KR102479151B1 - 위커하모마이세스속 미생물 배양물 - Google Patents
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Abstract
벤조산에틸을 고함유하고, 화학 합성품보다 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기를 갖는 배양물의 제공.
위커하모마이세스속에 속하는 미생물을 유성분 함유 배지에서 배양하여 얻어지는 배양물.
위커하모마이세스속에 속하는 미생물을 유성분 함유 배지에서 배양하여 얻어지는 배양물.
Description
본 발명은, 양호한 향기를 갖는 배양물 및 그 이용에 관한 것이다.
종래, 여러 가지 향기 성분을 생산하는 효모, 예를 들어 사카로미세스·세레비제 등을 사용하여, 양호한 향기를 갖는 배양물을 얻는 방법이 알려져 있으며, 그 배양물은 음식품으로서 이용되고 있다 (특허문헌 1 ∼ 3).
향기 성분 중 하나인 벤조산에틸은 화학적으로는 벤조산과 에탄올로부터 합성할 수 있다. 이 화합물은 스타 프루트의 향기 성분 중 하나로서 알려져 있으며, 산업적으로는 과실의 향기의 인공 향료로서 이용되고 있다. 향기 성분으로서 벤조산에틸을 함유하는 사카로미세스·세레비제를 사용한 배양물도 알려져 있지만, 그 함유량은 0.006 ∼ 0.009 ppm 으로 적은 것이었다 (비특허문헌 1).
또, 위커하모마이세스·피쥬페리 (Wickerhamomyces pijperi) 는, 피키아 피쥬페리 (Pichia pijperi) 로부터 재분류된 효모의 일종이며, 비특허문헌 2 에는 이 효모를 효모 추출-만니톨 배지, 효모-펩톤-덱스트로오스 (YPD) 배지에서 배양한 것이 기재되어 있지만, 얻어진 배양물의 특성은 불명하며, 유성분 (乳成分) 함유 배지에서 배양할 수 있는 것 및 그 배양물의 향기에 대해서도 전혀 알려지지 않았었다.
Journal of the institute of Brewing, 116, 190-196, 2010
Microbiology, 155, 3142-3148, 2009
상기 벤조산에틸 등의 향기 성분의 화학 합성품은 향기가 단조로워, 향료용 조성물로서 반드시 만족할 수 있는 것은 아니었다. 이 때문에, 화장품이나 음식품, 의약품에 이용 가능하고, 화학 합성품보다 기호성이 우수한 향기를 갖고, 향료용 조성물로서 이용 가능한 조성물을 제공하는 것이 요구되고 있었다. 또, 프루트형의 향기를 좋아하는 소비자도 많아, 프루트형의 신규한 향기를 제공하는 것이 요구되고 있었다.
본 발명의 과제는, 향료용 조성물, 화장품, 음식품 및 의약품 등에 이용할 수 있는 신규한 조성물로서, 벤조산에틸을 다량으로 함유하고, 벤조산에틸의 화학 합성품보다 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기를 갖는 조성물 및 그 이용을 제공하는 것에 있다.
그래서 본 발명자는, 양호한 향기를 갖는 조성물을 개발하기 위해 여러 가지 검토한 결과, 전혀 의외로, 위커하모마이세스속의 미생물을, 유성분을 함유하는 배지에서 배양하였을 때에, 향기 성분으로서 알려져 있는 벤조산에틸을 다량으로 함유하고, 벤조산에틸의 화학 합성품보다 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기를 갖는 배양물이 얻어지고, 당해 배양물은 향료용 조성물, 화장품, 음식품, 의약품 등에 사용할 수 있는 배양물로서 유용한 것을 알아내어, 본 발명을 완성하였다.
즉, 본 발명은 다음의 [1] ∼ [10] 을 제공하는 것이다.
[1] 위커하모마이세스속에 속하는 미생물을 유성분 함유 배지에서 배양하여 얻어지는 배양물.
[2] 유성분 함유 배지가 훼이 함유 배지인 [1] 에 기재된 배양물.
[3] 위커하모마이세스속에 속하는 미생물이 위커하모마이세스·피쥬페리인 [1] 또는 [2] 에 기재된 배양물.
[4] 위커하모마이세스속에 속하는 미생물이 위커하모마이세스·피쥬페리 NBRC1290 및/또는 위커하모마이세스·피쥬페리 NBRC1887 인 [1] ∼ [3] 중 어느 하나에 기재된 배양물.
[5] 유성분 함유 배지가 추가로 벤조산 및/또는 그 염을 함유하는 것인 [1] ∼ [4] 중 어느 하나에 기재된 배양물.
[6] [1] ∼ [5] 중 어느 하나에 기재된 배양물을 함유하는 향료용 조성물.
[7] [1] ∼ [5] 중 어느 하나에 기재된 배양물을 함유하는 화장품.
[8] [1] ∼ [5] 중 어느 하나에 기재된 배양물을 함유하는 음식품.
[9] [1] ∼ [5] 중 어느 하나에 기재된 배양물을 함유하는 의약품.
[10] [1] ∼ [5] 중 어느 하나에 기재된 배양물을 배합하는 것을 특징으로 하는 화장품, 음식품 또는 의약품에 대한 향기 부여 방법.
본 발명의 배양물은, 벤조산에틸을 다량으로 함유하고, 벤조산에틸의 화학 합성품보다 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기를 갖는 점에서, 향료용 조성물이나 화장품뿐만 아니라, 음식품이나 의약품에 사용되는 배양물로서 유용하다.
본 발명의 배양물은, 위커하모마이세스속에 속하는 미생물을 유성분 함유 배지에서 배양하여 얻어지는 배양물이다.
위커하모마이세스속에 속하는 미생물로는, 위커하모마이세스·피쥬페리 (Wickerhamomyces pijperi), 위커하모마이세스·아노말루스 (Wickerhamomyces anomalus), 위커하모마이세스·보비스 (Wickerhamomyces bovis), 위커하모마이세스·라바울렌시스 (Wickerhamomyces rabaulensis), 위커하모마이세스·햄프시렌시스 (Wickerhamomyces hampshirensis), 위커하모마이세스·스트라스부르젠시스 (Wickerhamomyces strasburgensis), 위커하모마이세스·시도위오럼 (Wickerhamomyces sydowiorum), 위커하모마이세스·린페르디 (Wickerhamomyces lynferdii), 위커하모마이세스·시페리 (Wickerhamomyces ciferrii), 위커하모마이세스·샴바르디 (Wickerhamomyces chambardii), 위커하모마이세스·실비콜라 (Wickerhamomyces silvicola), 위커하모마이세스·비스포러스 (Wickerhamomyces bisporus), 위커하모마이세스·알니 (Wickerhamomyces alni), 위커하모마이세스·카나덴시스 (Wickerhamomyces canadensis), 위커하모마이세스·오니치스 (Wickerhamomyces onychis), 위커하모마이세스·에다피커스 (Wickerhamomyces edaphicus), 위커하모마이세스·파타고니쿠스 (Wickerhamomyces patagonicus) 등을 들 수 있다. 이 중, 위커하모마이세스·피쥬페리가 보다 바람직하다. 또한, 위커하모마이세스·피쥬페리 중, NBRC (NITE Biological Resource Center) 에 기탁되어 있는 NBRC1290, NBRC1887 이 더욱 바람직하다. 또한, 이들 미생물은 단독으로 사용해도 되고, 복수 조합하여 사용해도 된다. 또한, 구분류에 있어서 피키아·피쥬페리 (Pichia pijperi) 로 분류되어 있던 것으로, 새롭게 위커하모마이세스·피쥬페리로서 분류될 수 있는 것은, 본원의 위커하모마이세스·피쥬페리에 포함된다.
본 명세서에 있어서「유성분」이란, 우유, 염소유, 양유 등의 수유 (獸乳) 의 생유, 가열유, 탈지 분유, 전지 분유 혹은 생크림, 훼이 등의 젖 유래의 성분을 함유하는 것을 의미한다.
유성분 함유 배지로는, 유성분을 함유하는 배지이면 되고, 추가로 다른 성분을 함유하고 있어도 된다. 당해 다른 성분으로는, 특별히 한정되는 것은 아니지만, 글루코오스, 갈락토오스, 락토오스, 프룩토오스 등의 당, 벤조산 및/또는 그 염이 바람직하다. 당으로는, 미생물에 자화되는 점에서 글루코오스가 바람직하다. 또, 첨가하면 미생물의 벤조산에틸의 산생량이 향상되는 점에서 벤조산 및/또는 그 염이 바람직하고, 벤조산의 염으로는, 벤조산나트륨 및 벤조산칼륨 등의 벤조산 알칼리 금속염이 보다 바람직하고, 벤조산나트륨이 더욱 바람직하다. 따라서, 벤조산 및/또는 그 염으로는, 벤조산 및/또는 벤조산나트륨을 첨가하는 것이 바람직하다.
유성분으로는, 미생물의 벤조산에틸의 산생량이 향상되기 때문에, 훼이가 특히 바람직하다. 「훼이」란, 우유로부터 유지방분, 카세인을 제거한 것이다. 예를 들어, 훼이는 유성분을 미생물로 발효시켰을 때의 배양 상청으로서 얻을 수 있고, 락토오스, 갈락토오스 등의 당, 아미노산, 락트산, 단백질 등을 함유하는 것이 바람직하다. 또, 훼이로는, 특히 유성분을 락트산균 및/또는 비피더스균으로 배양하여 얻어진 배양 상청이 바람직하다. 여기서, 락트산균 및/또는 비피더스균으로는, 락토바실러스·카제이, 락토바실러스·말리, 락토바실러스·아시도필루스, 락토바실러스·델브루에키이 서브스피시즈. 불가리쿠스, 락토바실러스·헬베티쿠스 등의 락토바실러스속 세균, 스트렙토코커스·써모필루스 등의 스트렙토코커스속 세균, 락토코커스·락티스 서브스피시즈. 락티스, 락토코커스·락티스 서브스피시즈. 크레모리스 등의 락토코커스속 세균, 엔테로코커스·페칼리스 등의 엔테로코커스속 세균, 혹은 비피도박테리움·브레이브, 비피도박테리움·비피덤, 비피도박테리움·롱검 등의 비피도박테리움속 세균을 들 수 있다.
배지 중의 유성분의 함유량은, 특별히 한정되지 않지만, 고형분 환산으로 1 ∼ 50 질량% (이하, 간단히「%」라고 한다) 가 바람직하고, 2 ∼ 10 % 가 보다 바람직하다. 또, 벤조산 및/또는 그 염의 함유량은, 미생물의 벤조산에틸의 산생량 및 미생물의 증식능의 면에서, 유성분 함유 배지 중 0.001 ∼ 0.1 % 가 바람직하고, 0.01 ∼ 0.05 % 가 보다 바람직하다. 또한, 글루코오스의 함유량은, 미생물의 증식능의 면에서 0.1 ∼ 10 % 가 바람직하고, 1 ∼ 5 % 가 보다 바람직하다.
위커하모마이세스속에 속하는 미생물의 배양 온도는, 특별히 한정되지 않지만, 배양물의 향기의 면에서 15 ∼ 30 ℃ 가 바람직하고, 20 ∼ 30 ℃ 가 더욱 바람직하다. 배양 시간은 8 시간 이상이 바람직하고, 24 ∼ 32 시간이 더욱 바람직하다. 또, 벤조산 및/또는 그 염을 배지에 첨가한 경우에는, 24 ∼ 48 시간이 바람직하고, 32 ∼ 48 시간이 더욱 바람직하다. 배양 방법으로는, 교반 배양, 정치 배양, 진탕 배양, 중화 배양 등을 들 수 있다.
본 발명의 배양물 중에는, 벤조산에틸이 1.0 ppm 이상 함유되고, 벤조산에틸의 화학 합성품보다 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기를 갖는다. 벤조산에틸의 함유량은 1.0 ∼ 50 ppm 이 바람직하고, 1.0 ∼ 30 ppm 이 보다 바람직하다.
또, 본 발명의 배양물 중에는, 벤조산에틸 이외의 다른 향기 성분이 함유되어 있어도 된다. 다른 향기 성분으로는, 이소아밀알코올 등의 향기 성분을 들 수 있다.
본 발명의 배양물은, 벤조산에틸을 다량으로 함유하고, 벤조산에틸의 화학 합성품보다 복잡하고 프레시한 프루트형의 양호한 향기를 갖기 때문에, 향료용 조성물, 화장품, 음식품 및 의약품 등에 이용할 수 있다. 화장품 분야에서는 공업적으로 이용 가능한 생물 유래의 향료는 적고, 합성 향료보다 천연 향료의 수요가 높기 때문에, 화장품에 바람직하게 이용할 수 있다.
본 발명의 배양물은, 배양물을 그대로 향료용 조성물, 화장품, 음식품 및 의약품 등에 배합해도 되지만, 여과시킨 것을 배합하는 것이 바람직하다. 또, 배양물을 동결 건조법 혹은 증류법 등으로 농축시키고, 당해 농축물을 향료용 조성물, 화장품, 음식품 및 의약품 등에 배합할 수도 있다.
화장품으로는, 향수, 오드 콜로뉴, 오드 트왈렛 등의 방향 화장품, 화장수, 유액, 로션, 크림, 팩, 미용액 등의 기초 화장품, 샴푸나 린스 등의 두발용 화장품, 입욕제 등의 목욕용 화장품, 파운데이션 등의 메이크업 화장료, 자외선 차단제 등의 특수 화장품 등을 들 수 있다. 음식품으로는, 각종 청량 음료, 발포주, 맥주, 청주, 과자류, 빙과류, 아이스크림, 발효유 등의 유제품 등을 들 수 있다. 또 의약품으로는, 크림, 연고, 겔 등의 외용제 등을 들 수 있다. 이들 화장품, 음식품, 의약품 중의 본 발명 배양물의 함유량은, 고형분 환산으로 0.01 ∼ 10 % 가 바람직하고, 0.1 ∼ 1 % 가 보다 바람직하다.
실시예
다음으로 실시예를 들어 본 발명을 상세하게 설명한다.
실시예 1
(1) 균주 및 전전 배양
(ⅰ) 사용 균주
위커하모마이세스·피쥬페리 YIT8095 (NBRC 1290), 위커하모마이세스·피쥬페리 YIT12779 (NBRC 1887)
비교예 : 클루이베로마이세스 마르시아누스 (Kluyveromyces marxianus) YIT12612 (NBRC 0260)
(ⅱ) 전전 배양
전전 배양 : 2 ㎖ 의 효모 곰팡이 (YM) 배지 (1 % 글루코오스, 0.5 % 펩톤, 0.3 % 효모 엑기스, 0.3 % 맥아 엑기스) 에 20 % 글리세롤 동결 보존주를 20 ㎕ 접종하고, 30 ℃, 160 rpm 으로 24 시간 진탕 배양하였다.
(2) 균이 산생하는 향기 성분의 분석
(ⅰ) 전 배양
전 배양 : 1 % 글루코오스를 함유하는 2 ㎖ 의 훼이 함유 배지에 전전 배양에서 얻어진 배양액을 20 ㎕ 접종하고, 30 ℃, 160 rpm 으로 24 시간 진탕 배양하였다.
상기 훼이 함유 배지로는 스트렙토코커스·써모필루스 YIT2084 (FERM BP-10879) 를 3 % 탈지 분유 배지에서 배양하여 얻어진 배양물의 상청을 사용하였다. 이 상청을 분석한 결과, 1.1 % 의 락토오스, 0.4 % 의 갈락토오스, 0.4 % 의 락트산을 함유하고, pH 는 4.0 이었다.
(ⅱ) 배양
배양 : 1 % 글루코오스를 함유하는 5 ㎖ 의 훼이 함유 배지에, 전 배양액을 50 ㎕ 접종하고, 30 ℃, 160 rpm 으로 24 시간 진탕 배양하였다.
(ⅲ) 향기 성분의 분석
배양 종료 후, 시료는 8000 rpm 으로 5 분간 원심 분리하고, 2 ㎖ 의 상청을 20 ㎖ 의 바이알에 옮기고, 배양물 중의 향기 성분을 헤드스페이스 기체 크로마토그래피 질량 분석법 (HS-GC-MS) 에 의해 동정하였다 (표 1, 표 2). 또, 동정한 향기 성분의 정량은, HS-GC-불꽃 이온화 검출기 (FID) 로 실시하였다 (표 3, 표 4). 결과를 표 5 에 나타낸다. 또, 배양액의 향기의 관능 검사를 하기의 기준으로 실시하였다. 그 결과를 표 5 에 나타낸다.
(관능 검사의 평가 기준)
5 : 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기가 강하게 난다.
4 : 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기가 난다.
3 : 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기가 조금 난다.
2 : 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기가 거의 나지 않는다.
1 : 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기는 나지 않는다.
NBRC1290 주와 NBRC1887 주의 배양액으로부터 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기가 강하게 느껴지고, 향기 성분을 분석하여 각 화합물의 함유량을 비교한 결과, 벤조산에틸의 함유량이 많은 것에 특징이 있었다. 이들 배양액과의 비교로서, 별종의 효모 (클루이베로마이세스 마르시아누스 NBRC0260 주) 를 훼이 함유 배지에서 배양시켜 얻은 배양액의 향기 성분을 분석·평가한 결과, 장미풍의 향기는 강하지만, 프루트형의 향기는 거의 나지 않고, 벤조산에틸은 함유하고 있지 않았다.
NBRC1290 주 및 NBRC1887 주의 배양액과, 배양액 중과 동량의 벤조산에틸의 화학 합성품 단독의 향기의 관능 검사를 실시한 결과, NBRC1290 주 및 NBRC1887 주의 배양액에서는 화학 합성품에는 낼 수 없는 향기의 복잡함이 느껴지고, 화학 합성품보다 바람직한 향기였다.
(3) 배지에 의한 균의 향기 성분 산생량의 차이
NBRC1290 주 및 NBRC1887 주를 사용하여 실험을 실시하였다.
(ⅰ) 전 배양
전 배양 : 1 % 글루코오스를 함유하는 2 ㎖ 의 훼이 함유 배지, 2 ㎖ 의 YPD 배지 (1 % 효모 엑기스, 2 % 펩톤, 2 % 글루코오스), 2 ㎖ 의 YM 배지 (1 % 글루코오스, 0.5 % 펩톤, 0.3 % 효모 엑기스, 0.3 % 맥아 엑기스) 에, 전전 배양에서 얻어진 배양액을 각각 20 ㎕ 접종하고, 30 ℃, 160 rpm 으로 24 시간 진탕 배양하였다.
(ⅱ) 배양
배양 : 1 % 글루코오스를 함유하는 2 ㎖ 의 훼이 함유 배지, 2 ㎖ 의 YPD 배지, 2 ㎖ 의 YM 배지에, 전 배양에서 얻어진 배양액을 각각 5 ㎖ 접종하고, 30 ℃, 160 rpm 으로 24 시간 진탕 배양하였다.
(ⅲ) 향기 성분의 함유량의 분석
배양 종료 후, 배양물 중의 향기 성분의 함유량을 HS-GC-FID 에 의해 분석하였다 (표 3, 표 4). 결과를 표 6 에 나타낸다. 또, 배양물의 향기의 관능 검사를 실시예 1 (2) 와 동일한 기준으로 실시하였다. 그 결과를 표 6 에 나타낸다.
훼이 함유 배지에서 NBRC1290 주와 NBRC1887 주를 배양한 배양액으로부터 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기가 강하게 느껴지고, 배양액은 벤조산에틸을 많이 함유하고 있었다. 한편, YM 배지, YPD 배지에서 상기 균주를 배양한 배양액에 있어서도 벤조산에틸을 함유하는 경우가 있지만, 그 함유량은 적으며, 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기는 거의 나지 않았다.
(4) 배양 조건에 의한 균의 향기 성분 산생량의 차이
NBRC1887 주를 사용하여 실험을 실시하였다.
(ⅰ) 전 배양
전 배양 : 1 % 글루코오스를 함유하는 2 ㎖ 의 훼이 함유 배지에 전전 배양에서 얻어진 배양액을 20 ㎕ 접종하고, 30 ℃, 160 rpm 으로 24 시간 진탕 배양하였다.
(ⅱ) 배양
배양 : 1 % 글루코오스를 함유하는 100 ㎖ 의 훼이 함유 배지에 전 배양액을 1 ㎖ 접종하고, 15 ℃, 20 ℃, 25 ℃, 30 ℃ 의 배양 조건에서, 160 rpm 으로 진탕 배양하였다. 또, 0, 24, 32, 48, 56 시간 배양하였을 때에 샘플을 회수하였다.
(ⅲ) 벤조산에틸의 함유량의 분석
각 배양물 중의 벤조산에틸의 함유량을 HS-GC-FID 에 의해 분석하였다 (표 3, 표 4). 결과를 표 7 에 나타낸다. 또, 배양물의 향기의 관능 검사를 하기의 기준으로 실시하였다. 그 결과를 표 7 에 나타낸다.
(관능 검사의 평가 기준)
◎ : 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기가 강하게 난다.
○ : 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기가 난다.
△ : 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기가 조금 나지만, 복잡함이 약하다.
▲ : 다른 향기 성분의 향기가 강하고, 향기의 특징이 변화하여, 일본 술풍의 향기가 난다.
× : 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기가 나지 않는다.
배양 온도가 15 ℃ 인 경우, 미생물의 발효에 의해 벤조산에틸은 산생되지만, 다른 향기 성분의 향기가 약하고, 배양물의 향기의 복잡함이 약하였다. 한편, 20 ∼ 30 ℃ 에서 배양한 배양물은 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기가 나고, 향기가 양호하였다. 또, 배양 시간이 48 시간 이상이 되면, 미생물의 발효에 의해, 벤조산에틸 이외의 향기 성분의 산생량이 상승하기 때문에, 다른 향기 성분의 향기가 강해지고, 향기의 특징이 변화하여, 일본 술풍의 향기가 났다. 이 때문에, 배양 시간으로는 24 ∼ 32 시간이 양호하였다.
(5) 벤조산 또는 그 염을 배지에 배합하였을 때의 벤조산에틸 함유량의 차이
NBRC1887 주를 사용하여 실험을 실시하였다.
(ⅰ) 전 배양
전 배양 : 1 % 글루코오스를 함유하는 2 ㎖ 의 훼이 함유 배지에 전전 배양에서 얻어진 배양액을 20 ㎕ 접종하고, 30 ℃, 160 rpm 으로 24 시간 진탕 배양하였다.
(ⅱ) 배양
배양 : 1 % 글루코오스를 함유하는 100 ㎖ 의 훼이 함유 배지에, 벤조산나트륨을 0.01 % 가 되도록 배합하였다. 또 동일하게 하여, 1 % 글루코오스를 함유하는 100 ㎖ 의 훼이 함유 배지에, 벤조산이 0.01 %, 페닐알라닌이 0.01 %, 0.05 %, 0.1 %, 파라하이드록시메틸벤젠이 0.01 %, 0.05 % 가 되도록 각각 배합하였다. 또한, 컨트롤로서 첨가물을 배합하지 않는 1 % 글루코오스를 함유하는 100 ㎖ 의 훼이 함유 배지도 준비하였다. 각 배지에, 전 배양액을 1 ㎖ 접종하고, 30 ℃, 160 rpm 으로 진탕 배양하였다. 또, 0, 24, 32, 48 시간 배양하였을 때에 샘플을 회수하였다.
(ⅲ) 벤조산에틸의 함유량의 분석
각 배양물 중의 벤조산에틸의 함유량을 HS-GC-FID 에 의해 분석하였다 (표 3, 표 4). 결과를 표 8 에 나타낸다.
벤조산 또는 벤조산나트륨을 배합한 경우에는, 32 ∼ 48 시간 배양하였을 때에, 배양물 중의 벤조산에틸의 함유량이 현저하게 증가하였다. 그 밖의 물질을 배합한 경우에는, 배양물 중의 벤조산에틸의 함유량은 거의 증가하지 않았다.
제조예 1
표 9 의 조성으로, (5) 와 (6) 을 혼합하여, 이것에 (1) ∼ (4) 를 첨가하고 충분히 교반하여 화장수를 조제하였다. 이 화장수는 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기가 났다. 또한, 배양액으로는, 1 % 글루코오스를 함유하는 훼이 함유 배지 100 ㎖ 에, 실시예 1 (4) 의 전 배양에서 얻은 전 배양액을 1 ㎖ 접종하고, 20 ℃, 24 시간, 160 rpm 으로 진탕 배양하여 얻어진 배양액을 여과시킨 것을 사용하였다.
제조예 2
표 10 의 조성으로, (10) 에 (7) ∼ (9) 를 첨가하여 가온시키고, 80 ℃ 에서 (1) ∼ (6) 을 첨가하여 유화시키고, 실온까지 냉각시켜 유액을 조제하였다. 이 유액은 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기가 났다. 또한, 배양액은 제조예 1 과 동일한 것을 사용하였다.
제조예 3
표 11 의 조성으로, (12) 에 (9) ∼ (11) 을 첨가하여 가온시키고, 80 ℃ 에서 (1) ∼ (8) 을 첨가하여 유화시키고, 실온까지 냉각시켜 크림을 조제하였다. 이 크림은 복잡하고 프레시한 프루트형의 향기가 났다. 또한, 배양액은 제조예 1 과 동일한 것을 사용하였다.
Claims (10)
- 위커하모마이세스·피쥬페리 NBRC1290 및/또는 위커하모마이세스·피쥬페리 NBRC1887 을 훼이 함유 배지에서 배양하여 얻어지는 배양물.
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 제 1 항에 있어서,
훼이 함유 배지가 추가로 벤조산 및/또는 그 염을 함유하는 것인 배양물. - 제 1 항 또는 제 5 항에 기재된 배양물을 함유하는 향료용 조성물.
- 제 1 항 또는 제 5 항에 기재된 배양물을 함유하는 화장품.
- 제 1 항 또는 제 5 항에 기재된 배양물을 함유하는 음식품.
- 삭제
- 제 1 항 또는 제 5 항에 기재된 배양물을 배합하는 것을 특징으로 하는 화장품, 음식품 또는 의약품에 대한 향기 부여 방법.
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