KR102263330B1 - 식물 제형의 상승작용적 조합을 통한 트리글리세리드 합성의 억제를 위한 조성물 및 방법 - Google Patents
식물 제형의 상승작용적 조합을 통한 트리글리세리드 합성의 억제를 위한 조성물 및 방법 Download PDFInfo
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Abstract
식물 추출물의 상승작용적 조합을 통한 트리글리세리드 합성의 억제를 위한 조성물 및 방법이 기재되어 있다. 구체적으로, 본 발명은 트리글리세리드 합성과 관계가 있는 디아실글리세롤 아실트랜스퍼라제-1 (DGAT-1) 효소의 상승작용적 억제 및 스테롤 조절 요소 결합 단백질 1c (SREBP-1c) 및/또는 퍼옥시좀 증식체 활성화된 수용체 감마 보조활성인자 1-알파 (PGC1α)의 조정을 통한 피부 유분 생성의 관리뿐만 아니라, 체중 증가 또는 비만증의 치료 또는 예방, 체중 감량의 촉진, 식욕 저해 등에 관한 것이다.
Description
<관련 출원>
본 특허 문헌은 2014년 3월 13일에 출원된 미국 가출원 제61/952,534호를 35 U.S.C. § 119(e) 하에 우선권 주장하며, 상기 출원은 그의 전문이 본원에 참조로 포함된다.
식물 추출물의 상승작용적 조합을 통한 트리글리세리드 합성의 억제를 위한 조성물 및 방법을 기재한다. 구체적으로, 하기 설명은 트리글리세리드 합성과 관계가 있는 디아실글리세롤 아실트랜스퍼라제-1 (DGAT-1) 효소의 상승작용적 억제 및 스테롤 조절 요소 결합 단백질 1c (SREBP-1c) 및/또는 퍼옥시좀 증식체-활성화된 수용체 감마 보조활성인자 1-알파 (PGC1α)의 조정을 통한 피부 유분 생성의 관리뿐만 아니라, 체중 증가 또는 비만증의 치료 또는 예방, 체중 감량의 촉진, 식욕 저해 등에 관한 것이다.
DGAT-1은 포유동물 트리글리세리드 (지방) 합성의 종료 단계를 촉매화하는 효소이다. DGAT-1은 식이 지방의 흡수 및 동화 동안, 및 지방 조직뿐만 아니라 다른 조직, 예컨대 피부의 피지선 내 지방 축적에서 기능을 한다.
SREBP-1c는 염기성 나선-루프-나선/루이신 지퍼 전사 인자 족에 속하는 전사 인자이며, 이는 또한 SREBP-1a 및 SREBP2를 포함한다 (Brown and Goldstein, 1997, Cell 89, 331-340). 전사 인자 SREBP 족 중에, SREBP-1c는 트리글리세리드 및 지방산 합성과 관계가 있는 유전자를 우선적으로 조절하고, SREBP-2는 콜레스테롤 합성과 연관된 유전자를 조절한다.
PGC1α는 에너지 대사와 연관된 많은 생물학적 프로그램을 매개하는 전사 보조활성인자이다. 원래 갈색 지방의 열발생 및 비커플링(uncoupling) 단백질 1 (UCP1)의 발현을 조정하는 PPARγ 보조활성인자로서 기재되며, 그것은 또한 많은 세포 유형에서 미토콘드리아 생합성(biogenesis) 및 산화성 대사를 제어하는 것으로 나타났다. PGC1α는 근육에서 운동에 의해 유발되며, 미토콘드리아 생합성, 혈관형성 및 섬유-유형 스위칭(switching)과 같은 근육 내 많은 공지된 유익한 운동 효과를 자극한다 (Handschin and Spiegelman (2008) Nature 454, 463-469). 그것은 또한 근이영양증 및 신경차단-관련 근위축증에 대한 저항성을 제공한다 (Sandri et al. (2006) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 103, 16260-16265). 상승된 PGC1α 근육 발현의 건강상 유익은 근육 조직 자체를 초과할 수 있다. 온화하게 상승된 근육 PGC1α를 갖는 트랜스제닉 마우스는 연령-관련 비만증 및 당뇨병에 대해 상당히 내성이 있고, 연장된 수명을 가지며 (Wenz et al. (2009) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 106, 20405-20410), 이는 PGC1α가 다른 조직의 기능 및 건강에 영향을 미치고 체중 관리와 관련될 수 있는 골격근으로부터의 인자의 분비를 자극할 수 있음을 암시한다.
담즙산 결합 수지라 불리우는 약물의 부류, 예를 들어 콜레스티라민은 섭취된 지방과 물리적 복합체를 형성하여 지방이 신체에 의해 흡수되지 않는 복합체 형태가 되도록 함으로써 식이 지방의 흡수를 억제하는 기능을 한다. 담즙산 결합 수지는 혈중 지질 및 대사에 대한 식이 지방 효과에 어려움이 있는 개체에 처방된다. 그러나, 담즙산 결합 수지와 식이 지방 간에 형성된 물리적 복합체는 바람직하지 못한 부작용인 지방변증을 유발한다.
이에 따라, 예컨대 트리글리세리드 합성 또는 흡수를 억제함으로써 체중 관리뿐만 아니라 피부 유분 생성 관리에 사용되는 개선된 조성물 및 방법이 바람직하다.
한 실시양태에서, 허니부쉬(honeybush) 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도(whole grape) 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 유효한 양으로 포함하는 조성물이 효과적인 것으로 밝혀졌다. 조성물에서, 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나는 전체 포도 추출물에 대해 디아실글리세롤 아실트랜스퍼라제-1 (DGAT-1)을 상승작용적으로 억제하는 양으로 존재할 수 있다. 조성물에서, 허니부쉬 추출물은 PGC1α 프로모터 활성을 활성화시키는 양으로 존재할 수 있다. 조성물에서, 포도씨 추출물은 SREBP1c 프로모터 활성을 억제하는 양으로 존재할 수 있다. 조성물은 제약상, 기능식품상 또는 화장품용으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 추가로 포함할 수 있고, 추출물 혼합물은 조성물의 약 0.5 중량% (wt%) 내지 약 90 wt%를 구성한다. 대안적으로, 조성물은 제약상, 기능식품상 또는 화장품용으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함할 수 있고, 추출물 혼합물은 조성물의 활성 성분의 약 0.5 중량% (wt%) 내지 약 75 wt%를 구성한다. 대안적으로, 조성물은 제약상, 기능식품상 또는 화장품용으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함할 수 있고, 추출물 혼합물은 조성물의 활성 성분의 약 0.5 중량% (wt%) 내지 약 50 wt%를 구성한다. 조성물은 정제, 캡슐, 분말 또는 과립으로서 제형화될 수 있는 경구 투여용일 수 있다. 조성물은 크림, 겔, 로션, 스프레이 용액, 패드, 붕대 및 경피 패치(patch)로서 제형화될 수 있는 국소 투여용일 수 있다. 조성물은 대상체의 식이 지방 흡수 및 동화를 조정할 수 있다. 조성물은 지방조직의 지방 합성을 저해할 수 있다. 조성물은 디아실글리세롤 아실트랜스퍼라제-1 효소를 억제할 수 있다. 조성물은 피부 유분의 생성을 조정할 수 있다.
다른 실시양태는 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 유효한 양으로 포함하는 조성물을 포함하는 식품 또는 드링크를 제공한다.
또 다른 실시양태는 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 유효한 양으로 포함하는 조성물을 포함하는 체중 관리 제품에 관한 것이다. 체중 관리 제품은 경구 투여를 위해 제형화될 수 있다. 체중 관리 제품은 조성물을 활성 물질로서 포함하는 식품 또는 드링크일 수 있다. 체중 관리 제품은 조성물을 활성 물질로서 포함하는 제약일 수 있다. 체중 관리 제품은 국소 투여를 위해 제형화될 수 있다. 체중 관리 제품은 화장품 용도를 위해 제형화될 수 있다. 체중 관리 제품은 제약상, 기능식품상 또는 화장품용으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함할 수 있고, 추출물 혼합물은 조성물의 약 0.5 중량% (wt%) 내지 약 90 wt%를 구성한다. 체중 관리 제품은 제약상, 기능식품상 또는 화장품용으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함할 수 있고, 추출물 혼합물은 조성물의 약 0.5 중량% (wt%) 내지 약 75 wt%를 구성한다. 체중 관리 제품은 제약상, 기능식품상 또는 화장품용으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함할 수 있고, 추출물 혼합물은 조성물의 약 0.5 중량% (wt%) 내지 약 50 wt%를 구성한다.
다른 실시양태는 대상체의 체중 증가를 치료, 예방 또는 관리하기 위한 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 대상체의 체중 증가를 효과적으로 치료, 예방 또는 관리하는데 유효한 양의, 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 포함하는 조성물을 대상체에 투여하는 것을 포함한다.
추가의 실시양태는 대상체의 지방 흡수, 수송, 축적, 생성 및 분비를 감소시키는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 대상체의 지방 흡수, 수송, 축적, 생성 및 분비를 효과적으로 감소시키는데 유효한 양의, 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 포함하는 조성물을 대상체에 투여하는 것을 포함한다.
다른 실시양태는 대상체의 체중 감량을 촉진시키는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 대상체의 체중 감량을 효과적으로 촉진시키는데 유효한 양의, 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 포함하는 조성물을 대상체에 투여하는 것을 포함한다.
다른 실시양태는 대상체의 체중을 유지하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 대상체의 체중을 효과적으로 유지하는데 유효한 양의, 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 포함하는 조성물을 대상체에 투여하는 것을 포함한다.
다른 실시양태는 대상체의 피부 유분 생성과 관련된 피부 상태 또는 질환을 치료, 예방 또는 관리하기 위한 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 대상체의 피부 유분 생성과 관련된 피부 상태 또는 질환을 효과적으로 치료, 예방 또는 관리하는데 유효한 양의, 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 포함하는 조성물을 대상체에 투여하는 것을 포함한다.
추가의 실시양태는 대상체의 DGAT-1을 상승작용적으로 억제하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 대상체의 DGAT-1을 상승작용적으로 억제하는데 유효한 양의, 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 포함하는 조성물을 대상체에 투여하는 것을 포함한다.
도 1은 무세포 분석에서 DGAT-1 효소 억제에 대한 전체 포도 추출물의 용량 반응 및 EC50 값을 예시하는 그래프를 도시한다.
도 2는 세포 DGAT-1 억제에 대한 전체 포도 추출물의 용량 반응 및 EC50 값을 예시하는 그래프를 도시한다.
도 3a는 플라시보 군에서 치료 전후의 트리글리세리드 반응의 변화(%)를 예시하는 그래프를 도시한다.
도 3b는 전체 포도 추출물 군에서 치료 전후의 트리글리세리드 반응의 변화(%)를 예시하는 그래프를 도시한다.
도 3c는 플라시보 또는 전체 포도 추출물 치료 7일 후 트리글리세리드 반응의 변화(%)를 예시하는 그래프를 도시한다.
도 4는 세포 PGC1α 생물학적분석에 대한 허니부쉬 추출물의 효과를 예시하는 막대 그래프를 도시한다.
도 5는 세포 SREBP1c 프로모터 활성에 대한 포도씨 추출물의 효과를 예시하는 그래프를 도시한다.
도 6a는 대조군, 단독의 전체 포도 추출물, 단독의 포도씨 추출물 (20 ㎍/mL) 및 예측 반응과 비교해서 전체 포도 추출물 및 포도씨 추출물 (20 ㎍/mL)을 사용한 치료에 대한 반응으로의 세포 트리글리세리드 (%)를 나타내는 막대 그래프를 도시한다.
도 6b는 대조군, 단독의 전체 포도 추출물, 단독의 포도씨 추출물 (30 ㎍/mL) 및 예측 반응과 비교해서 전체 포도 추출물 및 포도씨 추출물 (30 ㎍/mL)을 사용한 치료에 대한 반응으로의 세포 트리글리세리드 (%)를 나타내는 막대 그래프를 도시한다.
도 6c는 대조군, 단독의 전체 포도 추출물, 단독의 포도씨 추출물 (40 ㎍/mL) 및 예측 반응과 비교해서 전체 포도 추출물 및 포도씨 추출물 (40 ㎍/mL)을 사용한 치료에 대한 반응으로의 세포 트리글리세리드 (%)를 나타내는 막대 그래프를 도시한다.
도 7a는 대조군, 단독의 전체 포도 추출물, 단독의 허니부쉬 추출물 (10 ㎍/mL) 및 예측 반응과 비교해서 전체 포도 추출물 및 허니부쉬 추출물 (10 ㎍/mL)을 사용한 치료에 대한 반응으로의 세포 트리글리세리드 (%)를 나타내는 막대 그래프를 도시한다.
도 7b는 대조군, 단독의 전체 포도 추출물, 단독의 허니부쉬 추출물 (25 ㎍/mL) 및 예측 반응과 비교해서 전체 포도 추출물 및 허니부쉬 추출물 (25 ㎍/mL)을 사용한 치료에 대한 반응으로의 세포 트리글리세리드 (%)를 나타내는 막대 그래프를 도시한다.
도 7c는 대조군, 단독의 전체 포도 추출물, 단독의 허니부쉬 추출물 (50 ㎍/mL) 및 예측 반응과 비교해서 전체 포도 추출물 및 허니부쉬 추출물 (50 ㎍/mL)을 사용한 치료에 대한 반응으로의 세포 트리글리세리드 (%)를 나타내는 막대 그래프를 도시한다.
도 2는 세포 DGAT-1 억제에 대한 전체 포도 추출물의 용량 반응 및 EC50 값을 예시하는 그래프를 도시한다.
도 3a는 플라시보 군에서 치료 전후의 트리글리세리드 반응의 변화(%)를 예시하는 그래프를 도시한다.
도 3b는 전체 포도 추출물 군에서 치료 전후의 트리글리세리드 반응의 변화(%)를 예시하는 그래프를 도시한다.
도 3c는 플라시보 또는 전체 포도 추출물 치료 7일 후 트리글리세리드 반응의 변화(%)를 예시하는 그래프를 도시한다.
도 4는 세포 PGC1α 생물학적분석에 대한 허니부쉬 추출물의 효과를 예시하는 막대 그래프를 도시한다.
도 5는 세포 SREBP1c 프로모터 활성에 대한 포도씨 추출물의 효과를 예시하는 그래프를 도시한다.
도 6a는 대조군, 단독의 전체 포도 추출물, 단독의 포도씨 추출물 (20 ㎍/mL) 및 예측 반응과 비교해서 전체 포도 추출물 및 포도씨 추출물 (20 ㎍/mL)을 사용한 치료에 대한 반응으로의 세포 트리글리세리드 (%)를 나타내는 막대 그래프를 도시한다.
도 6b는 대조군, 단독의 전체 포도 추출물, 단독의 포도씨 추출물 (30 ㎍/mL) 및 예측 반응과 비교해서 전체 포도 추출물 및 포도씨 추출물 (30 ㎍/mL)을 사용한 치료에 대한 반응으로의 세포 트리글리세리드 (%)를 나타내는 막대 그래프를 도시한다.
도 6c는 대조군, 단독의 전체 포도 추출물, 단독의 포도씨 추출물 (40 ㎍/mL) 및 예측 반응과 비교해서 전체 포도 추출물 및 포도씨 추출물 (40 ㎍/mL)을 사용한 치료에 대한 반응으로의 세포 트리글리세리드 (%)를 나타내는 막대 그래프를 도시한다.
도 7a는 대조군, 단독의 전체 포도 추출물, 단독의 허니부쉬 추출물 (10 ㎍/mL) 및 예측 반응과 비교해서 전체 포도 추출물 및 허니부쉬 추출물 (10 ㎍/mL)을 사용한 치료에 대한 반응으로의 세포 트리글리세리드 (%)를 나타내는 막대 그래프를 도시한다.
도 7b는 대조군, 단독의 전체 포도 추출물, 단독의 허니부쉬 추출물 (25 ㎍/mL) 및 예측 반응과 비교해서 전체 포도 추출물 및 허니부쉬 추출물 (25 ㎍/mL)을 사용한 치료에 대한 반응으로의 세포 트리글리세리드 (%)를 나타내는 막대 그래프를 도시한다.
도 7c는 대조군, 단독의 전체 포도 추출물, 단독의 허니부쉬 추출물 (50 ㎍/mL) 및 예측 반응과 비교해서 전체 포도 추출물 및 허니부쉬 추출물 (50 ㎍/mL)을 사용한 치료에 대한 반응으로의 세포 트리글리세리드 (%)를 나타내는 막대 그래프를 도시한다.
현재, DGAT-1 및 SREBP1c의 억제 및 PGC1α의 활성화를 통해 지방 합성을 억제하고, 체중 관리뿐만 아니라 피부 유분 관리 용품에 유용할 수 있는 제형 또는 상품이 없다.
체중 관리를 위한 조성물 및 방법, 보다 특히 허니부쉬 추출물 또는 포도씨 추출물 또는 이들 둘 모두와 조합된 전체 포도 추출물을 포함하는 조성물, 및 DGAT-1 효소의 상승작용적 억제뿐만 아니라 SREBP1c 프로모터 활성의 억제 및 PGC1알파 프로모터 활성의 활성화를 통한 체중 관리, 체중 증가 또는 비만증의 치료 또는 예방, 체중 감량의 촉진, 식욕 저해 등을 위한 그의 사용 방법을 기재한다.
또한, 대상체의 피부 유분 생성과 관련된 피부 상태 또는 질환의 치료, 예방 또는 관리를 위한 조성물, 보다 특히 허니부쉬 추출물 또는 포도씨 추출물 또는 이들 둘 모두와 조합된 전체 포도 추출물을 포함하는 조성물, 및 DGAT-1 효소의 상승작용적 억제뿐만 아니라 SREBP1c 프로모터 활성의 억제 및 PGC1알파 프로모터 활성의 활성화를 통한 대상체의 피부 유분 생성과 관련된 피부 상태 또는 질환의 치료, 예방 또는 관리 등을 위한 그의 사용 방법을 기재한다.
<정의>
용어 "조성물"이란 자연 상태 또는 생물학적 과정과 관련된 특정 상태를 치료, 개선, 촉진, 증가, 관리, 제어, 유지, 최적화, 변경, 감소, 억제 또는 예방하는 생성물을 지칭한다. 용어 조성물은 유효한 양의 추출물 혼합물 또는 그의 성분을 포함하는 제약 (즉, 약물), 화장품, 식품, 식품 성분 또는 식이 보충제 조성물을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 예시적 조성물은 국소 크림 및 로션, 식이 보충제, 음료 및 음료 믹스를 포함한다.
용어 "제약 조성물"이란 의사 또는 수의사로부터의 처방이 필요할 약품 (즉, 약물)을 제조하는데 사용될 수 있는 조성물을 지칭한다.
용어 "화장품 조성물"이란 의사 또는 수의사로부터의 처방이 필요하거나 필요하지 않는 인체의 외관 또는 냄새를 증진시키는데 사용되는 케어 물질을 제조하는데 사용될 수 있는 조성물을 지칭한다.
용어 "식품 조성물"이란 식품 또는 음료 제품을 제조하는데 사용될 수 있는 조성물을 지칭한다.
본원에 사용되는 용어 "식이 보충제"란 자연 상태 또는 생물학적 과정과 관련된 특정 상태를 개선, 촉진, 증가, 관리, 제어, 유지, 최적화, 변경, 감소, 억제 또는 예방하는 제품을 지칭한다 (즉, 질병을 진단, 치료, 완화, 치유 또는 예방하는데는 사용되지 않음). 예를 들어 체중-관련 상태에 관해서, 식이 보충제는 체중 감량의 촉진, 체중 증가의 관리, 체중의 유지, 칼로리 섭취의 감소, 근육 질량의 증가 등에 사용될 수 있다. 예를 들어 피부 유분 생성 관련 상태의 관리에 관해서, 식이 보충제는 피부 유분 생성의 감소, 피부 여드름 발생의 감소 등을 촉진시키는데 사용될 수 있다. 예시적 식이 보충제는 식이 성분, 예컨대 비타민, 미네랄, 허브 또는 기타 식물, 아미노산, 또는 총 식이 섭취를 증가시킴으로써 음식물 보충에 사용되는 임의의 다른 물질, 또는 농축물, 대사물질, 구성성분, 추출물 또는 이들의 임의의 조합 중 하나 이상을 포함한다. 특정 실시양태에서, 식이 보충제는 특수 카테고리의 식품이고 약물이 아니다.
용어 "추출물 혼합물"이란 둘 이상의 상이한 추출물의 혼합물 또는 조합을 지칭한다. 혼합물을 포함하는 추출물은 동등한 또는 상이한 양 또는 비율의 것일 수 있다.
본원에 사용되는 용어 "추출물"이란 전체 포도, 허니부쉬 또는 포도씨와 같은 식물 물질의 활성 성분을 농축된 형태로 포함하는 제제 또는 고체, 점성 또는 액체 물질을 지칭한다. 용어 "추출물"은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜, 예컨대 메탄올, 에탄올, 부탄올 등, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, N,N-디메틸포름아미드 (DMF), 디메틸술폭시드 (DMSO), 1,3-부틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜 및 이들의 조합 중에서 선택된 용매를 사용하여 전체 포도, 허니부쉬 및/또는 포도씨로부터 제조된 조(crude) 추출물뿐만 아니라, 상기와 같은 용매 중의 조 추출물 분획을 포함하도록 의도된다. 활성 성분의 추출 및 보존이 보장되는 한, 임의의 추출 방법을 사용할 수 있다. 추출 방법의 예로는 용매 추출, 초임계 유체 추출 등이 포함된다. 분획은 조 추출물을 상이한 극성을 갖는 두 용매 사이에 분배시킴으로써 수득된 것들 및 실리카 겔-충전 컬럼 내로 로딩된 조 추출물을 소수성 용매, 친수성 용매 또는 이들의 조합을 이동상으로서 사용하여 용출시킴으로써 수득된 용출액을 포함할 수 있다. 또한, 추출물은 동결 건조, 진공 건조, 열풍 건조 또는 분무 건조에 의해 추출 용매를 제거함으로써 농축된 액체 상 또는 고체 상일 수 있다. 바람직하게는, 추출물은 물, 에탄올 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 용매를 사용하여 전체 포도, 허니부쉬 또는 포도씨로부터 제조된 조 추출물 또는 조 추출물 분획일 수 있다.
본원에 사용되는 용어 "유효한 양" 또는 "치료 유효한 양"의 조성물, 추출물 혼합물, 추출물 혼합물의 성분, 및/또는 활성 제제 또는 성분이란 목적하는 결과를 달성하기에 충분한 시간 동안 및 그러한 투여량에서 효과적인 양을 지칭한다. 예를 들어 "유효한 양" 또는 "치료 유효한 양"이란, 대상체 (예를 들어, 포유동물, 예컨대 인간)에 투여되는 경우 다음 중 임의의 하나 이상을 비롯한 치료를 달성하기에 충분한 본 발명의 조성물, 추출물 혼합물, 추출물 혼합물의 성분, 및/또는 활성 제제 또는 성분의 양을 지칭한다: (1) 대상체의 DGAT-1의 상승작용적 억제; (2) 대상체의 체중 증가의 치료, 예방 또는 관리; (3) 체중 감량 촉진; (4) 대상체의 식욕 저해; (5) 대상체의 비만증의 치료 또는 예방; (6) 대상체의 지방 흡수율의 변경 (예를 들어, 지방 흡수, 수송, 축적, 생성 및/또는 분비의 감소에 의해); (7) 장 세포 내에서 발생하는 지방 합성의 억제에 의한 식이 지방의 흡수, 동화 및 축적의 감소; (8) 대사 증가를 방해하여 대상체의 체중 감량의 촉진 또는 체중 증가의 예방; (9) 포유동물의 체중 유지; (10) 대상체의 피부 유분 생성과 관련된 피부 상태 또는 질환의 치료, 예방 또는 관리. "치료 유효한 양"을 구성하는 본 개시내용의 조성물, 추출물 혼합물, 추출물 혼합물의 성분, 및/또는 활성 제제 또는 성분의 양은 활성 제제 또는 화합물, 치료되는 상태 및 그의 심각성, 투여 방식, 치료 기간, 또는 치료하고자 하는 대상체의 연령에 따라 다양할 것이나, 관련 기술분야의 통상의 기술자라면 자신의 지식 및 본 개시내용을 참작하여 일상적으로 결정할 수 있다.
"서브-유효한 양" 또는 "서브-치료량"의 조성물, 추출물 혼합물, 추출물 혼합물의 성분, 및/또는 활성 제제 또는 성분 또는 요법은 조성물, 추출물 혼합물, 추출물 혼합물의 성분, 및/또는 활성 제제 또는 성분 또는 요법의 유효한 양 미만인 양이나, 유효한 양 또는 서브-치료량의 또 다른 조성물, 추출물 혼합물, 추출물 혼합물의 성분, 및/또는 활성 제제 또는 성분과 조합되는 경우 예를 들어 파생 유효 효과의 상승효과 및/또는 감소된 부작용으로 인해 목적하는 결과를 낳을 수 있다.
본원에서 용어 "상승작용적 효과" 또는 "상승적 효과"는 그의 개별 효과의 합보다 더 큰 조합된 생물학적 효과(들)를 낳는 둘 이상의 조합 조성물 (예를 들어, 추출물 혼합물)의 상호작용으로서 정의된다 (즉, 1 + 1 < 2 또는 1 + 1 + 1 < 3). 상승작용적 효과는 각 조성물의 합한 (더해진) 효과보다 약 10, 20, 30, 50, 75, 100, 120, 150, 200, 250, 350 또는 500% 또는 그 이상쯤이거나 또는 그보다 클 수 있다. 효과는 본원에 기재된 임의의 측정가능한 효과일 수 있다.
본원에 사용되는 용어 "담체"란 조성물의 하나 이상의 성분 (예를 들어, 유효 성분 또는 활성 제제)를 투여에 적합한 형태의 용해성이고 균질한 상태로 유지하는데 도움을 주는, 무독성이며 다른 성분과 해로운 방식으로 상호작용하지 않는 조성물을 지칭한다. 담체는 관련 기술분야에 공지된 임의의 재료, 예컨대 이에 제한되는 것은 아니나 임의의 분말, 액체, 겔, 가용화제 또는 결합제를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 일부 예시적 담체는 말토덱스트린, 아라비아 검, 전분, 미세결정질 셀룰로스, 히드록시프로필 메틸셀룰로스 및 이들의 혼합물을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 특정 실시양태에서, 담체는 말토덱스트린이고/이거나 사용되는 담체는 맛 및/또는 떫은맛 뉴트럴(neutral)이다 (즉, 생성된 제품의 떫은맛을 비롯한 기호성에 대해 효과가 없음).
본원에 사용되는 용어 "피부"란 인간 또는 비(非)-인간 개체의 외피 및 그의 구조적 구성요소, 예컨대 모발, 모낭, 피지선, 아포크린 (땀) 샘, 손톱 및 발톱을 포함하는 세포 층을 지칭한다.
본원에 사용되는 용어 "피부의 환부"란 활성 성분을 포함하는 조성물을 사용하여 치료하고자 하는 피부의 영역을 지칭한다. 예를 들어, 환부는 치료 또는 예방이 모색되는 개체의 피부 유분 생성과 관련된 피부 상태 또는 질환의 자리일 수 있다. 일부 경우에서, 환부는 개체 상의 모든 피부를 포괄할 수 있다. 대안적으로, 환부는 미용 특성의 개선이 모색되는 자리일 수 있고, 개체 상의 모든 피부 또는 피부의 특정 영역, 예컨대 얼굴, 등 또는 팔을 포함할 수도 있다.
용어 "피부 유분 생성과 관련된 피부 상태 또는 질환"이란 피부 피지선에 의한 증가 또는 감소된 피부 유분 생성으로부터 초래되는 임의의 피부 상태 또는 질환을 지칭한다. 피부 유분 생성과 관련된 피부 상태 또는 질환의 예는 여드름, 피지낭, 과형성, 블랙헤드(blackhead), 거친 또는 울퉁불퉁한 피부, 확장 및 가시화된 구멍, 습진 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용되는 용어 "전신" 또는 "전신으로"란 혈류 또는 림프계를 통한 요법의 투여 방식을 지칭한다. 전신 치료의 예는 경구 가바즈(gavage) 또는 섭취, 정맥내 또는 피하 펌프 주입, 및 근육내, 복강내, 피부밑 또는 피하 주사를 통한 주사를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용되는 용어 "국소" 또는 "국소적으로"란 피부의 환부일 수 있는 피부의 영역에 직접 적용되는 투여 방식을 지칭한다. 국소 치료의 예는 크림, 로션, 겔, 샴푸, 컨디셔닝 로션, 스프레이, 패드, 붕대, 기저귀, 습윤 타월렛(towelette) 또는 경피 패치의 적용; 및 피내 주사 또는 로젠지(lozenge) 또는 좌제의 도입을 통한 국소적 투여를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용되는 용어 "치료하는" 또는 "치료"란 관심 질병 또는 상태를 앓고 있는 포유동물, 예컨대 인간의 관심 질병 또는 상태의 치료를 지칭하며, 다음을 포함한다: (i) 포유동물에서의 질병 또는 상태의 발생을 예방함 (특히, 상기와 같은 포유동물은 상태에 걸리기는 쉬우나 아직 그것을 앓는 것으로 진단되지는 않은 경우); (ii) 질병 또는 상태를 억제함 (즉, 그의 진전을 정지시킴); (iii) 질병 또는 상태를 경감시킴 (즉, 질병 또는 상태의 퇴행을 유발함); 또는 (iv) 근원적인 질병 또는 상태를 다루지 않고 질병 또는 상태로부터 초래되는 증상을 경감 (예를 들어, 통증의 경감, 염증의 감소, 체중 감량 유발)시킴. 본원에 사용되는 용어 "질병" 및 "상태"는 상호교환적으로 사용될 수 있거나, 또는 특정 질환 또는 상태가 공지된 요인을 갖지 않을 수 있어 (병인이 아직 밝혀지지 않아) 아직 질병으로서는 인지되지는 않으나 단지 바람직하지 못한 상태 또는 증후군으로서 인지된다는 점에서 상이할 수 있고, 여기서 다소 특이적인 일련의 증상은 임상의에 의해 확인된 것이다.
용어 "투여하다", "투여된", "투여" 및 "투여하는"은 관련 기술분야에 공지된 루트, 예컨대 이에 제한되지는 않으나 정맥내, 동맥내, 경구, 비경구, 협측, 국소, 경피, 직장, 근육내, 피하, 골내, 경점막 또는 복강내 투여 루트를 통해 대상체에 조성물을 제공하는 것으로서 정의된다. 특정 실시양태에서, 조성물의 경구 투여 루트가 바람직할 수 있다. 대안적으로, 국소 투여가 바람직할 수 있다.
본원에 사용되는 용어 "대상체" 또는 "개체"는 조성물을 투여할 수 있는 포유동물을 포함한다. 포유동물의 비제한적 예는 인간, 비-인간 영장류, 설치류 (예컨대 트랜스제닉 및 비-트랜스제닉 마우스) 등을 포함한다. 본원에 기재된 방법은 인간 치료제, 임상전, 기능식품, 화장품 및 수의 용품에 유용할 수 있다. 일부 실시양태에서 대상체는 포유동물이고, 일부 실시양태에서 대상체는 인간이다.
본원에 사용되는 "제제", "활성 제제", "생물학적 활성 제제" 또는 "활성 물질"이란 식물 추출물로부터 수득된 생물학적, 제약적 또는 화학적 화합물 또는 기타 모이어티를 지칭한다. 구체적으로, "제제", "활성 제제", "생물학적 활성 제제" 또는 "활성 물질"은 전체 포도 추출물, 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나로부터 수득될 수 있는 생물학적, 제약적 또는 화학적 화합물 또는 기타 모이어티일 수 있다. 비제한적 예는 단순한 또는 복잡한 유기 또는 무기 분자, 펩티드, 단백질, 탄수화물, 지방산 또는 지질 유사 분자를 포함한다.
용어 "조정제"란 조성물의 일부로서 포함된 활성 제제 또는 물질을 지칭하며, 이는 대상체에서의 하나 이상의 세포 단백질의 활성 또는 발현을 조정한다. 조정제는 분자의 활성 및/또는 발현 수준 또는 패턴을 증대 또는 저해할 수 있다. 조정제는 성분에 직접 결합함으로써 경로에서 성분을 활성화시킬 수 있다. 조정제는 또한 하나 이상의 관련 성분과 상호작용함으로써 경로에서 성분을 간접적으로 활성화시킬 수 있다. 경로의 산출물은 단백질의 발현 또는 활성 수준에 대해 측정될 수 있다. 경로에서 단백질의 발현 수준은 상응하는 mRNA 또는 관련 전사 인자의 수준뿐만 아니라 세포내 위치에서의 단백질의 수준으로 반영될 수 있다. 예를 들면, 특정 단백질은 특이적 세포내 성분, 예컨대 이에 제한되지는 않으나 세포의 핵, 미토콘드리아, 엔도솜, 리소좀 또는 기타 막성 구조물의 내부 또는 외부로 전위함으로써 활성화된다. 경로의 산출물은 또한 생리학적 효과, 예컨대 지방 흡수 및/또는 동화, 체중 감량, 감소된 피부 유분 생성 등에 대해 측정될 수 있다.
"활성인자"란 경로 산출물을 증가시키는 방식으로 경로에 영향을 미치는 조정제를 지칭한다. 특정 타겟의 활성화는 직접적 (예를 들어 타겟과의 상호작용에 의해) 또는 간접적 (예를 들어 타겟을 포함한 신호전달 경로에서의 타겟의 단백질 상류와의 상호작용에 의해)일 수 있다.
용어 "저해제" 또는 "억제제"란 경로 산출물을 감소시키는 방식으로 경로에 영향을 미치는 조정제를 지칭한다. 특정 타겟의 억제는 직접적 (예를 들어 타겟과의 상호작용에 의해) 또는 간접적 (예를 들어 타겟을 포함한 신호전달 경로에서의 타겟의 단백질 상류와의 상호작용에 의해)일 수 있다.
조성물
유용한 조성물은 적어도 생리학적으로 허용되는 양의 추출물 혼합물을 포함하며, 상기 추출물 혼합물은 (i) DGAT-1 활성을 적어도 부분적으로 억제할 수 있는 전체 포도 추출물, 및 (ii) (a) 적어도 생리학적으로 허용되는 양의 PGC1α 프로모터 활성을 적어도 부분적으로 활성화시키고 DGAT-1 활성을 상승작용적으로 억제할 수 있는 허니부쉬 추출물 및/또는 (b) 적어도 생리학적으로 허용되는 양의 SREBP1c 프로모터 활성을 적어도 부분적으로 억제하고 DGAT-1 활성을 상승작용적으로 억제할 수 있는 포도씨 추출물 중 적어도 하나를 포함함으로써 건강 및 질병에 중요한 영향을 미치고 체중 관리 용품 및 피부 유분 관리 용품에 광범위하고 중요하게 사용된다.
구체적으로, 기재된 조성물은 장 세포 내 (위장관의 루멘 내가 아님)에서 발생하는 지방 합성을 억제함으로써 식이 지방의 흡수 및 동화를 방해할 수 있다. 기재된 조성물은 또한, 담즙산 결합 수지의 효과의 일부가 아닌 관찰되는 잠재적 유익인 신체 내 지방조직의 지방 합성을 방해할 수 있다. 또한, 기재된 조성물은 피부의 피지 생성과 관련된 지방 합성을 방해할 수 있고, 예를 들어 국소 적용의 경우에 과도한 피부 유분 생성을 감소시키는 효과를 가질 수 있다.
식이 지방의 흡수, 동화 및 축적의 억제는 체중을 감소 또는 유지하고자 하고 높은 식이 지방 섭취가 문제인 개체의 체중 감량을 촉진시킬 수 있다. 국소 적용의 경우, 피지의 지방 생성 억제는 피부 유분 생성 (예를 들어, 과도한 피부 유분 생성)과 관련된 피부 상태, 예컨대 피부 여드름의 관리를 개선 또는 조력할 수 있다.
특정 실시양태에서, 조성물은 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 백포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 유효한 양으로 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나는 전체 포도 추출물에 대해 디아실글리세롤 아실트랜스퍼라제-1 (DGAT-1)을 상승작용적으로 억제하는 양으로 존재한다.
특정 실시양태에서, 추출물 혼합물은 조성물의 약 0.5 중량% (wt%) 내지 약 90 wt%를 구성한다. 다른 특정 실시양태에서, 추출물 혼합물은 조성물의 약 0.5 중량% (wt%) 내지 약 75 wt%를 구성한다. 다른 특정 실시양태에서, 추출물 혼합물은 조성물의 약 0.5 중량% (wt%) 내지 약 50 wt%를 구성한다.
특정 실시양태에서, 조성물은 추출물 혼합물을 약 5% 이상, 대안적으로 10% 이상, 대안적으로 약 15% 이상, 대안적으로 약 20% 이상, 대안적으로 25% 이상, 대안적으로 30% 이상, 대안적으로 40% 이상, 대안적으로 45% 이상, 대안적으로 50% 이상, 대안적으로 55% 이상, 대안적으로 60% 이상, 대안적으로 65% 이상, 대안적으로 70% 이상, 대안적으로 75% 이상 포함한다. 일부 실시양태에서, 추출물 혼합물은 조성물의 약 75% 이하, 대안적으로 약 50% 이하, 대안적으로 약 55% 이하, 대안적으로 약 40% 이하, 대안적으로 약 30% 이하, 대안적으로 약 25% 이하의 양으로 존재한다.
적합한 전체 포도 추출물 공급원은 시벡스 뉴트리션(Cyvex Nutrition, 미국 92614 캘리포니아주 어바인)으로부터 얻었다. 전체 포도 추출물은 펄프, 껍질 및 씨를 물 및 에탄올을 사용하여 추출하여 8000:1의 신선한 전체 포도 대 전체 포도 추출물 비율의 수율을 생성함으로써 제조될 수 있다.
한 실시양태에서, 전체 포도 추출물은 하기 활성 성분(들)을 함유한다: 프로안토시아니딘, 올리고머 프로안토시아니딘, 폴리페놀, 갈산, 트랜스-레스베라트롤, 및 스틸베노이드. 전체 포도 추출물은 추가 성분, 예컨대 프로시아니딘, 카테킨, 카테킨 대사물질, 안토시아니딘 및 에피카테킨을 추가로 포함할 수 있다.
전체 포도 추출물 중의 폴리페놀의 양은 예를 들어 10% 내지 90%, 보다 바람직하게는 예를 들어 50% 내지 98%로 다양할 수 있다.
전체 포도 추출물 중의 스틸베노이드의 양은 예를 들어 0.01% 내지 1%, 보다 바람직하게는 예를 들어 0.01% 내지 0.1%로 다양할 수 있다.
전체 포도 추출물 중의 올리고머 프로안토시아니딘의 양은 예를 들어 10% 내지 90%, 보다 바람직하게는 예를 들어 50% 내지 90%로 다양할 수 있다.
바람직하게는 및 유리하게는, 전체 포도 추출물은 본 조성물에 존재하는 추출물 혼합물의 약 30% 이상, 대안적으로 약 35% 이상, 대안적으로 약 40% 이상, 대안적으로 약 45% 이상, 대안적으로 약 50% 이상, 대안적으로 약 55% 이상, 대안적으로 약 60% 이상, 대안적으로 약 65% 이상, 대안적으로 약 70% 이상, 대안적으로 약 75% 이상, 대안적으로 약 80% 이상, 대안적으로 약 90% 이상, 대안적으로 약 100%를 구성한다.
특정 실시양태에서, 조성물은 전체 포도 추출물 및 허니부쉬 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 유효한 양으로 포함한다.
적합한 허니부쉬 추출물은 상업적으로 판매되는 허니부쉬 티백(tea bag)으로부터 추출 방법에 의해 수득하였다.
허니부쉬 추출물은 하기 활성 성분을 포함한다: 플라바논 및 크산톤. 허니부쉬 추출물은 추가 성분, 예컨대 디히드로칼콘, 플라본 및 벤조페논을 추가로 포함할 수 있다.
허니부쉬 추출물 중의 망기페린의 양은 예를 들어 0.1% 내지 10%, 보다 바람직하게는 예를 들어 0.5% 내지 5%로 다양할 수 있다.
허니부쉬 추출물 중의 헤스페리딘의 양은 예를 들어 0.1% 내지 10%, 보다 바람직하게는 0.5% 내지 5.0%로 다양할 수 있다.
허니부쉬 추출물 중의 루테올린의 양은 0.01% 내지 5.0%, 보다 바람직하게는 예를 들어 0.1% 내지 1%로 다양할 수 있다.
바람직하게는, 전체 포도 추출물은 추출물 혼합물의 약 25%를 구성하고 허니부쉬 추출물은 약 75%를 구성하며; 보다 바람직하게는, 전체 포도 추출물은 추출물 혼합물의 약 50%를 구성하고 허니부쉬 추출물은 약 50%를 구성하며; 보다 바람직하게는, 전체 포도 추출물은 추출물 혼합물의 약 60%를 구성하고 허니부쉬 추출물은 약 40%를 구성하며; 가장 바람직하게는, 전체 포도 추출물은 추출물 혼합물의 약 75%를 구성하고 허니부쉬 추출물은 약 25%를 구성한다.
특정 실시양태에서, 전체 포도 추출물 대 허니부쉬 추출물의 비율은 1:5이고, 보다 바람직하게는 비율은 1:4이고, 보다 바람직하게는 비율은 1:3이고, 보다 바람직하게는 비율은 1:2이고, 보다 바람직하게는 비율은 1:1이고, 보다 바람직하게는 비율은 2:1이고, 보다 바람직하게는 비율은 3:1이고, 보다 바람직하게는 비율은 4:1이다.
다른 특정 실시양태에서, 조성물은 전체 포도 추출물 및 포도씨 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 유효한 양으로 포함한다.
적합한 포도씨 추출물 공급원은 폴리페놀릭(Polyphenolic, 미국 93637 캘리포니아주 마데라)로부터 얻었다. 포도씨 추출물은 포도씨를 온수를 사용하여 추출하여 30 내지 50:1의 포도씨 대 포도씨 추출물을 얻음으로써 제조된다.
포도씨 추출물은 하기 성분을 포함한다: 올리고머 안토시아니딘, 프로안토시아니딘, 폴리페놀 및 갈산. 포도씨 추출물은 추가 성분, 예컨대 프로시아니딘, 카테킨, 카테킨 대사물질 및 이성질체, 프로토카테큐산, 에피카테킨, 에피카테킨 대사물질 및 이성질체, 및 글루코갈린을 추가로 포함할 수 있다.
포도씨 추출물 중의 폴리페놀의 양은 예를 들어 10% 내지 98%, 보다 바람직하게는 예를 들어 50% 내지 98%로 다양할 수 있다.
포도씨 추출물 중의 갈산의 양은 예를 들어 1% 내지 50%, 보다 바람직하게는 예를 들어 5% 내지 20%로 다양할 수 있다.
포도씨 추출물 중의 카테킨의 양은 예를 들어 1% 내지 50%, 보다 바람직하게는 예를 들어 5% 내지 20%로 다양할 수 있다.
바람직하게는, 전체 포도 추출물은 추출물 혼합물의 약 25%를 구성하고 포도씨 추출물은 약 75%를 구성하며; 보다 바람직하게는, 전체 포도 추출물은 추출물 혼합물의 약 50%를 구성하고 포도씨 추출물은 약 50%를 구성하며; 보다 바람직하게는, 전체 포도 추출물은 추출물 혼합물의 약 60%를 구성하고 포도씨 추출물은 약 40%를 구성하며; 가장 바람직하게는, 전체 포도 추출물은 추출물 혼합물의 약 75%를 구성하고 포도씨 추출물은 약 25%를 구성한다.
다른 특정 실시양태에서, 전체 포도 추출물 대 포도씨 추출물의 비율은 1:4이고, 보다 바람직하게는 비율은 1:3이고, 보다 바람직하게는 비율은 1:2이고, 보다 바람직하게는 비율은 1:1이고, 보다 바람직하게는 비율은 2:1이고, 보다 바람직하게는 비율은 3:1이고, 보다 바람직하게는 비율은 4:1이다.
다른 특정 실시양태에서, 추출물 혼합물은 전체 포도 추출물 및 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 둘 모두를 포함하고, 여기서 전체 포도 추출물 대 허니부쉬 추출물 대 포도씨 추출물의 비율은 1:1:1이고, 보다 바람직하게는 비율은 1:1:2이고, 보다 바람직하게는 비율은 1:2:2이고, 가장 바람직하게는 비율은 1:1:2.5이다.
조성물은 전신 (예를 들어, 경구) 또는 국소 투여 또는 적용을 위해 제형화될 수 있다. 일부 개체에서, 전신 및 국소 투여의 조합을 사용하는 것이 바람직할 수 있다. 이는 국소 및 전신 트리글리세리드 및 지방 합성 모두의 제어에 대한 관심으로 인한 것일 수 있다.
경구- 또는 국소-투여용 조성물을 제조하기 위해, 허니부쉬 추출물 또는 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물의 유효한 양을 제약상, 기능식품상 또는 화장품용으로 허용되는 비히클, 아주반트, 담체 및/또는 부형제 (예를 들어, 전분, 말토덱스트린, 덱스트린, 미세결정질 셀룰로스, 규화 미세결정질 셀룰로스, 셀룰로스)와 혼합한다. 제약상, 기능식품상 또는 화장품용으로 허용되는 비히클, 아주반트, 담체 및/또는 부형제는 예를 들어 문헌[Handbook of Pharmaceutical Excipients, second edition, American Pharmaceutical Association, 1994] (본원에 참조로 포함됨)에 기재된 바와 같이 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 일부 특이적 예를 하기에 제공한다.
특정 실시양태에서, 추출물은 용이하게 취급하기 위해서 용매로 혼입될 수 있다. 예를 들어 바람직한 실시양태에서, 각각의 전체 포도 추출물, 허니부쉬 추출물 또는 포도씨 추출물은 1,3-부틸렌 글리콜과 물의 혼합물, 글리세린, 프로필렌 글리콜, 카르보머(carbomer) 980, 세틸 및 베헤닐 알콜에 혼입된다.
경구 투여용 조성물
경구 투여용 조성물은 식품 또는 음료 조성물 (예를 들어, 건강 보조 식품, 영양 보충제 또는 기능성 음료), 화장품 조성물 또는 제약 조성물일 수 있다.
특정 실시양태에서, 경구 투여용 조성물은 추가 성분, 예컨대 향미료, 감미료, 착색제 및 보존제 성분뿐만 아니라 보충제 성분을 포함할 수 있다.
a) 향미료, 감미료, 착색제 및 보존제 성분
다양한 추가 성분, 예컨대 천연 및 인공 향미료, 천연 및 인공 착색제 및/또는 식품 등급 염료가 경구 투여용 조성물에 포함될 수 있다. 또한, 관련 기술분야의 통상의 기술자가 아는 바와 같은 다양한 보존제가 또한 첨가될 수도 있다.
향미제는 조성물의 맛 또는 향미를 증진시키도록 채택되고, 천연 또는 합성일 수 있다. 천연 향미제가 바람직하다. 향미제는 천연인 경우, 향미 증진 이외에 영양 보충의 기능을 할 수 있다. 향미료의 비제한적 예는 천연 또는 인공 향미료를 포함하고, 초콜릿; 바닐라; 캐러멜; 커피; 과일 향미료, 예컨대 레몬, 라임, 오렌지, 블랙베리, 라즈베리, 블루베리, 복숭아, 살구, 체리, 포도; 크렘, 및 이들의 혼합물을 포함한다. 이러한 향미료는 구입할 수 있고/거나 공지된 향미료 기술을 사용하여 제조 및 첨가할 수 있다. 천연 향미제는 액체 농축물 또는 고체 추출물의 형태일 수 있다. 합성 향미제를 사용할 수 있고, 그의 예는 에스테르, 알콜, 알데히드 및 테르펜이다.
조성물은 감미료와 같은 첨가제를 함유할 수 있다. 감미료는 조성물에 단맛을 부여하기 위해 사용되며, 천연 또는 합성일 수 있다. 천연 감미료가 바람직하다. 천연 감미료의 예는 콘 시럽, 화밀, 수크로스, 프룩토스, 락토스, 말토스 및 기타 당을 포함한다.
적합한 착색제의 비제한적 예는 엘더베리, 캐러멜화 당으로부터 제조된 캐러멜 착색제, 안나토(Annatto), 클로로필린(Chlorophyllin), 코치닐(Cochineal), 베타닌(Betanin), 터메릭(Turmeric), 사프론(Saffron), 파프리카(Paprika), 리코펜(Lycopene), 판단(Pandan) 및 나비 완두(Butterfly pea)를 포함한다.
적합한 보존제의 비제한적 예는 나트륨 벤조에이트, 나트륨 시트레이트, 나트륨 포스페이트, 칼륨 메타바이술파이트, 나트륨 메타바이술파이트, 나트륨 락테이트, 나트륨 술파이트, EDTA (에틸렌디아민테트라아세트산), 메틸파라벤, 시트르산, 아스코르브산, 말산 및 이들의 혼합물을 포함한다.
조성물은 개별적으로 또는 전체적으로 조성물 중량을 기준으로 약 0.001% 이상의 향미료, 착색제 및/또는 보존제 성분 및 이들의 혼합물을 포함할 수 있다. 대안적으로, 조성물은 개별적으로 또는 전체적으로 조성물 중량을 기준으로 약 0.001% 내지 약 10%, 대안적으로 약 0.001% 내지 약 5%, 대안적으로 약 0.01% 내지 약 4%, 대안적으로 약 0.1% 내지 약 3%의 각각의 또는 향미료, 착색제 성분 및/또는 보존제 성분 및 이들의 혼합물을 포함할 수 있다.
b) 보충제 성분
본 조성물은 기본적으로 추출물 혼합물의 조성물이도록 의도되나, 본 발명의 실시양태는 보충제, 예컨대 이에 제한되지는 않으나 비타민, 미네랄, 허브, 식물, 식물 유래의 보조제, 동물 유래의 보조제, 치료 화합물 및 이들의 혼합물을 포함할 수 있음을 고려한다.
이와 같은 기타 성분의 비제한적 예는 칼슘, 칼륨, B 비타민, 비타민 A, C, D, E 및 K, 엽산, 관련 기술분야에 통상적으로 공지되고 음식물 보충에 사용되는 기타 비타민 및 미네랄 (예를 들어, 마그네슘, 크롬, 코발트, 구리, 플루오라이드, 게르마늄, 아이오딘, 철, 리튬, 마그네슘, 망가니즈, 몰리브데넘, 인, 칼슘, 셀레늄, 실리콘, 나트륨, 황, 바나듐 및 아연); 예컨대 페룰산 (사과로부터의), 인삼, 은행 이엽(ginko biloba), 베타 카로텐, 캡사이시노이드, 안토시아니딘, 바이오플라보노이드, d-리모넨, 이소티오시아네이트, 마늘로부터의 시스테인, 생강, 포도, 티(tea)로부터의 카테킨 및 폴리페놀, 양파, 식물성스테롤, 이소플라본, 리코펜, 커큐민, 카페인; 글루코사민, 콘드로이틴; 멜라토닌, 세라토닌을 포함한 추출물 및 활성 식물성화학물질; 및 이들의 혼합물을 포함한다.
조성물은 조성물 중량을 기준으로 약 0.001% 이상의 보충제 성분을 포함할 수 있다. 대안적으로, 조성물은 조성물 중량을 기준으로 약 0.001% 내지 약 25%, 대안적으로 약 0.01% 내지 약 10%, 대안적으로 약 0.1% 내지 약 5%의 보충제 성분을 포함할 수 있다.
보존제, 유화제 등과 같은 제제는 그것들의 첨가 목적을 달성하는 한 최소의 양으로 사용된다. 수치상, 그것들의 양은 조성물의 총 중량을 기준으로 대략 0.0005 중량% 내지 0.5 중량%의 범위이다.
특정 실시양태에서, 제약 조성물은 활성 성분 외에 제약상 허용되는 비히클 또는 부형제를 포함하고, 경구 투여 형태 (정제, 현탁액, 과립, 유화액, 캡슐, 시럽 등), 비경구 투여 형태 (멸균 주사액, 수성 또는 유성 현탁액 등)으로 제형화될 수 있다. 제약상 허용되는 비히클의 예는 상기에 제공되어 있다. 비히클은 제약 조성물의 제형에 따라 개별적으로 또는 조합하여 사용될 수 있다.
또한 제약 조성물에 적합한 부형제가 사용될 수 있다. 예를 들어, 제약 조성물을 수성 현탁액으로 제형화하는데 적합한 부형제는 현탁화제 또는 분산제, 예컨대 나트륨 카르복시메틸 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 히드로프로필메틸셀룰로스, 나트륨 알기네이트 또는 폴리비닐피롤리돈일 수 있다. 제약 조성물이 주사액으로 제형화되는 경우, 링거 용액 또는 염화나트륨 등장액이 부형제로서 사용될 수 있다.
제약 조성물을 투여하기 위해, 경구 루트 또는 비경구 루트, 예컨대 국소 루트를 취할 수 있다.
식품 또는 제약 경구 투여용 조성물은 임의의 적합한 섭취가능한 형태로 형성될 수 있다. 조성물 형태의 비제한적 예는 연질 츄(chew), 경질 츄, 츄어블(chewable) 정제, 영양 바, 로젠지, 분말, 과립, 클러스터, 연질 겔, 반고체 태피(taffy)-유사 츄, 츄잉 검, 삼킴가능한 정제, 삼킴가능한 캡슐, 삼킴가능한 카플렛(caplet), 개별 단위 용량, 사용자-복용가능 형태 및 이들의 혼합물을 포함한다. 예를 들어, 단위 용량은 단일 연질 츄, 또는 분할가능 형태, 예컨대 사용자가 단위 투여량을 제공하기 위해 절단 또는 파단하는 바일 수 있다.
"연질 츄"는, 실온에서 고체이고 츄잉하기에 연질이며 입에서 저작 과정 동안 다소 플라스틱 텍스쳐(texture)를 갖기 때문에 기능적으로 츄잉성인 제품을 의미하도록 의도된다.
특정 실시양태에서, 조성물에는 비결합 또는 추가된 물이 없다. 용어 "비결합된 물"이란 조성물에서 사용되는 성분의 일부로서 존재하지 않는 물을 지칭한다. 대조적으로, "결합된 물"이란 성분의 일부로서 존재하는 물, 예를 들어 과일 주스 농축물의 일부로서 존재할 수 있는 물을 지칭한다.
특정 실시양태에서, 경구 투여용 조성물은 시럽, 식품 (예컨대 식품 바, 비스킷, 스낵 식품 및 관련 기술분야에 널리 공지된 기타 표준 식품 형태) 또는 드링크 또는 음료의 형태일 수 있다. 드링크는 상기 기재된 바와 같은 향미료, 완충제 등을 함유할 수 있다.
3. 투여량
식품 또는 제약 조성물의 1일 용량은 예를 들어 0.25 내지 2.0 g/일일 수 있다.
하루에 단일 용량 또는 다중 용량이 투여될 수 있다.
제약 조성물의 용량은 다양한 인자, 예컨대 투여 루트, 환자의 연령, 성별 및 체중, 및 병의 심각성에 따라 다양할 수 있어, 결코 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 안된다.
유사하게, 식품 또는 음료 조성물의 용량 (예컨대 양)은 또한 다양한 인자, 예컨대 환자의 연령, 성별 및 체중, 및 병의 심각성에 따라 다양할 수 있어, 결코 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 안된다.
바람직하게는, 식품 또는 음료 또는 제약 조성물은 식이 지방 섭취 직전에 소비를 위해 투여된다. 대안적으로, 식품 또는 음료 또는 제약 조성물은 식이 지방 섭취 15분 이상 전; 대안적으로, 식이 지방 섭취 30분 이상 전; 대안적으로, 식이 지방 섭취 45분 이상 전; 대안적으로, 식이 지방 섭취 1시간 이상 전; 대안적으로, 식이 지방 섭취 1.5시간 이상 전; 대안적으로, 식이 지방 섭취 2시간 이상 전에 소비를 위해 투여된다.
대안적 실시양태에서, 식품 또는 음료 또는 제약 조성물은 식이 지방 섭취 직후에 소비를 위해 투여된다. 대안적으로, 식품 또는 음료 또는 제약 조성물은 식이 지방 섭취 약 2시간 미만 후; 대안적으로, 식이 지방 섭취 약 1.5시간 미만 후; 대안적으로, 식이 지방 섭취 약 1시간 미만 후; 대안적으로, 식이 지방 섭취 약 45분 미만 후; 대안적으로, 식이 지방 섭취 약 30분 미만 후; 대안적으로, 식이 지방 섭취 약 15분 미만 후; 대안적으로, 식이 지방 섭취 약 5분 미만 후에 소비를 위해 투여된다.
특정 실시양태에서, 식품 또는 음료 또는 제약 조성물은 식이 지방 섭취와 공동으로 소비를 위해 투여된다.
식품 또는 음료 또는 제약 조성물은 목적하는 효과, 예컨대 체중의 감소 또는 원치 않는 피부 유분 생성의 감소를 달성하기에 적합한 기간 동안에 소비를 위해 투여된다.
예를 들어, 식품 또는 음료 또는 제약 조성물은 1일, 2일, 5일, 1주, 2주, 1달 또는 그 이상 동안에 소비를 위해 투여될 수 있다. 식품 또는 음료 또는 제약 조성물은 또한 불특정 기간 동안에 소비를 위해 투여될 수 있다.
국소-투여용 조성물
특정 실시양태에서, 국소 투여를 위한 조성물은 허니부쉬 추출물 또는 포도씨 추출물과 조합된 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 포함한다.
국소 투여는 대상체의 피부 유분 생성과 관련된 피부 상태 또는 질환의 치료, 예방 또는 관리에 적합할 수 있다.
예를 들어, 한 측면에 따라, 피부 유분 생성 속도는 환부, 예컨대 얼굴, 등 또는 팔에의 조성물의 피부에 대한 국소 적용에 의해 억제될 수 있다. 조성물의 국소 투여는 피부 유분 생성이 과도하고 보다 적은 피부 유분 생성이 요망되는 환부에 적용될 수 있다.
일반적으로, 국소 적용은 하루에 1회 이상하고; 대안적으로 국소 적용은 하루에 2회 이상하고; 보다 바람직하게는 하루에 3회 또는 그 이상을 한다.
일반적으로, 조성물은 임의의 적합한 기간 동안에 적용될 수 있다. 예를 들어, 조성물은 몇 분 내지 수 분 또는 시간 동안에 적용될 수 있다. 적용은 연속적 또는 간헐적일 수 있다.
몇 일 내에, 사용자는 피부 유분 생성의 개선을 인지할 수 있다. 사용자는 또한 피부 텍스쳐 및 매끄러움에 관해서 추가 개선을 인지할 수 있다.
국소 적용을 위한 조성물은 용액, 겔, 로션, 크림, 연고, 수중유 유화액, 유중수 유화액, 또는 국소 적용을 위한 기타 제약상, 기능식품상 또는 화장품용으로 허용되는 형태로서 제형화될 수 있다.
조성물은 또한 목적하는 피부 효과에 악영향을 미치지 않는 한 다양한 공지된 통상의 화장품 및 제약 성분을 함유할 수 있다. 예를 들어, 화장품용으로 허용되는 비히클은 조성물이 피부에 적용되는 경우 그의 분포를 촉진하기 위해, 조성물에 존재하는 다른 재료를 위한 희석제, 분산제 또는 담체로서 작용할 수 있다.
특정 실시양태에서, 국소 조성물은 기타 화장품 및 제약 활성제 및 부형제를 포함할 수도 있다.
물 이외의 비히클은 액체 또는 고체 연화제, 용매, 습윤제, 증점제 및 분말을 포함할 수 있다. 본원에 사용되는 "연화제"란 피부의 건조함의 예방 또는 경감뿐만 아니라 보호를 위해 사용되는 재료를 지칭한다. 광범위하게 다양한 적합한 연화제가 공지되어 있고, 본원에 사용될 수 있다. 본원에 참조로 포함되는 문헌[Sagarin, Cosmetics, Science and Technology, 2nd Edition, Vol. 1, pp. 32-43 (1972)]에는 적합한 재료의 수많은 예가 수록되어 있다.
비히클은 또한 추진제, 예컨대 프로판, 이소부탄, 디메틸 에테르, 이산화탄소, 아산화질소; 및 용매, 예컨대 에틸 알콜, 이소프로판올, 아세톤, 에틸렌 글리콜 모노메틸 에테르, 디에틸렌 글리콜 모노부틸 에테르, 디에틸렌 글리콜 모노에틸 에테르, 또는 분말, 예컨대 백악, 활석, 풀러토(fullers earth), 고령토, 전분, 검, 콜로이드성 실리카, 나트륨 폴리아크릴레이트, 테트라알킬 및/또는 트리알킬 아릴 암모늄 스멕타이트, 화학적으로 개질된 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 유기 개질된 몬모릴로나이트 점토, 수화된 알루미늄 실리케이트, 퓸드(fumed) 실리카, 카르복시비닐 중합체, 나트륨 카르복시메틸 셀룰로스, 에틸렌 글리콜 모노스테아레이트를 포함할 수 있다.
국소 투여용 조성물에 사용하기에 적합한 화장품 및 제약 제제의 예는 항진균제, 비타민, 소염제, 항균제, 진통제, 산화질소 합성 억제제, 곤충 퇴치제, 자가-태닝제, 계면활성제, 보습제, 안정화제, 보존제, 방부제, 증점제, 윤활제, 습윤제, 킬레이트화제, 피부 침투 인핸서, 연화제, 향료 및 착색제를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
조성물은 임의로, 조성물 사용 동안 햇빛에의 과도한 노출의 유해한 영향으로부터의 보호를 제공하기 위해 선스크린, 예컨대 무기 및 유기 선스크린을 포함할 수 있다.
적합한 유기 선스크린의 예는, 필요에 따라, 본원에 참조로 포함되는 현행 OTC 선스크린 모노그래프(OTC Sunscreen Monograph)에 기술된 것들을 포함한다. 따라서 본 발명의 조성물은 0.1 내지 10 중량%, 바람직하게는 1 내지 5 중량%의 유기 선스크린 재료를 포함할 수 있다.
조성물은 임의로, 무기 선스크린, 예컨대 1 내지 300 nm의 평균 입자 크기를 갖는 이산화티타늄, 산화아연, 1 내지 300 nm의 평균 입자 크기를 갖는 산화철, 1 내지 100 nm의 평균 입자 크기를 갖는 실리카 (예컨대 퓸드 실리카)를 포함할 수도 있다. 실리카는 본 발명에 따라 유화액 중의 성분으로서 사용되는 경우 적외선 방사선으로부터의 보호를 제공할 수 있음을 주목하여야 한다.
두 형태 중 하나의 초미세 이산화티타늄, 즉, 수분산성 이산화티타늄 및 유분산성 이산화티타늄을 사용할 수 있다. 수분산성 이산화티타늄은 초미세 이산화티타늄이고, 그 입자는 비코팅되거나 또는 입자에 친수성 표면 특성을 부여하는 재료로 코팅된다. 이러한 재료의 예는 산화알루미늄 및 알루미늄 실리케이트를 포함한다. 유분산성 이산화티타늄은 초미세 이산화티타늄이고, 그 입자는 소수성 표면 특성을 나타내고, 그는 상기 목적을 위해서 금속 비누, 예컨대 알루미늄 스테아레이트, 알루미늄 라우레이트 또는 아연 스테아레이트, 또는 유기실리콘 화합물로 코팅될 수 있다.
용어 "초미세 이산화티타늄"이란 100 nm 미만, 바람직하게는 10 내지 40 nm, 가장 바람직하게는 15 내지 25 nm의 평균 입자 크기를 갖는 이산화티타늄 입자를 지칭한다. 임의로 본 발명에 따른 조성물에 혼입될 수 있는 이산화티타늄의 총량은 조성물 중량 기준으로 1 내지 25%, 바람직하게는 2 내지 10%, 원칙적으로 3 내지 7%이다.
국소 적용을 위한 제품은 0.01% 이상, 및 10% (중량 기준) 이하의 추출물 혼합물을 포함할 수 있다. 선택된 농도 범위는 약 0.01% 내지 약 3%, 약 0.1% 내지 약 1%, 약 0.1% 내지 약 3%, 약 0.1% 내지 약 5%, 약 0.3% 내지 약 1%, 약 0.3% 내지 약 3%, 약 0.3% 내지 약 5%, 약 0.5% 내지 약 1%, 약 0.5% 내지 약 3% 및 약 0.5% 내지 약 5%를 포함한다. 전형적으로, 다양한 간격으로 적용될 수 있는 효과적인 농도 범위는 0.01% 내지 1%이다. 일부 경우에서, 일부 병적 상태 또는 질병을 치료하기 위해 5%까지의 농도로 제품을 적용하는 것이 바람직하다. 상태 또는 질병의 심각성으로 인해 10%까지의 농도가 필요할 수 있는 경우가 또한 존재한다.
용도 및 제품
전체 포도 추출물은 포유동물 트리글리세리드 (지방) 합성의 종료 단계를 촉매화하는 효소인 디아실글리세롤 아실트랜스퍼라제-1 또는 DGAT-1의 강력한 억제제로서 확인되었다. 구체적으로, 전체 포도 추출물은 무세포 및 세포 DGAT-1 분석 모두에서 DGAT-1 활성의 강력한 억제제인 것으로 확인되었다 (도 1 및 2 참조). 전체 포도 추출물을 기작 증명(proof-of-mechanism) 인간 임상 시험으로 시험한 경우, (1) 감소된 트리글리세리드 공복력(fasting triglyceride), (2) 경구 지방 투여에 대한 감소된 반응, 및 (3) 최대 트리글리세리드 농도까지의 지연된 시간을 비롯하여 생체내 DGAT-1 억제의 특징적 반응이 초래되었다 (도 3 참조).
또한, 지질 형성 및 후속 지방 조직 형성을 억제하는 DGAT-1과 상승작용할 수 있는 두 상보성 기작이 확인되었다. 두 타겟은 퍼옥시좀 증식체-활성화된 수용체 감마 보조활성인자 1-알파 (PGC1α) 및 스테롤 조절 요소-결합 단백질 1c (SREBP1c)로서 확인되었다. 허니부쉬 및 포도씨의 식물 추출물은 각각 PGC1α 프로모터 활성의 활성인자 (도 4) 및 SREBP1c 프로모터 활성의 억제제 (도 4 및 5 참조)로서 확인되었다.
전체 포도 추출물과 허니부쉬 추출물 또는 포도씨 추출물의 조합의 잠재적인 상승작용적 효과를 조사하기 위한 일련의 상승효과 실험에서, 두 추출물 모두 전체 포도 추출물에 세포 DGAT-1 활성에 대한 상승효과를 제공하였다 (도 6 및 7 참조).
이와 같은 DGAT-1 효소 활성에 대한 상승작용적 효과 및 추가로 PGC1α의 활성화 및 SREBP1c에 대한 억제 효과에 비추어, 조성물은 체중 관리 용품, 및 국소 제품인 피부 유분 제어 용품에 사용될 수 있다.
특정 실시양태는 DGAT-1 효소를 조정하기 위한, 예를 들어 DGAT-1 효소를 억제하기 위한 본 조성물의 용도를 포함한다.
특정 실시양태는 대상체의 식이 지방 흡수 및 동화를 조정하기 위한 본 조성물의 용도에 관한 것이다.
다른 실시양태는 지방 조직의 지방 합성을 저해하기 위한 본 조성물의 용도에 관한 것이다.
다른 실시양태는 피부 유분의 생성을 조정하기 위한 본 조성물의 용도 및 피부 유분의 생성을 억제하기 위한 본 조성물의 용도에 관한 것이다.
특정 실시양태는 유효한 양의 추출물 혼합물을 포함하는 조성물을 포함하는 체중 관리 제품이며, 여기서 추출물 혼합물은 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도 추출물을 포함하는 것인 체중 관리 제품에 관한 것이다. 제품은 조성물을 활성 물질로서 포함하는 식품 또는 드링크일 수 있다. 대안적으로, 제품은 조성물을 활성 물질로서 포함하는 제약일 수 있다. 또 다른 실시양태에서, 제품은 국소 투여를 위해 제형화될 수 있다. 제품은 또한 화장품 용도를 위해 제형화될 수 있다. 제형의 특이적 예, 투여 방식, 유형 및 투여량은 상기에 상세히 기재되어 있다.
다른 특정 실시양태는 대상체의 체중 증가를 치료, 예방 또는 관리하기 위한 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 대상체의 체중 증가를 효과적으로 치료, 예방 또는 관리하는데 유효한 양의, 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 포함하는 조성물을 대상체에 투여하는 것을 포함한다.
추가의 실시양태는 대상체의 지방 흡수, 수송, 축적, 생성 및 분비를 감소시키는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 대상체의 지방 흡수, 수송, 축적, 생성 및 분비를 효과적으로 감소시키는데 유효한 양의, 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 포함하는 조성물을 대상체에 투여하는 것을 포함한다.
추가의 실시양태는 대상체의 체중 감량을 촉진시키는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 대상체의 체중 감량을 효과적으로 촉진시키는데 유효한 양의, 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 포함하는 조성물을 대상체에 투여하는 것을 포함한다.
다른 특정 실시양태는 대상체의 체중을 유지하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 대상체의 체중을 효과적으로 유지하는데 유효한 양의, 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 포함하는 조성물을 대상체에 투여하는 것을 포함한다.
또 다른 실시양태는 대상체의 피부 유분 생성과 관련된 피부 상태 또는 질환을 치료, 예방 또는 관리하기 위한 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 대상체의 피부 유분 생성과 관련된 피부 상태 또는 질환을 효과적으로 치료, 예방 또는 관리하는데 유효한 양의, 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 포함하는 조성물을 대상체에 투여하는 것을 포함한다. 피부 유분 생성과 관련된 피부 상태 또는 질환은 과도한 피부 유분 생성으로부터 초래된 것, 예컨대 막힌 모낭 및 구멍, 블랙헤드, 및 그에 따라 통상 얼굴에 형성되나 등, 가슴, 목, 팔 및 어깨에도 나타날 수 있는 여드름일 수 있다.
또 다른 실시양태는 대상체의 DGAT-1을 상승작용적으로 억제하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 대상체의 DGAT-1을 상승작용적으로 억제하는데 유효한 양의, 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 포함하는 조성물을 대상체에 투여하는 것을 포함한다.
실시예
:
하기 실시예를 통해 더 잘 이해할 수 있으며, 이들은 예시하기 위해 기술되나 제한하는 것으로 간주되어서는 안된다.
방법
전체 포도 추출물은 펄프, 껍질 및 씨를 물 및 에탄올을 사용하여 추출하여 8000:1의 신선한 전체 포도 대 전체 포도 추출물 비율의 수율을 생성함으로써 제조된다.
건조된 허니부쉬 잎 및 줄기인 누미 오가닉 티백(Numi Organic Tea bag)을 일정한 혼합과 함께 2시간 동안 140℉에서 1:10의 재료 대 알콜 비율로 83% 에탄올/물에서 추출하였다. 이어서, 슬러리를 냉각시키고, 325 메쉬 스크린에 통과시키고, 생성된 케이크를 핸드 압축시켰다. 수집된 모든 액체 추출물을 합하고, 잔류 알콜을 증발에 의해 제거하였다. 물을 액체 농축물 양의 대략 2배로 첨가하였다.
포도씨를 온수를 사용하여 30 내지 50:1의 포도씨 대 용매 비율로 추출함으로써 포도씨 추출을 수행하였다.
실시예
1:
DGAT
-1의 강력한 억제제의 확인
200종 초과의 식물 추출물을 DGAT-1 효소 활성을 억제하는 특성에 대해 무세포 DGAT-1 효소 분석으로 평가하였다. 또한, 식물 추출물을 세포 DGAT-1 분석 모델 시스템으로 평가하였다.
DGAT1
효소 분석 프로토콜:
인간 장 세포로부터의 마이크로솜을 DGAT1 효소 공급원으로서 사용하였다.
디올레오일 글리세롤 (DG) 및 팔미톨레오일-조효소 A (PCoA)가 DGAT1의 기질이었다. 기질 (DG (300 μM) + PCoA (75 μM))을 1.5 mL 튜브에서 식물 추출물, 비히클 또는 양성 대조군 (A922500)과 혼합하였다. 마이크로솜 (22.5 ㎍/mL)을 첨가하고, 1시간 동안 37℃ 수조에서 와류 및 인큐베이션하였다. 1시간 후, 이소프로필 알콜/메틸렌 클로라이드/포름산을 사용하여 디올레오일-팔미톨릴 글리세롤 (DGAT1 효소 반응으로부터 형성된 TG 생성물) 및 트리올레오일 글리세롤 (내부 표준물)을 추출하였다. 추출된 TG를 여과한 후, 아세토니트릴/이소프로필 알콜/메틸렌 클로라이드/포름산/수산화암모늄 이동상을 사용한 액체 크로마토그래피 질량 분광계 (LCMS)에 의해 분리 및 확인하였다. 디올레오일-팔미톨릴 글리세롤을 내부 표준물에 대해 정량화하였다.
세포
DGAT1
분석 프로토콜:
293H 세포를 12웰 배양 플레이트에서 전면생장으로 플레이팅하고, 밤새 부착시켰다. 다음날 아침, 배지를 상승효과 실험 또는 대조군 (비히클, A922500 (양성 대조군))을 위해 단독 및 조합한 식물 추출물을 함유하는 혈청 무함유 배지로 교체하고, 30분 동안 인큐베이션하였다 (예비치료). 예비치료 후, [14C]-글리세롤 (1 μCi/ml)을 함유하는 0.3 mM 올레산/BSA를 사용하여 트리글리세리드 (TG) 합성을 유발시키고, 5% CO2, 37℃에서 5시간 동안 인큐베이션하였다. 비히클로 예비치료된 대조군 세포는 올레산 유도를 위해 대조군에 첨가된 [14C]-글리세롤 및 혈청-무함유 배지 + 10% 지방산 무함유 BSA를 가졌다. 5시간 후, 배지를 제거하고, 세포를 세척하고, 분리하고, 작은 부피의 PBS에 수집하였다.
샘플을 클로로포름/메탄올을 사용한 추출에 의해 박층 크로마토그래피 (TLC)를 위한 준비를 하고, 유기 층을 세척한 후 최종 유기 상의 분취물을 건조 완료시켰다. 지질을 TG, 1,2- 및 1,3-DAG, 및 MAG 표준물을 함유하는 소량의 클로로포름으로 용해시키고, 톨루엔/클로로포름/메탄올 이동상을 사용한 TLC에 의해 분리하였다. 지질 종은 아이오딘 증기 및 표준물과의 비교에 의해 확인하였다. TG에 도입된 방사능은 마이크로베타 트리룩스(MicroBeta TriLux)에 의한 스크래핑(scraping) 및 계수에 의해 결정하였다.
전체 포도 추출물은 무세포 및 세포 DGAT-1 분석 모두에서 DGAT-1 활성의 강력한 억제제로서 확인되었다 (도 1 및 2 참조).
구체적으로, 도 1은 무세포 분석에서 DGAT-1 효소 억제에 대한 전체 포도 추출물의 용량 반응 및 EC50 값 (3.053 ㎍/mL)을 나타낸다.
도 2는 세포 DGAT-1 억제에 대한 전체 포도 추출물의 용량 반응 및 EC50 (46.57 ㎍/mL) 값을 나타낸다.
실시예
2:
기작
증명 인간 임상 시험
인간
기작
증명 (POM) 임상 시험 설계:
임상 시험은 전체 포도 추출물 또는 플라시보를 7일의 기간 동안에 1일 2 그램 복용하도록 무작위화된 37명의 건강한 과체중/비만 (BMI 25-35 kg/m2) 남녀의 2-군(arm) 평행 이중 맹검 연구였다. 전체 포도 추출물 또는 플라시보를 사용한 7일 개입 전후에, 연구 대상체는 표준화된 트리글리세리드 로딩을 함유하는 밀(meal) 투여 (84% 지방, 12% 탄수화물, 4% 단백질)를 소비하였다. 혈액 샘플은 6시간 간격에 걸쳐 밀 투여 전 및 직후에 취하고, 검증된 DGAT1 활성의 척도인 혈청 트리글리세리드 수준에 대해 평가하였다 (Pharmacological inhibition to examine the role of DGAT1 in dietary lipid obsorption in rodents and humans. Benjamin S. Maciejewski et al., American Journal of Physiology - Gastrointestinal and Liver Physiology 2013 Vol. 304: G958-G969 DOI: 10.1152/ajpgi.00384.2012).
전체 포도 추출물을 기작 증명 인간 임상 시험으로 시험한 경우, (1) 감소된 트리글리세리드 공복력, (2) 경구 지방 투여에 대한 감소된 반응, 및 (3) 최대 트리글리세리드 농도까지의 지연된 시간을 포함하여, 생체내 DGAT-1 억제의 특징적 반응이 초래되었다 (도 3a 내지 c 참조)
구체적으로, 도 3a에 나타난 바와 같이, 7일의 플라시보 치료는, 생체내 DGAT-1 활성을 조사하는 검증된 방법인 경구 지방 투여에 대한 혈청 트리글리세리드 반응에 영향을 미치지 않았다.
도 3b에 나타난 바와 같이, 2 그램의 전체 포도 추출물을 사용한 치료는 연구 개시 전의 트리글리세리드 반응과 비교해서 치료 기간 (7일) 말엽에 트리글리세리드 반응의 유의한 감소 (%)를 보였다.
유사하게, 도 3c에 나타난 바와 같이, 전체 포도 추출물을 사용한 7일의 치료는 플라시보와 비교해서 트리글리세리드 반응의 유의한 델타 감소를 초래하였다.
<표 1> 평균 및 표준 편차, 델타 트리글리세리드 (TG).
실시예
3:
PGC1α
프로모터 활성에 대한
허니부쉬
추출물의 효과 및
SREBP1c
프로모터 활성에 대한 포도씨 추출물의 효과
다음으로, DGAT-1과 상승작용하여 지질 형성 및 후속 지방 조직 형성을 억제할 수 있는 두 상보성 기작을 확인하였다.
두 타겟은 퍼옥시좀 증식체-활성화된 수용체 감마 보조활성인자 1-알파 (PGC1α) 및 스테롤 조절 요소-결합 단백질 1c (SREBP1c)였다.
A. PGC1α
프로모터 활성
CHO 세포주를 전장 인간 PGC1α 프로모터의 제어 하에 루시페라제 리포터 벡터 (pGL4.27)로 안정되게 형질감염시켰다. 안정한 세포가 성장하였고, 96웰 플레이트에서 18시간 동안 추출물로 치료하였다. 18시간의 인큐베이션 후, 세포로부터 배지를 제거하였고, 세포를 200 ㎕의 PBS (포스페이트 완충 염수)로 1회 세척하였다. 이어서, 웰 당 20 ㎕의 수동 용해(passive lysis) 완충제를 첨가하고, 실온에서 인큐베이션하여 세포를 용해시켰다. 이에 이어서, 100 ㎕의 루시페라제 기질 완충제를 첨가하고, 플레이트 판독기로 발광을 판독하였다.
PGC1α 프로모터 활성을 활성화시킨 식물 추출물 (허니부쉬)을 확인하였다 (도 4).
구체적으로, 도 4는 허니부쉬 추출물에 의한 세포 PGC1α 프로모터 활성의 용량 반응 활성화를 나타낸다.
B. SREBP1c
프로모터 활성
HEPG2 세포주를 전장 인간 SREBP1c 프로모터의 제어 하에 루시페라제 리포터 벡터 (pGL4.27)로 안정되게 형질감염시켰다. 안정한 세포가 성장하였고, 96웰 플레이트에서 18시간 동안 추출물로 치료하였다. 18시간의 인큐베이션 후, 세포로부터 배지를 제거하고, 세포를 200 ㎕의 PBS (포스페이트 완충 염수)로 1회 세척하였다. 이어서, 웰 당 20 ㎕의 수동 용해 완충제를 첨가하고, 실온에서 인큐베이션하여 세포를 용해시켰다. 이에 이어서, 100 ㎕의 루시페라제 기질 완충제를 첨가하고, 플레이트 판독기로 발광을 판독하였다.
SREBP1c 프로모터 활성을 억제한 식물 추출물 (포도씨)을 확인하였다 (도 5).
구체적으로, 도 5는 포도씨 추출물에 의한 SREBP1c 프로모터 활성의 용량 반응 억제를 나타낸다.
실시예
4: 포도씨 추출물에 의한 상승효과
전체 포도 추출물과 포도씨 추출물의 조합의 잠재적인 상승작용적 효과를 조사하였다.
20 ㎍/mL 용량의 포도 추출물, 다양한 용량의 포도씨 추출물 (20 ㎍/mL, 30 ㎍/mL 및 40 ㎍/mL), 및 다양한 용량의 포도씨와 조합된 저용량의 전체 포도 추출물 (20 ㎍/mL)을 세포 트리글리세리드 형성에 대한 효과를 결정하기 위해 시험하였다 (도 6a 내지 c; 데이터는 미치료 대조군 세포에 대한 %로서 나타냄).
도 6a 내지 c에 나타난 바와 같이, 20 ㎍/mL 용량의 전체 포도 추출물과 조합하여 시험한 모든 용량의 포도씨 추출물에서 유의한 상승작용적 반응이 명백하였다.
도 6a에 나타난 바와 같이, 가장 낮은 용량의 포도씨 추출물 (20 ㎍/mL)과 조합된 20 ㎍/mL 용량의 전체 포도 추출물은 대조군, 단독의 전체 포도 추출물 및 단독의 포도씨 추출물과 비교해서 세포 트리글리세리드 형성의 유의한 감소를 초래하였다. 결과를 "예측" 첨가제 효과 (즉, 단독의 전체 포도 추출물의 효과와 단독의 포도씨 추출물의 효과의 조합)와 비교할 때, 최대 상승효과 상기 용량에서 55% 감소를 보였다 (도 6a).
도 6b에 나타난 바와 같이, 30 ㎍/mL의 포도씨 추출물과 조합된 전체 포도 추출물은 조합에 대한 예측 결과와 비교해서 세포 트리글리세리드 형성이 48% 감소하였다.
도 6c에 나타난 바와 같이, 40 ㎍/mL의 포도씨 추출물과 조합된 전체 포도 추출물은 조합에 대한 예측 결과와 비교해서 세포 트리글리세리드 형성이 34% 감소하였다.
실시예
5:
허니부쉬
추출물에 의한 상승효과
전체 포도 추출물과 허니부쉬 추출물의 조합의 잠재적인 상승작용적 효과를 조사하였다.
20 ㎍/mL 용량의 전체 포도 추출물, 다양한 용량의 허니부쉬 추출물 (10 ㎍/mL, 25 ㎍/mL 및 50 ㎍/mL), 및 다양한 용량의 허니부쉬 추출물과 조합된 저용량의 전체 포도 추출물 (20 ㎍/mL)을 세포 트리글리세리드 형성에 대한 효과를 결정하기 위해 시험하였다 (도 7a 내지 c; 데이터는 미치료 대조군 세포에 대한 %로서 나타냄).
도 7a 내지 c에 나타난 바와 같이, 20 ㎍/mL 용량의 전체 포도 추출물과 조합하여 시험한 고용량의 허니부쉬 추출물에서 유의한 상승작용적 반응이 명백하였다.
도 7a에 나타난 바와 같이, 10 ㎍/mL의 허니부쉬 추출물과 조합된 전체 포도 추출물은 대조군, 단독의 전체 포도 추출물, 단독의 허니부쉬 추출물 및 예측 결과와 비교해서 세포 트리글리세리드 형성에 대해 관측가능한 효과가 없었다.
도 7b에 나타난 바와 같이, 25 ㎍/mL의 허니부쉬 추출물과 조합된 전체 포도 추출물은 예측 결과와 비교해서 세포 트리글리세리드가 약 5% 감소하였다.
도 7c에 나타난 바와 같이, 가장 높은 용량의 허니부쉬 추출물 (50 ㎍/mL)과 조합된 20 ㎍/mL 용량의 전체 포도 추출물은 대조군, 단독의 전체 포도 추출물 및 단독의 허니부쉬 추출물과 비교해서 세포 트리글리세리드 형성의 유의한 감소를 초래하였다. 결과를 "예측" 부가적 효과 (즉, 단독의 전체 포도 추출물의 효과와 50 ㎍/mL의 단독의 허니부쉬 추출물의 효과의 조합)와 비교할 때, 최대 상승효과는 상기 용량에서 약 36% 감소를 보였다 (도 7c).
기재된 실험으로부터, 허니부쉬 추출물 또는 포도씨 추출물과 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물의 DGAT-1 효소의 억제를 통한 세포의 트리글리세리드 형성에 대한 상승작용적 효과가 확인할 수 있다.
따라서 상기 상세한 설명은 제한이 아닌 예시적인 것으로서 간주되도록 의도되고, 모든 등가물을 비롯한 하기 특허청구범위가 본 발명의 취지 및 범위를 규정하도록 의도됨을 이해한다.
Claims (33)
- 허니부쉬(honeybush) 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 유효한 양으로 포함하며,
상기 추출물 혼합물이 그를 필요로 하는 대상체에서 상승작용적으로 세포 트리글리세리드 형성을 억제하여 체중을 관리하는, 체중 관리용 조성물. - 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 유효한 양으로 포함하며,
상기 추출물 혼합물이 그를 필요로 하는 대상체에서 상승작용적으로 세포 트리글리세리드 형성을 억제하여 피부 유분을 관리하는, 피부 유분 관리용 조성물. - 제1항 또는 제2항에 있어서, 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나가 전체 포도 추출물에 대해 디아실글리세롤 아실트랜스퍼라제-1 (DGAT-1)을 상승작용적으로 억제하는 양으로 존재하는 것인 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 허니부쉬 추출물이 PGC1α 프로모터 활성을 활성화시키는 양으로 존재하는 것인 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 포도씨 추출물이 SREBP1c 프로모터 활성을 억제하는 양으로 존재하는 것인 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 제약상, 기능식품상 또는 화장품용으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 추가로 포함하고, 추출물 혼합물이 조성물의 0.5 중량% (wt%) 내지 90 wt%를 구성하는 것인 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 제약상, 기능식품상 또는 화장품용으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 추가로 포함하고, 추출물 혼합물이 조성물의 활성 성분의 0.5 중량% (wt%) 내지 75 wt%를 구성하는 것인 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 제약상, 기능식품상 또는 화장품용으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 추가로 포함하고, 추출물 혼합물이 조성물의 활성 성분의 0.5 중량% (wt%) 내지 50 wt%를 구성하는 것인 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 경구 투여를 위한 조성물.
- 제9항에 있어서, 정제, 캡슐, 분말 또는 과립으로서 제형화되는 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 국소 투여를 위한 조성물.
- 제11항에 있어서, 크림, 겔, 로션, 스프레이 용액, 패드, 붕대 또는 경피 패치(patch)로서 제형화되는 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 전체 포도 추출물 대 허니부쉬 추출물 또는 포도씨 추출물의 비율이 1:1인 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 전체 포도 추출물 대 허니부쉬 추출물 또는 포도씨 추출물의 비율이 1:2인 조성물.
- 제1항 또는 제2항의 조성물을 포함하는 식품.
- 제1항 또는 제2항의 조성물을 포함하는 드링크.
- 허니부쉬 추출물 및 포도씨 추출물 중 적어도 하나 및 전체 포도 추출물을 포함하는 추출물 혼합물을 유효한 양으로 포함하는 조성물을 포함하며,
상기 추출물 혼합물이 그를 필요로 하는 대상체에서 상승작용적으로 세포 트리글리세리드 형성을 억제하여 체중을 관리하는, 체중 관리 제품. - 제17항에 있어서, 경구 투여를 위해 제형화되는 체중 관리 제품.
- 제17항 또는 제18항에 있어서, 조성물을 활성 물질로서 포함하는 식품 또는 드링크인 체중 관리 제품.
- 제17항 또는 제18항에 있어서, 조성물을 활성 물질로서 포함하는 제약인 체중 관리 제품.
- 제17항에 있어서, 국소 투여를 위해 제형화되는 체중 관리 제품.
- 제17항에 있어서, 화장품 용도를 위해 제형화되는 체중 관리 제품.
- 제17항 또는 제18항에 있어서, 제약상, 기능식품상 또는 화장품용으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 추가로 포함하고, 추출물 혼합물이 조성물의 0.5 중량% (wt%) 내지 90 wt%를 구성하는 것인 체중 관리 제품.
- 제17항 또는 제18항에 있어서, 제약상, 기능식품상 또는 화장품용으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 추가로 포함하고, 추출물 혼합물이 조성물의 0.5 중량% (wt%) 내지 75 wt%를 구성하는 것인 체중 관리 제품.
- 제17항 또는 제18항에 있어서, 제약상, 기능식품상 또는 화장품용으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 추가로 포함하고, 추출물 혼합물이 조성물의 0.5 중량% (wt%) 내지 50 wt%를 구성하는 것인 체중 관리 제품.
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