KR102124381B1 - 난초 캘러스 추출물을 함유하는 피부 보호용 조성물 - Google Patents
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Abstract
난초잎 캘러스의 극성 용매 추출물인 난초 캘러스 추출물을 유효량 함유하는 피부 보호용 조성물이 제공된다. 상기 조성물은 특히 피부 보습, 피부 부드러움 증가, 피부 윤택성 증가, 피부 탄력 증가, 피부 조임, 피부결들의 감소, 피부 노화 지연, 콜라겐 함량 증가 보조, 피부 조직 수복, 피부 병변 예방 및/또는 상처 치유 촉진을 위해 사용된다.
Description
본 출원은 2017년 4월 10일자로 미국 특허청에 제출된 미국 가출원 제62/483,722호를 우선권으로 주장하며, 이의 개시내용은 그 전체가 본원에 참고로 통합되어 있다.
본 발명은 피부를 보호하기 위한 난초 캘러스 추출물의 용도, 특히 피부를 보호하기 위한 난초잎의 캘러스 추출물의 용도에 관한 것이다. 피부 보호 용도는 피부 보습, 피부 부드러움 증가, 피부 윤택성 증가, 피부 탄력 증가, 피부 조임, 피부결들의 감소, 피부 노화 지연, 콜라겐 함량 증가 보조, 피부 조직 수복, 피부 병변 예방 및/또는 상처 치유 촉진을 포함한다.
인체의 가장 큰 조직일 뿐만 아니라 이물 침입 및 외부 환경 자극에 대한 제1 방어선인 피부는 수분 보유, 온기 유지 및 감각에 중요한 역할을 한다. 자외 (UV) 선, 방사선 및 환경 내 미생물 및 미립자 물질에 노출되면 피부의 수분 함량이 감소하고 피부 노화 현상 (예를 들면, 피부 각질 비대, 피부 건조 및 탈락, 미세한 라인과 어두운 색의 점 발생, 피부 처짐, 및 단백질의 분해 및 소실)의 발생이 가속화될 수 있고, 심지어는 피부 세포의 DNA를 파괴하여 세포 독성 및 세포 변이를 유발하고 피부 병변에 이르게 할 수 있다.
콜라겐과 히알루론산은 모두 피부의 수분 함량을 증가시키는 데 중요한 물질이며, 콜라겐은 수분 보유 기능을 제공할 뿐만 아니라 피부에 복원성과 탄성을 부여한다. 피부 진피 내 엘라스틴은 피부 세포의 구조를 지지할 수 있다. 따라서 피부 내에 콜라겐, 히알루론산 및 엘라스틴의 함량을 증가시킬 수 있다면, 피부의 신축성과 탄력성을 증가시키고 피부를 조이고 피부 상에 미세한 라인들을 고르게 폄으로써 피부 꺼짐과 처진 증상을 완화시킬 수 있는 효과를 얻을 수 있다.
최근 사람들은 피부 관리 문제에 더 많은 관심을 기울이고 있고 피부 관리에 천연의 안전한 물질을 사용하는 것을 선호한다. 따라서, 당 업계에는 천연의 안전한 물질을 사용하는 피부 관리 접근법에 대한 필요성이 여전히 존재한다. 본 발명의 발명자들은 난초 캘러스 추출물이 콜라겐, 엘라스틴 및 히알루론산의 합성을 촉진하고 피부 세포 내 DNA를 수복하는데 도움을 줌으로써 피부 보습, 피부 부드러움 증가, 피부 윤택성 증가, 피부 탄력 증가, 피부 조임, 피부결들의 감소, 피부 노화 지연, 콜라겐 함량 증가 보조, 피부 조직 수복, 피부 병변 예방 및/또는 상처 치유 촉진을 위해 사용될 수 있음을 발견하였다.
본 발명의 목적은 조성물 제조 시 난초 캘러스 추출물의 용도를 제공하는 것으로서, 여기서 추출물은 난초잎 캘러스의 극성 용매 추출물이고, 상기 조성물은 피부 보호용으로 사용된다. 바람직하게는, 난초는 팔레놉시스 아마빌리스 (Phalaenopsis amabilis)이다. 바람직하게는, 극성 용매는 물, C1-C4 알콜 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 바람직하게는, 조성물은 케어 제품 조성물, 식품 조성물 또는 약학 조성물이다.
본 발명의 또 다른 목적은 피부 보호를 위해 사용되는 조성물을 제공하는 것이다. 상기 조성물은 유효량의 난초 캘러스 추출물을 포함하며, 여기서 추출물은 난초잎 캘러스의 극성 용매 추출물이다. 바람직하게는, 극성 용매는 물, C1-C4 알콜 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 바람직하게는, 조성물은 케어 제품 조성물, 식품 조성물 또는 약학 조성물이다.
본 발명에 따라 제공되는 케어 제품 조성물은 피부 보습, 피부 부드러움 증가, 피부 윤택성 증가, 피부 탄력 증가, 피부 조임, 피부결들의 감소 및 피부 노화 지연 중 적어도 하나를 위해 사용된다. 바람직하게는, 케어 제품 조성물은 에센스, 에멀젼 또는 로션이다.
본 발명에 따라 제공되는 식품 조성물은 피부 내 콜라겐 함량을 증가시키는데 도움을 주기 위해 사용된다. 특히, 식품 조성물은 피부 내 I형 콜라겐 함량을 증가시키는데 도움을 주기 위해 사용된다. 바람직하게는, 식품 조성물은 미용 음료이다.
본 발명에 따라 제공되는 약학 조성물은 피부 조직의 수복, 피부 병변 예방 및 상처 치유 촉진 중 적어도 하나를 위해 사용된다. 약학 조성물은 경피 투여, 경구 투여 또는 피하 주사의 형태로 제공될 수 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 유효량의 난초 캘러스 추출물을 이를 필요로 하는 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 피부 보호 방법을 제공하는 것이다. 이 방법은 피부 보습, 피부 부드러움 증가, 피부 윤택성 증가, 피부 탄력 증가, 피부 조임, 피부결들의 감소, 피부 노화 지연, 콜라겐 함량 증가 보조, 피부 조직 수복, 피부 병변 예방 및 상처 치유 촉진의 적어도 하나를 위한 것이다. 난초 캘러스 추출물은 상술한 바와 같은 조성물의 형태로서 이를 필요로 하는 대상에게 투여될 수 있다.
본 발명을 위해 구현된 상세한 기술 및 바람직한 구체예가 본 분야의 숙련자가 청구된 발명의 특징을 잘 이해할 수 있도록 첨부된 도면을 참조하여 다음의 단락들에서 설명된다.
도 1 내지 4는 본 발명의 난초 캘러스 추출물이 피부 내 콜라겐, 엘라스틴 및 히알루론산의 함량 증가에 미치는 영향을 나타낸 것으로, 도 1은 COL1A1 및 COL1A2 유전자의 상대 발현 수준 (배) (* p<0.05, ** p<0.01)을 나타내고, 도 2는 ELN 유전자의 상대 발현 수준 (배) (** p<0.01)을 나타내며, 도 3은 HAS3 유전자의 상대 발현 수준 (배)을 나타내고, 도 4는 CAT 및 SOD2 유전자의 상대 발현 수준 (배) (*** p<0.001)을 나타내며, 여기서 대조군의 세포는 난초 캘러스 추출물이 함유되지 않은 배지에서 24시간 동안 배양되었고, "추출물" 군의 세포는 난초 캘러스 추출물을 외부에서 첨가한 배지에서 24시간 동안 배양되었다.
도 5 내지 도 7은 본 발명의 난초 캘러스 추출물이 피부 세포에서 손상된 DNA의 수복을 돕는데 미치는 영향을 나타낸 것으로, 여기서 도 5는 MSH2, MLH1 및 MSH6 유전자의 상대 발현 수준 (배) (상기 세 유전자는 미스매치 수복 (MMR) 유전자에 속한다) (** p<0.01, *** p<0.001)을 나타내고, 도 6은 ERCC1 유전자의 상대 발현 수준 (배) (이 유전자는 뉴클레오티드 제거 수복 (NER) 유전자에 속한다) (** p<0.01)을 나타내고, 도 7은 UNG, OGG1 및 APE1 유전자의 상대 발현 수준 (배) (상기 세 유전자는 염기 제거 수복 (BER) 유전자에 속한다) (** p<0.01, *** p<0.001)을 나타낸다.
도 5 내지 도 7은 본 발명의 난초 캘러스 추출물이 피부 세포에서 손상된 DNA의 수복을 돕는데 미치는 영향을 나타낸 것으로, 여기서 도 5는 MSH2, MLH1 및 MSH6 유전자의 상대 발현 수준 (배) (상기 세 유전자는 미스매치 수복 (MMR) 유전자에 속한다) (** p<0.01, *** p<0.001)을 나타내고, 도 6은 ERCC1 유전자의 상대 발현 수준 (배) (이 유전자는 뉴클레오티드 제거 수복 (NER) 유전자에 속한다) (** p<0.01)을 나타내고, 도 7은 UNG, OGG1 및 APE1 유전자의 상대 발현 수준 (배) (상기 세 유전자는 염기 제거 수복 (BER) 유전자에 속한다) (** p<0.01, *** p<0.001)을 나타낸다.
이하, 본 발명의 구체예의 일부를 상세히 설명한다. 그러나, 본 발명은 본 발명의 정신을 벗어나지 않는 범위 내에서 다양한 구체예들로 구현될 수 있으며, 명세서에 기술된 구체예들로 한정되지 않는다. 또한, 본원에서 달리 언급하지 않는 한, 본 발명의 명세서 (특히 청구항에서)에 인용된 표현 "a", "an", "the" 등은 단수 형태 및 복수 형태 모두를 포함하는 것으로 의도된다. 본 명세서에서 인용된 "대상"이라는 용어는 인간 및 비인간 동물을 포함하는 포유동물을 의미한다. 또한, 본 명세서에서 달리 언급하지 않는 한, 본 명세서에서 인용된 "난초 캘러스"란 난초잎의 캘러스를 가리킨다.
본 발명의 발명자들은 난초 식물의 상해된 잎에서 생성된 캘러스의 특성이 포유동물의 다능성 줄기세포의 것과 유사하며, 난초 캘러스의 추출물은 피부 세포의 항산화능을 향상시키고, 피부 세포의 DNA 수복를 돕고, 콜라겐, 엘라스틴 및 히알루론산의 합성을 촉진하는데 효과적이라는 것을 발견하였다.
따라서, 본 발명은 난초 캘러스 추출물을 함유하는 조성물을 제공하는 것을 포함한, 피부를 보호하는데 난초 캘러스 추출물의 용도, 조성물의 제조에 있어 난초 캘러스 추출물의 용도, 및 난초 캘러스 추출물을 함유하는 조성물을 사용하는 것을 포함하는 방법에 관한 것이다. 상기 조성물은 피부 보호, 특히 피부 보습, 피부 부드러움 증가, 피부 윤택성 증가, 피부 탄력 증가, 피부 조임, 피부결들의 감소, 피부 노화 지연, 콜라겐 함량 증가 보조, 피부 조직 수복, 피부 병변 예방 및/또는 상처 치유 촉진을 위해 사용된다. 특히, 난초 캘러스는 난초잎의 캘러스이다.
본 발명에 따라 채택된 난초 캘러스 추출물은 물, 알콜 (예컨대 C1-C4 알콜), 또는 이들의 조합일 수 있는 극성 용매로 난초잎의 캘러스를 추출함으로써 제공될 수 있다. 추출 단계에서 사용되는 용매의 양은 중요하지 않으며, 일반적으로 추출할 물질을 고르게 분산시킬 수 있으면 된다. 예를 들어, 추출 단계에서, 추출 용매 및 난초 캘러스는 100:1 내지 300:1 (추출 용매:난초 캘러스) 범위의 중량비로 사용될 수 있다. 임의로, 추출은 추출 효율을 향상시키기 위해 초음파 처리를 동반하여 수행될 수 있다. 바람직하게는, 건조 작업 및/또는 분쇄 작업이 추출 전에 수행될 수 있다.
본 발명의 일부 구체예에서, 난초 캘러스는 추출 전에 동결건조된다. 예를 들어, 동결건조된 난초 캘러스를 물과 100:1 (물:동결건조된 난초 캘러스)의 중량비로 혼합하여 혼합물을 제공한 다음, 혼합물을 70 ℃에서 45분 동안 초음파 진탕하여 추출을 달성하였다. 본 발명에 따라 채택된 난초 캘러스는 다음 단계에 의해 제공될 수 있다:
I. 난초 식물을 6% 차아염소산나트륨 용액으로 세척한 다음 멸균수로 세척하는 단계 (임의로 상기 세척 단계는 반복될 수 있다);
II. 세척한 난초 식물의 잎을 절단하여 그 표면에 상처를 내 캘러스 발생을 유도하는 단계 (1 내지 3개월 동안); 및
III. 상기 단계 II에서 얻은 캘러스(들)를 MS 배지 (Murashige and Skoog 기본 배지)에서 25 ℃의 온도 및 50 내지 60%의 습도로 (1 내지 1.5개월 동안) 배양하는 단계.
본 발명에 따라 채택된 난초 캘러스 추출물은 난초 캘러스의 추출로부터 직접 수득된 액체 추출물의 원 형태일 수 있거나, 또는 액체 추출물의 사용을 용이하게 하기 위해 액체 추출물을 여과, 멸균, 농축 및 희석하는 것과 같은 하나 이상의 임의적인 단계를 수행하여 얻은 산물일 수 있다. 예를 들어, 액체 추출물에 농축 건조, 분무 건조 또는 동결건조와 같은 작업을 행함으로써, 운반 또는 저장에 편리한 농축액 또는 분말 제품을 제공할 수 있다.
본 발명에 따라 제공되는 조성물은 케어 제품 조성물, 식품 조성물 또는 약제 조성물일 수 있으며, 여기서 케어 제품 조성물은 피부 보습, 피부의 부드러움 증가, 피부 윤택성 증가, 피부 탄력 증가, 피부 조임, 피부결들의 감소 및 피부 노화 지연 중 적어도 하나를 위해 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 케어 제품 조성물은 특별한 제한 없이 임의의 적합한 형태로 제공될 수 있다. 예를 들어, 케어 제품 조성물은 외용을 위한 에멀젼, 크림, 겔 (예컨대 하이드로겔) 또는 용액 (예컨대 에센스, 로션)일 수 있지만 이에 제한되지는 않는다.
본 발명에 따라 제공되는 식품 조성물은 피부에서 콜라겐 함량을 증가시키는데 도움을 주고, 특히 피부 내에 I형 콜라겐 함량을 증가시키는데 사용되며, 특별한 제한 없이 임의의 적합한 형태로 제공될 수 있다. 예를 들어, 식품 조성물은 건강 식품 및 미용 음료와 같이 먹거나 마시기에 적합한 형태로 제조될 수 있지만, 이에 제한되지는 않는다.
임의로, 본 발명에 따라 제공되는 케어 제품 조성물, 식품 조성물 또는 약학 조성물은 적당량의 첨가제, 예컨대 식품 조성물 또는 약학 조성물의 식미성 및 시지각성 향상을 위한 향미제, 토너 또는 착색제 및/또는 케어 제품 조성물, 식품 조성물 또는 약학 조성물의 안정성 및 저장성을 개선하기 위한 완충제, 보존제, 방부제, 항균제 또는 항진균제를 추가로 포함할 수 있다.
소정 목적에 따라, 본 발명에 따른 약학 조성물은 특별한 제한 없이 임의의 적합한 형태로 제공될 수 있다. 예를 들어, 약학 조성물은 경구 또는 비경구 (예컨대 경피 또는 피하) 경로에 의해 이를 필요로 하는 대상에 투여될 수 있지만, 이로만 제한되지는 않는다. 형태 및 목적에 따라, 약학 조성물을 제공하는데 적합한 담체가 선택되어 사용될 수 있으며, 여기서 담체는 부형제, 희석제, 보조제, 안정제, 흡수 지연제, 붕해제, 굴수제 (hydrotropic agent), 유화제, 산화방지제, 접착제, 결합제, 점착부여제, 분산제, 현탁화제, 윤활제, 흡습제 등를 포함한다.
경구 투여용 제형으로서, 약학 조성물은 활성 성분 (즉, 난초 캘러스 추출물)의 원하는 효과에 부정적인 영향을 미치지 않을 임의의 약학적으로 허용되는 담체를 포함할 수 있다. 적합한 담체의 예로는 물, 염수, 덱스트로스, 글리세롤, 에탄올 또는 그의 유사체, 셀룰로스, 전분, 당 벤토나이트 및 이들의 조합을 들 수 있지만, 이들로만 제한되지는 않는다. 약학 조성물은 경구 투여를 위한 임의의 적합한 형태, 예컨대 정제 (예를 들면 당의정), 환제, 캡슐, 과립제, 가루약, 유동 추출제, 용액, 시럽, 현탁액 또는 팅크제 등의 형태로 제공될 수 있다.
경피 투여용 제형으로서, 약학 조성물은 외용 패치, 에멀젼, 크림, 겔 (예컨대 하이드로겔), 페이스트 (예컨대 분산 페이스트, 연고), 스프레이, 또는 용액 (예컨대 현탁액)으로 제공될 수 있으나, 이들로만 제한되지는 않는다.
피하 투여에 적합한 주사제 또는 점적제의 형태로서, 약학 조성물은 등장 용액, 염-완충 염수 (예를 들면, 인산염-완충 염수 또는 시트르산염-완충 염수), 굴수제, 유화제, 5% 당 용액 및 기타 담체와 같은 하나 이상의 성분(들)을 포함할 수 있다. 대안적으로, 약학 조성물은 예비-주사 고체로서 제조될 수 있다. 예비-주사 고체는 다른 용액 또는 현탁액에 가용성인 형태 또는 유화가능한 형태로 제공될 수 있다. 목적하는 주사제는 예비-주사 고체를 이를 필요로 하는 대상에게 투여하기 전에 다른 용액 또는 현탁액에 용해시키거나 유화시킴으로써 제공된다.
대상의 필요성, 연령, 체중 및 건강 상태뿐 아니라 목적에 따라, 본 발명에 따라 제공되는 조성물은 다양한 투여 빈도, 예컨대 1일 1회, 1일 수 회, 수 일에 1회 등으로 투여될 수 있다.
본 발명은 또한 유효량의 난초 캘러스 추출물을 이를 필요로 하는 대상에 투여하는 것을 포함하는, 피부 보호 방법을 제공한다. 본 발명의 방법에 따라 채택된 난초 캘러스 추출물은 조성물의 형태로서 필요로 하는 대상에게 투여될 수 있다. 조성물의 적용 유형, 적용 경로, 적용 형태, 적용 빈도 및 관련 응용 분야에서의 사용은 모두 위의 설명에 따른다.
이하, 구체적인 실시예를 들어 본 발명을 더욱 상세하게 설명하겠다. 그러나, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 본 발명의 범위가 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 범위는 첨부된 청구 범위에서 제시될 것이다.
실시예
[
제조예
]
A. 난초
캘러스
추출물의 제조
팔레놉시스 아마빌리스 (Phalaenopsis amabilis) 식물을 궈광 꽃 시장의 232 Orchid Garden (대만 타이충)에서 구입하고 다음 작업으로 처리하여 난초 캘러스(들)를 제공하였다.
I. 난초 식물을 6% 차아염소산나트륨 용액으로 세척한 다음 멸균수로 세척하고, 임의로 이 세척 단계를 반복할 수 있다;
II. 세척한 난초 식물의 잎을 절단하고 그 표면에 상처를 내 캘러스 발생을 유도하였다 (1 내지 3개월 동안);
III. 상기 단계 II에서 얻은 캘러스(들)를 MS 배지 (SIGMA 사에서 구입한 Murashige and Skoog 기본 배지, 제품 번호: M5519)에서 25 ℃의 온도 및 50 내지 60%의 습도로 (1 내지 1.5개월 동안) 배양하였다.
단계 III에서 얻은 난초 캘러스를 다음과 같은 작업으로 처리하여 난초 캘러스 추출물을 제조하였다:
(1) 난초 캘러스를 -22 ℃에서 12시간 동안 동결건조시킨 다음, 건조된 난초 캘러스를 분쇄하여 난초 캘러스 분말을 제공하였다;
(2) 단계 (1)에서 얻은 난초 캘러스 분말을 물:난초 캘러스 분말 = 100:1의 중량비로 혼합하여 혼합물을 제공한 다음, 혼합물을 70 ℃에서 45분간 초음파 진탕하였다;
(3) 단계 (2)의 생성물을 여과막으로 여과하여 여액을 제공하였다;
(4) 단계 (3)에서 얻은 여액을 95 ℃로 가열하고, 95 ℃에서 20분간 유지하여 살균하였다.
(5) 단계 (4)의 생성물을 냉각시키고, 다음 실험에 사용하기 위해 생성물을 패키징하여 냉장 저장으로 유지하였다;
(6) 단계 (5)의 생성물을 동결건조시켜 건조 물질 (즉, 본 발명에 따라 채택된 난초 캘러스 추출물)을 제공하였다.
B. 세포 처리
인간 피부 섬유아세포 (CCD-966SK, ATCC로부터 구입)를 24시간 동안 MEM 배지 (최소 필수 배지; Gibco 사에서 구입, 제품 번호: 61100-061)에서 배양하였다. 그 후, 인간 피부 섬유아세포를 두 군으로 나누어 독립적으로 하기 처리를 실시하였다:
1. 대조군: 세포를 MEM 배지에서 24시간 동안 배양하였다 (즉, 세포를 난초 캘러스 추출물이 없는 배지에서 배양함).
2. "추출물" 군: 세포를 [제조예 A]의 단계 (6)에서 얻은 난초 캘러스 추출물 1 중량% (건조 물질로서)가 외부에서 첨가된 MEM 배지에서 24시간 동안 배양하였다.
C. cDNA의 제조
[제조예 B]에 의해 제공된 각 군의 세포를 수확하고, RNA 추출 키트 (GENEmark 사에서 구입)로 RNA 추출을 시행하였다. 그 후, RNA를 역전사효소로 cDNA에 전사하였다. cDNA는 이후 유전자 발현 조사에 사용하기 위한 것이다.
실시예
1: 난초
캘러스
추출물이 피부 내 콜라겐, 엘라스틴 및 히알루론산의 함량 증가에 미치는 영향
피부 세포의 COL1A1, COL1A2, ELN 및 HAS3와 같은 유전자 발현 수준의 증가는 콜라겐, 엘라스틴 및 히알루론산의 합성을 촉진하는데 도움이 되는 것으로 알려져 있으며, 이는 예컨대 전체가 본원에 참고로 인용되는 "Modulation of collagen synthesis and its gene expression in human skin fibroblasts by tocotrienol-rich fraction. Arch Med Sci. 7, 5: 889-895 (2011)," "The complexity if elastic fiber biogenesis in the skin - a perspective to the clinical heterogeneity of cutis laxa. Exp Dermatol. 22(2): 88-92 (2013)", "Hyaluronan Synthase 3 Regulates Hyaluronan Synthesis in Cultured Human Keratinocytes. The Journal of Investigative Dermatology. 118: 43-48 (2002)", 및 "An overview of the Beneficial Effects of Hydrolysed Collagen as a Nutraceutical on Skin Properties: Scientific Background and Clinical Studies. The Open Nutraceuticals Journal. 8: 29-42 (2015)로부터 알 수 있다. 본 발명의 난초 캘러스 추출물이 콜라겐, 엘라스틴 및 히알루론산의 함량 증가에 미치는 영향을 확인하기 위해, [제조예 C]에 의해 제공된 cDNA를 ABI Step One Plus 시스템 및 KAPA SYBR FAST qPCR 키트에 의해 정량적 중합효소 연쇄 반응 (qPCR)에 적용하여 각 군의 세포 내 COL1A1, COL1A2, ELN 및 HAS3 유전자의 발현 수준을 측정하였다. 이어서, 얻어진 데이터를 스튜던트 t-검정법에 의해 분석하고, 대조군 결과를 기준으로 (즉, 대조군의 유전자 발현 수준을 1배로 설정함) "추출물" 군의 상대 유전자 발현 수준을 산출하였다. 그 결과를 도 1 내지 3에 나타내었다.
도 1 내지 3에 도시된 바와 같이, 대조군과 비교하여, "추출물" 군의 COL1A1, COL1A2, ELN 및 HAS3 유전자의 발현 수준은 모두 유의하게 증가하였다. 이 결과로부터, 본 발명의 난초 캘러스 추출물은 실제로 피부 세포의 COL1A1, COL1A2, ELN 및 HAS3 유전자의 발현 수준을 증가시킬 수 있으므로, 콜라겐, 엘라스틴 및 히알루론산의 합성 및 분비를 촉진시키고, 따라서 피부 보습, 피부 부드러움 증가, 피부 윤택성 증가, 피부 탄력 증가, 피부 조임, 피부결들의 감소, 피부 노화 지연, 콜라겐 함량 증가 보조 및/또는 상처 치유 촉진 효과를 이루는데 효과적임을 알 수 있다.
실시예
2: 난초
캘러스
추출물이 피부의
항산화능을
향상시키는데 미치는 영향
피부 세포의 CAT 및 SOD2와 같은 유전자의 발현 수준 증가는 피부 세포의 항산화능을 향상시키는데 도움이 되는 것으로 알려져 있으며, 이는 예컨대 전체가 본원에 참고로 인용되는 "Anti-oxidant gene expression imbalance, aging and Down syndrome. Life Sciences. 76: 1407-1426 (2005)"로부터 알 수 있다. 난초 캘러스 추출물의 항산화능을 확인하기 위해, [제조예 C]에 의해 제공된 cDNA를 ABI Step One Plus 시스템 및 KAPA SYBR FAST qPCR 키트에 의해 정량적 중합효소 연쇄 반응 (qPCR)에 적용하여 각 군의 세포 내 CAT 및 SOD2 유전자의 발현 수준을 측정하였다. 이어서, 얻어진 데이터를 스튜던트 t-검정법에 의해 분석하고, 대조군 결과를 기준으로 (즉, 대조군의 유전자 발현 수준을 1배로 설정함) "추출물" 군의 상대 유전자 발현 수준을 산출하였다. 그 결과를 도 4에 나타내었다.
도 4에 도시된 바와 같이, 대조군과 비교하여, "추출물" 군의 CAT 및 SOD2 유전자의 발현 수준은 모두 유의하게 증가하였다. 이 결과로부터, 본 발명의 난초 캘러스 추출물은 실제로 피부 세포의 항산화 유전자의 발현 수준을 증가시킬 수 있고, 따라서 피부 세포의 과산화물 상해 대항 능력을 향상시킴으로써 피부 노화 지연, 피부 조직 수복 및/또는 피부 병변 예방 효과를 이루는데 효과적임을 알 수 있다.
실시예
3: 난초
캘러스
추출물이 피부 세포에서 손상된 DNA 수복을 보조하는데 미치는 영향
유기체에서 미스매치 수복 (MMR), 뉴클레오티드 제거 수복 (NER) 및 염기 제거 수복 (BER)과 같은 DNA 수복 메카니즘은 돌연변이 또는 절단으로 인한 DNA 손상을 예방할 수 있는 것으로 알려져 있다. 따라서 피부 세포의 MMR-, NER- 및 BER- 관련 유전자의 발현 수준의 증가는 피부 세포에서 손상된 DNA를 수복하는데 도움이되며, 이는 예컨대 전체가 본원에 참고로 인용되는 "DNA repair mechanisms in dividing and non-dividing cells. DNA repair (Amst). 12(8): 620-636 (2013)"로부터 알 수 있다. 피부 세포 내 손상된 DNA의 수복에 도움을 줄 수 있는 본 발명의 난초 캘러스 추출물의 효과를 확인하기 위해, [제조예 C]에 의해 제공된 cDNA를 ABI Step One Plus 시스템 및 KAPA SYBR FAST qPCR 키트에 의해 정량적 중합효소 연쇄 반응 (qPCR)에 적용하여 각 군의 세포 내에 MMR-관련 유전자 (MSH2, MLH1 및 MSH6 포함), NER-관련 유전자 (ERCC1 포함), 및 BER-관련 유전자 (UNG, OGG1 및 APE1 포함)의 발현 수준을 측정하였다. 이어서, 얻어진 데이터를 스튜던트 t-검정법에 의해 분석하고, 대조군 결과를 기준으로 (즉, 대조군의 유전자 발현 수준을 1배로 설정함) "추출물" 군의 상대 유전자 발현 수준을 산출하였다. 그 결과를 도 5 내지 7에 나타내었다.
도 5 내지 7에 도시된 바와 같이, 대조군과 비교하여, "추출물" 군의 MMR-관련 유전자 (MSH2, MLH1 및 MSH6 포함), NER-관련 유전자 (ERCC1 포함), 및 BER-관련 유전자 (UNG, OGG1 및 APE1 포함)의 발현 수준은 모두 유의하게 증가하였다. 이 결과로부터, 본 발명의 난초 캘러스 추출물은 실제로 피부 세포의 DNA 수복-관련 유전자의 발현 수준을 증가시킬 수 있고, 따라서 피부 세포 내 손상된 DNA를 수복시킴으로써 피부 노화 지연, 피부 조직 수복 및/또는 피부 병변 예방 효과를 이루는데 효과적임을 알 수 있다.
상기 실시예에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따라 제공되는 난초 캘러스 추출물은 실제로 피부 내 콜라겐, 엘라스틴 및 히알루론산의 합성을 촉진하고, 피부 세포의 항산화능을 향상시키며, 피부 세포에서 손상된 DNA의 수복을 도울 수 있음으로 해서 피부 보습, 피부 부드러움 증가, 피부 윤택성 증가, 피부 탄력 증가, 피부 조임, 피부결들의 감소, 피부 노화 지연, 콜라겐 함량 증가 보조, 피부 조직 수복, 피부 병변 예방 및/또는 상처 치유 촉진에 효과적이다.
Claims (10)
- 유효량의 난초 캘러스 추출물을 포함하는, 피부 조직 수복, 피부 병변 예방 및 상처 치유 촉진 중 적어도 하나를 위한 약학 조성물로서,
상기 추출물은 70 ℃에서 극성 용매로 난초 잎의 캘러스를 추출함으로써 제공되고, 상기 난초는 팔레놉시스 아마빌리스 (Phalaenopsis amabilis)인 약학 조성물. - 제1항에 있어서, 극성 용매는 물, C1-C4 알콜 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 약학적 조성물.
- 유효량의 난초 캘러스 추출물을 포함하는, 피부 보습, 피부 부드러움 증가, 피부 탄력 증가, 피부 조임 감소, 및 피부 노화 지연 중 적어도 하나를 위한 케어 제품 조성물로서,
상기 추출물은 70 ℃에서 극성 용매로 난초 잎의 캘러스를 추출함으로써 제공되며, 상기 난초는 팔레놉시스 아마빌리스 (Phalaenopsis amabilis)인 케어 제품 조성물. - 제3항에 있어서, 상기 조성물이 에센스, 에멀션 또는 로션으로 제공되는 케어 제품 조성물.
- 유효량의 난초 캘러스 추출물을 포함하는, 피부의 콜라겐 함량 증가를 보조하기 위한 식품 조성물로서,
상기 추출물은 70 ℃에서 극성 용매로 난초 잎의 캘러스를 추출함으로써 제공되며, 상기 난초는 팔레놉시스 아마빌리스 (Phalaenopsis amabilis)인 식품 조성물. - 삭제
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