KR102295962B1

KR102295962B1 - 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물

Info

Publication number: KR102295962B1
Application number: KR1020190154526A
Authority: KR
Inventors: 도현훈
Original assignee: 주식회사 다솔
Priority date: 2019-11-27
Filing date: 2019-11-27
Publication date: 2021-09-01
Also published as: KR20210065590A

Abstract

본 발명은 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로서, 항산화, 항균, 피부진정 및 안티폴루션 효과를 갖는 것을 특징으로 하는 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물에 관한 것이다.

Description

타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물{Functional cosmetic composition comprising a mixed extract of Tanaka and pine needles}

현대사회로 접어들면서 사람들은 각종 유해환경에 지속적으로 노출되고 있으며, 각종 유해환경으로 인해 피부가 부적절한 영향을 받아 피부건강이 악화되는 문제점이 발생하고 있다.

상기와 같은 유해환경에 해당하는 것으로 활성산소, 각종 세균, 대기 중의 오염물질 등을 예로 들 수 있다.

상기 활성산소는 생체 내에서 에너지 생산을 위한 산화 과정 중에 발생하는 것으로, 보통은 생체 내 제거 기작에 의해 대부분은 소멸되지만, 일부가 남아 피부 노화의 원인이 되곤 한다.

또한, 상기 세균은 각종 염증의 원인이 되며, 피부에 트러블을 일으키는 바, 피부 건강에 악영향을 미치는 요소로 꼽히고 있다.

또한, 대기 중의 오염 물질 또한, 피부에 지속적으로 접촉하여 피부의 건강을 악화시키는 원인이 되고 있다.

상기와 같은 문제점을 해결하기 위해, 화학물질을 이용하여 활성산소, 각종 세균, 대기 중의 오염물질을 제거하려는 시도가 있었으나, 화학물질은 피부에 부작용을 나타낼 수 있고, 생산 단가가 비싸며, 생태학적으로 지속적이지 못하다는 문제점이 있었다.

이에 따라, 다양한 천연물질을 이용하여 항산화, 항균, 피부진정 및 안티폴루션 효과를 갖는 화장료 조성물을 얻어내기 위한 연구가 활발히 진행 중이다.

대한민국 등록특허공보 제10-1908975호(2018.10.17. 공고), "사위질빵 추출물을 유효성분으로 함유하는 안티폴루션 화장료 조성물" 대한민국 등록특허공보 제10-944025호(2019.01.30. 공고), "하늘타리 추출물을 유효성분으로 함유하는 안티폴루션 화장료 조성물"

상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여 본 발명은 타나까나무의 분말과 소나무잎을 혼합하여 추출한 혼합추출물을 유효성분으로 포함함으로써 항산화, 항균, 피부진정 및 안티폴루션 효과를 갖는 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물을 제공하는데 목적이 있다.

상기와 같은 과제를 달성하기 위하여 본 발명은 타나까나무의 분말과 소나무잎을 혼합하여 추출한 혼합추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물을 제공한다.

또한, 상기 타나까나무의 분말과 소나무잎은 30 : 70 ~ 70 : 30의 중량비로 혼합되는 것을 특징으로 한다.

또한, 상기 타나까나무의 분말과 소나무잎은 100℃ 이하의 온도에서 열수 추출되는 것을 특징으로 한다.

또한, 상기 혼합추출액은 전체 중량 대비 0.1 내지 10.0 중량%로 포함되는 것을 특징으로 한다.

또한, 상기 화장료 조성물은 항산화, 항균, 피부진정 및 안티폴루션 효과를 갖는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따른 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물은 항산화, 항균, 피부진정 및 안티폴루션 효과를 가짐으로써 각종 유해환경으로부터 피부를 보호하는 효과가 있다.

도 1은 본 발명에 따른 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물의 혼합비율에 따른 항산화 효과를 나타낸 그래프.
도 2는 본 발명에 따른 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물의 희석농도에 따른 항산화 효과를 나타낸 그래프.
도 3은 본 발명에 따른 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물의 혼합비율에 따른 항균 효과를 나타낸 그래프.
도 4는 본 발명에 따른 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물의 희석농도에 따른 항균 효과를 나타낸 그래프.
도 5은 본 발명에 따른 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물의 혼합비율에 따른 피부진정 효과를 나타낸 그래프.
도 6는 본 발명에 따른 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물의 희석농도에 따른 피부진정 효과를 나타낸 그래프.
도 7은 본 발명에 따른 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물의 혼합비율에 따른 항오염 효과를 나타낸 그래프.
도 8는 본 발명에 따른 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물의 희석농도에 따른 항오염 효과를 나타낸 그래프.

이하의 본 발명에 관한 상세한 설명들은 본 발명이 실시될 수 있는 실시 예이고 해당 실시 예의 예시로써 도시된 첨부 도면을 참조한다. 이들 실시 예는 당 업자가 본 발명의 실시에 충분하도록 상세히 설명된다. 본 발명의 다양한 실시 예는 서로 다르지만 상호 배타적일 필요는 없음이 이해되어야 한다. 예를 들어, 여기에 기재되어 있는 특정 형상, 구조 및 특성은 일 실시 예에 관련하여 본 발명의 사상 및 범위를 벗어나지 않으면서 다른 실시 예로 구현될 수 있다. 또한, 각각의 기재된 실시 예 내의 개별 구성요소의 위치 또는 배치는 본 발명의 사상 및 범위를 벗어나지 않으면서 변경될 수 있음이 이해되어야 한다.

따라서 후술되는 상세한 설명은 한정적인 의미로서 취하려는 것이 아니며, 본 발명의 범위는 적절하게 설명된다면 그 청구항들이 주장하는 것과 균등한 모든 범위와 더불어 첨부된 청구항에 의해서만 한정된다. 도면에서 유사한 참조부호는 여러 측면에 걸쳐서 동일하거나 유사한 기능을 지칭한다.

본 발명에서 사용되는 용어는 본 발명에서의 기능을 고려하면서 가능한 현재 널리 사용되는 일반적인 용어들을 선택하였으나, 이는 당 분야에 종사하는 기술자의 의도 또는 판례, 새로운 기술의 출현 등에 따라 달라질 수 있다. 또한, 특정한 경우는 출원인이 임의로 선정한 용어도 있으며, 이 경우 해당되는 발명의 설명 부분에서 상세히 그 의미를 기재할 것이다. 따라서 본 발명에서 사용되는 용어는 단순한 용어의 명칭이 아닌, 그 용어가 가지는 의미와 본 발명의 전반에 걸친 내용을 토대로 정의되어야 한다.

본 발명에서 어떤 부분이 어떤 구성요소를 “포함”한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한, 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있음을 의미한다.

이하, 본 발명에 따른 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물에 대하여 자세히 설명한다.

본 발명에 다른 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물은 타나까나무의 분말과 소나무잎을 혼합하여 추출한 혼합추출물을 유효성분으로 포함하여 항산화, 항균, 피부진정 및 안티폴루션 효과를 갖는 것을 특징으로 한다.

상기 타나까나무(Limonia Acidissima)는 미얀마, 태국, 히말라야 산맥, 인도 등의 지역에서 자라지만, 그 수량이 매우 적고 미얀마 슈에보, 버꼬꾸, 샨 지역 등이 주요 서식지로 알려져 있다. 상기 타나카나무는 강우량이 풍부한 곳에서 잘 자라며, 건조하고 바위가 많은 토질과 모래와 홍토가 섞여있는 곳에서 번식력이 우수하며, 나무의 재질은 돌과 같이 딱딱하지만 껍질은 얇으며 부드러운 특징을 가지고 있다. 따나카 나무의 지름이 3인치 정도 자라는 데에는 토양과 기후조건에 따라 3년에서 10년 정도의 기간이 소요되며, 화장품이나 의약품으로 이용되려면 최소 10년 이상 자란 나무야만이 그 가치로서 인정받을 수 있다. 본 발명에서는 타나까나무의 분말을 이용하며, 이때 타나까나무 분말은 타나까나무의 기둥으로 얻는 것이 바람직할 것이다.

상기 소나무잎은 소나무(Pinus densiflora)의 잎, 즉, 솔잎을 지칭하는 것이다. 상기 소나무는 소나무과의 늘푸른 바늘잎 큰키나무로 키 20 ~ 35m 정도로 굵고 크게 자란다. 음지쪽 나무는 곧은 편이며 가지가 위와 옆으로 벋어 위쪽이 둥글거나 뾰족한 긴 삼각형이 된다. 상기 소나무는 낮은 산에서 높은 산까지 1,600m 이하 고지의 토질 좋은 곳에 서식하며, 주로 산허리 6부 능선 양지쪽에서 볼 수 있다. 상기 소나무잎은 길이 8~9cm 정도로 두 장씩 맞붙어 나오며, 가늘고 각진 바늘 모양이다. 난 지 2년 된 소나무잎은 아래쪽부터 갈색으로 변해 떨어지고 새잎이 나온다. 여름에는 짙은 녹색을 띠고, 겨울에는 노란빛 도는 녹색을 띤다.

본 발명에 따른 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물은 상기 타나까나무의 분말과 소나무잎을 30 : 70 ~ 70 : 30의 중량비로 혼합하는 것을 특징으로 한다. 타나까나무의 분말과 소나무잎의 혼합 비율이 해당 범위를 벗어나면 항산화, 항균, 피부진정 및 안티폴루션 효과가 적절하게 나타나지 않는 문제점이 발생할 수 있다. 본 발명에 있어, 타나까나무의 분말과 소나무잎의 혼합 비율은 가장 적절하게는 50 : 50 중량비인 것이 가장 적절할 것이다.

본 발명에 따른 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물은 상기 타나까나무의 분말과 소나무잎을 100℃ 이하의 온도에서 열수 추출하는 것을 특징으로 한다. 상기 열수 추출의 온도가 100℃를 초과하면 타나까나무의 분말과 소나무잎 내부의 성분이 변하여 본 발명이 목적으로 하는 항산화, 항균, 피부진정 및 안티폴루션 효과가 제대로 나타나지 않는 문제점이 발생할 수 있다.

상기 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물은 전체 중량 대비 0.1 내지 10.0 중량%로 포함되는 것을 특징으로 한다. 상기 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물이 해당 범위를 벗어나 투입되면 항산화, 항균, 피부진정 및 안티폴루션 효과가 적절하게 나타나지 않는 문제점이 발생할 수 있다.

이하, 실시예 및 비교예 그리고 실험예를 통하여 본 발명에 따른 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물이 갖는 효과에 대하여 자세히 설명한다.

실시예 1. 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물의 제조

하기의 제조과정을 거쳐 실시예 1의 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물을 제조하였다.

단계 S10: 타나까나무의 분말과 소나무잎을 50 : 50의 중량비로 혼합하여 혼합물을 제조하였다.

단계 S20: 혼합물을 90℃의 온도에서 열수 추출하여 추출물을 제조하였다.

단계 S30: 추출물을 원심분리기로 분리하여 상등액을 취했다.

단계 S40: 상등액을 5.0 중량%가 되도록 정제수에 희석하여 실험준비를 완료하였다.

실시예 2 내지 3. 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물의 제조

실시예 1의 제조과정에 따라 조성물을 제조하되, 단계 S10에서 타나까나무의 분말과 소나무잎을 각각 다른 혼합비율로 혼합하여 실시예 2 내지 3의 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물을 제조하였다.

	타나까나무 분말의 함량	소나무잎의 함량
실시예 2	30 중량%	70 중량%
실시예 3	70 중량%	30 중량%

실시예 4 내지 7. 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물의 제조

실시예 1의 제조과정에 따라 조성물을 제조하되, 단계 S40에서 상등액이 정제수에 희석되는 비율을 각각 달리하여 실시예 4 내지 7의 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물을 제조하였다.

	혼합추출물이 정제수에 희석되는 비율
실시예 4	0.1 중량%
실시예 5	3.0 중량%
실시예 6	7.0 중량%
실시예 7	10.0 중량%

비교예 1. 소나무잎 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조

하기의 제조과정을 거쳐, 타나까나무를 포함하지 않고 소나무잎 추출물만을 포함하는 비교예 1의 화장료 조성물을 제조하였다.

단계 S10: 타나까나무의 분말을 90℃의 온도에서 열수 추출하여 추출물을 제조하였다.

단계 S20: 추출물을 원심분리기로 분리하여 상등액을 취했다.

단계 S30: 상등액을 5.0 중량%가 되도록 정제수에 희석하여 실험준비를 완료하였다.

비교예 2. 타나까나무 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조

하기의 제조과정을 거쳐, 소나무잎을 포함하지 않고 타나까나무 추출물만을 포함하는 비교예 2의 화장료 조성물을 제조하였다.

비교예 3. 타나까나무와 소나무잎이 10 : 90으로 혼합된 혼합추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조

하기의 제조과정을 거쳐 비교예 3의 화장료 조성물을 제조하였다.

단계 S10: 타나까나무의 분말과 소나무잎을 10 : 90의 중량비로 혼합하여 혼합물을 제조하였다.

비교예 4. 타나까나무와 소나무잎이 90 : 10으로 혼합된 혼합추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조

하기의 제조과정을 거쳐 비교예 4의 화장료 조성물을 제조하였다.

단계 S10: 타나까나무의 분말과 소나무잎을 90 : 10의 중량비로 혼합하여 혼합물을 제조하였다.

비교예 5. 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물이 0.01 중량% 포함된 화장료 조성물의 제조

하기의 제조과정을 거쳐 비교예 5의 화장료 조성물을 제조하였다.

단계 S40: 상등액을 0.01 중량%가 되도록 정제수에 희석하여 실험준비를 완료하였다.

비교예 6. 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물이 15.0 중량% 포함된 화장료 조성물의 제조

하기의 제조과정을 거쳐 비교예 6의 화장료 조성물을 제조하였다.

단계 S40: 상등액을 15.0 중량%가 되도록 정제수에 희석하여 실험준비를 완료하였다.

실험예 1. 자유 라디칼 소거능 실험

항산화 효과 실험은 공지된 방법에 따라, DPPH법을 이용한 자유라디칼 소거 효과를 통해 실시예 1 내지 7 및 비교예 1 내지 6의 화장료 조성물에 대한 항산화 효과를 확인하였다.

실시예 1 내지 7 및 비교예 1 내지 6의 화장료 조성물을 96 microplate에 100㎕ 씩 분주한 후, 에탄올을 이용하여 1mM이 되도록 용해한 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) 용액을 10㎕ 첨가하였다. 상온에서 30분 반응 후 517nm에서 흡광도를 측정하여 free radical scavenging activity를 측정하였다. 0.1% 농도의 비타민C를 대조군으로 두어 실시예 1 내지 7 및 비교예 1 내지 6의 화장료 조성물과 함께 실험하였다. 결과는 비타민C의 자유라디컬 소거효과를 100%로 기준하여 표 3 및 표 4에 나타내었다. 표 3은 타나까나무의 분말과 소나무잎의 혼합비율에 따른 실험결과를 나타낸 것이고, 표 4는 타나까나무의 분말과 소나무잎 혼합추출액이 포함된 농도에 따른 실험결과를 나타낸 것이다.

	타나까나무 분말의 혼합 중량비(중량 %)	소나무잎의 혼합 중량비(중량 %)	자유라디칼 소거효과(%)
대조군(비타민C)	-	-	100%
비교예 1	0	100	35.6%
비교예 3	10	90	60.4%
실시예 2	30	70	94.3%
실시예 1	50	50	99.8%
실시예 3	70	30	95.2%
비교예 4	90	10	73.5%
비교예 2	100	0	43.1%

	혼합추출물이 정제수에 희석된 비율(중량%)	자유라디칼 소거효과(%)
대조군(비타민C)	-	100%
비교예 5	0.01	56.4%
실시예 4	0.1	95.3%
실시예 5	3.0	97.5%
실시예 1	5.0	99.8%
실시예 6	7.0	98.7%
실시예 7	10.0	94.3%
비교예 6	15.0	78.9%

그 결과, 타나까나무의 분말과 소나무잎이 30 : 70 ~ 70 : 30의 중량비로 혼합되고, 혼합추출액이 전체 중량 대비 0.1 내지 10.0 중량%로 포함될 때 우수한 자유라디컬 소거효과를 나타냄을 확인할 수 있었다.

실험예 2. 항균 효과 실험

실시예 1 내지 7 및 비교예 1 내지 6의 조성물에 대하여 항균효과를 측정하기 위해 항균 활성 실험에 사용한 세균은 병원성 세균으로, 그람 양성 세균으로 Staphylococcus aureus를 사용하였다.

멸균 Mueller Hinton agar (Difco Co., USA) 배지에 각각의 균주 100μl씩 분주하여 균일하게 도포한 후 멸균 disk(φ 8mm)를 일정한 간격으로 배지에 밀착시켰다. 상기 실시예 1 내지 7 및 비교예 1 내지 6의 조성물을 disk에 떨어뜨린 후 37℃ 항온기에서 18시간 배양 후 억제대의 직경을 mm 단위로 측정하여 항균력을 비교하였다. 이때 대조군으로는 gentamicine(20μg)을 사용하였다. 각각의 조성물의 균주에 대한 생육억제 크기(inhibition zone)를 표 5 및 표 6에 나타냈다.

	타나까나무 분말의 혼합 중량비(중량 %)	소나무잎의 혼합 중량비(중량 %)	Staphylococcus aureus에 대한 생육억제 크기(mm)
비교예 1	0	100	3.7mm
비교예 3	10	90	8.3mm
실시예 2	30	70	16.2mm
실시예 1	50	50	18.3mm
실시예 3	70	30	17.8mm
비교예 4	90	10	9.2mm
비교예 2	100	0	4.4mm

	혼합추출물이 정제수에 희석된 비율(중량%)	Staphylococcus aureus에 대한 생육억제 크기(mm)
비교예 5	0.01	3.2mm
실시예 4	0.1	16.2mm
실시예 5	3.0	17.3mm
실시예 1	5.0	18.3mm
실시예 6	7.0	17.7mm
실시예 7	10.0	16.5mm
비교예 6	15.0	5.3mm

그 결과, 타나까나무의 분말과 소나무잎이 30 : 70 ~ 70 : 30의 중량비로 혼합되고, 혼합추출액이 전체 중량 대비 0.1 내지 10.0 중량%로 포함될 때 우수한 항균 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다.

실험예 3. 피부 진정 효과 실험

20세 ~ 25세의 건강한 성인남녀 50명을 대상으로 실시예 1 내지 7 및 비교예 1 내지 6의 화장료 조성물을 이용하여 피부 진정효과를 평가하였다.

피시험자들의 전완부를 약 20분간 직사광선에 노출시킨 후, 피시험자들을 10명씩 5개조로 나누어, 4개조에 대해서는 상기 실시예 1 내지 7 및 비교예 1 내지 6에 의해 조성된 화장료에 부직포를 함침시킨 수딩패치를 피시험자들의 직사광선에 노출된 전완부에 20분간 부착하였으며, 나머지 1개조는 수딩패치로서 물에 함침시킨 수직포을 피시험자들의 직사광선에 노출된 전완부에 20분간 부착하여 대조군으로 하였다.

피부의 진정효과 평가는, 상기 수딩패치를 부착하기 전, 수딩패치를 제거한 직후, 수딩패치를 제거하고 20분 후, 수딩패치를 제거하고 40분 후, 수딩패치를 제거하고 60분에 각각 온도를 측정하고 각 조의 평균값을 구하여 각 실시예에 의한 온도감소율을 측정하였다. 온도감소율은 하기 계산식 1을 이용하여 도출하였으며, 그 결과는 표 7 및 표 8에 나타내었다.

	타나까나무 분말의 혼합 중량비(중량 %)	소나무잎의 혼합 중량비(중량 %)	수딩패치 제거 후 시간경과에 따른 온도변화율(%)
	타나까나무 분말의 혼합 중량비(중량 %)	소나무잎의 혼합 중량비(중량 %)	0분	20분	40분	60분
대조군(물)	-	-	7.2	0.6	0.4	0.2
비교예 1	0	100	7.4	1.8	1.0	0.6
비교예 3	10	90	9.2	4.6	3.8	1.4
실시예 2	30	70	16.4	12.4	8.8	7.6
실시예 1	50	50	18.4	14.2	10.6	9.2
실시예 3	70	30	16.6	11.4	8.2	7.4
비교예 4	90	10	10.2	5.6	4.2	2.2
비교예 2	100	0	7.6	2.2	1.4	0.8

	혼합추출물이 정제수에 희석된 비율(중량%)	수딩패치 제거 후 시간경과에 따른 온도변화율(%)
	혼합추출물이 정제수에 희석된 비율(중량%)	0분	20분	40분	60분
대조군(물)	-	7.2	0.6	0.4	0.2
비교예 5	0.01	7.4	1.2	1.0	0.8
실시예 4	0.1	16.2	11.2	8.8	8.0
실시예 5	3.0	17.4	13.2	9.2	8.4
실시예 1	5.0	18.4	14.2	10.6	9.2
실시예 6	7.0	17.8	13.8	9.8	8.6
실시예 7	10.0	16.6	11.4	9.0	8.2
비교예 6	15.0	8.4	4.2	2.4	1.8

그 결과, 타나까나무의 분말과 소나무잎이 30 : 70 ~ 70 : 30의 중량비로 혼합되고, 혼합추출액이 전체 중량 대비 0.1 내지 10.0 중량%로 포함될 때 우수한 피부 진정 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다.

실험예 4. 안티폴루션 효과 실험

일반적으로 공해 물질과 직접적으로 맞닿게 되는 피부 각질세포를 사용하여 벤조피렌(2.5 ㎍/mL), 질산암모늄(500 ppm), 포름알데히드(1.5 ㎍/mL)에 의한 세포 손상 정도를 측정하였고, 이를 비교하여 피부 세포 손상 억제 효과를 확인하였다.

사람 각질 세포 HaCaT를 1×10⁴ cells/ml 농도로 96-well plate에 200 ㎕씩 분주하여 37℃, CO2 인큐베이터에서 24시간 배양하였다. 이때, 배지는 소혈청 10%와 항생제 1%가 포함된 IMDM 배지를 이용하였다. 배양 후 소혈청과 항생제가 배제된 IMDM 배지로 교체한 다음, 벤조피렌(2.5 ㎍/mL), 질산암모늄(500 ppm), 포름알데히드(1.5 ㎍/mL)를 처리한 후 실시예 1 내지 7 및 비교예 1 내지 6의 화장료 조성물을 100 μg/ml 처리하여 21시간 추가 배양하였다. 그 후 5 mg/ml 농도의 MTT solution을 넣고 3시간 배양한 다음, 배지를 제거하고 dimethyl sulfoxide를 150 ul 씩 각 well에 넣어주고 10분간 shaking 하고, 570 nm로 흡광도를 측정하였다. 오염물을 처리하지 않은 실험군의 세포생존율을 대조군으로 하고, 대조군의 세포증식율을 100%로 하여 실시예 1 내지 7 및 비교예 1 내지 6의 화장료 조성물의 세포증식율을 비교하였다. 비교군은 실험군 대신 정제수만을 투입하였다.

	타나까나무 분말의 혼합 중량비(중량 %)	소나무잎의 혼합 중량비(중량 %)	벤조피렌(2.5 ㎍/mL)에 대한 세포증식율(%)	질산암모늄(500 ppm)에 대한 세포증식율(%)	포름알데히드(1.5 ㎍/mL)에 대한 세포증식율(%)
대조군(오염물질 미처리군)	-	-	100%	100%	100%
비교군(실험군 미처리군)	0	0	42%	44%	40%
비교예 1	0	100	51%	52%	50%
비교예 3	10	90	63%	62%	63%
실시예 2	30	70	83%	81%	81%
실시예 1	50	50	89%	87%	84%
실시예 3	70	30	82%	84%	82%
비교예 4	90	10	64%	61%	65%
비교예 2	100	0	54%	55%	52%

	혼합추출물이 정제수에 희석된 비율(중량%)	벤조피렌(2.5 ㎍/mL)에 대한 세포증식율(%)	질산암모늄(500 ppm)에 대한 세포증식율(%)	포름알데히드(1.5 ㎍/mL)에 대한 세포증식율(%)
대조군(오염물질 미처리군)	-	100%	100%	100%
비교군(실험군 미처리군)	-	42%	44%	40%
비교예 5	0.01	48%	51%	51%
실시예 4	0.1	81%	81%	80%
실시예 5	3.0	83%	84%	82%
실시예 1	5.0	89%	87%	84%
실시예 6	7.0	84%	85%	83%
실시예 7	10.0	82%	83%	81%
비교예 6	15.0	49%	53%	50%

그 결과, 타나까나무의 분말과 소나무잎이 30 : 70 ~ 70 : 30의 중량비로 혼합되고, 혼합추출액이 전체 중량 대비 0.1 내지 10.0 중량%로 포함될 때 우수한 항오염효과를 나타냄을 확인할 수 있었다.

결론.

상기 실험예 1 내지 4를 통해 본 발명에 따른 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물의 효과에 대하여 확인하였다.

상기 실험예 1 내지 4를 통해 타나까나무의 분말과 소나무잎이 30 : 70 ~ 70 : 30의 중량비로 혼합되고, 혼합추출액이 전체 중량 대비 0.1 내지 10.0 중량%로 포함될 때 높은 자유라디컬 소거효과를 나타냄을 확인할 수 있었으며, 이를 통해 항산화 효과를 유추할 수 있었다.

또한, 타나까나무의 분말과 소나무잎이 30 : 70 ~ 70 : 30의 중량비로 혼합되고, 혼합추출액이 전체 중량 대비 0.1 내지 10.0 중량%로 포함될 때 그람양성균에 대한 억제효과를 확인하였으며, 이를 통해 항균 효과를 유추할 수 있었다.

또한, 타나까나무의 분말과 소나무잎이 30 : 70 ~ 70 : 30의 중량비로 혼합되고, 혼합추출액이 전체 중량 대비 0.1 내지 10.0 중량%로 포함될 때 피부냉감 효과를 확인할 수 있었으며, 이를 통해 우수한 피부 진정 효과를 나타냄을 유추할 수 있었다.

또한, 타나까나무의 분말과 소나무잎이 30 : 70 ~ 70 : 30의 중량비로 혼합되고, 혼합추출액이 전체 중량 대비 0.1 내지 10.0 중량%로 포함될 때 벤조피렌, 질산암모늄 및 포름알데히드에 대해 우수한 세포증식율을 나타냄을 확인할 수 있었고, 이를 통해 우수한 항오염 효과를 가짐을 유추할 수 있었다.

특히, 타나까나무추출물과 소나무잎추출물 각각의 효능의 합산치에 혼합 추출물의 효능이 높게 나타남을 확인하였고, 이를 통해 타나까나무추출물과 소나무잎추출물을 혼합하는 과정에서 예기치 못한 효과를 나타냈음을 확인할 수 있었다.

따라서, 본 발명은 항산화, 항균, 피부진정 및 안티폴루션 효과를 갖는 신규한 조성물로서, 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물을 개발하였음을 명시한다.

본 발명을 첨부된 도면과 함께 설명하였으나, 이는 본 발명의 요지를 포함하는 다양한 실시 형태 중의 하나의 실시 예에 불과하며, 당 업계에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 하는 데에 그 목적이 있는 것으로, 본 발명은 상기 설명된 실시예에만 국한되는 것이 아님은 명확하다. 따라서, 본 발명의 보호범위는 하기의 청구범위에 의해 해석되어야 하며, 본 발명의 요지를 벗어나지 않는 범위 내에서 변경, 치환, 대체 등에 의해 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 기술 사상은 본 발명의 권리에 포함될 것이다. 또한, 도면의 일부 구성은 구성을 보다 명확하게 설명하기 위한 것으로 실제보다 과장되거나 축소되어 제공되는 것임을 명확히 한다.

Claims

타나까나무와 소나무잎을 혼합하여 추출한 혼합추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 타나까나무와 소나무잎은 30 : 70 ~ 70 : 30의 중량비로 혼합되는 것을 특징으로 하는 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 타나까나무와 소나무잎은 100℃ 이하의 온도에서 열수 추출되는 것을 특징으로 하는 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 혼합추출액은 전체 중량 대비 0.1 내지 10.0 중량%로 포함되는 것을 특징으로 하는 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 항산화, 항균, 피부진정 및 안티폴루션 효과를 갖는 것을 특징으로 하는 타나까나무와 소나무잎의 혼합추출물을 포함하는 기능성 화장료 조성물.