액을 흑미에 접종하여 발효하는 공정 및 추출 공정을 수행하여, 비교예 1의 아로니아 및 블루베리 추출물 미함유 흑미 발효 추출물을 제조하였다.
<비교예 2> 아로니아 발효 추출물 제조
상기 실시예 1과 동일한 방법으로 제조하되, 흑미는 제외하고, 상기 준비예 1의 아로니아 추출물 125mL에 L. casei 배양액을 접종하여 발효시킨 발효물을 추출하여, 비교예 2의 아로니아 발효 추출물을 제조하였다.
<비교예 3> 블루베리 발효 추출물 제조
상기 실시예 1과 동일한 방법으로 제조하되, 흑미는 제외하고, 상기 준비예 2의 블루베리 추출물 125mL에 L. casei 배양액을 접종하여 발효시킨 발효물을 추출하여, 비교예 3의 블루베리 발효 추출물을 제조하였다.
<비교예 4> 아로니아를 함유한 흑미 발효 추출물 제조
상기 비교예 1과 동일한 방법으로 제조하되, 아로니아 및 블루베리 추출물 대신 준비예 1의 아로니아 추출물 125mL에 L. casei 배양액을 접종하여 발효시킨 발효물을 추출하여, 비교예 4의 아로니아를 함유한 흑미 발효 추출물을 제조하였다.
<비교예 5> 발효를 생략한 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유한 흑미 추출물 제조
상기 실시예 1과 동일한 방법으로 제조하되, L. casei 배양액을 이용하여 흑미를 고상발효 하는 과정을 제외하고, 아로니아 및 블루베리 추출물이 스며든 흑미를 대상으로 추출 공정을 수행하여, 비교예 5의 아로니아 및 블루베리 추출물 함유한 흑미 추출물을 제조하였다.
<비교예 6> 블루베리를 함유한 흑미 발효 추출물 제조
상기 비교예 1과 동일한 방법으로 제조하되, 아로니아 및 블루베리 추출물 대신 준비예 2의 블루베리 추출물 125mL에 L. casei 배양액을 접종하여 발효시킨 발효물을 추출하여, 비교예 6의 블루베리를 함유한 흑미 발효 추출물을 제조하였다.
<실험예 1> 골다공증 유발 동물 모델 준비
생후 8주 된 270-290g의 Sprague-Dawley(SD) 흰쥐(rat)를 오리엔탈바이오(성남, 한국)에서 구입하였다. 실험 전에 일주일 동안 쥐를 순응시켰다. 모든 동물은 대한생리학회에서 발행한 생리학 분야 동물 보호 및 사용 원칙 지침에 따라 건국대학교의 특정 병원균이 없는 동물방에 보관하고 일정 온도(25±2℃ 및 습도(55±5%)를 12시간의 명암 사이클을 유지하며 사육하였다.
암컷 쥐를 난소 절제하고(ovariectomized, OVX) 2주간의 회복 기간을 허용했다. 실험 동물은 대조군(control, Con), 모의 대조군(shamoperated, Sham), 음성 대조군(negative control, NC), 양성 대조군(positive control, PC), 흑미 발효 추출물(LABB) 250mg/kg 처리군(LABB250) 및 흑미 발효 추출물(LABB) 500mg/kg 처리군(LABB500)으로 분류하였다.
구체적으로, 대조군(Con)은 난소 적출을 하지 않은 정상군이고, 모의 대조군(Sham)은 난소 적출을 시행한 군과 동일한 방법으로 수술을 하되, 난소는 적출하지 않은 채로 봉합하는 가장 수술(sham operator)을 시행한 비교군이며, 음성 대조군(NC)은 골다공증을 유도한 난소 적출군(OVX)으로서 골다공증을 유발한 군이다. 양성 대조군(PC)은 여성호르몬(17-β-estradiol)을 주사한 난소 적출군(OVX)이고, LABB 250mg/kg 처리군(LABB250) 및 LABB 500mg/kg 처리군(LABB500)은 상기 실시예 1의 아로니아 및 블루베리 복합추출물을 함유하는 흑미 발효 추출물(LABB)을 각각 250mg/kg 및 500mg/kg 경구투여한 난소 적출군이다. 이 때, 난소 절제 시행 후 8주에 골다공증의 발생을 확인한 뒤에, LABB 또는 17-β-estradiol diets를 9주에서 16주까지 제공하였으며, LABB는 매일 경구 투여되었고, 에스트로겐은 estradiol valerate(200μg/kg, Estradiol Depot 10mg, Jenapharm, Jena, Germany)의 depot 제제를 일주일에 한 번 피하 주사했다.
또한, 실험예 2 및 3을 실시하기 위한 동물모델로서, 상기 흑미 발효 추출물(LABB) 처리군과 동일한 방법으로 시료처리군을 준비하되, 흑미 발효 추출물 대신 비교예 1 내지 6의 추출물을 각각 250mg/kg 및 500mg/kg 경구투여한 난소 적출군으로서, 비교예 1 처리군, 비교예 2 처리군, 비교예 3 처리군, 비교예 4 처리군, 비교예 5 및 비교예 6 처리군의 실험 동물을 추가적으로 준비하였다.
<실험예 2> 흑미 발효 추출물 투여에 따른 혈청 ALP 활성 및 인 함량 평가
골다공증 유도 쥐(rat)의 혈청 ALP(alkaline phosphatase) 활성 분석을 위하여, assay kits(ab83369, Alkaline Phosphatase Assay Kit; Abcam)를 사용하여 ALP enzyme을 standard로 하여 혈청 내 ALP 활성을 측정하였다.
구체적으로, 대조군(Con), 모의 대조군(Sham), 음성 대조군(NC), 양성 대조군(PC), 흑미 발효 추출물 250mg/kg 및 500mg/kg 처리군(LABB250 및 LABB500) 및 비교예 1 내지 6 처리군 각각의 쥐(rat)의 혈청 샘플 희석액 80L, 5mM의 pNPP(pnitrophenyl phosphate) 50L 및 ALP enzyme 10L를 순차적으로 반응 웰(well)에 첨가하고, 플레이트를 암실에서 25℃ 60분간 반응시킨 뒤, 20L의 stop 용액을 첨가하여 반응을 정지시켰다. 405nm에서 흡광도를 측정하였고, standard와 비교하여 ALP 활성을 측정하였다. ALP activity(U/L)는 표준곡선을 사용하여 계산하였다.
혈청 내 인(phosphate)의 함량 측정은 phosphate colorimetric assay kit(Biovision 410-500)를 사용하여 실시하였다. 구체적으로, phosphate standard와 각 시료(대조군(Con), 모의 대조군(Sham), 음성 대조군(NC), 양성 대조군(PC), 흑미 발효 추출물 250mg/kg 처리군(LABB250), 흑미 발효 추출물 250mg/kg 및 500mg/kg 처리군(LABB250 및 LABB500) 및 비교예 1 내지 6 처리군의 혈청 10μl를 96 well plate에 분주한 후 증류수(DW)를 첨가하여 volume을 200μl로 조정하고 phosphate reagent 30μl를 첨가하여 상온에서 30분 반응한 후 650nm에서 흡광도를 측정하였다.
도 1은 대조군(Con), 모의 대조군(Sham), 음성 대조군(NC), 양성 대조군(PC), 실시예 1의 흑미 발효 추출물 250mg/kg 처리군(LABB250), 실시예 1의 흑미 발효 추출물 500mg/kg 처리군(LABB500) 및 비교예 1 내지 6 처리군에 대한 (A) 혈청 ALP(alkaline phosphatase) 활성 및 (B) 혈청 인 함량(phosphate conc.) 측정 결과를 나타낸 그래프이다.
| 혈청 alkaline phosphatase 활성(ALP activity) | 혈청 인 함량(phosphate conc.) | ||||
| U/L | NC군 대비 억제율 | mM | NC군 대비 억제율 | ||
| 대조군(Con) | 107.3 | - | 3.13 | - | |
| 모의 대조군(Sham) | 112.8 | - | 2.84 | - | |
| 음성 대조군(NC) | 171.4 | 100% | 4.72 | 100% | |
| 양성 대조군(PC) | 120.2 | 29.9% | 4.01 | 15.0% | |
| 250mg/kg | 실시예 1 (LABB250) | 119.5 | 30.28% | 3.31 | 29.87% |
| 비교예 1 | 161.4 | 5.83% | 4.55 | 3.60% | |
| 비교예 2 | 163.5 | 4.61% | 4.52 | 4.24% | |
| 비교예 3 | 164.1 | 4.26% | 4.53 | 4.03% | |
| 비교예 4 | 134.2 | 21.70% | 3.75 | 20.55% | |
| 비교예 5 | 131.2 | 23.45% | 3.69 | 21.82% | |
| 비교예 6 | 162.7 | 5.08% | 4.48 | 5.08% | |
| 500mg/kg | 실시예 1 (LABB500) | 110.4 | 35.59% | 3.22 | 31.78% |
| 비교예 1 | 153.7 | 10.33% | 4.48 | 5.08% | |
| 비교예 2 | 159.5 | 6.94% | 4.44 | 5.93% | |
| 비교예 3 | 160.2 | 6.53% | 4.42 | 6.36% | |
| 비교예 4 | 133.8 | 21.94% | 3.72 | 21.19% | |
| 비교예 5 | 132.5 | 22.70% | 3.68 | 22.03% | |
| 비교예 6 | 132.5 | 22.70% | 3.68 | 22.03% | |
<실험예 3> 흑미 발효 추출물 투여에 따른 혈청 칼슘 수준 평가
칼슘(calcium)의 혈청 내 수준(levels)은 calcium colorimetric assay kit(ab102505 칼슘 검출 분석 키트, Abcam)를 사용하여 측정하였다.
구체적으로, 각 혈청시료(대조군(Con), 모의 대조군(Sham), 음성 대조군(NC), 양성대조군(PC), 흑미 발효 추출물 250mg/kg 처리군(LABB250), 흑미 발효 추출물 500mg/kg 처리군(LABB500) 및 비교예 1 내지 6 처리군)를 10μl씩 각각 96 well plate에 분주하고 증류수를 40μl를 추가하여 well당 50μl를 넣었다. Chromogenic Reagent 90μl를 추가로 well에 분주하였다. 그 후, Calcium Assay Buffer 60 μL 각 well에 넣고 실온에서 10분동안 빛을 차단한 장소에서 반응시켰다. 반응이 끝난뒤, 575nm에서 흡광도를 측정하였다. 혈청의 칼슘 농도는 칼슘 표준곡선을 이용하여 측정하였다.
도 2는 대조군(Con), 모의 대조군(Sham), 음성 대조군(NC), 양성 대조군(PC), 흑미 발효 추출물 250mg/kg 처리군(LABB250), 흑미 발효 추출물 500mg/kg 처리군(LABB500) 및 비교예 1 내지 6 처리군에 대한 혈청 내 칼슘(Ca2+) 수준(μM) 측정 결과를 나타낸 그래프이다.
| 혈청 내 칼슘 수준(Ca2+, uM) | NC군 대비 증가율 | ||
| 대조군(Con) | 42.7 | - | |
| 모의 대조군(Sham) | 44.1 | - | |
| 음성 대조군(NC) | 16.2 | 100% | |
| 양성대조군(PC) | 44.2 | 173% | |
| 250mg/kg | 실시예 1 (LABB250) | 22.8 | 40.74% |
| 비교예 1 | 16.9 | 4.32% | |
| 비교예 2 | 16.7 | 3.09% | |
| 비교예 3 | 16.6 | 2.47% | |
| 비교예 4 | 21.4 | 32.10% | |
| 비교예 5 | 21.6 | 33.33% | |
| 비교예 6 | 16.9 | 4.32% | |
| 500mg/kg | 실시예 1 (LABB500) | 25.5 | 57.41% |
| 비교예 1 | 18.4 | 13.58% | |
| 비교예 2 | 17.6 | 8.64% | |
| 비교예 3 | 17.5 | 8.02% | |
| 비교예 4 | 23.5 | 45.06% | |
| 비교예 5 | 23.7 | 46.30% | |
| 비교예 6 | 17.8 | 9.88% | |
그 결과, OVX군(NC)의 혈청 칼슘 수준이 무처리군(Con) 또는 모의 대조군(Sham)에 비해 감소하였으나, 흑미 발효 추출물 또는 비교예 1 내지 6의 추출물을 처리한 군에서는 다시 증가하였고, 특히, 흑미 발효 추출물을 투여한 군(LABB250 및 LABB500)에서 칼슘 수준이 가장 많이 회복됨을 확인하였다. 이러한 결과는 LABBE 치료가 OVX 쥐에서 골 재형성을 억제하여 뼈 손실을 개선함을 시사한다.
결과적으로, 본 발명에 따른 아로니아, 블루베리 및 유산균을 이용하여 제조된 실시예 1의 흑미 발효 추출물(LABB)은 혈청 ALP 활성 및 혈청 인 함량 증가를 억제하고 혈청 칼슘 수준 감소를 억제하여, 골다공증과 같은 골 질환을 개선시킬 수 있음을 확인하였다.
이상에서 살펴본 바와 같이, 본 발명의 구체적인 실시예를 상세하게 설명되었으나, 본 발명의 사상을 이해하는 당업자는 동일한 사상의 범위 내에서 다른 구성요소를 추가, 변경, 삭제 등을 통하여, 퇴보적인 다른 발명이나 본 발명 사상의 범위 내에 포함되는 다른 실시예를 용이하게 제안할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상술한 상세한 설명보다는 후술하는 특허청구의 범위에 의하여 나타내어지며, 특허청구의 범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
Claims (10)
- 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미(black rice)의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 골 질환의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물에서,
상기 아로니아 및 블루베리 추출물은 아로니아 및 블루베리를 각각 에탄올로 추출한 후 혼합하여 제조된 것이고,
상기 발효 추출물은 흑미를 상기 아로니아 및 블루베리 추출물에 침지시킨 후 락토바실러스(Lactobacillus)속 균주를 접종하여 발효함으로써 수득된 것이며,
상기 골 질환은 골다공증(osteoporosis)인 것을 특징으로 하는, 건강식품 조성물. - 흑미를 아로니아 및 블루베리 추출물에 침지하는 단계(단계 1);
상기 단계 1에서 처리된 흑미에 유산균을 접종하여 발효하는 단계(단계 2); 및
상기 단계 2에서 발효된 흑미를 건조 후 추출하는 단계(단계 3);를 포함하는 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미의 발효 추출물의 제조방법에서,
상기 단계 1의 아로니아 및 블루베리 추출물은 아로니아 및 블루베리를 각각 에탄올로 추출한 후 혼합하는 것을 특징으로 하고,
상기 단계 2의 유산균은 락토바실러스(Lactobacillus) 속 균주인 것을 특징으로 하는, 제조방법. - 삭제
- 삭제
- 제2항에 있어서,
상기 락토바실러스(Lactobacillus) 속 균주는 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei)인 것을 특징으로 하는, 제조방법. - 제2항에 있어서,
상기 단계 2의 발효는 30 내지 45℃의 온도에서 1일 내지 10일간 발효하는 것을 특징으로 하는 제조방법. - 삭제
- 삭제
- 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미(black rice)의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 골 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물에서,
상기 아로니아 및 블루베리 추출물은 아로니아 및 블루베리를 각각 에탄올로 추출한 후 혼합하여 제조된 것이고,
상기 발효 추출물은 흑미를 상기 아로니아 및 블루베리 추출물에 침지시킨 후 락토바실러스(Lactobacillus)속 균주를 접종하여 발효함으로써 수득된 것이며,
상기 골 질환은 골다공증(osteoporosis)인 것을 특징으로 하는, 건강기능식품 조성물. - 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유하는 흑미(black rice)의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 골 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에서,
상기 아로니아 및 블루베리 추출물은 아로니아 및 블루베리를 각각 에탄올로 추출한 후 혼합하여 제조된 것이고,
상기 발효 추출물은 흑미를 상기 아로니아 및 블루베리 추출물에 침지시킨 후 락토바실러스(Lactobacillus)속 균주를 접종하여 발효함으로써 수득된 것이며,
상기 골 질환은 골다공증(osteoporosis)인 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020200141742A KR102511165B1 (ko) | 2020-10-29 | 2020-10-29 | 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유한 흑미 유산균 발효물 성분을 포함하는 골 질환 예방 및 치료용 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020200141742A KR102511165B1 (ko) | 2020-10-29 | 2020-10-29 | 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유한 흑미 유산균 발효물 성분을 포함하는 골 질환 예방 및 치료용 조성물 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20220057673A KR20220057673A (ko) | 2022-05-09 |
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Family
ID=81581987
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020200141742A KR102511165B1 (ko) | 2020-10-29 | 2020-10-29 | 아로니아 및 블루베리 추출물을 함유한 흑미 유산균 발효물 성분을 포함하는 골 질환 예방 및 치료용 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR102511165B1 (ko) |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| KR101686490B1 (ko) * | 2013-11-05 | 2016-12-14 | 주식회사 성균바이오텍 | 흑미 추출물을 유효성분으로 하는 골대사 질환 예방 또는 치료용 조성물 |
| KR102159447B1 (ko) * | 2018-03-15 | 2020-09-23 | 건국대학교 글로컬산학협력단 | 아로니아 및 흑미의 발효 추출물을 포함하는 골 질환의 예방 및 치료용 조성물 |
| KR102334305B1 (ko) * | 2018-12-24 | 2021-12-03 | 건국대학교 글로컬산학협력단 | 블루베리 추출물을 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 조성물 |
-
2020
- 2020-10-29 KR KR1020200141742A patent/KR102511165B1/ko active IP Right Grant
Also Published As
| Publication number | Publication date |
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| KR20220057673A (ko) | 2022-05-09 |
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