KR102139328B1 - Cosmetic composition for skin cooling or improving skin redness with the extract of Eucommia Ulmoides bark - Google Patents

Cosmetic composition for skin cooling or improving skin redness with the extract of Eucommia Ulmoides bark Download PDF

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Abstract

본 발명은 천연물 유래 물질로 이루어진 화장료 조성물로, 구체적으로는 두충나무 껍질 추출물과 두충나무 껍질 추출물 내 함유되어 있는 제니포사이드, 아우큐빈을 이용하여 외부의 노출 된 열로 인한 홍조 완화용 또는 피부 온도 상승을 억제하는 피부 쿨링용 화장료 조성물 및 그 제조방법을 제공한다.The present invention is a cosmetic composition made of a material derived from a natural product, specifically, for reducing redness or increasing skin temperature due to externally exposed heat by using the genus biceps bark extract and geniposide and acubin contained in the cesium bark extract. Provided is a cosmetic composition for suppressing skin cooling and a method for manufacturing the same.

Description

두충나무 껍질 추출물을 함유하는 피부 쿨링 또는 피부 홍조 완화용 화장료 조성물{Cosmetic composition for skin cooling or improving skin redness with the extract of Eucommia Ulmoides bark}Cosmetic composition for skin cooling or improving skin redness with the extract of Eucommia Ulmoides bark}

본 발명은 두충나무 껍질 추출물을 함유하는 피부 쿨링 또는 피부 홍조 완화용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition for skin cooling or skin flushing relief containing an extract of bark beetle.

피부는 인체의 약 16%를 차지하고 있는 부위로 인체의 표면을 덮고 있으며, 외부 환경과 직접적으로 접해 있어 온도, 습도와 같은 외부인자들과 밀접한 관계가 있다. 신체의 적정 체온은 36.5℃이며 피부는 5~6℃가 낮은 31℃가 적정 온도로, 적정 온도에서 너무 높거나 낮아지면 피부 건강이 저하될 수 있다. The skin covers the surface of the human body with an area that occupies about 16% of the human body, and is in direct contact with the external environment, which is closely related to external factors such as temperature and humidity. The optimal body temperature of the body is 36.5℃, and the skin is 31℃, which is 5~6℃, and the temperature is 31℃. If the temperature is too high or too low, skin health may deteriorate.

최근 지구는 기상관측 이래 최고 온도를 갱신하면서, 국내를 비롯한 전세계적으로 고온이 지속되었고, 현재 각국의 기후 정책을 이행하더라도 3℃ 이상의 온난화로 이어질 것이란 분석이 나오고 있다. 지구의 온도가 상승함에 따라 자외선, 적외선 등의 외부 환경에 의해 피부의 온도도 상승되며 이로 인해 피부 노화가 가속화되고 있다. 따라서 외부 자극에 의한 피부 온도 상으로부터 피부 적정 온도를 지키는 것이 필요한 실정이다.Recently, as the Earth has renewed its highest temperature since meteorological observations, it has been analyzed that high temperatures have continued throughout the world, including in Korea, and that even if current climate policies are implemented, it will lead to warming above 3℃. As the temperature of the earth rises, the temperature of the skin also rises due to external environments such as ultraviolet rays and infrared rays, thereby accelerating skin aging. Therefore, it is necessary to keep the proper skin temperature from the skin temperature caused by external stimuli.

피부 및 체온의 증가는 말초 면역 체계와 뇌 모두를 포함하는 복잡한 반응으로, 일반적인 열 경로에서, 프로스타글란딘 E2(Prostaglandin E2, PGE2)의 생산에 따라 체온이 상승한다. PGE2는 발열의 주요 매개체로, 전측 시상 하부에 있는 체온 조절 뉴런의 수용체에 결합하여 발열 작용을 나타내며, PGE2에 의한 혈관확장과 미세혈관 투과성 증대를 통해 감염된 조직으로의 혈류량이 증가하여 피부 홍조 및 부종이 발생하게 된다. 이와 관련하여 3D 인공 피부 모델을 이용한 실험에서 열 자극에 의해 PGE2의 생성을 증가시킨 연구 및 PGE synthase (PGES)의 발현과 이에 유도된 열충격 단백질 (Heat Shock Protein, HSP)-70의 발현도 연구된 바가 있다. The increase in skin and body temperature is a complex reaction involving both the peripheral immune system and the brain, and in the normal thermal pathway, body temperature rises with the production of Prostaglandin E2 (PGE2). PGE2 is a major mediator of fever. It binds to the receptors of thermoregulatory neurons located in the anterior hypothalamus and exhibits a fever action. Skin redness and swelling due to increased blood flow to the infected tissue through vasodilation and increased microvascular permeability by PGE2 This will happen. In this regard, in the experiment using a 3D artificial skin model, the study of increasing the production of PGE2 by thermal stimulation and the expression of PGE synthase (PGES) and the expression of heat shock protein (HSP)-70 induced therein were also studied. There is a bar.

그런데, PGE2와 관련하여 피부 열을 조절하는 것에 대해 천연물질 소재를 이용하는 연구는 미미한 실정이다. 이에 본 발명은 천연 식물 추출물을 함유하여 외부 자극으로 인한 피부 열을 조절해 줌으로써 피부 홍조 완화용 또는 피부 쿨링용 화장료 조성물을 개발하여 제공하고자 한다.However, research using natural materials for controlling skin heat in relation to PGE2 is insignificant. Accordingly, the present invention is to provide a cosmetic composition for alleviating skin flushing or cooling the skin by controlling the heat of the skin due to external stimulation by containing a natural plant extract.

대한민국 등록특허 제10-1860426호(등록일자:2018.05.16)는 황백 추출물을 이용한 피부냉감용 생약조성물 및 이의 제조방법과 이를 이용한 피부개선제품에 관한 것으로, 피부 및 피부속의 열화를 방지하며, 발생된 피부속열과 피부외열을 내려주는 효과 및 가려움증, 습진, 냄새, 부스럼, 발진의 예방 및 치료 개선 효과가 개시되어 있다.Republic of Korea Patent Registration No. 10-1860426 (Registration Date: 2018.05.16) relates to a herbal medicine composition for skin cooling using a yellow-white extract and a manufacturing method thereof and a skin improvement product using the same, and prevents deterioration of skin and skin, and occurs Disclosed is an effect of lowering the skin heat and skin heat, and improving the prevention and treatment of itchiness, eczema, odor, swelling, and rash.

본 발명은 외부 자극으로 인한 피부 열을 조절해 줌으로써 열에 의해 발생하는 피부 홍조 완화 및 피부 쿨링 효과가 뛰어난 천연물의 추출물을 발굴하고, 이를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 개발하여 제공하는 것을 목적으로 한다.An object of the present invention is to discover and extract an extract of a natural product having excellent skin flushing effect and skin cooling effect caused by heat by controlling skin heat caused by external stimulation, and to develop and provide a cosmetic composition containing it as an active ingredient. .

본 발명은 두충나무(Eucommia ulmoides) 껍질 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 홍조 완화용 화장료 조성물을 제공한다.The present invention provides a cosmetic composition for alleviating flushing, characterized in that it contains an extract of Eucommia ulmoides bark.

또한, 본 발명은 두충나무(Eucommia ulmoides) 껍질 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 온도 상승 억제용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition for inhibiting skin temperature rise, characterized in that it contains an extract of Eucommia ulmoides bark.

한편, 본 발명에 있어서, 상기 두충나무 껍질 추출물은, 바람직하게 PGE2 합성 효소 단백질의 발현을 저해시키는 것일 수 있다.On the other hand, in the present invention, the bark tree bark extract, preferably may be to inhibit the expression of PGE2 synthase protein.

한편, 본 발명에 있어서, 상기 두충나무 껍질 추출물은, 바람직하게 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.1 내지 20 중량%로 함유되는 것일 수 있다.On the other hand, in the present invention, the bark tree bark extract, preferably may be contained in 0.1 to 20% by weight relative to the total weight of the cosmetic composition.

또한, 본 발명은 제니포사이드(Geniposide)을 유효성분으로 함유하고 있는 것을 특징으로 하는 홍조 완화용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition for alleviating flushing, characterized in that it contains Geniposide as an active ingredient.

또한, 본 발명은 아우큐빈(Aucubin)을 유효성분으로 함유하고 있는 것을 특징으로 하는 홍조 완화용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition for alleviating flushing, characterized in that it contains Aucubin as an active ingredient.

또한, 본 발명은 제니포사이드(Geniposide)을 유효성분으로 함유하고 있는 것을 특징으로 하는 피부 온도 상승 억제용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition for inhibiting skin temperature rise, characterized in that it contains a geniposide (Geniposide) as an active ingredient.

또한, 본 발명은 아우큐빈(Aucubin)을 유효성분으로 함유하고 있는 것을 특징으로 하는 피부 온도 상승 억제용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition for inhibiting skin temperature rise, characterized in that it contains aucubin (Aucubin) as an active ingredient.

한편, 본 발명에 있어서, 상기 제니포사이드(Geniposide) 또는 아우큐빈(Aucubin)은, 바람직하게 PGE2 합성 효소 단백질의 발현을 저해시키는 것일 수 있다.On the other hand, in the present invention, the geniposide (Geniposide) or Aucubin (Aucubin), may preferably be to inhibit the expression of PGE2 synthase protein.

한편, 본 발명에 있어서, 상기 제니포사이드(Geniposide) 또는 아우큐빈(Aucubin)은, 바람직하게 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.1 내지 20 중량%로 함유되는 것일 수 있다.On the other hand, in the present invention, the geniposide (Geniposide) or Aucubin (Aucubin), may be preferably contained in 0.1 to 20% by weight relative to the total weight of the cosmetic composition.

한편, 본 발명에 있어서, 상기 화장료 조성물은, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스쳐크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 또는 바디클렌저로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상의 제형인 것일 수 있다.On the other hand, in the present invention, the cosmetic composition, skin lotion, skin softener, skin toner, astringent, lotion, milk lotion, moisturizer, nutrition lotion, massage cream, nutrition cream, moisture cream, hand cream, foundation, essence, It may be one or more formulations selected from the group consisting of nutrient essence, pack, soap, cleansing foam, cleansing lotion, cleansing cream, body lotion or body cleanser.

본 발명은 두충나무 껍질 추출물과 두충나무 껍질 추출물 내 함유되어 있는 제니포사이드, 아우큐빈을 이용하여 외부의 노출된 열로 인한 홍조 완화 및 피부 온도 상승을 억제하는 피부 쿨링용 화장료 조성물 및 그 제조방법을 제공한다.The present invention provides a cosmetic composition for skin cooling and a method for manufacturing the skin cooling to suppress redness caused by externally exposed heat and to increase the skin temperature by using the extracts of bark bark bark, and the genoside, acubin contained in the bark bark bark extract do.

본 발명의 두충나무 껍질 추출물과 두충나무 껍질 추출물 내 함유되어 있는 제니포사이드, 아우큐빈을 이용하여 세포 사멸 저해 효과, 열 보호 효능 및 열 처리에 의해 증가된 PGE2 합성 효소 단백질의 발현을 저해시킴으로써 항염 효능을 나타낼 수 있다. Anti-inflammatory effect by inhibiting the expression of PGE2 synthetase protein increased by heat killing effect, heat protection efficacy and heat treatment by using the genus biside, acubin contained in the cedar bark extract of the present invention and the cedar bark extract Can represent

도 1은 고성능 액체크로마토그래피(HLPC)를 이용한 제니포사이드(Geniposide) 분석 결과 그래프이다.
도 2는 고성능 액체크로마토그래피(HLPC)를 이용하여 순도 분석한 두충나무 껍질 추출물 내 제니포사이드(Geniposide)의 함량 분석 결과 그래프이다.
도 3은 고성능 액체크로마토그래피(HLPC)를 이용한 아우큐빈(Aucubin) 분석 결과 그래프이다.
도 4는 고성능 액체크로마토그래피(HLPC)를 이용하여 순도 분석한 두충나무 껍질 추출물 내 아우큐빈(Aucubin)의 함량 분석 결과 그래프이다.
도 5는 대조군과 두충나무 껍질 추출물과 유효성분 제니포사이드(Geniposide)와 아우큐빈(Aucubin)에 대해 MTT assay를 통한 HaCaT 세포 독성 테스트를 수행한 결과 그래프이다.
도 6은 대조군과 두충나무 껍질 추출물과 유효성분 제니포사이드(Geniposide)와 아우큐빈(Aucubin)에 대해 JC-1 staining에 따른 염색 정도를 비교한 사진이다.
도 7은 대조군과 두충나무 껍질 추출물과 유효성분 제니포사이드(Geniposide)와 아우큐빈(Aucubin)에 대해 UVB에 대한 조사 후, 관련 유전자 TRPV4의 mRNA 발현 정도를 비교한 그래프이다.
도 8은 대조군과 두충나무 껍질 추출물과 유효성분 제니포사이드(Geniposide)와 아우큐빈(Aucubin)에 대한 PGE2 합성 효소 단백질의 발현 정도를 비교한 그래프이다.
도 9는 두충나무 껍질 추출물 함유 겔(실시예 2) 제품 사용군과 두충나무 껍질 추출물 비함유 겔(비교예) 제품 사용군에 대해 각 제품의 사용 전후에 따른 피부 표면 온도의 비교 그래프를 나타낸 것이다.
도 10은 두충나무 껍질 추출물 함유 겔(실시예 2) 제품 사용군과 두충나무 껍질 추출물 비함유 겔(비교예) 제품 사용군에 대해 각 제품의 사용 전후에 따른 피부 혈류량의 비교 그래프를 나타낸 것이다.
1 is a graph showing the results of analysis of Geniposide using high performance liquid chromatography (HLPC).
Figure 2 is a graph of the results of the analysis of the content of Geniposide (Geniposide) in the extract of bark beetle bark purity analyzed using high performance liquid chromatography (HLPC).
3 is a graph of the results of Aucubin analysis using high performance liquid chromatography (HLPC).
Figure 4 is a graph of the analysis results of the content of Aucubin (Aucubin) in the extract of the cedar bark tree by purity analysis using high performance liquid chromatography (HLPC).
5 is a graph showing the results of the HaCaT cytotoxicity test through MTT assay for the control group and the cedar bark extract and the active ingredients Geniposide and Aucubin.
6 is a photograph comparing the degree of staining according to JC-1 staining for the control group and the extract of the cedar bark and the active ingredients Geniposide and Aucubin.
7 is a graph comparing the mRNA expression level of the related gene TRPV4 after irradiation with UVB for the control group and the cedar bark extract and the active ingredients Geniposide and Aucubin.
8 is a graph comparing the expression level of PGE2 synthetase protein for the control group and the cedar bark extract and the active ingredients Geniposide and Aucubin.
Figure 9 shows a comparison graph of the skin surface temperature according to before and after the use of each product for the gel group containing the extract of the bark tree bark (Example 2) and the group using the gel of the bark tree bark extract (comparative example). .
FIG. 10 shows a comparison graph of skin blood flow according to before and after the use of each product for the group using the gel containing the cedar bark extract (Example 2) and the product using the gel containing the cedar bark extract (comparative example).

두충나무(Eucommia ulmoides)는 두충과에 속하는 낙엽교목으로, 잎은 타원형으로 어긋나며, 열매는 편평한 긴 원형으로 자르면 고무같은 점질의 실이 나오고, 껍질을 건조시킨 것은 한약재로 쓰인다. 두충나무의 껍질은 두충, 어린 잎은 면아라 하며 약용으로 쓰이는데, 요통, 신경통 및 고혈압 치료, 진통 등의 효능이 있는 것으로 알려져 있다. Eucommia ulmoides ( Eucommia ulmoides ) is a deciduous tree belonging to the family Nephi , and its leaves are oval-shaped, and the fruit is cut into a flat long circle to produce a rubbery, viscous thread, and the dried bark is used as a medicinal herb. The bark of the wormwood tree is called wormworm, and the young leaves are cotton, and is used for medicinal purposes.

본 발명은 두충나무(Eucommia ulmoides) 껍질 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 홍조 완화용 화장료 조성물을 제공한다.The present invention provides a cosmetic composition for alleviating flushing, characterized in that it contains an extract of Eucommia ulmoides bark.

또한, 본 발명은 두충나무(Eucommia ulmoides) 껍질 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 온도 상승 억제용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition for inhibiting skin temperature rise, characterized in that it contains an extract of Eucommia ulmoides bark.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 두충나무 껍질 추출물은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 다양한 추출 방법을 이용할 수 있다. 예를 들면, 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 헥산 용매를 각각 단독 또는 이들을 2종 이상 혼합한 혼합용매를 추출용매로 이용하여 추출할 수 있다. In the cosmetic composition of the present invention, the cedar bark extract can use various extraction methods commonly used in the art. For example, purified water, methanol, ethanol, glycerin, ethyl acetate, butylene glycol, propylene glycol, dichloromethane, hexane solvent, respectively, or a mixture of two or more of them may be extracted using a mixed solvent as an extraction solvent.

본 발명에서는, 두충나무 껍질을 건조하고 분쇄한 후 에탄올을 사용하여 두충나무 껍질 추출물을 획득한 후, 여과기로 여과시키고 이를 농축시킨 다음, 부틸렌 글라이콜을 첨가하여 제조된 두충나무 껍질 추출물을 사용하였다.In the present invention, after drying and crushing the bark of the cedar tree, an extract of the cedar tree bark is obtained using ethanol, filtered with a filter and concentrated, and then the cedar tree bark extract prepared by adding butylene glycol Used.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 두충나무 껍질 추출물은, PGE2 합성 효소 단백질의 발현을 저해시키는 것일 수 있다.In the cosmetic composition of the present invention, the bark bark extract may be one that inhibits the expression of PGE2 synthase protein.

프로스타글란딘 E2(Prostaglandin E2, PGE2)는 생체 내에서 합성된 생리활성물질의 일종으로, 발열의 주요 매개체로 작용하여 전측 시상 하부에 있는 체온 조절 뉴런의 수용체에 결합하여 발열 작용을 나타냄으로써 체온 상승에 역할을 한다. 또한, PGE2에 의한 혈관확장과 미세혈관 투과성 증대를 통해 감염된 조직으로의 혈류량이 증가하여 피부 홍조 및 부종이 발생하게 된다. Prostaglandin E2 (PGE2) is a type of bioactive compound synthesized in vivo, and acts as a main medium for fever, binding to the receptors of thermoregulatory neurons in the anterior hypothalamus and exerting heat, thereby acting to increase body temperature. Do it. In addition, through the expansion of blood vessels and microvascular permeability by PGE2, blood flow to the infected tissue increases, resulting in skin flushing and edema.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 두충나무 껍질 추출물은 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.1 내지 20 중량%로 함유하는 것이 좋다. In the cosmetic composition of the present invention, the bark tree bark extract is preferably contained in 0.1 to 20% by weight relative to the total weight of the cosmetic composition.

또한, 본 발명은 제니포사이드(Geniposide)을 유효성분으로 함유하고 있는 것을 특징으로 하는 홍조 완화용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition for alleviating flushing, characterized in that it contains Geniposide as an active ingredient.

제니포사이드(Geniposide)는 이리도이드 배당체의 성분으로 천연식물의 약 40종에 존재하는 물질인데, 항염, 항산화, 면역조절 등에 약리효과를 나타내는 것으로 알려져 있다.Geniposide is a component of iridoid glycosides and is present in about 40 species of natural plants, and is known to exhibit pharmacological effects such as anti-inflammatory, antioxidant, and immunomodulatory properties.

또한, 본 발명은 아우큐빈(Aucubin)을 유효성분으로 함유하고 있는 것을 특징으로 하는 홍조 완화용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition for alleviating flushing, characterized in that it contains Aucubin as an active ingredient.

아우큐빈(Aucubin)은 이리도이드 배당체의 성분으로 천연식물에서 주로 발견되는 물질인데, 간 손상 보호, 면역증진, 통풍 치료 등에 약리효과를 나타내는 것으로 알려져 있다.Aucubin is a component found in natural plants as a component of iridoid glycosides, and is known to exhibit pharmacological effects in protecting liver damage, enhancing immunity, and treating gout.

또한, 본 발명은 제니포사이드(Geniposide)를 유효성분으로 함유하고 있는 것을 특징으로 하는 피부 온도 상승 억제용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition for inhibiting skin temperature rise, characterized in that it contains a geniposide (Geniposide) as an active ingredient.

또한, 본 발명은 아우큐빈(Aucubin)을 유효성분으로 함유하고 있는 것을 특징으로 하는 피부 온도 상승 억제용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition for inhibiting skin temperature rise, characterized in that it contains aucubin (Aucubin) as an active ingredient.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 제니포사이드(Geniposide) 또는 아우큐빈(Aucubin)은 PGE2 합성 효소 단백질의 발현을 저해시키는 것일 수 있다.In the cosmetic composition of the present invention, the geniposide or Aucubin may inhibit the expression of PGE2 synthase protein.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 제니포사이드(Geniposide) 또는 아우큐빈(Aucubin)은 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.1 내지 20 중량%로 함유하는 것이 좋다.In the cosmetic composition of the present invention, the geniposide (Geniposide) or Aucubin (Aucubin) is preferably contained in 0.1 to 20% by weight relative to the total weight of the cosmetic composition.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 화장료 조성물은, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스쳐크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 또는 바디클렌저로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상의 제형인 것일 수 있다.In the cosmetic composition of the present invention, the cosmetic composition, skin lotion, skin softener, skin toner, astringent, lotion, milk lotion, moisture lotion, nutrition lotion, massage cream, nutrition cream, moisture cream, hand cream, foundation, essence , Nutritional essence, pack, soap, cleansing foam, cleansing lotion, cleansing cream, body lotion or may be one or more formulations selected from the group consisting of a body cleanser.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.In addition, the cosmetic composition of the present invention can be used in combination with other cosmetic compositions other than the present invention. In addition, the cosmetic composition according to the present invention may be used according to a conventional method of use, and the number of times of use may be varied according to a user's skin condition or taste.

이하, 본 발명에 대해 하기 실시예 및 실험예에서 더욱 상세히 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예 및 실험예에만 한정되는 것은 아니고, 이와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 모두 포함한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail in the following Examples and Experimental Examples. However, the scope of the present invention is not limited to the following examples and experimental examples, and includes all modifications of equivalent technical ideas.

[실시예 1 : 두충나무 껍질 추출물의 제조][Example 1: Preparation of cedar bark extract]

두충나무 껍질을 건조하고 분쇄한 후 50%의 에탄올에 두충나무 : 50% 에탄올 = 1:5, 바람직하게는 1:8의 중량% 비율로 30~80℃에서 1~5일, 바람직하게는 50℃에서 1일 동안 교반시켜 두충나무 껍질 추출물을 획득하였다. 다음으로, 메시크기 0.1~10 um, 바람직하게는 1 um ~ 0.3 um의 메시크기를 가진 여과기로 두충나무 껍질 추출물을 여과시켰다. 여과된 두충나무 껍질 추출물을 대략 40~70℃, 바람직하게는 60℃ 온도에서 농축시켜 농축액을 제조하였다. 제조된 농축액에 부틸렌 글라이콜을 첨가하여 10~50 중량%, 바람직하게는 30% 중량%가 되도록 첨가하여 두충나무 껍질 추출물을 제조하였다.After drying and grinding the cedar bark, the cedar tree is 50% ethanol in 50% ethanol = 1:5, preferably 1:8 by weight ratio of 30 to 80°C for 1 to 5 days, preferably 50 It was stirred for 1 day at ℃ to obtain an extract of bark beetle. Next, the cedar bark extract was filtered with a filter having a mesh size of 0.1 to 10 um, preferably 1 um to 0.3 um. The filtered bark tree bark extract was concentrated at a temperature of approximately 40-70°C, preferably 60°C, to prepare a concentrate. Butylene glycol was added to the prepared concentrate to add 10 to 50% by weight, preferably 30% by weight, to prepare a cedar bark extract.

[실험예 1 : 두충나무 껍질 추출물의 함량 분석][Experimental Example 1: Analysis of the content of the bark extract of the cedar tree]

본 실험예에서는 상기 실시예 1의 추출물에 대해 두충나무 껍질 추출물의 유효성분인 표 1(제니포사이드), 표 2(아우큐빈) 함량 분석을 실시하였다. 기재된 조건의 고성능 액체크로마토그래피(HPLC)를 이용하여 순도 분석을 하였고, 그 결과를 하기 표 3과 도 1, 도2, 도3, 도4에 나타내었다.In this experimental example, the extracts of Example 1 were analyzed for the contents of Table 1 (Zeniposide) and Table 2 (Aucubin), which are active ingredients of the extract of bark beetle. Purity analysis was performed using high performance liquid chromatography (HPLC) under the described conditions, and the results are shown in Table 3 and FIGS. 1, 2, 3 and 4 below.

제니포사이드(Geniposide)의 함량 분석을 위한 고성능 액체크로마토그래피(HLPC)를 이용한 순도 분석 조건Purity analysis conditions using high performance liquid chromatography (HLPC) for analyzing the content of Geniposide 컬럼(Column)Column Capcell Pak C18 4.6 X 250mm
(Shiseido HPLC Column)
Capcell Pak C18 4.6 X 250mm
(Shiseido HPLC Column)
컬럼온도(Column temperature)Column temperature 35℃35℃ 유속(Flowrate)Flow rate 1.0mL/min1.0mL/min 측정기(Detector)Detector UV 239nmUV 239nm 분석시간(Analysis time)Analysis time 30 min30 min 주입부피(Injection Volume)Injection Volume 20㎕20 μl 이동상(Mobile phase)Mobile phase Acetonitrile : Deionize Water= 15 : 85Acetonitrile: Deionize Water= 15: 85

아우큐빈(Aucubin)의 함량 분석을 위한 고성능 액체크로마토그래피(HLPC)를 이용한 순도 분석 조건Purity analysis conditions using high performance liquid chromatography (HLPC) for the analysis of the content of Aucubin 컬럼(Column)Column Capcell Pak C18 4.6 X 250mm
(Shiseido HPLC Column)
Capcell Pak C18 4.6 X 250mm
(Shiseido HPLC Column)
컬럼온도(Column temperature)Column temperature 35℃35℃ 유속(Flowrate)Flow rate 0.5mL/min0.5mL/min 측정기(Detector)Detector UV 210nmUV 210nm 분석시간(Analysis time)Analysis time 30 min30 min 주입부피(Injection Volume)Injection Volume 20㎕20 μl 이동상(Mobile phase)Mobile phase Acetonitrile : Deionize Water= 5 : 95Acetonitrile: Deionize Water= 5: 95

고성능 액체크로마토그래피(HLPC)를 이용한 순도 분석 결과Purity analysis results using high performance liquid chromatography (HLPC) 지표물질Indicator 두충나무 추출물(ppm)Duchung tree extract (ppm) GeniposideGeniposide 250 ~ 350250 ~ 350 AucubinAucubin 700 ~ 1,200700 ~ 1,200

[실험예 2 : 두충나무 껍질 추출물의 세포 독성 평가(MTT assay)][Experimental Example 2: Cytotoxicity evaluation of bark tree bark extract (MTT assay)]

본 실험예에서는 상기 실시예 1의 두충나무 껍질 추출물과 그 유효성분인 제니포사이드(Geniposide), 아우큐빈(Aucubin)의 세포독성을 측정하였다.In this experimental example, the cytotoxicity of the extract of the cedar bark of Example 1 and its active components, Geniposide and Aucubin, were measured.

24-well plate 에 각질형성 세포(HaCaT)를 접종하여 24 시간 배양한 뒤, 배양된 세포의 배지를 serum free 배지로 교체하고 시료를 농도별로 처리하여 24시간 배양하였다. 배양이 끝난 세포에 2.5 mg/ml 의 MTT 용액을 10배 희석시킨 배지로 교체하여 반응시킨 후 상등액을 제거하고 DMSO 1 ml 을 첨가하여 생성된 MTT-formazan 결정체를 용해시켜 ELISA Reader로 570 nm 에서 흡광도를 측정하였다. 세포 독성은 대조군과 비교하여 흡광도의 백분율로 나타내며, 이는 하기 표 4에 나타내었다.After inoculating keratinocytes (HaCaT) in a 24-well plate and incubating for 24 hours, the medium of the cultured cells was replaced with serum free medium, and the samples were processed for each concentration to incubate for 24 hours. After the reaction was performed by replacing the cultured cells with a medium diluted with 10 times of MTT solution of 2.5 mg/ml, the supernatant was removed, and 1 ml of DMSO was added to dissolve the resulting MTT-formazan crystals and absorbed at 570 nm with an ELISA Reader. Was measured. Cytotoxicity is expressed as a percentage of absorbance compared to the control, which is shown in Table 4 below.

하기 표 4 및 도 5에 표기된 바와 같이, 두충나무 껍질 추출물과 지표성분 제니포사이드와 아우큐빈의 효능 평가를 위해 시료 농도를 정하기 위하여 MTT assay를 통한 HaCaT 세포 독성 테스트를 수행한 결과, 두충나무 껍질 추출물은 250 ug/ml 농도에서부터 독성이 나타났고 Geniposide, Aucubin은 독성이 나타나지 않았다.As shown in Table 4 and Figure 5 below, as a result of performing a HaCaT cytotoxicity test through MTT assay to determine the sample concentration for the evaluation of the efficacy of the cedar bark extract and indicator components geniposide and aucuvin, cedar bark extract Silver was toxic at a concentration of 250 ug/ml, and Geniposide and Aucubin were not toxic.

SampleSample Conc.
(㎍/㎖)
Conc.
(Μg/ml)
Cell viability (%)Cell viability (%) Stdev.Stdev.
ControlControl 100.0100.0 0.80.8 두충나무 껍질
추출물
Cedar bark
extract
1One 101.0 101.0 2.8 2.8
1010 100.4 100.4 0.8 0.8 2525 97.8 97.8 2.7 2.7 5050 105.1 105.1 1.9 1.9 100100 102.8 102.8 1.2 1.2 250250 85.2 85.2 1.3 1.3 500500 61.9 61.9 1.2 1.2 GeniposideGeniposide 0.10.1 101.6 101.6 1.3 1.3 1One 104.6 104.6 4.1 4.1 2.52.5 101.9 101.9 0.8 0.8 55 98.4 98.4 0.8 0.8 1010 100.8 100.8 0.9 0.9 2525 97.5 97.5 2.2 2.2 5050 101.2 101.2 1.7 1.7 100100 96.3 96.3 1.0 1.0 AucubinAucubin 0.10.1 100.4 100.4 1.7 1.7 1One 103.4 103.4 4.4 4.4 2.52.5 102.2 102.2 3.1 3.1 55 101.7 101.7 4.7 4.7 1010 100.0 100.0 2.9 2.9 2525 105.9 105.9 2.4 2.4 5050 105.2 105.2 4.6 4.6 100100 96.2 96.2 2.1 2.1

[실험예 3 : 두충나무 껍질 추출물의 광보호 효능 확인][Experimental Example 3: Confirmation of the light-protecting efficacy of the cedar bark extract]

본 실험예에서는 상기 실시예 1의 두충나무 껍질 추출물과 그 유효성분인 제니포사이드, 아우큐빈의 광보호 효능을 측정하였다.In this experimental example, the light-protecting efficacy of the extract of the cedar bark of Example 1 and its active components, Jenny Poside and Aucubin, were measured.

미토콘드리아의 세포막 전위변화를 검증하기 위해, 각질세포(Human keratinocyte)를 35 mm plate 에 분주하여 24 시간 안정화한 후, serum-free medium 으로 교체하고 샘플을 처리하였다. 1시간 뒤, HBSS(Hank's Balanced Salt solution)버퍼로 세척 후 fresh HBSS 를 첨가한 뒤 UVB 50 mJ/㎠을 조사하였다. 그 후, Serum-free medium 으로 배지를 교체한 뒤 시료를 처리하여 37°C, 5% CO2 incubator 에서 24 시간 배양하였다. 배지 제거 후 1 μg/ml 의 JC-1 solution 을 처리하여 37°C, 5% CO2 incubator 에서 빛이 없는 상태로 2 시간 반응시킨 뒤 배지를 제거하고 형광 현미경으로 관찰하였다.To verify the mitochondrial cell membrane potential change, keratinocytes (Human keratinocytes) were dispensed into 35 mm plates, stabilized for 24 hours, and then replaced with serum-free medium and treated with samples. After 1 hour, after washing with HBSS (Hank's Balanced Salt solution) buffer, fresh HBSS was added and UVB 50 mJ/cm 2 was irradiated. Then, after replacing the medium with a serum-free medium, the sample was processed and incubated for 24 hours in a 37°C, 5% CO2 incubator. After removing the medium, 1 μg/ml of JC-1 solution was treated and reacted for 2 hours without light in a 37°C, 5% CO2 incubator to remove the medium and observed under a fluorescence microscope.

두충나무 껍질 추출물 및 그 유효성분인 제니포사이드, 아우큐빈을 대조군인 UVB 처리군과 비교하여 염색된 정도를 확인한 결과, 도 6과 같이, 실시예 1의 경우 100 ug/ml 농도에서 Apoptosis 저해효능이 나타났다. 제니포사이드는 처리한 농도 전 범위에서 효능을 보였으며, 특히 저농도에서 UVB 조사군 대비 붉은 형광과 cell수가 크게 증가한 것을 확인하였다. 아우큐빈은 10 ug/ml 농도 이하에서 효능을 나타내었다. 따라서 두충나무 껍질 추출물 및 지표성분 제니포사이드와 아우큐빈은 UVB에 의한 세포사멸을 저해하는 효능이 높은 것으로 판단된다.As a result of confirming the degree of staining of the extract of the bark tree bark and its active components, geniposide and aucubin, as compared to the control UVB treatment group, as shown in FIG. 6, in Example 1, the effect of inhibiting apoptosis at a concentration of 100 ug/ml was obtained. appear. The geniposide showed efficacy in the entire range of the treated concentration, and it was confirmed that the red fluorescence and the number of cells significantly increased compared to the UVB irradiation group at a particularly low concentration. Aucuvin showed efficacy at a concentration of 10 ug/ml or less. Therefore, it is considered that the extract of bark beetle and indicator components geniposide and aucuvin have high efficacy in inhibiting apoptosis by UVB.

[실험예 4 : 두충나무 껍질 추출물의 열보호 효능 확인][Experimental Example 4: Confirmation of heat protection efficacy of bark extract of cephalobacteria]

본 실험예에서는 상기 실시예 1의 두충나무 껍질 추출물과 그 유효성분인 제니포사이드, 아우큐빈을 통한 피부 열보호 효능을 측정하였다.In this experimental example, the effect of heat protection of the skin was measured through the extract of the bark of the cedar tree of Example 1 and its active ingredients, Jenny Poside and Aucubin.

6 well multidish에 HEKn cell을 접종하여 24시간 배양한 뒤, 배양된 세포의 배지를 HBSS로 교체 후 UVB 100 mJ/㎠ 을 조사를 하였다. 그 후serum-free 배지로 교체하고 시료를 농도별로 처리하여 24시간 배양하였다. 세포를 TRIzol로 모아 제조사의 방법에 따라 RNA를 분리하였다. 분리된 RNA를 정량한 뒤 2 μg의 RNA로 cDNA를 합성하여 Real-Time PCR을 실시하였다. 이는 하기 표 5와 6에 나타내었다.After inoculating HEKn cells in 6 well multidish and incubating for 24 hours, the medium of the cultured cells was replaced with HBSS and UVB 100 mJ/cm 2 was investigated. After that, the cells were replaced with serum-free medium, and the samples were processed for each concentration to incubate for 24 hours. Cells were collected with TRIzol and RNA was isolated according to the manufacturer's method. After quantifying the isolated RNA, cDNA was synthesized with 2 μg of RNA to perform real-time PCR. This is shown in Tables 5 and 6 below.

Real-Time PCR 실험 결과, 도 7과 같이, 두충나무 껍질 추출물은 UVB에 의해 증가된 TRPV4의 발현을 농도의존적으로 감소시켰고, 유효성분으로 사용된 제니포사이드와 아우큐빈도 TRPV4의 발현을 감소시켰다. 따라서 두충나무 껍질 추출물과 지표성분 제니포사이드와 아우큐빈은 자외선에 의해 손상이 일어나는 피부를 보호하는 열보호 효능이 있는 것으로 판단된다.As a result of the Real-Time PCR experiment, as shown in FIG. 7, the cedar bark extract reduced the expression of TRPV4 increased by UVB concentration-dependently, and decreased the expression of TNFV4 and geniposide used as active ingredients. Therefore, it is believed that the extracts of bark of the cedar tree, and the indicator components of Zeniposide and Aucubin, have a thermal protection effect that protects the skin from being damaged by ultraviolet rays.

SampleSample Conc. (㎍/㎖)Conc. (Μg/ml) TRPV4 Expression rate
(% UVB, Actin 보정)
TRPV4 Expression rate
(% UVB, Actin correction)
Stdev.Stdev.
ControlControl 74.474.4 2.92.9 UVB 100mJ/㎠UVB 100mJ/㎠ 100.0100.0 0.00.0 Vitamin CVitamin C 1010 84.584.5 2.32.3 두충나무 껍질 추출물Eucommia bark extract 1010 76.7 76.7 1.0 1.0 5050 64.4 64.4 1.9 1.9 100100 59.9 59.9 4.2 4.2

SampleSample Conc. (㎍/㎖)Conc. (Μg/ml) TRPV4 Expression rate
(% UVB, Actin 보정)
TRPV4 Expression rate
(% UVB, Actin correction)
Stdev.Stdev.
ControlControl 76.376.3 1.31.3 UVB 100mJ/㎠UVB 100mJ/㎠ 100.0100.0 0.00.0 Vitamin CVitamin C 1010 79.079.0 0.80.8 GeniposideGeniposide 0.10.1 91.691.6 2.02.0 1One 82.182.1 6.26.2 2.52.5 60.660.6 5.75.7 55 56.756.7 1.91.9 AucubinAucubin 0.10.1 71.271.2 4.04.0 1One 56.356.3 1.81.8 55 51.651.6 2.82.8 1010 50.750.7 5.65.6

[실험예 5 : 두충나무 껍질 추출물의 피부 쿨링 효능 확인][Experimental Example 5: Confirming the skin cooling effect of the cedar bark extract]

본 실험예에서는 상기 실시예 1의 두충나무 껍질 추출물과 그 유효성분인 제니포사이드, 아우큐빈이 피부 쿨링 효과에 어떤 영향을 미치는지 알아보기 위하여 피부 온도 상승에 관여하는 PGE2 synthase 단백질 발현을 측정하였다.In this experimental example, the expression of PGE2 synthase protein involved in the increase in skin temperature was measured in order to find out how the cedar bark extract of Example 1 and its active components, geniposide and aucuvin, affect the skin cooling effect.

6 well multidish에 normal human dermal fibroblast cell을 접종하여 24시간 배양한 뒤, 배양된 세포의 배지를 HBSS로 교체 후 Infrared ray를 20분 조사하였다. 그 후 serum-free 배지로 교체하고 시료를 농도별로 처리하여 24시간 배양하였다. 단백질을 분리한 뒤, SDS-PAGE를 통해 두충나무 껍질 추출물과 그 유효성분인 제니포사이드, 아우큐빈의 PGE2 synthase 단백질 발현 저해 효능을 측정하였다. 이는 하기 표 7, 도 8에 나타내었다.After inoculating normal human dermal fibroblast cells in 6 well multidish and incubating for 24 hours, the medium of the cultured cells was replaced with HBSS, and then Infrared ray was irradiated for 20 minutes. Thereafter, the serum-free medium was replaced, and the samples were treated for each concentration to incubate for 24 hours. After separating the protein, the effect of inhibiting the expression of PGE2 synthase protein of the cephalobark bark extract and its active components, geniposide and aucuvin, was measured through SDS-PAGE. This is shown in Tables 7 and 8 below.

SampleSample Conc. (㎍/㎖)Conc. (Μg/ml) PGE2 synthase Expression rate
(% IR, GAPDH 보정)
PGE2 synthase expression rate
(% IR, GAPDH correction)
ControlControl 88.5388.53 Infrared rayInfrared ray 100.00100.00 IR + 두충나무 껍질 추출물IR + Eucommia bark extract 2525 94.8394.83 5050 89.2189.21 100100 88.2088.20 IR + AucubinIR + Aucubin 1.751.75 96.2796.27 3.53.5 94.7794.77 77 73.8973.89 IR + GeniposideIR + Geniposide 0.50.5 74.7174.71 1One 76.8576.85 22 78.2478.24

표 7 및 도 8과 같이, 두충나무 껍질 추출물과 지표성분 제니포사이드와 아우큐빈은 열 처리에 의해 증가된 PGE2 합성 효소 단백질의 발현을 저해시켰다. 따라서 두충나무 껍질 추출물과 지표성분 제니포사이드와 아우큐빈은 열 처리에 의해 증가된 PGE2 합성 효소 단백질의 발현을 저해시킴으로써 피부 쿨링 효능이 있는 것으로 판단된다.As shown in Table 7 and FIG. 8, the bark extract of the cedar tree and the indicator components geniposide and aucuvin inhibited the expression of increased PGE2 synthase protein by heat treatment. Therefore, it is considered that the extract of the bark of the cedar tree and the indicator components geniposide and aucuvin have skin cooling efficacy by inhibiting the expression of PGE2 synthase protein increased by heat treatment.

[실시예 2 : 두충나무 껍질 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 제조][Example 2: Preparation of a cosmetic composition containing a cedar bark extract]

본 실시예에서는 본 발명의 화장료 조성물의 일 예로 겔을 제조하였다. In this example, a gel was prepared as an example of the cosmetic composition of the present invention.

상기 실시예 1의 두충나무 껍질 추출물을 5.0 중량% 함유하는 겔을 제조하였다. 한편, 두충나무 껍질 추출물을 함유하는 겔의 효능을 확인하기 위해 두충나무 껍질 추출물을 포함하지 않는 겔(비교예)을 제조하였다. 하기 표 8은 실시예 2 및 비교예의 화장료 조성물에 대한 함량을 나타낸 것이다.A gel containing 5.0% by weight of the cedar bark extract of Example 1 was prepared. On the other hand, in order to confirm the efficacy of the gel containing the cedar tree bark extract, a gel (comparative example) without the cedar tree bark extract was prepared. Table 8 below shows the contents of the cosmetic composition of Example 2 and Comparative Example.

실시예 2 및 비교예의 조성Composition of Example 2 and Comparative Example 성분ingredient 실시예2 함량
(중량%)
Example 2 Content
(weight%)
비교예 함량
(중량%)
Comparative Example Content
(weight%)
GlycerinGlycerin 10.010.0 10.010.0 Butylene GlycolButylene Glycol 1.51.5 1.51.5 Acrylates/C10-30 Alkyl Acrylate CrosspolymerAcrylates/C10-30 Alkyl Acrylate Crosspolymer 0.50.5 0.50.5 PEG-60 Hydrogenated Castor OilPEG-60 Hydrogenated Castor Oil 0.50.5 0.50.5 Sodium Hydroxide(20% Sol.)Sodium Hydroxide (20% Sol.) 0.30.3 0.30.3 WaterWater 81.681.6 86.686.6 EUCOMMIA ULMOIDES EUCOMMIA ULMOIDES BARK EXTRACTBARK EXTRACT 5.05.0 -- 1,2-Hexanediol1,2-Hexanediol 0.20.2 0.20.2 EthylhexylglycerinEthylhexylglycerin 0.10.1 0.10.1 PhenoxyethanolPhenoxyethanol 0.20.2 0.20.2 incense 0.10.1 0.10.1 TotalTotal 100100 100100

[실시예 3 : 두충나무 껍질 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 제조][Example 3: Preparation of a cosmetic composition containing a cedar bark extract]

본 실시예에서는 본 발명의 화장료 조성물의 일 예로 크림을 제조하였다. In this example, a cream was prepared as an example of the cosmetic composition of the present invention.

상기 실시예 1의 두충나무 껍질 추출물을 5.0 중량% 함유하는 크림을 제조하였다. 하기 표 9는 실시예 3 및 비교예의 화장료 조성물에 대한 함량을 나타낸 것이다.A cream containing 5.0% by weight of the extract of the bark tree of Example 1 was prepared. Table 9 below shows the contents of the cosmetic composition of Example 3 and Comparative Example.

실시예 3 및 비교예의 조성Composition of Example 3 and Comparative Example 성분ingredient 실시예3 함량
(중량%)
Example 3 Content
(weight%)
비교예 함량
(중량%)
Comparative Example Content
(weight%)
GlycerinGlycerin 8.08.0 8.08.0 Butylene GlycolButylene Glycol 2.02.0 2.02.0 CarbomerCarbomer 0.50.5 0.50.5 HydroxyethylcelluloseHydroxyethylcellulose 0.10.1 0.10.1 Sodium Hydroxide(20% Sol.)Sodium Hydroxide (20% Sol.) 0.30.3 0.30.3 WaterWater 71.371.3 76.376.3 EUCOMMIA ULMOIDES EUCOMMIA ULMOIDES BARK EXTRACTBARK EXTRACT 5.05.0 -- Cetearyl Olivate, Sorbitan OlivateCetearyl Olivate, Sorbitan Olivate 2.02.0 2.02.0 Glyceryl Stearate, PEG-100 StearateGlyceryl Stearate, PEG-100 Stearate 2.02.0 2.O2.O Cyclopentasiloxane, CyclohexasiloxaneCyclopentasiloxane, Cyclohexasiloxane 3.03.0 3.03.0 Caprylic/Capric TriglycerideCaprylic/Capric Triglyceride 5.05.0 5.05.0 1,2-Hexanediol1,2-Hexanediol 0.30.3 0.30.3 EthylhexylglycerinEthylhexylglycerin 0.10.1 0.10.1 PhenoxyethanolPhenoxyethanol 0.30.3 0.30.3 incense 0.10.1 0.10.1 TotalTotal 100100 100100

[실시예 4 : 두충나무 껍질 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 제조][Example 4: Preparation of cosmetic composition containing cedar bark extract]

본 실시예에서는 본 발명의 화장료 조성물의 일 예로 선크림을 제조하였다. In this example, sunscreen was prepared as an example of the cosmetic composition of the present invention.

상기 실시예 1의 두충나무 껍질 추출물을 5.0 중량% 함유하는 선크림을 제조하였다. 하기 표 10은 실시예 4 및 비교예의 화장료 조성물에 대한 함량을 나타낸 것이다.A sunscreen containing 5.0% by weight of the extract of bark of the cedar tree of Example 1 was prepared. Table 10 below shows the contents of the cosmetic composition of Example 4 and Comparative Example.

실시예 4 및 비교예의 조성Composition of Example 4 and Comparative Example 성분ingredient 실시예4 함량
(중량%)
Example 4 Content
(weight%)
비교예 함량
(중량%)
Comparative Example Content
(weight%)
GlycerinGlycerin 2.02.0 2.02.0 Butylene GlycolButylene Glycol 5.05.0 5.05.0 Acrylates/C10-30 Alkyl Acrylate CrosspolymerAcrylates/C10-30 Alkyl Acrylate Crosspolymer 0.50.5 0.50.5 Titanium DioxideTitanium Dioxide 3.23.2 3.23.2 Zinc OxideZinc Oxide 1.81.8 1.81.8 Sodium Hydroxide(20% Sol.)Sodium Hydroxide (20% Sol.) 0.30.3 0.30.3 WaterWater 60.460.4 65.465.4 EUCOMMIA ULMOIDES EUCOMMIA ULMOIDES BARK EXTRACTBARK EXTRACT 5.05.0 -- 1,2-Hexanediol1,2-Hexanediol 0.30.3 0.30.3 EthylhexylglycerinEthylhexylglycerin 0.10.1 0.10.1 PhenoxyethanolPhenoxyethanol 0.30.3 0.30.3 incense 0.10.1 0.10.1 Ethylhexyl MethoxycinnamateEthylhexyl Methoxycinnamate 7.57.5 7.57.5 Bis-Ethylhexyloxyphenol Methoxyphenyl TriazineBis-Ethylhexyloxyphenol Methoxyphenyl Triazine 3.03.0 3.03.0 Diethylamino Hydroxybenzoyl Hexyl BenzoateDiethylamino Hydroxybenzoyl Hexyl Benzoate 1.01.0 1.01.0 C12-15 Alkyl BenzoateC12-15 Alkyl Benzoate 5.05.0 5.05.0 Cetearyl Olivate, Sorbitan OlivateCetearyl Olivate, Sorbitan Olivate 3.53.5 3.53.5 Polyacrylate-13,Polyisobutene, Polysorbate 20, Sorbitan isostearatePolyacrylate-13, Polyisobutene, Polysorbate 20, Sorbitan isostearate 1.01.0 1.01.0 TotalTotal 100100 100100

[실시예 5 : 두충나무 껍질 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 제조][Example 5: Preparation of cosmetic composition containing cedar bark extract]

본 실시예에서는 본 발명의 화장료 조성물의 일 예로 BB크림을 제조하였다. In this example, BB cream was prepared as an example of the cosmetic composition of the present invention.

상기 실시예 1의 두충나무 껍질 추출물을 5.0 중량% 함유하는 BB크림을 제조하였다. 하기 표 11은 실시예 5 및 비교예의 화장료 조성물에 대한 함량을 나타낸 것이다.A BB cream containing 5.0% by weight of the extract of the bark tree of Example 1 was prepared. Table 11 below shows the contents of the cosmetic composition of Example 5 and Comparative Example.

실시예 5 및 비교예의 조성Composition of Example 5 and Comparative Example 성분ingredient 실시예4 함량
(중량%)
Example 4 Content
(weight%)
비교예 함량
(중량%)
Comparative Example Content
(weight%)
GlycerinGlycerin 5.05.0 5.05.0 Butylene GlycolButylene Glycol 5.05.0 5.05.0 NaClNaCl 1.01.0 1.01.0 1,2-Hexandiol1,2-Hexandiol 0.90.9 0.90.9 EthylhexylglycerinEthylhexylglycerin 0.10.1 0.10.1 WaterWater 42.942.9 47.947.9 EUCOMMIA ULMOIDES EUCOMMIA ULMOIDES BARK EXTRACTBARK EXTRACT 5.05.0 -- Polyglyceryl-2 Oleate, Polyhydroxystearic acid,
Polyglyceryl-2 Stearate
Polyglyceryl-2 Oleate, Polyhydroxystearic acid,
Polyglyceryl-2 Stearate
5.05.0 5.05.0
BeeswaxBeeswax 2.02.0 2.02.0 Sorbitan OlivateSorbitan Olivate 1.01.0 1.01.0 Polyglyceryl-3 PolyricinoleatePolyglyceryl-3 Polyricinoleate 2.02.0 2.02.0 Dicaprylyl EtherDicaprylyl Ether 10.010.0 10.010.0 Color BaseColor Base 20.020.0 20.020.0 incense 0.10.1 0.10.1 TotalTotal 100100 100100

상기 실시예 2 내지 5와 같이 두충나무 껍질 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 제조가 가능하다. 하기 표 12는 실시예 2 내지 5의 화장료 조성물에서의 분류를 나타낸 것이다.As in Examples 2 to 5, it is possible to prepare a cosmetic composition containing a cedar bark extract. Table 12 below shows classifications in the cosmetic compositions of Examples 2 to 5.

기초Foundation 가용화타입(세럼)Solubilization type (serum) 실시예 2Example 2 유화타입(크림)Oil type (cream) 실시예 3Example 3 분산타입(선크림)Dispersion type (sun cream) 실시예 4Example 4 색조hue BB 크림BB cream 실시예 5Example 5

[실험예 6 : 본 발명 화장료 조성물의 피부 표면 온도 저해 효능 및 피부 혈류량 저해 효능 확인][Experimental Example 6: Confirmation of the effect of inhibiting skin surface temperature and the effect of inhibiting skin blood flow of the cosmetic composition of the present invention]

본 실험예에서는 상기 실시예 2 내지 5의 화장료 조성물 중 일예로 실시예 2의 두충나무 껍질 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 피부 표면 온도 저해능 및 피부 혈류량 저해능을 확인하고자 하였다.In this experimental example, as an example of the cosmetic compositions of Examples 2 to 5, it was intended to confirm the skin surface temperature inhibitory ability and skin blood flow inhibitory ability of the cosmetic composition containing the extract of the cedar bark of Example 2 as an example.

(1) 피험자 기본 정보(1) Subject Basic Information

본 인체 적용 시험에 참가한 피험자에 대한 정보는 다음 표 9와 같다. Table 9 shows information about the subjects who participated in this human application test.

시험에 참여한 피험자 수 (명)Number of subjects participating in the test (persons) 21명21 people 최종 완료 피험자 수 (명)Number of subjects completed (persons) 20명 (1명 탈락: 추척관찰 불가)20 (1 dropout: no follow-up) 전체 평균 연령 (표준 편차)Overall mean age (standard deviation) 31.5 ± 14.63 세31.5 ± 14.63 years 성별gender 여성female

(2) 피부 표면 온도 측정 결과(2) Skin surface temperature measurement result

제품을 2주간 사용 후 시험 기관을 방문하여 제품 사용 전 (before), 제품 사용 2주 후 (2w)에 측정을 진행하였으며, 제품 사용 2주 후 적외선 램프를 이용하여 인위적으로 피부 온도를 높이는 실험적 온도 조건을 설정한 후 (After IR) 피부 표면 온도의 변화를 측정하였다. 피부 표면 온도 측정 결과는 하기 표 10, 도 9와 같다.After using the product for 2 weeks, we visited the test institute and measured before (before) and 2 weeks (2w) after using the product. Experimental temperature to artificially increase the skin temperature using an infrared lamp after 2 weeks of using the product After setting the conditions (After IR), changes in skin surface temperature were measured. Skin surface temperature measurement results are shown in Tables 10 and 9 below.

피부표면온도 평균값 (평균±표준오차)Average skin surface temperature (average ± standard error) 측정시간Measurement time Before (℃)Before (℃) 2w (℃)2w (℃) After IR (℃)After IR (℃) 평균Average 실시예2Example 2 33.4±0.3633.4±0.36 32.2±0.28a,c 32.2±0.28 a,c 35.2±0.22d 35.2±0.22 d 비교예Comparative example 34.1±0.4834.1±0.48 33.9±0.54b 33.9±0.54 b 36.2±0.2036.2±0.20

a: 실시예2, Before vs. 2w: paired t-test, significant: p<0.001 a : Example 2, Before vs. 2w: paired t-test, significant: p<0.001

b: 비교예, Before vs. 2w: paired t-test, no significant b : Comparative example, Before vs. 2w: paired t-test, no significant

c: 2w, 실시예2 vs. 비교예: independent t-test, significant: p<0.05 c : 2w, Example 2 vs. Comparative Example: independent t-test, significant: p<0.05

d: After IR, 실시예2 vs. 비교예: independent t-test, significant: p<0.05 d : After IR, Example 2 vs. Comparative Example: independent t-test, significant: p<0.05

표 10 및 도 9의 결과와 같이, 실시예 2 제품 사용군은 사용 전과 비교하여 사용 2주 후 피부 표면 온도가 통계적으로 유의하게 낮았으며, 비교예 사용군은 사용 전과 비교하여 사용 2주 후 통계적인 차이가 없었다. 제품 사용 2주차에 실시예2 사용군의 피부 표면 온도가 통계적으로 유의하게 낮았으며, 제품 사용 2주차에 두 군을 열처리한 후 피부 표면 온도를 비교 평가한 결과, 실시예2 사용군의 피부 표면 온도가 통계적으로 유의하게 낮았다. As shown in Table 10 and Figure 9, Example 2 product use group was statistically significantly lower in skin surface temperature 2 weeks after use compared to before use, Comparative Example use group compared to before use and after 2 weeks of use statistics There was no difference. The skin surface temperature of the Example 2 use group was statistically significantly lower at the 2nd week of product use, and the skin surface temperature of the Example 2 use group was compared and evaluated after heat treatment of the two groups at the 2nd week of product use. The temperature was statistically significantly lower.

따라서, 두충나무 껍질 추출물은 피부 온도 저해 효능을 나타내는 물질로 이용할 수 있음을 확인할 수 있었다.Therefore, it was confirmed that the extract of bark beetle can be used as a substance exhibiting the effect of inhibiting skin temperature.

(3) 피부 혈류량 측정 결과(3) Skin blood flow measurement result

제품을 2주간 사용 후 시험 기관을 방문하여 제품 사용 전 (before), 제품 사용 2주 후 (2w)에 측정을 진행하였으며, 제품 사용 2주 후 적외선 램프를 이용하여 인위적으로 피부 온도를 높이는 실험적 온도 조건을 설정한 후 (After IR) 피부 혈류량의 변화를 측정하였다. 피부 혈류량 측정 결과는 다음 표 11 및 도 10과 같다After using the product for 2 weeks, we visited the test institute and measured before (before) and 2 weeks (2w) after using the product. Experimental temperature to artificially increase the skin temperature using an infrared lamp after 2 weeks of using the product After setting the conditions (After IR), changes in skin blood flow were measured. Skin blood flow measurement results are shown in Table 11 and Figure 10 below.

측정시간Measurement time Before (℃)Before (℃) 2w (℃)2w (℃) After IR (℃)After IR (℃) 평균Average 실시예2Example 2 216±16.2216±16.2 181±18.3a,c 181±18.3 a,c 230±25.6d 230±25.6 d 비교예Comparative example 256±17.3256±17.3 259±21.3b 259±21.3 b 334±31.0334±31.0

a: 실시예2, Before vs. 2w: paired t-test, significant: p<0.05 a : Example 2, Before vs. 2w: paired t-test, significant: p<0.05

b: 실시예3, Before vs. 2w: paired t-test, no significant b : Example 3, Before vs. 2w: paired t-test, no significant

c: 2w, 실시예2 vs. 비교예: independent t-test, significant: p<0.05 c : 2w, Example 2 vs. Comparative Example: independent t-test, significant: p<0.05

d: After IR, 실시예2 vs. 비교예: independent t-test, significant: p<0.05 d : After IR, Example 2 vs. Comparative Example: independent t-test, significant: p<0.05

표 11 및 도 10의 결과와 같이, 실시예 2 제품 사용군은 사용 전과 비교하여 사용 2주 후 피부 혈류량이 통계적으로 유의하게 낮았으며, 비교예 사용군은 사용 전과 비교하여 사용 2주 후 통계적인 차이가 없었다. 제품 사용 2주차에 실시예2 사용군의 피부 혈류량이 통계적으로 유의하게 낮았으며, 제품 사용 2주차에 두 군을 열처리한 후 혈류량을 비교 평가한 결과, 실시예2 사용군의 피부 혈류량이 통계적으로 유의하게 낮았다. 따라서, 두충나무 껍질 추출물은 피부 혈류량 저해 효능을 나타내는 물질로서 피부 홍조 완화에 이용될 수 있음을 확인할 수 있었다.As shown in Table 11 and Fig. 10, Example 2 product use group was statistically significantly lower in skin blood flow 2 weeks after use compared to before use, and Comparative Example use group was statistically used 2 weeks after use compared to before use There was no difference. Skin blood flow of the Example 2 use group was statistically significantly lower at the 2nd week of product use, and after comparing the blood flow after heat treatment of the 2 groups at the 2nd week of product use, the skin blood flow of the Example 2 use group was statistically low. Significantly lower. Therefore, it was confirmed that the cedar bark extract can be used to alleviate redness of the skin as a substance exhibiting the effect of inhibiting skin blood flow.

이상 종합하면, 본 발명의 두충나무 껍질 추출물 및 그 유효성분 제니포사이드와 아우큐빈은 세포 사멸 저해 효과, 열 보호 효능 및 열 처리에 의해 증가된 PGE2 합성 효소 단백질의 발현을 저해시킴으로써 항염 효능이 있는 것을 확인하였다. 또한, 두충나무 껍질 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 피부 온도 저해 효능 및 피부 혈류량 저해 효능이 뛰어남을 확인하였는데, 이는 두충나무 껍질 추출물 및 그 유효성분의 PGE2와 같은 온도 조절 분자 감소에 따른 것임을 알 수 있다.Summarizing the above, the cedar bark extract of the present invention and its active ingredients, geniposide and aucuvin, have anti-inflammatory effects by inhibiting the apoptosis-inhibiting effect, heat protection efficacy, and expression of PGE2 synthase protein increased by heat treatment. Confirmed. In addition, the cosmetic composition containing the cedar bark extract was confirmed to have excellent skin temperature inhibitory effect and skin blood flow inhibitory effect, which can be seen that due to the reduction of temperature control molecules such as PGE2 of the cedar bark extract and its active ingredient. .

Claims (11)

삭제delete 두충나무(Eucommia Ulmoides) 껍질 추출물을 함유하며,
상기 두충나무 껍질 추출물은 제니포사이드(Geniposide) 및 아우큐빈(Aucubin)을 포함하며, 자외선에 의한 세포사멸을 저해하고, 자외선에 의해 증가된 TRPV4의 발현을 감소시키고, 외부 열에 의해 증가된 PGE2 합성 효소 단백질의 발현을 저해시키는 것을 특징으로 하는 외부 자극에 의한 피부 온도 상승 억제용 화장료 조성물.
Contains Eucommia Ulmoides bark extract,
The cedar bark extract includes Geniposide and Aucubin, inhibits apoptosis by UV light, reduces the expression of TRPV4 increased by UV light, and increases PGE2 synthase by external heat A cosmetic composition for inhibiting skin temperature rise due to external stimulation, characterized by inhibiting protein expression.
삭제delete 제2항에 있어서,
상기 두충나무 껍질 추출물은,
화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.1 내지 20 중량%로 함유되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
According to claim 2,
The bark tree bark extract,
Cosmetic composition, characterized in that contained in 0.1 to 20% by weight relative to the total weight of the cosmetic composition.
삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 제2항에 있어서,
상기 화장료 조성물은,
스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스쳐크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 또는 바디클렌저로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상의 제형인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
According to claim 2,
The cosmetic composition,
Skin lotion, skin softener, skin toner, astringent, lotion, milk lotion, moisture lotion, nutrition lotion, massage cream, nutrition cream, moisture cream, hand cream, foundation, essence, nutrition essence, pack, soap, cleansing foam, cleansing lotion , Cleansing cream, body lotion or cosmetic composition characterized in that it is at least one formulation selected from the group consisting of a body cleanser.
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