KR102384358B1 - 홍삼의 비수용성 추출물을 포함하는 항균 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 1) 홍삼에 메탄올을 용매로 추출하여 제1 추출물을 수득하는 단계; 2) 상기 제1 추출물에 염소화 탄화수소를 용매로 추출하여 제2 추출물을 수득하는 단계; 3) 상기 제2 추출물로부터 물층을 제거하고 비수용성층을 수득하는 단계; 및 4) 상기 비수용성층에 메탄올을 용매로 추출하여 제3 추출물을 수득하는 단계;를 포함하는 방법에 의해 제조된 비수용성 홍삼 추출물을 포함하는 항균 조성물을 제공한다. 본 발명의 항균 조성물은 황색 포도상구균에 대해서 특히 우수한 항균력을 가지므로, 식품 조성물, 약학 조성물, 화장료 조성물 등과 같이 황색 포도상구균에 대한 항균 활성을 필요로 하는 분야에서 활용할 수 있다. 또한, 본 발명의 항균 조성물은 홍삼 유래의 추출물을 주요 성분으로 하므로 독성이 적고 인체 및 환경에 무해할 수 있다.

Description

홍삼의 비수용성 추출물을 포함하는 항균 조성물{Antibacterial Composition Comprising Non-aqueous Extract Of Red Ginseng}
본 발명은 홍삼의 비수용성 추출물을 포함하는 항균 조성물에 관한 것이다.
식품에서 식품성분 및 영양소의 파괴를 최소화하기 위해서는 열처리를 최소화하는 것이 바람직한데, 이 경우 인체 유해 미생물의 생육을 억제하고 식품 부패성을 관리하기 위한 방안이 요구된다. 이에 따라, 인체 유해 미생물의 생육을 억제하기 위해 식품 내 미생물 생육 환경을 조정(산성화, 낮은 수분 활성도, 높은 당도)하고, 추가적으로 방부제 등을 사용하여 안정성을 증대시키고 있다.
방부제로서 종래에는 화학적으로 합성한 파라벤류, 페녹시에탄올, 트리클로산과 같은 인공물질들이 주로 이용되어 왔다. 그러나, 건강에 대한 관심이 높아지고, 화학적으로 합성한 인공물질의 경우 피부 알러지 또는 내성균 등을 유발할 수 있음이 지적되면서, 최근 화장품 및 식품 분야에서는 인체 독성이 최소화된 천연 소재를 활용한 항균 조성물에 대한 연구가 지속적으로 이루어지고 있다(특허문헌 1).
인체 유해 미생물 중 하나인 황색 포도상구균(Staphylococcus aureus)은 화농성 질환의 원인균일뿐만 아니라 식중독의 원인균이다. 이는, 자연계에 널리 분포하며, 특히 동물의 피부, 비강, 구강에 분포하면서 손쉽게 식품을 오염시킬 우려가 높고, 한번 오염되면 독소를 생산하여 가열처리 하더라도 식중독 성분이 식품에 잔존하여 건강에 문제를 일으킬 수 있다.
한편, 식품에 첨가되는 방부제에 있어서, 다양한 세균에 대하여 사멸 효과가 있는 항균제를 사용할 경우 세균의 내성을 유발할 수 있어 안전성에 대한 우려가 있었고, 한편으로 특정 원료를 사용하는 경우 특정한 미생물에 의한 오염 발생이 높으므로 광범위한 항균 스펙트럼을 가지는 항균제보다는 특정한 균에만 항균 효과가 있는 물질의 개발이 필요하였다.
본 발명자들은 방부제로 사용되는 인공물질들을 대신하여 천연 소재의 방부 효과를 활용하는 방안에 대하여 검토하였으며, 홍삼의 비수용성 추출물이 식품 또는 피부 등에서 번식할 수 있는 황색 포도상구균에 대하여 특이적으로 우수한 항균 효과를 나타내는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
한국 공개특허 제2013-0106062호
본 발명은 황색 포도상구균에 선택적이고 우수한 항균력을 가지는 홍삼의 비수용성 추출물 함유 조성물 및 이의 제조 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명의 일 양태는 1) 홍삼에 메탄올을 용매로 추출하여 제1 추출물을 수득하는 단계; 2) 상기 제1 추출물에 염소화 탄화수소를 용매로 추출하여 제2 추출물을 수득하는 단계; 3) 상기 제2 추출물로부터 물층을 제거하고 비수용성층을 수득하는 단계; 및 4) 상기 비수용성층에 메탄올을 용매로 추출하여 제3 추출물을 수득하는 단계;를 포함하는 방법에 의해 제조된 비수용성 홍삼 추출물을 포함하는 항균 조성물을 제공한다.
본 발명의 다른 양태는 1) 홍삼에 메탄올을 용매로 추출하여 제1 추출물을 수득하는 단계; 2) 상기 제1 추출물에 염소화 탄화수소를 용매로 추출하여 제2 추출물을 수득하는 단계; 3) 상기 제2 추출물로부터 물층을 제거하고 비수용성층을 수득하는 단계; 및 4) 상기 비수용성층에 메탄올을 용매로 추출하여 제3 추출물을 수득하는 단계;를 포함하는 비수용성 홍삼 추출물의 제조 방법을 제공한다.
본 발명의 제조 방법에 따라 제조된 홍삼의 비수용성 추출물을 함유하는 항균 조성물은 황색 포도상구균에 대해서 특히 우수한 항균력을 가지며, 적은 농도로도 즉각적이고 강한 항균 효과를 나타낼 수 있다. 따라서, 본 발명의 항균 조성물을 식품 조성물, 약학 조성물, 화장료 조성물 등과 같이 황색 포도상구균에 대한 항균 활성을 필요로 하는 분야에서 다양하게 활용할 수 있다.
또한, 본 발명의 항균 조성물은 홍삼 유래의 추출물을 주요 성분으로 하므로, 독성이 적고 인체 및 환경에 무해할 수 있다.
도 1은 본 발명의 실시예의 황색 포도상구균에 대한 항균 효과를 관찰한 결과를 나타낸다. 도 1에서, A, B, C 및 D는 각각 실시예 1의 추출물을 0.0625 ㎎/㎖, 0.625 ㎎/㎖, 6.25 ㎎/㎖ 및 12.5 ㎎/㎖의 농도로 처리한 경우에 황색 포도상구균에 대한 항균 효과를 나타낸다.
도 2는 본 발명의 실시예의 UPLC 용매 이동상 분석 결과를 나타낸다.
도 3은 본 발명의 실시예의 HPLC-MS 분석 결과를 나타낸다.
이하, 본 발명에 대한 이해를 돕기 위하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.
본 명세서 및 청구범위에서 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.
1. 항균 활성을 갖는 비수용성 홍삼 추출물의 제조 방법
본 발명의 일 양태는 1) 홍삼에 메탄올을 용매로 추출하여 제1 추출물을 수득하는 단계; 2) 상기 제1 추출물에 염소화 탄화수소를 용매로 추출하여 제2 추출물을 수득하는 단계; 3) 상기 제2 추출물로부터 물층을 제거하고 비수용성층을 수득하는 단계; 및 4) 상기 비수용성층에 메탄올을 용매로 추출하여 제3 추출물을 수득하는 단계;를 포함하는 비수용성 홍삼 추출물의 제조 방법을 제공한다.
본 발명의 비수용성 홍삼 추출물은 포도상구균에 대해 항균 활성을 나타내므로, 식품 조성물, 약학 조성물, 화장료 조성물 등과 같이 포도상구균에 대한 항균 활성을 필요로 하는 분야에서 활용할 수 있다. 상기 포도상구균은 황색 포도상구균(Staphylococcus aureus), 표피 포도상구균(Staphylococcus epidermidis) 및 비병원포도상구균(Staphylococcus saprophyticus)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상일 수 있다.
또한, 본 발명에서 '황색 포도상구균'은 반코마이신내성 황색포도상구균(Vancomycin Resistant Staphylococcus Aureus, VRSA) 및 메티실린 내성 황색포도상구균(Methicillin Resistant Staphylococcus Aureus, MRSA)을 포함하는 의미로 사용될 수 있다.
본 발명에서, 홍삼은 수삼을 쪄서 익혀 건조한 것으로 건조 과정에서 갈변 반응이 일어나 담황갈색 내지 적갈색을 띄는 것이다. 또한, 상기 인삼은 재배한 것 또는 시판되는 것 등을 제한 없이 사용할 수 있다.
상기 1) 단계에서, 상기 메탄올은 메탄올 또는 50%(v/v) 이상 100%(v/v) 미만의 메탄올 수용액일 수 있다. 구체적으로, 상기 메탄올은 메탄올 또는 85%(v/v) 이상 100%(v/v) 미만의 메탄올 수용액일 수 있다. 상기 수치범위를 충족하는 경우, 최종적으로 수득되는 홍삼의 비수용성 추출물의 포도상구균에 대한 항균 활성이 우수할 수 있다.
상기 2) 단계에서, 상기 염소화 탄화수소는 디클로로메탄 및 클로로포름으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상일 수 있다. 상기 염소화 탄화수소는 상기 제1 추출물 대비 동량으로 사용될 수 있으나 이에 특별히 제한되지 않는다.
상기 3) 단계에서, 상기 물층과 비수용성층은 용질의 밀도에 의해 층분리되며 밀도가 높은 염소화 탄화수소 용매 층은 하부로 물층은 위로 정렬되어 분별 깔대기를 이용하여 순수 분리될 수 있다.
상기 4) 단계에서, 상기 메탄올은 1~50%(v/v) 메탄올 수용액일 수 있다. 구체적으로, 상기 메탄올은 5~35%(v/v) 메탄올 수용액일 수 있다.
2. 항균 조성물
본 발명의 일 양태는 1) 홍삼에 메탄올을 용매로 추출하여 제1 추출물을 수득하는 단계; 2) 상기 제1 추출물에 염소화 탄화수소를 용매로 추출하여 제2 추출물을 수득하는 단계; 3) 상기 제2 추출물로부터 물층을 제거하고 비수용성층을 수득하는 단계; 및 4) 상기 비수용성층에 메탄올을 용매로 추출하여 제3 추출물을 수득하는 단계;를 포함하는 방법에 의해 제조된 비수용성 홍삼 추출물을 포함하는 항균 조성물을 제공한다.
본 발명의 비수용성 홍삼 추출물은 항균 조성물에 0.01~30중량%, 또는 0.01~20중량%, 또는 0.01~10중량%, 또는 0.05~5 중량%로 포함될 수 있다.
본 발명의 항균 조성물은 식품 조성물, 약학 조성물 또는 화장료 조성물로서 이용될 수 있다.
상기 본 발명에 따른 조성물은 식품 조성물로서 이용될 수 있다. 본 발명에서 상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 구체적으로는 건강기능식품, 쵸코렛, 캔디류, 스낵류, 과자류, 껌류, 요쿠르트류 또는 아이스크림류를 포함하는 낙농제품, 각종 정제, 캅셀제, 환제, 과립제, 분말제, 액제, 편상, 페이스트, 시럽제, 겔, 젤리, 바, 필름, 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함한다.
본 발명에 따른 조성물이 건강기능식품으로서 이용될 경우 식품학적으로 허용가능한 담체 또는 첨가제와 함께 당해 기술분야에 공지되어 있는 통상적인 건강기능식품의 제형으로 제제화될 수 있다. 상기 건강기능식품은 예를 들어 산제, 과립제, 정제, 캅셀제, 환제, 분말제, 액제, 편상, 페이스트, 현탁액, 에멀젼, 시럽제, 겔, 액제, 엑스제, 차, 젤리, 바, 필름, 또는 음료 등으로 제조될 수 있다.
상기 식품학적으로 허용가능한 담체 또는 첨가제로는 제조하고자 하는 제형의 제조에 당해 기술분야에서 사용 가능한 것으로 공지되어 있는 것을 이용할 수 있다. 구체적으로, 상기 담체로서 희석제, 활택제, 결합제, 붕해제, 감미제, 안정제 및 방부제로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 사용할 수 있으며, 이들 각각에 대한 구체적인 예는 전술한 바와 동일한 내용이 적용될 수 있다. 또한, 첨가제로는 향료, 비타민류 및 항산화제로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 종 이상을 사용할 수 있다.
상기 본 발명에 따른 조성물이 약학 조성물로서 이용될 경우에는 당해 기술분야에 공지되어 있는 통상적인 약제학적 제형으로 제제화될 수 있다. 상기 의약품은 바람직하게는 경구 제형으로 제제화될 수 있으며, 예를 들어 액제, 현탁제, 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 환제, 또는 엑스제와 같은 경구 투여용 제형으로 제제화될 수 있다.
상기 각각의 제형으로 제제화되는 경우, 각각의 제형의 제조에 필요한 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 첨가제를 부가하여 제조할 수 있다. 대표적으로 경구 투여용 제형으로 제제화 시 상기 담체로서 희석제, 활택제, 결합제, 붕해제, 감미제, 안정제 및 방부제로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 사용할 수 있으며, 첨가제로는 향료, 비타민류 및 항산화제로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 종 이상을 사용할 수 있다.
상기 본 발명에 따른 조성물은 화장료 조성물로서 이용될 수도 있다. 본 발명에 따른 조성물이 화장료 조성물로서 이용될 경우에는 화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 기제, 보조제 및 첨가제를 사용하여 액체 또는 고체 형태로 제조될 수 있다. 액체 또는 고체 형태의 화장품으로는, 예를 들면 이에 한정되지는 않으나 화장수, 크림제, 로션제, 입욕제 등의 형태를 포함할 수 있다. 화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 기제, 보조제 및 첨가제는 특별히 제한되지 않으며, 예를 들면 물, 알코올, 프로필렌글리콜, 스테아르산, 글리세롤, 세틸알코올, 유동 파라핀 등이 있다.
본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 제조되는 경우, 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징 및 오일 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸카보네이트, 에틸아세테이트, 벤질알코올, 벤질벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클린징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비함유 클렌징 제형은 클렌징 크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔일 수 있으며, 이에 한정되는 것은 아니다.
이하, 본 발명을 실시예 및 비교예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 제조예 및 실험예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 제조예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 1
홍삼(한국인삼공사, 시판 홍삼정) 100g에 95%(v/v) 메탄올 500g을 용매로 하여 30 ℃에서 30분 동안 추출하였다. 여기에 상기 추출물과 동량의 디클로로메탄(Sigma) 500g을 첨가하여 30 ℃에서 30분 동안 추출하였다. 상기 수득된 추출물은 물층과 비수용성층으로 분리가 되며, 분별 깔대기를 사용하여 물층을 제거하고 비수용성층만을 회수하였다. 이후, 상기 비수용성층에 15%(v/v) 메탄올 500g을 용매로 하여 30 ℃에서 30분 동안 추출하여 홍삼의 비수용성 추출물을 수득하였다.
상기 추출물을 50㎎/㎖ 농도(최종 농도 5%(w/v))로 희석시켜 실시예 1의 시료를 준비하였다.
비교예 1 및 2
홍삼농축액(240g, KGC, Daejeon, Korea)을 Diaion HP-20(삼양사)이 충전된 컬럼을 이용하여 수지 흡착법에 의해 사포닌 성분을 분리하였다.
구체적으로, 70%(v/v) 에탄올을 시료 무게당 5-10배량 가하여 80 ℃에서 3시간씩 3회 반복 추출한 후 여과하였다. 이후 이를 농축하여 에탄올을 제거한 다음 적당량의 물로 희석하였다. 추출 전 건조홍삼 무게의 2배에 상당하는 수지(물로 치환)를 충진한 칼럼에 물로 희석한 홍삼 추출물을 서서히 통과시킨다. 흡착되지 않은 화합물은 수지용적 5배량의 증류수나 수돗물로 세척한다. 수지에는 사포닌뿐만 아니라 아미노산, 유기산 등과 같은 비사포닌 성분도 상당량 흡착되어 있으므로 수지용적의 4-5배량의 25%(v/v) 에탄올로 1차 비사포닌 성분을 제거한다. 이후 수지용적 4-5배량의 95%(v/v) 이상 농도의 에탄올로 사포닌 고함유 홍삼 추출물 분획을 용출시키고, 사포닌 농도 50 ㎎/㎖ (최종 농도 5%(㎎/㎖)) 및 100 ㎎/㎖ (최종 농도 10%(㎎/㎖))로 희석시켜 각각 비교예 1 및 2의 시료를 준비하였다.
실험예 1
상기 실시예의 추출물에 대하여, 감수성 시험용 디스크(Disk)를 활용하여 다음의 방법에 따라 아가(agar) 확산 방법을 수행하였다.
Escherichia coli(BIOBALLTM, NCTC12923), Staphylococcus aureus(BIOBALLTM, NCTC10788), Candida albicans(BIOBALLTM, NCPF3179) 및 Aspergillus niger(BIOBALLTM, NCPF2275) 각 균을 TSA(Trypticas soy agar) 고체 배지에 도말하고, 실시예 및 비교예의 추출물을 디스크에 흡수시킨 후, 배지 위에 올렸다. 이후, 세균은 35 ℃, 효모 및 곰팡이는 25 ℃에서 24시간 동안 배양하고, 생장 저지환(Clear Zone)의 직경을 측정하여 생육 억제 정도(Inhibition zone)를 ㎜ 단위로서 하기 표 1에 나타냈다.
또한, 양성 대조군으로 벤조산 나트륨을 각 10%, 20%, 30% 농도로서 사용하였다.
생육 억제 정도 (㎜)
E. coli S. aureus C. albicans A. niger
실시예 1 (5%(㎎/㎖)) 0 29 0 0
비교예 1 (5%(㎎/㎖)) 0 0 0 0
비교예 2 (10%(㎎/㎖)) 0 0 0 0
벤조산 나트륨 (30%(㎎/㎖)) 37 40 12 12
벤조산 나트륨 (20%(㎎/㎖)) 35 39 11 11
벤조산 나트륨 (10%(㎎/㎖)) 29 30 9 10
상기 결과로부터, 실시예의 추출물은 황색 포도상구균에 대해서만 특이적으로 항균 활성을 나타내며 즉각적인 항균 효과가 있는 것을 확인할 수 있다.
또한, 최저 생육저해 농도(MIC; minimal inhibitory concentration)를 측정하기 위해, 황색 포도상구균(5×106 CFU/㎖)을 TSA 고체 배지에 도말하였다.
상기 실시예의 추출물을 각 0.0625 ㎎/㎖ (최종 농도 0.00625%(㎎/㎖)), 0.625 ㎎/㎖ (최종 농도 0.0625%(㎎/㎖)), 6.25 ㎎/㎖ (최종 농도 0.625%(㎎/㎖)), 12.5 ㎎/㎖ (최종 농도 1.25%(㎎/㎖)), 25.0 ㎎/㎖ (최종 농도 2.5%(㎎/㎖)) 및 50.0 ㎎/㎖ (최종 농도 5%(㎎/㎖))의 농도로서 디스크에 흡수시킨 후, 상기 배지에 올려 35 ℃에서 24시간 동안 배양하였다.
이후, 생육 억제 정도(Inhibition zone)를 ㎜ 단위로서 측정하여 하기 표 2에 나타내고, 0.0625 ㎎/㎖, 0.625 ㎎/㎖, 6.25 ㎎/㎖ 및 12.5 ㎎/㎖의 농도에서 배양 결과를 촬영하여 도 1에 각 A, B, C 및 D로 나타냈다.
농도(㎎/㎖) 생육 억제 정도 (㎜)
50 29
25 26
12.5 25
6.25 24
0.625 10
0.0625 0
상기 표 2의 결과로부터, 50 ㎎/㎖ 농도에서 가장 강한 항균 활성을 나타내는 것을 확인할 수 있다.
또한, 도 1의 결과에서, 본 발명의 홍삼의 비수용성 추출물은 0.625 ㎎/㎖ 이상의 농도, 즉 0.0625%(㎎/㎖) 이상의 농도에서는 생육 저지환(Clear Zone)이 나타나는 것을 확인할 수 있다. 따라서, 본 발명의 홍삼의 비수용성 추출물은 적은 농도로도 강한 항균 효과를 나타냄을 확인할 수 있다.
실험예 2
상기 실시예의 추출물의 성분 분석을 수행하였다. 우선, 실시예의 추출물에 대한 사포닌 유무를 TLC plate (Merck사 Silicagel 60 F254 20×20cm)를 이용하여 박층 크로마토그래피 방법으로 분석하였으나, 사포닌 성분은 검출되지 않아 비사포닌 성분으로 확인되었다.
다음으로, UPLC 용매 이동상 분석은 다음의 조건 하에서 수행하고, 그 결과를 도 2에 나타낸다:
검출기: PDA
컬럼: Waters® ACQUITY UPLC® BEH C18, 1.7 ㎛ (2.1×100㎜)
용매 A: 물 중 0.1% 포름산
용매 B: 아세토니트릴 중 0.1% 포름산
유속: 0.4 ㎖/분
주입 부피: 5.0 ㎕
상기 결과에서, 2개의 주요한 피크(RT 8.11, RT 14.63)와 5~7개의 마이너한 피크가 관찰되었다.
또한, 상기 2개의 주요한 피크(RT 8.11, RT 14.63)에 대해 Waters사의 TQD 검출기를 이용하여 질량분석(HPLC-MS)을 수행하고, 그 결과를 도 3에 나타낸다. 상기 결과에서, 분자량이 각각 179.55, 187.55인 소분자량의 물질임을 확인하였다.
제조예 1. 건강식품의 제조
1-1. 밀가루 식품의 제조
본 발명의 실시예의 홍삼 추출물 0.5~5.0 중량부를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하였다.
1-2. 스프 및 육즙(gravies)의 제조
본 발명의 실시예의 홍삼 추출물 0.1~5.0 중량부를 스프 및 육즙에 첨가하여 건강 증진용 육가공 제품, 면류의 수프 및 육즙을 제조하였다.
1-3. 그라운드 비프(ground beef)의 제조
본 발명의 실시예의 홍삼 추출물 10 중량부를 그라운드 비프에 첨가하여 건강 증진용 그라운드 비프를 제조하였다.
1-4. 유제품(dairy products)의 제조
본 발명의 실시예의 홍삼 추출물 5~10 중량부를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
1-5. 선식의 제조
현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
검정콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
본 발명의 실시예의 홍삼 추출물을 진공 농축기에서 감압농축하고, 분무, 열풍건조기로 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 입도 60 메쉬로 분쇄하여 건조분말을 얻었다.
상기에서 제조한 곡물류, 종실류 및 본 발명의 실시예의 홍삼 추출물을 다음의 비율로 배합하여 제조하였다.
곡물류(현미 30 중량부, 율무 15 중량부, 보리 20 중량부), 종실류(들깨 7 중량부, 검정콩 8 중량부, 검정깨 7 중량부), 본 발명의 실시예의 홍삼 추출물(3 중량부), 영지(0.5 중량부), 지황(0.5 중량부)
1-6. 건강음료의 제조
액상과당(0.5%), 올리고당(2%), 설탕(2%), 식염(0.5%), 물(75%)과 같은 부재료와 본 발명의 실시예의 홍삼 추출물 5 g을 균질하게 배합하여 순간 살균을 한 후 이를 유리병, 패트병 등 소포장 용기에 포장하여 제조하였다.
1-7. 야채 주스의 제조
본 발명의 실시예의 홍삼 추출물 5 g을 토마토 또는 당근 주스 1,000 ㎖에 가하여 야채 주스를 제조하였다.
1-8. 과일 주스의 제조
본 발명의 실시예의 홍삼 추출물 1 g을 사과 또는 포도 주스 1,000 ㎖ 에 가하여 과일 주스를 제조하였다.
제조예 2. 화장료 조성물의 제조
2-1. 에센스의 제조
본 발명의 실시예의 홍삼 추출물을 이용하여 하기 표 3에 기재된 함량(중량부)에 따라 에센스를 각각 제조하였다.
조성 함량(중량부)
트리에탄올아민 0.25
카르복시비닐폴리머 0.22
글리세린 4
부틸렌글리콜 2
실시예의 홍삼 추출물 1.5
밀납 0.5
세토스테아릴알코올 1
글리세릴모노스테아레이트 1
스쿠알렌 4
정제수 적량
2-2. 유연화장수의 제조
실시예의 홍삼 추출물을 유효성분으로 함유하는 유연화장수는 하기 표 4와 같이 제조하였다.
원료 함량(중량부)
1,3-부틸렌글리콜 1.00
디소듐이디티에이 0.05
알란토인 0.10
디포타슘글리시리제이트 0.05
시트릭애씨드 0.01
소듐시트레이트 0.02
글리세레스-26 1.00
알부틴 2.00
PEG-40 수소화 캐스터오일 1.00
에탄올 30.00
실시예의 홍삼 추출물 0.5
착색제 미량
착향제 미량
정제수 잔량
2-3. 영양 크림의 제조
실시예의 홍삼 추출물을 유효성분으로 함유하는 영양크림은 하기 표 5의 조성과 같이 제조하였다.
원료 함량(중량부)
1,3-부틸렌글리콜 7.0
글리세린 1.0
D-판테놀 0.1
마그네슘알루미늄실리케이트 0.3
PEG-40 스테아레이트 1.2
스테아릭애씨드 2.0
폴리소르베이트 60 1.5
친유형글리세릴스테아레이트 2.0
소르비탄세스퀴올리에이트 1.5
세테아릴알코올 3.0
미네랄오일 4.0
스쿠알렌 3.8
실시예의 홍삼 추출물 1.5
식물성 오일 1.8
디메치콘 0.4
디포타슘글리시리제이트 미량
알란토인 미량
소듐히아루로네이트 미량
토코페릴아세테이트 적량
트리에탄올아민 적량
착향제 적량
정제수 잔량
2-4. 로션의 제조
실시예의 홍삼 추출물을 유효성분으로 함유한 로션을 하기 표 6의 조성과 같이 제조하였다.
원료 함량(중량부)
세토스테아릴알코올 1.6
스테아린산 1.4
친유형모노스테아린산글리세린 1.8
PEG-100 스테아레이트 2.6
세스퀴올레인산소르비탈 0.6
스쿠알렌 4.8
마카다이아오일 2
호호바오일 2
초산토코페롤 0.4
메틸폴리실록산 0.2
초산토코페롤 0.4
1,3-부틸렌글리콜 4
산탄검 0.1
글리세린 4
d-판데놀 0.15
실시예의 홍삼 추출물 1.0
알란토인 0.1
카르보머(2% aq. Sol) 4
트리에탄올아민 0.15
에탄올 3
정제수 적량

Claims (15)

1) 홍삼에 메탄올을 용매로 추출하여 제1 추출물을 수득하는 단계;
2) 상기 제1 추출물에 염소화 탄화수소를 용매로 추출하여 제2 추출물을 수득하는 단계;
3) 상기 제2 추출물로부터 물층을 제거하고 비수용성층을 수득하는 단계; 및
4) 상기 비수용성층에 메탄올을 용매로 추출하여 제3 추출물을 수득하는 단계;를 포함하는 방법에 의해 제조된 비수용성 홍삼 추출물을 포함하는, 포도상구균 항균용 조성물.
청구항 1에 있어서,
상기 1) 단계에서, 상기 메탄올은 메탄올 또는 50%(v/v) 이상 100%(v/v) 미만의 메탄올 수용액인 조성물.
청구항 1에 있어서,
상기 1) 단계에서, 상기 메탄올은 메탄올 또는 85%(v/v) 이상 100%(v/v) 미만의 메탄올 수용액인 조성물.
청구항 1에 있어서,
상기 4) 단계에서, 상기 메탄올은 1~50%(v/v) 메탄올 수용액인 조성물.
청구항 1에 있어서,
상기 4) 단계에서, 상기 메탄올은 5~35%(v/v) 메탄올 수용액인 조성물.
청구항 1에 있어서,
상기 염소화 탄화수소는 디클로로메탄 및 클로로포름으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인 조성물.
청구항 1에 있어서,
상기 포도상구균은 황색 포도상구균(Staphylococcus aureus), 표피 포도상구균(Staphylococcus epidermidis) 및 비병원 포도상구균(Staphylococcus saprophyticus)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것인 조성물.
청구항 1에 있어서,
상기 조성물은 식품 조성물인 조성물.
청구항 1에 있어서,
상기 조성물은 화장료 조성물인 조성물.
1) 홍삼에 메탄올을 용매로 추출하여 제1 추출물을 수득하는 단계;
2) 상기 제1 추출물에 염소화 탄화수소를 용매로 추출하여 제2 추출물을 수득하는 단계;
3) 상기 제2 추출물로부터 물층을 제거하고 비수용성층을 수득하는 단계; 및
4) 상기 비수용성층에 메탄올을 용매로 추출하여 제3 추출물을 수득하는 단계;를 포함하며,
상기 제3 추출물은 포도상구균에 대한 항균 활성을 갖는 것인,
비수용성 홍삼 추출물의 제조 방법.
청구항 10에 있어서,
상기 1) 단계에서, 상기 메탄올은 메탄올 또는 50%(v/v) 이상 100%(v/v) 미만의 메탄올 수용액인 방법.
청구항 10에 있어서,
상기 1) 단계에서, 상기 메탄올은 메탄올 또는 85%(v/v) 이상 100%(v/v) 미만의 메탄올 수용액인 방법.
청구항 10에 있어서,
상기 4) 단계에서, 상기 메탄올은 1~50%(v/v) 메탄올 수용액인 방법.
청구항 10에 있어서,
상기 4) 단계에서, 상기 메탄올은 5~35%(v/v) 메탄올 수용액인 방법.
청구항 10에 있어서,
상기 염소화 탄화수소는 디클로로메탄 및 클로로포름으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인 방법.
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