KR101968339B1 - 특정한 물을 포함하는 화장품 조성물 및 미백 또는 항노화제로서 이들의 용도 - Google Patents

Abstract

본 발명은 7.6 내지 10 사이의 pH 및 10 내지 250mg/l의 전체 용해 고체(TDS) 농도를 가지는 물의 화장품 또는 피부과학적 조성물에서의 사용에 대한 것이다. 본 발명은 또한 이 물을 함유하는 화장품 또는 피부과학적 조성물에 대한 것이다.
본 발명은 특히 피부의 외재적 및/또는 내재적 노화의 신호의 발현을 방지하거나 지연하기 위한, 또는 이들의 효과를 지연하기 위한; 피부 상에 색소침착성 반점, 또는 피부의 과잉색소침착의 색상을 예방하거나 감소하기 위한; 탈색소 영역 주위의 색소침착을 감소하기 위한; 피부 색상의 불균일성을 개선하기 위한; 또는 피부의 외관을 밝게 하기 위한 치료 방법에 대한 것이다.

Description

특정한 물을 포함하는 화장품 조성물 및 미백 또는 항노화제로서 이들의 용도{Cosmetic composition containing a particular water, and use thereof as a depigmenting or anti-ageing agent}

본 발명의 대상은 특정한 물을 포함하는 화장품 또는 피부학적 조성물, 화장품 제제로서 이 물의 용도 그리고 또한 이물이나 이를 포함하는 조성물을 피부나 케라틴 섬유에 국부적인 적용을 포함하는 화장품이나 피부학적 케어 방법이다.

본 발명은 또한 피부나 케라틴 섬유를 미백, 색조 또는 표백하기 위한 화장품 제제로서 이 특정한 물의 사용 그리고 화장품 항-노화 제제로서 이 물의 사용에 대한 것이다.

태양으로부터의 자외선 방출에 노출, 또는 호르몬의 변화와 같은, 외부의 공격을 받는 대상인 피부 고유의 노화는 그 내부의 손상적인 변화를 유도한다. 이러한 일련의 사건은 피부의 조직, 그의 육안으로 관찰되는 질 및 그 아름다움을 변화시키고, 그리고 주름, 염증성 반응, 탄력성의 상실, 감소된 보습화 또 달리는, 갈색 점, 예를 들어 렌티지니즈(흑자), 특히는 손등이나 얼굴, 목 주름 또 달리는 머리에 명백하게 나타나는 이종성 색소침착과 같은 특징적인 임상적 증상의 발현을 유도한다.

건조 피부는 전혀 빛을 발하지 않고, 광채가 없으며 그리고 색소성의 질환을 갖는 피부인 것으로 알려져 있다. UV 방사, 바람, 온도 변화 및 오염과 같은 외부적인 공격은 피부 막을 연약하게 함에 의해 피부의 건조성을 유발하거나 또는 강화한다.

본 발명은 피부의 내재적인 노화 또는 외재적인 노화, 그리고 피부의 노화와 연결될 수 있거나 또는 그렇지 않을 수 있는 피부 색소 형성에 또한 초점을 맞추고 있다.

피부의 외재적인 노화는, - 피부의 정상적인 기능을 손상하고 그리고 주름 또는 견고성, 유연성 및 탄력성의 손실과 같은 손상적 변화의 임상적인 사인의 발현을 야기하고, 특별하게는 상피에서 손상적인 세포 및 조직의 변화, 예를 들어 메탈로프로테이나제(MMPs), 특히는 메탈로프로테이나제-1 (MMP-1)의 효소적 활성으로부터 유래하는 진피에서 케라티노사이트 분화의 파괴 또는 콜라겐 섬유 분해의 파괴를 야기하는 - 태양에 노출, 빛에 노출, 자외선에 노출, 스트레스 및 오염과 같은 과도한 화학적 및 물리적인 자극에 의해 유도되어 진다.

동시적으로, 내재적 또는 실제연령의 노화는 내인성 인자들이 포함되어 진 유전적으로 프로그램된 노화의 결과이다. 이 내재적인 노화는, 예를 들어 주름의 발현 및/또는 엘라스틱 섬유의 변화 및 미세한 라인과 같은 조직학적 변화에 의해 반영된 - 분해 효소의 제어, 산화적 스트레스에 대한 내성 또는 달리는 기능적 세포질 외 매트릭스를 합성하는 능력의 상실과 같은 것 - 생화학적 경로의 제어이상 및 DNA 상에 대한 손상의 축적으로 귀결된 세포 대사 기능이상에 의해 야기되어 진다.

인간에 있어서, 색소는 피부, 모낭 또는 머리카락과 같은 케라틴 물질에 있어서 멜라닌 안료의 합성 및 분포로부터 유래한다. 이것은 많은 내재적인 또는 외재적인 요인에 의해 제어되어 진다.

피부 및 케라틴 섬유 색소는 특화된 세포인 멜라노사이트의 대사적 활성으로부터 유래한다. 이들 진피의 수상세포는 배발생인 멜라노 아세포 동안 신경관의 비분화 전구체로부터 유래된다. 멜라노사이트는 그 수지세포를 통해 이웃의 케라티노사이트에 전이되어 지는 소위 멜라노좀 장기에 멜라닌을 생산한다.

멜라닌의 과잉 생산은 예를 들어 노인성 흑점인 피부 색상에서 이질성을 야기한다.

많은 항노화 및/또는 탈색소 기술 및 기질들이 미학적 또는 화장적 목적을 위해 다음을 목적으로 공지되어 져 있다;

- i)　피부의 외재적 및/또는 내재적 노화의 신호의 발현을 방지하거나 또는 지연하기 위해, 또는 ii) 이들의 효과를 늦추거나 또는 감소하기 위해, 및/또는

- i) 피부 색상의 균일성을 개선하기 위해, ii) 피부 복잡성을 경감하기 위해, 또는 iii) 피부의 색소적인 점을 보정하거나 감소하기 위함.

따라서, 독성을 피하고 그리고 효과적인 새로운 항노화 및/또는 탈색소화 기질을 위한 연구는 화장품 산업에서 필요성이 있다.

본 발명의 주요한 목적은 새로운 화장품 제제의 제공 및 이를 함유하는 화장품 조성물로 구성되는 기술적인 문제점을 해결하기 위한 것으로, 상기 제제 및 조성물은 피부의 내재적 및/또는 외재적인 노화의 신호의 발현을 방지하거나 지연하기 위한, 또는 이들의 효과를 늦추거나 또는 감소하기 위한 것이다.

본 발명의 목적은 또한 화장품적 또는 피부과학적 케어방법, 그리고 특히는 적어도 이러한 신호를 나타내는 영역에서, i) 피부의 내재적 및/또는 외재적인 노화의 신호의 발현을 방지하거나 지연하기 위한, 또는 ii) 이들의 효과를 늦추거나 또는 감소하기 위한 화장품학적 피부 케어 방법을 제공하기 위한 것이다.

본 발명의 목적은 또한 피부 또는 케라틴 섬유를 표백, 경감 또는 탈색소하는 특성을 갖는 화장품 조성물의 제공을 구성하는 기술적인 문제를 해결하기 위한 것이다. 본 발명의 목적은 또한 화장품 또는 피부학적 케어방법, 그리고 특히는 적어도 과잉 착색된 영역에서 피부 또는 케라틴 섬유를 표백, 경감 또는 탈색소화를 수행함에 의해 피부 및 케라틴 섬유 케어 방법을 제공하기 위한 것이다.

본 발명의 목적은 또한 화장품 또는 피부과학 산업을 위해 충분한 양으로 이용할 수 있으며, 그리고 쉽게 산업화할 수 있는 용도로 새로운 저렴한 화장품 활성 제제를 제공하기 위한 것이다.

따라서, 본 발명의 대상은 화장품 제제로서 특정한 물의 사용으로, 화장품 조성물은 외재적 및/또는 내재적 피부 노화의 수선 및 방지의 특성을 가지는 이 물을 포함하고, 또한 화장학적 또는 피부과학적 케어 방법은 케라틴 물질에 이 물이나 이 조성물의 국부적 적용을 포함한다.

본 발명의 대상은 또한 피부 및/또는 케라틴 섬유를 표백, 경감 또는 탈색하는 특성을 가지는 화장품 또는 피부과학적 조성물이다.

본 발명의 발명자 등은 아주 놀라웁게도, 다음의 상세한 설명에서 "본 발명의 물"로 언급되어 지는 이 특정한 물이 다음의 특성을 가지는 것을 밝혀냈다:

- 정상 인간 케라티노사이트(NHKs) 상에서, HSP-70 (Heat Shock Protein 70KDa 또는 HSPA1A/HSPA1B)을 코드하는 유전자 및/또는 인보루크린(involucrin)을 코드하는 유전자의 발현에 제어적인 활성, 및

- 정상 인간 섬유아세포(NHFs) 상에서, MMP-1을 코드하는 유전자 및/또는 MMP-3을 코드하는 유전자의 발현에 제어적인 활성.

본 발명자 등은 본 발명에 따라 사용된 물이 HSP-70 및 인보루크린을 코드하는 유전자의 생산에서 발현에서의 증가를 유도하고, 그리고 MMP-1 및 MMP-3을 코드하는 유전자의 발현의 저해를 야기한다는 것을 입증하였다. HSP-70을 코드하는 유전자의 발현에서의 증가는 케라티노사이트 상에서 스트레스 및 외부의 공격에 대한 저항성이 양호하게 하고, 이는 예를 들어 아팝토시스(apoptosis)에서의 감소에 의해 반영되어 질 수 있다. 이러한 조건 하에서, 케라티노사이트는 세포질 외의 매트릭스 분해에 그리고 멜라닌형성의 자극에 포함된 예비-염증성 인자인 사이토킨류 및 케모킨류를 거의 분비하지 않는다. 마찬가지로, 케라티노사이트 분화에서 주요한 인자인 인보루크린을 코드하는 유전자의 발현 생산의 자극은 외부의 공격에 대해 보호적인 진피 막의 형성을 가능하게 한다. 예를 들어 자외선 노출 또는 산화적인 스트레스에 반응하여 활성화된, 세포질 외의 매트릭스 분해 효소인 메탈로프로테이나제 1 및 3을 코드하는 유전자의 생산에서의 감소는 이들 효소의 발현에서 감소를 초래하고, 그리고 결론적으로, 예를 들어 콜라겐의 분해를 통해 세포질 외의 매트릭스 분해에서의 감소를 초래한다.

모든 이들의 작용은, 피부 보호 및 피부의 색소적 질환 및 내재적 및/또는 외재적 노화에 대한 방지의 활성에 대하여 키이 인자인 진피의 증식/분화 평형 및 피부 항상성을 유지한다.

본 발명자 등은 또한 아주 놀라웁게, 본 발명의 물이 정상 인간 케라티노사이트(NHKs) 상에서, 멜라닌 형성에 있어서 핵심 인자인 티로시나제를 코드하는 유전자 및/또는 티로시나제-관련-프로테인-1 (TRP-1)을 코드하는 유전자의 발현에 제어적인 활성을 가진다는 것을 밝혀냈다.

본 발명자 등은 본 발명에 따라 사용된 물이 TRP-1 및 티로시나제 유전자의 발현에 저해적인 효과를 가진다는 것을 밝혀냈다. 멜라닌 형성에 포함된 단백질을 코드하는 유전자의 발현에 대한 이러한 저해적인 효과는 피부 및/또는 케라틴 섬유를 표백, 경감 또는 탈색하는 활성을 유도하는 멜라닌 형성의 저해를 수행하는 것을 가능하게 만든다.

본 발명의 제일 측면에 따르면, 본 발명은 다음의 물을 포함하는 화장품이나 피부과학적 조성물 및 화장품이나 피부과학적 조성물에 이 물의 사용에 대한 것으로, 이 물은;

- 7.6 내지 10, 바람직하기로는 7.8 내지 8.8, 가장 바람직하기로는 7.8 내지 8.6 사이의 pH를 가지고, 그리고

- 10 내지 250mg/l, 바람직하기로는 20 내지 100mg/l의 전체 용해 고체(TDS) 농도를 가진다.

본 조성물의 전체 중량에 대한 물의 중량 농도는 바람직하기로는 10% 내지 99%, 더욱 바람직하기로는 15% 내지 95%, 그리고 가장 바람직하기로는 30% 내지 85%이다.

조성물의 전체 중량에 대한 물의 중량 농도는 예를 들어 10% 내지 99%, 15% 내지 95%, 40% 내지 85% 또는 60% 내지 80%이다.

생리화학적인 분석으로부터 기인하는 다양한 변수, 그리고 특히는 다음에 따라 물을 한정하는 것이 가능하다:

- 다음의 분류화를 가지는, mg/l로 표시된 그의 전에 전체 용해된 고체(TDS) 농도:

극 하한	0-50　mg/l
하한	50-250　mg/l
평균	250-800　mg/l
상한	800-1500　mg/l
극 상한	> 1500　mg/l

- 다음의 분류화를 갖는 그의 pH:

산성	pH 5-6.7
중성	pH 6.7-7.3
온화한 염기성	pH 7.3-7.8
염기성	pH 7.8-10

유익하기로는, 본 발명의 물은 다음의 농도를 포함한다:

-　칼슘 (Ca^{2 +}) 3 내지 14　mg/l 사이, 그리고 바람직하기로는 4 내지 10mg/l사이;

-　염소 (Cl^-) 2 내지 16　mg/l 사이, 그리고 바람직하기로는 8 내지 14mg/l 사이;

-　마그네슘 (Mg^{2 +}) 0.8 내지 5　mg/l 사이, 그리고 바람직하기로는 0.8 내지 3mg/l 사이;

-　칼륨 (K⁺) 0.01 내지 2　mg/l 사이, 그리고 바람직하기로는 0.1 내지 1mg/l 사이;

-　나트륨 (Na⁺) 2 내지 14　mg/l 사이, 그리고 바람직하기로는 8 내지 13mg/l 사이;

-　비카보네이트 (HCO₃ ^-) 0 내지 50　mg/l 사이, 그리고 바람직하기로는 10 내지 40mg/l 사이;

-　셀페이트류 (SO₄ ^{2 -}) 1 내지 8　mg/l 사이, 그리고 바람직하기로는 2 내지 5mg/l 사이.

바람직하기로는, 본 발명의 물은 7.9 내지 8.4 사이의 pH, 또는 8.2 내지 8.8 사이의 pH를 가진다.

본 발명의 물은 유익하기로는 50 내지 100mg/l 사이, 그리고 바람직하기로는 40 내지 80mg/l 사이, 더욱 바람직하기로는 55 내지 75mg/l 사이의 전체 용해된 고체(TDS) 농도를 가진다.

유익하기로는, 본 발명의 물은 특히 온천으로부터 유래하는 물이다.

표현 "온천으로부터의 물"은 지하수로부터 유래된 물, 유익하기로는 천연적으로 인간 소비에 적절한 물을 의미하기 위한 것이다. 이물은 예를 들어 끓임에 의해 깊게, 또는 달리는 예를 들어 재생의 경우에는 표면에서 제거되어 질 수 있다.

제일의 바람직한 변형형태에 따르면, 본 발명의 물은 아이스랜드에서의 올푸스 지역에서의 홀리다렌디(또한, 스펠트 "홀리다렌디") 온천으로부터 추출되어 진다. 이 온천은 화산성 지반 위에 땅위를 흐르는 빗물 및 녹은 눈과 얼음에 의해 공급되어 진다.

이 물은 또한 컴파니 아이스랜딕 워터 홀딩스 이에치에프(Icelandic Water Holdings ehf)에 의해 상표명 "Icelandic Glacial™"으로 시판되고 있으며, 그리고 예를 들어, Raimbeaucourt 59283 - France에 있는 International Breweries & Beers (IBB)에 의해 프랑스에 배포되어 진다.

이 물은 특히 다음의 조성:

-　칼슘 (Ca^{2 +}) 대략적으로 6.4mg/l;

-　염소 (Cl^-) 대략적으로 13mg/l;

-　마그네슘 (Mg^{2 +}) 대략적으로 2.4mg/l;

-　칼륨 (K⁺) 대략적으로 0.6mg/l;

-　나트륨 (Na⁺) 대략적으로 12mg/l;

-　비카보네이트류 (HCO₃ ^-) 대략적으로 33mg/l;

-　셀페이트류 (SO₄ ^{2 -}) 대략적으로 3.4mg/l;

-　TDS 대략적으로 62mg/l;

으로 특징되어 질 수 있고, 그리고 대략적으로 8.4의 pH를 가진다.

제이의 바람직한 실시형태에 따르면, 본 발명의 물은 아이스랜드 안의 헤이스모르크에 위치된 온천으로부터 추출되어 진다.

이 물은 미국의 주식회사 Icelandic Spring Inc.에 의하여 상표명 "아이스랜드 스프링(Iceland Spring)™"으로 판매되어 지고 있다.

이 물은 다음의 조성:

-　칼슘 (Ca^{2 +}) 대략적으로 4.6mg/l;

-　염소 (Cl^-) 대략적으로 11.0mg/l;

-　마그네슘 (Mg^{2 +}) 대략적으로 0.9mg/l;

-　칼륨 (K⁺) 대략적으로 0.5mg/l;

-　나트륨 (Na⁺) 대략적으로 12mg/l;

-　셀페이트류 (SO₄ ^{2 -}) 대략적으로 2.3mg/l;

-　TDS 대략적으로 48mg/l;

으로 특징되어 질 수 있고, 그리고 대략적으로 8.7의 pH를 가진다.

제삼의 변형형태에 따르면, 본 발명의 물은 이태리 에밀리아-로마그나 파르마 아페니네스(Parma Appenines, Emilia-Romagna, Italy)의 몬테 쥬콘(Monte Zuccone)에 위치된 온천으로부터 추출되어 진다.

이 물은 주식회사 Norda에 의해 상표명 "Ducale™"으로 판매되어 지고 있다.

이 물은 다음의 조성:

-　칼슘 (Ca^{2 +}) 대략적으로 12.5mg/l;

-　염소 (Cl^-) 대략적으로 3.8mg/l;

-　마그네슘 (Mg^{2 +}) 대략적으로 1.3mg/l;

-　칼륨 (K⁺) 대략적으로 0.4mg/l;

-　나트륨 (Na⁺) 대략적으로 3mg/l;

-　셀페이트류 (SO₄ ^{2 -}) 대략적으로 6.9mg/l;

-　TDS 대략적으로 56mg/l;

으로 특징되어 질 수 있고, 그리고 대략적으로 8.3의 pH를 가진다.

여기에서 주어진 값은 평균적인 값이고, 물의 조성은 시간의 경과에 따라 안정하다. 그러나, 특히 분석의 방법에 연결되어, 이 값에 대한 변동이 관찰되어 질 수 있다.

조성물은 칼슘, 칼륨, 마그네슘 및 나트륨 이온에 대하서는 US-EPA (United States Environmental Protection Agency)의 방법 200.7; 염소, 질산염, 비카보네이트 및 설페이트 이온에 대해서는 US-EPA 300.0; 전체 용해된 고체 (TDS) 농도에 대해서는 SM 2540-C; 그리고 pH에 대해서는 SM 4500-HB에 따라 분석되어 진다.

하나의 특정한 변형형태에 따르면, 본 발명의 물은 외재적 및/또는 내재적 피부의 노화의 보호 및 예방을 위해 또는 이들의 효과를 늦추기 위해 화장품 제제로서, 및/또는 피부 및 케라틴 섬유(머리카락, 체모)를 탈색, 표백 또는 경감하기 위한 화장품 제제로서 사용되어 진다.

바람직하기로, 본 발명의 물은

- HSP-70을 코드하는 유전자 및/또는 인보루크린을 코드하는 유전자의 발현을 자극하기 위해, 및/또는

- MMP-1 및/또는 MMP-3을 코드하는 유전자 및/또는 티로시나제 관련 프로테인-1(TRP-1) 및/또는 티로시나제를 저해하기 위해 화장품 제제로서 사용되어 진다.

다른 실시형태에 따르면, 본 발명은 화장품 조성물에서,

- 피부 및 케라틴 섬유를 탈색, 표백 또는 경감하기 위한 화장품 제제로서, 및/또는

- 티로시나제 관련 프로테인-1(TRP-1)을 코드하는 유전자 및/또는 티로시나제를 코드하는 유전자의 발현을 저해하기 위한 화장품 제제로서 상기에 정의된 것과 같은 물의 용도에 관한 것이다.

또 다른 실시형태에 따르면, 본 발명은 피부의 외재적 및/또는 내재적 노화의 방지 및 예방을 위해 또는 이들의 효과를 지연하기 위한 화장품 제제로서 상기에 정의된 것과 같은 물의 사용에 대한 것이다.

설명된 바와 같이, 이 물은 피부의 외재적 및/또는 내재적 노화의 방지 및 예방을 위한 제제로서 또는 멜라닌형성-저해제로서 활성을 가진다.

이 활성에 기인하여, 이것은 피부의 외재적 및/또는 내재적 노화의 신호의 발현을 방지하거나 지연하기 위한 활성 제제로, 또는 이들의 효과를 지연하기 위한 활성 제제로 및/또는 화장품이나 피부과학적 조성물에서 탈색, 경감 또는 표백 제제로서 사용되어 질 수 있다.

제이의 대상에 따르면, 본 발명은 상기에 정의된 바와 같은 적어도 하나의 물을 포함하는 화장품 또는 피부과학적 조성물에 대한 것이다.

다른 바람직한 변형형태에 따르면, 조성물 전체 중량에 대한 본 발명의 물의 중량 농도는 적어도 15%, 바람직하기로는 적어도 40%, 보다 바람직하기로는 적어도 60%, 그리고 가장 바람직하기로는 적어도 80%이다.

본 발명의 조성물은 유익하기로는, 활성 제제로서 적어도 하나의 상기에 정의된 바와 같은 물과, 그리고 화장품학적으로 또는 피부과학적으로 허용되어 질 수 있는 부형제와 같은 적어도 하나의 부형제를 포함하는 화장품 또는 피부과학적 조성물이다.

하나의 실시형태에 따르면, 본 조성물은 피부의 외재적 및/또는 내재적 노화의 신호의 발현을 방지하거나 지연하기 위한, 또는 이들의 효과를 지연하기 위한 조성물, 및/또는 피부 및 케라틴 섬유를 탈색, 표백 또는 경감하기 위한 조성물이다.

본 발명에 따른 조성물은 유익하기로는 국부적인 적용을 위한 것이다.

본 발명의 조성물은 유익하기로는 국부적인 조성물일 수 있고, 그리고 용액, 혈청, 로션, 스프레이, 밀크, 에멀젼의 형태로, 바람직하기로는 유중수 또는 하이드로겔의 형태로 제형화되어 질 수 있다.

하나의 특정한 실시형태에 따르면, 본 발명의 조성물은 적어도 하나의 다른 활성 제제 및 적어도 하나의 화장품학적으로 또는 피부과학적으로 허용될 수 있는 부형제를 포함한다.

제일 측면에 따르면, 본 조성물은 피부의 외재적 및/또는 내재적 노화의 효과의 발현을 방지하거나 지연하기 위한, 또는 이들의 효과를 늦추기 위한 것이다.

이것은 또한 유익하기로는 프리-라디칼-제거 활성을 가지는 기질; 피부의 구조의 유지를 증진하고 및/또는 표피 및 진피의 표면 층의 세포질 외의 매트릭스의 분해를 제한하는 및/또는 보호, 보정 또는 재생 효과를 피부가 얻기 위한 활성의 수단에 의해, 특히 주름의 형성에 있어서, 피부의 노화하는 효과를 감소하거나 지연하기 위한 기질; 및 항-염증성 활성을 가지는 기질로부터 선택되어 질 수 있는 하나 또는 그 이상의 다른 활성 제제를 포함할 수 있다.

제이의 측면에 따르면, 본 조성물은 피부 및 케라틴 섬유를 탈색하기 위한, 특히는 안색을 밝게 하기 위하거나 또는 피부 색상의 불균일성을 개선하기 위하거나, 또는 그렇지 않으면 침착성 피부 반점이나 과잉 색소 침착된 피부 부위를 감소하거나 바르게 보정하기 위한 것이다.

이것은 또한 유익하기로는 피부 및 케라틴 섬유에서 탈색소 활성이나 경감 활성을 가지는 기질, 또는 피부나 케라틴 섬유 상에서 표백 활성을 가지는 기질로부터 선택되어 질 수 있는 하나 또는 그 이상의 다른 활성 제제를 포함할 수 있다.

탈색 제제는 이 기술분야의 통상인에게 공지되어 있는데, 예를 들어, 알부틴, 코지산, 아젤라익 산, 퍼루릭산, 비타민 B3 또는 PP, 칼슘 D-판테테인-S-술포네이트, 레솔시놀 유도체류, 레스베라트롤, 감초 또는 뽕나무 추출물, 알파-리포익 산, 리놀레익 산, EDTA(에틸렌디아민테트라아세트 산)와 같은 양이온-킬레이팅 제제, 콩의 추출물, 시트러스 운시우(Citrus unshiu)의 추출물, 디아세틸 볼딘, 레티놀, 레티닐 프로피오네이트 또는 레티닐 팔미테이트와 같은 레티놀 에스테르, 베타-엑디손, 토코페릴 포스페이트 또는 칼슘 아스코르빌 토코페릴 포스페이트와 같은 토코페롤 유도체류이다.

이것은 또한 슬리밍 활성을 갖는 기질; 보습 활성을 갖는 기질; 순화, 부드러움 또는 릴랙싱 활성을 갖는 기질; 안색, 특히는 얼굴의 광휘를 개선하기 위해 피부 미세캡슐화-자극 활성을 갖는 기질; 구릿빛 피부 케어를 위한 세븀-조절 활성을 갖는 기질; 및 피부를 깨끗이 하거나 또는 정제하기 위한 기질로부터 선택되어 질 수 있는, 다른 화장품학적 활성을 갖는 다른 활성 제제를 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 조성물은 또한 유익하기로는 중합체, 계면활성제, 유동화제, 향료, 전해제, pH 조정제, 항산화제, 보존제, 염료, 진주광택의 제제 및 안료, 그리고 이들의 혼합물로부터 선택되어 질 수 있는, 적어도 하나의 화장품학적으로 또는 피부과학적으로 허용될 수 있는 부형제를 또한 유익하기로는 포함한다.

제삼의 대상에 있어서는, 본 발명은 화장품 또는 피부과학적 조성물에 또는 화장품 또는 피부과학적 조성물의 제조를 위해 상기에 한정된 바와 같은 본 발명의 물의 사용에 대한 것으로, 여기서 상기 조성물은:

-　피부의 외재적 및/또는 내재적 노화 신호의 발현을 방지하거나 지연하기 위한, 또는 이들의 효과를 늦추기 위한 것;

-　피부 상에 색소성 반점(과잉 색소침착의 영역) 또는 피부의 과잉색소침착된 영역의 색상, 특히는 피부의 다양한 색채이상, 특히는 접촉성 피부병, 약물-유도 광피부병, 멜라즈마, 각화증, 예를 들어 노인성 또는 태양광선 각화증, 노인성 흑점(나이 반점), 또는 태양광선 흑점, 상처나 화상으로부터 유래된 색소성 반점, 또는 일러지나 광독성 반응에 의해 유발된 색소성 반점으로 구성된 것을 방지하거나 또는 감소하기 위한 것;

-　특히는, 백반증과 같은 루커더마에 의해 유발된 탈색된 영역의 주위의 색소침착을 방지하거나 또는 감소하기 위한 것;

- 피부 색상의 균일성을 개선하기 위한 것; 또는 그렇지 않으면 피부의 안색을 밝게 하기 위한 것이다.

제사의 대상에 따르면, 본 발명은 상기에 정의된 바와 같은 적어도 하나의 물 또는 조성물의 국부적인 적용을 포함하는 비치료적인 화장 케어 방법 또는 피부과학적 치료 방법에 대한 것이다.

하나의 특정한 실시형태에 따르면, 이 화장 케어 방법은 치료적인 효과를 가짐이 없이 피부의 외관에 있어서 미적인 개선을 형성하기 위한 것이고,그리고 특히는:

-　피부의 외재적 및/또는 내재적 노화 신호의 발현을 방지하거나 지연하기 위한, 또는 이들의 효과를 늦추기 위한 것;

-　피부 상에 색소성 반점(과잉 색소침착의 영역) 또는 피부의 과잉색소침착된 영역의 색상, 특히는 피부의 다양한 색채이상, 특히는 접촉성 피부병, 약물-유도 광피부병, 멜라즈마, 각화증, 예를 들어 노인성 또는 태양광선 각화증, 노인성 흑점(나이 반점), 또는 태양광선 흑점, 상처나 화상으로부터 유래된 색소성 반점, 또는 일러지나 광독성 반응에 의해 유발된 색소성 반점으로 구성된 것을 방지하거나 또는 감소하기 위한 것;

-　특히는, 백반증과 같은 루커더마에 의해 유발된 탈색된 영역의 주위의 색소침착을 방지하거나 또는 감소하기 위한 것;

- 피부 색상의 균일성을 개선하기 위한 것; 또는 그렇지 않으면 피부의 안색을 밝게 하기 위한 것이다.

본 발명은 특히는 상기에 정의된 바와 같은 적어도 하나의 화장품 조성물의 유효량을 피부의 외재적 및/또는 내재적 노화 신호를 나타내는 피부의 적어도 하나의 영역에 및/또는 신체 또는 얼굴 피부나 케라틴 섬유의 적어도 하나의 과잉색소침착된 영역에 적용하는 것을 포함하는 피부 및 케라틴 섬유에 대한 화장 케어 방법에 대한 것이다.

본 발명의 첫 번째 세 가지 대상에 관련하여 기술되어 진 모든 특징은 비치료적인 화장 케어 방법에 그리고 또한 본 발명에 따른 피부과학적 치료 방법에 적용되어 진다.

본 발명의 어떤 측면에 대해 , 용어 "유효한 양"은 특정한 화장품 효과를 생성하기 위해 필요한 양에 적어도 동등한 양을 의미하기 위한 것이다.

본 발명의 다른 목적, 특징 및 이점은 단지 상세한 설명을 제공하기 위한 실시예이고 그리고 본 발명의 범주를 결코 제한할 수 없는 다음의 상세한 설명에 의해 이 기술 분야의 통상인에게 명백하게 될 것이다.

이 실시예는 종래 기술에 대하여 신규한 것으로 나타나는 실시예를 포함하는, 본 발명의 전체 부분과 전체로서 취하여진 상세한 설명으로부터 유래된 어떤 특징을 형성하고, 그의 기능 및 그의 일반성의 관점에서 본 발명의 전체 부분을 형성한다.

더욱이, 실시예에 있어서, 다르게 명시되지 않는다면, 모든 백분율은 중량 기준으로 주어진 것이며, 온도는 다르게 명시되지 않는다면 섭씨온도로 나타내어 지고, 그리고 압력은 달리 명시되지 않는다면 대기압력이다.

상기와 같이 구성되는 본 발명의 특정한 물을 포함하는 화장품 조성물 및 미백 또는 항노화제로서 이들의 용도는 새로운 화장품 제제를 제공하고 그리고 이를 함유하는 화장품 조성물로 구성되는 기술적인 문제점을 해결하여, 상기 제제 및 조성물은 피부의 내재적 및/또는 외재적인 노화의 신호의 발현을 방지하거나 지연하고, 또는 이들의 효과를 늦추거나 또는 감소하는 유용한 작용효과를 제공한다.

도 1은 HSP 70 (HSPA1A/HSPA1B)을 코드하는 유전자 및 정상 인간 케라티노사이트(NHKs)의 인보루크린(IVL)의 발현에 대해, 소위 "아이스랜드 물" 또는 아이스랜드의 Glacial™ 물"인 본 발명의 물(EI)의 효과를 나타내는 히스토그램에 대한 것이다. 이 도면은 더욱 특별하게는 처리 8시간 후 NHKs에서 인보루크린 및 HSP-70을 코드하는 유전자의 전사 준위에 대한 아이스랜드 물의 효과에 대한 것이다. 도 1에 나타난 결과는 GAPDH 레퍼런스 유전자의 수단에 의해 표준화된 처리된/비처리된(NT) 것의 비율에 따라 표시되어 졌다.
도 2는 정상 인간 섬유아세포(NHFs)의 MMP-1 및 MMP-3을 코드하는 유전자의 발현에 본 발명의 물(EI)의 효과를 나타내는 히스토그램에 대한 것이다. 이 도 2는 더욱 특별하게는 처리 24시간 후 NHKs에서 MMP-1 및 MMP-3 유전자의 전사 준위에 대한 아이스랜드 물의 효과에 대한 것이다.
도 1 및 2에 제시된 결과는 GAPDH 불변식 레퍼런스 유전자의 발현의 수단에 의해 표준화된 처리된/비처리된(NT) 것의 비율에 따라 표시되어 졌다.
도 3은 정상 인간 멜라노사이트의 티로시나제를 코드하는 유전자의 발현에 본 발명의 물(EI)의 효과를 나타내는 히스토그램에 대한 것이다. 특히, 도 3은 24시간 동안 처리된 정상 인간 멜라노사이트에서 티로시나제 유전자의 전사 준위에 대한 아이스랜드 물의 효과에 대한 것이다.
도 4는 정상 인간 멜라노사이트의 티로시나제를 코드하는 유전자의 발현에 Milli-Q™ 물(EM)의 효과를 나타내는 히스토그램에 대한 것이다. 특히, 도 4는 24시간 동안 처리된 정상 인간 멜라노사이트에서 티로시나제 유전자의 전사 준위에 대한 Milli-Q™ 물의 효과에 대한 것이다.
도 5는 정상 인간 멜라노사이트의 TRP-1을 코드하는 유전자의 발현에 본 발명의 물(EI)의 효과를 나타내는 히스토그램에 대한 것이다. 특히, 도 5는 24시간 동안 처리된 정상 인간 멜라노사이트에서 TRP-1 유전자의 전사 준위에 대한 아이스랜드 물의 효과에 대한 것이다.
도 6은 정상 인간 멜라노사이트의 티로시나제를 코드하는 유전자의 발현에 본 발명의 물(EI)의 효과를 나타내는 히스토그램에 대한 것이다. 특히, 도 6은 24시간 동안 처리된 정상 인간 멜라노사이트에서 티로시나제 유전자의 전사 준위에 대한 아이스랜드 물의 효과에 대한 것이다.
도 7은 24시간 동안 처리된 정상 인간 멜라노사이트에서 티로시나제를 코드하는 유전자의 발현에 본 발명의 물을 포함하는 각종 물의 효과를 나타내는 히스토그램에 대한 것이다.
도 3 내지 7에 제시된 결과는 베타-2 마이크로글로불린(β2-m) 불변식 레퍼런스 유전자의 발현의 수단에 의해 표준화된 비율 [처리된/비처리된(NT) 것]에 따라 표시되어 졌다.
도 3 내지 7에서, 스튜던트 통계 테스트는 처리된 세포와 비처리된 세포(NT) 사이의 전사적 효과를 비교하기 위하여 사용되었다.

실시예

이 후의 실시예에 있어서, 여기에서 단독으로 사용된 용어 "물"은 정제된 실험실의 물을 언급한다. 실시예에서 사용된 본 발명의 물(EI)은 아이스랜드에 위치된 온천으로부터의 물로 상표명 "Icelandic Glacial™ water"로 시판되고 있는 아이스랜드의 Glacial™ 물이다. 이 물은 또한 이하의 실시예에서 "아이스랜드 물"이라고 칭해진다.

실시예 　1 - 표피의 세포 및 조직 보호에 포함된 유전자의 발현에 대한 본 발명의 물로 처리의 효과

본 연구의 목적은 HSP-70 및 인보루크린을 코드하는 유전자의 발현에 대한 본 발명의 물의 효과를 평가하기 위한 것이다.

1. 세포 배양

사용된 정상 인간 케라티노사이트(NHKs)는 코카시안(Caucasian) 성인 기증자로부터 유래되어 진다. NHKs는 6개의 웰 플레이트에 2.5×10⁴ 세포/웰의 비율로 배지 1에 접종되어 졌다. NHKs의 세 웰은 배양 조건 당 접종되어 졌고, 이것은 8시간 동안 처리되어 졌다.

2. 처리

80% 컨플루언스(confluence)에서, 세포는 아래의 배지 1에서 15%의 아이스랜드 물로 선택적으로 처리되어 졌다:

공급자

에피리페(Epilife) 피셔(Fisher)

보충물(Supplements) 피셔

처리 8시간 후, 세포는 이들로부터 전체 RNA를 추출하기 위해 회수되어 진다.

3. PCR Taqman 저밀도 배열( Low Density Array )

3.1 전체 RNA 의 수득

세포 배양 배지가 제거되어 지고, 그리고 250㎕의 RLT 라이시스 버퍼(Nucleospin RNA trace kit에서 공급받음)가 부가되어 졌다. 세포는 셀 스크래퍼를 사용하여 스크랩되어 지고 그런 다음 세포 용융물이 1.2ml 딥웰(kit로 공급됨)에 회수되었다. 전체 RNA는 Nucleospin RNA trace kit (Macherey Nagel)를 갖는 Epimotion 5075 (Eppendorf)를 사용하여 추출되어 졌다.

얻어진 전체 RNA 용액은 분석되어 지고 그리고 이들의 정성이 Bioanalyseur 2100 (Agilent Technologies)를 사용하여 검증되어 졌다. 이 기구는 특정한 결과 분석 소프트웨어(2100 expert software)를 가지는 컴퓨터에 연결되어 진다. 이 기술은 진핵생물의 전체 RNA 분석에 특징적인 12-웰 마이크로플레이트(RNA 6000 NanoChips) 및 시약 키트(RNA 6000 Nano Reagents & Supplies)을 필요로 한다.

3.2 상보적 DNA 의 합성

사용된 역전사(RT) 키트는 High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit (Applied Biosystems)이였다. 100ng의 전체 RNA가 물에 희석되어 50㎕의 최종 부피로 되었다. 이들은 그런 다음 10분 동안 25℃에서 배양되어 지고 그리고 나서 2시간 동안 37℃에서, 아래에 나타난 바와 같이 미리 제조된, 고능력 역전사 키트로부터 50㎕의 2X 반응 혼합물로 배양되어 졌다.

시약 부피

RT 버퍼 10　㎕

dNTP 버퍼 4　㎕

랜덤 프라이머 10　㎕

RNAse out 1　㎕

RT 5　㎕

H ₂ O 20　㎕

3.3 PCR Taqman 저밀도 배열

50㎕의 각 RT가 샘블되어 지고, 그리고 50㎕의 "Taqman Gene Expression master mix"와 혼합되어 진다. 균질화 후, 100㎕가 마이크로플루이딕 카드 상에 증착되어 지고 그리고 후자는 원심분리되고 그런 다음 밀봉되어 진다.

대조 유전자가 결과를 표준화하기 위해 사용되어 졌다. PCR는 ABI Prism 7900HT 시퀀스 검출 시스템 장비에서, Applied Biosystems에 의해 공급된 프로토콜에 따라 수행되었다. qPCR의 단계는 50℃에서 2분 동안, 94.5℃에서 10분 동안 그리고 97℃에서 30초 동안 그리고 59.7℃에서 1분 동안, 40 주기 동안 수행되었다.

4. 결과의 분석

RT-PCR TLDA 방법에서, 정량분석은 ΔCt 비교적 방법을 사용하여 수행되었다. 이 방법은 각 유전자에서 백그라운드 노이즈를 고려하는 RQ 매니저 소프트웨어(Manager software)를 사용하여 카드의 각 유전자의 주기(Ct)의 수를 결정한다. 이 주기(Ct)의 수는 세포에서 GAPDH 하우스킵핑 유전자 불변체의 Ct에 대해 표준화되어 진다.

결과는 표 1에 나타내었다.

본 발명의 물인, 아이스랜드 Glacial™ 물로 처리 후 관찰된, HSP 70을 코드하는 유전자 발현에서의 증가(×2.1)는 케라티노사이트 상에 스트레스 및 외부 공격에 대한 양호한 저항성을 추론한다. 결론적으로, 케라티노사이트는 멜라닌형성의 자극 및 세포질 외의 매트릭스 분해에 포함된 전염증성 인자인 시토킨류 및 케모킨류를 거의 분비하지 않을 수 있다. 마찬가지로, 케라티노사이트 분화에서 키이 인자인 인보루크린을 코드하는 유전자의 발현 산물의, 본 발명의 물인, 아이스랜드 Glacial™ 물로 처리 후 관찰된 자극(×1.8)은 외부의 공격에 대해 보호적인 표피의 배리어의 형성을 가능하게 한다.

실시예 　2 - 진피의 조직 보호 및 세포에 포함된 유전자의 발현에 본 발명의 물로 처리의 효과.

본 연구의 목적은 단일 층에서 배양된 정상 인간 섬유아세포(NHFs) 배양에 대해 아이스랜드 Glacial™ 물의 생물학적 활성을 연구하기 위한 것이다. 실시예 1에서와 같이, 이 연구는 Taqman 저밀도 배열을 위한 TLDA 스탠딩, TLDA 테크놀로지의 수단에 의하여 수행되어 졌다. 아이스랜드 Glacial™ 물로 24시간 동안 처리에 반응하여, 섬유아세포-관련 생물학적 경로에 특이적인 단백질을 코드하는 유전자 패널의 발현의 조절이 연구되어 졌다.

메탈로프로테이나제 1 및 3(MMP-1 및 MMP-3)은 동일한 단백질 가수분해의 케스케이드에 속하고 그리고 콜라겐, 보다 특히는 콜라겐 1 및 3의 분해에서 함께 작용한다. 이들은 특히 자외선 노출에 반응하여 그리고 피부 노화 동안에 유도되어 진다. 이것을 따라서 더만 세포질 외 매트릭스의 분해를 조절하기 위해 발현을 저해하기를 원하는 전략이다.

1. 재료 및 방법

세포 배양

사용된 정상 인간 섬유아세포(NHFs)는 코카시안(Caucasian) 성인 기증자로부터 유래되어 진다.

세포는 6개의 웰 플레이트에 2.5×10⁴ 세포/웰의 비율로 다음의 조성을 가지는 배지 1에 접종되어 졌다.

배지 1

공급자 최종 농도

FCS Biowest 10%

DMEM Fisher qs

NHF의 세 웰은 배양 조건 당 접종되어 졌다.

처리 24시간 전, 컨플루언스에서 세포는 송아지의 태반혈장(foetal calf serum; 아래의 조성을 가지는 배지 2)으로부터 방혈되어 졌다:

배지 2

공급자

DMEM Fisher

2. 처리

송아지의 태반혈장 없이 23시간의 배양 후, 세포는 배지 2에서 15%의 아이스랜드 Glacial™ 물로 임의적으로 처리되어 졌다. 처리 8시간 및 24시간 후, 세포는 이들로부터 전체 RNA를 추출하기 위해 회수되어 졌다.

3. PCR Taqman 저밀도 배열

이 방법은 실시예 1의 것에 따른다.

4. 결과

처리 24시간 후, NHF는 이들로부터 전체 RNA를 추출하기 위해 회수되어 졌다.

얻어진 결과는 15 중량%의 아이스랜드 Glacial™ 물로 NHF의 처리가 처리 24시간 후 MMP-1 및 MMP-3의 발현을 유의적으로 감소(각각 44% 및 40%)하는 것을 가능하게 한다는 것을 입증하였다( 도 2 참고).

이들 두 가지 메탈로프로테이나제의 발현에 대한 아이스랜드 Glacial™ 물의 효과는 특히 ECM 분해에 작용함에 의해 피부의 노화를 방지하거나 또는 늦추는데 유익하다.

실시예 　3 - 멜라닌형성 및 피부 색소침착 결함에 포함된 유전자의 발현에 대한 본 발명의 물을 포함하는 다른 조성물의 물로의 처리의 효과.

본 연구의 목적은 정상 인간 멜라노사이트(NHMs) 상에서, 실시간 정량적 RT-PCR(qRT-PCR)에 의해, 활성 제제인 아이스랜드 Glacial™ 물의, 티로시나제 또는 티로시나제 관련 단백질 1(TRP-1)을 코드하는 유전자의 발현에 대한 효과를 평가하기 위한 것이다.

이 활성 제제의 효과는 본 발명에 따르지 않는 물로, 아래의 시험에서 임의적으로 비교되어 진다.

세포 배양

기증자 1로부터의 정상 인간 멜라노사이트(NHMs)가 배양에 위치되어 지고 그리고 6개의 웰 플레이트에 2.5×10⁵ 세포/웰의 비율로 배지 3(아래의 조성)에 접종되어 졌다. 세 웰은 배양 조건 당 접종되어 졌고; 세 개는 비처리된 대조 웰이고 그리고 세 웰은 24시간의 처리 시간 동안 처리되어 졌다.

배지 1의 조성:

공급자 최종 농도

글루타맥스를 갖는 배지 E-199 Fisher

송아지의 태반혈장 Abcys 10%

배지 2의 조성:

공급자 최종 농도

KSFM Fisher

뇌하수체의 추출물 Fisher 50㎍/ ml 의 KSFM

배지 3의 조성:

공급자 최종 농도

배지 2 90%

배지 1 10%

b-섬유아세포 성장 인자 Fisher 10　 ng / ml

멜라노사이트의 처리

접종 48시간 후, 세포는 본 발명의 물이나 아이스랜드 Glacial™ 물과 다른 조성을 가지는 물과 접촉함에 의해 처리(1.1 내지 1.3에서 특정되어 진 처리 조건)되고, 배지 3에 희석되어 지고, 0.22㎛ 필터를 통해 여과되어 졌다. 비처리된 대조군 또한 제조되어 졌다.

처리 24시간 후, 세포는 이들로부터 전체 RNA를 추출하기 위해 회수되어 졌다.

Rneasy 키트(Qiagen)를 사용하여 전체 RNA 의 수득

세포 배양 배지가 회수되어 지고, 그리고 350㎕의 RLT 라이시스 버퍼(키트로 공급)가 부가되어 졌다. 세포를 세로 스크랩퍼를 사용하여 스크랩되어 졌고 그리고 세포 용융물은 주사기를 사용하여 균일화되어 졌다.

전체 RNA는 공급자의 프로토콜에 따라 추출되어 졌다.

이렇게 얻어진 전제 RNA 용액이 분석되어 졌다. 이 기술은 진핵생물의 전체 RNA 분석에 특징적인 12-웰 마이크로플레이트(RNA 6000 NanoChips) 및 시약 키트(RNA 6000 Nano Reagents & Supplies)을 필요로 한다.

3.2 상보적 DNA 의 합성

사용된 역전사(RT) 키트는 "High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit 1000 Reactions" (Applied Biosystems)이었고, 공급자의 프로토콜에 따라 사용되었다. DNAse 후, 100ng의 전체 RNA가 물에 희석되어 25㎕의 최종 부피로 되었다. 이들은 그런 다음 10분 동안 25℃에서 배양되어 지고 그리고 나서 2시간 동안 37℃에서, 아래에 나타난 바와 같이 미리 제조된, 고능력 cDNA 어치브 키트로부터 25㎕의 2X 반응 혼합물로 배양되어 졌다.

시약 부피

RT 버퍼 10　㎕

dNTP 버퍼 4　㎕

랜덤 프라이머 10　㎕

RNAse out 1　㎕

RT 5　㎕

H ₂ O 20　㎕

실시간 정량적 RT - PCR

이 분석을 위해 사용된 시약

공급자

Kit RNeasy Qiagen

RNAse out Invitrogen

Taqman 패스트 유니버셜 마스터 믹스 Applied

TaqMan β2-m 발현 Applied

Taqman TRP -1 발현 Applied

Taqman 티로시나제 발현 Applied

처리의 효과는 어플라이드 바이오시스템으로부터의 7900HT 패스트 96-웰 블럭을 갖는 실시간 정량적 PCR (qRT-PCR)에 의해 평가되어 졌다.

1 반응을 위한 반응 혼합물의 제조:

TaqMan 패스트 유니버셜 마스터 믹스 (2x) 10　㎕

TaqMan 유전자 발현 어세이 1　㎕

H ₂ O 4　㎕

15㎕의 혼합물이 7900HT 기구를 위해 특별하게 디자인된 96-웰 플레이트의 웰에 위치되어 지고, 그리고 5㎕의 물(블랭크 용) 또는 5㎕의 연속적인 희석의 cDNA(범위용) 또는 정제된 물에 1/50으로 희석된 5㎕의 샘플, 각각의 유전자가 상응하는 웰에 부가되어 졌다.

결과의 분석

각 샘플에 대해서, 신호가 나타나는 주기의 수는 SDS 2.3 소프트웨어(어플라이드 바이오시스템)을 사용하여 결정되어 졌고, 그리고 계산 범위로 확립된 측정 라인의 장점에 의해, 따라서 트랜스크립트 복제의 수의 관점에서의 농도가 계산되어 질 수 있다.

동일한 분석을 위해, 얻어진 TRP-1 및 티로시나제 전사체의 발현 준위는 β2-m 유전자에 대해 얻어진 값에 대해 표준화되어 진다. 구성성분이고 비변형체의 발현인 이 유전자는 분석 사이에서 양, 특히 다른 역전사 유효성에 기인하는 것에 있어서 변형이 없게 할 수 있게 한다.

통계적 분석

통계적으로 유의성 있는 전사 활성 변형은 스튜던트 테스트를 적용함에 의해 평가되어 졌다.

각 조건은 삼 회 반복으로 수행되어 졌다(3 비처리된 대조 및 3 처리). 두 데이터 매트릭스를 비교함에 의해 피셔 테스트(Fischer test)가 무엇보다 먼저 적용되었다. 피셔 테스트가 0.05보다 클 때, 그러면 스튜던트 테스트에 대한 변이가 2와 같다. 피셔 테스트가 0.05보다 적을 때, 그때는 변이가 3과 같다.

보유된 전사의 변형은 0.05보다 적은 스튜던트 테스트를 가지는 것이다. 결과 부분에서 나타난 데이터는 처리된 샘플 대 비처리된 샘플에서 얻어진 양의 비율이고, 전체는 비변형된 β2-마이크로글로불린 유전자에 후위로 관련된다.

결과

1.1 - 치료 24시간 후 NHM 내에서 티로시나제 유전자의 발현 상에 아이스랜드 물(본 발명의 물)의 농도 범위로 처리의 효과

아이스랜드 물(본 발명의 물)의 효과는 상표명 Milli-Q™ (공급자 Millipore)로 시판되고 있는 고도로 정제되고 그리고 탈이온된 물에 의해 생성된 것과 비교되어 졌다.

6-웰 플레이트에 접종된, 기증자 1로부터의 정상 인간 멜라노사이트가 24시간 동안 아이스랜드 물 또는 Milli-Q™ 물로, 컨플루언스에서 세배로 처리되어 졌다. 비처리된 대조군 또한 제조되었다.

티로시나제를 코드하는 유전자를 코드하는 전사체의 준위는 샘플에 대하여 측정되어 지고 그리고 비변형체 β2-m 유전자를 코드하는 전사체의 준위에 후위로 관련되어 진다.

얻어진 결과는 히스토그램의 형태로 처리되어 졌다.

도 3은 아이스랜드 물로 처리 24시간 후 16%의 티로시나제를 코드하는 유전자의 전사체 준위에서 감소하였다.

도 4는 Milli-Q™ 물은 티로시나제 유전자 발현 상에 효과가 없다는 것을 보여준다.

Milli-Q™ 물과는 달리, 본 발명의 물은 멜라닌형성에서 그리고 피부 색소침착에서 키이 효소인, 티로시나제를 코드하는 유전자의 발현을 유의적으로 저해하는 것을 가능하게 한다.

1.2 - 치료 24시간 후 NHM 내에서 TRP -1을 코드하는 유전자의 발현 상에 본 발명의 물로 처리의 효과

6-웰 플레이트에 접종된, 기증자 2로부터 유래된 정상 인간 멜라노사이트가 24시간 동안 15%의 아이스랜드 물로, 컨플루언스에서 세배로 처리되어 졌다. 비처리된 대조군 또한 제조되었다. TRP-1 유전자를 코드하는 전사체의 준위는 샘플에 대하여 측정되어 지고 그리고 비변형체 β2-m 유전자를 코드하는 전사체의 준위에 후위로 관련되어 진다.

얻어진 결과는 히스토그램의 형태로 처리되어 졌다.

도 5는 아이스랜드 물로 처리 24시간 후 47.10%의 TRP-1 유전자의 전사체 준위에서 감소하였다.

본 발명의 물은 멜라닌형성에서 그리고 피부 색소침착에 관련된 TRP-1을 코드하는 유전자의 발현을 유의적으로 저해하는 것을 가능하게 한다.

1.3 - 치료 24시간 후 티로시나제를 코드하는 유전자의 발현 상에 본 발명의 물 15%로 정상 인간 멜라노사이트에서의 처리 효과

6-웰 플레이트에 접종된, 기증자 2로부터 유래된 정상 인간 멜라노사이트가 24시간 동안 15%의 아이스랜드 물로, 컨플루언스에서 세배로 처리되어 졌다. 비처리된 대조군 또한 제조되었다.

티로시나제 유전자를 코드하는 전사체의 준위는 샘플에 대하여 측정되어 지고 그리고 비변형체 β2-m 유전자를 코드하는 전사체의 준위에 후위로 관련되어 진다.

얻어진 결과는 히스토그램의 형태로 처리되어 졌다.

도 6은 아이스랜드 물로 처리 24시간 후 37.60%의 티로시나제를 코드하는 유전자의 전사체 준위에서 감소를 보여준다.

1.4 - 치료 24시간 후 NHM 내에서 티로시나제 유전자의 발현 상에 본 발명의 물 및 미네랄 물로 처리의 비교 효과

아이스랜드 물(본 발명의 물)에 의해 생성된 효과는 그 특징(조성, pH, TDS)이 본 발명의 물과는 다른 것인, 상표명 "Evian™ water"로 시판되고 있고 아주 순수한 빙하수인 미네랄 물에 의해 생성된 것과 비교되어 졌다. 아래의 표 3은 본 발명에 따르지 않는 Icelandic Glacial™ 물(본 발명의 물) 및 Evian™ 물의 각각의 특징을 나타냈다(아래 주소의 제조자의 웹사이트로부터 얻어진 데이터).

(mg/ml로 표시된 농도)	Icelandic Glacial™ www.icelandicglacial.com	ISBRE™ www.isbre.com	EVIAN ™ www.evian.com
칼슘 (Ca2 +)	6.4	0.8	80
염소 (Cl-)	13	1.2	6.8
마그네슘 (Mg2 +)	2.4	0.1	26
칼륨 (K+)	0.6	0.8	1
나트륨 (Na+)	12	0.5	6.5
비카보네이트(HCO3 -)	33	0	360
셀페이트류 (SO4 2 -)	3.4	1.3	12.6
TDS	62	4	357
pH	8.4	5.7	7.2

특별히 아이스랜드 물은 다른 시험된 두 가지 물보다 알카리성이다는 것이 인지되어 진다. 이것은 Evian™ 물보다 낮은 미네랄(cf. 칼슘 또는 비카보네이트)을 가진다. 그러나, 이것은 아주 순수한 것으로 평판이 있고, TDS 값이 4인 Isbre™ 빙하수보다 많은 미네랄을 함유한다.

정상 인간 멜라노사이트가 24시간 동안 15%의 아이스랜드 물 또는 Evian™ 물로, 컨플루언스에서 세배로 처리되어 졌다. 비처리된 대조군 또한 제조되었다.

티로시나제를 코드하는 유전자를 코드하는 전사체의 준위는 샘플에 대하여 측정되어 지고 그리고 비변형체 β2-m 유전자를 코드하는 전사체의 준위에 후위로 관련되어 진다.

얻어진 결과는 히스토그램의 형태로 처리되어 졌다.

도 7은 아이스랜드 물로 처리 24시간 후 16%의 티로시나제를 코드하는 유전자의 전사체의 준위에서 감소를 나타낸다.

본 발명의 물인 Icelandic Glacial™ 물은 티로시나제를 코드하는 유전자의 발현을 유의적으로 저해하는 것을 가능하게 하고, 따라서 멜라닌형성에 그리고 피부 색소침착에 작용한다.

한편, 보다 많은 미네랄화된 물(Evian™) 또는 역으로 아주 적게 미네랄화된 물 (Isbre™) 또는 전체적으로 탈미네랄화된 물 (Milli-Q™)은 티로시나제를 코드하는 유전자의 발현 상에 아무런 효과도 나타내지 않았다.

결론

본 연구는 본 발명의 물이 정상 인간 멜라노사이트 (NHMs)에서 티로시나제-관련 단백질 1 (TRP-1)을 코드하는 유전자 및 티로시나제를 코드하는 유전자의 전사를 부분적으로 저해한다는 것을 보여주는 것을 가능하게 한다. 아이스랜드 물로 24시간 동안 처리는, 그 특징이 본 발명에 따르지 않는 물에 대해 인지된 효과에 반하여 TRP-1 및 티로시나제를 코드하는 유전자의 발현에서 유의성 있는 감소를 이끈다.

따라서, 본 발명의 물, 특히는 Icelandic Glacial™ 물은 화장품 조성물에서 피부-탈색, -표백 또는 -경감하는 활성 제제로서 사용되어 질 수 있다.

실시예 4 - 본 발명에 따른 화장품 제형

조성물은 아래의 제형에 따라 제조되어 졌으며, 여기서 백분율은 최종 조성물에 대한 중량으로 표시되었으며 그리고 구성성분의 명칭은 이들의 화학적 명칭, 이들의 상표명 또는 이들의 INCI 명칭이다.

4.1 - 항노화 혈청

항노화 혈청이 아래의 제형에 따라 제조되어 졌다.

중량 %

글리세롤 5

부틸렌 글리콜 3

펜틸렌 글리콜 3

폴리글리세롤-3 2.5

메틸 글루세트-20 1.8

데실옥사졸리돈 1

펜옥시에탄올 9

탈크 1

레시틴 1

카르보머(Carbomer) 0.5

솔비톨 3

실리카 0.2

알루미나 0.2

수산화나트륨 0.2

알진(Algin) 0.1

폴리비닐 알코올 < 0.1

소디움 히알루로네이트 < 0.1

멜로우 (Malva sylvestris) 추출물 0.7

가수분해된 콩 가루 < 0.1

아데노신 < 0.1

아스코르브산 < 0.1

히비스커스 에스큘런튜스(Hibiscus esculentus) < 0.1

과실 추출물

아이스랜딕 Glacial ™ 물 77

로션은 본 발명의 물을 포함하는 유동성 수성 조성물로, 아침 및 저녁으로 얼굴에 적용되어 진다. 본 발명의 물을 포함하는 이의 조성물은 피부 노화, 특히는 안색의 광휘의 상실이나 피부의 탄력성의 상실의 발현의 신호에 대하여 방지적인 효과를 가능하게 한다.

4.2 - 경 노화 크림

중량 %

카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 10

글리세롤 5

세테어릴 알코올 4

부틸렌 글리콜 3

펜틸렌 글리콜 3

망고 (Mangifera indica) 버터 1.5

글리세릴 스테아레이트 1.2

데실옥사졸리돈 1

스테아레쓰-21 1

펜옥시에탄올 0.9

세테어릴 글루코사이드 0.8

수소화 코코글리세라이드 0.7

탈크 0.6

솔비톨 0.5

디메티콘 0.5

세틸 팔미테이트 0.3

알진 0.2

코코글리세라이드 0.2

실리카 0.2

카르보머 0.2

알루미나 0.2

크산탄 검 0.1

폴리비닐 알코올 0.1

티타늄 디옥사이드 0.1

트로메타민 0.1

셀룰로스 검 < 0.1

소디움 히알루로네이트 < 0.1

멜로우 (Malva sylvestris) 추출물 0.7

가수분해된 콩 가루 < 0.1

아데노신 < 0.1

아스코르브산 < 0.1

히비스커스 에스큘런튜스 < 0.1

(Hibiscus esculentus) 과실 추출물

아이스랜드 스프링™ 물 73

본 발명의 물로 구성되는 연속적 수성 상인 크림은 아침에 얼굴 및 목선에, 특히 강조하면 피부의 노화 신호를 보이는 영역 상에 적용되어 진다. 이것은 피부의 내재적 및/또는 외재적 노화에 대하여 보호적인 효과를 얻는 것을 가능하게 한다.

4.3 - 풍부한 항노화 크림

유중수 에멀젼이 다음의 조성에 따라 얻어진다:

중량 %

카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 15

글리세롤 5

세테어릴 알코올 4

부틸렌 글리콜 3

펜틸렌 글리콜 3

망고 (Mangifera indica) 버터 2

글리세릴 스테아레이트 2.2

수소화 코코글리세라이드 2

디메티콘 1

세틸 팔미테이트 0.6

데실옥사졸리돈 1

스테아레쓰-21 1

펜옥시에탄올 0.9

세테어릴 글루코사이드 0.8

탈크 0.6

솔비톨 0.5

코코글리세라이드 0.5

실리카 0.2

알진 0.3

카르보머 0.2

크산탄 검 0.1

폴리비닐 알코올 0.1

트로메타민 0.1

셀룰로스 검 < 0.1

소디움 히알루로네이트 < 0.1

멜로우(Malva sylvestris) 추출물 0.7

가수분해된 콩 가루 < 0.1

아데노신 < 0.1

아스코르브산 < 0.1

히비스커스 에스큘런튜스 < 0.1

( Hibiscus esculentus) 과실 추출물

Ducale™ 물 55

본 발명의 물을 포함하는 수성 상인 리치 크림은 저녁에 얼굴에 적용되어 진다. 이것은 피부의 내재적 및/또는 외재적 노화에 대하여 보호적인 효과를 얻는 것을 가능하게 한다.

4.4 - 탈색소하는 얼굴의 데이 젤 에멀젼

젤 에멀젼이 다음의 조성에 따라 얻어진다:

중량 %

글리세롤 5

카프릴릭/카프릭/석씬닉 트리글리세라이드s 5

옥틸 메톡시신남에이트 1

디메티콘 코폴리올 0.5

아크릴레이트/C_{10 -30} 알킬 아크릴레이트 공중합체 0.5

아스코르빌-2 글루코사이드 2

아이스랜딕 Glacial™ 물 90

보존제, 향료, 염료 qs.

일광으로부터 또는 직접적으로 태양으로부터 보다 많은 또는 적은 강한 광휘를 받는 개인들은 밝은 안색을 보전하고 그리고 색소 침착된 반점의 발현을 피하기를 원한다.

상기한 겔 에멀젼의 사용은 이러한 목적을 달성하는 것을 가능하게 한다. 이 조성물은 일반적으로 아침에 얼굴에 적용되어 진다. 이것은 얼굴이나 또는 그 이외의 부분일 수 있는 색소침착에 예방적으로 또는 치료적으로 작용한다.

4.5 - 색소 침착 반점 - 예방 SPF 30 보호 액

보호 액이 다음의 조성에 따라 제조되어 진다:

중량 %

휘발성 펜타시클로메티콘 49

티타늄 디옥사이드 15

옥틸 메톡시신남에이트 7.5

글리세롤 5

페닐 트리메티콘 5

디메티콘 코폴리올 3

폴리(메틸 메타크릴레이트) 2.5

부틸메톡시디벤조일메탄 1

아이스랜딕 Glacial™ 물 15

중성제, 향료, 보존제, 항산화제 qs.

이 보호액은 강력한 태양 광선에 노출되어 지기 전에, 이 현상에 예비된 개인들이 색소 침착 반점의 발현을 예방하기 위해 사용되어 진다. 고농도의 선크림의 존재는 멜라닌의 준위에서의 감소로부터 귀결하는 천연적 보호에서의 감소를 보상하는 것을 가능하게 만든다는 것이 인지되어져야 한다.

4.6 - 탈색소 안면 크림

크림은 다음의 조성에 따라 얻어진다:

중량 %

글리세릴 스테아레이트 + Peg-100 스테아레이트 5

수소화 폴리이소부텐 4

마그네슘 아스코르빌 포스페이트 3

글리세릴 트리카프릴레이트/카프레이트 3

스쿠알란 3

글리세롤 2

밀납 1

세테어릴 옥타노에이트 1.5

세틸 알코올 1

스테아릴 알코올 1

디메티콘 1

크산탄 검 0.3

에티렌디아민테트라아세트 산 0.2

칼륨 디글리세르라지네이트 0.2

토코페릴 아세테이트 0.2

살리실릭 산 1

나트륨 시트레이트 0.1

아이스랜드 Spring™ 물 70

중성제, 향료, 보존제 qs.

유중수 에멀젼의 형태로 되는 이 크림의 사용은 노화성 반점 또는 화학적 색소침착 반점을 감소하거나 제거함에 의해 피부 색소침착의 불균일성을 치료하는 것을 가능하게 한다. 이것은 피부 색상을 균일하게 하고 그리고 안색을 밝게 한다.

4.7 - 안색을 밝게 하기 위한 안면 로션

로션이 다음의 조성에 따라 제조되어 진다:

중량 %

에틸 알코올 30

PPG-3 미리스틸 에테르 5

글리세롤 2

카르보머 0.2

부틸렌 글리콜 3

폴리솔베이트 20 0.2

칼슘 D-판테테인-S-설포네이트 0.2

시트루스 운시우(Citrus unshiu) 추출물 2

Ducale™ 물 56

중성제, 향료, 보존제 qs.

안색을 밝게 하기 위한 이 로션은 메이크 업을 제거하고 피부를 세정한 후에 사용되어 진다.

4.8 - 라이트닝 안면 혈청

혈청이 다음의 조성에 따라 제조되어 진다: 중량 %

아이스랜딕 Glacial™ 물 88

글리세롤 2

테트라소디움 EDTA/시트르 산/트리소디움 시트레이트 희망하는 pH로 qs

크산탄 검 0.25

버넷(Burnet) 추출물 0.5

아스코르빌-2 글루코사이드 2

폴리메틸실세스퀴녹산 2

에틸 알코올 2

락트 산 1

폴리아크릴아미드, C_{13 -14} 이소파라핀, 라우레쓰-7 0.5

디메티콘 코폴리올 0.25

향료, 염료, 보존제 qs

이 고도로 농축된 혈청 조성물의 몇 방울이 일반적으로 안면 크림의 적용 전에 얼굴에 적용되어 진다. 이 혈청은 안색의 밝음을 얻거나 또는 유지하기 위해 일 내지 이 중의 치료로서 통상적으로 사용되어 진다.

4.9 - 헤어의 머리를 밝게 하기 위한 헤어 로션

헤어 로션이 다음의 조성에 따라 제조되어 진다:

중량 %

아이스랜드 Spring™ 물 46

알코올 50

판테닐 에틸 에테르 0.5

DL-알파-토코페릴 아세테이트 0.2

폴리솔베이트 60 1

리쿼라이스 추출물 0.1

향료 0.2

글리세롤 0.5

염료 qs

이 로션은 머리카락의 점진적인 밝음을 얻기 위하여 수 주일 동안 아침 및 저녁에 헤어에 적용되어 진다.

4.10 - 손을 위한 항-반점 크림 겔

크림 겔이 다음의 조성에 따라 제조되어 진다:

중량 %

Ducale™ 물 69

카프릴릭/카프릭 디글리세릴 석시네이트 6

옥틸 옥타노에이트 2.5

옥틸 메톡시신남에이트 6

아스코르빌-2-글루코사이드 2

페닐 트리메티콘 2.5

벤조페논-3 0.5

소디움 히알루로네이트 0.05

크산탄 검 0

아크릴레이트/C_{10 -30} 알킬 아크릴레이트 공중합체 0.5

폴리(메틸 메타크릴레이트) 1

글리세롤 2

PEG 150 3

중성제, 염료, 향료, 보존제 qs

이 크림 겔은 손의 색상을 감소하기 위해 손상의 노화성 반점(노인성 흑점)에 직접적으로 적용되어 져야 한다.

실시예에서, "qs"는 "충분한 양", 즉 전체 100%를 만들기에 충분한 양을 의미한다.

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11. 세포질외 매트릭스 분해를 늦추고 멜라닌 형성을 늦추는, 하기의 특성을 가지는 적어도 하나의 물로 구성되는 화장품 활성 제제를 포함하는, 피부 및 케라틴 섬유에 대한 탈색소, 표백 또는 라이트닝 제제용 화장품 조성물:
    - 7.6 내지 10 사이의 pH,
    - 10 내지 250mg/l 사이의 전체 용해 고체(TDS) 농도,
    - 칼슘 (Ca²⁺) 3 내지 14 mg/l 사이;
    - 염소 (Cl^-) 2 내지 16 mg/l 사이;
    - 마그네슘 (Mg²⁺) 0.8 내지 5 mg/l 사이;
    - 칼륨 (K⁺) 0.01 내지 2 mg/l 사이;
    - 나트륨 (Na⁺) 2 내지 14 mg/l 사이;
    - 셀페이트류 (SO₄ ^2-) 1 내지 5 mg/l 사이.
12. 제11항에 있어서, 용액, 세럼, 로션, 스프레이, 밀크, 에멀젼 또는 하이드로겔의 형태로 제형화되는 것인 화장품 조성물.
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20. 제11항에서 정의된 화장품 조성물의 적용을 포함하는 화장 케어 방법.
    
    
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