KR102071539B1 - 지카 바이러스의 표피단백질과 비구조단백질 1에 특이적인 단클론항체를 이용한 지카 바이러스 항체의 검출방법 및 지카 바이러스 항체 검출을 위한 신속진단키트 - Google Patents
지카 바이러스의 표피단백질과 비구조단백질 1에 특이적인 단클론항체를 이용한 지카 바이러스 항체의 검출방법 및 지카 바이러스 항체 검출을 위한 신속진단키트 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 지카 바이러스 항체의 검출방법 및 지카 바이러스 항체 검출을 위한 신속진단키트에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 지카 바이러스의 표피단백질과 비구조단백질 1에 특이적인 단클론항체를 이용하여 개체로부터 분리된 생물학적 샘플에서 바이러스 항체의 존재 여부를 신속하게 정성적으로 확인할 수 있는, 지카 바이러스 감염 여부를 진단하기 위한 지카 바이러스 항체의 검출방법 및 지카 바이러스 항체 검출을 위한 신속진단키트에 관한 것이다.
Description
본 발명은 지카 바이러스 항체의 검출방법, 지카 바이러스 항체 검출을 위한 신속 진단키트 및 지카 바이러스 항체 검출용 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 지카 바이러스의 표피단백질과 비구조단백질 1에 특이적인 단클론항체를 이용하여 개체로부터 분리된 생물학적 샘플에서 바이러스 항체의 존재 여부를 신속하게 정성적으로 확인할 수 있는, 지카 바이러스 감염 여부를 진단하기 위한 지카 바이러스 항체의 검출방법, 지카 바이러스 항체 검출을 위한 신속 진단키트 및 지카 바이러스 항체 검출용 조성물에 관한 것이다.
지카 바이러스는 플라비바이러스과와 플라비바이러스속에 속하는 바이러스로, 숲모기에 의해 전염된다. 인간에서는 지카열로 알려진 가벼운 증상의 병을 일으키는데, 1950년대 이후로 아프리카에서 아시아에 이르는 좁은 적도대 안에서 발생하는 것으로 알려졌다. 2014년, 지카 바이러스는 태평양을 건너 프랑스령 폴리네시아에, 이후 이스터 섬, 2015년에는 중앙 아메리카, 카리비아 해로, 남아메리카에서 발생한 지카 바이러스는 범유행의 수준에 이르렀다.
지카 발열은 지카 바이러스에 의해 발생하는 새로운 질병으로 모기매개로 전염된다. 지카 바이러스는 Flaviviridae의 Flavivirus 계열로 뎅기열, 황열, 웨스트 나일, 일본 뇌염 바이러스와 같은 계열의 바이러스이다. 지카 바이러스는 단일 가닥 RNA로 10,617 염기를 가지며, 3개의 구조 단백질(capsid, premembrane/membrane, 및 envelope)과 7개의 비구조 단백질(NS1 , NS2A , NS2B , NS3 , NS4A, NS4B 및 NS5)로 구성된다 (도 1).
현재 지카 바이러스에 감염된 산모에게서 지카 발열이 있는 경우 태어난 신생아는 소두증을 나타내는 것으로 알려져 있다. 또한, 감염 환자 가운데 자가면역질환성 뇌 신경 이상 증상이 나타날 수 있으며 예를 들어, 랑-바레증후군증 또는 급성 산재성 뇌척수염(ADEM)이 나타날 수 있다.
이와 같은 위험성에 의해 지카 바이러스에 대한 세계적 관심이 증대하고 있으며, 지카 바이러스 연구 및 선제적 진단 및 치료기술 확보가 시급한 실정이다.
이러한 기술 배경하에서, 본 출원의 발명자들은 지카 바이러스 특이적 항원과 이에 결합하는 항체를 통해 개체로부터 분리된 생물학적 샘플에서 지카 바이러스에 대한 IgG 또는 IgM 항체를 검출함으로써 지카 바이러스 감염 여부 진단이 가능함을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명의 목적은 생물학적 샘플로부터 지카 바이러스 항체의 존재 유무를 정확하고 신속하게 검출하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 목적은 생물학적 샘플로부터 지카 바이러스 항체의 존재 유무를 정확하고 신속하게 검출하기 위한 신속 진단키트를 제공하는 것이다.
본 발명의 목적은 생물학적 샘플 중 지카 바이러스 항체의 존재 유무를 정확하고 신속하게 검출하기 위한 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 지카 바이러스 특이적 항원과 이에 결합하는 항체 및 표지물질을 반응시켜 지카 바이러스 항원-항체-표지물질 축합체(conjugate)를 형성하는 단계; 및 개체로부터 분리된 생물학적 샘플에서 상기 축합체 중 지카 바이러스 특이적 항원과 반응하는 지카 바이러스 항체를 검출하는 단계를 포함하는 지카 바이러스 감염 여부 진단에 정보를 제공하는 방법을 제공한다.
본 발명은 또한, 흡수패드; 항-인간 IgG 또는 IgM 항체가 고정된 검사선을 포함하는 멤브레인; 개체로부터 분리된 생물학적 샘플 주입부; 지카 바이러스 특이적 항원, 이에 특이적으로 결합하는 항체 및 표지물질을 동시에 또는 개별적으로 포함하는 축합패드; 및 완충용액으로 전처리된 버퍼패드를 포함하는, 샘플 내 지카 바이러스 항체를 검출하기 위한 신속 진단키트를 제공한다.
본 발명은 더욱이, 지카 바이러스 특이적 항원과 이에 결합하는 항체 및 표지물질을 포함하고, 상기 항원, 항체 및 표지물질의 반응에 의해 지카 바이러스 항원-항체-표지물질 축합체를 형성하는 것을 특징으로 하는, 개체로부터 분리된 생물학적 샘플 중 지카 바이러스 항체를 검출하기 위한 조성물을 제공한다.
본 발명에 따르면, 지카 바이러스 항원-항체-표지물질 축합체를 통해, 생물학적 샘플과 반응시에 지카 바이러스 특이적 항원 단백질의 3차 구조를 유지시켜 줌으로써 지카 바이러스 특이적 항원 단백질에 대한 항체들을 최대로 측정할 수 있도록 유도한다. 또한, 구조적 항원결정기(conformational epitope)를 갖는 항체에 대한 반응성이 증가하게 됨으로써, 지카 바이러스 감염 환자 유래 생물학적 샘플 내 존재하는 지카 바이러스 항체가 효과적으로 결합할 수 있게 된다. 지카 바이러스 특이적 항원을 인지하는 항체의 효과적 결합은 진단시 예민성(민감성) 및 정확도를 획기적으로 높일 수 있다.
도 1은 지카 바이러스 게놈 구조를 나타낸 것이다.
도 2는 표피단백질(E) 및 비구조단백질 1(NS1)의 발현을 위한 베큘로바이러스 발현 벡터에 대한 모식도이다.
도 3은 재조합 바이러스를 웨스턴 블랏한 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 곤충세포에서 발현된 지카 바이러스 항원을 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 본 발명에 따른 단클론항체와 지카 바이러스의 반응성을 나타낸 결과이다.
도 6은 인간 혈액 내 지카 바이러스에 대한 IgG와 IgM 항체를 검출하기 위한 스트립 구조이다.
도 7은 단클론항체 J5E1 및 J2G7과 지카 바이러스 재조합 항원들을 이용하여 인간 혈액 내 지카 바이러스에 대한 IgG와 IgM 항체를 효율적으로 검출하기 위한 원리를 나타내는 모식도이다.
도 8은 반응 스트립을 플라스틱 카세트에 조립한 후, 음성, IgG 양성, IgM 양성으로 나타나는 결과를 보여주는 것이다.
도 9는 브라질의 표준 판넬(panel)과 본 발명에 따른 진단키트를 비교 시험한 결과이다.
도 2는 표피단백질(E) 및 비구조단백질 1(NS1)의 발현을 위한 베큘로바이러스 발현 벡터에 대한 모식도이다.
도 3은 재조합 바이러스를 웨스턴 블랏한 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 곤충세포에서 발현된 지카 바이러스 항원을 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 본 발명에 따른 단클론항체와 지카 바이러스의 반응성을 나타낸 결과이다.
도 6은 인간 혈액 내 지카 바이러스에 대한 IgG와 IgM 항체를 검출하기 위한 스트립 구조이다.
도 7은 단클론항체 J5E1 및 J2G7과 지카 바이러스 재조합 항원들을 이용하여 인간 혈액 내 지카 바이러스에 대한 IgG와 IgM 항체를 효율적으로 검출하기 위한 원리를 나타내는 모식도이다.
도 8은 반응 스트립을 플라스틱 카세트에 조립한 후, 음성, IgG 양성, IgM 양성으로 나타나는 결과를 보여주는 것이다.
도 9는 브라질의 표준 판넬(panel)과 본 발명에 따른 진단키트를 비교 시험한 결과이다.
다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 일반적으로 본 명세서에서 사용된 명명법은 본 기술분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다.
일 관점에서, 본 발명은 지카 바이러스 특이적 항원과 이에 결합하는 항체 및 표지물질을 반응시켜 지카 바이러스 항원-항체-표지물질 축합체(conjugate)를 형성하는 단계; 및 개체로부터 분리된 생물학적 샘플에서 상기 축합체 중 지카 바이러스 특이적 항원과 반응하는 지카 바이러스 항체를 검출하는 단계를 포함하는 지카 바이러스 감염 여부 진단에 정보를 제공하는 방법에 관한 것이다.
본 발명은 지카 바이러스 항원을 특이적으로 인식하는 항체와 결합시켜 혈액 내 항체 존재 여부를 확인하는 기술로서, 기존의 플라크 감소 중화시험법(PRNT)이나 효소면역측정법(ELISA) 보다 훨씬 빠르고, 간편하며, 경제적이다.
본 발명은 지카 바이러스 특이적 항원과 이에 결합하는 항체 및 표지물질을 반응시켜 지카 바이러스 항원-항체-표지물질 축합체를 형성하는 단계를 포함한다.
상기 지카 바이러스 특이적 항원은 예를 들어, 서열번호 1의 표피단백질(E) 및/또는 서열번호 2의 비구조단백질 1(NS1)일 수 있다. 지카 바이러스는 뎅기 바이러스와 표피단백질(E)에 대한 상동성이 높기 때문에 교차반응이 심하다고 알려져 있으며, 이와 비해서 비구조단백질 1(NS1)는 뎅기 바이러스와 교차반응이 높지 않다고 알려져 있다. 이에, 본 발명에서는 표피단백질(E)과 비구조단백질 1(NS1)의 비율을 조절함으로써, 생물학적 샘플 내 지카 바이러스에 대한 IgG 또는 IgM 항체를 검출할 수 있다.
하나의 실시예에서, 상기 서열번호 1의 표피단백질(E) 및 서열번호 2의 비구조단백질 1(NS1)의 단백질은 단독 또는 혼합으로 사용할 수 있으며, 혼합하여 사용할 경우 E:NS1의 혼합 비율은 1~5: 9~5 비율로 혼합된 것 일 수 있으며, 바람직하게는 3:7 내지 4:6로 혼합하여, 생물학적 샘플 내 지카 바이러스에 대한 IgG 항체를 최적으로 검출할 수 있다. 만일 이러한 비율을 벗어나는 혼합비율을 사용하는 경우, 상기 단백질을 이용한 진단키트의 민감도와 특이도가 크게 저하될 수 있다. 표피 단백질의 비율이 높아지면 뎅기 바이러스와 교차반응이 높아지고, 비구조단백질 1의 비율이 높아질 경우 위양성(false positive) 반응이 발생한다. 이에 따라, 상기 진단키트가 생물학적 샘플 내 지카바이러스에 대한 IgG 항체 검출에 사용되기 어렵게 된다.
또한, 상기 서열번호 1의 표피단백질(E) 및 서열번호 2의 비구조단백질 1(NS1)의 단백질은 단독 또는 혼합으로 사용할 수 있으며, 혼합하여 사용 할 경우 E:NS1의 혼합비율은 1~5: 9~5 비율로 혼합된 것 일수 있으며, 바람직하게는 1:9 내지 2:8로 혼합하여, 생물학적 샘플 내 지카 바이러스에 대한 IgM 항체를 최적으로 검출할 수 있다. 만일 이러한 비율을 벗어나는 혼합비율을 사용하는 경우, 상기 단백질을 이용한 진단키트의 민감도와 특이도가 크게 저하될 수 있다. 표피 단백질의 비율이 높아지면 뎅기 바이러스와 교차반응이 높아지고, 비구조단백질 1의 비율이 높아질 경우 위양성(false positive) 반응이 발생한다. 이에 따라, 상기 진단키트가 생물학적 샘플 내 지카바이러스에 대한 IgM 항체 검출에 사용되기 어렵게 된다.
본 발명에서 상기 지카 바이러스 특이적 항원 예를 들어, 서열번호 1의 표피단백질(E) 및/또는 서열번호 2의 비구조단백질 1(NS1)를 인식하는 항체를 제조하고자 하였다. 이에, 상기 항원을 이용하여 마우스로부터 단클론항체를 생산하는 융합세포를 제작하였다. 그 결과, 지카바이러스 표피단백질(E)을 인식하는 단클론항체 4종 J5E1, J1A7, J5E4 및 A136과 지카바이러스 비구조단백질 1 (NS1)을 인식하는 단클론항체 4종 J2G7, J3B1, J10A5 및 J10C6를 선별하였고, 그 중 지카바이러스 표피단백질(E) 및 비구조단백질 1 (NS1)에 대하여 우수한 결합 친화도를 나타내는 J5E1 및 J2G7를 각각 기탁번호 KCTC 13109BP 및 기탁번호 KCTC 13110BP로 기탁하였다. 따라서, 본 발명에 따른 지카 바이러스 특이적 항원에 결합하는 항체는 기탁번호 KCTC 13109BP로 기탁된 융합세포(hyridoma)에서 생산되는 단클론항체 또는 기탁번호 KCTC 13110BP로 기탁된 융합세포에서 생산되는 단클론항체일 수 있다.
상기 지카 바이러스 특이적 항원 및 항체는 표지물질과 반응하여 지카 바이러스 항원-항체-표지물질 축합체를 형성한다. 상기 표지물질은 육안 또는 형광을 통하여 확인 가능한 재질이라면 제한되지 않으나, 예를 들어 금, 컬러 유리, 및 플라스틱 비드, 형광물질, 효소, 효소 반응 또는 비효소 반응에 사용되는 발색기질 등으로 구성된 군에서 선택된 어느 하나일 수 있으며, 발색체는 상기 예시된 것에 한정되지 아니하고 육안 또는 형광을 통하여 확인 가능한 다른 재질로 대체 가능하다. 상기 표지물질의 발색에 의해 생물학적 샘플로부터 지카 바이러스 특이적 항원과 반응하는 항체의 존재 여부를 검출할 수 있다.
상기 효소 반응에 사용되는 발색기질은 DAB(diaminobenzidine), AEC(3-amino-9-ethylcarbasole), BCIP/NBT(5-bromo-4-chloro-3-indolyl-phosphate/nitroblue tetrazolium), pNPP(para-Nitrophenyl phosphate), 나프톨 AS-TR 포스페이트(naphthol AS-TR phosphate), BCIP/INT(5-bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate/iodonitrotetrazolium), NF(New fuchsin), FRT(Fast Red TR Salt), 페닐렌다이아민(phenylenediamine), 3,3',5,5'-테트라메틸벤지딘(3,3',5,5'-tetra methylbenzidine), 다이아니시딘(dianisidine), 아미노-살리실릭산(amino-salicylic acid), 3,3'-다이아미노벤지딘(3,3'-diaminobenzidine), 3-아미노-9-에틸카바졸(3-amino-9-ethylcarbazole), 4-클로로-1-나프톨(4-chloro-1-naphthol), TMB(3,3',5,5'-tetramethyl bezidine), ABTS[2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)] 및 OPD(ophenylenediamine)로 구성된 군으로부터 선택되고, 상기 발색유도물질은 발색효소이고, HRP(Horseradish peroxidase), 염기성 탈인산화효소(Alkaline phosphatase), 글루코오즈 옥시다아제(Glucose Oxidase), 루시퍼라아제(luciferase), 베타-디-갈락토시다아제(β-D-galactosidase), 말산탈수소효소(MDH: malate dehydrogenase) 및 아세틸콜린에스터라아제(acetylcholinesterase)로 구성된 군으로부터 선택될 수 있다.
상기 비효소 반응에 사용되는 발색기질은 아이오딘(iodine), 칼슘(calcium), 구리(copper), 철(iron), 아미노산(amino acid) 및 크레아틴(creatinine)으로 구성된 군으로부터 선택되고, 상기 발색유도물질은 전분(starch), o-크레졸프탈레인 콤플렉손(o-cresolphthalein complexone), 바소큐프로인 디설포네이트(bathocuproin disulfonate), 바소페난트롤린 디설포네이트(bathophenanthroline disulfonate), 닌히드린(ninhydrin), o-프탈알데히드(o-phthalaldehyde: OPA) 및 피크레이트(picrate)로 구성된 군으로부터 선택될 수 있다.
발색기질은 상기 예시된 것에 한정되지 아니하고, 육안 또는 형광을 통하여 확인 가능한 다른 재질로 대체 가능하다.
바람직하게, 상기 지카 바이러스 특이적 항원 및 항체는 금 예를 들어 콜로이드성 금 입자와 컨쥬게이션 (축합)되어 지카 바이러스 항원-항체-금을 포함하는 축합체를 형성한다. 이러한 축합체 구조를 통해 표지물질 (금 콜로이드)에 항원이 직접 축합된 형태보다 물리화학적 간섭이 없어지게 된다. 이에, 상기 항원에 지카 바이러스 감염 환자 유래 생물학적 샘플 내에 존재하는 지카 바이러스에 대한 항체가 효과적으로 결합할 수 있게 된다.
본 발명은 또한, 개체로부터 분리된 생물학적 샘플에서 상기 축합체 중 지카 바이러스 특이적 항원과 반응하는 지카 바이러스 항체를 검출하는 단계를 포함한다.
상기 생물학적 샘플은 본 명세서에서 검액 또는 검체와 혼용하여 사용될 수 있으며, 지카 바이러스 감염이 의심되는 진단 대상 개체에서 분리된 것이라면 제한이 없으나, 혈액이 바람직하고, 예를 들어 혈청, 혈장 또는 전혈일 수 있다.
경우에 따라서, 생물학적 샘플 내 지카 바이러스에 대한 IgG 및 IgM 항체를 구별하여 검출하기 위하여, IgG 또는 IgM 인간 항체에 특이적으로 결합할 수 있는 마우스의 항체를 포함할 수 있다.
상기 생물학적 샘플을 항-인간 IgG 항체 또는 항-인간 IgM 항체와 반응시키고, 지카 바이러스 항원-항체-표지물질 축합체와 추가적으로 반응시키면, 표지물질-항체-지카 바이러스 항원-생물학적 샘플 내 지카 바이러스 특이적 항원과 반응하는 항체-항-인간 IgG 항체(또는 항-인간 IgM 항체)의 형태로 반응한다. 이러한 반응에 의해 발색 예를 들어, 색 띠가 형성되므로, 이를 통해 생물학적 샘플 내 지카 바이러스에 대한 항체가 존재하는지 여부를 신속하게 확인할 수 있다.
앞서 설명한 바와 같이, 본 발명의 일 실시예에 따르면 생물학적 샘플 내 IgG 항체를 검출하기 위해서는 표피단백질(E) 및 비구조단백질 1(NS1)의 단백질은 단독 또는 혼합으로 사용할 수 있으며, 혼합하여 사용 할 경우 E:NS1의 혼합비율은 1~5: 9~5 비율로 혼합된 것 일수 있으며, 바람직하게는 3:7 내지 4:6로 혼합, IgM 항체를 검출하기 위해서는 표피단백질(E) 및 비구조단백질 1(NS1)의 단백질은 단독 또는 혼합으로 사용할 수 있으며, 혼합하여 사용 할 경우 E:NS1의 혼합비율은 1~5: 9~5 비율로 혼합된 것 일수 있으며, 바람직하게는 1:9 내지 2:8로 혼합하는 것이 가장 바람직하다. 만일 이러한 비율을 벗어나는 혼합비율을 사용하는 경우, 상기 단백질을 이용한 진단키트의 민감도와 특이도가 크게 저하될 수 있다. 표피 단백질의 비율이 높아지면 뎅기 바이러스와 교차반응이 높아지고, 비구조단백질 1의 비율이 높아질 경우 위양성(false positive) 반응이 발생한다. 이에 따라, 상기 진단키트가 생물학적 샘플 내 지카바이러스에 대한 IgG 또는 IgM 항체 검출에 사용되기 어렵게 된다.
본 발명은 또한, 흡수패드; 항-인간 IgG 또는 IgM 항체가 고정된 검사선을 포함하는 멤브레인; 개체로부터 분리된 생물학적 샘플 주입부; 지카 바이러스 특이적 항원, 이에 특이적으로 결합하는 항체 및 표지물질을 동시에 또는 개별적으로 포함하는 축합패드; 및 완충용액으로 전처리된 버퍼패드를 포함하는, 샘플 내 지카 바이러스 항체를 검출하기 위한 신속 진단키트에 관한 것이다.
본 발명에서는 지카 바이러스에 대한 IgG 및 IgM 항체를 구별하여 검출하기 위하여, 지카 바이러스에 대한 인간 IgG 또는 IgM 항체에 특이적으로 결합할 수 있는 항-인간 IgG 또는 IgM 마우스 항체를 포함할 수 있다. 항-인간 IgG 또는 IgM 항체는 검사선을 포함하는 멤브레인에 고정된다.
종래 브라질 바히아파마(Bahiafarma) 사로부터 지카 표준 판넬 혈액(Anti-Zika Mixed Titer Performance Panel)을 제공받아 비교 시험한 결과, 효소면역측정법(ELISA)와 플라크감소중화시험법 (PRNT, plaque reduction neutralization test)의 결과와 거의 일치하였으며, 상위 검사법인 효소면역측정법(ELISA)를 참고치로 하여 결과를 분석하였을 때 100%의 민감도(IgG 및 IgM 모두)와 100%의 특이도를 보임을 확인하였다. 또한, 실제 혈액을 이용하여 지카 바이러스 진단 결과, 지카 IgG 또는 IgM 양성 검체에 대하여 모두 높은 민감도와 특이도를 나타내었다. 이를 통해 종래의 지카 바이러스 진단키트에 비하여 높은 민감도와 특이도를 갖고 혈액 내 지카 바이러스에 대한 IgG 및 IgM 항체를 구별하여 검출할 수 있음을 확인하였다.
개체로부터 분리된 생물학적 샘플 주입부와 관련하여, 지카 바이러스 바이러스의 감염이 의심되는 개체로부터 분리된 생물학적 샘플 예를 들어, 혈액이 투입되는 부분으로, 혈구 분리가 되고 멤브레인으로 이동하여 멤브레인에 고정된 항-인간 IgG 또는 IgM 항체와 반응할 수 있다.
상기 혈구가 분리된 혈액은 액상 형태로, 샘플 주입부의 아래 방향에 위치한 축합패드로 이동할 수 있다. 상기 축합패드는 지카 바이러스 특이적 항원, 이에 특이적으로 결합하는 항체 및 표지물질을 동시에 또는 개별적으로 포함한다. 지카 바이러스 특이적 항원, 항체 및 표지물질에 대한 구체적 내용은 앞서 설명한 바와 동일하게 적용된다. 상기 지카 바이러스 특이적 항원, 항체 및 표지물질의 반응에 의해 형성되는 지카 바이러스 항원-항체-표지물질 축합체에 대한 내용 역시 앞서 설명한 바와 동일하게 적용된다.
상기 완충용액으로 전처리된 버퍼패드는 진단키트 내 샘플의 전달을 원활하게 하고 항원-항체를 반응시키기 위한 것으로, 축합패드와 연결되어 진단 키트의 말단에 위치할 수 있다. 상기 완충용액은 붕산염 완충용액, 트리스 완충용액 또는 인산염 완충용액일 수 있고, 경우에 따라서 Triton X-100, Tween 20, 카제인 등의 물질을 추가로 포함할 수 있다.
흡수패드는 버퍼패드와 반대편 방향의 키트 말단에 위치하도록 구성도리 수 있다. 과량의 샘플 또는 완충용액을 흡수하여 제거한다. 이를 통해 진단키트에 의한 결과를 교란시키지 않도록 한다.
상기 진단키트는 예를 들어, 스트립, ELISA 플레이트, 딥-스틱디바이스, 방사 분할 면역검정 디바이스, 또는 플로우-쓰로우(flow-through) 디바이스 형태일 수 있다. 바람직하게, 면역크로마토그래피법을 이용한 스트립 형태 또는 디바이스 형태일 수 있다. 면역크로마토그래피법을 이용하는 경우 지카 바이러스의 표피단백질(E) 및/또는 비구조단백질 1(NS1), 이에 대한 단클론항체가 표지물질 예를 들어, 콜로이드성 금 입자에 축합되어 있고, 축합체가 생물학적 샘플 예를 들어 혈액에 존재하는 지카 바이러스 항체와 반응을 하면서 모세관 현상에 의해 니트로 셀룰로오스(nitrocellulose) 멤브레인의 미세구멍(micropore)을 통하여 이동한다. 그 도중에 멤브레인의 미세구멍의 내부 표면에 고정되어 있는 항-인간 IgG 또는 항-인간 IgM-단클론항체와 결합하여 발색 띠(band)를 형성하게 된다. 발색 띠(band)의 발색 정도를 확인함으로써 항체의 존재 여부 및 항체의 종류를 육안으로 판별할 수 있다.
경우에 따라서, 상기 축합체에 포함된 단클론항체와 특이적으로 결합할 수 있는 마우스 항체를 대조선으로 포함할 수 있다. 반응시 대조선에서 발색물질로 인해 발색 띠(band)가 나타내고 대조선에서 발색반응이 나타나지 않으면, 진단 결과를 신뢰할 수 없다고 판정될 수 있다.
상기 진단키트는 진단방법에 적합한 한 종류 또는 그 이상의 다른 구성 성분 조성물, 용액 또는 장치 등의 다양한 구성요소를 추가로 포함할 수 있다.
상기 진단키트는 생물학적 샘플을 담는 구획된 캐리어 수단, 시약을 포함하는 용기 등을 추가로 포함할 수 있다. 상기 캐리어 수단은 병, 튜브와 같은 하나 이상의 용기를 함유하기에 적합하고, 각 용기는 본 발명의 방법에 사용되는 독립적 구성요소들을 함유한다.
본 발명의 명세서에서, 당해 분야의 통상의 지식을 가진 자는 용기 중의 필요한 제제를 손쉽게 분배할 수 있다.
본 발명은 더욱이, 지카 바이러스 특이적 항원과 이에 결합하는 항체 및 표지물질을 포함하고, 상기 항원, 항체 및 표지물질의 반응에 의해 지카 바이러스 항원-항체-표지물질 축합체를 형성하는 것을 특징으로 하는, 개체로부터 분리된 생물학적 샘플 중 지카 바이러스 항체를 검출하기 위한 조성물에 관한 것이다.
지카 바이러스 특이적 항원, 항체 및 표지물질에 대한 구체적 내용은 앞서 설명한 바와 동일하게 적용된다. 상기 지카 바이러스 특이적 항원, 항체 및 표지물질의 반응에 의해 형성되는 지카 바이러스 항원-항체-표지물질 축합체에 대한 내용 역시 앞서 설명한 바와 동일하게 적용된다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실시예 1: 베큘로 바이러스 발현용 지카 바이러스 유전자 확보 및 클로닝
서열번호 1의 표피단백질(E) 및 서열번호 2의 비구조단백질 1(NS1) 단백질에대한 유전자 정보를 확보하고, 유전자를 합성하였다. 합성한 유전자는 PCR 방법으로 증폭하였고, 베큘로바이러스 발현 벡터(pAcGP67A)에 삽입하여 재조합 발현 벡터 (도 2)를 완성하였다.
실시예
2: 재조합
베큘로바이러스의
분리
Sf9 S. frugiperda 세포 (ATCC #CRL-1711)는 10% 소태아혈청(fetal bovine serum)을 포함하는 Sf-900 II SFM 배지에서 유지되었다. 상기에서 제조한 pAcGP67A-Zika 비구조단백질 1(NS1), 표피단백질(E) 각각의 DNA (2 ug)를 0.5 ug의 BaculoGold AcNPV DNA와 함께 2 x106 Sf9 곤충세포에 종래 공지된 방법에 따라 형질전환하였다. 형질전환 후 3일째 되는 날, 배지를 원심분리하고, 그 상층액을 Sf9 세포와 함께 한계 희석 어세이(limiting dilution assay)를 수행하였다. 상층액 내의 재조합 바이러스는 감염된 Sf9 세포에 의해 증폭되었다. 증폭한 바이러스는 웨스턴 블랏으로 확인하였다 (도 3).
실시예 3: Sf9 세포내의 Zika 바이러스 단백질의 분리
Sf-900 II SFM 배지내의 세포는 교반용 플라스크에서 0.01-10 m.o.i의 재조합 배큘로바이러스로 감염되었다. 상층액을 3일간 배양한 후, 3000 g에서 10분간 원심분리하여 세포 잔해를 제거하였다. 상기 상층액을 Ni-NTA 레진(resin)에 주입한 후 20 mM 트리스버퍼(Tris-HCl, pH8.0), 0.5 M 염화칼슘로 평형화하였다. 5 mM 이미다졸로 레진을 세척한 후, 500 mM 이미다졸로 단백질을 분리하였다 (도 4). 분리된 단백질은 트리스버퍼(pH8.0) 및 10% 글리세롤로 투석하였다.
실시예 4: 금 축합체용 마우스 항 지카 NS1와 Envelope 특이 단클론항체 제작
실시예
4-1: 면역화 및 세포 융합
상기의 실시예 3에서 준비한 지카 재조합 표피단백질(E)와 비구조단백질 1(NS1)이 각각 100 ㎍이 들어 있는 용액과 같은 부피의 컴플리트 프레운즈 아주번트 (complete Freund's adjuvant)가 섞인 현탁액을 만들어 생후 8주령 암컷 생쥐 (BALB/C, 대한바이오링크(주), 한국)의 복강 내에 주입하였다. 2주 후에 인컴플리트 프레운즈 아주번트(incomplete Freund's adjuvant)를 사용하여 같은 요령으로 한 번 더 주사하고, 다시 2주 후에 같은 요령으로 한 번 더 주사하였다. 마지막 면역처리 후 2일 뒤에 꼬리에서 채혈하여 혈청을 얻은 뒤 인산염 완충액에 1/1,000으로 희석하여 효소면역측정법(ELISA, enzyme-linked immunosorbent assay) 방법으로 항체의 역가를 결정하였다. 만약 역가가 낮게 나오면 2주 후에 다시 면역화시켰다. 그 후, 면역화된 쥐에서 비장을 꺼내고, 조직분쇄기로 비장을 으깬 후, 세포 혼탁액을 용기에 담고 원심 분리하여 세포를 회수하였다. 골수종 세포는 세포배양용 플라스크에서 회수하여 RPMI1640 배지에 현탁하고 세포수를 계수하였다. 비장세포 역시 세포수를 계수하였다. 1X 107개의 골수종 세포와 1X108개의 비장세포를 50 ml 용기로 옮겨 RPMI1640 배지를 적당량 첨가한 후 200 X g로 5 분간 원심 분리하여 세포를 회수하였다. 회수된 세포를 현탁시켜 RPMI1640 배지에 천천히 흔들어 주면서 1 ml의 PEG (50% polyethylene glycol) 용액을 1분 동안 가하였다. 5 분 후에 1 ml의 RPMI1640 배지를 30 초에 걸쳐 천천히 첨가하고, 다시 3 ml의 RPMI1640 배양액을 30 초에 걸쳐 첨가하였다. 또 다시 17 ml의 RPMI1640 배양액을 1 분에 걸쳐 넣은 다음 20 ml의 RPMI1640 배양액을 더 넣어주고, 5 분 동안 반응시켰다. 이를 200 X g로 5 분간 원심분리한 후 배지는 제거하였다. 50 ml의 1% HAT (hypoxathine-aminopterin-thymidine)을 함유하는 RPMI1640 배양액에 주의하여 현탁한 후, 피더 세포(feeder cell)가 들어있는 96웰 세포배양용 플레이트에 웰당 100 ㎕씩 상기 세포를 넣어준 후 37 ℃, 5% CO2 인큐베이터에서 배양하였다.
실시예 4-2: 융합 세포주의 클로닝 및 복수를 이용한 항체 생산
실시예 4-1와 같이 배양된 세포를 10일 간 배양한 후에, 융합 세포가 군락을 형성하여 자라는 것이 확인되면 96웰 세포배양용 플레이트에서 배지를 약 100 ㎕ 취하여 지카 재조합 표피단백질(E)와 비구조단백질 1(NS1)이 각각 코팅(coating)된 플레이트를 이용하여 특이 항체를 생산하는 세포가 자라는 웰을 스크리닝하였다. 그 웰의 세포를 회수하여 24웰 세포배양용 용기로 옮긴 다음 배양한 후, 안정한 단클론 세포주가 얻어질 때까지 클로닝을 계속하였다. 클로닝이 완료되면 티 플라스크 (T flask)로 옮겨 대량으로 배양하여 얼린 후 액체 질소에 보관하였다. 본 발명에서 개발된 주요한 지카 재조합 표피단백질(E)와 비구조단백질 1(NS1) 특이 단클론항체는 아래 표 1과 같다.
생후 6-8주령 생쥐(BALB/C)의 복강에 인컴플리트 프레운즈 아주번트(incomplete Freund's adjuvant)를 0.5 ml 주사하였다. 1 주일째 되는 날 융합 세포를 인산염 완충액에 현탁하고 계수하여, 쥐 한 마리당 1.5X 106 개의 세포를 0.5 ml 인산염 완충액에 현탁한 후 복강에 주사하였다. 1-2 주가 지나면서 복수(ascitic fluid)가 적당히 차오르면 주사기를 이용하여 복수를 채취한 후 냉동 보관하였다. 본 발명을 통하여 개발된 주요 단클론항체의 아형(isotype), 면역친화도(K), 분리한 지카 바이러스와의 반응성 여부는 표 1 및 도 5에 나타내었다.
[표 1] 단클론항체 및 특성
실시예 4-3: 단클론항체의 정제
실시예 4-2와 같은 방법으로 채취한 복수에 황산 암모늄(ammonium sulfate)을 10%의 농도로 첨가하여 30 분간 혼합한 후, 15,000 rpm에서 30 분간 원심분리하고 상층액을 취하였다. 다시 이 상층액에 황산 암모늄을 50%의 농도로 첨가한 후 4℃에서 30 분간 방치하였다. 다시 15,000 rpm에서 30 분간 원심 분리하여 상층액은 버리고 침전물을 20 mM 인산완충용액 (phosphate buffer, pH 7.0)에 현탁시켰다. 이 현탁액을 20 mM 인산완충용액에서 18 시간 이상 투석한 후, 20 mM 인산완충용액 (pH 7.0)으로 평형화된 단백질 G-결합 컬럼 (Protein G-coupled column)에 투석액을 주입하고, 모두 주입되고 나면 인산완충용액을 이용하여 흡착하지 않은 물질들을 제거해 주었다. 컬럼에 결합된 항체는 10 mM 글리신용액 (glycine solution, pH 2.8) 용액으로 용출(elution)시켰다. 이때 1 M 트리스(Tris, pH 9.0) 용액을 용출액의 1/10 부피로 첨가해 주어 pH가 7.0 ~ 7.5가 되도록 보정해 주었다. 용출된 항체액을 농축한 후, 인산완충용액(phosphate buffered saline, PBS)에서 투석하고, 투석이 끝나면 브래드포드법(Bradford assay)을 이용하여 항체의 양을 확인하고 사용 전까지 냉동 보관하였다.
실시예 5: 단클론항체 J5E1/J2G7-금 축합체 및 축합 패드 제조
0.02% HAuCl4 용액을 교반 가열하면서 끓기 시작하면 0.2% Sodium citrate 용액을 첨가하여 용액을 환원시켜 금 입자(gold particle)을 제작하였다. 이렇게 제작된 금 입자에 실시예 4에서 개발된 단클론항체 J5E1와 단클론항체 J2G7을 금 입자용액 100 ml당 1 mg을 첨가하여 각각 축합시켰다. 축합된 단클론항체-금 축합체를 10,000 g에서 원심분리하여 침전시키고 0.1% BSA를 함유하는 생리식염수(PBS)로 용해하여 OD450 값이 10이 되도록 만들었다. 이렇게 제작된 용액을 재조합 지카 표피단백질(E)와 비구조단백질 1(NS1)과 함께 섞은 후, 곧바로 0.05% Tween 20이 전처리된 폴리에스테르나 유리패드에 처리하고 건조시켜서 축합 패드를 완성하였다. 여기서, 재조합 지카 표피단백질(E)와 비구조단백질 1(NS1)의 혼합비율은 IgM을 측정하기 위해서는 1:9로, IgG를 측정하기 위해서는 4:6으로 하는 것이 가장 바람직하였다.
실시예 6: 검사선용 항-인간 IgG 및 항-인간 IgM 및 대조선용 항 마우스 IgG 분주
실시예 4에서 수행한 방법과 동일하게 수행하여 제작된 항-인간 IgG 단클론항체와 항-인간 IgM 단클론항체를 준비하여, 니트로셀룰로오스 멤브레인에 0.5 ~ 4.0 mg/ml의 농도로 검사선1(항-인간 IgG)과 검사선2(항-인간 IgM) 부위에 분주를 하였다. 또한, 멤브레인의 대조선 위치에는 산양 항 마우스 IgG를 Arista Biologicals Inc.(미국)로부터 구입하여 1.0 mg/ml의 농도로 PBS로 희석하여 분주하였다.
실시예 7: 버퍼 패드 및 흡수 패드
유리 섬유(glass fiber), 코튼(cotton) 또는 셀룰로오스 재질의 패드에 0.1 M Tris (pH 8.0)을 처리한 후, 건조하여 버퍼 패드로 사용하였다. 흡수 패드는 코튼 재질의 패드를 별도의 처리 없이 잘라서 사용하였다.
실시예 8: 지카 바이러스 항체 진단용 신속 면역크로마토그래피 진단 키트의 제조
실시예
8-1: 스트립 제조방법
도 6과 같이 스트립의 아래쪽으로부터 완충용액이 처리된 버퍼패드, 금축합체 및 지카 재조합 항원이 함께 처리된 축합패드, 그리고, 검체를 주입하는 검체패드와 검사선과 대조선이 순서대로 부착 및 분주되어 있는 멤브레인을 순차적으로 부착시키고 상단에는 흡수패드를 부착시켰다.
실시예 8-2: 스트립 장착 및 키트 제조
실시예 8-1에서 준비된 스트립을 도 7과 같은 플라스틱 카세트에 장착하고 조립을 하여 진단키트를 완성하였다.
실시예 9: 본 발명에 따른 신속 면역크로마토그래피 진단키트의 검사 방법
지카 바이러스 항체가 존재하는 검액(인간의 혈청, 혈장, 전혈)을 검체주입부에 5μl 넣고, 버퍼패드에 반응용액을 3방울(약 100 μl) 떨어뜨린다. 그러면, 검액이 혈구분리가 되고, 멤브레인으로 이동하여 고정화되어 있는 항-인간 IgG (검사선) 또는 항-인간 IgM (검사선)에 반응을 하게 된다. 다른 한편으로는 반응용액이 축합패드로 이동하여 항체-금축합체를 용해시킨 후, 재조합 항원들과 결합하게 되어 지카 E/NS1 항원-항체-금 축합체를 형성하게 되고 (도 7 참조), 이 복합체가 멤브레인으로 이동하여 "금 축합체-항체-지카 E/NS1 항원 - 검액 내 지카 항체-항-인간 IgG 항체 (또는 항-인간 IgM 항체)"와 같은 형태로 반응을 하게 되어 색 띠를 형성하게 된다. 한편, 반응하지 않은 항체-금 축합체는 대조선 부위에 부착되어 있는 항-마우스 면역글로블린 G와 반응을 하여 색 띠를 나타나게 된다.
실시예 10: 본 발명에 따른 신속 면역크로마토그래피 진단 키트의 효능 시험
실시예
10-1: 기존 방법과의 비교 시험
본 발명에 따른 진단키트의 성능을 확인하기 위해서 브라질 바히아파마(Bahiafarma) 사로부터 지카 표준 판넬 혈액(Anti-Zika Mixed Titer Performance Panel)을 제공받아서 비교시험을 수행하였다. 그 결과, 표 2에서와 같이 효소면역측정법(ELISA)와 플라크감소중화시험법 (PRNT, plaque reduction neutralization test)의 결과와 거의 일치하였다. 즉, 상위 검사법인 효소면역측정법(ELISA)를 참고치로 하여 결과를 분석하였을 때에, 본 발명에 따른 진단키트는 100%의 민감도(IgG 및 IgM 모두)와 100%의 특이도를 보였다. 이 결과는 본 발명에 따른 진단키트가 기존에 사용되고 있는 ELISA와 PRNT 법을 충분히 대체할 수 있다는 것을 보여주고 있다.
[표 2] 바히아파마 지카 표준 판넬을 이용한 기존 키트와의 비교 시험 결과
1ELISA (효소면역측정법, enzyme-linked immunosorbent assay), 2s/co (signal per cutoff value).
실시예 10-2: 진단적 효능 시험
본 발명에 따른 진단키트의 진단적 효능 시험(민감도 및 특이도)을 위해서는 Hospital Gaffree e Guinle (리오 데 자네이로, 브라질)로부터 혈액 450건(지카 IgG 양성 300건과 지카 IgM 양성 150건)을 제공받았다. 지카 음성 검체 300건은 단국대학교 병원(천안, 한국)으로부터 제공받았다. 이들 검체들은 모두 ELISA 법으로 지카 양성과 음성으로 확인된 것이다.
이와 같이 제공된 혈액을 이용하여 본 발명에 따른 진단키트를 이용한 시험을 수행하여 표 3에서와 같이 민감도와 특이도가 지카 IgG 양성 검체에 대해서는 99%와 99.3%로, 지카 IgM 양성 검체에 대해서는 96.6%와 98.6% 인 매우 뛰어난 결과를 확보하였다. 이들 결과는 국제적으로 현재까지 보고된 지카 바이러스에 대한 신속진단키트들 중에서 가장 우수한 결과이다.
[표 3] 본 발명에 따른 진단키트의 진단적 효능 시험 결과.
실시예 10-3: 비교시험 및 진단적 효능 시험을 통한 결론
상기와 같이, 본 발명의 진단 키트는 우수한 진단적 정확도를 보여주었다. 2016년 09월 현재, 지카 진단용 혈청학적 진단키트 중에서 신속진단키트는 아직 보고된 바 없다. 따라서, 본 발명에 따른 신속 진단키트를 동법의 키트와 비교할 수는 없었으나, 다른 종류의 측정법과 종합 비교시, 평균 97.8%(99%와 96.6%)의 민감도와 평균 99.0%(99.3% + 98.6%)의 특이도를 보여주었다. 이는 본 발명에 따른 기술을 탑재한 진단키트를 이용하여 지카 바이러스에 대한 항체를 검사하게 되면 뛰어난 진단적 정확도를 가질 수 있음을 알 수 있다.
결론적으로, 본 발명에 따른 진단방법 및 진단키트는 지카 바이러스 감염의 진단에 있어, 우수한 진단적 정확성을 가지며, 고가의 장비의 도움 없이도 현장에서 신속하게 검사할 수 있는 진단법으로 사용될 수 있을 것이다.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시 양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
<110> BioNano Health Guard Research Center
GenBody Incorporation
<120> A Method of Detecting Anti-Zika Virus Antibodies Using Monoclonal
Antibody Specific to the Zika Envelope and Non-Structural Protein
1 and Rapid Diagnostic Kit for Detecting Anti-Zika Virus
Antibodies
<130> 186
<160> 2
<170> KopatentIn 2.0
<210> 1
<211> 305
<212> PRT
<213> Zika Envelope
<400> 1
Ile Arg Cys Ile Gly Val Ser Asn Arg Asp Phe Val Glu Gly Met Ser
1 5 10 15
Gly Gly Thr Trp Val Asp Val Val Leu Glu His Gly Gly Cys Val Thr
20 25 30
Val Met Ala Gln Asp Lys Pro Thr Val Asp Ile Glu Leu Val Thr Thr
35 40 45
Thr Val Ser Asn Met Ala Glu Val Arg Ser Tyr Cys Tyr Glu Ala Ser
50 55 60
Ile Ser Asp Met Ala Ser Asp Ser Arg Cys Pro Thr Gln Gly Glu Ala
65 70 75 80
Tyr Leu Asp Lys Gln Ser Asp Thr Gln Tyr Val Cys Lys Arg Thr Leu
85 90 95
Val Asp Arg Gly Trp Gly Asn Gly Cys Gly Leu Phe Gly Lys Gly Ser
100 105 110
Leu Val Thr Cys Ala Lys Phe Ala Cys Ser Lys Lys Met Thr Gly Lys
115 120 125
Ser Ile Gln Pro Glu Asn Leu Glu Tyr Arg Ile Met Leu Ser Val His
130 135 140
Gly Ser Gln His Ser Gly Met Ile Val Asn Asp Thr Gly His Glu Thr
145 150 155 160
Asp Glu Asn Arg Ala Lys Val Glu Ile Thr Pro Asn Ser Pro Arg Ala
165 170 175
Glu Ala Thr Leu Gly Gly Phe Gly Ser Leu Gly Leu Asp Cys Glu Pro
180 185 190
Arg Thr Gly Leu Asp Phe Ser Asp Leu Tyr Tyr Leu Thr Met Asn Asn
195 200 205
Lys His Trp Leu Val His Lys Glu Trp Phe His Asp Ile Pro Leu Pro
210 215 220
Trp His Ala Gly Ala Asp Thr Gly Thr Pro His Trp Asn Asn Lys Glu
225 230 235 240
Ala Leu Val Glu Phe Lys Asp Ala His Ala Lys Arg Gln Thr Val Val
245 250 255
Val Leu Gly Ser Gln Glu Gly Ala Val His Thr Ala Leu Ala Gly Ala
260 265 270
Leu Glu Ala Glu Met Asp Gly Ala Lys Gly Arg Leu Ser Ser Gly His
275 280 285
Leu Lys Cys Arg Leu Lys Met Asp Lys Leu Arg Leu Lys Gly Val Ser
290 295 300
Tyr
305
<210> 2
<211> 363
<212> PRT
<213> Zika NS1
<400> 2
Met Val Gly Cys Ser Val Asp Phe Ser Lys Lys Glu Thr Arg Cys Gly
1 5 10 15
Thr Gly Val Phe Val Tyr Asn Asp Val Glu Ala Trp Arg Asp Arg Tyr
20 25 30
Lys Tyr His Pro Asp Ser Pro Arg Arg Leu Ala Ala Ala Val Lys Gln
35 40 45
Ala Trp Glu Asp Gly Ile Cys Gly Ile Ser Ser Val Ser Arg Met Glu
50 55 60
Asn Ile Met Trp Arg Ser Val Glu Gly Glu Leu Asn Ala Ile Leu Glu
65 70 75 80
Glu Asn Gly Val Gln Leu Thr Val Val Val Gly Ser Val Lys Asn Pro
85 90 95
Met Trp Arg Gly Pro Gln Arg Leu Pro Val Pro Val Asn Glu Leu Pro
100 105 110
His Gly Trp Lys Ala Trp Gly Lys Ser His Phe Val Arg Ala Ala Lys
115 120 125
Thr Asn Asn Ser Phe Val Val Asp Gly Asp Thr Leu Lys Glu Cys Pro
130 135 140
Leu Lys His Arg Ala Trp Asn Ser Phe Leu Val Glu Asp His Gly Phe
145 150 155 160
Gly Val Phe His Thr Ser Val Trp Leu Lys Val Arg Glu Asp Tyr Ser
165 170 175
Leu Glu Cys Asp Pro Ala Val Ile Gly Thr Ala Val Lys Gly Lys Glu
180 185 190
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260 265 270
Leu Glu Ile Arg Phe Glu Glu Cys Pro Gly Thr Lys Val His Val Glu
275 280 285
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290 295 300
Gly Arg Val Ile Glu Glu Trp Cys Cys Arg Glu Cys Thr Met Pro Pro
305 310 315 320
Leu Ser Phe Arg Ala Lys Asp Gly Cys Trp Tyr Gly Met Glu Ile Arg
325 330 335
Pro Arg Lys Glu Pro Glu Ser Asn Leu Val Arg Ser Met Val Thr Ala
340 345 350
Gly Ser Thr Asp His Met Asp His Phe Ser Leu
355 360
Claims (20)
- 다음의 단계를 포함하는 지카 바이러스 감염 여부 진단에 정보를 제공하는 방법:
서열번호 1의 표피단백질(E) 또는 서열번호 2의 비구조단백질 1(NS1)을 포함하는 지카 바이러스 특이적 항원과 이에 결합하는 항체 및 표지물질을 반응시켜 지카 바이러스 항원-항체-표지물질 축합체(conjugate)를 형성하는 단계; 및
개체로부터 분리된 생물학적 샘플에서 상기 축합체 중 지카 바이러스 특이적 항원과 반응하는 지카 바이러스 항체를 검출하는 단계. - 삭제
- 제1항에 있어서, 상기 서열번호 1의 표피단백질(E) 및 서열번호 2의 비구조단백질 1(NS1)을 3:7 내지 4:6로 혼합하여 샘플 내 IgG 항체를 검출하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 서열번호 1의 표피단백질(E) 및 서열번호 2의 비구조단백질 1(NS1)을 1:9 내지 2:8로 혼합하여 샘플 내 IgM 항체를 검출하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 항체는 기탁번호 KCTC 13109BP로 기탁된 융합세포(hybridoma)에서 생산되는 단클론항체 또는 기탁번호 KCTC 13110BP로 기탁된 융합세포에서 생산되는 단클론항체인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항에 있어서, 금, 컬러 유리, 및 플라스틱 비드, 형광물질, 효소, 효소 반응 또는 비효소 반응에 사용되는 발색기질로 구성된 군에서 선택된 어느 하나의 표지물질의 발색을 통해 항체를 검출하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 생물학적 샘플은 혈청, 혈장 또는 전혈인 것을 특징으로 하는 방법.
- 흡수패드;
항-인간 IgG 또는 IgM 항체가 고정된 검사선을 포함하는 멤브레인;
개체로부터 분리된 생물학적 샘플 주입부;
서열번호 1의 표피단백질(E) 또는 서열번호 2의 비구조단백질 1(NS1)을 포함하는 지카 바이러스 특이적 항원, 이에 특이적으로 결합하는 항체 및 표지물질을 동시에 또는 개별적으로 포함하는 축합패드; 및
완충용액으로 전처리된 버퍼패드를 포함하는, 샘플 내 지카 바이러스 항체를 검출하기 위한 신속 진단키트. - 삭제
- 제8항에 있어서, 상기 서열번호 1의 표피단백질(E) 및 서열번호 2의 비구조단백질 1(NS1)을 3:7 내지 4:6로 혼합하여 샘플 내 IgG 항체를 검출하는 것을 특징으로 하는 진단키트.
- 제8항에 있어서, 상기 서열번호 1의 표피단백질(E) 및 서열번호 2의 비구조단백질 1(NS1)을 1:9 내지 2:8로 혼합하여 샘플 내 IgM 항체를 검출하는 것을 특징으로 하는 진단키트.
- 제8항에 있어서, 상기 항체는 기탁번호 KCTC 13109BP로 기탁된 융합세포(hybridoma)에서 생산되는 단클론항체 또는 기탁번호 KCTC 13110BP로 기탁된 융합세포에서 생산되는 단클론항체인 것을 특징으로 하는 진단키트.
- 제8항에 있어서, 상기 표지물질은 금, 컬러 유리, 및 플라스틱 비드, 형광물질, 효소, 효소 반응 또는 비효소 반응에 사용되는 발색기질로 구성된 군에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 진단키트.
- 제8항에 있어서, 상기 생물학적 샘플은 혈청, 혈장 또는 전혈인 것을 특징으로 하는 진단키트.
- 제8항에 있어서, 스트립, ELISA 플레이트, 딥-스틱디바이스, 방사 분할 면역검정 디바이스, 또는 플로우-쓰로우(flow-through) 디바이스 형태인 것을 특징으로 하는 진단키트.
- 서열번호 1의 표피단백질(E) 또는 서열번호 2의 비구조단백질 1(NS1)을 포함하는 지카 바이러스 특이적 항원과 이에 결합하는 항체 및 표지물질을 포함하고, 상기 항원, 항체 및 표지물질의 반응에 의해 지카 바이러스 항원-항체-표지물질 축합체를 형성하는 것을 특징으로 하는, 개체로부터 분리된 생물학적 샘플 중 지카 바이러스 항체를 검출하기 위한 조성물.
- 삭제
- 제16항에 있어서, 상기 항체는 기탁번호 KCTC 13109BP로 기탁된 융합세포(hybridoma)에서 생산되는 단클론항체 또는 기탁번호 KCTC 13110BP로 기탁된 융합세포에서 생산되는 단클론항체인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제16항에 있어서, 상기 표지물질은 금, 컬러 유리, 및 플라스틱 비드 형광물질, 효소, 효소 반응 또는 비효소 반응에 사용되는 발색기질로 구성된 군에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제16항에 있어서, 상기 생물학적 샘플은 혈청, 혈장 또는 전혈인 것을 특징으로 하는 조성물.
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Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101520084B1 (ko) * | 2014-01-09 | 2015-05-29 | 주식회사 젠바디 | 뎅기열 바이러스의 표피단백질 도메인1에 특이적인 단클론 항체를 포함하는 뎅기열 바이러스 항체의 신속진단키트 및 그 제조 방법 |
| CN105954512A (zh) * | 2016-06-01 | 2016-09-21 | 卢氏实验室公司 | 一种快速免疫层析法检测塞卡病毒Zika virus的检测条 |
-
2016
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Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101520084B1 (ko) * | 2014-01-09 | 2015-05-29 | 주식회사 젠바디 | 뎅기열 바이러스의 표피단백질 도메인1에 특이적인 단클론 항체를 포함하는 뎅기열 바이러스 항체의 신속진단키트 및 그 제조 방법 |
| CN105954512A (zh) * | 2016-06-01 | 2016-09-21 | 卢氏实验室公司 | 一种快速免疫层析法检测塞卡病毒Zika virus的检测条 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Acharya D et al, Scientific Reports (2016.08.24.), vol 6, no 32227, pp 1-11. |
| 인터넷 기사, 혈액으로 확인하는 지카바이러스 진단키트 개발, 세이프코리아뉴스 (2016.06.04.), pp 1-9. |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2018092969A1 (ko) | 2018-05-24 |
| KR20180056119A (ko) | 2018-05-28 |
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