KR102506620B1 - 크리소에리올을 포함하는 멜라닌 생성 촉진용 조성물 - Google Patents
크리소에리올을 포함하는 멜라닌 생성 촉진용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 크리소에리올(chrysoeriol) 또는 이의 생리학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 멜라닌 생성 촉진용 조성물에 관한 것으로, 크리소에리올(chrysoeriol)이 티로시나아제 활성을 촉진하여 멜라닌 생합성을 촉진함을 확인하였는바, 멜라닌 생성을 촉진하여 백반증, 백모 또는 저색소증의 개선, 예방 또는 치료 용도로 활용할 수 있다.
Description
본 발명은 크리소에리올(chrysoeriol) 또는 이의 생리학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 멜라닌 생성 촉진용 조성물에 관한 것이다.
인체 피부의 표피 기저층에 존재하는 멜라닌 세포(melanocyte)에서 생성되는 멜라닌(melanin)은 검은 색소와 단백질의 복합 형태를 갖는 페놀계 고분자 물질을 말한다. 상기 멜라닌은 농도와 분포에 따라서 사람의 피부색을 결정하기도 하고, 자외선으로부터 인체의 피부를 보호해주는 역할도 한다.
멜라닌이 과도하게 생성되면 기미, 주근깨 등의 색소침착을 유발한다. 그러나 반대로 멜라닌의 생성이 과도하게 억제되면 백반증의 피부병변이 나타나기도 하고 모근의 멜라닌 세포의 수와 기능이 감소하여 백모가 발생하기도 하며 저색소증이 발생해 피부암의 위험인자가 되기도 한다.
백반증을 가진 많은 환자들에 있어서 하얀 반점은 삶의 질에 큰 영향을 미치는 것으로 알려져 있으며 최근 신문기사에 의하면 백반증 환자의 취업문제, 대인관계 문제가 심각한 것으로 보도되었다. 이는 백반증이 작은 장애로 보일 수 있지만 정도가 심한 색소 부족 질병을 가진 사람에게는 심리학적 자아 존중감 및 사회 활동에 영향을 줄 수 있다는 것을 의미한다.
백반증과 유사한 질병인 백모도 외모에 대한 관심이 높아지면서 주목받고 있어 보건미용, 심리적인 면에서 연구대상이 되고 있다. 백모가 많을수록 백반증과 마찬가지로 심리적으로 우울하거나 스트레스가 증가하며 대인관계나 사회활동에서 불편함을 느끼고 있다.
현재, 백반증의 치료에 있어서 국부의 코르티코스테로이드, 칼시뉴린 억제제, 비타민 D 파생물, 광선치료(UVA, narrow band UVB, 광화학치료), 정상적인 멜라닌 세포를 가지고 있는 표피를 이식하는 수술적인 치료, 국부적인 치료와 광선치료의 조합을 포함한 다양한 치료들이 사용되고 있지만 비흑색종 피부암과 흑색종의 발생정도를 증가시키는 등 부작용을 가지고 있다.
또한, 현재 백모 해결방안으로 다양한 모발 염모제가 사용되고 있는 실정이다. 그러나 이런 영구 염모제는 식물성 염모제, 금속성 염모제, 합성 염모제 등으로 이루어지기 때문에 화학작용으로 인하여 모발과 두피에 손상, 자극 등의 부작용을 가지고 있다.
그러나 이러한 방법은 이들의 근본적인 예방, 개선 또는 치료 방법이 아니기 때문에 보다 근본적인 해결을 위해서는 멜라닌 생성을 촉진시켜 흑화를 유도하는 연구가 필요한 실정이다.
본 발명의 해결하고자 하는 과제는 크리소에리올(chrysoeriol) 또는 이의 생리학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 멜라닌 생성 촉진용 조성물을 제공하는 것이다.
또한, 상기 멜라닌 생성 촉진용 조성물을 유효성분으로 포함하는 백반증, 백모 또는 저색소증 예방, 치료 또는 개선용 조성물을 제공하는 것으로, 상기 조성물은 화장료 조성물, 약학적 조성물 및 식품 조성물을 포함한다.
상기의 과제를 해결하기 위해 본 발명은 크리소에리올(chrysoeriol) 또는 이의 생리학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 멜라닌 생성 촉진용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 멜라닌 생성 촉진용 조성물을 유효성분으로 포함하는 백반증, 백모 또는 저색소증 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 멜라닌 생성 촉진용 조성물을 유효성분으로 포함하는 백반증, 백모 또는 저색소증 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 멜라닌 생성 촉진용 조성물을 유효성분으로 포함하는 백반증, 백모 또는 저색소증 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명에서 크리소에리올(chrysoeriol)이 멜라닌 생합성 및 티로시나아제 활성을 촉진함을 확인하였는바, 크리소에리올(chrysoeriol)은 피부 또는 모근에서 멜라닌 생성을 촉진시켜 흑화를 유도하며, 따라서 멜라닌 결핍질환(백반증, 백모 또는 저색소증)을 개선, 예방 또는 치료용도로 활용 가능하다.
도 1은 크리소에리올(chrysoeriol) 처리 농도(0.625 내지 5 ㎍/㎖)에 따른 B16F10 세포 생존율을 분석한 결과이다.
각 세포는 표시된 농도의 크리소에리올을 처리하고 72시간 동안 처리하였다. 세포 생존율을 비처리 대조군에 대해 백분율로 나타냈다. 데이터는 3 개 이상의 독립적인 실험 (n = 3)에 대해 평균 ± 표준 편차 (SD)로 표시하였다. * p <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001
도 2는 B16F10 세포에서 크리소에리올(chrysoeriol) 처리 농도에 따른 멜라닌 함량 변화를 분석한 결과이다.
B16F10 세포는 72 시간 동안 0.3125 내지 2.5 ㎍/㎖의 농도로 크리소에리올(chrysoeriol)을 처리하였고, α-MSH는 양성 대조군으로 사용하였다. 멜라닌 함량은 대조군 세포(비처리)의 측정값과 비교하여 백분율로 표시하였다. 데이터는 4 개 이상의 독립적인 실험 (n = 4)에 대해 평균 ± 표준 편차 (SD)로 표시하였다. * p <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001
도 3은 B16F10 세포에서 크리소에리올(chrysoeriol) 처리 농도에 따른 티로시나아제 활성 변화를 분석한 결과이다.
B16F10 세포는 72 시간 동안 0.3125 내지 2.5 ㎍/㎖의 농도로 크리소에리올(chrysoeriol)을 처리하였고, α-MSH는 양성 대조군으로 사용하였다. 멜라닌 함량은 대조군 세포(비처리)의 측정값과 비교하여 백분율로 표시하였다. 데이터는 4 개 이상의 독립적인 실험 (n = 4)에 대해 평균 ± 표준 편차 (SD)로 표시하였다. *** p <0.001
각 세포는 표시된 농도의 크리소에리올을 처리하고 72시간 동안 처리하였다. 세포 생존율을 비처리 대조군에 대해 백분율로 나타냈다. 데이터는 3 개 이상의 독립적인 실험 (n = 3)에 대해 평균 ± 표준 편차 (SD)로 표시하였다. * p <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001
도 2는 B16F10 세포에서 크리소에리올(chrysoeriol) 처리 농도에 따른 멜라닌 함량 변화를 분석한 결과이다.
B16F10 세포는 72 시간 동안 0.3125 내지 2.5 ㎍/㎖의 농도로 크리소에리올(chrysoeriol)을 처리하였고, α-MSH는 양성 대조군으로 사용하였다. 멜라닌 함량은 대조군 세포(비처리)의 측정값과 비교하여 백분율로 표시하였다. 데이터는 4 개 이상의 독립적인 실험 (n = 4)에 대해 평균 ± 표준 편차 (SD)로 표시하였다. * p <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001
도 3은 B16F10 세포에서 크리소에리올(chrysoeriol) 처리 농도에 따른 티로시나아제 활성 변화를 분석한 결과이다.
B16F10 세포는 72 시간 동안 0.3125 내지 2.5 ㎍/㎖의 농도로 크리소에리올(chrysoeriol)을 처리하였고, α-MSH는 양성 대조군으로 사용하였다. 멜라닌 함량은 대조군 세포(비처리)의 측정값과 비교하여 백분율로 표시하였다. 데이터는 4 개 이상의 독립적인 실험 (n = 4)에 대해 평균 ± 표준 편차 (SD)로 표시하였다. *** p <0.001
달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 일반적으로, 본 명세서에서 사용된 명명법 및 이하에 기술하는 실험 방법은 본 기술 분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다.
본 발명은 일 관점에서 크리소에리올(chrysoeriol) 또는 이의 생리학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 멜라닌 생성 촉진용 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서 크리소에리올(chrysoeriol)은 플라보노이드의 일종으로, 하기 화학식 1로 표시되며, 5,7-디히드록시-2-(4-히드록시-3-메톡시페닐)크로멘-4-온(5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)chromen-4-one)이다.
본 발명에서 “생리학적으로 허용 가능한 염”은 상기 화합물의 원하는 생물학적 또는 생리학적 활성을 보유하고 있고, 원하지 않는 독물학적 효과는 최소한으로 나타내는 모든 염을 의미한다. 당해 기술 분야에서 통상적인 방법에 따라 제조된 염을 의미하며, 이러한 제조방법은 당업자에게 공지되어 있다. 구체적으로, 상기 생리학적으로 허용 가능한 염은 화장품학적, 약리학적 또는 생리학적으로 허용되는 무기산과 유기산 및 염기로부터 유도된 염을 포함하지만 이것으로 한정되지는 않는다. 적합한 산의 예로는 염산, 브롬산, 황산, 질산, 과염소산, 푸마르산, 말레산, 인산, 글리콜산, 락트산, 살리실산, 숙신산, 톨루엔-p-설폰산, 타르타르산, 아세트산, 시트르산, 메탄설폰산, 포름산, 벤조산, 말론산, 나프탈렌-2-설폰산, 벤젠설폰산 등을 포함할 수 있다. 적합한 염기로부터 유도된 염은 알칼리 금속, 예를 들어, 나트륨, 또는 칼륨, 알칼리 토금속, 예를 들어, 마그네슘을 포함할 수 있다.
또한, 발명의 조성물은 상기 화학식 1로 표시되는 크리소에리올(chrysoeriol) 또는 이의 생리학적으로 허용되는 염뿐만 아니라, 이의 이성질체 또는 이로부터 제조될 수 있는 가능한 용매화물 또는 수화물을 포함할 수 있다.
본 발명의 일실시예에서 크리소에리올(chrysoeriol)이 B16F10 세포에서 2.5 ㎍/㎖ 이하의 농도에서 세포 생존율일 90% 이상을 유지함을 확인하였으며, 멜라닌 생성을 촉진하고, 티로시나아제 활성을 촉진함을 확인하였는바, 크리소에리올(chrysoeriol)을 포함하는 조성물은 멜라닌 생성을 촉진시키는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 멜라닌 생성 촉진용 조성물은 피부 또는 모근세포에서 멜라닌 생합성을 증가시켜 멜라닌 결핍으로 인해 발생하는 백반증, 백모증 또는 저색소증을 완화, 호전, 예방, 개선 또는 치료하는데 활용 가능하다.
본 발명은 다른 관점에서 상기 멜라닌 생성 촉진용 조성물을 유효성분으로 포함하는 백반증, 백모 또는 저색소증 예방 또는 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 화장료 조성물은 크리소에리올(chrysoeriol)을 포함하는 멜라닌 생성 촉진용 조성물을 유효성분으로 포함하여 피부 또는 모근에서 멜라닌 생성을 촉진하여 멜라닌 결핍으로 인한 백반증, 백모 또는 저색소 증의 예방 또는 개선 효과를 나타낸다.
상기 “백반증(vitiligo)”은 자가 면역 기능의 이상으로 멜라닌 세포가 파괴되어 인해 다양한 크기와 형태의 백색 반점들이 피부에 나타나는 현상으로 후천적 탈색소성 질환을 의미한다.
상기 “백모(gray hair)”는 모근의 멜라닌 세포의 수와 기능이 감소하면서 모발이 하얗게 변하는 현상을 의미한다.
상기 “저색소증(hypochromatism)”은 습진, 아토피피부염, 염증성 피부염 등과 같은 피부질환들로 인하여 국소적으로 멜라닌 세포에 기능적 장애가 발생하여 일시적으로 병변 부위의 피부가 흰색을 나타내는 질환을 의미한다.
본 발명에서 “백반증, 백모 또는 저색소증의 예방, 개선 또는 치료”는 피부 또는 모낭에 존재하는 멜라닌 세포에서 멜라닌을 생성하게 하여 백반증, 백모 또는 저색소증의 증상을 예방, 개선 또는 치료하는 것이다.
본 발명의 화장료 조성물은 크리소에리올(chrysoeriol) 이외에, 백반증, 백모 또는 저색소증의 예방 또는 개선 효과를 상승 또는 보강시킬 수 있도록 멜라닌 생성 촉진 효과가 있다고 알려진 화합물이나 천연 추출물을 더 포함할 수 있다.
본 발명의 백반증, 백모 또는 저색소증의 예방 또는 개선용 화장료 조성물에 있어서, 그 유효성분은 멜라닌 생성을 촉진하여 백반증, 백모 또는 저색소증의 예방 또는 개선 효과를 나타낼 수 있는 한 용도, 제형, 배합 목적 등에 따라 임의의 양(유효량)으로 포함할 수 있는데, 통상적인 유효량은 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 0.001 중량 % 내지 99.99 중량 % 범위 내에서 포함될 수 있다. 여기서 “유효량” 이란 항산화, 항염 또는 항균 효과를 유도할 수 있는 유효성분의 양을 말한다. 이러한 유효량은 당업자의 통상의 능력 범위 내에서 실험적으로 결정될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 다양한 형태로 제조될 수 있는데, 예컨대, 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 구체적으로, 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 립스틱, 메이크업 베이스, 파운데이션, 프레스파우더 및 루스 파우더로 이루어진 군으로부터 선택되는 제형을 가질 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 화장료 조성물은 그 유효성분 이외에 화장료 제제에 있어서 수용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 여기서 “화장료 제제에 있어서 수용 가능한 담체” 란 화장품 제제에 포함될 수 있는 이미 공지되어 사용되고 있는 화합물 또는 조성물이거나 앞으로 개발될 화합물 또는 조성물로서 피부와의 접촉시 인체가 적응 가능한 이상의 독성, 불안정성 또는 자극성이 없는 것을 말한다. 상기 담체는 본 발명의 화장료 조성물에 그것의 전체 중량에 대하여 약 1 중량 % 내지 약 99.99 중량 %, 바람직하게는 조성물의 중량의 약 5 중량% 내지 약 99 중량 %로 포함될 수 있다. 그러나 상기 비율은 본 발명의 화장료의 제조되는 제형에 따라 또한 그것의 구체적인 적용 부위(얼굴이나 손)나 그것의 바람직한 적용량 등에 따라 달라지는 것이기 때문에, 상기 비율은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 안 된다.
한편, 상기 담체로서는 알코올, 오일, 계면활성제, 지방산, 실리콘 오일, 습윤제, 보습제, 점성 변형제, 유제, 안정제, 자외선 차단제, 발색제, 향료 등이 예시될 수 있다. 상기 담체로서 사용될 수 있는 알코올, 오일, 계면활성제, 지방산, 실리콘 오일, 습윤제, 보습제, 점성 변형제, 유제, 안정제, 자외선 차단제, 발색제, 향료로 사용될 수 있는 화합물/조성물 등은 이미 당업계에 공지되어 있기 때문에 당업자라면 적절한 해당 물질/조성물을 선택하여 사용할 수 있다.
본 발명은 또 다른 관점에서 상기 멜라닌 생성 촉진용 조성물을 유효성분으로 포함하는 백반증, 백모 또는 저색소증 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서 멜라닌 생성 촉진용 조성물, 백반증, 백모, 저색소증, 예방 또는 치료에 관한 설명은 전술한 바와 같다.
본 발명의 약학적 조성물은 크리소에리올(chrysoeriol)을 포함하는 멜라닌 생성 촉진용 조성물을 유효성분으로 포함하여 피부 또는 모근에서 멜라닌 생성을 촉진하여 멜라닌 결핍으로 인한 백반증, 백모 또는 저색소 증의 예방 또는 치료 효과를 나타낸다.
본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 허용 가능한 희석제, 부형제 또는 담체를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 용어 "약학적으로 허용 가능한"이란 상기 조성물에 노출되는 세포나 인간에게 독성이 없는 특성을 나타내는 것을 의미한다.
상기 약학적 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결 건조제 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있으며, 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다.
경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여할 수 있다. 본 발명에서 용어, "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 질병의 종류, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명에서 용어, "투여"란 어떠한 적절한 방법으로 개체에게 본 발명의 약학적 조성물을 도입하는 것을 의미하며, 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한, 경구 또는 비 경구의 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있으며, 구체적으로, 구강, 직장, 국소, 정맥 내, 복강 내, 근육 내, 동맥 내, 경피, 비측 내, 흡입 또는 피 내 경로를 통하여 통상적인 방식으로 투여될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 백반증, 백모 또는 저색소증 치료를 목적으로 하는 개체이면 특별히 한정되지 않고, 어떠한 것이든 적용 가능하다. 예를 들면, 원숭이, 개, 고양이, 토끼, 모르모트, 랫트, 마우스, 소, 양, 돼지, 염소 등과 같은 비인간동물, 인간, 조류 및 어류 등 어느 것이나 사용할 수 있으며, 상기 약학적 조성물은 비 경구, 피하, 복강 내, 폐 내 및 비강 내로 투여될 수 있고, 국부적 치료를 위해, 필요하다면 병변 내 투여를 포함하는 적합한 방법에 의하여 투여될 수 있다. 본 발명의 상기 약학적 조성물의 바람직한 투여량은 개체의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.
적합한 총 1일 사용량은 올바른 의학적 판단범위 내에서 처치의에 의해 결정될 수 있으며, 일반적으로 0.001 내지 1000 mg/kg의 양, 바람직하게는 0.05 내지 200 mg/kg, 보다 바람직하게는 0.1 내지 100 mg/kg의 양을 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다.
본 발명은 또 다른 관점에서 상기 멜라닌 생성 촉진용 조성물을 유효성분으로 포함하는 백반증, 백모 또는 저색소증 예방 또는 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서 멜라닌 생성 촉진용 조성물, 백반증, 백모, 저색소증, 예방 또는 개선에 관한 설명은 전술한 바와 같다.
본 발명의 식품 조성물은 크리소에리올(chrysoeriol)을 포함하는 멜라닌 생성 촉진용 조성물을 유효성분으로 포함하여 피부 또는 모근에서 멜라닌 생성을 촉진하여 멜라닌 결핍으로 인한 백반증, 백모 또는 저색소 증의 예방 또는 개선 효과를 나타낸다.
본 발명의 식품 조성물은 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐 또는 액제 등의 형태를 포함할 수 있으며, 본 발명의 크리소에리올(chrysoeriol)을 첨가할 수 있는 식품의 종류에는 별다른 제한이 없으며, 예를 들어 각종 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있다.
상기 식품 조성물에는 크리소에리올(chrysoeriol) 이외에도 다른 성분을 추가할 수 있으며, 그 종류는 특별히 제한되지 않는다. 예를 들어, 통상의 식품과 같이 여러 가지 생약 추출물, 식품학적으로 허용 가능한 식품보조첨가제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있으며, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에서 용어, "식품보조첨가제"란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 건강기능식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 상기 예들에 의해 본 발명의 식품보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.
상기 천연 탄수화물의 예는 포도당, 과당 등의 단당류; 말토스, 수크로스 등의 이당류; 및 덱스트린, 시클로덱스트린 등의 다당류와, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이 있으며, 상기한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴 등), 스테비아 추출물(레바우디오시드 Ａ, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.
본 발명의 식품 조성물에는 건강기능성 식품이 포함될 수 있다. 본 발명에서 사용된 용어 "건강기능성 식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 기능성이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다.
본 발명의 건강기능성 식품은 당업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조시에는 당업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어날 수 있다.
유효성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품의 제조 시에 본 발명의 크리소에리올(chrysoeriol)은 0.1 내지 50 중량%, 바람직하게는 1 내지 10 중량%의 양으로 첨가될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능성 식품을 모두 포함한다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명의 구성 및 효과를 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
<실험방법>
1. 세포배양
B16F10 세포는 10% FBS와 1% 페니실린 (penicillin)이 포함된 DMEM을 배지로 하여 37℃, 5% CO2 습윤 배양기에서 배양하였다.
2. 세포 독성 평가
MTT 방법을 시행하여 크리소에리올(chrysoeriol) 처리 농도에 따른 세포 독성을 측정하였다. B16F10 세포를 24-웰 플레이트(well plate)에 웰 당 8×103 세포 / 웰로 분주한 후 24시간 배양하고 시료를 농도별로 처리한 후 72시간 동안 배양하였다. 그런 다음 상층액을 모두 제거하고 MTT시약(0.2 mg/㎖ in DMEM)을 웰 당 500 ㎕씩 넣고 4시간 반응시켰다. 반응시간이 끝나면 MTT시약을 모두 제거한 후 DMSO를 넣어 형성된 포르마잔 결정(formazan crystals)을 녹였다. spectrophotometric microplate reader를 사용하여 560 nm에서 흡광도를 측정하였다.
3. 멜라닌 함량 측정
6 웰 플레이트(well-plate)에 5×104 세포/웰로 분주하고 24시간 배양한 다음 시료를 농도별로 처리하고 72시간 동안 배양하였다. 배양한 세포를 1×PBS로 세척한 후 원심분리하여 수확하였다. 그런다음 10% DMSO가 첨가된 1 N NaOH을 500 ㎕ 씩 넣고 80℃에서 20분간 멜라닌을 용해시켰다. spectrophotometric microplate reader를 사용하여 405 nm에서 흡광도를 측정하였다.
4. 티로시나아제 활성 평가
6 웰 플레이트 (well-plate)에 5×104 세포 / 웰로 분주하고 24시간 배양한 다음 시료를 농도별로 처리하고 72시간 동안 배양하였다. 배양한 세포를 1× PBS로 세척한 후 Protease inhibitor cocktail을 1%로 첨가한 RIPA 버퍼 (NaCl : 150mM Tritonx-100 : 1% sodium deoxycholate : 1% SDS : 0.1% Tris-HCI, pH7.5 : 50mM EDTA, pH 8.0 : 2mM)로 세포를 라이시스(lysis) 하였다. 원심분리하여 상층액을 분리하였다. 상층액의 단백질 농도는 BCA 단백질 어세이 키트(protein assay kit)로 정량하였다. 그런 다음 96-웰 플레이트에 20 ㎕의 정량한 단백질과 2 ㎎/㎖의 L-DOPA 80㎕을 넣고 37℃에서 2시간 동안 반응시켰다. 그 후 spectrophotometric microplate reader를 사용하여 490 nm에서 흡광도를 측정하였다.
<실험예 1> 크리소에리올(chrysoeriol)의 세포독성 평가
B16F10 멜라노마(melanoma) 세포에서 크리소에리올(chrysoeriol)이 세포 생존에 미치는 영향을 평가하기 위해 MTT 실험을 진행하였다. B16F10 melanoma 세포에 크리소에리올(chrysoeriol)을 0.625 내지 5 ㎍/㎖로 72 시간동안 처리하였다. 세포 생존율은 아무것도 처리하지 않은 세포에 대한 백분율을 표시하였다.
분석결과 5 ㎍/㎖ 농도로 처리한 경우, 세포의 생존율이 87% 로 약간의 세포독성을 나타내는 것을 확인하였다. 반면, 2.5 ㎍/㎖ 이하의 농도로 처리시 생존율일 90% 이상을 유지하는 것을 확인하였다(도 1).
따라서 이후 실험에서는 2.5 ㎍/㎖ 이하의 농도에 대한 활성을 평가하였다.
<실험예 2> 크리소에리올(chrysoeriol)의 멜라닌 합성 촉진 효과 분석
크리소에리올(chrysoeriol)이 멜라닌 합성에 미치는 영향을 확인하기 위해 B16F10 세포 생존에 영향을 미치지 않는 농도인 0.3125, 0.625, 1.25, 2.5 ㎍/㎖의 농도로 B16F10 세포에 72 시간 동안 처리하였다.
양성대조군은 α-MSH (100 nM)을 사용하였다. 분석결과, 크리소에리올(chrysoeriol) 처리 농도가 0.3125 ㎍/㎖에서 2.5 ㎍/㎖으로 증가함에 따라 멜라닌 함량이 증가하는 경향을 나타내는 것을 확인하였다. 구체적으로 처리 농도 중 2.5 ㎍/㎖ 농도로 처리한 세포에서 가장 멜라닌 함량이 높으며, 양성군 보다 높게 나타냄을 확인하였다(도 2).
<실험예 3> 크리소에리올(chrysoeriol)의 티로시나아제(tyrosinase) 활성 촉진 효과
전술한 실험결과에서 크리소에리올(chrysoeriol)이 멜라닌 함량을 증가시킴을 확인하였는바, 크리소에리올(chrysoeriol)이 B16F10 세포에서 멜라닌 합성의 중요한 효소인 티로시나아제(tyrosinase)의 활성에 미치는 영향을 분석하였다.
B16F10 세포에 양성대조군으로 α-MSH (100 nM)을 처리하였고, 크리소에리올(chrysoeriol)을 0.3125, 0.625, 1.25 또는 2.5 ㎍/㎖ 농도로 처리하고 티로시나아제 활성 변화를 분석하였다.
분석결과, 비처리 대조군과 비교하여 크리소에리올(chrysoeriol)을 처리한 군에서 농도 의존적으로 티로시나아제 활성이 증가하는 것을 확인하였다. 구체적으로, 고농도(2.5 ㎍/㎖)의 크리소에리올(chrysoeriol)을 처리한 군이 티로시나아제(tyrosinase) 활성이 가장 크게 증가하였으며, 양성대조군(α-MSH 100 nM) 보다 활성 증가가 높음을 확인하였다(도 3).
Claims (4)
- 삭제
- 하기의 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 백반증, 백모 또는 저색소증 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
[화학식 1]
- 하기의 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 백반증, 백모 또는 저색소증 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
[화학식 1]
- 하기의 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 백반증, 백모 또는 저색소증 예방 또는 개선용 식품 조성물.
[화학식 1]
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