KR102037041B1 - 항-인플루엔자 바이러스 항체의 안정한 액체 약제학적 제제 - Google Patents

항-인플루엔자 바이러스 항체의 안정한 액체 약제학적 제제 Download PDF

Info

Publication number
KR102037041B1
KR102037041B1 KR1020170100975A KR20170100975A KR102037041B1 KR 102037041 B1 KR102037041 B1 KR 102037041B1 KR 1020170100975 A KR1020170100975 A KR 1020170100975A KR 20170100975 A KR20170100975 A KR 20170100975A KR 102037041 B1 KR102037041 B1 KR 102037041B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
ser
val
thr
gly
antibody
Prior art date
Application number
KR1020170100975A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20180018393A (ko
Inventor
이준원
한원용
김수정
오준석
김소영
김광우
신연경
Original Assignee
(주)셀트리온
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by (주)셀트리온 filed Critical (주)셀트리온
Publication of KR20180018393A publication Critical patent/KR20180018393A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102037041B1 publication Critical patent/KR102037041B1/ko

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
    • C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
    • C07K16/1018—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Abstract

본 발명은 항-인플루엔자 바이러스 항체의 안정한 액체 약제학적 제제에 관한 것으로보다 상세하게는 (A) 항-인플루엔자 바이러스 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물; (B) 계면활성제; (C) 당 또는 당의 유도체; 및 (D) 아미노산을 포함하는 안정한 액체 약제학적 제제에 관한 것이다. 본 발명의 항-인플루엔자 바이러스 항체의 안정한 액체 약제학적 제제는 저온(5 ℃), 상온(25 ℃), 및 고온(40 ℃) 보관 안정성과 장기간(12개월) 보관 안정성이 우수하며, 정맥내, 근육내, 피내, 피하내, 복막내 국소, 또는 이의 조합된 투여가 가능하다.

Description

항-인플루엔자 바이러스 항체의 안정한 액체 약제학적 제제{Stable Liquid Pharmaceutical Formulation of Anti-Influenza Virus Antibody}
본 발명은 항-인플루엔자 바이러스 항체의 안정한 액체 약제학적 제제에 관한 것이다.
인플루엔자(influenza)는 인플루엔자 바이러스 감염에 의한 호흡기 질환으로 매년 겨울철에 유행을 일으키며, 특히 노인이나 소아들이 취약한 것으로 알려져 있다. 인플루엔자 바이러스는 A, B, C형으로 구분되며 그 중 A형과 B형이 사람이나 동물에게 전염된다. 인플루엔자 A 바이러스는 바이러스 표면에 존재하는 항원인 HA(Hemagglutinin)와 NA(Neuraminidase) subtype에 따라 더욱 세분화할 수 있으며(H1N1, H3N2 등), 인플루엔자 B 바이러스는 subtype에 따라 세분화되어 있지는 않다. 현재까지 알려진 A형 인플루엔자 바이러스의 HA 17종류, NA 10종류의 조합을 통해 여러 가지 서브타입을 가진 바이러스의 발생이 가능하다.
인플루엔자 바이러스의 유전자는 여러 개의 절편으로 구성되어 있는데, 단일 숙주에 두 개 이상의 다른 인플루엔자가 동시에 감염될 경우, 유전자의 재배열을 통하여 새로운 아형의 인플루엔자 바이러스가 발생될 수 있으며, 이러한 항원 대변이(Antigenic shift)는 예측이 불가능하기 때문에 현재의 백신으로는 방어가 힘들다. 따라서 이런 신종 인플루엔자에 대한 대응을 위하여 치료의 폭이 보다 넓은 인플루엔자 바이러스 치료제가 절실한 상황이다.
신규한 인플루엔자 바이러스 치료제로서, 한국특허출원 제10-2011-0020061호와 한국특허출원 제10-2012-0107512호의 개시된 항체는 주요한 계통발생 그룹1(H1, H2, H5, 및 H9)과 계통발생 그룹2(H3, H7)에 대한 중화 효과를 나타내었다. 또한 한국특허출원 제10-2014-0036601호는 상기 한국특허출원에서 개시된 2 종류 이상의 항체를 혼합한 조성물을 통해 계통발생 그룹 1 및 그룹 2에 속한 인플루엔자 바이러스에 대한 예방 및 치료 효과를 확인하였다.
상기의 치료 및 예방 효과가 우수한 항-인플루엔자 바이러스 항체가 예방 및 치료용 액체 약제학적 제제로 사용되기 위해서는 항체가 저온(5 ℃), 상온(25 ℃), 및 고온(40 ℃)에서 안정성을 가지면서, 항체의 응집 및 분해가 최소화된 안정한 제제(Formulation)의 개발이 필수적이다.
항체는 통상적인 유기 및 무기 약물에 비해 크고 복잡하기 때문에, 항체 조성물은 특별한 문제들을 지니고 있다. 항체 안정성은 이온 강도, pH, 온도, 동결/해동의 반복 주기, 항체 농도, 및 전단 응력과 같은 인자들에 의해 영향을 받을 수 있다. 활성 항체는 변성, 응집 (용해성 및 불용성 응집물의 형성), 침전, 및 흡착을 포함하는 물리적 불안정성과 라세미화, 베타-제거 또는 이황화 교환, 가수분해, 탈아미드화, 및 산화를 포함하는 화학적 불안정성에 의하여 손실이 발생할 수 있다. 상기 물리적 및 화학적 불안정성은 저하된 생물학적 활성, 증가된 독성, 및/또는 증가된 면역원성을 갖는 항체 부산물 또는 유도체의 형성을 잠재적으로 초래할 수 있다.
종래 기술에 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 개발에 사용될 수 있는 다양한 부형제 들이 제시되고 있지만, 항체마다 항체 고유의 물리화학적인 성질을 가지기 때문에, 제제 개발 시에 특정 항체가 가지는 특정 불안정성 문제들 극복하기 위한 부형제의 종류 및 양을 예측하는 것은 실질적으로 불가능하다. 또한, 특정 항체를 조성물 내에서 화학적으로 그리고 생물학적으로 안정하게 유지시키는, 항체 농도, pH, 및/또는 다른 부형제의 농도와 같은 최적 조건을 발견하는 것은 어려우며 많은 시간과 노력이 필요하다.
더욱이 2 이상의 서로 다른 항체 혼합물을 제제화하기 위한 적합한 부형제 및 최적의 조건을 발견하는 것 및 그 안정성을 증명하는 것은 각각의 항체의 안정성에 대하여 입증해야 하는 것은 물론, 혼합한 조성물의 안정성을 입증해야 하기 때문에 단일 항체를 제제화하는 것에 비해 몇 배의 어려움이 있다.
현재, 항-인플루엔자 바이러스 항체의 안정한 액체 약제학적 제제를 개시하는 선행기술은 존재하지 않는다.
따라서, 상기 항-인플루엔자 바이러스 항체를 포함하는 안정한 액체 약제학적 제제에 대한 필요성 및 보다 다양한 인플루엔자 바이러스 아형에 대한 진단, 예방, 또는 치료 효과를 제공하기 위하여, 항-인플루엔자 단일 항체 또는 서로 다른 두 가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체를 장기간 저장하여도 안정한 조성물에 대한 필요성이 존재하였다.
이에 상기의 문제점들을 해결하고자, 본 발명자들은 인플루엔자 바이러스 예방 또는 치료 효과가 확인된 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물의 저온(5 ℃), 상온(25 ℃), 및 고온(40 ℃)에서 안정성과 장기간보관 안정성을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명이 해결하고자 하는 과제는 항-인플루엔자 바이러스 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물을 포함하는 안정한 액체 약제학적 제제를 제공하는 것이다.
또한, 본 발명이 해결하고자 하는 다른 과제는 항-인플루엔자 바이러스 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물을 포함하면서 저온(5 ℃), 상온(25 ℃), 및 고온(40 ℃) 보관 안정성과 장기간(12개월) 보관 안정성이 우수한 액체 약제학적 제제를 제공하는 것이다.
또한, 본 발명이 해결하고자 하는 다른 과제는 정맥내, 근육내, 피내, 피하내, 복막내, 국소, 또는 이의 조합된 투여가 가능한 항-인플루엔자 바이러스 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물의 안정한 액체 약제학적 제제를 제공하는 것이다.
상기 과제를 해결하고자, 본 발명은 (A) 항-인플루엔자 바이러스 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물; (B) 계면활성제; (C) 당 또는 당의 유도체; 및 (D) 아미노산을 포함하는 안정한 액체 약제학적 제제를 제공한다.
본 발명의 일 구현예에서, (A) 항-인플루엔자 바이러스 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물은 인플루엔자 Ａ 바이러스의 헤마글루티닌(HA) 단백질 내의 에피토프에 결합하는 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 항체는 인플루엔자 Ａ 바이러스의 헤마글루티닌(HA) 단백질의 줄기 영역(stem region) 내 에피토프에 결합할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 항체의 에피토프는 i) HA1 폴리펩티드의 위치 18, 25, 27, 32, 33, 38, 40, 54, 55, 278, 291, 292, 310, 311, 312, 및 318 로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 아미노산 잔기(residue); 및 ii) HA2 폴리펩티드의 위치 18, 19, 20, 21, 38, 39, 41, 42, 45, 46, 48, 49, 52, 53, 56, 57, 58, 60, 및 99로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 아미노산 잔기(residue)를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 에피토프는 HA1 폴리펩티드의 위치 318의 아미노산 잔기를 포함하고, HA2 폴리펩티드의 위치 41, 42, 45, 48, 49, 52, 및 53의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 에피토프는 HA1 폴리펩티드의 위치 18, 38, 40, 291, 292, 및 318의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 또한, 상기 에피토프는 HA2 폴리펩티드의 위치 18, 19, 20, 21, 41, 42, 45, 48, 49, 52, 및 53의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 상기 에피토프는 HA1 폴리펩티드의 위치 18, 38, 40, 291, 292, 및 318의 아미노산 잔기를 포함하고, HA2 폴리펩티드의 위치 18, 19, 20, 21, 41, 42, 45, 48, 49, 52, 및 53의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 에피토프는 HA1 폴리펩티드의 위치 278 및 318의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 상기 에피토프는 HA2 폴리펩티드의 위치 38, 39, 41, 42, 45, 48, 49, 52, 및 53 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 상기 에피토프는 HA 제1 단량체(monomer)의 상기 HA1 폴리펩티드 및/또는 HA2 폴리펩티드의 위치의 아미노산 잔기를 포함하고, 상기 제1 단량체에 인접한 제2 단량체의 HA1 폴리펩티드의 위치 25, 32, 및 33 아미노산 잔기를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 에피토프는 HA1 폴리펩티드의 위치 278 및 318의 아미노산 잔기를 포함하고, HA2 폴리펩티드의 위치 38, 39, 41, 42, 45, 48, 49, 52, 및 53 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 상기 에피토프는 HA 제1 단량체의 상기 HA1 폴리펩티드 및 HA2폴리펩티드의 위치의 아미노산 잔기를 포함하고, 상기 제1 단량체에 인접한 제2 단량체의 HA1 폴리펩티드의 위치 25, 32, 및 33 아미노산 잔기를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 에피토프는 HA1 폴리펩티드의 위치 278 및 318의 아미노산 잔기를 포함하고, HA2 폴리펩티드의 위치 38, 39, 41, 42, 45, 48, 49, 52, 53, 58, 및 99의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 상기 에피토프는 HA 제1 단량체의 상기 HA1 폴리펩티드 및 HA2 폴리펩티드의 위치의 아미노산 잔기를 포함하고, 상기 제1 단량체에 인접한 제2 단량체의 HA1 폴리펩티드의 위치 25, 27, 32, 및 33 아미노산 잔기를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 에피토프는 HA1 폴리펩티드의 위치 54, 55, 278, 291 및 318의 아미노산 잔기를 포함하고, HA2 폴리펩티드의 위치 19, 20, 21, 38, 39, 41, 42, 45, 46, 48, 49, 52, 53, 56, 57, 및 60의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 상기 에피토프는 HA 제1단량체의 상기 HA1 폴리펩티드 및 HA2 폴리펩티드의 위치의 아미노산 잔기를 포함하고, 상기 HA 제1단량체에 인접한 HA 제2 단량체의 HA1 폴리펩티드의 위치 25, 32, 33, 310, 311, 및 312의 아미노산 잔기를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서 (A) 항-인플루엔자 바이러스 항체는 i) 서열번호 1의 CDR1 영역, 서열번호 2의 CDR2 영역, 및 서열번호 3의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 4의 CDR1 영역, 서열번호 5의 CDR2 영역, 및 서열번호 6의 CDR3 영역영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; ii) 서열번호 7의 CDR1 영역, 서열번호 8의 CDR2 영역, 및 서열번호 9의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 10의 CDR1 영역, 서열번호 11의 CDR2 영역, 및 서열번호 12의 CDR3 영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; iii) 서열번호 13의 CDR1 영역, 서열번호 14의 CDR2 영역, 및 서열번호 15의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 16의 CDR1 영역, 서열번호 17의 CDR2 영역, 및 서열번호 18의 CDR3 영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; iv) 서열번호 19의 CDR1 영역, 서열번호 20의 CDR2 영역, 및 서열번호 21의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 22의 CDR1 영역, 서열번호 23의 CDR2 영역, 및 서열번호 24의 CDR3 영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; v) 서열번호 25의 CDR1 영역, 서열번호 26의 CDR2 영역, 및 서열번호 27의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 28의 CDR1 영역, 서열번호 29의 CDR2 영역, 및 서열번호 30의 CDR3 영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; vi) 서열번호 31의 CDR1 영역, 서열번호 32의 CDR2 영역, 및 서열번호 33의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 34의 CDR1 영역, 서열번호 35의 CDR2 영역, 및 서열번호 36의 CDR3 영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; 및vii) 서열번호 37의 CDR1 영역, 서열번호 38의 CDR2 영역, 및 서열번호 39의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 40의 CDR1 영역, 서열번호 41의 CDR2 영역, 및 서열번호 42의 CDR3 영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서 (A) 항-인플루엔자 바이러스 항체는 i) 서열번호 43의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변영역 및 서열번호 44의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; ii) 서열번호 45의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변영역 및 서열번호 46의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; iii) 서열번호 47의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변영역 및 서열번호 48의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; iv) 서열번호 49의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변영역 및 서열번호 50의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; v) 서열번호 51의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변영역 및 서열번호 52의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; vi) 서열번호 53의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변영역 및 서열번호 54의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; 및 vii) 서열번호 55의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변영역 및 서열번호 56의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서 (A) 항-인플루엔자 바이러스 항체는i) 서열번호 57의 폴리펩티드 서열의 경쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 및 서열번호 58의 폴리펩티드 서열의 중쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄를 포함하는 항체; ii) 서열번호 59의 폴리펩티드 서열의 경쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 및 서열번호 60의 폴리펩티드 서열의 중쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄를 포함하는 항체; iii) 서열번호 61의 폴리펩티드 서열의 경쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 및 서열번호 62의 폴리펩티드 서열의 중쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄를 포함하는 항체; iv) 서열번호 63의 폴리펩티드 서열의 경쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 및 서열번호 64의 폴리펩티드 서열의 중쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄를 포함하는 항체; v) 서열번호 65의 폴리펩티드 서열의 경쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 및 서열번호 66의 폴리펩티드 서열의 중쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄를 포함하는 항체; vi) 서열번호 67의 폴리펩티드 서열의 경쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 및 서열번호 68의 폴리펩티드 서열의 중쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄를 포함하는 항체; 및 vii) 서열번호 69의 폴리펩티드 서열의 경쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 및 서열번호 70의 폴리펩티드 서열의 중쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄를 포함하는 항체 로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서 (A) 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물은i) 서열번호 1의 CDR1 영역, 서열번호 2의 CDR2 영역, 및 서열번호 3의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 4의 CDR1 영역, 서열번호 5의 CDR2 영역, 및 서열번호 6의 CDR3 영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; 및 ii) 서열번호 7의 CDR1 영역, 서열번호 8의 CDR2 영역, 및 서열번호 9의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 10의 CDR1 영역, 서열번호 11의 CDR2 영역, 및 서열번호 12의 CDR3 영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서 (A) 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물은 i) 서열번호 43의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변영역 및 서열번호 44의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; 및 ii) 서열번호 45의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변영역 및 서열번호 46의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서 (A) 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물은 i) 서열번호 57의 폴리펩티드 서열의 경쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 및 서열번호 58의 폴리펩티드 서열의 중쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄를 포함하는 항체; 및 ii) 서열번호 59의 폴리펩티드 서열의 경쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 및 서열번호 60의 폴리펩티드 서열의 중쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄를 포함하는 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서 (A) 항-인플루엔자 바이러스 항체는 제넨텍 사의 MHAA4549A 항체; 메디이뮨 사의 MEDI8852 항체; 크루셀 사의 CR6261 항체, CR8020 항체, CR9114항체, CR8033 항체, CR8071 항체; 다나-파버 암 연구소의 F10 항체; 비스테라 사의 VIS410 항체; 테라클론 사이언시스 사의 TCN-032 항체; 및/또는 스위스 바이오의학연구소(IRB)의 FI6 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서 (A) 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물이 서로 다른 2가지 항체의 혼합물일 때, 서로 다른 2 가지 항체들의 혼합비가 9:1 내지 1:9일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (A) 항-인플루엔자 바이러스 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물의 농도는 10 내지 150 mg/mL일 수 있다.
본 발명의 일 구현예어서, (B) 계면활성제는 폴리소르베이트, 폴록사머, 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예서, (B) 계면활성제는 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 40, 폴리소르베이트 60, 폴리소르베이트 80, 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (B) 계면활성제는 폴리소르베이트 80을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현에서, (B) 계면활성제의 농도는 0.01 내지 1.0 %(w/v)일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (C) 당은 단당류, 이당류, 올리고당, 다당류, 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (C) 당의 유도체는 당 알코올, 당 산, 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (C) 당은 단당류, 이당류, 올리고당, 다당류, 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함하고, (C) 당의 유도체는 당 알코올, 당 산, 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (C) 당 또는 당의 유도체는 소르비톨, 만니톨, 트레할로스, 수크로오스, 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (C) 당 또는 당의 유도체의 농도는 0.1 내지 15 %(w/v)일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (D) 아미노산은 유리 아미노산, 아미노산염, 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (D) 아미노산은 아스파르트산, 히스티딘, 리신, 아르기닌, 또는 이들의 염을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (D) 아미노산은 히스티딘, 히스티딘염, 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, (D) 아미노산의 농도는 1 내지 20 mM일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, pH가 5.5 내지 6.5일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 40±2 ℃에서 6주간 보관한 후 측정한 항체 모노머 순도가 95% 이상일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 5±3 ℃/주변 상대 습도조건에서 3개월 이상 보관한 후 측정한 항체 모노머 순도가 95 % 이상일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 5±3 ℃/주변 상대 습도조건에서 6개월 이상 보관한 후 측정한 항체 모노머 순도가 95 % 이상일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 정맥내, 근육내, 피내, 피하내, 복막내, 국소, 또는 이의 조합된 투여용일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 프리-필드 시린지(pre-filled syringe)는 상기 안정한 액체 약제학적 제제가 충진된다.
본 발명의 일 구현예에서, 자동 주사기(auto-injector)는 상기 프리-필드 시린지가 그 내부에 포함된다.
본 발명의 일 구현예에서, 키트는 상기 안정한 액체 약제학적 제제 및 용기를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 인플루엔자 바이러스 예방, 진단 또는 치료용일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제를 제조하는 방법일 수 있다.
본 발명에 따른 항-인플루엔자 바이러스 항체의 안정한 액체 약제학적 제제는 저온(5 ℃), 상온(25 ℃), 및 고온(40 ℃) 보관 안정성과 장기간(12개월) 보관 안정성이 우수하며, 정맥내, 근육내, 피내, 피하내, 복막내 국소, 또는 이의 조합된 투여가 가능하다.
[안정한 액체 약제학적 제제]
본 발명에 따른 안정한 액체 약제학적 제제는 (A) 항-인플루엔자 바이러스 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물; (B) 계면활성제; (C) 당 또는 당의 유도체; 및 (D) 아미노산을 포함할 수 있다.
(A) 항-인플루엔자 바이러스 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물
본 발명에서 “항체”는 그의 가장 넓은 의미로 사용되고 폴리클로날 항체, 모노클로날 항체, 재조합 항체, 단일쇄 항체, 하이브리드 항체, 키메라 항체, 인간화 항체, 인간 항체, 또는 이들의 단편을 포함할 수 있다. 기타 변화된 구조를 갖는 자연 발생 항체, 예를 들어 카멜리드 항체도 이 정의에 포함된다. 온전한(intact) 항체는 2개의 중쇄(Heavy Chain) 및 2개의 경쇄(Light Chain)가 디설파이드 결합에 의해 서로 연결되어 있는 4개의 폴리펩타이드쇄로 이루어진 면역글로불린 분자를 가리킨다. 항체의 단편은 특히 Fab, F(ab'), F(ab')2, Fv, dAb, Fd, 상보성 결정 영역(CDR) 단편, 단일-쇄 항체(scFv), 2가(bivalent) 단일-쇄 항체, 단일-쇄 파지 항체, 디아바디(diabody), 트리아바디(triabody), 테트라바디(tetrabody), 폴리펩티드로의 특정 항원에 결합하기에 충분한 이뮤노글로브린의 하나 이상의 단편을 함유하는 폴리펩티드 등을 포함한다. 각각의 중쇄는 중쇄 가변영역 및 중쇄 불변 영역으로 이루어진다. 중쇄 불변 영역은 3개의 도메인(CH1, CH2, 및 CH3)으로 이루어진다. 각각의 경쇄는 경쇄 가변영역 및 경쇄 불변 영역으로 이루어진다. 경쇄 불변 영역은 1개의 도메인(CL)으로 이루어진다. 중쇄 가변영역 및 경쇄 가변영역은, 골격 영역(FR)으로 불리는 보다 보존된 영역과 함께 배치된, 상보성 결정 영역(CDR)으로 불리는 초가변성 영역으로 더욱 세분될 수 있다. 각각의 중쇄 가변영역 및 경쇄 가변영역은 3개의 CDR 및 4개의 FR로 이루어지고, 이들은 아미노 말단에서 카복시 말단까지 하기의 순서로 배열되어 있다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.
본 발명에서 가변영역의 CDR은 Kabat 등에 의해 고안된 시스템에 따라 통상적인 방법으로 결정되었다(문헌[Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest (5th), National Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991)] 참조). 본 발명에 사용된 CDR 넘버링은 Kabat 방법을 사용했지만, 이외에 IMGT 방법, Chothia 방법, AbM 방법 등 다른 방법에 따라 결정된 CDR을 포함하는 항체도 본 발명에 포함된다.
본 발명에서 항체는 항체의 기능적 변이체를 포함한다. 항체의 기능적 변이체 들이 인플루엔자 바이러스에 특이적으로 결합하기 위해 본 발명의 항체와 경쟁할 수 있다면, 본 발명의 항체의 기능적 변이체로 간주된다. 기능적 변이체는 1차 구조적 서열이 실질적으로 유사한 유도체를 포함할 수 있으며, 이에 제한되는 것은 아니다. 기능적 변이체는 선택적으로 부모 항체의 아미노산 서열과 비교하여 하나 이상의 아미노산의 치환, 삽입, 결실, 또는 그들의 조합을 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 항체일 수 있다. 더욱이 기능적 변이체는 아미노 말단 또는 카르복시 말단 중 하나 또는 모두에서 아미노산 서열의 절단체(truncated form)를 포함할 수 있다. 본 발명의 기능적 변이체는 본 발명의 부모 항체와 비교하여 동일하거나 다르거나, 더 높거나 낮은 결합 친화력을 가질 수 있지만, 여전히 인플루엔자 바이러스에 결합할 수 있다. 본 발명의 범위에 속하는 기능적 변이체는 본 명세서의 개시된 항체와 약 50 ~ 99 %, 약 60 ~ 99 %, 약 80 ~ 99 %, 약 90 ~ 99 %, 약 95 ~ 99 %, 또는 약 97 ~ 99 % 아미노산 서열 동질성을 가질 수 있다. 비교될 아미노산 서열을 최적으로 배열하고 유사하거나 또는 동일한 아미노산 잔기를 정의하기 위해 컴퓨터 알고리즘 중 당업자에게 알려진 Gap 또는 Bestfit 등을 사용할 수 있다. 기능적 변이체는 부모 항체 또는 그것의 일부를 PCR 방법, 올리고머 뉴클레오티드를 이용한 돌연변이 생성 및 부분 돌연변이 생성을 포함하는 공지의 일반 분자생물학적 방법에 의해 변화시키거나 유기합성 방법으로 얻을 수 있으며, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서 “항체의 종류"는 그의 중쇄에 의해 소유된 불변 도메인 또는 불변 영역의 유형으로 분류될 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다. 예를 들어, 항체의 5개의 주요 종류, 즉 IgA, IgD, IgE, IgG, 및 IgM이 존재하며, 이들 중 다수는 하위부류(아이소타입), 예를 들어 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, 및 IgA2로 추가로 분류될 수 있다.
본 발명에서 "에피토프"는 에피토프는 항원을 표적화하는 항체에 의해 결합되는 상기 항원의 영역이며, 상기 항체와 직접 접촉하는 특정한 아미노산들을 포함하나 이에 제한되는 것은 아니다. 예를 들어 에피토프는 아미노산, 당 측쇄, 포스포릴 또는 설포닐기와 같은 분자의 화학 활성 표면 그룹을 포함할 수 있으며, 특정한 3차원 구조 특징 및/또는 특정한 전하 특징일 수 있다.
본 발명에서 "인플루엔자 A 바이러스(influenza A virus)"는 오르쏘믹소바이러스 (Orthomyxoviridae)에 속하는 외피 보유 바이러스(enveloped virus)로 8개의 분절로 된 음성-극성 및 단일 가닥(Negative-sense, single-strand)의RNA(ribonucleic acid)를 유전체로 가지고, A, B, 및 C 그룹으로 분류되며, 주요 표면 단백질인HA(hemaggutinin)와 NA(neuraminidase)에 따라 다시 여러 서브타입(subtype)으로 나뉜다. 현재까지 17종의 HA와 10종의 NA가 알려져 있다.
본 발명에서 "헤마글루티닌(hemagglutinin, 이하 "HA"라 칭함)"은 인플루엔자 바이러스의 외피(envelope) 당단백질을 나타낸다. HA는 인플루엔자 바이러스가 숙주 세포에 흡착하여 침투하는 것을 매개한다. 현재까지 17 종류의 서브타입이 보고되어 있다.
본 발명에서 "H1 서브타입"에는 H1N1, H1N2, H1N3, H1N4, H1N5, H1N6, H1N7, H1N8, H1N9, 및 H1N10이 포함된다.
본 발명에서 "H2 서브타입"에는 H2N1, H2N2, H2N3, H2N4, H2N5, H2N6, H2N7, H2N8, H2N9, 및 H2N10 이 포함된다.
본 발명에서 "H5 서브타입"에는 H5N1, H5N2, H5N3, H5N4, H5N5, H5N6, H5N7, H5N8, H5N9, 및 H5N10 이 포함된다.
본 발명에서 "H9 서브타입"에는 H9N1, H9N2, H9N3, H9N4, H9N5, H9N6, H9N7, H9N8, H9N9, 및 H9N10 이 포함된다.
본 발명에서 "H3 서브타입"에는 H3N1, H3N2, H3N3, H3N4, H3N5, H3N6, H3N7, H3N8, H3N9, 및 H3N10 이 포함된다.
본 발명에서 "H7 서브타입"에는 H7N1, H7N2, H7N3, H7N4, H7N5, H7N6, H7N7, H7N8, H7N9, 및 H7N10 이 포함된다.
본 발명의 일 구현예에서, "항체"는 인플루엔자 바이러스에 결합 또는 인플루엔자 바이러스를 중화 시키는 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, "항체 혼합물"는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 항-인플루엔자 바이러스 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물은 인플루엔자 Ａ 바이러스에 결합하는 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 일 구현예에서, 항-인플루엔자 바이러스 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물은 인플루엔자 Ａ 바이러스의 헤마글루티닌(HA) 단백질에 결합하는 항체를 포함할 수 있다. 본 발명의 또 다른 일 구현예에서, 항-인플루엔자 바이러스 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물은 인플루엔자 A 바이러스 헤마글루티닌(HA) 단백질의 줄기 영역(stem region) 또는 이의 에피토프에 결합하는 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 항체의 에피토프는 i) HA1 폴리펩티드의 위치 18, 25, 27, 32, 33, 38, 40, 54, 55, 278, 291, 292, 310, 311, 312, 및 318 로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 아미노산 잔기(residue); 및 ii) HA2 폴리펩티드의 위치 18, 19, 20, 21, 38, 39, 41, 42, 45, 46, 48, 49, 52, 53, 56, 57, 58, 60, 및 99로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 아미노산 잔기(residue)를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 에피토프는 HA1 폴리펩티드의 위치 318의 아미노산 잔기(residue)를 포함하고, HA2 폴리펩티드의 위치 41, 42, 45, 48, 49, 52, 및 53의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 에피토프는 HA1 폴리펩티드의 위치 18, 38, 40, 291, 292 및 31의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 또한, 상기 에피토프는 HA2 폴리펩티드의 위치 18, 19, 20, 21, 41, 42, 45, 48, 49, 52 및 53의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 상기 에피토프는 HA1 폴리펩티드의 위치 18, 38, 40, 291, 292 및 318의 아미노산 잔기를 포함하고, HA2 폴리펩티드의 위치 18, 19, 20, 21, 41, 42, 45, 48, 49, 52 및 53의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 에피토프는 HA1 폴리펩티드의 위치 278 및 318의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 상기 에피토프는 HA2 폴리펩티드의 위치 38, 39, 41, 42, 45, 48, 49, 52, 및 53 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 상기 에피토프는 HA 제1 단량체(monomer)의 상기 HA1 폴리펩티드 및/또는 HA2 폴리펩티드의 위치의 아미노산 잔기를 포함하고, 상기 제1 단량체에 인접한 제2 단량체의 HA1 폴리펩티드의 위치 25, 32 및 33 아미노산 잔기를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 에피토프는 HA1 폴리펩티드의 위치 278 및 318의 아미노산 잔기를 포함하고, HA2 폴리펩티드의 위치 38, 39, 41, 42, 45, 48, 49, 52, 및 53 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 상기 에피토프는 HA 제1 단량체의 상기 HA1 폴리펩티드 및 HA2폴리펩티드의 위치의 아미노산 잔기를 포함하고, 상기 제1 단량체에 인접한 제2 단량체의 HA1 폴리펩티드의 위치 25, 32 및 33 아미노산 잔기를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 에피토프는 HA1 폴리펩티드의 위치 278 및 318의 아미노산 잔기를 포함하고, HA2 폴리펩티드의 위치 38, 39, 41, 42, 45, 48, 49, 52, 53, 58 및 99의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 상기 에피토프는 HA 제1 단량체의 상기 HA1 폴리펩티드 및 HA2 폴리펩티드의 위치의 아미노산 잔기를 포함하고, 상기 제1 단량체에 인접한 제2 단량체의 HA1 폴리펩티드의 위치 25, 27, 32 및 33 아미노산 잔기를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 에피토프는 HA1 폴리펩티드의 위치 54, 55, 278, 291 및 318의 아미노산 잔기를 포함하고, HA2 폴리펩티드의 위치 19, 20, 21, 38, 39, 41, 42, 45, 46, 48, 49, 52, 53, 56, 57 및 60의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 상기 에피토프는 HA 제1단량체의 상기 HA1 폴리펩티드 및 HA2 폴리펩티드의 위치의 아미노산 잔기를 포함하고, 상기 HA 제1단량체에 인접한 HA 제2 단량체의 HA1 폴리펩티드의 위치 25, 32, 33, 310, 311, 및 312의 아미노산 잔기를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 항-인플루엔자 바이러스 항체는 폴리클로날 항체, 모노클로날 항체, 재조합 항체, 단일쇄 항체, 하이브리드 항체, 키메라 항체, 인간화 항체, 인간 항체, 또는 이들의 단편을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 일 구현예에서, 항-인플루엔자 바이러스 항체는 인간 항체를 포함할 수 있다. 본 발명의 또 다른 일 구현예에서, 항-인플루엔자 바이러스 항체는 항체의 IgG 분류에 포함될 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서 항-인플루엔자 바이러스 항체는 i) 서열번호 1의 CDR1 영역, 서열번호 2의 CDR2 영역, 및 서열번호 3의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 4의 CDR1 영역, 서열번호 5의 CDR2 영역, 및 서열번호 6의 CDR3 영역영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; ii) 서열번호 7의 CDR1 영역, 서열번호 8의 CDR2 영역, 및 서열번호 9의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 10의 CDR1 영역, 서열번호 11의 CDR2 영역, 및 서열번호 12의 CDR3 영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; iii) 서열번호 13의 CDR1 영역, 서열번호 14의 CDR2 영역, 및 서열번호 15의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 16의 CDR1 영역, 서열번호 17의 CDR2 영역, 및 서열번호 18의 CDR3 영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; iv) 서열번호 19의 CDR1 영역, 서열번호 20의 CDR2 영역, 및 서열번호 21의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 22의 CDR1 영역, 서열번호 23의 CDR2 영역, 및 서열번호 24의 CDR3 영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; v) 서열번호 25의 CDR1 영역, 서열번호 26의 CDR2 영역, 및 서열번호 27의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 28의 CDR1 영역, 서열번호 29의 CDR2 영역, 및 서열번호 30의 CDR3 영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; vi) 서열번호 31의 CDR1 영역, 서열번호 32의 CDR2 영역, 및 서열번호 33의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 34의 CDR1 영역, 서열번호 35의 CDR2 영역, 및 서열번호 36의 CDR3 영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; 및vii) 서열번호 37의 CDR1 영역, 서열번호 38의 CDR2 영역, 및 서열번호 39의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 40의 CDR1 영역, 서열번호 41의 CDR2 영역, 및 서열번호 42의 CDR3 영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서 항-인플루엔자 바이러스 항체는 i) 서열번호 43의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변영역 및 서열번호 44의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; ii) 서열번호 45의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변영역 및 서열번호 46의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; iii) 서열번호 47의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변영역 및 서열번호 48의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; iv) 서열번호 49의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변영역 및 서열번호 50의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; v) 서열번호 51의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변영역 및 서열번호 52의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; vi) 서열번호 53의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변영역 및 서열번호 54의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; 및 vii) 서열번호 55의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변영역 및 서열번호 56의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서 항-인플루엔자 바이러스 항체는i) 서열번호 57의 폴리펩티드 서열의 경쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 및 서열번호 58의 폴리펩티드 서열의 중쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄를 포함하는 항체; ii) 서열번호 59의 폴리펩티드 서열의 경쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 및 서열번호 60의 폴리펩티드 서열의 중쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄를 포함하는 항체; iii) 서열번호 61의 폴리펩티드 서열의 경쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 및 서열번호 62의 폴리펩티드 서열의 중쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄를 포함하는 항체; iv) 서열번호 63의 폴리펩티드 서열의 경쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 및 서열번호 64의 폴리펩티드 서열의 중쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄를 포함하는 항체; v) 서열번호 65의 폴리펩티드 서열의 경쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 및 서열번호 66의 폴리펩티드 서열의 중쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄를 포함하는 항체; vi) 서열번호 67의 폴리펩티드 서열의 경쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 및 서열번호 68의 폴리펩티드 서열의 중쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄를 포함하는 항체; 및 vii) 서열번호 69의 폴리펩티드 서열의 경쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 및 서열번호 70의 폴리펩티드 서열의 중쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄를 포함하는 항체로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물은i) 서열번호 1의 CDR1 영역, 서열번호 2의 CDR2 영역, 및 서열번호 3의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 4의 CDR1 영역, 서열번호 5의 CDR2 영역, 및 서열번호 6의 CDR3 영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; 및 ii) 서열번호 7의 CDR1 영역, 서열번호 8의 CDR2 영역, 및 서열번호 9의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 10의 CDR1 영역, 서열번호 11의 CDR2 영역, 및 서열번호 12의 CDR3 영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물은 i) 서열번호 43의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변영역 및 서열번호 44의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; 및 ii) 서열번호 45의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변영역 및 서열번호 46의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물은 i) 서열번호 57의 폴리펩티드 서열의 경쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 및 서열번호 58의 폴리펩티드 서열의 중쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄를 포함하는 항체; 및 ii) 서열번호 59의 폴리펩티드 서열의 경쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 경쇄 및 서열번호 60의 폴리펩티드 서열의 중쇄에 95% 이상의 서열 동일성을 갖는 중쇄를 포함하는 항체를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물이 서로 다른 2가지 항체의 혼합물일 때, 서로 다른 2 가지 항체들의 혼합비가 9:1 내지 1:9일 수 있다. 본 발명의 다른 구현예에서, 상기 혼합비가 4:1 내지 1:4일 수 있다. 본 발명의 또 다른 구현예에서, 상기 혼합비가 1:1일 수 있다. 상기 혼합비가 이 범위 내인 경우, 액체 약제학적 제제의 안정성을 우수하게 나타낼 수 있다. 상기 혼합비는 본 발명에 따른 안정한 액체 약제학적 제제의 안정성에 악영향을 실질적으로 미치지 않는 범위 내에서 자유롭게 조절할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 항-인플루엔자 바이러스 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물의 농도는 5 내지 200 mg/mL일 수 있다. 본 발명의 다른 구현예에서, 상기 농도가 10 내지 150 mg/mL일 수 있다. 본 발명의 또 다른 구현예에서, 상기 농도가 20 내지 100 mg/mL일 수 있다. 상기 농도가 이 범위 내인 경우, 장기간 안정성을 우수하게 나타낼 수 있다. 상기 농도는 본 발명에 따른 안정한 액체 약제학적 제제의 안정성에 악영향을 실질적으로 미치지 않는 범위 내에서 자유롭게 조절할 수 있다.
(B) 계면활성제
본 발명에서 “계면활성제”는 폴리옥시에틸렌소르비탄지방산에스테르 (예를 들면, 폴리소르베이트(Polysorbate)), 폴리옥시에틸렌알킬에테르 (예들 들면, 브리지(Brij)), 알킬페닐폴리옥시에틸렌에테르 (예를 들면, 트리톤-X(Triton-X)), 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 코폴리머 (예를 들면, 폴록사머(Poloxamer), 플루로닉(Pluronic)), 나트륨 도데실 설페이트(SDS) 등이 있으며 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 일 구현예에서, 계면활성제는 폴리소르베이트, 폴록사머, 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다. 본 발명의 다른 일 구현예서, 계면활성제는 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 40, 폴리소르베이트 60, 폴리소르베이트 80, 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함할 수 있다. 발명의 다른 일 구현예에서, 계면활성제는 폴리소르베이트 80을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현에서, 계면활성제의 농도는 0.001 내지 10 %(w/v) 일 수 있다. 본 발명의 다른 일 구현예에서, 상기 농도는0.01 내지 1.0 %(w/v)일 수 있다. 본 발명의 또 다른 일 구현예에서, 상기 농도는0.05 내지 0.5 %(w/v)일 수 있다. 상기 농도가 이 범위 내인 경우, 액체 약제학적 제제의 안정성을 우수하게 나타낼 수 있다. 상기 농도는 본 발명에 따른 안정한 액체 약제학적 제제의 안정성에 악영향을 실질적으로 미치지 않는 범위 내에서 자유롭게 조절할 수 있다.
(C) 당 또는 당의 유도체
본 발명에서 “당”은 단당류, 이당류, 올리고당, 다당류, 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함할 수 있다. 단당류의 예로는 글루코스, 프룩토스, 갈락토스 등이 있으며 이에 제한되지 않는다. 이당류의 예로는 수크로오스, 락토스, 말토스, 트레할로스 등이 있으며 이에 제한되지 않는다. 올리고당의 예로는 프룩토올리고당, 갈락토올릭고당, 만난올리고당 등이 있으며 이에 제한되지 않는다. 다당류의 예로는 전분, 글리코겐, 셀룰로스, 키틴, 펙틴 등이 있으며 이에 제한되지 않는다.
본 발명에서 “당의 유도체”는 당 알코올, 당 산, 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다. 당 알코올의 예로는 글리세롤, 에리스리톨, 트레이톨, 아라비톨, 자이리톨, 리비톨, 만니톨, 소르비톨, 갈락티톨, 푸시톨, 이디톨, 이노시톨, 볼레미톨, 아이소말트, 말티톨, 락티톨, 말토트리이톨, 말토테트라이톨, 폴리글리시톨 등이 있으며 이에 제한되지 않는다. 당 산의 예로는 알돈산(글리세르산 등), 울로손산(뉴라민산 등), 우론산(글루쿠론산 등), 알다르산(타르타르산 등) 등이 있으며 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 일 구현예에서, 당은 단당류, 이당류, 올리고당, 다당류, 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함하고, 당의 유도체는 당 알코올, 당 산, 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다. 본 발명의 일 구현예에서, 당 또는 당의 유도체는 소르비톨, 만니톨, 트레할로스, 수크로오스, 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 당 또는 당의 유도체의 농도는 0.01 내지 30 %(w/v) 일 수 있다. 본 발명의 다른 일 구현예에서, 상기 농도는 0.1 내지 15 %(w/v)일 수 있다. 본 발명의 또 다른 일 구현예에서, 상기 농도는1.0 내지 10 %(w/v)일 수 있다. 상기 농도가 이 범위 내인 경우, 액체 약제학적 제제의 안정성을 우수하게 나타낼 수 있다. 상기 농도는 본 발명에 따른 안정한 액체 약제학적 제제의 안정성에 악영향을 실질적으로 미치지 않는 범위 내에서 자유롭게 조절할 수 있다.
(D) 아미노산
본 발명에서 “아미노산”은 유리 아미노산, 아미노산염, 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다. 상기 유리 아미노산(free amino acid)은 아미노산 간의 펩타이드 결합 또는 아미노산과 다른 분자와의 사이에서 에스터르(ester)결합 등을 하지 않는 유리상태의 아미노산을 의미한다. 아미노산의 예로서는 아스파르트산, 히스티딘, 리신, 아르기닌 등이 있으며, 이에 제한되지 않는다. 아미노산염의 예로서는 아스파르트산염, 히스티딘염, 리신염, 아르기닌염 등이 있으며, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 일 구현예에서, 아미노산은 아스파르트산, 히스티딘, 리신, 아르기닌, 또는 이들의 염을 포함할 수 있다. 본 발명의 다른 일 구현예에서, 아미노산은 히스티딘, 히스티딘염, 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명의 또 다른 일 구현예에서, 아미노산은 히스티딘 및 히스티딘-HCl의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 아미노산은 아미노산, 아미노산염, 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명의 또 다른 일 구현예에서, 상기 아미노산은 완충제일 수 있다.
상기 “완충제”는 산이나 알칼리에 의한 pH의 변화를 최소화시키는 중화성 물질을 의미하며 pH 조절제 없이도 특정 범위의 pH를 유지시키는 물질을 의미한다.
본 발명의 일 구현예에서, 아미노산의 농도는 0.1 내지 40 mM 일 수 있다. 본 발명의 다른 일 구현예에서, 상기 농도는 1 내지 20 mM 일 수 있다. 본 발명의 또 다른 일 구현예에서, 상기 농도는 5 내지 15 mM 일 수 있다. 상기 농도가 이 범위 내인 경우, 액체 약제학적 제제의 안정성을 우수하게 나타낼 수 있다. 상기 농도는 본 발명에 따른 안정한 액체 약제학적 제제의 안정성에 악영향을 실질적으로 미치지 않는 범위 내에서 자유롭게 조절할 수 있다.
(E) pH
본 발명에서 안정한 액체 약제학적 제제의 pH는 5.5 내지 6.5일 수 있다. pH가 이 범위 내에 있는 경우, 장기간 안정성을 우수하게 나타낼 수 있다. pH는 완충제 또는 아미노산을 이용하여 조절할 수 있다. 다시 말해서, 완충제 또는 아미노산을 소량으로 포함하는 경우 별도의 pH 조절제 없이도 상기 범위의 pH를 나타낼 수 있다.
본 발명의 다른 일 구현예어서, 상기 pH는 추가적인 pH 조절제로 조절할 수 있다. pH 조절제는 산 또는 염기(예를 들면, 수산화나트륨) 등이 있으며 이에 제한되지 않는다.
(F) 기타 성분
본 발명의 안정한 액체 약제학적 제제는 항체의 활성, 제제의 안정성에 악영향을 실질적으로 미치지 않는 범위 내에서 당해 기술분야에서 공지된 첨가제를 추가적으로 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 일 구현예에서, 상기 첨가제는 추가 완충제, 희석제, 용해제, pH 조절제, 진정제, 다른 무기 또는 유기 염, 산화방지제, 수성 담체, 또는 이들의 혼합물 등을 포함할 수 있으며, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 발명의 또 다른 일 구현예에서, 수성 담체, 산화방지제, 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 더 포함할 수 있다. 수성 담체는 제약상 허용되고(인간에게 투여시 안전하고 무독성이고), 액체 약제학적 제제의 제조에 유용한 담체를 포함할 수 있다.
(G) “안정한” 액체 약제학적 제제
본 발명의 "안정한" 액체 약제학적 제제에서 용어 “안정한”은 본 발명에 따른 항체가 제조 공정 동안 및/또는 보관/저장 시에 이의 물리적 안정성 및/또는 화학적 안정성 및/또는 생물학적 활성을 실질적으로 보유하는 것을 의미한다. 항체의 안정성을 측정하는 다양한 분석학적 기술은 당해 기술분야에서 용이하게 이용할 수 있다.
본 발명에서 “물리적 안정성”은 당해 기술분야에 공지된 방법으로 평가할 수 있으며, 이러한 방법은 광(흡광 또는 광학 밀도)의 샘플 겉보기 감쇠 측정 등을 포함할 수 있다. 이러한 광 감쇠 측정은 제제의 탁도와 관련된다. 또한, 물리적 안정성에 대해 고분자량 성분 함량, 저분자량 성분 함량, 온전한 단백질량, 불용성 이물 입자 수 등을 측정할 수 있다.
본 발명에서 “화학적 안정성”은, 당해 기술분야에 공지된 방법으로 평가할 수 있으며, 이러한 방법은 화학적으로 변화된 형태의 항체를 검출하고 정량화하는 평가 등을 포함할 수 있다. 또한 화학적 안정성에 대해 이온 교환 크로마토그래피을 이용한 전하 변형체(예를 들면, 탈아미드화 또는 산화의 결과로서 발생) 등을 측정할 수 있다. 상기 이온 교환 크로마토그래피를 이용한 전하 변형체 측정은 산성 또는 염기성 피크 등을 통해 측정할 수 있다.
본 발명에서 “저장 안정성”은 예를 들어 운반 중, 변경된 기후 조건, 상승된 온도 및 대기 습도 환경, 전단 응력이 작용 환경 등의 경우에도 항체가 생물학적 활성을 실질적으로 보유하는 것을 의미한다. 상기 저장 안정성은 장기간 상승된 온도 및 대기 습도 환경 등에서 황체의 생물학적 활성을 측정하는 다양한 분석법을 통해 측정할 수 있다.
본 발명에서 “생물학적 활성”은 당해 기술분야에 공지된 방법으로 평가할 수 있으며, 이러한 방법은 ELISA(Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay)를 통해 항원 결합 친화도를 측정 등을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 액체 약제학적 제제는 장기간 동안 안정할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 용어 “안정한” 액체 약제학적 제제는 다음 중 하나 이상을 만족하는 액체 약제학적 제제를 의미한다.
외관 분석
- 온도 40±2 ℃, 상대습도 75±5 %, 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 유관상 투명한 정도가 유지되는 액체 약제학적 제제;
- 온도 5±3 ℃, 주변 습도, 및 밀폐 조건에서 12개월 보관 후 유관상 투명한 정도가 유지되는 액체 약제학적 제제;
pH
- 온도 5±3 ℃, 주변 습도, 및 밀폐 조건에서 12개월 보관 후 pH측정 결과 6.0±0.5를 만족하는 액체 약제학적 제제;
무균 상태
- 온도 5±3 ℃, 주변 습도, 및 밀폐 조건에서 12개월 보관 후 아이솔레이터 (Isolaotor) 내에서 배지의 미생물이 자라지 않는 액체 약제학적 제제;
항체 농도
- 온도 5±3 ℃, 주변 습도, 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 HIC-HPLC로 측정한 단일 항체의 농도가 50±5.0 mg/mL 이거나, 항체 혼합물을 구성하는 단일 항체의 각각의 농도가 25±2.5 mg/mL 이고 항체 혼합물의 농도가 50±5.0 mg/mL인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25±2 ℃, 상대습도 60±5 %, 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 HIC-HPLC로 측정한 단일 항체의 농도가 50±5.0 mg/mL 이거나, 항체 혼합물을 구성하는 단일 항체의 각각의 농도가 25±2.5 mg/mL 이고 항체 혼합물의 농도가 50±5.0 mg/mL 인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40±2 ℃, 상대습도 75±5 %, 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 HIC-HPLC로 측정한 단일 항체의 농도가 50±5.0 mg/mL 이거나, 항체 혼합물을 구성하는 단일 항체의 각각의 농도가 25±2.5 mg/mL이고 항체 혼합물의 농도가 50±5.0 mg/mL인 액체 약제학적 제제;
- 온도 5±3 ℃, 주변 습도, 및 밀폐 조건에서 12개월 동안 보관한 후 HIC-HPLC로 측정한 단일 항체의 농도가 50±5.0 mg/mL 이거나, 항체 혼합물을 구성하는 단일 항체의 각각의 농도가 25±2.5 mg/mL 이고 항체 혼합물의 농도가 50±5.0 mg/mL인 액체 약제학적 제제;
온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)
- 온도 40±2 ℃, 상대습도 75±5 % 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 Chip-based CE-SDS로 측정한 온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG %)이 95.0 내지 100 %인 액체 약제학적 제제;
- 온도 5±3 ℃, 주변 습도, 및 밀폐 조건에서 12개월 동안 보관한 후 비환원 CE-SDS로 측정한 온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG %)이 90.0 내지 100 %인 액체 약제학적 제제;
온전한 중쇄 및 경쇄의 함량 (Intact HC+LC%)
- 온도 5±3 ℃, 주변 습도, 및 밀폐 조건에서 12개월 동안 보관한 후 환원 CE-SDS로 측정한 온전한 경쇄 및 중쇄의 함량(Intact HC+LC %)이 95.0 내지 100 %인 액체 약제학적 제제;
항체 모노머의 함량
- 온도 40±2 ℃, 상대습도 75±5 %, 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 SEC-HPLC로 측정한 항체 모노머의 함량이 95.0 내지 100 %인 액체 약제학적 제제;
- 온도 5±3 ℃, 주변 습도, 및 밀폐 조건에서 12개월 동안 보관한 후 SEC-HPLC로 측정한 항체 모노머의 함량이 95.0 내지 100 %인 액체 약제학적 제제;
인플루엔자 A 바이러스 HA결합 친화도
- 온도 5±3 ℃, 주변 습도, 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 CELISA(Cellular Enzyme-Linked Immunosorbent assay) 또는 ELISA로 측정한 HA결합 친화도가 70 내지 130%인 액체 약제학적 제제;
- 온도 25±2 ℃, 상대습도 60±5%, 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 CELISA(Cellular Enzyme-Linked Immunosorbent assay) 또는 ELISA로 측정한 HA결합 친화도가 70 내지 130 %인 액체 약제학적 제제;
- 온도 40±2 ℃, 상대습도 75±5%, 및 밀폐 조건에서 6주 동안 보관한 후 CELISA(Cellular Enzyme-Linked Immunosorbent assay) 또는 ELISA로 측정한 HA결합 친화도가 70 내지 130%인 액체 약제학적 제제
- 온도 5±3 ℃, 주변 습도, 및 밀폐 조건에서 12개월 동안 보관한 후 CELISA(Cellular Enzyme-Linked Immunosorbent assay) 또는 ELISA로 측정한 HA결합 친화도가 70 내지 130 %인 액체 약제학적 제제;
[안정한 액체 약제학적 제제의 제조방법]
본 발명의 안정한 액체 약제학적 제제의 제조방법은 공지된 방법을 이용하여 제조할 수 있으며, 특정 방법으로 제한되지 않는다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 제조방법은 i) 당 또는 당의 유도체를 포함하는 용액에 아미노산을 첨가한 혼합 용액을 제조하는 단계; ii) i) 단계의 혼합 용액과 항체 포함하는 용액 간의 완충액을 교환하여 항체를 포함하는 혼합 용액을 제조하는 단계; 및 iii) ii) 단계의 항체를 포함하는 혼합 용액에 계면활성제 포함하는 용액을 첨가하는 단계를 포함하는 안정한 액체 약제학적 제제를 제조하는 방법일 수 있다.
상기 “완충액”은 완충제를 포함하는 용액으로서, 산이나 알칼리에 의한 pH의 변화를 최소화시키는 용액을 의미한다.
본 발명의 일 구현예에서, 서로 다른 2개의 항-인플루엔자 바이러스 항체의 혼합물을 포함하는 안정한 액체 약제학적 제제의 제조방법은 각각의 항체를 상기 제조방법으로 안정한 액체 약제학적 제제를 제조한 뒤 이를 혼합하거나 항체 혼합물을 제조한 뒤 상기 제조방법으로 안정한 액체 약제학적 제제를 제조할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 제조방법은 제조시 동결 건조 공정을 포함하지 않을 수 있거나 동결 건조 공정을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 일 구현예에서, 제조방법이 동결 건조 공정을 포함하지 않은 경우, 상기 제조방법은 추가적으로 액체 약제학적 제제를 제조하고 멸균 등의 처리 후 바로 밀폐 용기에 담는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 일 구현예에서, 제조방법이 동결 건조 공정을 포함하는 경우, 상기 제조방법은 추가적으로 액체 약제학적 제제를 제조하고 동결 건조한 후, 또는 본 발명의 액체 약제학적 제제를 제조하고 동결 건조하고 보관/저장한 후, 동결 건조 및/또는 보관/저장에 의해 제거되었거나 변형된 성분을 보충하거나 교체하는 단계를 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 액체 약제학적 제제 중에서 동결 건조 및/또는 보관/저장에 의해 제거되거나 변형될 수 있는 성분들이 제외된 성분들만을 동결 건조한 후, 또는 그 성분들만을 동결 건조하고 보관/저장한 후, 상기 제외되었던 성분들을 첨가하는 단계를 포함할 수 있다.
[안정한 액체 약제학적 제제의 용도]
본 발명의 안정한 액체 약제학적 제제는 인플루엔자 바이러스 감염의 진단, 예방, 또는 치료용일 수 있다. 본 발명의 일 구현예에서, 본 발명의 안정한 액체 약제학적 제제는 인플루엔자 바이어스 감염에 유래된 질환의 진단, 예방, 또는 치료용일 수 있다. 본 발명의 다른 일 구현예에서, 인플루엔자 바이러스 감염에 유래된 질환은 폐렴, 중이염 등이 있으며 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 정맥내, 근육내, 피내, 피하내, 복막내, 국소, 또는 이의 조합된 투여용일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 1회 또는 수회 투여용일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 액체 약제학적 제제 내의 항체를 비롯한 다른 성분들의 농도는 상술한 바와 같으며, 액체 약제학적 제제의 전체 부피는 0.1 내지 100 mL일 수 있다.
본 발명의 액체 약제학적 제제의 투여량 및 투여시기는 질병의 종류, 질병의 중증도 및 경과상태, 환자의 건강 및 치료에 대한 반응, 및 치료하는 의사의 판단에 따라 달라질 수 있으며, 특정 투여량 및 투여시기로 제한되지 않는다.
[진단, 예방, 또는 치료방법]
본 발명은 (A) 항-인플루엔자 바이러스 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물; (B) 계면활성제; (C) 당 또는 당의 유도체; 및 (D) 아미노산을 포함하는 안정한 액체 약제학적 제제를 환자에게 투여하는 것을 포함하는 인플루엔자 바이러스 진단, 예방, 또는 치료 방법을 제공한다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 예방 또는 치료 방법은 당업자에게 알려진 치료제를 함께 투여할 수 있다. 본 발명의 다른 일 구현예에서, 상기 예방 또는 치료 방법은, 항-바이러스 약물을 투여하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 또 다른 일 구현예에서, 상기 항-바이러스 약물은 항-인플루엔자 바이러스 단일클론 항체, 항-인플루엔자 바이러스 다클론 항체, DNA 폴리머라제 저해제, siRNA 제제 또는 치료 백신일 수 있으며, 이에 제한되는 것은 아니다.
[안정화 방법]
본 발명은 (A) 항-인플루엔자 바이러스 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물; (B) 계면활성제; (C) 당 또는 당의 유도체; 및 (D) 아미노산을 포함하는 안정한 액체 약제학적 제제를 제조하는 것을 포함하는 항체를 액체 약제학적 제제 내에서 안정화하는 방법을 제공한다.
[키트]
본 발명은 (A) 항-인플루엔자 바이러스 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물; (B) 계면활성제; (C) 당 또는 당의 유도체; 및 (D) 아미노산을 포함하는 안정한 액체 약제학적 제제; 및 상기 안정한 액체 약제학적 제제를 밀폐된 상태로 수용하는 용기를 포함하는 키트를 제공한다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 용기는 유리, 폴리머(플라스틱), 금속 등의 물질로부터 형성될 수 있으며, 이에 제한되지 않는다. 본 발명의 일 구현예에서, 상기 용기는 병, 바이알, 주사기, 또는 튜브이며, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 용기는 유리 또는 폴리머 바이알, 또는 유리 또는 폴리머 프리필드시린지일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 용기의 내부에 실리콘 오일이 코팅되어 있지 않을 수 있다. 실리콘 오일이 코팅되어 있는 경우 안정성이 저하될 수 있다. 상기 용기는 1회 투여용 또는 수회 투여용 용기일 수 있다.
상기 바이알, 카트리지, 프리-필드 시린지, 자동 주사기 등의 구체적인 제품형태와 상기 안정한 액체 약제학적 제제를 상기 바이알, 카트리지, 프리-필드 시린지, 자동 주사기 등에 충진하는 방법은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 용이하게 입수하거나 실시할 수 있다. 예를 들어, 미국 특허 제4,861,335호, 제6,331,174호 등은 프리-필드 시린지의 구체적인 제품형태 및 충진방법을 개시한다. 예를 들어, 미국 특허 제5,085,642호, 제5,681,291호 등은 자동 주사기의 구체적인 제품형태 및 조립방법을 개시한다. 상기 바이알, 카트리지, 프리-필드 시린지, 자동 주사기 등으로서 상용화된 제품을 그대로 이용하거나, 상기 안정한 액체 약제학적 제제의 물성, 투여부위, 투여량 등을 고려하여 별도로 주문 제작한 제품을 이용할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 키트는 상기 안정한 액체 약제학적 제제의 사용방법, 보관방법, 또는 이들 모두를 제공하는 지시사항을 더 포함할 수 있다. 상기 사용방법은 인플루엔자 바이러스 감염의 진단, 예방, 또는 치료 방법을 포함하고, 투여경로, 투여량 및 투여시기를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 키트는 상업적 및 사용자 관점에서 필요한 기타 도구를 포함할 수 있다. 본 발명의 다른 일 구현예에서, 상기 기타 도구는 바늘, 주사기 등을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 키트는 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 추가적으로 포함할 수 있으며, 약제학적으로 허용 가능한 부형제는 용인 가능한 또는 편리한 제형 (dosage form)을 제조하기 위한 항체와 같은 활성 분자와 조합되는 불활성 물질을 의미한다. 약제학적으로 허용가능한 부형제는 사용된 투여량 및 농도에서 수용자에게 비독성이고, 모노클로날 항체를 포함하는 조성물의 다른 성분과 양립할 수 있는 부형제이다.
이하 본 발명을 실시예에 따라 상세히 설명한다. 그러나, 하기의 실시예들은 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 발명의 범위가 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다. 본 발명에서 인용된 문헌 및 본 출원인이 기출원한 한국특허출원 제10-2011-0020061호, 한국특허출원 제10-2012-0107512호, 및 한국특허출원 제10-2014-0036601호는 본 발명의 명세서에 참조로서 통합된다.
실시예
아래 실험예에서 사용한 항-인플루엔자 바이러스 항체의 동정, 클로닝, 제조 및 특징화는 한국특허출원 제10-2011-0020061호, 한국특허출원 제10-2012-0107512호에 상세히 기술되어 있으며, 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물은 한국특허출원 제10-2014-003660호 에 상세히 기술되어 있다.
아래 실험예에서 항-인플루엔자 바이러스 항체로 한국특허출원 제10-2011-0020061호의 실시예 4에서 최종 선별한 11개의 항체 중 3종과 한국특허출원 제10-2012-0107512호 의 실시예4에서 최종 선별한 6개의 항체 중 4종 (이하 "항체 1", "항체 2", “항체 3”, “항체 4”, “항체 5”, “항체 6”, 또는 “항체 7”이 라 칭함)을 사용하였으며, 항체 혼합물은 상기 7종의 항체를 2 이상 포함하는 항체 혼합물을 사용하였다.
아래 실험예에서 사용된 액체 약제학적 제제의 물리적 안정성, 화학적 안정성 및 생물학적 활성의 측정방법으로서 다음과 같은 방법을 사용하였다.
하기 측정방법에 따른 물리적 안정성, 화학적 안정성 및 생물학적 활성은 측정 환경 및 조건에 따른 측정 오차를 포함할 수 있다.
- 항체 농도
HIC-HPLC (Hydrophobic Interaction Chromatography)를 이용하여 단일 항체와 항체 혼합물의 농도(mg/mL)를 측정하였다.
- 외관 분석
저장된 제제의 외관을 이용하여 용액의 투명도(Clarity)를 측정하였다.
- pH 측정
pH-측정기를 이용하여 용액의 pH를 측정하였다.
- 무균 시험
아이솔레이터(Isolator) 내에서 용액의 미생물의 자라나는 정도를 측정하였다.
- 온전한 면역글로불린 G의 함량(Intact IgG%)
마이크로칩-기반 모세관 전기이동 나트륨 도데실 설페이트(Chip-based Capillary Electrophoresis-Sodium Dodecyl Sulfate; CE-SDS) 또는 비환원 CE-SDS를 이용하여 온전한 면역글로불린 G의 함량((Intact IgG%)을 측정하였다.
- 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)
환원 모세관 전기이동 나트륨 도데실 설페이트(Capillary Electrophoresis-Sodium Dodecyl Sulfate; CE-SDS)를 이용하여 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC%)을 측정하였다.
- 인플루엔자 바이러스 결합 친화도
효소결합면역흡착 분석법(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay; ELISA) 또는 세포효소결합면역흡착 분석법(Cellular Enzyme-Linked ImmunoSorbent assay; CELISA) 으로 인플루엔자 바이러스 HA 결합 친화도(%)를 측정하였다.
- 항체 모노머의 함량
크기 배제 고성능 액체 크로마토그래피(Size Exclusion HPLC)를 이용하여 항체 모노머의 함량(post-peak; %)을 측정하였다.
실험예 1. 실시예 1 내지 9 및 비교예 1 내지 21의 제조
항-인플루엔자 바이러스 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물의 최적화된 액체 약제학적 제제 선별을 위하여, 대표적으로 단일 항체로서 항체 1또는 항체 2를 항체 혼합물로서 항체 1 및 항체 2를 1:1로 혼합한 항체 혼합물을 대상으로 후보 액체 약제학적 제제 구성 성분을 적용하여 하기와 같은 방법으로 실시예 1 내지 9 및 비교예 1 내지 21을 제조하였다.
각 완충제를 이용하여 최적의 완충능력을 보이는 pH에 맞게 완충액을 제조한 뒤 당, 당 알코올, 또는 염화나트룸을 첨가하고, 완충제와 당, 당 알코올, 또는 염화나트륨이 포함된 용액에 항-인플루엔자 바이러스 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물을 첨가하고, 계면활성제를 목표 농도에 도달하도록 첨가하여 후보 액체 약제학적 제제를 제조하였다.
후보 액체 약제학적 제제의 각 성분에 대한 구체적인 함량은 하기 표 1에서와 같으며, 전체 용량은 4 mL 이다.
실시예 1 내지 9 및 비교예 1 내지 21
구분 완충제 pH 당, 당 알코올, 또는
염화나트륨		 계면활성제
(w/v)		 항체 농도 (mg/mL)
항체 1 항체 2
실시예 1 히스티딘
10 mM		 6.0 소르비톨
5 %(w/v) 		폴리소르베이트 80
0.10 %		 25 25
실시예 2 히스티딘
10 mM		 6.0 소르비톨
5 %(w/v) 		폴리소르베이트 80
0.10 %		 50 -
실시예 3 히스티딘
10 mM		 6.0 소르비톨
5 %(w/v) 		폴리소르베이트 80
0.10 %		 - 50
실시예 4 히스티딘
10 mM		 6.0 소르비톨
5 %(w/v)		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 25 25
실시예 5 히스티딘
10 mM		 6.0 소르비톨
5 %(w/v)		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 50 -
실시예 6 히스티딘
10 mM		 6.0 소르비톨
5 %(w/v)		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 - 50
실시예 7 히스티딘
10 mM		 6.0 소르비톨
5 %(w/v)		 폴리소르베이트 80
0.02 %		 25 25
실시예 8 히스티딘
10 mM		 6.0 소르비톨
5 %(w/v)		 폴리소르베이트 80
0.02 %		 50 -
실시예 9 히스티딘
10 mM		 6.0 소르비톨
5 %(w/v)		 폴리소르베이트 80
0.02 %		 - 50
비교예 1 히스티딘
10 mM		 6.0 염화나트륨
140 mM		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 25 25
비교예 2 히스티딘
10 mM		 6.0 염화나트륨
140 mM		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 50 -
비교예 3 히스티딘
10 mM		 6.0 염화나트륨
140 mM		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 - 50
비교예 4 아세트산나트륨
10 mM		 4.0 염화나트륨
140 mM 		폴리소르베이트 80
0.05 %		 25 25
비교예 5 아세트산나트륨
10 mM		 4.0 염화나트륨
140 mM 		폴리소르베이트 80
0.05 %		 50 -
비교예 6 아세트산나트륨
10 mM		 4.0 염화나트륨
140 mM 		폴리소르베이트 80
0.05 %		 - 50
비교예 7 아세트산나트륨
10 mM		 4.0 소르비톨
5 %(w/v)		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 25 25
비교예 8 아세트산나트륨
10 mM		 4.0 소르비톨
5 %(w/v)		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 50 -
비교예 9 아세트산나트륨
10 mM		 4.0 소르비톨
5 %(w/v)		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 - 50
비교예 10 아세트산나트륨
10 mM		 5.0 염화나트륨
140 mM		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 25 25
비교예 11 아세트산나트륨
10 mM		 5.0 염화나트륨
140 mM		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 50 -
비교예 12 아세트산나트륨
10 mM		 5.0 염화나트륨
140 mM		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 - 50
비교예 13 아세트산나트륨
10 mM		 5.0 소르비톨
5 %(w/v)		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 25 25
비교예 14 아세트산나트륨
10 mM		 5.0 소르비톨
5 %(w/v)		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 50 -
비교예 15 아세트산나트륨
10 mM		 5.0 소르비톨
5 %(w/v)		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 - 50
비교예 16 인산나트륨
10 mM		 6.0 염화나트륨
140 mM		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 25 25
비교예 17 인산나트륨
10 mM		 6.0 염화나트륨
140 mM		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 50 -
비교예 18 인산나트륨
10 mM		 6.0 염화나트륨
140 mM		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 - 50
비교예 19 인산나트륨
10 mM		 6.0 소르비톨
5 %(w/v)		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 25 25
비교예 20 인산나트륨
10 mM		 6.0 소르비톨
5 %(w/v)		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 50 -
비교예 21 인산나트륨
10 mM		 6.0 소르비톨
5 %(w/v)		 폴리소르베이트 80
0.05 %		 - 50
실험예 2. 실시예 1 내지 9 및 비교예 1 내지 21의 안정성 비교
실시예 1 내지 9 및 비교에 1 내지 21을 5±3 ℃/주변 상대 습도, 25±2 ℃/60±5 % 상대습도, 40±2 ℃/75±5 % 상대습도에서 보관하였다. 상기 각 온도 및 습도에서 2주 후, 4주 후, 6주 후 안정성을 측정하였다.
실시예 1 내지 9 및 비교예 1 내지 21의 안정성을 비교하기 위하여, 외관 분석, 항체 농도 측정, 온전한 면역글로블린 G의 함량 측정, 항체 모노머의 함량 측정, 및 결합 친화도(ELISA 및 CELISA) 측정을 수행하였다.
단일 항체인 항체 1 또는 항체 2를 포함한 실시예 및 비교예와 항체 1 및 항체 2의 항체 혼합물에 대한 실시예와 비교예의 경향성이 동일하여, 대표적으로 항체 혼합물에 대한 실시예 1, 4, 및 7과 비교예 1, 4, 7, 10, 13, 16, 및 19를 대상으로 안정성 측정한 결과를 명세서에 기재하였다.
(1) 외관 분석
실시예 1, 4, 및 7및 비교예 1, 4, 7, 10, 13, 16, 및 19에 대해 육안으로 관찰되는 입자 및 투명도를 판단하는 외관 분석을 수행하여, 전혀 탁하지 않은 경우를 투명으로, 유관상 입자가 보이지 않으나 탁한 경우를 연한 유백색으로, 유관상 입자가 보이지 않으나 매우 탁한 경우를 유백색으로, 젤라틴과 같은 형상을 나타내는 경우를 불투명으로 표시하였다.
하기 표 2에서 나타난 바와 같이, 40±2 ℃/75±5 % 상대습도에서 아세트산 완충제, pH 4.0, 140mM 염화나트륨을 포함한 비교예 4는 4주가 경과한 뒤 젤라틴화가 진행되어 분석이 불가능한 수준을 보여주었다(IS: Inaccessible State). 모든 온도조건에서 실시예 1, 4, 및 7및 비교예 1, 7, 10, 13, 16, 및, 19는 6주 동안 육안으로 관찰되는 입자는 존재하지 않았지만, 염화나트륨을 포함한 비교예 1, 4, 10, 및 16은 외관상 연한 유백색 또는 유백색을 나타나는 데 반해, 소르비톨을 포함한 실시예 1, 4, 및 7및 비교예 7, 13, 및 19는 외관상 투명한 결과를 보여주었다.
따라서, 모든 온도조건에서 염화나트륨보다 소르비톨을 포함하는 경우가 유관상 투명 정도가 유지되었다.
이후 실험에서는 젤라틴화가 진행된 비교예 4를 제외한 실시예 1, 4, 및 7과 비교예 1, 7, 10, 13, 16, 및 19에 대해서만 분석을 진행하였다.
구분 온도 0주 2주 후 4주 후 6주 후
실시예 1 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 투명 투명 투명 투명
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 투명 투명 투명 투명
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 투명 투명 투명 투명
실시예 4 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 투명 투명 투명 투명
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 투명 투명 투명 투명
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 투명 투명 투명 투명
실시예 7 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 투명 투명 투명 투명
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 투명 투명 투명 투명
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 투명 투명 투명 투명
비교예 1 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색
비교예 4 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 연한 유백색 유백색 불투명 불투명
비교예 7 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 투명 투명 투명 투명
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 투명 투명 투명 투명
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 투명 투명 투명 투명
비교예 10 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색
비교예 13 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 투명 투명 투명 투명
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 투명 투명 투명 투명
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 투명 투명 투명 투명
비교예 16 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색 연한 유백색
비교예 19 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 투명 투명 투명 투명
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 투명 투명 투명 투명
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 투명 투명 투명 투명
(2) 항체 농도
실시예 1, 4, 및 7 및 비교예 1, 7, 10, 13, 16, 및 19에 대해 HIC-HPLC (Hydrophobic Interaction Chromatography)를 이용하여 항체 혼합물 내의 항체 1 및 항체 2의 각각의 농도를 측정하였다.
그 결과 모든 온도조건에서 변화 없다는 것을 알 수 있었다(데이터는 나타내지 않음).
(3) 온전한 면역글로블린 G의 함량(%)
실시예 1, 4, 및 7 및 비교예 1, 7, 10, 13, 16, 및 19에 대해 Chip-based CE-SDS 분석 장비인 Labchip GXII를 이용하여 온전한 면역글로블린 G의 함량을 측정하였다.
하기 표 3에서 나타난 바와 같이, 40±2 ℃/75±5 % 상대습도에서 6주 후, 히스티딘 완충제를 포함하는 실시예 1, 4, 및 7및 비교예 1은 인산 완충제를 포함하는 비교예 16 및 19는 95 % 이상의 순도를 보여주는 반면에 아세트산 완충제를 포함하는 비교예 7 및 10은 95 % 미만의 순도를 보여주었다.
따라서, 높은 온도조건에서 아세트산 완충제보다 히스티딘 완충제 또는 인산 완충제를 포함하는 경우가 CE-SDS 측정 결과 95 % 이상 온전한 면역글로블린 G의 함량이 유지되었으므로 열화에 안정하다는 것을 알 수 있었다. 열화란 인체에 체온 보다 높은 온도(본 발명의 40±2 ℃에 해당함)에서 단백질의 고유한 구조적 특성이 변형된 것을 의미한다.
구분 온도 0주 2주 후 4주 후 6주 후
실시예 1 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 98.42 98.57 98.35 98.00
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 98.42 98.61 98.47 97.90
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 98.42 98.32 96.54 96.40
실시예 4 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 98.44 98.69 98.35 98.48
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 98.44 98.53 98.47 97.80
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 98.44 98.26 96.62 96.42
실시예 7 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 98.46 98.59 98.39 98.33
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 98.46 98.58 98.51 98.03
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 98.46 98.28 96.69 96.34
비교예 1 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 98.38 98.67 98.35 98.61
25±2℃ / 60±5 % 상대 습도 98.38 98.61 98.47 97.81
40±2℃ / 75±5 % 상대 습도 98.38 98.22 96.35 96.28
비교예 7 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 98.47 98.55 98.32 98.51
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 98.47 98.54 98.44 97.47
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 98.47 98.16 95.58　 94.52　
비교예 10 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 98.36 98.65 98.31 98.34
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 98.36 98.45 98.43 97.17
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 98.36 97.85 93.49 91.95
비교예 13 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 98.43 98.68 98.31 98.47
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 98.43 98.47 98.43 97.73
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 98.43 98.18 96.19 95.07
비교예 16 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 98.48 98.56 98.33 97.98
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 98.48 98.64 98.45 97.17
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 98.48 98.20 95.61 96.26
비교예 19 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 98.46 98.62 98.38 98.27
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 98.46 98.59 98.50 97.70
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 98.46 98.21 96.40 95.77
(4) 항체 모노머의 함량 (%)
실시예 1, 4, 및 7 및 비교예 1, 7, 10, 13, 16, 및 19에 대해 SEC-HPLC를 이용하여 항체 모노머의 함량을 측정하였다.
하기 표 4에서 나타난 바와 같이, 40±2 ℃/75±5 % 상대습도에서 6주 후, 히스티딘 완충제, pH 6.0, 5 % 소르비톨을 포함하는 실시예 1, 4, 및 7은 95% 이상의 순도를 보여주는 반면에 아세트산 완충제 또는 인산 완충제를 포함하는 비교예 1, 7, 10, 13, 16, 및 19는 95 % 미만의 순도를 보여주었다. 또한 상대적으로 pH 4.0의 아세트산 완충제를 포함하는 비교예 7은 크로마토그램 상에서 메인피크 뒤쪽에 나타나는 분해산물 (Fragments)의 비율이 상대적으로 높았으며, 인산 완충제를 포함하는 비교예 16 및 17는 크로마토그램 상에서 메인피크 앞쪽에 나타나는 응집체 (Aggregate)의 비율이 상대적으로 높았음을 확인할 수 있었다 (데이터는 나타내지 않음).
따라서, 높은 온도조건에서 아세트산 완충제 또는 인산 완충제보다 히스티딘 완충제를 포함하는 경우가 SEC-HPLC 측정 결과 95 % 이상 항체 모노머의 함량이 유지되었으므로 열화에 안정하다는 것을 알 수 있었다. 또한 염화나트륨을 포함하는 비교예 1, 10, 및 16은 소르비톨을 포함하는 실시예 1, 4, 및 7 및 비교예 1, 7, 13, 및 19보다 낮은 모노머 함량을 보여주는 것으로 보아 염화나트륨이 소르비톨보다 열화에 안정하다는 것을 알 수 있었다.
구분 온도 0주 2주 후 4주 후 6주 후
실시예 1 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 99.17 99.12 99.23 99.10
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 99.17 99.08 99.23 98.80
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 99.17 96.91 96.12 95.69
실시예 4 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 99.20 99.15 99.23 99.12
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 99.20 99.11 99.05 98.91
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 99.20 96.96 96.33 95.83
실시예 7 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 99.20 99.17 99.27 99.17
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 99.20 99.11 99.08 98.92
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 99.20 97.17 96.05 95.78
비교예 1 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 99.13 99.04 99.14 98.99
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 99.13 98.98 98.80 98.62
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 99.13 96.62 95.28 94.67
비교예 7 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 99.41 99.35 99.43 99.33
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 99.41 99.32 99.31 99.16
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 99.41 97.21 95.46 94.73
비교예 10 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 99.17 99.15 99.22 99.04
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 99.17 98.96 98.77 98.58
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 99.17 96.03 93.59 91.46
비교예 13 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 99.34 99.39 99.41 99.29
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 99.34 99.28 99.27 99.04
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 99.34 97.11 96.13 95.57
비교예 16 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 98.78 98.79 98.85 98.77
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 98.78 98.60 98.43 98.29
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 98.78 96.08 94.77 94.20
비교예 19 5±3 ℃ / 주변 상대 습도 98.92 98.91 99.01 98.83
25±2 ℃ / 60±5 % 상대 습도 98.92 98.86 98.72 98.50
40±2 ℃ / 75±5 % 상대 습도 98.92 96.51 95.41 94.71
(5) 결합 친화도 측정
실시예 1, 4, 및 7및 비교예 1, 7, 10, 13, 16, 및 19에 대해 ELISA 및 CELISA를 이용하여 항체 결합 친화도를 측정하였다.
H1(H1N1), H3(H3N2) 서브타입의 HA를 발현하는 CHO 세포주를 이용하여 각각 항체 1과 항체 2의 결합능력을 CELISA를 통해 측정하였고, H5(H5N1) 서브타입의 HA에 대한 항체 1과 항체 2의 항체 혼합물의 결합능력을 ELISA를 통해 측정하였다.
그 결과 모든 온도조건에서 HA결합 친화도가 70 내지 130 %인 것을 알 수 있었다(데이터는 나타내지 않음).
실험예 3. 제형 구성 성분 종류 및 농도에 대한 추가 실험
(1) 항체
상기 실험예 2의 실시예 1, 4, 및 7에서 확인된 바와 같이, 항체 1과 항체 2를 모두 포함한 항체 혼합물 제형이 안정하다는 것을 확인하였다. 상기 실험예 2의 항체 농도 측정, 온전한 면역글로블린 G의 함량 측정, 항체 모노머의 함량 측정, 및 결합 친화도(ELISA 및 CELISA) 측정에서 항체 1 과 항체 2 각각에 대하여 안정성을 확인하였다. 이를 통하여 단일 항체인 항체 1과 항체 2도 항체 혼합물과 안정성 경향이 동일함을 확인하였다.
또한 추가적으로 실시예 1에서 항체 혼합물의 농도를 150 mg/mL로 하여 외관 분석, 항체 농도 측정 등을 수행한 결과 안정함을 확인하였다(데이터 나타내지 않음).
(2) 계면활성제 　
상기 실험예 2의 실시예 1, 4, 및 7에서 확인된 바와 같이, 계면활성제를 포함하는 경우 안정한다는 것을 확인하였다. 다른 계면활성제를 포함하는 경우에도 안정한지를 확인하기 위해 추가적으로 실시예 1, 4, 및 7의 제형에서 계면활성제를 폴리소르베이트 20 또는 풀록사머 188을 치환하여 6주 후 외관을 분석한 결과에서도 제형은 모두 안정하였다(데이터는 나타내지 않음).
또한 추가적으로 실시예 1에서 폴리소르베이트 80의 농도를 0.01 % 및 1.0 %로 하여 외관 분석, 항체 농도 측정 등을 수행한 결과 안정함을 확인하였다(데이터 나타내지 않음).
(3) 당 또는 당의 유도체
상기 실험예 2의 실시예 1, 4, 및 7에서 확인된 바와 같이, 당 또는 당의 유도체를 포함하는 경우 안정하다는 것을 확인하였다. 다른 당 또는 당의 유도체를 포함하는 경우에도 안정한지를 확인하기 위해 추가적으로 실시예 1, 4, 및 7의 제형에서 소르비톨을 만니톨, 트레할로스, 또는 수크로오스를 치환하여 6주 후 외관을 분석한 결과에서도 제형은 모두 안정하였다(데이터는 나타내지 않음).
또한 추가적으로 실시예 1에서 소르비톨의 농도를 0.1% 및 15 %로 하여 외관 분석, 항체 농도 측정 등을 수행한 결과 안정함을 확인하였다(데이터 나타내지 않음).
(4) 아미노산
상기 실험예 2의 실시예 1, 4, 및 7에서 확인된 바와 같이, 아미노산을 포함하는 경우 안정하다는 것을 확인하였다. 다른 아미노산 또는 아미노산염을 포함하는 경우에도 안정한지를 확인하기 위해 추가적으로 실시예 1, 4 및 7의 제형에 아스파르트산, 리신, 또는 아르기닌을 첨가하여 6주 후 외관을 분석한 결과에서도 제형은 모두 안정하였다. 또한 실시예 1, 4, 및 7의 제형에서 히스티딘을 히스티딘-염산염으로 치환하여 6주 후 외관을 분석한 결과에서도 제형은 안정하였다(데이터는 나타내지 않음).
또한 추가적으로 실시예 1에서 히스티딘의 농도를 1 mM 및 20 mM로 하여 외관 분석, 항체 농도 측정 등을 수행한 결과 안정함을 확인하였다(데이터 나타내지 않음).
실험예 4. 안정한 액체 약제학적 제제의 결정
(1) 실험예 2 및 3의 분석
외관 분석 비교 결과, 소르비톨을 포함하는 경우가 염화나트륨을　포함하는 경우보다 안정함을 알 수 있었다. 온전한（Intact）항체의　함량 비교 결과, 히스티딘　완충제 또는　인산　완충제를 포함하는 경우가　아세트산　완충제를 포함하는 경우보다　열화에　대해서　더　안정함을 알 수 있었다. 모노머 함량 비교 결과　히스티딘　완충제를　포함하는　제형이　아세트산 완충제 또는 인산　완충제를　포함하는 경우보다，열화에　대해서　더　안정함을 알 수 있었다. 모든 분석 시험에서 계면활성제인 폴리소르베이트 80의 농도에 따른 제형 안정성 변화가 없음을 알 수 있었다.
(2) 소결
외관 분석뿐만 아니라 실험예 2의 항체 농도 측정, 온전한 면역글로블린 G의 함량 측정, 항체 모노머의 함량 측정, 및 결합 친화도(ELISA 및 CELISA) 측정에서 모두 안정함이 확인된 실시예 1, 4, 및 7 이 항-인플루엔자 항체에 대하여, 단일 항체 또는 서로 다른 2 이상의 항체 혼합물에 있어서 히스티딘 완충제와 소르비톨을 포함하는 경우가 안정한 액체 약제학적 제제임을 확인하였다.
액체 약제학적 제제 내에서 계면활성제는 표면 흡착 또는 항체의 응집을 막아주는 역할을 한다. 하지만 일반적으로 고분자인 계면활성제는 저장 기간이 길어짐에 따라 계면활성제 자체가 분해되어 조금씩 함량이 감소하는 경향을 가질 수 있다. 따라서 계면활성제가 분해되는 속도를 고려하였을 때 계면활성제가 표면 흡착 및 항체의 응집 저해제로서 그 기능을 장기간 유지하기 위해서 높은 농도를 사용하는 것이 필요하다. 이에 따라 후보 액체 약제학적 제제 중 가장 함량이 높은 0.1%를 포함하는 것이 최적의 조건이라 판단하였다(데이터는 나타내지 않음).
따라서, 히스티딘　10 mM,　pH 6.0, 5 % 소르비톨，0.1 % 폴리소르베이트　80을 포함하는 실시예 １을 대상으로 장기 안정성 실험을 진행하였다.
실험예 5. 안정한 액체 약제학적 제제의 다른 항-인플루엔자 단일 항체 및 항체 혼합물에 적용
상기 실시예 1의 안정한 액체 약제학적 제제 구성 성분을 항체 3 내지 7 및 이들의 혼합물에 적용하여, 상기 실험예 2와 동일하게 5±3 ℃/주변 상대 습도, 25±2 ℃/60±5 % 상대습도, 40±2 ℃/75±5 % 상대습도에서 보관하였다. 상기 각 온도 및 습도에서 2주 후, 4주 후, 6주 후 안정성 확인할 결과 모든 단일 항체 및 항체 혼합물에 대해 실시예 1과 마찬가지로 단일 항체 및 항체 혼합물의 안정성이 유지됨을 확인하였다(데이터는 나타내지 않음).
실험예 6: 실시예 1의　장기간　안정성　평가
실시예 1의 장기간　안정성　평가를 ICH(International Conference on Harmonisation)에서 제공한 가이드라인(Guideline Q5C Quality of Biotechnological Products: Stability Testing of Biotechnological 또는 Biological Products and ICH Guideline Q1A (R2): Stability Testing of New Drug Substances and Drug Products)에　따라　실시하였다．　
상기 실험예 1의 방법으로 제조한 실시예 1의 안정한 액체 약제학적 제제 50 mL를 5±3 ℃/주변 상대 습도에서 밀폐 용기에 보관하였다. 상기 온도 및 습도에서 12개월까지 안정성을 측정하였다.
실시예 1 의 장기간 안정성을 확인하기 위하여, 외관 분석, pH 측정, 무균 시험, 항체 농도 측정, 비환원 CE-SDS를 이용한 온전한 면역글로블린 G의 함량 측정, 환원 CE-SDS를 이용한 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량 측정, 항체 모노머의 함량 측정, 및 결합 친화도(H5N1 ELISA, H1N1 CELISA, 및 H3N2 CELISA) 측정을 수행하였으며 그 결과를 표 5 내지14로 나타내었다. 　
(1) 외관 분석
구분 5±3 ℃,
0개월 후 		5±3 ℃,
3개월 후 		5±3 ℃,
6개월 후 		5±3 ℃,
9개월 후 		5±3 ℃,
12개월 후
실시예 1 투명 투명 투명 투명 투명
상기 표 5에서 나타난 바와 같이, 실시예 1은 5±3 ℃에서 12 개월 후 외관상의 변화 없이 유관상 투명 정도가 유지되었으므로 안정하다는 것을 알 수 있었다.
(2) pH 측정
구분 5±3 ℃,
0개월 후 		5±3 ℃,
3개월 후 		5±3 ℃,
6개월 후 		5±3 ℃,
9개월 후 		5±3 ℃,
12개월 후
실시예 1 6.1 6.1 6.1 6.1 6.1
상기 표 6에서 나타난 바와 같이, 실시예 1은 5±3 ℃에서 12 개월 후 pH는 변화 없이 일정하게 유지되었으므로 안정하다는 것을 알 수 있었다.
(3) 무균 시험
구분 5±3 ℃,
0개월 후 		5±3 ℃,
3개월 후 		5±3 ℃,
6개월 후 		5±3 ℃,
9개월 후 		5±3 ℃,
12개월 후
실시예 1 세균이 자라지 않음 분석하지 않음 세균이 자라지 않음 세균이 자라지 않음 세균이 자라지 않음
상기 표 7에서 나타난 바와 같이, 실시예 1은 5±3 ℃에서 12 개월 후 무균 상태가 유지되었으므로 안정하다는 것을 알 수 있었다.
(4) 항체 농도 (mg/mL)
구분 5±3 ℃,
0개월 후 		5±3 ℃,
3개월 후 		5±3 ℃,
6개월 후 		5±3 ℃,
9개월 후 		5±3 ℃,
12개월
후
실시예 1
항체 1 (mg/mL) 24.0 23.5 24.4 23.5 23.8
항체 2 (mg/mL) 25.1 25.2 25.8 24.7 25.1
항체 1 + 항체 2 (mg/mL) 49.0 48.7 50.2 48.2 48.9
상기 표 8에서 나타난 바와 같이, 실시예 1은 5±3 ℃에서 12 개월 후 항체 농도의 변화 없이 일정하게 유지되었으므로 안정하다는 것을 알 수 있었다.
(5) 온전한 면역글로블린 G의 함량(Intact IgG %)
구분 5±3 ℃,
0개월 후 		5±3 ℃,
3개월 후 		5±3 ℃,
6개월 후 		5±3 ℃,
9개월 후 		5±3 ℃,
12개월 후
실시예 1 94.6 96.7 97.4 97.1 97.1
상기 표 9에서 나타난 바와 같이, 실시예 1은 5±3 ℃에서 12 개월 후 온전한 면역글로블린 G의 함량이 97 % 이상 높은 함량이 유지되었으므로 안정하다는 것을 알 수 있었다.
(6) 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량(Intact HC+LC %)
구분 5±3 ℃,
0개월 후 		5±3 ℃,
3개월 후 		5±3 ℃,
6개월 후 		5±3 ℃,
9개월 후 		5±3 ℃,
12개월 후
실시예 1 98.6 98.5 98.5 98.4 98.7
상기 표 10에서 나타난 바와 같이, 실시예 1은 5±3 ℃에서 12 개월 후 온전한 중쇄 및 경쇄의 함량이 98 % 이상 높은 함량이 유지되었으므로 안정하다는 것을 알 수 있었다.
(7) 항체 모노머의 함량(%)
구분 5±3 ℃,
0개월 후 		5±3 ℃,
3개월 후 		5±3 ℃,
6개월 후 		5±3 ℃,
9개월 후 		5±3 ℃,
12개월 후
실시예 1 99.3 99.0 99.0 98.9 98.8
상기 표 11에서 나타난 바와 같이, 실시예 1은 5±3 ℃에서 12 개월 후 항체 모노머의 함량이 98 % 이상 높은 함량이 유지되었으므로 안정하다는 것을 알 수 있었다.
(8) 결합 친화도(%)
H5N1 ELISA, H1N1 CELISA, 및 H3N2 CELISA 측정 결과를 하기와 같이 표 12 내지 표 13으로 나타내었다.
인플루엔자 A 바이러스 HA (H5N1) 결합 친화도
구분 5±3 ℃,
0개월 후 		5±3 ℃,
3개월 후 		5±3 ℃,
6개월 후 		5±3 ℃,
9개월 후 		5±3 ℃,
12개월 후
실시예 1 95 106 99 105 106
상기 표 12에서 나타난 바와 같이, 보면 실시예 1은 5±3 ℃에서 12 개월 후 인플루엔자 A 바이러스 HA의 H5N1 서브타입 결합 친화도가 70-130 % 사이이므로 안정하다는 것을 알 수 있었다.
인플루엔자 A 바이러스 HA (H1N1) 결합 친화도(%)
구분 5±3 ℃,
0개월 후 		5±3 ℃,
3개월 후 		5±3 ℃,
6개월 후 		5±3 ℃,
9개월 후 		5±3 ℃,
12개월 후
실시예 1 97 107 113 103 98
상기 표 13에서 나타난 바와 같이, 실시예 1은 5±3 ℃에서 12 개월 후 인플루엔자 A 바이러스 HA의 H1N1 서브타입 결합 친화도가 70-130 % 사이이므로 안정하다는 것을 알 수 있었다.
인플루엔자 A 바이러스 HA (H3N2) 결합 친화도(%)
구분 5±3 ℃,
0개월 후 		5±3 ℃,
3개월 후 		5±3 ℃,
6개월 후 		5±3 ℃,
9개월 후 		5±3 ℃,
12개월 후
실시예 1 101 115 100 98 106
상기 표 14에서 나타난 바와 같이, 실시예 1은 5±3 ℃에서 12 개월 후 인플루엔자 A 바이러스 HA의 H3N2 서브타입 결합 친화도가 70-130 % 사이이므로 안정하다는 것을 알 수 있었다.
상기 안정성 확인 결과를 바탕으로, 24개월 후 장기간 안정성 데이터를 확보할 예정이다.
<110> CELLTRION INC. <120> Stable Liquid Pharmaceutical Formulation of Anti-Influenza Virus Antibody <130> CPD2017037KR <150> KR 10-2016-0101719 <151> 2016-08-10 <160> 140 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 light chain CDR1 <400> 1 Arg Ala Ser Glu Asn Ile Trp Asn Asn Leu Ala 1 5 10 <210> 2 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 light chain CDR2 <400> 2 Gly Ala Ser Thr Gly Ala Thr 1 5 <210> 3 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 light chain CDR3 <400> 3 Gln Gln Tyr Asn Ser Trp Pro Arg Thr 1 5 <210> 4 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 heavy chain CDR1 <400> 4 Ser His Ala Ile Ser 1 5 <210> 5 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 heavy chain CDR2 <400> 5 Gly Ile Ser Pro Met Phe Gly Thr Thr His Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 6 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 heavy chain CDR3 <400> 6 Asp Gly Ala Gly Ser Tyr Tyr Pro Leu Asn Trp Phe Asp Pro 1 5 10 <210> 7 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 light chain CDR1 <400> 7 Arg Ala Ser His Arg Val Gly Ser Thr Tyr Ile Ala 1 5 10 <210> 8 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 light chain CDR2 <400> 8 Gly Ala Ser Asn Arg Ala Thr 1 5 <210> 9 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 light chain CDR3 <400> 9 Gln Gln Phe Ser Val Ser Pro Trp Thr 1 5 <210> 10 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 heavy chain CDR1 <400> 10 Thr Tyr Gly Val Ser 1 5 <210> 11 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 heavy chain CDR2 <400> 11 Trp Ile Ser Ala Tyr Thr Gly Ile Thr Asp Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 12 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 heavy chain CDR3 <400> 12 Asp Lys Val Gln Gly Arg Val Glu Val Gly Ser Gly Gly Arg His Asp 1 5 10 15 Tyr <210> 13 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 light chain CDR1 <400> 13 Arg Ala Ser Gln Ser Leu Ser Ser Ser Ser Leu Val 1 5 10 <210> 14 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 light chain CDR2 <400> 14 Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr 1 5 <210> 15 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 light chain CDR3 <400> 15 Gln Gln Tyr Gly Asn Ser Pro Tyr Thr 1 5 <210> 16 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 heavy chain CDR1 <400> 16 Asn Asn Tyr Ala Ile Ser 1 5 <210> 17 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 heavy chain CDR2 <400> 17 Gly Gly Ile Ser Pro Ile Phe Gly Thr Leu Asn Tyr Ala Glu Arg Phe 1 5 10 15 Gln Gly <210> 18 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 heavy chain CDR3 <400> 18 Gly Cys Gly Tyr Asn Cys Tyr Tyr Phe Asp Gly 1 5 10 <210> 19 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 light chain CDR1 <400> 19 Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ile Ser Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 20 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 light chain CDR2 <400> 20 Gly Ala Ser Arg Arg Ala Thr 1 5 <210> 21 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 light chain CDR3 <400> 21 Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro Tyr Thr 1 5 <210> 22 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 heavy chain CDR1 <400> 22 Arg Phe Gly Ile His 1 5 <210> 23 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 heavy chain CDR2 <400> 23 Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 24 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 heavy chain CDR3 <400> 24 Asp Ser Arg Gly Tyr Cys Ser Ser Ile Ile Cys Phe Glu Gly Gly Leu 1 5 10 15 Asp Asn <210> 25 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 light chain CDR1 <400> 25 Arg Ala Ser Arg Arg Val Gly Ser Thr Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 26 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 light chain CDR2 <400> 26 Gly Ala Ser Ser Arg Ala Ala 1 5 <210> 27 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 light chain CDR3 <400> 27 Gln Gln Tyr Ala Ala Ser Pro Trp Thr 1 5 <210> 28 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 heavy chain CDR1 <400> 28 Thr Tyr Gly Ile Ser 1 5 <210> 29 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 heavy chain CDR2 <400> 29 Trp Ile Ser Ala Tyr Thr Gly Asn Thr Asp Tyr Ala Gln Lys Val Gln 1 5 10 15 Gly <210> 30 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 heavy chain CDR3 <400> 30 Asp Lys Val Gln Gly Arg Val Glu Ala Gly Ser Gly Gly Arg His Asp 1 5 10 15 Tyr <210> 31 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 light chain CDR1 <400> 31 Arg Ala Ser His Ser Val Gly Ser Thr Tyr Ile Ala 1 5 10 <210> 32 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 light chain CDR2 <400> 32 Gly Ala Ser Asn Arg Ala Thr 1 5 <210> 33 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 light chain CDR3 <400> 33 Gln Gln Phe Ser Val Ser Pro Trp Thr 1 5 <210> 34 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 heavy chain CDR1 <400> 34 Thr Tyr Gly Val Ser 1 5 <210> 35 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 heavy chain CDR2 <400> 35 Trp Ile Ser Gly Tyr Thr Gly Ile Thr Asp Tyr Ala Gln Lys Ser Gln 1 5 10 15 Gly <210> 36 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 heavy chain CDR3 <400> 36 Asp Lys Val Gln Gly Arg Val Glu Ala Gly Ser Gly Gly Arg His Asp 1 5 10 15 Tyr <210> 37 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 light chain CDR1 <400> 37 Arg Ala Ser His Ser Ile Gly Ser Thr Tyr Ile Ala 1 5 10 <210> 38 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 light chain CDR2 <400> 38 Gly Ala Ser Asn Arg Ala Ser 1 5 <210> 39 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 light chain CDR3 <400> 39 Gln Gln Phe Ser Val Ser Pro Trp Thr 1 5 <210> 40 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 heavy chain CDR1 <400> 40 Thr Tyr Gly Val Ser 1 5 <210> 41 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 heavy chain CDR2 <400> 41 Trp Ile Ser Gly Tyr Thr Gly Ile Thr Asp Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 42 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 heavy chain CDR3 <400> 42 Asp Lys Val Gln Gly Arg Val Glu Val Gly Ser Gly Gly Arg His Asp 1 5 10 15 Tyr <210> 43 <211> 127 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 light chain variable region <400> 43 Met Glu Ala Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser 20 25 30 Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Asn 35 40 45 Ile Trp Asn Asn Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro 50 55 60 Arg Leu Leu Ile Ser Gly Ala Ser Thr Gly Ala Thr Gly Val Pro Ser 65 70 75 80 Arg Phe Arg Gly Ser Gly Ser Arg Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser 85 90 95 Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Ile Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn 100 105 110 Ser Trp Pro Arg Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 115 120 125 <210> 44 <211> 142 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 heavy chain variable region <400> 44 Met Asp Trp Thr Trp Arg Phe Leu Phe Val Val Ala Ala Ala Thr Gly 1 5 10 15 Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Met 20 25 30 Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Val Phe Phe 35 40 45 Ser Ser His Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Gly Gly Ile Ser Pro Met Phe Gly Thr Thr His Tyr Ala 65 70 75 80 Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Gln Ser Thr Thr 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Glu Leu Thr Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Gly Ala Gly Ser Tyr Tyr Pro Leu Asn Trp 115 120 125 Phe Asp Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 130 135 140 <210> 45 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 light chain variable region <400> 45 Glu Val Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ala Leu Pro Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser His Arg Val Gly Ser Thr 20 25 30 Tyr Ile Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Gln Ala Pro Arg Arg Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Ala Thr Asp Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Arg Arg Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Ser Val Ser Pro 85 90 95 Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 46 <211> 126 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 heavy chain variable region <400> 46 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Ser Phe Ser Thr Tyr 20 25 30 Gly Val Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Pro Glu Trp Val 35 40 45 Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Thr Gly Ile Thr Asp Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Thr Asp Ala Thr Thr Ala Thr Ala Phe 65 70 75 80 Leu Asp Leu Arg Ser Leu Arg Pro Asp Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Lys Val Gln Gly Arg Val Glu Val Gly Ser Gly Gly Arg 100 105 110 His Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Ile Val Ser Ser 115 120 125 <210> 47 <211> 128 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 light chain variable region <400> 47 Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser 20 25 30 Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser 35 40 45 Leu Ser Ser Ser Ser Leu Val Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala 50 55 60 Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro 65 70 75 80 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 85 90 95 Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr 100 105 110 Gly Asn Ser Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Gln Val Glu Ile Lys 115 120 125 <210> 48 <211> 139 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 heavy chain variable region <400> 48 Met Asp Trp Thr Trp Arg Phe Leu Phe Val Val Ala Ala Ala Thr Gly 1 5 10 15 Val Gln Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Leu 35 40 45 Asn Asn Tyr Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Gly Gly Ile Ser Pro Ile Phe Gly Thr Leu Asn Tyr Ala 65 70 75 80 Glu Arg Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Val Phe Thr Asn 85 90 95 Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Phe Cys Ala Arg Gly Cys Gly Tyr Asn Cys Tyr Tyr Phe Asp Gly 115 120 125 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 130 135 <210> 49 <211> 128 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 light chain variable region <400> 49 Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly Glu Thr Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser 20 25 30 Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser 35 40 45 Val Ser Ile Ser Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Arg Lys Pro Gly Gln Ala 50 55 60 Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Arg Arg Ala Thr Gly Ile Pro 65 70 75 80 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 85 90 95 Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr 100 105 110 Gly Ser Ser Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 115 120 125 <210> 50 <211> 146 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 heavy chain variable region <400> 50 Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Leu Leu Arg Gly 1 5 10 15 Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln 20 25 30 Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Arg Phe Gly Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Phe Tyr Ala 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn 85 90 95 Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Cys Ser Ser Ile Ile Cys 115 120 125 Phe Glu Gly Gly Leu Asp Asn Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 130 135 140 Ser Ser 145 <210> 51 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 light chain variable region <400> 51 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Arg Arg Val Gly Ser Thr 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Arg Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Ala Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Thr Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val Asp 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ala Ala Ser Pro 85 90 95 Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Thr Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 52 <211> 126 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 heavy chain variable region <400> 52 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Arg Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Thr Gly Asn Thr Asp Tyr Ala Gln Lys Val 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Lys Val Gln Gly Arg Val Glu Ala Gly Ser Gly Gly Arg 100 105 110 His Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 53 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 light chain variable region <400> 53 Glu Val Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Thr Leu Pro Pro Gly 1 5 10 15 Asp Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser His Ser Val Gly Ser Thr 20 25 30 Tyr Ile Ala Trp Phe Gln Gln Lys Ser Gly Gln Ala Pro Arg Arg Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Ala Thr Asp Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Arg Arg Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Ser Val Ser Pro 85 90 95 Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 54 <211> 126 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 heavy chain variable region <400> 54 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Val Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Pro Phe Ser Thr Tyr 20 25 30 Gly Val Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Trp Ile Ser Gly Tyr Thr Gly Ile Thr Asp Tyr Ala Gln Lys Ser 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Thr Asp Ala Ser Thr Ala Thr Ala Phe 65 70 75 80 Leu Glu Leu Arg Ser Leu Arg Pro Asp Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Lys Val Gln Gly Arg Val Glu Ala Gly Ser Gly Gly Arg 100 105 110 His Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Ile Val Ser Ser 115 120 125 <210> 55 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 light chain variable region <400> 55 Glu Val Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ala Leu Pro Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser His Ser Ile Gly Ser Thr 20 25 30 Tyr Ile Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Gln Ala Pro Arg Arg Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Ala Ser Asp Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Arg Arg Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Ser Val Ser Pro 85 90 95 Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 56 <211> 126 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 heavy chain variable region <400> 56 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Ser Phe Ser Thr Tyr 20 25 30 Gly Val Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Trp Ile Ser Gly Tyr Thr Gly Ile Thr Asp Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Thr Asp Ala Thr Thr Ala Thr Ala Phe 65 70 75 80 Leu Glu Leu Arg Ser Leu Arg Pro Asp Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Lys Val Gln Gly Arg Val Glu Val Gly Ser Gly Gly Arg 100 105 110 His Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Ile Val Ser Ser 115 120 125 <210> 57 <211> 234 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 light chain <400> 57 Met Glu Ala Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser 20 25 30 Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Asn 35 40 45 Ile Trp Asn Asn Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro 50 55 60 Arg Leu Leu Ile Ser Gly Ala Ser Thr Gly Ala Thr Gly Val Pro Ser 65 70 75 80 Arg Phe Arg Gly Ser Gly Ser Arg Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser 85 90 95 Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Ile Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn 100 105 110 Ser Trp Pro Arg Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 115 120 125 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 130 135 140 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 145 150 155 160 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 165 170 175 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 180 185 190 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 195 200 205 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 210 215 220 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 <210> 58 <211> 472 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 heavy chain <400> 58 Met Asp Trp Thr Trp Arg Phe Leu Phe Val Val Ala Ala Ala Thr Gly 1 5 10 15 Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Met 20 25 30 Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Val Phe Phe 35 40 45 Ser Ser His Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Gly Gly Ile Ser Pro Met Phe Gly Thr Thr His Tyr Ala 65 70 75 80 Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Gln Ser Thr Thr 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Glu Leu Thr Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Gly Ala Gly Ser Tyr Tyr Pro Leu Asn Trp 115 120 125 Phe Asp Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser 130 135 140 Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr 145 150 155 160 Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro 165 170 175 Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val 180 185 190 His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser 195 200 205 Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile 210 215 220 Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val 225 230 235 240 Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 245 250 255 Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 260 265 270 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Arg Glu Val Thr Cys Val Val 275 280 285 Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 290 295 300 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 305 310 315 320 Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln 325 330 335 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 340 345 350 Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro 355 360 365 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr 370 375 380 Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 385 390 395 400 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 405 410 415 Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 420 425 430 Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe 435 440 445 Ser Cys Ser Val Met His Glu Gly Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 450 455 460 Ser Leu Ser Leu Phe Pro Gly Lys 465 470 <210> 59 <211> 215 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 light chain <400> 59 Glu Val Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ala Leu Pro Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser His Arg Val Gly Ser Thr 20 25 30 Tyr Ile Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Gln Ala Pro Arg Arg Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Ala Thr Asp Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Arg Arg Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Ser Val Ser Pro 85 90 95 Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110 Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 115 120 125 Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160 Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175 Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 60 <211> 456 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 heavy chain <400> 60 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Ser Phe Ser Thr Tyr 20 25 30 Gly Val Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Pro Glu Trp Val 35 40 45 Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Thr Gly Ile Thr Asp Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Thr Asp Ala Thr Thr Ala Thr Ala Phe 65 70 75 80 Leu Asp Leu Arg Ser Leu Arg Pro Asp Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Lys Val Gln Gly Arg Val Glu Val Gly Ser Gly Gly Arg 100 105 110 His Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Ile Val Ser Ser Ala Ser 115 120 125 Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr 130 135 140 Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro 145 150 155 160 Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val 165 170 175 His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser 180 185 190 Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile 195 200 205 Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val 210 215 220 Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 225 230 235 240 Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 245 250 255 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 260 265 270 Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 275 280 285 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 290 295 300 Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln 305 310 315 320 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 325 330 335 Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro 340 345 350 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr 355 360 365 Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 370 375 380 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 385 390 395 400 Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 405 410 415 Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe 420 425 430 Ser Cys Ser Val Met His Glu Gly Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 435 440 445 Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 <210> 61 <211> 235 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 light chain <400> 61 Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser 20 25 30 Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser 35 40 45 Leu Ser Ser Ser Ser Leu Val Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala 50 55 60 Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro 65 70 75 80 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 85 90 95 Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr 100 105 110 Gly Asn Ser Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Gln Val Glu Ile Lys 115 120 125 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 130 135 140 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 145 150 155 160 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 165 170 175 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 180 185 190 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 195 200 205 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 210 215 220 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 62 <211> 469 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 heavy chain <400> 62 Met Asp Trp Thr Trp Arg Phe Leu Phe Val Val Ala Ala Ala Thr Gly 1 5 10 15 Val Gln Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Leu 35 40 45 Asn Asn Tyr Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Gly Gly Ile Ser Pro Ile Phe Gly Thr Leu Asn Tyr Ala 65 70 75 80 Glu Arg Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Val Phe Thr Asn 85 90 95 Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Phe Cys Ala Arg Gly Cys Gly Tyr Asn Cys Tyr Tyr Phe Asp Gly 115 120 125 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 130 135 140 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly 145 150 155 160 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 165 170 175 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 180 185 190 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 195 200 205 Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val 210 215 220 Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys 225 230 235 240 Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu 245 250 255 Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr 260 265 270 Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val 275 280 285 Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val 290 295 300 Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser 305 310 315 320 Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu 325 330 335 Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala 340 345 350 Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro 355 360 365 Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln 370 375 380 Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala 385 390 395 400 Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr 405 410 415 Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu 420 425 430 Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser 435 440 445 Val Met His Glu Gly Leu His Asn Pro Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser 450 455 460 Leu Phe Pro Gly Lys 465 <210> 63 <211> 235 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 light chain <400> 63 Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly Glu Thr Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser 20 25 30 Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser 35 40 45 Val Ser Ile Ser Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Arg Lys Pro Gly Gln Ala 50 55 60 Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Arg Arg Ala Thr Gly Ile Pro 65 70 75 80 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 85 90 95 Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr 100 105 110 Gly Ser Ser Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 115 120 125 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 130 135 140 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 145 150 155 160 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 165 170 175 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 180 185 190 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 195 200 205 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 210 215 220 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 64 <211> 476 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 heavy chain <400> 64 Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Leu Leu Arg Gly 1 5 10 15 Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln 20 25 30 Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Arg Phe Gly Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Phe Tyr Ala 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn 85 90 95 Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Ser Arg Gly Tyr Cys Ser Ser Ile Ile Cys 115 120 125 Phe Glu Gly Gly Leu Asp Asn Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 130 135 140 Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser 145 150 155 160 Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys 165 170 175 Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu 180 185 190 Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu 195 200 205 Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr 210 215 220 Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val 225 230 235 240 Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro 245 250 255 Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe 260 265 270 Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val 275 280 285 Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe 290 295 300 Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro 305 310 315 320 Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr 325 330 335 Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val 340 345 350 Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala 355 360 365 Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg 370 375 380 Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly 385 390 395 400 Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro 405 410 415 Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser 420 425 430 Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln 435 440 445 Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Gly Leu His Asn His 450 455 460 Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Phe Pro Gly Lys 465 470 475 <210> 65 <211> 215 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 light chain <400> 65 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Arg Arg Val Gly Ser Thr 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Arg Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Ala Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Thr Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val Asp 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ala Ala Ser Pro 85 90 95 Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Thr Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110 Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 115 120 125 Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160 Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175 Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 66 <211> 456 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 heavy chain <400> 66 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Arg Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Thr Gly Asn Thr Asp Tyr Ala Gln Lys Val 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Lys Val Gln Gly Arg Val Glu Ala Gly Ser Gly Gly Arg 100 105 110 His Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser 115 120 125 Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr 130 135 140 Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro 145 150 155 160 Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val 165 170 175 His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser 180 185 190 Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile 195 200 205 Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Xaa Val Asp Lys Lys Val 210 215 220 Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 225 230 235 240 Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 245 250 255 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 260 265 270 Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 275 280 285 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 290 295 300 Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln 305 310 315 320 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 325 330 335 Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro 340 345 350 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr 355 360 365 Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 370 375 380 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 385 390 395 400 Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 405 410 415 Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe 420 425 430 Ser Cys Ser Val Met His Glu Gly Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 435 440 445 Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 <210> 67 <211> 215 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 light chain <400> 67 Glu Val Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Thr Leu Pro Pro Gly 1 5 10 15 Asp Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser His Ser Val Gly Ser Thr 20 25 30 Tyr Ile Ala Trp Phe Gln Gln Lys Ser Gly Gln Ala Pro Arg Arg Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Ala Thr Asp Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Arg Arg Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Ser Val Ser Pro 85 90 95 Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110 Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 115 120 125 Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160 Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175 Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 68 <211> 456 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 heavy chain <400> 68 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Val Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Pro Phe Ser Thr Tyr 20 25 30 Gly Val Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Trp Ile Ser Gly Tyr Thr Gly Ile Thr Asp Tyr Ala Gln Lys Ser 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Thr Asp Ala Ser Thr Ala Thr Ala Phe 65 70 75 80 Leu Glu Leu Arg Ser Leu Arg Pro Asp Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Lys Val Gln Gly Arg Val Glu Ala Gly Ser Gly Gly Arg 100 105 110 His Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Ile Val Ser Ser Ala Ser 115 120 125 Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr 130 135 140 Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro 145 150 155 160 Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val 165 170 175 His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser 180 185 190 Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile 195 200 205 Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val 210 215 220 Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 225 230 235 240 Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 245 250 255 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 260 265 270 Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 275 280 285 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 290 295 300 Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln 305 310 315 320 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 325 330 335 Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro 340 345 350 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr 355 360 365 Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 370 375 380 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 385 390 395 400 Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 405 410 415 Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe 420 425 430 Ser Cys Ser Val Met His Glu Gly Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 435 440 445 Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 <210> 69 <211> 215 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 light chain <400> 69 Glu Val Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ala Leu Pro Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser His Ser Ile Gly Ser Thr 20 25 30 Tyr Ile Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Gln Ala Pro Arg Arg Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Ala Ser Asp Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Arg Arg Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Ser Val Ser Pro 85 90 95 Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110 Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 115 120 125 Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160 Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175 Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 70 <211> 456 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 heavy chain <400> 70 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Ser Phe Ser Thr Tyr 20 25 30 Gly Val Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Trp Ile Ser Gly Tyr Thr Gly Ile Thr Asp Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Thr Asp Ala Thr Thr Ala Thr Ala Phe 65 70 75 80 Leu Glu Leu Arg Ser Leu Arg Pro Asp Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Lys Val Gln Gly Arg Val Glu Val Gly Ser Gly Gly Arg 100 105 110 His Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Ile Val Ser Ser Ala Ser 115 120 125 Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr 130 135 140 Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro 145 150 155 160 Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val 165 170 175 His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser 180 185 190 Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile 195 200 205 Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val 210 215 220 Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 225 230 235 240 Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 245 250 255 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 260 265 270 Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 275 280 285 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 290 295 300 Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln 305 310 315 320 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 325 330 335 Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro 340 345 350 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr 355 360 365 Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 370 375 380 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 385 390 395 400 Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 405 410 415 Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe 420 425 430 Ser Cys Ser Val Met His Glu Gly Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 435 440 445 Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 <210> 71 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 light chain CDR1 <400> 71 agggccagtg agaatatttg gaacaacttg gcc 33 <210> 72 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 light chain CDR2 <400> 72 ggtgcgtcca ccggggccac t 21 <210> 73 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 light chain CDR3 <400> 73 cagcagtata attcgtggcc tcggacg 27 <210> 74 <211> 15 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 heavy chain CDR1 <400> 74 agtcatgcta tcagt 15 <210> 75 <211> 51 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 heavy chain CDR2 <400> 75 gggatcagcc ctatgtttgg aacaacacac tacgcacaga agttccaggg c 51 <210> 76 <211> 42 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 heavy chain CDR3 <400> 76 gatggtgcgg ggagttatta tccactcaac tggttcgacc cc 42 <210> 77 <211> 36 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 light chain CDR1 <400> 77 agggccagtc accgtgttgg cagcacctac atagcc 36 <210> 78 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 light chain CDR2 <400> 78 ggtgcatcca acagggccac t 21 <210> 79 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 light chain CDR3 <400> 79 cagcagttta gtgtttcacc gtggacg 27 <210> 80 <211> 15 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 heavy chain CDR1 <400> 80 acttatggag tcagt 15 <210> 81 <211> 51 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 heavy chain CDR2 <400> 81 tggatcagcg cttacactgg tatcacagac tacgcacaga agtttcaggg c 51 <210> 82 <211> 51 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 heavy chain CDR3 <400> 82 gataaggtgc aggggcgcgt tgaagtggga tctgggggtc gtcatgacta c 51 <210> 83 <211> 36 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 light chain CDR1 <400> 83 agggccagtc agagtcttag cagcagctcc ttagtc 36 <210> 84 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 light chain CDR2 <400> 84 ggtgcatcca gcagggccac 20 <210> 85 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 light chain CDR3 <400> 85 cagcagtatg ggaactcacc gtacacg 27 <210> 86 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 heavy chain CDR1 <400> 86 aacaactatg ctatcagc 18 <210> 87 <211> 54 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 heavy chain CDR2 <400> 87 ggagggatca gccctatctt tgggacatta aactacgcag agaggttcca gggc 54 <210> 88 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 heavy chain CDR3 <400> 88 ggttgtggct acaattgtta ctactttgac ggg 33 <210> 89 <211> 36 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 light chain CDR1 <400> 89 agggccagtc agagtgttag catcagctac ttagcc 36 <210> 90 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 light chain CDR2 <400> 90 ggcgcatcca ggagggccac t 21 <210> 91 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 light chain CDR3 <400> 91 cagcagtatg gtagctcacc gtacact 27 <210> 92 <211> 15 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 heavy chain CDR1 <400> 92 aggtttggca tccac 15 <210> 93 <211> 51 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 heavy chain CDR2 <400> 93 gttatatggt acgatggaag taataaattc tatgcagact ccgtgaaggg c 51 <210> 94 <211> 54 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 heavy chain CDR3 <400> 94 gattcccgcg gatattgtag tagtatcatt tgttttgagg ggggacttga caac 54 <210> 95 <211> 36 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 light chain CDR1 <400> 95 agggccagtc ggcgcgttgg cagcacctac ttagcc 36 <210> 96 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 light chain CDR2 <400> 96 ggtgcatcca gcagggccgc t 21 <210> 97 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 light chain CDR3 <400> 97 cagcagtatg ctgcctcacc gtggacg 27 <210> 98 <211> 15 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 heavy chain CDR1 <400> 98 acctatggca tcagc 15 <210> 99 <211> 51 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 heavy chain CDR2 <400> 99 tggatcagcg cttatactgg aaatacagac tatgcacaga aggtccaggg c 51 <210> 100 <211> 51 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 heavy chain CDR3 <400> 100 gataaggtcc aggggcgcgt tgaagcggga agtgggggcc ggcatgacta c 51 <210> 101 <211> 36 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 light chain CDR1 <400> 101 agggccagtc acagtgttgg cagcacctac atagcc 36 <210> 102 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 light chain CDR2 <400> 102 ggtgcatcca acagggccac t 21 <210> 103 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 light chain CDR3 <400> 103 cagcagttta gtgtttcacc gtggacg 27 <210> 104 <211> 15 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 heavy chain CDR1 <400> 104 acttatggag tcagc 15 <210> 105 <211> 51 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 heavy chain CDR2 <400> 105 tggatcagcg gttatactgg tatcacagac tacgcacaga agtctcaggg c 51 <210> 106 <211> 51 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 heavy chain CDR3 <400> 106 gacaaagtgc aggggcgcgt tgaagcggga tctgggggtc gtcacgacta c 51 <210> 107 <211> 36 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 light chain CDR1 <400> 107 agggccagtc acagtattgg cagcacctac atagcc 36 <210> 108 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 light chain CDR2 <400> 108 ggtgcatcca acagggcctc t 21 <210> 109 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 light chain CDR3 <400> 109 cagcagttta gtgtttcacc gtggacg 27 <210> 110 <211> 15 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 heavy chain CDR1 <400> 110 acttatggag tcagc 15 <210> 111 <211> 51 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 heavy chain CDR2 <400> 111 tggatcagcg gttacactgg tatcacagac tacgcacaga agtttcaggg c 51 <210> 112 <211> 51 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 heavy chain CDR3 <400> 112 gataaggtgc aggggcgcgt tgaagtggga tctgggggtc gtcatgacta c 51 <210> 113 <211> 381 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 light chain variable region <400> 113 atggaagccc cagctcagct tctcttcctc ctgctactct ggctcccaga taccaccgga 60 gaaattgtgt tgacacagtc tccagccacc ttgtctttgt ctccagggga aagagccacc 120 ctctcctgca gggccagtga gaatatttgg aacaacttgg cctggtacca gcaaaaacct 180 ggccaggctc ccaggctcct catctctggt gcgtccaccg gggccactgg tgtcccaagt 240 aggtttagag gcagcgggtc taggacagaa ttcactctca ccatcagcag cctgcagtct 300 gaagattttg caatttattt ctgtcagcag tataattcgt ggcctcggac gttcggccca 360 gggaccaagg tggagatcaa a 381 <210> 114 <211> 426 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 heavy chain variable region <400> 114 atggactgga cctggaggtt cctctttgtg gtggcagcag ctacaggtgt ccagtgccag 60 gtgcagctgg tgcagtctgg ggctgaggtg aagatgcctg ggtcctcggt gaaggtctcc 120 tgcaagactt ctggagtctt cttcagcagt catgctatca gttgggtgcg acaggcccct 180 ggacaagggc ttgagtggat gggagggatc agccctatgt ttggaacaac acactacgca 240 cagaagttcc agggcagagt cacgattacc gcggaccaat ccacgaccac agcctacatg 300 gagttgacca gtcttacatc tgaggacacg gccgtatatt actgtgcgcg tgatggtgcg 360 gggagttatt atccactcaa ctggttcgac ccctggggcc agggaaccct ggtcaccgtc 420 tcctca 426 <210> 115 <211> 324 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 light chain variable region <400> 115 gaagttgtgt tgacacagtc tcccggcacc ctggctttgc ctccagggga aagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtca ccgtgttggc agcacctaca tagcctggta tcagcagaag 120 tctggccagg ctcccaggcg cctcatctat ggtgcatcca acagggccac tgacatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg gtccgggaca gacttcactc tcaccatcag gagactggag 240 cctgaagatt ctgcagtgta ttactgtcag cagtttagtg tttcaccgtg gacgttcggc 300 caagggacca gggtggaaat caag 324 <210> 116 <211> 378 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 heavy chain variable region <400> 116 caggttcagc tggtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60 tcctgcaaga cttctggtta ttccttttcc acttatggag tcagttgggt ccgacaggcc 120 cccggacaag ggcctgagtg ggtgggatgg atcagcgctt acactggtat cacagactac 180 gcacagaagt ttcagggcag agtcactctg accacagacg caaccacggc caccgccttc 240 ctggacctga ggagtctgag acctgacgac acggccacgt atttctgtgc gagagataag 300 gtgcaggggc gcgttgaagt gggatctggg ggtcgtcatg actactgggg acagggaacc 360 ctggtcatcg tctcctca 378 <210> 117 <211> 384 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 light chain variable region <400> 117 atggaaaccc cagcgcagct tctcttcctc ctgctactct ggctcccaga taccaccgga 60 gaaattgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 120 ctctcctgca gggccagtca gagtcttagc agcagctcct tagtctggta ccagcagaaa 180 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggtgcatcca gcagggccac tggcatccca 240 gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 300 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagtatggga actcaccgta cacgtttggc 360 caggggaccc aggttgagat caaa 384 <210> 118 <211> 417 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 heavy chain variable region <400> 118 atggactgga cctggaggtt cctctttgtg gtggcagcag ctacaggtgt ccagtcccag 60 gtgcagctgg tgcagtctgg ggctgaggtg aagaagcctg ggtcctcggt gaaggtctcc 120 tgcaaggctt ctggaggcac cctcaacaac tatgctatca gctgggtgcg acaggcccct 180 ggacaagggc ttgagtggat gggagggatc agccctatct ttgggacatt aaactacgca 240 gagaggttcc agggcagagt caccattacc gcggacgtat ttacgaacac agtctacatg 300 gagctgagca gcctgagatc tgaggacacg gccgtgtatt tctgtgcgag aggttgtggc 360 tacaattgtt actactttga cgggtggggc cagggaaccc tggtcaccgt ttcctca 417 <210> 119 <211> 384 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 light chain variable region <400> 119 atggaaaccc cagcgcagct tctcttcctc ctgctactct ggctcccaga taccaccgga 60 gaaactgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 120 ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc atcagctact tagcctggta ccagcggaaa 180 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggcgcatcca ggagggccac tggcatccca 240 gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 300 cctgaagatt ttgcagtata ttactgtcag cagtatggta gctcaccgta cacttttggc 360 caggggacca agctggagat caaa 384 <210> 120 <211> 438 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 heavy chain variable region <400> 120 atggagtttg ggctgagctg ggttttcctc gttgctcttt taagaggtgt ccagtgtcag 60 gtgcagctgg tggagtctgg gggaggcgtg gtccagcctg ggaggtccct gagactctcc 120 tgtgcagcgt ctggattcac cttcagtagg tttggcatcc actgggtccg ccaggctcca 180 ggcaaggggc tggagtggat ggcagttata tggtacgatg gaagtaataa attctatgca 240 gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac ggtttatctg 300 caaatgaaca gcctcagagc cgaggacacg gctgtctatt actgtgcgaa agattcccgc 360 ggatattgta gtagtatcat ttgttttgag gggggacttg acaactgggg ccagggaacc 420 ctggtcaccg tctcctca 438 <210> 121 <211> 324 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 light chain variable region <400> 121 gagattgtgt tgactcagtc tccaggcacc ctgtctgtgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtcg gcgcgttggc agcacctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggcg cctcatctat ggtgcatcca gcagggccgc tggcatccca 180 gacaggttca gtggcactgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagggtggac 240 cctgaagatt ttgcggtata ttactgtcag cagtatgctg cctcaccgtg gacgttcggc 300 caagggacca cggtggagat caaa 324 <210> 122 <211> 378 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 heavy chain variable region <400> 122 caggttcagc tggtgcagtc tggaggtgag ctgaagaagc ctggggcctc agtgagggtc 60 tcctgtaagg cttctggcta cacctttacc acctatggca tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag gccttgagtg ggtgggatgg atcagcgctt atactggaaa tacagactat 180 gcacagaagg tccagggcag agtaaccatg accacggaca catccacgag cacagcctac 240 atggagctga ggagcctcac atctgacgac acggccgtct attactgtgc gagagataag 300 gtccaggggc gcgttgaagc gggaagtggg ggccggcatg actactgggg ccagggaacc 360 ctggtcaccg tctcctca 378 <210> 123 <211> 324 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 light chain variable region <400> 123 gaagttgtgt tgacgcagtc tcccggcacc ctgactttgc ctccagggga cagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtca cagtgttggc agcacctaca tagcctggtt tcagcagaag 120 tctggccagg ctcccaggcg cctcatctat ggtgcatcca acagggccac tgacatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg gtccgggaca gacttcactc tcaccatcag gagactggag 240 cctgaagatt ctgcagtgta ctactgtcag cagtttagtg tttcaccgtg gacgttcggc 300 caagggacca gggtggaaat caag 324 <210> 124 <211> 378 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 heavy chain variable region <400> 124 caggttcagc tggtccagtc tggagtagag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60 tcctgcaaga cttctggtta tccgttttcc acttatggag tcagctgggt ccgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg ggtgggatgg atcagcggtt atactggtat cacagactac 180 gcacagaagt ctcagggcag agtcactctg acgacagacg caagcacggc caccgccttc 240 ttggagctga ggagtctgag gcctgacgac acggccacct atttttgtgc gagagacaaa 300 gtgcaggggc gcgttgaagc gggatctggg ggtcgtcacg actactgggg acagggaacc 360 ctggtcatcg tctcctca 378 <210> 125 <211> 324 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 light chain variable region <400> 125 gaagttgtgt tgacgcagtc tcccggcacc ctggctttgc ctccagggga aagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtca cagtattggc agcacctaca tagcctggta tcagcagaag 120 tctggccagg ctcccaggcg cctcatctat ggtgcatcca acagggcctc tgacatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg gtccgggaca gacttcactc tcaccatcag gagactggag 240 cctgaagatt ctgcagtgta ttactgtcag cagtttagtg tttcaccgtg gacgttcggc 300 caagggacca gggtggaaat caag 324 <210> 126 <211> 378 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 heavy chain variable region <400> 126 caggttcagc tggtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60 tcctgcaaga cttctggtta ttccttttcc acttatggag tcagctgggt ccgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg ggtgggatgg atcagcggtt acactggtat cacagactac 180 gcacagaagt ttcagggcag agtcactctg accacagacg caaccacggc caccgccttc 240 ctggagctga ggagtctgag acctgacgac acggccacct atttctgtgc gagagataag 300 gtgcaggggc gcgttgaagt gggatctggg ggtcgtcatg actactgggg acagggaacc 360 ctggtcatcg tctcctca 378 <210> 127 <211> 705 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 light chain <400> 127 atggaagccc cagctcagct tctcttcctc ctgctactct ggctcccaga taccaccgga 60 gaaattgtgt tgacacagtc tccagccacc ttgtctttgt ctccagggga aagagccacc 120 ctctcctgca gggccagtga gaatatttgg aacaacttgg cctggtacca gcaaaaacct 180 ggccaggctc ccaggctcct catctctggt gcgtccaccg gggccactgg tgtcccaagt 240 aggtttagag gcagcgggtc taggacagaa ttcactctca ccatcagcag cctgcagtct 300 gaagattttg caatttattt ctgtcagcag tataattcgt ggcctcggac gttcggccca 360 gggaccaagg tggagatcaa acgaactgtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 420 tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 480 cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 540 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 600 ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 660 ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 705 <210> 128 <211> 1419 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 1 heavy chain <400> 128 atggactgga cctggaggtt cctctttgtg gtggcagcag ctacaggtgt ccagtgccag 60 gtgcagctgg tgcagtctgg ggctgaggtg aagatgcctg ggtcctcggt gaaggtctcc 120 tgcaagactt ctggagtctt cttcagcagt catgctatca gttgggtgcg acaggcccct 180 ggacaagggc ttgagtggat gggagggatc agccctatgt ttggaacaac acactacgca 240 cagaagttcc agggcagagt cacgattacc gcggaccaat ccacgaccac agcctacatg 300 gagttgacca gtcttacatc tgaggacacg gccgtatatt actgtgcgcg tgatggtgcg 360 gggagttatt atccactcaa ctggttcgac ccctggggcc agggaaccct ggtcaccgtc 420 tcctcagcct ccaccaaggg cccatcggtc ttccccctgg caccctcctc caagagcacc 480 tctgggggca cagcggccct gggctgcctg gtcaaggact acttccccga accggtgacg 540 gtgtcgtgga actcaggcgc cctgaccagc ggcgtgcaca ccttcccggc tgtcctacag 600 tcctcaggac tctactccct cagcagcgtg gtgaccgtgc cctccagcag cttgggcacc 660 cagacctaca tctgcaacgt gaatcacaag cccagcaaca ccaaggtgga caagagagtt 720 gagcccaaat cttgtgacaa aactcacaca tgcccaccgt gcccagcacc tgaactcctg 780 gggggaccgt cagtcttcct cttcccccca aaacccaagg acaccctcat gatctcccgg 840 acccgtgagg tcacatgcgt ggtggtggac gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc 900 aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag 960 tacaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaat 1020 ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac aaagccctcc cagcccccat cgagaaaacc 1080 atctccaaag ccaaagggca gccccgagaa ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccgg 1140 gatgagctga ccaagaacca ggtcagcctg acctgcctgg tcaaaggctt ttatcccagc 1200 gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg cagccggaga acaactacaa gaccacgcct 1260 cccgtgctgg actccgacgg ctcctttttc ctttacagca agctcaccgt ggacaagagc 1320 aggtggcagc aggggaacgt tttttcatgc tccgtgatgc atgagggttt gcacaaccac 1380 tacacgcaga agagcctctc cctgtttccg ggtaaatga 1419 <210> 129 <211> 648 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 light chain <400> 129 gaagttgtgt tgacacagtc tcccggcacc ctggctttgc ctccagggga aagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtca ccgtgttggc agcacctaca tagcctggta tcagcagaag 120 tctggccagg ctcccaggcg cctcatctat ggtgcatcca acagggccac tgacatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg gtccgggaca gacttcactc tcaccatcag gagactggag 240 cctgaagatt ctgcagtgta ttactgtcag cagtttagtg tttcaccgtg gacgttcggc 300 caagggacca gggtggaaat caagcgaact gtggctgcac catctgtctt catcttcccg 360 ccatctgatg agcagttgaa atctggaact gcctctgttg tgtgcctgct gaataacttc 420 tatcccagag aggccaaagt acagtggaag gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc 480 caggagagtg tcacagagca ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg 540 acgctgagca aagcagacta cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag 600 ggcctgagct cgcccgtcac aaagagcttc aacaggggag agtgttag 648 <210> 130 <211> 1371 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 2 heavy chain <400> 130 caggttcagc tggtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60 tcctgcaaga cttctggtta ttccttttcc acttatggag tcagttgggt ccgacaggcc 120 cccggacaag ggcctgagtg ggtgggatgg atcagcgctt acactggtat cacagactac 180 gcacagaagt ttcagggcag agtcactctg accacagacg caaccacggc caccgccttc 240 ctggacctga ggagtctgag acctgacgac acggccacgt atttctgtgc gagagataag 300 gtgcaggggc gcgttgaagt gggatctggg ggtcgtcatg actactgggg acagggaacc 360 ctggtcatcg tctcctcagc ctccaccaag ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc 420 tccaagagca cctctggggg cacagcggcc ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc 480 gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg 540 gctgtcctac agtcctcagg actctactcc ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc 600 agcttgggca cccagaccta catctgcaac gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg 660 gacaagaaag ttgagcccaa atcttgtgac aaaactcaca catgcccacc gtgcccagca 720 cctgaactcc tggggggacc gtcagtcttc ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc 780 atgatctccc ggacccctga ggtcacatgc gtggtggtgg acgtgagcca cgaagaccct 840 gaggtcaagt tcaactggta cgtggacggc gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg 900 cgggaggagc agtacaacag cacgtaccgt gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag 960 gactggctga atggcaagga gtacaagtgc aaggtctcca acaaagccct cccagccccc 1020 atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg 1080 cccccatccc gggatgagct gaccaagaac caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc 1140 ttctatccca gcgacatcgc cgtggagtgg gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac 1200 aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac ggctccttct tcctctacag caagctcacc 1260 gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac gtcttctcat gctccgtgat gcatgagggt 1320 ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc tccctgtctc cgggtaaatg a 1371 <210> 131 <211> 708 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 light chain <400> 131 atggaaaccc cagcgcagct tctcttcctc ctgctactct ggctcccaga taccaccgga 60 gaaattgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 120 ctctcctgca gggccagtca gagtcttagc agcagctcct tagtctggta ccagcagaaa 180 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggtgcatcca gcagggccac tggcatccca 240 gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 300 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagtatggga actcaccgta cacgtttggc 360 caggggaccc aggttgagat caaacgaact gtggctgcac catctgtctt catcttcccg 420 ccatctgatg agcagttgaa atctggaact gcctctgttg tgtgcctgct gaataacttc 480 tatcccagag aggccaaagt acagtggaag gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc 540 caggagagtg tcacagagca ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg 600 acgctgagca aagcagacta cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag 660 ggcctgagct cgcccgtcac aaagagcttc aacaggggag agtgttag 708 <210> 132 <211> 1410 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 3 heavy chain <400> 132 atggactgga cctggaggtt cctctttgtg gtggcagcag ctacaggtgt ccagtcccag 60 gtgcagctgg tgcagtctgg ggctgaggtg aagaagcctg ggtcctcggt gaaggtctcc 120 tgcaaggctt ctggaggcac cctcaacaac tatgctatca gctgggtgcg acaggcccct 180 ggacaagggc ttgagtggat gggagggatc agccctatct ttgggacatt aaactacgca 240 gagaggttcc agggcagagt caccattacc gcggacgtat ttacgaacac agtctacatg 300 gagctgagca gcctgagatc tgaggacacg gccgtgtatt tctgtgcgag aggttgtggc 360 tacaattgtt actactttga cgggtggggc cagggaaccc tggtcaccgt ttcctcagcc 420 tccaccaagg gcccatcggt cttccccctg gcaccctcct ccaagagcac ctctgggggc 480 acagcggccc tgggctgcct ggtcaaggac tacttccccg aaccggtgac ggtgtcgtgg 540 aactcaggcg ccctgaccag cggcgtgcac accttcccgg ctgtcctaca gtcctcagga 600 ctctactccc tcagcagcgt ggtgaccgtg ccctccagca gcttgggcac ccagacctac 660 atctgcaacg tgaatcacaa gcccagcaac accaaggtgg acaagaaagt tgagcccaaa 720 tcttgtgaca aaactcacac atgcccaccg tgcccagcac ctgaactcct ggggggaccg 780 tcagtcttcc tcttcccccc aaaacccaag gacaccctca tgatctcccg gacccctgag 840 gtcacatgcg tggtggtgga cgtgagccac gaagaccctg aggtcaagtt caactggtac 900 gtggacggcg tggaggtgca taatgccaag acaaagccgc gggaggagca gtacaacagc 960 acgtaccgtg tggtcagcgt cctcaccgtc ctgcaccagg actggctgaa tggcaaggag 1020 tacaagtgca aggtctccaa caaagccctc ccagccccca tcgagaaaac catctccaaa 1080 gccaaagggc agccccgaga accacaggtg tacaccctgc ccccatcccg ggatgagctg 1140 accaagaacc aggtcagcct gacctgcctg gtcaaaggct tctatcccag cgacatcgcc 1200 gtggagtggg agagcaatgg gcagccggag aacaactaca agaccacgcc tcccgtgctg 1260 gactccgacg gctccttttt cctttacagc aagctcaccg tggacaagag caggtggcag 1320 caggggaacg ttttttcatg ctccgtgatg catgagggtt tgcacaaccc ctacacgcag 1380 aagagcctct ccctgtttcc gggtaaatga 1410 <210> 133 <211> 708 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 light chain <400> 133 atggaaaccc cagcgcagct tctcttcctc ctgctactct ggctcccaga taccaccgga 60 gaaactgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 120 ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc atcagctact tagcctggta ccagcggaaa 180 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggcgcatcca ggagggccac tggcatccca 240 gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 300 cctgaagatt ttgcagtata ttactgtcag cagtatggta gctcaccgta cacttttggc 360 caggggacca agctggagat caaacgaact gtggctgcac catctgtctt catcttcccg 420 ccatctgatg agcagttgaa atctggaact gcctctgttg tgtgcctgct gaataacttc 480 tatcccagag aggccaaagt acagtggaag gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc 540 caggagagtg tcacagagca ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg 600 acgctgagca aagcagacta cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag 660 ggcctgagct cgcccgtcac aaagagcttc aacaggggag agtgttag 708 <210> 134 <211> 1431 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 4 heavy chain <400> 134 atggagtttg ggctgagctg ggttttcctc gttgctcttt taagaggtgt ccagtgtcag 60 gtgcagctgg tggagtctgg gggaggcgtg gtccagcctg ggaggtccct gagactctcc 120 tgtgcagcgt ctggattcac cttcagtagg tttggcatcc actgggtccg ccaggctcca 180 ggcaaggggc tggagtggat ggcagttata tggtacgatg gaagtaataa attctatgca 240 gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac ggtttatctg 300 caaatgaaca gcctcagagc cgaggacacg gctgtctatt actgtgcgaa agattcccgc 360 ggatattgta gtagtatcat ttgttttgag gggggacttg acaactgggg ccagggaacc 420 ctggtcaccg tctcctcagc ctccaccaag ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc 480 tccaagagca cctctggggg cacagcggcc ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc 540 gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg 600 gctgtcctac agtcctcagg actctactcc ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc 660 agcttgggca cccagaccta catctgcaac gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg 720 gacaagagag ttgagcccaa atcttgtgac aaaactcaca catgcccacc gtgcccagca 780 cctgaactcc tggggggacc gtcagtcttc ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc 840 atgatctccc ggacccctga ggtcacatgc gtggtggtgg acgtgagcca cgaagaccct 900 gaggtcaagt tcaactggta cgtggacggc gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg 960 cgggaggagc agtacaacag cacgtaccgt gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag 1020 gactggctga atggcaagga gtacaagtgc aaggtctcca acaaagccct cccagccccc 1080 atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg 1140 cccccatccc gggatgagct gaccaagaac caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc 1200 ttctatccca gcgacatcgc cgtggagtgg gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac 1260 aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac ggctcctttt tcctttacag caagctcacc 1320 gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac gtcttttcat gctccgtgat gcatgagggt 1380 ttgcacaacc actacacgca gaagagcctc tccctgtttc cgggtaaatg a 1431 <210> 135 <211> 648 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 light chain <400> 135 gagattgtgt tgactcagtc tccaggcacc ctgtctgtgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtcg gcgcgttggc agcacctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggcg cctcatctat ggtgcatcca gcagggccgc tggcatccca 180 gacaggttca gtggcactgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagggtggac 240 cctgaagatt ttgcggtata ttactgtcag cagtatgctg cctcaccgtg gacgttcggc 300 caagggacca cggtggagat caaacgaact gtggctgcac catctgtctt catcttcccg 360 ccatctgatg agcagttgaa atctggaact gcctctgttg tgtgcctgct gaataacttc 420 tatcccagag aggccaaagt acagtggaag gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc 480 caggagagtg tcacagagca ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg 540 acgctgagca aagcagacta cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag 600 ggcctgagct cgcccgtcac aaagagcttc aacaggggag agtgttag 648 <210> 136 <211> 1371 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 5 heavy chain <400> 136 caggttcagc tggtgcagtc tggaggtgag ctgaagaagc ctggggcctc agtgagggtc 60 tcctgtaagg cttctggcta cacctttacc acctatggca tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag gccttgagtg ggtgggatgg atcagcgctt atactggaaa tacagactat 180 gcacagaagg tccagggcag agtaaccatg accacggaca catccacgag cacagcctac 240 atggagctga ggagcctcac atctgacgac acggccgtct attactgtgc gagagataag 300 gtccaggggc gcgttgaagc gggaagtggg ggccggcatg actactgggg ccagggaacc 360 ctggtcaccg tctcctcagc ctccaccaag ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc 420 tccaagagca cctctggggg cacagcggcc ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc 480 gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg 540 gctgtcctac agtcctcagg actctactct ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc 600 agcttgggca cccagaccta catctgcaac gtgaatcaca agcccagcaa caccaargtg 660 gacaagaaag ttgagcccaa atcttgtgac aaaactcaca catgcccacc gtgcccagca 720 cctgaactcc tggggggacc gtcagtcttc ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc 780 atgatctccc ggacccctga ggtcacatgc gtggtggtgg acgtgagcca cgaagaccct 840 gaggtcaagt tcaactggta cgtggacggc gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg 900 cgggaggagc agtacaacag cacgtaccgt gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag 960 gactggctga atggcaagga gtacaagtgc aaggtctcca acaaagccct cccagccccc 1020 atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg 1080 cccccatccc gggatgagct gaccaagaac caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc 1140 ttctatccca gcgacatcgc cgtggagtgg gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac 1200 aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac ggctccttct tcctctacag caagctcacc 1260 gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac gtcttctcat gctccgtgat gcatgagggt 1320 ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc tccctgtctc cgggtaaatg a 1371 <210> 137 <211> 648 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 light chain <400> 137 gaagttgtgt tgacgcagtc tcccggcacc ctgactttgc ctccagggga cagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtca cagtgttggc agcacctaca tagcctggtt tcagcagaag 120 tctggccagg ctcccaggcg cctcatctat ggtgcatcca acagggccac tgacatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg gtccgggaca gacttcactc tcaccatcag gagactggag 240 cctgaagatt ctgcagtgta ctactgtcag cagtttagtg tttcaccgtg gacgttcggc 300 caagggacca gggtggaaat caagcgaact gtggctgcac catctgtctt catcttcccg 360 ccatctgatg agcagttgaa atctggaact gcctctgttg tgtgcctgct gaataacttc 420 tatcccagag aggccaaagt acagtggaag gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc 480 caggagagtg tcacagagca ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg 540 acgctgagca aagcagacta cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag 600 ggcctgagct cgcccgtcac aaagagcttc aacaggggag agtgttag 648 <210> 138 <211> 1371 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 6 heavy chain <400> 138 caggttcagc tggtccagtc tggagtagag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60 tcctgcaaga cttctggtta tccgttttcc acttatggag tcagctgggt ccgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg ggtgggatgg atcagcggtt atactggtat cacagactac 180 gcacagaagt ctcagggcag agtcactctg acgacagacg caagcacggc caccgccttc 240 ttggagctga ggagtctgag gcctgacgac acggccacct atttttgtgc gagagacaaa 300 gtgcaggggc gcgttgaagc gggatctggg ggtcgtcacg actactgggg acagggaacc 360 ctggtcatcg tctcctcagc ctccaccaag ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc 420 tccaagagca cctctggggg cacagcggcc ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc 480 gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg 540 gctgtcctac agtcctcagg actctactcc ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc 600 agcttgggca cccagaccta catctgcaac gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg 660 gacaagaaag ttgagcccaa atcttgtgac aaaactcaca catgcccacc gtgcccagca 720 cctgaactcc tggggggacc gtcagtcttc ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc 780 atgatctccc ggacccctga ggtcacatgc gtggtggtgg acgtgagcca cgaagaccct 840 gaggtcaagt tcaactggta cgtggacggc gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg 900 cgggaggagc agtacaacag cacgtaccgt gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag 960 gactggctga atggcaagga gtacaagtgc aaggtctcca acaaagccct cccagccccc 1020 atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg 1080 cccccatccc gggatgagct gaccaagaac caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc 1140 ttctatccca gcgacatcgc cgtggagtgg gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac 1200 aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac ggctccttct tcctctacag caagctcacc 1260 gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac gtcttctcat gctccgtgat gcatgagggt 1320 ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc tccctgtctc cgggtaaatg a 1371 <210> 139 <211> 648 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 light chain <400> 139 gaagttgtgt tgacgcagtc tcccggcacc ctggctttgc ctccagggga aagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtca cagtattggc agcacctaca tagcctggta tcagcagaag 120 tctggccagg ctcccaggcg cctcatctat ggtgcatcca acagggcctc tgacatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg gtccgggaca gacttcactc tcaccatcag gagactggag 240 cctgaagatt ctgcagtgta ttactgtcag cagtttagtg tttcaccgtg gacgttcggc 300 caagggacca gggtggaaat caagcgaact gtggctgcac catctgtctt catcttcccg 360 ccatctgatg agcagttgaa atctggaact gcctctgttg tgtgcctgct gaataacttc 420 tatcccagag aggccaaagt acagtggaag gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc 480 caggagagtg tcacagagca ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg 540 acgctgagca aagcagacta cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag 600 ggcctgagct cgcccgtcac aaagagcttc aacaggggag agtgttag 648 <210> 140 <211> 1371 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 7 heavy chain <400> 140 caggttcagc tggtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60 tcctgcaaga cttctggtta ttccttttcc acttatggag tcagctgggt ccgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg ggtgggatgg atcagcggtt acactggtat cacagactac 180 gcacagaagt ttcagggcag agtcactctg accacagacg caaccacggc caccgccttc 240 ctggagctga ggagtctgag acctgacgac acggccacct atttctgtgc gagagataag 300 gtgcaggggc gcgttgaagt gggatctggg ggtcgtcatg actactgggg acagggaacc 360 ctggtcatcg tctcctcagc ctccaccaag ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc 420 tccaagagca cctctggggg cacagcggcc ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc 480 gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggg gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg 540 gctgtcctac agtcctcagg actctactcc ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc 600 agcttgggca cccagaccta catctgcaac gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg 660 gacaagaaag ttgagcccaa atcttgtgac aaaactcaca catgcccacc gtgcccagca 720 cctgaactcc tggggggacc gtcagtcttc ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc 780 atgatctccc ggacccctga ggtcacatgc gtggtggtgg acgtgagcca cgaagaccct 840 gaggtcaagt tcaactggta cgtggacggc gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg 900 cgggaggagc agtacaacag cacgtaccgt gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag 960 gactggctga atggcaagga gtacaagtgc aaggtctcca acaaagccct cccagccccc 1020 atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg 1080 cccccatccc gggatgagct gaccaagaac caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc 1140 ttctatccca gcgacatcgc cgtggagtgg gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac 1200 aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac ggctccttct tcctctacag caagctcacc 1260 gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac gtcttctcat gctccgtgat gcatgagggt 1320 ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc tccctgtctc cgggtaaatg a 1371

Claims (28)

  1. (A) 항-인플루엔자 바이러스 항체 또는 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물 10 내지 150 mg/mL;
    (B) 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 80 또는 폴록사머 188 0.01 내지 1.0 %(w/v);
    (C) 소르비톨, 만니톨, 트레할로스 또는 수크로오스 0.1 내지 15 %(w/v); 및
    (D) 히스티딘 1 내지 20 mM을 포함하고,
    (A) 항-인플루엔자 바이러스 항체는
    i) 서열번호 1의 CDR1 영역, 서열번호 2의 CDR2 영역, 및 서열번호 3의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 4의 CDR1 영역, 서열번호 5의 CDR2 영역, 및 서열번호 6의 CDR3 영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; 및
    ii) 서열번호 7의 CDR1 영역, 서열번호 8의 CDR2 영역, 및 서열번호 9의 CDR3 영역을 포함하는 경쇄 가변영역 및 서열번호 10의 CDR1 영역, 서열번호 11의 CDR2 영역, 및 서열번호 12의 CDR3 영역을 포함하는 중쇄 가변영역을 포함하는 항체
    로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 항체를 포함하는,
    안정한 액체 약제학적 제제.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 제 1항에 있어서,
    (A) 항-인플루엔자 바이러스 항체는
    i) 서열번호 43의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역 및 서열번호 44의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; 및
    ii) 서열번호 45의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역 및 서열번호 46의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역을 포함하는 항체
    로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 항체를 포함하는,
    안정한 액체 약제학적 제제.
  5. 삭제
  6. 삭제
  7. 제 1항에 있어서,
    (A) 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물은
    i) 서열번호 43의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역 및 서열번호 44의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역을 포함하는 항체; 및
    ii) 서열번호 45의 폴리펩티드 서열의 경쇄 가변영역 및 서열번호 46의 폴리펩티드 서열의 중쇄 가변영역을 포함하는 항체
    를 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  8. 삭제
  9. 제 1항에 있어서,
    (A) 서로 다른 2가지 이상의 항-인플루엔자 바이러스 항체 혼합물이 서로 다른 2가지 항체의 혼합물일 때, 서로 다른 2 가지 항체들의 비가 9:1 내지 1:9인, 안정한 액체 약제학적 제제.
  10. 삭제
  11. 삭제
  12. 삭제
  13. 삭제
  14. 삭제
  15. 삭제
  16. 삭제
  17. 삭제
  18. 삭제
  19. 삭제
  20. 삭제
  21. 삭제
  22. 제 1항에 있어서,
    pH가 5.5 내지 6.5인, 안정한 액체 약제학적 제제.
  23. 제 1항에 있어서,
    40±2℃에서 6주간 보관한 후 측정한 항체 모노머 순도가 95% 이상인, 안정한 액체 약제학적 제제.
  24. 제 1항에 있어서,
    5±3℃에서 12개월 보관한 후 측정한 항체 모노머 순도가 95% 이상인, 안정한 액체 약제학적 제제.
  25. 제 1항, 제4항, 제7항, 제9항, 제22항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서,정맥내, 근육내, 피내, 피하내, 복막내, 국소, 또는 이의 조합된 투여용인, 안정한 액체 약제학적 제제.
  26. 제 1항, 제4항, 제7항, 제9항, 제22항 내지 제24항 중 어느 한 항에 기재된 안정한 액체 약제학적 제제가 충진된 프리-필드 시린지(pre-filled syringe).
  27. 제 26항에 기재된 프리-필드 시린지가 그 내부에 포함된 자동주사기(auto-injector).
  28. 제 1항, 제4항, 제7항, 제9항, 제22항 내지 제24항 중 어느 한 항의 안정한 액체 약제학적 제제 및 용기를 포함하는 키트.
KR1020170100975A 2016-08-10 2017-08-09 항-인플루엔자 바이러스 항체의 안정한 액체 약제학적 제제 KR102037041B1 (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020160101719 2016-08-10
KR20160101719 2016-08-10

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20180018393A KR20180018393A (ko) 2018-02-21
KR102037041B1 true KR102037041B1 (ko) 2019-10-29

Family

ID=61163123

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020170100975A KR102037041B1 (ko) 2016-08-10 2017-08-09 항-인플루엔자 바이러스 항체의 안정한 액체 약제학적 제제

Country Status (6)

Country Link
US (1) US20210347861A1 (ko)
EP (1) EP3498263B1 (ko)
KR (1) KR102037041B1 (ko)
CN (1) CN109803640B (ko)
TW (1) TWI656882B (ko)
WO (1) WO2018030777A1 (ko)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20140186396A1 (en) 2009-12-28 2014-07-03 Takeda Vaccines, Inc. Methods for stabilizing influenza antigen enveloped virus-based virus-like particle solutions

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0852951A1 (de) * 1996-11-19 1998-07-15 Roche Diagnostics GmbH Stabile lyophilisierte pharmazeutische Zubereitungen von mono- oder polyklonalen Antikörpern
AR054822A1 (es) * 2005-07-07 2007-07-18 Sanofi Pasteur Emulsion inmuno adyuvante
CN102791734B (zh) * 2010-03-08 2014-10-15 赛特瑞恩股份有限公司 源自人b细胞且具有抗甲型流感病毒的中和活性的人单克隆抗体
EP2399604A1 (en) * 2010-06-25 2011-12-28 F. Hoffmann-La Roche AG Novel antibody formulation
WO2012045001A2 (en) * 2010-09-30 2012-04-05 Vanderbilt University Influenza virus antibodies and immunogens and uses therefor
US9475861B2 (en) * 2011-09-30 2016-10-25 Celltrion Inc. Binding molecule having influenza A virus-neutralizing activity produced from human B cell
US20130315955A1 (en) * 2012-04-13 2013-11-28 Protein Sciences Corporation Stability and potency of hemagglutinin
ES2706059T3 (es) * 2012-05-25 2019-03-27 Novartis Ag Composición farmacéutica acuosa que contiene un agente terapéutico biológico y derivado de L-arginina y una inyección que incluye la composición
US9314519B2 (en) * 2012-08-21 2016-04-19 Intervet Inc. Liquid stable virus vaccines
KR20150070384A (ko) * 2012-10-25 2015-06-24 메디뮨 엘엘씨 안정한 저점도 항체 제제
KR20140118682A (ko) * 2013-03-29 2014-10-08 (주)셀트리온 2 이상의 인플루엔자 ａ 바이러스 중화 결합 분자를 포함하는 조성물
AR097762A1 (es) * 2013-09-27 2016-04-13 Intervet Int Bv Formulaciones secas de vacunas que son estables a temperatura ambiente
MX2016004605A (es) * 2013-10-24 2016-11-14 Astrazeneca Ab Formulaciones de anticuerpos estables acuosas.

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20140186396A1 (en) 2009-12-28 2014-07-03 Takeda Vaccines, Inc. Methods for stabilizing influenza antigen enveloped virus-based virus-like particle solutions

Also Published As

Publication number Publication date
TWI656882B (zh) 2019-04-21
EP3498263A1 (en) 2019-06-19
EP3498263A4 (en) 2019-11-20
KR20180018393A (ko) 2018-02-21
CN109803640B (zh) 2022-01-04
US20210347861A1 (en) 2021-11-11
CN109803640A (zh) 2019-05-24
WO2018030777A1 (ko) 2018-02-15
TW201811368A (zh) 2018-04-01
EP3498263B1 (en) 2023-11-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102255099B1 (ko) 2 이상의 인플루엔자 ａ 바이러스 중화 결합 분자를 포함하는 조성물
KR102230620B1 (ko) Ｃｄｈ19 및 ｃｄ3에 대한 항체 작제물
CN107206074B (zh) 双特异性四价抗体及其制备和使用方法
CN110869389B (zh) 抗ror1抗体及其制备和使用方法
KR101601387B1 (ko) c-KIT 항체 및 이의 용도
AU2021203876A1 (en) Anti-CD3 antibodies, activatable anti-CD3 antibodies, multispecific anti-CD3 antibodies, multispecific activatable anti-CD3 antibodies, and methods of using the same
KR20210134300A (ko) 항-sars-cov-2 스파이크 당단백질 항체 및 항원-결합 단편
KR101704893B1 (ko) Gdf-8에 대한 개선된 길항물질 항체 및 그의 용도
KR102612930B1 (ko) Cd127에 대한 항체
KR102007055B1 (ko) Cd27l 항원 결합 단백질
AU2016333517A1 (en) Anti-PD-1 antibodies and compositions
KR20110102198A (ko) 인간 ｂ 세포에서 생산된 인플루엔자 ａ 바이러스 중화 활성을 가지는 인간 단일클론 항체
CN106519036B (zh) 抗cd47和egfr的双功能蛋白及其制备方法与应用
KR20190101435A (ko) 에스. 아우레우스 용혈소 ａ 독소에 대한 인간 항체
DK2109622T3 (en) High affinity antibodies neutralizing staphylococcus enterotoxin B
TW202400655A (zh) 使用胃抑肽受體(gipr)結合蛋白與glp-1促效劑之組合來治療或改善代謝病症之方法
KR20220002899A (ko) 항-psma/cd3 항체로 전립선암을 치료하는 방법
KR20220002972A (ko) 변형 항 pd-l1 항체 및 신경변성 질환 치료 방법 및 용도
KR102037041B1 (ko) 항-인플루엔자 바이러스 항체의 안정한 액체 약제학적 제제
CN109280085B (zh) 一种异二聚体蛋白及其制备方法
KR102651568B1 (ko) 조합 요법
US20230035183A1 (en) Antibodies for the treatment of chronic graft versus host disease
KR20230092961A (ko) 아토피성 피부염 또는 관련 병태의 치료 및/또는 예방을 위한 il-18 길항제의 용도
CN110785186A (zh) 用于治疗免疫性血小板减少的方法

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
AMND Amendment
E601 Decision to refuse application
AMND Amendment
X701 Decision to grant (after re-examination)
GRNT Written decision to grant