KR102220299B1 - Method for preparing sawdust media for cultivating poria cocos spawn using tree died by pine wilt disease - Google Patents

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Abstract

본 발명은 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 대한 것으로, 더욱 상세하게는 폐기되는 소나무 재선충병 고사목을 이용하여 복령 종균 배양용 톱밥배지를 제조할 수 있어 경제성을 향상시킬 수 있고, 소나무 재선충병 고사목으로부터 얻은 톱밥에 대해 과초산을 이용한 화학처리 후 열처리를 수행하여 복령 종균 배양의 효율성을 향상시킬 수 있는 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 대한 것이다.The present invention relates to a method for manufacturing a sawdust medium for cultivating Bokryeong spawns using a pine tree nematode disease dead tree, and more particularly, a sawdust medium for cultivating Bokryeong spawns can be prepared using a discarded pine tree nematode disease dead tree, thereby improving economic efficiency. The production method of sawdust medium for cultivating Bokryeong spawns using pine tree nematode dead trees that can improve the efficiency of Bokryeong spawn culture by performing heat treatment after chemical treatment with peracetic acid on sawdust obtained from dead wood of pine nematode disease will be.

Description

소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법{Method for preparing sawdust media for cultivating poria cocos spawn using tree died by pine wilt disease}Method for preparing sawdust media for cultivating poria cocos spawn using tree died by pine wilt disease}

본 발명은 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 대한 것으로, 더욱 상세하게는 폐기되는 소나무 재선충병 고사목을 이용하여 복령 종균 배양용 톱밥배지를 제조할 수 있어 경제성을 향상시킬 수 있고, 소나무 재선충병 고사목으로부터 얻은 톱밥에 대해 과초산을 이용한 화학처리 후 열처리를 수행하여 복령 종균 배양의 효율성을 향상시킬 수 있는 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 대한 것이다.The present invention relates to a method for manufacturing a sawdust medium for cultivating Bokryeong spawns using a pine tree nematode disease dead tree, and more particularly, a sawdust medium for cultivating Bokryeong spawns can be prepared using a discarded pine tree nematode disease dead tree, thereby improving economic efficiency. The production method of sawdust medium for cultivating Bokryeong spawns using pine tree nematode dead trees that can improve the efficiency of Bokryeong spawn culture by performing heat treatment after chemical treatment with peracetic acid on sawdust obtained from dead wood of pine nematode disease will be.

소나무는 겉씨식물 구과목 소나무과의 상록침엽 교목으로, 북부 고원지대를 제외한 한국 전역에 걸쳐 자라고 있는데, 소나무 재선충병에 의해 많은 피해를 보고 있다. 소나무 재선충병은 소나무 등에 기생해 나무를 갉아먹는 선충인 소나무재선충에 의해 생기는 병이며, 상기 소나무재선충은 솔수염하늘소, 북방수염하늘소 등의 매개충에 기생하며 매개충을 통해 나무에 옮겨진다. 하지만, 소나무 재선충병은 현재까지 치료 방법이 없고 그 감염 여부를 육안으로만 확인할 수 있어, 많은 소나무가 소나무 재선충병에 의해 고사되고 있다. 따라서, 소나무 재선충병에 의해 고사된 소나무를 이용하기 위한 여러 방안이 시도되고 있는데, 일반적으로 하기의 특허문헌처럼 소나무 재선충병 고사목을 열처리를 하여 소나무재선충을 사멸시킨 후 고사목을 이용하게 된다.Pine is an evergreen coniferous arboreous tree of the coniferous coniferous pine family, and it grows all over Korea except in the northern highlands, and is suffering a lot of damage from pine tree nematode disease. Pine tree nematode disease is a disease caused by pine tree nematode, which is a nematode that is parasitic on pines and eats trees, and the pine tree nematode is parasitic to vector insects such as brush-bearing sky cattle and northern bearded sky cattle, and is transferred to trees through vector insects. However, there is no treatment method for pine tree nematode disease until now, and its infection can only be confirmed with the naked eye, so many pine trees are killed by pine tree nematode disease. Accordingly, various methods have been attempted to use pine trees killed by pine tree nematode disease. In general, the dead tree is used after the dead tree of pine tree nematode is killed by heat treatment as in the following patent documents.

<특허문헌><Patent Literature>

공개특허공보 제10-2009-0011397호(2009. 02. 02. 공개) "소나무 재선충병 피해목 및 의심목의 재활용 방법"Unexamined Patent Publication No. 10-2009-0011397 (published on February 02, 2009) "Recycling method of trees damaged and suspicious of pine tree nematode disease"

하지만, 소나무 재선충병 고사목을 처리하는 종래의 방법은 열처리를 통해 소나무재선충을 사멸시키는 것에만 주안점을 두어, 열처리 후 고사목의 이용에 한계가 있는 문제가 있다. 특히, 소나무 재선충병 고사목을 이용하여 복령을 재배할 수 없는 문제가 있다. However, the conventional method of treating the dead tree of pine tree nematode disease has a problem in that the use of the dead tree after heat treatment is limited by focusing only on killing the pine tree nematode through heat treatment. In particular, there is a problem that it is not possible to cultivate Bokryeong using the dead wood of pine tree nematode disease.

본 발명은 전술한 종래기술의 문제점을 해결하기 위한 것으로,The present invention is to solve the problems of the prior art described above,

본 발명은 폐기되는 소나무 재선충병 고사목을 이용하여 복령 종균 배양용 톱밥배지를 제조할 수 있어, 경제성을 향상시킬 수 있는 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법을 제공하는데 그 목적이 있다.The present invention is to provide a method of manufacturing a sawdust medium for cultivating Bokryeong spores using a pine tree nematode cultivation that can improve economic efficiency by producing a sawdust medium for cultivating Bokryeong spores using discarded pine wood. There is this.

또한, 본 발명은 소나무 재선충병 고사목에서 얻은 톱밥에 대해 과초산을 이용한 화학처리 후 열처리를 수행하여, 소나무 재선충 및 복령의 생장을 저해하는 곰팡이를 효과적으로 제거함으로써, 복령 종균 배양의 효율성을 향상시킬 수 있는 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 대한 것이다.In addition, the present invention performs heat treatment after chemical treatment using peracetic acid on the sawdust obtained from the dead tree of pine nematode disease, effectively removing the fungus that inhibits the growth of pine nematode and bokryeong, thereby improving the efficiency of cultivation of Bokryeong spawns. It is about the manufacturing method of sawdust medium for cultivating Bokryeong spawns using the dead wood of pine nematode disease.

본 발명은 앞서 본 목적을 달성하기 위하여 다음과 같은 구성을 가진 실시예에 의해 구현된다.The present invention is implemented by an embodiment having the following configuration in order to achieve the above object.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법은 소나무 재선충병 고사목을 분쇄하여 톱밥을 얻는 톱밥수득단계와, 상기 톱밥에 열을 가해 열처리하는 열처리단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.According to an embodiment of the present invention, a method of manufacturing a sawdust medium for cultivating Bokryeong spawn according to the present invention includes a sawdust acquisition step of obtaining sawdust by pulverizing a pine tree nematode disease dead tree, and a heat treatment step of heat treatment by applying heat to the sawdust. Characterized in that.

본 발명의 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법은 상기 톱밥수득단계에서 얻은 톱밥에 과초산 희석액을 처리하는 화학처리단계와, 상기 화학처리단계 후 톱밥을 과초산 희석액에서 꺼내 건조시켜 상기 톱밥에 잔류하는 과초산 희석액을 제거하는 건조단계를 추가로 포함하며, 상기 열처리단계에서는 상기 건조단계에서 건조된 톱밥에 열을 가해 열처리하는 것을 특징으로 한다.According to another embodiment of the present invention, the method of manufacturing a sawdust medium for culturing Bokryeong spawn according to the present invention includes a chemical treatment step of treating the sawdust obtained in the sawdust acquisition step with a diluent peracetic acid, and the sawdust after the chemical treatment step. It further comprises a drying step of removing the peracetic acid dilution remaining in the sawdust by taking out from the acetic acid dilution solution and drying, and in the heat treatment step, heat treatment is performed by applying heat to the sawdust dried in the drying step.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 있어서 상기 소나무 재선충병 고사목은 곰팡이류에 의해 2차 감염된 것을 특징으로 한다.According to another embodiment of the present invention, in the method of manufacturing a sawdust medium for cultivating Bokryeong spawn according to the present invention, the pine tree nematode disease dead tree is secondarily infected by fungi.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 있어서 상기 과초산 희석액은 과초산을 물에 섞어 0.8 내지 1.2%농도를 가지도록 한 과초산 희석액이 사용되는 것을 특징으로 한다.According to another embodiment of the present invention, in the method of manufacturing a sawdust medium for cultivating Bokryeong spawns according to the present invention, the peracetic acid dilution liquid is used to have a concentration of 0.8 to 1.2% by mixing peracetic acid in water It is characterized by being.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 있어서 상기 화학처리단계는 톱밥을 과초산 희석액에 25 내지 35초 동안 침지하여 행하여지는 것을 특징으로 한다.According to another embodiment of the present invention, in the method for manufacturing a sawdust medium for culturing Bokryeong spawn according to the present invention, the chemical treatment step is characterized in that the sawdust is immersed in a diluent of peracetic acid for 25 to 35 seconds.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 있어서 상기 열처리단계는 고압의 스팀을 건조된 톱밥에 가해 행하여지는 것을 특징으로 한다.According to another embodiment of the present invention, in the method of manufacturing a sawdust medium for culturing Bokryeong spawn according to the present invention, the heat treatment step is characterized in that it is performed by applying high-pressure steam to the dried sawdust.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 있어서 상기 열처리단계는 고압의 스팀을 건조된 톱밥에 가해 115 내지 130℃로 70 내지 120분 동안 열처리하여, 열처리 후 톱밥의 함수율이 50 내지 70%를 가지도록 하는 것을 특징으로 한다.According to another embodiment of the present invention, in the method of manufacturing a sawdust medium for cultivating Bokryeong spawn according to the present invention, the heat treatment step is performed by applying high-pressure steam to the dried sawdust and heat treatment at 115 to 130°C for 70 to 120 minutes. It is characterized in that the water content of the sawdust after heat treatment is 50 to 70%.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령의 재배방법은 톱밥배지에 복령 종균을 접종한 후 24 내지 28℃의 온도로 2 내지 3주 동안 유지하여 톱밥배양종균을 형성하는 종균배양단계와, 소나무 재선충병 고사목을 화학 처리후 열처리하여 톱밥배양종균을 접종하기 위한 자목을 형성하는 자목형성단계와, 상기 자목에 톱밥배양종균을 접종한 후 배양하여 복령을 생산하는 복령배양단계를 포함하며, 상기 톱밥배지는 제3항 내지 제7항 중 어느 한 항의 제조방법에 의해 제조된 톱밥배지가 사용되는 것을 특징으로 한다.According to another embodiment of the present invention, the cultivation method of Bokryeong according to the present invention is a seed culture that forms a sawdust cultured seed by inoculating the Bokryeong seed in a sawdust medium and maintaining it at a temperature of 24 to 28°C for 2 to 3 weeks. Steps, including the step of forming a tree for inoculating sawdust cultured seed by heat treatment after chemical treatment of the dead tree of pine tree nematode disease, and a bokryeong culture step of inoculating and culturing the sawdust cultured seed tree to produce bokryeong. And, the sawdust medium is characterized in that the sawdust medium manufactured by the manufacturing method of any one of claims 3 to 7 is used.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령의 제배방법에 있어서 상기 자목형성단계는 소나무 재선충병 고사목으로부터 얻은 원목에 과초산 희석액을 처리하는 화학처리단계와, 상기 화학처리단계에서 화학처리된 원목을 건조시켜 상기 원목에 잔류하는 과초산 희석액을 제거하는 건조단계와, 상기 건조단계에서 건조된 원목에 열을 가해 열처리하는 열처리단계를 포함하며, 상기 소나무 재선충병 고사목은 곰팡이류에 의해 2차 감염된 것을 특징으로 한다.According to another embodiment of the present invention, in the cultivation method of Bokryeong according to the present invention, in the step of forming a tree, a chemical treatment step of treating a dilute peracetic acid on a log obtained from a dead tree of pine nematode disease, and a chemical treatment step in the chemical treatment step A drying step of drying the treated logs to remove the peracetic acid dilution remaining on the logs, and a heat treatment step of heat-treating the logs dried in the drying step by applying heat, wherein the pine tree nematode dead wood is 2 It is characterized by secondary infection.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령의 제배방법에 있어서 상기 자목형성단계는 상기 화학처리단계는 과초산을 물에 섞어 0.8 내지 1.2%농도를 가지도록 한 과초산 희석액을 준비하고, 원목을 상기 과초산 희석액에 25 내지 35초 동안 침지하거나, 원목에 상기 과초산 희석액을 25 내지 35초 동안 분무하여 행하여지며, 상기 열처리단계는 고압의 스팀을 건조된 원목에 가해 115 내지 130℃로 100 내지 150분 동안 열처리하여 수행되는 것을 특징으로 한다.According to another embodiment of the present invention, in the cultivation method of bokryeong according to the present invention, in the step of forming a tree, the chemical treatment step is to prepare a diluted peracetic acid solution having a concentration of 0.8 to 1.2% by mixing peracetic acid with water. And, the log is immersed in the peracetic acid diluent for 25 to 35 seconds, or the peracetic acid diluent is sprayed on the log for 25 to 35 seconds, and the heat treatment step is performed by applying high pressure steam to the dried log to 115 to 130 It characterized in that it is carried out by heat treatment for 100 to 150 minutes at ℃.

본 발명은 앞서 본 실시예에 의해 다음과 같은 효과를 얻을 수 있다.The present invention can obtain the following effects by the above embodiment.

본 발명은 폐기되는 소나무 재선충병 고사목을 이용하여 복령 종균 배양용 톱밥배지를 제조할 수 있어, 경제성을 향상시킬 수 있는 효과가 있다.The present invention can produce a sawdust medium for cultivating Bokryeong spawns using the discarded pine tree nematode dead wood, there is an effect that can improve the economy.

또한, 본 발명은 소나무 재선충병 고사목에서 얻은 톱밥에 대해 과초산을 이용한 화학처리 후 열처리를 수행하여, 소나무 재선충 및 복령의 생장을 저해하는 곰팡이를 효과적으로 제거함으로써, 복령 종균 배양의 효율성을 향상시킬 수 있는 효과가 있다.In addition, the present invention performs heat treatment after chemical treatment using peracetic acid on the sawdust obtained from the dead tree of pine nematode disease, effectively removing the fungus that inhibits the growth of pine nematode and bokryeong, thereby improving the efficiency of cultivation of Bokryeong spawns. There is an effect.

도 1 내지 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 톱밥배지의 제조방법에 의해 제조된 톱밥배지의 오염 정도를 확인하기 위한 사진.
도 4 내지 6은 본 발명의 다른 실시에에 따른 자목의 제조방법에 의해 제조된 자목의 오염 정도를 확인하기 위한 사진.
도 7은 본 발명의 다른 실시예에 따른 자목의 제조방법에 의해 제조된 자목에 복령 종균이 활착된 모습을 나타내는 사진.
도 8은 본 발명의 또 다른 실시예에 따른 복령의 재배방법에 의해 재배된 복령을 나타내는 사진.
1 to 3 are photographs for confirming the degree of contamination of the sawdust medium manufactured by the method of manufacturing a sawdust medium according to an embodiment of the present invention.
4 to 6 are photographs for confirming the degree of contamination of the timber manufactured by the method of manufacturing a timber according to another embodiment of the present invention.
7 is a photograph showing a state in which Bokryeong spawns are established on a tree manufactured by a method for manufacturing a tree according to another embodiment of the present invention.
Figure 8 is a photograph showing a bokryeong cultivated by the cultivation method of bokryeong according to another embodiment of the present invention.

이하에서는 본 발명에 따른 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법 및 상기 제조방법에 의해 제조된 톱밥배지를 이용하는 복령의 재배방법을 첨부된 도면을 참조하여 상세히 설명한다. 특별한 정의가 없는 한 본 명세서의 모든 용어는 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 기술자가 이해하는 당해 용어의 일반적 의미와 동일하고 만약 본 명세서에 사용된 용어의 의미와 충돌하는 경우에는 본 명세서에 사용된 정의에 따른다. 또한, 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있는 공지 기능 및 구성에 대해 상세한 설명은 생략한다. 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함"한다고 할 때 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.Hereinafter, a method of manufacturing a sawdust medium for cultivating Bokryeong spawn using a pine tree nematode dead tree according to the present invention and a method of cultivating boryeong using the sawdust medium prepared by the above manufacturing method will be described in detail with reference to the accompanying drawings. Unless otherwise defined, all terms in this specification are the same as the general meaning of the terms understood by those of ordinary skill in the art to which the present invention belongs, and in case of conflict with the meaning of terms used herein, In accordance with the definitions used in the specification. In addition, detailed descriptions of known functions and configurations that may unnecessarily obscure the subject matter of the present invention will be omitted. Throughout the specification, when a part "includes" a certain component, it means that other components may be further included rather than excluding other components unless specifically stated to the contrary.

본 발명의 일 실시예에 따른 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법은 소나무 재선충병 고사목에서 얻은 톱밥을 화학 처리후 열처리하여 복령 종균 배양을 위한 톱밥배지를 형성하는 것으로, 톱밥수득단계, 화학처리단계, 건조단계, 열처리단계, 혼합단계 등을 포함한다. 상기 소나무 재선충병 고사목은 소나무 재선충병에 걸려 벌체된 소나무를 의미하며, 대부분 푸른곰팡이, 푸사리움(Fusarium)속 등의 곰팡이류에 의해 2차 감염이 되어 있다. 상기 복령은 죽은 소나무에서 자생하는데, 상기와 같은 일반적인 소나무 재선충병 고사목을 종래처럼 단순 열처리하여 이용하는 경우 소나무재선충의 사멸을 가능하나 복령의 재배가 불가능한 바, 본 발명은 곰팡이류에 의해 2차 감염되어 있는 일반적인 소나무 재선충병 고사목을 이용하여 복령을 효율적으로 재배할 수 있도록 하기 위해 완성되었으며, 이에 대해서는 하기에서 자세히 설명하기로 한다.The method of manufacturing a sawdust medium for cultivating Bokryeong spawns using a pine tree nematode dead tree according to an embodiment of the present invention is to form a sawdust medium for cultivating Bokryeong spawns by heat treatment after chemical treatment of sawdust obtained from a pine tree nematode dead tree. It includes an obtaining step, a chemical treatment step, a drying step, a heat treatment step, and a mixing step. The pine tree nematode disease dead tree refers to a pine tree that has been cut down by pine tree nematode disease, and is mostly secondary infection by fungi such as blue fungi and Fusarium genus. Bokryeong is native to dead pines, and if the above general pine tree nematode disease dead tree is used by simple heat treatment as in the prior art, it is possible to kill the pine tree nematode, but cultivation of bokryeong is impossible, and the present invention is secondary infection by fungi. It was completed in order to be able to efficiently cultivate Bokryeong using common pine tree nematode disease dead trees, which will be described in detail below.

상기 톱밥수득단계는 소나무 재선충병 고사목을 분쇄하여 톱밥을 얻는 단계로, 나무를 분쇄하여 톱밥을 얻는 종래의 방법이 사용될 수 있다.The sawdust acquisition step is a step of obtaining sawdust by pulverizing the dead wood of pine tree nematode disease, and a conventional method of obtaining sawdust by crushing the wood may be used.

상기 화학처리단계는 상기 톱밥수득단계에서 얻은 톱밥에 과초산 희석액을 처리하는 단계로(에컨대, 상기 톱밥을 과초산 희석액에 일정 시간 침지함), 과초산을 물에 섞어 0.8 내지 1.2%농도를 가지도록 한 과초산 희석액이 사용되며 25 내지 35초 동안 침지하는 것이 바람직하다.The chemical treatment step is a step of treating the sawdust obtained in the sawdust acquisition step with a diluted peracetic acid solution (e.g., immersing the sawdust in a diluent of peracetic acid for a certain period of time), and mixing peracetic acid with water to obtain a concentration of 0.8 to 1.2%. A diluent of peracetic acid is used and is preferably immersed for 25 to 35 seconds.

상기 건조단계는 상기 화학처리단계 후 톱밥을 과초산 희석액에서 꺼낸 후 건조시키는 단계로, 예컨대 50℃로 설정된 오븐을 이용하여 160 내지 200분 동안 건조하여 수행될 수 있다. 상기 건조단계에서 상기 톱밥이 제대로 건조되지 않으면 상기 톱밥에 과초산 희석액이 잔류하여 상기 복령 종균의 배양을 저해하게 된다.The drying step is a step of drying the sawdust after removing the sawdust from the peracetic acid diluent after the chemical treatment step. For example, it may be dried for 160 to 200 minutes using an oven set at 50°C. If the sawdust is not properly dried in the drying step, a diluent of peracetic acid remains in the sawdust, thereby inhibiting the cultivation of the Bokryeong spawn.

상기 열처리단계는 상기 건조단계에서 건조된 톱밥에 열을 가해 처리하는 단계로, 고압의 스팀을 건조된 톱밥에 가해 115 내지 130℃로 70 내지 120분 동안 열처리하여 열처리 후 톱밥의 함수율이 50 내지 70%를 가지도록 하는 것이 바람직하다. 상기 열처리단계에서는 스팀을 이용하여 열처리를 수행하므로 톱밥이 복령 종균의 배양이 가능한 함수율을 가질 수 있도록 할 수 있다. 상기 열처리단계는 예컨대 오토클레이브(autoclave) 등의 장치를 이용하여 수행될 수 있다.The heat treatment step is a step of applying heat to the sawdust dried in the drying step, and heat treatment at 115 to 130°C for 70 to 120 minutes by applying high pressure steam to the dried sawdust, so that the moisture content of the sawdust after the heat treatment is 50 to 70 It is desirable to have %. In the heat treatment step, since heat treatment is performed using steam, the sawdust may have a moisture content capable of cultivating Bokryeong spawns. The heat treatment step may be performed using an apparatus such as an autoclave.

상기 혼합단계는 상기 열처리단계에서 열처리된 톱밥에 미강, 칼슘 등을 섞어 톱밥배지를 형성하는 단계이다. 상기 소나무 재선충병 고사목을 분쇄하여 얻은 톱밥에 대해 바로 상기 열처리단계를 수행하여 소나무재선충을 사멸시킬 수 있으나 복령 종균의 배양은 불가능한 바, 본 발명은 소나무 재선충병 고사목에 얻은 톱밥에 대해 과초산 용액을 처리하고 건조 후 열처리를 수행하여 복령 종균의 배양이 가능한 톱밥배지를 수득하게 된다.The mixing step is a step of forming a sawdust medium by mixing rice bran, calcium, and the like with the sawdust heat-treated in the heat treatment step. The heat treatment step can be performed on the sawdust obtained by pulverizing the dead tree of pine tree nematode disease, but it is possible to kill the pine tree nematode, but cultivation of Bokryeong spawn is not possible.The present invention uses a peracetic acid solution for the sawdust obtained from the dead tree of pine tree nematode disease. After treatment and drying, heat treatment is performed to obtain a sawdust medium capable of cultivating Bokryeong spawn.

본 발명의 다른 실시예는 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 의해 제조된 톱밥배지에 대한 것이다.Another embodiment of the present invention relates to a sawdust medium prepared by a method of manufacturing a sawdust medium for cultivating Bokryeong spawns using a pine tree nematode dead wood.

본 발명의 또 다른 실시예에 따른 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 의해 제조된 톱밥배지를 이용하는 복령의 재배방법을 도 1 내지 8을 참조하여 설명하면, 상기 복령의 재배방법은 톱밥배지에 복령 종균을 접종한 후 배양하여 톱밥배양종균을 형성하는 종균배양단계와, 소나무 재선충병 고사목을 화학 처리후 열처리하여 톱밥배양종균을 접종하기 위한 자목을 형성하는 자목형성단계와, 상기 자목에 톱밥배양종균을 접종한 후 배양하여 복령을 생산하는 복령배양단계 등을 포함한다. 상기 톱밥배지는 앞서 설명한 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 의해 제조된 톱밥배지가 사용되므로 자세한 설명은 생략하기로 한다.Referring to Figs. 1 to 8, the cultivation method of Bokryeong using the sawdust medium prepared by the method of manufacturing a sawdust medium for cultivating Bokryeong spawns using a pine tree nematode dead tree according to another embodiment of the present invention will be described with reference to Figs. The cultivation method includes a seed cultivation step in which Bokryeong seed is inoculated on a sawdust medium and then cultured to form a sawdust cultivated seed, and a cultivation step of forming a seed tree for inoculating the sawdust cultivated seed by heat treatment after chemical treatment of the dead tree of pine tree nematode disease. , And a bokryeong culture step of producing bokryeong by inoculating the sawdust cultured spawn on the tree and then culturing it. The sawdust medium is a sawdust medium prepared by the method of manufacturing a sawdust medium for cultivating Bokryeong spawns using the aforementioned pine tree nematode dead wood, so a detailed description will be omitted.

상기 종균배양단계는 상기 톱밥배지에 복령 종균을 접종한 후 배양하여 톱밥배양종균을 형성하는 단계로, 죽은 소나무로부터 얻은 톱밥배지에 복령 종균을 접종하여 배양하는 종래의 방법이 이용될 수 있다. 예컨대, 상기 톱밥배지를 용기에 넣고 액상의 복령 종균을 넣고 24 내지 28℃의 온도로 2 내지 3주 동안 유지하여 톱밥배양종균을 형성할 수 있다.The seed cultivation step is a step of inoculating the sawdust medium with Bokryeong seed and culturing it to form a sawdust culture seed, and a conventional method of inoculating and culturing the sawdust medium obtained from a dead pine tree may be used. For example, the sawdust medium may be put into a container, and liquid bokryeong seeds may be added and maintained at a temperature of 24 to 28°C for 2 to 3 weeks to form sawdust cultured seeds.

상기 자목형성단계는 소나무 재선충병 고사목을 화학 처리후 열처리하여 톱밥배양종균을 접종하기 위한 자목을 형성하는 단계로, 원목수득단계, 화학처리단계, 건조단계, 열처리단계 등을 포함한다.The timber forming step is a step of forming a timber for inoculating the sawdust cultured spawn by chemical treatment of the dead tree of pine tree nematode disease and then heat treatment, and includes a timber acquisition step, a chemical treatment step, a drying step, a heat treatment step, and the like.

상기 원목수득단계는 소나무 재선충병 고사목을 절단하여 일정 직경과 길이를 가지는 원목을 수득하는 단계이다.The log-receiving step is a step of cutting the dead wood of pine tree nematode disease to obtain a log having a predetermined diameter and length.

상기 화학처리단계는 상기 원목수득단계에서 얻은 원목에 과초산 희석액을 처리하는 단계호, 예컨대 상기 원목에 과초산 희석액을 분무하거나 상기 원목을 과초산 희석액에 일정 시간 침지하여 수행될 수 있으며, 과초산을 물에 섞어 0.8 내지 1.2%농도를 가지도록 한 과초산 희석액이 사용되며 25 내지 35초 동안 분무하거나 침지하는 것이 바람직하다.The chemical treatment step is a step of treating the log obtained in the log acquisition step with a dilute peracetic acid solution, for example, spraying a diluent of peracetic acid on the log or immersing the log in a diluent of peracetic acid for a certain period of time. A diluent of peracetic acid prepared by mixing with water to have a concentration of 0.8 to 1.2% is used, and spraying or immersion for 25 to 35 seconds is preferable.

상기 건조단계는 상기 화학처리단계에서 화학처리된 원목을 건조시키는 단계로, 예컨대 50℃로 설정된 오븐을 이용하여 160 내지 400분 동안 건조하여 수행될 수 있다. 상기 건조단계에서 상기 원목이 제대로 건조되지 않으면 상기 원목에 과초산 희석액이 잔류하여 상기 복령의 재배를 저해하게 된다.The drying step is a step of drying the wood chemically treated in the chemical treatment step, for example, may be performed by drying for 160 to 400 minutes using an oven set at 50°C. If the log is not properly dried in the drying step, a diluent of peracetic acid remains in the log, thereby inhibiting the cultivation of the bokryeong.

상기 열처리단계는 상기 건조단계에서 건조된 원목에 열을 가해 처리하는 단계로, 고압의 스팀을 건조된 원목에 가해 115 내지 130℃로 100 내지 150분 동안 열처리하는 것이 바람직하다. 상기 열처리단계에서는 스팀을 이용하여 열처리를 수행하므로 원목이 복령 재배가 가능한 함수율을 가질 수 있도록 할 수 있다. 상기 열처리단계는 예컨대 오토클레이브(autoclave) 등의 장치를 이용하여 수행될 수 있다. 상기 소나무 재선충병 고사목을 절단하여 얻은 원목에 대해 바로 상기 열처리단계를 수행하여 소나무재선충을 사멸시킬 수 있으나 복령 재배는 불가능한 바, 본 발명은 소나무 재선충병 고사목에 얻은 원목을 과초산 용액으로 처리하고 건조 후 열처리를 수행하여 복령 재배가 가능한 자목을 수득하게 된다.The heat treatment step is a step of applying heat to the wood dried in the drying step, and heat treatment is performed at 115 to 130°C for 100 to 150 minutes by applying high pressure steam to the dried wood. In the heat treatment step, since the heat treatment is performed using steam, the wood may have a moisture content capable of cultivating Bokryeong. The heat treatment step may be performed using an apparatus such as an autoclave. Although the above heat treatment step can be performed on the log obtained by cutting the dead tree of pine tree nematode disease, the heat treatment step can be performed to kill the pine tree nematode, but cultivation of bokryeong is not possible.In the present invention, the log obtained from the dead tree of pine tree nematode disease is treated with peracetic acid and dried. After the heat treatment is performed to obtain a tree that can be grown bokryeong.

상기 복령배양단계는 상기 자목형성단계에서 얻은 자목에 상기 종균배양단계에서 얻은 톱밥배양종균을 접종한 후 배양하여 복령을 생산하는 단계로, 죽은 소나무로부터 얻은 자목에 톱밥배양종균을 접종하여 배양하는 종래의 방법이 이용될 수 있다. 예컨대, 상기 통밥배양종균을 자목에 접종하고 24 내지 28℃의 온도로 5 내지 7개월 유지하여 복령을 수득할 수 있다.The bokryeong cultivation step is a step of inoculating and culturing the sawdust cultured spawn obtained in the seedling cultivation step to the stock tree obtained in the birch formation step to produce bokryeong. The method of can be used. For example, it is possible to obtain bokryeong by inoculating the whole rice cultured seed germs on a tree and maintaining a temperature of 24 to 28°C for 5 to 7 months.

이하, 실시예를 통해서 본 발명을 보다 상세히 설명하기로 한다. 하지만, 이들은 본 발명을 보다 상세하게 설명하기 위한 것일 뿐 본 발명의 권리범위가 이에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. However, these are only for describing the present invention in more detail, and the scope of the present invention is not limited thereto.

<실시예 1> 톱밥시료의 준비<Example 1> Preparation of sawdust sample

1. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목을 분쇄하여 톱밥을 수득하고, 상기 톱밥을 1% 과초산 수용액에 30초 동안 침지한 후 꺼내어 50℃로 설정된 오븐을 이용하여 180분 동안 건조하고, 건조된 상기 톱밥을 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 1시간 30분 동안 처리하여, 톱밥시료 1을 얻었다.1. Sawdust was obtained by crushing the dead tree of pine tree nematode disease in which blue mold is growing, and the sawdust was immersed in 1% peracetic acid aqueous solution for 30 seconds, then taken out and dried for 180 minutes using an oven set at 50℃, and dried. The sawdust was treated with high pressure steam at 121° C. for 1 hour and 30 minutes using an autoclave to obtain a sawdust sample 1.

2. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목을 분쇄하여 톱밥을 수득하고, 상기 톱밥을 1% 과초산 수용액에 30초 동안 침지한 후 꺼내 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 1시간 30분 동안 처리하여, 톱밥시료 2를 얻었다.2. Sawdust was obtained by crushing the dead wood of pine nematode disease where green mold is growing, and the sawdust was immersed in 1% peracetic acid aqueous solution for 30 seconds, and then taken out using high-pressure steam at 121°C for 1 hour using an autoclave. Treated for 30 minutes to obtain a sawdust sample 2.

3. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목을 분쇄하여 톱밥을 수득하고, 상기 톱밥을 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 1시간 30분 동안 열처리하고, 열처리된 톱밥을 1% 과초산 수용액에 30초 동안 침지한 후 꺼내어 50℃로 설정된 오븐을 이용하여 180분 동안 건조하여, 톱밥시료 3을 얻었다.3. Sawdust was obtained by crushing the deadwood of pine nematode disease where green mold is growing, and the sawdust was heat-treated at 121°C for 1 hour and 30 minutes with high-pressure steam using an autoclave, and the heat-treated sawdust was 1% and After immersing in an aqueous acetic acid solution for 30 seconds, it was taken out and dried for 180 minutes using an oven set at 50° C. to obtain a sawdust sample 3.

4. 1% 과초산 수용액 대신에 0.5% 과초산 수용액을 사용한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 1의 1과 동일하에 하여, 톱밥시료 4를 얻었다.4. A sawdust sample 4 was obtained under the same conditions as in Example 1 except that 0.5% aqueous peracetic acid was used instead of the aqueous 1% peracetic acid solution.

5. 1% 과초산 수용액 대신에 2% 과초산 수용액을 사용한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 1의 1과 동일하에 하여, 톱밥시료 5를 얻었다.5. A sawdust sample 5 was obtained under the same conditions as in Example 1 except that a 2% aqueous peracetic acid solution was used instead of the 1% aqueous peracetic acid solution.

6. 1% 과초산 수용액 대신에 0.3% 과산화수소 수용액을 사용한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 1의 1과 동일하에 하여, 톱밥시료 6을 얻었다.6. A sawdust sample 6 was obtained under the same conditions as in Example 1 except that a 0.3% aqueous hydrogen peroxide solution was used instead of the 1% aqueous peracetic acid solution.

7. 정상적인 소나무(소나무 재선충병에 걸리지 않고 푸른곰팡이에 오염되지 않음)를 분쇄하여 얻은 톱밥을 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 1시간 30분 동안 처리하여, 톱밥시료 7을 얻었다.7. Sawdust obtained by crushing a normal pine tree (not affected by pine tree nematode disease and not contaminated with blue mold) was treated with high-pressure steam at 121°C for 1 hour 30 minutes using an autoclave to obtain a sawdust sample 7. .

8. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목을 분쇄하여 톱밥을 수득하고, 상기 톱밥을 톱밥시료 8로 하였다.8. Sawdust was obtained by crushing the deadwood of pine tree nematode disease in which green mold was growing, and the sawdust was used as sawdust sample 8.

9. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목을 분쇄하여 톱밥을 수득하고, 상기 톱밥을 1% 과초산 수용액에 30초 동안 침지한 후 꺼내어 50℃로 설정된 오븐을 이용하여 180분 동안 건조하여, 톱밥시료 9를 얻었다.9. Sawdust was obtained by crushing the dead tree of pine nematode disease where green mold is growing, and the sawdust was immersed in 1% peracetic acid aqueous solution for 30 seconds and then taken out and dried for 180 minutes using an oven set at 50°C. Sample 9 was obtained.

10. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목을 분쇄하여 톱밥을 수득하고, 상기 톱밥을 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 1시간 30분 동안 처리하여, 톱밥시료 10을 얻었다.10. Sawdust was obtained by crushing the dead wood of pine nematode disease growing green mold, and the sawdust was treated with high pressure steam at 121°C for 1 hour 30 minutes using an autoclave to obtain a sawdust sample 10.

<실시예 2> 톱밥시료의 오염 확인<Example 2> Confirmation of contamination of sawdust samples

1. 실시예 1에서 얻은 각 톱밥시료 10㎖ 및 멸균수 30㎖를 50ml Conical Tube에 넣어 vortex후 상층액 200㎕를 감자한천배지(PDA)에 도말하여 7일 후, 촬영하여 도 1 내지 3에 나타내었고(도 1의 경우 톱밥시료 1 사용, 도 2의 경우 톱밥시료 7 사용, 도 3의 경우 톱밥시료 10 사용), 또한 자라나는 Colony(오염)의 종류, Colony 개수, 오염 면적을 기록하여 표 1에 나타내었다.1. Put 10 ml of each sawdust sample obtained in Example 1 and 30 ml of sterilized water into a 50 ml Conical Tube, vortex 200µl of the supernatant, and smear 200µl of the supernatant on potato agar medium (PDA). (In the case of FIG. 1, sawdust sample 1 is used, in the case of FIG. 2, sawdust sample 7 is used, and in the case of FIG. 3, sawdust sample 10 is used), and the type of growing colony, number of colony, and contamination area are recorded in Table 1 Shown in.

2. 도 1 내지 3 및 표 1을 보면, 푸른 곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목에서 얻은 톱밥에 대해 1% 과초산 수용액을 이용한 화학처리 및 열처리를 수행하는 경우 오염이 발생하지 않은데 반해, 화학처리나 열처리 중 어느 하나만 수행하거나, 과초산 수용액의 농도가 낮은 경우 오염이 발생한 것을 확인할 수 있다.2. Referring to Figs. 1 to 3 and Table 1, when chemical treatment and heat treatment using 1% peracetic acid aqueous solution are performed on sawdust obtained from the dead wood of pine nematode disease in which blue mold is growing, contamination does not occur, whereas chemical treatment B. When only one of the heat treatment is performed or the concentration of the aqueous peracetic acid solution is low, it can be confirmed that contamination has occurred.

Colony 종류 Colony type Colony 개수 Colony Count 오염 면적(%)Pollution area (%) 톱밥시료 1Sawdust sample 1 00 00 00 톱밥시료 2Sawdust sample 2 00 00 00 톱밥시료 3Sawdust sample 3 00 00 00 톱밥시료 4Sawdust sample 4 1One 22 66 톱밥시료 5Sawdust sample 5 00 00 00 톱밥시료 6Sawdust Sample 6 00 00 00 톱밥시료 7Sawdust Sample 7 00 00 00 톱밥시료 8Sawdust Sample 8 22 1010 100100 톱밥시료 9Sawdust sample 9 1One 55 3030 톱밥시료 10Sawdust sample 10 1One 44 1515

<실시예 3> 톱밥시료를 이용한 복령 종균 배양<Example 3> Bokryeong seed culture using sawdust sample

1. 각 톱밥시료 10㎤당 열처리한 미강 2㎤, Ca 0.03g를 혼합한 후 용기에 담고 액상의 복령 종균 0.07g을 접종하여 26℃에서 7일 동안 배양한 후, 종균의 활착정도를 확인하여 표 2에 나타내었다. 톱밥시료에 아무것도 자라지 않으면 X로 평가하고, 톱밥시료에 자라는 복령 종균과 다른 곰팡이의 비율에 따라 1 내지 5로 평가하였으며, 복령 종균만 자라면 1로 평가하고 복령 종균이 다른 곰팡이보다 많이 자라면 2, 복령 종균과 다른 곰팡이가 비슷하면 3, 복령 종균이 다른 곰팡이보다 적게 자라면 4, 다른 곰팡이만 자라면 5로 평가하였다.1. After mixing 2 cm 3 of heat-treated rice bran and 0.03 g of Ca per 10 cm 3 of each sawdust sample, put it in a container, inoculate 0.07 g of liquid Bokryeong seed, and incubate at 26°C for 7 days, and then check the extent of seeding. It is shown in Table 2. If nothing grows in the sawdust sample, it was evaluated as X, and it was evaluated as 1 to 5 depending on the ratio of the Bokryeong spawn growing on the sawdust sample and other fungi. , 3 if the Bokryeong spawn was similar to other fungi, 4 if the Bokryeong spawn grew less than other fungi, and 5 if only other fungi were grown.

2. 표 2를 보면, 푸른 곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목에서 얻은 톱밥에 대해 1% 과초산 수용액을 이용한 화학처리 후 열처리를 수행하는 경우 복령 종균이 잘 자라나, 화학처리 후 건조과정을 거치지 않거나 고농도의 과초산을 사용하는 경우 다른 곰팡이뿐만 아니라 복령 종균도 자리지 못함을 알 수 있다. 또한, 과초산의 농도가 너무 낮거나 열처리만 한 경우 복령 종균뿐만 아니라 다른 곰팡이도 자라게 되며, 화학처리만 하거나, 열처리 후 화학처리를 하는 경우 톱밥배지의 환경이 복령 종균에 생육에 접합하지 못해 복령 종균이 자라지 못하며, 과산화수소의 경우 저농도로 사용하였음에도 복령 종균의 배양에는 유해한 것을 알 수 있다.2. As shown in Table 2, when heat treatment is performed after chemical treatment using 1% peracetic acid aqueous solution for sawdust obtained from dead wood of pine tree nematode in which blue mold is growing, bokryeong spawns grow well, but do not undergo drying after chemical treatment. It can be seen that if a high concentration of peracetic acid is used, not only other fungi but also Bokryeong spores cannot be found. In addition, if the concentration of peracetic acid is too low or only heat treatment, not only the Bokryeong spawn but also other fungi will grow.If only chemical treatment or chemical treatment after heat treatment, the environment of the sawdust medium cannot be bonded to the growth of Bokryeong spawn. It can be seen that the spawn cannot grow, and hydrogen peroxide is harmful to the cultivation of Bokryeong spawn even though it was used at a low concentration.

톱밥시료 1Sawdust sample 1 톱밥시료 2Sawdust sample 2 톱밥시료 3Sawdust sample 3 톱밥시료 4Sawdust sample 4 톱밥시료 5Sawdust sample 5 활착정도Survival 1One XX XX 33 XX 톱밥시료 6Sawdust Sample 6 톱밥시료 7Sawdust Sample 7 톱밥시료 8Sawdust Sample 8 톱밥시료 9Sawdust sample 9 톱밥시료 10Sawdust sample 10 활착정도Survival XX 1One 55 XX 33

<실시예 4> 톱밥시료에 존재하는 재선충 확인<Example 4> Confirmation of re-nematodes present in sawdust sample

톱밥시료 1, 7 및 8에 대하여 Baerman Funnel을 이용하여 소나무재선충을 검출한 결과, 톱밥시료 1 및 7에는 소나무재선충이 검출되지 않았으나 톱밥시료 8에서는 재선충이 검출되었다. 이를 통해, 푸른 곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목에서 얻은 톱밥을 1% 과초산 수용액을 이용한 화학처리 후 열처리를 수행하는 경우 소나무 재선충을 사멸시킬 수 있음을 알 수 있다.Pine tree nematodes were not detected in sawdust samples 1, 7 and 8 using Baerman Funnel, but pine tree nematodes were not detected in sawdust samples 1 and 7, but ash nematodes were detected in sawdust sample 8. Through this, it can be seen that if the sawdust obtained from the dead tree of pine tree nematode disease growing blue mold is chemically treated with 1% peracetic acid aqueous solution and then heat treatment is performed, the pine tree nematode can be killed.

<실시예 5> 자목 시료의 준비<Example 5> Preparation of wood sample

1. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무 재선충병 고사목을 절단하여 직경 15cm, 길이 20cm를 가지는 원목을 준비하고, 상기 원목을 1% 과초산 수용액에 30초 동안 침지한 후 꺼내어 50℃로 설정된 오븐을 이용하여 250분 동안 건조하고, 건조된 상기 원목을 내열성 폴리프로필렌 봉지로 포장하고(입봉 부분은 통기필터를 장착한 복령 재배용 캡으로 봉함) 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 2시간 동안 처리하여, 자목시료 1을 얻었다.1. Prepare a log having a diameter of 15cm and a length of 20cm by cutting the dead tree of pine tree nematode in which blue fungus is growing. After immersing the log in 1% peracetic acid solution for 30 seconds, take it out and use an oven set at 50℃. After drying for 250 minutes, the dried wood is wrapped in a heat-resistant polypropylene bag (the mouth is sealed with a cap for cultivation of Bokryeong equipped with a ventilation filter) and treated with high-pressure steam at 121°C for 2 hours using an autoclave. Thus, a stock sample 1 was obtained.

2. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무 재선충병 고사목을 절단하여 직경 15cm, 길이 20cm를 가지는 원목을 준비하고, 상기 원목을 1% 과초산 수용액에 30초 동안 침지한 후 꺼내 내열성 폴리프로필렌 봉지로 포장하고(입봉 부분은 통기필터를 장착한 복령 재배용 캡으로 봉함) 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 2시간 동안 처리하여, 자목시료 2를 얻었다.2. Prepare a log having a diameter of 15 cm and a length of 20 cm by cutting the dead tree of pine tree nematode in which blue mold is growing, and immerse the log in 1% peracetic acid solution for 30 seconds, take it out, and wrap it in a heat-resistant polypropylene bag ( The mouth-sealed part was sealed with a cap for cultivation of Bokryeong equipped with a ventilation filter.) Treated with high-pressure steam at 121°C for 2 hours using an autoclave to obtain Jawood Sample 2.

3. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무 재선충병 고사목을 절단하여 직경 15cm, 길이 20cm를 가지는 원목을 준비하고, 상기 원목을 내열성 폴리프로필렌 봉지로 포장하고(입봉 부분은 통기필터를 장착한 복령 재배용 캡으로 봉함) 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 2시간 동안 열처리하고, 상기 봉지에서 원목을 꺼내 1% 과초산 수용액에 30초 동안 침지한 후 꺼내어 50℃로 설정된 오븐을 이용하여 250분 동안 건조하고 내열성 폴리프로필렌 봉지로 다시 포장하여(입봉 부분은 통기필터를 장착한 복령 재배용 캡으로 봉함), 자목시료 3을 얻었다.3. Prepare a log with a diameter of 15cm and a length of 20cm by cutting the dead tree of pine tree nematode in which green fungus is growing, and wrap the log with a heat-resistant polypropylene bag (the mouthpiece is sealed with a cap for Bokryeong cultivation equipped with a ventilation filter. ) Heat treatment at 121°C for 2 hours with high-pressure steam using an autoclave, remove the log from the bag, immerse it in 1% peracetic acid aqueous solution for 30 seconds, and then take it out and use an oven set at 50°C for 250 minutes. After drying and packaging again with heat-resistant polypropylene bags (the mouthpiece portion was sealed with a cap for cultivation of Bokryeong equipped with a ventilation filter), Jawood Sample 3 was obtained.

4. 1% 과초산 수용액 대신에 0.5% 과초산 수용액을 사용한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 2의 1과 동일하에 하여, 자목시료 4를 얻었다.4. Except for using 0.5% peracetic acid aqueous solution instead of 1% peracetic acid aqueous solution, other conditions were carried out in the same manner as in Example 2 1, to obtain a purple tree sample 4.

5. 1% 과초산 수용액 대신에 2% 과초산 수용액을 사용한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 2의 1과 동일하에 하여, 자목시표 5을 얻었다.5. Except for using a 2% aqueous peracetic acid solution instead of a 1% aqueous peracetic acid solution, other conditions were carried out in the same manner as in Example 2 1 to obtain a target table 5.

6. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무 재선충병 고사목을 절단하여 직경 15cm, 길이 20cm를 가지는 원목을 준비하고, 상기 원목을 80% 메탄올 수용액에 30초 동안 침지한 후 꺼내어 50℃로 설정된 오븐을 이용하여 300분 동안 충분히 건조하고, 건조된 상기 원목을 내열성 폴리프로필렌 봉지로 포장하고(입봉 부분은 통기필터를 장착한 복령 재배용 캡으로 봉함) 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 2시간 동안 처리하여, 자목시료 6을 얻었다.6. Prepare a log having a diameter of 15cm and a length of 20cm by cutting the dead tree of pine tree nematode in which blue fungus is growing. After immersing the log in 80% methanol aqueous solution for 30 seconds, take it out and use an oven set at 50°C to 300 Dry enough for a minute and wrap the dried log in a heat-resistant polypropylene bag (sealed with a cap for Bokryeong cultivation equipped with a ventilation filter) and treated with high-pressure steam at 121°C for 2 hours using an autoclave. Thus, a stock sample 6 was obtained.

7. 정상적인 소나무(소나무 재선충병에 걸리지 않고 푸른곰팡이에 오염되지 않음)를 절단하여 직경 15cm, 길이 20cm를 가지는 원목을 준비하고, 상기 원목을 내열성 폴리프로필렌 봉지로 포장하고(입봉 부분은 통기필터를 장착한 복령 재배용 캡으로 봉함) 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 2시간 동안 처리하여, 자목시료 7을 얻었다.7. Prepare a solid wood having a diameter of 15 cm and a length of 20 cm by cutting a normal pine tree (not affected by pine tree nematode disease and not contaminated with blue mold), and wrap the log in a heat-resistant polypropylene bag. Sealed with the attached Bokryeong cultivation cap) Using an autoclave, it was treated with high-pressure steam at 121° C. for 2 hours to obtain Jawood Sample 7.

8. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무 재선충병 고사목을 절단하여 직경 15cm, 길이 20cm를 가지는 원목을 준비하고, 상기 원목을 내열성 폴리프로필렌 봉지로 포장하여(입봉 부분은 통기필터를 장착한 복령 재배용 캡으로 봉함) 자목시료 8로 하였다.8. Prepare a log with a diameter of 15 cm and a length of 20 cm by cutting the dead tree of pine tree nematode in which green fungus is growing, and wrap the log in a heat-resistant polypropylene bag (the mouth part is sealed with a cap for Bokryeong cultivation equipped with a ventilation filter. ) It was set as the tree sample 8.

9. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무 재선충병 고사목을 절단하여 직경 15cm, 길이 20cm를 가지는 원목을 준비하고, 상기 원목을 1% 과초산 수용액에 30초 동안 침지한 후 꺼내어 50℃로 설정된 오븐을 이용하여 250분 동안 건조하고, 내열성 폴리프로필렌 봉지로 포장하여(입봉 부분은 통기필터를 장착한 복령 재배용 캡으로 봉함) 자목시료 9를 얻었다.9. Prepare a log having a diameter of 15cm and a length of 20cm by cutting the dead tree of pine tree nematode in which blue fungus is growing. After immersing the log in 1% peracetic acid solution for 30 seconds, take it out and use an oven set at 50℃. After drying for 250 minutes, it was packaged in a heat-resistant polypropylene bag (the part of the mouth was sealed with a cap for cultivation of Bokryeong equipped with a ventilation filter) to obtain a jawood sample 9.

10 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무 재선충병 고사목을 절단하여 직경 15cm, 길이 20cm를 가지는 원목을 준비하고, 상기 원목을 내열성 폴리프로필렌 봉지로 포장하고(입봉 부분은 통기필터를 장착한 복령 재배용 캡으로 봉함) 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 2시간 동안 처리하여, 자목시료 10을 얻었다.10 Prepare a log having a diameter of 15 cm and a length of 20 cm by cutting the dead tree of pine tree nematode in which green fungus is growing, and wrap the log in a heat-resistant polypropylene bag (the mouth part is sealed with a cap for Bokryeong cultivation equipped with a ventilation filter) Treatment with high-pressure steam at 121° C. for 2 hours using an autoclave to obtain a jawood sample 10.

<실시예 6> 자목시료의 오염확인<Example 6> Confirmation of contamination of wood sample

1. 실시예 5에서 얻은 각 자목시료에 대하여 드릴을 이용하여 구멍(25cm2)을 형성하여, 상면으로부터 10cm 깊이까지 톱밥을 채취한 후, 각 톱밥 10㎖ 및 멸균수 30㎖를 50ml Conical Tube에 넣어 vortex후 상층액 200㎕를 감자한천배지(PDA)에 도말하여 7일 후, 촬영하여 도 4 내지 6에 나타내었고(도 4의 경우 자목시료 1로부터 얻은 톱밥 사용, 도 5의 경우 자목시료 7로부터 얻은 톱밥 사용, 도 6의 경우 자목시료 10으로부터 얻은 톱밥 사용), 또한 자라나는 Colony(오염)의 종류, Colony 개수, 오염 면적을 기록하여 표 3에 나타내었다. 1. A hole (25 cm 2 ) was formed using a drill for each of the wood samples obtained in Example 5, and sawdust was collected from the top to a depth of 10 cm, and then 10 ml of each sawdust and 30 ml of sterilized water were added to a 50 ml Conical Tube. After putting vortex, 200 µl of the supernatant was smeared on potato agar medium (PDA), photographed after 7 days, and shown in Figs. 4 to 6 (in the case of Fig. 4, sawdust obtained from the wood sample 1 is used, in the case of Fig. The use of sawdust obtained from, in the case of FIG. 6, the use of sawdust obtained from the wood sample 10), and the type of colony (contamination) growing, the number of colony, and the contamination area were recorded and shown in Table 3.

2. 도 4 내지 6 및 표 3을 보면, 푸른 곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목에서 얻은 자목에 대해 1% 과초산 수용액을 이용한 화학처리 및 열처리를 수행하는 경우 오염이 발생하지 않은데 반해, 화학처리나 열처리 중 어느 하나만 수행하거나, 과초산 수용액의 농도가 낮은 경우 오염이 발생한 것을 확인할 수 있다.2. Referring to Figs. 4 to 6 and Table 3, when chemical treatment and heat treatment using 1% peracetic acid aqueous solution are performed on the tree obtained from the dead tree of pine nematode disease in which blue mold is growing, contamination does not occur, whereas chemical treatment B. When only one of the heat treatment is performed or the concentration of the aqueous peracetic acid solution is low, it can be confirmed that contamination has occurred.

Colony 종류 Colony type Colony 개수 Colony Count 오염 면적(%)Pollution area (%) 자목시료 1Arbor sample 1 00 00 00 자목시료 2Arbor sample 2 00 00 00 자목시료 3Arbor sample 3 00 00 00 자목시료 4Arbor sample 4 1One 55 1010 자목시료 5Wood sample 5 00 00 00 자목시료 6Arbor sample 6 00 00 00 자목시료 7Arbor sample 7 00 00 00 자목시료 8Arbor sample 8 1One 5050 9090 자목시료 9Arbor sample 9 1One 1717 4545 자목시료 10Wood sample 10 22 1313 3030

<실시예 7> 자목시료를 이용한 복령 배양<Example 7> Bokryeong culture using Jamok sample

1. 톱밥시료(실시예 1의 1에서 얻은 톱밥시료 1 사용) 10㎤당 열처리한 미강 2㎤, Ca 0.03g를 혼합한 후 용기에 담고 액상의 복령 종균 0.07g을 접종하여 26℃에서 2주 동안 배양한 후 얻은 톱밥배양종균 5g을 각 자목시료에 접종하고 26℃에서 7일 동안 배양한 후, 촬영하여 도 7에 나타내었고(도 7의 경우 자목시료 1 사용), 또한 복령 종균의 활착정도를 확인하여 표 4에 나타내었다. 자목시료에 아무것도 자라지 않으면 X로 평가하고, 자목시료에 자라는 복령 종균과 다른 곰팡이의 비율에 따라 1 내지 5로 평가하였으며, 복령 종균만 자라면 1로 평가하고 복령 종균이 다른 곰팡이보다 많이 자라면 2, 복령 종균과 다른 곰팡이가 비슷하면 3, 복령 종균이 다른 곰팡이보다 적게 자라면 4, 다른 곰팡이만 자라면 5로 평가하였다.1. Sawdust sample (use of sawdust sample 1 obtained in Example 1) 2 cm 3 of rice bran and 0.03 g of Ca were mixed per 10 cm 3 and placed in a container and inoculated with 0.07 g of bokryeong seed in liquid form for 2 weeks at 26°C. 5g of sawdust cultured seeds obtained after cultivation during cultivation was inoculated into each seed tree sample and incubated at 26°C for 7 days, and then photographed and shown in FIG. It is shown in Table 4 to confirm. If nothing grows in the Jawood sample, it was evaluated as X, and it was evaluated as 1 to 5 depending on the ratio of the Bokryeong seed bacteria growing on the Jawood sample and other fungi. , 3 if the Bokryeong spawn was similar to other fungi, 4 if the Bokryeong spawn grew less than other fungi, and 5 if only other fungi were grown.

2. 표 4를 보면, 푸른 곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목에서 얻은 원목에 대해 1% 과초산 수용액을 이용한 화학처리 후 열처리를 수행하는 경우 복령 종균이 자목에 잘 활착되나(도 7을 통해서도 복령 종균이 자목에 잘 활착된 것을 확인할 수 있음), 화학처리 후 건조과정을 거치지 않거나 고농도의 과초산을 사용하는 경우 다른 곰팡이뿐만 아니라 복령 종균도 자목에서 자리지 못함을 알 수 있다. 또한, 과초산의 농도가 너무 낮거나 열처리만 한 경우 복령 종균뿐만 아니라 다른 곰팡이도 자목에서 자라게 되며, 화학처리만 하거나 열처리 후 화학처리를 하는 경우 자목의 환경이 복령 종균에 생육에 접합하지 못해 복령 종균이 자목에 활착되지 못하며, 메탄올을 이용하여 화학처리하는 경우 복령 종균이 자목에 잘 활작되지 않는 것을 확인할 수 있다.2. Looking at Table 4, when heat treatment after chemical treatment using 1% peracetic acid aqueous solution is performed on the logs obtained from the dead tree of pine tree nematode in which blue mold is growing, Bokryeong spawns are well established on the tree (see also Bokryeong It can be seen that the seed germs are well established on the tree tree), and if the drying process is not carried out after chemical treatment, or when a high concentration of peracetic acid is used, not only other fungi but also the Bokryeong seed germs cannot be found in the tree tree. In addition, if the concentration of peracetic acid is too low or only heat treatment, not only the Bokryeong spawn but also other fungi will grow on the tree, and if only chemical treatment or chemical treatment after heat treatment, the environment of the tree cannot be bonded to the growth of the Bokryeong spawn. It can be seen that the seed germs do not grow on the tree trees, and when chemical treatment with methanol is performed, the Bokryeong seeds do not grow well on the tree trees.

자목시료 1Arbor sample 1 자목시료 2Arbor sample 2 자목시료 3Arbor sample 3 자목시료 4Arbor sample 4 자목시료 5Wood sample 5 활착정도Survival 1One XX XX 44 XX 자목시료 6Arbor sample 6 자목시료 7Arbor sample 7 자목시료 8Arbor sample 8 자목시료 9Arbor sample 9 자목시료 10Wood sample 10 활착정도Survival XX 1One 55 XX 33

<실시예 8> 자목시료에 존재하는 재선충 확인<Example 8> Confirmation of re-nematodes present in a tree sample

실시예 6에서 얻은 자목시료 1, 7 및 8에 대한 톱밥에 대하여 Baerman Funnel을 이용하여 소나무재선충을 검출한 결과, 자목시료 1 및 7의 톱밥에서는 소나무재선충이 검출되지 않았으나 자목시료 8의 톱밥에서는 재선충이 검출되었다. 이를 통해, 푸른 곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목에서 얻은 원목을 1% 과초산 수용액을 이용한 화학처리 후 열처리를 수행하는 경우 소나무 재선충을 사멸시킬 수 있음을 알 수 있다.Pine tree nematodes were not detected in the sawdust of Jawood samples 1, 7 and 8 obtained in Example 6 using Baerman Funnel, but the sawdust of Jawood Sample 8 was not Was detected. Through this, it can be seen that when the solid wood obtained from the dead tree of pine tree nematode in which blue mold is growing is subjected to chemical treatment using 1% peracetic acid aqueous solution and then heat treatment is performed, the pine tree nematode can be killed.

<실시예 9> 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령의 재배<Example 9> Cultivation of Bokryeong using pine tree nematode disease dead tree

톱밥시료(실시예 1의 1에서 얻은 톱밥시료 1 사용) 10㎤당 열처리한 미강 2㎤, Ca 0.03g를 혼합한 후 용기에 담고 액상의 복령 종균 0.07g을 접종하여 26℃에서 2주 동안 배양한 후 얻은 톱밥배양종균 5g를, 실시예 5에서 얻은 각 자목시료에 접종하고 26℃에서 6개월 동안 배양하여 복령을 재배한 후, 촬영하여 도 8에 나타내었다. 도 8에서 확인할 수 있는 바와 같이, 소나무 재선충변 고사목을 이용하여, 톱밥배지, 자목을 만들고 이를 이용하여도 복령이 잘 재배됨을 확인할 수 있다.Sawdust sample (using the sawdust sample 1 obtained in Example 1) 2 cm 3 of heat-treated rice bran and 0.03 g of Ca were mixed per 10 cm 3 and placed in a container and inoculated with 0.07 g of Bokryeong seed in liquid form and incubated at 26°C for 2 weeks After inoculation of 5 g of the sawdust cultured seed bacteria obtained in Example 5, and inoculating each seedling sample obtained in Example 5 and cultivating Bokryeong for 6 months at 26° C., photographed and shown in FIG. 8. As can be seen in FIG. 8, it can be seen that even if a sawdust medium and a birch are made using the deadwood of the pine tree nematode, and using the same, bokryeong is well cultivated.

이상에서, 출원인은 본 발명의 바람직한 실시예들을 설명하였지만, 이와 같은 실시예들은 본 발명의 기술적 사상을 구현하는 일 실시예일 뿐이며 본 발명의 기술적 사상을 구현하는 한 어떠한 변경예 또는 수정예도 본 발명의 범위에 속하는 것으로 해석되어야 한다.In the above, the applicant has described the preferred embodiments of the present invention, but such embodiments are only one embodiment that implements the technical idea of the present invention, and any change or modification of the present invention as long as the technical idea of the present invention is implemented. It should be construed as falling within the scope.

Claims (10)

곰팡이류에 의해 2차 감염된 소나무 재선충병 고사목을 분쇄하여 톱밥을 얻는 톱밥수득단계와, 상기 톱밥수득단계에서 얻은 톱밥에 과초산과 물을 섞어 생성한 과초산 희석액을 처리하는 화학처리단계와, 상기 화학처리단계서 화학처리된 톱밥을 건조시켜 상기 톱밥에 잔류하는 과초산 희석액을 제거하는 건조단계와, 상기 건조단계에서 건조된 톱밥에 열을 가해 열처리하는 열처리단계를 포함하는 것을 특징으로 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법.A chemical treatment step of crushing a pine tree nematode disease dead tree secondary infected by fungi to obtain sawdust; a chemical treatment step of treating a dilute solution of peracetic acid produced by mixing peracetic acid and water with the sawdust obtained in the sawdust obtaining step; and the chemical A drying step of drying the sawdust treated chemically in the treatment step to remove the diluted peracetic acid remaining in the sawdust, and a heat treatment step of heat treatment by applying heat to the sawdust dried in the drying step. Manufacturing method of sawdust medium. 삭제delete 삭제delete 제1항에 있어서, 상기 과초산 희석액은
과초산을 물에 섞어 0.8 내지 1.2%농도를 가지도록 한 과초산 희석액이 사용되는 것을 특징으로 하는 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법.
The method of claim 1, wherein the peracetic acid diluent is
A method of manufacturing a sawdust medium for cultivating Bokryeong spawns, characterized in that a diluent of peracetic acid is used to have a concentration of 0.8 to 1.2% by mixing peracetic acid with water.
제1항에 있어서, 상기 화학처리단계는
톱밥을 과초산 희석액에 25 내지 35초 동안 침지하여 행하여지는 것을 특징으로 하는 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법.
The method of claim 1, wherein the chemical treatment step
Method for producing a sawdust medium for culturing Bokryeong spawns, characterized in that the sawdust is immersed in a diluted solution of peracetic acid for 25 to 35 seconds.
제1항에 있어서, 상기 열처리단계는
고압의 스팀을 건조된 톱밥에 가해 행하여지는 것을 특징으로 하는 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법.
The method of claim 1, wherein the heat treatment step
Method for producing a sawdust medium for cultivating Bokryeong spawns, characterized in that the high-pressure steam is applied to the dried sawdust.
제1항에 있어서, 상기 열처리단계는
고압의 스팀을 건조된 톱밥에 가해 115 내지 130℃로 70 내지 120분 동안 열처리하여, 열처리 후 톱밥의 함수율이 50 내지 70%를 가지도록 하는 것을 특징으로 하는 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법.
The method of claim 1, wherein the heat treatment step
A method of manufacturing a sawdust medium for culturing Bokryeong spawns, characterized in that high-pressure steam is added to the dried sawdust and heat-treated at 115 to 130°C for 70 to 120 minutes, so that the water content of the sawdust after the heat treatment is 50 to 70%.
톱밥배지에 복령 종균을 접종한 후 24 내지 28℃의 온도로 2 내지 3주 동안 유지하여 톱밥배양종균을 형성하는 종균배양단계와, 소나무 재선충병 고사목을 화학 처리후 열처리하여 톱밥배양종균을 접종하기 위한 자목을 형성하는 자목형성단계와, 상기 자목에 톱밥배양종균을 접종한 후 배양하여 복령을 생산하는 복령배양단계를 포함하며,
상기 톱밥배지는 곰팡이류에 의해 2차 감염된 소나무 재선충병 고사목을 분쇄하여 톱밥을 얻는 톱밥수득단계와, 상기 톱밥수득단계에서 얻은 톱밥에 과초산과 물을 섞어 생성한 과초산 희석액을 처리하는 화학처리단계와, 상기 화학처리단계서 화학처리된 톱밥을 건조시켜 상기 톱밥에 잔류하는 과초산 희석액을 제거하는 건조단계와, 상기 건조단계에서 건조된 톱밥에 열을 가해 열처리하는 열처리단계를 거쳐 얻어지는 것을 특징으로 하는 복령의 재배방법.
After inoculating Bokryeong spawn in sawdust medium, the seed culture step is maintained at a temperature of 24 to 28°C for 2 to 3 weeks to form sawdust cultured spawns, and sawdust cultured spawns are inoculated by heat treatment after chemical treatment of the dead tree of pine tree nematode disease. And a bokryeong cultivation step of forming bokryeong by culturing after inoculating sawdust cultivated spawn on the bokryeong, and
The sawdust medium is a chemical treatment step of pulverizing pine tree nematode disease dead trees secondary infected by fungi to obtain sawdust, and a dilute solution of peracetic acid produced by mixing peracetic acid and water with the sawdust obtained in the sawdust obtaining step And, a drying step of drying the sawdust chemically treated in the chemical treatment step to remove the peracetic acid diluent remaining in the sawdust, and a heat treatment step of heat treatment by applying heat to the sawdust dried in the drying step. How to cultivate Bokryeong.
제8항에 있어서,
상기 자목형성단계는 소나무 재선충병 고사목으로부터 얻은 원목에 과초산 희석액을 처리하는 화학처리단계와, 상기 화학처리단계에서 화학처리된 원목을 건조시켜 상기 원목에 잔류하는 과초산 희석액을 제거하는 건조단계와, 상기 건조단계에서 건조된 원목에 열을 가해 열처리하는 열처리단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 복령의 재배방법.
The method of claim 8,
The timber forming step includes a chemical treatment step of treating a diluent of peracetic acid on the log obtained from the dead wood of pine nematode disease, and a drying step of removing the diluent of peracetic acid remaining in the log by drying the chemically treated log in the chemical treatment step. And a heat treatment step of heat treatment by applying heat to the log dried in the drying step.
제9항에 있어서,
상기 화학처리단계는 과초산을 물에 섞어 0.8 내지 1.2%농도를 가지도록 한 과초산 희석액을 준비하고, 원목을 상기 과초산 희석액에 25 내지 35초 동안 침지하거나, 원목에 상기 과초산 희석액을 25 내지 35초 동안 분무하여 행하여지며,
상기 열처리단계는 고압의 스팀을 건조된 원목에 가해 115 내지 130℃로 100 내지 150분 동안 열처리하여 수행되는 것을 특징으로 하는 복령의 재배방법.
The method of claim 9,
In the chemical treatment step, peracetic acid is mixed with water to prepare a peracetic acid dilution to have a concentration of 0.8 to 1.2%, and the log is immersed in the peracetic acid dilution for 25 to 35 seconds, or the peracetic acid dilution is added to the log for 25 seconds. By spraying for 35 seconds,
The heat treatment step is a cultivation method of bokryeong characterized in that it is carried out by applying high-pressure steam to the dried logs and heat treatment at 115 to 130 ℃ for 100 to 150 minutes.
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