KR102007276B1

KR102007276B1 - 감초 추출 분획물을 유효성분으로 함유하는 비만 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법

Info

Publication number: KR102007276B1
Application number: KR1020170118383A
Authority: KR
Inventors: 이주영; 양갑식; 이혜은; 한신희; 김예진; 이정훈; 안태진
Original assignee: 가톨릭대학교 산학협력단; 대한민국(농촌진흥청장)
Priority date: 2017-09-15
Filing date: 2017-09-15
Publication date: 2019-08-06
Also published as: KR20190030853A

Abstract

본 발명은 감초 추출 분획물을 유효성분으로 함유하는 비만 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 본 발명에 따르면, 감초 에탄올 추출물을 분획하여 제조된 감초 헥산 분획물 및 감초 디클로로메탄 분획물은 3T3-L1 지방전구세포의 지방세포 분화 유도 시, 지질 방울 형성 및 지방세포로의 분화를 억제하고, 식이 유도 비만 마우스 모델에서 증가된 체중을 감소시킬 수 있다.
따라서, 상기와 같은 효과를 가지는 감초 추출 분획물은 비만 예방 또는 치료용 약학 조성물, 비만 예방 또는 개선용 건강식품 조성물로 유용하게 활용될 수 있다.

Description

감초 추출 분획물을 유효성분으로 함유하는 비만 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법{Composition for preventing or treating obesity comprising the fraction of Glycyrrhiza uralensis extract and manufacturing method thereof}

본 발명은 감초 추출 분획물을 유효성분으로 함유하는 비만 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

비만은 비정상적으로 과다하게 지방이 체내에 축적되어 개인의 건강에 위협을 주는 일종의 질병으로 정의될 수 있다. 비만은 과식, 운동부족이 주된 원인이 되는 단순성 비만과 내분비계 질환이 원인이 되는 증후성 비만으로 구별된다. 단순성 비만의 원인으로는 과식, 폭식, 간식, 야식, 불규칙적인 식사 등 잘못된 식생활 습관과 운동 부족, 약물의 부작용 등이 있다.

경제 성장과 생활 방식의 변화에 따라 식습관에도 최근 많은 변화가 있어 왔다. 특히, 바쁜 현대인들은 패스트푸드 등의 고열량 식이와 적은 운동량으로 인하여 과체중 및 비만이 증가하고 있는 실정이다. 세계보건기구(WHO)에 따르면, 전 세계적으로 10억 명 이상의 성인이 과체중이고, 그 중 적어도 300만 명 이상이 임상적으로 비만이며, 특히, 유럽에서는 매년 25만 명, 전 세계에서 250만 명 이상이 과체중과 관련되어 사망한 것으로 보고된 바 있다.

과체중 및 비만은 혈압과 콜레스테롤 수치를 증가시켜 심장 질환, 당뇨병, 관절염, 지방간, 고지혈증, 암 등 다양한 만성 합병증 질환을 유발시키거나 악화시킬 수 있다. 또한, 과체중 및 비만은 성인뿐만 아니라, 어린이나 청소년에서도 동맥경화, 고혈압, 고지혈증 또는 심장질환 등의 발병률을 증가시키는 주요한 요인으로 알려져 있다. 따라서, 비만을 하나의 질환으로 인식하고 적극적으로 치료하고자 하는 필요성이 증대되고 있다.

현재까지 비만 치료제에 사용되는 물질은 위장에서 지방 흡수를 감소시키거나 식욕을 억제시키는 약제들이다. 그러나, 소장 및 췌장의 리파아제를 억제하여 지방 흡수를 방지하는 작용을 하는 제니칼(Roche) 및 알리(GlaxoSmithKline)는 위장 관련 부작용 및 지용성 비타민 흡수 감소 등의 부작용을 유발하는 것으로 보고된 바 있다. 또한, 식욕 억제를 통하여 비만 억제 효과를 나타내는 로카세린(5-HT2c receptor agonist) 및 큐넥사(Phentermine/Topiramate)는 주의력 결핍이나 기억력 저하 등 부작용을 일으킬 수 있으며, 항우울제나 편두통제와 함께 복용 시, 심장 판막질환 등 심각한 부작용을 유발할 가능성이 있는 것으로 보고된 바 있고, 시부트라민(serotin noradrenalin reuptake inhibitor)은 2010년 심혈관 질환 및 뇌경색 발생 증가로 퇴출된 바 있다. 이렇듯 현재 사용되고 있는 비만 치료제는 상기와 같은 심각한 문제점을 가지고 있어 새로운 비만 치료제의 개발이 절실한 실정이다.

감초(Glycyrrhiza uralensis)는 콩과(fabaceae)에 속하는 다년생 초본식물로 주로 뿌리를 이용하며 적갈색 또는 암갈색을 나타내고, 특유의 단맛이 있다. 감초의 주요 성분으로는 글리시리진(glycyrrhizin), 사포닌(saponin), 플라보노이드(flavonoid), 다당류(polysaccharides) 및 아스파라긴산(asparagine)이 있으며, 약간의 호모나탈로인(homonataloin), 레진(resins) 및 섬유질(fibers)을 함유하고 있다. 감초는 다른 약재들과 쉽게 섞일 수 있는 장점이 있어서 약품, 건강식품 및 화장품 원재료로 널리 활용되고 있다.

대한민국 공개특허 제 10-2016-0050143호(2016.05.11 공개)

본 발명의 목적은 감초 추출 분획물을 유효성분으로 함유하는 비만 예방 또는 치료용 약학 조성물, 또는 비만 예방 또는 개선용 건강식품 조성물을 제공하는 데에 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 감초 추출 분획물의 제조방법을 제공하는 데에 있다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 감초 (C1 내지 C4)알코올 추출물을 헥산 또는 디클로로메탄으로 분획하여 획득한 감초 추출 분획물을 유효성분으로 함유하는 비만 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 감초 (C1 내지 C4)알코올 추출물을 헥산 또는 디클로로메탄으로 분획하여 획득한 감초 추출 분획물을 유효성분으로 함유하는 비만 예방 또는 개선용 건강식품 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 감초 분말을 (C1 내지 C4)알코올 수용액에 침지시킨 후, 열수 추출하여 추출물을 획득하는 제 1단계, 상기 추출물을 여과한 후, 감압 농축하여 감초 알코올 추출물을 제조하는 제 2단계, 상기 감초 알코올 추출물을 증류수에 현탁시킨 후, 헥산(hexane) 또는 디클로로메탄(dichloromethane)으로 분획하여 분획물을 획득하는 제 3단계 및 상기 분획물을 감압 농축하여 감초 추출 분획물을 제조하는 제 4단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 감초 추출 분획물의 제조방법을 제공한다.

본 발명에 따르면, 감초 에탄올 추출물을 분획하여 제조된 감초 헥산 분획물 및 감초 디클로로메탄 분획물은 3T3-L1 지방전구세포의 지방세포 분화 유도 시, 지질 방울 형성 및 지방세포로의 분화를 억제하고, 식이 유도 비만 마우스 모델에서 증가된 체중을 감소시킬 수 있다.

따라서, 상기와 같은 효과를 가지는 감초 추출 분획물은 비만 예방 또는 치료용 약학 조성물, 비만 예방 또는 개선용 건강식품 조성물로 유용하게 활용될 수 있다.

도 1은 3T3-L1 지방전구세포의 지방세포 분화 유도 시, 감초 추출 분획물에 의한 지질 방울 형성 억제 효과를 Oil red O 염색으로 확인한 것이다.
도 2는 3T3-L1 지방전구세포의 지방세포 분화 유도 시, 감초 추출 분획물에 의한 지질 방울 형성 억제 효과를 Oil red O 염색 및 현미경으로 확인한 것이다.
도 3은 식이 유도 비만 마우스 모델에서 감초 추출 분획물에 의한 체중 감소 효과를 확인한 것이다.

본 발명의 발명자들은 감초 에탄올 추출물을 분획하여 제조된 감초 헥산 분획물 및 감초 디클로로메탄 분획물이 3T3-L1 지방전구세포의 지방세포 분화 유도 시, 지질 방울 형성을 억제하는 것을 확인함으로써 지방세포로의 분화 억제를 확인하였으며, 식이 유도 비만 마우스 모델에서 감초 디클로로메탄 분획물에 의한 체중 감소 효과를 확인하며 본 발명을 완성하였다.

본 발명은 감초 (C1 내지 C4)알코올 추출물을 헥산 또는 디클로로메탄으로 분획하여 획득한 감초 추출 분획물을 유효성분으로 함유하는 비만 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.

바람직하게는, 상기 (C1 내지 C4)알코올은 에탄올 또는 메탄올일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 에탄올일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아님을 명시한다.

바람직하게는, 상기 감초 추출 분획물은 지방전구세포의 지방세포 분화 유도 시, 지질 방울 형성 및 지방세포로의 분화를 억제할 수 있다.

바람직하게는, 상기 감초 추출 분획물은 고지방 식이에 의해 증가된 체중을 감소시킬 수 있다.

본 발명의 조성물은 투여를 위하여, 상기 기재한 유효성분 이외에 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있다. 상기 담체, 부형제 및 희석제로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 소르비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용할 수 있다. 상세하게는 제형화할 경우 통상 사용하는 충진제, 중량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형 제제로는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 이러한 고형 제제는 상기 유효성분 외에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘 카보네이트, 수크로오스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 첨가하여 조제될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제는 멸균된 수용액, 비수성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 과제를 포함한다. 비수성 용제 및 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 오일, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔, 마크로솔, 트윈 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 조성물의 적합한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 시간에 따라 다르지만, 당 업자에 의해 적절하게 선택될 수 있는 바, 상기 조성물의 일일 투여량은 바람직하게는 0.01 mg/kg 내지 500 mg/kg이며, 필요에 따라 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다.

상기 건강식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 천연 과일 주스, 합성 과일 주스 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 또한, 건강기능식품 조성물은 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 껌류, 아이스크림류, 스프, 음료수, 차, 기능수, 드링크제, 알코올 및 비타민 복합제 중 어느 하나의 형태일 수 있다.

또한, 상기 건강식품 조성물은 식품첨가물을 추가로 포함할 수 있으며, 식품첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한 식품의약품안전처에 승인된 식품첨가물공전의 총칙 및 일반 시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다.

상기 식품첨가물공전에 수재된 품목으로 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산 칼륨, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성품, 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고랭색소, 구아검 등의 천연첨가물, L-글루타민산나트륨 제제, 면류 첨가 알칼리제, 보존료제제, 타르색소 제제 등의 혼합 제제류 등을 들 수 있다.

이때, 건강식품 조성물을 제조하는 과정에서 식품에 첨가되는 본 발명에 따른 조성물은 필요에 따라 그 함량을 적절히 가감할 수 있다.

바람직하게는, 상기 제 1단계는 35 내지 60℃에서 1 내지 5시간 동안 2 내지 4회 반복 추출하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아님을 명시한다.

이하에서는 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.

실시예 1 : 감초 추출물 및 감초 추출 분획물 제조

건조된 만주감초(Glycyrrhiza uralensis) 30 g을 분쇄한 후, 증류수 또는 70% 에탄올 800 ml에 침지시켜 45℃에서 3시간 동안 3회 반복 열수 추출하였으며, 추출물을 여과한 후, 여액을 회전 증발기로 감압 농축하여 감초 물 추출물 및 감초 에탄올 추출물을 제조하였다.

상기 70% 에탄올로 추출된 감초 에탄올 추출물은 증류수에 현탁시킨 후, 분액 깔때기에 현탁시킨 70% 에탄올 추출물과 헥산(hexane), 디클로로메탄(dichloromethane; MeCl₂) 및 에틸 아세테이트(ethyl acetate; EtOAc) 용매를 차례대로 1:1씩 부어 순차적으로 분획하였으며, 각 분획물의 용매를 감압 농축하여 감초 추출 분획물을 제조하였다.

실시예 2 : 세포 배양

마우스 섬유아세포(fibroblast)인 3T3-L1 지방전구세포(preadipocyte)는 ATCC(American Type Culture Collection, Manassas, VA, USA)로부터 제공 받았다. 3T3-L1 지방전구세포는 90% DMEM 배지(Dulbecco's Modified Eagle’s Medium, GKibco BRL, Grand Island, NY, USA), 10% 우아혈청(bovine calf serum; BCS, Gibco BRL, Grand Island, NY, USA), 및 1% 페니실린(penicillin) 및 스트렙토마이신(streptomycin)(Gibco BRL, Grand Island, NY, USA)이 포함된 성장 배지를 이용하여 37℃, 5% CO₂조건 하에서 배양하였다. 세포 수의 증식에 따른 과밀도 현상을 해소하기 위하여, 성장 배지의 교환은 매 48시간 마다 수행하여 적정 수의 세포를 유지하였다.

실시예 3 : 3T3 -L1 지방전구세포의 분화 유도 및 형태 관찰

3T3-L1 지방전구세포를 지방세포(adipocyte)로 분화시키기 위하여, 10% 우아혈청과 1% 페니실린 및 스트렙토마이신이 포함된 성장 배지를 이용하여 3T3-L1 지방전구세포를 confluent 상태까지 배양하였다. Confluent 상태에서 10% 우태아혈청(fetal bovine serum; FBS, Gibco BRL, Grand Island, NY, USA) 및 1% 페니실린 및 스트렙토마이신이 포함된 분화 배지를 이용하여 2일 동안 추가 배양하였다.

그 후, 0.5 mM 3-이소부틸-1-메틸잔틴(3-isobutyl-1-methylxanthine; IBMX), 0.1 μM 덱사메타손(dexamethasone) 및 10 μg/ml 인슐린(insulin)이 포함된 MID 분화 배지로 교환하여 2일 동안 배양하였으며, 그 후, 매 2일 마다 10 μg/ml 인슐린이 포함된 분화 배지로 교환하여 배양하였다.

또한, 감초 추출물 및 감초 추출 분획물에 의한 3T3-L1 지방전구세포의 분화 억제 정도를 분석하기 위하여, MDI 및 인슐린이 포함된 분화 배지로 교환할 때 적정 농도의 감초 추출물과 감초 추출 분획물을 처리하였다. 상기와 같이 분화를 유도한 3T3-L1 지방전구세포는 다양한 실험적 분석을 위해 사용하였다.

또한, 감초 추출물 및 감초 추출 분획물에 의한 지방세포의 형태 변화를 분석하기 위하여, 상기와 동일한 방법으로 분화를 유도하고 감초 추출물과 감초 추출 분획물을 처리한 후, 현미경을 이용하여 200배의 배율로 관찰한 다음 사진을 촬영하여 세포 형태를 분석하였다.

실시예 4 : Oil Red O 염색 및 트리글리세라이드 ( triglyceride ) 정량

Oil red O 염색법은 총 지질을 정량할 때 쓰이는 색소 결합법으로 지질에만 특이적으로 결합하는 특성 때문에 지방세포에 생성된 지방 빈도를 분석하는데 활용되고 있다. 따라서, 감초 추출물 및 감초 추출 분획물이 분화가 유도된 3T3-L1 지방세포 내에 생성되는 지질 방울(lipid droplet)에 어떠한 영향을 미치는지를 분석하기 위하여, Oil Red O 염색을 수행하였다.

대조군 및 각각 다른 농도의 감초 추출물과 감초 추출 분획물이 처리된 3T3-L1 지방세포는 배지를 제거하고, 인산완충식염수(phosphated buffered saline; PBS)로 세척한 다음 3.7% 포르말린(formalin)으로 1시간 동안 고정시켰다. 고정이 끝난 후, 60% 이소프로판올(isopropanol)을 이용하여 세포를 세척한 다음 Oil Red O 용액을 처리하고 실온에서 20분 동안 염색을 수행하였다. 염색 후, Oil Red O 용액을 제거하고 증류수로 3회 세척한 다음 염색된 세포는 현미경을 이용하여 사진을 촬영하였다.

또한, 감초 추출물 및 감초 추출 분획물에 의해 유도되는 트리글리세라이드의 생성 억제 정도를 정량적으로 분석하기 위하여, 100% 이소프로판올을 이용하여 세포에 염색된 Oil Red O 용액을 녹여낸 다음 96 웰 플레이트(96 well plate)에 200 μl씩 옮겨 마이크로플레이트 리더기를 이용하여 520 nm에서 흡광도를 측정하였다.

실시예 5 : 동물 실험

C57BL/6J 마우스(5주령)는 라온 바이오(Raon bio)로부터 구매 하였다. 식이 유도 비만(diet induced obesity; DIO) 마우스 모델을 위해, 이유식 직후, 3주령에 야생형 C57BL/6J 수컷 마우스에 45 kcal% 고지방 식이(high fat diet; HFD, Research Diets)를 급여하였고, 실험 전 16 내지 20주 동안 동일한 식이 요법을 유지하였다. 다른 모든 동물들은 일반 식이(chow diet, 지방 칼로리에서 13.5%, Lab Diet)를 급여하였다. 마우스는 12시간 단위로 빛과 어둠 주기가 교차하는 환경에서 유지하였고, 사료와 물은 자유 급여하였다.

실시예 6 : 감초 추출물 및 감초 추출 분획물 처리

복강(i.p.) 주사를 위해, 마우스는 감초 추출물(감초 물 추출물, 감초 에탄올 추출물, 감초 디클로로메탄 분획물) 또는 비히클 처리 전, 4일 동안 비히클(DMSO) 25 μl를 투여하였다. 셀라스트롤(celastrol)을 DMSO (25 μl) 용액에 녹여 마우스에 투여하였다. DMSO 25 μl를 투여한 비히클 군은 대조군으로 사용하였다.

실험예 1 : 감초 추출물 및 감초 추출 분획물이 지질 방울 생성에 미치는 영향

지방세포로 분화되는 과정에 생성되는 지질 방울은 인지질 단일층(phospholipid monolayer)에 의하여 둘러싸여 있는 비활성 소낭으로서 소포체의 이중막 사이에 트리글리세라이드와 콜레스테롤 에스테르(cholesteryl ester)가 축적되어 층이 나누어지기 시작하면서 만들어진다.

따라서, 감초 추출물 및 감초 추출 분획물이 3T3-L1 지방전구세포의 지방세포 형성(adipogenesis) 과정에서 나타나는 지질 방울 생성에 어떠한 영향을 미치는 지를 분석하기 위하여, 지방세포 분화 유도 시, 감초 추출물과 감초 추출 분획물을 적정 농도로 처리한 다음 Oil red O 염색 전과 후로 구분하여 세포 내 지질 방울의 생성 정도를 도립 현미경으로 관찰하였다.

그 결과, 도 1을 참조하여 보면, 지방세포 분화를 유도하지 않은 경우, 지질 방울이 형성되지 않은 것을 확인한 반면, MDI 처리를 통해 분화를 유도한 경우, 세포질 내 지질 방울이 활발하게 형성되는 것을 확인하였다. 또한, 이렇게 형성된 지질 방울은 감초 물 추출물 (Water ex.), 감초 에탄올 추출물(EtOH ex.) 및 에틸 아세테이트 분획물 25 μg/ml 처리 시, 유의한 변화가 관찰되지 않았으나, 감초 헥산 분획물(Hexane fr.) 및 감초 디클로로메탄 분획물(MeCl₂) 25 μg/ml 처리 시, 지질 방울의 형성이 현저하게 억제되는 것을 확인하였다.

다음으로, 감초 헥산 분획물(Hexane fr.) 및 감초 디클로로메탄 분획물(MeCl₂)이 지방 방울 형성에 있어서 농도 의존적인 억제 효과를 보이는지를 확인하기 위하여, 각 분획물을 10, 25, 50 및 100 μg/ml 농도로 처리하고 지질 방울 형성을 분석한 결과, 도 2를 참조하여 보면, 감초 헥산 분획물(Hexane fr.) 및 감초 디클로로메탄 분획물(MeCl₂)이 농도 의존적으로 지질 방울의 형성을 현저하게 억제하는 것을 확인하였다. 따라서, 감초 헥산 분획물(Hexane fr.) 및 감초 디클로로메탄 분획물(MeCl₂)은 3T3-L1 지방전구세포에서 지방세포로의 분화를 억제한다는 것을 확인할 수 있었다.

실험예 2 : 감초 추출물 및 감초 추출 분획물이 식이 유도 비만 마우스 모델에서 총 체중 감소에 미치는 영향

C57BL/6J 마우스에 6주 동안 45 kal% 고지방 식이를 급여하여 38 g 정도의 과체중 마우스를 만들고, 감초 물 추출물(Water ex.), 감초 에탄올 추출물(EtOH ex.) 및 감초 디클로로메탄 분획물(MeCl₂)을 각각 30 mg/kg의 농도로 복강 주사한 후, 체중 변화를 관찰하였다.

그 결과, 도 3을 참조하여 보면, 감초 물 추출물에서는 체중 감소 효과가 관찰되지 않은 반면, 감초 에탄올 추출물에서는 3g 정도의 체중 감소 효과가 관찰되었으며, 감초 디클로로메탄 분획물에서는 6g 정도의 가장 우수한 체중 감소 효과를 관찰함으로써, 감초 디클로로메탄 분획물(MeCl₂)의 항비만 효과를 확인할 수 있었다.

하기에 본 발명에 따른 감초 추출 분획물을 포함하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.

<처방예 1> 약학조성물의 처방예

<처방예 1-1> 산제의 제조

감초 추출 분획물 20 mg, 유당 100 mg 및 탈크 10 mg을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.

<처방예 1-2> 정제의 제조

감초 추출 분획물 20 mg, 옥수수전분 100 mg, 유당 100 mg 및 스테아린산 마그네슘 2 mg을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.

<처방예 1-3> 캡슐제의 제조

감초 추출 분획물 10 mg, 옥수수전분 100 mg, 유당 100 mg 및 스테아린산 마그네슘 2 mg을 혼합한 후 통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.

<처방예 1-4> 주사제의 제조

감초 추출 분획물 10 mg, 주사용 멸균 증류수 적량 및 pH 조절제 적량을 혼합한 후 통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플 당(2 ml) 상기의 성분 함량으로 제조하였다.

<처방예 1-5> 연고제의 제조

감초 추출 분획물 10 mg, PEG-4000 250 mg, PEG-400 650 mg, 백색 바셀린 10 mg, 파라옥시안식향산메칠 1.44 mg, 파라옥시안식향산프로필 0.18 mg 및 잔량의 정제수를 혼합한 후 통상의 연고제의 제조방법에 따라서 연고제를 제조하였다.

<처방예 2> 건강보조식품

<처방예 2-1> 건강식품의 제조

감초 추출 분획물 1 ㎎, 비타민 혼합물 적량(비타민 A 아세테이트 70 μg, 비타민 E 1.0 ㎎, 비타민 B 1 0.13 ㎎, 비타민 B 2 0.15 ㎎, 비타민 B 6 0.5 ㎎, 비타민 B 12 0.2 μg, 비타민 C 10 ㎎, 비오틴 10 μg, 니코틴산아미드 1.7 ㎎, 엽산 50 μg, 판토텐산 칼슘 0.5 ㎎) 및 무기질 혼합물 적량(황산제1철 1.75 ㎎, 산화아연 0.82 ㎎, 탄산마그네슘 25.3 ㎎, 제1인산칼륨 15 ㎎, 제2인산칼슘 55 ㎎, 구연산칼륨 90 ㎎, 탄산칼슘 100 ㎎, 염화마그네슘 24.8 ㎎)을 혼합한 다음 과립을 제조하고 통상의 방법에 따라 건강식품을 제조하였다.

<처방예 2-2> 건강음료의 제조

감초 추출 분획물 1 ㎎, 구연산 1000 ㎎, 올리고당 100 g, 매실 농축액 2 g, 타우린 1 g 및 정제수를 가하여 전체 900 ml가 되도록 하며, 통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 L 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관하였다.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술한 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현 예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

본 발명의 범위는 후술하는 특허청구범위에 의하여 나타내어지며, 특허청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims

감초 에탄올 추출물을 디클로로메탄으로 분획하여 획득한 감초 추출 분획물을 유효성분으로 함유하는 비만 예방 또는 치료용 약학 조성물.
삭제
제 1항에 있어서, 상기 감초 추출 분획물은 지방전구세포의 지방세포 분화 유도 시, 지질 방울 형성 및 지방세포로의 분화를 억제하는 것을 특징으로 하는 비만 예방 또는 치료용 약학 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 감초 추출 분획물은 고지방 식이에 의해 증가된 체중을 감소시키는 것을 특징으로 하는 비만 예방 또는 치료용 약학 조성물.
감초 에탄올 추출물을 디클로로메탄으로 분획하여 획득한 감초 추출 분획물을 유효성분으로 함유하는 비만 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
감초 분말을 에탄올 수용액에 침지시킨 후, 열수 추출하여 추출물을 획득하는 제 1단계;
상기 추출물을 여과한 후, 감압 농축하여 감초 에탄올 추출물을 제조하는 제 2단계;
상기 감초 에탄올 추출물을 증류수에 현탁시킨 후, 디클로로메탄(dichloromethane)으로 분획하여 분획물을 획득하는 제 3단계; 및
상기 분획물을 감압 농축하여 감초 추출 분획물을 제조하는 제 4단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 감초 추출 분획물의 제조방법.
제 6항에 있어서, 상기 제 1단계는 35 내지 60℃에서 1 내지 5시간 동안 2 내지 4회 반복 추출하는 것을 특징으로 하는 감초 추출 분획물의 제조방법.