KR102042296B1

KR102042296B1 - 신규한 비시클릭 티아졸 화합물

Info

Publication number: KR102042296B1
Application number: KR1020147032428A
Authority: KR
Inventors: 마사아키 사와; 히데키 모리야마; 데스시 야마다; 미키 시타시게; 유스케 가와세; 유코 우노
Original assignee: 카나 바이오사이언스, 인코포레이션; 고쿠리츠켕큐카이하츠호진 고쿠리츠간켕큐센타
Priority date: 2012-05-24
Filing date: 2013-05-22
Publication date: 2019-11-07
Also published as: EP2855470A1; US9102637B2; CN104321321B; JP6095195B2; US20150133656A1; WO2013176293A1; KR20150014931A; CN104321321A; EP2855470B1; US20130317218A1; JP2015517453A

Abstract

본 발명은 Traf2- 및 Nck-상호작용 키나제 (TNIK)를 억제하는 신규한 비시클릭 티아졸 화합물에 관한 것이며, 이는 암 환자, 특히 고형암 환자, 예컨대 결장직장암, 췌장암, 비소세포 폐암, 전립선암 또는 유방암 환자에게 투여되는 TNIK 억제제로서 유용하다. 비시클릭 티아졸 화합물은 하기 화학식 I에 의해 나타내어지는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다.
<화학식 I>

(상기 식에서, R¹, R², R³ 및 Q는 명세서에 정의된 바와 같음)

Description

신규한 비시클릭 티아졸 화합물 {NOVEL BICYCLIC THIAZOLE COMPOUNDS}

본 발명은 Traf2- 및 Nck-상호작용 키나제 (TNIK)를 억제하는 신규한 비시클릭 티아졸 화합물에 관한 것이며, 이는 암 환자, 특히 고형암 환자, 예컨대 결장직장암, 췌장암, 비소세포 폐암, 전립선암 또는 유방암 환자에게 투여되는 TNIK 억제제로서 유용하다.

Wnt 단백질은 세포 운명의 결정, 증식, 이동 및 극성과 같은 다양한 세포 과정을 제어하는 신호 전달 경로를 활성화하는 분비 당단백질의 거대 패밀리를 구성한다. Wnt 단백질은 여러 경로를 통해 신호전달을 할 수 있으며, 가장 잘 특징규명된 것은 β-카테닌을 통하는 정규 경로 (Wnt/β-카테닌 신호전달)이다. Wnt/β-카테닌 신호전달의 탈조절은 결장직장암, 췌장암, 비소세포 폐암, 전립선암, 유방암 등과 같은 다수의 인간 암에서 흔히 발견된다.

TNIK는 c-Jun N-말단 키나제 경로를 활성화시키고 세포골격을 조절하는 STE20 패밀리 키나제 중 하나로 공지되어 있다. 최근, TNIK는 두 결장직장암 세포주 DLD1 및 HCT-116에서, 통상적으로 항-TCF4 (T-세포 인자-4) 및 항-β-카테닌 항체와 면역침전되는 70 단백질 중 하나로 확인되었다 (문헌 [Shitashige M, et al., Gastroenterology 2008, 134:1961-7]). 최근 연구는 TNIK가 정규 Wnt 신호전달 경로에서 결정적인 역할을 수행하며, 따라서 TNIK는 종양에서 일탈적 Wnt 신호전달을 제거하는 유망한 표적일 수 있음을 보였다 (문헌 [Shitashige M, et al., Cancer Res; 70(12); 5024-33 (2010)]). 즉, TNIK를 표적화하는 소형 간섭 RNA는 결장직장암 세포의 증식 및 면역결핍 마우스에 결장직장암 세포를 피하 주사하여 생성된 종양의 성장을 억제하였다.

항암제의 스크리닝인 본 발명의 유용성 평가 방법은 본 발명자들에 의해 출원된 WO 2009/104413에 이미 기재되어 있다. 본 발명자들에 의해 출원된 WO 2010/64111에는 강력한 TNIK 억제제로서의 신규한 아미노티아졸 유도체 및 β-카테닌 및 TCF4 복합체의 전사 활성에 대한 TNIK 억제제의 효과가 개시되어 있다. 그러나 지금까지는, 본 발명의 비시클릭 구조를 갖는 티아졸 화합물이 TNIK 억제제로서 유용한 것으로 개시되지 않았다.

본 발명은 TNIK를 억제하는 신규한 비시클릭 티아졸 화합물을 제공하고, 이는 암 환자, 특히 고형암 환자, 예컨대 결장직장암, 췌장암, 비소세포 폐암, 전립선암 또는 유방암 환자에게 투여되는 TNIK 억제제로서 유용하다.

본 발명에 따라, 본 발명자들은 장애, 예컨대 본원에 기재되고 당업자에게 명백한 장애의 효과적인 치료를 제공하는 신규한 비시클릭 티아졸 TNIK 억제제를 발견하였다.

본 발명은 하기 화학식 I에 의해 나타내어지는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.

<화학식 I>

(상기 식에서,

R¹은

또는

이고,

여기서 각각의 A¹, A², A³, A⁴, A⁵, A⁶, A⁷은 독립적으로 C-Z 또는 N이고,

R²는 수소 원자, 치환 또는 비치환된 알킬 기이고,

R³은 수소 원자, 치환 또는 비치환된 알킬 기, 히드록실 기, 치환 또는 비치환된 알콕시 기이고,

Q는

,

또는

이고,

여기서 각각의 Y¹, Y², Y³ 및 Y⁴는 독립적으로 수소 원자 또는 저급 알킬 기로 임의로 치환된 질소 원자, 황 원자, 산소 원자 또는 탄소 원자를 나타내고,

Z, R⁴ 및 R⁵는 독립적으로 수소 원자, 할로겐 원자, 치환 또는 비치환된 알킬 기, 치환 또는 비치환된 알케닐 기, 치환 또는 비치환된 알키닐 기, 히드록실 기, 치환 또는 비치환된 알콕시 기, 치환 또는 비치환된 아미노 기, 카르복실 기, 에스테르 기, 포르밀 기, 치환된 카르보닐 기, 치환된 카르바모일 기, 치환 또는 비치환된 우레아 기, 치환 또는 비치환된 방향족 기, 치환 또는 비치환된 헤테로시클릭 기, 치환 또는 비치환된 헤테로방향족 기, 치환 또는 비치환된 아실아미노 기, 치환 또는 비치환된 아릴카르보닐아미노 기, 티올 기, 치환 또는 비치환된 티오알킬 기, 술폰산 기, 치환된 술폰 기, 치환 또는 비치환된 술폰아미드 기, 시아노 기, 니트로 기를 나타내거나, 또는 인접 R⁴ 및 R⁵는 조합되어, 각각 지환족 또는 헤테로시클릭 비시클릭 융합 고리를 형성하는 5- 내지 7-원 고리를 형성할 수 있으며, 여기서 5- 내지 7-원 고리는 임의로 치환기를 가질 수 있고,

R⁶은 치환 또는 비치환된 알킬 기, 치환 또는 비치환된 알케닐 기, 치환 또는 비치환된 알키닐 기, 치환 또는 비치환된 알콕시 기, 치환 또는 비치환된 아미노 기, 치환 또는 비치환된 헤테로시클릭 기임)

본원에서 사용되는 치환기에는, 예를 들어 할로겐 원자 (예컨대, F, Cl, Br), 치환 또는 비치환된 알킬 기 (예컨대, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬 기, 치환 또는 비치환된 C3-C7 시클로알킬 기, 치환 또는 비치환된 아르알킬 기, 여기서 치환기에는, 예를 들어 히드록실 기, 디메틸아미노 기, 모르폴리노 기, 4-메틸피페라진-1-일 기 및 피페라진-1-일 기가 포함됨), 치환 또는 비치환된 알케닐 기 (예컨대, 치환 또는 비치환된 C2-C6 알케닐 기, 예를 들어 비닐, 알릴, 이소프로페닐, 부테닐, 이소부테닐 등), 치환 또는 비치환된 알키닐 기 (예컨대, 치환 또는 비치환된 C2-C6 알키닐 기, 예를 들어 에티닐, 2-프로피닐, 프로파르길 등), 치환 또는 비치환된 알콕시 기 (예컨대, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕시 기), 치환 또는 비치환된 아미노 기 (예컨대, 아미노 기, 모르폴리노 기 또는 4-메틸피페라진-1-일 기), 치환 또는 비치환된 아실아미노 기 (예컨대, 치환 또는 비치환된 C1-C4 아실아미노 기), 치환 또는 비치환된 아릴카르보닐아미노 기 (예컨대, 페닐카르보닐아미노 기 또는 피리딜카르보닐아미노 기), 에스테르 기 (예컨대, 치환 또는 비치환된 C1-C4 알킬에스테르 기), 치환된 카르보닐 기 (예컨대, 아세틸 기, 벤조일 기), 치환된 카르바모일 기 (예컨대, 치환 또는 비치환된 C1-C4 카르바모일 기), 치환 또는 비치환된 우레아 기 (예컨대, 치환 또는 비치환된 C1-C4 우레아 기), 치환 또는 비치환된 방향족 기 (예컨대, 치환 또는 비치환된 페닐 기), 치환 또는 비치환된 헤테로시클릭 기 (예컨대, 치환 또는 비치환된 모르폴리노 기, 피페라지닐 기 또는 피롤리디노 기), 치환 또는 비치환된 헤테로방향족 기 (예컨대, 치환 또는 비치환된 피리디노 기), 치환 또는 비치환된 티오알킬 기 (예컨대, 치환 또는 비치환된 C1-C4 티오알킬 기), 치환된 술폰 기 (예컨대, 치환 또는 비치환된 C1-C4 알킬술폰 기), 치환 또는 비치환된 술폰아미드 기 (예컨대, 치환 또는 비치환된 C1-C4 알킬술폰아미드 기)가 포함된다.

하기 일반 반응식은 본원에 개시된 비시클릭 티아졸 화합물에 대한 합성 접근법에 대해 상세히 알려준다. 본원에 개시된 화학식 I의 화합물은 반응식 1-7에 나타낸 바와 같이, 그리고 표준 합성 방법 및 시판되거나 당업계에 공지된 합성법을 이용하여 시판되는 전구체로부터 합성할 수 있는 출발 물질을 사용하여 실시예에 예시된 바와 같이, 또는 당업자에 의해 인식되는 그의 변형예와 같이 제조할 수 있다.

이러한 반응식에서 종종 정확한 구조가 지시되지만, 당업자는 유기 화학 분야에서 표준인 방법으로 보호 및 탈보호 또는 반응성 관능기를 적절하게 고려하여 본 방법이 화학식 I의 유사한 화합물에 널리 적용됨을 인식할 것이다. 예를 들어, 원치않는 부 반응을 방지하기 위해 히드록시 기는 일반적으로 분자의 다른 부위에서 화학 반응 동안 에테르 또는 에스테르로 전환되어야 한다. 히드록실 보호기는 용이하게 제거되어 유리 히드록시 기를 제공한다. 아미노 기 및 카르복실산 기는 유사하게 유도체화되어 이를 원치않는 부 반응으로부터 보호한다. 전형적 보호기 및 이의 부착 및 탈착 방법은 문헌 [T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis 3rd Edition, John Wiley and Sons, Inc., New York (1999)]에 충분히 기재되어 있다.

하기 반응식 중 각 변수는 본원에 제공된 화합물의 설명과 일치되는 임의의 기를 지칭한다. 화학식 I의 화합물의 호변이성질체 및 용매화물 (예, 수화물)도 본 발명의 범주 내에 포함된다.

본원에 개시된 임의의 화학식의 임의의 화합물은 반응식에 제공된 절차 및 또한 적합한 출발 물질을 선택하여 실시예에 제공된 절차를 이용하고 유사한 절차에 따라 수득할 수 있다. 따라서, 본원에 개시되거나 예시된 임의의 화학식의 임의의 화합물은 목적하는 치환과 함께 적절한 출발 물질 및 적절한 시약을 사용하여, 그리고 본원에 기재된 것과 유사한 절차에 따라 수득할 수 있다.

R²가 수소 원자인 화학식 I의 화합물은 반응식 1에 나타낸 바와 같이 5-아미노티아졸 중간체 (II) 및 산 클로라이드 (III-a)로부터의 아미드의 형성에 의해 일반적으로 합성된다.

<반응식 1>

상기 식에서, R¹, R³ 및 Q는 화학식 I에서 정의된 바와 같다.

동일한 유형의 아미드-커플링 반응은 일반적 아미드 커플링 조건 하에서 카르복실산 (III-b)을 사용하여 수행할 수 있으며, 예컨대 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필) 카르보디이미드 히드로클로라이드 (EDC), 히드록시벤조트리아졸 (HOBT) 및 염기, 예컨대 디이소프로필에틸아민 또는 트리에틸아민을 사용하여 R²가 수소 원자인 화학식 I의 화합물을 수득할 수 있다.

또 다른 접근법에서, 화학식 I의 화합물은 반응식 2에 나타낸 바와 같이 아민을 사용한 직접 아미노분해에 의해 에스테르 중간체 (IV)로부터 제조할 수 있다.

<반응식 2>

상기 식에서, R¹, R², R³ 및 Q는 화학식 I에서 정의된 바와 같다.

아미노분해 반응은 순수한 아민 용액 또는 용매, 예컨대 THF 또는 디옥산의 존재 하 알콜 용액 중 아민을 사용하여 수행한다. 반응은 80℃ 내지 150℃의 온도에서 1-24시간 동안, 바람직하게는 마이크로파 조사 하 80℃에서 150분 동안 마이크로파 합성기를 사용하여 밀봉된 튜브 내에서 교반하고 가열한다.

반응식 3에 나타낸 바와 같은 대안적 경로에서, R²가 수소인 화학식 I의 화합물의 N-알킬화에 의해 널리 공지된 합성 경로, 예컨대 환원성 알킬화 또는 분자의 관능화가 이러한 유형의 반응과 상용성인 경우 알킬 할라이드를 사용한 알킬화를 이용하여, 화학식 I의 화합물을 제조할 수 있다.

<반응식 3>

상기 식에서, R¹, R², R³ 및 Q는 화학식 I에서 정의된 바와 같고, X는 Cl, Br 및 I로부터 선택되는 할로겐이다.

아미드-커플링 반응의 출발 물질로서 사용되는 반응식 1에서 화학식 II로 나타내어지는 화합물은 문헌 [Cook et al. (J. Chem. Soc. 1949, 3001)]에 기재된 바와 유사한 방식으로 제조할 수 있다. 예를 들어, 화학식 II로 나타내어지는 화합물은 하기 반응식 4을 통해 제조할 수 있다.

<반응식 4>

상기 식에서, R¹ 및 R³은 화학식 I에서 정의된 바와 같다.

따라서, 이소티오시아네이트 (V) 및 2-아미노-2-시아노-N-알킬아세트아미드의 혼합물을 적합한 용매, 예컨대 에틸 아세테이트 또는 에탄올 중에서 교반하고, 환류 조건에서 0.5-2시간 동안 가열하여 화학식 II로 나타내어지는 화합물을 제공한다.

이소티오시아네이트 (V)는 시판될 수 있거나, 유기 합성 분야에 널리 공지된 방법, 예컨대 티오포스겐 처리를 통해 상응하는 아민으로부터 제조할 수 있다. 이소티오시아네이트 (V)는 또한 은 (I) 티오시아네이트를 사용하여 상응하는 할라이드로부터 문헌 [Zhong et al. (Tetrahedron Letters, 47(13), 2161-2164 (2006))]에 기재된 바와 유사한 방식으로 제조할 수 있다.

에스테르 중간체 (IV)는 반응식 5에 나타낸 바와 같이 아민 (VII) 및 2-할로게노-티아졸 화합물 (VI)을 사용하여 팔라듐-촉매 반응을 통해 제조할 수 있다.

<반응식 5>

상기 식에서, R¹, R² 및 Q는 화학식 I에서 정의된 바와 같고, X는 Cl, Br 및 I로부터 선택되는 할로겐이다.

이러한 부크발트/하트비그 유형 반응은 당업자에게 널리 공지되어 있고, 불활성 용매, 예컨대 톨루엔, THF 또는 디옥산 중에서 수행하며, 팔라듐 촉매, 예컨대 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐 (0), 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐 (0), 팔라듐 (II) 아세테이트, 및 염기, 예컨대 소듐, 포타슘 또는 세슘 카르보네이트, 및 리간드, 예컨대 4,5-비스 (디페닐포스피노)-9,9-디메틸크산텐 (크산트포스)을 포함한다. 동일한 유형의 팔라듐-커플링 반응을, 상응하는 할로게노-방향족/헤테로방향족 화합물 및 상응하는 2-아미노티아졸 유사물을 사용하여 수행함으로써 동일한 목적하는 아미노티아졸 중간체 (IV)를 수득할 수 있다.

화학식 VI으로 나타내어지는 화합물은 하기 반응식 6으로 제조할 수 있다.

<반응식 6>

상기 식에서, Q는 화학식 I에서 정의된 바와 같고, X는 Cl, Br 및 I로부터 선택되는 할로겐이다.

따라서, 화학식 VI으로 나타내어지는 화합물은 5-아미노티아졸 중간체 (VIII) 및 산 클로라이드 (III-a)로부터의 아미드의 형성을 통해 합성할 수 있다. 동일한 유형의 아미드-커플링 반응은 일반적 아미드 커플링 조건, 예컨대 EDC, HOBT 및 염기, 예컨대 디이소프로필에틸아민 또는 트리에틸아민 하에서 카르복실산 (III-b)을 사용하여 수행할 수 있다.

화학식 VIII로 나타내어지는 화합물은 하기 반응식 7을 통해 5-아미노티아졸-4-카르복실산 에틸 에스테르로부터 제조할 수 있다.

<반응식 7>

상기 식에서, X는 Cl, Br 및 I로부터 선택되는 할로겐이다.

5-아미노티아졸-4-카르복실산 에틸 에스테르는 문헌 [Golankiewicz et al. (Tetrahedron, 41 (24), 5989-5994 (1985))]에 기재된 절차에 따라 제조한다. 따라서, 시판되는 에틸 시아노 (히드록시이미노)아세테이트는 중탄산나트륨 포화 수용액 중 소듐 디티오네이트로 처리하여 에틸 2-아미노-2-시아노아세테이트를 제공하고, 그 후 아세트산 포름산 무수물을 사용하여 상응하는 포름아미드로 전환시킨다. 후속하여, 수득된 에틸 2-시아노-2-포름아미도아세테이트를 라웨슨 시약으로 처리한 후, 할로겐화 시약, 예컨대 NCS, NBS로 처리하여 목적하는 생성물을 수득한다.

본 발명은 하기 실시예에서 추가로 정의된다. 이러한 실시예는 오로지 예시로서 주어지는 것으로 이해되어야 한다. 상기 논의 및 본 실시예로부터, 당업자는 본 발명의 본질적 특징을 확인할 수 있고, 이의 주제 및 범주로부터 벗어나지 않는 한, 본 발명을 다양한 용도 및 조건에 적합시키기 위해 본 발명에 다양한 변화 및 개질을 가할 수 있다. 그 결과, 본 발명은 아래 기재되는 예시적 실시예에 제한되지 않으며, 본원에 첨부되는 특허청구범위에 의해 정의된다.

화학식 I로 나타내어지는 화합물의 구체적 예는 아래 표 1에 주어진다.

본 발명에 따라, 비시클릭 티아졸 화합물 (I) 또는 그의 제약상 허용되는 염은 TNIK 억제 효과 (시험예 1) 및 현저한 항증식성 활성 (시험예 2)을 보인다.

따라서, 비시클릭 티아졸 화합물은 경구 또는 비경구 투여, 예컨대 정맥내 점적 주사를 위한 통상적 제약 제제의 형태로 제약 조성물 (예를 들어, 종양 억제제)로서 사용될 수 있다.

경구 투여를 위한 제제에는 고체 제제, 예컨대 정제, 과립, 분말, 캡슐 및 액체 제제, 예컨대 시럽이 포함된다. 이러한 제제는 통상적 방법으로 제조할 수 있다. 고체 제제는 통상적 제약 담체, 예컨대 락토스, 전분, 예컨대 옥수수 전분, 결정질 셀룰로스, 예컨대 미세결정질 셀룰로스, 히드록시프로필 셀룰로스, 칼슘 카르복시메틸셀룰로스, 활석, 스테아르산마그네슘 등을 사용하여 제조할 수 있다. 캡슐은 이렇게 제조된 과립 또는 분말을 캡슐화하여 제조할 수 있다. 시럽은 수크로스, 카르복시메틸셀룰로스 등을 함유하는 수용액 중에 비시클릭 티아졸 화합물을 용해 또는 현탁시켜 제조할 수 있다.

비경구 투여를 위한 제제에는, 주사, 예컨대 정맥내 점적 주사가 포함된다. 주사 제제는 또한 통상적 방법으로 제조될 수 있고, 임의로 등장화제 (예, 만니톨, 염화나트륨, 글루코스, 소르비톨, 글리세롤, 크실리톨, 프룩토스, 말토스, 만노스), 안정화제 (예, 아황산나트륨, 알부민), 방부제 (예, 벤질 알콜, 메틸 p-히드록시벤조에이트) 중에 혼입될 수 있다.

비시클릭 티아졸 화합물은 종양, 특히 고형 종양, 예컨대 결장직장암, 췌장암, 비소세포 폐암, 전립선암 또는 유방암의 치료에 효과적이다.

비시클릭 티아졸 화합물의 용량은 질환의 중증도, 환자의 연령 및 체중, 투여 형태 등에 따라 달라질 수 있으나, 통상적으로 성인에서 1일에 1mg-1,000mg 범위이며, 이는 경구 또는 비경구 경로로 1회, 또는 2 또는 3회로 나누어 투여할 수 있다.

시험예

시험예 1

재조합 인간 TNIK (N-말단 절편)의 제조:

인간 TNIK의 키나제 도메인 (NM_015028.1)을 함유하는 N-말단 절편 (TNIK_N, 잔기 1-314)을 코딩하는 cDNA를, 인간 조직으로부터 합성된 cDNA 혼합물 (바이오체인(Biochain))로부터 하기 프라이머를 사용하여 PCR로 증폭시켰다.

전진 프라이머, EheI 부위를 포함하는 40개의 뉴클레오티드 (WO 2010/064111(P.29)의 "재조합 인간 TNIK (N-말단 절편)의 제조"에서 서열 1로 기재됨)

역전사 프라이머, NotI 부위를 포함하는 42개의 뉴클레오티드 (WO 2010/064111(P.29)의 "재조합 인간 TNIK (N-말단 절편)의 제조"에서 서열 2로 기재됨).

cDNA는 프로테아제 절단 부위 및 글루타티온 S-트랜스퍼라제 정제 태그 (GST-태그)를 포함하는 바큘로바이러스 전달 벡터 pFastBac_GSTb로 서브클로닝하였다. 플라스미드를 정제하고 pFastBac_GSTb-TNIK_N의 삽입을 DNA 서열분석으로 확인하였다. 그 후, E. coli DH10Bac 적격 세포를, 플라스미드로 형질전환시켜 Bac-to-Bac™ 바큘로바이러스 발현 시스템 (인비트로젠(Invitrogen))에 대한 지침서에 따라 재조합 백미드(bacmid)를 제조하였다. Sf9 세포를 SF-900II 혈청 무함유 배지 (인비트로젠) 중 셀펙틴(Cellfectin) 시약 (인비트로젠)을 사용하여 pFastBac_GSTb-TNIK_N을 함유하는 재조합 백미드로 형질감염시켰다. 바이러스 상청액을 형질감염 72시간 후 배지로부터 수집하였다. T-플라스크 또는 롤러 병 내 27℃에서 72시간 동안, 10% FCS 및 항생제-항진균제 시약 (인비트로젠)으로 보충한 그레이스(Grace) 곤충 배지 (인비트로젠) 내에서 활발하게 성장하는 Sf9 또는 Sf21 세포를 감염시켜 바이러스를 3회 증폭시켰다. 증폭된 TNIK_N 바이러스의 적정농도(titer)는 BacPAK™ 바큘로바이러스 래피드 타이터 키트 (클론테크(Clontech))를 사용하여 2.36 x 10⁸ pfu/ml로 추정되었다.

그레이스 곤충 배지 내 로그-기 Sf21 세포 (2 x 10⁶ 세포/ml)에 3.0의 MOI로 재조합 바큘로바이러스를 감염시키고, 27℃에서 72시간 동안 롤러 병 (병 당 250ml 배지) 내에서 인큐베이션한 후, 세포를 원심분리하여 수집하고, 세포 펠릿을 냉 PBS로 세척하고, 정제시까지 -80℃에서 유지하였다. 하기 정제 절차를 4℃에서 수행하였다. 동결한 세포를 얼음 위에서 해동시키고 초음파처리하여 1mM 페닐메탄술포닐플루오라이드, 2㎍/ml 류펩틴, 2㎍/ml 아프로티닌, 1mM NaF, 100μM 소듐 오르토바나데이트 및 1μM 칸타리딘으로 보충한 용해 완충제 (50mM 트리스-HCl, pH 7.5, 150mM NaCl, 1% 노니데트 P-40, 5mM DTT, 0.5mM EDTA, 0.5mM EGTA) 내에서 용해시켰다. 현탁된 용해물을 9000g에서 20분 동안 원심분리하여 맑게 만들고, 글루타티온 세파로스 비드 (지이 헬스케어(GE Healthcare))를 사용하여 1시간 동안 상청액을 인큐베이션하였다. 비드를 완충제-H (50mM 트리스-HCl, pH 7.5, 1M NaCl, 1mM DTT, 0.5mM EDTA, 0.5mM EGTA 및 0.05% Brij35) 중에 현탁시키고, 이코노-팩 칼럼 (바이오-래드(BIO-RAD)) 내에서 완충제-H에 이어 완충제-L (50mM 트리스-HCl, pH 7.5, 150mM NaCl, 1mM DTT, 0.5mM EDTA, 0.5mM EGTA, 0.05% Brij35)로 세척하였다. 결합된 TNIK_N을 용리 완충제 (50mM 트리스-HCl, pH 8.0, 150mM NaCl, 1mM DTT, 10% 글리세롤, 0.5mM EDTA, 0.5mM EGTA 및 5mM 환원형 글루타티온)로 용리시켰다. 용리된 분획을 수집하고 브래드포드(Bradford) 시약 (바이오-래드)으로 단백질 농도를 측정하였다. TNIK_N 분획을 모으고 저장 완충제 (50mM 트리스-HCl, pH 7.5, 150mM NaCl, 1mM DTT, 10% 글리세롤, 0.05% Brij35)로 평형시킨 10DG 칼럼 (바이오래드)을 사용하여 탈염시켰다. 정제된 TNIK_N을 4-20% 폴리아크릴아미드 겔 및 보이저(Voyager)-DE RP MALDI/TOF (어플라이드 바이오시스템즈(Applied Biosystems)) 상의 매트릭스-지원 레이저 탈착/이온화 반사 비행시간 (MALDI-TOF) 질량 분광측정법을 사용하여 전기영동으로 특징규명하였다. TNIK_N을 분자량 및 MASCOT 펩티드 질량 지문으로 확인하였다.

키나제 검정:

384-웰 플레이트 (그라이너(Greiner))를 사용하여 키나제 검정을 20㎕ 부피로 수행하였다. 반응 혼합물은 화합물 또는 비히클 (1% DMSO), 0.08ng/㎕ TNIK_N, e-아미노카프로산 및 7개의 아미노 산을 포함하는 1μM FITC-표지 기재 펩티드 (WO 2010/064111(P.31)의 "시험예 1의 키나제 검정"에 서열 3으로 기재됨), 20mM 헤페스, pH 7.5, 0.01% 트리톤 X-100, 5mM MgCl₂, 25μM ATP 및 2mM DTT로 이루어진다. 블랭크로는, TNIK_N을 비히클 (1% DMSO)의 반응 혼합물로부터 제외시켰다. 키나제 반응을 1시간 동안 실온에서 수행하고, 60㎕의 종결 완충제 (127mM 헤페스, pH 7.5, 26.7mM EDTA, 0.01% 트리톤 X-100, 1% DMSO 및 0.13% 코팅 시약 3 (캘리퍼 라이프 사이언시스(Caliper Life Sciences)))를 첨가하여 종결하였다. 비포스포릴화 및 포스포릴화 FITC-표지 기재 펩티드의 양을 이동성 변화 마이크로 유체 기술 (캘리퍼 LC3000 시스템, 캘리퍼 라이프 사이언시스)로 측정하였다. TNIK_N의 키나제 활성을 P/(P+S) (P: 포스포릴화 FITC-표지 기재 펩티드의 피크 높이; S: FITC-표지 기재 펩티드의 피크 높이)로 정의하였다. 화합물의 억제율은 아래와 같이 계산하였다; 억제율(%) = (1-(A-C)/(B-C))x100 (A: 화합물 웰의 평균 P/(P+S); B: 비히클 웰의 평균 P/(P+S); C: 블랭크 웰의 평균 P/(P+S)임). 키나제에 대한 화합물의 IC50 값은 로그-농도-억제 곡선의 회귀 분석으로부터 계산하였다.

결과:

예시적 화합물의 시험 결과는 표 2에 기재하였다.

시험예 2

시험관내 세포 증식 검정

인간 결장암 세포주 HCT-116을 10% FCS (인비트로젠) 및 1% 페니실린/스트렙토마이신(시그마)으로 보충된 2mM L-글루타민(인비트로젠)을 함유하는 RPMI 배지를 사용하여 96 웰-플레이트 (써모피셔(ThermoFisher))에 600 세포/웰로 시딩하고, 37℃, 5% CO₂ 및 100% 습도에서 유지시켰다. 다음 날, 오래된 배지를 회수하고 신선한 배지를 첨가하였다. 화합물을 첨가하기 전에 세포의 초기 수를 계수하였다. 그 후, 세포를 화합물로 중복 처리하였다 (10μM부터 하프-로그 단계적 희석법). 8개의 비처리 대조군 웰을 각 플레이트에서 인큐베이션하였다. 처리 72시간 후, 세포를 2% 파라포름알데히드로 고정시키고, 핵을 훽스트(Hoechst) 33258 (인비트로젠)로 염색하였다. 세포의 수를 어레이스캔(ArrayScan)™ VTI (써모피셔 사이언티픽)로 계수하였다. 데이터를 대조군 웰의 백분율로서 평가하였다:

% 억제율 = (1-(처리군-초기)/(대조군-초기))x100.

여기서 처리군은 72시간 동안 화합물 처리한 후의 웰의 평균 세포의 수이고,

대조군은 72시간 동안 화합물 처리하지 않은 웰의 평균 세포의 수이고,

초기는 화합물 처리 전 웰의 평균 세포의 수이다.

IC₅₀ 값을 로그-농도-억제 곡선의 회귀 분석으로 계산하였다.

상기 검정을 고려했을 때, 본 발명의 화학식 I의 화합물은 표 3에 나타낸 바와 같이 현저한 항증식성 활성을 지니는 것으로 나타났다.

실시예

하기 실시예는 오로지 예시적인 것이며, 본 발명의 범주를 제한하고자 하는 것이 아니다.

하기 기재내용에서 사용되는 약어 및 기호는 아래와 같은 의미를 지닌다.

CDCl₃: 클로로포름-d

D₂O: 산화중수소

DCM: 디클로로메탄

DMA: 디메틸아세트아미드

DMAP: 4-디메틸 아미노피리딘

DMF: 디메틸 포름아미드

DMSO: 디메틸 술폭시드

EtOH: 에탄올

EtOAc: 에틸 아세테이트

HCl: 염산

K₂CO₃: 탄산칼륨

MeOH: 메탄올

MgSO₄: 황산마그네슘

NaHCO₃: 중탄산나트륨

Na₂SO₄: 황산나트륨

NH₄Cl: 염화암모늄

NH₃: 암모니아

NMP: N-메틸피롤리돈

POCl₃: 옥시염화인

Pd₂(dba)₃: 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0)

THF: 테트라히드로푸란

TFA: 트리플루오로아세트산

크산트포스: 4,5-비스(디페닐포스피노)-9,9-디메틸크산텐

EDC: 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필) 카르보디이미드 히드로클로라이드

HOBT: 히드록시벤조트리아졸

min.: 분

h 또는 hr: 시간

RT 또는 rt: 실온

sat.: 포화

aq.: 수성

TLC: 박층 크로마토그래피

HPLC: 고성능 액체 크로마토그래피

Prep HPLC: 정제용 HPLC

LCMS: 고성능 액체 크로마토그래피/질량 분광측정법

MS: 질량 분광측정법

NMR: 핵 자기 공명

실시예 1

5-(4- 아세트아미도벤즈아미도 )-2-(나프탈렌-1- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

(a) 5-아미노-2-(나프탈렌-1- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

EtOAc (8mL) 중 2-아미노-2-시아노아세트아미드 (0.25g, 2.53mmol)의 현탁액에 1-이소티오시아네이토나프탈렌 (0.467g, 2.53mmol)을 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 환류시켰다. 감압하에서 용매를 증발시키고, 생성된 조 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하고 DCM 중 2% MeOH로 용리시켜 0.35g (48% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(b) 5-(4- 아세트아미도벤즈아미도 )-2-(나프탈렌-1- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

건조 THF (8mL) 중 4-아세트아미도벤조산 (0.151g, 0.845mmol) 및 촉매량의 DMF의 혼합물에 옥살릴 클로라이드 (0.12mL, 1.40mmol)를 0℃에서 적가하고, 혼합물을 2hr 동안 rt에서 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류 옥살릴 클로라이드를 질소 분위기 하에서 톨루엔을 사용하여 공비 증류로 제거하였다. 생성된 산 클로라이드를 그 후 피리딘 (5mL) 중에 용해시키고, 0℃로 냉각시켰다. 이 용액에, 피리딘 (5mL) 중 5-아미노-2-(나프탈렌-1-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (0.2g, 0.70mmol)의 용액을 0℃에서 첨가하고, 혼합물을 12hr 동안 rt에서 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 1M HCl에 현탁시키고, 생성된 고체를 수집하고 건조시켰다. 조 고체를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하고 DCM 중 3% MeOH로 용리시켜 91mg (29% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 2

5-(4- 아세트아미도벤즈아미도 )-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

(a) 2- 이소티오시아네이토나프탈렌

물 (10mL) 중 나프탈렌-2-아민 (0.50g, 3.49mmol)의 혼합물에 CSCl₂ (0.3mL, 4.19mmol)를 0℃에서 첨가하고, 혼합물을 40min 동안 rt에서 교반하였다. 그 후 반응 혼합물을 물로 희석하고 에테르 (2x50mL)로 추출하였다. 조합된 에테르 층을 Na₂SO₄상에서 건조시키고, 감압하에서 농축시켜 0.62g (96% 수율)의 표제 화합물을 수득하고 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.

(b) 5-아미노-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

EtOAc (15mL) 중 2-아미노-2-시아노아세트아미드 (0.486g, 2.70mmol)의 현탁액에 2-이소티오시아네이토나프탈렌 (0.5g, 2.70mmol)을 첨가하고, 혼합물을 30min 동안 환류시켰다. 감압하에서 용매를 증발시키고, 생성된 조 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하고 DCM 중 2% MeOH로 용리시켜 0.6g (78% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(c) 5-(4- 아세트아미도벤즈아미도 )-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

건조 THF (15mL) 중 4-아세트아미도벤조산 (0.204g, 1.14mmol) 및 촉매량의 DMF의 혼합물에 옥살릴 클로라이드 (0.2mL, 2.30mmol)를 0℃에서 적가하고, 혼합물을 2hr 동안 rt에서 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류 옥살릴 클로라이드를 질소 분위기 하에서 톨루엔을 사용하여 공비 증류로 4회 제거하였다. 생성된 산 클로라이드를 그 후 피리딘 (6mL) 중에 용해시키고 0℃로 냉각시켰다. 이 용액에, 피리딘 (6mL) 중 5-아미노-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (0.27g, 0.95mmol)의 용액을 0℃에서 첨가하고, 혼합물을 12hr 동안 rt에서 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 1M HCl에 현탁시키고, 생성된 고체를 수집하고 건조시켰다. 조 고체를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하고 DCM 중 3% MeOH로 용리시켜 16mg (3.7% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 3

2-(이소퀴놀린-3- 일아미노 )-5-(4- 메톡시벤즈아미도 )티아졸-4- 카르복스아미드

(a) 3- 이소티오시아네이토이소퀴놀린

물 (5mL) 중 이소퀴놀린-3-아민 (0.2g, 1.38mmol)의 혼합물에 CSCl₂ (0.1mL, 1.52mmol)를 천천히 5min 걸쳐 0℃에서 첨가하고, 혼합물을 40min 동안 rt에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 에테르 (2x50mL)로 추출하였다. 조합된 에테르 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고 감압하에서 농축시켜 0.158g (62% 수율)의 표제 화합물을 수득하고 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.

(b) 5-아미노-2-(이소퀴놀린-3- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

EtOAc (15mL) 중 2-아미노-2-시아노아세트아미드 (0.167g, 1.69mmol)의 현탁액에 이소퀴놀린-3-일이소시아네이트 (0.315g, 1.69mmol)를 첨가하고, 혼합물을 2hr 동안 환류시켰다. 감압하에서 용매를 증발시키고, 생성된 조 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하고 DCM 중 2% MeOH로 용리시켜 0.1g (21% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(c) 2-(이소퀴놀린-3- 일아미노 )-5-(4- 메톡시벤즈아미도 )티아졸-4- 카르복스아미드

피리딘 (2mL) 중 p-아니소일 클로라이드 (0.4mL, 3.0mmol)의 혼합물에 피리딘 (3mL) 중 5-아미노-2-(이소퀴놀린-3-일아미노)-티아졸-4-카르복스아미드 (0.20g, 0.70mmol)의 용액을 적가하고, 혼합물을 밤새 rt에서 혼합하였다. 용매를 증발시켰다. 잔류물을 MeOH로 연화처리하고, 생성된 고체를 수집하여 42mg (28% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 9

5-(3-아미노-4- 메틸벤즈아미도 )-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

(a) 5-(4- 메틸 -3- 니트로벤즈아미도 )-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

피리딘 (5mL) 중 5-아미노-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (0.2g, 0.70mmol)의 혼합물에 피리딘 (3mL) 중 4-메틸-3-니트로벤조일 클로라이드의 용액을 0℃ 질소 분위기 하에서 첨가하였다. 혼합물을 rt로 가온시키고, 16hr동안 rt에서 교반하였다. 용매를 증발시키고, 조 잔류물을 EtOAc (20mL)에 현탁시켰다. 생성된 고체를 여과하여 수집하고 MeOH (2x5mL)로 세척하여 0.21g (66% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(b) 5-(3-아미노-4- 메틸벤즈아미도 )-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

MeOH-THF (10mL, 1:1) 중 5-(4-메틸-3-니트로벤즈아미도)-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (0.07g, 0.15mmol)의 혼합물에 10% Pd/C (0.014g)를 N₂-분위기 하에서 첨가하였다. 혼합물을 16hr 동안 수소 분위기 하에서 교반하였다. 불용성 물질을 여과해내고, 여과물을 감압하에서 농축시켜 0.032g (49% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 10

5-[4-(2- 히드록시에틸아미노 ) 벤즈아미도 ]-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4-카르복스아미드

NMP (1mL) 중 5-(4-플루오로벤즈아미도)-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (0.10g, 0.25mmol) 및 2-아미노에탄올 (0.15g, 2.46mmol)의 용액을 마이크로파 합성기를 사용하여 1hr 동안 처리하였다 (CEM 코퍼레이션, 180℃). 반응 혼합물을 물 (3mL)로 희석하고, 생성된 고체를 여과하여 수집하였다. 고체를 물로 세척하고 건조시켜 0.035g (31% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 17

5-{4-[(4- 메틸피페라진 -1-일) 메틸 ] 벤즈아미도 }-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

DMA (30mL) 중 5-아미노-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (0.50g, 1.76mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.3mL, 1.94mmol)의 혼합물에 4-클로로메틸벤조일 클로라이드 (0.37g, 1.94mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 3hr 동안 rt에서 교반하였다. 그 후, 1-메틸피페라진 (0.1mL, 0.95mmol)을 혼합물 (5mL DMA 중 0.083g)에 첨가하고, 혼합물을 16hr동안 rt에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (150mL)로 희석하고, 물로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 감압하에서 용매를 증발시키고, 조 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하고 DCM 중 5% MeOH로 용리시켜 0.010g (11% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 19

2-(나프탈렌-2- 일아미노 )-5-[4-(피페라진-1- 일메틸 ) 벤즈아미도 ]티아졸-4- 카르복스아미드

(a) tert -부틸 4-(4-{[4- 카르바모일 -2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-5-일] 카르바모일 }벤질)피페라진-1- 카르복실레이트

DMA (30mL) 중 5-아미노-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (0.5g, 1.76mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.3mL, 1.94mmol)의 혼합물에 4-클로로메틸벤조일 클로라이드 (0.37g, 1.94mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 3hr 동안 rt에서 교반하였다. 그 후, 1-Boc-피페라진 (0.18g, 0.95mmol)을 혼합물 (5mL DMA 중 0.083g)에 첨가하고, 혼합물을 16hr 동안 rt에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (150mL)로 희석하고, 물로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 감압하에서 용매를 증발시키고, 조 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하고 DCM 중 5% MeOH로 용리시켜 0.010g (11% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(b) 2-(나프탈렌-2- 일아미노 )-5-[4-(피페라진-1- 일메틸 ) 벤즈아미도 ]티아졸-4-카 르복스아미 드

4N HCl-디옥산 (5mL) 중 tert-부틸 4-(4-{[4-카르바모일-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-5-일]카르바모일}벤질)피페라진-1-카르복실레이트 (0.025g, 0.04mmol)의 용액을 2hr 동안 rt에서 N₂-분위기 하에서 교반하였다. 용매를 진공 하에서 증발시키고, 잔류물을 에테르로 세척하고, 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하고 헥산 중 50% EtOAc로 용리시켜 0.013g (68% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 21

5-[4-(2- 히드록시아세트아미도 ) 벤즈아미도 ]-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

(a) 5-[4-(2- 아세톡시아세트아미도 ) 벤즈아미도 ]-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

THF (20mL) 중 5-(4-아미노벤즈아미도)-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (0.15g, 0.37mmol) 및 Et₃N (0.3mL, 2.33mmol)의 혼합물에 아세톡시아세틸 클로라이드 (0.12mL, 1.11mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 밤새 rt에서 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하고 헥산 중 50% EtOAc로 용리시켜 0.15g (80% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(b) 5-[4-(2- 히드록시아세트아미도 ) 벤즈아미도 ]-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

MeOH (10mL) 중 5-[4-(2-아세톡시아세트아미도)벤즈아미도]-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (0.10g, 0.20mmol)의 혼합물에 K₂CO₃ (0.14g, 0.99mmol) 및 1방울의 물을 rt에서 첨가하였다. 혼합물을 16hr 동안 rt에서 교반하였다. 불용성 물질을 여과해내고, 여과물을 진공 하에서 농축시켰다. 생성된 고체를 수집하고 Et₂O로 세척하여 0.008g (5% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 22

1-{4-[4- 카르바모일 -2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-5- 일카르바모일 ]벤질} 피리디늄 클로라이드

피리딘 (5mL) 중 5-아미노-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (0.18g, 0.62mmol) 및 촉매량의 DMAP의 용액에 4-클로로메틸벤조일 클로라이드 (0.13g, 0.68mmol)를 0℃ N₂-분위기 하에서 첨가하였다. 혼합물을 16hr 동안 실온 질소 분위기 하에서 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 물로 연화처리하였다. 생성된 고체를 여과하여 수집하고 MeOH로 세척하여 0.030g (10% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 24

5-[4-(4- 메틸피페라진 -1-일) 벤즈아미도 ]-2-(퀴놀린-6- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

(a) 6- 이소티오시아네이토퀴놀린

1,1'-티오카르보닐디이미다졸 (740mg, 4.16mmol)을 DCM (15mL) 중 퀴놀린-6-아민 (0.50g, 3.47mmol)의 용액에 0℃에서 조금씩 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1.5hr 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에서 농축시키고, 잔류물을 칼럼 크로마토그래피로 정제하고, DCM으로 용리시켜 0.60g (93% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(b) 5-아미노-2-(퀴놀린-6- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

EtOAc (20mL) 중 6-이소티오시아네이토퀴놀린 (0.50g, 2.7mmol) 및 2-아미노-시아노아세트아미드 (0.26g, 2.68mmol)의 혼합물을 90min 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 진공 하에서 농축시키고, 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하고 DCM 중 2% MeOH로 용리시켜 0.50g (65% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(c) 5-(4- 플루오로벤즈아미도 )-2-(퀴놀린-6- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

피리딘 (5mL) 중 4-플루오로벤조일 클로라이드 (0.16g, 1.2mmol)의 용액에 피리딘 (5mL) 중 5-아미노-2-(퀴놀린-6-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (0.30g, 1.05mmol) 및 촉매량의 DMAP의 용액을 0℃에서 적가하고, 혼합물을 16hr 동안 rt에서 교반하였다. 반응 혼합물을 냉수로 켄칭하였다. 생성된 고체를 여과하여 수집하고 물, MeOH 및 에테르로 연속적으로 세척하여 0.18g (42% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(d) 5-[4-(4- 메틸피페라진 -1-일) 벤즈아미도 ]-2-(퀴놀린-6- 일아미노 )티아졸-4-카 르복스아미 드

NMP (3mL) 중 5-(4-플루오로벤즈아미도)-2-(퀴놀린-6-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (90mg, 0.22mmol) 및 1-메틸-피페라진 (110mg, 1.10mmol)의 혼합물을 150℃에서 1.5hr 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉수 (5mL)로 희석하고, 생성된 고체를 여과하여 수집하고 물, 에테르로 연속적으로 세척하고 건조시켜 0.049g (45% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 28

2-[메틸(퀴놀린-6-일)아미노]-5-[4-(4- 메틸피페라진 -1-일) 벤즈아미도]티아졸 -4-카 르복스아미 드

(a) 에틸 5-아미노-2- 브로모티아졸 -4- 카르복실레이트

N-브로모숙신이미드 (0.54g, 3.03mmol)를 아세토니트릴 (10mL) 중 5-아미노티아졸-4-카르복실산 에틸 에스테르 (0.44g, 2.53mmol) (문헌 [Golankiewicz et al. (Tetrahedron, 41 (24), 5989-5994 (1985)]에 기재된 절차에 따라 제조함)의 용액에 첨가하고, 혼합물을 30min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (50mL)로 희석하고 5% K₂CO₃ 수용액 (25mL)에 이어 염수 (25mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하고 헥산 중 15% EtOAc로 용리시켜 0.37g (58% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(b) 에틸 2- 브로모 -5-(4- 플루오로벤즈아미도 )-티아졸-4- 카르복실레이트

피리딘 (5mL) 중 에틸 5-아미노-2-브로모티아졸-4-카르복실레이트 (0.50g, 1.99mmol) 및 촉매량의 DMAP의 혼합물에 피리딘 (5mL) 중 4-플루오로벤조일 클로라이드 (0.377g, 2.39mmol)의 용액을 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 rt로 가온시키고, 16hr 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉수로 켄칭하고, 생성된 고체를 수집하였다. 고체를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하고 헥산 중 20% EtOAc로 용리시켜 0.70g (93% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(c) 에틸 5-(4- 플루오로벤즈아미도 )-2-[메틸(퀴놀린-6-일)아미노]티아졸-4-카르복실레이트

톨루엔 (10mL) 중 에틸 2-브로모-5-(4-플루오로벤즈아미도)-티아졸-4-카르복실레이트 (0.2g, 0.50mmol)의 용액에 크산트포스 (0.061g, 0.10mmol) 및 Pd₂(dba)₃ (0.048g, 0.040mmol)를 아르곤 기체 하에서 첨가하였다. 상기 현탁액에 세슘 카르보네이트 (0.344g, 0.90mmol) 및 N-메틸퀴놀린-6-아민 (0.084g, 0.53mmol)을 첨가하고, 혼합물을 110℃에서 16h 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 베드를 통해 여과하고, 셀라이트 패드를 에틸 아세테이트 (3x5mL)로 세척하였다. 여과물을 농축시키고, 조 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하고 헥산 중 50% EtOAc로 용리시켜 0.14g (58% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(d) 5-(4- 플루오로벤즈아미도 )-2-[메틸(퀴놀린-6-일)아미노]티아졸-4- 카르복스아미드

THF (5mL) 중 에틸 5-(4-플루오로벤즈아미도)-2-[메틸(퀴놀린-6-일)-아미노] 티아졸-4-카르복실레이트 (0.14g, 0.31mmol)의 용액에 7N NH₃-MeOH (5mL)를 첨가하고, 혼합물을 80℃에서 16hr 동안 밀봉된 튜브 내에서 가열하였다. 용매를 진공 하에서 증발시키고, 생성된 고체를 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하고 EtOAc로 용리시켜 110mg (84% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(e) 2-[메틸(퀴놀린-6-일)아미노]-5-[4-(4- 메틸피페라진 -1-일] 벤즈아미도)티아졸 -4- 카르복스아미드

NMP (3mL) 중 5-(4-플루오로벤즈아미도)-2-[메틸(퀴놀린-6-일)아미노]티아졸-4-카르복스아미드 (100mg, 0.24mmol) 및 1-메틸-피페라진 (110mg, 1.10mmol)의 혼합물을 150℃에서 1.5hr 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉수 (5mL)로 희석하고, 생성된 고체를 여과하여 수집하고 물 및 에테르로 연속적으로 세척하여 0.065g (54% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 32

5-[4-(4- 메틸피페라진 -1-일) 벤즈아미도 ]-2-(퀴놀린-4- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

(a) 4- 이소티오시아네이토퀴놀린

무수 톨루엔 (15mL) 중 4-클로로퀴놀린 (300mg, 1.84mmol) 및 은 (I) 티오시아네이트 (607mg, 3.68mmol)의 혼합물을 110℃에서 12hr 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 클로로포름으로 3회 세척하였다. 여과물을 진공 하에서 농축시켜 0.31g (90% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(b) 5-아미노-2-(퀴놀린-4- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

EtOAc (20mL) 중 4-이소티오시아네이토퀴놀린 (0.3g, 1.6mmol) 및 2-아미노-시아노아세트아미드 (0.26g, 2.68mmol)의 혼합물을 90min 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 진공 하에서 농축시키고, 생성된 고체를 수집하고 EtOAc로 세척하여 0.33g (불순물 함유)의 표제 화합물을 수득하고 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.

(c) 5-(4- 플루오로벤즈아미도 )-2-(퀴놀린-4- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

피리딘 (5mL) 중 4-플루오로벤조일클로라이드 (0.16g, 1mmol) 및 촉매량의 DMAP의 혼합물에 피리딘 (5mL) 중 5-아미노-2-(퀴놀린-4-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (0.25g, 0.87mmol)의 용액을 적가하고, 혼합물을 16hr 동안 rt에서 교반하였다. 반응 혼합물을 냉수로 켄칭하였다. 생성된 고체를 여과하여 수집하고 물, 에테르 및 MeOH로 연속적으로 세척하여 0.12g (33% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(d) 5-[4-(4- 메틸피페라진 -1-일) 벤즈아미도 ]-2-(퀴놀린-4- 일아미노 )티아졸-4-카 르복스아미 드

NMP (1.5mL) 중 5-(4-플루오로벤즈아미도)-2-(퀴놀린-4-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (110mg, 0.27mmol) 및 1-메틸-피페라진 (1.5mL)의 혼합물을 150℃에서 4hr 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉수 (1mL)로 희석하였다. 생성된 고체를 여과하여 수집하고 물 및 에테르로 연속적으로 세척하고 건조시켜 0.090g (69% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 38

N- 메틸 -2-(나프탈렌-2- 일아미노 )-5-(티오펜-3- 카르복스아미도 )티아졸-4- 카르복스아미드

(a) 에틸 5-아미노-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4- 카르복실레이트

EtOH (16mL) 중 2-나프탈레닐 이소티오시아네이트 (0.5g, 2.7mmol) 및 에틸 2-아미노-2-시아노아세테이트 (0.38g, 2.97mmol)의 혼합물을 80℃에서 3h 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 rt로 냉각시키고, 용매를 진공 하에서 농축시켰다. 생성된 고체를 수집하고 n-헥산-EtOAc (1:1)로 세척하여 565mg (67% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(b) 에틸 2-(나프탈렌-2- 일아미노 )-5-(티오펜-3- 카르복스아미도 )티아졸-4- 카르복실레이트

피리딘 (3mL) 중 에틸 5-아미노-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-4-카르복실레이트 (100mg, 0.32mmol)의 용액에 3-티오펜 카르보닐 클로라이드 (61mg, 0.42mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 rt로 가온시키고 밤새 교반하였다. 반응을 냉수로 켄칭하고, 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 물로 세척하고, Na₂SO₄상에서 건조시켰다.용매를 증발시키고, 생성된 고체를 수집하고 EtOAc로 세척하여 55mg (40% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(c) N- 메틸 -2-(나프탈렌-2- 일아미노 )-5-(티오펜-3- 카르복스아미도 )티아졸-4-카르복스아미드

THF (5mL) 중 에틸 2-(나프탈렌-2-일아미노)-5-(티오펜-3-카르복스아미도)티아졸-4-카르복실레이트 (50mg, 0.118mmol)의 용액에 물 (0.5mL) 중 40% 메틸아민을 rt에서 첨가하고, 혼합물을 밤새 rt에서 교반하였다. 반응을 완결시키기 위해, 추가의 물 (0.5mL) 중 40% 메틸아민을 혼합물에 첨가하고, rt에서 교반을 계속하였다. 용매를 제거하고, 잔류물을 물로 연화처리하였다. 생성된 고체를 여과하여 수집하고, 고체를 물 및 EtOAc로 연속적으로 세척하여 28mg (58% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 44

6-{[4- 카르바모일 -5-(티오펜-3- 카르복스아미도 )티아졸-2-일]아미노}-1- 메틸퀴놀린 -1-윰 아이오다이드

DMF (1mL) 중 2-(퀴놀린-6-일아미노)-5-(티오펜-3-카르복스아미도)티아졸-4-카르복스아미드 (50mg, 0.126mmol)의 용액에 K₂CO₃ (50mg, 0.152mmol) 및 MeI (27mg, 0.190mmol)를 rt에서 첨가하였다. 혼합물을 밤새 rt에서 교반하였다. 냉수를 첨가하여 반응을 켄칭하고, 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하였다. 생성된 침전물을 여과하여 수집하고 EtOAc 및 물로 연속적으로 세척하여 10mg (15% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 68

2-[(5- 메톡시나프탈렌 -2-일)아미노]-5-(티오펜-3- 카르복스아미도 )티아졸-4-카르복스아미드

(a) 에틸 2- 브로모 -5-(티오펜-3- 카르복스아미드 )티아졸-4- 카르복실레이트

피리딘 (16mL) 중 피리딘 중 에틸 5-아미노-2-브로모티아졸-4-카르복실레이트 (0.86g, 3.42mmol)의 용액에 3-티오펜 카르보닐 클로라이드 (0.65g, 4.45mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 rt로 가온시키고, 밤새 교반하였다. 반응을 완결시키기 위해, 3-티오펜 카르보닐 클로라이드 (100mg, 0.68mmol)를 혼합물에 첨가하고, 6h 동안 교반을 계속하였다. 냉수를 첨가하여 반응을 켄칭하고, 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하였다. 생성된 침전물을 수집하고 물 및 EtOAc로 연속적으로 세척하여 0.55g (45% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(b) 에틸 2-[(5- 메톡시나프탈렌 -2-일)아미노]-5-(티오펜-3- 카르복스아미도)티아졸 -4- 카르복실레이트

톨루엔 (10mL) 중 에틸 2-브로모-5-(티오펜-3-카르복스아미드)티아졸-4-카르복실레이트 (0.2g, 0.55mmol) 및 5-메톡시나프탈렌-2-일아민 (95mg, 0.55mmol)의 혼합물에 Pd₂(dba)₃ (50mg, 0.055mmol), 크산트포스 (64mg, 0.110mmol) 및 Cs₂CO₃ (357mg, 1.10mmol)을 첨가하고, 혼합물을 16h 동안 110℃ 아르곤 분위기 하에서 환류시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트 베드를 통해 여과하였다. 여과물을 진공 하에서 농축시켰다. 생성된 고체를 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하고 헥산 중 50% EtOAc로 용리시켜 110mg (44% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(c) 2-[(5- 메톡시나프탈렌 -2-일)아미노]-5-(티오펜-3- 카르복스아미도 )티아졸 -4-카 르복스아미 드

THF (5mL) 중 에틸 2-[(5-메톡시나프탈렌-2-일)아미노]-5-(티오펜-3-카르복스아미도)-티아졸-4-카르복실레이트 (0.105g, 0.23mmol)의 용액에 7N NH₃-MeOH (5mL)를 첨가하고, 혼합물을 80℃에서 16hr 동안 밀봉된 튜브 내에서 가열하였다. 용매를 진공 하에서 증발시키고, 생성된 고체를 여과하여 수집하고 MeOH로 세척하여 90mg (92% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 81

5-(2- 시클로펜틸아세트아미도 )-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

THF (2mL) 중 2-시클로펜틸아세틸 클로라이드 (0.35mL, 2.64mmol)의 용액을 THF (10mL) 중 5-아미노-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (0.15g, 0.53mmol) 및 피리딘 (2mL)의 혼합물에 0℃에서 적가하고, 혼합물을 16hr 동안 rt에서 교반하였다. 반응 혼합물을 냉수로 켄칭하였다. 생성된 고체를 여과하여 수집하고 에테르 및 EtOAc로 연속적으로 세척하여 0.12g (58% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 92

5-(6- 모르폴리노헥산아미도 )-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

(a) 5-(6- 브로모헥산아미도 )-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

THF (4mL) 중 6-브로모헥사노일 클로라이드 (0.82mL, 5.28mmol)의 용액을 THF (20mL) 중 5-아미노-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (0.30g, 1.06mmol) 및 피리딘 (4mL)의 혼합물에 0℃에서 적가하고, 혼합물을 16hr 동안 rt에서 교반하였다. 반응 혼합물을 냉수로 켄칭하였다. 생성된 고체를 여과하여 수집하고 에테르 및 EtOAc로 세척하여 0.45g (92% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(b) 5-(6- 모르폴리노헥산아미도 )-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

DMA (0.5 ml) 중 5-(6-브로모헥산아미도)-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (150mg, 0.32mmol) 및 모르폴린 (0.06mL, 0.69mmol)의 혼합물을 120℃에서 1.5hr 동안 밀봉된 튜브 내에서 가열하였다. 반응 혼합물을 그 후 냉수로 희석하였다. 생성된 고체를 여과하여 수집하고 에테르 및 MeOH로 연속적으로 세척하여 135mg (90% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 103

5-(4- 아미노부탄아미도 )-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

EtOH (5mL) 중 2-(나프탈렌-2-일아미노)-5-(4-프탈이미도부탄아미도)티아졸 -4-카르복스아미드 (180mg, 0.36mmol) 및 33% 메틸아민의 혼합물을 70℃에서 4hr 동안 가열하였다. 용매를 제거하고, 물을 잔류 오일에 첨가하였다. 생성된 고체를 여과하여 수집하고 에테르, DCM 및 MeOH로 연속적으로 세척하여 38mg (29% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 106

N-(2- 히드록시에틸 )-5-{4-[(2- 히드록시에틸 )아미노] 벤즈아미도 }-2-(나프탈렌-2-일 아미 노)티아졸-4- 카르복스아미드

(a) 에틸 5-(4- 플루오로벤즈아미도 )-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4- 카르복실레이트

피리딘 (3mL) 중 에틸 5-아미노-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-4-카르복실레이트 (170mg, 0.54mmol)의 용액에 4-플루오로벤조일 클로라이드 (0.09mL, 0.81mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 rt로 가온시키고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 세척하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc로 연화처리하고, 생성된 고체를 여과하여 수집함으로써 140mg (59% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

(b) N-(2- 히드록시에틸 )-5-{4-[(2- 히드록시에틸 )아미노] 벤즈아미도 }-2-(나프탈렌-2-일-아미노)티아졸-4- 카르복스아미드

NMP (0.5mL) 중 에틸 5-(4-플루오로벤즈아미도)-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-4-카르복실레이트 (25mg, 0.06mmol) 및 2-아미노에탄올 (0.024mL, 0.40mmol)의 용액을 마이크로파 합성기 (바이오타지(Biotage), 150℃)를 사용하여 70min 동안 처리하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하였다. 유기 층을 H₂O로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고 진공 하에서 농축시켰다. 생성된 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하고 DCM 중 2.5% MeOH로 용리시켜 7mg (25% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 110

5-(4- 히드록시벤즈아미도 )-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

MeOH (10mL) 중 4-{[4-카르바모일-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-5-일]카르바모일} 페닐 아세테이트 (100mg, 0.22mmol)의 혼합물에 K₂CO₃ (93mg, 0.67mmol)을 rt에서 첨가하고, 혼합물을 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고 잔류물을 물로 희석하고 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고진공 하에서 농축시켰다. 생성된 고체를 여과하여 수집하고 MeOH로 세척하여 60mg (68% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 111

5-[4-(2- 히드록시에톡시 ) 벤즈아미도 ]-2-(나프탈렌-2- 일아미노 )티아졸-4- 카르복스아미드

DMF (10mL) 중 5-(4-히드록시벤즈아미도)-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (200mg, 0.5mmol) 및 2-브로모에탄올 (123mg, 1.0mmol)의 혼합물에 K₂CO₃ (136mg, 1.0mmol)을 첨가하고, 혼합물을 80℃에서 16hr 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피로 정제하고, DCM 중 3.5% MeOH로 용리시켜 40mg (18% 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

하기 표 4 내의 화합물은 본 발명에서 제공된 화학식 I의 추가적인 대표적 예이고, 이는 당업자에게 널리 공직된 적절한 시약, 출발 물질 및 방법을 사용하여 지시된 실시예에 따라 또는 그와 유사한 방법으로 제조하였다.

하기 표 5 내의 화합물은 본 발명에서 제공된 화학식 I의 추가적인 대표적 예이고, 이는 당업자에게 널리 공직된 적절한 시약, 출발 물질 및 방법을 사용하여 실시예 1-111에 기재된 방법에 따라 또는 그와 유사한 방법으로 합성하였다.

참조 실시예 1

정제의 제조:

100mg의 5-(4-아세트아미도벤즈아미도)-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (실시예 2)를 함유하는 정제를 아래 절차에 따라 수득하였다.

절차:

실시예 2의 화합물, 옥수수 전분 및 미세결정질 셀룰로스를 혼합하고 혼합물을 50중량부의 물 중에 용해시킨 히드록시프로필 셀룰로스에 첨가한 후, 충분히 혼련시켰다. 혼련된 혼합물을 체에 통과시켜 과립화하고, 스테아르산마그네슘과 건조 혼합한 후, 각 250mg의 정제로 압축시켰다.

참조 실시예 2

과립의 제조:

5-(4-아세트아미도벤즈아미도)-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (실시예 2)를 함유하는 과립을 아래 절차에 따라 수득하였다.

절차:

실시예 2의 화합물, 락토스 및 옥수수 전분을 혼합하고 혼합물을 120중량부의 물 중에 용해시킨 히드록시프로필 셀룰로스에 첨가한 후, 충분히 혼련시켰다. 혼련된 혼합물을 20메쉬 체에 통과시켜 과립화하고, 건조시킨 후 크기-조정하여 500mg의 과립 당 200mg의 실시예 2의 화합물을 함유하는 과립을 수득하였다.

참조 실시예 3

캡슐의 제조:

100mg의 5-(4-아세트아미도벤즈아미도)-2-(나프탈렌-2-일아미노)티아졸-4-카르복스아미드 (실시예 2)를 각각 함유하는 캡슐을 아래 절차를 통해 수득하였다.

절차:

실시예 2의 화합물, 락토스, 옥수수 전분 및 스테아르산마그네슘을 잘 혼합하고 각 200mg의 분말 혼합물을 캡슐화하여 캡슐을 수득하였다.

Claims

하기 화학식 I에 의해 나타내어지는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
<화학식 I>

(상기 식에서,
R¹은
또는
이고,
여기서 각각의 A¹, A², A³, A⁴, A⁵, A⁶, A⁷은 독립적으로 C-Z 또는 N이고,
R²는 수소 원자, 치환 또는 비치환된 알킬 기이고,
R³은 수소 원자, 치환 또는 비치환된 알킬 기, 히드록실 기, 치환 또는 비치환된 알콕시 기이고,
Q는
,
또는
이고,
여기서 각각의 Y¹, Y², Y³ 및 Y⁴는 독립적으로 수소 원자 또는 저급 알킬 기로 임의로 치환된 질소 원자, 황 원자, 산소 원자 또는 탄소 원자를 나타내고,
Z, R⁴ 및 R⁵는 독립적으로 수소 원자, 할로겐 원자, 치환 또는 비치환된 알킬 기, 치환 또는 비치환된 알케닐 기, 치환 또는 비치환된 알키닐 기, 히드록실 기, 치환 또는 비치환된 알콕시 기, 치환 또는 비치환된 아미노 기, 카르복실 기, 에스테르 기, 포르밀 기, 치환된 카르보닐 기, 치환된 카르바모일 기, 치환 또는 비치환된 우레아 기, 치환 또는 비치환된 방향족 기, 치환 또는 비치환된 헤테로시클릭 기, 치환 또는 비치환된 헤테로방향족 기, 치환 또는 비치환된 아실아미노 기, 치환 또는 비치환된 아릴카르보닐아미노 기, 티올 기, 치환 또는 비치환된 티오알킬 기, 술폰산 기, 치환된 술폰 기, 치환 또는 비치환된 술폰아미드 기, 시아노 기, 니트로 기를 나타내거나, 또는 인접 R⁴ 및 R⁵는 조합되어, 각각 지환족 또는 헤테로시클릭 비시클릭 융합 고리를 형성하는 5- 내지 7-원 고리를 형성할 수 있으며, 여기서 5- 내지 7-원 고리는 임의로 치환기를 가질 수 있고,
R⁶은 치환 또는 비치환된 알킬 기, 치환 또는 비치환된 알케닐 기, 치환 또는 비치환된 알키닐 기, 치환 또는 비치환된 알콕시 기, 치환 또는 비치환된 아미노 기, 치환 또는 비치환된 헤테로시클릭 기임)
제1항에 있어서, Q가
인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항에 있어서, Q가
인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항에 있어서, Q가
인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.