KR101987861B1

KR101987861B1 - Nedd-8 활성화 효소 억제제 및 저메틸화제의 투여

Info

Publication number: KR101987861B1
Application number: KR1020147014236A
Authority: KR
Inventors: 피터 쥐. 스미스
Original assignee: 밀레니엄 파머슈티컬스 인코퍼레이티드
Priority date: 2011-11-03
Filing date: 2012-11-02
Publication date: 2019-06-11
Also published as: BR112014010699B1; MX2014005323A; PL2773360T3; JP2018009035A; AU2012321106A1; CA2854461C; HK1201733A1; SG11201401895WA; IL232353B; US20150366886A1; EA201400539A1; EP2773360A4; US8980850B2; UA114414C2; MX357835B; GEP20196940B; BR112014010699A2; EA028380B1; CN104245699B; AU2012321106C1

Abstract

본 발명은 암의 치료가 필요하다고 인정된 환자에서 암의 치료 방법에 관한 것이다. 이 방법은 이러한 환자에게 ((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]-피리미딘-7-일)-2-히드록시시클로펜틸)메틸 술파메이트(MLN4924) 또는 {(1S,2S,4R)-4-[(6-{[(1R,2S)-5-클로로-2-메톡시-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일]아미노}피리미딘-4-일)옥시]-2-히드록시시클로펜틸}-메틸 술파메이트(I-216)와 같은 NAE 억제제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염 및 아자시티딘 또는 데시타빈과 같은 저메틸화제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염을 투여하는 단계를 포함한다. 암의 치료에 사용되는 의약품이 또한 개시되어 있다.

Description

NEDD-8 활성화 효소 억제제 및 저메틸화제의 투여{ADMINISTRATION OF NEDD-8 ACTIVATING ENZYME INHIBITOR AND HYPOMETHYLATING AGENT}

본 출원은 2011년 11월 3일에 출원된 미국 가특허 출원 제61/555,049호로부터 우선권의 이익을 주장한다.

NEDD8-활성화 효소(NAE)의 억제는 이종 이식 모델(xenograft model)에서 암 세포의 사멸을 유발하고 종양의 성장을 억제하는 것으로 나타났다. 예컨대, T.A. Soucy et al., Nature, 2009, 458, 732-737; T.A. Soucy et al., Clin . Cancer Res., 2009, 15(12), 3912-3916; 및 J.E. Brownell et al., Mol . Cell ., 2010, 37(1), 102-111 참조. NAE 억제제의 단계 I에 관한 임상 연구의 보고서는 R.T. Swords et al ., Blood, 2010, 115, 3796-3800; J.S. Kauh et al ., J. Clin . Oncol ., 2011, 29, 초록 3013; 및 S. Bhatia et al ., J. Clin . Oncol ., 2011, 29, 초록 8529를 포함한다. NAE의 억제제는 미국 특허 출원 제11/346,469호(공개 번호 제2006/0189636호, 특허 제7,951,810호), 동 제11/700,614호(공개 번호 제2007/0191293호) 및 동 제11/890,338호(공개 번호 제2008/0051404호, 특허 제8,008,307호)에 기재되어 있으며, 상기 언급된 공개 문헌들 각각은 그 전문이 본원에 참고로 인용된다. 이들 문서와 본 명세서 사이에 어떤 불일치가 있으면, 본 명세서가 조절한다.

저메틸화제는 암의 치료에 있어서 미국 식품 의약청(US Food and Drug Administration)에 의해 승인되었다. 예를 들어, VIDAZA^®(주사용 아자시티딘)는 다음 프랑스-미국-영국(French-American-British: FAB) 골이형성 증후군(myelodysplastic syndromes) 서브타입에 걸린 환자의 치료용인 것으로 나타난다: 불응성 빈혈(refractory anemia: RA) 또는 철아구성 빈혈(refractory anemia with ringed sideroblasts; 호중구 감소증(neutropenia) 또는 혈소판 감소증(thrombocytopenia)이 동반되거나 주입이 필요한 경우), 골수아구가 과도한 불응성 빈혈(refractory anemia with excess blasts: RAEB), 전환중인 골수아구가 과도한 불응성 빈혈(refractory anemia with excess blasts in transformation: RAEB-T), 및 만성 골수단구성 백혈병(chronic myelomonocytic leukemia: CMMoL). DACOGEN^®(주사용 데시타빈)은 모든 프랑스-미국-영국 서브타입(불응성 빈혈, 철아구성 빈혈, 골수아구가 과도한 불응성 빈혈, 전환중인 골수아구가 과도한 불응성 빈혈, 및 만성 골수단구성 백혈병) 중 이전에 치료되거나 치료되지 않은, 데 노보(de novo) 및 2차적인 MDS를 포함하는 골이형성 증후군(MDS)에 걸린 환자 및 중급-1, 중급-2, 및 고 위험 국제 예후 점수 체계(International Prognostic Scoring System) 군의 치료용인 것으로 표시된다.

최대 가능 용량(MTD(maximum tolerated dose): 최대 내약 용량)은 전형적으로 암의 치료용 약제에 대하여 구해지게 되는데, 그 이유는 치료의 이익이 용량에 따라 증가하는 것으로 생각되기 때문이다. 예컨대, Y. Lin and W.J. Shih, Biostatistics, 2001, 2(2), 203-215 참조. 약제의 시너지 효과가 있는 조합, 즉, 치료 부작용을 형성하지 않으면서, 그것의 성분의 효율성에서 예상되는 것보다 더 효과적인 약제의 조합은 MTD에서 훨씬 더 큰 효능을 전달하기 위한 기회를 제공할 수 있다. 따라서, 환자에게 부작용으로 부담을 주지 않으면서, 가장 효과적으로 암 환자를 치료하기 위해 항암제의 시너지 효과가 있는 조합을 발견하는 것이 바람직할 수 있다.

현재 NAE 억제제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염 및 저메틸화제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염의 투여가 시너지 효과를 제공한다는 것이 발견되었다. 실험실 내(in vitro) 및 생체 내(in vivo) 둘 다에서 시너지 효과가 발견되었다. 아래에서 더 상세하게 논의된 바와 같이, 실험실 내 시너지 효과는 조합 지수(Combination Index)를 사용하여 측정되었다(M.C. Berenbaum, J. Theor . Biol ., 1985, 114, 413-431). 아래에서 더 상세하게 논의된 바와 같이, 생체 내 시너지 효과는 시너지 생존 방법(synergy survival method) 또는 시너지 종양 성장 방법(synergy tumor growth method)에 따라 측정되었다.

본 개시 내용의 적어도 하나의 양태는 이러한 치료가 필요한 환자에게, NAE 억제제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염 및 저메틸화제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염의 치료적으로 유효한 총량을 이러한 치료가 필요한 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암을 치료하는 방법에 관한 것이다.

본 개시 내용의 적어도 하나의 양태는 또한 이러한 치료가 필요한 환자의 암을 치료하기 위해 저메틸화제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 NAE 억제제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도에 관한 것이다.

본 개시 내용의 적어도 하나의 양태는 이러한 치료가 필요하다고 인정된 대상체에서 암을 치료하는데 사용되는 적어도 하나의 의약품을 포함하는 키트에 관한 것이다. 예를 들어, 키트는 NAE 억제제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염의 적어도 1회 용량을 포함하는 적어도 하나의 의약품, 및 저메틸화제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 적어도 하나의 의약품들을 투여하기 위한 설명서를 포함할 수도 있거나; 또는 이 키트는 저메틸화제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염의 적어도 1회 용량을 포함하는 적어도 하나의 의약품, 및 NAE 억제제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 의약품의 투여용 설명서를 포함할 수도 있다. 다양한 구체예들에서, 키트는 NAE 억제제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염의 적어도 1회 용량을 포함하는 적어도 하나의 의약품 및 저메틸화제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염의 적어도 1회 용량을 포함하는 적어도 하나의 의약품, 및 의약품들을 투여하기 위한 설명서를 포함할 수 있다. 뿐만 아니라, 예를 들어, 키트는 NAE 억제제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염의 적어도 1회 용량을 포함하는 적어도 하나의 의약품, 및 저메틸화제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염의 1회 용량을 포함하는 적어도 하나의 의약품으로 구성된 항암 활성 물질을 포함할 수 있고; 게다가 상기 암 치료용 키트는 이러한 치료가 필요하다고 인정된 대상체의 치료를 위한 의약품들을 투여하기 위한 투여 설명서를 포함한다.

본 개시 내용의 적어도 하나의 양태는 이러한 치료가 필요한 대상체의 암을 치료하는데 사용되는 적어도 하나의 의약품에 관한 것이다. 예를 들어, 적어도 하나의 의약품은 NAE 억제제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 저메틸화제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이들의 조합을 포함할 수도 있다.

본 개시 내용의 적어도 하나의 양태는 암을 치료하기 위한 적어도 하나의 의약품의 제조시 NAE 억제제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도에 관한 것이며, NAE 억제제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염은 저메틸화제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 이러한 치료가 필요한 환자에게 투여된다.

본 개시 내용의 적어도 하나의 양태는 암을 치료하기 위한 적어도 하나의 의약품의 제조시 저메틸화제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도에 관한 것이며, 저메틸화제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염은 NAE 억제제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 이러한 치료가 필요한 환자에게 투여된다.

도 1은 HL60, OCIM2, NB4 및 THP-1 세포주에서, 각각 별도로 아자시티딘 또는 데시타빈과 조합된, NAE 억제제 MLN4924 및 I-216에 대한 조합 지수 값을 나타낸다.
도 2는 제1 일, 제4 일, 제8 일, 제11 일, 제15일 및 제18 일에 지시된 용량으로, 비히클(vehicle) 단독, 단일 약제로서 MLN4924, 단일 약제로서 아자시티딘("Aza"), 및 MLN4924와 아자시티딘의 동시 투여(s.c.)로 피하 처리한 후 HL-60 피하 이종 이식 모델에서 시간의 함수로서 종양 부피의 플롯을 나타낸다.
도 3은 제1 일, 제4 일, 제8 일, 제11 일, 제15 일 및 제18 일에 지시된 용량으로, 비히클 단독, 단일 약제로서 MLN4924, 단일 약제로서 아자시티딘("Aza"), 및 MLN4924와 아자시티딘의 동시 투여(s.c.)로 피하 처리한 후 THP-1 피하 이종 이식 모델에서 시간의 함수로서 종양 부피의 플롯을 나타낸다.
도 4는 제1 일, 제4 일, 제8 일, 제11 일, 제15 일 및 제18 일에 지시된 용량으로, 비히클 단독, 단일 약제로서 MLN4924, 단일 약제로서 아자시티딘("Aza"), 및 MLN4924와 아자시티딘의 동시 투여(s.c.)로 피하 처리한 후 OCI-M2 피하 이종 이식 모델에서 시간의 함수로서 종양 부피의 플롯을 나타낸다.
도 5는 제22 일, 제25 일, 제29 일, 제32 일, 제36 일, 제39일에 지시된 용량으로 비히클 단독, 단일 약제로서 MLN4924, 단일 약제로서 아자시티딘("Aza"), 및 MLN4924와 아자시티딘의 동시 투여(s.c.)로 피하 처리한 후 HL60 파종성 모델(disseminated model)에서 시간의 함수로서 퍼센트 생존의 플롯을 나타낸다.

다음 정의들 및 약어들이 본원에 사용될 수 있다:

본원에 사용된 바와 같이, "용량 제한 독성"(DLT)은 투여가 양으로 제한되거나 완전히 중단되어야 한다고 투여하는 의사가 생각하도록 MLN4924를 이용한 치료에 관련된, 투여하는 의사가 생각하는 부정적 이벤트로서 정의된다. 이러한 이벤트들의 예는 다음을 포함한다:

● 연속하여 7일 이상 지속되는 등급 4 호중구 감소증(500 세포/mm³보다 적은 ANC)

● 열이 구강 온도 ≥ 38.5℃로서 정의되는 열 및/또는 감염을 동반하는 등급 3 호중구 감소증

● 연속하여 7일 이상 지속되는 등급 4 혈소판 감소증(25,000/mm³보다 적지만 10,000/mm³ 보다 많은 혈소판)

● 출혈을 동반하는 등급 3 혈소판 감소증

● 언제나 10,000/mm³보다 적은 혈소판 개수

● 최적의 구토 방지 예방법의 사용에도 불구하고 등급 3 이상의 구역질(nausea) 및/또는 구토(emesis)(여기에서 "최적의 구토 방지 예방법"은 표준 용량으로 제공되고 표준 투약 계획에 따르는 5-HT₃ 길항제를 이용하는, 구토 방지 식이 요법으로서 정의된다). 덱사메타손은 그것의 CYP3A-유발 효과 때문에 사용되어서는 안 된다.

● 최대 지지 요법에도 불구하고 발생하는 등급 3 이상의 설사(diarrhea)

● 10% 이상 내지 50% 미만의 값의 LVEF의 명백한 감소(예를 들어, 기준치가 LVEF = 55%인 환자에서 LVEF = 45%)

● 40% 미만으로 LVEF의 감소

● 50 mm Hg보다 크거나 또는 3x 기준치로의 PASP의 증가

● 다음을 제외한 어떤 다른 등급 3 이상의 비혈액학적 독성:

○ 등급 3 관절통(arthralgia)/근육통(myalgia)

○ 짧은(1주일 미만) 등급 3 피로도

○ MLN4924의 매일 투여 후 등급 3 이하의 호중구 감소증 또는 문서로 기록된 감염의 부재시 발생하는 등급 3 열병

● MLN4924-관련 혈액학적 또는 비혈액학적 독성들의 충분한 회복의 부족으로 인한 1주일 이상의 치료 지연

● 어떤 용량의 MLN4924도 MLN4924로의 치료의 주기 또는 중단 동안 발견하지 못하는 것을 요구하는 MLN4924-관련 독성.

본원에 사용된 바와 같이, "임상적으로 유효한 양" 및 "치료적으로 유효한"은 (a) 치료되는 질병 또는 질환 상태의 심각성의 검출 가능한 감소를 유발하기 위해; (b) 환자의 질환 또는 질병의 증상을 경감시키거나 완화하기 위해; 또는 (c) 치료되는 질병 또는 질환 상태의 진전을 늦추거나 방지하거나, 그렇지 않으면 이를 안정화하거나 이의 안정을 연장하기 위해(예를 들어, 추가적인 종양 성장을 방지하거나 암의 세포 성장을 억제하기 위해) 적절한 투여시 적절한 기간 동안 환자에게 충분한 치료적 물질의 양을 의미한다.

하나 이상의 치료적 물질이 투여될 때, "임상적으로 유효한 총량" 또는 "치료적으로 유효한 총량"은 임의의 개수의 개개의 치료적 물질의 개개의 양이 임상적으로 유효한 양의 정의를 만족하지 않는 경우 조차 각각의 치료적 물질의 개개의 양의 합계가 "임상적으로 유효한 양"의 정의를 만족한다는 것을 의미한다. 예를 들어, A의 10 mg이 임상적으로 유효한 양이 아니고, B의 20 mg이 임상적으로 유효한 양이 아니지만, 10 mg A + 20 mg B의 투여가 "임상적으로 유효한 양"의 정의에 대하여 나열된 결과 중 적어도 하나를 일으키면, 10 mg A + 20 mg B의 합계는 "임상적으로 유효한 총량"으로 생각될 것이다.

어떤 형태 또는 조성으로도, 투여된 용량(들) 또는 임상적으로 유효한 (총)량은 환자 BSA 당 치료적 물질(들)의 양(들), 예를 들어, mg/m²로 표현될 수 있다.

본원에 사용된 바와 같이, "환자"는 질환, 질병 또는 상태로 진단되거나 이들의 증상을 나타내거나 그렇지 않으면 이들로 고통받고 따라서 본원에 설명된 치료의 필요가 인식되는 것으로 생각되는 사람을 의미한다.

본원에 사용된 바와 같이, 예시적 용어 "포함하다", "와 같은", "예를 들어" 등(및 이들의 변형, 예를 들어, "포함하다" 및 "포함하는", "예")은 달리 명시되지 않으면, 제한하지 않기 위한 것으로 의도된다. 즉, 달리 명확하게 진술되지 않으면, 이러한 용어는 "하지만 이에 제한되지 않는"을 나타내기 위한 것으로 의도되고, 예를 들어, "포함하는"은 포함하지만 이에 제한되지 않는다는 것을 의미한다.

본원에 사용된 바와 같이, "체표면적"(BSA)은 표준 노모그램, 예를 들어, 다음을 사용하여 계산된다

.

치료적 물질- NAE 억제제.

MNL4924로도 알려진, 화합물((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]-피리미딘-7-일)-2-히드록시시클로펜틸)메틸 술파메이트:

는 NEDD8-활성화 효소(NAE)의 억제제인 것으로 보고되었다. 예컨대, T.A. Soucy et al., Nature, 2009, 458, 732-737; T.A. Soucy et al., Clin . Cancer Res., 2009, 15(12), 3912-3916; 및 J.E. Brownell et al., Mol . Cell ., 2010, 37(1), 102-111 참조. 상기 논의된 바와 같이, MLN4924, 이들의 약학적으로 허용 가능한 염, MLN4924 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염의 약학적 조성물, 합성 공정, 및 이들의 다형태는 이미 설명되었다. 예컨대, 미국 특허 출원 제11/700,614호(공개 번호 제2007/0191293호), 제12/221,399호(공개 번호 제2009/0036678호) 및 제12/779,331호(공개 번호 제2011/0021544호) 참조. MLN4924 원료 의약품("MLN4924-DS")은 MLN4924의 히드로클로라이드 염, 즉, ((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2-히드록시시클로펜틸)메틸 술파메이트 히드로클로라이드이다.

I-216으로도 알려진, 화합물 {(1S,2S,4R)-4-[(6-{[(1R,2S)-5-클로로-2-메톡시-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일]아미노}피리미딘-4-일)옥시]-2-히드록시시클로펜틸}메틸 술파메이트:

는 NAE의 억제제인 것으로도 보고되었다. 2011년 8월 24일에 출원된 미국 가특허 출원 제61/526,830호에 대한 우선권을 주장하는, 2012년 8월 23에 출원된 미국 특허 출원 제13/592,389호를 참고하고, 이들은 전문이 본원에 참고 문헌으로 인용된다. 이들 문서와 본 명세서 사이에 어떤 불일치가 있으면, 본 명세서가 조절한다.

치료적 물질-저메틸화제

아자시티딘은 4-아미노-1-β-D-리보푸라노실-s-트리아진-2(1H)-온(IUPAC 명: 4-아미노-1-β-D-리보푸라노실-1,3,5-트리아진-2(1H)-온):

이다.

상기 논의된 바와 같이, VIDAZA^®(아자시티딘 주사용, Celgene Corporation(Summit, NJ); VIDAZA^®는 Celgene Corporation의 등록 상표임)가 다음 프랑스-미국-영국(FAB) 골이형성 증후군 서브타입: 즉, 불응성 빈혈(RA) 또는 철아구성 빈혈(호중구 감소증 또는 혈소판 감소증이 동반되거나 주입이 필요하면), 골수아구가 과도한 불응성 빈혈(RAEB), 전환중인 골수아구가 과도한 불응성 빈혈(RAEB-T), 및 만성 골수단구성 백혈병(CMMoL)에 걸린 환자의 치료용으로 US FDA에 의해 표시되고 승인되었다. VIDAZA^®에 대한 전체 처방 정보는 상업적인 패키지 삽입물에서 입수 가능하다.

데시타빈은 4-아미노-1-(2-데옥시-β-D-에리트로펜토푸라노실)-1,3,5-트리아진-2(1H)-온:

이다.

DACOGEN^®데시타빈 주사용, Eisai, Inc., Woodcliff Lake, NJ; DACOGEN^®은 SuperGen, Inc., Dublin, CA의 등록 상표임)이 모든 프랑스-미국-영국 서브타입(불응성 빈혈, 철아구성 빈혈, 골수아구가 과도한 불응성 빈혈, 전환중인 골수아구가 과도한 불응성 빈혈, 및 만성 골수단구성 백혈병) 중 이전에 치료되거나 치료되지 않은, 데 노보 및 2차 MDS를 포함하는 골이형성 증후군에 걸린 환자(MDS) 및 중급-1, 중급-2, 및 고 위험 국제 예후 점수 시스템(International Prognostic Scoring System) 군의 치료용으로 US FDA에 의해 표시되고 승인되었다. DACOGEN^®에 대한 전체 처방 정보는 상업적인 패키지 삽입물에서 입수 가능하다.

화합물 투여

NAE 억제제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염 및 저메틸화제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염의 투여가 시너지 효과를 제공할 수 있다는 것이 발견되었다.

NAE 억제제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염(NAEi)은 단일 투약 형태에서 또는 별도의 투약 형태로서 저메틸화제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염(HMA)과 조합되어 투여될 수 있다. 별도의 투약 형태로서 투여될 때, 저메틸화제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염은 NAE 억제제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염의 투여 전에, 동시에, 또는 이후에 투여될 수 있다. 본원에 사용된 바와 같이, NAEi 및 HMA의 "조합"의 투여는 두 개의 약제의 동시의 또는 순차적인 투여, 뿐만 아니라, 당업자에 의해 이해된 바와 같이, 단일 치료 주기 동안 두 가지 화합물의 투여를 나타낸다.

일부 구체예에서, 본 개시 내용은 다음과 같은 28일 주기: 즉, 제1 일, 제4 일, 제8 일 및 제11 일에 NAEi 투여; 및 제1 일, 제2 일, 제3 일, 제4 일, 제5 일, 제8 일 및 제9 일에 HMA 투여에 따라 환자에게 NAE 억제제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염(NAEi) 및 저메틸화제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염(HMA)을 투여함으로써 환자에서 암을 치료하는 방법에 관한 것이다. 선택적으로 제1 주기는 제1 일, 제4 일, 제11 일 및 제15일에 NAEi가 투여되고 제8 일, 제9 일, 제10 일, 제11 일, 제12 일, 제15 일 및 제16 일에 HMA가 투여되는 35일이며, 28일의 다음 주기는 선행 문장에서 설명된 바와 같다.

일부 구체예에서, 본 개시 내용은 다음과 같은 28일 주기: 즉, 제1 일, 제3 일, 및 제5 일에 NAEi 투여; 및 제1 일, 제2 일, 제3 일, 제4 일, 제5 일, 제8 일 및 제9 일에 HMA 투여에 따라 환자에게 NAE 억제제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염(NAEi) 및 저메틸화제 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염(HMA)을 투여함으로써 환자에서 암을 치료하는 방법에 관한 것이다. 선택적으로, 첫 번째 주기는 제1 일, 제3 일, 및 제5 일에 NAEi가 투여되고 제8 일, 제9 일, 제10 일, 제11 일, 제12 일, 제15 일 및 제16 일에 HMA가 투여되는 35일이며, 28일의 다음 주기는 상기 문장에서 설명된 바와 같다.

다양한 구체예에서, NAEi는 ((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]-피리미딘-7-일)-2-히드록시시클로펜틸)메틸 술파메이트 ("MLN4924") 또는 {(1S,2S,4R)-4-[(6-{[(1R,2S)-5-클로로-2-메톡시-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일]아미노}피리미딘-4-일)옥시]-2-히드록시시클로펜틸}메틸 술파메이트 ("I-216")일 수 있다. 적어도 하나의 구체예에서, NAEi는 MLN4924이다. 적어도 하나의 구체예에서, NAEi는 I-216이다.

다양한 구체예에서, HMA는 아자시티딘 또는 데시타빈일 수도 있다. 적어도 하나의 구체예에서, HMA는 아자시티딘이다. 적어도 하나의 구체예에서, HMA는 데시타빈이다.

다양한 구체예에서, MLN4924는 아자시티딘과 조합하여 투여된다. 다양한 구체예에서, MLN4924는 데시타빈과 조합하여 투여된다. 다양한 구체예에서, I-216은 아자시티딘과 조합하여 투여된다. 다양한 구체예에서, I-216은 데시타빈과 조합하여 투여된다.

다양한 구체예에서, NAEi는 약 20　mg/m², 30　mg/m², 40mg/m², 45　mg/m², 50　mg/m², 60mg/m²또는75　mg/m²의 용량으로 투여된다. 다양한 구체예에서, HMA는 약 75　mg/m²의 용량으로 투여된다.

다양한 구체예에서, NAEi는 정맥 내로 투여된다. 다양한 구체예에서, NAEi는 경구로 투여된다. 다양한 구체예에서, NAEi는 피하로 투여된다. 다양한 구체예에서, HMA는 정맥 내로 또는 피하로 투여된다.

일부 구체예에서, 본 개시 내용은 다음과 같은 28일 주기: 즉, 제1 일, 제4 일, 제8 일 및 제11 일에 NAEi 투여; 및 제1 일, 제2 일, 제3 일, 제4 일, 제5 일, 제8 일 및 제9 일에 HMA 투여에 따라 환자에게 NAEi 및 저메틸화제 HMA를 투여함으로써 환자에서 암을 치료하는 방법에 관한 것이며; NAEi는 MLN4924이고 HMA는 아자시티딘이고; MLN4924는 약 20　mg/m², 30　mg/m², 40mg/m², 45　mg/m², 60mg/m²또는75　mg/m²의 용량으로 정맥 내로 투여되고; 아자시티딘은 약 75　mg/m²의 용량으로 투여되고; 암은 혈액학적 악성 종양이다. 다양한 구체예에서, 혈액학적 악성 종양은 급성 골수성 백혈병(acute myeloid leukemia: AML) 또는 골이형성 증후군(MDS)이다. 다양한 구체예에서, 혈액학적 악성 종양은 AML이다. 다양한 구체예에서, 혈액학적 악성 종양은 MDS이다.

일부 구체예에서, 본 개시 내용은 다음과 같은 28일 주기: 즉, 제1 일, 제3 일, 및 제5 일에 NAEi 투여; 및 제1 일, 제2 일, 제3 일, 제4 일, 제5 일, 제8 일 및 제9 일에 HMA 투여에 따라 환자에게 NAEi 및 저메틸화제 HMA를 투여함으로써 환자에서 암을 치료하는 방법에 관한 것이며; NAEi는 MLN4924이고 HMA는 아자시티딘이고; MLN4924는 약 20　mg/m², 30　mg/m², 40mg/m², 45　mg/m², 50　mg/m², 60mg/m²또는75　mg/m²의 용량으로 정맥 내로 투여되고; 아자시티딘은 약 75　mg/m²의 용량으로 투여되고; 암은 혈액학적 악성 종양이다. 다양한 구체예에서, 혈액학적 악성 종양은 급성 골수성 백혈병(AML) 또는 골이형성 증후군(MDS)이다. 다양한 구체예에서, 혈액학적 악성 종양은 AML이다. 다양한 구체예에서, 혈액학적 악성 종양은 MDS이다.

치료적 물질; 약학적 조성물.

치료적 물질은 약학적으로 허용 가능한 염일 수 있다. 일부 구체예에서, 이러한 염은 무기산 또는 유기산 또는 염기로부터 유래된다. 적합한 염의 재검토를 위해서, 예컨대, Berge et al ., J. Pharm . Sci., 1977, 66, 1-19 alc Remington : The Science and Practice of Pharmacy, 20th Ed., A. Gennaro(ed.), Lippincott Williams & Wilkins(2000) 참조.

적합한 산 부가 염의 예는 아세테이트, 아디페이트, 알기네이트, 아스파르테이트, 벤조에이트, 벤젠 술포네이트, 비술페이트, 부티레이트, 시트레이트, 캄포레이트, 캄포 술포네이트, 시클로펜탄프로피오네이트, 디글루코네이트, 도데실술페이트, 에탄술포네이트, 푸마레이트, 루코헵타노에이트, 글리세로포스페이트, 헤미술페이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 히드로클로라이드, 히드로브로마이드, 히드로이오다이드, 2-히드록시에탄술포네이트, 락테이트, 말레에이트, 메탄술포네이트, 2-나프탈렌술포네이트, 니코티네이트, 옥살레이트, 파모에이트, 펙티네이트, 퍼술페이트, 3-페닐-프로피오네이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 숙시네이트, 타르트레이트, 티오시아네이트, 토실레이트 및 언데카노에이트를 포함한다.

적합한 염기 부가 염의 예는 암모늄 염; 나트륨 및 칼륨 염과 같은 알칼리 금속 염; 칼슘 및 마그네슘 염과 같은 알칼린 토금속 염; 디시클로헥실아민 염, N-메틸-D-글루카민과 같은 유기 염기와의 염; 및 아르기닌, 리신, 등과 같은 아미노산과의 염을 포함한다.

예를 들어, Berge는 다음 FDA-승인된 상업적으로 판매되는 염: 음이온 아세테이트, 베실레이트(벤젠술포네이트), 벤조에이트, 비카보네이트, 비타르트레이트, 브로마이드, 칼슘 에데테이트(에틸렌디아민테트라아세테이트), 캄실레이트(캄포술포네이트), 카보네이트, 클로라이드, 시트레이트, 디히드로클로라이드, 에데테이트(에틸렌디아민테트라아세테이트), 에디실레이트(1,2-에탄디술포네이트), 에스톨레이트(라우릴 술페이트), 에실레이트(에탄술포네이트), 푸마레이트, 글루셉테이트(글루코헵토네이트), 글루코네이트, 글루타메이트, 글리콜릴아르사닐레이트(글리콜아미도페닐아르소네이트), 헥실레졸시네이트, 히드라바민(N, N'-디(데히드로-아비에틸)-에틸렌디아민), 히드로브로마이드, 히드로클로라이드, 히드록시나프토에이트, 이오다이드, 이세티오테이트(2-히드록시에탄술포네이트), 락테이트, 락토비오네이트, 말레에이트, 말레에이트, 만델레이트, 메실레이트(메탄-술포네이트), 메틸브로마이드, 메틸니트레이트, 메틸술페이트, 뮤케이트, 납실레이트(2-나프탈렌술포네이트), 니트레이트, 파모에이트(엠보네이트), 판토테네이트, 포스페이트/디포스페이트, 폴리갈락투로네이트, 살리실레이트, 스테아레이트, 서브아세테이트, 숙시네이트, 술페이트, 탄네이트, 타르트레이트, 테오클레이트(8-클로로테오필리네이트) 및 트리에티오다이드; 유기 양이온 벤자틴(N, N'-디벤질에틸렌디아민), 클로로프로카인, 콜린, 디에탄올아민, 에틸렌디아민, 메글루민(N-메틸글루카민) 및 프로카인; 및 금속성 양이온 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 칼륨, 소디움 및 아연을 나열한다.

Berge는 다음 FDA-승인되지 않고 상업적으로 판매된(미국 외) 염: 음이온 아디페이트, 알기네이트, 아미노살리실레이트, 안히드로메틸렌시트레이트, 아레콜린, 아스파르테이트, 비술페이트, 부틸브로마이드, 캄포레이트, 디글루코네이트, 디히드로브로마이드, 디숙시네이트, 글리세로포스페이트, 헤미술페이트, 히드로플루오라이드, 히드로이오다이드, 메틸렌비스(살리실레이트), 나파디실레이트(1,5-나프탈렌디술포네이트), 옥살레이트, 펙티네이트, 퍼술페이트, 페닐에틸바비투레이트, 피크레이트, 프로피오네이트, 티오시아네이트, 토실레이트 및 언데카노에이트; 유기 양이온 베네타민 (N-벤질펜에틸아민), 클레미졸(1-p-클로로벤질-2-피롤리돈-1'-일메틸벤지미다졸), 디에틸아민, 피페라진 및 트로메타민(트리스(히드록시메틸)아미노메탄); 및 금속성 양이온 바륨 및 비스무트를 추가로 나열한다.

본원에 사용된 바와 같이, "약학적으로 허용 가능한 담체"는 수령자 대상체(포유동물, 예를 들어, 사람)에 맞는 물질을 나타내고 약제의 활성을 종료하지 않으면서 활성제를 표적 부위에 전달하는데 적합하다. 담체와 관련된 독성 또는 부작용은, 존재하는 경우, 예를 들어, 활성제의 의도된 용도에 대한 합리적인 위험/이익 비율에 상응한다.

본 개시 내용의 방법에 사용되는 약학적 조성물은 다른 것들 중에서, 통상적인 과립화, 혼합, 용해, 캡슐화, 동결건조, 또는 에멀젼화 공정과 같은 방법에 의해 제조될 수 있다. 조성물은 과립, 침전물, 또는 미립자, 동결 건조된, 회전 건조된 또는 분무 건조된 파우더, 무정형 파우더를 포함하는 파우더, 타블렛, 캡슐, 시럽, 좌약, 주사액, 에멀젼, 엘릭서(elixir), 현탁액 또는 용액을 포함하는 다양한 형태로 생성될 수 있다. 제형은 안정화제, pH 개질제제, 계면활성제, 가용화제, 생물학적 이용성 개질제제 및 이들의 조합을 포함할 수 있다.

이들 조성물에 사용될 수 있는 약학적으로 허용 가능한 담체는 이온 교환기, 알루미나, 알루미늄 스테아레이트, 레시틴, 사람 혈청 알부민과 같은 혈청 단백질, 포스페이트 또는 카보네이트와 같은 완충 물질, 글리신, 소르브 산, 칼륨 소르베이트, 식물성 포화 지방산의 부분적 글리세리드 혼합물, 물, 염 또는 프로타민 술페이트, 디소디움 히드로겐 포스페이트, 칼륨 히드로겐 포스페이트, 염화 나트륨, 아연 염과 같은 전해질, 콜로이드 실리카, 마그네슘 트리실리케이트, 폴리비닐 피롤리돈, 셀룰로스-기반 물질, 폴리에틸렌 글리콜, 소디움 카르복시메틸셀룰로스, 폴리아크릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌-폴리옥시프로필렌-블록 폴리머, 폴리에틸렌 글리콜 및 양모 지방을 포함한다.

이들 약학적 조성물은 사람과 같은, 포유동물에게 약학적 투여를 위해 조제된다. 이러한 조성물은 경구로, 비경구로, 흡입 스프레이에 의해, 국부적으로, 직장으로, 비강으로, 볼 내로, 질 내로, 또는 매몰된 레저버(reservoir)를 통해 투여될 수 있다. 용어 "비경구"는 본원에 사용된 바와 같이 피하, 정맥 내, 복강 내, 근육 내, 관절 내, 활막 내, 흉골 내, 척추강 내, 간 내, 병소 내 및 두개 내 주입 또는 주입 기술을 포함한다. 일부 구체예에서, 조성물은 경구로, 정맥 내로, 또는 피하로 투여된다. 일부 구체예에서, 조성물은 경구로 투여된다. 일부 구체예에서, 조성물은 정맥 내로 투여된다. 이들 제형은 단기간 작용하거나, 빠르게 방출하거나, 장기간 작용하도록 설계될 수 있다. 뿐만 아니라, 조성물은 종양 부위에 투여(예를 들어, 주사에 의해)와 같이, 전신의 수단보다는 오히려 국소적 수단으로 투여될 수 있다.

약학적 제형은 오일, 물, 알콜, 및 이들의 조합과 같은 액체를 사용하여 액체 현탁액 또는 용액으로서 제조될 수 있다. 시클로덱스트린과 같은 가용화제가 포함될 수 있다. 약학적으로 적합한 계면활성제, 현탁화제, 또는 에멀젼화제는 경구 또는 비경구 투여를 위해 추가될 수 있다. 현탁액은 땅콩 오일, 참깨 오일, 면실유, 옥수수 오일 및 올리브 오일과 같은 오일을 포함할 수 있다. 현탁액 제제는 또한 에틸 올레에이트, 이소프로필 미리스테이트, 지방산 글리세리드 및 아세틸화된 지방산 글리세리드와 같은 지방산의 에스테르를 함유할 수 있다. 현탁액 제형은 에탄올, 이소프로필 알콜, 헥사데실 알콜, 글리세롤 및 프로필렌 글리콜과 같은 알콜; 폴리(에틸렌글리콜)과 같은 에테르; 미네랄 오일 및 광유(petrolatum)와 같은 석유 탄화수소를 포함할 수 있다.

이들 약학적 조성물의 멸균 주사 가능 형태는 수성 또는 유성 현탁액일 수 있다. 이들 현탁액은 업계에 알려진 기술에 따라 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁화제를 사용하여 조제될 수 있다. 멸균 주사 가능 제제는 또한, 예를 들어, 1,3-부탄디올의 용액으로서, 비-독성 비경구로 허용 가능한 희석액 또는 용매 중의 멸균 주사 가능 용액 또는 현탁액일 수 있다. 이용될 수 있는 예시적 비히클 및 용매 중에, 링거액(Ringer's solution) 및 등장성 염화 나트륨 용액이 있다. 게다가, 멸균, 고정된 오일은 통상적으로 용매 또는 현탁 배지로서 이용된다. 이 목적을 위해, 합성 모노- 또는 디-글리세리드를 포함하는 어떤 완하성 지방유(bland fixed oil)가 이용될 수 있다. 올레 산 및 그것의 글리세리드 유도체와 같은 지방산은 주사 가능 물질의 제조에 있어서 유용하며, 그 이유는, 예를 들어, 그것들의 폴리옥시에틸화된 버젼의 올리브 오일 또는 피마자 오일과 같이, 천연 약학적으로 허용 가능한 오일이기 때문이다. 이들 오일 용액 또는 현탁액은 또한 카르복시메틸 셀룰로스 또는 에멀젼 및 현탁액을 포함하는 약학적으로 허용 가능한 투약 형태의 제형에서 통상적으로 사용되는 유사한 분산제와 같은, 장쇄 알콜 희석액 또는 분산제를 함유할 수 있다. Tween, Span 및 다른 에멀젼화제 또는 약학적으로 허용 가능한 고체, 액체, 또는 다른 투약 형태의 제조에 통상적으로 사용되는 생물학적 이용 가능성 인핸서(enhancer)와 같이, 통상적으로 사용되는 다른 계면활성제는 조제의 목적을 위해 사용될 수 있다. 화합물은 볼루스(bolus) 주사와 같은 주사 또는 연속적 주입에 의한 비경구 투여용으로 조제될 수 있다. 주사용 단위 투약 형태는 앰플 또는 다회수 용량 용기로 되어있을 수도 있다.

예를 들어, 본 발명의 다양한 구체예에서, NAEi는 MLN4924 주입 약물 제품(Injection Drug Product)("MLN4924-IDP")이다. MLN4929-IDP는 다음 부형제들과 함께 조제된다: 시트르 산; 수산화 나트륨; 시클로덱스트린 술포부틸에테르, 소디움 염(Captisol^®); 및 주사용수. 적어도 하나의 구체예에서, MLN4929-IDP는 pH 3.3인, 50 mM 시트레이트 완충액 및 100 mg/mL 술포부틸에테르 β-시클로덱스트린을 함유하는 용액 중의 10 mg/mL MLN4924(자유 염기로서)로 구성된다.

MLN4924-IDP는 식염수에 희석될 때 안정성 문제를 겪게 된다. MLN4924-IDP는 분석 확인서(Certificate of Analysis)에서 지시된 재검사 기간 동안 사용될 수 있다. 실제로는, MLN4924-IDP는 5℃±3℃에서 냉장하여 저장되었다. 각각의 타입 I 유리 바이알은 명목상 Teflon^®-코팅된 부틸 고무 마개로 밀봉되었고 합성된 멸균 용액 5 mL를 함유하며, 플라스틱 Flip-Off^® 캡이 있는 알루미늄 시일(seal)로 오버시일되었다(oversealed).

본 개시 내용의 다양한 구체예에서, HMA는 아자시티딘이다. 아자시티딘은 상업적으로 이용 가능한 VIDAZA^®(주사용 아자시티딘)이며, 이것은 100-mg 일회용 바이알에서 동결건조된 파우더로서 공급된다. 추가 정보를 위해서는, VIDAZA ^® 패키지 삽입물 참조.

이들 약학적 조성물은 캡슐, 타블렛, 수성 현탁액 또는 용액을 포함하는, 경구로 허용 가능한 어떤 투약 형태로도 경구로 투여될 수 있다. 수성 현탁액이 경구 사용에 필요할 때, 활성 성분은 에멀젼화제 및 현탁화제와 조합될 수 있다. 원하면, 특정 감미제, 방향제 또는 착색제가 추가될 수 있다. 캡슐 형태의 경구 투여를 위해, 유용한 희석액은 락토스 및 건조된 옥수수 전분을 포함한다. 경구 사용을 위한 타블렛의 경우에, 통상적으로 사용되는 담체는 락토스 및 옥수수 전분을 포함한다. 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제가 또한 전형적으로 추가된다. 코팅은 다양한 목적으로, 예를 들어, 맛을 감추기 위해, 용해 또는 흡수의 부위에 영향을 미치기 위해, 또는 약물 작용을 연장하기 위해 사용될 수도 있다. 코팅은 타블렛에 또는 캡슐에 사용되는 과립화된 입자에 적용될 수 있다.

대안으로, 이들 약학적 조성물은 직장 투여를 위해 좌약의 형태로 투여될 수 있다. 이것들은 약제를 실온에서는 고체이지만 직장 온도에서는 액체이며 그러므로 직장에서 녹아서 약물을 방출할 적합한 비-자극성 부형제와 혼합함으로써 제조될 수 있다. 이러한 물질은 코코아 버터, 밀랍 및 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다.

이들 약학적 조성물은 또한, 예를 들어, 처리의 표적이 눈, 피부, 또는 대장 항문(lower intestinal tract)의 질환을 포함하는, 국부적 적용에 의해 쉽게 접근 가능한 지역 또는 기관을 포함할 때, 국부적으로 투여될 수 있다. 적합한 국부적 제형은 이들 지역 또는 기관 각각에 대하여 쉽게 제조된다.

대장 항문에 대한 국부적 적용은 직장 좌약 제형(상기 참조) 또는 적합한 관장제 제형에서 이루어질 수도 있다. 국부적-경피성 패치가 또한 사용될 수 있다. 국부적 적용을 위해, 약학적 조성물은 하나 이상의 담체에 현탁되거나 용해된 활성 성분을 함유하는 적합한 연고로 조제될 수 있다. 본 개시 내용의 화합물의 국부적 투여를 위한 담체는 미네랄 오일, 액체 광유, 백색 광유, 프로필렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌, 폴리옥시프로필렌 화합물, 에멀젼화 왁스 및 물을 포함한다. 대안으로, 약학적 조성물은 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 담체에 현탁되거나 용해되는 활성 성분(들)을 함유하는 적합한 로션 또는 크림으로 조제될 수 있다. 적합한 담체는 미네랄 오일, 소르비탄 모노스테아레이트, 폴리소르베이트 60, 세틸 에스테르 왁스, 세테아릴 알콜, 2-옥틸도데카놀, 벤질 알콜 및 물을 포함한다.

눈에 사용하기 위해, 약학적 조성물은 염화 벤질알코늄과 같은 보존제가 있거나 없는, 등장성, pH 조정된 멸균 식염수 중의 미소화된 현탁액으로서, 또는, 예를 들어, 등장성, pH 조정된 멸균 식염수 중의 용액으로서 조제될 수 있다. 대안으로, 눈에 사용하기 위해, 약학적 조성물은 광유과 같은 연고로 조제될 수 있다.

약학적 조성물은 또한 비강 에어로졸 또는 흡입에 의해 투여될 수 있다. 이러한 조성물은 약학적 제형의 업계에 알려진 기술에 따라 제조될 수 있고 식염수 중의 용액으로서 제조될 수 있으며, 벤질 알콜 또는 다른 적합한 보존제, 생물학적 이용 가능성을 향상시키기 위한 흡수 프로모터, 플루오로카본, 및/또는 다른 통상적인 가용화제 또는 분산제를 이용한다.

본원에 개시된 방법은 NAE 효소 활성의 억제가 병든 세포 또는 조직의 생존 및/또는 확장에 해로운 질환, 장애, 및 질병을 치료하기 위해 사용될 수 있다(예를 들어, 세포는 NAE 억제에 민감하고; NAE 활성의 억제는 질환 메카니즘을 방해하고; NAE 활성의 감소는 질환 메카니즘의 억제제인 단백질을 안정화하고; NAE 활성의 감소는 질환 메카니즘의 활성화제인 단백질의 억제를 초래한다). 질환, 장애 및 질병은 또한 효과적인 쿨린 및/또는 유비퀴틴화 활성을 필요로 하는 것들을 포함할 수 있으며, 이 활성은 NAE 효소 활성을 줄임으로써 조절될 수 있다.

예를 들어, 본원에 개시된 방법들은 질환 상태의 유지 및/또는 진행에 효과적인 쿨린-의존적 유비퀴틴화 및 단백질 가수분해 경로(예를 들어, 유비퀴틴 프로테아솜 경로)가 필요한 장애를 포함하는, 세포 증식을 수반하는 장애의 치료에 유용할 수 있다. 본 개시 내용의 방법들은 NAE 활성에 의해 조절되는 단백질을 통해 매개된 장애(예를 들어, NFκB 활성화, p27^Kip 활성화, p21^WAF ^/ ^CIP1 활성화, p53 활성화)의 치료에 유용할 수 있다. 대표적인 장애는 증식 장애, 가장 주목할 만하게 암 및 염증성 장애(예를 들어, 류머티스성 관절염(rheumatoid arthritis), 염증성 장 질환(inflammatory bowel disease), 천식(asthma), 만성 폐쇄성 폐질환(chronic obstructive pulmonary disease; COPD), 골관절염(osteoarthritis), 피부병(dermatosis)(예를 들어, 아토피성 피부염, 건선(psoriasis)), 혈관 증식성 질환(예를 들어, 죽상 동맥 경화증(atherosclerosis), 재발 협착증(restenosis)) 자가 면역 질환(예를 들어, 다발성 경화증(multiple sclerosis), 조직 및 기관 이식 거부)); 뿐만 아니라 감염(예를 들어, 면역 반응)에 관련된 염증, 신경병성 장애(neurodegenerative disorder)(예를 들어, 알츠하이머 병(Alzheimer's disease), 파킨슨씨 병(Parkinson's disease), 운동 신경 세포 질환(motor neuron disease), 신경성 동통(neuropathic pain), 삼중 반복 장애(triplet repeat disorder), 성상 세포증(astrocytoma), 및 알콜성 간 질환의 결과로서 신경 퇴화), 허혈성 손상(ischemic injury)(예를 들어, 뇌졸중(stroke)), 및 악액질(cachexia)(예를 들어, 다양한 생리학적 및 병리학적 상태(예를 들어, 신경 손상, 단식, 열병, 산증(acidosis), HIV 감염, 암 고통, 및 특정 내분비병(endocrinopathy))를 동반하는 가속화된 근육 단백질 파손)을 포함한다.

본원에 개시된 방법들은, 예를 들어, 암의 치료에 유용할 수 있다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "암"은 제어되지 않거나 불규칙한 세포 증식, 감소된 세포 분화, 주위 조직을 침입하는 부적절한 능력, 및/또는 이소성 부위에서 새로운 성장을 확립하는 능력을 특징으로 하는 세포 장애를 나타낸다. 용어 "암"은 고체 종양 및 혈액성 감염 종양을 포함한다. 용어 "암"은 피부, 조직, 기관, 뼈, 연골, 혈액, 및 혈관의 질환을 포함한다. 용어 "암"은 원발성 암(primary cancer) 및 전이성 암(metastatic cancer)을 더 포함한다.

일부 구체예에서, 암은 고체 종양이다. 본 개시 내용의 방법들에 의해 치료될 수 있는 고체 종양의 예는 췌장암; 방광암; 대장암; 전이성 유방암을 포함하는 유방암; 안드로겐-의존적 및 안드로겐-독립적 전립선암을 포함하는 전립선암; 예를 들어, 전이성 신세포암(renal cell carcinoma)을 포함하는 신장암; 예를 들어, 소세포 폐암(small cell lung cancer: SCLC), 비-소세포 폐암(NSCLC), 기관지 폐포암(bronchioloalveolar carcinoma: BAC), 및 폐의 선암(adenocarcinoma)을 포함하는 폐암; 예를 들어, 진행성 상피암(progressive epithelial cancer) 또는 원발성 복막암(primary peritoneal cancer)을 포함하는 난소암; 자궁경부암; 위암; 식도암; 예를 들어, 두경부의 편평상피암을 포함하는 두경부암(head and neck cancer); 흑색종(melanoma); 전이성 신경내분비 종양을 포함하는 신경내분비암(neuroendocrine cancer); 예를 들어, 신경교종(glioma), 악성 올리고덴드로신경교종, 성인 다형성 교아종(glioblastoma multiforme), 및 성인 악성 성상세포증을 포함하는 뇌 종양; 골암(bone cancer); 및 연조직 육종(soft tissue sarcoma)을 포함한다.

일부 구체예에서, 암은 혈액학적 악성 종양이다. 혈액학적 악성 종양의 예는 급성 골수성 백혈병(AML); 가속화된 CML 및 CML 모세포 단계(CML-BP)를 포함하는 만성 골수성 백혈병(chronic myelogenous leukemia: CML); 급성 림프구성 백혈병(ALL); 만성 림프구성 백혈병(chronic lymphocytic leukemia: CLL); 호지킨 병(Hodgkin's disease: HD); 여포성 림프종 및 외투 세포 림프종을 포함하는 비-호지킨 림프종(NHL); B-세포 림프종; T-세포 림프종; 다발성 골수종(MM); 발덴스트롬 마크로글로불린혈증(Waldenstrom's macroglobulinemia); 불응성 빈혈(RA), 철아구성 빈혈(RARS), 골수아구가 과도한 불응성 빈혈(RAEB), 및 전환중인 RAEB(RAEB-T)를 포함하는 골이형성 증후군(MDS); 및 골수 증식 증후군(myeloproliferative syndrome)을 포함한다.

일부 구체예에서, 의사는 암에 걸린 환자를 주로 하나의 타입으로 진단할 수도 있다. 일부 구체예에서, 의사는 환자를 하나 이상의 타입의 암에 걸린 것으로 진단할 수도 있다. 일부 구체예에서, 진단은 주로 하나의 타입의 골이형성 증후군이다. 일부 구체예에서, 진단은 하나 이상의 타입의 골이형성 증후군이다.

일부 구체예에서, 본 개시 내용의 방법들은 대장암, 난소암, 폐암, 유방암, 위암, 전립선 암 및 췌장암과 같은 종양 암의 재발이 있거나, 전개 또는 경험할 위험이 있는 환자를 치료하는데 사용된다. 일부 구체예에서, 본 개시 내용의 방법들은 AML, CML, CML-BP, ALL, 또는 CLL과 같은 혈액학적 암의 재발이 있거나, 전개 또는 경험할 위험이 있는 환자를 치료하는데 사용된다.

본 개시 내용이 더 완벽하게 이해되기 위해서, 다음 실시예가 설명된다. 이들 실시예는 단지 예시이고 어떤 방법으로도 본 발명의 범위를 제한하려는 것은 아니다.

실시예

1. 실험실 내 세포 생존력 검정

실험 프로토콜은 폴리-D-리신 BioCoat™ Black/Clear 384 플레이트들(Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ)을 사용하였다. 적절한 NAE 억제제를 DMSO에 용해시켰고 Echo(Labcyte, Sunnyvale, CA) 액체 처리 시스템을 사용하여 웰들로 전달하였다. HL60 및 THP-1 세포주를 ATCC(American Type Culture Collection, Manassas, VA)에서 얻은 한편, NB4 및 OCI-M2 세포주는 DSMZ(Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Brunswick, Germany)에서 얻었다. 각 플레이트는 웰들에 추가된 세포주들 중 하나로부터 세포 현탁액을 갖는다. 웰들 중 일부를 양성 대조군(아무 화합물도 추가되지 않음)으로 사용하는 한편, 웰들 중 또 다른 일부를 음성 대조군(아무 세포도 추가되지 않음)으로 사용하였다. 플레이트들을 72시간 동안 배양하였고, 그 후 세포 생존력을 ATPlite(PerkinElmer, Waltham, MA)를 사용하여 측정하였다.

통계 분석.

표준화. 음성 대조군의 중간값이 0이고 양성 대조군의 중간값이 100이 되도록 데이터를 크기 조정함으로써 생존력 데이터를 각 플레이트에 대하여 별도로 표준화하였다. 더 공식적으로,

이며, V_i는 i번째 웰의 표준화된 생존력이며, U_i는 미가공 생존력 측정값이고, 중간값(U_{_})은 음성 대조군의 중간값이고, 중간값(U₊)은 양성 대조군의 중간값이다. 표준화 후에, 대조군을 폐기하였다.

반응 표면 모델 및 피팅. 반응 표면 모델을 표준화된 생존력 및 약물 농도 사이의 관계를 설명하기 위해 사용하였다. 주어진 플레이트에 대하여,

이며, E₁, E₂, E₃, E₄, I₁, I₂, I₃, S₁, S₂, S₃, 및 S₄가 파라미터이면, C_A 및 C_B는 각각 약물 A 및 B의 농도이고, V는 표준화된 생존력 측정값이다. 오차 값은 독립적이고 정규 확률 변수를 동일하게 분포시켰다고 가정하였다. 이 모델은 힐 방정식(Hill equation)의 연장이며(A.V. Hill, J. Physiol ., 1910, 40, iv-vii), 이것은 보통 단일 약물의 효과를 모델링하는데 사용된다. 통계적 소프트웨어 프로그램 R R Development Core Team(2008)(R: 통계 컴퓨팅을 위한 언어 및 환경. R Foundation for Statistical Computing, Vienna, Austria. ISBN 3-900051-07-0, URL http://www.R-project.org)을 가지고 최대 우도 방법(maximum likelihood method)을 사용하여 데이터를 이 모델에 맞추었다.

품질 검사. 세 가지 타입의 품질 검사를 플레이트들에 적용하였다. 먼저, 양성 대조군의 변화 및 음성 대조군의 평균이 작다는 것을 검사하였다. 그 다음 새로운 데이터가 이전 단일 약물 실험의 데이터와 일치한다는 것을 검사하였다. 마지막으로, 반응 표면 적합성의 나머지를 제곱값들의 나머지 합계가 충분히 작다는 것을 보장하기 위해 분석하였다. 이들 품질 검사 모두는 수치 임계값을 기반으로 하여 통과/실패를 결정하였고, 같은 임계값을 실험의 모든 플레이트들에 대하여 사용하였다. 플레이트가 품질 검사 중 어느 하나를 실패하면, 그것을 분석에서 제거하였다.

실험실 내 시너지 효과의 측정. 조합 지수(M.C. Berenbaum, J. Theor . Biol., 1985, 114, 413-431)를 약물 시너지 효과의 측정값으로서 사용하였다. 조합 지수를 이소볼로그램(isobologram)에 기초하여 계산하며, 이것은 일정한 생존력을 갖는 용량 반응 표면의 슬라이스이다. 본 분석을 위해, 50% 생존력을 갖는 용량 윤곽선인 50% 이소볼로그램을 사용하였다. EC50_A 및 EC50_B는 50%의 생존력을 갖는 약물 A 및 B 단독 각각의 용량인 것으로 정의된다. 50% 이소볼로그램에 따른 지점(D_A, D_B)에 대하여, 조합 지수는(D_A / EC50_A) +(D_B / EC50_B)로 정의된다. (D_A, D_B)의 선택이 임의적일 수 있기 때문에, 제약조건 D_A / D_B = EC50_A / EC50_B를 사용한다. 조합 지수가 1보다 작으면, 그것은 이소볼로그램이 안쪽으로 곡선을 그리고, 약물 조합은 시너지 효과가 있다는 것을 나타낸다. 반대로, 조합 지수가 1보다 크면, 50% 이소볼로그램은 바깥쪽으로 곡선을 그리며, 길항 작용을 의미한다. 본 발명에 따라 적용되는 더 엄중한 분석 방법에서, 범위 0.8-1.2 이내의 조합 지수 값은 가산적인 것으로 생각된다. 이 규칙은 가산성(additivity)으로부터의 작은 편차가 시너지 효과가 있는 것으로 분류되는 것을 방지한다.

각각의 조건에 대한 양측 t-테스트를 수행하여 평균 조합 지수가 1과 다른지 결정하였다. Benjamini-Hochberg 방법(Y. Benjamini and Y. Hochberg, J. R. Stat. Soc., Series B( Stat . Methodol.), 1995, 57(1), 289-300)을 사용하여 다수의 가설 시험에 대한 결과적 p-값을 조정하였다. 0.05 보다 아래로 조정된 p-값은 통계적으로 유의한 것으로 생각되었다. 조합이 시너지 효과가 있는 것으로 분류되기 위해서, 본 발명자들은 세 가지 기준을 만족시킬 필요가 있었다: 조건에 대한 평균 조합 지수는 1보다 작아야 하고, 차이는 통계적으로 유의해야 하고, 조합 지수는 범위(0.8, 1.2) 밖에 있어야 한다. 이 세 번째 기준은 가산성으로부터의 작은 편차가 시너지 효과가 있는 것으로 분류되는 것을 방지한다. p-값이 0.05 이상이거나 조합 지수가 범위(0.8, 1.2) 내에 있는 조합은 가산적인 것으로 분류되었다.

세포 생존력 검정을 사용하여 네 개의 세포주, HL60, OCIM2, NB4, 및 THP-1에서, 두 개의 NAE 억제제, MLN4924 및 I-216 각각을 두 개의 저메틸화제, 아자시티딘 및 데시타빈의 각각과의 실험실 내에서의 조합 효과를 평가하였다. 도 1은 각각 테스트된 조합 중에서 품질 검사를 통과한 실험 모두에 대한 조합 지수를 나타낸다. 결과는 조건별로 배열된다. 하기 표 1은 평균 조합 지수, 조정된 p-값, 및 각각 결정된 조합에 대한 결론을 나열한다. 표 1에서 나타난 바와 같이, 모두 8개의 NAE 억제제 및 저메틸화제의 조합은 OCIM2 및 NB4 세포주 둘 다에서 시너지 효과를 입증하였다. HL60 세포주에서, 두 NAE 억제제는 데시타빈과 함께 시너지 효과를 입증하였고 아자시티딘과 함께 부가적인 효과를 나타냈다. THP-1 세포주에서, NAE 억제제 둘 다는 아자시티딘과 함께 부가적인 효과를 입증하였다. THP-1에서 데시타빈의 단일 약제 활성의 결핍으로 인해, 조합 지수는 THP-1에서 NAE 억제제 및 데시타빈으로 실험실 내 실험에 대하여 계산될 수 없다.

표 1. 조합 지수 값의 요약.

도 1은 각 플레이트에 대한 조합 지수 값을 나타내고, 조건(즉, 특정 세포주에 적용된 특정 약물 조합) 별로 배열하였다. 이들 결과를 각 조건에 대한 평균 조합 지수를 계산함으로써 요약하였으며, 표 1에 나타난 바와 같다.

2. 생체 내 종양 효능 모델

피하 이종 이식 모델

테스트 대상체. Matrigel™(BD Biosciences, Bedford, MA)과 함께 100 μL 포스페이트 완충된 식염수 중의 HL-60(2x10⁶) 종양 세포를 26-게이지 바늘을 사용하여 암컷 Ncr 누드 마우스(5-8주령, Charles River Laboratories, Wilmington, MA)의 오른쪽 등 측면의 피하 공간으로 무균 주사하였다. Matrigel™과 함께 100 μL 포스페이트 완충된 식염수 중의 THP-1(2.5x10⁶) 또는 OCI-M2(5x10⁶) 종양 세포를 26-게이지 바늘을 사용하여 CB.17 SCID 마우스(5-8주령, Charles River Laboratories)의 오른쪽 등 측면의 피하 공간으로 무균 주사하였다.

접종 후 7일(7)에 시작하여, 노기스(vernier caliper)를 사용하여 일주일에 두 번 종양을 측정하였다. 종양 부피를 표준 과정을 사용하여 계산하였다(0.5 x(길이 x 너비²)). 종양이 대략 200mm³의 부피에 도달했을 때, 마우스를 10개의 군으로 무작위로 나누었고 다양한 용량 및 투여 계획으로 화합물 억제제(200 μL)와 함께 피하에 주사하였으며, 처음 투여한 날을 1일로 정의하였다. 모든 대조군 군은 비히클 단독을 수용하였다. 종양 크기 및 체중을 연구의 기간 동안 일주일에 대략 두 번 측정하였다. 마우스를 종양 부피가 체중의 10%에 도달했을 때, 또는 처리군 또는 대조군의 평균 종양 부피가 대략 2000mm³에 도달했을 때 안락사시켰다. 각 연구에 대한 투여 계획은 다음과 같았다: MLN4924 및 아자시티딘을 별도로 투여하거나 지시된 용량으로 제1 일, 제4 일, 제8 일, 제11 일, 제15 일 및 제18 일에 피하 주사로 동시 투여하였다. 종양 성장을 투여 기간 후 계속해서 관찰하였다. 시간의 함수로서 보고된 평균 종양 부피를 도 2-4에서 나타낸다.

피하 이종 이식 모델에서 종양 성장의 시너지 효과의 통계적 분석.

THP-1 및 OCI-M2 모델에 대하여, 제0 일 내지 제21 일의 측정값을 분석하였다. HL60 모델에 대하여, 제0 일 내지 제14 일의 측정값을 사용하였는데, 다수의 마우스가 제14 일 이후에 허용된 부피를 초과하는 종양을 갖기 때문이다. 모든 종양 부피는 log₁₀ 변형 전에 그것들에게 추가된 1의 값을 가졌다. 이들 값을 처리군과 비교하여 시간이 지남에 따른 경향의 차이가 통계적으로 유의한지 평가하였다. 처리군의 짝들을 비교하여, 다음 혼합된 효과의 선형 회귀 모델을 최대 우도 방법을 사용하여 데이터에 맞추었으며:

Y_ijk-Y_i0k = Y_i0k + 처리_i + 일_j + 일_j ² +(처리^*일)_ij +(처리^*일²)_ij + e_ijk

여기서 Y_ijk가 i번째 처리시 k번째 동물의 j번째 시점에서 log₁₀ 종양 값이면, Y_i0k는 i번째 처리시 k번째 동물의 제0 일 log₁₀ 종양 값이고, 일_j는 중간값-중심 시점이었고 연속적인 변수로서 처리되었고, e_ijk는 잔여 오차이다. 공간적 거듭 제곱식 공분산 매트릭스를 시간이 흐름에 따라 같은 동물에서 반복된 측정값을 설명하기 위해 사용하였다. 상호작용 기간, 뿐만 아니라 일_j ² 기간을 그것들이 통계적으로 유의하지 않으면 제거하였다.

우도 비 테스트를 사용하여 처리군의 주어진 쌍이 통계적으로 유의한 차이를 나타내는지를 평가하였다. 전체 모델의 -2 로그 우도를 어떤 처리기간도 없는 것(감소된 모델)과 비교하였고 값의 차이를 Chi-제곱 테스트를 사용하여 테스트하였다. 테스트의 자유도를 전체 모델의 자유도와 감소된 모델의 자유도 사이의 차이로서 계산하였다.

통계적 유의성 외에, 각각의 처리에 대한 효과의 크기의 측정이 발견되었다. 로그 종양 값(Y_ijk-Y_i0k) 대 시간의 예측된 차이는 각 처리군에 대한 평균 곡선 아래 면적(AUC) 값을 계산하기 위해 상기 모델로부터 취했다. dAUC 값을 다음과 같이 계산하였다:

시너지 효과의 분석을 위해, 로그 종양 값의 관찰된 차이를 사용하여 각 동물에 대한 AUC 값을 계산하였다. 처리군의 동물이 연구로부터 제거되는 경우에, 마지막으로 관찰된 종양 값을 이후의 모든 시점에서 실시하였다. 시너지 효과의 분석의 확고성을 개선하기 위해, 다음 과정을 각 처리군의 AUC 값에 적용하였다. x를 주어진 처리군에 대한 AUC 값의 세트로 설정하였다. 원하는 범위를 한정하였다:

(중간값(x) - 5 ^* MAD(x), 중간값(x) + 5 ^* MAD(x)).

여기에서, MAD는 x의 중간 절대 편차이다. x의 어떤 값도 이 범위 밖에 있으면, 상기 값은 가장 가까운 경계의 값으로 대체되었다. 과정은 비-반복성이고, 그래서 범위를 각 처리군에 대하여 한 번만 계산하였다.

처리 A 및 B의 조합에 대한 시너지 점수를 다음과 같이 한정하였고

100 ^*(평균(AUC_AB) - 평균(AUC_A) - 평균(AUC_B) + 평균(AUC_ctl)) / 평균(AUC_ctl)

AUC_AB, AUC_A, AUC_B, 및 AUC_ctl은 각각 조합군, A 군, B 군, 및 대조군의 동물에 대한 AUC 값이다. 시너지 점수의 표준 오차를 동물들 중에서 AUC 값의 변화에 기반하여 계산하였다. 양측 t-테스트를 사용하여 시너지 점수가 0과 유의하게 다른지 결정하였다. p-값이 0.05 이하이고, 시너지 점수가 0 미만이면, 조합은 시너지 효과가 있는 것으로 생각되었다. p-값이 0.05 이상이면, 조합이 가산적인 것으로 생각되었다.

마우스 이종 이식 모델을 사용하여 NAE 억제제 MLN4924 및 저메틸화제 아자시티딘의 생체 내 조합 효과를 평가하였다. 도 2-4는 제1 일, 제4 일, 제8 일, 제11 일, 제15 일 및 제18 일에 지시된 용량으로 단일 약제로서 비히클, 단일 약제로서 MLN4924, 단일 약제로서 아자시티딘("Aza"), 및 MLN4924와 아자시티딘의 동시 투여(s.c.)에 따른 세 개의 피하 이종 이식 모델에서 시간의 함수로서 종양 부피를 나타낸다.

HL-60 피하 이종 이식 모델에서(도 2), 단일 약제로서 MLN4924 및 아자시티딘은 종양 성장에 대하여 한계 효과를 갖는다. 반대로, MLN4924와 아자시티딘을 동시 투여하는 것은 종양 퇴화로 이어졌으며, 시너지 효과를 통계적으로 평가하였다.

THP-1 이종 이식 모델에서(도 3), 단일 약제로서 아자시티딘은 종양 성장에 대한 한계 효과를 갖는 반면에 단일 약제로서 MLN4924는 종양 성장을 억제하였다. 반대로, MLN4924와 아자시티딘을 동시 투여하는 것은 종양 퇴화로 이어졌다. 이 모델에서, 시너지 효과 대신에, 가산성의 통계적 평가에도 불구하고, 도면은 조합의 이점: 즉, 종양 성장 억제(단일 약제) 대 조합에 의한 종양 퇴화를 명확하게 보여준다.

THP-1에서 개선된 활성의 추가적인 입증은 각각의 단일 약제와 비교하여 조합에 의하여 종양 재성장을 지연하는 것이다. 단일 약제 처리 보다 조합에 의해 제공된 추가적인 이점은 통계적으로 유의하며, 도 3b에서 도시된 바와 같다(P-값 < 0.05).

OCI-M2 피하 이종 이식 모델에서(도 4), 단일 약제로서 MLN4924 및 아자시티딘은 종양 성장을 억제하였다. 반대로, MLN4924와 아자시티딘을 동시 투여하는 것은 종양 퇴화로 이어지며 시너지 효과를 통계적으로 평가하였다.

파종성 ( Disseminated ) 이종 이식 모델

테스트 대상체 . 100 μL IMDM 배지 중의 HL-60(1x10⁷) 종양 세포를 27-게이지 바늘을 사용하여 암컷 마우스 CB-17 SCID(8-10주령, Charles River Laboratories, Wilmington, MA)의 측면 정맥에 접종하였다. 접종 후 제20 일에, 마우스를 10개의 군으로 무작위로 나누었다. 제22 일에 시작해서, 피하 이종 이식 실험에서 설명된 바와 같은 1주일에 두 번의 투여 계획을 사용하여(제22 일, 제25 일, 제29 일, 제32 일, 제36 일, 제39 일에 투여), 마우스에 비히클, 180 mg/kg MLN4924, 10 mg/kg 아자시티딘, 또는 180 mg/kg MLN4924와 10 mg/kg 아자시티딘의 조합물을 피하로 투여하였다. 마우스를 체중 감소와, 국부 마비(paresis) 또는 뒷다리의 마비(paralysis) 및 만져서 알 수 있는 내부 고체 종양의 출현을 포함하는 질환의 증상에 대하여 1주일에 적어도 두 번 관찰하였다. 동물이 죽거나 질병 부담으로 인해 희생된 날을 기록하였다. 생존 시간은 도 5에 도시된다.

파종성 이종 이식 모델에서 생존에 대한 시너지 효과의 통계적 분석.

생존 시간에 있어서 시너지 효과를 결정하기 위해, 평균 생존 시간 및 해당 표준 오차를 각 처리군에 대하여 계산하였다. 생존 시너지 효과를 다음과 같이 정의하였으며

평균(생존_AB) - 평균(생존_A) - 평균(생존_B) + 평균(생존_ctl)

여기서 생존_AB, 생존_A, 생존_B, 및 생존_ctl은 각각 조합군, A 군, B 군, 및 대조군의 동물에 대한 생존 시간이다. 생존 시너지 효과에 대한 표준 오차를 구적법(quadrature)으로 네 개의 용어 각각의 표준 오차를 추가함으로써 발견하였다. 양측 Z-테스트를 사용하여 생존 시너지 효과가 0과 유의하게 다른지의 여부를 결정하였다. P-값이 0.05 보다 아래이고, 생존 시너지 효과가 0보다 크면, 조합은 시너지 효과가 있는 것으로 생각되었다. P-값이 0.05 이상이면, 조합은 가산적인 것으로 생각되었다.

도 5는 도 2-4의 실험에서와 같은 1주일에 두 번의 투여 계획을 사용하여, HL-60 세포가 정맥 내 주사로 접종되고, 마우스를 지시된 용량으로 접종 후 제22 일에 시작하여 비히클, 단일 약제로서 MLN4924, 단일 약제로서 아자시티딘으로 처리하고 MLN4924와 아자시티딘을 피하에 동시 투여한 파종성 이종 이식 모델에서 시간의 함수로서 생존을 도시한다. HL-60 파종성 모델에서(도 5), 단일 약제로서 MLN4924 및 아자시티딘 둘 다는 대조군과 비교하여 평균 생존 시간을 연장시켰다(MLN4924에 대하여 8.4일 연장 및 아자시티딘에 대하여 21.1일 연장). MLN4924 및 아자시티딘의 조합은 36.7일만큼 평균 생존 시간을 연장시켰으며, 이것은 가산적인 조합으로부터 예상되는 것보다 7.2일 더 길다(도 5). 생존 시너지 효과는 통계적으로 유의하였다.

표 2a. HL60 피하 이종 이식 종양에 대한 시너지 효과 평가.

표 2b. HL60 피하 이종 이식 종양에 대한 처리군의 짝 비교.

표 3a. THP-1 피하 이종 이식 종양에 대한 시너지 효과 평가.

표 3b. THP-1 피하 이종 이식 종양에 대한 처리군의 짝 비교.

표 4a. OCI-M2 피하 이종 이식 종양에 대한 시너지 효과 평가.

표 4b. OCI-M2 피하 이종 이식 종양에 대한 처리군의 짝 비교.

표 5a. HL-60 파종성 이종 이식 모델의 마우스에 대한 평균 생존 시간.

표 5b. HL-60 파종성 이종 이식 모델에 대한 생존 시간 시너지 효과 평가.

예측적 약물 투여 예.

사용 전에, MLN4924-IDP 바이알을 실온(15℃ 내지 30℃)에 배치함으로써 주위 조건으로 가온한다. 수조와 같이, 가속화된 가열 방법을 사용하지 않았고, 사용해서도 안 된다. MLN4924-IDP는 희석 전에 8시간 동안 실온에서 안정하다.

각 MLN4924-IDP 바이알은 명목상 5 mL를 함유한다(유리 염기로서 50 mg MLN4924). 멸균 기술을 사용하여, 적절한 양의 약물을 바이알(들)에서 빼내서 5% 덱스트로스 용액을 함유하는 250 mL IV 백(bag)에 주사하였으며, 이것을 반복적으로 부드럽게 뒤집어서 혼합하였다. 제조된 MLN4924-IDP IV 백을 실온에 저장하는 경우 6시간 내에 사용해야 한다. 대안으로, 제조된 IV 백은 화학적으로 안정하고 5℃±3℃에서 최대 24시간 동안 저장될 수 있다. 5℃±3℃에서 저장 24시간 후, 제조된 IV 백을 실온이 되면 6시간 내에 사용해야 한다. 바이알은 용량 제조 동안의 어느 시점에서도 진탕되지 않아야 한다.

아자시티딘의 제조, 복원, 및 분배를 위한 설명서는 아자시티딘(VIDAZA^®) 패키지 삽입물에 제공된다.

투여된 MLN4924 및 아자시티딘의 양은 체표면적(BSA)에 기초한다. BSA를 환자가 가장 최근 BSA 계산에 사용된 중량으로부터 체중의 5% 초과의 변화를 경험하는 경우 제1 주기, 제1 일에, 및 그 다음 방문시 표준 노모그램을 사용하여 계산한다.

환자는 60분 주입을 통해 250-mL IV 백의 5% 덱스트로스로 희석된 MLN4924를 수용한다. MLN4924를 중심 정맥 접근(central venous access) 또는 말초 정맥 접근(peripheral venous access)을 통해 투여해야 한다. 주입은 어떤 관련된 주입 반응에 대해서도 느려지거나 중단되고 재시작될 수 있다. 총 주입 시간은 복원의 시간에서 6시간을 초과하지 않아야 한다.

MLN4924 IV 백의 전체 내용물은 1시간 동안 일정한 속도로 주입될 것이다. 모든 MLN4924가 신체로 들어간다는 것을 보장하기 위해, 주입 선은 투여 직후 5% 덱스트로스로 플러싱될 것이다.

아자시티딘의 투여를 위한 설명서는 아자시티딘(VIDAZA^®) 패키지 삽입물에 제공된다.

DLT가 처리 중에 어떤 시점에서도 발생할 수 있지만, 처리의 제1 주기 동안 발생하는 유일한 DLT는 반드시 용량의 단계적 확대, 투여 수준의 확장, 또는 중급 투여 수준의 평가에 관련된 결정에 영향을 미칠 것이다. 처리-관련 독성에 대한 요법의 모든 주기를 통해 환자를 관찰하였다.

주기의 기간은 28일일 것이다. 아자시티딘은 5-온/2-오프/2-온(5-on/2-off/2-on) 투여 계획으로, 즉, 제1 일, 제2 일, 제3 일, 제4 일, 제5 일, 제8 일, 및 제9 일에 투여될 것이다. MLN4924는 제1 일, 제3 일, 및 제5 일에 투여될 것이다. 환자는 제1 일, 제3 일 및 제5 일에 두 약제 모두를 투약받을 것이다. MLN4924는 20　mg/m², 30　mg/m², 40mg/m², 45　mg/m², 50　mg/m^2, 60 mg/m², 또는 75 mg/m²의 용량으로 투여될 수 있다. 아자시티딘은 75 mg/m²의 용량으로 IV 또는 SC로 투여될 것이다.

최적의 구체예에서, MLN4924는 제1 일, 제8 일, 및 제15 일에 투여될 것이다.

선택적으로, 주기의 기간은 제1 주기를 제외하고, 28일일 것이며, 7일 리드-인(lead-in)이 아자시티딘이 투여되지 않는 경우에 통합되는 경우, 이로 인해 제1 주기가 총 35일 동안 지속될 것이다. 이 투여 계획에 따라, 아자시티딘은 5-온/2-오프/2-온 계획으로; 제1 주기의 제8 일 내지 제12 일 및 제15 일 및 제16 일에 및 이후 모든 주기에 대하여 제1 일, 제2 일, 제3 일, 제4 일, 제5 일, 제8 일, 및 제9 일에 투여될 것이다. 이 투여 계획에 따라서, MLN4924는 제1 일, 제3 일, 및 제5 일에 투여될 것이다.

또 다른 선택적 구체예에서, MLN4924는 제1 주기 동안에만 제1 일, 제4 일, 제11 일 및 제15 일에 투여될 것이며, 하나의 35일 주기를 제공하고; 이후의 모든 주기에서는, MLN4924는 제1 일, 제3 일, 및 제5 일에 투여될 것이며, 각 주기는 28일 동안 지속된다. 이 선택적 투여 계획에 따라, 환자는 제1 주기의 제11 일 및 제15 일에 및 이후의 주기의 제1 일, 제3 일, 및 제5 일에 두 약제 모두를 투약받을 것이다. MLN4924는 20　mg/m², 30　mg/m², 40mg/m², 45　mg/m², 50　mg/m², 60 mg/m², 또는 75 mg/m²의 용량으로 투여될 것이다. 아자시티딘은 75 mg/m²의 용량으로 IV 또는 SC(의사의 선택)로 투여될 것이다.

환자는 IV 또는 SC 주사로 아자시티딘을 투약받을 것이다(투여에 대한 상세한 설명은 아자시티딘 [VIDAZA^®] 패키지 삽입물 참조). MLN4924 및 아자시티딘 둘 다가 투여되려는 날에, MLN4924의 주입은 아자시티딘 투여의 완료 후 15 내지 60분의 범위의 시간에 시작될 것이다. 바이탈 사인(vital sign)의 평가는 이 며칠간 아자시티딘 투여 전, MLN4924 투여 전, 및 MLN4924 투여 후에 이루어질 것이다.

Claims

- NEDD8-활성화 효소(NAE) 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및
- 저메틸화제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염
의 치료적으로 유효한 총량을 포함하고,
상기 저메틸화제는 아자시티딘 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 데시타빈 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 상기 NAE 억제제는 ((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2-히드록시시클로펜틸)메틸 술파메이트 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 {(1S,2S,4R)-4-[(6-{[(1R,2S)-5-클로로-2-메톡시-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일]아미노}피리미딘-4-일)옥시]-2-히드록시시클로펜틸}메틸 술파메이트 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고,
상기 NAE 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 저메틸화제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 단일 투약 형태 또는 별도의 투약 형태로 제공되는, 암을 치료하기 위한 약학적 제제.
제1항에 있어서, 상기 저메틸화제는 아자시티딘 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염인 약학적 제제.
제1항에 있어서, 상기 저메틸화제는 데시타빈 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염인 약학적 제제.
제1항에 있어서, 상기 NAE 억제제는 ((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2-히드록시시클로펜틸)메틸 술파메이트 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염인 약학적 제제.
제4항에 있어서, 상기 ((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2-히드록시시클로펜틸)메틸 술파메이트의 약학적으로 허용 가능한 염은 히드로클로라이드 염인 약학적 제제.
제1항에 있어서, 상기 NAE 억제제는 {(1S,2S,4R)-4-[(6-{[(1R,2S)-5-클로로-2-메톡시-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일]아미노}피리미딘-4-일)옥시]-2-히드록시시클로펜틸}메틸 술파메이트 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염인 약학적 제제.
제4항에 있어서, 상기 ((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2-히드록시시클로펜틸)메틸 술파메이트 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 28일 주기의 제1 일, 제3 일, 및 제5 일에 투여되는 약학적 제제.
제7항에 있어서, 상기 ((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2-히드록시시클로펜틸)메틸 술파메이트 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 20 mg/m²의 용량으로 투여되는 약학적 제제.
제7항에 있어서, 상기 ((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2-히드록시시클로펜틸)메틸 술파메이트 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 30 mg/m²의 용량으로 투여되는 약학적 제제.
제7항에 있어서, 상기 ((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2-히드록시시클로펜틸)메틸 술파메이트 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 40 mg/m²의 용량으로 투여되는 약학적 제제.
제7항에 있어서, 상기 ((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2-히드록시시클로펜틸)메틸 술파메이트 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 50 mg/m²의 용량으로 투여되는 약학적 제제.
제7항에 있어서, 상기 ((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2-히드록시시클로펜틸)메틸 술파메이트 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 20mg/m² 내지 30mg/m²의 용량으로 투여되는 약학적 제제.
제7항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 ((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]-피리미딘-7-일)-2-히드록시시클로펜틸)메틸 술파메이트 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 정맥 내로 투여되는 약학적 제제.
제7항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 ((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2-히드록시시클로펜틸)메틸 술파메이트 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 피하로 투여되는 약학적 제제.
제1항, 제2항 및 제4항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 저메틸화제는 아자시티딘 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 28일 주기의 제1 일, 제2 일, 제3 일, 제4 일, 제5 일, 제8 일 및 제9 일에 투여되는 약학적 제제.
제15항에 있어서, 상기 아자시티딘 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 75　mg/m²의 용량으로 투여되는 약학적 제제.
제15항에 있어서, 상기 아자시티딘 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 피하로 투여되는 약학적 제제.
제15항에 있어서, 상기 아자시티딘 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 정맥 내로 투여되는 약학적 제제.
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 NAE 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 저메틸화제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 단일 투약 형태로 제공되는 약학적 제제.
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 NAE 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 저메틸화제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 별도의 투약 형태로 제공되는 약학적 제제.
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 암은 혈액학적 악성 종양인 약학적 제제.
제21항에 있어서, 상기 암은 급성 골수성 백혈병(AML)인 약학적 제제.
제21항에 있어서, 상기 암은 골이형성 증후군(MDS)인 약학적 제제.
제23항에 있어서, 상기 골이형성 증후군(MDS)은 불응성 빈혈(RA), 철아구성 불응성 빈혈(RARS), 골수아구가 과도한 불응성 빈혈(RAEB), 및 전환중인 RAEB(RAEB-T) 중 어느 것으로 진단되는 약학적 제제.
제24항에 있어서, 상기 진단은 주로 하나의 타입의 골이형성 증후군인 약학적 제제.
제24항에 있어서, 상기 진단은 하나 이상의 타입의 골이형성 증후군인 약학적 제제.
제21항에 있어서, 상기 암은 만성 골수성 백혈병(CML), 급성 림프구성 백혈병(ALL), 만성 림프구성 백혈병(CLL), 호지킨 병(HD), 비-호지킨 림프종(NHL), T-세포 림프종, 다발성 골수종(MM), 발덴스트롬 마크로글로불린혈증, 골이형성 증후군(MDS), 및 골수 증식 증후군 중 어느 것으로 진단되는 약학적 제제.
제27항에 있어서, 상기 진단은 주로 하나의 타입의 암인 약학적 제제.
제27항에 있어서, 상기 진단은 하나 이상의 타입의 암인 약학적 제제.
제23항에 있어서, 상기 암은 만성 골수단구성 백혈병(CMMoL)인 약학적 제제.
- NAE 억제제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 적어도 1회 용량을 포함하는 적어도 하나의 의약품, 및
- 저메틸화제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 적어도 1회 용량을 포함하는 적어도 하나의 의약품
을 포함하는, 대상체의 암 치료용 키트로서,
상기 암 치료용 키트는 치료가 필요하다고 인정된 대상체의 치료용 의약품들을 투여하기 위한 투여 설명서를 더 포함하고,
상기 저메틸화제는 아자시티딘 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 데시타빈 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 상기 NAE 억제제는 ((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2-히드록시시클로펜틸)메틸 술파메이트 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 {(1S,2S,4R)-4-[(6-{[(1R,2S)-5-클로로-2-메톡시-2,3-디히드로-1H-인덴-1-일]아미노}피리미딘-4-일)옥시]-2-히드록시시클로펜틸}메틸 술파메이트 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염인 키트.
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