KR102508983B1 - 철갑상어 수용성 오일을 함유하는 면역 증진용 조성물 제조방법 - Google Patents
철갑상어 수용성 오일을 함유하는 면역 증진용 조성물 제조방법 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 면역 증진용 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 수지상 세포 항원 제시기능 증강 효능을 갖는 철갑상어 성분을 유효성분으로 하여, 인체 면역 증진에 탁월한 효과를 발휘하는, 면역 증진용 기능성 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
Description
본 발명은 면역 증진용 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 수지상 세포 항원 제시기능 증강 효능을 갖는 철갑상어 성분을 유효성분으로 하여, 인체 면역 증진에 탁월한 효과를 발휘하는, 면역 증진용 기능성 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
철갑상어(Acipenser sinensis)는 4억 5천년∼3억 5천년 전(데본기)에 기원된 어종으로 Acipenseridae과에 속하며, 북반구의 중위도 이북 지역에 넓게 분포되어 자생하는 어종이다. 현재 철갑상어는 26종이 알려지고 있으며, 경제적 및 생태학적인 가치로 인하여 많은 나라의 관심이 증대되고 있다.
1997년 3월에 러시아 까나꼬브 양식장에서 우리나라에 처음으로 종묘를 이식해 사육한 후 2003년 자체 종묘 생산된 시베리안 철갑상어는 환경 적응능력이 뛰어난데다, 우리나라에서 양식되는 다른 품종보다 빨리 성장하고 좋은 육질을 지니고 있어 양식 대상 어종으로 인기를 끌고 있다. 최대 몸길이는 3 m이며, 체중은 200∼300 kg까지 성장하고, 최대 몸 길이가 8 m이상까지 자라는 종도 있으며, 최대 수명이 100년을 넘는 것도 있다. 생후 6∼7년 정도 되면 1 m 이상으로 성장하고 비로소 캐비어를 생산한다.
철갑상어는 육질의 쫄깃한 맛이 있어 회, 훈제, 바비큐, 스테이크 및 꼬치구이 요리, 머리는 찜, 탕요리, 지느러미는 중국 3대 진미인 샥스핀 요리, 연골은 특수요리, 강장제와 공업용 재료로 이용되고 있다. 또한, 철갑상어는 단백질, 필수 아미노산, 불포화 지방산, 비타민, EPA, DHA 등의 유효성분들을 다량 함유하고 있고, 두뇌발달, 영양억제, 피로회복, 혈행개선, 치매예방, 골다공증, 관절염, 항산화 작용 등의 우수한 효능들이 밝혀지면서, 고영양, 고기능성 재료로서 점점 더 주목받고 있다.
최근에는, 철갑상어의 양식기술이 발달하기 시작하면서, 일반인들도 철갑상어를 흔히 접할 수 있는 기회가 많아지고 있으며, 이러한 추세에 따라 철갑상어를 이용한 다양한 상품들이 더욱 활발하게 제조될 수 있는 계기가 되었다.
그러나, 현재까지 시판되는 철갑상어 원재료에 있어서, 철갑상어의 실제 함량이나, 유효성분의 함량, 가공 방식, 추출 효율 등에 대한 충분한 연구가 이루어지지 않는 실정이다. 특히, 국내에서는 철갑상어의 가공 기술과 이를 이용한 제품은 전무하기에 아직까지 소비자들에게 철갑상어가 기능성 재료 및 상품로서 객관적이고 대중적으로 인정받고 있지 못한 실정이다.
한편, 면역기능이 여러 가지 질병요인(pathogen)으로부터 생체를 방어한다는 것은 이미 알려졌으며, 이러한 면역기능을 이용하여 질병을 예방하고 치료하는 방법으로 대표적으로 예방접종(vaccination), 항독소 이용방법 등이 이 용되고 있다.
이외에도 면역기능의 작용기작이 알려지면서 면역기능을 조절할 수 있는 면역조절물질을 직접 이용하려는 시도가 진행되고 있는데, 이러한 면역조절물질은 비특이적 또는 특이적으로 면역 세포들을 자극하여 생체의 면역기능을 억제 또는 증진시킴으로써, 질병요인으로부터 생체의 방어력을 증강시킬 수 있었다.
그러나, 상기의 면역 조절물질의 대부분은 화학 합성물질로 부작용 또는 독성이 일부 발견되기도 하여 실제 생체에 적용하기에 일부 제한이 있다.
이러한 문제점을 해결하기 위한 노력으로, 최근에는 면역조절물질에 대한 연구가 독성이 없는 식품소재 또는 천연물로부터 추출한 유효성분, 기존의 한방제 등의 효능검증을 통해 수행되고 있다. 이처럼 천연물로부터 생체 조절 및 생체 방어계를 항진시키는 생리활성물질을 찾는 연구가 활발히 진행되면서, 천연물이 대체의학의 치료제 또는 건강보조식품으로서 실용화되는 단계로 접어들고 있다.
이에 따라, 본 출원인은, 철갑상어 원재료 수득방법에 의하여 얻어지는 철갑상어 추출물로부터 실험을 통하여 면역 증진에 탁월한 효과를 발휘함을 알게 되어 이 발명을 완성하게 되었다.
본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위한 것으로서, 수지상 세포 항원 제시기능 증강 효능을 갖는 철갑상어 성분을 유효성분으로 하여, 인체 면역 증진에 탁월한 효과를 발휘하는, 면역 증진용 기능성 조성물 및 이의 제조방법을 제공하고자 한다.
본 발명의 상기 및 다른 목적과 이점은 바람직한 실시예를 설명한 하기의 설명으로부터 분명해질 것이다.
상기 목적은, 철갑상어 수용성 오일을 유효성분으로 하고, 상기 철갑상어 수용성 오일은 수지상 세포의 항원제시 기능 증강 효능을 갖는 것을 특징으로 하는, 면역 증진용 기능성 조성물에 의해 달성될 수 있다.
상기 면역 증진용 기능성 조성물은, 화장료 조성물, 식품 조성물, 음료 조성물 및 약학 조성물 중에서 선택되는 1종 이상의 건강 기능 조성물로 제조되는 것을 특징으로 한다.
상기 철갑상어 수용성 오일은, 철갑상어의 원재료 수득방법에 따라 철갑상어 오일을 제조하는 단계; 상기 철갑상어 오일을 제1 숙성을 수행하여 철갑상어 오일 숙성물을 제조하는 단계; 상기 철갑상어 오일 숙성물에 대하여, 고압 처리기 및 미세한 노즐을 사용하여 기름의 물성 변이를 형성하여 거품화시키는, 전처리 단계; 전처리된 철갑상어 오일 숙성물을 제2 숙성하는 단계;
상기 제2 숙성이 수행된 철갑상어 오일 숙성물과 물을 혼합하여 증류 추출기에 투입하고 제2 추출하는 단계; 제2 추출을 수행한 후에 남은 철갑상어 오일 숙성물에 다시 물을 혼합하여 증류 추출기에 투입하고 제3 추출하여 1차 수용성 오일을 제조하는 단계; 식용 달팽이를 포함하는 1차 첨가물 조성물 및, 보이차 및 국화를 포함하는 2차 첨가물 조성물을 각각 제조하는 단계; 및 상기 1차 수용성 오일, 상기 1차 첨가물 조성물 및 상기 2차 첨가물 조성물의 혼합물을 증류 추출하여 2차 수용성 오일을 제조하는 단계;를 포함하여 철갑상어 수용성 오일로 제조되는 것을 특징으로 한다.
상기 철갑상어의 원재료 수득방법은, 철갑상어 치어를 천연 항생제를 사용하여 3년 이상 동안 양식하는, 양식 단계; 양식된 철갑상어를 출하하여 온마리 상태로 전처리하는, 전처리 단계; 전처리된 철갑상어를 급속 냉각하되, 상기 급속 냉각은 5분 내지 20분 사이에 -80 내지 -20℃의 온도까지 도달하도록 하는 것인, 냉각 보관 단계; 및 냉각 보관된 철갑상어를 해동하고 세척한 다음, 철갑상어 온마리를 공압 추출기에 투입하고 제1 추출을 수행하여 철갑상어 오일을 수득하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따르면, 철갑상어 성분, 구체적으로, 철갑상어 추출물, 보다 구체적으로, 철갑상어 수용성 오일을 유효성분으로 함유하는 면역 증진 기능성 조성물을 제조할 수 있다.
보다 구체적으로, 상기 철갑상어 수용성 오일은 철갑상어 온마리로부터 수득된 추출물로부터 얻어지는 것으로, 수지상 세포의 항원제시 기능 증강 효능을 가짐으로써, 면역 증진에 있어 탁월한 효과를 발휘할 수 있다.
또한, 본 발명에 따르면, 철갑상어 수용성 오일 제조 시에는, 무항생제로 인한 인체 안전성을 확보함으로써, 기존의 철갑상어 함유 제품 대비, 친환경성, 고품질, 고기능성의 철갑상어 함유 조성물을 제조할 수 있다.
다만, 본 발명의 효과들은 이상에서 언급한 효과로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 효과들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
도 1은, 본 발명의 일 실시예에 따른 철갑상어 수용성 오일을 제조한 사진들이다.
도 2 내지 도 4는 실험예 1의 결과를 나타낸 그래프들이다.
도 2 내지 도 4는 실험예 1의 결과를 나타낸 그래프들이다.
이하, 본 발명의 실시예와 도면을 참조하여 본 발명을 상세히 설명한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위해 예시적으로 제시한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가지는 자에 있어서 자명할 것이다.
또한, 달리 정의하지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야의 숙련자에 의해 통상적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 가지며, 상충되는 경우에는, 정의를 포함하는 본 명세서의 기재가 우선할 것이다.
도면에서 제안된 발명을 명확하게 설명하기 위해서 설명과 관계없는 부분은 생략하였으며, 명세서 전체를 통하여 유사한 부분에 대해서는 유사한 도면 부호를 붙였다. 그리고, 어떤 부분이 어떤 구성 요소를 "포함"한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성 요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다. 또한, 명세서에서 기술한 "부"란, 특정 기능을 수행하는 하나의 단위 또는 블록을 의미한다.
각 단계들에 있어 식별부호(제1, 제2, 등)는 설명의 편의를 위하여 사용되는 것으로 식별부호는 각 단계들의 순서를 설명하는 것이 아니며, 각 단계들은 문맥상 명백하게 특정 순서를 기재하지 않는 이상 명기된 순서와 다르게 실시될 수 있다. 즉, 각 단계들은 명기된 순서와 동일하게 실시될 수도 있고 실질적으로 동시에 실시될 수도 있으며 반대의 순서대로 실시될 수도 있다.
본 발명, 본 명세서에서, "철갑상어 추출물"은, 추후 서술되는 철갑상어 온마리로부터 얻어지는 철갑상어 액상 추출물, 철갑상어 오일 또는 철갑상어 고형분을 의미하는 것으로, 포괄적으로 해석됨이 바람직하다.
이하, 첨부된 도면을 참조하여 본원의 구현예 및 실시예를 상세히 설명한다. 그러나, 본원의 이러한 구현예 및 실시예와 도면에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 측면은, 철갑상어 수용성 오일을 유효성분으로 하고, 상기 철갑상어 수용성 오일은 수지상 세포의 항원제시 기능 증강 효능을 갖는 것을 특징으로 하는, 면역 증진용 기능성 조성물을 제공한다.
철갑상어 수용성 오일 조성물 제조
<철갑상어 오일>
첫번째로, 철갑상어의 원재료 수득방법에 따라 얻어진 철갑상어 오일을 얻을 수 있다.
상기 철갑상어의 원재료 수득방법은, 철갑상어 치어를 천연 항생제를 사용하여 3년 이상 동안 양식하는, 양식 단계(S1); 양식된 철갑상어를 출하하여 온마리 상태로 전처리하는, 전처리 단계(S2); 전처리된 철갑상어를 급속 냉각하되, 상기 급속 냉각은 5분 내지 20분 사이에 -80 내지 -20℃의 온도까지 도달하도록 하는 것인, 냉각 보관 단계(S3); 및 냉각 보관된 철갑상어를 해동하고 세척한 다음, 철갑상어 온마리를 공압 추출기에 투입하고 제1 추출을 수행하여 철갑상어 오일을 수득하는 단계(S4);를 포함할 수 있다.
보다 구체적으로 설명하면, 상기 S1 단계에서, 철갑상어, 구체적으로는, 철갑상어 치어(稚魚)를 양식한다. 상기 철갑상어의 품종으로는 벨루가 철갑상어(Huso huso), 칼루가 철갑상어(Huso dauricus), 시베리아 철갑상어 (Acipenser baerii), 러시아 철갑상어(Acipenser gueldenstaedti), 스텔렛 철갑상어(Acipenser ruthenus), 흰 철갑상어(Acipenser transmontanus), 아무르 철갑상어(Acipenser schrenckii), 중국 철갑상어(Acipenser sinensis), 주걱 철갑상어(Polyodon spathula) 및 그 교잡종으로 이루어진 군에서 선택될 수 있다. 본 발명의 일 실시예에 따른 철갑상어는, 예를 들어, 시베리아 철갑상어일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
상기 양식의 환경은, 담수 양식장일 수 있으며, 담수원은 강물, 지하수, 산천수 및 수돗물이고, 그 담수원은 활성탄에 의한 탈염소 처리와 같은 정수 처리를 거친 수원일 수 있다.
상기 양식은 상기 철갑상어 치어가 적어도 1kg 무게의 성년 철갑상어가 될 때까지 수행될 수 있으며, 예를 들어, 3년 이상, 예를 들어, 3년 내지 5년 동안 지속될 수 있다.
상기 양식은 무항생제 환경을 지향한다. 즉, 본 발명의 철갑상어 양식에서는, 종래 기술에서와 같이 상기 철갑상어의 체중 증가 및 육질 향상을 위해 투여하는 각종 항생제 및 성장 촉진제와 같은 화학성분은 사용하지 않으며, 천연 재료로 이루어진 천연 항생제를 사용할 수 있다.
일례로, 상기 천연 항생제로 천일염을 사용할 수 있다. 구체적으로, 양식되는 동안에 상기 철갑상어가 천일염을 섭취하도록 함으로써, 철갑상어 내부의 유해균을 포함한 불순물들을 효과적으로 제거할 수 있도록 한다. 상기 천일염의 섭취는 월 1회 내지 3회의 범위 내에서 수행되는 것이 바람직하다.
상기 S2 단계 및 S3 단계에서, 양식된 철갑상어를 전처리한 다음, 냉각 보관할 수 있다. 상기 전처리는 상기 철갑상어를 부위별로 절단하지 않고, 온마리(가르거나 자르지 아니한 통짜) 형태로 수행되도록 한다.
상기 양식된 철갑상어를 출하하여 전처리를 수행하되, 먼저, 기설정된 출하날로부터 10일 내지 12일 전, 일례로, 10일 전부터 상기 철갑상어가 어떠한 먹이도 섭취하지 않게 금식하도록 조치할 수 있다. 상기 철갑상어가 금식하도록 함으로써 내장 내의 불순물들을 깨끗하게 비워내어, 철갑상어 온마리가 갖는 유효성분들의 수득율을 더욱 높일 수 있도록 한다.
금식 후의 상기 철갑상어를 출하하여 간단한 세척을 수행한 다음, 철갑상어 머리를 고무망치로 1회 또는 2회 세게 내리쳐서 기절시킨다. 이어서, 기절한 철갑상어를 곧바로 급속 냉각시켜 보관을 수행할 수 있다. 상기 급속 냉각의 조건은 단시간, 예를 들어, 5분 내지 20분 사이에, -80 내지 -20℃의 온도까지 도달하도록 하는 것일 수 있다.
전술한 방식으로 철갑상어를 빠르게 기절시킨 후에 곧바로 급속 냉각시킴으로써, 철갑상어의 고통을 최소화하면서 철갑상어를 온마리 형태 그대로의 유효 성분을 고품질로 얻을 수 있다.
상기 S4 단계에서, 철갑상어 원재료, 즉, 철갑상어 오일을 수득한다.
상기 냉각 보관된 철갑상어를 2 내지 6 시간 동안 해동한 다음, 물 또는 식염수로 어체 전체를 골고루 세척하여 잔여 혈액이나 잔여 내장 등의 각종 불순물을 제거할 수 있다.
상기 철갑상어를 온마리 형태로 제1 추출을 수행할 수 있다. 상기 제1 추출의 방법은, 공압 추출기, 구체적으로, 공압 열수추출기를 사용하여 수행할 수 있다. 상기 철갑상어 온마리를 용매인 물과 함께 상기 공압 추출기에 투입할 수 있다. 이때, 상기 용매는 깔라만시 원액, 도라지 원액 및 비트 원액을 더 포함할 수 있다.
일례로, 상기 철갑상어 온마리 50 중량%, 물 41 중량%, 깔라만시 원액 5 중량%, 도라지 원액 2 중량% 및 비트 원액 2 중량%을 혼합한 추출 원료물을 상기 공압 추출기에 투입하여 제1 추출을 수행할 수 있다.
상기 공압 추출기는 100 내지 104℃, 일례로, 102℃에서, 2.3 내지 2.7 기압, 일례로, 2.5 기압의 조건에서 수행될 수 있으며, 추출 시간은 98 내지 102 시간, 일례로, 100 시간으로 수행되는 것이 바람직하다.
상기 제1 추출 후에는 비중 차이를 이용하여 상, 중, 하의 층 분리를 수행하는 비중 분리를 진행할 수 있다. 상기 비중 분리를 위한 구체적인 방법으로는, 먼저, 상기 공압 추출기를 가동하고 있는 상태에서 증기(김)을 빼지 않고, 수득된 1차 추출물을 직접 교반기 탱크에 담는다. 이때, 상기 교반기 탱크에 담는 1차 추출물은 철갑상어 액상 추출물일 수 있으며, 상기 철갑상어 액상 추출물은 상기 추출 원료물 총 중량에 대하여 약 80 중량%를 차지할 수 있다.
이후, 상기 공압 추출기에 구비되어 있는 압축기로 나머지 추출 원료물을 1회 또는 2회 이상 압축을 수행하여 2차 추출물을 수득할 수 있다. 이때, 상기 2차 추출물은 철갑상어 오일일 수 있으며, 상기 철갑상어 오일은, 상기 추출 원료물 총 중량에 대하여 약 5 중량%를 차지할 수 있다.
이어서, 남은 추출 원료물인 건더기, 즉, 철갑상어 고형분을 수득할 수 있다. 상기 철갑상어 고형분은, 철갑상어 육질, 연골, 골수 또는 이들의 조합을 포함할 수 있다. 상기 철갑상어 고형분, 상기 추출 원료물 총 중량에 대하여 약 15 중량%를 차지할 수 있다.
상기 S4 단계에서 서술된 철갑상어 원재료의 수득방법은, 추출과 동시에 비중 분리를 함께 수행하는 것으로써, 보다 간단한 공정으로 철갑상어 온마리로부터 얻어지는 철갑상어 액상 추출물, 철갑상어 오일 및 철갑상어 고형분을 모두 수득할 수 있도록 한다.
<철갑상어 수용성 오일 조성물>
두번째로, 상기 철갑상어 오일을 제1 숙성을 수행하여 철갑상어 오일 숙성물을 제조할 수 있다. 상기 제1 숙성을 수행하기 전에 살균을 수행할 수 있다. 살균의 방법은, 당해 분야에서 일반적으로 사용되는 공지된 기술에 따라 수행될 수 있다.
상기 제1 숙성은 상기 철갑상어 오일을 숙성용 용기에 담아 그늘진 곳에서 수행되되, 자연 상태와 유사한 조건에서 수행되는 자연 숙성일 수 있다. 구체적으로, 상기 숙성은, 25일 내지 35일, 일례로는 30일 동안 수행되는 것이 바람직하며, 예를 들어, 17 내지 21℃, 일례로, 17℃의 온도 범위에서, 햇빛이 없고, 공기가 통하는 조건에서 수행될 수 있다.
상기 제1 숙성이 전술된 조건 범위에서 수행되면, 철갑상어 오일 내의 불순물들이 가라앉거나 부유되어 추후에 제거될 수 있고, 이에 철갑상어 오일의 순도를 높이고 유효성분의 함량을 더욱 증대시킬 수 있다. 상기 숙성 후에는 별도로 여과를 수행할 수 있다.
세번째로, 상기 철갑상어 오일 숙성물을 전처리할 수 있다. 상기 전처리란 추후 수용성 오일의 제형을 얻기 위하여 기름 상태를 수용화(가용화) 직전의 상태로 만드는 작업일 수 있다.
상기 전처리를 수행하는 구체적인 방법은, 철갑상어 오일의 물성 변이를 일으키는 것으로, 예를 들어, 고압 분사기 및 상기 고압 분사기에 구비된 미세한 노즐에 상기 철갑상어 오일을 수회 내지 수십~수백 차례 통과시키면서 상기 철갑상어 오일을 거품화시키는 것일 수 있다. 이때, 별도의 주입 펌프를 사용하여 공기를 주입하면서 상기 거품화 작업의 효율을 높일 수도 있다.
이러한 전처리 과정은 다수 회 반복하여 오일이 마치 생크림과 같은 제형이 될 때까지 수행될 수 있다. 이때, 오일이 생크림과 같은 제형이 되는 시점이, 수용성 오일을 얻기 위한 수용화(가용화) 직전의 상태일 수 있다.
이러한 전처리 과정은, 종래에 사용되는 계면활성제와 같은 인공적인 화학성분을 사용하지 않고, 오직 물리적인 나노 공법으로 성분 내 물성적 변이를 일으켜서 수용화(가용화)를 형성하여 추후 수용성 오일의 제형을 얻을 수 있도록 한다. 즉, 본 발명의 일 실시예에서는 천연 나노 공법을 이용한 철갑상어 수용성 오일의 제조방법으로써, 인체 무해성과 환경 친화성이 특히 우선시 되어야 하는, 음용수, 식품, 화장품, 의약품, 펫 관련 분야 및 식물성 원료 조성물 등의 분야로의 폭넓은 활용이 가능할 수 있도록 한다.
전처리가 수행된 상기 철갑상어 오일 숙성물은 제2 숙성시킨 후, 실온, 예를 들어, 1 내지 35℃, 구체적으로, 18 내지 23℃에서 용기에 담아 보관할 수 있다. 상기 제2 숙성은, 상기 제1 숙성과 같이 자연 숙성으로써, 구체적인 조건은 제1 숙성과 동일하나 숙성 기간은 약 10일간이 바람직하다.
네번째로, 전처리된 철갑상어 오일 숙성물과 물을 함께 제2 추출 및 제3 추출을 수행하여 1차 수용성 오일을 제조할 수 있다. 이때, 상기 제2 추출 및 제3 추출의 방법은 증류 추출일 수 있다.
구체적으로, 상기 제2 추출은, 증류 추출기에 상기 전처리된 철갑상어 오일 숙성물과 물을 1:1 중량비로 배합하여 투입한 다음, 증류 추출을 수행하는 것일 수 있다. 이어서, 제2 추출 후에 수증기가 모두 증발하고 남은 철갑상어 오일 숙성물에 다시 물을 1:1.2~1.5의 중량비로 배합하여 투입한 다음, 증류 추출하는 제3 추출을 수행할 수 있다. 상기 제3 추출은 적어도 30회 이상 반복하여 수행되며 이로써, 1차 수용성 오일을 얻을 수 있다.
상기 1차 수용성 오일은 최종 수용성 오일을 제조하는 과정 상의 제형일 수 있다. 상기 1차 수용성 오일은 교반기에 투입하여 1회 또는 2회 교반을 수행할 수 있다.
다섯번째로, 첨가물 조성물을 제조할 수 있다. 상기 첨가물 조성물은 각각 식용 달팽이를 포함하는 1차 첨가물 조성물 및, 보이차 및 국화를 포함하는 2차 첨가물 조성물일 수 있다.
상기 1차 첨가물 조성물은, 백봉 오골개, 흰 목이버섯, 비트, 다시마뿌리, 도라지로 이루어진 1차 천연성분의 군에서 선택되는 1종 이상을 더 포함할 수 있다. 일례로, 상기 1차 첨가물 조성물은 식용 달팽이, 백봉 오골개, 흰 목이버섯, 비트, 다시마뿌리 및 도라지의 혼합물인 1차 천연성분을 포함할 수 있다. 이때, 상기 천연 성분은 생재료 상태를 깨끗이 세척하여 약 4 내지 7cm의 평균 크기로 절단한 것을 사용할 수 있다.
상기 1차 천연성분과 물을 1:1의 중량비로 혼합한 다음 공압 추출기에 투입하고, 100℃ 이상의 온도에서 100 시간 동안 추출한 1차 천연성분 추출물, 즉, 1차 첨가물 조성물을 제조할 수 있다.
상기 2차 첨가물 조성물은, 연씨, 해죽순, 병풀, 개똥쑥, 인지쑥, 박하, 유근피, 하고초, 구찌뽕, 와송, 차가버섯, 삼채, 깔라만시 및 뽕잎으로 이루어진 2차 천연성분의 군에서 선택되는 1종 이상을 더 포함할 수 있다. 일례로, 상기 2차 첨가물 조성물은 보이차, 국화, 연씨, 해죽순, 병풀, 개똥쑥, 인지쑥, 박하, 유근피, 하고초, 구찌뽕, 와송, 차가버섯, 삼채, 깔라만시 및 뽕잎의 혼합물인 2차 천연성분을 포함할 수 있다. 이때, 상기 천연 성분은 생재료 상태를 깨끗이 세척하여 약 4 내지 7cm의 평균 크기로 절단한 것을 사용할 수 있다.
상기 2차 천연성분과 물을 1:1의 중량비로 혼합한 다음 공압 추출기에 투입하고, 100℃ 이상의 온도에서 100 시간 동안 추출한 2차 천연성분 추출물, 즉, 2차 첨가물 조성물을 제조할 수 있다.
이어서, 상기 1차 천연성분 추출물과 2차 천연성분 추출물을 실온, 1 내지 35℃, 예를 들어, 19 내지 23℃에서, 10일 동안 각각 숙성시킨 다음에, 교반기에 함께 투입하여 교반한 다음, 증류 추출을 수행할 수 있다. 예를 들어, 상기 1차 천연성분 추출물 100 중량부에 대하여 2차 천연성분 추출물 50 중량부 및 물 50 중량부를 혼합한 다음, 증류 추출기에 투입하여 증류 추출할 수 있다.
증류 추출이 완료되면, 상기 1차 천연성분 추출물과 2차 천연성분 추출물의 혼합 추출로부터 얻어지는 혼합 첨가물 조성물을 수득할 수 있다.
여섯번째로, 상기 1차 수용성 오일 및 상기 혼합 첨가물 조성물을 증류 추출하여 2차 수용성 오일을 제조할 수 있다. 상기 1차 수용성 오일 및 상기 혼합 첨가물 조성물은 1:1의 중량비로 혼합될 수 있으며, 상기 증류 추출은 1회 또는 2회 내지 3회를 수행할 수 있다.
상기 2차 수용성 오일은 본 발명에서의“철갑상어 수용성 오일 조성물”일 수 있다. 즉, 상기 철갑상어 수용성 오일 조성물은, 철갑상어 오일과 천연성분인 첨가물 혼합물을 증류추출한 혼합 첨가물 조성물을 포함하는 것일 수 있다.
상기 철갑상어 수용성 오일(조성물)은 계면활성제와 같은 인공 화학물질 없이도 물에 쉽게 가용화될 수 있는 오일 제형으로써, 인체 무해성과 환경 친화성이 특히 우선시 되어야 하는, 화장품, 음용수 또는 식품 등의 분야에 폭넓게 활용될 수 있다.
이러한 상기 철갑상어 수용성 오일 조성물은, 상기 철갑상어 온마리로부터 수득된 액상 추출물을 포함하는 것으로, 철갑상어 내 유효 성분을 고함량으로 함유하고 무항생제로 인한 인체 안전성과 향상된 품질을 확보할 수 있다.
상기 철갑상어 수용성 오일 조성물은, 수지상 세포의 항원제시 기능 증강 효능을 가짐으로써, 인체 면역 증진 효과에 탁월한 효능을 발휘한다. 이에 대하여는, 추후 실험예를 통하여 보다 구체적으로 서술될 것이다.
상기 철갑상어 수용성 오일 조성물은, 상기 면역 증진 기능성 조성물 총 중량에 대하여, 10 내지 100 중량%, 구체적으로, 30 내지 100 중량%, 더 구체적으로, 50 내지 100 중량%, 보다 더 구체적으로, 70 내지 100 중량%로 포함될 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 상기 면역 증진용 기능성 조성물은, 예를 들어, 화장품 조성물, 식품 조성물, 음료 조성물, 약학 조성물 등에 적용되어 제품화될 수 있다. 그러나, 이에 제한되지 않으며, 다양한 종류의 건강 기능 조성물로의 적용이 얼마든지 가능하다.
예를 들어, 상기 조성물은 화장료 조성물에 포함되어 피부용 제품으로 제작될 수 있다. 피부용 제품의 적용 예로는 일반적으로 피부를 정돈, 보호용의 기초 화장품(화장수, 세럼, 에센스, 로션, 크림 등), 색조 화장품(메이크업 베이스, 파운데이션, 파우더, 아이 쉐도우, 립글로즈, 립스틱, 립밤 등), 손ㆍ발톱용 메이 크업(메니큐어, 영양제, 강화제, 탑코트 등), 세정용 화장품(폼클린싱, 클린싱 오일, 클린싱 로션, 클린싱 크림, 클린싱 젤, 팩, 마스크, 비누, 클린싱 티슈 등), 선 케어 화장품, 바디용 화장품(바디로션, 샤워젤, 바디 크림, 바디오일 등)을 모두 포함할 수 있으며, 이에 제한되지 않는다.
상기 피부용 제품으로의 적용 시에는, 상기 철갑상어 수용성 오일의 특성을 저해하지 않는 선에서, 제조될 제품의 목적, 제형, 효과 등에 맞게 통상적으로 사용되는 공지된 성분들을 더 포함할 수 있다.
또 다른 예로, 상기 조성물을 식품 조성물로 제조할 경우, 당해 분야에서 통상적인 방법에 의해 제공되는 다양한 건강보조식품의 형태로 제작될 수 있다. 예컨대, 상기 식품 조성물은, 현탁액, 음료 등의 액상; 또는, 스틱, 환, 젤리, 칩, 등의 고상; 의 제형으로 다양하게 제작될 수 있다.
일례로, 상기 식품 조성물은 음료 조성물로 제조될 수 있으며, 그 형태는, 예컨대, 액상 스틱형, 액상 파우치형 등으로 제작될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 식품 조성물을 음료 조성물로 제조될 경우에는 전술된 성분 이외에 예를 들어, 아카시아 꿀, 배즙, 도라지즙, 사과즙 또는 이들의 조합의 천연 감미제 성분을 더 포함할 수도 있다. 일례로서, 상기 철갑상어 수용성 오일 100 중량부에 대하여, 배즙 및 아카시아 꿀을 1:1의 중량비로 혼합한 천연 감미제를 15 내지 20 중량부로 더 포함할 수 있다. 이러한 천연 감미성분을 더 포함함으로써, 철갑상어의 섭취에 대한 거부감을 없애 관능성을 향상시킬 수 있다.
본 발명에 따르면, 철갑상어 성분, 구체적으로, 철갑상어 추출물, 더 구체적으로, 철갑상어 수용성 오일을 유효성분으로 함유하는 면역 증진용 기능성 조성물을 제조할 수 있다.
보다 구체적으로, 상기 철갑상어 수용성 오일은 철갑상어 온마리로부터 수득된 것으로, 수지상 세포 항원제시 기능 증진에 우수한 효능을 갖는 유효 성분을 함유하여, 면역 증진에 있어 탁월한 효과를 발휘할 수 있다.
또한, 본 발명에 따르면, 철갑상어 수용성 오일 제조 시, 무항생제로 인한 인체 안전성을 확보함으로써, 기존의 철갑상어 함유 제품 대비, 고품질, 고기능성의 철갑상어 함유 면역 증진용 기능성 조성물을 제조할 수 있다.
이하, 구체적인 실시예와 비교예를 통하여 본 발명의 구성 및 그에 따른 효과를 보다 상세히 설명하고자 한다. 그러나, 본 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
[실시예 1]
철갑상어 원재료 제조
3년 이상 친환경 무항생제로 양식하되, 월 1회 이상 천일염을 먹여 깨끗하게 키운 철갑상어(시베리아 철갑상어)를 출하시기에 맞추어 10일 동안 금식하게 한 후, 머리에 고무망치로 1회-2회 때려 고통 없이 기절시켜 즉시 급냉 하여 보관하였다. 급냉보관한 철갑상어를 깨끗하게 세척 후 철갑상어 온마리를 공압열수추출기에 철갑상어50%, 물41%, 깔라만시 원액5%, 도라지원액2%, 비트원액2%를 담아 102℃, 2.5기압에서, 100시간 추출 후 상, 중, 하 비중점을 두고 분리하여 철갑상어 액상 추출물 80%, 철갑상어 고형분 15%, 철갑상어 오일 5%을 각각 수득하였다.
철갑상어 수용성 오일 제조
수득한 철갑상어 오일을 30일 이상 17℃에서 숙성시킨 후 고압 펌프(고압 분사기)를 사용하여 미세한 노즐에 통과시키는 작업을 수십 차례 반복하여 생크림처럼 거품화시켰다. 이는 물성 변이를 일으켜 수용화 전 단계의 상태로 만드는 작업으로써, 이를 완료한 다음, 다시 10일간 자연 숙성도록 상온에 보관하였다.
전술한 물리적 천연 분리 방법을 수행한 철갑상어 오일 숙성물과 물을 같은 비율(철갑상어 오일 숙성물 50%+물50%)로 혼합하여 증류 추출기에 투입하여 추출하고 남은 철갑상어 오일 숙성물에 다시 물만 120%로 투입하여 30회 이상 증류추출하여 1차 수용성 오일을 제조하였다.
한편, 식용달팽이, 백봉오골개, 흰목이버섯, 비트, 다시마 뿌리 및 도라지를 혼합한 혼합물 50%+물50% 을 공압열수추출기에 담아 100시간 추출한 1차 첨가물을 제조하였다. 또한, 보이차, 국화, 연씨, 해죽순, 병풀, 개똥쑥, 인지쑥, 박하, 유근피, 하고초, 구찌뽕, 와송, 차가버섯, 삼채, 깔라만시 및 뽕잎을 혼합한 혼합물 50%와 물 50%을 공압열수추출기에 담아 100시간 추출한 2차 첨가물을 제조한 다음, 1차 첨가물과 함께 교반기에서 교반하였다.
그런 다음, 1차 첨가물 100 중량부에 대하여, 2차 첨가물 50 중량부와, 1차 수용성 오일 50 중량부를 증류추출기에 담아 증류 추출하여 최종 철갑상어 수용성 오일을 제조하였다.
도 1을 참조하면, 전술된 방법으로 제조된 투명한 외관의 철갑상어 수용성 오일을 확인할 수 있다.
<실험예 1 : 면역 증진 효능 확인 실험>
실시예 1에 따라 제조된 철갑상어 수용성 오일에 대한 면역 증진 효과를 확인하기 위하여, 수지상 세포의 항원제시 기능 확인 실험을 수행하였다. 즉, 수지상 세포가 오브알부민(ovalbumin(OVA))을 탐식한 다음, OVA 유래 펩타이드(peptide)를 “MHC class Ⅱ 분자”에 부착시켜 조력 T (helper T cell) 세포 에 제시해주는 기능에 미치는 영향을 분석하였다.
구체적인 실험방법은 다음과 같다.
1) 시료 준비
실시예 1의 철갑상어 수용성 오일을 3개의 농도(2.5%, 5%, 10%)로 희석하여 각 시험군들을 제조하였다. 보다 정확한 비교를 위하여, 상기 시험군은 3 그룹(시험군 1 : 1차 원료, 시험군 2 : 2차 원료, 시험군 3 : 3차 원료) 으로 나누어 3회 반복 실험하였다.
2) 면역 세포 증식에 미치는 영향 분석
수지상 세포
수지상 세포주인 DC2.4 cell을 준비하였다. DC2.4 cell은 10%의 우혈청을 첨가한 DMEM 배지를 이용하여 배양하였다. 96 well plate의 각 well에 수지상 세포를 4 × 104 cell/well 로 가한 다음, 2.5%, 5%, 10% 의 각 농도별 시험군 1, 2 및 3을 각각 첨가하고, 37℃, 5% CO2 배양기에서 2일 간 배양하였다.
이후, 세포의 증식 정도는 각 well에 WST-8 시약을 20 ㎕ 씩 가한 다음, 37℃ 에서 4 시간 배양한 후, 450 nm에서 흡광도를 측정하여 계산하였다.
그 결과를 도 2에 나타내었다.
도 2를 참조하면, 시험군 1(1차 원료), 시험군 2(2차 원료) 및 시험군 3(3차 원료) 모두, 각 농도 (2.5%, 5%, 10%) 에 대하여, 세포 증식 억제 또는 증식 촉진 효능이 거의 확인되지 않았다.
T 세포
OVA-특이 CD8 T cell인 DOBW cell을 이용하였다. DOBW cell은 10%의 우혈청을 첨가한 DMEM 배지를 이용하여 배양하였다. 96 well plate의 각 well에 DOBW cell을 2 × 104 cell/well 로 가한 다음, 2.5%, 5%, 10% 의 각 농도별 시험군 1, 2 및 3을 각각 첨가하고, 37℃, 5% CO2 배양기에서 2일간 배양하였다.
이후, 세포의 증식 정도는 각 well에 WST 시약을 20 ㎕ 씩 가한 다음, 37℃ 에서 4 시간 배양한 후, 450 nm에서 흡광도를 측정하여 계산하였다.
그 결과를 도 3에 나타내었다.
도 3을 참조하면, 시험군 1(1차 원료) 및 시험군 2(2차 원료)의 각 농도 (2.5%, 5%, 10%) 에 대하여, 세포 증식 억제 또는 증식 촉진 효능이 확인되지 않았다. 단, 시험군 3(3차 원료)에서 2.5%, 5% 농도에서는 세포 증식 억제 또는 증식 촉진 효능이 확인되지 않았으나, 10% 농도에서는 세포 증식 억제 효능이 나타난 것을 확인할 수 있었다.
3) 수지상 세포 항원제시 기능에 미치는 영향 분석
10%의 우혈청을 첨가한 DMEM 배지를 이용하였다.
96 well plate의 각 well에 수지상 세포 DC2.4 cell 를 1 × 105 cell/well 로 가한 다음, 2.5%, 5%, 10% 의 각 농도별 시험군 1, 2 및 3을 각각 첨가하고, OVA를 함유하는 PLGA(poly lactide-co-glycolide)나노입자(평균 크기 750 nm)를 OVA로서 10 ㎕/ml로 가하고, DOBW cell을 2 × 105 cell/well 로 가한 다음, 37℃, 5% CO2 배양기에서 2일간 배양하였다. 배양 후 상층액을 취하였다.
DOBW cell은 MHC Class Ⅱ 분자인 I-Ad 에 결합된 OVA 펩타이드(peptide)를 인식하여 IL-2를 생산하는 CD4 양성 T 세포이다. 상층액에 존재하는 IL-2의 양은 ELISA 키트를 이용하여 정량하였다. 그 결과를 도 4에 나타내었다.
도 4를 참조하면, 시험군 1(1차 원료), 시험군 2(2차 원료) 및 시험군 3(3차 원료) 모두, 각 농도 (2.5%, 5%, 10%) 에 대하여, 농도 의존적으로 수지상 세포의 항원 제시 기능이 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 1차 원료는 10%의 농도에서 107% 증가되었고, 2차 원료에서는 10%의 농도에서 64% 증가되었고, 3차 원료에서는 10% 농도에서 53% 증가되었음을 확인한 바, 낮은 농도임에도 수지상 세포의 항원제시 기능 증가에 우수한 효과를 보였음을 알 수 있었다.
이로써, 본 발명의 철갑상어 수용성 오일(시베리아 철갑상어 추출물)은 수지상 세포의 항원제시 기능을 증진시키는 효능을 발휘하여, 면역 증진에 탁월한 효과를 나타냄을 확인하였다.
본 명세서에서는 본 발명자들이 수행한 다양한 실시예 가운데 몇 개의 예만을 들어 설명하는 것이나 본 발명의 기술적 사상은 이에 한정하거나 제한되지 않고, 당업자에 의해 변형되어 다양하게 실시될 수 있음은 물론이다.
Claims (2)
- 철갑상어 수용성 오일을 유효성분으로 하고,
상기 철갑상어 수용성 오일은 수지상 세포의 항원제시 기능 증강 효능을 갖는 것을 특징으로 하고,
상기 철갑상어 수용성 오일은, 철갑상어 온마리로부터 얻어지는 것이되, 조성물 총 중량에 대하여, 상기 철갑상어 수용성 오일은 10 내지 70 중량% 로 포함되고,
상기 철갑상어 수용성 오일은, 철갑상어 온마리를 사용한 원재료 수득방법에 따라 철갑상어 오일을 제조하는 단계; 상기 철갑상어 오일을 제1 숙성을 수행하여 철갑상어 오일 숙성물을 제조하는 단계; 상기 철갑상어 오일 숙성물에 대하여, 고압 처리기 및 미세한 노즐을 사용하여 기름의 물성 변이를 형성하여 거품화시키는, 전처리 단계; 전처리된 철갑상어 오일 숙성물을 제2 숙성하는 단계; 상기 제2 숙성이 수행된 철갑상어 오일 숙성물과 물을 혼합하여 증류 추출기에 투입하고 제2 추출하는 단계; 제2 추출을 수행한 후에 남은 철갑상어 오일 숙성물에 다시 물을 혼합하여 증류 추출기에 투입하고 제3 추출하여 1차 수용성 오일을 제조하는 단계; 식용 달팽이를 포함하는 1차 첨가물 조성물 및, 보이차 및 국화를 포함하는 2차 첨가물 조성물을 각각 제조하는 단계; 및 상기 1차 수용성 오일, 상기 1차 첨가물 조성물 및 상기 2차 첨가물 조성물의 혼합물을 증류 추출하여 2차 수용성 오일을 제조하는 단계;를 포함하여, 제조되는 것을 특징으로 하고,
상기 철갑상어의 원재료 수득방법은, 철갑상어 치어를 천연 항생제를 사용하여 3년 이상 동안 양식하는, 양식 단계; 양식된 철갑상어를 출하하여 온마리 상태로 전처리하는, 전처리 단계; 전처리된 철갑상어를 급속 냉각하되, 상기 급속 냉각은 5분 내지 20분 사이에 -80 내지 -20℃의 온도까지 도달하도록 하는 것인, 냉각 보관 단계; 및 냉각 보관된 철갑상어를 해동하고 세척한 다음, 철갑상어 온마리를 공압 추출기에 투입하고 제1 추출을 수행하여 철갑상어 오일을 수득하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는, 면역 증진용 기능성 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 면역 증진용 기능성 조성물은, 화장료 조성물, 식품 조성물, 음료 조성물 및 약학 조성물 중에서 선택되는 1종 이상의 건강 기능 조성물로 제조되는 것을 특징으로 하는, 면역 증진용 기능성 조성물.
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