KR102037885B1 - 광범위한, 미확인 또는 혼합된 임상적 적용에서 치료용 조성물들 및 방법들 - Google Patents

광범위한, 미확인 또는 혼합된 임상적 적용에서 치료용 조성물들 및 방법들 Download PDF

Info

Publication number
KR102037885B1
KR102037885B1 KR1020187037153A KR20187037153A KR102037885B1 KR 102037885 B1 KR102037885 B1 KR 102037885B1 KR 1020187037153 A KR1020187037153 A KR 1020187037153A KR 20187037153 A KR20187037153 A KR 20187037153A KR 102037885 B1 KR102037885 B1 KR 102037885B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
composition
diarrhea
colostrum
antibodies
coli
Prior art date
Application number
KR1020187037153A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20190003798A (ko
Inventor
티모씨 더블유 스탈츨
Original Assignee
팬더릭스 인코포레이티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 팬더릭스 인코포레이티드 filed Critical 팬더릭스 인코포레이티드
Publication of KR20190003798A publication Critical patent/KR20190003798A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102037885B1 publication Critical patent/KR102037885B1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
    • C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/20—Milk; Whey; Colostrum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/10—Laxatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/12—Antidiarrhoeals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/02—Antidotes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/12—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria
    • C07K16/1203—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria
    • C07K16/121—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria from Helicobacter (Campylobacter) (G)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/12—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria
    • C07K16/1203—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria
    • C07K16/1228—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria from Enterobacteriaceae (F), e.g. Citrobacter, Serratia, Proteus, Providencia, Morganella, Yersinia
    • C07K16/1232—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria from Enterobacteriaceae (F), e.g. Citrobacter, Serratia, Proteus, Providencia, Morganella, Yersinia from Escherichia (G)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/12—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria
    • C07K16/1267—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-positive bacteria
    • C07K16/1282—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-positive bacteria from Clostridium (G)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
    • C07K2317/11—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production isolated from eggs
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

본 공개는 수동 면역을 위한 개선된 조성물들 및 방법들을 제시한다. 구체예들에서, 운반체 매트릭스 안에 특이적 다클론성 항체들의 공조적 조합을 포함하는 조성물이 제시된다. 본 공개는 광범위한, 미확인, 또는 혼합된 임상적 적용에서 설사 및 장 감염들의 치료를 위한 효과적이고, 경제적인 조성물들 및 방법들을 제시한다.

Description

광범위한, 미확인 또는 혼합된 임상적 적용에서 치료용 조성물들 및 방법들{COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATMENT IN BROAD-SPECTRUM, UNDIFFERENTIATED OR MIXED CLINICAL APPLICATIONS}
관련 출원들에 대한 상호 참조
본 출원은 미국 시민 Timothy W. Starzl이 출원인으로, 그리고 미국을 제외한 모든 국가에서는 미국 법인 PanTheryx, Inc.의 이름으로, 2011년 11월 21일자로 제출된 국제 특허 출원이며, 2010년 11월 23일자 제출된 미국 가특허출원 번호 61/416,667를 우선권으로 주장하고, 이의 전문은 여기에 참고자료로 편입된다.
발명의 분야
본 공개는 수동 면역(passive immunization)을 위한 조성물들 및 방법들을 제시한다. 구체예들에서, 특이적 다클론성 항체들과 운반체 매트릭스의 공조적 조합을 포함하는 조성물들이 제시된다. 본 공개는 광범위한, 미확인, 또는 혼합된 임상적 적용에서 병원성 감염들의 치료를 위한 효과적이고, 경제적인 조성물들 및 방법들을 제시한다. 한 구체예에서, 설사 및 장(enteric) 감염들의 치료용 조성물들 및 방법들이 제시된다.
천연 및 이들의 합성 유사체들인 항체들, 면역글로블린들, 그리고 기타 생물학적 면역 인자들 (여기에서는 항체들로 통칭함)은 모두 인간 및 동물들에서 치료제들로 알려져 있다. 항체들은 이 항체의 항원 결합 부위와 소위 항원 결정부위 또는 에피토프로 불리는 항원의 일부분 사이에 결합(비공유적 힘을 통하여)에 의해 작용한다. 항체들은 고도로 특이적일 수 있다. 예를 든다면, 단일클론 항체들 분야는 더 큰 특이적 및 정확한 결합 특징들을 생산하는 여세하에 대개 개발되어왔었다. 그러나, 이러한 높은 특이성은 과도하게 제한되는 결합 속성으로 이어질 수 있고, 이때 기능적으로 동일한 물질들 또는 항원들은 면역물질 또는 면역치료제와 동일하게 반응하지 않는다. 다른 한편, 결합 특이성을 수득하는데 오류 또는 실패로 보통 간주되는 교차 반응성은 유사하지만 상이한 항원에 대항하여 생성된 항체 사이에 반응이다. 조절된 교차-반응성은 항체의 결합 범위를 확장시키는데 구성적으로 이용될 수 있다.
초유(Colostrum)는 포유동물들에서 이의 성분들을 신생아의 위장으로 그리고 위장을 통하여 매우 농축된 소량의 형태로 전달하도록 특이적으로 자연적으로 진화되어 왔다. 초유는 항체들 가령, IgA, IgG, 및 IgM을 함유하는 것으로 알려져 있다. 초유의 다른 성분들은 락토페린, 라이소자임, 락토퍼옥시다제, 보체, 그리고 프롤린-풍부한 폴리펩티드들(PRP)을 함유한다. 초유에는 인터루킨들, 종양 괴사 인자, 케모킨들, 및 기타 물질들을 포함하는, 다수의 사이토킨들(면역계 기능을 조절하는 작은 메신져 펩티드들) 또한 발견된다. 초유는 또한 다수의 성장 인자들, 가령, 인슐린-유사 성장 인자들 I 및 II, 형질변환 성장 인자들 알파, 베타 1 및 베타 2, 섬유아세포 성장 인자들, 상피 성장 인자, 과립구-대식세포 자극 성장 인자, 혈소판-유도된 성장 인자, 맥관 내피 성장 인자, 그리고 콜로니-자극 인자-I을 함유한다.
초유내 항체들 및 공인자들은 모유 수유를 통하여 수용체에게 수동 면역을 제공할 수 있다. 보통, 항체들 및 공인자들은 모체로부터 신생아로 전달되어, 병원균에 대한 1차 보호를 제공한다. 성장 인자들은 또한 장의 발달과 복구를 자극한다.
수동 면역을 이용하여 해결할 수 있는 한 가지 증세는 설사다. 설사는 병원균들의 섭취에 의해 주로 일어난다. 세계 보건 기구(World Health Organization (WHO)에 따르면, 전 세계적으로 설사의 88%는 안전하지 않은 물, 부적절한 공중위생 또는 불충분한 위생 상태로 인한 것이다. 이들 경우는 매년 약 150만의 사망을 초래하고, 이들 대부분은 어린이들이다. (Pruss-Urstun et al., Safer water, better health: costs, benefits and sustainability of interventions to protect and promote world health. World Health Organization, Geneva, 2008. ISBN 978 92 4 1596435).
특히 세계적인 관심사는 개발도상국에서 감염성 설사의 경우이며, 이는 엄청나게 진행 중인 이환율 및 사망률의 원인, 특히 소아집단에서 원인이다. 예를 든다면, 인도는 2009년 United Nations Human Development 보고서에 따르면 세계에서 최고의 영아 사망률을 가진 국가중 하나다. 예를 든다면, 세계적 비영리단체인, Save the Children은 인도에서 15초마다 한 명의 아이가 사망하고, 이들 죽음의 90%는 예방가능한 질환들, 가령, 설사가 원인이라고 보고한다. 설사를 예방하기 위하여 WHO는 로타바이러스(Rotavirus) 및 홍역 백신, 비누로 손 씻기, 개선된 음용수 공급 및 지역사회에 걸친 위생을 권고하지만, 그러나, 이들 대책이 이 질환을 치료하는데는 효과적이지 못하다.
소아과적 설사에 대한 세계의 많은 지역에서 표준 치료 프로토콜은 항생제들의 투여와 경구 수분 보충 요법을 포함한다. 많은 이유로 인하여 항생제들이 처방 약물이다. 항생제들은 바이러스 감염 치료에 효과적이지 않다. 예를 든다면, 로타바이러스는 전 세계적으로 5세 미만의 어린이들에서 설사로 인한 모든 병원 출입의 약 40%의 원인이 되는 것으로 추정된다(Weekly Epidemiological Record, vol. 83, no. 47, 21 November 2008). 항생제들의 부적절한 사용은 박테리아의 저항성 균주를 조장시킬 수 있다. 역으로, 저항성 균주 박테리아가 감염의 원인일 수 있다. 최상의 환경에서 조차도, 적절한 항생제의 이용으로 설사 증상의 심각성을 감소시키는데 몇 일이 소요될 수 있다.
항생제들의 또다른 단점은 GI 관에서 발견되는 병원성 세균 및 유익한 세균 모두의 파괴를 유도할 수 있고, 이는 내독성 리포폴리사카라이드의 방출을 추가적으로 초래할 수 있다.(Holzheimer, The significance of endotoxin release in experimental and clinical sepsis in surgical patients--evidence for antibiotic-induced endotoxin release? Infection. 1998 Mar-Apr;26(2):77-84). 이들 내독소는 발열을 포함하는 전신 부작용, 백혈 세포수의 변화, 산재성 맥관내 응고, 저혈압, 쇼크 및 사망, 흡수불량의 주체를 보유하고; 실제로, 상당히 소량의 내독소 약량의 직접적인 주사는 대부분의 포유동물들의 사망을 초래한다. Todar K. Bacterial Endotoxin. Textbook of Bacteriology. 2008.
textbookofbacteriology.net.
WHO에 따라면, 경구 수분 보충 요법 및 모유 수유를 포함하는 지속적인 섭취와 함께 아연은 어린이 설사 치료에 권장된다. 아연 시럽 또는 아연-강화된 경구 수분 공급 용액 (ORS, 40 mg/L)은 일일 약 15 내지 30 mg의 약량으로 일반적으로 이용된다. 아연은 저렴하지만, 적당한 효과를 가진다. 아연 시럽은 급성 설사 기간 동안 단지 약 25%의 감소 결과를 가지며, 그리고 치료 실패 또는 사망의 경우 40% 감소 결과를 가진다. (Bhutta et al. Therapeutic effects of oral zinc in acute and persistent diarrhea in children in developing countries: pooled analysis of randomized controlled trials.The American Journal of Clinical Nutrition. 2000; 72(6):1516-22). 한 연구에서 급성 설사를 하는 1,219명의 어린이에서 아연-강화된 (40 mg/L) ORS의 효과 및 안전성을 평가하였다. 아연-강화된 ORS 집단에서 임상적 결과는 표준 ORS 만을 제공받은 대조군 집단의 것과 비교하였을 때 적절하게 개선되었다. 이 연구에서, 아연-ORS 집단에서 총 대변의 수는 대조군의 총 수와 비교하여 더 적었다. 설사 기간 동안에 실질적인 효과 또는 장기적 설사 위험에 대한 실질적인 효과는 기록되지 않았다. (Bahl R, Bhandari N, Saksena M, et al. Efficacy of zinc-fortified oral rehydration solution in 6- to 35-month-old children with acute diarrhea. J Pediatr 2002;141:677-82).
바이러스 감염, 가령, 로타바이러스 감염을 치료하는데 항생제들이 효과가 없다는 것은 공지된 사실이다. 다른 중재법들도 제한적인 효과를 가진다. 추가적으로 설사 원인을 구별하기 위한 적절한 진단 도구가 항상 바로 이용가능하거나 입수가능하지 않다.
의심할여지 없이, 미확인 설사의 치료를 위한 신속하고, 효과적이고, 그리고 경제적인 대안이 바람직하다. 광범위한, 미확인, 또는 혼합된 임상적 적용에서 설사 및 장 감염들의 치료를 위한 효과적이고, 경제적인 조성물들 및 방법들이 여전히 필요하다.
본 공개의 요약
본 공개는 수동 면역의 조성물들 및 방법들을 제시하는데, 이때 병원성 감염 또는 바람직하지 못한 균주의 치료 또는 예방을 포함한, 미생물 관리를 위하여 특이적 결합 분자, 가령, 특이적 면역글로블린은 운반체 매트릭스와 복합되어 경구 또는 점막 투여용 조성물을 제공한다. 구체예들에서, 이 조성물들은 신생아가 아닌 대상에게 투여된다.
한 구체예에서, 본 공개는 미생물의 관리를 위하여 신생아가 아닌 인간에게 투여하기 위한 조성물을 제시하는데, 이 조성물은 동물의 적응성 면역계로부터 유도된 최소한 한 가지 특이적 결합 분자, 또는 이의 단편을 포함하고, 이때 상기 특이적 결합 분자는 면역글로블린, 항체, 펩티드, 가변 림프세포 수용체, 이적(transfer) 인자, 또는 이의 혼합물로부터 선택되며; 운반체 매트릭스는 인간이 아닌 포유동물의 본질적인 면역계의 두 개 이상의 성분들을 포함하고, 이때 상기 매트릭스는 초유, 젖, 혈청, 혈장, 타액, 림프액, 점막, 또는 눈물의 성분으로부터 선택되거나, 또는 유도될 수 있고; 이때 매트릭스 및 특이적 결합 분자는 상이한 종으로부터 유도된다.
바람직한 구체예에서, 이 운반체 매트릭스는 소의 초유를 포함한다. 또다른 구체예에서, 이 매트릭스는 라이소자임, 포스포리파제, 디펜신(defensins), 옵소닌, 보체계의 구성성분들, 베타-리신, 단백질-풍부한 펩티드들 (PRP), (PRPs), 락토페린, 트란스페린(transferrin), 사이토킨, 인터루킨들, 케모킨들, 인터페론, TNF-알파, 피브로넥틴, 루코사이트(leukocytes), 백혈구(white blood cells), 식세포, 대식세포, 단핵세포, 호중구, 다형핵 세포들, 수지상 세포들, 비만 세포들, 호산구, 호염기성 세포들, 자연 살생(NK) 세포들, 림포카인 활성화된 살생 (LAK) 세포들, 디펜신, 엘라스타제, 카텝신 G, 미엘로퍼옥시다제, 그리고 NADPH 옥시다제로부터 선택된 본질적인 면역계의 성분들을 포함한다.
다양한 구체예들에서, 이 조성물은 약제적으로 수용가능한 운반체를 함유한다. 다른 구체예들에서, 이 조성물은 식품 등급의 운반체를 함유한다. 구체예들에서, 이 조성물들은 경구 운반, 비강 운반, 안구 운반 또는 이의 조합들을 통하여 투여될 수 있다.
다른 구체예들에서, 이 조성물은 외부적으로 추가된 폴리머, 코폴리머, 리포좀, 하이드로겔 또는 피브린을 함유하지 않는다. 다른 구체예들에서, 이 조성물은 미소구체(microspheres) 또는 미소캡슐(microcapsules)을 함유하지 않는다. 여전히 추가 구체예에서, 이 조성물은 외부적으로 추가된 항원을 함유하지 않는다
추가 구체예에서, 특이적 결합 분자들은 병원균, 병원균 관련된 독소, 병원균 관련된 접착(adhesion) 요소, 바람직하지 못한 균주, 또는 이의 조합에 특이적으로 결합한다. 한 측면에서, 이 병원균은 위장염의 원인이 되는 인간 또는 수의적, 장 또는 위장의 병원균을 포함한다.
다양한 측면들에서, 이 병원균 또는 바람직하지 못한 균주는 다음의 군으로부터 선택된다: 캄필로박터 에주니(Campylobacter jejuni), 살모넬라(Salmonella), 살모넬라 엔테리카 세로바르 티피(Salmonella enterica serovar Typhi ), 쉬겔라 디스엔테리에(Shigella dystenteriae), 플레시오모나스 쉬겔로이데스(Plesiomonas shigelloides), 대장균(Escherichia coli) [(EPEC) 장병원성 대장균(E. coli ), (ETEC) 장독소생성성 대장균(E. coli ), (EaggEC) 장집합성 대장균(E. coli ), (EIEC) 장침입성 대장균(E. coli ), 그리고 (EHEC) 출혈성 대장균(E. coli )을 포함], 클로스트리윰 디피실(Clostridium dificile), 에르시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica), 비브리오 콜레라(Vibrio cholerae) O1, 비브리오(Vibrio) O139, 비(non)-O1 비브리오(Vibrios), 비브리오 파라헤모리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus), 에어로모나스 하이드로필라(Aeromonas hydrophila), 클로스트리디움 페르프린겐스(Clostridium perfringens), 클로스트리윰 디피실(Clostridium dificile), 장간의(enterohepatic) 헬리코박터(헬리코박터 피로리(Helicobacter pylori)를 포함), 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 클렙시엘라(Klebsiella), 로타바이러스, 코로나바이러스, 노로바이러스, 칼시바이러스, 장의 아데노바이러스, 사이토메갈로바이러스, 아스트로바이러스, S. 뉴모니에(S. pneumoniae), H. 인플루엔자(H. influenzae), 나이제리아 고노리에(Neisseria gonorrhoeae), 대상포진(포진 zoster) 바이러스, 푸사리움 종(Fusarium spp)., 그리고 아칸타모에바 종(Acanthamoeba spp).
특정 측면에서, 이 병원균 관련된 독소는 내독소 또는 외독소를 포함한다.
또다른 특정 측면에서, 이 병원균 관련된 접착 요소는 어드헤신(adhesins), 캐드헤린(cadherins), 섬모(cilia), 가장자리잔털(fimbrillae), 바이러스 접착 구조, 또는 이의 조합을 포함한다.
다양한 구체예들에서, 이 조성물은 미확인 설사, 여행자의 설사, 로타바이러스 설사, 독소-매개된 설사, 콜레라, C. 디피실(C. difficile) 감염, 이질, 장티푸스, 소화성 궤양의 치료 또는 예방, 또는 위장의 세균총(flora) 관리에 효과적인 양으로 경구로 투여된다. 또다른 측면에서, 이 조성물의 유효량은 대상에게 수동 면역을 부여한다.
또다른 구체예에서, 본 공개는 본 공개의 조성물을 제조하는 방법을 제시하는데, 이 방법은 (a) 특이적 항원에 결합하는 최소한 한 가지 특이적 결합 분자 또는 이의 단편을 동물로부터 수득하는 단계, 이때 이 특이적 결합 분자는 면역글로블린, 항체, 펩티드, 가변림프세포 수용체, 이적(transfer) 인자, 그리고 이의 혼합물로부터 선택되며; (b) 인간이 아닌 동물로부터 획득한 효소들, 락토페린, 트란스페린, 비-특이적 면역글로블린들, 사이토킨, 백혈구(white blood cells), 보체 성분들, 인터페론, 그리고 피브로넥틴으로 구성된 군으로부터 선택된 최소한 두 가지 성분들을 포함하는, 최소한 한 가지 운반체 매트릭스를 수득하는 단계; (c) 이 운반체 매트릭스와 특이적 결합 분자 또는 이의 단편의 고체 형(solid form)을 준비하는 단계; 그리고 (d) 이 운반체 매트릭스의 고체 형과 특이적 결합 분자 또는 이의 단편의 고체형을 혼합하는 단계로 구성된다.
또다른 구체예에서, 본 발명은 면역 부여 조성물을 제조하는 방법을 제시한다. 이 방법은 (a) 최소한 한 가지 외부적 원천의 특이적으로 표적화된 면역 인자를 수득하고; (b) 최소한 한 가지 외부적 원천의 특이적으로 표적화된 면역 인자의 분말화된(powderized) 형태를 제조하고; (c) 최소한 한 가지 외부적 원천의 운반체 매트릭스를 수득하는데, 이는 외부적 원천의 특이적으로 표적화된 면역 인자를 지탱하고 상호작용시키기 위하여 물질들의 혼합물과 외부적으로 원천의 운반체 매트릭스와 함께 임의선택적으로 혼합되며; (d) 최소한 한 가지 외부적 원천의 운반체 매트릭스의 분말화된 형태를 제조하고; 그리고 (e) 단계 (b)의 분말화된 형태와 단계 (d)의 분말화된 형태를 혼합하고, 이로써 수동 면역 부여 조성물을 수득하는 것을 포함한다. 한 측면에서, 이 수동 면역 부여 조성물은 투약량 조절된 제제(dose controlled formulation)를 함유한다. 다양한 측면들에서, 이 수동 면역 부여 조성물은 약제적으로 수용가능한 운반체를 함유한다. 다양한 측면들에서, 이 수동 면역 부여 조성물은 폴리머, 코폴리머, 리포좀, 하이드로겔, 또는 피브린을 함유하지 않는다. 다양한 측면들에서, 이 수동 면역 부여 조성물은 미소구체 또는 미소캡슐을 함유하지 않는다. 다양한 측면들에서, 이 수동 면역 부여 조성물은 면역원 또는 항원을 함유하지 않는다.
본 발명은 다음의 특징적인 속성들중 최소한 한 가지를 포함한다: (a) 지정된 또는 표적화된 질환용 매트릭스, 특이적 인자들, 그리고 활성화 사건의 맞춤 설계가 가능하며; (b) 성분들의 다양한 혼합물의 투약량 조절된 제제를 가능하게 하여, 효과를 조율 또는 조정할 수 있으며; (c) 자연계에서 획득할 수 있는 정상적인 생리학적 수준을 초과하는 지정된 성분들을 제공하는 투약량 조절된 제제를 가능하게 하며; (d) 고유 면역계 반응을 모방하는 체계 효과를 만들기 위하여 복합적인 다중-성분 다중-경로 상호작용을 이용하고; (e) 강화된 상태로 투여되고, 그리고 표적 병원균들, 독소들, 질병 상태, 또는 증후군의 존재에 의해 후속적으로 활성화되는 사전조정된 또는 강화된 수동 면역 반응의 생성을 가능하게 하고; (f) 이 산물이 이용되는 범위내에서 명시된 표적 질환 상태 또는 증후군의 요구, 또는 실질적인 환경의 요구와 일치되는 특정화된 특이성 또는 광범위한 효과를 가지는 제제들의 생성을 가능하게 하고; 그리고 (g) 예방 뿐만 아니라 치료 중재용으로 표적화될 수 있는 제제들의 생성을 가능하게 한다.
또다른 측면에서, 특이적 결합 분자들, 가령, 다클론성 항체들의 양을 조정함으로써, 투약량 조절된 제제를 만들 수 있다.
바람직한 구체예에서, 이 최소한 한 가지 특이적 결합 분자는 면역주사를 맞은 닭으로부터 유도된 IgY를 포함한다. 다른 특이적 측면들에서, IgY는 최소한 장독소생성성 대장균 종(E. coli ) spp.), 대장균(E. coli ) K99 털 흡착(pili adherence) 인자, 클로스트리디움 페르프린겐스 유독소(Clostridium perfringens toxoid), 살모넬라 티피무리움(Salmonella typhimurium), 로타바이러스, 그리고 코로나바이러스에 특이적인 IgY 모둠(pool)을 포함한다.
또다른 구체예에서, 이 조성물은 점막에 국소적으로 투여된다.
또다른 구체예에서, 이 병원균은 질염을 일으키는 병원균을 포함한다. 다양한 측면들에서, 이 병원균은 다음으로 구성된 군으로부터 선택된다: 가르드네렐라 종(Gardnerella spp .), 나이제리아 고노리에(Neisseria gonorrhoeae), 클라미디아세아 트라초마티스(Chlamydiaceae trachomatis), 미코플라스마 종(Mycoplasma spp.), 캄필로박터 에주니(Campylobacter jejuni), 트리초모나스 바지날리스(Trichomonas vaginalis), 포진 바이러스 유형 1, 포진 바이러스 유형 2, 칸디다 알비칸스(Candida albicans), 칸디다 글라브라타(Candida glabrata), 칸디다 트로피칼리스(Candida tropicalis), 칸디다 파라피실로시스(Candida parapsilosis) 및 칸디다 크루세이(Candida krusei).
또다른 구체예에서, 이 병원균은 집단 A 스트렙토코커스(Streptococcus) 박테리아다.
또다른 구체예에서, 이 병원균은 S. 아우레우스(S. aureus), S. 뉴모니에(S. pneumoniae), H. 인플루엔자(H. influenzae), 나이제리아 고노리에(Neisseria gonorrhoeae), 클라미디아 트라초마티스(Chlamydia trachomatis), 아데노바이러스, 단순 포진, 대상포진 바이러스, 장바이러스, 푸사리움 종(Fusarium spp .), 칸디다 종(Candida spp .), 그리고 아칸타모에바 종(Acanthamoeba spp .)으로 구성된 군으로부터 선택된 결막염 원인 병원균을 포함한다.
또다른 구체예에서, 본 공개의 조성물들은 특별한 규정식 요구를 야기하는 질환 가령, 소아 설사, 크론(Crohn)병, 그리고 궤양성 결장염을 앓고 있는 치료를 요하는 대상에게 투여하기 위한 영양 조성물로 유용하다.
도 1은 실시예 1A의 조성물에 대해 음성 대조군과 비교하였을 때 두 가지 분야의 시험 테스트 집단의 경우 5일간에 걸쳐 매일 평균 배변 빈도를 보여준다. 시험 1(n=29)과 시험 2 (n = 31)에서, 실시예 1A의 조성물은 항생제 및 경구 수분 공급 염(ORS)과 함께 3일동안 일일 1회 투여된다. 음성 대조군(n = 28)에서는 본 공개된 조성물없이 항생제와 ORS만 투여된다.
도 2는 도 1과 동일한 세 집단에 대해 동일한 5일 기간에 걸쳐 1-5 등급(1=정상, 5=액체)의 일일 대변 평균 농도를 보여준다.
도 3은 도 1과 동일한 세 집단에 대해 동일한 5일 기간에 걸쳐 1-5 등급(1=정상, 5=심각하게 아픔)의 의사가 평가한 평균 행복을 보여준다.
도 4는 세 가지 분야 연구(시험) 테스트 집단의 5일 기간에 걸쳐 일일 평균 배변 빈도를 보여준다. 시험 1 및 2, 그리고 음성 대조군은 도 1에서 설명하는 것과 같다. 시험 3 (n =140)에서, 항생제 및 ORS와 함께, 실시예 1B의 조성물을 환자들에게 투여하였다.
도 5는 도 4와 동일한 네 개 집단에 대해 동일한 5일 기간에 걸쳐 1-5 등급(1=정상, 5=액체)의 일일 대변 평균 농도를 보여준다.
도 6은 도 1과 동일한 네 집단에 대해 동일한 5일 기간에 걸쳐 1-5 등급(1=정상, 5=심각하게 아픔)의 의사가 평가한 평균 행복을 보여준다.
도 7은 시험 1 및 2, 음성 대조군에 대해 5일 기간에 걸쳐 일일 평균 배변 빈도를 보여주고, 시험 3은 6개 집단으로 분할한다 (ES204A): 3일간 투여된 4g 초유와 함께 2 g의 분무 건조된 알; (ES204B): 2일간 투여된 4g 초유와 함께 2 g의 분무 건조된 알; (MT204A) 3일간 투여된 4g 초유와 함께 2 g의 열 건조된 알; (MT304A) 3일간 투여된 4g 초유와 함께 3 g의 열 건조된 알; (MS204A) 3일간 투여된 4g 초유와 함께 2 g의 분무 건조된 알; (MS304A) 3일간 투여된 4g 초유와 함께 3 g의 분무 건조된 알.
도 8은 도 7과 동일한 집단들에 대해 동일한 5일 기간에 걸쳐 1-5 등급(1=정상, 5=액체)의 일일 대변 평균 농도를 보여준다.
도 9는 도 7과 동일한 집단들에 대해 동일한 5일 기간에 걸쳐 1-5 등급(1=정상, 5=심각하게 아픔)의 의사가 평가한 평균 행복을 보여준다.
정의
여기에서 사용된 것과 같은 용어들 "방지(prevention)", "방지하다(prevent)", "방지하는(preventing)", "예방(prophylaxis)"은 질환 단계 또는 상태의 이러한 임상적 현시를 방지 또는 감소시키기 위하여, 질환 단계 또는 상태의 임상적 현시의 개시 이전에 시작되는 작용 과정(가령, 본 공개의 화합물 또는 약학 조성물을 투여하는)을 지칭한다. 이러한 방지 및 억제는 절대적으로 유용할 필요는 없다.
여기에서 사용된 것과 같은 용어들 "치료(treatment)", "치료하다(treat)" 그리고 "치료하는(treating)"은 질환 단계 또는 상태의 이러한 임상적 현시를 제거 또는 감소시키기 위하여, 질환 단계 또는 상태의 임상적 현시의 개시 이후에 시작되는 작용 과정(가령, 화합물 또는 약학 조성물을 투여하는)을 지칭한다. 이러한 방지 및 억제는 절대적으로 유용할 필요는 없다.
여기에서 사용된 것과 같이 용어 "치료를 요하는"이란 돌보는 자가 판단할 때 환자가 치료를 요구하거나 또는 치료로부터 이익을 얻게 되는 경우를 말한다. 이러한 판단은 본 공개되는 방법, 화합물 또는 약학 조성물에 의해 치료가능한 상태의 결과로써, 돌보는 자의 경험 범위 내에 있는 다양한 인자들에 근거하여 이루어지지만, 환자가 아프거나, 또는 아플 것이라는 이해를 포함한다.
여기에서 사용된 것과 같이 용어 "방지를 요하는"이란 돌보는 자가 판단할 때 환자가 치료를 요구하거나 또는 치료로부터 이익을 얻게 되는 경우를 말한다. 이러한 판단은 본 공개되는 방법, 화합물 또는 약학 조성물에 의해 치료가능한 상태의 결과로써, 돌보는 자의 경험 범위 내에 있는 다양한 인자들에 근거하여 이루어지지만, 환자가 아플 것이라는, 또는 아프게 될 수 있다는 이해를 포함한다.
여기에서 사용된 것과 같이, 용어들 "개체", "대상", 또는 "환자"는 조류 또는 포유동물들, 가령, 마우스, 노르웨이(Norway) 쥐, 코튼 랫(cotton rats), 게르빌루스 쥐(gerbils), 기니피그(cavies), 헴스터, 기타 설치류들, 토끼, 개, 고양이, 돼지, 소, 양, 염소, 말, 또는 영장류 및 인간을 포함하는 임의의 동물을 지칭한다. 이 용어는 수컷 또는 암컷 또는 이둘 모두를 명시할 수 있거나, 또는 수컷 또는 암컷을 배제할 수 있다. 한 측면에서, 환자는 성인 인간이다. 또다른 측면에서, 환자는 신생아가 아닌 유아(인간)다. 또다른 측면에서, 환자는 아장아장 걷는 아기(인간), 어린이, 또는 청소년이다.
용어 "신생아(neonate)", 또는 갓난(newborn)이란 출생후 첫 28일 이내의 유아를 말한다. 용어 "신생아가 아닌"이란 28일령이 경과된 동물을 말한다.
여기에서 사용된 것과 같이, 용어 "유효량"은 물질 단독으로, 또는 약학 조성물의 일부로써, 질환 단계 또는 조건의 임의의 증상, 측면 또는 특징에 임의의 탐지가능한, 긍정적인 효과를 가질 수 있는 양을 지칭한다. 이러한 효과는 절대적으로 유익할 필요는 없다.
여기에서 사용된 것과 같이, 용어 "함유하는(including)"은 언급된 것들에 추가하여 추가적인 요소들이 고려되는 것과 같이, 범위에서 비-제한적이고; 이 용어는 임의의 경우에 "~을 함유하나, 이에 한정되지 않는"으로 이해할 수 있다.
용어 "면역화하다(immunize)", "적극적으로 면역화하다(actively immunize)", "적극적으로 면역화하는(actively immunizing)", 그리고 "적극적인 면역화(active immunization)"은 항원, 예를 든다면, 가령, 바이러스 또는 박테리아를 포함하나 이에 한정되지 않는 미생물로부터 유도된 항원에 대상을 노출시킴으로써 의도적으로 면역화시키는 것을 의미하고; 이러한 노출은 고유 유기체, 감쇠된(attenuated) 유기체, 유기체의 일부분, 유기체 상에 존재하는 하나 이상의 항원들 또는 전술한 것들의 조합에 대상을 노출시킴으로써 실시할 수 있다.
용어 "수동적으로 면역화하다(passively immunize)", "수동적으로 면역화하는", 그리고 "수동 면역(passive immunization)"은 항원, 예를 든다면, 가령, 바이러스 또는 박테리아를 포함하나 이에 한정되지 않는 미생물로부터 유도된 항원에 대항하는 항체들을 대상 내에서 이 유기체에 대해 면역 반응을 필연적으로 유도하지 않고 대상에게 제공하는 것을 의미한다. 수동 면역은 즉각적인 보호를 제공하지만, 그러나 이 대상은 그 결과로 기억 세포들을 발생시키지 않는다.
여기에서 이용된 것과 같이, 용어 "수동 면역"은 이 대상에게 항체들의 이전에 의해 수득되는 인공적으로 획득한 면역을 지칭한다. 용어들 "알(egg)" 또는 "알 생성물(egg product)" 각각은 조류 원천의 완전한 일반(shell) 알(전통적인, 면역화된 또는 그 밖의 방법으로) 또는 이로부터 유도된 임의의 생성물 또는 분획물을 말한다.
용어들 "면역 알(immune egg)" 또는 "면역 알 생성물(immune egg product)" 각각은 면역화된 단계에서 유지된 알을 낳는 동물로부터 수득한 완전한 알 또는 이로부터 유도된 임의의 생성물 또는 분획물을 말한다.
용어 "항원"은 유기체, 특히 동물에서 면역 반응을 유도할 수 있는 실체 또는 이의 단편을 말한다. 이 용어는 항원성 또는 항원 결정부위를 담당하는 면역원 및 이의 영역들을 포함한다.
용어 "다중클론 항체"는 항원 또는 이의 항원성 기능 유도체로 면역화된 동물의 혈청으로부터 유도된 항체 분자들의 이질적인 집단인 항체들을 말한다. 다클론성 항체들의 생산을 위하여, 다양한 숙주 동물들을 항원 주사에 의해 면역화시킬 수 있다. 다양한 어쥬번트들은 숙주 종에 따라 면역학적 반응을 증가시키는데 이용할 수 있다.
용어 "단일클론 항체"는 당업계에 공지되어 있으며, 오직 하나의 항원만을 인지하고, 실험실에서 단일 클론으로부터 양산된 항체를 말한다. 단일클론 항체들은 정상적으로 수명이 짧은 항체를 생산하는 B 세포를 빠르게 성장하는 세포, 가령, 암 세포(때로는 "불사(immortal)" 세포라고도 부름)에 융합시켜 일반적으로 만들어진다. 생성된 하이브리드 세포, 또는 하이브리도마는 신속하게 증대되어, 다량의 항체를 만드는 클론을 생성한다. "단일클론 항체들"은 특정 항원 또는 에피토프를 지향하는 실질적으로 균질한 집단들이다. 이들은 배양물에서 연속 세포주들에 의해 항체 분자들의 생산을 제공하는 임의의 기술에 의해 수득될 수 있다. 단일클론 항체들은 당업계의 숙련자들에게 공지되어 있는 임의의 방법들에 의해 수득될 수 있다. 예를 든다면, Kohler, et al., Nature 256:495-497, 1975, 및 미국 특허 제4,376,110호 참고.
용어 "결정(crystalline)"은 결정화, 가령, 배취(batch) 결정화에 의해 정제된 항체, 가령, 단일클론 항체를 말한다. 결정구조의 항체들은 소량의 매우 집중된 형태를 만들기 위하여 이용될 수 있다. (Yang et al., 2003, Crystallline antibodies for subcutaneous delivery. PNAS 100(12):6934-6939).
용어 "미확인 설사"는 설사의 원인 진단이 미확정이라는 의미다.
용어 "항체 단편"은 복합체를 형성하기 위하여 특이적 항원에 결합함으로써 항체와 유사하게 작용하는 임의의 합성 또는 유전적으로 조작된 단백질을 포괄한다. 예를 든다면, 항체 단편들은 중쇄 및 경쇄의 가변 영역들로 구성된 단리된 단편들, "Fv" 단편들, 재조합 단일 쇄 폴리펩티드 분자들을 포함하고, 이때 경쇄 및 중쇄 가변 영역들은 펩티드 링커 ("scFv 단백질들")에 의해 연결되며, 그리고 최소 인지 단위는 초가변영역을 흉내내는 아미노산 잔기들로 구성된다. 항체 단편들은 항체의 일부분, 가령, F(ab')2, F(ab)2, Fab', Fab, Fv, sFv 및 이와 유사한 것들을 포함한다. 구조와 관계없이, 항체 단편은 이 고유 항체가 인지하는 동일한 항원에 결합한다.
용어 "이적 인자(transfer factor)"는 아미노산으로 구성된 대략적으로 5000 Daltons의 면역 분자를 말하며, 항원-특이적 세포-매개된 면역, 주로 지연된 과민성과 림포킨 생성을 야기하고, 뿐만 아니라 항원들 자체에 결합한다. (Kirkpatrick 1993, Structural nature and functions of transfer factors. Ann. N.Y. Acad. Sci. 685:362-368.)
용어 "가변 림프세포 수용체들"은 턱이 없는 척추동물들 가령, 칠성장어(lamprey) 및 먹장어에서 발견되는 림프세포-유도된 분자들을 말한다. 이들 동물들은 단지 소수의 유전자로부터 생산되고, 동일한 수준의 특이성을 가지고, 항체들과 유사한 방식으로 병원성 항원들에 결합하는 가변 림프세포 수용체들의 큰 배열을 보유한다. (Alder et al., 2005, Diversity and function of adaptive immune receptors in a jawless vertebrate. Science, 310(5756):1970-1973).
용어 "세포 수용체"는 B-세포 수용체의 리간드 결합 모이어티를 말한다; 하나의 아이소타입(가령, IgD, IgM, IgE)의 막 결합된 면역글로블린 분자. 통합 막 도메인의 존재를 제외하고, 이들은 이들의 분비형과 동일하다.
특이적 표적화된 면역 인자들, 가령, 항체, 항체 단편, 가변림프세포 수용체, 또는 이적 인자로도 또한 알려진, 특이적 결합 분자들의 특징들에서 용어 "특이적 결합"은 상이한 항원들의 균질한 혼합물 내에 존재하는 특정 항원에 선호적으로 결합하는 능력을 말한다. 특정 구체예들에서, 특이적 결합 상호작용은 시료내에 바람직한 항원들과 바람직하지 못한 항원들 (가령, "표적" 항원들과 "비-표적" 항원들)을 구별할 수 있고, 일부 구체예들에서 약 10 내지 100-배 이상(가령, 약 1000- 또는 10,000-배 이상)으로 구별한다. 일부 구체예들에서, 특이적 결합 분자는 비-공유되는 에피토프들과 비교하였을 때, 상이한 종 또는 균주 미생물간에 공유되는 에피토프에 특이적으로 결합할 수 있다. 특정 구체예들에서, 항체와 항원이 항체-항원 복합체로 특이적으로 결합되어 있을 때, 항원 항체 사이의 친화력은 10-6 M 미만, 10-7 M 미만, 10-8 M 미만, 10-9 M 미만, 10-10 M 미만, 10-11 M 미만 또는 10-12 M 미만의 KD(해리 상수)로 특징화된다.
용어 "본질적인 면역계(innate immune system)", 또는 비-특이적 면역계는 다른 유기체들에 의한 감염으로부터 비-특이적 방식으로 숙주를 방어하는 세포, 분자 성분들 및 기전을 말한다. 본질적인 면역계의 세포 및 분자 성분들은 일반적인 방식으로 병원균들을 인지하고, 이들과 반응하지만, 그러나 적응성 면역계와는 다르게 대상에 대하여 오래 지속되거나 또는 보호성 면역을 부여하지는 않는다. 척추동물들은 두 번째 층의 보호, 적응성 면역계를 보유하는데, 이는 본질적인 반응에 의해 활성화된다.
용어 "적응성 면역계(adaptive immune system)"는 예를 든다면, 병원성 성장을 제거하거나, 중화 또는 방지하기 위하여, 항원을 인지하고, 이에 반응하는 매우 특화된, 체계적 세포들 및 공정을 말한다. 이 체계는 체세포 과돌연변이(가속화된 체세포 돌연변이의 과정) 및 V(D)J 재조합(항원 수용체 유전자 분절들의 비가역적 유전적 재조합)으로 인하여 매우 적응성이 있다. 적응성 면역은 획득된 면역이라고도 하며, 그리고 면역학적 기억을 만든다. 적응성 면역 반응은 병원균 및 항원 특이적이며, 노출 및 최대 반응 사이에 지체 시간(lag time)이 있다. 적응성 면역 반응은 클론 인지 원리에 근거하는데, 항원에 첫 노출시, 프라임된(primed) 림프세포들은 면역 효과 물질 세포로 분화되거나 또는 증폭된 그리고 더욱 신속한 반응을 탑재함으로써 동일 항원에 2차 노출에 반응하는 기억 세포들의 확장된 모둠(pool)을 형성한다.
용어 "동물"은 동물계 정의를 지칭한다.
모든 대명사는 이들의 최대 의미를 의도한다. 다른 언급이 없는 한, 여성 대명서는 남성을 포괄하며, 남성 대명사는 여성을 포괄하며, 단수는 복수를 포괄하고, 그리고 복수는 단수를 포괄한다.
여기에서 이용된 수치적인 범위는 모든 수치 및 해당 범위내에서 특이적으로 공개된 것이나 또는 공개되지 않거나, 범위내에 수치들의 하위범위를 포함하는 의도이다. 더욱이, 이들 수치 범위는 임의의 수 또는 그 범위내 수치들의 하위범위에 대한 청구에 대한 지원을 제공하는 것으로 이해되어야 한다. 예를 든다면, 1 내지 10의 공개는 2 내지 8, 3 내지 7, 5 내지 6, 1 내지 9, 3.6 내지 4.6, 3.5 내지9.9, 그리고 기타 등등의 범위를 뒷받침하는 것으로 이해되어야 한다.
여기에서 언급된 모든 특허들, 특허 출원들, 그리고 대등하게-검토된 공개문(가령, "참고자료")은 참고자료에 특이적으로 그리고 개별적으로 표시된 것과 같은 수준으로 명시적으로 참고자료에 편입된다. 본 공개내용과 편입된 참고 자료 사이에 충돌이 있는 경우, 본 공개내용이 통제한다.
본 공개의 방식
*본 공개는 바람직하지 못한 균주 또는 병원성 미생물들의 관리에 유용한 조성물들 및 방법들을 제시한다.
본 발명의 한 구체예는 운반체 매트릭스 안에 내장된 또는 포함된 표적화된 항체-기반 제제를 만드는 방법에 근거하며, 이때 이 항체들은 관련된 표적 항원들의 다중 클러스터에 교차-반응성의 조절된 형태를 이용하고, 그리고 운반체 매트릭스는 항체들의 효과를 강화시키는 지지물(support) 및 공인자들을 함유한다. 이러한 항체/매트릭스 제제들의 유용성은 정확한 또는 특이적 원인 물질은 아니지만 원인 물질의 부류가 알려진 또는 의심되는 상태, 또는 다중(혼합형) 원인 물질들이 활동하는 상황에서 광범위한 치료요법적 중재를 제공하는 것을 포함할 수 있다.
이러한 방식에서 새로운 방법이 개발되었고, 이 방법은 항체들의 특이성 및 교차-반응성 속성들을 모두 이용하는 항체들을 이용하고, 그 다음 다중-성분의 원래 위치의 (in situ) 면역 반응을 생성하기 위하여 운반체 매트릭스내 성분들을 더 이용한다. 이 구체예에서, 항체들은 항원들의 구조적으로 관련된 클러스터를 제시하는 몇 가지 밀접하게 관련된 에피토프들 모두에 결합하도록 기획된다. 이들 항원들은 다른 측면들에서는 상당히 다를 수 있으며, 다양한 원천, 유기체들, 또는 종으로부터 기원될 수 있다.
본 발명의 한 구체예는 운반체 매트릭스 안에서 특이적 결합 분자들 (면역 인자들, 예를 든다면 항체들)의 방법에 관계하는데, 이때 특이적 결합 분자들은 관련된 항원들의 부류에 대해 특이성을 가지며, 그리고 이 부류의 구성요소들의 상이한 경우들에 대해 특이적으로 교차-반응성이 있다. 이 항원의 원천인 유기체 또는 병원균과는 관계없이, 표적 항원들의 관련 클러스터에 구조적 유사성 정도가 존재한다. 구조의 유사성은 "교차-반응성" (의도된 항원 이외의 항원에 대해 반응 분자의 공간입체적 결합)으로 알려진 현상을 초래할 수 있다. 교차-반응성은 대개 의도되지 않는 것이고, 대부분의 경우, 오류 및 비-특이성의 원인으로 간주된다. 그러나, 이 구체예에서, 교차-반응성의 정도 및 수준은 원하는 성질들을 제공하기 위하여 이의 표현을 제한하고 그리고 경로화하는 다양한 수단에 의해 조절된다.
이 치료는 환자들에게 수동 면역을 부여한다. 이 치료의 본질은 관련된 위험 인자들을 이 항체들이 수거되었던 원천으로부터 음식을 섭취하는 것과 필적하도록 만든다(가령, 위험 인자들은 알과 우유 한잔을 먹는 것과 비슷할 것이다). 이는 현재 이용가능한 대체 중재보다 독성이 덜한 효과적인 치료다.
본 발명은 외부 원천의 (치료되는 동물과는 상이한 동물로부터 수득된 또는 면역 인자들에 대응하는) 특이적으로 표적화된 면역 인자들과 함께 외부 원천의(치료되는 동물과는 상이한 동물로부터 수득된 성분들을 함유하는) 운반체 매트릭스의 용도는 이를 필요로 하는 대상에게 운반되고, 그리고 효과적인 다중-매개변수 면역을 도입할 수 있다는 창의적인 발견에 근거한다.
한 측면에서, 본 공개는 다음을 포함하는 조성물을 제시한다: a) 항원에 특이적으로 결합하는, 신생아가 아닌 인간의 최소한 한 가지 특이적 결합 분자, 또는 이 동물로부터 수득한 이의 단편의 효과량, 이때 이 특이적 결합 분자는 면역글로블린, 항체, 펩티드, 가변 림프세포 수용체, 이적 인자, 그리고 이의 혼합물로부터 선택되며; 그리고 b) 인간이 아닌 동물로부터 획득한, 효소들, 락토페린, 트란스페린, 비-특이적 면역글로블린들, 사이토킨, 백혈구(white blood cells), 보체 성분들, 인터페론, 그리고 피브로넥틴으로 구성된 군에서 선택된 최소한 두 가지 성분들을 포함하는 운반체 매트릭스, 이때 최소한 한 가지 특이적 결합 분자와 이 운반체 매트릭스의 최소한 두 가지 성분들은 상이한 동물들로부터 수득된다.
또다른 측면에서, 본 공개는 조성물들을 제조하는 방법을 제시하는데, 이 방법은 다음을 포함한다: (a) 동물로부터 특이적 항원에 결합하는 최소한 한 가지 특이적 결합 분자 또는 이의 단편을 수득하고, 이때 특이적 결합 분자는 면역글로블린, 항체, 펩티드, 가변 림프세포 수용체, 이적 인자, 그리고 이의 혼합물로부터 선택되며; (b) 인간이 아닌 동물로부터 효소들, 락토페린, 트란스페린, 비-특이적 면역글로블린들, 사이토킨, 백혈구(white blood cells), 보체 성분들, 인터페론, 그리고 피브로넥틴으로 구성된 군으로부터 선택된 최소한 두 가지 성분들을 포함하는 최소한 한 가지 운반체 매트릭스를 수득하고; (c) 이 운반체 매트릭스의 고체 형과 특이적 결합 분자 또는 이의 단편의 고체 형을 제조하고; 그리고 (d) 운반체 매트릭스의 고체형과 특이적 결합 분자 또는 이의 단편의 고체형을 혼합한다.
또다른 측면에서, 본 공개의 조성물들은 미생물 감염들의 치료 또는 방지에 유용하다. 구체예들에서, 미생물 감염들은 캄필로박터 에주니(Campylobacter jejuni), 살모넬라(Salmonella), 살모넬라 엔테리카 세로바르 티피(Salmonella enterica serovar Typhi ), 쉬겔라 디스엔테리에(Shigella dystenteriae), 플레시오모나스 쉬겔로이데스(Plesiomonas shigelloides), 대장균(Escherichia coli), 장병원성 대장균(E. coli ), 장독소생성성 대장균(E. coli ), 장집합성 대장균(E. coli ), 장침입성 대장균(E. coli ), 그리고 출혈성 대장균(E. coli ), 클로스트리윰 디피실(Clostridium dificile), 에르시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica), 비브리오 콜레라(Vibrio cholerae) O1, 비브리오(Vibrio) O139, 비(Non)-O1 비브리오(Vibrios), 비브리오 파라헤모리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus), 에어로모나스 하이드로필라(Aeromonas hydrophila), 클로스트리디움 페르프린겐스(Clostridium perfringens), 장간의(enterohepatic) 헬리코박터, 헬리코박터 피로리(Helicobacter pylori), 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 클렙시엘라(Klebsiella), 로타바이러스, 코로나바이러스, 노로바이러스, 칼시바이러스, 장의 아데노바이러스, 사이토메갈로바이러스, 아스트로바이러스가 원인이 되는 것들을 포함한다. 구체예들에서, 이 조성물들은 가령, 미확인 설사, 여행자의 설사, 로타바이러스 설사, 독소-매개된 설사, 콜레라, 클로스트리윰 디피실(Clostridium dificile) 감염, 이질, 장티푸스, 소화성 궤양, 질염의 질환 치료 또는 예방에 유용하거나, 또는 위장의 세균총 관리에 유용하다.
특정 구체예에서, 본 공개된 조성물들 및 방법들은 설사의 치료 또는 방지에 이용된다. 바이러스들, 박테리아, 기생충 및 단세포동물(protozoa)을 포함하는 다중 설사 원인 유기체들이 있다. 인도에서 박테리아성 감염의 주요 원인은 예를 든다면, 대장균 종(Escherichia coli spp.), 장독소생성성 대장균(E. coli ), 장-흡착성 대장균(E. coli ), 아우로모나스 하이드로필라(Aeuomonas spp.), 캄필로박터 에주니(Campylobacter jejuni), 쉬겔라 종(Shigella spp.), 비브리오 종(Vibrio spp.), 비브리오 콜레라(Vibrio cholera) O1, 비브리오 파라헤모리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus), 살모넬라 종(Salmonella spp.), 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 클로스트리윰 디피실(Clostridium dificile), 클로스트리디움 페르프린겐스(Clostridium perfringens), 그리고 에르시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica)를 포함한다. 2차적인 원인은 클로스트리윰 디피실(Clostridium dificile) (독소 A 또는 B)를 포함한다. 바이러스 설사의 주요 원인은 로타바이러스에 의한 감염이지만; 칼시바이러스, 아스트로바이러스, 노르워크(Norwalk) 바이러스, 그리고 아데노바이러스들 또한 설사의 원인으로 알려져 있다. 바이러스 설사의 2차 원인은 장 아데노바이러스, 단순 포진 바이러스 그리고 바이러스성 간염을 포함한다(John B. Sullivan and Gary R. Krieger, Clinical Environmental Health and Toxic Exposures, 2nd Ed., Lippincott Williams ＆ Wilkins, 2001,page 1040).
유행에 있어서 지역적 그리고 계절적 차이가 있다는 것 또한 공지된 사실이다. 예를 든다면, 인도의 Pranam에서 어린이 설사의 평균 15-25%는 로타바이러스가 차지한다고 한 연구는 보고하였다. 장독소생성성 대장균(E. coli)은 전체 설사에서 10~20%의 원인이며, 장병원성 대장균(E. coli)은 약 1 내지 5 %의 원인이다. 어린이 설사의 약 10 내지 15%는 캄필로박터 에주니(Campylobacter jejuni) 감염이 원인이었으며, 어린이 설사의 대략 5 내지 15%는 쉬겔라(Shigella)가 원인이었다. 약 5 내지 10%는 비브리오 콜레라가 원인이었다. 약 1 내지 5%는 살모넬라 (비-장티푸스)가 원인이었다. 크립토스포리디움(Cryptosporidium)이 주로(5-15%) 원생동물 감염의 원인이었다. 약 20 내지 30%에서는 병원성 원인이 확인되지 않았다(Fricker, Children in the Tropics, Putting an end to diarrheal diseases, 1993-No. 204: 1-66)
인도내에서 다른 지역들은 어린이 설사를 상이한 발병 수준을 가지는 상이한 병원균들의 탓으로 돌린다. 예를 든다면, 인도의 Orissa에서 한 연구는 866개의 배양-양성 시료가운데 대장균(E. coli) sp. (75.5%), 병원성 대장균(E. coli) (13.2%), 에어로모나스 종(Aeromonas spp). (2%), 쉬겔라 종(Shigella spp). (4.5%), 비브리오 콜레라(Vibrio cholera) O1 (17.3%), V. 콜레라(Vibrio cholera) O139 (1%) 그리고 살모넬라 종(Salmonella spp.) (0.7%)을 발견하였다. find-health-articles.com/rec_pub_18806340-incidence.
광범위한 병인으로 인하여, 미확인 설사를 치료하는 효과적이고, 광범위하며, 경제적이며 안전한 방법이 바람직하다. 어린이 설사의 대부분은 박테리아 및 바이러스 감염이 원인인 것으로 보이지만, 항생제들 및 항-바이러스제들을 대체할 것들이 바람직하다.
A. 조성물들
본 공개의 한 측면은 치료, 방지 또는 미생물 세균총의 관리에 유용한 조성물에 관계한다. 구체예들에서, 이 조성물들은 구체적으로 위장관에서 병원성 감염들의 치료에 유용하다.
구체예들에서, 본 공개는 다음을 포함하는 조성물을 제공한다:a) 항원에 특이적으로 결합하고, 동물로부터 수득된, 최소한 한 가지의 특이적 결합 분자, 또는 이의 단편의 비-신생아 유효량, 이때 특이적 결합 분자는 면역글로블린, 항체, 펩티드, 가변 림프세포 수용체, 이적 인자, 그리고 이의 혼합물로부터 선택되며; 그리고 b) 인간이 아닌 동물로부터 수득한 효소들, 락토페린, 트란스페린, 비-특이적 면역글로블린들, 사이토킨, 백혈구(white blood cells), 보체 성분들, 인터페론, 그리고 피브로넥틴으로 구성된 군으로부터 선택된 최소한 두 가지 성분들을 포함하는 운반체 매트릭스, 이때 최소한 한 가지 특이적 결합 분자와 운반제 매트릭스의 최소한 두 가지 성분들은 상이한 동물로부터 수득한다.
특이적 결합 분자들
본 공개의 조성물들 및 방법들은 동물로부터 수득하고, 그리고 항원에 특이적으로 결합하는 특이적 결합 분자들 또는 이의 단편들을 제공한다. 특이적 결합 분자는 항체, 항체 단편, 펩티드, 가변 림프세포 수용체, 이적 인자, 그리고 이의 혼합물을 포함한다.
항체들
자연적 그리고 이들의 합성 유사체들인 항체들, 면역글로블린들, 그리고 다른 생물학적 면역 인자들 (집합적으로 항체들이라고 칭함)은 모두 인간 및 동물들에서 공지의 치료제다.
항체들은 항원에 있는 항원-결합 부위와 항원 결정부위 또는 에피토프라고 불리는 항원 부분 사이에 결합(비-공유적 힘)에 의해 작용한다. 항체들은 높은 수준의 특이성 능력을 가진다. 예를 든다면, 단일클론 항체들의 분야는 좀더 특이적이며 정확한 결합 특성을 만드는 자극 하에서 대개 개발되어왔다. 그러나, 이러한 높은 특이성은 상당히 제한된 결합 속성으로 이어질 수 있으며, 이때 기능적으로 동일한 물질 또는 항원들은 면역물질 또는 면역치료제와 동일하게 반응하지 않는다. 다른 한편, 대개 오류 또는 실패로 간주되는 교차-반응성은 유사하지만 상이한 항원에 대항하여 생성된 항원과 항체 사이에 반응이다. 조절된 교차-반응성은 항체의 결합 범위를 확장시키는데 구성적으로 이용될 수 있다.
본 공개의 한 구체예는 운반체 매트릭스 안에 내장된 또는 포함된 표적화된 항체-기반 제제를 만드는 방법에 근거하며, 이때 이 항체들은 관련된 표적 항원들의 다중 클러스터들에 조절된 형태의 교차-반응성을 이용하고, 그리고 운반체 매트릭스는 항체들의 효과를 강화시키는 지지물 및 공인자들을 함유한다. 이러한 항체/매트릭스 제제들의 유용성은 정확한 또는 특이적 원인 물질은 아니지만 원인 물질의 부류가 알려진 또는 의심되는 상태, 또는 다중(혼합형) 원인 물질들이 활동하는 상황에서 광범위한 치료요법적 중재를 제공하는 것을 포함할 수 있다. 이러한 방식에서 새로운 방법이 개발되었고, 이 방법은 항체들의 특이성 및 교차-반응성 속성들을 모두 이용하는 항체들을 이용하고, 그 다음 다중-성분의 원래 위치의 (in situ) 면역 반응을 생성하기 위하여 운반체 매트릭스내 성분들을 더 이용한다. 이 구체예에서, 항체들은 항원들의 구조적으로 관련된 클러스터를 제시하는 몇 가지 밀접하게 관련된 모든 에피토프들에 결합하도록 기획된다. 이들 항원들은 다른 측면들에서는 상당히 다를 수 있으며, 다양한 원천, 유기체들, 또는 종으로부터 기원될 수 있다.
본 공개의 목적을 위하여, 항체들은 임의의 동물로부터 유도된 단일클론성, 다중클론성, 단편들, 키메라, 인간화된 또는 임의의 형태일 수 있고, 그리고 항체들은 임의의 아이소타입일 수 있고: 예를 든다면 IgA, IgD, IgE, IgG 및 IgM (태반 포유동물들), IgY (닭), 또는 기타 다른 것들은 이중특이적, 또는 이중기능적, 또는 다중특이적 또는 다중기능적 항체 또는 이의 단편일 수 있다. 구체예들에서, 이 특이적 결합 분자는 세 가지 주요 범주중 하나로부터 선택될 수 있다: 포유동물의 단일클론 항체들, 포유동물의 다클론성 항체들, 그리고 조류의 다클론성 항체들; 또는 이들로부터 유도된 병원성 성분에 결합하는 능력을 유지하는 임의의 단편들.
본 발명의 한 구체예는 광범위한 치료제 생산에 이를 이용하는 것이다. 이러한 유형의 반응성 제제를 생산하는 한 가지 방법은 적합하게 면역화된 동물로부터 수거한 다클론성 항체들의 생산을 포함하며, 그리고 이때 이러한 항체들은 운반체 매트릭스 안에 내장된다. 다클론성 항체들 (또는 항혈청)은 상이한 B 세포계로부터 유도된 항체들이다. 이들 항체들은 혈청, 젖, 초유, 알, 또는 면역화된 동물의 생물학적 유체들로부터 대량으로 수거된다. 이들은 특이적 항원, 또는 항원들의 집단에 대항하여 분비된, 상이한 범주의 에피토프들을 인지하는 면역글로블린 분자들의 혼합물이다. 교차-반응성으로 인하여 단일 항원에 대한 다중 항체들(상이한 에피토프들에 결합) 또는 다중 항원들에 결합하는 단일 항체를 가지는 것이 가능하다. 이 다클론성 항체들은 동물들, 가령, 표적 성분들로부터 유도된 항원들로 백신접종을 맞은 또는 접종된 소, 양, 말, 염소, 돼지, 토끼, 닭, 오리, 거위 또는 칠면조로부터 수득할 수 있다. 이 항체들은 예를 든다면, 접종된 동물에 의해 생산된 또는 유도된 조직, 혈청, 젖 또는 알로부터 수확할 수 있다. 이는 단일클론 항체들과 대조적으로, 동일하고, 단일특이적이며; 단일 부모 세포의 모든 클론이 되는 한 가지 유형의 면역 세포에 의해 만들어진다.
본 발명에 이용되는 항체들은 혈청, 혈장, 초유, 젖, 알, 또는 기타 적합한 생물학적으로 유도된 유체로부터 수집되거나, 또는 세포 배양 배지, 상청액, 등으로부터 수집될 수 있다. 본 발명에 이용된 항체들은 제제를 만들기 위하여 임의의 적합한 방식에서 처리될 수 있고, 그리고 분리, 혈장반출술, 건조 공정, 동결건조, 저온 살균, 그리고 보존 방법들을 포함하나 이에 한정되지 않는 것을 이용한다. 본 발명에 이용된 항체들은 최종 의도된 용도에 따라 다양한 방식으로 처리, 농출, 분리, 또는 정제될 수 있다.
다양한 구체예들에 적합하도록 항체들의 혼합을 변경함으로써, 본 공개는 기타 위장의 감염들 가령, 콜레라, 클로스트리윰 디피실(Clostridium dificile), 이질, 살모넬라 티피(Salmonella typhi) (장티푸스), 그리고 H. 피로리(H. pylori) (소화성 궤양)를 치료 또는 방지하는데 적합한 조성물들 및 방법들을 제시한다.
한 구체예에서, 동물들에서 가령, 관련된 항원과 임의선택적으로 어쥬번트의 피하(sc) 또는 복막(ip)의 다중 주사를 통하여 동물들에서 항체들이 적절하게 생성된다. 한 측면에서, 면역화된 종에서 면역원인 단백질에 관련 항원(합성 펩티드들이 이용되는 경우 특히)을 접합시키는데 유용할 수 있다. 예를 든다면, 항원은 이중기능 또는 유도화 물질, 가령, 말레이미도벤조일 술포숙시니미드 에스테르(시스테인 잔기를 통한 접합), N-하이드록시숙시니미드(리신 잔기를 통하여), 글루타알데히드, 숙신 무수물, SOCl2, 또는 R N=C=NR, (이때 R 및 R은 상이한 알킬기다)을 이용하여, 키홀 림페트 헤모시아닌 (KLH), 혈청 알부민, 소의 티로글로블린, 또는 콩 트립신 억제제에 접합시킬 수 있다. 동물들은 여기에서 설명하는 것과 같이 항원, 면역원성 접합체, 또는 이의 유도물질에 대해 면역화된다. 다른 구체예들에서, 항체들은 예를 든다면, 파아지 디스플레이 라이브러리에서 수득된 합성 또는 반합성된 것일 수 있거나, 또는 인간화된 또는 키메라 항체들로 만들어질 수 있다.
조류(가령, 알을 낳은 암탉)는 이러한 항체 생산에 전통적으로 이용되는 포유동물들과 비교하였을 때 항체들의 생산자로써 비용측면에서 매우 효과적이다. 조류 항체들은 포유동물의 항체들보다 생화학적 장점들을 가진다. 포유동물들과 새들 사이에 면역학적 차이는 면역학적 분석에서 민감성의 증가와 배경의 감소를 야기하고; 뿐만 아니라 포유동물의 대상들에게 투여하였을 때 높은 특이성과 보체성 면역 효과의 결여를 초래한다. 포유동물의 항체들과 비교하여, 조류 항체들은 1차 또는 전통적인 경로를 통하여 인간 보체계를 활성화시키지 않고, 류마티즘성 인자들, 인간 항-마우스 IgG 항체들, 스타필로코커스 단백질 A 또는 G, 또는 박테리아성 그리고 인간 Fc 수용체들과도 반응하지 않을 것이다. 그러나 조류 항체들은 비-염증성 대체 경로를 활성화시킬 수 있다. 따라서, 조류 항체들은 포유동물의 항체들보다 많은 장점들을 제공한다.
바람직한 구체예에서, 이 특이적 분자들은 한 가지 병원성 성분들 또는 병원성 성분들의 혼합물이 접종된 암탉의 알에서 만들어진 다클론성 항체들이다. 특이적 항원들의 다양한 조제물은 또한 접종에 이용될 수 있다. 접종 후, 암탉은 난황내에 상당한 양의 특이적 IgY 면역글로블린을 함유하고, 뿐만 아니라 알부민 내에 소량의 IgM 및 IgA 면역글로블린들을 함유하는 알을 낳는다. 따라서, 알은 매우 특이적이며, 안정적인 항체들을 대량으로 경제적으로 생산하는 우수한 원료가 된다. 한 구체예에서, 닭을 이용하여 조류 항체를 생산한다; 그러나, 칠면조, 오리, 거위, 타조 등을 대안으로 이용할 수 있다. 한 측면에서, 여기에서 설명된 것과 같이, 당업계에 공지되어 있는 임의의 방법으로 암탉에 접종한다. 예를 든다면, 이 항원을 근육내로 또는 피하로 주사할 수 있다. 조류에서 주사에 바람직한 근육은 가슴 근육이다. 이용할 수 있는 다른 투여 방법들은 피하 주사, 정맥 주사, 복막내 주사, 피내 주사, 직장 좌제, 에어로졸 또는 경구 투여를 포함한다.
면역 주사 및 고정된 시간 간격으로 적절한 투약량의 반복된 부스터 투여에 의해 표적 동물에서 특이적 면역 상태가 바람직하게 유도되고, 그리고 유지된다. 시간 간격은 1-12개월 기간에 걸쳐 바람직하게는 1-8주 간격이다. 투약량은 약 0.01-5 mg의 항원 사이에서 선택된다. 한 측면에서, 투약량은 암탉의 1회 접종시 0.01 mg 내지 1.0 mg의 항원, 바람직하게는 100 mg, 200 mg, 250 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg 또는 750 mg 항원이다. 총 백신접종 횟수는 12개월 기간에 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6회에서 선택할 수 있다. 일반적으로, 첫 접종은 첫날 실시하고, 부스터 백신접종은 10일 및 20일차에 한다. 가령, ELISA를 이용하여 알에서 특이적 항체 농도, 또는 역가를 모니터함으로써 필요할 때 암탉을 재-백신접종시킬 수 있다. 암탉의 경우 일반적인 피하 투약량 용적은 약 0.2 내지 1.0 mL, 0.3 내지 0.7 mL, 또는 0.5 mL에서 선택된다. 그러나, 부스터 투여는 본질적으로 면역 내성을 유도하지 않는다. 이러한 과정들은 당업계에 공지되어 있다.
다른 접종 유지 과정들 또는 복합 과정들을 이용하는 것이 가능한데, 가령, 예를 든다면, 1차 면역화를 위한 근육내 주사와 부스터 주사용으로 정맥 주사를 이용하는 것이 가능하다. 추가 과정들은 마이크로캡슐화된 그리고 액체 면역원의 동시 투여, 또는 1차 면역주사용으로 근육내 주사와, 경구 투여 또는 마이크로캡슐화 수단에 의한 장관외 투여에 의한 부스터 투약을 포함한다. 1차 면역주사 및 부스터 면역주사의 몇 가지 조합들이 당업계 숙련자들에게 공지되어 있다.
약학 운반체들로 또한 알려진 어쥬번트들, 또는 이의 기능적 등가체들이 면역주사 용액/백신 조성물에 포함되어 동물의 특이적 면역 반응을 강화시킬 수 있다. 다수의 어쥬번트들이 설명되고 있으며, 실험실 동물들, 가령, 마우스, 쥐, 토끼 및 닭에서 항체 생산에 이용되었다. 이러한 환경에서, 주요 목적은 강력한 항체 반응을 얻는 것이기 때문에 부작용의 관용은 다소 높다.
본 공개에 관련된 어쥬번트들은 이들의 기원에 따라 구분지을 수 있는데, 미네랄, 박테리아, 식물, 합성 또는 숙주 생성물로 구분될 수 있다. 이 분류에서 제 1 집단은 미네랄 어쥬번트들, 가령, 알루미늄 화합물들이다. 알루미늄 염으로 침전시킨 항원들 또는 작용된 알루미늄 화합물들과 혼합된 또는 이에 흡수된 항원들이 동물들 및 인간에서 면역 반응을 증대시키기 위하여 광범위하게 이용되어 왔다. 한 구체예에서, 면역화 조성물에서 어쥬번트들은 박테리아성 기원이다. 박테리아성 기원의 어쥬번트들은 정제되고 합성될 수 있고(가령 뮤라밀 이펩티드, 지질 A) 그리고 숙주 중개물질들을 클론시켰다(인터루킨 1 및 2). 박테리아성 기원의 활성 성분들의 몇 가지 어쥬번트들의 공지된 화학적 정제는 다음을 포함한다: 보르데텔라 페르투시스(Bordetella pertussis), 미코박테리움 튜베르쿨로시스(Mycobacterium tuberculosis), 리포폴리-사카라이드, Freund의 컴플리트 어쥬번트 (FCA) 및 Freund의 인컴플리트 어쥬번트 (Difco Laboratories, Detroit, Mich.) 및 Merck 어쥬번트 65 (Merck and Company, Inc., Rahway, N.J.). 특정 측면에서, Freund의 컴플리트 어쥬번트 또는 Freund의 인컴플리트 어쥬번트는 본 공개의 면역화 조성물에 이용된다. 추가적으로, 본 발명에 따라 적합한 어쥬번트들은 가령 Titermax Classical 어쥬번트 (SIGMA-ALDRICH), ISCOMS, Quil A, ALUN, 미국 특허 제58767호 및 제5,554,372호 참고, 지질 A 유도물질들, 콜레라독소 유도물질들, HSP 유도물질들, LPS 유도물질들, 합성 펩티드 매트릭스들, GMDP, 및 기타 뿐만 아니라 면역자극물질들과 복합된 것들이다(미국 특허 제5,876,735호). B. 페르투시스(Bordetella pertussis)는 T-림프세포 집단에서 작용을 통하여 세포-매개된 면역을 조절하는 능력으로 인하여 본 발명의 내용에서 어쥬번트로 관심있다. Freund의 컴플리트 어쥬번트는 대부분 실험 연구에서 표준이다. 미네랄 오일은 신속한 분해대사로부터 항원을 보호하기 위하여 백신 조성물에 추가될 수 있다.
본 공개에 따라 면역원적 또는 면역화 조성물에는 많은 다른 유형의 물질들이 이용될 수 있다. 이 물질들은 식물 생성물 가령, 사포닌, 동물 생성물 가령, 치틴 및 다수의 합성 물질들을 포함한다.
근육내 경로를 통하여 면역화된 닭은 면역화후 28일 시점까지 이들의 알에 고특이적 항체 수준을 생산할 수 있고, 200일 이상 특이적 항체들을 지속적으로 생산하여, 단기간, 가령 4-5주 미만에 이용가능한 항체 조제물을 만들 수 있다. 알들은 알 하나당 최대 약 50 내지 약 100 mg 농도의 IgY 항체를 포함한다. 하나의 알로부터 100 mg 이상의 정제된 IgY를 수득할 수 있다. 한 개의 알 난황 안에 항원 특이적 항체의 비율은 최대 약 2% 내지 10%일 수 있다(daSilva et al., IgY: A promising antibody for use in immunodiagnostic and in immunotherapy. Veterinary Immunol. Immunopath., 135(2010):173-180).
알을 많이 낳는 계통의 닭 한 마리는 한달 대략 20개의 알을 낳는다. 알은 전체 알의 약 10.5%인 껍질 때문에 약 33 내지 약 77 g의 무게가 나간다. 난황은 알의 총 무게의 약 31%다. 건조시킬 때, 72개의 알로부터 건조된 완전한 알 분말 약 1 kg가 만들어질 수 있다. 따라서, 이러한 계산에서 하나의 알은 약 13.9 g의 건조된 완전한 알로 돌아올 수 있다. 또다른 측면에서, 하나의 면역 알(immune egg)은 10 g 내지 약 15 g의 건조된 완전한 알로 돌아올 수 있다. 또다른 측면에서, 본 공개의 면역 알들은 하나의 알에서 40 내지 55 mL이며, 하나의 알에 약 1-2 mg/mL의 총 IgY을 가진다. 또다른 측면에서, 본 공개의 면역 알들은 알 하나당 약 0.01 mg/mL 내지 0.05 mg/mL의 특이적 IgY를 함유한다. 따라서, 한 측면에서 공정처리 후, 예를 든다면, 혼합형 항원 조제물로 면역화된 닭으로부터 하나의 건조된 완전한 면역 알은 약 80 내지 110 mg의 총 IgY와 약 6 내지 10 mg의 전체 혼합된 항원-특이적 총 IgY를 함유한다.
면역학 분야에 숙지의 기술을 가진 이들에게 공지된 다수의 방법들을 통하여 알을 생산하는 동물들에서 백신이 면역 반응을 이끌어내는지를 판단할 수 있다. 이들 방법들의 실시예들은 효소-연결된 면역흡착 분석법(ELISA), 자극 항원들에 대한 항체들의 존재에 대한 테스트, 그리고 항원에 반응하는 숙주의 면역 세포들의 능력을 평가하기 위하여 기획된 테스트를 포함한다. 면역 반응을 유도하는데 필수적인 면역원의 최저 투약량은 이용되는 어쥬번트들의 유형 및 면역원의 제제, 뿐만 아니라 숙주로 이용되는 알을 낳는 동물의 유형을 포함하는 이용된 백신화 과정에 따라 달라진다.
한 구체예에서, 다클론성 항체들의 생산에는 알의 상업적 생산에 적합한 암탉을 이용한다. 알 생산에 적합한 임의의 품종의 닭을 이용할 수 있다. 예를 든다면, Rhode Island Reds, White Leghorns, Brown Leghorns, Lohmann Brown hens, 성-연결된 하이브리드 교배, 또는 큰 알 크기, 다량 알 생산 및 취급에 용이한 적합한 기타 품종들이 선택될 수 있다. 한 측면에서, 표준 질환들(가령 살모넬라, 조류 인플루엔자 또는 뉴캐슬(Newcastle) 바이러스 등)에 대해 닭은 병아리로 접종된다. 한 측면에서, 임의의 나이의 닭을 접종할 수 있다. 알을 낳는 나이에 다다른 암탉, 닭의 경우 약 15-19 주 또는 임의의 선택한 이 시기 이전 또는 이후의 암탉에게 안정적이고, 지속적인 생산 흐름을 야기하기 위하여 최종 생성물의 양과 시기로 미리 결정된 일정에 따라 접종한다. 일반적으로, 약 2 내지 4주의 격리 및 순응의 적절한 기간 후, 각 집단에서 항체에 바람직한 특이적 항원들을 포함하는 다양한 항원들 또는 면역화 조성물들을 이용하여 접종 프로그램을 시작한다.
한 구체예에서, 접종된 닭으로부터 알을 수집하고, 온전한 알로 처리한다. 배취(batch)를 준비하기 위하여 충분히 수집될 때까지 알은 냉장 상태로 보관한다. 미리결정된 닭 집단으로부터 한 무리의 알이 깨지고, 내용물은 껍질로부터 분리되고, 혼합하고, 그리고 바람직하게는 저온살균하여(pasteurization), 닭으로부터 병원성 미생물들의 잠재적인 오염을 제거한다.
한 측면에서, 면역 알 생성물들은 저온살균한다. 알 생성물들을 위생 설비에서 처리한다. 일반 알(shell eggs)은 평면(flat)으로부터 껍질속 알을 빼내고, 세척하고, 껍질을 깨끗이 하고, 알을 깨는 자동화 장비에 의해 면역 알 생성물로 처리된다. 임의선택적으로, 노른자로부터 흰자를 분리한다. 액상 알 생성물은 임의선택적으로 여과시키고, 임의선택적으로 다른 성분들과 혼합시키고, 그리고 그 다음 추가 처리 전 냉장한다. 생성된 액상 알 생성물은 치사 처리(lethality treatment) 가령, 저온살균 또는 건조된 형태로 가열한다. 미국에서 1970 Egg Products Inspection Act (EPIA)는 소비용 모든 알 생성물은 저온살균되어야 한다고 요구한다.
저온살균 후, 전체 알 내용물은 표준 상업적 방법들, 가령, 대기 또는 뜨거운 공기를 이용한 분무 건조, 열 건조, 동결 건조(freeze drying) 또는 냉동건조(lyophilization)를 이용하여 건조시킨다. 한 측면에서, 저온살균된 액상 알을 건조시키는 적합한 방법은 알 안에 항체들 및 분자 성분들의 손상을 최소화시켜 고영양가를 가지고, 수동 면역을 부여할 수 있는 생성물을 만든다.
한 측면에서, 전반적인 역가 또는 항체 수준을 결정하기 위하여 건조된 알을 테스트한다. 표준 테스트 과정, 가령, ELISA, FIA (형광 면역분석), RIA (방사능면역분석), 또는 이와 유사한 것들을 이용한다. 또다른 측면에서, 이 배취는 표준화된 양의 항체들을 담고 있는 로트(lot)를 만들기 위하여 다른 평균 생산 수준에서 닭 집단들의 배취와 혼합한다. 특이적 다클론성 항체들을 함유하는 건조된 알은 본 공개 조성물들로 제형화하기 전 실온에서 밀봉 용기에 보관할 수 있다. 구체예들에서, 건조된 알 원료들은 온전한 알로 이용되고, 분리하지 않는다. 구체예들에서, 온전한 건조된 알 원료들은 알 하나당 최소한 5 mg의 특이적 IgY를 함유한다.
또다른 구체예에서, IgY는 단리된다. IgY의 단리에서 제 1 단계는 리포프로테인으로부터 수용성 단백질을 분리하는 것이다. 난황(egg yolk)에서 총 단백질의 42.4%는 수용성 단백질로 구성된다(Osuga et al., "Egg proteins: In Food Proteins, J. R. Whitaker and S. R. Tannenbaum eds., AVI Pub. Co., Westport, Conn. (1977).
난황으로부터 면역글로블린들을 단리하고 정제하는데 많은 방법들이 이용되어왔다(Martin et al., Can J. Biochem. Physiol. 35:241 (1957); Martin et al., Can. J. Biochem Physiol. 36:153 (1958); Jensenius et al., J. Immunol. Methods 46:63 (1981); Bade et al., J. Immunol. Methods 72:421 (1984); Polson et al., Immunol. Invest. 14:323 (1985); Hassl et al., J. Immunol. Methods 110:225 (1988). Hatta 등(Agric. Biol. Chem. 54:2531 (1990)은 침전물로써 난황 지단백질을 침전물로 제거하기 위하여, 그리고 알 난황으로부터 수용성 분획물내 IgY를 회수하기 위하여 식품 등급의 천연 검(가령, 카라기난)을 이용하였다. 닭의 알 난황으로부터 항체들을 회수하는 방법들은 당분야에 잘 공지되어 있다. 알 난황으로부터 IgY를 추출하기 위한 몇 가지 방법들을 이용할 수 있고, 그리고 시판되는 추출 키트들을 이용가능하다(van Regenmortel, M. H. V. (1993). Eggs as protein and antibody factoies. In Proceedings of the European Symposium on the Quality of Poultry Meat, pp. 257-263. Tours, France: INRA).
또다른 구체예에서, 입체적 특이적 결합 분자는 병원성 성분에 특이적인 단일클론 항체일 수 있다.
단일클론 항체들은 Kohler et al., Nature.256:495 (1975)에서 처음 설명한 하이브리도마 방법을 이용하여 만들거나, 또는 재조합 DNA 방법들에 의해 만들 수 있다(미국 특허 제4,816,567호). 하이브리도마 방법에서, 마우스 또는 다른 적절한 숙주 동물, 가령, 헴스터는 상기에서 설명한 것과 같이 면역화시켜, 면역화에 이용된 단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 생산하는 또는 생산할 수 있는 림프 세포들을 유도한다. 대안으로, 림프세포들은 시험관에서 면역화시킬 수 있다. 면역화 후, 림프세포들을 단리하고, 그리고 그 다음 적합한 융합 물질, 가령, 폴리에틸렌 글리콜을 이용하여 골수 세포계와 융합시켜, 하이브리도마 세포를 만든다(Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, pp.59-103 (Academic Press, 1986).
하이브리도마 세포들이 성장하는 배양 배지는 이 항원에 대항하는 단일클론 항체들의 생산에 대해 분석된다. 바람직하게는, 하이브리도마 세포들에 의해 생산된 단일클론 항체들의 결합 특이성은 면역침전 또는 시험관 결합 분석, 가령, 방사능면역분석(RIA) 또는 효소-연결된 면역흡착 분석(ELISA)으로 결정한다. 단일클론 항체의 결합 친화력은 예를 든다면, Munson et al., Anal. Biochem.. 107:220 (1980)에서 설명된 Scatchard 분석으로 결정할 수 있다.
서브클론에 의해 분비된 단일클론 항체들은 배양 배지, 복수액, 또는 혈청으로부터 통상적인 항체 정제 과정들 가령, 예를 든다면, 친화력 크로마토그래피(가령, 단백질 A 또는 단백질 G-세파로즈를 이용) 또는 이온-교환 크로마토그래피, 하이드록실아파타이트 크로마토그래피, 겔 전기영동, 투석 등에 의해 적절하게 분리된다.
단일클론 항체들을 인코드하는 DNA는 통상적인 과정을 이용하여 용이하게 단리되고, 그리고 서열화된다(가령, 뮤린 항체들의 중쇄와 경쇄를 인코드하는 유전자들에게 특이적으로 결합할 수 있는 올리고뉴클레오티드 프로브를 이용함으로써). 이 하이브리도마 세포들은 이러한 DNA의 바람직한 원천으로 작용한다. 일단 단리되면, 이 DNA를 발현 벡터 안에 위치시킬 수 있고, 그 다음 재조합 숙주 세포들에서 단일클론 항체들이 합성되도록, 숙주 세포들 가령, 대장균(E. coli) 세포들, 원숭이 COS 세포들, 중국 헴스터 난소(CHO) 세포들, 또는 다른 방법으로는 항체 단백질을 생산하지 않는 골수종 세포들 안으로 형질감염시킨다. 항체를 인코드하는 박테리아 DNA에서 재조합 발현에 대한 재검토 문헌들은 Skerra et al., Curr. Opinion in Immunol., 5:256-262 (1993) and Plvckthun. Immunol. Revs. 130:151-188 (1992)을 포함한다.
추가 구체예에서, 단일클론 항체들 또는 항체 단편들은 McCafferty et al,. Nature. 348:552-554 (1990)에서 설명되는 기술을 이용하여 만들어진 항체 파아지 라이브러리로부터 단리할 수 있다. Clackson et al. Nature.352:624-628 (1991) 및 Marks et al.,.J. Mol. Biol., 222:581-597 (1991)는 파아지 라이브러리를 이용하여 차례로 뮤린 및 인간 항체들의 단리를 설명한다. 후속 간행물들은 체인 셔플링에 의해 고친화성(nM 범위) 인간 항체들의 생산(Marks et al., Bio/Technology. 10:779-783 (1992) 뿐만 아니라, 매우 큰 파아지 라이브러리를 구축하기 위한 전략으로써 복합 감염 및 생체 재조합을 설명한다(Waterhouse et al., Nuc. Acids. Res.21 :2265-2266 (1993). 따라서, 이들 기술은 단일클론 항체들의 단리를 위한 전통적인 단일클론 항체 하이브리도마 기술에 실행가능한 대안이다.
항체를 인코드하는 DNA를 변형시켜, 예를 든다면, 상동성 뮤린 서열을 인간 중쇄 및 경쇄 불변 도메인(CH 및 CL)로 대체함으로써(미국 특허 제4,816,567호; 그리고 Morrison, et al., Proc. Natl Acad. Sci. USA, 81:6851 (1984), 또는 비-면역글로블린 폴리펩티드 (이종기원의 폴리펩티드)의 코딩 서열 전부 또는 일부와 면역글로블린 코딩 서열을 융합시킴으로써, 키메라 또는 융합 항체 폴리펩티드들을 만들 수 있다. 비-면역글로블린 폴리펩티드 서열들은 항체의 불변 도메인을 대체할 수 있거나, 또는 이들은 한 항원에 대한 특이성을 가진 하나의 항원-복합 부위와 상이한 항원에 대한 특이성을 가지는 또다른 항원-복합 부위를 포함하는 2가 키메라 항체를 만들기 위하여 항체의 하나의 항원-복합 부위의 가변 도메인을 대체한다.
특이적 결합 단백질을 만들기 위한 면역화를 위한 항원들
면역화를 위하여 선택된 항원들은 박테리아성, 바이러스성, 원생동물, 곰팡이, 기생충, 세포, 또는 동물의 면역계가 반응하게 되는 임의의 다른 물질일 수 있다. 한 측면에서, 이 항원들의 면역원성은 어쥬번트의 사용으로 강화된다.
한 측면에서, 백신접종 조성물, 접종물 또는 백신내 병원성 성분들, 항원들, 또는 면역원으로 동물을 접종한다. 한 측면에서, 병원성 성분들 또는 특이적 항원들은 시판되는 원천 가령, American Type Culture Collection (ATCC)으로부터 획득하거나 유도할 수 있다. 또다른 측면에서, 병원성 성분들은 야생형 균주로부터 단리될 수 있다. 또다른 측면에서, 병원성 성분들 또는 바람직하지 못한 균주들이 혼합된 항원 조제물에 존재한다. 다양한 바람직하지 못한 균주들 또는 병원성 성분들로부터 유도된 임의의 항원들 또는 복합물이 면역화 조성물에 이용될 수 있다.
한 측면에서, 접종물, 항원 또는 면역원은 표적화된 항원 클러스터의 공통 또는 보존된 성분 또는 영역으로 선택되고, 관련된 항원들의 클러스터의 개별 구성요소들의 가변 또는 특징적인 성분들 또는 영역들은 무시한다. 이 방법은 바람직한 에피토프의 경우에 교차-반응성이 있지만, 다른 에피토프에는 반응성이 없는 항체들의 생산을 유도하는 특징을 가진 적절한 면역원의 제조, 그리고 항체 생산을 야기하기 위하여 이 면역원에 생산 세포 또는 유기체의 노출을 포함하고, 생산된 항체는 투여용 적합한 운반체 매트릭스 안에 내장된다. 광범위한 하나 이상의 표적 항원들의 클러스터를 제공하기 위하여 이 방법에 따라 생산된 항체들의 혼합을 이용하는 이러한 유형의 제제를 개발할 수 있다. 예를 든다면, 관련없는 항원들의 두 개 클러스터가 질환 또는 이상과 연관되는 경우, 그리고 이 질환 또는 이상을 해결하기 위하여 단일 제제를 만드는 것이 바람직한 경우, 두 가지 항체들, 면역글로블린들, 또는 생물학적 면역 인자들의 혼합물은 두 가지 광대한 반응성 도메인을 동시에 제공하는 이 방법을 이용하여 만들 수 있다. 이 구체예의 한 가지 예는 구조적으로 관련된 독소의 클러스트에 특이적으로 반응하는 항독소 항체의 생산을 위한 것이다.
한 구체예에서, 이 방식을 이용하여 임의의 그람-음성 박테리아 (대장균(Escherichia coli), 살모넬라(Salmonella), 쉬겔라(Shigella), 및 다른 장내세균, 슈도모나스(Pseudomonas), 모렉셀라(Moraxella), 헬리코박터(Helicobacter), 스테노트로포모나스(Stenotrophomonas) 및 다른 것들)로부터 리포폴리사카라이드(LPS)(내독소에 대한 광범위한 반응성 항체를 만들거나, 또는 예를 든다면 AB5 독소 (캄필로박터(Campylobacter) 장내독소, 콜레라 독소, 열-변성 장내독소 (LT 및 LT-II) (대장균(E. coli), 백일해 독소, 쉬가 독소 (Shigella), 쉬가-유사 독소 (또는 베로톡신)을 포함)에 대한 광범위한 반응성 항체를 만든다.
바람직한 측면에서, 이들 예들의 항-독소 항체들은 독소를 생성하는 종에 관계없이 효과를 가진다. 또다른 측면에서, 생산된 이 항체들은 표적 독소들의 생물학적 활성을 중화 또는 비활성화시키는 중화 항체들이다. 이러한 광범위한 중화 항체를 이용하여 병리학적 경우들에서 중재할 수 있는데(예를 든다면 특정 유형들의 설사), 이때 어떤 유기체들이 원인이었는지에 대한 지식이 필요없이, 징후를 조정하는 독소가 표적화된 클러스터중 하나였다(이들 예에서, AB5 또는 LPS). 더욱이, 임상적적인 유효량의 항AB5 항체와 항LPS 항체 모두를 함유하는 혼합물을 만들었다면, 활성독소가 AB5 또는 LPS 또는 이 둘 모두인 경우에서 이 제제를 중재에 이용할 수 있다.
이 방법은 임의의 수의 독소 클러스터(이 실시예에서)를 포함하고, 그리고 다른 독소-유사 반응들(예를 든다면 바이러스 독소-유사 현상)의 중재물질에 대한 광범위한 중화 항체들을 포함하고, 감염 원인에 대한 지식없이 증상 및 병리를 관리할 수 있는 설사에 대해(이 실시예에서) 광범위하게 적용할 수 있는 중재를 일으키고, 또는 다중 감염성 원인이 있는 경우에 광범위하게 적용할 수 있는 중재를 일으키는 것을 포함하도록 확장될 수 있다. 한 측면에서, 본 공개는 운반체 매트릭스 안에 복합된 항-독소 항체들의 공조적 조합을 포함하는 조성물을 제시한다.
일부 구체예들에서, 본 발명의 방법들과 조성물들은 콜레라 독소 (비브리오 콜레라(Vibrio cholera)), 대장균(E. coli) (장독소생성성 (ETEC)을 포함), 쉬겔라(Shigella), 살모넬라(Salmonella), 캄필로박터(Campylobacter), 클로스트리윰 디피실(Clostridium dificile), 기생충들(가령, 지아디아(Giardia), 엔트아메바 히스톨리티카(Entamoeba histolytica), 크립토스포리디오시스(Cryptosporidiosis), 싸이클로스포라(Cyclospora)), 및 설사 바이러스들 (가령, 로타바이러스)을 포함하나 이에 한정되지 않는 다양한 병원균들 또는 물질들을 위하여 이용한다.
위장관으로 진입한 후, 박테리아 가령, 대장균(E. coli)을 포함하나 이에 한정되지 않는 많은 병원균들은 상피, 점막, 또는 다른 조직에 결합(흡착)하고, 위장관, 가령 내장의 벽에 파묻히게 된다. 위장관에 있는 조직에 결합한 후, 병원균들은 복제되어, 직접적으로 생산하거나 또는 면역계 작용에 의해 병원균 세포들의 증가된 리신에 의해 간접적으로 독소 농도가 증가되는 원인이 된다. 위장관 조직에 결합하는 병원균들의 능력을 방해하면, 병소 및 다른 증상들을 야기하기에 충분한 크기의 콜로니가 형성되기 전 병원균들의 좀더 효과적인 이동, 소화 및 배출을 촉진시킨다. 어드헤신, 캐드헤린, 섬모, 가장자리잔털, 및/또는 바이러스 접착 구조들을 포함하나 이에 한정되지 않는 위장관에 흡착되는데 이용될 수 있는 병원균 상에 있는 수용체들 및 리간드들을 차단시킴으로써, 위장관 조직에 접착을 방지 또는 최소화시킬 수 있고, 이러한 작용 방식을 이용하는 병원균들로부터 실질적으로 병상의 감소를 궁극적으로 야기할 수 있다.
다양한 구체예들에서, 위장염을 일으키는 인간 또는 수의학적 장 또는 위장 병원균 하나 또는 조합으로부터 병원균이 선택된다. 다양한 측면에서, 이 병원균은 다음으로 구성된 군으로부터 선택된다: 캄필로박터 에주니(Campylobacter jejuni), 살모넬라(Salmonella), 살모넬라 티피무리움(Salmonella typhimurium), 살모넬라 엔테리카 세로바르 티피(Salmonella enterica serovar Typhi ), 쉬겔라 디스엔테리에(Shigella dystenteriae), 플레시오모나스 쉬겔로이데스(Plesiomonas shigelloides), 대장균(Escherichia coli)[(EPEC) 장병원성 대장균(E. coli ), (ETEC) 장독소생성성 대장균(E. coli ), (EaggEC) 장집합성 대장균(E. coli ), (EIEC) 장침입성 대장균(E. coli ), 그리고 (EHEC) 출혈성 대장균(E. coli )을 포함], 에르시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica), 비브리오 콜레라(Vibrio cholerae) O1, 비브리오(Vibrio) O139, 비(non)-O1 비브리오(Vibrios), 비브리오 파라헤모리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus), 에어로모나스 하이드로필라(Aeromonas hydrophila), 클로스트리디움 페르프린겐스(Clostridium perfringens), 클로스트리윰 디피실(Clostridium dificile), 장간의(enterohepatic) 헬리코박터(헬리코박터 피로리(Helicobacter pylori) 포함), 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 클렙시엘라(Klebsiella), 로타바이러스, 코로나바이러스, 노로바이러스, 칼시바이러스, 장의 아데노바이러스, 사이토메갈로바이러스, 아스트로바이러스. 또다른 측면에서, 병원균 관련된 독소는 내독소 또는 외독소를 포함한다. 또다른 측면에서, 병원균 관련된 접착 요소는 어드헤신, 캐드헤린, 섬모, 가장자리잔털, 바이러스 접착 구조, 또는 이의 조합을 포함한다.
다양한 특이적 측면들에서, 병원성성분들, 면역원들 또는 항원들은 가령, 로타바이러스, 코로나 바이러스; 클로스트리디움 페르프린겐스(Clostridium perfringens) 유형 C; 대장균 (세포성); 장독소생성성 균주, 그리고 대장균(E.coli)의 장내독소들; K99, K88, 987P, 또는 F41 털(pili) 흡착 인자 항원을 가지는 임의의 박테리아; 대장균(E. coli) 및 살모넬라 티피무리움(Salmonella typhimurium)(일반적으로 그람 음성 박테리아)가 원인이 되는 내독소(또는 LPS)로부터 유도될 수 있다. 특정 측면에서, 하나, 둘, 셋, 넷, 다섯, 여섯, 일곱, 또는 여덟 또는 다수의 병원성 미생물들로부터 유도된 항원들 또는 독소를 암탉에게 접종한다.
한 측면에서, 면역 반응은 항원 원천과 백신접종을 받은 동물의 면역계 사이의 거리가 증가될 때 더 강력하다.
특정 구체예에서, 제 1 무리의 닭들을 제 1의 혼합 항원 조제물로 접종한다. 한 측면에서, 제 2 무리의 닭들은 제 1 항원과는 상이한 것들을 함유하는 제 2 혼합 항원 조제물로 접종한다. 또다른 측면에서, 제 3 무리의 닭들은 제 3 혼합 항원 조제물로 접종한다. 추가적인 측면에서, 제 4 무리의 닭들은 제 4 혼합 항원 조제물로 접종한다. 본 발명의 범위를 제한하려는 의도는 없지만, 항원 과부하를 피하기 위하여 상이한 무리들에게 상이한 항원들로 면역접종하는 것이 유익할 것으로 믿는다.
각 무리의 알들을 수거하고, 임의선택적으로 특이적 및/또는 전체 IgY에 대해 역가를 측정하고, 임의선택적으로 단리하고 및/또는 정제하고, 별도로 처리하여 건조 분말을 만든다. 또다른 측면에서, 제 1 및 제 2 무리로부터; 제 1, 제 2 및 제 3 무리; 또는 제 1, 제 2, 제 3 및 제 4 무리의 알들의 건조 분말은 본 공개된 조성물을 만들기 위하여 건조 제분화된 알들은 운반체 매트릭스와 혼합하거나, 또는 운반체 매트릭스로 포장한다. 한 측면에서, 제 1 항원 조제물은 소의 로타바이러스 (혈청형 G6 및 G10), 소의 코로나바이러스, K99 털 흡착 인자를 가진 장독서생성성 대장균 균주, 및 클로스트리디움 페르프린겐스(Clostridium perfringens) 유형 C를 포함한다. 면역 반응을 강화시키기 위하여 혼합형 항원 조제물은 임의선택적으로 어쥬번트화될 수 있다.
또다른 측면에서, 제 2 항원 조제물은 클로스트리디움 페르프린겐스(Clostridium perfringens) 유형 C 및 열-불안정한 독소를 생산하는 또는 K99, K88, 987P, 또는 F41 흡착 인자들을 보유하는 장독소생성성 대장균 균주들에 의해 만들어진 베타 독소를 포함한다.
한 측면에서, 제 3 항원 조제물은 대장균(E. coli)과 살모넬라 티피무리움(Salmonella typhimurium)을 포함한다. JVAC는 대장균(E. coli)과 살모넬라 티피무리움(Salmonella typhimurium)에 의한 내독소혈증의 발생 및 심각성을 감소시킨다. 이들의 내독소와 흔히 연합되는 것은 장내세균성 유방염(Coliform Mastitis) 및 내독소혈증(Endotoxemia)과 연합된 그람-음성 질환들이다.
또다른 측면에서, 항원들은 당업계에 공지되어 있는 임의의 수단에 의해 만든다. 예를 든다면, 야생형 원천, 가령, 가령, 대장균(E. coli) 설사를 앓는 동물의 세포들. 단리 세포들은 37℃에서 하룻밤동안 가령, Trypticase Soy Broth (TSB)에서 배양하고, 원심분리에 의해 농축시킬 수 있다. 생성된 펠렛은 PBS 완충액내 0.4% 포름알데히드로 재현탁시키고, 비활성화를 위하여 37℃에서 항온처리할 수 있다. 포름알데히드는 원심분리로 제거할 수 있다. 펠렛은 PBS에 재현탁시키고, 항원으로 이용할 수 있다. 한 측면에서, 이 항원들을 접종 전 동량의 어쥬번트로 유화시킨다.
또다른 구체예에서, 이 항원들은 결막염을 야기하는 병원성 유기체로부터 선택된다. 공지의 원인 병원균들은 US 2008/0031903, Gambotto et al.,에서 설명되고 있으며, 참고자료에 편입된다.
유행성 각결막염(EKC)은 전 세계적으로 볼 수 있는 쇠약하게 만드는 감염성 눈 질환이다. 이 질환의 원인은 대개 아데노바이러스들, 특히 혈청형 8, 19 및 37이다. 혈청형 3, 4 및 11은 또는 일부 EKC 유행병에 연루되어 있다. 이 질환은 모든 연령대에 영향을 주는데, 매우 접촉성이 크고, 주로 학교, 학교, 수용장, 어린이들 단위 및 캠프에서 급속히 확산된다. 효과적인 치료가 없기 때문에 치료는 현재 증상에 의한 것이다. 이 질환을 치료하고, 유행하는 것을 막기 위하여 효과적인 항-바이러스 국소 물질의 개발이 바람직하다.
결막염은 또한 다수의 추가적인 박테리아, 바이러스, 곰팡이 및 원생 물질에 의해 야기될 수 있는데 S. 아우레우스(S. aureus), S. 뉴모니에(S. pneumoniae), H. 인플루엔자(H. influenzae), 나이제리아 고노리에(Neisseria gonorrhoeae), 클라미디아 트라초마티스(Chlamydia trachomatis), 아데노바이러스, 단순 포진, 대상포진 바이러스, 장바이러스, 푸사나리움 종(Fusarium species), 칸디다 종(Candida species) 그리고 아칸타모에바 종(Acanthamoeba spp.)을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 특정 바이러스 감염들, 가령, 아데노바이러스 감염들은 항바이러스 약물 생성물, 가령, 치도포비르(cidofovir)로 치료될 수 있다. 전형적으로, 약물 생성물들은 부작용이 있는데, 가령, 치도포비르와 관련된 안구 및 신장의 부작용이 있다. 약물 생성물은 안정성, 생산 단가 등을 포함하는 다른 물류상의 문제들이 발생한다. 그것 자체로, 안구 감염 치료를 위한 저렴하고, 바로 이용가능하며, 수용가능하고, 안정적인 약물 생성물이 바람직하다.
한 측면에서, 본 공개는 하기에서 설명된 것과 같이, 운반체 매트릭스 안에 복합된 이들 병원균에 대한 다클론성 항체들을 포함하는 결막염 또는 충혈안의 치료용 조성물을 제시한다. 이 항체들은 여기에서 설명된 것과 같이 생산된다.
또다른 구체예에서, 이 항원들은 질염을 여기하는 병원성 유기체로부터 선택된다. 이 감염은 박테리아성, 곰팡이(효모), 또는 기생충일 수 있다. 박테리아성 질염은 예를 든다면, 가르드네렐라 종(Gardnerella spp.), 나이제리아 고노리에(Neisseria gonorrhoeae), 클라미디아세아 트라초마티스(Chlamydiaceae trachomatis), 미코플라스마 종(Mycoplasma spp.), 캄필로박터 에주니(Campylobacter jejuni)가 원인일 수 있다. 기생충성 질염은 가령, 트리초모나스 바지날리스(Trichomonas vaginalis)가 원인일 수 있다. 바이러스성 질염은 포진 바이러스 유형 1 또는 유형 2가 원인일 수 있다. 칸디다성 질염은 효모유사 곰팡이 칸디다(Candida)가 원인이다. 170개 이상의 효모유사 곰팡이 종이 있다. 칸디다 알비칸스(C. albicans)는 여성의 85-90%의 칸디다성 질염의 가장 흔한 원인 물질이다. 칸디다 글라브라타(Candida glabrata)(5-10%), 칸디다 트로피칼리스(Candida tropicalis)(3-5%), 칸디다 파라피실로시스(Candida parapsilosis)(3-5%) 및 칸디다 크루세이(Candida krusei)(1-3%)는 또한 다른 칸디다종 중에서 임상적으로 유의적이다. 임의의 이들 병원균들은 여기에서 설명된 것과 같이 다중클론 항체 생산을 위한 항원 원천으로 선택될 수 있다.
칸디다성 외음부질염은 다수의 선조치가능한 인자들에 의해 주로 야기되는데, 가령, 항생제들, 코르티코스테로이드, 세포활동억제제, 경구 피임약, 방사선 요법의 , 심각한 감염성 질환, 내분비 장애, 면역결핍 단계의 장기적이고, 무절제된 이용에 의해 야기된다. 광범위한 항생제들의 처방은 병원성 박테리아 뿐만 아니라, 점막 질 부생균: 락토바실리(lactobacilli) 및 비피도박테리아(bifidobacteria)를 또한 억제한다. 그 결과, 질의 pH는 상승하고(알칼리 범위 쪽으로), 그리고 자가-정화 과정의 교란이 일어난다. 게다가, 칸디다는 영양 기질로 일부 항생제들을 이용할 수 있다. 따라서, 여성의 생식기내에서 칸디다의 활발한 과다 성장에 우호적인 상태가 발생한다. 한 측면에서, 본 공개는 하기에서 설명된 것과 같이, 운반체 매트릭스 안에 복합된 설명된 하나 이상의 병원균들에 대한 다클론성 항체들을 포함하는, 질염 치료용 조성물을 제시한다.
특정 측면에서, 운반체 매트릭스 내에 특이적 다클론성 항체들의 혼합물을 포함하는 본 공개의 조성물은 박테리아성, 바이러스성, 곰팡이성 또는 기생충성 질염을 치료하는 광범위한 방법을 제시한다. 또다른 측면에서, 본 공개의 조성물들은 이를 필요로 하는 대상에서 미확인 질염을 치료하는데 이용될 수 있다.
다른 특이적 결합 분자들
본 공개의 조성물들 및 방법들은 이적 인자들, 가변 림프세포 수용체들 및 세포 수용체들을 포함하는 다른 특이적 결합 분자들을 포함한다. 아미노산으로 구성된 대략적으로 5000 Daltons의 면역 분자인 이적 인자는 항원-특이적 세포-매개된 면역, 주로 지연된 과민성 및 림포킨의 생산을 야기하고 뿐만 아니라 항원들 자체에 결합한다.(Kirkpatrick 1993, Structural nature and functions of transfer factors. Ann. N.Y. Acad. Sci. 685:362-368.) 가변 림프세포 수용체들은 턱이 없는 척추동물들 가령, 칠성장어 및 먹장어에서 발견되는 림프세포-유도된 분자들이다. 이들 동물들은 오직 소수의 유전자들로부터 생산되고, 그리고 항체들과 유사한 방식으로 그리고 동일한 수준의 특이성을 가지고 병원성 항원들에 결합하는 가변 림프세포 수용체들의 큰 배열을 보유한다. (Alder et al., 2005, Diversity and function of adaptive immune receptors in a jawless vertebrate. Science, 310(5756):1970-1973).
운반체 매트릭스
본 공개는 대상에서 병원성 감염의 치료 또는 예방용 조성물들을 제시한다. 이 조성물들은 운반체 매트릭스와 복합된 특이적 결합 분자들, 가령, 다클론성 항체들을 포함한다. 본 발명의 범위를 제한하는 의도는 없지만, 운반체 매트릭스는 이중 목적으로 작용한다. 첫째, 예를 든다면, 경구 투여시, 그리고 신생아가 아닌 대상의 위장관내에서 이들의 의도된 기능적 환경 내에서 항체들을 보호하고; 그리고 감염의 관리에서 항체들과 공조적으로 반응하기 위하여 성분들, 가령, 본질적인 면역계의 성분들을 더 제공하기 위하여.
용어 "운반체 매트릭스", 또는 보호성/반응성 매트릭스는 증식, 촉진, 지지하는데 필요한 요소들을 공급하기 위하여, 또는 원 위치의(in situ) 면역-유형 반응, 캐스캐이드 또는 반응을 강화시키기 위하여, 적절한 비율 및 농도의 요소들, 공동 인자들, 또는 다른 성분들을 함유하는 임의의 기질, 화합물, 제제, 또는 보충 혼합물(천연 또는 합성)을 말한다. 이들 요소들은 절단 및 성숙 반응, 어셈블리 및 복합체의 형성, 결손 및 흡착 기능들을 다양하게 촉진할 수 있고, 필수 요소들, 생물제제, 또는 화합물들을 공급하고, 그리고 활성 요소들 또는 성분들을 위한 보호 기능을 제공한다. 운반체 매트릭스는 내생성 항체들 (면역 인자들)을 함유하거나 함유하지 않을 수 있는데, 이는 표적화된 항원들에게 특이적이거나 또는 특이적이지 않을 수 있다.
한 구체예에서, 운반체 매트릭스는 인간이 아닌 포유동물로부터 유도된 혈청, 혈장, 초유, 젖, 타액, 림프액, 점막, 또는 눈물로부터 선택되고, 또는 인간이 아닌 포유동물로부터 유도된 혈청, 혈장, 초유, 젖, 타액, 림프액, 점막, 또는 눈물로부터 유도된다.
자연적으로 생성되는 운반체 매트릭스의 예는 초유다. 초유는 매우 농축된 저-용적 형태로 이의 성분들이 신생아들에게 운반되어 위장관으로 또는 위장관을 통하여 전달되도록 특이적으로 포유동물에서 자연적으로 진화되어 왔다. 초유, 또는 "처음 젖"은 출산 직후 포유동물들에 의해 만들어진다. 항체들 및 공인자들이 엄마로부터 신생아로 이동되고, 그리고 병원균들에 대항하여 제 1 보호를 제공한다. 성장 인자들은 또한 장의 발달 및 복구를 자극한다.
초유는 숙주의 면역-보완(immuno-complimentary) 인자들을 함유한다. 이들은 인터페론, 면역글로블린(IgG 및 분비성 IgA를 포함), 다형핵 백혈구, 대식세포들 및 림프세포들을 포함한다. 초유는 또한 프롤린-풍부한 폴리펩티드, 또는 PRP, T-세포 활성물질을 함유한다. 초유는 젖과 비교하여 면역글로블린 함량이 높은 것으로 알려져 있다. 초유는 포유동물들내 항체들 가령, IgA, IgG, 및 IgM을 함유하는 것으로 알려져 있다. IgA는 장의 상피를 통하여 흡수되고, 혈액을 통하여 이동되고, 그리고 다른 유형 1 점막 표면 상에 분비된다. 소의 초유는 6% 내지 20% 면역글로블린; 주로 IgG1 및 IgG2가 어디든 있는 것으로 알려져 있다. 한 측면에서, 소의 온전한 초유는 운반체 매트릭스로 이용된다.
초유는 내장 환경을 조절하는데 또한 도움을 주는데, 외부 병원균들에게 적의적인 환경을 제공한다. 초유는 박테리아 및 바이러스들이 복제에 필요한 철을 얻는 것을 방지하는 락토페린, 철-결합 단백질을 함유한다. 초유는 특정 프로바이오틱 종을 선택적으로 풍부하게 하며, 이는 감염을 막는데 도움이 된다. 초유는 두 가지 주요 성장 인자들, 형질변환 성장 인자들 (TGF) 알파 및 베타의 유일한 천연 원천이며, 뿐만 아니라 인슐린-성장 인자 1 및 2의 원천이다. 이들 인자들은 조직 복구 및 발달을 촉진시킨다. 초유는 또한 간세포 성장 인자의 원천이며, 이는 내장 벽 세포들의 성장 및 확장을 촉진시킨다. 초유는 위장 환경 내에서 운반체 매트릭스로 작용하도록 자연적으로 기획된다. 합성 형태의 운반체 매트릭스 또한 본 공개에 포함된다. 천연 및 합성 성분들 모두로 구성된 운반체 매트릭스 또한 본 공개내에 포함된다.
초유는 단백질, 비타민 A, 그리고 염화나트륨이 매우 풍부하지만, 보통의 젖보다 탄수화물, 지질 및 칼륨의 양은 더 적게 포함한다. 초유에서 가장 적절한 생활성 성분들은 성장 인자들 및 항미생물 인자들이다. 초유내 항체들은 수동 면역을 제공하며, 성장 인자들은 장의 발달을 자극한다. 이들은 신생아로 전달되어, 병원균들에 대항하여 제 1 보호를 제공한다. 엄마로부터 수동 면역이 신생아에게 이적된다.
신생아는 매우 작은 소화계를 가지며, 초유는 매우 농축된 낮은 용적 형태로 영양소를 운반한다. 신생아의 위장관은 초유로부터 면역의 수동 이적에 특별히 수용적이다. 출생시, 위의 pH는 위 안의 잔류 양수로 인하여 6-8 범위에서 가변적이다. 그 다음 24 내지 48시간 이내에 위의 pH는 1.5 내지 3으로 떨어진다. 따라서, 신생아의 GI 조건은 수동 면역에 도움이 된다. 추가로, 신생아 및 미숙아에서 위가 비어있는 시간이 연장되는데, 성인치로는 6-8월령에 이른다. 초유내 항체들 및 공인자들은 특정 환경(가령, 모유수유)에서 수취인에게 수동 면역을 제공할 수 있고; 이는 신생아들에게 특히 사실이다. 신생아가 아닌 아기, 어린이, 청년 및 건강한 성인의 위장관은 면역글로블린들의 경구 투여에 대해 좀더 적대적인 환경이다.
초유의 다른 면역 성분들은 본질적인 면역계의 주요 성분들, 가령, 락토페린, 트란스페린, 라이소자임, 락토퍼옥시다제, 보체, 그리고 프롤린-풍부한 폴리펩티드들 (PRP)을 포함한다. 초유에는 인터루킨들, 종양 괴사 인자, 케모킨들 및 기타를 포함하는 다수의 사이토킨 (면역계의 기능을 조절하는 작은 메신져 펩티드들)들이 발견된다. 초유는 또한 다수의 성장 인자들, 가령, 인슐린-유사 성장 인자들 I, 및 II, 형질변환 성장 인자들 알파, 베타 1 및 베타 2, 섬유아세포 성장 인자들, 상피 성장 인자, 과립구-대식세포-자극 성장 인자, 혈소판-유도된 성장 인자, 맥관 내피 성장 인자, 그리고 콜로니-자극 인자-1을 함유한다.
한 측면에서, 운반체 매트릭스는 초유의 2가지 이상, 3가지 이상, 4가지 이상, 5가지 이상, 또는 6가지 이상, 또는 7가지 또는 그 이상의 비-면역글로블린 성분들로 구성된다. 또다른 측면에서, 운반체 매트릭스는 면역글로블린들의 대부분을 제거하기 위하여 처리된 초유를 포함한다. 구체예들에서, 운반체 매트릭스는 인간이 아닌 동물로부터 수득되는 효소들, 락토페린, 트란스페린, 비특이적 면역글로블린들, 보체계의 구성성분들, 사이토킨, 백혈구, 보체 성분들, 인터페론, 그리고 피브로넥틴으로 구성된 군으로부터 선택된 최소한 두 가지 성분들을 포함하는데, 이때 최소한 한 가지 특이적 결합 분자와 운반체 매트릭스의 최소한 두 가지 성분들은 상이한 동물들로부터 얻는다.
또다른 측면에서, 매트릭스는 라이소자임, 포스포리파제, 디펜신, 옵소닌, 프롤린-풍부한 폴리펩티드들 (PRP), 베타-리신, 락토페린, 트란스페린, 사이토킨, 인터루킨들, 케모킨들, 인터페론, TNF-알파, 피브로넥틴, 프롤린-풍부한 폴리펩티드들, 인슐린 성장 인자 유형 1, 인슐린 성장 인자 유형 2, 유도된 혈소판 성장 인자, 상피 성장 인자, 섬유아세포 혈소판 성장 인자, 형질변환 성장 인자 알파, 형질변환 성장 인자 베타, 신경 성장 인자, 렙틴, 루코사이트(leukocytes),백혈구(white blood cells), 식세포, 대식세포들, 단핵세포, 호중구, 다형핵 세포들, 그리고 수지상 세포들, 비만 세포들, 호산구, 호염기성 세포들, 천연 살생(NK) 세포들, 림포카인 활성화된 살생 (LAK) 세포들, 디펜신을 포함하는 양이온 단백질들, 엘라스타제를 포함하는 단백질분해성 효소들, 카텝신 G, 미엘로퍼옥시다제, NADPH 옥시다제 성분들, 또는 이의 조합로부터 선택된 두 가지 이상의 물질로 구성된다. 또다른 측면에서, 매트릭스는 본질적인 면역계의 물질들의 혼합물을 포함한다. 바람직한 측면에서, 운반체 매트릭스는 소의 비-과다면역(non-hyperimmune) 초유로 구성된다.
소의 초유는 새로 태어난 송아지를 위하여 소에서 만들어진다. 많은 낙농 젖소 무리에서, 송아지는 수유받지 못하고; 다만 초유를 공급받고, 젖병으로 나중에는 양동이에 젖을 공급받는다. 초유를 수집하고, 시판용으로 처리된다. 초유를 포함하는 다양한 조성물들과 초유를 준비하기 위한 공정들은 미국 특허 제5,846,569호, 미국 특허 제6,410,058호, 미국 특허 제6,475,511호, 그리고 미국 특허 제6,521,277호에 공개되어 있으며, 이들 각각은 전문이 여기에 참고자료로 편입된다. 소의 건조된 초유는 시판된다. 하나의 특이적 측면에서, 운반체 매트릭스는 상업적으로 건조된 소의 초유이다.
가축 관리인/축산가는 일반적으로 이들의 동물들로부터 초유를 쌓아둔다. 이들 소유의 토지에서 생산된 초유는 다른 원천으로부터 얻은 초유보다 우수하다고 생각하는데, 그 이유는 토지에서 발생되는 병원균들에 이미 노출된(그리고 따라서 이들 병원균들에 대항하는 항체들을 만든) 동물들에 의해 만들어지기 때문이다. 일반적으로, 관련 병원균들에 노출된 동물들의 초유는 우수한 면역학적 특징들을 가질 것이다.
소의 초유 및 이의 성분들은 락토즈 또는 다른 성분들에 과민증 또는 알레르기를 제외하고 인간이 소비하는데 있어서 안전하다. 목초-사육 소의 초유는 대장균(Escherichia coli), 크립토스포르디움 파르붐(Cryptosporidium parvum), 쉬겔라 플렉네리(Shigella flexneri), 살모넬라(Salmonella), 스타필로코커스(Staphylococcus), 그리고 로타바이러스를 포함하는 많은 인간 병원균들에 특이적인, 이들 병원균들에 대해 이들의 자연적인 노출에 따라 면역글로블린들을 함유한다. 항생제들의 발달 전, 초유는 감염에 맞서 싸우는데 이용되는 면역글로블린들의 주요 원천이었다.
과다면역 초유는 특이적 병원균으로 소를 면역화시킴으로써 소의 천연 초유의 효과를 부스터시키는 시도를 나타낸다. 이러한 방법은 항체들이 원래 도전에 이용된 특이적 병원균들 또는 항원들에 대해 만들어지기 때문에 전망있다. 그러나, 항원들에 대한 다양한 반응, 생물학적 가변성 그리고 초유의 낮은 생산성이 이의 임상적 그리고 상업적 유용성을 제한시킨다.
한 측면에서, 본 공개는 과다면역 초유가 아닌 또는 병원성 또는 표적 항원 성분들에 특이적인 측정가능한 또는 상당한 양의 항체들을 함유하지 않는 초유를 포함하는 조성물을 제공한다. 또다른 측면에서, 본 공개는 운반체 매트릭스가 상당한 양의 특이적 또는 비-특이적 항체들 없이, 본질적인 면역계의 다양한 성분들을 함유하는, 조성물을 제공한다.
한 구체예에서, 초유는 가령, 배취 또는 컬럼 포맷 상에서 친화력 수지(가령 단백질 G 또는 단백질 A 세파로즈; 또는 단백질 A 또는 단백질 G 아가로즈) 상에서 항체들을 흡수하고, 추가 처리를 위하여 용출액은 유지시킴으로써 면역글로블린의 대부분을 제거하도록 처리될 수 있다. 면역글로블린은 세파덱스 G-200 또는 DEAE 세파덱스 A-25 이온 교환 크로마토그래피 상에서 겔 여과 크로마토그래피에 의해 또한 제거될 수 있다(Lloyd and Soulsby, Immunology, The role of IgA immunoglobulin in the passive transfer of protection to Taenia taeniaeformis in the mouse. 34, 939-945). 이들 공정들은 당업계에 공지되어 있는 다양한 방법들 및 기술들에 의해 컬럼 또는 배취 포맷 상에서 실시될 수 있다.
한 가지 특이적 구체예에서, 운반체 매트릭스는 초유를 함유한다. 한 측면에서, 지지성/반응성 매트릭스로 시판되는 초유를 이용한다. 바람직한 측면에서, 시판되는 소의 초유는 착유 첫 초유로부터만 생산되는 덩어리화되고, 인스턴트화되고, 저온살균된 전유의(full cream), 온전한 초유 분말이다. 또다른 측면에서, 초유는 저압 및 처온에서 처리되고, 그리고 최대 생활성을 유지하도록 간접 증기를 이용하여 분무 건조된다. 또다른 측면에서 시판되는 초유는 항생제 없는 원천으로부터 온 것이다. 또다른 측면에서, 초유는 미생물 분석을 받고, 음성으로 또는 다양한 병원균에 대해 음성으로, 또는 수용가능한 수준 아래에 있다. 다른 다양한 측면들에서, 다른 오염물질들 가령, 질산염, 아플라톡신, 니트로퓨란, 다이옥신, 멜라민, 및 중금성에 대해 초유를 분석하고, 음성 또는 명시된 수준 아래에 있다.
한 구체예에서, 이 발명은 각각은 상이한 항원 클러스트 또는 부류를 표적으로 하는 몇 가지 과다-면역화된 원천의 초유로 구성될 수 있는데, 이때 초유를 혼합하여 광범위한 항체 제제를 제공한다.
또다른 구체예에서, 운반체 매트릭스는 재구성된 또는 인공 점막 분비물 가령, 눈물 유체, 비강 또는 기관지 점막, 경부 점막, 정액 혈장, 땀, 혈액 혈장 또는 타액으로 구성된다. 체액은 몇 가지 성분들이 다양한 양으로 함유된 것으로 알려져 있다(Schenkels et al., Biochemical composition of human saliva in relation to other fluids, Crit. Rev. 경구 Biol. Med., 1995, 6(2):161-175). 타액은 뮤신, 산성 PRPs, 알파-아밀라제, 염기성 PRPs, 염기성 PRG, 분비성 IgA, 시스타틴, 스타테린, IgG, 여분의-이하선 당단백질 (EP-GP), VEGh (리포칼린), 히스타틴, 라이소자임, 칼리크레인, 락토페린, 락토퍼옥시다제, 합토코린, 베타-마이크로세미노단백질, IgM, 알부민, 및 Zn-알파2-당단백질을 함유한다. 한 측면에서, 운반체 매트릭스는 2가지 이상, 3가지 이상, 4가지 이상, 5가지 이상, 6가지 이상 또는 7가지 이상의 체액 성분들을 포함한다.
눈물 유체, 또는 눈물은 타액과 동일한 많은 성분들을 보유하며, 그리고 특히 고 농도의 분비성 IgA, VEGh, 라이소자임, 및 락토페린을 보유한다. 한 측면에서, 주요 성분으로 염, 가령 염화나트륨 및 이와 유사한 것을 함유하는 인공 눈물 유체, 또는 당업계에 공지되어 있는 것과 같이 하이드록시에틸셀룰로오즈, 콘드로이틴 설페이트 또는 히알루론산 또는 산탄검(미국 특허 제7,875,271호, 참고자료에 편입됨)을 함유하는 점안제는 설명된 것과 같이 2가지 이상, 3가지 이상, 4가지 이상, 5가지 이상의 체액 성분으로 강화되고, 그리고 여기에서 설명된 것과 같이 정제된 다클론성 항체들의 운반체 매트릭스로 이용된다. 한 측면에서, 조성물은 눈의 미생물 감염들, 가령, 충혈안(pink eye)을 치료하는데 이용할 수 있다.
경부 점막은 뮤신, 알파-아밀라제, 라이소자임, 락토퍼옥시다제, 알부민, 그리고 베타-마이크로세미노단백질을 함유한다. 매트릭스는 이들 2가지 이상, 3가지 이상, 4가지 이상, 5가지 이상의 성분들과 공간 특이적 결합 분자, 가령, 본 공개 방법들에 의해 제조한 항-박테리아성 또는 항-곰팡이 다클론성 항체들과 함께 복합되어, 조성물내 운반체 매트릭스로 형성된다.
한 측면에서, 본 공개는 투과 물질로써 셀룰로오즈와 복합된 카르복시메틸전분을 함유하는, 물에 고정되는 또는 팽창될 수 있어, 물과 접촉시 거의 즉각적으로 겔을 형성하고, 질에 바로 적용시킬 수 있는 검을 포함하는 조성물을 제시한다. 본 공개의 항체/매트릭스 조성물을 포함하는 정제는 예를 든다면 미국 특허 제4,808,415호(참고문헌에 편입됨)에서 설명되는 것과 같이 카르복시메틸전분 및 셀룰로오즈를 포함한다. 특정 측면에서, 항박테리아성 그리고 항곰팡이성 다클론성 항체들은 매트릭스 안에서 복합되고, 제형화되어 질감염증을 위한 광범위한 범위의 치료를 제공한다. 한 측면에서, 이 조성물은 질의 박테리아성 감염, 가령, 트리초모나스 감염, 또는 곰팡이성 질감염증, 가령, 칸디다 감염을 치료하는데 이용된다.
타액은 경구 강내에 존재하고, 타액선에 의해 만들어지는 점막 분비물이다. 타액은 보호 기능 가령, 조직 피복, 윤활, 가습 및 치아의 재광화(remineralization) 작용을 한다. 타액은 또한 면역학적 활성, 항-박테리아성, 항-바이러스 그리고 항-곰팡이성 활성으로 숙주 방어 기능을 한다. 타액은 또한 소화 효소들과 함께 소화 활성, 덩어리(bolus) 형성 및 맛보는 기능을 한다. 타액은 타액에만 유일한 다양한 단백질들 가령, 히스타틴 및 산성의 프롤린-풍부한 단백질들을 함유한다. 타액은 다른 체액에 존재하는 단백질들, 가령, 라이소자임, 뮤신, 스타테린 및 면역글로블린들을 또한 함유한다. 타액은 혈액 혈장 안에서 유래된 단백질 가령, 알부민 및 Zn-알파-2-당단백질을 함유한다. 소의 타액은 공지의 치료 가치가 있다. (Varshney et al., 1997, Therapeutic value of bovine saliva in wound healing: a histomorphological study., Indian J. Biol. May 1997, 35(5):535-7). 한 측면에서, 타액의 성분들은 예를 든다면, 치약 또는 구강세척액, 또는 경구 점막 투여용 다른 조제물에 유용할 수 있다.
기관지 점막은 뮤신, 알파-아밀라제, 염기성 프롤린-풍부한 폴리펩티드들 (PRPs), 시스타틴, 스타테린, EP-GP, 라이소자임, 베타-마이크로세미노단백질, 및 알부민을 함유한다. 한 측면에서, 본 공개는 공간 특이적 결합 분자와 2가지 이상, 3가지 이상, 4가지 이상의 타액 또는 기관지 분비물의 성분들을 포함하는 운반체 매트릭스를 포함하는 조성물을 제시한다. 한 측면에서, 운반체 매트릭스와 함께 이 조성물은 공간 특이적 결합 분자, 가령, 본 공개에 따라 제조된 항-집단 A 스트렙토코커스(Streptococcus) 다클론성 항체들과 함께 건조 포맷으로 포장된다. 한 측면에서, 건조 제제는 예를 든다면 염 용액에서 재구성되고, 그리고 급성 인후염증의 치료용 목의 분무물질로 투여된다.
다른 운반체 매트릭스는 예를 든다면, 에어로졸화된(흡입된), 안구, 국소 또는 다른 조제물을 위한 다른 사용 환경에서 기능을 하도록 만들 수 있다.
특정 구체예에서, 특이적 결합 분자와 운반체 매트릭스는 상이한 종으로부터 유도된다. 추가 측면에서, 특이적 결합 분자와 운반체 매트릭스는 모두 인간이 아닌 종으로부터 유도된다. 또다른 측면에서, 특이적 결합 분자는 포유동물이 아닌 동물로부터 유도된다. 또다른 측면에서, 운반체 매트릭스는 인간이 아닌 포유동물로부터 유도된다.
제제 및 조성물들
한 구체예에서, 예방접종을 맞은 동물 또는 인공적인 생산 시스템 (가령, 세포 배양물)의 혈장, 혈청, 또는 혈액, 초유, 알, 또는 다른 성분들로부터 항체들을 수거하고, 그 다음 정제하거나 또는 처리하고, 그리고 운반체 매트릭스 가령, 초유에 추가한다. 이 조성물들은 항체 제제의 경구 투여용 운반 매질로 이용된다. 이 방법은 상업적 용도로 역가, 농도 및 지속적인 이용성을 조절하기 위하여 이러한 방식에서 제제용으로 신뢰가능한 규모의 항체를 효과적으로 생산하는 방식을 제공할 수 있다. 한 구체예에서 예방접종을 맞은 동물의 알로부터 항체들을 수거하고, 그리고 알 물질내에서 정제하거나 또는 처리하고 또는 유지되며, 그리고 소의 초유에 추가될 수 있다.
위장의 많은 병원균들을 위한 저렴하고 효과적인 치료가 분명히 필요하고, 그리고 이러한 역할에 경구로 투여되는 항체들이 후보물질이다. 설명된 효과를 보유하는 것에 추가하여, 경구로 투여된 항체들은 일반적으로 비-면역원성이다. 이들은 보고된 부작용이 없이 그리고 필적가능한 섭취된 식품 산물보다 비교적 상이한 반응없이 일반적으로 잘 용인되는 것으로 간주된다. 특히 경구로 투여되는 항체를 함유하는 몇 가지 산물은 FDA로부터 GRAS (Generally Recognized as Safe) 보증을 받았다.
본 발명의 한 구체예는 광범위한 미지의 또는 진단되지 않은 이상으로 인하여 야기된 독소 매개된 설사에 효과적인 투여를 허용하는 목적으로 본 방법에 따라 만들어진 운반체 매트릭스 안에 내장된 광범위한 중화 항체들의 혼합물로 구성된 광범위한 영역의 치료 또는 예방적 항독소 제제다.
본 발명의 한 구체예는 이 방법에 따라 만들어진 광범위한 항-병원균 항체들의 혼합물을 함유하는 운반체 매트릭스 안에 내장된 광범위한 영역의 치료 또는 예방적 항-병원균 제제다.
본 발명의 한 구체예는 이 방법에 따라 만들어진 광범위한 항-어드헤신 항체들의 혼합물을 함유하는 운반체 매트릭스 안에 내장된 광범위한 영역의 치료 또는 예방적 항-어드헤신 제제다.
본 발명의 한 구체예는 이 방법에 따라 만들어진 광범위한 항독소, 항-병원균 및 항-어드헤신 항체들의 혼합물을 함유하는 운반체 매트릭스 안에 내장된 광범위한 영역의 치료 또는 예방적 제제다.
천연 식품 기반 생성물의 이용의 한 가지 중요한 제약은 이 준비물은 천연 과정에 의해 허용되는 결과로 제한된다. 본 발명은 자연에서 정상적으로 획득할 수 있는 생리학적 수준보다 상당히 더 높은 특이적 항체들 및 전반적인 면역 인자들 (제제)의 수준의 선택적 추가를 허용한다. 본 발명은 표적화된 질환, 병원균들, 또는 물질들에 더 큰 특이성을 만들기 위하여 다양한 인자들의 가중을 또한 허용한다.
한 구체예에서, 특이적 결합 분자를 포함하는 제제는 건조 고체 (알 분말) 제제이다. 분말화된 제제는 임의선택적으로 비활성 가스를 적층하여, 밀폐된 갑안에 밀봉된다. 이 제제는 실온, 냉장 또는 냉동 온도에서 연장된 기간동안 보관할 수 있다. 다른 구체예들에서, 건조된 조성물은 경구 투여용 캡슐 또는 정제로 제형화된다. 또다른 구체예에서, 이 제제는 씹을 수 있는 정제로 압착된다.
본 발명의 한 구체예는 이 조성물을 제형화하기 위한 약학적으로 수용가능한 희석제에 관계하는데, 이때 전술한 약학적으로 수용가능한 희석제는 락토즈, 만니톨, 솔비톨, 미정질의 셀룰로오즈, 수크로오즈, 구연산 나트륨염, 인산 이칼슘염,또는 유사한 성질의 다른 성분들로 구성된 군으로부터 단독으로 또는 적합한 이의 조합에서 선택된다; 결합제는 트라가탄 검, 아카시아 검, 메틸 셀룰로오즈, 젤라틴, 폴리비닐 피롤리돈, 전분 또는 유사한 성질의 다른 성분들으로 구성된 군으로부터 단독으로 또는 적합한 이의 조합에서 선택된다; 부형제는 한천-한천, 탄산 칼슘염, 탄산 나트륨염, 규산염, 알긴산, 옥수수 전분, 감자 타피오카 전분, 프리모겔 또는 유사한 성질의 다른 성분들로 구성된 군으로부터 단독으로 또는 적합한 이의 조합에서 선택된다; 윤활제는 스테아레이트 마그네슘, 스테아레이트 칼슘 또는 스테오로트( steorotes), 활석, 고체 폴리에틸렌 글리콜, 라우릴 설페이트 나트륨 또는 유사한 성질의 다른 성분들로 구성된 군으로부터 단독으로 또는 적합한 이의 조합에서 선택된다; 활택제(glidants)는 콜로이드성 이산화 실리콘 또는 유사한 성질의 다른 성분으로 구성된 군으로부터 단독으로 또는 적합한 이의 조합에서 선택된다; 감미제는 가령, 수크로오즈, 사카린 또는 유사한 성질의 다른 성분으로 구성된 군으로부터 단독으로 또는 적합한 이의 조합에서 선택된다; 풍미제는 페퍼민트, 메틸 살리실산염, 오렌지 향, 바닐라 향 또는 임의의 다른 약제적으로 수용가능한 향으로 구성된 군으로부터 단독으로 또는 적합한 이의 조합에서 선택된다; 습윤제는 아세틸 알코올, 글리세릴 모노스테아레이트, 또는 임의의 다른 약제적으로 수용가능한 습윤제로 구성된 군으로부터 단독으로 또는 적합한 이의 조합에서 선택된다; 흡수제는 카올린, 벤토나이트 점토 또는 임의의 다른 약제적으로 수용가능한 흡수제로 구성된 군으로부터 단독으로 또는 적합한 이의 조합에서 선택된다; 지연 물질은 밀랍, 파라핀 또는 임의의 다른 약제적으로 수용가능한 지연 물질로 구성된 군으로부터 단독으로 또는 이의 적합한 조합으로부터 선택된다.
또다른 측면에서, 신생아가 아닌 인간에게 일일 투약량은 특이적 항체들을 정량화하는 임의의 방법으로 표준화된다. 한 측면에서, 이 조성물의 투약량은 제제내 특이적 항-항원 항체의 농도를 평가하기 위하여 ELISA를 이용하여 표준화된다. 한 측면에서, 병원성 감염을 치료하는데 유효한 경구 조성물의 1회 투약량에는 약 0.0001 mg 내지 20 mg; 0.001 mg 내지 15 mg; 0.01 내지 10 mg; 0.05 내지 5 mg; 0.1 내지 1 mg의 혼합된 항원 특이적 결합 분자의 양으로 항원-특이적 결합 분자를 함유한다.
용어 "고체형(solid form)"은 분말, 압착된 정제, 트로키(troche) 또는 캡슐로써 특이적 결합 분자의 건조된 형, 또는 운반체 매트릭스의 건조된 형, 또는 특이적 결합 분자 및 운반체 매트릭스를 모두 포함하는 고체 투약형을 말한다. 한 측면에서, 고체 투약형은 경구 투여를 위한 것이다. 한 측면에서, 분말은 현탁용 제제다. 한 측면에서, 분말화된 건조된 면역 알 및 분말화된 건조된 초유는 밀폐된 갑내에 포장된다. 경구 투여 직전, 갑의 내용물을 액체에 현탁하거나 또는 용해하고, 경구로 투여한다.
한 측면에서, 이 조성물은 투여용 액체 형으로 또한 제공될 수도 있다.
한 측면에서, 한 개의 투약량은 1 g, 2 g, 3 g, 4 g, 5 g, 5 g, 6 g, 또는 7 g의 건조된 면역 알과 1 g, 2 g, 3 g, 4 g, 5 g, 5 g, 6 g, 또는 7 g의 건조된 소의 초유를 함유한다. 한 측면에서, 건조된 투약형의 1회 약량에는 3g의 건조된 면역 알 생성물과 4 g의 건조된 소의 초유를 함유한다. 한 측면에서, 건조된 투약형의 1회 약량에는 2 g의 건조된 면역 알 생성물과 4 g의 건조된 소의 초유를 함유한다. 한 측면에서, 건조된 투약형의 1회 약량에는 4g의 건조된 면역 알 생성물과 4 g의 건조된 소의 초유를 함유한다. 또다른 측면에서, 단일 투약갑내에 내용물을 약 2온스의 물에 용해시키고, 그리고 경구로 투여한다.
경구용 제제는 트로키, 씹을 수 있는 정제, 또는 경질 젤라틴 캡슐로 또한 만들 수 있는데, 이때 활성 성분들은 비활성 고체 희석물(가령, 감자 전분, 락토즈, 미정질의 셀룰로오즈, 탄산 칼슘염, 인산 칼슘염 또는 카올린)과 혼합되며, 또는 연질 젤라틴 캡슐로 만들 수 있는데, 이때 활성 성분들은 물, 오일 매질예를 든다면, 땅통 기름, 액체 파라핀 또는 올리브유와 혼합된다. 분말 및 과립은 가령, 믹스, 유동상(fluid bed) 기구 또는 분무 건조 장비를 이용하여 통상적인 방식으로 정제 및 캡슐로 상기에서 언급한 성분들을 이용하여 만들 수 있다.
다양한 구체예들에서, 본 공개의 제제는 선행 기술에 대해 다양한 장점들을 제공한다. 한 측면에서, 항원-특이적 IgY 및 소의 초유 운반체 매트릭스를 포함하는 본 공개 제제는 관심 항원들이 일단 확인되면 약 6주 이내의 신속한 기간 내에 만들 수 있는 장점을 가진다. 이는 닭 백신접종 프로토콜의 용이한 재생산성 및 표준화를 허용한다. 하나의 특이적 측면에서, 상이한 무리의 닭에게 단일, 혼합된 항원 조제물을 각각 백신접종하고, 그 다음 병원성 감염 치료를 위한 광범위한 영역의 조성물을 위하여 복합한다. 하나의 특이적 측면에서, 세 무리의 닭을 별도의 혼합된 항원 조제물로 백신접종하고, 그 다음 원인 미생물 병원균들에 대한 지식없이 미확인 설사 치료를 위한 광범위한 조성물을 제조하기 위하여 모았다. 이 방법은 이 조성물내 항원-특이적 항체 혼합물을 원한다면 특정 출현, 영역, 또는 계절에 맞게 맞출 수 있는 장점을 가진다. 끝으로, 구체예들에서, 특이적 결합 분자는 신속한 제조 및 장기간 보관을 위하여 온전한 건조된 알로부터 분리시킬 필요는 없다.
또다른 측면에서, 본 공개 조성물들은 신생아가 아닌 대상의 병원성 감염 치료를 위하여 경구 투여에 효과적이다. 신생아가 아닌 유아의 위장관은 여기에서 설명한 것과 같이, 신생아와 비교하여 매우 산성이며, 흡수력이 적다. 본 공개의 예시에서, 이 조성물들은 신생아가 아닌 6개월 내지 5세의 어린이에서 미확인 설사를 치료하는데 효과적이었다. 또다른 측면에서, 본 공개 조성물들은 어른 여행자의 설사를 치료 또는 방지하는데 효과적이다. 운반체 매트릭스는 항원-특이적 결합 분자들과 복합용으로 보호성 및 반응성 매트릭스다. 또다른 측면에서, 본 공개 조성물들은 투여 직전 현탁시키는 분말화된, 고체형으로 제공된다. 한 측면에서, 현탁된, 또는 재구성된 투약형은 병원성 감염 증상을 앓고 있을 때 조차도 유아 및 어린이에게 매우 맛있는 장점을 가진다. 이는 최대 투약량을 병원성 감염을 앓고 있는 대상에게 용이하게 투여하고 복용하게 하는 장점을 가진다.
또다른 측면에서, 본 발명의 조성물들은 병원성 감염의 치료 또는 예방에서 광범위한 수동 면역을 관리하는데 이용될 수 있다. 한 측면에서, 닭의 낮은 수준의 면역화는 운반체 매트릭스와 함께 투여하였을 때, 효과적이고 광범위한 제제를 만들기 위하여 유효량의 항-항원 특이적 결합 분자를 가진 조성물을 제조하는데 충분하다.
병원성 감염의 치료 또는 예방
본 공개의 조성물들은 운반체 매트릭스 안에 내장된 특이적 결합 단백질을 포함한다. 이 조성물들은 적합한 운반체 매트릭스 안에서 특정 면역원적 또는 생물학적으로 또는 면역학적으로 반응 특징들에 적합한 경구, 정맥, 볼, 비강, 점막, 피부 또는 다른 방법을 포함하는 임의의 방법으로 투여될 수 있다. 특이적 구체예는 본 공개 조성물의 경구 투여를 포함한다.
다양한 구체예들에서, 이 조성물은 예방 또는 치료 조성물로 투여된다. 다양한 측면들에서, 이 조성물은 약제적으로 수용가능한 운반체를 포함한다. 다양한 측면들에서, 이 조성물은 폴리머, 코폴리머, 리포좀, 하이드로겔, 또는 피브린을 함유하지 않는다. 다양한 측면들에서, 이 조성물은 미소구체 또는 미소캡슐을 함유하지 않는다. 다양한 측면들에서, 이 조성물은 면역원 또는 항원을 함유하지 않는다. 본 발명의 조성물은 경구 운반, 비강 운반, 안과적(ophthalmic) 운반, 안구(ocular) 운반, 점막 운반, 또는 이의 조합을 통하여 투여될 수 있다.
본 발명의 한 구체예는 경구 투여를 이용한다. 인간 및 동물계 모두에서 항체들, 면역글로블린들, 및 기타 생물학적 면역 인자들의 경구(복용) 투여는 위장계와 연관된 또는 영향을 받은 질환에서 과정, 심각성 및 지속 기간에 측정가능한 효과들을 보유할 수 있는 것으로 설명된다.
광범위한 항체들의 혼합물은 운반체 매트릭스, 가령, 예를 든다면 경구 투여용 초유 안에 내장된다. 초유는 항체 제제에 공조적 보호성 및 효과적인 속성을 제공하도록 작용한다. 항-병원균, 항-독소, 및 항-어드헤신 항체들의 조합을 포함하나 이에 한정되지 않는 항체들의 임의의 조합을 이용할 수 있다.
한 측면에서, 본 공개의 조성물들은 다양한 병원성 감염들을 앓고 있는 환자를 치료하는데 이용한다. 경구 투여용 조성물들 및 제제들은 병원성 감염 치료를 위하여 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 7일, 8일, 9일, 10일, 11일 또는 12일 동안 연속하여 하루에 1회, 2회, 3회 또는 4회 투여할 수 있다. 한 측면에서, 이 조성물은 병원성 감염 치료를 위하여 5일 동안 일일 2회 투여된다. 또다른 특정 측면에서, 이 조성물은 신생아가 아닌 어린이에서 미확인 설사의 효과적인 치료를 위하여, 또는 신생아가 아닌 어린이 또는 어른의 여행자 설사의 치료를 위하여 3일 연속 일일 1회 투여한다. 또다른 측면에서, 병원성 감염의 예방을 위하여 이 조성물을 정규적으로 투여할 수 있다.
점막으로 국소 투여에 의해 점막의 병원성 감염의 치료를 위한 조성물의 경우에, 3 내지 12일 기간 동안 하루에 2 내지 6회 이 조성물을 투여할 수 있다.
바람직한 구체예에서, 본 공개는 신생아가 아닌 인간에서 미확인 설사의 치료에 효과적인 조성물을 제시한다. 이 조성물은 설사병의 몇 가지 원인을 표적으로 하는 높은 특이성 항체들을 만들기 위하여 효과적인 다중클론 항체 생산 전략(알을 통하여 수확하는 항체로 닭 접종)을 이용한다. 특정 구체예에서, 이 조성물은 시판되는 소의 초유인 운반체 매트릭스내 특이적 다클론성 항체들을 포함한다.
바람직한 구체예에서, 본 공개는 미확인 소아 설사의 효과적인 치료를 위한 경제적인 조성물을 제시한다. 이 조성물은 대장균(E. coli), 살모넬라 종(Salmonella spp.), 로타바이러스, 그람 음성 박테리아, 병원균들에 의해 생산된 독소들, 그리고 위장관에서 병원균의 부착 및 콜로니화를 가능하게 하는 어드헤신에 특이적인, 주로 IgY의 다클론성 항체들의 혼합물을 포함한다.
특정 측면에서, 상이한 항원들 또는 상이한 혼합된 항원 조제물로 접종된 세 무리 각각으로부터 건조된 면역 알 생성물의 동량을 포함하는 이 조성물은 시판되는 건조된 비-과다면역 소의 초유의 특정량과 함께 포장된다. 한 측면에서, 각 무리로부터 0.5 내지 3 g. 0.7 내지 2.0 g, 1.0 g, 1.3 g, 또는 1.5 g의 건조된 면역 알 생성물이 단일 투약 갑에 추가된다. 바람직하게는 1.0 g 또는 1.3 g의 각 면역 알 생성물이 단일 투약 갑에 추가된다. 또다른 측면에서, 1 내지 5 g, 2 g 내지 4 g, 1.5 g, 2.0 g, 2.5 g, 3.0 g, 3.5 g, 4.0 g, 4.5 g 또는 5 g의 건조된 초유가 동일한 갑에 추가된다.
사용 전, 갑 또는 샤셋의 내용물은 대략적으로 2 온스의 정제수 또는 일부 다른 경구 액체에 혼합된다. 전제 재구성된 제제는 대상의 경구로 투여된다. 이 조성물은 2 내지 10일간 일일 1회 내지 4회 투여될 수 있다. 특정 구체예에서, 이 조성물은 3일 연속 일일 1회 투여된다. 본 공개는 2일, 3일 또는 4일 동안 일일 1회 본 공개의 조성물을 투여함으로써 미확인 소아과적 설사를 치료하는 방법을 제시한다.
한 측면에서, 본 공개 조성물은 항생제 치료에 부속 요법으로 투여된다. 이 측면에서, 이 조성물은 치료의 첫 3일 동안 하루에 1회 투여될 수 있다. 또다른 측면에서, 본 공개 조성물은 경구 수분 공급 용액 (ORS)과 함께 투여된다. 또다른 측면에서, 본 공개 조성물은 경구 아연 제제와 함께 투여된다. 또다른 측면에서, 본 공개 조성물은 항생제에 저항성인 특정 병원성 유기체의 과다성장을 방지하기 위하여 항생제 치료에 부속으로 투여된다. 실시예에서 상세하게 설명되는 것과 같이, 조성물 및 방법은 미확인 소아 설사의 증상들을 신속하게 해결하는데 효과적이어서, 상당히 감소된 대변 양, 배변 빈도 및 설사 기간을 초래하고, 뿐만 아니라 의사의 보고에 따르면 행복이 상당히 개선되었다.
한 가지 대체 구체예에서, 본 공개 조성물들은 여행자의 설사를 치료하는데 이용한다. TD의 개시는 여행의 첫 주이내에 보통 발생되지만, 여행중 임의의 시기, 그리고 집으로 돌아온 후에도 발생할 수 있다. 위험의 가장 중요한 결정인자는 여행자의 목적지다. 고 위험 목적지는 남미, 아프리카, 동아시아, 그리고 아시아의 개발도상국이다. 특정 고위험군의 사람은 젊은이, 면역억제된 사람, 염증성 장 질환 또는 당뇨병을 가진 사람, 그리고 H-2 차단제 또는 제산제를 복용한 사람을 포함한다. 대부분의 TD는 갑자기 시작된다. 이 병은 보통 대변의 빈도, 양, 그리고 중량의 증가를 초래한다. 대변의 묽어진 농도 또한 공통적이다. 일반적으로, 여행자는 매일 4 내지 5회의 느슨한 또는 물기많은 장 운동을 경험한다. 다른 공통적인 관련 증상들은 메쓰거움, 두토, 설사, 복부 경련, 팽만감, 발열, 절박감 그리고 불안이다.
감염성 물질들은 TD의 주요 원인이다. 박테리아성 장병원균들은 TD의 대략적으로 80%의 원인이다. 조사한 국가들에서 단리된 가장 공통적인 원인 물질은 장독소생성성 대장균 (ETEC)이었다. ETEC는 관련 경련과 낮은 등급의 발열 또는 열이 없이 물변을 만든다. ETEC 및 다른 박테리아성 병원균들이외에, 다양한 바이러스 및 기생충성 장 병원균들 또한 잠재적 원인 물질들이다.
한 측면에서, 본 공개 조성물은 여행자 설사의 항생제 치료의 대안으로 또는 부속으로 3일 연속 일일 1회 대상에게 투여한다. 제한된 현지 연구 증거는 첫 투약 후 24 또는 48시간 이내 설사 증상의 개선을 제시한다. 대안으로, 본 공개 조성물의 하루에 2회 투약량을 1일째에 투여하고, 그 다음 2일째와 3일째 단일 투약량을 투여한다. 한 측면에서, 여행자 설사를 예방하기 위하여 본 공개 조성물은 하루걸러 하루 또는 일주일 걸러 일주간 일정으로 투여하거나, 또는 감소된 투약 일정으로 투여한다.
또다른 대체 구체예에서, 본 공개 조성물들은 예를 든다면, 프로바이오틱 투여 전, 대상의 위장 세균총 관리를 위한 "프레바이오틱(prebiotic)"으로 이용한다. 여기에서 사용된 것과 같이, 용어 "프레바이오틱(prebiotic)"은 조성물 및/또는 대상의 행복 및 건강에 장점들을 부여하는 위장의 세균총 활성 모두에 특이적 변화를 허용하는 조성물을 말한다. 한 측면에서, 이 조성물은 하나 이상의 바람직하지 못한 박테리아 균주들을 감소 또는 제거하기 위하여 위장의 세균총을 관리하는데 유용한다. 한 측면에서, 하나 이상의 바람직하지 못한 박테리아 균주들을 감소 또는 제거하기 위하여 위장 세균총의 관리용 맞춤 항-항원성 면역글로블린 조성물이다. 또다른 측면에서, 이 조성물들은 전통적인 프레바이오틱에 부속물으로 이용된다. 추가 측면에서, 본 공개 조성물은 가용성 섬유를 더 포함한다. 추가 측면에서 조성물은 단독으로 세균총 관리를 위하여 이용한다.
또다른 측면에서, 본 공개는 하나 이상의 바람직하지 못한 박테리아 균주들을 감소 또는 제거하기 위하여 본 공개 조성물을 투여하고, 이어서 하나 이상의 바람직한 박테리아 균주를 도입하기 위하여 프로바이오틱을 투여하는 단계를 포함하는 대상에서 위장의 세균총 관리 방법을 제시한다. 또다른 측면에서, 본 공개 조성물은 항생제에 저항성인 특정 병원성 유기체의 과다성장을 방지하기 위하여 항생제 치료에 부속으로 투여된다.
실시예 1. 설사 치료용 조성물들
설사는 박테리아성, 바이러스, 원생동물 및 기생충 감염들을 포함하는 광범위한 원인으로 인한 증상이다. 박테리아성 설사는 대장균(Escherichia coli), 살모넬라(Salmonella), 비브리오 콜레라(Vibrio cholerae) 및 파라헤모리티쿠스(parahemolyticus), 쉬겔라(Shigella), 캄플로박터(Campylobacter), 에르시니아(Yersinia) 및 기타 다양한 형태를 포함하는 다중 유기체들에 의해 유도된다. 바이러스성 소아 설사는 로타바이러스에 의해 흔히 야기되지만, 몇 가지 다른 바이러스들에 의해서도 또한 야기될 수 있다.
설사에는 다중 원인 유기체들이 있는 것은 알려진 사실이다. 이들 원인 유기체들은 구조적으로 관련된 독소들을 생산하는 공통 클러스터로 조직화될 수 있는데, 임상적으로 효과적인 역가를 가진 제제에 혼합하였을 때 일련의 광범위한 중화 항체들이 만들어질 수 있고, 독소-매개된 설사의 광범위한 유기체-독립적 치료 중재로 이용될 수 있다.
간략하게, 설사의 원인 유기체에 특이적 항체들은 항원을 접종받은 닭에서 생성된다. 면역 알들을 수거하고, 그리고 전체 알은 저온살균하고, 분무 건조하여 분말형을 얻는다. 시판되는 소의 초유는 분말화된 형태로 혼합된다. 두 가지 분말이 단일 투약 갑에 순차적으로 추가되고, 경구 제제를 위한 건조 형태에 분포된다. 투여 전, 분말화된 경구 제제는 경구 섭취전 소량의 물과 혼합된다.
이 치료는 여기 실시예들에서 설명된 것과 같이, 환자들에게 수동 면역을 부여한다. 치료의 성질은 관련된 위험 인자들을 항체들이 수확된 원천으로부터 음식을 섭취하는 것과 필적하게 만든다(가령, 위험 인자들은 알 및 한잔의 우유를 먹는 것과 유사할 것이다). 이는 현재 이용가능한 대체 의학보다 독성이 적은 효과적인 치료다.
실시예 1A. 5가지 대장균(E. coli) 균주들(대장균(E. coli) 흡착 털 항원들 F41, 97P, F19 및 K99을 포함하는 4가지 ATCC 균주들과 젖으로부터 유도된 야생형 대장균(E. coli))으로부터 유도된 정제된 항원들을 닭들에게 개별적으로 접종하였다. 각 닭은 오직 하나의 항원을 접종받았다. 닭들은 3주간 주당 1회 접종받았다. Freund의 어쥬번트를 첫 접종에 이용하고, 이어서 Freund의 인컴플리트 어쥬번트를 제 2 및 제 3 접종에 이용하였다. 접종시 좌우 가슴에 두 대를 주사하였다. 알들은 별도로 보관하였다; 알들을 수거하였고, 섬광 저온살균하였고, 분무 건조하였다. 5가지 항체 조제물 각각은 동일 분량으로 혼합하였다. 건조된 알 분말 항-대장균(E. coli) 항체 조제물은 약 2년간 냉동 보관하였다.
로타바이러스, 코로나바이러스 및 대장균(E. coli) 항원들을 함유하는 혼합 항원 조제물로 제 2 무리의 닭에게 접종하였다. 상기와 같은 동일한 접종, 수거 및 알 처리 프로토콜을 이용하였다. 건조된 알 분말 항-설사 항체 조제물은 1.5년간 냉동 보관하였다. 항체 조제물을 특징화하기 위하여 ELISA를 이용하였다.
건조된 항-대장균(E. coli) 항체 조제물과 건조된 항-설사 항체 조제물 각 1g은 단일 투약 갑내에 시판되는 건조된 소의 일반(full-fat) 초유 3g 또는 4g에 추가하였다.
실시예 1B. 각각 상이한 혼합된 항원 조제물로 세 무리 닭에게 개별적으로 접종하였다: 제 1 항원 조제물은 로타바이러스 (혈청형 G6 및 G10), 코로나바이러스, K99 털 흡착 인자를 가진 장독소생성성 대장균(E. coli) 균주들, 그리고 클로스트리디움 페르프린겐스 유형 C 톡소이드와 어쥬번트를 함유한다); 제 2 조제물은 K99, K88, 987P 또는 F41 흡착 인자들을 보유하는 장독소생성 대장균(E. coli) 균주를 함유한다; 그리고 제 3 혼합된 항원 조제물은 다양한 대장균(E. coli) 내독소와 함께 어쥬번트를 함유한다. 세 무리 각각은 오직 단일 혼합된 항원 조제물만 제공받았다. 알들을 수집하고, 세척하고, 파괴하고, 저온살균하고, 분무 건조 또는 열 건조시켜 세 가지 건조된 면역 알 생성물을 만들었다. 특이적 IgY 활성을 위하여 ELISA에 의해 건조된 알 생성물을 임의선택적으로 평가하였다. 세 가지 건조된 면역 알 생성물 각각의 동량을 단일 투약 갑내에 3 g 또는 4 g의 건조된 초유와 복합시켰다. 하기에서 설명하는 것과 같이, 2 g, 3 g, 또는 4 g의 복합된 양의 건조된 면역 알 생성물을 단일 투약 갑에 이용하였다. 한 측면에서, 시판되는 건조된 초유는 백신의 항원들에 대해 특이적 활성을 나타내지 않았다.
실시예 1C. IgY 생산을 위한 닭의 면역화
다음의 면역화 프로토콜은 Gallus Immunotech, Inc. 프로토콜을 개작하였으며, 그리고 IgY 다클론성 항체들의 생산에 이용할 수 있다. 기준 대조군으로 삼기 위하여 면역화전에 몇 개의 알을 임의선택적으로 수거하였다. 소 또는 돼지용 혼합된 항원 조제물을 이용한다면, 투여전 1:2, 1:4, 1:8, 또는 1:16로 희석한다. 0일째, Freund의 컴플리트 어쥬번트와 함께 0.02 내지 0.5mg의 항원을 암탉에게 주사한다. 닭의 가슴 조직의 여러 부위에서 피하 또는 근육내로 주사할 수 있다. 항원/어쥬번트 혼합물의 총 용적은 이 용적의 1/2 내지 2/3의 어쥬번트와 함께 약 1 mL일 수 있다. Freund의 인컴플리트 어쥬번트와 항원의 첫 양의 약 절반으로 14일째, 21일째 그리고 28일째 전형적으로 면역화를 반복한다. 전형적으로, 특이적 항체는 약 30일 시점에 알에서 탐지될 수 있다. 항체의 장기적 생산을 위하여, 매 2개월마다 암탉을 부스터시킨다. 알들은 IgY의 프로세싱 및/또는 정제전 냉장 보관할 수 있다. 한 측면에서, 프로세싱 전 또는 정제전 최대 한달 또는 최대 2달까지 알들을 냉장 보관에 유지시킬 수 있다. 또다른 측면에서, 적절한 양의 항원을 이용하여, 오리, 거위, 타조, 메추라기 또는 칠면조 알에서 유사한 방식으로 IgY를 만들 수 있다.
실시예 2. 클로스트리듐 디피실 ( Clostridium difficile )을 위한 섭취된 항체 치료
한 구체예에서, 본 발명 방법들과 조성물들은 대부분의 사람들에게 자연적으로 존재하는 세균, 클로스트리듐 디피실(C. difficile)을 치료하는데 이용된다. 클로스트리듐 디피실(C. difficile)의 집단 수준은 장의 다른 자연적인 세균총에 의한 제어하여 유지된다. 또다른 의학적 이상으로 인하여 투여된 항생제들이 장의 자연적 세균총을 감소시켜, 클로스트리듐 디피실(C. difficile) 집단이 억제되지 않도록 증대를 허용할 때, 클로스트리듐 디피실(C. difficile) 감염들이 환자에게서 대개 발달된다. 클로스트리듐 디피실(C. difficile)의 많은 균주들은 특화된 항생제들에 의해 치료될 수 있지만, 점점 더 많은 수의 클로스트리듐 디피실(C. difficile) 균주들은 항생제 치료에 저항성이 있다. 이는 환자에게 지루하고 회복이 어렵게 만들고, 특정 환경에서는 생명을 위협할 수도 있다. 수동 면역을 부여하는 복용된 항체로 클로스트리듐 디피실(C. difficile)을 중화시키는 공정은 클로스트리듐 디피실(C. difficile) 집단 수준을 조절할 수 있도록 하여, 자연적인 장의 세균총 균형이 복원되도록 한다.
로타바이러스 및 그람-음성 박테리아가 원인이 되는 경우 항-설사 제제에서, 클로스트리듐 디피실(C. difficile) 또는 이의 독소들에 결합하는데 특이적으로 제형화된 운반체 매트릭스내에 내장된 항체는 효과적인 치료 방법이다. 이 제제는 진행중인 감염을 치료하거나, 또는 이러한 감염이 발생하는 것을 방지하는데 이용될 수 있다. 따라서, 이 치료는 단독으로 투여되거나, 또는 항생제와 동시에 투여될 수 있다. 이 치료는 클로스트리듐 디피실(C. difficile) 사건으로부터 회복되는 환자에게 이득이 될 뿐만 아니라, 클로스트리듐 디피실(C. difficile)이 발생될 고 위험에 처한 환자들에게 예방책으로 투여될 수 있다.
클로스트리듐 디피실(C. difficile)을 중화시키는 항체들은 운반체 매트릭스 안에 수용된다(단백질 및 효소들의 혼합물은 장내에서 항체를 "활성화시키는" 의도이며, 뿐만 아니라 유용한 2차 면역, 보호 또는 영양분을 제공하려는 의도이다). 한 구체예에서, 이 항체들은 혼합된 항원 조제물에 함유될 수 있는 또는 함유되지 않은 항원, 또는 항원 조합(더 강력한 면역 반응을 유도하기 위하여 어쥬번트와 잠재적으로 복합된)을 동물에게 주사 또는 접종함으로써 생성된다.
한 측면에서, 이 항원은 클로스트리듐 디피실(C. difficile) 항원 또는 독소로부터 수득하거나 또는 유도한다. 또다른 측면에서, 항원들의 조합은 클로스트리듐 디피실(C. difficile)로부터 유도된 많은 항원들 또는 독소중 하나와, 하나 이상의 추가 바이러스 항원들을 함유한다. 또다른 측면에서, 항원들의 조합은 클로스트리듐 디피실(C. difficile)로부터 유도된 하나 이상의 항원들 또는 독소들과, 하나 이상의 추가 박테리아성 항원들 또는 독소들을 함유한다. 또다른 측면에서, 항원들의 조합은 클로스트리듐 디피실(C. difficile)으로부터 유도된 하나 이상의 항원들과, 하나 이상의 추가 원생동물의 항원들을 함유한다. 또다른 측면에서, 항원들의 조합은 클로스트리듐 디피실(C. difficile)로부터 유도된 하나 이상의 항원들과, 하나 이상의 추가 곰팡이성 항원들을 함유한다.
그 다음 항체들은 동물로부터 동물 생성물, 가령, 젖, 알, 또는 초유로부터 수득되거나, 단리되거나 또는 유도되고, 또는 동물 가령 혈청, 혈장으로부터 직접적으로 수거된다. 특정 측면에서, 항체들은 항원, 항원들의 조합, 또는 백신으로 암탉을 접종하고, 그리고 접종을 맞은 닭의 전체 알, 또는 알의 난황으로부터 수득되거나, 유도되거나, 또는 정제된다.
이 조성물은 클로스트리듐 디피실(C. difficile) 감염들의 치료를 돕거나, 또는 클로스트리듐 디피실(C. difficile) 감염에 대항하여 예방하려는 의도를 가진다. 예를 든다면, 이 물질은 운반체 매트릭스 (예를 든다면, 초유)에 내장된, 클로스트리듐 디피실(C. difficile)을 특이적으로 표적화하는 항체들로 구성된다. 수거 후, 이 항체들을 분말화시킬 수 있다. 운반체 매트릭스 또한 분말화시킬 수 있다. 두 분말을 철저하게 혼합하거나 또는 단일 투약 갑, 또는 바이알에 별도로 추가하고, 건조된 형태로 분포될 수 있다. 바람직한 투여 방법에서, 이 물질은 복용에 의해 경구로 투여될 것이다. 복용되도록 하기 위하여, 복용 직전에 분말화된 물질을 소량의 액체, 가령, 물, 우유, 쥬스, 또는 전해질 용액에 혼합될 것이고, 그 다음 의사가 지시한 바와 같이 복용된다. 다른 운반 방법들 또한 고려된다.
클로스트리듐 디피실(C. difficile) 감염에 대한 현재 치료는 항생제 요법에 집중된다. 그러나, 강력한 항생제들이 감염의 원인인 경우, 그리고 항생제들에 대한 저항성이 발생된 경우들에서, 현재 이용가능한 대안 치료는 거의없다. 본 구체예는 독성 항상제보다는 자연적 면역 기전을 이용함으로써 클로스트리듐 디피실(C. difficile)을 중화시키려고 한다. 클로스트리듐 디피실(C. difficile) 집단 수준을 감소시키면서 장내 자연적으로 생성되는 세균총의 성장을 허용하는 장점을 가진다.
항체들의 효과를 강화시키기 위하여 운반체 매트릭스내에 내장된 항체들의 조합은 임의의 클로스트리듐 디피실(C. difficile) 질환 치료에 현재 이용되지 않는다. 본 방법들은 환자들에게 수동 면역을 부여한다. 이 치료의 본질은 관련 위험 인자들을 이 항체들이 수거되는 원천으로부터 음식을 섭취하는 것에 필적하도록 만든다(가령, 위험 인자들은 알 및 한 잔의 우유를 먹는 것과 유사할 것이다). 이는 현재 이용가능한 대체 약물보다 독성이 적은 효과적인 치료다.
한 측면에서, 선택된 항체들은 수득되고, 정제되고, 단리되며, 그리고 분말화된 형태로 제조된다. 또다른 측면에서, 선택된 항체들은 정제되거나, 또는 단리되지 않고, 온전한 생성물로 처리된다. 예를 든다면, 접종을 맞은 닭으로부터 수득된 온전한 알의 내용물은 가공되는데, 가령 추가 정제 단계없이 저온살균되고, 그리고 분말화된 형태로 제조된다. 활성화 효소/단백질 혼합물(예를 든다면, 초유를 함유하는) 또한 분말화된 형태로 제조된다. 두 가지 분말을 철저하게 혼합하고, 경구 제제를 위하여 건조된 형태로 분포된다. 투여 전, 분말화된 경구 제제는 소비전 소량의 물과 혼합된다.
이 치료는 환자들에게 수동 면역을 부여한다. 이 치료의 본질은 관련 위험 인자들을 이 항체들이 수거되는 원천으로부터 음식을 섭취하는 것에 필적하도록 만든다(가령, 위험 인자들은 알 및 한 잔의 우유를 먹는 것과 유사할 것이다). 이는 현재 이용가능한 대체 약물보다 독성이 적은 효과적인 치료다.
실시예 3. 헬리코박터 피로리( Helicobacter pylori )를 위한 복용 항체 치료
헬리코박터 피로리(H. pylori)는 위장 영역에 거주할 수 있는 그람-음성 박테리아다. 일반적으로 헬리코박터 피로리(H. pylori)는 십이지장 및 위 궤양 그리고 아마도 위암과 연관된 것으로 본다. 헬리코박터 피로리(H. pylori)는 중성에 더 가까운 pH 환경을 가지는 상피 세포 표면의 점막 층으로 파고들어 위 내강의 산성 환경을 회피할 수 있다. 헬리코박터 피로리(H. pylori)는 상피 세포의 막 연합된 지질 또는 탄수화물에 결합하기 위하여 어드헤신을 만들 수 있다. 위 내부 영역에서 헬리코박터 피로리(H. pylori)의 콜로니화로 위의 장기적인 염증인 만성 위염을 초래할 수 있다. 소화성 궤양의 주요 원인은 헬리코박터 피로리(H. pylori) 감염이다.
헬리코박터 피로리(H. pylori)에 대항하는 선택된 항체들을 수득하고, 그리고 분말화된 형태로 제조한다. 활성화 효소/단백질 혼합물(예를 든다면, 초유를 함유하는) 또한 분말화된 형태로 제조된다. 두 가지 분말을 철저하게 혼합하고, 또는 단일 투약 갑 또는 바이알에 별도로 추가하고, 그리고 경구 제제를 위하여 건조된 형태로 분포된다. 투여 전, 분말화된 경구 제제는 소비전 소량의 물과 혼합된다.
이 치료는 환자들에게 수동 면역을 부여한다. 이 치료의 본질은 관련 위험 인자들을 이 항체들이 수거되는 원천으로부터 음식을 섭취하는 것에 필적하도록 만든다(가령, 위험 인자들은 알 및 한 잔의 우유를 먹는 것과 유사할 것이다). 이는 현재 이용가능한 대체 약물보다 독성이 적은 효과적인 치료다.
실시예 4. 임상적 연구-미확인 설사에서 효과
광범위한 원인균 및 치료 섭생을 지시하기 위한 진단 테스트의 제한된 이용성으로 인하여 설사의 효과적인 광범위한 치료는 상당한 난제이다. 심각한 설사의 경우 현재 표준 중재는 항생제들과 경구 수분 공급 염의(ORS) 편재 투여를 포함한다. 그러나, 이 방법은 제한적인 효과를 보여주었고, 그리고 항생제 저항성 박테리아 균주들의 발달을 조장하였다.
실시예 4A. 현지 연구 (시험) 1 및 2.
미확인 설사의 치료 또는 해결을 가속화시킴에 있어서 실시예 1A의 제제의 내성 및 효과를 평가하기 위한 임상 연구들을 실시하였다. 제 1 개방, 단일-중심의, 비-비교성 연구에는 6개월 내지 5세 사이의 남녀의 소아 설사를 가진 총 63명의 소아환자들이 등록되었다. 이 연구는 항생제 및 ORS가 투여된, 실시예 1A의 경구제제를 제공받은 시험군 A, "시험 1"의 임상적 결과를 항생제와 ORS만을 제공받은 대조군 집단 B와 비교하였다. 상이한 계절적 조건하에 실시예 1A의 제제를 테스트하기 위하여 추적 연구에서 제 2 테스트 군 AA, "시험 2"에는 33명의 환자들이 등록되었다.
모든 참가 소아 환자들은 5점 등급 상에서 "심각한" 또는 "심한" 설사 프로파일(등급 4 또는 5)을 나타내었다. 소아 설사의 원인 물질 또는 병인에 대해 진단적 차이는 없었다. 혈액성 쌀뜨물 대변을 가진 환자들을 제외시켰다. 추가로, 우유, 닭 또는 알 생성물에 대해 공지의 알레르기가 있는 환자들을 제외시켰다.
[표 1]
Figure 112018128625120-pat00001
등록된 어린이(n=63)를 두 집단으로 나눈다: 실험군 연구 1, "집단 A" (34명의 등록된 어린이; 29명이 시험 완료), 음성 대조군 "집단 B", (29명의 등록된 어린이; 28명이 시험 완료), 그리고 연구 2 "집단 AA"(31명이 등록됨). 항생제 및 ORS를 제공받은 제 2 대조군 집단 "집단 BB"은 집단 AA와 동시에 음성 대조군으로 이용하지만, 그러나, 그 결과들은 도면에서 생략한다.
각 시험 군은 2 g의 복합된 알 분말과 4 g의 초유를 물과 혼합하여, 3일 연속 하루에 1회 경구 투여로 제공받았다. 각 집단을 관찰하였고, 5일간의 데이터를 수집하였다. 집단 A는 참석 소아과의에 의해 결정된 바와 같이, 항생제들 및 경구 수분 공급 보충물(ORS)의 표준 섭생에 추가하여 실시예 1의 조성물을 제공받았다. 집단 B는 항생제와 ORS의 표준 섭생으로 치료된다. 계절성을 시험하기 위하여 연구 1과 연구 2 사이에 6개월의 시간 경과를 허용하였다. 두 시험들 모두 동일한 연구 센터에서 실시하였다. 각 집단에서, 소아과 주치의는 사안별로 항생제 및 ORS 처방을 결정하였다(표 2).
[표 2]
Figure 112018128625120-pat00002
실시예 1A의 조성물은 5 gram의 분말의 단일 투약 사셋에 포장된다. 이 조성물은 경구로 투여되었고, 한 개 갑은 대략적으로 2 온스의 음용수에 재현탁된다. 재현탁이 완료된 직후 한 번의 세팅에서 환자들은 전체 현탁액을 마시도록 요구받았고, 이 프로토콜은 모든 경우에 적용되었다.
각 환자에서 측정하였을 때, 본 실시예에서 맡은 매개변수들에는 배변 빈도, 대변 농도, 및 의사가 평가하는 행복이 포함되었다. 배변 빈도는 24시간 동안 병원 또는 보호자가 보고한 설사성 장 운동의 횟수다. 대변 농도는 1-5 등급의 농도로써, 1은 정상을, 그리고 5는 액체를 나타낸다. 의사들이 평가한 행복은 전체적인 상태를 1-5등급으로 나타내는 것으로, 1은 건강한 아이의 정상적인 매개변수들을 나타내고, 5는 매우 아픈 아이를 나타낸다.
이 시험의 주치의들은 6일 일정에 걸쳐 설명된 3가지 매개변수들을 측정함으로써 전형적으로 환자의 진행의 경험을 제공하도록 요청받았다. 보고된 값을 각 매개변수에 대해 하나의 예측된 환자 진행 기준에 통합시켰다. 환자들은 의사의 경험에 근거한 예상된 결과에 대해 개선, 그리고 동시에 음성 대조군에 비교하여 개선에 대해 평가받았다.
데이터 분석은 MS Excel 및 Matlab으로 실시하였다. 통계학적 유의성은 Chi-square 테스트로 계산하였고, p-값이 <0.05인 경우 유의적인 것으로 간주한다. 도 1 내지 3에 결과를 나타낸다.
실시예 1A의 조성물을 제공받은 환자에서 최초 투약 24시간 이내에 급격한 개선이 관찰되었다. 최초 투약후 48시간 이내에 일반적으로 환자들은 정상 수준 또는 정상에 가까운 수준으로 안정화되었다.
도 1에 나타낸 것과 같이, 24 시간 기간내 설사성 장 움짐임의 평균 수는 실시예 1의 조성물의 최초 투여후 집단 A (시험 1)에서 9에서 2로 감소되었다. 집단 AA (시험 2)는 10에서 3으로 유사한 감소를 나타내었다. 대조적으로, 집단 B (음성 대조군)에서 동일한 시간 동안 평균 발생 횟수는 11에서 10으로 감소되었다. 집단 A 및 AA (시험 1 및 2)에서 평균 발생 횟수는 3일째부터 2에서 일정하게 유지되었으며, 반면에 집단 B는 5일 시점에 24시간 당 6회를 나타내어 결과적으로 감소되었다. 집단 A에서, 실시예 1의 조성물로 치료 24시간 이내에 배변 빈도 비율은 거의 정상 수준, 2.32±2.48으로 회복되었고, 대조군 집단과 비교하였을 때 위장 증후 기간내 86% 이상 감소되었다(P<0.001). 48시간 이내에 배변 빈도 비율은 2.14±2.19로 개선되었다. 집단 AA에서 빈도 비율은 유사한 안정화 비율을 나타내는데, 24시간 이내에 2.56 +/-0.68로 개선되었고, 48시간 이내에 2.00 +/- 0.45로 개선되어, 대조군과 비교하여 뚜렷하게 개선되었다(P<0.001)
도 2에서 보여준 것과 같이, 초기 대변 농도는 모든 환자에서 액체였다. 집단 A 및 집단 AA 대변 농도는 실시예 1의 조성물의 첫 투역후 24시간 이내에 거의-정상 수준으로 개선되었다. 대조군 집단 B 농도는 개선되었지만, 24시간 이내에 여전히 액체였고, 증상은 전체 관찰 기간 동안 완전하게 해결되지 않았다. 집단 A는 48시간 이내 그리고 연구 나머지 동안에 정상적인 대변 농도를 가졌고, 집단 B는 3일 시점에 대개 액체로 개선되었다. 집단 B는 결국 6일 시점에 대변의 농도가 거의-정상 수준에 이르렀고, 집단 A의 대변 농도는 3-6일 시점까지 정상을 유지하였다.
놀라운 것은 실시예 1A의 조성물로 치료후 24시간 이내에, 대변 농도 비율이 집단 A의 경우 적당한 수준, 2.05±1.02로 회복되었고, 집단 AA의 경우 1.96 +/- 0.61로 회복되었고, 대조군 집단과 비교하였을 때 위장 증상 기간 동안 86% 이상 감소되었다(P<0.001). 48 시간 이내에, 집단 A 대변 농도는 거의 정상 수준인 1.41±0.9으로 더 떨어졌고, 그리고 집단 AA 수준은 1.17 +/- 0.37이었다.
도 3에서 나타낸 것과 같이, 이 연구에 등록된 모든 환자들은 주치의들의 판단에 의해 최대 심각한 탈수, 구토 및 낮은 반응성을 포함하여 심각하게 아픈 것으로 평가되었다. 집단 A 및 집단 AA의 환자들은 실시예 1의 조성물의 첫 투약 후, 하룻밤 동안 대략적으로 2의 평균 행복 평가 수준(P<0.001)으로 개선되었다. 24 시간에서, 집단 B 환자들은 여전히 심각하게 아팠다. 집단 A 및 집단 AA 환자들은 48시간에서 거의 정상으로 개선되었고, 지속적으로 개선되어 3일 시점에 정상적인 상태를 얻었고, 집단 B 환자들은 개선되었지만, 여전히 매우 아픈 상태가 유지되었다. 4-6일 시점까지, 집단 A의 환자들은 충분히 회복된 상태를 유지하고, 집단 B의 환자들은 1차원적으로 개선되었지만; 그러나 연구가 끝날 때 여전히 어느정도 아픈 상태를 유지하였다.
전반적으로 의사들이 보고한 행복은 하루 이내에 거의 건강한 수준으로 회복되었고, 집단 A는 초기 값 4.46±0.51에서 이 집단의 경우 정상 매개변수 범위내로 간주되는 1.9±0.9로 떨어졌다. 집단 AA는 유사한 결과를 나타내었는데, 4.3 +/- 0.46의 초기 수준에서 2.03 +/-0.49로 떨어졌다. 이는 대조군 집단과 비교하였을 때 아픈 기간 동안 종합적으로 86% 감소를 나타낸다(p<0.001). 48 시간 이내, 집단 A의 경우에 의사들이 보고한 행복은 1.26±0.83, 집단 AA의 경우 1.4 +/- 0.49로 더 개선되었다.
1차 시험 평과와는 독립적으로 로타바이러스의 예상된 유행에 대해 시험 경우의 정상적인 분포를 확인하는 점검이 집단 A (시험 1)에서 이루어졌다. 집단 A에서 29명중 26명의 실험 환자와 집단 AA에서 31명중 24명의 환자로부터 대변 시료를 수집하였고, 그리고 확립된 상업적인 응집 분석(Slidex Rota-kit, bioMerieux, France)을 이용하여 독립적인 추천 실험실에서 테스트하였다. 집단 A에서 채취한 26명 환자중 7명은 로타바이러스에 양성으로 테스트된다(테스트된 집단의 27%). 이 소아적 로타바이러스 감염 유행은 계절에 대한 예상 결과와 연구에서 인정된 설사의 중증도와 일치한다. 집단 AA에서 24명중 4명은 양성으로 테스트되었다(테스트된 집단의 17%). 집단 AA의 로타바이러스의 유행은 예상한 것보다는 다소 낮았다. 따라서, 실시예 1A의 조성물은 로타바이러스 감염에 의한 설사를 포함한, 미확인 설사를 치료하기 위하여 투여될 때 효과적인 것으로 간주되었다.
로타바이러스 양성 집단(RV)과 비-로타바이러스 양성 집단 (Non-RV) 사이에 실시예 1의 조성물에 대해 반응의 유사성을 더 판단하기 위하여, Pearson의 생성물-모멘트 상관 계수("R"로 나타냄)를 이용하였는데, 이의 강도는 -1 내지 1의 범위로 나타낸다. R의 계산은 각 시점에서 비-RV 및 RV 집단의 평균을 이용하였고, 6일간에 걸쳐 각 집단의 평균 값으로부터 R-값을 계산한다.
의사들이 평가한 행복 데이터세트에 대한 비-RV 집단과 RV 집단 연합의 R 값은 0.99029로, 두 집단 간에 매우 강력한 1차원적 관계와 공분산을 나타낸다. 비-RV 및 RV 환자들의 거동은 서로 매우 예측되는 것이며, 그리고 6일에 걸친 치료와 관찰 기간 동안 치료에 대해 매우 유사한 반응들을 보여주었다. 이들 결과는 로타바이러스 매개된 설사에서 실시예 1의 조성물의 효과를 확인시킨다(표 3).
[표 3]
Figure 112018128625120-pat00003
이 연구에 등록된 96명의 환자중 88명이 총 6일간의 연구를 끝마쳤다. 집단 A에서는 4명의 환자들이 그만두었고, 집단 AA에서는 2명의 환자들이 그만두었는데, 이들의 장염이 공동-병적이었거나, 또는 다른 상태로 인한 결과라고 의사들이 판단하였을 때 그만두게 되었다; 표 4에 나타냄. 집단 A의 한 명은 실시예 1의 조성물의 제 2 투약 후 환자가 그만두기에 충분하다고 환자의 보호자가 결정하였을 때 시험에서 빠졌다. 그리고 집단 B에서 한 명의 환자는 기록의 오류로 그만두었다(표 4).
[표 4]
Figure 112018128625120-pat00004
이들 결과는 실시예 1의 조성물이 미확인 소아 설사에 안전하고 효과적인 치료를 제공할 수 있다는 것을 암시한다. 설사 기간 및 심각성의 감소는 소아 설사와 연관된 이환율 및 치사율의 상당량을 방지할 것이며, 그리고 소아 환자들에서 설사-연관된 공동-사망율의 발생을 방지하는데 또한 도움이 될 수 있다.
실시예 1의 조성물로 치료 하루 후, 소아과 의사는 시험을 마친 환자 100%가 전반적인 행복의 실질적 개선을 보고한다. 놀라운 것은 질환의 기간 및 중증도 모두에서 상당한 감소는 실시예 1의 조성물로 치료 2일 후 설사 기간이 86% 감소되었다. 독립적인 로타바이러스 테스트는 이들 경우에서 실시예 1A의 조성물의 효과를 확인하였다.
실시예 1A의 조성물은 통상적인 요법 단독과 비교하였을 대 병의 기간 및 중증도를 상당히 감소시켜, 미확인 설사의 치료에 매우 효과적인 것으로 나타났다. 실시예 1A의 조성물은 보고된 부작용 없이 잘 용인된다. 본 연구 결과들은 빠듯한 현장 환경내에서 소아 설사의 치료에 중요하고 확고한 개선을 나타낸다. 이들 결과들은 본 발명의 조성물이 미확인 설사의 가장 심각한 증상으로부터 환자를 보호함으로써 추가 기전 및 생화학의 연구에 대한 기회를 제공한다.
실시예 4B. 현지 연구 (시험) 3.
제 3 연구 시험은 시험 3에 등록된 140명의 치료 환자와 30명의 음성 대조군 환자로 실시하였다. 치료를 받은 부분에서 조성물의 일일 투약량은 각 무리가 하나의 시판되는 설사 또는 유선염 백신으로 별로 접종을 맞은 세 무리 각각으로부터 건조된 전체 알의 동일 부분 총 2g과; 4 g의 건조된 소의 초유 (ES204A; MS204A); 또는 각 무리가 하나의 시판되는 설사 또는 유선염 백신으로 별로 접종을 맞은 세 무리 각각으로부터 건조된 전체 알의 동일 부분 3g과 4g의 건조된 소의 초유 (MS304A)를 함유한다. 추가로, 알은 분무 건조(S) 또는 열 건조(T)에 의해 처리되었다. 무리들은 미국내 두 군데 지정학적으로 다른 지역(M) 또는 (E)에 수용되었다.
시험 3은 상기에서 설명한 바와 같이 실시되었다; 환자들은 3일 연속 하루에 한번 이 조성물들로 치료를 받았다. 시험 1과 2에 비교하여 시험 3의 평균 결과들을 도 4-9에 나타낸다. 15명의 환자로 시험 3의 작은 부분은 2일간 하루에 한 번 2 g의 건조된 알과 4 g의 초유로 치료를 받았고, 그리고 각 측정된 매개변수에서 1일과 2일 시점에 상당한 개선을 나타내었다. 이 집단은 4일째 의사가 보고한 행복 기록 증상 및 3일과 4일(ES204B) 시점에서 대변 농도에서 약간의 평균 재발 효과를 나타내었다. 그러나, 이들 값은 음성 대조군과 비교하였을 때 여전히 상당히 개선된 것이었다.
이들 결과에서 온전한 건조된 알 안에 항원-특이적 IgY 항체들인 특이적 결합 분자들과 비-면역 건조된 소의 초유인 운반체 매트릭스를 포함하는 현탁용 고체 제제가 경제적이고 효과적이라는 것을 보여준다. 본 공개의 매트릭스인 건조된 소의 초유는 용이하게 상업적으로 이용가능하며, 젖보다 더 높은 수준의 다양한 매트릭스 성분들을 제공할 수 있다. 이는 예를 든다면, Larrson et al, US 2010/0233162의 선행 교시와 대조적이다. Larsson은 곰팡이성 감염들을 치료하고 방지하기 위하여 인간의 젖 안에 단리된 닭 난황 면역글로블린(IgY)의 국소 투여 방법을 제시한다. 어쨌든, 인간의 젖의 사용은 신속하게 생산하고 보관하는데 있어서 Larsson 조성물이 덜 경제적이고 어렵게 만든다. 더욱이, 치료 3일 후, 본 공개 조성물은 신생아가 아닌 아기 및 어린이들에서 미확인 설사의 기간을 상당히 감소시키는 것을 보여준다; 위장관의 상태는 신생아보다 더 엄중하다. 이는 신생 유아에서 장 감염의 치료 및 예방을 위한 조류 항체의 사용 방법을 제시하는 Larsson et al., US 2006/0134101와 대조적이다. 또한 이는 설사 기간에서 차이가 없거나 또는 거의 차이가 없음을 보여주는 로타바이러스 설사를 하는 신생아가 아닌 어린이에서 과다면역화된 닭 알의 난황 면역글로블린의 임상적 시도를 보고한 Sarker et al., 2001 것과 대조적이다(Sarker et al., 2001, Randomized, placebo-controlled, clinical trial of hyperimmunized chicken egg yolk immunoglobulin in children with rotavirus diarrhea. J. Pediatr. Gastroenterol Nutr. 32: 19-25).
또한, 본 조성물들은 (1) 경구 투여 동안 항체들을 보호하고, 그리고 (2) 설명한 것과 같이 수동 면역을 추가 활성화시키기 위하여, 보호성 반응성 운반체 매트릭스, 가령 소의 초유와 함께 항원-특이적 IgY을 함유하는 건조된 온전한 알을 이용한다. 이는 항-병원성 박테리아 특이적 IgY을 함유하는 알의 생산 및 IgY를 함유하는 요거트 또는 아이스크림 형태의 조성물의 생산 방법을 제공하는 Lee et al., US 2003/0185856과 대조적으며; 그러나 보호성 반응성 운반체 매트릭스는 설명되지 않는다. 요거트와 아이스크림은 초유로부터 유도된 매트릭스내에 존재하는 충분히 높은 농도의 매트릭스 성분들을 일반적으로 보유하지 않는다.
면역조절 반응과 달리, 이 조성물의 투여 효과는 첫 투여후 6-12 시간 이내에 일반적으로 관찰될 수 있다. 본 공개 조성물들은 대상의 면역 반응의 의존없이 효과적이다.
실시예 5. 임상적 연구- 장티푸스에서 기대이상의 효과
알려지지 않은 기존 접종으로 야기되는 임상적 효과의 예상외의 그리고 기대하지 않은 설명을 통하여 청구된 조성물의 효과에 대한 증거가 제시되었다.
인도의 한 현지 연구 동안 임상적으로 "장티푸스"로 진단을 받은 소수의 어린이들을 치료를 위해 데리고 왔다. 장티푸스는 살모넬라 티피(S. typhi)라고 불리는 박테리아 유형에 의해 가장 흔히 야기된다. 설사를 넘어선 이 질환의 전통적인 증상들은 이의 전신적인 감염 상태에 의해 야기된다. 이 박테리아는 전형적으로 내장으로 우선 이동하고, 그 다음 혈류로 진입하고 혈류내에서 림프절, 방광, 간, 비장 그리고 신체의 다른 부분들로 이동할 수 있다. 이들 환자는 고열, 전반적으로 아픈-느낌, 그리고 복부 통증 그리고 복부와 가슴에 작은 붉은 반점인 "피부 반점들(rose spots)"인 전통적인 발진을 현저하게 포함하는 진전된 질환의 전통적인 증상들을 나타내었다.
실행 환경에서 전형적이기 때문에, 전체적인 신체 검사를 넘어선 진단적 테스트를 이들 환자에서 실시하지 않았다. 이들 환자는 현지 연구를 위한 포함 기준에 맞지 않았을지라도 에서 동정적인 이유로 주치의들의 요청시 실시예 1B의 조성물을 제공받았다.
3가지 시판되는 백신으로 닭의 표준 접종 프로토콜은 살모넬라에 대한 항원들을 특이적으로 포함하지 않았고, 그래서 단지 제한적인 임상적 반응만 예상되었다. 내독소 중화로 인하여 주요 설사 증상의 일부 관련된 완화와 함께 약간의 개선만 기대되었지만, 질환 자체의 과정에서 효과는 없었다.
놀라운 것은, 실시예 1B의 조성물을 제공받은 모든 장티푸스 환자들은 24 내지 48시간 이내에 설사 증상의 급격한 개선을 나타내었다. 이러한 개선은 내독소 중화 단독에 대해 기대한 것 이상으로 나타났다. 그러나 더욱 놀라운 사실은 모든 경우에서 장티푸스의 전신 증상들이 24시간 후 또한 사라졌고, 48 내지 72 시간의 정상 또는 거의 정상 상태에 이르는 시간을 낳는다. 장티푸스 증상들은 치료 2 내지 4주에 보통 개선된다.
현지 시험 관찰 기간(5일) 동안 질환의 임의의 반향 또는 재발을 나타내는 환자들은 없었다. 치료가 완벽하게 감염을 치유하지 못한다면 증상들이 신속하게 다시 나타날 수 있다는 것은 알려진 사실이다.
3일 연속 하루에 1회 실시예 1B의 조성물의 치료는 질환의 GI 및 전신적인 증상에서 놀라울 정도로 단시간내 급격한 감소(표준 관리와 병용하여)를 초래하는데 충분하였다. 반응의 기간은 자연적 또는 "표준 관리" 효과 단독으로 설명되지 않을 수 있다.
이러한 예상치못한 효과의 원천을 발견하려는 시도에서, 이러한 로트(lot)를 위한 전반적인 생산 이력을 신중히 검토하였다. 상업적으로 알을 낳는 암탉을 위하여 통상적이만 재량적 부분으로써, 우리가 이용한 닭에게 살모넬라 벡신을 접종하였다는 것을 발견하였다.
새들은 새끼 때 백신접종을 받았지만, 이 제제는 살모넬라 티피(Salmonella typhi)에 대해 매우 효과적이었다는 것을 밝혔다. 살모넬라는 실시예 1 조제물에서 닭에 이용된 접종 프로토콜에 있는 항원중 하나가 아니었다. 본 공개 조성물에 대해 이들 장티푸스 환자들의 예상치 못한 반응은 현장 시험 동안 주치의들에게는 매우 놀라운 것으로 기록되었다.
실시예 6. 알 분말 특이적 IgY 및 전체 IgY에 대한 정량적 ELISA.
Liou et al., 2011, J. Anim. Vet. Adv., 10(18):2349-2356의 방법을 변형하여 효소-연결된 면역흡착 분석(ELISA)을 이용함으로써 총 IgY 및 특이적 항-항원 IgY의 항체 활성을 결정할 수 있다.
미량적정 플레이트는 100 uL의 혼합된 항원 조제물(웰당 10)로 피복하거나 또는 대조군 웰의 경우 100 uL 토끼 항-닭 IgY 항체 (10 ug/mL, Sigma-Aldrich)로 피복한다. 이 플레이트를 4℃에서 하룻밤 동안 항온처리한다. PBS-Tween 20 완충액으로 세척한 후, 플레이트를 2% BSA로 차단시키고, 4℃에서 하룻밤 동안 항온처리한다. 그 다음 웰을 PBS-Tween 20 완충액으로 세척하고, PBS로 1회 세척한다. 그 다음, 희석된 건조된 알 분말 원액(10 mg/mL)을 1% BSA로 연속적으로 희석시키고, 웰당 100 uL으로 시료 웰들에게 추가한다. 표준 곡선용 웰은 가령, 0.015-1 ug/mL의 농도 범위에서 표준 IgY의 100uL 연속 희석액으로 채우고, 4℃에서 하룻밤 동안 항온처리한다. PBS-Tween 20 완충액으로 세척한 후, 100 uL의 알칼리 포스파타제-공액된 염소 항-닭 IgY를 웰에 추가하고 37℃에서 2시간 동안 항온처리한다. PBS-Tween 20 완충액으로 세척한 후, 100 uL 디소듐 p-니트로페닐 포스페이트를 기질로 각 웰에 추가하고, 37℃에서 10분간 반응하도록 둔다. 플레이트 판독기를 이용하여 405 nm에서 흡수도를 측정한다. 표준 곡선 흡수도는 특이적 항-항원 IgY 농도의 상대적인 양을 제공한다.
전체 IgY 양의 경우, 미량적정 플레이트의 각 웰을 토끼 항-닭 IgY 항체 (10 ug/mL)로 피복한다. 상기와 같이 항온처리 및 세척 후, 100 uL의 희석된 건조된 알 분말을 추가하고, 상기와 같이 분석을 실행한다.
본 발명은 상기 실시예들을 참고하여 설명하고 있지만, 본 발명의 사상 및 범위에는 변형 및 변이들이 포괄된다는 것을 이해할 것이다. 따라서, 본 발명은 다음의 청구범위에 의해서만 한정된다.
없음.

Claims (20)

  1. a) 항원에 특이적으로 결합하는 특이적 결합 분자의 신생아가 아닌 인간에게 유효한 양으로서, 상기 특이적 결합 분자는 적어도 장독소생성성 대장균 종(Escherichia coli spp.), 대장균(E. coli) K99 털 흡착(pili adherence) 인자, 클로스트리디움 페르프린겐스 유독소(Clostridium perfringens toxoid), 살모넬라 티피무리움(Salmonella typhimurium), 로타바이러스 및 코로나바이러스에 특이적인 IgY 항체의 모둠(pool)을 포함하는 것; 및
    b) 소의 초유를 포함하는 운반체 매트릭스를 포함하며,
    상기 신생아가 아닌 인간에게 유효한 양은 미확인 설사, 미확인 소아 설사, 여행자의 설사, 로타바이러스 설사, 독소-매개된 설사, 콜레라, 클로스트리듐 디피실(Clostridium difficile) 감염, 이질, 또는 장티푸스의 치료 또는 예방에 유효한 양인, 신생아가 아닌 인간의 설사 또는 장 감염 치료 또는 예방용 약학적 조성물.
  2. 청구항 1항에 있어서, 상기 소의 초유는 소의 풀팻(full-fat) 초유 및 소의 비-과다면역(non-hyperimmune) 초유로 이루어진 군으로부터 선택된 것인, 조성물.
  3. 청구항 1항에 있어서, 상기 특이적 결합 분자는 위장염을 야기하는 인간 또는 수의학적인 장 또는 위장의 추가 병원균, 병원균-관련 독소, 또는 병원균-관련 접착 요소에 특이적인 IgY을 더 포함하는, 조성물.
  4. 청구항 3항에 있어서, 상기 추가 병원균은 캄필로박터 에주니(Campylobacter jejuni), 살모넬라(Salmonella), 살모넬라 엔테리카 세로바르 티피(Salmonella enterica serovar Typhi), 쉬겔라 디스엔테리에(Shigella dystenteriae), 플레시오모나스 쉬겔로이데스(Plesiomonas shigelloides), 장병원성 대장균(E. coli), 장집합성 대장균(E. coli), 장침입성 대장균(E. coli), 출혈성 대장균(E. coli), 클로스트리윰 디피실(Clostridium difficile), 에르시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica), 비브리오 콜레라(Vibrio cholerae) O1, 비브리오(Vibrio) O139, 비(Non)-O1 비브리오(Vibrios), 비브리오 파라헤모리티쿠스(Vibrio parahaemolyticus), 에어로모나스 하이드로필라(Aeromonas hydrophila), 클로스트리디움 페르프린겐스(Clostridium perfringens), 장간의(enterohepatic) 헬리코박터(Helicobacter), 헬리코박터 피로리(Helicobacter pylori), 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 클렙시엘라(Klebsiella), 가르드네렐라 종(Gardnerella spp.), 나이제리아 고노리에(Neisseria gonorrhoeae), 클라미디아세아 트라초마티스(Chlamydiaceae trachomatis), 미코플라스마 종(Mycoplasma spp.), 트리초모나스 바지날리스(Trichomonas vaginalis), 포진 바이러스 유형 1, 포진 바이러스 유형 2, 칸디다 알비칸스(Candida albicans), 칸디다 글라브라타(Candida glabrata), 칸디다 트로피칼리스(Candida tropicalis), 칸디다 파라피실로시스(Candida parapsilosis) 및 칸디다 크루세이(Candida krusei), 집단 A 스트렙토코커스(Streptococcus) 종, 노로바이러스, 칼시바이러스, 장의 아데노바이러스, 사이토메갈로바이러스, 아스트로바이러스, S. 뉴모니에(S. pneumoniae), H. 인플루엔자(H. influenzae), 나이제리아 고노리에(Neisseria gonorrhoeae), 대상포진 바이러스, 푸사리움 종(Fusarium spp.), 및 아칸타모에바 종(Acanthamoeba spp.)으로 구성된 군으로부터 선택된, 조성물.
  5. 청구항 1항에 있어서, 조성물은 미확인 설사, 여행자의 설사, 로타바이러스 설사, 독소-매개된 설사, 콜레라, 클로스트리듐 디피실(Clostridium difficile) 감염, 이질 또는 장티푸스에 효과적인 양을 포함하는, 조성물.
  6. 청구항 5항에 있어서, 미확인 설사는 소아 미확인 설사인, 조성물.
  7. 청구항 6항에 있어서, 상기 조성물은 상당히 감소된 설사 기간을 초래하는, 조성물.
  8. 청구항 1항에 있어서, 특이적 결합 분자는 한 가지 병원성 성분들 또는 병원성 성분들의 혼합물이 접종된 암탉의 알에서 만들어진 다클론성 IgY 항체들인, 조성물.
  9. 청구항 1항에 있어서, 상기 소의 초유는 소의 풀팻(full-fat) 초유인, 조성물.
  10. 청구항 1항에 있어서, 상기 소의 초유는 소의 비-과다면역(non-hyperimmune) 초유인, 조성물.
  11. 청구항 1항에 있어서, 특이적 결합 분자는 고체형인, 조성물.
  12. 청구항 11항에 있어서, 운반체 매트릭스는 고체형인, 조성물.
  13. 청구항 12항에 있어서, 상기 조성물은 분말화된 건조된 완전한 면역 알 및 분말화된 건조된 초유를 포함하는, 조성물.
  14. 청구항 13항에 있어서, 상기 조성물의 1회 투약량은 1g 내지 7g의 건조된 면역 알 및 1g 내지 7g의 건조된 소의 초유를 함유하는, 조성물.
  15. 청구항 1항에 있어서, 상기 조성물은 약제적으로 허용되는 희석제, 결합제, 부형제, 윤활제, 감미제, 풍미제, 습윤제 또는 흡수제를 더 포함하는, 조성물.
  16. 청구항 1항 내지 15항 중 임의의 한 항에 따른 조성물의 제조방법에 있어서,
    (a) 적어도 장독소생성성 대장균 종(Escherichia coli spp.), 대장균(E. coli) K99 털 흡착(pili adherence) 인자, 클로스트리디움 페르프린겐스 유독소(Clostridium perfringens toxoid), 살모넬라 티피무리움(Salmonella typhimurium), 로타바이러스 및 코로나바이러스에 특이적인 IgY 항체의 모둠(pool)의 신생아가 아닌 인간에게 유효한 양을 포함하는 특이적 결합 분자를 포함하는 분말화된 건조된 완전한 면역 알을 수득하는 것;
    (b) 소의 풀팻(full-fat) 초유를 포함하는, 하나 이상의 운반체 매트릭스를 수득하는 것;
    (c) 운반체 매트릭스의 고체 형과, 특이적 결합 분자의 고체 형을 제조하는 것; 및
    (d) 운반체 매트릭스의 고체형을 특이적 결합 분자의 고체형과 혼합하는 것을 포함하는, 방법.
  17. 청구항 1항 내지 15항 중 임의의 한 항에 있어서, 조성물은 이를 필요로 하는 대상에게 투여하기 위한 영양 조성물로 유용하며, 상기 대상은 특별한 식이요법의 필요로 하는 소아 설사, 크론 질환 및 궤양성 결장염으로 구성된 군에서 선택된 질환을 앓고 있는, 조성물.
  18. 삭제
  19. 삭제
  20. 삭제
KR1020187037153A 2010-11-23 2011-11-21 광범위한, 미확인 또는 혼합된 임상적 적용에서 치료용 조성물들 및 방법들 KR102037885B1 (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US41666710P 2010-11-23 2010-11-23
US61/416,667 2010-11-23
PCT/US2011/061708 WO2012071346A1 (en) 2010-11-23 2011-11-21 Compositions and methods for treatment in broad-spectrum, undifferentiated or mixed clinical applications

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020137016241A Division KR20140043303A (ko) 2010-11-23 2011-11-21 광범위한, 미확인 또는 혼합된 임상적 적용에서 치료용 조성물들 및 방법들

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20190003798A KR20190003798A (ko) 2019-01-09
KR102037885B1 true KR102037885B1 (ko) 2019-10-30

Family

ID=46146180

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020187037153A KR102037885B1 (ko) 2010-11-23 2011-11-21 광범위한, 미확인 또는 혼합된 임상적 적용에서 치료용 조성물들 및 방법들
KR1020137016241A KR20140043303A (ko) 2010-11-23 2011-11-21 광범위한, 미확인 또는 혼합된 임상적 적용에서 치료용 조성물들 및 방법들

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020137016241A KR20140043303A (ko) 2010-11-23 2011-11-21 광범위한, 미확인 또는 혼합된 임상적 적용에서 치료용 조성물들 및 방법들

Country Status (28)

Country Link
US (3) US9701735B2 (ko)
EP (2) EP2643017B1 (ko)
JP (2) JP6121907B2 (ko)
KR (2) KR102037885B1 (ko)
CN (2) CN103533958B (ko)
AP (1) AP2013006940A0 (ko)
AR (1) AR083973A1 (ko)
AU (3) AU2011332053B2 (ko)
BR (1) BR112013012594A2 (ko)
CA (1) CA2818827C (ko)
CL (1) CL2013001469A1 (ko)
CO (1) CO6791606A2 (ko)
DK (1) DK2643017T3 (ko)
EA (1) EA034057B1 (ko)
ES (1) ES2742734T3 (ko)
HK (1) HK1216616A1 (ko)
IL (2) IL226475A0 (ko)
MA (1) MA34753B1 (ko)
MX (2) MX340019B (ko)
MY (1) MY164281A (ko)
NZ (2) NZ709245A (ko)
PE (1) PE20141173A1 (ko)
PH (1) PH12018501891A1 (ko)
PT (1) PT2643017T (ko)
SG (2) SG190384A1 (ko)
TW (2) TWI656881B (ko)
UA (1) UA115524C2 (ko)
WO (1) WO2012071346A1 (ko)

Families Citing this family (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20140017257A1 (en) * 2012-07-11 2014-01-16 Xi Jiang IgY From Norovirus P Particles And Their Derivatives
US9458230B2 (en) * 2013-01-04 2016-10-04 Wisconsin Alumni Research Foundation Secretory IGA compositions, methods of making and methods of use thereof
US9321803B2 (en) 2013-07-12 2016-04-26 Children's Hospital Medical Center Compositions and methods for inhibiting norovirus infection
CN104844709A (zh) * 2014-05-27 2015-08-19 青岛大学附属医院 特异性抗烟曲霉菌感染的鸡卵黄抗体的制备和应用
EP3613764A1 (en) * 2014-10-15 2020-02-26 Xenothera Composition with reduced immunogenicity
US11168127B1 (en) * 2015-12-01 2021-11-09 Camas Incorporated Pathogen specific avian antibodies in the neonatal mammal
US10632158B2 (en) 2016-06-23 2020-04-28 IgY Nutrition Use of a hyperimmune egg product to prevent and treat dysbiosis
WO2018026604A1 (en) * 2016-08-01 2018-02-08 Scaled Microbiomics, Llc Systems and methods for altering microbiome to reduce disease risk and manifestations of disease
CA3053522A1 (en) 2017-03-28 2018-10-04 Children's Hospital Medical Center Norovirus s particle based vaccines and methods of making and using same
WO2019087372A1 (ja) * 2017-11-02 2019-05-09 オーストリッチファーマ株式会社 細菌感染症用ダチョウ抗体
CN109908344A (zh) * 2017-12-12 2019-06-21 广州汇高生物科技有限公司 一种用于治疗溃疡性结肠炎的药物组合物及其制备方法
US10973918B2 (en) * 2018-10-03 2021-04-13 Anubis Bio Corporation Composition and methods for treating acute diarrhea and enteric infections in animals
WO2020132296A1 (en) * 2018-12-20 2020-06-25 Pantheryx, Inc. Medical nutrition product composition for acute diarrhea
WO2020176637A1 (en) 2019-02-26 2020-09-03 Pantheryx, Inc. Compositions for management of disorders of the gastrointestinal tract
WO2020237023A1 (en) * 2019-05-21 2020-11-26 Scaled Microbiomics, Llc Formulations for altering microbiome to reduce risks of hereditary and spontaneous colorectal cancers
US20210252148A1 (en) * 2019-10-31 2021-08-19 Anubis Bio Corporation Composition and Methods for Preventing and Treating African Swine Fever in Wild and Domestic Swine
WO2021168321A1 (en) * 2020-02-19 2021-08-26 Anubis Bio Corporation Composition and methods for treating infectious agents using pathogen-specific antibodies
EP4125965A4 (en) * 2020-04-03 2024-04-24 University of Utah Research Foundation METHOD OF TREATMENT OF LUNG DISEASE WITH CELLULAR AMNIOTIC FLUID
WO2021205408A1 (en) * 2020-04-10 2021-10-14 Igy Immune Technologies And Life Sciences Inc. Igy immunoglobulins targeting coronavirus, methods of preparing same, and methods of using same
WO2021211698A1 (en) * 2020-04-14 2021-10-21 Scaled Microbiomics, Llc Treating or preventing travelers diarrhea
CN111803628B (zh) * 2020-07-24 2021-05-14 尤丽康（江苏）生物医药有限公司 一种抗幽门螺杆菌复合制剂
WO2022103871A1 (en) * 2020-11-10 2022-05-19 Wyomingv Immune, Inc. Therapeutic compositions for the treatment of covid-19
KR20230172005A (ko) * 2021-04-16 2023-12-21 프로디지 바이오테크, 인코포레이티드 알코올성 간 질환 및 이식편대숙주 질환의 치료 또는 예방을 위한 과면역화된 난 생성물
US11319382B1 (en) 2021-06-28 2022-05-03 King Abdulaziz University Methods for producing and using IgY antibodies targeting the middle east respiratory syndrome coronavirus spike protein to treat or prevent MERS-CoV infection
JP7479620B1 (ja) 2023-09-19 2024-05-09 有限会社バイオメディカルリサーチグループ リポ多糖、リポ多糖製造方法及びリポ多糖配合物

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20070264264A1 (en) * 2005-08-30 2007-11-15 La Belle Associates, Inc. Method and composition for conferring immunity in mammals
US20090246207A1 (en) * 2009-06-09 2009-10-01 Hamid Reza Rahmani Calf Biologic Anti-Scour Supplement (CBAS)

Family Cites Families (81)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US58767A (en) 1866-10-16 John brougjbton
US4550019A (en) 1978-03-22 1985-10-29 South Africa Inventions Development Corporation Manufacture and use of fowl egg antibodies
US4377569A (en) 1980-01-21 1983-03-22 Plymate Robert R Method of treating animals to resist infectious diseases
US4376110A (en) 1980-08-04 1983-03-08 Hybritech, Incorporated Immunometric assays using monoclonal antibodies
US4341763A (en) * 1981-03-10 1982-07-27 Smithkline-Rit Methods of vaccinating humans against rotavirus infection
NZ201698A (en) 1981-08-31 1985-12-13 S L Gaffin Composition of antibodies specific to endotoxins
US4748018A (en) * 1984-02-07 1988-05-31 Stolle Research & Development Corp. Method of passive immunization of mammals using avian antibody
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4816563A (en) 1983-11-25 1989-03-28 Amtron, Inc. Process for obtaining transfer factor from colostrum, transfer factor so obtained and use thereof
JPS60123428A (ja) 1983-12-05 1985-07-02 Green Cross Corp:The 下痢症治療剤
US5198213A (en) 1985-04-15 1993-03-30 Protein Technology, Inc. Method of disease treatment utilizing an immunologically whey fraction
DE3689717T2 (de) 1985-11-25 1994-10-20 Gen Corp Kk Einen spezifischen Antikörper enthaltender Stoff aus Eiern, Verfahren zu dessen Herstellung und seine Anwendung.
IT1204777B (it) 1986-02-04 1989-03-10 Crinos Industria Farmaco Composizione per la preparazione estemporanea di formulazioni per applicazioni topiche per uso farmaceutico e cosmetico
US5017372A (en) 1986-04-14 1991-05-21 Medicis Corporation Method of producing antibody-fortified dry whey
US5554372A (en) 1986-09-22 1996-09-10 Emory University Methods and vaccines comprising surface-active copolymers
EP0338229B1 (de) * 1988-04-19 1993-06-16 Biotest Pharma Gmbh Präparat mit Antikörperaktivität und breitem Wirkungsspektrum, daraus bestehende oder diese enthaltende Mittel und deren Verwendung zur Behandlung von bakteriell oder toxin-bedingten Erkrankungen und zur Bekämpfung von Protozoen
US5601823A (en) 1989-10-31 1997-02-11 Ophidian Pharmaceuticals, Inc. Avian antitoxins to clostridium difficle toxin A
US5719267A (en) 1989-10-31 1998-02-17 Ophidian Pharmaceuticals Inc. Clostridial toxin disease therapy
CA2086610A1 (en) 1990-07-02 1992-01-03 Charles H. Kirkpatrick Transfer factor and methods of use
US5258178A (en) 1990-07-30 1993-11-02 Abbott Laboratories Method and product for the treatment of gastric disease
US5753228A (en) 1992-08-25 1998-05-19 Arizona Board Of Regents On Behalf Of The University Of Arizona Method of treating parasitosis by the enteral administration of hyperimmune hen egg yolk antibodies
US5367054A (en) 1993-04-12 1994-11-22 Stolle Research & Development Corp. Large-scale purification of egg immunoglobulin
US5585098A (en) 1993-11-23 1996-12-17 Ovimmune, Inc. Oral administration of chicken yolk immunoglobulins to lower somatic cell count in the milk of lactating ruminants
US5876735A (en) 1994-04-22 1999-03-02 Corixa Corporation Methods for enhancement of protective immune responses
EP0930891A4 (en) 1996-10-02 2001-07-04 Ovimmune Inc ORAL ADMINISTRATION OF CHICKEN EGG ANTIBODIES FOR TREATING DISEASES
SE9701026D0 (sv) 1997-03-20 1997-03-20 Immun System Ims Ab use of avian antibodies
JPH10265393A (ja) 1997-03-25 1998-10-06 Natl Fedelation Of Agricult Coop Assoc 豚流行性下痢の予防治療剤
JP3430853B2 (ja) 1997-04-11 2003-07-28 株式会社ゲン・コーポレーション 胃炎、胃潰瘍および十二指腸潰瘍の予防剤並びに治療剤
CA2291487A1 (en) 1997-05-29 1998-12-03 New Zealand Pastoral Agriculture Research Institute Limited Processes for production of immunoglobulin a in milk
US5846569A (en) 1997-06-20 1998-12-08 Creative Labs, Inc. Colostrum supplement
IE970541A1 (en) 1997-07-25 1999-01-27 Michael Anthony Folan Maternal immune secretions and their use in the treatment and/or prophylaxis of the buccal cavity
CZ287956B6 (cs) 1997-11-04 2001-03-14 Medipharm Cz, S. R. O. Perorální přípravek k prevenci a léčbě parvovirózy psů
CN1290580C (zh) * 1998-04-01 2006-12-20 中德联合研究院 抗轮状病毒鸡卵黄免疫球蛋白产品
KR100550708B1 (ko) 1998-04-29 2006-02-08 폰네뢰프 카르 초유의 제조 방법
AU4376199A (en) 1998-06-26 2000-01-17 Pasteur Merieux Serums Et Vaccins Mucosal targeting immunisation
CA2279791C (en) 1998-08-14 2011-11-08 Marcus B. Gohlke Dietary supplement combining colostrum and lactorferrin in a mucosal delivery format
WO2000019843A1 (en) 1998-10-01 2000-04-13 Canadian Inovatech Inc. Egg concentrate product
US6379676B2 (en) 1999-03-10 2002-04-30 Anitox Corporation Enhancing immune response in animals
US6348223B1 (en) 1999-06-29 2002-02-19 Rose Acre Farms, Inc. Milk replacer composition and method
US6569447B2 (en) 2000-03-24 2003-05-27 Trouw Nutrition Usa, Llc Combination of plasma and hyperimmunized products for increased performance
CN1218751C (zh) * 2000-08-31 2005-09-14 北京好友巡天生物技术有限责任公司 二元活性抗体制剂及其制备方法
US20020044942A1 (en) 2000-09-18 2002-04-18 Chisolm Biological Laboratory, Llc Transfer factor composition and process for producing same
US6468534B1 (en) 2000-09-21 2002-10-22 4Life Research, Lc Methods for obtaining transfer factor from avian sources, compositions including avian-generated transfer factor, and methods of use
US20030185856A1 (en) 2001-01-05 2003-10-02 Nam-Hyung Lee Method for the production of the egg containing anti-pathogenic bacteria specific antbodies(igy) and the yogurt and ice cream containing the igy
US7244427B2 (en) 2001-01-30 2007-07-17 The Lauridsen Group Incorporated Isolated bovine IgG heavy chain protein and its use as an antimicrobial
US6939954B2 (en) 2001-01-30 2005-09-06 The Lauridsen Group Incorporated Isolated bovine lgG heavy chain protein and its use as an antimicrobial
CA2339436A1 (fr) 2001-03-15 2002-09-15 Josee Harel Production d'anticorps contre les facteurs de virulence associes aux souches d'escherichia coli aeec, et leur utilisation
US6932967B2 (en) 2001-03-22 2005-08-23 Michael R. Simon Human medical treatment by aerosol inhalation of immunoglobulin A
CN100571715C (zh) * 2002-03-21 2009-12-23 阿纳迪斯有限公司 含有生物活性物质的组合物及其制备和处理方法
GB2405338B (en) 2002-05-21 2006-04-12 Anadis Ltd Composition comprising antibodies for the prophylaxis of respiratory infections
US7815943B2 (en) 2002-08-22 2010-10-19 4Life Research, Lc Cardiovascular therapy composition including transfer factor and therapeutic methods including use of the composition
JP4556407B2 (ja) 2002-10-04 2010-10-06 住友金属鉱山株式会社 酸化物透明電極膜とその製造方法、透明導電性基材、太陽電池および光検出素子
SE0203265D0 (sv) 2002-11-06 2002-11-06 Coloplus Ab A feed or food product composition
US20060233781A1 (en) 2003-01-02 2006-10-19 Pedersen Medical A/S Antimicrobial composition for local use on mucosal membranes and skin
SE0300213D0 (sv) 2003-01-30 2003-01-30 Immun System Uppsala I M S Ab Use of avian antibodies
AU2003901008A0 (en) 2003-03-04 2003-03-20 Anadis Ltd Composition for the treatment and prevention of bacterial infections
US6866868B1 (en) 2003-09-15 2005-03-15 4Life Research, Lc Compositions including different types of transfer factor, methods for making the compositions, and methods of treatment using the compositions
EP1723951A1 (en) 2005-04-21 2006-11-22 N.V. Nutricia Nutritional supplement with oligosaccharides for a category of HIV patients
ATE361101T1 (de) 2004-08-24 2007-05-15 Nutricia Nv Nahrungszusammensetzung die unverdauliche oligosaccharide enthält
JP2008515813A (ja) 2004-10-06 2008-05-15 アグリ−バイオテック ピーティーワイ リミテッド 抗体産生方法
WO2006056306A2 (en) 2004-11-25 2006-06-01 Unilever N.V. Hydrogel polymeric conjugates of a prodrug
DE602004015169D1 (de) 2004-11-26 2008-08-28 Nutricia Nv Kleinkindernahrung mit proteasehemmer
US10471100B2 (en) 2006-09-29 2019-11-12 4Life Patents, Llc Nanofraction immune modulators, preparations and compositions including the same, and associated methods
BRPI0615547A2 (pt) 2005-08-19 2011-05-24 Unilever Nv produto alimentìcio, preparação farmacêutica, método de fabricação de produto alimentìcio, método de fabricação de preparação farmacêutica, uso do produto alimentìcio, usos da preparação farmacêutica, método de fornecimento de benefìcios à saúde do intestino e implementos de liberação para uso com produto alimentìcio
CA2521156A1 (en) 2005-09-16 2007-03-16 John Hare Antibodies as growth promoting agents
CN1965665A (zh) * 2005-11-16 2007-05-23 雅臣药业集团（远东）有限公司 IgY抗体免疫奶或奶粉的制备方法
CA2637598A1 (en) * 2006-01-18 2007-02-14 University Of Chicago Compositions and methods related to staphylococcal bacterium proteins
JP5244584B2 (ja) 2006-03-23 2013-07-24 千寿製薬株式会社 キサンタンガムおよびブドウ糖を含有する眼科用組成物
US20090053197A1 (en) 2006-06-14 2009-02-26 Ramaekers Joseph C Transfer Factor Compositions and Methods
US20080031903A1 (en) 2006-07-27 2008-02-07 Andrea Gambotto Method of treating ocular infections
CN101626784B (zh) 2006-08-31 2013-07-17 作为康可信托公司受托人的A.C.N.135493391股份有限公司 利用包含抗体的组合物治疗和/或预防非传染性医学病症
EP2215474A4 (en) 2007-07-16 2012-07-18 Avaxia Biologics Inc ANTIBODY THERAPY FOR MODULATING THE FUNCTION OF DARM RECEPTORS
JP2010536932A (ja) 2007-08-30 2010-12-02 ベンクト・オーゲルプ 真菌感染を治療および予防するための、ニワトリ卵黄免疫グロブリン（ＩｇＹ）の局所投与
EP2725035A1 (en) 2007-10-02 2014-04-30 Avaxia Biologics, Inc. Antibody therapy for use in the digestive tract
EP2058001A1 (en) * 2007-11-08 2009-05-13 Crossbeta Biosciences B.V. Enhancement of immunogenicity of antigens
NZ587901A (en) 2008-03-13 2012-11-30 Immuron Ltd Immuno-modulating compositions for the treatment of immune-mediated disorders
EP2265639A1 (en) 2008-04-18 2010-12-29 Unilever N.V. Compositions comprising antibodies or antibody fragments
WO2010044095A2 (en) 2008-09-04 2010-04-22 Pawan Saharan Novel immunologically active peptide fragments of a proline- rich polypeptide isolated from mammalian colostrums for treatment of viral and non-viral diseases or diseased conditions
EA024697B1 (ru) 2009-04-27 2016-10-31 Иммурон Лимитед Применение композиции, содержащей обогащенный анти-lps-антителами иммуноглобулиновый препарат, для лечения заболеваний печени
US8475832B2 (en) 2009-08-07 2013-07-02 Rb Pharmaceuticals Limited Sublingual and buccal film compositions
US20110129479A1 (en) 2009-12-02 2011-06-02 Tobin Monte B Immunogen selection directed in immunoglobulin packages in plasma and colostrum and method of making and using same

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20070264264A1 (en) * 2005-08-30 2007-11-15 La Belle Associates, Inc. Method and composition for conferring immunity in mammals
US20090246207A1 (en) * 2009-06-09 2009-10-01 Hamid Reza Rahmani Calf Biologic Anti-Scour Supplement (CBAS)

Also Published As

Publication number Publication date
SG10201509584UA (en) 2015-12-30
CA2818827A1 (en) 2012-05-31
ES2742734T3 (es) 2020-02-17
AU2016201651A1 (en) 2016-04-07
DK2643017T3 (da) 2019-08-26
JP6121907B2 (ja) 2017-04-26
CN103533958A (zh) 2014-01-22
TWI656881B (zh) 2019-04-21
JP2017075150A (ja) 2017-04-20
CN103533958B (zh) 2015-07-08
AP2013006940A0 (en) 2013-06-30
CL2013001469A1 (es) 2014-03-07
EP2643017A1 (en) 2013-10-02
EP2643017A4 (en) 2015-08-05
AU2018203497A1 (en) 2018-06-07
US20170327564A1 (en) 2017-11-16
US20200299360A1 (en) 2020-09-24
MA34753B1 (fr) 2013-12-03
EP2643017B1 (en) 2019-05-22
AU2016201651B2 (en) 2018-02-22
MX340019B (es) 2016-06-22
US20120141458A1 (en) 2012-06-07
AU2011332053B2 (en) 2016-06-02
IL261338A (en) 2018-10-31
AU2011332053A1 (en) 2013-05-02
MX2013005704A (es) 2013-10-01
AU2018203497B2 (en) 2020-05-07
EA201370127A1 (ru) 2013-09-30
AR083973A1 (es) 2013-04-10
PH12018501891A1 (en) 2019-03-11
PE20141173A1 (es) 2014-09-25
US9701735B2 (en) 2017-07-11
MY164281A (en) 2017-11-30
BR112013012594A2 (pt) 2018-10-16
CA2818827C (en) 2024-02-13
UA115524C2 (uk) 2017-11-27
MX355905B (es) 2018-05-04
CO6791606A2 (es) 2013-11-14
US10611828B2 (en) 2020-04-07
NZ709245A (en) 2016-11-25
TWI539964B (zh) 2016-07-01
JP2013543895A (ja) 2013-12-09
IL261338B (en) 2019-11-28
IL226475A0 (en) 2013-07-31
SG190384A1 (en) 2013-06-28
EP3424531A1 (en) 2019-01-09
HK1216616A1 (zh) 2016-11-25
WO2012071346A1 (en) 2012-05-31
TW201630624A (zh) 2016-09-01
PT2643017T (pt) 2019-09-05
CN105012950A (zh) 2015-11-04
TW201300126A (zh) 2013-01-01
KR20140043303A (ko) 2014-04-09
KR20190003798A (ko) 2019-01-09
NZ612299A (en) 2016-01-29
EA034057B1 (ru) 2019-12-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102037885B1 (ko) 광범위한, 미확인 또는 혼합된 임상적 적용에서 치료용 조성물들 및 방법들
Kovacs-Nolan et al. Avian egg antibodies: basic and potential applications
AU729502B2 (en) Oral administration of chicken yolk antibodies to treat disease
WO1997020577A1 (en) Improved therapeutic formulation and method
EP0706400A1 (en) Therapeutic formulation and method
JP2001503606A (ja) Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉアドヘシン結合型抗原
US20070264264A1 (en) Method and composition for conferring immunity in mammals
OA17508A (en) Compositions and methods for treatment in broad-spectrum, undifferentiated or mixed clinical applications.
KR100280333B1 (ko) 대장균k987p필리항원에대한난황항체의분리방법
AU673589B2 (en) Therapeutic formulation and method
KR19990061701A (ko) E．coli k８８에 대한 신규한 항체의 생산

Legal Events

Date Code Title Description
A107 Divisional application of patent
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant