KR101934564B1

KR101934564B1 - Skin external composition comprising germinated Camellia sinensis seed extract

Info

Publication number: KR101934564B1
Application number: KR1020120037794A
Authority: KR
Inventors: 유세진; 백석윤; 양미숙; 장희경; 김주연
Original assignee: (주)아모레퍼시픽
Priority date: 2012-04-12
Filing date: 2012-04-12
Publication date: 2019-01-02
Also published as: KR20130115482A

Abstract

본 발명은 녹차(Camellia sinensis)씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 발아 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유하여 피부 보호, 항노화, 항주름, 피부 탄력 개선, 미백, 피부 보습, 아토피 등의 피부 건조 질환의 예방 및 개선, 피지 조절, 항염증, 여드름 등의 피부 트러블 예방 또는 개선, 피부 혈색 개선, 각질 제거, 탈모 예방, 항비듬의 용도를 갖는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for external application for skin containing an extract of Camellia sinensis as an active ingredient, and more particularly to a composition for external application for skin comprising Green tea seed extract as an active ingredient to provide skin protection, antiaging, anti wrinkle, A composition for external application for skin having the use of prevention and improvement of skin dryness diseases such as whitening, skin moisturization and atopy, prevention or improvement of skin troubles such as sebum control, anti-inflammation and acne, improvement of skin color, exfoliation, hair loss prevention and anti dandruff .

Description

[0001] The present invention relates to a skin external composition comprising germinated green tea seed extract, Camellia sinensis seed extract,

본 발명은 녹차(Camellia sinensis)씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 발아 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유하여 피부 보호, 항노화, 항주름, 피부 탄력 개선, 미백, 피부 보습, 아토피 등의 피부 건조 질환의 예방 및 개선, 피지 조절, 항염증, 여드름 등의 피부 트러블 예방 또는 개선, 피부 혈색 개선, 각질 제거, 탈모 예방, 항비듬, 모발의 광택 및 부드러움 개선, 얼굴 또는 바디의 볼륨 및 탄력 증진, 얼굴 또는 바디의 라인 개선의 용도를 갖는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a composition for external application for skin containing an extract of Camellia sinensis as an active ingredient, and more particularly to a composition for external application for skin comprising Green tea seed extract as an active ingredient to provide skin protection, antiaging, anti wrinkle, Prevention and improvement of skin dryness diseases such as whitening, skin moisturization and atopy, prevention or improvement of skin trouble such as sebum control, anti inflammation and acne, improvement of skin color, exfoliation, prevention of hair loss, anti dandruff, improvement of gloss and softness of hair , Improving the volume and elasticity of a face or body, and improving the line of a face or a body.

인간의 피부는 나이가 들어감에 따라 여러 가지 내적, 외적 요인에 의해 변화를 겪는다. 즉, 내적으로는 신진대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되어 생체에 필요한 면역 단백질 및 생체 구성 단백질들의 생합성이 줄어들게 되며, 외적으로는 오존층 파괴로 인하여 태양 광선 중 지표에 도달하는 자외선의 함량이 증가하고 환경 오염이 더욱 심화됨에 따라 자유 라디칼 및 활성 유해 산소 등이 증가함으로써, 피부의 두께가 감소하고, 주름이 증가하며, 탄력이 감소될 뿐 아니라 피부 혈색도 칙칙해지고, 피부 트러블이 자주 발생하며, 기미와 주근깨 및 검버섯 또한 증가하는 등 여러 가지 변화를 일으키게 된다.The human skin undergoes changes due to various internal and external factors as it gets older. In other words, internally, secretion of various hormones that regulate metabolism is reduced, the function of immune cells and the activity of cells are lowered, and the biosynthesis of immune proteins and biocompatible proteins necessary for the living body is reduced, and ozone layer destruction As the content of ultraviolet rays reaching the surface of the sunlight increases and environmental pollution is further intensified, free radicals and active noxious oxygen are increased, so that the thickness of the skin decreases, the wrinkles increase, the elasticity decreases Skin color is grayish, skin troubles occur frequently, and spots, freckles and black blots also increase.

노화가 진행될수록 피부를 구성하는 물질인 콜라겐, 엘라스틴, 히알루론산 및 당단백질의 함유량 및 배열이 변하거나 감소하는 증상들이 나타나게 되고, 자유 라디칼 및 활성 유해 산소에 의한 산화적 스트레스를 받게 된다. 또한 노화가 진행되거나 자외선에 의해서, 피부를 구성하는 대부분의 세포에서는, 염증을 일으킨다고 알려져 있는 전염증성 사이토카인(proinflammatory cytokine)을 생성하는 효소인 사이클로옥시제나제-2(Cox-2, cyclooxygenase)의 생합성이 증가하고, 이들 염증성 인자에 의해 피부조직을 분해하는 효소인 매트릭스 메탈로프로테아제(MMP, Matrix metalloproteinase)의 생합성이 증가하며, iNOS(inducible nitric oxide synthase)에 의한 NO(nitric oxide) 생성이 증가하는 것으로 알려져 있다. 즉 자연적으로 진행되는 내인성 노화에 따른 세포 활성의 감소 및 미세염증에 의해 기질물질의 생합성이 감소되고, 여러 가지 유해 환경에 의한 스트레스의 증가 및 태양 광선에 의한 활성 산호 종의 증가와 같은 외적 요인에 의해 분해 및 변성이 가속화되어 피부 기질이 파괴되고 얇아지면서 피부 노화의 제반 증상들이 나타나게 된다. 따라서, 이러한 노화의 현상들을 방지하고, 개선시킬 수 있는 활성성분에 대하여 많은 연구가 이루어 있다.As the aging progresses, the content and arrangement of collagen, elastin, hyaluronic acid and glycoprotein, which constitute the skin, are changed or decreased, and oxidative stress due to free radicals and active noxious oxygen is experienced. In addition, most of the cells constituting the skin undergo aging or ultraviolet rays, Cox-2 (cyclooxygenase), an enzyme that produces a proinflammatory cytokine known to cause inflammation, And the biosynthesis of Matrix metalloproteinase (MMP), an enzyme that degrades skin tissue, is increased by these inflammatory factors, and nitric oxide (NO) production by iNOS (inducible nitric oxide synthase) Respectively. In other words, there is a decrease in cell activity due to natural endogenous aging and a decrease in the biosynthesis of substrate materials due to microinflammation, an increase in stress due to various harmful environments, and an increase in active coral species caused by sunlight As the degradation and denaturation are accelerated, the skin substrate is destroyed and thinned, and various symptoms of skin aging appear. Therefore, much research has been done on the active ingredients that can prevent and improve such aging phenomena.

사람의 피부색을 결정하는 데는 여러 가지 요인들이 관여하는데, 그 중에서도 멜라닌 색소를 만드는 멜라노사이트(melanocyte)의 활동성, 혈관의 분포, 피부의 두께 및 카로티노이드와 빌리루빈 등 인체 내외의 색소 함유 유무 등의 요인들이 중요하다.Several factors are involved in determining the skin color of a person, including the activity of the melanocyte that makes the melanin pigment, the distribution of blood vessels, the thickness of the skin, and the presence or absence of pigment in and out of the body, such as carotenoids and bilirubin It is important.

이중 특히 가장 중요한 요인은 인체 내의 멜라노사이트에서 타이로시나제 등의 여러 가지 효소가 작용하여 생성되는 멜라닌이라는 흑색 색소이다. 이 멜라닌 색소의 형성에는 유전적 요인, 호르몬 분비, 스트레스 등과 관련된 생리적 요인 및 자외선 조사 등과 같은 환경적 요인 등이 영향을 미친다.Especially, the most important factor is melanin, a melanin pigment produced by various enzymes such as tyrosinase in melanocytes in the human body. The formation of melanin pigment affects genetic factors, hormonal secretion, physiological factors such as stress, and environmental factors such as ultraviolet irradiation.

신체 피부의 멜라닌 세포에서 생성되는 멜라닌 색소는 검은 색소와 단백질의 복합체 형태를 갖는 페놀계 고분자 물질로서, 태양으로부터 조사되는 자외선을 차단하여 진피 이하의 피부기관을 보호해주는 동시에 피부 생체 내에 생겨난 자유 라디칼 등을 잡아주는 등 피부 내 단백질과 유전자들을 보호해주는 유용한 역할을 담당한다.The melanin pigment produced in melanocytes of body skin is a phenolic polymer substance having a complex form of black pigment and protein. It protects the subcutaneous skin organs by blocking ultraviolet rays irradiated from the sun, and at the same time, free radicals And protects proteins and genes in the skin.

이와 같이 피부 내, 외부의 스트레스적 자극에 의해 생겨난 멜라닌은 스트레스가 사라져도 피부 각질화를 통해서 외부로 배출되기 전까지는 없어지지 않는 안정한 물질이다. 그러나 멜라닌이 필요 이상으로 많이 생기게 되면 기미, 주근깨 및 점 등과 같은 과색소 침착증을 유발하여 미용상으로 좋지 않은 결과를 가져오게 된다.Melanin, which is produced by stress stimuli inside and outside the skin, is a stable substance that does not disappear until the skin is excreted through skin keratinization even if the stress disappears. However, when melanin is produced more than necessary, it induces hypercholesterolemia such as spots, freckles, and dots, resulting in poor cosmetic results.

오늘날 동양권의 여성들은 백옥같이 하얗고 깨끗한 피부를 선호하며 이를 미의 중요한 기준으로 삼고 있기 때문에 과색소 침착에 대한 치료 및 미용상 문제를 해결하고자 하는 요구가 늘어나게 되었다.Today, oriental women prefer white, clean skin like white whites, and this is an important criterion of beauty, so there has been a growing demand for treatment and cosmetic problems for hyperpigmentation.

이와 같은 요구에 부응하여 종전부터 아스코르빈산, 코지산, 알부틴, 하이드로퀴논, 글루타치온 또는 이들의 유도체, 또는 타이로시나제 저해활성을 가진 물질들을 화장료나 의약품에 배합하여 사용하여 왔으나, 이들의 불충분한 미백효과, 피부에 대한 안전성 문제, 화장료에 배합 시 나타나는 제형 및 안정성의 문제 등으로 인해 그 사용이 제한되고 있다.In response to such demands, substances having ascorbic acid, kojic acid, arbutin, hydroquinone, glutathione, derivatives thereof, or tyrosinase inhibiting activity have been conventionally used in cosmetics or pharmaceuticals, The use thereof is limited due to a whitening effect, a safety problem to the skin, a problem of formulation and stability in combination with cosmetics, and the like.

피부 중에서 최외각에 위치한 표피(epidermis)의 가장 중요한 기능은, 외부로부터의 다양한 자극(화학물질, 대기오염물질, 건조한 환경, 자외선 등의 물리 및 화학적 자극인자)에 대한 방어와 피부를 통한 체내 수분의 과도한 발산을 막는 보호기능이며, 이러한 보호기능은 각질형성세포로 구성된 각질층이 정상적으로 형성되어 있을 때만 그 기능을 유지할 수 있다. 표피 중에서도 가장 바깥에 존재하는 각질층(stratum corneum, horney layer)은 각질형성세포로부터 형성되며, 분화가 완결된 각질 세포와 그를 둘러싼 지질층으로 구성되어 있다(J. Invest. Dermatol. 1983; 80: 44~49). 각질세포는 표피 최하층에서 지속적으로 증식(proliferation)하는 기저세포(basal cell)가 단계적으로 형태 및 기능상의 변화를 거치며, 피부 표면까지 상승한 특징적은 세포이며, 일정 기간이 경과하면 오래된 각질세포는 피부에서 탈락되고 새로운 각질세포가 그 기능을 대신하게 되는데, 이러한 반복적인 일련의 변화 과정을 ‘표피 세포의 분화’ 또는 ‘각화(keratinization)’라고 부른다. 각화과정 중의 각질형성세포는 천연보습인자(natural moisturizing factor; NMF)와 세포간 지방질(세라마이드, 콜레스테롤, 지방산)을 생성하면서 각질층을 형성하여, 각질층이 견고함과 유연성을 가지게 하여 피부장벽(skin barrier)으로서의 기능을 보유하게 한다.The most important function of the epidermis located on the outermost part of the skin is to protect against various external stimuli (physical and chemical stimulants such as chemicals, air pollutants, dry environment, ultraviolet rays) , And this protective function can maintain its function only when the stratum corneum composed of keratinocytes is normally formed. The stratum corneum (horney layer), which is the outermost part of the epidermis, is formed from keratinocytes and consists of keratinocytes with complete differentiation and a surrounding lipid layer (J. Invest. Dermatol. 1983; 49). The keratinocyte is a characteristic cell in which the basal cell that continuously proliferates in the lowest epidermis undergoes a stepwise change in morphology and function and is elevated to the surface of the skin. After a certain period of time, This process is called "epidermal cell differentiation" or "keratinization" because the new keratinocyte replaces its function. During keratinization, keratinocytes form the stratum corneum while producing natural moisturizing factors (NMF) and intercellular lipids (ceramides, cholesterol, fatty acids), making the stratum corneum firm and flexible, As shown in Fig.

그러나, 이러한 각질층은 과도한 세안이나, 목욕 등의 생활 습관적 요인, 건조한 대기, 오염물질 등의 환경적인 요인 및 아토피성 피부나 노인성 피부 같은 내인성 질환 등으로 인해 쉽게 그 기능이 손실될 수 있으며, 실제적으로 현대에 들어서 더욱 늘어난 여러 요인들로 인해 최근에는 건조피부증상 및 이로 인한 제반 장해를 호소하는 사람들이 점점 증가하고 있는 추세이다. 따라서, 적절한 피부수분을 유지하기 위하여 외부로부터 수분을 공급하거나, 체내로부터의 수분 손실을 방지하기 위한 연구가 많이 진행되어 왔으며, 실제로 수분보유능력이 있는 여러 종류의 보습제(moisturizer)가 개발되어 주로 화장품 영역에서 많이 사용되고 있다.However, such a stratum corneum can easily lose its function due to excessive skin cleansing, lifestyle factors such as bathing, environmental factors such as dry air and pollutants, and endogenous diseases such as atopic skin and senile skin, Due to the increasing number of factors in the modern age, there has been an increasing tendency in recent years to appeal to people with dry skin symptoms and disorders. Therefore, in order to maintain proper skin moisture, studies have been conducted to supply moisture from the outside or to prevent water loss from the body, and a variety of moisturizers having moisture retention ability have been developed, It is widely used in the area.

그러나, 생활환경 중에 인간에 대한 위해 요인이 점점 증가하고, 노령인구가 급격히 늘어나면서, 각질층의 생성-탈락속도(turnover rate)가 늦어지고, 각질형성세포의 지질합성능력이 저하되거나, 표피에서 정상적인 세포의 분열, 성숙 및 분화가 원활하지 않음으로써, 각질층의 보습인자와 지질의 양이 감소되어 정상적인 각질층의 기능을 유지하지 못하는 상태, 즉 피부장벽기능이 와해된 상태의 피부를 갖게 되는 경우가 증가하는 추세에 있다.However, as the risk factors for humans increase in the living environment and the aging population rapidly increases, the turnover rate of the stratum corneum is delayed, the lipid synthesis ability of the keratinocytes decreases, It is difficult to maintain the function of the normal stratum corneum, that is, the skin is in a state in which the skin barrier function is broken, is increased due to the inability of the cell to divide, mature and differentiate smoothly, .

이러한 비정상적인 표피세포의 분열, 분화로 인해 피부는 피부건조증, 아토피 및 건선 등의 다양한 피부 질환을 유발하게 되며, 이러한 제 질환들은 자체로 수분 보유 기능만을 갖는 통상적인 보습제 만으로는 그 증상을 약간 완화시킬 수는 있으나, 근본적인 치유를 기대하기는 어려운 실정이다.Due to the abnormal division and differentiation of the epidermal cells, the skin causes various skin diseases such as dry skin, atopy and psoriasis. Such a disease can slightly alleviate the symptoms only by a conventional moisturizing agent having only moisture holding function , But it is difficult to expect fundamental healing.

일반적으로 두피 및 얼굴을 포함한 피부에서 피지는 피부의 보습 유지나 미생물의 침입을 막는 역할을 담당하지만, 피지가 과잉으로 분비되면 탈모가 촉진되고 여드름이 악화되며 여드름에 의한 모공 확대가 촉진되고 지루성 피부염이 발생하는 등 여러 가지 질환이 유발된다.In general, sebaceous glands in the skin, including the scalp and face, play a role in preventing moisturization and microbial invasion of the skin. However, excessive secretion of sebum promotes hair loss, worsens acne, promotes enlargement of pores caused by acne, And many other diseases are caused.

이러한 피지의 과분비는 여러 원인에 의해서 발생하는데 그 중에서도 가장 중요한 것은 피지선의 활성에 있어 피지 분비를 촉진하는데 관여하는 호르몬 가운데 하나인 디하이드로테스토스테론(dihydrotestosterone: DHT)의 양에 의해서 피지선 세포가 활성화되어 피지가 과분비되는 것이다. 즉, 탈모에 있어서는 세포내에서 테스토스테론(testosterone: T)이 5-알파-리덕타아제 타입 2(5-α-reductase type 2)에 의해서 남성 호르몬 중에 하나인 디하이드로테스토스테론으로 전환됨과 동시에 세포질 내에 있는 수용체 단백질(receptor)과 결합하여 액내로 들어가 탈모를 유발하지만 피부나 피지선에서는 테스토스테론이 5-알파-리덕타아제 타입 1(5-α-reductase type 1)에 의해서 디하이드로테스토스테론으로 전환되어 피지선 세포를 활성화하여 분화가 촉진됨으로써 피지선내의 피지(sebum)를 과분비하여 여드름을 유발하게 된다(J. Invest Dermatol 105:209-214 Diane etc.).The hypersecretion of sebaceous glands is caused by various causes, and the most important one is the activation of sebaceous glands by the amount of dihydrotestosterone (DHT), which is one of the hormones involved in promoting sebaceous secretion in the activity of sebaceous glands, Is overdone. That is, testosterone (T) is converted into dihydrotestosterone, one of the male hormones, by 5-alpha-reductase type 2 in cells in the hair loss, (5-α-reductase type 1) in the skin or the sebaceous glands. The testosterone is converted to dihydrotestosterone by the action of 5-α-reductase type 1, Activation to promote differentiation promotes sebum in sebaceous glands and causes acne (J. Invest Dermatol 105: 209-214 Diane etc.).

단순한 피지의 과분비외에 발생되는 피부 트러블인 여드름, 탈모 등은 피부의 미세한 염증 반응에 의해서 더욱 악화된다. 여드름의 발생 과정을 살펴보면 과도한 피지가 모낭에 축적되어서 여드름균이 활성화되고 염증이 유발된다.Acne and hair loss, which are skin troubles other than simple sebum hypersecretion, are further exacerbated by the minute inflammatory reaction of the skin. If you look at the development of acne, excess sebum accumulates in the hair follicle, activating acne bacteria and causing inflammation.

그러나, 이와 같이 피부에 안전한 천연 소재로서 피지 분비를 근본적인 원인을 통해서 감소시키고, 동시에 염증작용을 완화해 주는 원료는 많지 않은 실정이다.However, there are not many raw materials that can reduce sebum secretion as a skin-safe natural material through fundamental causes and at the same time to relieve inflammation.

아토피성 피부염의 증상은 피부 발적, 피부 부종, 물집, 궤양과 심한 가려움을 동반한다. 치료하지 않으면 피부는 피부 반응을 촉진시키는 물질에 계속 노출되어 접촉 피부염이 오랫동안(만성) 지속되는 상태가 될 수 있다. 만성 접촉 피부염은 피부가 두꺼워지고 잘 벗겨지며 건조해지면서 색이 변하고 모발의 소실까지 생긴다.Symptoms of atopic dermatitis accompany skin eruptions, skin edema, blisters, ulcers and severe itching. Untreated, the skin may continue to be exposed to substances that promote skin reactions, leading to prolonged (chronic) persistence of contact dermatitis. Chronic contact dermatitis is thickened and peeled off the skin, drying and changing color and even loss of hair.

아토피성 피부염은 상당히 많은 사람들이 앓고 있는데 전 인구의 0.5~1%, 어린이의 경우 5~10%가 고통을 받고 있다. 증상이 나타나는 시기는 대체로 생후 2~6개월이며, 특히 1세 미만에서 가장 많이 나타나고 85%가 만 다섯 살 안에 나타난다. 보통 어릴 때 잠시 앓는 병이라고 알려져 있으나 환자의 50%는 두 돌 이내에 없어지나 25%는 청소년기까지 가며, 나머지 25%는 성인이 되어도 없어지지 않고 계속된다.Atopic dermatitis is suffering from a fairly large number of people suffering from 0.5 to 1% of the population and 5 to 10% of children. Symptoms usually appear 2 to 6 months after birth, especially when they are under 1 year of age and 85% are within 5 years of age. It is usually known to be a short-lived disease at a young age, but 50% of the patients disappear within two months, 25% go to adolescence, and the remaining 25% continue to be adults.

이에, 최근 아토피성 피부에 자극 없이 안심하고 사용할 수 있는 인체 세정제, 헤어 샴푸, 헤어 컨디셔너 등의 피부 외용제 조성물의 수요가 증가하고 있으며, 이와 더불어 아토피성 피부의 상태를 개선하는 항소양 또는 항염 효과를 가진 제품의 다양한 연구가 활발히 진행되고 있다.Recently, there has been an increasing demand for a composition for external application for skin such as a human body cleansing agent, a hair shampoo and a hair conditioner, which can be safely used without being irritated to atopic skin. In addition, the amount of an anti- Various researches of the products having been developed have been actively carried out.

사람의 모발은 약 10~15만개로, 각각의 모발은 서로 다른 주기를 거쳐 성장, 퇴화를 반복한다. 모발은 성장하는 성장기(Anagen), 성장기가 끝나고 모발의 형태를 유지하면서 대사 과정이 느려지는 퇴행기(Catagen) 및 모유두가 위축되고 모낭이 차츰 위축되어 모근이 위쪽으로 밀려 올라가 모낭이 작아지는 휴지기(Telogen)의 3단계의 주기를 반복하는데, 이와 같은 모발의 주기 및 수명은 영양 상태, 병력, 유전, 체질, 호르몬 분비 또는 노화 등 다양한 조건에 따라 변화할 수 있다.A person's hair is about 10 to 150 thousand, and each hair repeats growth and degeneration through different cycles. The hair grows in the growing anagen, the catagen which slows the metabolism while maintaining the shape of the hair, and the catagen that slows down the papillary and the hair follicle is gradually contracted and the hair follicles are pushed upward, ). The cycle and lifespan of such hair may vary depending on various conditions such as nutritional status, history, genetics, constitution, hormone secretion or aging.

탈모는 자연적 과정들을 통해 발생하거나, 암과 같은 증상들을 경감시키기 위해 고안된 특정 치료 약물의 사용에 의해 화학적으로 촉진되는 문제이다. 이러한 탈모는 부분적 또는 완전한 대머리를 유발하는 모발 재성장의 결여를 수반한다. 이에, 환경 오염, 스트레스, 다이어트, 피로, 올바르지 않은 식습관 등으로 인해 탈모증을 가진 현대인이 많아짐에 따라 심각한 정신적 고통을 겪고 있는 남성 또는 여성이 증가하고 있는 상황이다.Hair loss is a problem that occurs through natural processes or is chemically facilitated by the use of certain therapeutic drugs designed to alleviate symptoms such as cancer. This hair loss involves a lack of hair regrowth leading to partial or complete baldness. As a result, the number of men or women suffering from severe mental suffering is increasing due to the increasing number of modern people with alopecia due to environmental pollution, stress, diet, fatigue, and inadequate eating habits.

최근에는 물리적, 화학적 및 환경적인 다양한 요인에 의하여 비듬, 두피 가려움증 등의 두피 트러블을 가진 사람이 차츰 증가하고 있으며, 이에 따라 이를 해결하기 위한 다양한 시도가 있으며, 구체적으로는 모발 및 두피 제품에 비듬방지, 항균, 두피자극완화, 가려움 방지 등의 부가적 성분을 첨가하거나, 샴푸 제품의 사용 전 또는 후에 사용하는 제품들이 연구되고 있다.In recent years, people with scalp troubles such as dandruff and scalp itching due to various physical, chemical and environmental factors have been gradually increasing. Accordingly, there have been various attempts to solve this problem. Specifically, hair and scalp products , Anti-bacterial, anti-irritation of the scalp, and itching prevention, or products used before or after use of the shampoo product are being studied.

녹차는 차나무(Camellia sinensis)의 잎을 사용하는 것으로, 의학적 음료 및 건강 음료로서 소비되고 있으며, 녹차의 의학적인 효과는 주로 녹차의 플라보노이드계 성분에 기인한 것이다.Green tea uses leaves of Camellia sinensis , and is consumed as a medical drink and health drink. The medical effect of green tea is mainly due to the flavonoid component of green tea.

종래 녹차씨의 추출물에 관하여 항염 또는 항암 효능, 항산화 활성 등에 대하여 사용된 바 있으나, 통상의 녹차씨가 아닌 발아 상태의 녹차씨 추출물의 전반적 피부 효능에 대하여는 보고된 바 없다.
Conventionally, the extract of green tea seeds has been used for anti-inflammatory or anticancer activity, antioxidant activity, etc. However, there has been no report on the overall skin effect of green tea seed extract in a germinated state other than ordinary green tea seeds.

대한민국공개특허공보 제10-2010-0112915호Korean Patent Publication No. 10-2010-0112915

이에 본 발명자들은 발아 녹차씨 추출물 또는 발아 녹차씨 아임계 추출물을 유효성분으로 함유하는 경우 피부 전반적 상태 개선에 대한 높은 효과를 가지는 점을 발견하고 본 발명을 완성하였다. Accordingly, the inventors of the present invention found that a ginseng seed extract or a germinated green tea seed extract as an active ingredient has a high effect on improving the overall condition of the skin, and completed the present invention.

따라서 본 발명은 발아 녹차(Camellia sinensis)씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 발아 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유하여 피부 보호, 항노화, 항주름, 피부 탄력 개선, 미백, 피부 보습, 아토피 등의 피부 건조 질환의 예방 및 개선, 피지 조절, 항염증, 여드름 등의 피부 트러블 예방 또는 개선, 피부 혈색 개선, 각질 제거, 탈모 예방, 항비듬 용도에 있어서 뛰어난 효과를 갖는 피부 외용제 조성물을 제공함을 목적으로 한다.
Accordingly, the present invention relates to a composition for external application for skin containing an extract of Camellia sinensis seeds as an active ingredient, and more particularly to a composition for external application for skin comprising germinated green tea seed extract as an active ingredient to provide skin protection, anti-aging, anti- It is an excellent effect in prevention and improvement of skin dryness diseases such as improvement, whitening, skin moisturization and atopy, prevention and improvement of skin trouble such as sebum control, anti inflammation and acne, improvement of skin color, exfoliation, hair loss prevention and anti dandruff To provide a skin external application composition.

상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 발아 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부외용제 조성물을 제공한다.In order to accomplish the above object, the present invention provides a composition for external application for skin comprising germinated green tea seed extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 발아 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 보호용 피부 외용제 조성물을 제공한다.The present invention also provides a composition for external skin for skin protection comprising germinated green tea seed extract as an active ingredient.

또한 본 발명은 발아 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 예방 또는 개선용 피부 외용제 조성물을 제공한다.The present invention also provides a composition for external application for skin for preventing or ameliorating skin aging comprising germinated green tea seed extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 발아 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 예방 또는 개선용 피부 외용제 조성물을 제공한다.The present invention also provides a composition for external application for skin for preventing or improving skin wrinkles containing ginga green tea seed extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 발아 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 탄력 개선용 피부 외용제 조성물을 제공한다.The present invention also provides a composition for external application for skin for improving skin elasticity, which comprises germinated green tea seed extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 발아 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 피부 외용제 조성물을 제공한다.The present invention also provides a composition for external skin application for skin whitening comprising germinated green tea seed extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 발아 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 피부 외용제 조성물을 제공한다.The present invention also provides a composition for external application for skin for moisturizing skin, which comprises germinated green tea seed extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 발아 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 각질 제거용 피부 외용제 조성물을 제공한다.The present invention also provides a composition for external application for skin exfoliating comprising germinated green tea seed extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 발아 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 피지 조절용 피부 외용제 조성물을 제공한다.The present invention also provides a composition for external skin application for skin sebum control comprising germinated green tea seed extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 발아 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 염증 예방 또는 개선, 또는 자극 완화용 피부 외용제 조성물을 제공한다.Further, the present invention provides a composition for external application for skin for preventing or ameliorating inflammation, or for relieving irritation, comprising germinated green tea seed extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 발아 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 여드름을 포함하는 피부 트러블 예방 또는 개선용 피부 외용제 조성물을 제공한다.The present invention also provides a composition for external application for skin for preventing or ameliorating skin troubles comprising acne containing ginger green tea seed extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 발아 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 혈색 개선용 피부 외용제 조성물을 제공한다.The present invention also provides a composition for external application for skin for improving skin color, which comprises germinated green tea seed extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 발아 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 탈모 예방용 피부 외용제 조성물을 제공한다.Further, the present invention provides a composition for external application for skin for preventing hair loss comprising germinated green tea seed extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 발아 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 항비듬용 피부 외용제 조성물을 제공한다.The present invention also provides a composition for external dermatological use for dandruff comprising a germinated green tea seed extract as an active ingredient.

본 발명은 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 피지 감소, 모공 축소 및 여드름 개선용 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for external application for skin for reducing sebum, reducing pores and improving acne, containing green tea seed extract as an active ingredient.

또한 본 발명은 발아 녹차씨의 아임계 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.The present invention also relates to a composition for external application for skin containing a subcritical extract of germinated green tea as an active ingredient.

이하, 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described more specifically.

본 발명에서 사용되는 녹차씨는 발아 상태의 녹차씨인 것을 특징으로 한다. 발아 녹차씨를 사용함으로써 생명 현상 유지에 필요한 성분의 함량이 높아지기 때문에 피부 전반 상태 개선에 있어서 매우 우수한 효과를 얻을 수 있다. 상기 녹차씨의 발아에 있어서는 당업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하며, 예를 들면 15~20℃, 바람직하게는 18℃가 유지된 상태에서 수분을 함유한 솜 위에서 수분을 유지시키며 15~20일 유지시킨 후, 명조건과 암조건을 반복처리 하여 발아시킬 수 있다. 이 때, 명조건은 12~13시간이며 암조건은 11~12시간으로, 바람직하게는 명조건 12시간이며 암조건 12시간으로 15~20일간 배양하여 발아시킨다. The green tea seeds used in the present invention are green tea seeds germinated. By using germinated green tea seeds, the content of the components necessary for vital phenomenon maintenance is increased, so that a very excellent effect can be obtained in improving the overall condition of the skin. The germination of the green tea seeds is carried out according to a method commonly used in the art, for example, maintaining moisture at 15 to 20 ° C, preferably 18 ° C, And then germinated by repeating the light condition and the dark condition. At this time, the light condition is 12 to 13 hours, and the dark condition is 11 to 12 hours, preferably 12 hours of light condition, and germination is carried out for 15 to 20 days in dark condition for 12 hours.

상기 녹차씨 추출물의 추출은 당업계에 통상의 추출방법에 의해 제조될 수 있으며, 바람직하게는 용매 추출법, 초임계 추출법 또는 아임계 추출법에 의할 수 있고, 아임계 추출법에 의하는 것이 보다 바람직하다. The green tea seed extract may be prepared by a conventional extraction method in the art, preferably by a solvent extraction method, a supercritical extraction method or a subcritical extraction method, and more preferably by a subcritical extraction method .

아임계 추출법(subcritical extraction)은 용매의 액체와 기체 상태가 공존하는 임계점 이하의 온도 및 압력 범위의 조건에서 이를 추출용매로 사용하는 추출법으로서, 본 발명에서는 상기 용매로 물을 사용한다. 초임계 추출법에서는 이산화탄소를 사용하기 때문에 극성물질의 추출을 위해서는 보조 용매로서 유기용매를 사용해야 하는 것에 비해, 아임계 추출에 있어서는 이러한 부가적인 보조 유기용매가 필요하지 않는 장점을 가지며, 물을 추출용매로 사용하기 때문에 가수분해 반응도 진행할 수 있는 특징을 갖는다. 이러한 아임계 추출법에 의함으로써 고순도의 추출물을 얻을 수 있기 때문에 발아 녹차씨의 아임계 추출물을 함유하는 경우에 피부 전반 개선에 있어 보다 우수한 효과를 얻을 수 있다.Subcritical extraction is an extraction method in which the solvent is used as an extraction solvent under the conditions of a temperature and a pressure range below a critical point at which a liquid and a gaseous state of a solvent coexist. In the present invention, water is used as the solvent. Since the supercritical extraction method uses carbon dioxide, it is advantageous to use an organic solvent as an auxiliary solvent for the extraction of the polar substance, but does not require such additional auxiliary organic solvent in the subcritical extraction. The hydrolysis reaction can also proceed. By using the subcritical extraction method, it is possible to obtain a high purity extract. Therefore, when the subcritical extract of germinated green tea is contained, a better effect can be obtained in improving the overall skin.

본 발명에서 사용되는 아임계 추출법에 의한 녹차씨 추출물은 구체적으로 다음과 같이 제조할 수 있다. 녹차씨를 준비한 후 아임계 추출장치를 이용해서 50~200MPa, 바람직하게는 100MPa의 고압에서 녹차씨를 분해하여 유효 성분을 추출한다. 50MPa 미만의 압력에서는 유효 성분들이 충분히 추출되지 않고, 200MPa 초과 압력에서는 고압 대비 유효 성분 추출 증가량이 미미하기 대문에 상기 범위의 압력에서 추출한다. 추출 후 1.2㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번, 0.45㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번, 0.2㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번 필터링하여 이물질 및 미생물을 제거하여 녹차씨 아임계 추출물을 제조할 수 있다.The green tea seed extract according to the subcritical extraction method used in the present invention can be specifically prepared as follows. Green tea seeds are prepared, and then the green tea seeds are decomposed at a high pressure of 50 to 200 MPa, preferably 100 MPa by using a subcritical extraction device to extract an effective ingredient. The effective components are not sufficiently extracted at a pressure of less than 50 MPa and the increase in the extraction of the active ingredient is insignificant compared with the high pressure at a pressure exceeding 200 MPa. After extraction, it is filtered once with a filter having a 1.2 μm gap, once with a filter having a 0.45 μm gap and once with a filter having a 0.2 μm gap to remove foreign matter and microorganisms, thereby preparing a green tea cryopreserved extract.

본 발명의 녹차씨 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.001~50 중량%, 바람직하게는 0.1~10 중량%로 함유할 수 있다. 0.001중량% 미만인 경우 그 효과가 미미하고, 50 중량%을 초과하는 경우 부작용과 제형 내 용해도 등의 문제점이 발생할 수 있기 때문이다.The green tea seed extract of the present invention may be contained in an amount of 0.001 to 50% by weight, preferably 0.1 to 10% by weight based on the total weight of the composition. If the amount is less than 0.001% by weight, the effect is insignificant, and if it exceeds 50% by weight, problems such as side effects and solubility in the formulation may occur.

본 발명에 의한 조성물은 발아 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 피부 보호, 항노화, 항주름, 피부 탄력 개선, 미백, 피부 보습, 아토피 등의 피부 건조 질환의 예방 및 개선, 피지 조절, 항염증, 여드름 등의 피부 트러블 예방 또는 개선, 피부 혈색 개선, 각질 제거, 탈모 예방 및 항비듬 효능을 가진다.The composition according to the present invention is effective for preventing and improving skin dryness diseases such as skin protection, anti-aging, anti wrinkle, skin elasticity improvement, whitening, skin moisturizing and atopy, sebum control, , Prevent or improve skin troubles such as acne, improve skin color, exfoliate, prevent hair loss, and have anti-dandruff efficacy.

본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 활성산소의 생성을 억제하고 활성산소에 의해 유발된 산화적 손상을 억제하는 효능이 있는 발아 녹차씨 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 활성산소 또는 자외선 등에 의한 세포의 손상을 예방할 수 있고, 이를 통해 피부를 보호할 수 있다. 또한, 활성산소 또는 자외선에 의한 노화의 진행을 억제할 수 있다. 또한, 발아 녹차씨 추출물은 COX-2의 생합성을 억제함으로써 염증을 예방 또는 개선시킬 수 있고, 이를 통해 피부 트러블을 완화시킬 수 있으며, 상기 피부는 두피를 포함한다. 즉, 본 명세서에 개시된 발아 녹차씨 추출물은, 두피 또는 모발에서 발생하는 활성산소 또는 자외선 등에 의한 세포의 손상을 예방하고, 두피의 염증을 예방 또는 개선시키며, 퍼머나 염색 등에 의한 두피의 자극을 완화시키는 용도로 사용될 수 있다.The composition for external application for skin according to the present invention contains gingko green tea extract having an effect of inhibiting the production of active oxygen and inhibiting oxidative damage induced by active oxygen as an active ingredient, thereby inhibiting cell damage caused by active oxygen or ultraviolet rays It can prevent and protect the skin through this. Further, progress of aging by active oxygen or ultraviolet rays can be suppressed. In addition, the germinated green tea seed extract can prevent or ameliorate inflammation by inhibiting the biosynthesis of COX-2, thereby alleviating skin troubles, and the skin includes the scalp. In other words, the germinated green tea seed extract disclosed in the present specification can prevent cellular damage caused by active oxygen or ultraviolet rays generated from the scalp or hair, prevent or improve inflammation of the scalp, alleviate stimulation of the scalp by perming or dyeing As shown in FIG.

따라서 본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 피부 손상을 억제하여 피부 보호용인 것을 특징으로 하며, 상기 피부는 두피 또는 모발을 포함할 수 있다. 상기 피부 보호는 산화 또는 자외선에 의한 피부 손상을 억제함으로써 피부를 보호하는 것을 특징으로 한다.Accordingly, the composition for external application for skin according to the present invention is characterized in that it is for skin protection by suppressing skin damage, and the skin may include scalp or hair. The skin protection is characterized by protecting the skin by inhibiting skin damage caused by oxidation or ultraviolet rays.

또한 본 발명의 피부 외용제 조성물은 피부 노화 예방 또는 개선용인 것을 특징으로 한다. 상기 피부 노화 예방 또는 개선은 산화 또는 자외선에 의한 피부 손상 억제, 콜라겐 생성 촉진 또는 매트릭스 메탈로프로테이나아제 I(MMP-1)의 생합성 저해를 통해 달성될 수 있다.In addition, the composition for external application for skin of the present invention is characterized in that it is for preventing or improving skin aging. The prevention or improvement of skin aging can be attained through inhibition of skin damage caused by oxidation or ultraviolet rays, promotion of collagen production, or inhibition of biosynthesis of matrix metalloproteinase I (MMP-1).

또한 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 콜라겐 생성 촉진 또는 매트릭스 메탈로프로테이나아제 I(MMP-1)의 생합성 저해를 통해 피부 주름을 예방 또는 개선시킬 수 있다.In addition, the composition for external application for skin according to the present invention can prevent or improve the wrinkles of the skin through promotion of collagen production or inhibition of biosynthesis of matrix metalloproteinase I (MMP-1).

또한 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 피부 탄력 개선용인 것을 특징으로 한다.Further, the composition for external application for skin according to the present invention is characterized in that it is for improving skin elasticity.

또한 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 멜라닌의 생성을 억제함으로써 피부 미백 효과를 나타낼 수 있다. 따라서 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 피부 미백용인 것을 특징으로 한다.In addition, the composition for external application for skin according to the present invention can exhibit skin whitening effect by inhibiting the production of melanin. Accordingly, the composition for external application for skin according to the present invention is characterized by being for skin whitening.

또한 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 피부 보습용인 것을 특징으로 한다. 상기 피부 보습은 본 발명의 발아 녹차씨 추출물이 각질형성세포의 분화를 촉진함으로써, 오래된 각질세포의 탈락과 새로운 각질세포의 생성 과정인 「표피 세포의 분화」 또는 「각화(keratinization)」과정을 돕고, 따라서 각질을 효과적으로 제거할 수 있는 효능을 가지며, 각질층의 생성-탈락속도(turn-over rate)를 정상 범위로 유지함으로써 각질층의 보습인자와 지질의 양을 정상적으로 유지할 수 있도록 하기 때문에, 각질 형성 세포의 분화 촉진 또는 트랜스 글루타미네이즈 발현 촉진을 통해 피부 수분을 유지하는 것을 통하여 달성될 수 있다. 또한 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 아토피 또는 건선을 포함하는 피부 건조 질환 예방 또는 개선용인 것을 특징으로 한다. 또한 이를 통하여 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 각질 제거용인 것을 특징으로 한다. Further, the composition for external application for skin according to the present invention is characterized in that it is for moisturizing the skin. In the skin moisturization, the germinated green tea seed extract of the present invention promotes the differentiation of keratinocytes, thereby helping to eliminate the old keratinocytes and the process of "differentiation of epidermal cells" or "keratinization" Thus, it is possible to effectively maintain the amount of the moisturizing factor and lipid in the stratum corneum by keeping the turn-over rate of the stratum corneum in the normal range, Or promoting the transglutaminase expression in the skin of the recipient. Further, the composition for external application for skin according to the present invention is characterized in that it is for preventing or improving skin dryness diseases including atopic or psoriasis. In addition, the composition for external application for skin according to the present invention is used for exfoliation.

또한 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 피부의 피지 조절용인 것을 특징으로 한다. 보다 구체적으로는 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 피지 분비를 억제함으로써, 피지의 과다 분비에 의한 여드름, 모공 확대, 지루성 피부염 등을 예방 또는 개선할 수 있다.In addition, the composition for external application for skin according to the present invention is characterized in that it is for controlling skin sebum. More specifically, the composition for external application for skin according to the present invention can prevent or improve acne, pore enlargement, seborrheic dermatitis, and the like due to excessive sebum secretion by suppressing sebum secretion.

또한 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 염증의 예방 또는 개선, 또는 자자 완화용인 것을 특징으로 하며, 상기 피부는 두피를 포함한다.In addition, the composition for external application for skin according to the present invention is characterized in that it is for preventing or improving inflammation, or for alleviating self-irritation, and the skin includes scalp.

또한 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 여드름을 포함하는 피부 트러블 예방 또는 개선용인 것을 특징으로 하며, 상기 피부는 두피를 포함한다.In addition, the composition for external application for skin according to the present invention is characterized in that it is for preventing or improving skin troubles including acne, and the skin includes scalp.

또한 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 피부 혈색 개선용인 것을 특징으로 한다. Further, the composition for external application for skin according to the present invention is characterized by being for improving skin color.

또한 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 탈모 예방용인 것을 특징으로 하며, 상기 탈모 예방은 육모증진 효과를 통해 달성될 수 있다.In addition, the composition for external application for skin according to the present invention is characterized in that it is for preventing hair loss, and prevention of hair loss can be achieved through hair growing enhancement effect.

또한 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 항비듬용인 것을 특징으로 한다.The composition for external application for skin according to the present invention is characterized by being anti-dandruff.

본 발명에 따른 조성물은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화 될 수 있다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로서, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한 포말(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.The composition according to the invention may be formulated containing a cosmetically or dermatologically acceptable medium or base. These are all formulations suitable for topical application, for example as a solution, a gel, a solid, a paste anhydrous product, an emulsion obtained by dispersing an oil phase in water, a suspension, a microemulsion, a microcapsule, a microgranule or an ionic form (liposome) In the form of ionic fibrin dispersions, or in the form of creams, skins, lotions, powders, ointments, sprays or conical sticks. It can also be used in the form of a foam or in the form of an aerosol composition further containing a compressed propellant. These compositions may be prepared according to conventional methods in the art.

또한 본 발명에 의한 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.In addition, the composition according to the present invention may further comprise at least one selected from the group consisting of fatty substances, organic solvents, solubilizers, thickening agents, gelling agents, softening agents, antioxidants, suspending agents, stabilizing agents, Such as fillers, emulsifiers, emulsifiers, fillers, sequestering agents, chelating agents, preservatives, vitamins, blockers, moisturizers, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, lipid vesicles or any other ingredient commonly used in cosmetics May contain adjuvants commonly used in the field of cosmetics or dermatology. Such adjuvants are introduced in amounts commonly used in the cosmetics or dermatological fields.

또한, 본 발명의 조성물은 피부 개선 효과를 증가시키기 위하여 피부 흡수 촉진 물질을 함유할 수 있다. In addition, the composition of the present invention may contain a skin absorption promoting substance to increase the skin improving effect.

또한, 본 발명의 조성물은 상기 발아 녹차씨 추출물 외에 본 발명의 목적을 손상시키지 않는 범위 내에서 바람직하게는 상기 피부 보호 효과에 상승효과를 줄 수 있는 다른 성분들을 함유할 수 있다.
In addition, the composition of the present invention may contain other ingredients that can synergize the skin protection effect, in addition to the germicidal green tea seed extract, within the range not impairing the object of the present invention.

본 발명의 발아 녹차씨 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물은 발아 녹차씨 추출물의 특성으로 인해 피부 보호, 항노화, 항주름, 피부 탄력 개선, 미백, 피부 보습, 아토피 등의 피부 건조 질환의 예방 및 개선, 피지 조절, 항염증, 여드름 등의 피부 트러블 예방 또는 개선, 피부 혈색 개선, 각질 제거, 탈모 예방, 항비듬에 있어서 우수한 효과를 가지며, 미발아 녹차씨 추출물에 비하여 현저히 우수한 효과를 나타낸다. 또한 상기 발아 녹차씨 추출물을 아임계 추출법에 의해 얻음으로써 유효성분을 고순도로 얻을 수 있어 상기의 효과에 있어서 보다 더 우수한 효과를 나타내는 조성물을 제공할 수 있다.
The composition for external application for skin containing ginga green tea seed extract of the present invention is characterized by the characteristics of ginger green tea seed extract to prevent and improve skin dryness diseases such as skin protection, anti-aging, anti wrinkle, skin elasticity improvement, whitening, skin moisturizing, , Skin irritation such as sebum control, antiinflammation and acne, improvement of skin color, exfoliation, prevention of alopecia, and anti dandruff. Further, by obtaining the germinated green tea seed extract by the subcritical extraction method, an effective ingredient can be obtained in a high purity, thereby providing a composition exhibiting a more excellent effect in the above effect.

이하 본 발명을 실시예 및 시험예에 의해 보다 구체적으로 설명하나, 이는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것일 뿐 본 발명의 범위가 이들 예로 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples and Test Examples. However, the present invention is not intended to limit the scope of the present invention.

[제조예 1] 발아 녹차씨 추출물의 제조[Preparation Example 1] Preparation of germinated green tea seed extract

18℃가 유지된 상태에서 수분을 함유한 솜 위에서 수분을 유지시키며, 명조건 12시간, 암조건 12시간으로 15~20일간 배양하여 발아시킨다. Maintain moisture on cotton containing water at 18 ℃, germinate by incubating for 12 ~ 12 hours under dark condition and for 15 ~ 20 days under dark condition.

상기 발아 녹차씨를 열풍 건조후, 분쇄하여 100mesh 사이즈로 분쇄하고, 정제수 30%, 알코올 70% 용매에 넣고 25℃에서 6시간 환류 추출하여 활성 성분들을 추출하였다. 추출 후에 1.2㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번, 0.45㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번 필터링을 하여 이물질을 제거하였다.
The germinated green tea seeds were pulverized by a hot air drying process, pulverized to a size of 100 mesh, subjected to reflux extraction at 25 ° C for 6 hours in purified water 30%, alcohol 70% solvent, and extracted with active ingredients. After the extraction, the filter was once filtered with a filter having a 1.2 mu m vacancy and once with a filter having a 0.45 mu m vacancy to remove foreign matter.

[제조예 2] 발아 녹차씨 아임계 추출물의 제조[Preparation Example 2] Preparation of germinated green tea cyanide extract

상기 제조예 1와 동일한 방법으로 수득한 발아 녹차씨를 아임계 추출장치를 이용하여 100MPa의 고압에서 유효 성분을 추출하였다. 추출 후 1.2㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번, 0.45㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번 필터링하여 이물질 및 미생물을 제거하여 발아 녹차씨 아임계 추출물을 얻었다.
The germinated green tea seeds obtained in the same manner as in Preparation Example 1 were extracted with an active ingredient at a high pressure of 100 MPa using a subcritical extraction device. After extraction, the filter was filtered once with a filter having a pore size of 1.2 mu m and once with a filter having a pore size of 0.45 mu m to remove foreign matter and microorganisms, thereby obtaining germinated green tea crayfish extract.

[비교제조예 1] 미발아 녹차씨 추출물의 제조[Comparative Preparation Example 1] Preparation of Muglia green tea seed extract

발아 상태가 아닌 녹차씨를 열풍 건조후, 분쇄하여 100mesh 사이즈로 분쇄하고, 정제수 30%, 알코올 70% 용매에 넣고 25℃에서 6시간 환류 추출하여 활성 성분들을 추출하였다. 추출 후에 1.2㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번, 0.45㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번 필터링을 하여 이물질을 제거하였다.
Green tea seeds, which were not germinated, were dried in hot air, pulverized, and ground into 100 mesh size. The extracts were extracted with 30% purified water and 70% alcohol solvent at 25 ° C for 6 hours to extract active components. After the extraction, the filter was once filtered with a filter having a 1.2 mu m vacancy and once with a filter having a 0.45 mu m vacancy to remove foreign matter.

[비교제조예 2] 미발아 녹차씨 아임계 추출물의 제조[Comparative Preparative Example 2] Preparation of a green tea extract of microgalaxy green tea

발아 상태가 아닌 녹차씨를 잘게 파쇄하여 아임계 추출장치를 이용하여 100MPa의 고압에서 유효 성분을 추출하였다. 추출 후 1.2㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번, 0.45㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번 필터링하여 이물질 및 미생물을 제거하여 녹차씨 아임계 추출물을 수득하였다.
Green tea seeds, which are not germinated, are finely crushed and an active ingredient is extracted at a high pressure of 100 MPa using a subcritical extraction device. The extract was filtered once with a filter having a pore size of 1.2 mu m and once with a filter having a pore size of 0.45 mu m to remove foreign matter and microorganisms, thereby obtaining a green tea cryorescent extract.

[시험예 1] 항산화 효과 시험 (DPPH 테스트) [Test Example 1] Antioxidant effect test (DPPH test)

발아 녹차씨 추출물의 항산화 효과를 알아보기 위하여, 유리 라디칼인 DPPH(1,1-디페닐-2-피크릴하이드라질; 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl)의 환원에 의해(항산화제는 산화됨) 발생되는 흡광도의 변화를 통해 DPPH 산화 억제 효능을 비교 측정함으로써 항산화능을 평가하는 방법으로 수행하였다. 즉, 제조예 1~2 및 비교제조예 1~2에서 수득한 발아 녹차씨 및 미발아 녹차씨 추출물에 대해 DPPH의 산화가 억제되어 흡광도가 대조군에 비해 감소되는 정도를 측정하여, 대조군의 흡광도에 비해서 50％ 이하의 흡광도를 나타내는 농도를 유효 항산화 농도로 평가하였다.To investigate the antioxidative effect of germination green tea seed extract, the reduction of free radical DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) Oxidized), and the antioxidant activity was evaluated by comparing the DPPH antioxidant effect with the change of absorbance. That is, the oxidation of DPPH was inhibited in the ginga green tea seeds and the Muglia green tea seed extracts obtained in Production Examples 1 and 2 and Comparative Production Examples 1 and 2 to measure the degree of decrease in absorbance as compared with the control, Concentration of absorbance of 50% or less was evaluated as effective antioxidant concentration.

100μM(in 에탄올) DPPH 용액 190㎕와 상기에서 수득한 제조예 1~2 및 비교제조예 1~2의 추출물 및 양성 대조군을 각각 10㎕씩 넣어 반응액을 만들고 37℃에서 30분간 반응시킨 후 540nm에서 흡광도를 측정하였다. 상기 양성 대조군으로는 항산화 효과 비교에 널리 사용하고 있는 항산화제인 비타민 C를 사용하였다. 각 물질의 DPPH 분석 결과는 하기 표 1에 나타내었으며, IC₅₀은 첨가한 시료에 의해 흡광도가 50％ 감소했을 때의 시료 농도를 의미한다.The reaction solution was prepared by adding 190 μl of 100 μM (in ethanol) DPPH solution, 10 μl of each of the extracts of Production Examples 1 and 2 and Comparative Preparations 1 and 2 obtained above and 10 μl of the positive control, reacted at 37 ° C. for 30 minutes, The absorbance was measured. As the positive control group, vitamin C, which is an antioxidant widely used for comparison of antioxidative effects, was used. The DPPH analysis results of each substance are shown in Table 1 below, and IC ₅₀ means the sample concentration when the absorbance was reduced by 50% by the added sample.

시험물질Test substance IC₅₀ (ppm)IC ₅₀ (ppm) 비타민 CVitamin C 16.316.3 발아 녹차씨 추출물(제조예 1)Green tea seed extract (Preparation Example 1) 24.724.7 발아 녹차씨 아임계 추출물(제조예 2)Germinated green tea cyanide extract (Preparation Example 2) 18.218.2 미발아 녹차씨 추출물(비교제조예 1)Green tea seed extract (Comparative Production Example 1) 60.560.5 미발아 녹차씨 아임계 추출물(비교제조예 2)Green tea extract (Comparative Preparation Example 2) 44.144.1

상기 표 1에서 확인할 수 있는 바와 같이, 제조예 1~2의 발아 녹차씨 추출물은 양성 대조군으로 사용한 비타민 C와 비교하여 우수한 효능 효과를 나타내었으며, 비교제조예 1~2의 미발아 녹차씨 추출물과 비교하였을 때 2배 이상의 항산화 효능을 나타내었다. 따라서, 본 발명에 따른 발아 녹차씨 추출물은 항산화 효과가 뛰어남을 알 수 있었다.
As can be seen from the above Table 1, the germinated green tea seed extracts of Preparation Examples 1 and 2 showed excellent efficacy as compared with the vitamin C used as the positive control. The antioxidant effect was more than twice as high as that of the control. Therefore, the germinated green tea seed extract according to the present invention has excellent antioxidative effect.

[시험예 2] 단 세포 겔 전기영동(Single cell gel electrophoresis ; SCGE, Comet assay)에 의한 DNA 산화적 손상에 대한 억제 활성[Test Example 2] Inhibitory activity against DNA oxidative damage by single cell gel electrophoresis (SCGE, Comet assay)

사람의 정상 섬유아세포(자체 일차 배양)를 24시간 배양한 후 제조예 1~2, 비교제조예 1~2에 따라 제조된 추출물과 비타민 E를 각각 농도별로 처리하고, 12시간 후에 양성대조군인 H₂O₂(최종농도 10-3M)를 처리한 다음 전기영동법으로 염색한 결과를 형광현미경으로 관찰하였다. 이때 이미지 아날라이저(image analyzer)인 KOMET 3.1(Kinetic Imaging, England)를 사용하여 25개의 각 세포에서 DNA 절단의 결과로 나타난 테일(tail)의 길이(um)를 분석하였으며, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.After the human normal fibroblasts (their primary cultures) were cultured for 24 hours, the extracts prepared according to Preparation Examples 1 to 2 and Comparative Preparation Examples 1 to 2 and vitamin E were treated at respective concentrations. After 12 hours, the positive control group, H ₂ O ₂ (final concentration: 10-3 M), and then stained with electrophoresis. The result was observed with a fluorescence microscope. At this time, the length (um) of the tail, which is the result of DNA cleavage in each of 25 cells, was analyzed using an image analyzer, KOMET 3.1 (Kinetic Imaging, England) Respectively.

시험물질Test substance 테일 길이(㎛)Tail length (탆) 저해율(%)Inhibition rate (%) 대조군Control group 323.4323.4 0.0 0.0 제조예 1(10 ppm)Production Example 1 (10 ppm) 257.2257.2 20.5 20.5 제조예 1(100 ppm)Production Example 1 (100 ppm) 214.1214.1 33.8 33.8 제조예 2(10 ppm)Preparation Example 2 (10 ppm) 227.8227.8 29.6 29.6 제조예 2(100 ppm)Production Example 2 (100 ppm) 190.7190.7 41.0 41.0 비교제조예 1(10 ppm)Comparative Preparation Example 1 (10 ppm) 321.1321.1 0.7 0.7 비교제조예 1(100 ppm)Comparative Preparation Example 1 (100 ppm) 312.7312.7 3.3 3.3 비교제조예 2(10 ppm)Comparative Preparation Example 2 (10 ppm) 318.9318.9 1.4 1.4 비교제조예 2(100 ppm)Comparative Preparation Example 2 (100 ppm) 311.2311.2 3.8 3.8 비타민 E (100 ppm)Vitamin E (100 ppm) 189.6189.6 41.4 41.4

상기 표 2의 세포 겔 전기영동에 의한 결과에서, 제조예 1~2에 따라 제조된 발아 녹차씨 추출물과 발아 녹차씨 아임계 추출물은 비교제조예 1~2에 따라 제조된 미발아 녹차씨 추출물과 미발아 녹차씨 아임계 추출물에 비하여 뛰어난 산화적 DNA 손상 억제 활성을 나타내었으며, 이로 인해 본 발명에 의한 발아 녹차씨 추출물이 히드록실 라디칼(.OH)에 의한 DNA 싱글 스트랜드 브레이크(single strand break)를 억제하는 DNA 산화적 손상억제제로서 작용함을 확인할 수 있었다. 이는 두피 또는 모발을 포함하는 피부의 세포의 유전자를 보호하는 중요한 방어 효과이다.
In the results of the cell gel electrophoresis of Table 2, the ginga green tea seed extract and the germinated green tea cetacean extract prepared according to Production Examples 1 and 2 were mixed with the microgalaxy seed extract prepared according to Comparative Preparation Examples 1 and 2 The present invention has shown that the extract of germinated green tea according to the present invention inhibits DNA single strand break by hydroxyl radical (.OH) And inhibit DNA oxidative damage. This is an important protective effect for protecting the genes of cells of the skin including the scalp or hair.

[시험예 3] I형 프로콜라겐 생성 분석(Type I Procollagen assay)[Test Example 3] Type I procollagen assay (Type I procollagen assay)

인체 섬유아세포(자체 일차 배양)를 10⁵CFU 개의 농도로 12공 평판배양기에서 배양한 다음 제조예 1~2 및 비교제조예 1~2에 따라 제조된 추출물을 하기 표3과 같이 포함한 배지로 교체하였다. 배양 3일째 세포를 수확해서(harvest) ELISA 방법으로 생성된 I형 프로콜라겐(type I procollagen)의 양을 정량하였다. 그 결과는 추출물들을 포함하지 않은 음성대조군을 0, 양성대조군을 100으로 하여 측정한 값과 제조예 1~2, 비교제조예 1~2와의 비교치로 산출하였고, 양성 대조군으로 TGF-b(Human Transforming Growth Factor-β1, Roche Co.)를 사용하였다.Human fibroblasts (their primary cultures) were cultured in a 12-well plate incubator at a concentration of 10 ⁵ CFU, and then the extracts prepared according to Preparation Examples 1 and 2 and Comparative Preparation Examples 1 and 2 were replaced with a culture medium containing the following table 3 Respectively. On the third day of culture, the cells were harvested and the amount of type I procollagen produced by ELISA was quantitated. The results were calculated by comparing the values obtained from the negative control group containing no extracts to 0 and the positive control group from 100 and the values obtained by the comparison between the preparation examples 1 to 2 and the comparative preparation examples 1 to 2. The positive control group was TGF-b (Human Transforming Growth Factor-β1, Roche Co.) was used.

타입 Ⅰ 프로콜라겐 생합성(%)Type I Procollagen Biosynthesis (%) 음성 대조군Negative control group 00 제조예 1(1 ppm)Preparation Example 1 (1 ppm) 22.822.8 제조예 1(10 ppm)Production Example 1 (10 ppm) 54.654.6 제조예 2(1 ppm)Preparation Example 2 (1 ppm) 35.635.6 제조예 2(10 ppm)Preparation Example 2 (10 ppm) 70.970.9 비교제조예 1(1 ppm)Comparative Preparation Example 1 (1 ppm) 3.13.1 비교제조예 1(10 ppm)Comparative Preparation Example 1 (10 ppm) 7.87.8 비교제조예 2(1 ppm)Comparative Preparation Example 2 (1 ppm) 6.36.3 비교제조예 2(10 ppm)Comparative Preparation Example 2 (10 ppm) 12.512.5 TGF-b 10ng/mlTGF-b 10 ng / ml 100100

인간 정상 섬유아세포 단층 배양 시스템(Normal human fibroblast monolayer culture system)에서 제조예 1~2의 발아 녹차씨 추출물은 비교제조예 1~2의 미발아 녹차씨 추출물 및 대조군에 비하여 I형 프로콜라겐 생성을 뚜렷하게 촉진시키는 효과를 나타내었다. 즉, 본 발명에 따른 발아 녹차씨 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물은 콜라겐 생성을 촉진하여 인체 피부의 노화에 의해 발생하는 콜라겐 감소 현상을 완화할 수 있다.
In the human normal fibroblast monolayer culture system, the germinated green tea seed extracts of Preparation Examples 1 and 2 exhibited significantly higher production of type I procollagen than the green germ extract of Comparative Production Examples 1 and 2 and the control group Respectively. That is, the composition for external application for skin containing ginga green tea seed extract according to the present invention promotes collagen production, thereby alleviating the collagen reduction phenomenon caused by aging of human skin.

[실시예 1~2 및 비교예 1~3][Examples 1 to 2 and Comparative Examples 1 to 3]

하기 표 4의 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양크림을 제조하였다(단위: 중량%). 실시예 1~2는 제조예 1~2의 발아 녹차씨 추출물을 함유한 제형이고, 비교예 1~2는 비교제조예 1~2의 미발아 녹차씨 추출물을 함유한 제형이며, 비교예 3은 추출물을 함유하지 않는 제형이다.Nutritive creams were prepared according to the composition of Table 4 below in a conventional manner (unit: wt%). Examples 1 and 2 are the formulations containing the germinated green tea seed extracts of Preparation Examples 1 and 2, Comparative Examples 1 and 2 are the formulations containing the ginger green tea seed extract of Comparative Preparation Examples 1 and 2, Comparative Example 3 It is a formulation that does not contain an extract.

배합성분Compounding ingredient 실시예1Example 1 실시예2Example 2 비교예1Comparative Example 1 비교예2Comparative Example 2 비교예3Comparative Example 3 정제수Purified water To 100To 100 To 100To 100 To 100To 100 To 100To 100 To 100To 100 발아 녹차씨 추출물(제조예 1)Green tea seed extract (Preparation Example 1) 1.001.00 -- -- -- -- 발아 녹차씨 아임계 추출물(제조예 2)Germinated green tea cyanide extract (Preparation Example 2) -- 1.001.00 -- -- -- 미발아 녹차씨 추출물(비교제조예 1)Green tea seed extract (Comparative Production Example 1) -- -- 1.001.00 -- -- 미발아 녹차씨 아임계 추출물(비교제조예 2)Green tea extract (Comparative Preparation Example 2) -- -- -- 1.001.00 -- 식물성 경화유Vegetable hydrogenated oil 1.501.50 1.501.50 1.501.50 1.501.50 1.501.50 스테아린산Stearic acid 0.600.60 0.600.60 0.600.60 0.600.60 0.600.60 글리세롤 스테아레이트Glycerol stearate 1.001.00 1.001.00 1.001.00 1.001.00 1.001.00 스테아릴 알코올Stearyl alcohol 2.002.00 2.002.00 2.002.00 2.002.00 2.002.00 폴리글리세릴-10 펜타스테아레이트 & 베헤닐 알코올 & 소디움 스테아로일 락틸에이트Polyglyceryl-10pentastearate and behenyl alcohol and sodium stearoyl lactylate 1.001.00 1.001.00 1.001.00 1.001.00 1.001.00 아라키딜 베헤닐 알코올 &아라키딜글루코사이드Arachidyl behenyl alcohol and arachidyl glucoside 1.001.00 1.001.00 1.001.00 1.001.00 1.001.00 세틸아릴 알코올 & 세테아릴글루코사이드Cetylaryl Alcohol and Cetearyl Glucoside 2.002.00 2.002.00 2.002.00 2.002.00 2.002.00 PEG-100 스테아레이트 & 글리세롤올레이트 & 프로필렌글리콜PEG-100 Stearate & Glycerololate & Propylene Glycol 1.501.50 1.501.50 1.501.50 1.501.50 1.501.50 카프릴릭/카르릭 트리 글리세라이드Caprylic / carboxy triglyceride 11.0011.00 11.0011.00 11.0011.00 11.0011.00 11.0011.00 사이클로메디콘Cyclomedicone 6.006.00 6.006.00 6.006.00 6.006.00 6.006.00 방부제, 향Preservative, incense 적량Suitable amount 적량Suitable amount 적량Suitable amount 적량Suitable amount 적량Suitable amount 트리에탄올 아민Triethanolamine 0.10.1 0.10.1 0.10.1 0.10.1 0.10.1

[시험예 4] 피부 주름 개선 효능 확인 [Test Example 4] Confirmation of skin wrinkle improving effect

본 발명의 조성물에 의한 사람에서의 주름 개선 효과를 확인하기 위하여 상기 실시예 1~2 및 비교예 1~3을 이용하였다. Examples 1 to 2 and Comparative Examples 1 to 3 were used in order to confirm the wrinkle-reducing effect in human by the composition of the present invention.

상기 실시예 1~2 및 비교예 1~3의 주름 개선 효과를 확인하기 위하여 다음과 같이 평가하였다. 40대의 건강한 여성 50명을 각각 실시예 1~2 및 비교예 1~3의 5개 군에 대해 10명씩 5조로 나누어 영양크림을 매일 1회씩 12주간 안면에 도포하게 한 후, 실리콘을 이용하여 레플리카를 떠서 주름의 상태를 피부측정기(visiometer, SV600, Courage+Khazaka electronic GmbH, Germany)로 측정하여 화상분석하였다.In order to confirm the effect of improving the wrinkles of Examples 1 to 2 and Comparative Examples 1 to 3, the following evaluations were made. Fifty women in their 40s were divided into five groups of 10 persons for each of the five groups of Examples 1 and 2 and Comparative Examples 1 to 3, and the nutritional cream was applied once a day for 12 weeks to the face. Then, And the state of the wrinkles was measured with a skin meter (visiometer, SV600, Courage + Khazaka electronic GmbH, Germany).

그 결과는 하기 표 5에 나타내었다. 하기 표 5의 값은, 도포 12주 후의 각각의 변수(parameter)값에서 도포 전 변수값을 뺀 것의 평균을 나타낸 것이다.The results are shown in Table 5 below. The values in Table 5 below are the average values obtained by subtracting the pre-application parameter values from the respective parameter values after 12 weeks of application.

사용 8주 후
임상 결과After 8 weeks of use
Clinical outcome R1R1 R2R2 R3R3 R4R4 R5R5 실시예 1Example 1 -0.30-0.30 -0.21-0.21 -0.14-0.14 -0.10-0.10 -0.09-0.09 실시예 2Example 2 -0.32-0.32 -0.29-0.29 -0.17-0.17 -0.12-0.12 -0.13-0.13 비교예 1Comparative Example 1 0.030.03 0.010.01 0.010.01 0.020.02 0.050.05 비교예 2Comparative Example 2 0.040.04 0.030.03 0.010.01 -0.01-0.01 0.000.00 비교예 3Comparative Example 3 0.010.01 0.020.02 0.000.00 0.040.04 0.080.08

R1 : 주름 등고선의 최고치와 최저치의 차이값R1: Difference between the maximum value and the minimum value of the wrinkle contour line

R2 : 주름 등고선을 임의로 5칸씩 나눈 후 그 중 R1값 들의 평균R2: The wrinkle contour line is arbitrarily divided into 5 squares, and the average of R1 values

R3 : 5개씩 나눈 R1값 중 최고 값R3: the highest value of R1 divided by 5

R4 : 주름 등고선의 베이스라인(baseline)에서 각 각의 꼭대기와 계곡의 값을 뺀 평균값R4: Average value obtained by subtracting the value of each apex and valley from the baseline of the wrinkle contour line

R5 : 주름 등고선의 베이스라인(baseline)에서 각 각의 주름 윤곽을 뺀 값의 차이 값R5: Difference between the baseline of the wrinkle contour line minus the contour of each wrinkle

상기 표 5에서 나타낸 바와 같이, 실시예 1~2의 피부 외용제 조성물은 비교예 1~3에 비해 피부 주름 개선 효과가 매우 우수함을 알 수 있었다.
As shown in Table 5, it was found that the compositions for external application for skin of Examples 1 and 2 were superior to those of Comparative Examples 1 to 3 in improving skin wrinkles.

[시험예 5] 엘라스타아제 활성 억제 효능 측정[Test Example 5] Elastase activity inhibition assay

본 발명의 발아 녹차씨 추출물의 엘라스타아제 활성 저해능을 미발아 녹차씨 추출물 및 양성대조군 포스포라미돈과 비교하여 측정하였다. 사용된 엘라스타아제와 기질은 미국 시그마알드리치 사로부터 상업적으로 구매하였고(Cat.No. E0127), 발아 녹차씨 추출물은 상기 제조예 1~2에 따라 제조한 것을, 녹차씨 추출물은 상기 비교제조예 1~2에 따라 제조한 것을 사용하였다.The inhibitory activity of the germicin green tea seed extract of the present invention on the elastase activity was measured in comparison with the germinated green tea seed extract and the positive control phosphoramidon. The elastase and substrate used were commercially purchased from Sigma-Aldrich Co. (Cat. No. E0127), the germinated green tea seed extract was prepared according to the above Preparation Examples 1 and 2, 1 and 2 were used.

하기의 시험방법으로 엘라스타아제 활성 저해작용을 시험하였다. The elastase activity inhibitory activity was tested by the following test method.

96 웰 플레이트에서 10mg/L Tris-HCL 완충액(pH 8.0)으로 조제한 것에 하기 표 6에 나타낸 시험물질 50μL 및 20㎍/mL 엘라스타아제·타입 III 용액 50μL를 혼합하였다. 포스포라미돈 10ug/ml 은 양성 대조군으로 사용하였으며 음성 대조군인 비처리군은 증류수를 사용하였다. 그 후, 상기 완충액으로 조제한 0.4514㎎/mL N-SUCCINYL-ALA-ALA-ALA-p-NITROANILIDE 100μL를 첨가하고, 25℃에서 15분 반응시켰다. 반응종료 후, 파장 415㎚에 있어서의 흡광도를 측정하였다. 동일한 방법으로 공시험을 행하여 보정하였다.L of Tris-HCl buffer (pH 8.0) was prepared in a 96-well plate, and 50 mu L of the test substance shown in Table 6 and 50 mu L of 20 mu g / mL elastase type III solution were mixed. 10 ug / ml of phosphoramidon was used as a positive control and distilled water was used as a negative control group. Then, 100 μL of 0.4514 mg / mL N-SUCCINYL-ALA-ALA-ALA-p-NITROANILIDE prepared as the buffer solution was added and reacted at 25 ° C. for 15 minutes. After completion of the reaction, the absorbance at a wavelength of 415 nm was measured. A blank test was carried out in the same manner and corrected.

엘라스타아제 활성 저해작용의 계산방법은 하기 수학식 1과 같으며, 결과는 하기 표 6에 나타내었다.The calculation method of the inhibitory activity of the elastase activity is shown in the following Equation 1, and the results are shown in Table 6 below.

A: 실험시료 무첨가, 효소 첨가에서의 파장 415 ㎚에 있어서의 흡광도A: Absorbance at 415 nm at the wavelength of the enzyme addition,

B: 실험시료 무첨가, 효소 무첨가에서의 파장 415 ㎚에 있어서의 흡광도B: absorbance at a wavelength of 415 nm in the absence of the sample added with the enzyme and no addition of the enzyme

C: 실험시료 첨가, 효소 첨가에서의 파장 415 ㎚에 있어서의 흡광도C: Absorbance at wavelength 415 nm in addition of experimental sample and enzyme addition

D: 실험시료 첨가, 효소 무첨가에서의 파장 415 ㎚에 있어서의 흡광도D: absorbance at a wavelength of 415 nm in the addition of an experimental sample and no enzyme addition

화합물compound 억제정도(%)% Inhibition 비처리군Untreated group 00 포스포라미돈Phosphoramidone 3535 발아 녹차씨 추출물(제조예 1)Green tea seed extract (Preparation Example 1) 3232 발아 녹차씨 아임계 추출물(제조예 2)Germinated green tea cyanide extract (Preparation Example 2) 3939 미발아 녹차씨 추출물(비교제조예 1)Green tea seed extract (Comparative Production Example 1) 15.515.5 미발아 녹차씨 아임계 추출물(비교제조예 2)Green tea extract (Comparative Preparation Example 2) 18.618.6

상기 표 6에 나타낸 바와 같이, 발아 녹차씨 추출물의 엘라스타아제 활성 억제 정도가 엘라스타아제 활성 억제제로 알려져 있는 포스포라미돈과 비교하여서도 거의 유사한 것으로 나타나 본 발명의 발아 녹차씨 추출물의 엘라스타아제 활성 억제 효과가 우수함을 확인할 수 있으며, 비교제조예 1~2의 미발아 녹차씨 추출물과 비교하여도 엘라스타아제 활성 억제 효과가 월등함을 확인할 수 있다.
As shown in Table 6, the degree of suppression of elastase activity of germinated green tea seed extract was almost similar to that of phosphoramidon, which is known as an inhibitor of elastase activity. Thus, It was confirmed that the activity inhibitory effect was excellent and that the inhibitory effect on the dextrinase activity was superior to that of the microgalaxin seed extract of Comparative Preparation Examples 1 and 2.

[시험예 6] 콜라게나제(MMP-1) 발현 억제 효능[Test Example 6] Effect of inhibiting the expression of collagenase (MMP-1)

본 발명의 항노화 효능을 확인하기 위하여 콜라게나제 생성 억제능을 레티노익산과 비교하여 측정하였다. 레티노익산은 항산화물질로서 피부의 표피 세포를 재생시켜 피부의 노화를 방지하는 기능이 있는 것으로 알려진 물질이다. In order to confirm the anti-aging effect of the present invention, inhibition of collagenase production was measured in comparison with retinoic acid. Retinoic acid is an antioxidant, a substance known to regenerate epidermal cells of the skin and prevent aging of the skin.

시험은 2.5%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Media) 배지가 들어 있는 96공 평판배양기(96-well microtiter plate)에 인간의 섬유아세포를 5,000 세포/공(well)이 되도록 넣고, 90% 정도 자랄 때까지 배양하였다. 그 후 무혈청 DMEM 배지에서 24시간 배양한 다음, 무혈청 DMEM 배지에 녹여진 상기 제조예 1~2, 비교제조예 1~2에 따라 제조된 추출물 50ppm 농도, 레티노익산을 동일 농도로 처리한 후, 세포배양액을 채취하였다. The test was carried out by placing human fibroblasts at 5,000 cells / well in a 96-well microtiter plate containing 2.5% fetal bovine serum-containing DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Media) And cultured until it grew to about 90%. Thereafter, the cells were cultured in a serum-free DMEM medium for 24 hours. Then, 50 ppm concentration of extract prepared according to Preparation Examples 1 to 2 and Comparative Preparation Examples 1 and 2 dissolved in serum-free DMEM medium and retinoic acid were treated at the same concentration , And cell culture fluid was collected.

채취한 세포배양액을 상업적으로 이용 가능한 콜라게나제 측정기구(미국 아머샴파마샤 사, Catalog #: RPN 2610)를 이용하여 콜라게나제(기질 메탈로 프로테아제; MMP-1) 생성 정도를 측정하였다. 먼저 1차 콜라게나제 항체가 균일하게 도포된 96-공 평판(96-well plate)에 채취된 세포 배양액을 넣고 3시간 동안 항원-항체 반응을 항온조에서 실시하였다. The obtained cell culture medium was measured for the degree of collagenase (substrate metalloprotease; MMP-1) production using a commercially available collagenase measuring device (Amersham Pharmacia, Catalog #: RPN 2610). First, the cell culture solution collected in a 96-well plate uniformly coated with the primary collagenase antibody was added and the antigen-antibody reaction was performed in a thermostatic chamber for 3 hours.

3시간 후 발색단이 결합된 2차 콜라겐 항체를 96-공 평판(96-well plate)에 넣고 다시 15분간 반응시켰다. 15분 후 발색유발물질을 넣어 실온에서 15분간 발색을 유발시키고, 다시 1M 황산을 넣어 반응(발색)을 중지시키면 반응액의 색깔은 노란색을 띄며 반응 진행의 정도에 따라 노란색의 정도가 다르게 나타났다. After 3 hours, the second collagen antibody bound to the chromophore was placed in a 96-well plate and reacted for another 15 minutes. After 15 minutes, the color development inducing substance was added and coloration was induced at room temperature for 15 minutes. When the reaction (color development) was stopped by adding 1 M sulfuric acid again, the color of reaction solution was yellow and the degree of yellow was different according to the degree of reaction progress.

노란색을 띠는 96-공 평판(96-well plate)의 흡광도를 흡광계를 이용하여 405nm에서 측정하였고, 하기 수학식 2에 의해 콜라게나제의 합성 정도를 계산하였다. 이때 조성물을 처리하지 않은 군의 채취된 세포배양액의 반응 흡광도를 대조군으로 하였다. 즉, 비 처리군에서의 콜라게나제의 발현 정도를 100으로 하고, 이에 대비하여 시험물질을 처리한 군에서의 콜라게나제의 발현 정도를 구하였으며, 그 결과는 하기 표 7에 나타내었다. The absorbance of a yellow 96-well plate was measured at 405 nm using a spectrophotometer, and the degree of synthesis of collagenase was calculated by the following equation (2). At this time, the reaction absorbance of the cell culture obtained from the untreated group was used as a control. That is, the degree of expression of collagenase in the untreated group was set at 100, and the degree of expression of collagenase in the group treated with the test substance was determined, and the results are shown in Table 7 below.

시험물질Test substance 콜라게나제 발현 정도(%)Expression level of collagenase (%) 비 처리군Untreated group 100100 레티노익산Retinoic acid 7575 발아 녹차씨 추출물(제조예 1)Green tea seed extract (Preparation Example 1) 6363 발아 녹차씨 아임계 추출물(제조예 2)Germinated green tea cyanide extract (Preparation Example 2) 7272 미발아 녹차씨 추출물(비교제조예 1)Green tea seed extract (Comparative Production Example 1) 2626 미발아 녹차씨 아임계 추출물(비교제조예 2)Green tea extract (Comparative Preparation Example 2) 3232

콜라게나제의 발현 정도가 낮을수록 콜라게나제의 발현 억제능이 높고 피부내의 콜라겐의 분해가 적게 일어나 피부 탄력 감소가 저해되며, 생성되는 주름의 양은 적어진다. 상기 표 7에서 나타나는 바와 같이, 본 발명의 발아 녹차씨 추출물은 시험관내(in vitro)에서 콜라게나제의 발현을 효과적으로 억제하였으며, 양성 대조군인 레티노익산과 유사한 수준으로 콜라게나제의 발현 억제능이 우수함을 확인할 수 있었다. 특히, 발아 녹차씨 추출물은 미발아 녹차씨 추출물에 비하여 콜라게나제의 발현을 더욱 효과적으로 억제함으로써 피부 내의 콜라겐 분해를 감소시켜 피부 탄력 증진 및 주름 감소와 같은 항노화 효과가 뛰어남을 알 수 있었다.
The lower the degree of expression of collagenase, the higher the ability to inhibit the expression of collagenase, the less collagen degradation in the skin, the less elasticity of the skin is inhibited, and the amount of wrinkles produced is reduced. As shown in the above Table 7, the extract of Seaweed green tea of the present invention effectively inhibited the expression of collagenase in vitro, and was superior in inhibiting the expression of collagenase at a level similar to that of the positive control, retinoic acid . Particularly, the extract of Seunggyeongcha extract inhibited the expression of collagenase more effectively than the extract of S. gingko green tea, thereby reducing the degradation of collagen in the skin. Thus, it was found that the antiaging effect such as skin elasticity and wrinkle reduction was excellent.

[시험예 7] 피부 탄력 향상 효능 확인[Test Example 7] Confirmation of improving skin elasticity

사람에서의 피부 탄력 향상 효과를 확인하기 위하여 상기 표 4의 조성에 따른 실시예 1~2 및 비교예 1~3을 사용하여 다음과 같이 평가하였다. In order to confirm the skin elasticity improvement effect in humans, the following evaluations were made using Examples 1 to 2 and Comparative Examples 1 to 3 according to the composition of Table 4 as follows.

30~40대의 건강한 여성 50명을 각각 실시예 1~2 및 비교예 1~3의 5개 군에 대해 10명씩 5조로 나누어 영양크림을 매일 1회씩 12주간 안면 왼쪽에 도포하게 한 후, 피부탄력 측정기(Cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)를 이용하여 피부탄력을 측정하였다. 그 결과는 하기 표 8에 나타내었다. 표 8의 결과값은 Cutometer SEM 575의 ΔR8(R8(왼쪽)-R8(오른쪽)) 값으로 기재하였는데, R8 값은 피부 점탄성(viscoelasticity)의 성질을 나타낸다.50 healthy women in 30-40 age groups were divided into 5 groups of 10 persons for each of the five groups of Examples 1 to 2 and Comparative Examples 1 to 3 and the nutritional cream was applied to the left side of the face for 12 weeks once a day, Skin elasticity was measured using a measuring instrument (Cutometer SEM 575, C + K Electronic Co., Germany). The results are shown in Table 8 below. The results in Table 8 are reported as ΔR8 (R8 (left) -R8 (right)) of Cutometer SEM 575, where the R8 value indicates the nature of the viscoelasticity of the skin.

실험제품Experimental product 피부탄력효과Skin elasticity effect 실시예 1Example 1 0.420.42 실시예 2Example 2 0.590.59 비교예 1Comparative Example 1 0.220.22 비교예 2Comparative Example 2 0.280.28 비교예 3Comparative Example 3 0.040.04

상기 표 8에 나타난 바와 같이, 본 발명의 발아 녹차씨 추출물이 함유된 실시예 1~2는 미발아 녹차씨 추출물이 함유된 비교예 1~2를 도포한 군에 비하여 피부 탄력성이 더 증가되었다. As shown in Table 8, the skin elasticity of Examples 1 and 2 containing the griffon green tea seed extract of the present invention was further increased as compared with the group of Comparative Examples 1 and 2 containing the griffon green tea seed extract.

따라서, 본 발명의 발아 녹차씨 추출물을 함유하는 조성물은 피부 탄력 향상에 매우 효과적임을 확인할 수 있다.
Therefore, it can be confirmed that the composition containing the germinated green tea seed extract of the present invention is very effective for improving skin elasticity.

[시험예 8] 미백 효과[Test Example 8] Whitening effect

<티로시나제 저해 효과><Effect of tyrosinase inhibition>

티로시나제 효소는 버섯류(Mushroom)로부터 추출된 것으로 시그마(SIGMA)사의 것을 사용하였다. 먼저 기질인 티로신을 증류수에 용해시켜 0.3mg/ml의 용액으로 만들고 그 용액을 1.0ml씩 시험관에 넣은 다음, 여기에 포타슘-포스페이트 완충용액(0.1mol 농도, pH 6.8) 1.0ml 및 증류수 0.7ml를 첨가하였다.The tyrosinase enzyme was extracted from Mushroom and was obtained from Sigma (SIGMA). First, the substrate, tyrosine, is dissolved in distilled water to make a 0.3 mg / ml solution. The solution is put into a test tube in an amount of 1.0 ml. Then, 1.0 ml of potassium phosphate buffer solution (0.1 mol concentration, pH 6.8) and 0.7 ml of distilled water .

제조예 1~2 및 비교제조예 1~2의 추출물을 에탄올 용액에 적당농도로 혼합하여 준비한 각 시료액 0.2ml를 반응액에 넣은 다음 37℃ 항온조에서 10분 동안 반응시켰다. 이때 대조군은 각 시료액 대신 용매만을 0.2ml 넣은 것으로 준비하였고, 양성대조군으로는 아스코르브산을 사용하였다. 이 반응액에 2500유닛/ml의 티로시나제 용액 0.1ml씩을 넣고 다시 37℃ 항온조에서 10분 동안 반응시켰다. 이 반응액이 든 시험관을 얼음물속에 넣어서 급냉시켜 반응을 중지시키고 광전분광분석계로 파장 475nm에서의 흡광도를 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 9에 나타내었다. 각각의 티로시나제 저해 효과는 하기 수학식 3으로 산출하였다.
0.2 ml of each sample liquid prepared by mixing the extracts of Preparation Examples 1 and 2 and Comparative Preparation Examples 1 and 2 in an ethanol solution at an appropriate concentration was added to the reaction solution and allowed to react in a thermostatic chamber at 37 ° C for 10 minutes. At this time, the control group was prepared by adding 0.2 ml of a solvent instead of each sample solution, and ascorbic acid was used as a positive control group. 0.1 ml of tyrosinase solution of 2500 units / ml was added to the reaction solution, followed by reaction at 37 ° C for 10 minutes. The reaction tube was immersed in ice water to quench the reaction, and the absorbance at 475 nm was measured with a photoelectron spectrometer. The results are shown in Table 9 below. Each tyrosinase inhibitory effect was calculated by the following formula (3).

시험물질Test substance 티로시나제 저해율(%)Inhibition rate of tyrosinase (%) 대조군(무첨가)Control group (no addition) 00 아스코르브산Ascorbic acid 5252 발아 녹차씨 추출물(제조예 1)Green tea seed extract (Preparation Example 1) 5757 발아 녹차씨 아임계 추출물(제조예 2)Germinated green tea cyanide extract (Preparation Example 2) 6464 미발아 녹차씨 추출물(비교제조예 1)Green tea seed extract (Comparative Production Example 1) 2121 미발아 녹차씨 아임계 추출물(비교제조예 2)Green tea extract (Comparative Preparation Example 2) 2828

상기 표 9의 결과에서, 본 발명에 의한 발아 녹차씨 추출물인 제조예 1~2의 경우 티로시나제 억제율이 공지된 티로시나제 저해제인 아스코르브산보다 높아 미백 효과가 매우 우수함을 알 수 있다. 또한 미발아 녹차씨 추출물인 비교제조예 1~2에 비하여도 미백효과가 매우 우수함을 확인할 수 있다.
In the results of Table 9, it can be seen that the inhibitory effect of tyrosinase is higher than that of ascorbic acid, which is a known tyrosinase inhibitor, in Examples 1 and 2 of germinated green tea seed extract according to the present invention. Also, it can be confirmed that the whitening effect is also excellent in comparison with Comparative Production Examples 1 and 2, which are the extracts of green tea seeds.

<B16/F10 멜라노마 세포를 이용한 멜라닌 생성 억제 효과>&Lt; B16 / F10 Melanoma Inhibitory Effect by Melanoma Cells >

실시예 1~2, 비교예 1~3 및 코지산을 각각 0.001 중량%로 함유한 시료를 시험물질로 하여 일정 농도로 B16/F10 멜라노마 세포(한국세포주은행)의 배양액에 첨가하여 3일간 배양한 후 배양액을 제거하고 PBS로 세척하고 1N NaOH로 세포를 녹여 405 nm에서 흡광도를 측정하였다. 시험물질을 첨가하지 않은 세포를 대조군으로 하여 대조군에서의 멜라닌 함량과 비교하여 각 시험물질의 멜라닌 생성 저해 정도를 측정하였다. 수학식 4에 따라 멜라닌 생성 억제율을 계산하여 그 결과를 표 10에 나타내었다.A sample containing 0.001% by weight of each of Examples 1 to 2 and Comparative Examples 1 to 3 and kojic acid was added to the culture medium of B16 / F10 melanoma cells (Korean Cell Line Bank) at a constant concentration as a test substance and cultured for 3 days After removing the culture solution, the cells were washed with PBS, and the cells were dissolved with 1N NaOH. Absorbance was measured at 405 nm. Cells to which the test substance was not added were used as a control group, and the melanin formation inhibition degree of each test substance was measured by comparing with the melanin content in the control group. The inhibition rate of melanin production was calculated according to Equation (4), and the results are shown in Table 10.

시험물질Test substance 멜라닌생성 억제율(%)Melanin production inhibition rate (%) 대조군(무첨가)Control group (no addition) 00 코지산Kojic acid 5353 발아 녹차씨 추출물(제조예 1)Green tea seed extract (Preparation Example 1) 5151 발아 녹차씨 아임계 추출물(제조예 2)Germinated green tea cyanide extract (Preparation Example 2) 5858 미발아 녹차씨 추출물(비교제조예 1)Green tea seed extract (Comparative Production Example 1) 1414 미발아 녹차씨 아임계 추출물(비교제조예 2)Green tea extract (Comparative Preparation Example 2) 3939

상기 표 10의 결과에서, 본 발명에 의한 발아 녹차씨 추출물을 함유하는 제조예 1~2의 멜라닌 생성 억제율이 공지된 멜라닌 생성 저해제인 코지산보다 유사하여 미백 효과가 매우 우수함을 알 수 있었다. 또한 미발아 녹차씨 추출물을 함유하는 비교제조예 1~2에 비하여도 미백효과가 매우 우수함을 확인할 수 있다.
From the results of Table 10, it can be seen that the inhibitory rate of melanin production in Production Examples 1 to 2 containing germinated green tea seed extract according to the present invention is similar to that of kojic acid, which is a known melanin production inhibitor, so that the whitening effect is excellent. Also, it can be confirmed that the whitening effect is also excellent in comparison with Comparative Production Examples 1 and 2 which contain the extract of Muglia green tea.

[시험예 9] 피부 보습력 증가 효과 측정[Test Example 9] Measuring effect of increasing skin moisturizing power

본 발명의 피부 보습력 증가에 미치는 효과를 측정하기 위하여, 상기 표 4의조성에 따른 실시예 1~2 및 비교예 1~3을 이용하였고, 하기와 같이 평가하였다. In order to measure the effect of the present invention on the skin moisturizing effect, Examples 1 to 2 and Comparative Examples 1 to 3 according to the composition of Table 4 were used and evaluated as follows.

건조 피부로 분류된 40~50대 성인 남녀 50명을 각각 상기 실시예 1~2 및 비교예 1~3의 5개 군에 대해 10명씩 5조로 나누어 영양크림을 매일 2회씩 4주간 안면에 도포하게 하였다. 도포 개시 전과, 도포 후 1주, 2주, 4주 경과한 시점, 그리고 도포를 중지한 2주 경과(총 6주 경과) 후에 항온, 항습 조건(24℃, 상대습도 40%)에서 피부수분량측정기(Corneometer CM825, C+K Electronic Co., 독일)로 피부수분량을 측정하였다. 그 결과는 하기 표 11에 나타내었다. 표 11의 결과는 시험개시 직전에 측정한 피부 수분량 측정기 값을 기준으로 하여 일정기간 처치한 후의 측정값의 증가분을 백분율로 표시한 것이다. 50 men and women aged 40 to 50 who were classified as dry skin were divided into five groups of 10 persons for each of the five groups of Examples 1 to 2 and Comparative Examples 1 to 3 to apply the nutritional cream twice daily for 4 weeks to the face Respectively. (24 ° C, relative humidity 40%) after 1 week, 2 weeks, and 4 weeks after application, and after 2 weeks (total 6 weeks) (Corneometer CM825, C + K Electronic Co., Germany). The results are shown in Table 11 below. The results in Table 11 are the percentages of the increment of the measured value after treatment for a certain period based on the skin moisture meter measured immediately before the start of the test.

시험군Test group 수분 증가율 (%)Moisture growth rate (%) 1주 경과1 week 2주 경과Two weeks 4주 경과4 weeks 6주 경과6 weeks 실시예 1Example 1 3232 3434 3636 2323 실시예 2Example 2 3535 3737 3939 2828 비교예 1Comparative Example 1 2828 3030 3333 1515 비교예 2Comparative Example 2 2929 3131 3434 1818 비교예 3Comparative Example 3 2525 2626 2626 1111

상기 표 11의 결과를 보면, 미발아 녹차씨 추출물을 함유하는 비교예 1~2를 도포한 경우에는 도포가 이루어진 4주까지는 약 33~34% 정도의 수분 증가율을 보이지만, 도포를 중지한 후에는 피부수분량이 감소하는 반면, 발아 녹차씨 추출물을 함유한 실시예 1~2를 도포한 경우에는 도포를 중지한 후에도 대부분 23% 이상의 피부수분 증가율을 보임을 확인할 수 있다. 이를 통해 발아 녹차씨 추출물을 함유한 본 발명의 조성물은 피부 보습력 효과과 우수함을 알 수 있다.
In the results of Table 11, when the Comparative Examples 1 and 2 containing the Muglia green tea seed extract were applied, the moisture increase rate was about 33 to 34% by about 4 weeks after application, but after the application was stopped On the other hand, when Examples 1 and 2 containing germinated green tea seed extract were applied, the skin moisture increase rate was found to be 23% or more even after the application was stopped. Thus, it can be seen that the composition of the present invention containing germinated green tea seed extract has excellent skin moisturizing effect.

[시험예 10] 각질형성세포 분화 촉진 효과 측정[Test Example 10] Measurement of promoting effect of keratinocyte differentiation

본 발명의 조성물의 각질형성세포의 분화 촉진 효과를 알아보기 위해, 하기와 같이 각질형성세포의 분화시 생성되는 CE(Cornified Envelop)양을 흡광도를 이용하여 측정하였다.In order to examine the effect of the composition of the present invention on promoting differentiation of keratinocytes, the amount of cornified envelope (CE) produced upon differentiation of keratinocytes was measured using absorbance.

먼저, 신생아의 표피로부터 분리해 일차 배양한 사람의 각질형성세포를 배양용 플라스크에 넣어 바닥에 부착시킨 뒤 하기 표 12의 시험물질을 배양액에 5 ppm 농도로 처리한 후 세포가 바닥 면적의 70~80% 정도 자랄 때까지 5일간 배양하였다. 이때, 저칼슘(0.03mM) 처리군과 고칼슘(1.2mM) 처리군을 각각 음성 대조군, 양성 대조군으로 하였다. 그 다음 상기 배양한 세포를 수확하여 PBS(Phophate buffered saline)로 세척한 뒤 2% SDS(sodium dodecyl sulfate)와 20mM 농도의 DTT(Dithiothreitol)를 함유한 10mM 농도의 트리스-염산 완충액(Tris-HCl, pH 7.4) 1ml를 가하여 소니케이션(sonication), 보일링(boiling), 원심분리를 하고, 침전물을 다시 PBS 1ml에 현탁시켜 340nm에서의 흡광도를 측정하였다. 이와 별도로 상기 소니케이션 후의 용액을 일부 취하여 단백질 함량을 측정하고, 세포 분화정도 평가시 기준으로 삼았다. 그 결과를 하기 표 12에 나타내었다.First, the keratinized cells of a primary culture separated from the epidermis of the newborn baby were put in a culture flask and adhered to the bottom. After treating the test material of Table 12 with the concentration of 5 ppm in the culture medium, The cells were cultured for 5 days until they grew to about 80%. At this time, low calcium (0.03 mM) and high calcium (1.2 mM) treatment groups were negative control and positive control, respectively. Then, the cultured cells were harvested, washed with PBS (Phosphate buffered saline), and then suspended in 10 mM Tris-HCl buffer (Tris-HCl, pH 7.4) containing 2% SDS (sodium dodecyl sulfate) and 20 mM DTT (Dithiothreitol) pH 7.4) was added, sonication, boiling, and centrifugation. The precipitate was suspended again in 1 ml of PBS and the absorbance at 340 nm was measured. Separately, a part of the solution after the sonication was taken to measure the protein content and used as a standard in evaluating the degree of cell differentiation. The results are shown in Table 12 below.

시험물질Test substance 각질형성세포에서의 분화능(%)The ability to differentiate in keratinocytes (%) 저칼슘(0.03mM) 용액(음성 대조군)Low calcium (0.03 mM) solution (negative control) 100100 고칼슘(1.2mM) 용액(양성 대조군)High calcium (1.2 mM) solution (positive control) 210210 발아 녹차씨 추출물(제조예 1)Green tea seed extract (Preparation Example 1) 164164 발아 녹차씨 아임계 추출물(제조예 2)Germinated green tea cyanide extract (Preparation Example 2) 186186 미발아 녹차씨 추출물(비교제조예 1)Green tea seed extract (Comparative Production Example 1) 129129 미발아 녹차씨 아임계 추출물(비교제조예 2)Green tea extract (Comparative Preparation Example 2) 137137

상기 표 12에 나타낸 바와 같이, 발아 녹차씨 추출물을 처리한 경우 각질 형성 세포의 분화 촉진 효과가 우수한 것을 확인할 수 있다. 이는 오래된 각질세포의 탈락과 새로운 각질세포의 생성 주기인 턴오버 주기를 정상화시켜서 피부 보습을 강화할 수 있음을 나타내는 것이며, 또한 발아 녹차씨 추출물이 피부 각질 제거를 촉진할 수 있음을 확인한 것이다.
As shown in Table 12 above, it can be confirmed that when the germinated green tea seed extract was treated, the effect of accelerating the differentiation of keratinocytes was excellent. This indicates that the skin moisturization can be enhanced by eliminating the old keratinocytes and normalizing the turnover cycle, which is a generation cycle of new keratinocyte, and that the germinated green tea seed extract can promote the keratin removal.

[시험예 11] 피부 장벽기능 회복 효과 측정[Test Example 11] Measurement of recovery effect on skin barrier function

본 발명에 따른 조성물이 피부 손상으로 인해 손상된 피부 장벽기능의 회복에 미치는 효과 측정하기 위하여, 하기와 같은 실험을 수행하였다. 성인 남녀 10명의 상박을 테이프 스트립핑(Tape Stripping) 방법을 이용하여 피부 장벽에 손상을 주고 각각 하기 표 13의 조성으로 제조한 실시예 3~4 및 비교예 4~6의 5개 군을 도포하면서 7일 동안 하루에 한번씩 경피수분손실량(TWEL)의 회복 정도를 Vapometer(Delfin, 핀란드)로 측정 비교하였다. 여기에서 비교예 6은 음성대조군으로서 비히클(vehicle)이다. 실험 결과는 하기 표 14에 나타내었다. 표 14의 결과는 장벽 손상 전과 장벽 손상 후의 처리전 차이를 100% 기준으로 하여 비교하였다. In order to measure the effect of the composition according to the present invention on recovery of damaged skin barrier function due to skin damage, the following experiment was conducted. Ten adults of both sexes were injured on the skin barrier using a tape stripping method and applied with the five groups of Examples 3 to 4 and Comparative Examples 4 to 6 prepared in the composition shown in Table 13 below The recovery of TWEL was measured and compared with Vapometer (Delfin, Finland) once a day for 7 days. Here, Comparative Example 6 is a vehicle as a negative control. The experimental results are shown in Table 14 below. The results in Table 14 were compared before treatment before barrier damage and after barrier damage on the basis of 100%.

배합성분Compounding ingredient 실시예3Example 3 실시예4Example 4 비교예4Comparative Example 4 비교예5Comparative Example 5 비교예6Comparative Example 6 정제수Purified water 6969 6969 6969 6969 7070 프로필렌글리콜Propylene glycol 3030 3030 3030 3030 3030 발아 녹차씨 추출물(제조예 1)Green tea seed extract (Preparation Example 1) 1One -- -- -- -- 발아 녹차씨 아임계 추출물(제조예 2)Germinated green tea cyanide extract (Preparation Example 2) -- 1One -- -- -- 미발아 녹차씨 추출물(비교제조예 1)Green tea seed extract (Comparative Production Example 1) -- -- 1One -- -- 미발아 녹차씨 아임계 추출물(비교제조예 2)Green tea extract (Comparative Preparation Example 2) -- -- -- 1One --

시험군Test group TWEL 변화 (%)TWEL Change (%) 처리전Before processing 1일1 day 2일2 days 3일3 days 4일4 days 5일5 days 6일6 days 실시예 3Example 3 100100 8989 7676 6767 6161 3939 2929 실시예 4Example 4 100100 8686 7474 6363 5050 3535 1414 비교예 4Comparative Example 4 100100 9898 9191 8484 8282 7777 6868 비교예 5Comparative Example 5 100100 9696 8787 8383 7979 7575 6565 비교예 6Comparative Example 6 100100 9999 8989 8686 8383 8181 7979

상기 표 14에서 알 수 있는 바와 같이, 발아 녹차씨 추출물을 처리할 경우 빠른 속도로 경피 수분 손실량이 정상으로 돌아오며 장벽 손상이 회복됨을 확인할 수 있다. 또한 장벽 손상 회복에 있어서 비교예 4~5의 미발아 녹차씨 추출물 함유 제형에 비하여 실시예 3~4의 발아 녹차씨 추출물의 효과가 현저히 뛰어남을 확인할 수 있다.
As can be seen from Table 14, it can be seen that when the germinated green tea seed extract is treated, the amount of transdermal water loss is returned to normal and the barrier damage is recovered at a high speed. In addition, it was confirmed that the effect of the germinated green tea seed extract of Examples 3 to 4 was remarkably superior to those of Comparative Examples 4 to 5 in the recovery of barrier damage.

[시험예 12] 피지 분비 억제 효과[Test Example 12] Effect of suppressing sebum secretion

<5α-리덕타아제 활성 억제를 통한 피부 과분비 억제 효과>&Lt; 5a-reductase inhibitory effect < RTI ID = 0.0 >

5α-리덕타아제 활성 억제 효과를 확인하기 위해서 HEK293-5αR2 세포에서 [¹⁴C]테스토스테론이 [¹⁴C]디하이드로테스토스테론(DHT: dihydrotestosterone)으로 변환되는 비율을 측정하였다. HEK293 세포에 p3 x FLAG-CMV-5αR2를 형질감염시켜서 24 웰 플레이트에 웰당 2.5 x 10⁵ 세포로 넣고 배양하였다(Park et al., 2003, JDS. Vol. 31, pp. 191-98). 다음날 효소 기질과 저해제가 첨가된 새로운 배지로 바꿔주었다. 배지의 기질로는 0.05μCi [¹⁴C]테스토스테론(Amersham Pharmacia biotech, UK)을 사용하였다.In order to confirm 5α-reductase inhibitory effect, the ratio of [ ¹⁴ C] testosterone to [ ¹⁴ C] dihydrotestosterone (DHT) in HEK293-5αR2 cells was measured. HEK293 cells were transfected with p3 x FLAG-CMV-5αR2, and cultured in 2.5 × 10 ⁵ cells / well in a 24-well plate (Park et al., 2003, JDS Vol. 31, pp. 191-98). The next day, the medium was changed to a new medium supplemented with an enzyme substrate and an inhibitor. 0.05 [mu] Ci [ ¹⁴ C] testosterone (Amersham Pharmacia biotech, UK) was used as the substrate of the medium.

5α-리덕타아제 활성 억제 정도를 확인하기 위해서 하기 표 15에 나타낸 추출물을 각각 넣고 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 2시간 동안 배양하였다. 이 때 추출물을 넣지 않은 것은 음성대조군으로 사용하고, 피나스테라이드(finasteride)를 넣은 것을 양성대조군으로 사용하였다. 이 후 배양 배지를 수거하여 스테로이드를 800 ㎕ 에틸아세테이트로 추출한 다음 상부의 유기용매층을 분리하여 말린 후 남은 잔유물을 다시 50 ㎕ 에틸아세테이트로 녹여서 실리카 플라스틱시트 카이젤겔 60 F254(Silica plastic sheet kieselgel 60 F254) 상에서 에틸아세테이트-헥산(1:1)을 용매로 하여 전개하였다. To confirm the degree of inhibition of 5? -Reductase activity, the extracts shown in Table 15 below were added and cultured in a 5% CO ₂ incubator at 37 ° C for 2 hours. At this time, no extract was used as a negative control, and finasteride was used as a positive control. Thereafter, the culture medium was collected, and the steroid was extracted with 800 쨉 l of ethyl acetate. The upper organic solvent layer was separated, dried, and the remaining residue was again dissolved in 50 쨉 l ethyl acetate to obtain a silica plastic sheet kiesel gel 60 F254 ) Using ethyl acetate-hexane (1: 1) as the solvent.

플라스틱 시료를 공기 중에서 건조한 후, 동위원소의 양을 측정하기 위하여 바스 시스템을 사용하였는데, 건조된 플라스틱 시트와 엑스레이 필름을 함께 바스 카셋트에 넣어 1주일 후에 필름에 남아있는 테스토스테론과 디하이드로테스토스테론의 동위원소 양을 측정한 다음 하기 수학식 5 및 6에 따라 전환율 및 저해율을 각각 산출하였으며, 그 결과를 하기 표 15에 나타내었다.After drying the plastic sample in air, the bath system was used to measure the amount of isotope. The dried plastic sheet and x-ray film were put together in a bath cassette, and after 1 week, the testosterone remaining in the film and isotopes of dihydrotestosterone The conversion and inhibition rates were calculated according to the following equations (5) and (6), respectively, and the results are shown in Table 15 below.

시험물질Test substance 전환율(%)Conversion Rate (%) 저해율(%)Inhibition rate (%) 음성대조군Negative control group 48.048.0 -- 양성대조군(피나스테라이드)The positive control (pinasteride) 27.627.6 42.5 42.5 발아 녹차씨 추출물(제조예 1)Green tea seed extract (Preparation Example 1) 30.130.1 37.3 37.3 발아 녹차씨 아임계 추출물(제조예 2)Germinated green tea cyanide extract (Preparation Example 2) 28.428.4 40.8 40.8 미발아 녹차씨 추출물(비교제조예 1)Green tea seed extract (Comparative Production Example 1) 41.541.5 13.5 13.5 미발아 녹차씨 아임계 추출물(비교제조예 2)Green tea extract (Comparative Preparation Example 2) 39.239.2 18.3 18.3

상기 표 15의 결과에서, 테스토스테론을 디하이드로테스토스테론으로 전환시켜 세포질 내에 있는 수용체 단백질과 결합해 핵 내로 들어가 피지선 세포를 활성화하고 분화를 촉진시켜 피지선 내에서 피지를 과분비시키는 역할을 하는 5α-리덕타아제의 활성을 본 발명에 의한 발아 녹차씨 추출물이 효과적으로 억제함으로써 테스토스테론의 디하이드로테스토스테론으로의 전환을 차단하는 것을 확인할 수 있으며, 비교제조예 1~2의 미발아 녹차씨 추출물에 비해 차단 효과가 뛰어남을 확인할 수 있다. 따라서, 본 발명에 의한 발아 녹차씨 추출물이 5α-리덕타아제의 활성을 효과적으로 억제시킴으로써 피지의 과분비를 억제시킬 수 있음을 확인하였다.
In the results shown in Table 15, testosterone is converted into dihydrotestosterone, which binds to the receptor protein in the cytoplasm to enter the nucleus, activates the sebaceous gland, accelerates differentiation, and induces 5α-reductase Of the present invention effectively inhibits the conversion of testosterone to dihydrotestosterone by effectively inhibiting the germination green tea seed extract according to the present invention and has an excellent blocking effect as compared with the microgalaxate seed extracts of Comparative Preparation Examples 1 and 2 Can be confirmed. Therefore, it was confirmed that the germinated green tea seed extract according to the present invention effectively inhibited the activity of 5? -Redoxaase, thereby suppressing sebaceous hyperplasia.

<피지 분비 억제 효과>&Lt; Effect of suppressing sebum secretion &

상기 표 4의 조성에 따른 실시예 1~2 및 비교예 1~3의 피지 분비 억제 효과를 알아보기 위하여 다음과 같이 평가하였다. 피지분비가 많다고 느끼는 피험자 남녀 30명을 선정하여 지정된 부위에 실시예 1~2 및 비교예 1~3의 영양크림을 4주간 매일 바르게 하였다. 피지감소의 효과에 대한 판정은 피지량 측정기(Sebumeter SM810, C+K Electronic Co., 독일)를 사용하여 2주 및 4주 경과 후 평균 피지 감소율(%)을 각각 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 16에 나타내었다.To evaluate the inhibitory effect of sebum secretion of Examples 1 to 2 and Comparative Examples 1 to 3 according to the composition of Table 4, the following evaluation was made. 30 men and women who felt that sebum secretion was high were selected and the nutritional creams of Examples 1 to 2 and Comparative Examples 1 to 3 were applied to the designated sites every day for 4 weeks. The results are shown in Table 16 below. The results are shown in Table 16 below. The results are shown in Table 16 below. Respectively.

시험물질Test substance 피지 감소율(%)Sebum reduction rate (%) 2주 경과 후After 2 weeks 4주 경과 후After 4 weeks 실시예1Example 1 33 44 실시예2Example 2 55 55 비교예1Comparative Example 1 00 1One 비교예2Comparative Example 2 1One 22 비교예3Comparative Example 3 00 00

상기 표 16의 결과에서, 본 발명에 의한 발아 녹차씨 추출물을 함유하는 실시예 1~2는 이를 함유하지 않은 비교예 3 보다 과잉으로 분비되는 피지를 효과적으로 억제할 수 있음을 알 수 있다. 특히 실시예 1~2는 미발아 녹차씨 추출물을 함유하는 비교예 1~2에 비해 피지 억제 효과가 매우 뛰어남을 알 수 있다.
From the results shown in Table 16, it can be seen that Examples 1 and 2 containing germinated green tea seed extract according to the present invention effectively inhibited excess sebum than Comparative Example 3 containing no germinated green tea seed extract. In particular, Examples 1 and 2 show excellent sebum inhibitory effect as compared with Comparative Examples 1 and 2 containing green gree starch seed extract.

[시험예 13] 염증 개선 효과[Test Example 13] Inflammation improving effect

항염증 효과는 프로스타글란딘의 생성 억제 효과로 평가하였다. 상기 제조예 1~2 및 비교제조예 1~2에 따라 제조한 추출물을 이용하여 대식세포를 대상으로 효과를 측정하였다. 우선, 마우스의 복강에서 채취한 대식세포에 최종농도가 500M이 되도록 아스피린을 첨가해 세포에 잔존하는 시클로옥시제나제(cyclooxygenase, COX) 활성을 비가역적으로 억제하였다. 그런 다음 상기 현탁액을 96 웰의 세포배양관의 각 웰에 100μl를 넣어 5% CO2와 37℃ 조건의 배양기에서 2시간 동안 배양하여 대식 세포를 용기 표면에 부착시켰다. 이어, 부착된 대식 세포를 PBS로 3회 세척한 후 이를 염증 개선 효과 시험에 사용하였다. 상기 배양된 대식세포 5x10⁴ 세포/ml에 LPS를 1%(w/v)로 함유하는 RPMI 배지를 첨가하여 12시간 동안 배양한 후 프로스타글란딘의 생성을 유발하고 제조예 1~2 및 비교제조예 1~2에 따른 추출물을 각각 100μl 처리하여 유리된 프로스타글란딘을 효소면역 분석법(ELISA)을 이용하여 정량하였다.The antiinflammatory effect was evaluated by the inhibitory effect of prostaglandin production. The extracts prepared according to Preparation Examples 1 and 2 and Comparative Preparation Examples 1 and 2 were used to measure the effect on macrophages. First, aspirin was added to the macrophage cells collected from the abdominal cavity of mice to a final concentration of 500 M to irreversibly inhibit the cyclooxygenase (COX) activity remaining in the cells. Then, the suspension was added to each well of a 96-well cell culture tube in an amount of 100 μl, and incubated for 2 hours in a 5% CO 2 incubator at 37 ° C. to adhere the macrophages to the surface of the container. Then, the adhered macrophages were washed three times with PBS and used for the inflammation improving effect test. RPMI medium containing 1% (w / v) LPS was added to the cultured macrophage 5x10 ⁴ cells / ml and cultured for 12 hours to induce the production of prostaglandin. The extracts according to ~ 2 were each treated with 100 μl, and the liberated prostaglandins were quantitated by enzyme immunoassay (ELISA).

이때, 프로스타글란딘의 생성억제 활성은 LPS를 처리한 군과 처리하지 않은 군에서 각각 생성된 프로스타글란딘의 차이를 100%로 설정하고, LPS와 시료를 함께 처리하여 감소된 프로스타글란딘의 백분율을 통하여 대조군과 비교, 판정하였으며, 그 결과(프로스타글란딘의 생성억제 효과)를 하기 표 17에 나타내었다.At this time, the inhibitory activity on the production of prostaglandin was determined by setting the difference of the prostaglandins produced in the LPS-treated group and the untreated group to 100%, comparing with the control group by the percentage of prostaglandin reduced by treating the LPS and the sample together, And the results (inhibitory effect on the production of prostaglandins) are shown in Table 17 below.

시험물질Test substance 프로스타글란딘 생성억제 효과(%)Inhibition of prostaglandin production (%) 블랭크(Blank)Blank 100100 양성대조군(아스피린 처리군)Positive control (aspirin treated group) 25.025.0 발아 녹차씨 추출물(제조예 1)Green tea seed extract (Preparation Example 1) 46.246.2 발아 녹차씨 아임계 추출물(제조예 2)Germinated green tea cyanide extract (Preparation Example 2) 33.133.1 미발아 녹차씨 추출물(비교제조예 1)Green tea seed extract (Comparative Production Example 1) 68.968.9 미발아 녹차씨 아임계 추출물(비교제조예 2)Green tea extract (Comparative Preparation Example 2) 59.859.8

상기 표 17의 결과에서, 실험결과 아스피린으로 처리한 양성대조군과 같이 제조예 1~2에 따른 발아 녹차씨 추출물을 처리한 경우에도 프로스타글란딘의 생성억제효과가 매우 높음을 알 수 있다. 또한 비교제조예 1~2의 미발아 녹차씨 추출물 처리군에 비하여도 프로스타글란딘의 생성 억제 효과가 매우 높음을 확인할 수 있다.The results of Table 17 show that the inhibitory effect of prostaglandin on the production of prostaglandin is remarkably high even in the case of treatment with ginga seed extract according to Preparation Examples 1 and 2 as in the positive control treated with aspirin. Also, it can be confirmed that the effect of inhibiting the production of prostaglandin is remarkably higher than that of the group treated with the extracts of Mugwort green tea of Comparative Production Examples 1 and 2.

이를 통해 본 발명의 발아 녹차씨 추출물은 우수한 염증 개선 효과를 제공할 수 있음을 알 수 있으며, 또한 발아 녹차씨 추출물은 피부 염증 인자인 프로스타글란딘의 발현을 억제하여 피부 트러블을 방지하고 개선시킬 수 있음을 알 수 있다.
Thus, it can be seen that the ginga green tea seed extract of the present invention can provide an excellent inflammation improving effect, and ginga green tea extract can prevent and improve skin trouble by inhibiting the expression of prostaglandin, which is a skin inflammation factor Able to know.

[실시예 5~6 및 비교예 7~10] [Examples 5 to 6 and Comparative Examples 7 to 10]

하기 표 18에 나타낸 성분 및 함량(중량%)에 따라 실시예 5~6 및 비교예 7~9를 제조하였다. 구체적으로 설명하면, 실시예 5~6 은 각각 발아 녹차씨 추출물 및 발아 녹차씨 아임계 추출물을 배합시킨 것이고, 비교예 7~8은 각각 미발아 녹차씨 추출물 및 미발아 녹차씨 아임계 추출물을 함유하는 것이며, 비교예 9는 여드름 피부 개선의 유효성분을 전혀 포함시키지 않은 것이고, 비교예 10은 항균력에 대한 기준으로 삼을 표준물질로서, 여드름 치료제로 많이 사용하는 에리스롬마이신(erythromycin)을 함유시킨 것이다.Examples 5 to 6 and Comparative Examples 7 to 9 were produced in accordance with the components and the contents (% by weight) shown in Table 18 below. Specifically, Examples 5 to 6 were obtained by mixing ginga green tea seed extract and ginger green tea cyanide extract, respectively, and Comparative Examples 7 and 8 were obtained by mixing the extracts of Mugwort green tea seeds and Mugwort green tea seeds Comparative Example 9 contains no active ingredient for acne skin improvement, Comparative Example 10 is a standard substance for antibacterial activity, and erythromycin (erythromycin), which is widely used as a therapeutic agent for acne, will be.

실시예 5~6 및 비교예 7~10의 제조 방법은 다음과 같다. 하기 표 18의 A상의 성분들을 완전 용해시키고 별도의 용해조에서 B상의 성분들을 완전 용해시킨 다음, B상을 A상에 첨가하여 혼합가용화 시켰다. 여기에 C상의 성분들을 표 18에 기재된 배합비율에 따라 첨가하여 혼합 균일화시킨 다음 여과시켜 본 조성물들을 제조하였다.The production methods of Examples 5 to 6 and Comparative Examples 7 to 10 are as follows. The components of phase A in Table 18 were completely dissolved and the components of phase B were completely dissolved in a separate melting tank, and the phase B was added to the phase A to be mixed and solubilized. The components of the C phase were added thereto in accordance with the mixing ratios shown in Table 18, mixed and homogenized, and then filtered to prepare the compositions.

구분division 실시예 5Example 5 실시예 6Example 6 비교예 7Comparative Example 7 비교예 8Comparative Example 8 비교예 9Comparative Example 9 비교예 10Comparative Example 10 AA 탈이온수(Deionized Water)Deionized Water To 100To 100 To 100To 100 To 100To 100 To 100To 100 To 100To 100 To 100To 100 EDTA-2NaEDTA-2Na 0.020.02 0.020.02 0.020.02 0.020.02 0.020.02 0.020.02 글리세린glycerin 5.05.0 5.05.0 5.05.0 5.05.0 5.05.0 5.05.0 BB 에탄올ethanol 2.02.0 2.02.0 2.02.0 2.02.0 2.02.0 2.02.0 PEG-60 경화 피마자유(hydrogenated castor oil)PEG-60 hydrogenated castor oil 0.40.4 0.40.4 0.40.4 0.40.4 0.40.4 0.40.4 향료(perfume)Perfume 0.040.04 0.040.04 0.040.04 0.040.04 0.040.04 0.040.04 CC 발아 녹차씨 추출물(제조예 1)Green tea seed extract (Preparation Example 1) 5.05.0 -- -- -- -- -- 발아 녹차씨 아임계 추출물(제조예 2)Germinated green tea cyanide extract (Preparation Example 2) -- 5.05.0 -- -- -- -- 미발아 녹차씨 추출물(비교제조예 1)Green tea seed extract (Comparative Production Example 1) -- -- 5.05.0 -- -- -- 미발아 녹차씨 아임계 추출물(비교제조예 2)Green tea extract (Comparative Preparation Example 2) -- -- -- 5.05.0 -- -- 에리스롬마이신Erythromycin -- -- -- -- -- 5.05.0

[시험예 14] 여드름 개선과 피지분비 감소 및 자극 유무의 시험[Test Example 14] Test for improvement of acne and reduction of sebum secretion and stimulation

여드름을 보유하고 있는 60명을 10명씩 6개 군으로 나누고 각각의 군에 해당하는 피험자에게 상기 실시예 5~6 및 비교예 7~10으로부터 제조된 화장료 조성물을 한 달간 사용하게 하였다. 여드름 개선 척도는 1점에서 5점까지로 하고, 1점은 ‘아니다’, 3점은 ‘보통이다’, 5점은 ‘매우 그렇다’로 표기하도록 하였다. 실험 결과는 하기의 표 19에 10명의 평균점수로 표기하였다.60 persons who had acne were divided into 6 groups of 10 persons, and the subjects corresponding to each group were allowed to use the cosmetic composition prepared from Examples 5 to 6 and Comparative Examples 7 to 10 for one month. Acne improvement scale is from 1 point to 5 points, 1 point is 'No', 3 points are 'Normal' and 5 points are 'Very agree'. The experimental results are shown in Table 19 below with an average score of 10 persons.

여드름 소멸 시기는 소멸이 판독된 일수를 기준으로 하였으며, 여드름 재발은 유무로 1개월 뒤의 결과를 기준으로 하였다. 피지 분비감소는 1점에서 5점까지로 하고, 1점은 ‘아니다’, 3점은 ‘보통이다’, 5점은 ‘매우 그렇다’로 표기하도록 하였다. 실험 결과는 하기 표 19에 10명의 평균점수로 표기하였다. 피부자극의 유무는 (자극반응을 보인 명수)/(총 시험자수)로 보았다.The acne extermination period was based on the number of days of disappearance readings, and the results were based on the results after 1 month with or without recurrence of acne. The reduction of sebaceous secretion was from 1 point to 5 points, 1 point was 'No', 3 points were 'Normal' and 5 points were 'Very agree'. The experimental results are shown in the following Table 19 with an average score of 10 persons. The presence or absence of skin irritation was evaluated as (number of stimuli) / (total number of test subjects).

염증성 여드름 개선Inflammatory acne improvement 면포성 여드름 소멸시기Acne-bloating period 여드름 재발Recurrence of acne 피지분비 감소Decrease sebaceous glands 자극 유무Presence or absence of stimulation 실시예 5Example 5 3.93.9 3.63.6 2.72.7 3.53.5 0.20.2 실시예 6Example 6 4.24.2 3.73.7 2.42.4 3.63.6 0.30.3 비교예 7Comparative Example 7 3.23.2 3.33.3 2.42.4 2.12.1 0.30.3 비교예 8Comparative Example 8 3.83.8 3.53.5 2.82.8 2.52.5 0.40.4 비교예 9Comparative Example 9 2.12.1 2.32.3 4.34.3 1.61.6 0.30.3 비교예 10Comparative Example 10 4.34.3 4.24.2 2.12.1 3.53.5 0.30.3

상기 표 19에 나타내 바와 같이, 실시예 5~6은 비교예 7~9에 비해 여드름이 재발되지 않았고, 전반적으로 여드름 개선에 대해 우수한 효과가 있음을 알 수 있다. 한편, 항균력 표준물질을 함유한 비교예 10의 경우, 여드름 개선 효과를 보이고 있으나, 사용함에 있어 자극이 강하여 장기적으로 사용하기에 피부자극의 우려가 있으나, 본원 발명에 따른 조성물은 자극이 없는 것으로 나타났다.
As shown in Table 19, in Examples 5 to 6, the acne was not recurred as compared with Comparative Examples 7 to 9, and it can be seen that there is an excellent effect on improvement of acne as a whole. On the other hand, in Comparative Example 10 containing the antibacterial standard material, although the effect of improving the acne is shown, there is a fear of skin irritation for long-term use due to strong irritation in use, but the composition according to the present invention has no irritation .

[시험예 15] 여드름균에 대한 항균력 시험[Test Example 15] Test for antibacterial activity against acne bacteria

상기 표 18에 따른 실시예 5~6 및 비교예 7~10의 조성으로 제조된 각각의 화장료 조성물을 가지고 여드름 원인 균주인 프로피오니박테리움 아크네스<ATCC 6919: 배지-BHI 브로쓰(broth)>에 대하여 항균력을 시험하였다.Each of the cosmetic compositions prepared according to the compositions of Examples 5 to 6 and Comparative Examples 7 to 10 according to Table 18 was used to prepare propionibacterium acnes <ATCC 6919: medium-BHI broth> Were tested for their antimicrobial activity.

여드름균에 대한 항균력 시험 방법은 다음과 같았다.The test method for the antimicrobial activity against acne bacteria was as follows.

(1) 시험 균액 준비(1) Preparation of test strain

프로피오니박테리움 아크네스는 BHI 브로쓰에 접종하여 혐기 배양한 배양액을 사용하였다.Propionibacterium acnes were cultured in an anaerobic culture inoculated with BHI broth.

(2) 희석 용액 준비(2) Dilution solution preparation

BHI 브로쓰(pH 6.8) 또는 LB 브로쓰(pH 4.5) 15ml에 상기 시험 균액을 0.15ml 첨가하여 잘 혼합한 것을 희석용액으로 사용하였다.0.15 ml of the above test solution was added to 15 ml of BHI broth (pH 6.8) or LB broth (pH 4.5), and the mixture was used as a diluting solution.

(3) 시료 준비(3) Preparation of sample

실시예 5~6 및 비교예 7~10로부터 제조된 화장료 조성물 원액 그대로를 시료로 사용하였다.The undiluted cosmetic compositions prepared from Examples 5 to 6 and Comparative Examples 7 to 10 were used as samples.

(4) 항균력 시험(4) Antimicrobial activity test

1) 96웰의 세포배양관(96 well plate) 1번 행에 출발 농도에 맞도록 시료를 넣고 희석용액으로 총량을 200μl씩을 넣는다.1) In a 96-well 96-well plate, place the sample in line 1 and add 200 μl of diluted solution.

2) 1번 행의 혼합액을 잘 섞어준 다음 100μl를 취하여 2번 행에 넣고 잘 섞어준 다음, 다시 100μl를 취하여 3번 행에 넣는 방식으로 이중 희석(double dilution)을 행한다.2) Thoroughly mix the mixture of line 1, and then take 100 μl of the mixture, place it in the second row, mix well, and then repeat the double dilution by adding 100 μl to the third row.

3) 32℃에서 24시간 및 48시간 정치 배양한 후 현탁된 정도로 균의 증식 유무를 판단하여 균의 증식이 없는 최소농도를 MIC(최소저지농도; Minimum Inhibitory Concentration) 값으로 결정한다. 만약 혼합액이 불투명하여 균의 증식 유무를 판단하기 어려우면 현미경 관찰을 통하여 확인한다.3) After culturing the cells at 32 ° C for 24 hours and 48 hours, determine whether the bacteria are proliferating to the extent of suspension, and determine the minimum concentration without bacterial growth as the MIC (Minimum Inhibitory Concentration) value. If the mixture is opaque and it is difficult to judge the growth of the microorganism, check with a microscope.

여드름균에 대한 항균력 시험 결과를 아래 표 20에 나타내었다. MIC는 제형에 함유된 유효성분의 농도로 환산하여 표기하였다.The results of the antimicrobial activity test against acne bacteria are shown in Table 20 below. The MIC was expressed in terms of the concentration of the active ingredient contained in the formulation.

항목Item pHpH 프로피오니박테리움 아크네스 억제 농도(%)Inhibitory concentration of propionibacterium acnes (%) 실시예 5Example 5 6.06.0 >6.3> 6.3 실시예 6Example 6 5.95.9 >0.8> 0.8 비교예 7Comparative Example 7 6.16.1 >25> 25 비교예 8Comparative Example 8 5.95.9 >12.5> 12.5 비교예 9Comparative Example 9 5.75.7 최고 농도(항균력 없음)Maximum concentration (no antimicrobial activity) 비교예 10Comparative Example 10 5.75.7 > 0.8> 0.8

MIC에서 % 농도가 작을수록 여드름균에 대한 항균력에 대하여 유효한 물질이라고 할 수 있는데, 실시예 5~6의 경우 공지의 여드름 치료제인 에리스롬마이신을 사용한 비교예 10보다 % 농도가 유사하여 본 발명의 발아 녹차씨 추출물을 함유하는 조성물은 시험균에 대하여 훨씬 우수한 항균력을 가짐을 확인할 수 있다. 또한 본 발명의 발아 녹차씨 추출물을 함유하는 실시예 5~6은 미발아 녹차씨 추출물을 함유하는 비교예 7~8에 비하여도 우수한 항균력을 가짐을 알 수 있다.
In the case of Examples 5 to 6, the concentrations were similar to those of Comparative Example 10 using erythromycin, which is a known acne remedy, erythromycin. As a result, It can be confirmed that the composition containing the germinated green tea seed extract has far superior antibacterial activity to the test bacteria. In addition, Examples 5 to 6 containing the germinated green tea seed extract of the present invention have excellent antibacterial activity as compared with Comparative Examples 7 to 8 containing the germinated green tea seed extract.

[시험예 16] 혈색 개선 효과[Test Example 16]

본 발명에 의한 조성물의 피부 혈액 순환 촉진 효과를 평가하기 위하여, LDPI(Laser Doppler Perfusion Imager)를 이용하여 피부에서의 혈액순환 정도를 측정하였다. LDPI는 피부에서의 혈액순환을 측정하는 기기로 널리 알려져 있고 현재 사용되고 있는 기기로서, 피부의 모세혈관에서 혈액의 속도 및 양 뿐만 아니라 소동맥과 소정맥에서의 흐름까지 측정해 낼 수 있는 매우 민감한 기기이다.In order to evaluate the skin blood circulation promoting effect of the composition according to the present invention, the degree of blood circulation in the skin was measured using LDPI (Laser Doppler Perfusion Imager). LDPI is a widely used and widely used device for measuring blood circulation in skin. It is a highly sensitive device that can measure not only blood velocity and quantity in the capillaries of the skin, but also flow in the small artery and the parenchyma.

항온항습실에서 얼굴을 비누로 수세한 후 30분간 적응시키고, LDPI를 이용하여 초기값을 측정하였다. 먼저 평소 손발이 차가운 여성 30명의 이마 아래 부분의 초기 혈류량을 LDPI로 측정하였다. 그런 다음 상기 표 4의 조성에 따른 실시예 1~2 및 비교예 1~3 각각을 1주일 동안 피시험자들에게 사용하도록 한 후에 측정한 혈류량과 상기 초기 측정값을 비교한 결과(피부 혈류량 변화)를 하기 표 21에 나타내었다. The face was soaked in a constant temperature and humidity chamber, and then adapted for 30 minutes. Initial values were measured using LDPI. First, the initial blood flow in the lower part of the forehead of 30 women with cold hands and feet was measured by LDPI. Then, each of Examples 1 to 2 and Comparative Examples 1 to 3 according to the composition of Table 4 was used for a week for each subject, and the blood flow measured and the initial measured value were compared (skin blood flow change) Are shown in Table 21 below.

화장료 사용 전후 LDPI 결과-피부 혈류량LDPI results before and after using cosmetics - skin blood flow 시험물질Test substance 1주 사용 후 피부 혈류량 변화율(%)Percent change of skin blood flow after 1 week use (%) 실시예 1Example 1 1.21.2 실시예 2Example 2 3.23.2 비교예 1Comparative Example 1 0.60.6 비교예 2Comparative Example 2 0.70.7 비교예 3Comparative Example 3 0.10.1

상기 표 21의 결과에서, 본 발명의 발아 녹차씨 추출물이 함유된 실시예 1~2는 미발아 녹차씨 추출물이 함유된 비교예 1~2 보다 피부 혈류량을 현저하게 증가시켰으며, 이러한 혈액 순환 촉진을 통해 혈색이 개선되는 것을 확인할 수 있었다. 이는 궁극적으로 본 발명에 의한 발아 녹차씨 추출물을 함유하는 화장료 조성물이 피부의 영양분을 효과적으로 전달하고 피부 노화를 억제하며 지연시키는 데 기여할 수 있음을 시사한다.
From the results shown in Table 21, it can be seen that Examples 1 and 2 containing the germinated green tea seed extract of the present invention significantly increased the skin blood flow rate compared with Comparative Examples 1 and 2 containing the green germ extract, And the improvement in color was confirmed through the analysis. This suggests that the cosmetic composition containing the germinated green tea seed extract according to the present invention can contribute to effectively transmit nutrients of the skin and suppress and retard skin aging.

[시험예 17] 피부톤 개선 효과[Test Example 17] Effect of improving skin tone

본 발명의 조성물의 피부톤 개선 효과를 알아보기 위하여 30명의 피험자에게 상기 표 4의 조성에 따른 실시예 1~2 및 비교예 1~3을 각각 사용(저녁 1회/일 도포, 총 1주간)하도록 한 후, Facial Stage DM-3(Moritex, Japan) 기기를 활용하여 피부톤 개선 정도를 평가하였다. 피부톤 개선율은 피부의 명도 및 색채 측정값으로 피부의 명도 및 색채 변화 값으로 판단하였으며, 그 결과는 하기 표 22에 나타내었다. In order to examine the effect of the composition of the present invention on improving the skin tone, 30 subjects used Examples 1 to 2 and Comparative Examples 1 to 3 according to the composition of Table 4 (once a day / one day for a total of one week) After that, the degree of skin tone improvement was evaluated using a Facial Stage DM-3 (Moritex, Japan) device. The improvement rate of the skin tone was determined by the brightness and the color change value of the skin and the brightness and the color change value of the skin.

시험물질Test substance 피부톤 변화율(%)Change in skin tone (%) 명도(평균±표준편차)Brightness (mean ± standard deviation) 색채(평균±표준편차)Color (mean ± standard deviation) 실시예 1Example 1 1.98±0.111.98 + 0.11 1.80±0.0151.80 + 0.015 실시예 2Example 2 2.21±0.022.21 ± 0.02 1.74±0.031.74 ± 0.03 비교예 1Comparative Example 1 0.39±0.050.39 + - 0.05 0.11±0.070.11 + 0.07 비교예 2Comparative Example 2 0.78±0.0.80.78 + 0.0.8 0.23±0.020.23 + 0.02 비교예 3Comparative Example 3 2.21±0.022.21 ± 0.02 1.74±0.031.74 ± 0.03

표 22의 결과에서, 본 발명에 의한 미발아 녹차씨 추출물을 함유하는 비교예 1~2 및 추출물을 함유하지 않는 비교예 3은 유의적인 피부톤 개선 효능을 보이지 않은 반면, 발아 녹차씨 추출물을 함유하는 실시예 1~2는 사용전보다 사용후의 피부톤이 많이 개선되는 것을 확인하였다.
In the results of Table 22, Comparative Examples 1 and 2 containing the Muglia green tea seed extract according to the present invention and Comparative Example 3 not containing the extract showed no significant skin tone improving effect, whereas those containing the guga green tea seed extract It was confirmed that Examples 1 and 2 significantly improved skin tone after use than before use.

[실시예 7~8 및 비교예 11~13][Examples 7 to 8 and Comparative Examples 11 to 13]

하기 표 23에 기재된 조성에 따라 각 성분을 혼합하여 실시예 7~8 및 비교예 11~13의 조성물을 제조하였다(단위: 중량%). The compositions of Examples 7 to 8 and Comparative Examples 11 to 13 were prepared by mixing each component according to the composition shown in the following Table 23 (unit: wt%).

성분ingredient 실시예7Example 7 실시예8Example 8 비교예11Comparative Example 11 비교예12Comparative Example 12 비교예13Comparative Example 13 정제수Purified water 잔량Balance 잔량Balance 잔량Balance 잔량Balance 잔량Balance 발아 녹차씨 추출물(제조예 1)Green tea seed extract (Preparation Example 1) 1.01.0 -- -- -- -- 발아 녹차씨 아임계 추출물(제조예 2)Germinated green tea cyanide extract (Preparation Example 2) -- 1.01.0 -- -- -- 미발아 녹차씨 추출물(비교제조예 1)Green tea seed extract (Comparative Production Example 1) -- -- 1.01.0 -- -- 미발아 녹차씨 아임계 추출물(비교제조예 2)Green tea extract (Comparative Preparation Example 2) -- -- -- 1.01.0 -- 암모늄라우릴설페이트액Ammonium lauryl sulfate solution 3030 3030 3030 3030 3030 암모늄라우레스설페이트액Ammonium laureth sulfate solution 2020 2020 2020 2020 2020 라우릴디메틸아민옥사이드액Lauryldimethylamine oxide solution 55 55 55 55 55 메틸파라벤Methyl paraben 0.10.1 0.10.1 0.10.1 0.10.1 0.10.1 코카마이드엠이에이Cocamide miai 1.01.0 1.01.0 1.01.0 1.01.0 1.01.0 세틸알콜Cetyl alcohol 0.50.5 0.50.5 0.50.5 0.50.5 0.50.5 폴리쿼터늄 10Polyquaternium 10 0.50.5 0.50.5 0.50.5 0.50.5 0.50.5 향료Spices 1.01.0 1.01.0 1.01.0 1.01.0 1.01.0

[시험예 18] 모발 성장 촉진 효과[Test Example 18] Hair growth promoting effect

<탈모 방지 효과 시험><Test for preventing hair loss>

초기 탈모 현상이 있는 피검자 30명을 대상으로 탈모 방지 효과에 관한 실험을 16주 동안 진행하였다. 상기 실시예 7~8 및 비교예 11~13의 조성물을 1일 1회씩 16주 동안 사용한 후, 16주가 경과한 다음 머리를 감을 때 다시 탈락모를 수집하여 개수를 세었으며, 그 결과를 하기 표 24에 나타내었다.A study on the effect of preventing hair loss was conducted on 30 subjects who had an early hair loss phenomenon for 16 weeks. The compositions of Examples 7 to 8 and Comparative Examples 11 to 13 were used once a day for 16 weeks. After 16 weeks, the hair was collected again and hair was collected again, and the number was counted. The results are shown in Table 24 Respectively.

처리군Treated group 탈락모개수평균(개)/표준편차Number of dropouts (average) / standard deviation 실시예 7Example 7 48/2348/23 실시예 8Example 8 35/1235/12 비교예 11Comparative Example 11 60/3760/37 비교예 12Comparative Example 12 62/2462/24 비교예 13Comparative Example 13 75/2875/28

상기 표 24의 결과에서, 본 발명에 의한 실시예 7~8의 조성물로 처리할 경우 비교예 11~13에 비해 탈락모의 개수가 현저히 감소하는 것을 알 수 있었다. 특히 미발아 녹차씨 추출물을 함유하는 비교예 11~12에 비하여도 발아 녹차씨 추출물을 함유하는 실시예 7~8을 사용한 경우에 탈락모의 개수가 현저히 감소함을 확인할 수 있다.
From the results shown in Table 24, it was found that the number of decay moths was significantly reduced when the composition of the present invention was treated with the compositions of Examples 7 to 8, as compared with Comparative Examples 11 to 13. In particular, it can be confirmed that the number of dropouts is significantly reduced in Examples 7 to 8 containing gingko green tea seed extract, compared with Comparative Examples 11 to 12 containing the gingival green tea seed extract.

<모낭세포 중 모유두세포(dermal papillaecell)의 증식 촉진 효과 평가><Assessment of proliferation promoting effect of dermal papillaecell in hair follicle cells>

2%의 우태아혈청이 함유된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Media) 배지에서 배양한 사람 유래 모낭 모유두세포를 96공 평판배양기(96-wellmicrotiter plate)에 1,000세포/웰이 되도록 분주하였다. 상기 제조예 1~2에 따른 발아 녹차씨 추출물 및 발아 녹차씨 아임계 추출물, 비교제조예 1~2에 따른 미발아 녹차씨 추출물 및 미발아 녹차씨 아임계 추출물을 각각 10 μg/ml의 농도로 희석하여 첨가하고, 양성 대조군으로 모발 성장 촉진 효과가 알려져 있는 피롤리디닐디아미노피리미딘옥사이드를 10μg/ml의 농도로 희석하여 첨가하여, 37℃ 온도에서 48시간 동안 배양하였다. 무처리 음성 대조군도 함께 시험하였다. 배양 후, 0.2% MTT(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide) 용액을 각 웰 당 50㎕씩을 첨가하고, 다시 37℃ 온도에서 4시간 동안 배양한 다음 생성된 물질을 DMSO(Dimethylsulfoxide)로 용해시켰다. 용해된 결과물의 흡광도를 평판배양측정기(microplate reader)를 이용하여 515nm에서 측정하였다. 이를 음성 대조군과 비교하여 시험 물질 흡광도의 상대적 차이를 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 25에 나타내었다. 음성대조군을 0%, 양성대조군을 100%로 하여, 하기의 수학식 7로 상대적인 증식율을 계산하였다.Human dermal papilla cells cultured in DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Media) medium containing 2% fetal bovine serum were dispensed into a 96-well microtiter plate at 1,000 cells / well. The ginga green tea seed extract and ginga green tea cyanide extract according to Preparation Examples 1 and 2, the microgalaxy seed extract according to Comparative Preparation Examples 1 and 2, and the microgalaxy green tea caffeine extract according to Preparation Examples 1 and 2 were mixed at a concentration of 10 μg / ml And diluted to a concentration of 10 μg / ml, and the mixture was cultured at 37 ° C for 48 hours. The hair growth promoting effect of pyrrolidinyldiaminopyrimidine oxide was observed. Untreated negative controls were also tested. After the incubation, 50 μl of 0.2% MTT (3- [4,5-dimethylthiazol-2-yl] -2,5-diphenyltetrazolium bromide) solution was added to each well and incubated at 37 ° C. for 4 hours The resulting material was dissolved in DMSO (Dimethylsulfoxide). The absorbance of the dissolved product was measured at 515 nm using a microplate reader. The relative difference in the absorbance of the test substance was measured by comparing it with the negative control, and the results are shown in Table 25 below. The relative growth rate was calculated by the following equation (7), assuming that the negative control group was 0% and the positive control group was 100%.

시험 물질Test substance 처리농도Treatment concentration 모유두세포증식능(%)Proliferation of dermal papilla cells (%) 음성대조군(무처리군)Negative control group (no treatment group) 0 μg/ml0 μg / ml 00 양성대조군(피롤리디닐디아미노피리미딘옥사이드)A positive control (pyrrolidinyldiaminopyrimidine oxide) 10 μg/ml10 μg / ml 100100 발아 녹차씨 추출물(제조예 1)Green tea seed extract (Preparation Example 1) 10 μg/ml10 μg / ml 6868 발아 녹차씨 아임계 추출물(제조예 2)Germinated green tea cyanide extract (Preparation Example 2) 10 μg/ml10 μg / ml 7575 미발아 녹차씨 추출물(비교제조예 1)Green tea seed extract (Comparative Production Example 1) 10 μg/ml10 μg / ml 2121 미발아 녹차씨 아임계 추출물(비교제조예 2)Green tea extract (Comparative Preparation Example 2) 10 μg/ml10 μg / ml 2323

상기 표 25의 결과에서, 본 발명의 발아 녹차씨 추출물인 제조예 1~2는 음성 대조군보다 모유두 세포 증식 효과가 뛰어나므로 그 자체로 모발 성장 촉진 효과가 있음을 확인할 수 있었고, 육모효과가 알려진 피롤리디닐디아미노피리미딘옥사이드와 비교할 때 70% 정도의 효과가 있음을 확인할 수 있다. 또한 특히 미발아 녹차씨 추출물인 비교제조예 1~2에 비하여도 뛰어난 모발 성장 촉진효과를 가짐을 알 수 있다.
In the results of Table 25, it was confirmed that Production Examples 1 and 2 of germinated green tea seed extract of the present invention had hair papillary cell proliferation effect more than negative control, It can be confirmed that there is an effect of about 70% as compared with the roridinyl diaminopyrimidine oxide. In addition, it can be seen that the hair growth promoting effect is also excellent in comparison with Comparative Production Examples 1 and 2, which are the extracts of green germ extract.

[실시예 9~10 및 비교예 14~16] [Examples 9 to 10 and Comparative Examples 14 to 16]

하기 표 26의 조성으로 샴푸를 제조하였다. 구체적으로, 계면활성제와 에틸렌글리콜디스테아레이트를 정제수에 첨가하여 80℃가 될 때까지 가열하여 균일하게 용해시킨 후, 교반하에 40℃까지 서서히 냉각시키고, 상기 혼합물에 본 발명에 따른 유효성분과 방부제, 점도조절제, 향료, 모발 컨디셔닝제를 투입하여 혼합한 후, 교반하에 실온까지 냉각시켜 제조하였다. A shampoo was prepared in the composition shown in Table 26 below. Specifically, the surfactant and ethylene glycol distearate were added to purified water, heated to 80 DEG C to dissolve uniformly, and then gradually cooled to 40 DEG C with stirring. To the mixture were added the active ingredient according to the present invention and a preservative, A viscosity adjusting agent, a perfume, and a hair conditioning agent were mixed and stirred, followed by cooling to room temperature.

성분ingredient 실시예9Example 9 실시예10Example 10 비교예14Comparative Example 14 비교예15Comparative Example 15 비교예16Comparative Example 16 라우릴황산암모늄Ammonium lauryl sulfate 1010 1010 1010 1010 1010 폴리옥시에틸렌라우릴황산암모늄Polyoxyethylene lauryl ammonium sulfate 55 55 55 55 55 코코아미도프로필베타인Cocoamidopropyl betaine 22 22 22 22 22 에틸렌글리콜디스테아레이트Ethylene glycol distearate 1.51.5 1.51.5 1.51.5 1.51.5 1.51.5 코코일 모노에탄올아미드Cocoyl monoethanolamide 0.80.8 0.80.8 0.80.8 0.80.8 0.80.8 발아 녹차씨 추출물(제조예 1)Green tea seed extract (Preparation Example 1) 1.01.0 -- -- -- -- 발아 녹차씨 아임계 추출물(제조예 2)Germinated green tea cyanide extract (Preparation Example 2) -- 1.01.0 -- -- -- 미발아 녹차씨 추출물(비교제조예 1)Green tea seed extract (Comparative Production Example 1) -- -- 1.01.0 -- -- 미발아 녹차씨 아임계 추출물(비교제조예 2)Green tea extract (Comparative Preparation Example 2) -- -- -- 1.01.0 -- 폴리쿼터늄-10Polyquaternium-10 0.20.2 0.20.2 0.20.2 0.20.2 0.20.2 청색1호Blue No. 1 0.00020.0002 0.00020.0002 0.00020.0002 0.00020.0002 0.00020.0002 황색4호Yellow No. 4 0.00010.0001 0.00010.0001 0.00010.0001 0.00010.0001 0.00010.0001 메틸파라벤Methyl paraben 0.10.1 0.10.1 0.10.1 0.10.1 0.10.1 향료Spices 0.80.8 0.80.8 0.80.8 0.80.8 0.80.8 구연산Citric acid 0.10.1 0.10.1 0.10.1 0.10.1 0.10.1 디메치콘Dimethicone 1.01.0 1.01.0 1.01.0 1.01.0 1.01.0 물water to 100to 100 to 100to 100 to 100to 100 to 100to 100 to 100to 100

[시험예 19] 항비듬 효과[Test Example 19] Anti-dandruff effect

<항비듬력 평가><Anti-dandruff evaluation>

상기 실시예 9~10 및 비교예 14~16의 항비듬력을 측정하여 비교하였다. 이때 시험 균주로는 비듬균인 피티로스포름 오발레(Pityrosporum Ovalae (ATCC 12078))를 사용하였다.The anti-dandruff properties of Examples 9 to 10 and Comparative Examples 14 to 16 were measured and compared. At this time, as a test strain, dicembryum Pityrosporum Ovalae (ATCC 12078) was used.

항균력 측정방법은 디스크 확산법을 이용하였다. 디스크 확산법을 통하여 MIC(Minimum Inhibitiory Concentration) Test로 측정하였다.The antimicrobial activity was measured by disk diffusion method. And measured by the MIC (Minimum Inhibition Concentration) test through the disk diffusion method.

구체적으로는, 멸균 처리된 피부 디스크를 샴푸 희석용액에 3분 동안 담궈두었다가, 흐르는 물로 세정하였다. 그런 다음, 피부 디스크를 시험균이 접종된 고체배지 위에 올려놓은 후 시험균을 배양하였다. 디스크의 크기를 제외하고, 배양 후 균의 증식이 억제된 투명대(clear zone)의 크기를 측정하여 상대적인 항균력을 측정하였다. 실험 결과치는 3회 측정한 결과의 평균값으로 하여 하기 표 27에 나타내었다.Specifically, the sterilized skin disc was immersed in a shampoo dilution solution for 3 minutes, and then washed with flowing water. Then, the skin discs were placed on a solid medium inoculated with the test bacteria, and then the test bacteria were cultured. Except for the size of the disk, the relative size of the clear zone, which inhibited the growth of the bacteria after culturing, was measured to determine the relative antibacterial activity. The results of the experiment are shown in Table 27 as the average value of the results of three times of measurement.

실시예9Example 9 실시예10Example 10 비교예14Comparative Example 14 비교예15Comparative Example 15 비교예16Comparative Example 16 비듬균 억제환 크기(mm)Strain relief ring size (mm) 1414 2525 88 99 00

상기 표 27의 결과에서, 본 발명에 따른 실시예 9~10의 경우 비교예 16과 비교하여 보다 우수한 항비듬 효과가 있음을 확인할 수 있다. 특히 미발아 녹차씨 추출물을 함유하는 비교예 14~15와 비교하여도 발아 녹차씨 추출물을 함유하는 실시예 9~10의 경우 현저히 우수한 항비듬 효과를 가짐을 알 수 있다.
From the results shown in Table 27, it can be seen that Examples 9 to 10 according to the present invention have a superior anti-dandruff effect as compared with Comparative Example 16. Compared with Comparative Examples 14 to 15 in which the extract of Muglia green tea seeds was contained in particular, Examples 9 to 10 containing ginger green tea seed extract had remarkably excellent antidandruff effect.

<비듬감소 효과 시험><Dandruff reduction test>

비듬이 비교적 많은 19~35세의 남성 60명을 선정하여 각 상기 실시예 9~10 및 비교예 14~16의 샴푸에 대하여 12명씩 5개 그룹으로 1개월간 다음과 같은 방식으로 사용하게 한 후 비듬 감소율을 측정하였다.Sixty men aged 19 to 35 years with a relatively large amount of dandruff were selected. The shampoos of Examples 9 to 10 and Comparative Examples 14 to 16 were used in 5 groups of 12 persons for 1 month in the following manner, Reduction rate was measured.

시험 개시 전에 보통 통상의 샴푸로 세발하고, 세발 후 2일간 누적된 비듬을 채집하여 채집된 비듬의 중량과 각 상기 실시예 9~10 및 비교예 14~16 샴푸로 2일에 한번씩 세발하여 시험종료 후 2일간 누적된 비듬의 중량을 비교 평가하였다. 이때 누적된 비듬은 진공 흡입 장치로써 두피로부터 직접 채집하여, 하기 수학식 8에 의거하여 비듬 감소율을 구하고 그 결과를 하기 표 28에 나타내었다. The dandruff was collected by collecting dandruff accumulated for 2 days after shaking and shredded once every 2 days by the shampoo of each of Examples 9 to 10 and Comparative Examples 14 to 16, The weight of dandruff accumulated for 2 days was compared and evaluated. The accumulated dandruff was collected directly from the scalp using a vacuum suction device, and the dandruff reduction rate was calculated according to the following equation (8). The results are shown in Table 28 below.

실시예9Example 9 실시예10Example 10 비교예14Comparative Example 14 비교예15Comparative Example 15 비교예16Comparative Example 16 평균값medium 21.321.3 34.834.8 12.312.3 15.615.6 3.43.4 SDSD 12.712.7 15.915.9 7.4)7.4) 11.211.2 2.12.1

상기 표 28의 결과에서, 본 발명에 따른 실시예 9~10의 경우 비교예 16와 비교하여 보다 우수한 항비듬 효과가 있음을 확인할 수 있다. 특히 미발아 녹차씨 추출물을 함유하는 비교예 14~15와 비교하여도 발아 녹차씨 추출물을 함유하는 실시예 9~10의 경우 현저히 우수한 항비듬 효과를 가짐을 알 수 있다.
From the results shown in Table 28, it can be seen that Examples 9 to 10 according to the present invention have a superior anti-dandruff effect as compared with Comparative Example 16. Compared with Comparative Examples 14 to 15 in which the extract of Muglia green tea seeds was contained in particular, Examples 9 to 10 containing ginger green tea seed extract had remarkably excellent antidandruff effect.

<두피 가려움증 방지 효과 시험>&Lt; Test for preventing scalp itchiness >

비교적 두피 가려움을 심하게 느끼는 25세~45세의 남녀 60명을 선정하여 12명씩 5개 그룹으로 나누어 각 상기 실시예 9~10 및 비교예 14~16의 샴푸를 3일에 1회씩 2주간 사용하게 한 후 두피 가려움 방지 효과를 하기 평가기준을 통하여 평가하고 그 결과를 하기 표 29에 나타내었다.Sixty men and women aged 25 to 45 years who were relatively scarred with scalp itching were selected and divided into 5 groups of 12 persons, and each of the shampoos of Examples 9 to 10 and Comparative Examples 14 to 16 was used once for 3 days for 2 weeks The results are shown in Table 29 below.

[평가 기준][Evaluation standard]

매우 우수하다 - 5점Very good - 5 points

우수하다 - 4점Excellent - 4 points

보통이다 - 3점Usually - 3 points

불량하다 - 2점Poor - 2 points

매우 불량하다 - 1점Very bad - 1 point

구분division 실시예9Example 9 실시예10Example 10 비교예14Comparative Example 14 비교예15Comparative Example 15 비교예16Comparative Example 16 두피의 가려움증 제거효과The itching effect of scalp 3.63.6 4.24.2 2.92.9 3.23.2 2.32.3

상기 표 29에서 알 수 있는 바와 같이, 본 발명에 따른 실시예 9~10의 경우 비교예 16와 비교하여 보다 우수한 두피가려움증 방지 효과가 있음을 확인할 수 있다. 특히 미발아 녹차씨 추출물을 함유하는 비교예 14~15와 비교하여도 발아 녹차씨 추출물을 함유하는 실시예 9~10의 경우 현저히 우수한 두피가려움증 방지 효과를 가짐을 알 수 있다.
As can be seen from the above Table 29, it can be confirmed that Examples 9 to 10 according to the present invention have a better anti-scalp effect than Comparative Example 16. In particular, in comparison with Comparative Examples 14 to 15 in which the ginga green tea seed extract was contained, Examples 9 to 10 containing gingko green tea seed extract had a remarkably excellent effect of preventing scalp itching.

Claims

A cosmetic composition for enhancing skin elasticity and improving skin wrinkles containing germinated green tea tree extract as an active ingredient.

The cosmetic composition according to claim 1, wherein the content of the germinated green tea seed extract is 0.001 to 50% by weight based on the total weight of the composition.

[Claim 3] The cosmetic composition according to claim 2, wherein the content of the germinated green tea seed extract is 0.1 to 10% by weight based on the total weight of the composition.

The composition according to claim 1, wherein the composition promotes the production of collagen in skin cells, inhibits the activity of elastase, and reduces the expression of collagenase. Composition.

The cosmetic composition according to claim 1, wherein the germinated green tea seed extract is an alcoholic extract of germinated green tea seeds.

The cosmetic composition according to claim 1, wherein the germinated green tea seed extract is a sub-critical extract of germinated green tea seeds.

[Claim 7] The cosmetic composition according to claim 6, wherein the subcritical extract is obtained by extracting germinated green tea seeds at a high pressure of 50 to 200 MPa in a subcritical extraction apparatus.

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