KR102137381B1 - 아마이드계 화합물을 포함하는 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 아마이드계 화합물을 포함하는 지질생합성 촉진용 화장료 조성물, 지방전구세포 또는 줄기세포에서 지방세포로의 분화 유도용 화장료 조성물, 및 피부 보습용 화장료 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따르면 지질생합성을 촉진함과 동시에 인간 지방 조직 유래 줄기세포 표지마커인　PPAR-γ와 분화 클러스터44의 발현을　촉진함으로써 지방 조직 유래 줄기세포의 성숙한 지방세포로의 분화를　촉진하여, 지방 조직 퇴축으로 인한 부피 감소와 기능 저하를 개선시킬 수 있으며, 피부보습인자의 발현에 시너지를 부여할 수 있다.

Description

아마이드계 화합물을 포함하는 화장료 조성물{COSMETICS COMPOSITION CONTAINING AMIDE COMPOUND}

본 발명은 아마이드계 화합물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는 아마이드계 화합물을 포함하는 지질생합성 촉진용 화장료 조성물, 지방전구세포 또는 줄기세포에서 지방세포로의 분화 유도용 화장료 조성물, 및 피부 보습용 화장료 조성물에 관한 것이다.

진피와 근막 사이에 위치하는 피하지방은, 체내 지방을 저장하는 지방세포, 지방전구세포, 지방 유래 줄기세포, 혈관 및 신경망 등을 포함하는 결합조직이다. 피하지방은 기본적으로 에너지 저장, 체온보호, 완충작용 등의 기능을 한다. 또한, 다양한 호르몬, 성장인자, 사이토카인 등을 분비한다. 이에, 면역, 체온조절, 피부조직의 성장 및 노화를 조절함으로써, 피부의 외관을 개선하는 역할을 한다. 또한, 피부에 탄력성 및 견고성을 제공하여, 개인의 외형적 상태를 형성하는 데 막대한 영향을 끼친다.

이러한 피하지방은 노화함에 따라 조직이 전반적으로 현저히 부피가 감소하고, 그 기능이 저하하는 것으로 잘 알려져 있다. 그러나, 현대에는 과도한 다이어트로 인한 영향불균형으로 인해 비교적 젊은 나이일 지라도 지방조직이 퇴축되는 경향을 보이고 있다. 이는, 지방조직 부피 저하로 인한 피부 탄력 감소 및 강도 하락으로 인한 구조적 붕괴뿐만 아니라, 피부 조직 및 전신적인 대사를 조절하는 내분비기관으로서의 기능저하로 인한 노화 촉진, 면역 및 재생 감소 등의 문제를 야기한다.

이러한 문제를 해결하기 위해, 현재 침습적인 방법을 이용한 자가 지방이식 수술 등의 외과적 시술방법이 시행되고 있다. 비교적 지방이 풍부한 복부나 허벅지 부위의 지방을 채취하여 이동시키는 방법으로 화상, 수술, 흉터 등로 인해 함몰된 피부나, 노화로 인한 피하지방 감소를 일부 개선할 수 있다. 하지만, 고가의 비용을 들여야 하며, 시술 후 자가 지방 조직의 생착률이 일정하지 않고, 수술적인 방법을 이용해야만 하는 침습적인 방식이라는 단점을 갖는다. 이에, 이러한 단점을 보완하면서, 피하지방층의 퇴축을 복구시킬 수 있는 비침습적인 방식에 대한 요구가 커지고 있다.

현재 많은 연구를 통해, 피하지방에 중간엽 계열의 다능성 줄기세포가 존재하는 것이 증명되었다. 이 줄기세포는 지방 조직 유래 줄기세포라고 하며, 환경적인 신호에 따라, 성숙한 지방세포로 분화한다. 뿐만 아니라 다양한 호르몬 및 사이토카인을 분비함으로서 지방 및 피부조직의 항상성을 유지하도록 돕는다. 또한, 지방 유래 줄기세포가 피하지방으로 분화하도록 유도함으로써, 자가 지방이식 수술에서와 같은 동등이상의 효과를 갖는 비침습적이고 안전한 지방 재생을 기대할 수 있다.

또한, 피부의 최외각에 위치하고 있는 표피(epidermis)는 외부의 다양한 물리적, 화학적 및 기계적 자극에 대한 방어와 피부를 통한 체내 수분의 과도한 발산을 막는 보호 기능을 수행하고 있다. 이러한 보호 기능은 각질형성 세포로 구성된 각질층이 정상적으로 형성되고 유지됨으로써 가능하다. 각질형성세포는 표피최하층(stratum basale)에서 지속적으로 증식하던 기저세포(basal cell)가 각질층(stratum corneum)으로 이동하면서, 단계적으로 형태 및 기능상의 변화를 거치며 형성된 세포이며, 일정 기간이 지나면 오래된 각질형성세포는 피부에서 탈락되고, 표피 최하층으로부터 올라온 새로운 각질형성세포가 그 기능을 대신하는 표피 분화(epidermis differentiation) 또는 각화(keratinization)의 과정을 반복하게 된다. 이러한 각화과정에서 각질형성세포는 천연보습인자(Natural Moisturizing Factor; NMF)와 세라마이드, 콜레스테롤 및 지방산과 같은 세포 간 지질을 생성하여, 각질층이 외부와의 차단층 역할을 하게 됨으로써 피부장벽(skin barrier)로서의 기능을 보유하게 된다.

또한, 현대 사회의 주요 질환의 하나로 여겨지는 피부 건조증은 피부 장벽 기능 이상에 의해 야기되는 증상의 하나로, 최근 환경 오염, 아파트, 고층 건물과 같은 건조한 환경의 증가, 사회적 스트레스의 증가, 우리나라 특유의 과도한 목욕 문화, 피부 노화 등과 같은 여러 가지 요인에 의해 점점 더 증가하고 있으며, 증세가 심하여 치료를 필요로 하는 경우 또한 지속적으로 증가하고 있다. 종래에는 피부 내 적절한 수분 유지에 중점을 두어 외부로부터 수분을 공급하거나 체내로부터의 수분 손실을 최소화하기 위한 연구가 많이 진행되어 왔으며, 실제로도 수분 보유 능력이 있는 보습소재가 널리 이용되고 있다.

그러나, 이와 같은 보습제의 사용은 그 대부분이 근본적인 치료이기보다는 일시적인 증상의 완화에 불과하여, 피부 건조증 및 피부 장벽 기능 이상의 개선에 대한 충분한 효과를 나타내지 못하는 것이 사실이다. 이에, 보습은 물론 지질 분포비율 및 지질량을 보존하여 손상된 피부 장벽 기능을 근원적으로 재생시켜주는 물질의 개발에 대한 니즈는 여전히 요구된다.

본 발명은 지질생합성 촉진은 물론 지방전구세포 또는 줄기세포에서 지방세포로의 분화를 촉진함과 동시에 피부 장벽 기능 이상의 유효한 개선을 위해 필라그린과 로리크린의 발현을 촉진하는 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상술된 목적을 위하여, 본 발명에서는 N-(2,3-디히드록시프로필)헥산아마이드, N-(2-히드록시-1-(히드록시메틸)에틸)데칸아마이드 또는 이들의 조합을 유효성분으로 포함하는 지질생합성 촉진용 화장료 조성물이 제공된다.

본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 지질생합성은 각질세포 또는 피지세포 등에서 이루어지는 것일 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 지질생합성 촉진은 퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체 감마의 발현을 촉진시켜 이루어지는 것일 수 있다.

또한, 본 발명에서는 N-(2,3-디히드록시프로필)헥산아마이드, N-(2-히드록시-1-(히드록시메틸)에틸)데칸아마이드 또는 이들의 조합을 유효성분으로 포함하는 지방전구세포 또는 줄기세포에서 지방세포로의 분화 유도용 화장료 조성물이 제공된다.

본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 줄기세포는 인간 지방 조직 유래 줄기세포일 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 줄기세포는 중간엽 줄기세포일 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물은, 퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체 감마의 발현을 증가시키는 것일 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물은, 분화 클러스터44(CD44)의 발현을 증가시키는 것일 수 있다.

또한, 본 발명에서는 N-(2,3-디히드록시프로필)헥산아마이드, N-(2-히드록시-1-(히드록시메틸)에틸)데칸아마이드 또는 이들의 조합을 유효성분으로 포함하는 피부 보습용 화장료 조성물이 제공된다.

본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물은, 피부보습인자를 증가시키는 것일 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 피부보습인자는 필라그린 및 로리크린에서 선택되는 것일 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 유효성분은 상기 화장료 조성물 총 중량에 대하여, 0.001 내지 5중량%로 포함되는 것일 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물은, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 아이 크림, 영양 크림, 마사지 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 에센스 또는 팩 등으로 제형화되는 것일 수 있다.

또한, 본 발명에서는 N-(2,3-디히드록시프로필)헥산아마이드, N-(2-히드록시-1-(히드록시메틸)에틸)데칸아마이드 또는 이들의 조합을 유효성분으로 포함하는 조성물을 화장료로서 사용하여 피부의 상태를 개선시키는 방법이 제공된다.

본 발명의 일 실시예에 따른 방법에 있어서, 상기 개선은 퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체 감마의 발현 증가; 분화 클러스터44의 발현 증가; 및 피부보습인자를 증가시켜 이루어지는 것일 수 있다.

본 발명에 따르면, 지질생합성 촉진과 동시에 지방분화의 핵심　조절자로 인간 지방 조직 유래 줄기세포 표지마커인　PPAR-γ와 분화 클러스터44의 발현을　촉진함으로써 지방 조직 유래 줄기세포의 성숙한 지방세포로의 분화를　촉진하여, 지방 조직 퇴축으로 인한 부피 감소와 기능 저하로 유발되는 현대인들의 미적, 건강적 문제를 개선할 수 있는 새로운 용도를 제공할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물을 인체에 도포시 피부보습인자의 발현을 촉진하여, 피부 조직의 안정적인 수분 유지를 돕고, 피부 장벽을 강화함으로써, 피부 내 수분을 유지하게 하는 피부　보습　효과가 우수하다. 또한, 본 발명의 화장료 조성물은 인체에 안전하며 장기간 사용하여도 부작용이 없다.

도 1은 본 발명의 실시예 및 비교예를 처리한 피지세포에서 PPAR-γ 발현 촉진 효과를 컨트롤과 양성대조군 대비 나타낸 그래프이고,
도 2는 본 발명의 실시예 및 비교예를 처리한 피지세포에서 Nile Red시약으로 염색하여 컨트롤과 양성대조군 대비 형광세기를 비교한 현미경 사진이고,
도 3는 본 발명의 실시예 및 비교예를 처리한 지방 조직 유래 중간엽 줄기세포에 처리한 후, CD44의 발현량을 컨트롤과 양성대조군 대비 나타낸 그래프이고,
도 4은 본 발명의 실시예 및 비교예를 처리한 후, 필라그린 유전자 발현결과를 컨트롤과 양성대조군 대비 나타낸 그래프이고,
도 5은 본 발명의 실시예 및 비교예를 처리한 후, 로리크린 유전자 발현결과를 컨트롤과 양성대조군 대비 나타낸 그래프이다.

본 발명에 따른 아마이드계 화합물을 포함하는 화장료 조성물에 대하여 이하 상술하나, 이때 사용되는 기술 용어 및 과학 용어에 있어서 다른 정의가 없다면, 이 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 통상적으로 이해하고 있는 의미를 가지며, 하기의 설명에서 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있는 공지 기능 및 구성에 대한 설명은 생략한다.

본 명세서의 용어, "전구세포"는 위탁줄기세포라고도 하며, 자손에 해당되는 세포(X)가 특정한 분화형성 발현이 밝혀진 경우, 분화형질을 발현하지 않은 미분화 친(親)세포를 X의 전구세포라고 부른다. 또한, "지방전구세포"는 지방세포로의 분화형성 발현이 밝혀진 전구세포를 말한다.

본 명세서의 용어, "줄기세포"는 동물의 미분화된 세포로서 모든 다세포 생물에 존재하며, 무한 증식이 가능한 자가 재생산 능력과 정상 염색체 유지 및 다양한 세포로의 분화 능력을 가지고 있는 세포를 말한다. 신체 210여 개의 장기를 구성하는 조직의 어떠한 세포로도 분화할 수 있다는 만능(Totipotent) 잠재력으로 인해 인체의 마스터 세포(Master cell)로 알려져 있다. 이러한 줄기세포의 일 예로는 유래에 따라 배아줄기세포, 성체줄기세포, 제대혈 줄기세포, 중간엽 줄기세포 또는 인간 지방 조직 유래 줄기세포 등을 들 수 있다. 보다 구체적으로, 본 명세서에서는 중간엽 줄기세포이거나, 지방 조직 유래 중간엽 줄기세포일 수 있다.

본 명세서의 용어, "중간엽 줄기세포"는 근육, 뼈, 지방 등의 중간엽 조직으로 분화되는 중간엽 줄기세포로 골수에 존재하며 신경, 피부와 같은 세포로 분화될 수 있는 능력을 가진 성체 줄기세포(Adult stem cell, AS) 중 하나를 말한다. 이러한, 성체 줄기세포는 지속적인 세포 교체를 반복하는 기관에서 발견되며, 이러한 기관들에는 피부의 표피층, 소장의 내막, 골수, 뇌, 힘줄 등이 있다.

본 명세서의 용어, "지방 조직 유래 줄기세포"는 지방조직에 분포하는 다분화성을 지닌 세포를 말한다. 이들은 골수 중간엽 줄기세포와 동등한 수준의 분화 잠재력을 가지고 있으며, 콜로니 형성능과 세포 배양에서의 증식능 유지에 골수 중간엽 줄기세포 보다 우수한 것으로 보고되어 있다. 또한, 지방 조직 유래 줄기세포의 증식은 FGF-2(fibroblast growth factor)에 의해 자극받을 수 있고, 지방세포 유래 줄기세포가 혈관 내피세포 성장인자(vascular endothelial growth factor, VEGF), 간세포 성장인자(hepatocyte growth factor, HGF), 인슐린 유사 성장 인자(insulin like growth factor, IGF)와 같은 잠재적 성장 인자들을 분비하는 것으로 알려져 있다. 지방 조직 유래 줄기세포는 골수나 제대혈에서 분리한 줄기세포와는 다르게 여러 번 반복해서 채취가 가능하며 골수처럼 채취할 때 환자에게 고통을 주지도 않는 장점이 있고, 대부분 자가 유래(autologous)이기 때문에 면역학적 거부반응이 없다는 장점을 가진다.

본 명세서의 용어, "지방세포로의 분화"는 동물, 구체적으로는 포유동물의 지방전구세포 또는 줄기세포가 지방세포로 분화하는 것을 의미한다. 본 명세서의 용어, "분화 유도용 조성물"은 초기 단계의 세포가 각 조직으로서의 특성을 갖게 되는 과정을 유도할 수 있는 조성물을 의미하며, 본 발명의 목적상 상기 지방전구세포 또는 줄기세포를 지방세포로 분화 유도할 수 있는 조성물을 의미한다.

본 명세서의 용어, "PPAR-γ (Peroxisome Proliferator Activated Receptor-gamma)"는　퍼옥시좀　증식체　활성화 수용체 감마로, 글리타존 리셉터(glitazone receptor) 또는 NR1C3(nuclear receptor subfamily 1, group C, member 3)라고 알려져 있으며,　PPARG 유전자에 의해 코딩되는 인간에 존재하는 타입 Ⅱ의 핵 수용체(nuclear receptor)이다. 상기　PPAR-γ는 지방분화의 핵심 조절자로, 지방 조직 유래 줄기세포로부터 지방세포로의 분화 정도를 확인할 수 있는 지방세포 분화 마커로 사용될 수 있다.

본 명세서의 용어, "CD44"는 지방 조직 유래　줄기세포 표지마커인 분화 클러스터44(Cluster of Differentiation 44)로, 이의 발현량 증가는 지방 조직 유래 줄기세포의 활성이 증가된다는 것을 의미한다.

본 명세서의 용어 "필라그린(filaggrin)"은 포유류의 표피세포에서　분리한 케라틴 결합단백질로, 분자량이 약 260,000의 염기성 단백질을 의미하는 것으로, 상기 단백질은 케라틴의 단위체와 약 3:2의 비율로 결합하고, 그 섬유를 다발모양으로 응집시켜 거대피브릴을 형성하며, 분자량이 약 50만의 고도로 인산화된 전구체로서, 세포 내에 축적되어 분화가 진행되면 단백질가수분해효소에 의한 절단과 탈인산화를 받아 필라그린이 된다고 알려져 있다.

본 명세서의 용어 "로리크린(loricrin)"은 최종 분화를 거치는 동안 발현되는데, 이들은 상부 과립층에서 세포막과 서로 결합하여 단백질로 완성되므로, 각질형성세포의 최종 분화 과정을 추적하는 데에 있어서 표지자로 사용될 수 있다.

본 발명자들은 화장품 소재에 대한 연구를 거듭하던 중 특정구조의 아마이드계 화합물이 퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체 감마(PPAR　-γ)의 발현을 조절할 수 있음을 확인하였다. 허나, 유사한 구조적 특징을 갖는 화합물에서도 비특이적인 효과를 나타냄을 발견하여, 연구를 심화하였다.

본 발명자들은, 특히 N-(2,3-디히드록시프로필)헥산아마이드, N-(2-히드록시-1-(히드록시메틸)에틸)데칸아마이드에 주목하였다. 상술된 아마이드계 화합물은, PPAR　-γ의 발현을 촉진함과 동시에 지방전구세포 또는 줄기세포에서 지방세포로의 분화를 유도하는 데 유효한 효과를 발휘한다. 또한, 다양한 피부보습인자와 지질량의 보완 및 유지에 시너지를 갖는다. 이에, 본 발명자들은 이와 같은 효과를 기반하여, 기존에 알려지지 않았던 이들의 용도를 밝힘으로써, 본 발명을 제안하고자 한다.

이하, 본 발명에 대하여 구체적으로 설명한다.

본 발명의 화장료 조성물은 N-(2,3-디히드록시프로필)헥산아마이드, N-(2-히드록시-1-(히드록시메틸)에틸)데칸아마이드 또는 이들의 조합을 유효성분으로 포함하며, 이의 구체적인 기능은 아래와 같다.

본 발명의 제1양태는 지질생합성 촉진용 화장료 조성물이다.

본 발명의 지질생합성 촉진용 화장료 조성물은, ⅰ)PPAR　-γ의 발현을 촉진하고, ⅱ)피지세포의 분화를 촉진한다. 이로, 본 발명의 화장료 조성물은 피부 표피 지질의 항상성의 붕괴를 개선시킬 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따른 지질생합성 촉진용 화장료 조성물에 있어서, 상기 지질생합성은 각질세포 또는 피지세포에서 이루어지는 것일 수 있으며, 상술된 세포 내에서 PPAR　-γ의 발현을 촉진하여 이루어지는 것일 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따른 지질생합성 촉진용 화장료 조성물은 지질량 증가를 유도하며, 각질세포의 지질 합성 유도를 증가시킨다. 또한, 트리글리세라이드의 합성을 촉진시켜, 이의 효과에 시너지를 부여한다.

본 발명의 제2양태는 지방전구세포 또는 줄기세포에서 지방세포로의 분화 유도용 화장료 조성물이다.

본 발명의 지방전구세포 또는 줄기세포에서 지방세포로의 분화 유도용 화장료 조성물은, ⅰ)PPAR　-γ의 발현을 촉진하고, ⅱ)지방세포의 증가, ⅲ) 분화 클러스터44의 발현 증가를 구현한다. 이로, 본 발명의 화장료 조성물은 지방 조직 유래 줄기세포의 성숙한 지방세포로의 분화를　촉진하여, 지방 조직 퇴축으로 인한 부피 감소와 기능 저하로 유발되는 피부 문제를 개선시킬 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따른 지방전구세포 또는 줄기세포에서 지방세포로의 분화 유도용 화장료 조성물에 있어서, 상기 줄기세포는 구체적으로 인간 지방 조질 유래 줄기세포일 수 있고, 보다 구체적으로는 중간엽 줄기세포일 수 있다.

본 발명의 제3양태는 피부 보습용 화장료 조성물이다.

본 발명의 피부 보습용 화장료 조성물은 필라그린 및 로리크린 등의 피부보습인자의 발현을 촉진하여 피부에 도포시 피부 조직의 수분 유지능을 현저하게 하고, 피부 장벽을 강화함으로써, 이의 효과에 시너지를 부여한다.

본 발명의 화장료 조성물은 상기와 같은 효과에 대한 동시 구현으로 퇴축된 지방조직의 부파를 완화시키고 개선시킬 수 있다. 따라서, 본 발명의 화장료 조성물은 피부 재생은 물론 나아가 손상된 피부가 원래의 기능을 회복할 수 있도록 도울 수 있음을 시사하는 것이므로, 본 발명의 화장료　조성물이 피부재생 용도로 사용될 수도 있다.

또한, 본 발명은 상술된 본 발명의 화장료 조성물을 피부에 도포하여 피부의 상태를 개선시키는 방법의 용도로도 사용될 수 있다. 상기 개선은 퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체 감마의 발현 증가; 분화 클러스터44의 발현 증가; 및 피부보습인자를 증가시켜 이루어지는 것에서 선택되는 하나 이상의 효과로부터 이루어지는 것일 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 상술한 바와 같이 N-(2,3-디히드록시프로필)헥산아마이드, N-(2-히드록시-1-(히드록시메틸)에틸)데칸아마이드 및 이들의 조합에서 선택되는 아마이드계 화합물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하며, 상기 아마이드계 화합물은 하기 구조를 갖는다.

일 예로, 본 발명의 화장료 조성물은 유효성분으로써, 상기 아마이드계 화합물의 약학적 허용 가능한 염, 이의 용매화물 및 이의 입체이성질체 역시도 본 발명의 일 양태로 포함할 수 있다.

상기 아마이드계 화합물은 피부에 대한 유효한 효과 발현을 하는 사용량에서 세포 독성 및 피부 자극을 유발하지 않아 안전하게 사용할 수 있다. 또한, 상기 아마이드계 화합물은 제형 내에서 그 효능이 안정적으로 유지됨은 물론 제형 내 석출되거나 분리되는 현상을 야기하지 않을 뿐 아니라 보관안정성도 좋다.

본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 유효성분은 상기 화장료 조성물 총 중량을 기준으로 0.001 내지 5중량%로 포함될 수 있다. 구체적으로는 0.001 내지 3중량%, 보다 구체적으로는 0.01 내지 1중량%로 포함되는 것이 좋다. 상술된 범위로 유효성분을 포함하는 경우, 제형의 안정성을 해치지 않으면서도 본 발명에서 목적하는 효과, 즉 용도에 현저함을 보여 보다 바람직하다.

또한, 본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 유효성분을 혼합물의 양태로 포함하는 경우 보다 현저한 시너지를 부여할 수 있어 좋다. 특히, 상기 N-(2,3-디히드록시프로필)헥산아마이드 및 N-(2-히드록시-1-(히드록시메틸)에틸)데칸아마이드의 조합을 유효성분으로 포함하는 경우, 피부보습인자의 발현 촉진에 보다 현저함을 보인다.

일 예로, 혼합된 유효성분(1:1, 중량비)을 포함하는 경우, 동일 사용량의 단일 성분을 포함하는 경우 대비 효과 상승을 보인다.

일 예로, 상기 혼합된 유효성분의 경우, 상기 N-(2,3-디히드록시프로필)헥산아마이드와 N-(2-히드록시-1-(히드록시메틸)에틸)데칸아마이드는 0.01:99.99 내지 99.99:0.01의 중량비로 혼합한 것일 수 있으며, 구체적으로 1:9 내지 9:1의 중량비, 보다 구체적으로 1:1 내지 9:1의 중량비로 혼합한 것일 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물은 상술된 유효성분 및 잔량을 물을 포함하는 것일 수 있으며, 다양한 양태로 제형화될 수 있음은 물론이다.

본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물 통상적으로 알려진 제조방법을 이용하여, 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형 등으로 제형화될 수 있다.

일 예로, 상기 화장료 조성물은 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 아이 크림, 영양 크림, 마사지 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 에센스, 팩 등에서 선택되는 제형으로 제형화되는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

또한, 상기 화장료 조성물은 목적하는 바에 따라 적절하게 추가의 첨가제를 더 포함할 수 있으며, 상기 아마이드계 화합물과 함께 당업계에 공지된 주름 개선용 성분, 항산화용 성분, 미백 성분 등에서 선택되는 성분을 더 포함할 수 있다. 일 예로, 레티노산, TGF, 동물 태반 유래의 단백질, 베튤린산 및 클로렐라 추출물 등에서 선택될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.

또한, 상기 화장료 조성물은 안정화제, 유화제, 점증제, 보습제, 액정 막강화제, pH 조절제, 항균제, 수용성 고분자, 피막제, 금속 이온 봉쇄제, 아미노산, 유기 아민, 고분자 에멀션, pH조정제, 피부 영양제, 산화 방지제, 산화 방지조제, 방부제, 향료 등에서 선택되는 하나 이상의 수성 첨가제; 및 유지류, 왁스류, 탄화 수소유, 고급 지방산유, 고급 알콜, 합성 에스테르유 및 실리콘유 등에서 선택되는 하나 이상의 유성 첨가제;에서 선택되는 하나 이상의 첨가제를 더 포함할 수 있다.

이때, 상기 각 첨가제는 상기 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 20 중량%로 포함될 수 있으며, 구체적으로는 0.01 내지 10중량%, 0.05 내지 5중량%로 포함될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.

(평가방법)

1. PPAR-γ 발현량 분석

본 발명의 실시예 및 비교예의 웨스턴 블랏(Western blot)을 통한 PPAR-γ의 발현량을 확인하였다.

구체적으로, 인간　피지세포(human sebocyte)를 10%의 우태아 혈청(fetal bovine serum, FBS)이 함유된 Dulbecco's modified eagle medium (DMEM)/F12(1 : 1)배지가 담긴 12 well plate에　피지세포 1.5×10⁵(1 mL/well)개를 부착시켰다. 24시간 동안 배양하고 난 뒤 무혈청 배지로 교체하였다. 이에, 실시예 또는 비교예 화합물을 각각 처리한 실험군을 24시간 배양 후에 세포를 회수하였다. 이후, 이들 각 시료에 대하여 웨스턴 블랏(western blot)을 통하여　피지세포에서의 PPAR-γ 발현량을 분석하였다. 상기 시료는 하기 표1에 도시한 구조의 아마이드계 화합물을 포함하는 실시예1, 실시예2, 비교예1 또는 비교예2를 이용하였다(100μM). 또한, 양성대조군으로는 IGF-1 10μM을 처리한 시료를 사용하였고, 비교군으로는 시료를 처리하지 않은 컨트롤(Control)로 사용하였다.

이로부터 수득된 결과는, 하기 도 1 에 도시하였다.

2. 지방세포로의 분화　유도 효과 확인

상기 1의 평가방법과 동일하게 인간 피지세포를 포함하는 배지가 담긴 12 well plate에　피지세포 1×10⁵(1 mL/well)개를 부착시키고, 24시간 동안 배양하고 난 뒤 1%의 우태아 혈청 배지로 교체하였다. 이에, 실시예 또는 비교예 화합물을 각각 처리한 실험군을 48시간 배양 하였다. Nile　red (1ug/ml)용액으로 30분 동안 세포 염색 후 염색된 세포가 붙어 있는 슬라이드 커버(cover slide)를 mounting solution이 1방울 떨구어져 있는 슬라이드에 덮은 후 완전히 굳은 뒤 현미경 이미지(microscopic image)로 관찰하였다.

이로부터 수득된 결과는, 하기 도 2 에 도시하였다.

3. CD44을 발현량 분석

본 발명의 실시예 및 비교예의 지방 조질 유래 줄기세포의 유세포 분석을 위해, CD44 발현량을 측정하였다. 이를 위해 각 시료를 각 배지에 첨가하였다. 상기 시료는 하기 표1에 도시한 구조의 아마이드계 화합물을 포함하는 실시예1, 실시예2, 비교예1 또는 비교예2를 이용하였다(100μM). 또한, 양성대조군으로는 IGF-1 10μM을 처리한 시료를 사용하였고, 비교군으로는 시료를 처리하지 않은 컨트롤(Control)로 사용하였다.

구체적으로, 지방 조직 유래 중간엽 줄기세포(human Adipose-derived stem cells, hADSCs)를 easy BLUE 시약을 사용하여 제작사의 설명서에 따라 RNA를 분리하였다. 분리된 RNA는 diethyl procarbonate (DEPC)가 첨가된 증류수에 용해시킨 후 260 nm에서 흡광도를 측정하고 농도를 정량하여 실험에 사용하고 지방 조직 유래 줄기세포에서 CD44의 발현량을 분석하였다.

이로부터 수득된 결과는, 하기 도3에 도시하였다.

4. 필라그린 및 로리크린의 발현량 분석

본 발명의 실시예 및 비교예의　보습인자 발현촉진효과를 측정하기 위해, 필라그린 및 로리크린의 발현량을 측정하였다.

구체적으로, 인비트로젠(사)로부터 구입한 각질형성세포를 보충제(HKGS, human keratinocyte growth supplement)를 함유한 EpiLife (keratinocyte growth media:각질세포성장 배지)에서 일정시간 배양한 후 3 계대의 세포를 사용하였다. 3 계대의 각질형성세포를 6 well plate에서 70~80%까지 배양한 후, 각 well에 대하여, 각 시료를 구분하여 처리한 후, 총 24 시간 배양하였다. 배양된 세포는 easy BLUE을 사용하여 각질형성세포의 RNA를 추출한 후 cDNA 합성을 SuperScript reverse transcriptase III kit를 사용하여 실시하였다. 유전자 비교를 위한 real-time PCR은 2X TaqMan universal PCR mixture(10 μl), 20X TaqMan expression assay mix (1 μl), cDNA(50 ng) 및 프라이머(Filaggrin: Hs00856927_g1*,　Loricrin: Hs01894962_s1*)를 사용하여 7500 Fast Real-Time PCR를 이용하여 수행하였다. 또한, 양성대조군으로는 IGF-1 10μM을 처리한 시료를 사용하였고, 비교군으로는 시료를 처리하지 않은 컨트롤(Control)로 사용하였다.

이로부터 수득된 결과는, 하기 도 4 내지 도 5에 도시하였다.

(실시예1 및 실시예2)

하기 표1에 도시한 구조의 아마이드계 화합물을 이용하여, 상기 평가방법을 실시하였다. 각 실시예의 시료는 100μM의 농도로 준비되었다.

(비교예1 및 비교예2)

하기 표1에 도시한 구조의 아마이드계 화합물을 이용하여, 상기 평가방법을 실시하였다. 각 비교예의 시료 역시 100μM의 농도로 준비되었다.

하기 도 1 및 도 2에 나타낸 바와 같이, 양성대조군인 IGF-1을 처리한 시료와 본 발명의 화합물을 처리한 시료(실시예)에 의해 PPAR-γ의 발현이 촉진되는 것을 확인하였다. 구체적으로, 본 발명의 실시예1 또는 실시예2 화합물을 처리한 시료의 경우, PPAR-γ의 발현에 있어서, 128.4% 또는 140.8%로 향상된 효과를 발휘함을 확인하였다.

반면, 본 발명의 화합물과 구조적 특징이 유사한 비교예1 또는 비교예2 화합물을 처리한 시료(비교예)의 경우, PPAR-γ의 발현이 촉진되는 것이 아닌 PPAR-γ의 발현이 억제되는 현상을 보였다. 구체적으로, 비교예1 또는 비교예2 화합물을 처리한 시료의 경우, 컨트롤 대비 24.5% 또는 75.5% 수준으로 PPAR-γ의 발현을 억제함을 확인하였다.

하기 도 1 및 도 2에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 화합물을 처리한 시료의 경우 농도 의존적으로 피지세포의 분화를 보다 효과적으로 유도함을 확인하였다. 이처럼, 본 발명의 화합물을 처리한 시료의 경우 지질 생합성을 증가시켜, Nile red 염색 시 지질의 방울의 생성이 증가되는 것을 확인하였다.

하기 도 3에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 화합물을 처리한 시료의 경우, CD44의 발현량이 컨트롤 대비 200% 이상으로 현저하게 증가되는 것을 확인하였다. 이와 같은 CD44의 발현량 증가에 대한 효과는 지방 조직 유래 줄기세포의 활성이 증가된다는 것을 의미한다. 이에, 본 발명에 따르면 지방세포로의 분화를 촉진하여, 피부재생 및 상처개선에 있어서 그 효과를 극대화시킬 수 있다. 반면, 비교예2 화합물을 처리한 시료에서는 컨트롤 대비 CD44의 발현량에 유의미한 촉진 효과가 확인되지 않았으며, 보다 낮은 CD44의 발현량을 보였다.

하기 도 4 내지 도 5에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 화합물을 처리한 시료의 모든 경우에서 필라그린 및 로리크린의 발현을 촉진함을 확인하였다. 특히, 실시예1 화합물을 처리한 시료의 경우, 컨트롤 대비 300%이상으로 향상된 필라그린 발현량을 보였고, 400%이상으로 향상된 로리크린 발현량을 보임을 확인하였다. 또한, 본 발명의 화합물을 처리한 시료의 모든 경우에서 필라그린 및 로리크린의 발현량에 증가를 보였으며, 이의 효과는 비교예2 화합물을 처리한 시료 대비 놀랍도록 향상된 효과에 달함을 확인하였다.

이상과 같이 본 발명에서는 특정된 사항들과 한정된 실시예에 의해 설명되었으나 이는 본 발명의 보다 전반적인 이해를 돕기 위해서 제공된 것일 뿐, 본 발명은 상기의 실시예에 한정되는 것은 아니며, 본 발명이 속하는 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 이러한 기재로부터 다양한 수정 및 변형이 가능하다.

따라서, 본 발명의 사상은 설명된 실시예에 국한되어 정해져서는 아니되며, 후술하는 특허청구범위뿐 아니라 이 특허청구범위와 균등하거나 등가적 변형이 있는 모든 것들은 본 발명 사상의 범주에 속한다고 할 것이다.

Claims (15)

1. N-(2,3-디히드록시프로필)헥산아마이드, N-(2-히드록시-1-(히드록시메틸)에틸)데칸아마이드 또는 이들의 조합을 유효성분으로 포함하는 지질생합성 촉진용 화장료 조성물.
2. 제 1항에 있어서,
   상기 지질생합성은,
   각질세포 또는 피지세포에서 이루어지는 것인, 화장료 조성물.
3. 제 1항에 있어서,
   상기 지질생합성 촉진은,
   퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체 감마의 발현을 촉진시켜 이루어지는 것인, 화장료 조성물.
4. N-(2,3-디히드록시프로필)헥산아마이드, N-(2-히드록시-1-(히드록시메틸)에틸)데칸아마이드 또는 이들의 조합을 유효성분으로 포함하는 지방전구세포 또는 줄기세포에서 지방세포로의 분화 유도용 화장료 조성물.
5. 제 4항에 있어서,
   상기 줄기세포는,
   인간 지방 조직 유래 줄기세포인, 화장료 조성물.
6. 제 4항에 있어서,
   상기 줄기세포는,
   중간엽 줄기세포인, 화장료 조성물.
7. 제 4항에 있어서,
   상기 화장료 조성물은,
   퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체 감마의 발현을 증가시키는 것인, 화장료 조성물.
8. 제 4항에 있어서,
   상기 화장료 조성물은,
   분화 클러스터44의 발현을 증가시키는 것인, 화장료 조성물.
9. N-(2,3-디히드록시프로필)헥산아마이드, N-(2-히드록시-1-(히드록시메틸)에틸)데칸아마이드 또는 이들의 조합을 유효성분으로 포함하는 피부 보습용 화장료 조성물.
10. 제 9항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은,
    피부보습인자를 증가시키는 것인, 화장료 조성물.
11. 제 10항에 있어서,
    상기 피부보습인자는,
    필라그린 및 로리크린에서 선택되는 것인, 화장료 조성물.
12. 제 1항, 제 4항 또는 제 9항에 있어서,
    상기 유효성분은,
    총 중량에 대하여, 0.001 내지 5중량%로 포함되는 것인, 화장료 조성물.
13. 제 1항, 제 4항 또는 제 9항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은,
    유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 아이 크림, 영양 크림, 마사지 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 에센스 또는 팩으로 제형화되는 것인, 화장료 조성물.
14. N-(2,3-디히드록시프로필)헥산아마이드, N-(2-히드록시-1-(히드록시메틸)에틸)데칸아마이드 또는 이들의 조합을 유효성분으로 포함하는 조성물을 화장료로서 사용하여 피부의 상태를 개선시키는 방법.
15. 제 14항에 있어서,
    상기 개선은,
    퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체 감마의 발현 증가;
    분화 클러스터44의 발현 증가; 및
    피부보습인자를 증가시켜 이루어지는 것인, 방법.

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