KR20200074625A - Method for preparing sawdust media for cultivating poria cocos spawn using tree died by pine wilt disease - Google Patents

Method for preparing sawdust media for cultivating poria cocos spawn using tree died by pine wilt disease Download PDF

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Abstract

The present invention relates to a manufacturing method of sawdust medium for cultivating Poria cocos spores using dead trees died of pine wilt disease. More specifically, the present invention relates to a manufacturing method of sawdust medium for cultivating Poria cocos spores using dead trees died of pine wilt disease. Since the sawdust medium for cultivating Poria cocos spores can be prepared using a discarded dead trees died of pine wilt disease, it is possible to improve the economic feasibility and increase efficiency of cultivation of Poria cocos spores by performing heat treatment after chemical treatment using peracetic acid on sawdust obtained from dead trees died of pine wilt disease.

Description

소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법{Method for preparing sawdust media for cultivating poria cocos spawn using tree died by pine wilt disease}Method for preparing sawdust media for cultivation of Bokryeong spp. using pine tree nematode disease

본 발명은 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 대한 것으로, 더욱 상세하게는 폐기되는 소나무 재선충병 고사목을 이용하여 복령 종균 배양용 톱밥배지를 제조할 수 있어 경제성을 향상시킬 수 있고, 소나무 재선충병 고사목으로부터 얻은 톱밥에 대해 과초산을 이용한 화학처리 후 열처리를 수행하여 복령 종균 배양의 효율성을 향상시킬 수 있는 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 대한 것이다.The present invention relates to a method for manufacturing a sawdust medium for cultivation of Bokryeong seed germ using pine tree nematode disease, and more specifically, to manufacture a sawdust medium for cultivation of Bokryeong seed germ tree using discarded pine tree nematode disease. For the manufacturing method of sawdust medium for cultivation of cultivation of cultivation of bokryeong seed using pine wood worm disease, which can improve the efficiency of cultivation of cultivar wormworm by performing heat treatment after chemical treatment with peracetic acid for sawdust obtained from dead wood of pine wilt disease will be.

소나무는 겉씨식물 구과목 소나무과의 상록침엽 교목으로, 북부 고원지대를 제외한 한국 전역에 걸쳐 자라고 있는데, 소나무 재선충병에 의해 많은 피해를 보고 있다. 소나무 재선충병은 소나무 등에 기생해 나무를 갉아먹는 선충인 소나무재선충에 의해 생기는 병이며, 상기 소나무재선충은 솔수염하늘소, 북방수염하늘소 등의 매개충에 기생하며 매개충을 통해 나무에 옮겨진다. 하지만, 소나무 재선충병은 현재까지 치료 방법이 없고 그 감염 여부를 육안으로만 확인할 수 있어, 많은 소나무가 소나무 재선충병에 의해 고사되고 있다. 따라서, 소나무 재선충병에 의해 고사된 소나무를 이용하기 위한 여러 방안이 시도되고 있는데, 일반적으로 하기의 특허문헌처럼 소나무 재선충병 고사목을 열처리를 하여 소나무재선충을 사멸시킨 후 고사목을 이용하게 된다.Pine is an evergreen coniferous tree of the coniferous tree, the pine family. It grows all over Korea except for the northern highlands, and suffers much damage from pine nematode disease. Pine nematode disease is a disease caused by pine nematodes, which are parasites that eat parasites and gnaw trees, and the pine nematodes parasitize on the larvae, such as pine brine, and beard beetle, and are transferred to the trees through the vector. However, pine wilt disease has no treatment method so far, and the infection can be confirmed only with the naked eye, so many pine trees are killed by pine wilt disease. Therefore, various methods have been tried to use the pines killed by the pine wilt disease, and in general, the pine wilt disease is killed by using heat treatment of the pine wilt disease, as in the following patent document, and then the firewood is used.

<특허문헌><Patent Document>

공개특허공보 제10-2009-0011397호(2009. 02. 02. 공개) "소나무 재선충병 피해목 및 의심목의 재활용 방법"Published Patent Publication No. 10-2009-0011397 (published on February 02, 2009) "How to recycle pine tree nematode disease and suspected trees"

하지만, 소나무 재선충병 고사목을 처리하는 종래의 방법은 열처리를 통해 소나무재선충을 사멸시키는 것에만 주안점을 두어, 열처리 후 고사목의 이용에 한계가 있는 문제가 있다. 특히, 소나무 재선충병 고사목을 이용하여 복령을 재배할 수 없는 문제가 있다. However, in the conventional method of treating the dead tree disease of pine wilt disease, there is a problem that the use of dead tree after heat treatment is limited by focusing only on killing the pine tree nematode through heat treatment. In particular, there is a problem in that it is not possible to cultivate Bokryeong using pine tree nematode disease.

본 발명은 전술한 종래기술의 문제점을 해결하기 위한 것으로,The present invention is to solve the problems of the prior art described above,

본 발명은 폐기되는 소나무 재선충병 고사목을 이용하여 복령 종균 배양용 톱밥배지를 제조할 수 있어, 경제성을 향상시킬 수 있는 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법을 제공하는데 그 목적이 있다.The present invention is to provide a method for producing a sawdust medium for cultivation of a wormwood seedworm using pinewood wilt disease, which can improve economic efficiency, by using a discarded pine woodworm beetle rotwood tree to improve economic efficiency. There is this.

또한, 본 발명은 소나무 재선충병 고사목에서 얻은 톱밥에 대해 과초산을 이용한 화학처리 후 열처리를 수행하여, 소나무 재선충 및 복령의 생장을 저해하는 곰팡이를 효과적으로 제거함으로써, 복령 종균 배양의 효율성을 향상시킬 수 있는 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 대한 것이다.In addition, the present invention, by performing a heat treatment after the chemical treatment with peracetic acid for sawdust obtained from pine tree nematode disease dead tree, by effectively removing the fungus that inhibits the growth of pine nematodes and pufferia, it is possible to improve the efficiency of cultivation of pufferworm seed germ. It relates to a method of manufacturing a sawdust medium for cultivation of Bokryeong spawn using dead pine tree nematode disease.

본 발명은 앞서 본 목적을 달성하기 위하여 다음과 같은 구성을 가진 실시예에 의해 구현된다.The present invention is implemented by an embodiment having the following configuration in order to achieve the above object.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법은 소나무 재선충병 고사목을 분쇄하여 톱밥을 얻는 톱밥수득단계와, 상기 톱밥에 열을 가해 열처리하는 열처리단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.According to an embodiment of the present invention, the method of manufacturing a sawdust medium for cultivation of Bokryeong seed germ according to the present invention includes a sawdust harvesting step of crushing the dead tree of pine wilt disease to obtain sawdust, and a heat treatment step of heat treatment by applying heat to the sawdust It is characterized by.

본 발명의 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법은 상기 톱밥수득단계에서 얻은 톱밥에 과초산 희석액을 처리하는 화학처리단계와, 상기 화학처리단계 후 톱밥을 과초산 희석액에서 꺼내 건조시켜 상기 톱밥에 잔류하는 과초산 희석액을 제거하는 건조단계를 추가로 포함하며, 상기 열처리단계에서는 상기 건조단계에서 건조된 톱밥에 열을 가해 열처리하는 것을 특징으로 한다.According to another embodiment of the present invention, a method of manufacturing a sawdust medium for cultivation of bokryeong spawn according to the present invention includes a chemical treatment step of processing a dilute peracetic acid in sawdust obtained in the sawdust harvesting step, and sawdust after the chemical treatment step. A drying step of removing the peracetic acid diluting liquid remaining in the sawdust by removing it from the acetic acid diluent and drying it is further included. The heat treatment step is characterized in that heat is applied to the sawdust dried in the drying step.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 있어서 상기 소나무 재선충병 고사목은 곰팡이류에 의해 2차 감염된 것을 특징으로 한다.According to another embodiment of the present invention, in the method of manufacturing sawdust medium for cultivation of Bokryeong spawn according to the present invention, the pine tree nematode disease is characterized by secondary infection by fungi.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 있어서 상기 과초산 희석액은 과초산을 물에 섞어 0.8 내지 1.2%농도를 가지도록 한 과초산 희석액이 사용되는 것을 특징으로 한다.According to another embodiment of the present invention, in the method of manufacturing sawdust medium for cultivating bokryeong spawn according to the present invention, the peracetic acid diluent is mixed with peracetic acid in water, and a dilute peracetic acid solution having a concentration of 0.8 to 1.2% is used. It is characterized by being.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 있어서 상기 화학처리단계는 톱밥을 과초산 희석액에 25 내지 35초 동안 침지하여 행하여지는 것을 특징으로 한다.According to another embodiment of the present invention, in the method of manufacturing sawdust medium for cultivation of Bokryeong spawn according to the present invention, the chemical treatment step is characterized in that sawdust is immersed in a dilute peracetic acid solution for 25 to 35 seconds.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 있어서 상기 열처리단계는 고압의 스팀을 건조된 톱밥에 가해 행하여지는 것을 특징으로 한다.According to another embodiment of the present invention, in the manufacturing method of the sawdust medium for cultivation of Bokryeong seeds according to the present invention, the heat treatment step is characterized in that it is performed by applying high pressure steam to the dried sawdust.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 있어서 상기 열처리단계는 고압의 스팀을 건조된 톱밥에 가해 115 내지 130℃로 70 내지 120분 동안 열처리하여, 열처리 후 톱밥의 함수율이 50 내지 70%를 가지도록 하는 것을 특징으로 한다.According to another embodiment of the present invention, in the method of manufacturing a sawdust medium for cultivation of Bokryeong seeds according to the present invention, the heat treatment step is performed by adding high pressure steam to the dried sawdust and heat-treating it at 115 to 130° C. for 70 to 120 minutes. , After heat treatment, it is characterized in that the water content of sawdust has 50 to 70%.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령의 재배방법은 톱밥배지에 복령 종균을 접종한 후 24 내지 28℃의 온도로 2 내지 3주 동안 유지하여 톱밥배양종균을 형성하는 종균배양단계와, 소나무 재선충병 고사목을 화학 처리후 열처리하여 톱밥배양종균을 접종하기 위한 자목을 형성하는 자목형성단계와, 상기 자목에 톱밥배양종균을 접종한 후 배양하여 복령을 생산하는 복령배양단계를 포함하며, 상기 톱밥배지는 제3항 내지 제7항 중 어느 한 항의 제조방법에 의해 제조된 톱밥배지가 사용되는 것을 특징으로 한다.According to another embodiment of the present invention, the method of cultivation of Bokryeong according to the present invention is inoculated with a sawdust medium in a sawdust medium and maintained at a temperature of 24 to 28°C for 2 to 3 weeks to form a sawdust culture. And a lumber formation step of forming a lumber for inoculating sawdust cultivation by heat-treating and treating the pine tree nematode disease chemical tree, and a cultivation cultivation step of inoculating sawdust cultivation in the lumber and culturing to produce bokyeong. The sawdust badge is characterized in that the sawdust badge manufactured by the method of any one of claims 3 to 7 is used.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령의 제배방법에 있어서 상기 자목형성단계는 소나무 재선충병 고사목으로부터 얻은 원목에 과초산 희석액을 처리하는 화학처리단계와, 상기 화학처리단계에서 화학처리된 원목을 건조시켜 상기 원목에 잔류하는 과초산 희석액을 제거하는 건조단계와, 상기 건조단계에서 건조된 원목에 열을 가해 열처리하는 열처리단계를 포함하며, 상기 소나무 재선충병 고사목은 곰팡이류에 의해 2차 감염된 것을 특징으로 한다.According to another embodiment of the present invention, in the cultivation method of Bokryeong according to the present invention, the tree formation step is a chemical treatment step of processing a dilute peracetic acid solution on a tree obtained from a pine tree nematode disease, and a chemical treatment in the chemical treatment step And a drying step of drying the treated wood to remove the peracetic acid diluent remaining in the wood, and a heat treatment step of applying heat to the dried wood in the drying step, wherein the pine wilt disease dead wood is molded by fungi. It is characterized by being infected with tea.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 복령의 제배방법에 있어서 상기 자목형성단계는 상기 화학처리단계는 과초산을 물에 섞어 0.8 내지 1.2%농도를 가지도록 한 과초산 희석액을 준비하고, 원목을 상기 과초산 희석액에 25 내지 35초 동안 침지하거나, 원목에 상기 과초산 희석액을 25 내지 35초 동안 분무하여 행하여지며, 상기 열처리단계는 고압의 스팀을 건조된 원목에 가해 115 내지 130℃로 100 내지 150분 동안 열처리하여 수행되는 것을 특징으로 한다.According to another embodiment of the present invention, in the method for cultivating bokryeong according to the present invention, the wood-forming step is prepared by mixing the peracetic acid with water to prepare a dilute peracetic acid to have a concentration of 0.8 to 1.2%. And, the wood is immersed in the peracetic acid dilution for 25 to 35 seconds, or the wood is sprayed with the dilute peracetic acid for 25 to 35 seconds, and the heat treatment step is performed by applying high-pressure steam to the dried wood to 115 to 130 It is characterized in that it is carried out by heat treatment for 100 to 150 minutes at ℃.

본 발명은 앞서 본 실시예에 의해 다음과 같은 효과를 얻을 수 있다.The present invention can obtain the following effects by the present embodiment.

본 발명은 폐기되는 소나무 재선충병 고사목을 이용하여 복령 종균 배양용 톱밥배지를 제조할 수 있어, 경제성을 향상시킬 수 있는 효과가 있다.The present invention can produce a sawdust medium for cultivation of Bokryeong spawn using dead pine tree nematode disease, which can improve the economic efficiency.

또한, 본 발명은 소나무 재선충병 고사목에서 얻은 톱밥에 대해 과초산을 이용한 화학처리 후 열처리를 수행하여, 소나무 재선충 및 복령의 생장을 저해하는 곰팡이를 효과적으로 제거함으로써, 복령 종균 배양의 효율성을 향상시킬 수 있는 효과가 있다.In addition, the present invention, by performing a heat treatment after chemical treatment with peracetic acid on sawdust obtained from pine tree nematode disease dead tree, by effectively removing the fungus that inhibits the growth of pine nematodes and pufferia, it is possible to improve the efficiency of cultivation of pufferworm spp. It has an effect.

도 1 내지 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 톱밥배지의 제조방법에 의해 제조된 톱밥배지의 오염 정도를 확인하기 위한 사진.
도 4 내지 6은 본 발명의 다른 실시에에 따른 자목의 제조방법에 의해 제조된 자목의 오염 정도를 확인하기 위한 사진.
도 7은 본 발명의 다른 실시예에 따른 자목의 제조방법에 의해 제조된 자목에 복령 종균이 활착된 모습을 나타내는 사진.
도 8은 본 발명의 또 다른 실시예에 따른 복령의 재배방법에 의해 재배된 복령을 나타내는 사진.
1 to 3 is a picture for confirming the degree of contamination of the sawdust badge produced by the method of manufacturing a sawdust badge according to an embodiment of the present invention.
4 to 6 is a picture for confirming the degree of contamination of the wood produced by the wood manufacturing method according to another embodiment of the present invention.
Figure 7 is a photograph showing the appearance of the bokryeong spawn in the wood produced by the method of manufacturing wood according to another embodiment of the present invention.
Figure 8 is a photograph showing a cultivated bokyeong by the cultivation method of bokryong according to another embodiment of the present invention.

이하에서는 본 발명에 따른 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법 및 상기 제조방법에 의해 제조된 톱밥배지를 이용하는 복령의 재배방법을 첨부된 도면을 참조하여 상세히 설명한다. 특별한 정의가 없는 한 본 명세서의 모든 용어는 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 기술자가 이해하는 당해 용어의 일반적 의미와 동일하고 만약 본 명세서에 사용된 용어의 의미와 충돌하는 경우에는 본 명세서에 사용된 정의에 따른다. 또한, 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있는 공지 기능 및 구성에 대해 상세한 설명은 생략한다. 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함"한다고 할 때 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.Hereinafter, a method of manufacturing sawdust medium for cultivation of Bokryeong spores using pine tree nematode disease according to the present invention and a method of cultivating Bokryeong using sawdust medium produced by the above-described manufacturing method will be described in detail with reference to the accompanying drawings. Unless otherwise specified, all terms in this specification are the same as the general meaning of the term understood by a person skilled in the art to which the present invention belongs, and if there is a conflict with the meaning of the term used in this specification, It follows the definition used in the specification. In addition, detailed descriptions of well-known functions and configurations that may unnecessarily obscure the subject matter of the present invention are omitted. Throughout the specification, when a part “includes” a certain component, it means that the component may further include other components, not to exclude other components, unless otherwise stated.

본 발명의 일 실시예에 따른 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법은 소나무 재선충병 고사목에서 얻은 톱밥을 화학 처리후 열처리하여 복령 종균 배양을 위한 톱밥배지를 형성하는 것으로, 톱밥수득단계, 화학처리단계, 건조단계, 열처리단계, 혼합단계 등을 포함한다. 상기 소나무 재선충병 고사목은 소나무 재선충병에 걸려 벌체된 소나무를 의미하며, 대부분 푸른곰팡이, 푸사리움(Fusarium)속 등의 곰팡이류에 의해 2차 감염이 되어 있다. 상기 복령은 죽은 소나무에서 자생하는데, 상기와 같은 일반적인 소나무 재선충병 고사목을 종래처럼 단순 열처리하여 이용하는 경우 소나무재선충의 사멸을 가능하나 복령의 재배가 불가능한 바, 본 발명은 곰팡이류에 의해 2차 감염되어 있는 일반적인 소나무 재선충병 고사목을 이용하여 복령을 효율적으로 재배할 수 있도록 하기 위해 완성되었으며, 이에 대해서는 하기에서 자세히 설명하기로 한다.Method of manufacturing a sawdust medium for cultivation of Bokryeong seed germ using pine tree nematode disease according to an embodiment of the present invention is to form a sawdust medium for cultivation of Bokryeong seed germ by chemically treating the sawdust obtained from dead pine tree nematode treatment It includes the obtaining step, the chemical treatment step, the drying step, the heat treatment step, and the mixing step. The pine tree nematode disease dead tree refers to a pine tree that has been cut off by pine tree nematode disease, and is mostly secondaryly infected by fungi such as blue mold and Fusarium. The bokryeong spontaneously grows from dead pine trees. When the common pine tree nematode dead tree is used by simple heat treatment as in the prior art, it is possible to kill the pine wiltworm, but the cultivation of the bokryeong is impossible, and the present invention is secondary infection by fungi. It was completed to enable efficient cultivation of Bokryeong using the common pine wilt disease, and will be described in detail below.

상기 톱밥수득단계는 소나무 재선충병 고사목을 분쇄하여 톱밥을 얻는 단계로, 나무를 분쇄하여 톱밥을 얻는 종래의 방법이 사용될 수 있다.The sawdust harvesting step is a step of obtaining sawdust by crushing the dead tree of pine wilt disease, and a conventional method of obtaining sawdust by crushing wood may be used.

상기 화학처리단계는 상기 톱밥수득단계에서 얻은 톱밥에 과초산 희석액을 처리하는 단계로(에컨대, 상기 톱밥을 과초산 희석액에 일정 시간 침지함), 과초산을 물에 섞어 0.8 내지 1.2%농도를 가지도록 한 과초산 희석액이 사용되며 25 내지 35초 동안 침지하는 것이 바람직하다.The chemical treatment step is a step of processing a peracetic acid diluent in the sawdust obtained in the sawdust harvesting step (for example, immersing the sawdust in a dilute peracetic acid for a certain time), mixing peracetic acid with water to increase the concentration of 0.8 to 1.2%. A dilute peracetic acid solution is used and is preferably immersed for 25 to 35 seconds.

상기 건조단계는 상기 화학처리단계 후 톱밥을 과초산 희석액에서 꺼낸 후 건조시키는 단계로, 예컨대 50℃로 설정된 오븐을 이용하여 160 내지 200분 동안 건조하여 수행될 수 있다. 상기 건조단계에서 상기 톱밥이 제대로 건조되지 않으면 상기 톱밥에 과초산 희석액이 잔류하여 상기 복령 종균의 배양을 저해하게 된다.The drying step is a step of removing the sawdust from the dilute peracetic acid after the chemical treatment step and drying it, for example, may be performed by drying for 160 to 200 minutes using an oven set at 50°C. If the sawdust is not properly dried in the drying step, a dilute peracetic acid remains in the sawdust, thereby inhibiting the culture of the bokryeong spawn.

상기 열처리단계는 상기 건조단계에서 건조된 톱밥에 열을 가해 처리하는 단계로, 고압의 스팀을 건조된 톱밥에 가해 115 내지 130℃로 70 내지 120분 동안 열처리하여 열처리 후 톱밥의 함수율이 50 내지 70%를 가지도록 하는 것이 바람직하다. 상기 열처리단계에서는 스팀을 이용하여 열처리를 수행하므로 톱밥이 복령 종균의 배양이 가능한 함수율을 가질 수 있도록 할 수 있다. 상기 열처리단계는 예컨대 오토클레이브(autoclave) 등의 장치를 이용하여 수행될 수 있다.In the heat treatment step, heat is applied to the sawdust dried in the drying step, and high-pressure steam is added to the dried sawdust to heat treatment at 115 to 130° C. for 70 to 120 minutes, and the water content of sawdust after heat treatment is 50 to 70. It is desirable to have %. In the heat treatment step, the heat treatment is performed using steam, so that sawdust can have a water content capable of cultivating the bokryeong spawn. The heat treatment step may be performed using an apparatus such as an autoclave.

상기 혼합단계는 상기 열처리단계에서 열처리된 톱밥에 미강, 칼슘 등을 섞어 톱밥배지를 형성하는 단계이다. 상기 소나무 재선충병 고사목을 분쇄하여 얻은 톱밥에 대해 바로 상기 열처리단계를 수행하여 소나무재선충을 사멸시킬 수 있으나 복령 종균의 배양은 불가능한 바, 본 발명은 소나무 재선충병 고사목에 얻은 톱밥에 대해 과초산 용액을 처리하고 건조 후 열처리를 수행하여 복령 종균의 배양이 가능한 톱밥배지를 수득하게 된다.The mixing step is a step of forming a sawdust medium by mixing rice flour, calcium, and the like with the sawdust heat-treated in the heat treatment step. It is possible to kill the pine wilt disease by performing the heat treatment step directly on the sawdust obtained by crushing the pine wilt disease, but the present invention is not capable of cultivation of the Bokyeong spp. After treatment and drying, heat treatment is performed to obtain a sawdust medium capable of cultivating Bokryeong spawn.

본 발명의 다른 실시예는 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 의해 제조된 톱밥배지에 대한 것이다.Another embodiment of the present invention relates to a sawdust medium produced by a method of manufacturing a sawdust medium for cultivation of Bokryeong spawn using pine wilt disease.

본 발명의 또 다른 실시예에 따른 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 의해 제조된 톱밥배지를 이용하는 복령의 재배방법을 도 1 내지 8을 참조하여 설명하면, 상기 복령의 재배방법은 톱밥배지에 복령 종균을 접종한 후 배양하여 톱밥배양종균을 형성하는 종균배양단계와, 소나무 재선충병 고사목을 화학 처리후 열처리하여 톱밥배양종균을 접종하기 위한 자목을 형성하는 자목형성단계와, 상기 자목에 톱밥배양종균을 접종한 후 배양하여 복령을 생산하는 복령배양단계 등을 포함한다. 상기 톱밥배지는 앞서 설명한 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법에 의해 제조된 톱밥배지가 사용되므로 자세한 설명은 생략하기로 한다.Referring to FIGS. 1 to 8, a method of cultivating bok-ryeong using sawdust medium prepared by a method of manufacturing sawdust medium for cultivation of bok-ryeong seeds using pine tree nematode disease according to another embodiment of the present invention will be described. The method of cultivation is the seeding culture step of inoculating the sawdust medium after inoculating the seed germ seed, and then cultivating the sawdust culture to form sawdust cultures, and the heat treatment after chemical treatment of the pine tree wilt disease dead wood to form the seedlings for inoculating the sawdust cultures. , Bokryeong culture step of inoculating sawdust cultivation seed in the tree and then incubating to produce Bokryeong. The sawdust badge is a sawdust badge prepared by a method of manufacturing a sawdust medium for cultivation of Bokryeong spp. using the pine tree nematode dead tree described above, so a detailed description thereof will be omitted.

상기 종균배양단계는 상기 톱밥배지에 복령 종균을 접종한 후 배양하여 톱밥배양종균을 형성하는 단계로, 죽은 소나무로부터 얻은 톱밥배지에 복령 종균을 접종하여 배양하는 종래의 방법이 이용될 수 있다. 예컨대, 상기 톱밥배지를 용기에 넣고 액상의 복령 종균을 넣고 24 내지 28℃의 온도로 2 내지 3주 동안 유지하여 톱밥배양종균을 형성할 수 있다.The seeding culture step is a step of inoculating the sawdust medium after inoculating the Bokryeong seed germ to form a sawdust culture seed, and a conventional method of inoculating and culturing the sawdust medium obtained from dead pine can be used. For example, the sawdust medium can be placed in a container and liquid bokryeong seeds are added and maintained at a temperature of 24 to 28° C. for 2 to 3 weeks to form sawdust cultures.

상기 자목형성단계는 소나무 재선충병 고사목을 화학 처리후 열처리하여 톱밥배양종균을 접종하기 위한 자목을 형성하는 단계로, 원목수득단계, 화학처리단계, 건조단계, 열처리단계 등을 포함한다.The lumber formation step is a step of forming a lumber for inoculating sawdust cultivation by chemically treating the pine tree nematode disease dead wood, and includes a raw material harvesting step, a chemical treatment step, a drying step, and a heat treatment step.

상기 원목수득단계는 소나무 재선충병 고사목을 절단하여 일정 직경과 길이를 가지는 원목을 수득하는 단계이다.The step of acquiring wood is a step of obtaining wood having a certain diameter and length by cutting dead pine trees.

상기 화학처리단계는 상기 원목수득단계에서 얻은 원목에 과초산 희석액을 처리하는 단계호, 예컨대 상기 원목에 과초산 희석액을 분무하거나 상기 원목을 과초산 희석액에 일정 시간 침지하여 수행될 수 있으며, 과초산을 물에 섞어 0.8 내지 1.2%농도를 가지도록 한 과초산 희석액이 사용되며 25 내지 35초 동안 분무하거나 침지하는 것이 바람직하다.The chemical treatment step may be performed by treating the raw wood obtained in the wood harvesting step with a peracetic acid diluent, for example, spraying the peracetic acid diluent on the wood or immersing the raw material in a peracetic acid diluent for a certain period of time, and peracetic acid Dilute peracetic acid to have a concentration of 0.8 to 1.2% by mixing with water, and it is preferable to spray or immerse for 25 to 35 seconds.

상기 건조단계는 상기 화학처리단계에서 화학처리된 원목을 건조시키는 단계로, 예컨대 50℃로 설정된 오븐을 이용하여 160 내지 400분 동안 건조하여 수행될 수 있다. 상기 건조단계에서 상기 원목이 제대로 건조되지 않으면 상기 원목에 과초산 희석액이 잔류하여 상기 복령의 재배를 저해하게 된다.The drying step is a step of drying the wood chemically treated in the chemical treatment step, for example, it may be performed by drying for 160 to 400 minutes using an oven set at 50°C. If the wood is not properly dried in the drying step, a dilute peracetic acid remains in the wood, thereby inhibiting the cultivation of the puffer fish.

상기 열처리단계는 상기 건조단계에서 건조된 원목에 열을 가해 처리하는 단계로, 고압의 스팀을 건조된 원목에 가해 115 내지 130℃로 100 내지 150분 동안 열처리하는 것이 바람직하다. 상기 열처리단계에서는 스팀을 이용하여 열처리를 수행하므로 원목이 복령 재배가 가능한 함수율을 가질 수 있도록 할 수 있다. 상기 열처리단계는 예컨대 오토클레이브(autoclave) 등의 장치를 이용하여 수행될 수 있다. 상기 소나무 재선충병 고사목을 절단하여 얻은 원목에 대해 바로 상기 열처리단계를 수행하여 소나무재선충을 사멸시킬 수 있으나 복령 재배는 불가능한 바, 본 발명은 소나무 재선충병 고사목에 얻은 원목을 과초산 용액으로 처리하고 건조 후 열처리를 수행하여 복령 재배가 가능한 자목을 수득하게 된다.The heat treatment step is a step of applying heat to the dried wood in the drying step, and it is preferable to heat the steam at 115 to 130° C. for 100 to 150 minutes by adding high-pressure steam to the dried wood. In the heat treatment step, heat treatment is performed using steam, so that the wood can have a moisture content capable of cultivating bok-ryeong. The heat treatment step may be performed using an apparatus such as an autoclave. It is possible to kill the pine wilt disease by performing the heat treatment step directly on the wood obtained by cutting the pine wilt disease, but the present invention is impossible to grow pine trees. Then, heat treatment is performed to obtain a lumber capable of cultivation in Fueryeong.

상기 복령배양단계는 상기 자목형성단계에서 얻은 자목에 상기 종균배양단계에서 얻은 톱밥배양종균을 접종한 후 배양하여 복령을 생산하는 단계로, 죽은 소나무로부터 얻은 자목에 톱밥배양종균을 접종하여 배양하는 종래의 방법이 이용될 수 있다. 예컨대, 상기 통밥배양종균을 자목에 접종하고 24 내지 28℃의 온도로 5 내지 7개월 유지하여 복령을 수득할 수 있다.The cultivation step is a step of inoculating the wood obtained in the wood formation step and inoculating the sawdust culture obtained in the seed culture step, followed by cultivation to produce bokyeong, and inoculating the wood from the dead pine tree and inoculating the wood with sawdust culture. Method of can be used. For example, the whole rice cultured seed can be inoculated into a tree and maintained at a temperature of 24 to 28° C. for 5 to 7 months to obtain bokryeong.

이하, 실시예를 통해서 본 발명을 보다 상세히 설명하기로 한다. 하지만, 이들은 본 발명을 보다 상세하게 설명하기 위한 것일 뿐 본 발명의 권리범위가 이에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. However, these are only for explaining the present invention in more detail, and the scope of the present invention is not limited thereto.

<실시예 1> 톱밥시료의 준비<Example 1> Preparation of sawdust samples

1. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목을 분쇄하여 톱밥을 수득하고, 상기 톱밥을 1% 과초산 수용액에 30초 동안 침지한 후 꺼내어 50℃로 설정된 오븐을 이용하여 180분 동안 건조하고, 건조된 상기 톱밥을 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 1시간 30분 동안 처리하여, 톱밥시료 1을 얻었다.1. Sawdust is obtained by crushing the dead tree of pine wilt disease in which blue mold is growing, and the sawdust is immersed in a 1% peracetic acid solution for 30 seconds, then taken out and dried for 180 minutes using an oven set at 50°C. The sawdust was treated with high pressure steam at 121°C for 1 hour and 30 minutes using an autoclave to obtain sawdust sample 1.

2. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목을 분쇄하여 톱밥을 수득하고, 상기 톱밥을 1% 과초산 수용액에 30초 동안 침지한 후 꺼내 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 1시간 30분 동안 처리하여, 톱밥시료 2를 얻었다.2. Sawdust is obtained by crushing the dead tree of the pine wilt disease in which blue mold is growing, and the sawdust is immersed in a 1% peracetic acid solution for 30 seconds, then taken out and used autoclave for 1 hour at 121°C under high pressure steam. After processing for 30 minutes, sawdust sample 2 was obtained.

3. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목을 분쇄하여 톱밥을 수득하고, 상기 톱밥을 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 1시간 30분 동안 열처리하고, 열처리된 톱밥을 1% 과초산 수용액에 30초 동안 침지한 후 꺼내어 50℃로 설정된 오븐을 이용하여 180분 동안 건조하여, 톱밥시료 3을 얻었다.3. Sawdust is obtained by crushing the dead tree of pine wilt disease where blue mold is growing, and the sawdust is heat-treated at 121°C for 1 hour and 30 minutes with high pressure steam using an autoclave, and the heat-treated sawdust is 1% and After immersing in an aqueous acetic acid solution for 30 seconds, it was taken out and dried for 180 minutes using an oven set at 50°C to obtain sawdust sample 3.

4. 1% 과초산 수용액 대신에 0.5% 과초산 수용액을 사용한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 1의 1과 동일하에 하여, 톱밥시료 4를 얻었다.4. Sawdust sample 4 was obtained under the same conditions as in Example 1, except that a 0.5% aqueous peracetic acid solution was used instead of a 1% aqueous peracetic acid solution.

5. 1% 과초산 수용액 대신에 2% 과초산 수용액을 사용한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 1의 1과 동일하에 하여, 톱밥시료 5를 얻었다.5. Sawdust sample 5 was obtained under the same conditions as in Example 1 except that a 2% aqueous peracetic acid solution was used instead of a 1% aqueous peracetic acid solution.

6. 1% 과초산 수용액 대신에 0.3% 과산화수소 수용액을 사용한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 1의 1과 동일하에 하여, 톱밥시료 6을 얻었다.6. Sawdust sample 6 was obtained under the same conditions as in Example 1, except that a 0.3% aqueous hydrogen peroxide solution was used instead of a 1% aqueous peracetic acid solution.

7. 정상적인 소나무(소나무 재선충병에 걸리지 않고 푸른곰팡이에 오염되지 않음)를 분쇄하여 얻은 톱밥을 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 1시간 30분 동안 처리하여, 톱밥시료 7을 얻었다.7. Sawdust obtained by crushing a normal pine tree (not affected by pine tree nematode disease and not contaminated with green mold) was treated with high pressure steam at 121°C for 1 hour and 30 minutes using an autoclave to obtain sawdust sample 7. .

8. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목을 분쇄하여 톱밥을 수득하고, 상기 톱밥을 톱밥시료 8로 하였다.8. Sawdust was obtained by crushing the dead wood of the pine wilt disease where green mold was growing, and the sawdust was used as sawdust sample 8.

9. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목을 분쇄하여 톱밥을 수득하고, 상기 톱밥을 1% 과초산 수용액에 30초 동안 침지한 후 꺼내어 50℃로 설정된 오븐을 이용하여 180분 동안 건조하여, 톱밥시료 9를 얻었다.9. Sawdust is obtained by crushing the dead tree of pine wilt disease in which blue mold is growing, and the sawdust is immersed in a 1% peracetic acid solution for 30 seconds, then taken out and dried for 180 minutes using an oven set at 50°C. Sample 9 was obtained.

10. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목을 분쇄하여 톱밥을 수득하고, 상기 톱밥을 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 1시간 30분 동안 처리하여, 톱밥시료 10을 얻었다.10. Sawdust was obtained by crushing the dead tree of the pine wilt disease in which blue mold is growing, and the sawdust was treated with autoclave at 121°C for 1 hour and 30 minutes to obtain sawdust sample 10.

<실시예 2> 톱밥시료의 오염 확인<Example 2> Confirmation of contamination of sawdust sample

1. 실시예 1에서 얻은 각 톱밥시료 10㎖ 및 멸균수 30㎖를 50ml Conical Tube에 넣어 vortex후 상층액 200㎕를 감자한천배지(PDA)에 도말하여 7일 후, 촬영하여 도 1 내지 3에 나타내었고(도 1의 경우 톱밥시료 1 사용, 도 2의 경우 톱밥시료 7 사용, 도 3의 경우 톱밥시료 10 사용), 또한 자라나는 Colony(오염)의 종류, Colony 개수, 오염 면적을 기록하여 표 1에 나타내었다.1. Put 10 ml of each sawdust sample obtained in Example 1 and 30 ml of sterile water into a 50 ml conical tube, vortex and apply 200 µl of the supernatant to potato agar medium (PDA), after 7 days, photographed in FIGS. 1 to 3 Table 1 shows the use of sawdust sample 1 in FIG. 1, sawdust sample 7 in FIG. 2, and sawdust sample 10 in FIG. 3, and also records the type of colony growing, the number of colonies, and the area of contamination. It is shown in.

2. 도 1 내지 3 및 표 1을 보면, 푸른 곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목에서 얻은 톱밥에 대해 1% 과초산 수용액을 이용한 화학처리 및 열처리를 수행하는 경우 오염이 발생하지 않은데 반해, 화학처리나 열처리 중 어느 하나만 수행하거나, 과초산 수용액의 농도가 낮은 경우 오염이 발생한 것을 확인할 수 있다.2. Referring to FIGS. 1 to 3 and Table 1, while the chemical treatment and heat treatment using a 1% peracetic acid solution for sawdust obtained from the pine wilt diseased tree with blue mold growing, while contamination does not occur, chemical treatment B. When only one of the heat treatments is performed or the concentration of the aqueous peracetic acid solution is low, it can be confirmed that contamination occurred.

Colony 종류 Colony type Colony 개수 Colony Count 오염 면적(%)Contaminated area (%) 톱밥시료 1Sawdust Sample 1 00 00 00 톱밥시료 2Sawdust Sample 2 00 00 00 톱밥시료 3Sawdust Sample 3 00 00 00 톱밥시료 4Sawdust Sample 4 1One 22 66 톱밥시료 5Sawdust Sample 5 00 00 00 톱밥시료 6Sawdust Sample 6 00 00 00 톱밥시료 7Sawdust Sample 7 00 00 00 톱밥시료 8Sawdust Sample 8 22 1010 100100 톱밥시료 9Sawdust Sample 9 1One 55 3030 톱밥시료 10Sawdust Sample 10 1One 44 1515

<실시예 3> 톱밥시료를 이용한 복령 종균 배양<Example 3> Culture of Bokryeong seeds using sawdust samples

1. 각 톱밥시료 10㎤당 열처리한 미강 2㎤, Ca 0.03g를 혼합한 후 용기에 담고 액상의 복령 종균 0.07g을 접종하여 26℃에서 7일 동안 배양한 후, 종균의 활착정도를 확인하여 표 2에 나타내었다. 톱밥시료에 아무것도 자라지 않으면 X로 평가하고, 톱밥시료에 자라는 복령 종균과 다른 곰팡이의 비율에 따라 1 내지 5로 평가하였으며, 복령 종균만 자라면 1로 평가하고 복령 종균이 다른 곰팡이보다 많이 자라면 2, 복령 종균과 다른 곰팡이가 비슷하면 3, 복령 종균이 다른 곰팡이보다 적게 자라면 4, 다른 곰팡이만 자라면 5로 평가하였다.1. After mixing 2 cm 3 of heat-treated rice bran per 10 cm 3 of each sawdust sample, 0.03 g of Ca, put it in a container, inoculate 0.07 g of liquid Pyeongnyeong spawn, incubate at 26° C. for 7 days, and confirm the degree of spawning. It is shown in Table 2. If nothing grows on the sawdust sample, it is evaluated as X, and it is evaluated as 1 to 5 according to the ratio of the fungus seed germ and other fungi growing on the sawdust sample, and it is evaluated as 1 if only the germ germ is grown, and 2 if the germ germ grows more than other fungi. , It was evaluated as 3 if the fungus was different from the other fungi, 4 if the fungus was less than the other fungus, and 5 if the fungus was only grown.

2. 표 2를 보면, 푸른 곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목에서 얻은 톱밥에 대해 1% 과초산 수용액을 이용한 화학처리 후 열처리를 수행하는 경우 복령 종균이 잘 자라나, 화학처리 후 건조과정을 거치지 않거나 고농도의 과초산을 사용하는 경우 다른 곰팡이뿐만 아니라 복령 종균도 자리지 못함을 알 수 있다. 또한, 과초산의 농도가 너무 낮거나 열처리만 한 경우 복령 종균뿐만 아니라 다른 곰팡이도 자라게 되며, 화학처리만 하거나, 열처리 후 화학처리를 하는 경우 톱밥배지의 환경이 복령 종균에 생육에 접합하지 못해 복령 종균이 자라지 못하며, 과산화수소의 경우 저농도로 사용하였음에도 복령 종균의 배양에는 유해한 것을 알 수 있다.2. Referring to Table 2, in the case of heat treatment after chemical treatment with 1% peracetic acid solution for sawdust obtained from the pine wilt disease of pine wilt disease, where blue mold grows, the Bokryeong spawn grows well, but does not undergo drying after chemical treatment. It can be seen that when using a high concentration of peracetic acid, not only other fungi, but also bacteria of Bokryeong are not located. In addition, if the concentration of peracetic acid is too low or heat treatment is performed, other fungi will grow as well as bacterial seeds. It can be seen that the seed bacterium does not grow, and hydrogen peroxide is harmful to the culture of the Bokryeong spawn even though it is used at a low concentration.

톱밥시료 1Sawdust Sample 1 톱밥시료 2Sawdust Sample 2 톱밥시료 3Sawdust Sample 3 톱밥시료 4Sawdust Sample 4 톱밥시료 5Sawdust Sample 5 활착정도Degree of survival 1One XX XX 33 XX 톱밥시료 6Sawdust Sample 6 톱밥시료 7Sawdust Sample 7 톱밥시료 8Sawdust Sample 8 톱밥시료 9Sawdust Sample 9 톱밥시료 10Sawdust Sample 10 활착정도Degree of survival XX 1One 55 XX 33

<실시예 4> 톱밥시료에 존재하는 재선충 확인<Example 4> Confirming the nematode present in the sawdust sample

톱밥시료 1, 7 및 8에 대하여 Baerman Funnel을 이용하여 소나무재선충을 검출한 결과, 톱밥시료 1 및 7에는 소나무재선충이 검출되지 않았으나 톱밥시료 8에서는 재선충이 검출되었다. 이를 통해, 푸른 곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목에서 얻은 톱밥을 1% 과초산 수용액을 이용한 화학처리 후 열처리를 수행하는 경우 소나무 재선충을 사멸시킬 수 있음을 알 수 있다.As a result of detecting pine nematodes using Baerman Funnel for sawdust samples 1, 7, and 8, pine nematodes were not detected in sawdust samples 1 and 7, but re- nematodes were detected in sawdust samples 8. Through this, it can be seen that pine wilt disease can be killed when heat treatment is performed after chemical treatment using 1% peracetic acid solution of sawdust obtained from dead pine tree nematode disease where blue mold is growing.

<실시예 5> 자목 시료의 준비<Example 5> Preparation of wood sample

1. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무 재선충병 고사목을 절단하여 직경 15cm, 길이 20cm를 가지는 원목을 준비하고, 상기 원목을 1% 과초산 수용액에 30초 동안 침지한 후 꺼내어 50℃로 설정된 오븐을 이용하여 250분 동안 건조하고, 건조된 상기 원목을 내열성 폴리프로필렌 봉지로 포장하고(입봉 부분은 통기필터를 장착한 복령 재배용 캡으로 봉함) 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 2시간 동안 처리하여, 자목시료 1을 얻었다.1.Preparing a tree with a diameter of 15 cm and a length of 20 cm by cutting the pine tree nematode disease growing blue mold, immersing the tree in a 1% peracetic acid solution for 30 seconds and taking it out and using an oven set to 50°C. After drying for 250 minutes, the dried wood is packaged in a heat-resistant polypropylene bag (the sealing part is sealed with a cap for cultivation of puffer fish equipped with a ventilation filter) and treated with high pressure steam at 121°C for 2 hours using an autoclave. By doing so, a sample 1 of the wood was obtained.

2. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무 재선충병 고사목을 절단하여 직경 15cm, 길이 20cm를 가지는 원목을 준비하고, 상기 원목을 1% 과초산 수용액에 30초 동안 침지한 후 꺼내 내열성 폴리프로필렌 봉지로 포장하고(입봉 부분은 통기필터를 장착한 복령 재배용 캡으로 봉함) 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 2시간 동안 처리하여, 자목시료 2를 얻었다.2. Cut a pine tree nematode disease tree growing blue mold, prepare a tree having a diameter of 15 cm and a length of 20 cm, immerse the tree in a 1% aqueous peracetic acid solution for 30 seconds, take it out and pack it in a heat-resistant polypropylene bag ( The sealing part is sealed with a cap for cultivation of bokyeong equipped with a ventilation filter) Using autoclave, it was treated with high-pressure steam at 121°C for 2 hours to obtain a lumber sample 2.

3. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무 재선충병 고사목을 절단하여 직경 15cm, 길이 20cm를 가지는 원목을 준비하고, 상기 원목을 내열성 폴리프로필렌 봉지로 포장하고(입봉 부분은 통기필터를 장착한 복령 재배용 캡으로 봉함) 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 2시간 동안 열처리하고, 상기 봉지에서 원목을 꺼내 1% 과초산 수용액에 30초 동안 침지한 후 꺼내어 50℃로 설정된 오븐을 이용하여 250분 동안 건조하고 내열성 폴리프로필렌 봉지로 다시 포장하여(입봉 부분은 통기필터를 장착한 복령 재배용 캡으로 봉함), 자목시료 3을 얻었다.3. Cut the dead tree of pine wilt disease growing on green mold, prepare solid wood having a diameter of 15 cm and a length of 20 cm, and pack the wood with a heat-resistant polypropylene bag (the sealing part is sealed with a cap for cultivation of bokyeong equipped with a ventilation filter) ) Heat treatment at 121℃ for 2 hours with high pressure steam using autoclave, take out the wood from the bag, immerse it in 1% peracetic acid solution for 30 seconds, take it out and use it for 50 minutes using the oven set at 50℃ It was dried and re-packaged with a heat-resistant polypropylene bag (the sealed part was sealed with a cap for cultivation of puffer fish equipped with a ventilation filter) to obtain a woody sample 3.

4. 1% 과초산 수용액 대신에 0.5% 과초산 수용액을 사용한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 2의 1과 동일하에 하여, 자목시료 4를 얻었다.4. Except for using a 0.5% peracetic acid aqueous solution in place of the 1% peracetic acid aqueous solution, other conditions were the same as those in Example 2, to obtain a lumber sample 4.

5. 1% 과초산 수용액 대신에 2% 과초산 수용액을 사용한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 2의 1과 동일하에 하여, 자목시표 5을 얻었다.5. Other conditions were the same as those in Example 2 1, except that a 2% aqueous peracetic acid solution was used instead of a 1% aqueous peracetic acid solution, to obtain a title mark 5.

6. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무 재선충병 고사목을 절단하여 직경 15cm, 길이 20cm를 가지는 원목을 준비하고, 상기 원목을 80% 메탄올 수용액에 30초 동안 침지한 후 꺼내어 50℃로 설정된 오븐을 이용하여 300분 동안 충분히 건조하고, 건조된 상기 원목을 내열성 폴리프로필렌 봉지로 포장하고(입봉 부분은 통기필터를 장착한 복령 재배용 캡으로 봉함) 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 2시간 동안 처리하여, 자목시료 6을 얻었다.6. Prepare a log having a diameter of 15cm and a length of 20cm by cutting the pine tree nematode tree growing blue mold, and immersing the log in 80% methanol aqueous solution for 30 seconds, then taking it out and using the oven set at 50°C. 300 Dry sufficiently for a minute and pack the dried wood in a heat-resistant polypropylene bag (the sealing part is sealed with a cap for cultivation of cultivated puffer fish equipped with a ventilation filter) and treated with high pressure steam at 121°C for 2 hours using an autoclave. Thus, a sample 6 of the wood was obtained.

7. 정상적인 소나무(소나무 재선충병에 걸리지 않고 푸른곰팡이에 오염되지 않음)를 절단하여 직경 15cm, 길이 20cm를 가지는 원목을 준비하고, 상기 원목을 내열성 폴리프로필렌 봉지로 포장하고(입봉 부분은 통기필터를 장착한 복령 재배용 캡으로 봉함) 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 2시간 동안 처리하여, 자목시료 7을 얻었다.7. Cut a normal pine tree (not contaminated with pine tree nematode and not contaminated with blue mold) to prepare a tree having a diameter of 15 cm and a length of 20 cm, and packing the tree with a heat-resistant polypropylene bag (the sealing part is a ventilation filter. Sealed with a cap for cultivation of the installed bokyeong) The autoclave was used for 2 hours at 121°C with high-pressure steam to obtain a lumber sample 7.

8. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무 재선충병 고사목을 절단하여 직경 15cm, 길이 20cm를 가지는 원목을 준비하고, 상기 원목을 내열성 폴리프로필렌 봉지로 포장하여(입봉 부분은 통기필터를 장착한 복령 재배용 캡으로 봉함) 자목시료 8로 하였다.8. Cut a pine tree nematode disease tree growing blue mold, prepare a tree having a diameter of 15 cm and a length of 20 cm, and wrap the tree with a heat-resistant polypropylene bag (the sealing part is sealed with a cap for cultivation of bokyeong equipped with a ventilation filter) ) The sample of wood was 8.

9. 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무 재선충병 고사목을 절단하여 직경 15cm, 길이 20cm를 가지는 원목을 준비하고, 상기 원목을 1% 과초산 수용액에 30초 동안 침지한 후 꺼내어 50℃로 설정된 오븐을 이용하여 250분 동안 건조하고, 내열성 폴리프로필렌 봉지로 포장하여(입봉 부분은 통기필터를 장착한 복령 재배용 캡으로 봉함) 자목시료 9를 얻었다.9. Prepare a log having a diameter of 15cm and a length of 20cm by cutting the pine tree nematode disease growing blue mold, and immersing the log in a 1% peracetic acid solution for 30 seconds and taking it out and using an oven set at 50℃. It was dried for 250 minutes and packaged with a heat-resistant polypropylene bag (the sealing part was sealed with a cap for cultivation of bok-ryeong equipped with a ventilation filter) to obtain a wood sample 9.

10 푸른곰팡이가 자라고 있는 소나무 재선충병 고사목을 절단하여 직경 15cm, 길이 20cm를 가지는 원목을 준비하고, 상기 원목을 내열성 폴리프로필렌 봉지로 포장하고(입봉 부분은 통기필터를 장착한 복령 재배용 캡으로 봉함) 오토크래이브를 이용하여 고압 스팀으로 121℃에서 2시간 동안 처리하여, 자목시료 10을 얻었다.10 Cut a dead tree of pine wilt disease growing on green mold, prepare a tree having a diameter of 15 cm and a length of 20 cm, and pack the tree with a heat-resistant polypropylene bag (the sealing part is sealed with a cap for cultivation of bokyeong equipped with a ventilation filter). The autoclave was treated with high pressure steam at 121°C for 2 hours to obtain a woody sample 10.

<실시예 6> 자목시료의 오염확인<Example 6> Confirmation of contamination of wood samples

1. 실시예 5에서 얻은 각 자목시료에 대하여 드릴을 이용하여 구멍(25cm2)을 형성하여, 상면으로부터 10cm 깊이까지 톱밥을 채취한 후, 각 톱밥 10㎖ 및 멸균수 30㎖를 50ml Conical Tube에 넣어 vortex후 상층액 200㎕를 감자한천배지(PDA)에 도말하여 7일 후, 촬영하여 도 4 내지 6에 나타내었고(도 4의 경우 자목시료 1로부터 얻은 톱밥 사용, 도 5의 경우 자목시료 7로부터 얻은 톱밥 사용, 도 6의 경우 자목시료 10으로부터 얻은 톱밥 사용), 또한 자라나는 Colony(오염)의 종류, Colony 개수, 오염 면적을 기록하여 표 3에 나타내었다.1. For each wood sample obtained in Example 5, a hole (25 cm 2 ) was formed using a drill to collect sawdust to a depth of 10 cm from the top surface, and then 10 ml of each sawdust and 30 ml of sterile water were added to a 50 ml conical tube. After putting vortex, 200 μl of the supernatant was smeared on potato agar medium (PDA), 7 days later, photographed and shown in FIGS. 4 to 6 (in the case of FIG. 4, using sawdust obtained from the lumber sample 1, in the case of FIG. 5) The use of sawdust obtained from, the use of sawdust obtained from wood sample 10 in the case of Figure 6), the type of colony (contamination) growing, the number of colonies, and the area of contamination are recorded in Table 3.

2. 도 4 내지 6 및 표 3을 보면, 푸른 곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목에서 얻은 자목에 대해 1% 과초산 수용액을 이용한 화학처리 및 열처리를 수행하는 경우 오염이 발생하지 않은데 반해, 화학처리나 열처리 중 어느 하나만 수행하거나, 과초산 수용액의 농도가 낮은 경우 오염이 발생한 것을 확인할 수 있다.2. Referring to FIGS. 4 to 6 and Table 3, when the chemical treatment and heat treatment with 1% peracetic acid solution were performed on the trees obtained from the pine tree nematode disease growing trees with blue mold, the contamination did not occur, whereas the chemical treatment B. When only one of the heat treatments is performed or the concentration of the aqueous peracetic acid solution is low, it can be confirmed that contamination occurred.

Colony 종류 Colony type Colony 개수 Colony Count 오염 면적(%)Contaminated area (%) 자목시료 1Timber Sample 1 00 00 00 자목시료 2Timber Sample 2 00 00 00 자목시료 3Woodwork Sample 3 00 00 00 자목시료 4Timber Sample 4 1One 55 1010 자목시료 5Subject Sample 5 00 00 00 자목시료 6Timber Sample 6 00 00 00 자목시료 7Timber Sample 7 00 00 00 자목시료 8Timber Sample 8 1One 5050 9090 자목시료 9Timber Sample 9 1One 1717 4545 자목시료 10Timber Sample 10 22 1313 3030

<실시예 7> 자목시료를 이용한 복령 배양<Example 7> Bokryeong culture using the woody sample

1. 톱밥시료(실시예 1의 1에서 얻은 톱밥시료 1 사용) 10㎤당 열처리한 미강 2㎤, Ca 0.03g를 혼합한 후 용기에 담고 액상의 복령 종균 0.07g을 접종하여 26℃에서 2주 동안 배양한 후 얻은 톱밥배양종균 5g을 각 자목시료에 접종하고 26℃에서 7일 동안 배양한 후, 촬영하여 도 7에 나타내었고(도 7의 경우 자목시료 1 사용), 또한 복령 종균의 활착정도를 확인하여 표 4에 나타내었다. 자목시료에 아무것도 자라지 않으면 X로 평가하고, 자목시료에 자라는 복령 종균과 다른 곰팡이의 비율에 따라 1 내지 5로 평가하였으며, 복령 종균만 자라면 1로 평가하고 복령 종균이 다른 곰팡이보다 많이 자라면 2, 복령 종균과 다른 곰팡이가 비슷하면 3, 복령 종균이 다른 곰팡이보다 적게 자라면 4, 다른 곰팡이만 자라면 5로 평가하였다.1. Sawdust sample (using sawdust sample 1 obtained in Example 1 1) 2 cm 3 of heat-treated rice per 10 cm 3, mixed with 0.03 g of Ca, placed in a container, inoculated with 0.07 g of liquid bokjae spawn, inoculated for 2 weeks at 26℃ After incubation, 5 g of sawdust cultured bacteria obtained after incubation was inoculated into each woody sample and cultured for 7 days at 26° C., and then photographed and shown in FIG. 7 (in the case of FIG. 7, woody sample 1 was used). It was confirmed and shown in Table 4. It was evaluated as X if nothing grew on the wood sample, and was evaluated as 1 to 5 according to the ratio of the fungal seed germ and other fungi growing on the wood sample, evaluated as 1 if only the germ germ grew, and 2 if the germ germ grew more than other fungi. , It was evaluated as 3 if the fungus was different from the other fungi, 4 if the fungus was less than the other fungus, and 5 if the fungus was only grown.

2. 표 4를 보면, 푸른 곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목에서 얻은 원목에 대해 1% 과초산 수용액을 이용한 화학처리 후 열처리를 수행하는 경우 복령 종균이 자목에 잘 활착되나(도 7을 통해서도 복령 종균이 자목에 잘 활착된 것을 확인할 수 있음), 화학처리 후 건조과정을 거치지 않거나 고농도의 과초산을 사용하는 경우 다른 곰팡이뿐만 아니라 복령 종균도 자목에서 자리지 못함을 알 수 있다. 또한, 과초산의 농도가 너무 낮거나 열처리만 한 경우 복령 종균뿐만 아니라 다른 곰팡이도 자목에서 자라게 되며, 화학처리만 하거나 열처리 후 화학처리를 하는 경우 자목의 환경이 복령 종균에 생육에 접합하지 못해 복령 종균이 자목에 활착되지 못하며, 메탄올을 이용하여 화학처리하는 경우 복령 종균이 자목에 잘 활작되지 않는 것을 확인할 수 있다.2. Referring to Table 4, when heat treatment is performed after chemical treatment using 1% peracetic acid solution for the raw material obtained from the dead tree of the pine wilt disease where the blue mold grows, the Bokryeong seed germ is well attached to the tree (also through FIG. 7) It can be seen that the seed germ adhered well to the tree), and if it does not undergo a drying process after chemical treatment or uses a high concentration of peracetic acid, it can be seen that the seed fungus as well as other fungi cannot be found in the tree. In addition, if the concentration of peracetic acid is too low or heat treatment is performed, other fungi, as well as cultivars of bok-ryeong, will grow on the lumber. It can be confirmed that the seed germ does not adhere to the head, and when chemical treatment is performed with methanol, the seed germ does not work well on the head.

톱밥시료 1Sawdust Sample 1 톱밥시료 2Sawdust Sample 2 톱밥시료 3Sawdust Sample 3 톱밥시료 4Sawdust Sample 4 톱밥시료 5Sawdust Sample 5 활착정도Degree of survival 1One XX XX 44 XX 톱밥시료 6Sawdust Sample 6 톱밥시료 7Sawdust Sample 7 톱밥시료 8Sawdust Sample 8 톱밥시료 9Sawdust Sample 9 톱밥시료 10Sawdust Sample 10 활착정도Degree of survival XX 1One 55 XX 33

<실시예 8> 자목시료에 존재하는 재선충 확인<Example 8> Confirming the nematode present in the wood sample

실시예 6에서 얻은 자목시료 1, 7 및 8에 대한 톱밥에 대하여 Baerman Funnel을 이용하여 소나무재선충을 검출한 결과, 자목시료 1 및 7의 톱밥에서는 소나무재선충이 검출되지 않았으나 자목시료 8의 톱밥에서는 재선충이 검출되었다. 이를 통해, 푸른 곰팡이가 자라고 있는 소나무재선충병 고사목에서 얻은 원목을 1% 과초산 수용액을 이용한 화학처리 후 열처리를 수행하는 경우 소나무 재선충을 사멸시킬 수 있음을 알 수 있다.As a result of detecting pine wilt using the Baerman Funnel for sawdust for the wood samples 1, 7 and 8 obtained in Example 6, pine wood wilt was not detected in the sawdust of wood samples 1 and 7, but the sawdust of wood sample 8 was re- nematode Was detected. Through this, it can be seen that the pine tree nematode can be killed when heat treatment is performed after chemical treatment using a 1% aqueous peracetic acid solution of the tree obtained from the dead tree of the pine wilt disease where blue mold is growing.

<실시예 9> 소나무 재선충병 고사목을 이용한 복령의 재배<Example 9> Cultivation of Bokryeong using pine tree nematode disease

톱밥시료(실시예 1의 1에서 얻은 톱밥시료 1 사용) 10㎤당 열처리한 미강 2㎤, Ca 0.03g를 혼합한 후 용기에 담고 액상의 복령 종균 0.07g을 접종하여 26℃에서 2주 동안 배양한 후 얻은 톱밥배양종균 5g를, 실시예 5에서 얻은 각 자목시료에 접종하고 26℃에서 6개월 동안 배양하여 복령을 재배한 후, 촬영하여 도 8에 나타내었다. 도 8에서 확인할 수 있는 바와 같이, 소나무 재선충변 고사목을 이용하여, 톱밥배지, 자목을 만들고 이를 이용하여도 복령이 잘 재배됨을 확인할 수 있다.Sawdust sample (use of sawdust sample 1 obtained in Example 1 1) 2 cm 3 of heat-treated rice per 10 cm 3, mixed with 0.03 g of Ca, placed in a container, inoculated with 0.07 g of liquid bokryeong spawn, incubated at 26° C. for 2 weeks After inoculation of 5 g of sawdust cultures obtained after the inoculation into each wood sample obtained in Example 5, cultured at 26° C. for 6 months, cultivation of boknyeong, photographed and shown in FIG. As can be seen in Figure 8, by using the pine tree nematode dead tree, sawdust badge, and make a tree, using this it can be confirmed that the well-cultivated bokyeong.

이상에서, 출원인은 본 발명의 바람직한 실시예들을 설명하였지만, 이와 같은 실시예들은 본 발명의 기술적 사상을 구현하는 일 실시예일 뿐이며 본 발명의 기술적 사상을 구현하는 한 어떠한 변경예 또는 수정예도 본 발명의 범위에 속하는 것으로 해석되어야 한다.In the above, the applicant has described the preferred embodiments of the present invention, but these embodiments are only one embodiment for implementing the technical concept of the present invention and any modification or modification of the present invention as long as the technical concept of the present invention is implemented It should be construed as being within the scope.

Claims (10)

소나무 재선충병 고사목을 분쇄하여 톱밥을 얻는 톱밥수득단계와, 상기 톱밥에 열을 가해 열처리하는 열처리단계를 포함하는 것을 특징으로 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법.A method for producing sawdust medium for cultivation of Bokryeong spawn, characterized in that it comprises a sawdust harvesting step of obtaining sawdust by crushing the dead tree of pine wilt disease and a heat treatment step of applying heat to the sawdust. 제1항에 있어서,
상기 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법은 상기 톱밥수득단계에서 얻은 톱밥에 과초산 희석액을 처리하는 화학처리단계와, 상기 화학처리단계 후 톱밥을 과초산 희석액에서 꺼내 건조시켜 상기 톱밥에 잔류하는 과초산 희석액을 제거하는 건조단계를 추가로 포함하며,
상기 열처리단계에서는 상기 건조단계에서 건조된 톱밥에 열을 가해 열처리하는 것을 특징으로 하는 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법.
According to claim 1,
The manufacturing method of the sawdust medium for cultivation of Bokryeong seeds is a chemical treatment step of processing a dilute peracetic acid in sawdust obtained in the sawdust harvesting step, and after removing the sawdust from a peracetic acid diluent and drying it, remaining in the sawdust Further comprising a drying step of removing the acetic acid diluent,
In the heat treatment step, a method of manufacturing a sawdust medium for cultivation of bokryeong seeds, characterized in that heat is applied to the sawdust dried in the drying step.
제2항에 있어서, 상기 소나무 재선충병 고사목은
곰팡이류에 의해 2차 감염된 것을 특징으로 하는 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법.
According to claim 2, The pine wilt disease dead wood
Method for producing sawdust medium for cultivation of Bokryeong spawn, characterized by being secondaryly infected by fungi.
제3항에 있어서, 상기 과초산 희석액은
과초산을 물에 섞어 0.8 내지 1.2%농도를 가지도록 한 과초산 희석액이 사용되는 것을 특징으로 하는 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법.
The method of claim 3, wherein the dilute peracetic acid
A method of manufacturing sawdust medium for cultivating bokryeong spawn, characterized in that a dilute peracetic acid is used in which peracetic acid is mixed with water to have a concentration of 0.8 to 1.2%.
제4항에 있어서, 상기 화학처리단계는
톱밥을 과초산 희석액에 25 내지 35초 동안 침지하여 행하여지는 것을 특징으로 하는 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법.
The method of claim 4, wherein the chemical treatment step
Method of producing a sawdust medium for cultivating bokryeong spawn, characterized in that the sawdust is immersed in dilute peracetic acid for 25 to 35 seconds.
제3항에 있어서, 상기 열처리단계는
고압의 스팀을 건조된 톱밥에 가해 행하여지는 것을 특징으로 하는 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법.
The method of claim 3, wherein the heat treatment step
Method of manufacturing a sawdust medium for cultivation of Bokryeong seed bacteria, characterized in that it is performed by applying high pressure steam to dried sawdust.
제3항에 있어서, 상기 열처리단계는
고압의 스팀을 건조된 톱밥에 가해 115 내지 130℃로 70 내지 120분 동안 열처리하여, 열처리 후 톱밥의 함수율이 50 내지 70%를 가지도록 하는 것을 특징으로 하는 복령 종균 배양용 톱밥배지의 제조방법.
The method of claim 3, wherein the heat treatment step
A method of manufacturing sawdust medium for cultivation of Bokryeong spawn, characterized in that high-pressure steam is added to the dried sawdust and heat-treated at 115 to 130°C for 70 to 120 minutes, so that the water content of sawdust is 50 to 70% after heat treatment.
톱밥배지에 복령 종균을 접종한 후 24 내지 28℃의 온도로 2 내지 3주 동안 유지하여 톱밥배양종균을 형성하는 종균배양단계와, 소나무 재선충병 고사목을 화학 처리후 열처리하여 톱밥배양종균을 접종하기 위한 자목을 형성하는 자목형성단계와, 상기 자목에 톱밥배양종균을 접종한 후 배양하여 복령을 생산하는 복령배양단계를 포함하며,
상기 톱밥배지는 제3항 내지 제7항 중 어느 한 항의 제조방법에 의해 제조된 톱밥배지가 사용되는 것을 특징으로 하는 복령의 재배방법.
After inoculating the sawdust medium with sawdust medium for 2 to 3 weeks at a temperature of 24 to 28°C, a seed culture step of forming sawdust cultures, and chemical treatment of the pine tree wilt disease dead tree, followed by heat treatment to inoculate the sawdust cultures And a cultivation step of forming a lumber for the cultivation, and a cultivation step of inoculating sawdust cultivation on the lumber and then incubating to produce bokyeong.
The sawdust badge is a cultivation method of Bokryeong, characterized in that the sawdust badge manufactured by the method of any one of claims 3 to 7.
제8항에 있어서,
상기 자목형성단계는 소나무 재선충병 고사목으로부터 얻은 원목에 과초산 희석액을 처리하는 화학처리단계와, 상기 화학처리단계에서 화학처리된 원목을 건조시켜 상기 원목에 잔류하는 과초산 희석액을 제거하는 건조단계와, 상기 건조단계에서 건조된 원목에 열을 가해 열처리하는 열처리단계를 포함하며,
상기 소나무 재선충병 고사목은 곰팡이류에 의해 2차 감염된 것을 특징으로 하는 복령의 제배방법.
The method of claim 8,
The tree formation step includes a chemical treatment step of treating a peracetic acid diluent on a tree obtained from a pine tree nematode disease, and a drying step of drying the chemically treated tree in the chemical treatment step to remove the peracetic acid diluent remaining in the tree. , Including the heat treatment step of heat treatment by applying heat to the wood dried in the drying step,
The pine wilt disease dead wood is a secondary infection method characterized in that the secondary infection by fungi.
제9항에 있어서,
상기 화학처리단계는 과초산을 물에 섞어 0.8 내지 1.2%농도를 가지도록 한 과초산 희석액을 준비하고, 원목을 상기 과초산 희석액에 25 내지 35초 동안 침지하거나, 원목에 상기 과초산 희석액을 25 내지 35초 동안 분무하여 행하여지며,
상기 열처리단계는 고압의 스팀을 건조된 원목에 가해 115 내지 130℃로 100 내지 150분 동안 열처리하여 수행되는 것을 특징으로 하는 복령의 재배방법.
The method of claim 9,
In the chemical treatment step, a peracetic acid dilution solution is prepared by mixing peracetic acid with water to have a concentration of 0.8 to 1.2%, and the wood is immersed in the peracetic acid dilution solution for 25 to 35 seconds, or the peracetic acid dilution solution is 25 It is done by spraying for 35 seconds,
The heat treatment step is a high-pressure steam is applied to the dried wood by heat treatment at 115 to 130 ℃ for 100 to 150 minutes, characterized in that the cultivation method of bokryeong.
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