KR100887631B1 - Composition of skin external application containing ginseng fruit extracts - Google Patents

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Abstract

A composition for skin external application for improvement of skin wrinkle is provided to have anti-aging, skin anti-wrinkling effect, skin whitening effect, skin hydration and atopic symptom improvement effect, skin trouble and pimple improvement effect and skin color improvement effect. A composition for skin external application for improvement of skin wrinkle comprises ginseng fruit extract as an active ingredient. The ginseng fruit extract is manufactured by drying sarcocarp and shell of a fruit of the ginseng of which berries are separated and removed, extracting the dried sarcocarp and shell using water or ethanol. The composition for skin external application is a cosmetic material. The cosmetic material is selected from flexible cosmetic water, astringent cosmetic water, lotion, moisturizing cream, massage cream, essence, eye cream, eye essence, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, powder, body lotion, body cream, body oil and body essence.

Description

인삼 열매 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물{Composition of skin external application containing ginseng fruit extracts}Composition for skin external application containing ginseng fruit extracts

본 발명은 인삼 열매 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 인삼의 지상부 중에서 독특한 성분과 조성을 갖는 인삼 열매 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 피부에서 콜라겐생성을 촉진하며, MMP-1 억제효과를 나타내고, 동시에 항산화 효과와 DNA 손상보호효과를 통한 피부 노화억제 및 주름개선 효과를 갖는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다. 또한 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 멜라닌생성을 억제하고 자외선에 의한 색소침착을 개선하는 효과를 통하여 피부 미백효과를 나타내며, 피부각질형성세포의 분화를 정상유도하고 유지시킴으로써 피부건조증상과 아토피증상을 개선시킬 수가 있었고, 피지분비를 조절하며 항염증효과를 통한 여드름 및 피부 트러블 개선에도 효과적이며, 피부 말초혈액순환 개선을 통하여 혈색을 좋게 하여 피부를 맑고 투명하게 해준다.The present invention relates to a composition for external application for skin containing ginseng fruit extract, and more specifically, to promote collagen production in the skin by containing ginseng fruit extract having a unique ingredient and composition as the active ingredient in the ground portion of ginseng, MMP-1 inhibition The present invention relates to a skin external composition having an effect and at the same time having an anti-aging and anti-wrinkle effect through an antioxidant effect and a DNA damage protection effect. In addition, the external composition for skin according to the present invention exhibits a skin whitening effect through the effect of inhibiting melanogenesis and improving pigmentation by ultraviolet rays, and induces and maintains the differentiation of keratinocytes of the skin to maintain skin dryness and atopic symptoms. It was able to improve sebum secretion and to improve acne and skin trouble through anti-inflammatory effect. It improves blood circulation through improving peripheral blood circulation and makes skin clear and transparent.

인삼(Panax ginseng C.A. Meyer)은 오가피과 인삼 속에 속하는 식물로서 한 국, 중국 및 일본 등지에서 2,000여년 전부터 사용되어 온 생약이며, 경험적으로 질병을 예방하고 수명을 연장시킬 목적으로 사용되어 왔다. 지금까지 알려진 인삼의 효능 및 효과는 중추신경계에 대한 작용, 항발암 작용, 항암활성, 면역기능 조절작용, 항당뇨 작용, 간기능 항진효능, 심혈관 장해개선, 항동맥경화 작용, 혈압조절 작용, 갱년기 장애 개선, 골다공증에 미치는 효과, 항스트레스 및 항피로 작용, 항산화 활성 및 노화억제 효능 등이 있다(최신고려인삼 '성분 및 효능편', 한국인삼연초연구원, 56-112, 1996).Ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) is a plant belonging to the genus Ogapi and ginseng, which has been used in Korea, China and Japan for more than 2,000 years, and has been used for the purpose of preventing disease and extending the life. Known efficacy and effects of ginseng to the central nervous system, anticarcinogenic effect, anticancer activity, immune function regulation, antidiabetic effect, liver function anti-inflammatory effect, cardiovascular disorders improvement, anti-arteriosclerosis, blood pressure control action, menopausal Disability improvement, effects on osteoporosis, antistress and anti-fatigue, antioxidant activity and anti-aging effects (Korea Ginseng 'Ingredients and Efficacy', Korea Ginseng and Tobacco Research Institute, 56-112, 1996).

인삼의 대표적 생리활성 성분인 진세노사이드(Ginsenoside)는 인삼의 지상 및 지하부에 고르게 분포되어 있으며, 특히 인삼 근(뿌리), 인삼엽 및 인삼 열매 등 부위에 따라 진세노사이드 함량뿐만 아니라 조성도 다른 것으로 알려져 있다(Attele AS et al, Biochem Pharmacol, 58; 1685-1693, 1999). 특히 인삼 열매는 인삼 근(뿌리)과 다른 진세노사이드의 성분과 그 함량을 바탕으로 항당뇨 효능에 있어서 인삼근 보다 우수한 결과를 나타내는 것으로 보고되었다(Dey L. et al., Phytomedicine, 10; 600-605, 2003).Ginsenoside, a representative physiologically active ingredient of ginseng, is distributed evenly in the ground and underground parts of ginseng. Especially, the composition and composition of ginsenosides are different depending on the parts such as ginseng root (root), ginseng leaf and ginseng fruit. (Attele AS et al, Biochem Pharmacol, 58; 1685-1693, 1999). In particular, ginseng fruit has been reported to show better results than ginseng root in antidiabetic efficacy based on the components and contents of ginseng root (root) and other ginsenosides (Dey L. et al., Phytomedicine, 10; 600; -605, 2003).

최근 천연 화장품에 대한 소비자의 관심이 증대되고 동시에 한방 소재를 활용하는 많은 화장품들이 출시되면서 인삼도 화장품의 중요한 피부효능을 가진 식물소재로 연구되고 있으나, 대부분 인삼근을 이용한 추출물 또는 인삼근의 진세노사이드 성분과 인삼다당체를 활용한 것일 뿐 인삼 열매의 성분에 의한 피부 노화억제와 주름개선 효능에 대한 것은 전무한 실정이다.Recently, as consumers' interest in natural cosmetics has increased and many cosmetics using herbal ingredients have been released, ginseng is also being studied as a plant material having important skin effects of cosmetics, but most of them are extracts or ginseng roots of ginseng root. Only the side ingredients and ginseng polysaccharides are used to inhibit skin aging and wrinkle improvement by ginseng fruit components.

또한 인삼 열매는 예로부터 인삼보다도 귀하게 여겨지는 것으로서 종자 획득 을 목적으로 선별되어 수확되어 왔다. 인삼 열매는 인삼의 재배기간 중 4년생에 한해서 1회만 채종하게 되며, 3년생에서 채종하면 종자가 너무 작기 때문에 좋은 묘삼을 생산하기가 어렵고 5년생 이상에서 채종하면 종자는 충실하고 좋으나 인삼뿌리의 비대발육을 억제할 뿐만 아니라 조직이 치밀하지 못하여 홍삼을 제조할 때 홍삼품질이 크게 저하될 수 있다. 또 채종횟수를 재배기간 중에 2회 이상으로 채종하면 수량 및 홍삼품질이 크게 저하된다(최신고려인삼 '재배편', 한국인삼연초연구원, 130-131, 1996).In addition, ginseng fruit is considered more precious than ginseng since ancient times, and has been harvested for the purpose of seed acquisition. Ginseng fruit is harvested only once in 4 years of ginseng cultivation period. It is difficult to produce good seedlings because seed is too small when harvested in 3 years old. Seeds are faithful and good when grown in 5 years old or older. In addition to inhibiting development, the tissue is not dense, so red ginseng quality may be greatly reduced when manufacturing red ginseng. In addition, the number and frequency of red ginseng deterioration is greatly reduced when the number of crops is collected more than two times during the cultivation period.

미국등록특허 제6,524,626호에서 인삼 열매즙을 동결건조하여 화장료 조성물에 사용하고 있으며, 인삼 열매즙과 다른 천연물을 복합적으로 사용함으로써 이들이 보습과 피부유연효과를 나타낸다고 기재하고 있으나, 이는 본 발명에 의한 인삼 열매 추출물이 나타내는 피부 노화억제 효능 및 주름개선효능으로서의 화장품 용도와는 분명 구분되는 것이다.In US Patent No. 6,524,626, ginseng fruit juice is used in a cosmetic composition by freeze-drying, it is described that by using a combination of ginseng fruit juice and other natural products they exhibit moisturizing and skin softening effect, which is according to the present invention It is clearly distinguished from cosmetic use as an anti-aging effect and an antiwrinkle effect exhibited by the extract.

인간의 피부는 나이가 들어감에 따라 여러 가지 내적, 외적 요인에 의해 변화를 겪는다. 즉, 내적으로는 신진대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되어 생체에 필요한 면역 단백질 및 생체 구성 단백질들의 생합성이 줄어들게 되며, 외적으로는 오존층 파괴로 인하여 태양 광선 중 지표에 도달하는 자외선의 함량이 증가하고 환경 오염이 더욱 심화됨에 따라 자유 라디칼 및 활성 유해 산소 등이 증가함으로써, 피부의 두께가 감소하고, 주름이 증가하며, 탄력이 감소될 뿐 아니라 피부 혈색도 칙칙해지고, 피부 트러블이 자주 발생하며, 기미와 주근깨 및 검버섯 또한 증가하는 등 여러 가지 변화 를 일으키게 된다.Human skin is changed by a number of internal and external factors as it ages. That is, internally, the secretion of various hormones that regulate metabolism decreases, and the function of immune cells and the activity of cells decreases, thereby reducing the biosynthesis of immune proteins and constituent proteins necessary for living organisms. Due to the increase in the amount of ultraviolet rays that reach the surface of the sun's rays and intensifying environmental pollution, free radicals and free radicals increase, thereby reducing the thickness of the skin, increasing wrinkles, reducing elasticity, Dull skin, dull skin, frequent skin problems, blemishes, freckles, and black mushrooms also increase.

노화가 진행될수록 피부를 구성하는 물질인 콜라겐, 엘라스틴, 히아루론산 및 당단백질의 함유량 및 배열이 변하거나 감소하는 증상들이 나타나게 되고, 자유 라디칼 및 활성 유해 산소에 의한 산화적 스트레스를 받게 된다. 또한 노화가 진행되거나 자외선에 의해서, 피부를 구성하는 대부분의 세포에서는, 염증을 일으킨다고 알려져 있는 전염증성 사이토카인(proinflammatory cytokine)을 생성하는 효소인 사이클로옥시게나제-2(Cox-2, cyclooxygenase)의 생합성이 증가하고, 이들 염증성 인자에 의해 피부조직을 분해하는 효소인 매트릭스 메탈로프로테아제(MMP, Matrix metalloproteinase)의 생합성이 증가하며, iNOS(inducible nitric oxide synthase)에 의한 NO(nitric oxide) 생성이 증가하는 것으로 알려져 있다. 즉 자연적으로 진행되는 내인성 노화에 따른 세포 활성의 감소 및 미세염증에 의해 기질물질의 생합성이 감소되고, 여러 가지 유해 환경에 의한 스트레스의 증가 및 태양 광선에 의한 활성 산소 종의 증가와 같은 외적 요인에 의해 분해 및 변성이 가속화되어 피부 기질이 파괴되고 얇아지면서 피부 노화의 제반 증상들이 나타나게 된다. 따라서, 이러한 노화의 현상들을 방지하고, 개선시킬 수 있는 활성성분에 대하여 많은 연구가 행해지고 있는 것이 현실이다.As aging progresses, symptoms such as changes and decreases in the content and arrangement of collagen, elastin, hyaluronic acid and glycoproteins, which are constituents of the skin, appear and are subject to oxidative stress caused by free radicals and active harmful oxygen. In addition, cyclooxygenase-2 (Cox-2, cyclooxygenase), an enzyme that produces proinflammatory cytokine, which is known to cause inflammation, in most cells constituting the skin due to aging or ultraviolet rays. Biosynthesis of the enzyme increases the biosynthesis of matrix metalloproteinase (MMP), an enzyme that breaks down skin tissues by these inflammatory factors, and the production of nitric oxide (NO) by iNOS (inducible nitric oxide synthase). It is known to increase. In other words, the biosynthesis of the substrate material is reduced by the reduction of cellular activity and micro-inflammation due to naturally occurring endogenous aging, and by external factors such as the increase of stress caused by various harmful environments and the increase of free radical species caused by sunlight. As a result, decomposition and degeneration are accelerated, and the skin matrix is destroyed and thinned, and various symptoms of skin aging appear. Therefore, a lot of research is being conducted on the active ingredient that can prevent and improve the phenomenon of aging.

사람의 피부색을 결정하는 데는 여러 가지 요인들이 관여하는데, 그 중에서도 멜라닌 색소를 만드는 멜라노사이트(melanocyte)의 활동성, 혈관의 분포, 피부의 두께 및 카로티노이드와 빌리루빈 등의 인체 내외의 색소 함유 유무 등의 요인들이 중요하다.There are many factors involved in determining the skin color of a person, including the activity of melanocytes (melanocytes) that make melanin pigment, the distribution of blood vessels, the thickness of the skin and the presence or absence of pigments in the body such as carotenoids and bilirubin. Are important.

이중 특히 가장 중요한 요인은 인체 내의 멜라노사이트에서 타이로시나제 등의 여러 효소가 작용하여 생성되는 멜라닌이라는 흑색 색소이다. 이 멜라닌 색소의 형성에는 유전적 요인, 호르몬 분비, 스트레스 등과 관련된 생리적 요인 및 자외선 조사 등과 같은 환경적 요인 등이 영향을 미친다. Especially, the most important factor is a black pigment called melanin which is produced by the action of various enzymes such as tyrosinase in melanocytes in the human body. The formation of this melanin pigment is influenced by genetic factors, physiological factors related to hormone secretion, stress, and environmental factors such as ultraviolet irradiation.

신체 피부의 멜라닌 세포에서 생성되는 멜라닌 색소는 검은 색소와 단백질의 복합체 형태를 갖는 페놀계 고분자 물질로서, 태양으로부터 조사되는 자외선을 차단하여 진피 이하의 피부기관을 보호해주는 동시에 피부 생체 내에 생겨난 자유 라디칼 등을 잡아주는 등 피부 내 단백질과 유전자들을 보호해주는 유용한 역할을 담당한다. Melanin pigment, which is produced from melanocytes of the skin of the body, is a phenolic polymer material having a complex form of black pigment and protein. It protects skin organs below the dermis by blocking ultraviolet rays from the sun and free radicals generated in the skin body. It plays a useful role in protecting proteins and genes in the skin.

이와 같이 피부 내, 외부의 스트레스적 자극에 의해 생겨난 멜라닌은 스트레스가 사라져도 피부 각질화를 통해서 외부로 배출되기 전까지는 없어지지 않는 안정한 물질이다. 그러나 멜라닌이 필요 이상으로 많이 생기게 되면 기미, 주근깨 및 점 등과 같은 과색소 침착증을 유발하여 미용상으로 좋지 않은 결과를 가져오게 된다. As such, melanin produced by stress stimulation inside and outside the skin is a stable substance that does not disappear until it is released to the outside through skin keratinization even if the stress disappears. However, if the melanin is produced more than necessary to cause hyperpigmentation, such as blemishes, freckles, and spots, cosmetically bad results.

오늘날 동양권의 여성들은 백옥같이 하얗고 깨끗한 피부를 선호하며 이를 미의 중요한 기준으로 삼고 있기 때문에 과색소 침착에 대한 치료 및 미용상 문제를 해결하고자 하는 요구가 늘어나게 되었다. Today, Asian women prefer white and clean skin like white jade, and this is an important standard of beauty, increasing the demand for treatment and cosmetic problems for hyperpigmentation.

이와 같은 요구에 부응하여 종전부터 아스코르빈산, 코지산, 알부틴, 하이드로퀴논, 글루타치온 또는 이들의 유도체, 또는 타이로시나제 저해활성을 가진 물질들을 화장료나 의약품에 배합하여 사용하여 왔으나, 이들의 불충분한 미백효과, 피 부에 대한 안전성 문제, 화장료에 배합 시 나타나는 제형 및 안정성의 문제 등으로 인해 그 사용이 제한되고 있다.In response to this demand, ascorbic acid, kojic acid, arbutin, hydroquinone, glutathione or derivatives thereof, or substances having tyrosinase inhibitory activity have been used in combination with cosmetics or pharmaceuticals, but they are insufficient. Its use is limited due to its whitening effect, safety issues on the skin, formulation and stability problems when formulating it in cosmetics.

피부(skin) 중에서 최외각에 위치한 표피(epidermis)의 가장 중요한 기능은, 외부로부터의 다양한 자극(화학물질, 대기오염물질, 건조한 환경, 자외선 등의 물리 및 화학적 자극인자)에 대한 방어와 피부를 통한 체내 수분의 과도한 발산을 막는 보호기능이며, 이러한 보호기능은 각질형성세포로 구성된 각질층이 정상적으로 형성되어 있을 때만 그 기능을 유지할 수 있다. 표피 중에서도 가장 바깥에 존재하는 각질층(Stratum corneum, horney layer)은 각질형성세포로부터 형성되며, 분화가 완결된 각질 세포와 그를 둘러싼 지질층으로 구성되어 있다(J. Invest. Dermatol. 1983; 80: 44-49). 각질세포는 표피 최하층에서 지속적으로 증식(proliferation)하는 기저세포(basal cell)가 단계적으로 형태 및 기능상의 변화를 거치며, 피부 표면까지 상승한 특징적인 세포이며, 일정 기간이 경과하면 오래된 각질세포는 피부에서 탈락되고 새로운 각질세포가 그 기능을 대신하게 되는데, 이러한 반복적인 일련의 변화 과정을 「표피 세포의 분화」 또는 「각화(keratinization)」라고 부른다. 각화과정 중에 각질형성세포는 천연보습인자(Natural Moisturizing Factor; NMF)와 세포간 지방질(세라마이드, 콜레스테롤, 지방산)을 생성하면서 각질층을 형성하여, 각질층이 견고함과 유연성을 가지게 하여 피부장벽(skin barrier)으로서의 기능을 보유하게 한다. The most important function of the outermost epidermis of the skin is to protect the skin and protect against various stimuli (physical and chemical stimulating factors such as chemicals, air pollutants, dry environment and ultraviolet rays) from the outside. It is a protective function that prevents excessive divergence of moisture through the body, and this protective function can be maintained only when the stratum corneum composed of keratinocytes is normally formed. The outermost stratum corneum (horney layer) of the epidermis is formed from keratinocytes and consists of the differentiated keratinocytes and the surrounding lipid layer (J. Invest. Dermatol. 1983; 80: 44- 49). Keratinocytes are characteristic cells whose basal cells, which continuously proliferate in the epidermal layer, undergo morphological and functional changes in stages and rise to the surface of the skin. Exfoliated and new keratinocytes take over their functions. This repetitive sequence of changes is called "epidermal differentiation" or "keratinization." During keratinization, keratinocytes form the stratum corneum by generating natural moisturizing factor (NMF) and intercellular fat (ceramide, cholesterol, fatty acids), making the stratum corneum firm and flexible. It has a function as).

그러나, 이러한 각질층은 과도한 세안이나, 목욕 등의 생활 습관적 요인, 건조한 대기, 오염물질 등의 환경적인 요인 및 아토피성 피부나 노인성 피부 같은 내 인성 질환 등으로 인해 쉽게 그 기능이 손실될 수 있으며, 실제적으로 현대에 들어서 더욱 늘어난 여러 요인들로 인해 최근에는 건조피부증상 및 이로 인한 제반 장해를 호소하는 사람들이 점점 증가하고 있는 추세이다. 따라서, 적절한 피부수분을 유지하기 위하여 외부로부터 수분을 공급하거나, 체내로부터의 수분 손실을 방지하기 위한 연구가 많이 진행되어 왔으며, 실제로 수분보유능력이 있는 여러 종류의 보습제(moisturizer)가 개발되어 주로 화장품 영역에서 많이 사용되고 있다. However, the stratum corneum can easily lose its function due to excessive washing, lifestyle factors such as bathing, environmental factors such as dry air and pollutants, and endogenous diseases such as atopic or aged skin. In recent years, due to various factors, more and more people are complaining of dry skin symptoms and all kinds of obstacles. Therefore, many studies have been conducted to supply moisture from the outside or to prevent water loss from the body in order to maintain proper skin moisture, and various types of moisturizers having moisture retention capabilities have been developed and mainly cosmetics. It is widely used in the field.

그러나, 생활환경 중에 인간에 대한 위해 요인이 점점 증가하고, 노령인구가 급격히 늘어나면서, 각질층의 생성-탈락속도(turnover rate)가 늦어지고, 각질형성세포의 지질합성능력이 저하되거나, 표피에서 정상적인 세포의 분열, 성숙 및 분화가 원활하지 않음으로써, 각질층의 보습인자와 지질의 양이 감소되어 정상적인 각질층의 기능을 유지하지 못하는 상태, 즉 피부장벽기능이 와해된 상태의 피부를 갖고 있는 인간들이 점점 증가하는 추세에 있다. However, as the risk factors for humans increase and the aged population rapidly increases in the living environment, the turnover rate of the stratum corneum is slowed, the lipid synthesis ability of the keratinocytes is degraded, or the epidermis is normal in the epidermis. Due to poor cell division, maturation and differentiation, the amount of moisturizing factors and lipids in the stratum corneum is reduced, so that humans with skin with a condition that is unable to maintain normal stratum corneum function, that is, the skin barrier function is deteriorated There is a growing trend.

이러한 비정상적인 표피세포의 분열, 분화로 인해 피부는 피부건조증, 아토피 및 건선 등의 다양한 피부 질환을 유발하게 되며, 이러한 제 질환들은 자체로 수분 보유 기능만을 갖는 통상적인 보습제 만으로는 그 증상을 약간 완화시킬 수는 있으나, 근본적인 치유를 기대하기는 어려운 실정이다.Due to the abnormal division and differentiation of epidermal cells, the skin causes various skin diseases such as dry skin, atopy and psoriasis, and these diseases can alleviate the symptoms slightly with a conventional moisturizer having only water retention function. However, it is difficult to expect radical healing.

일반적으로 두피 및 얼굴을 포함한 피부에서 피지는 피부의 보습 유지나 미생물의 침입을 막는 역할을 담당하지만, 피지가 과잉으로 분비되면 탈모가 촉진되고 여드름이 악화되며 여드름에 의한 모공 확대가 촉진되고 지루성 피부염이 발생하는 등 여러 가지 질환이 유발된다.In general, the sebum in the skin including the scalp and face plays a role in maintaining the moisturizing of the skin and preventing the invasion of microorganisms, but excessive secretion of sebum promotes hair loss, worsens acne, promotes the enlargement of pores by acne, and seborrheic dermatitis. There are a number of diseases that can occur.

이러한 피지의 과분비는 여러 원인에 의해서 발생하는데 그 중에서도 가장 중요한 것은 피지선의 활성에 있어 피지 분비를 촉진하는데 관여하는 호르몬 가운데 하나인 디하이드로테스토스테론(dihydrotestosterone : DHT)의 양에 의해서 피지선 세포가 활성화되어 피지가 과분비되는 것이다. 즉, 탈모에 있어서는 세포내에서 테스토스테론(testosterone : T)이 5-알파-리덕타아제 타입 2(5-α-reductase type 2)에 의해서 남성 호르몬 중에 하나인 디하이드로테스토스테론으로 전환됨과 동시에 세포질 내에 있는 수용체 단백질(receptor)과 결합하여 액내로 들어가 탈모를 유발하지만 피부나 피지선에서는 테스토스테론이 5-알파-리덕타아제 타입 1(5-α-reductase type 1)에 의해서 디하이드로테스토스테론으로 전환되어 피지선 세포를 활성화하여 분화가 촉진됨으로써 피지선내의 피지(sebum)를 과분비하여 여드름을 유발하게 된다(J. Invest Dermatol 105:209-214 Diane etc).These secretions are caused by a number of causes, the most important of which is the sebaceous gland cells are activated by the amount of dihydrotestosterone (DHT), one of the hormones involved in promoting sebum secretion in sebaceous gland activity. Is oversecreted. That is, in hair loss, testosterone (T) is converted into dihydrotestosterone, one of the male hormones, by the 5-alpha-reductase type 2 in the cell and at the same time in the cytoplasm. In combination with the receptor protein (receptor) enters the fluid causing hair loss, but in the skin or sebaceous gland testosterone is converted to dihydrotestosterone by 5-alpha-reductase type 1 to sebaceous gland cells By activating the differentiation, the secretion of sebum in the sebaceous gland (sebum) is excessive, causing acne (J. Invest Dermatol 105: 209-214 Diane etc).

단순한 피지의 과분비외에 발생되는 피부 트러블인 여드름, 탈모 등은 피부의 미세한 염증 반응에 의해서 더욱 악화된다. 여드름의 발생 과정을 살펴보면 과도한 피지가 모낭에 축적되어서 여드름균이 활성화되고 염증이 유발된다.Skin problems, such as acne and hair loss that occur outside of excessive sebum secretion, are further exacerbated by the skin's fine inflammatory response. If you look at the development of acne, excessive sebum accumulates in the hair follicles, which activates the acne bacteria and causes inflammation.

뛰어난 항산화 효과와 함께 항염증 효과를 가지고 있어서 세포 염증 반응의 프로스타글란딘 생성, 특히 프로스타글란딘 E2(PGE2)의 생성을 억제하고 iNOS에 의한 전염증인자인 NO(nitric oxide)의 생성을 억제하여 피지 과분비에 따른 여드름과 같은 피부 트러블을 완화시킬 수 있다.Acne due to sebum hypersecretion by inhibiting the production of prostaglandins, especially the production of prostaglandin E2 (PGE2) in the cellular inflammatory response, and the production of NO (nitric oxide), a pro-inflammatory factor by iNOS It can alleviate skin problems such as

그러나, 이와 같이 피부에 안전한 천연 소재로서 피지 분비를 근본적인 원인을 통해서 감소시키고, 동시에 염증작용을 완화해 주는 원료는 많지 않은 실정이 다.However, as a natural material safe for skin, there are not many raw materials that reduce sebum secretion through a fundamental cause and at the same time relieve inflammation.

이에, 본 발명자들은 인삼의 지상부인 인삼 열매를 이용하여 피부 효능을 갖는 화장품을 연구하던 중 인삼 열매 추출물이 일반적인 인삼 및 홍삼과는 다른 성분과 조성으로 인한 피부효능이 있음을 발견하고, 본 발명을 완성하게 되었다.Thus, the present inventors found that the ginseng fruit extract has a skin effect due to different ingredients and compositions from general ginseng and red ginseng, while studying cosmetics having skin efficacy using ginseng fruit, which is the ground part of ginseng, and the present invention. It was completed.

따라서, 본 발명의 목적은 인삼 열매로부터 항산화 효과, 콜라겐 생성촉진 및 MMP-1 억제 효과를 갖는 인삼 열매 추출물을 제조하고 이를 유효성분으로 함유하는 항노화, 주름개선용 및 피부탄력 개선용 피부 외용제 조성물을 제공하는 것이다.Accordingly, an object of the present invention is to prepare a ginseng fruit extract having an antioxidant effect, collagen production and MMP-1 inhibitory effect from ginseng fruit, and containing the composition as an active ingredient for anti-aging, wrinkle improvement and skin elasticity improvement To provide.

또한 본 발명의 목적은 상기 인삼 열매 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 멜라닌생성억제 및 색소침착 개선을 통한 피부 미백용 피부 외용제 조성물을 제공하는 것이다.It is also an object of the present invention to provide an external composition for skin whitening by inhibiting melanin production and improving pigmentation by containing the ginseng fruit extract as an active ingredient.

또 본 발명의 목적은 상기 인삼 열매 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 표피 각질형성세포의 정상적인 분화를 유도하고 유지시키는 피부보습효과와 아토피증상 개선 효과를 가지는 피부보습용 또는 아토피증상 개선용 피부 외용제 조성물을 제공하는 것이다.In addition, the object of the present invention by containing the ginseng fruit extract as an active ingredient to the skin moisturizing effect or atopic dermatitis improving effect to induce and maintain the normal differentiation of epidermal keratinocytes and improve atopic symptoms To provide.

또한 본 발명의 목적은 상기 인삼 열매 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 피지 조절 효과 및 항염증 효과, 즉 염증인자의 생성을 억제하여 여드름을 비롯한 피부 트러블을 개선시킬 수 있는 항염증용 피부 외용제 조성물을 제공하는 것이다.It is also an object of the present invention to provide an anti-inflammatory skin external composition for improving skin troubles including acne by controlling the sebum control effect and anti-inflammatory effect, that is, the production of inflammatory factors by containing the ginseng fruit extract as an active ingredient. It is.

또 본 발명의 목적은 상기 인삼 열매 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 피부의 모세혈관을 확장시키고 혈행 촉진 효과를 나타내며 피부를 맑고 투명하게 해주는 피부 혈색 개선용 피부 외용제 조성물을 제공하는 것이다.It is another object of the present invention to provide a skin external preparation composition for improving skin color to expand capillaries of the skin, promote blood circulation, and make the skin clear and transparent by containing the ginseng fruit extract as an active ingredient.

상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에서는 유효성분으로서 인삼 열매 추출물을 함유하는 항노화, 주름개선 및 피부 탄력 개선용 피부 외용제 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a skin external composition for anti-aging, wrinkle improvement and skin elasticity containing ginseng fruit extract as an active ingredient.

본 발명에서는 인삼의 지상부 중에서 인삼근과 차별적 성분과 조성을 갖는 인삼 열매 추출물을 유효성분으로 함유시킴으로써 항노화, 피부 주름 개선 효과, 피부 미백 효과, 피부 보습 및 아토피증상 개선 효과, 여드름 및 피부 트러블 개선 효과 및 피부 혈색 개선의 효과를 가지는 피부 외용제 조성물을 제공할 수 있었다.In the present invention, by containing the ginseng fruit extract having a different ingredient and composition from the ground of ginseng as an active ingredient, anti-aging, skin wrinkle improvement effect, skin whitening effect, skin moisturizing and atopic symptoms improvement effect, acne and skin trouble improvement effect And an external preparation composition for skin having an effect of improving skin coloration.

본 발명에 있어서, 상기 인삼 열매 추출물은 피부 외용제 조성물의 형태에 따라 조성물 총 중량에 대하여 0.001~50 중량%로 혼합될 수 있다. 인삼 열매 추출물은 0.001중량% 이상으로 혼합되는 것이 효과를 고려하였을 바람직하고, 50 중량 % 이하는 피부 외용제의 제형화를 고려하였을 때 바람직한 수치이다. In the present invention, the ginseng fruit extract may be mixed in an amount of 0.001 to 50% by weight based on the total weight of the composition, depending on the form of the skin external preparation composition. The ginseng fruit extract is preferably mixed at 0.001% by weight or more, taking into account the effect, 50% by weight or less is a preferable value considering the formulation of the external preparation for the skin.

본 발명에 의한 인삼 열매 추출물은 종자를 분리하여 제거한 인삼 열매의 과 육과 과피를 일광건조 또는 열풍건조한 후 물 또는 에탄올로 추출하여 제조한 것이다. The ginseng fruit extract according to the present invention is prepared by extracting the flesh and skin of the ginseng fruit separated and separated from the seeds by sun drying or hot air drying, followed by extraction with water or ethanol.

본 발명에 따른 화장품의 외형은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유한다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구, 또는 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 또한 포말(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다.The cosmetic form according to the invention contains a cosmetically or dermatologically acceptable medium or base. These are all formulations suitable for topical application, for example emulsions, suspensions, microemulsions, microcapsules, microgranules, or ionic (liposomes) obtained by dispersing an oil phase in solution, gels, solids, pasty anhydrous products, aqueous phases, and It may be provided in the form of a nonionic vesicle dispersant or in the form of a cream, skin, lotion, powder, ointment, spray or cone stick. These compositions can be prepared according to conventional methods in the art. The composition according to the invention can also be used in the form of a foam or in the form of an aerosol composition further containing a compressed propellant.

본 발명의 화장품은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.Cosmetics of the present invention may be used in the preparation of fatty substances, organic solvents, solubilizers, thickeners, gelling agents, emollients, antioxidants, suspending agents, stabilizers, foaming agents, fragrances, surfactants, water, ionic or nonionic emulsifiers. Cosmetics such as fillers, metal ion sequestrants, chelating agents, preservatives, vitamins, blockers, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic actives, lipid vesicles or any other ingredients commonly used in cosmetics or It may contain adjuvants commonly used in the field of dermatology. Such adjuvants are introduced in amounts generally used in the cosmetic or dermatological arts.

본 발명의 인삼 열매 추출물을 포함하는 피부 외용제는 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌 징워터, 팩, 파우더, 바디로션, 바디크림, 바디오일 및 바디에센스 등의 화장료로 제형화될 수 있다.The external preparation for skin containing the ginseng fruit extract of the present invention is not particularly limited in the formulation, for example, supple cosmetics, astringent cosmetics, nourishing cosmetics, nutrition cream, massage cream, essence, eye cream, eye essence, cleansing It may be formulated into a cosmetic such as cream, cleansing foam, cleansing water, pack, powder, body lotion, body cream, body oil and body essence.

이하, 실시예 및 시험예를 들어 본 발명의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 실험예 및 실시예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 발명의 범주 및 범위가 하기 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.Hereinafter, the configuration and effects of the present invention will be described in more detail with reference to Examples and Test Examples. However, these experimental examples and examples are provided only for the purpose of illustration in order to help the understanding of the present invention is not limited to the scope and scope of the present invention.

[실시예 1] 인삼 열매 추출물 제조Example 1 Preparation of Ginseng Fruit Extract

1) 인삼 열매 전처리: 생(生)인삼 열매를 수확하여 종자를 분리하여 제거한 후 인삼 열매의 과육과 과피를 일광건조 또는 열풍건조를 통하여 인삼 열매 건조원료를 제조하였다.1) Ginseng fruit pretreatment: Raw ginseng fruit was harvested, seed was separated and removed, and then the ginseng fruit dried raw material was prepared by sun drying or hot air drying.

2) 인삼 열매 추출물 제조: 인삼 열매 건조물 1kg에 물 3L를 가하여 환류 추출한 다음 여과한 후 40~45℃에서 감압농축하여 인삼 열매 추출물 300g을 얻었다.2) Preparation of ginseng fruit extract: 3 g of water was added to 1 kg of dried ginseng fruit extract to extract reflux, and then filtered and concentrated under reduced pressure at 40 to 45 ° C. to obtain 300 g of ginseng fruit extract.

[비교예 1] 인삼근 추출물 제조Comparative Example 1 Preparation of Ginseng Root Extract

상기 실시예 1에서 인삼 열매 대신에 인삼근(뿌리)을 사용한 것을 제외하고 실시예 1과 동일한 방법으로 제조하였다.Except for using ginseng root (root) instead of ginseng fruit in Example 1 was prepared in the same manner as in Example 1.

[시험예 1] 인삼 열매 추출물의 성분비교Test Example 1 Comparison of Ingredients of Ginseng Fruit Extract

<인삼 열매와 인삼근의 진세노사이드(인삼사포닌) 성분분석><Ginsenoside (Ginseng Saponin) Analysis of Ginseng Fruit and Ginseng Root>

실시예 1 및 비교예 1에서 각각 인삼 열매와 인삼근 추출물을 제조한 다음 이들 추출물에 에테르(ether)를 처리하여 지용성 성분을 제거한 후 부탄올(BuOH)로 조사포닌을 추출, 농축하여 HPLC를 통한 진세노사이드 성분분석을 실시하였으며, 그 결과를 도 1 및 표 1에 나타내었다.In Example 1 and Comparative Example 1, respectively, ginseng fruit and ginseng root extract were prepared, and then, the extracts were treated with ether to remove fat-soluble components, followed by extracting and concentrating ginsponin with butanol (BuOH). Cenoside component analysis was performed and the results are shown in FIG. 1 and Table 1. FIG.

실시예 1Example 1 비교예 1Comparative Example 1 조사포닌함량 (건조중량)Irradiated Ponin Content (Dry Weight) 33.42%33.42% 16.70%16.70% PD/PT 비율PD / PT ratio 0.730.73 3.233.23

실시예 1에서 제조한 인삼 열매 추출물은 조사포닌 함량에 있어서 비교예 1에서 제조한 인삼근 추출물의 약 2배 함량을 가지고 있었으며, 진세노사이드를 PD(Protopanaxadiol)계-"진세노사이드 Rb1, Rb2, Rc 및 Rd" 및 PT(Protopanaxatriol)계-"진세노사이드 Re, Rg1 및 Rg2"의 비율로 구분하였을 때 각각 0.73과 3.23으로 그 조성에 있어서 인삼 열매와 인삼근은 뚜렷한 차이 및 특징을 나타내었다.The ginseng fruit extract prepared in Example 1 had about twice the content of the ginseng root extract prepared in Comparative Example 1 in the content of irradiated phonynin, and ginsenosides were PD (Protopanaxadiol)-"ginsenoside Rb1, Rb2. And Rc and Rd "and PT (Protopanaxatriol)-" Ginsenoside Re, Rg1 and Rg2 "ratios were 0.73 and 3.23, respectively. .

<인삼 열매 추출물의 미네랄 성분분석>Mineral Analysis of Ginseng Fruit Extract

실시예 1에서 제조한 인삼 열매 추출물이 인삼과는 다른 '과실'로서의 특징을 가짐을 구분하기 위하여 비타민을 비롯한 미네랄 성분분석을 실시하였으며, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.In order to distinguish that the ginseng fruit extract prepared in Example 1 has the characteristics of 'fruit' different from ginseng, mineral components including vitamins were analyzed, and the results are shown in Table 2 below.

성분ingredient 함량content 성분ingredient 함량content 칼륨(mg/100g)Potassium (mg / 100g) 5865.575865.57 마그네슘(mg/100g)Magnesium (mg / 100g) 354.38354.38 칼슘(mg/100g)Calcium (mg / 100g) 819.26819.26 아연(mg/100g) Zinc (mg / 100g) 178.49178.49 철(mg/100g)Iron (mg / 100g) 59.3159.31 비타민 A(μg/100g, RE )Vitamin A (μg / 100g, RE) 213.11213.11 인(mg/100g)Phosphorus (mg / 100g) 187.17187.17 비타민 B1(mg/100g) Vitamin B1 (mg / 100g) 12.2912.29 비타민 B2(mg/100g) Vitamin B2 (mg / 100g) 8.458.45 비타민 B6(mg/100g) Vitamin B6 (mg / 100g) 10.50 10.50 비타민C(mg/100g) Vitamin C (mg / 100g) 4.91 4.91 비타민 E(mg/100g, α-TE) Vitamin E (mg / 100g, α-TE) 23.6123.61 비타민 K(μg/100g) Vitamin K (μg / 100 g) 232.12232.12 나이아신(mg/100g, NE) Niacin (mg / 100g, NE) 5.765.76 판토텐산(mg/100g)Pantothenic Acid (mg / 100g) 5.875.87 엽산(μg/100g) Folic Acid (μg / 100g) 349.97 349.97

이상과 같이 본 발명에서 사용하는 인삼 열매의 성분적 특성은 인삼근 보다 많은 인삼사포닌을 함유함과 동시에 사포닌 조성의 성질이 정반대이고, 또한 인삼근과 달리 열매로서 비타민과 미네랄 16 종의 함량이 풍부함을 확인할 수 있었으며, 이를 바탕으로 피부효능에 대한 하기 실험들을 진행하였다.As described above, the ginseng fruit used in the present invention contains more ginseng saponin than the ginseng root, and at the same time, the composition of the saponin is opposite to that of the ginseng root. It was confirmed that, based on this it was carried out the following experiment on the skin efficacy.

[시험예 2] 항노화 및 주름 개선 효과[Test Example 2] anti-aging and wrinkle improvement effect

1) 인삼 열매 추출물의 항산화 효과1) Antioxidant Effect of Ginseng Fruit Extract

자외선(UV) 조사에 의하여 세포에서 발생하는 활성산소(ROS; Reactive oxygen species)를 제거하는 능력을 비교하는 실험을 통하여 항산화 효과를 조사하였다. 양성대조군으로서 일반적으로 항산화 효과를 비교하는데 사용하는 트롤록스(trolox)를 사용하였으며, 이를 백삼 및 홍삼 추출물과도 비교하였다(도 2). 또한 시험물질을 처리하지 않은 군을 대조군으로 사용하였다.Antioxidant effect was investigated through experiments comparing the ability to remove reactive oxygen species (ROS) generated from cells by ultraviolet (UV) irradiation. As a positive control, trolox, which is generally used to compare antioxidant effects, was used, which was also compared with white and red ginseng extracts (FIG. 2). In addition, the group not treated with the test substance was used as a control.

도 2의 결과에서, 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물은 인간 HaCaT 각질형성세포 단층 배양 시스템(human HaCaT keratinocytes monolayer culture system)에서 대조군에 비하여 UV에 의해 생성된 활성 산소를 유의적으로 소거하는 효과를 나타내었다. 이는 항산화 물질의 활성지표로 사용되는 트롤록스와 유사한 정도의 우수한 활성이며, 유의적인 소거 활성이 없는 백삼, 홍삼 추출물과 대조되는 결과이다. 즉, 본 발명의 실시예 1에 의한 인삼 열매 추출물은 노화의 원인이 되는 활성 산소를 유의적으로 소거함으로써 주름 생성, 탄력 저하 및 색소 침착 등을 예방하는 효과를 가질 수 있음을 확인하였다.In the results of Figure 2, the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention significantly erases the active oxygen generated by UV compared to the control in the human HaCaT keratinocytes monolayer culture system (human HaCaT keratinocytes monolayer culture system) It showed an effect. This is a good activity similar to trolox, which is used as an activity indicator of antioxidants, and contrasted with white and red ginseng extracts without significant scavenging activity. That is, it was confirmed that the ginseng fruit extract according to Example 1 of the present invention may have an effect of preventing wrinkle formation, elasticity reduction and pigmentation by significantly eliminating active oxygen causing aging.

2) 단 세포 겔 전기영동(Single cell gel electrophoresis; SCGE, Comet assay)에 의한 DNA 산화적 손상에 대한 억제 활성2) Inhibitory activity against DNA oxidative damage by single cell gel electrophoresis (SCGE, Comet assay)

사람의 정상 섬유아세포를 24hr 배양한 후 실시예 1의 인삼 열매 추출물과 비타민 E를 각각 농도별로 처리하고, 12hr 후에 양성대조군인 H2O2(최종농도 10-3M)를 처리한 다음 전기영동법으로 염색한 결과를 형광현미경으로 관찰하였다. 이때 이미지 분석기(image analyzer)인 KOMET 3.1(Kinetic Imaging, England)를 사용하여 25개의 각 세포에서 DNA 절단의 결과로 나타난 테일(tail)의 길이(um)를 분석하였으며, 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다.After culturing human fibroblasts for 24hr, the ginseng fruit extract and vitamin E of Example 1 were treated by concentration, and after 12hr, H 2 O 2 (final concentration 10-3M), which was a positive control, was treated by electrophoresis. The stained result was observed by fluorescence microscope. In this case, using an image analyzer KOMET 3.1 (Kinetic Imaging, England) was analyzed the length (um) of the tail (um) resulting from DNA cleavage in each of the 25 cells, the results are shown in Table 3 below. Indicated.

인삼 열매 추출물 및 비타민 E의 DNA 산화적 손상에 대한 억제작용Inhibitory Effect of Ginseng Fruit Extract and Vitamin E on DNA Oxidative Damage 시험물질Test substance 테일 길이(㎛)Tail length (μm) 저해율(%)% Inhibition H2O2 H 2 O 2 115.6115.6 -- H2O2 + 실시예 1(10 ppm)H 2 O 2 + Example 1 (10 ppm) 75.875.8 34.434.4 H2O2 + 실시예 1(50 ppm)H 2 O 2 + Example 1 (50 ppm) 65.765.7 43.243.2 H2O2 + 실시예 1(100 ppm)H 2 O 2 + Example 1 (100 ppm) 52.152.1 54.954.9 H2O2 + 비타민 E 10 ppmH 2 O 2 + Vitamin E 10 ppm 70.670.6 38.938.9

상기 표 3의 결과에서, 세포 겔 전기영동에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물은 유의성 있는 산화적 DNA 손상 억제 활성을 나타내었으며, 이로 인해 본 발명에 의한 인삼 열매 추출물이 히드록실 라디칼(.OH)에 의한 DNA 싱글 스트랜드 브레이크(single strand break)를 억제하는 DNA 산화적 손상억제제로서 작용함을 확인할 수 있었다.In the results of Table 3, the ginseng fruit extract of Example 1 by cell gel electrophoresis showed significant oxidative DNA damage inhibitory activity, whereby the ginseng fruit extract according to the present invention is a hydroxyl radical (.OH) It was confirmed that it acts as a DNA oxidative damage inhibitor that inhibits the DNA single strand break.

3) I형 프로콜라겐 분석(Type I Procollagen assay)3) Type I Procollagen Assay

인체 섬유아세포를 105 개의 농도로 12공 평판배양기에서 배양한 다음 실시예 1의 인삼 열매 추출물 1ppm 및 10ppm을 포함한 배지로 교체하였다. 배양 3일째 세포를 수확해서(harvest) ELISA 방법으로 생성된 I형 프로콜라겐(type I procollagen)의 양을 정량하였다. 그 결과는 실시예 1의 인삼 열매 추출물을 포함하지 않은 대조군을 100으로 하여 측정한 값과의 비교치로 산출하였고, 양성대조군으로 TGF-b를 사용하였다. 또한 인삼근 추출물로서 백삼 및 홍삼 추출물과도 비교하였다.Human fibroblasts were cultured in a 12-hole plate incubator at a concentration of 10 5 and then replaced with a medium containing 1 ppm and 10 ppm of ginseng fruit extract of Example 1. Cells were harvested on the third day of culture to quantify the amount of type I procollagen produced by ELISA. The result was calculated as a comparison with the measured value of the control group that does not contain the ginseng fruit extract of Example 1 to 100, TGF-b was used as a positive control group. It was also compared with white and red ginseng extracts as ginseng root extract.

인간 정상 섬유아세포 단층 배양 시스템(Normal human fibroblast monolayer culture system)에서 실시예 1의 인삼 열매 추출물은 대조군에 비하여 I형 프로콜라겐 생성을 뚜렷하게 촉진시키는 효과를 나타내었다. 즉, 실시예 1의 인삼 열매 추출물은 인체 피부의 노화에 의해 발생하는 콜라겐 생성량 감소 현상을 억제할 수 있었고, 주름 개선 효과를 나타내었다(도 3). In the normal human fibroblast monolayer culture system, the ginseng fruit extract of Example 1 showed an effect of markedly promoting the production of type I procollagen as compared to the control group. That is, the ginseng fruit extract of Example 1 was able to suppress the reduction in collagen production caused by the aging of the human skin, and showed a wrinkle improvement effect (Fig. 3).

4) MMP-1 발현 억제 분석4) MMP-1 expression inhibition assay

인체 섬유아세포를 105 개의 농도로 12공 평판배양기에서 배양한 다음 자외선 B를 40mJ/㎠로 조사한 후, 실시예 1의 인삼 열매 추출물 1ppm 및 10ppm을 포함한 배지로 교체하였다. 배양 2일째 세포를 수확해서(harvest) ELISA 방법으로 생성된 MMP-1(matrix metalloproteinase I)의 양을 정량하였다. 그 결과는 시험물질을 포함하지 않는 자외선 대조군을 100으로 하여 측정한 값과의 비교치로 산출하였고, 양성대조군은 TGF-b를 사용하였다. 또한 인삼근 추출물로서 백삼 및 홍삼 추출물과도 비교하였다.Human fibroblasts were cultured in a 12-hole plate incubator at a concentration of 10 5 and then irradiated with ultraviolet B at 40 mJ / cm 2, and then replaced with a medium containing 1 ppm and 10 ppm of ginseng fruit extract of Example 1. Cells were harvested on the second day of culture (harvest) to quantify the amount of matrix metalloproteinase I (MMP-1) produced by ELISA. The result was calculated as a comparison with the value measured using the UV control group containing no test substance 100, and the positive control group was TGF-b. It was also compared with white and red ginseng extracts as ginseng root extract.

인간 정상 섬유아세포 단층 배양 시스템에서 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물은 UVB 40mJ/㎠에 의해서 유도되는 MMP-1의 발현을 유의적으로 억제하였다. 따라서, 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물은 내적 노화 또는 외적 환경요인에 의하여 발생하는 피부조직 분해효소인 MMP-1의 생합성을 저해하여 피부 노화를 억제하고 주름개선에 효과가 있음을 확인하였다(도 4).The ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention in a human normal fibroblast monolayer culture system significantly inhibited the expression of MMP-1 induced by UVB 40mJ / cm 2. Therefore, the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention inhibits the biosynthesis of the skin tissue degrading enzyme MMP-1 caused by internal aging or external environmental factors, inhibits skin aging and is effective in improving wrinkles. (FIG. 4).

5) 자외선에 의한 사이클로옥시게나제-2(COX-2)의 생합성 억제 효과5) Biosynthesis Inhibition Effect of Cyclooxygenase-2 (COX-2) by Ultraviolet Light

인체 섬유아세포를 105 개의 농도로 12공 평판배양기에서 배양한 다음 자외선A를 15J/㎠로 조사한 후, 실시예 1의 인삼 열매 추출물 및 비교예 1의 인삼근 추출물을 각각 0.1pp, 1ppm 및 10ppm 포함한 배지로 교체하였다. 배양 2일째 세포를 수확해서(harvest) 웨스턴블랏(Westren blot) 방법을 사용하여 생성된 사이클로옥시게나제-2(cyclooxygenase-2, COX-2)의 양을 정량하였다. 시험물질을 함유하지 않은 자외선 대조군을 100으로 하여 농도계(densitometer)로 측정한 값과의 비교치로 산출하였고, 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.After culturing human fibroblasts in a 12-hole flat plate incubator at a concentration of 10 5, UVA was irradiated at 15 J / cm 2, and then 0.1pp, 1ppm and 10ppm of Ginseng Fruit Extract of Example 1 and Ginseng Root Extract of Comparative Example 1, respectively. The medium was replaced. Cells were harvested on the second day of culture (harvest) and the amount of cyclooxygenase-2 (COX-2) produced was quantified using the Western blot method. The UV control group containing no test substance was calculated as 100 and compared with the value measured by a densitometer, and the results are shown in Table 4 below.

시험물질(농도:ppm)Test substance (concentration: ppm) COX-2 생합성(%)COX-2 biosynthesis (%) 실시예 1 Example 1 1010 1111 1One 3838 0.10.1 6363 비교예 1 Comparative Example 1 1010 7272 1One 9191 0.10.1 9999 대조군Control 100100

상기 표 4의 결과로부터, 실시예 1의 인삼 열매 추출물은 자외선에 의한 사이클로옥시게나제-2의 생합성을 농도 의존적으로 감소시켰으며, COX-2의 산물인 프로스타글란딘 E2(PGE2)에 의한 피부조직분해를 방지하는 것을 확인할 수 있었다. From the results of Table 4, the ginseng fruit extract of Example 1 concentration-dependently reduced the biosynthesis of cyclooxygenase-2 by ultraviolet rays, skin tissue degradation by the prostaglandin E2 (PGE2) product of COX-2 Could be prevented.

6) 자외선에 의한 종양괴사인자알파(TNF-α)의 생합성 억제 효과6) Inhibitory effect of UV on tumor necrosis factor alpha (TNF-α)

인체 각질형성세포를 105개의 농도로 12공 평판배양기에서 배양한 다음 자외선 B를 30mJ/㎠로 조사한 후, 실시예 1의 인삼 열매 추출물 및 비교예 1의 인삼근 추출물을 각각 0.1pp, 1ppm 및 10ppm 포함한 배지로 교체하였다. 배양 6-24시간 후 세포를 수확해서(harvest) ELISA(Pharmingen 555212) 방법을 사용하여 생성된 종양괴사인자알파(TNF-α)의 양을 정량하였으며, 시험물질을 처리하지 않은 자외선 대조군을 100으로 하여 측정한 값과의 비교치로 산출한 결과를 하기 표 5에 나타내었다.After culturing human keratinocytes in a 12-hole plate incubator at a concentration of 10 5, UV B was irradiated at 30 mJ / cm 2, and the ginseng fruit extract of Example 1 and the ginseng root extract of Comparative Example 1 were 0.1pp, 1ppm and Replace with medium containing 10ppm. After 6-24 hours of culture, the cells were harvested (harvest) and the amount of tumor necrosis factor alpha (TNF-α) generated using the ELISA (Pharmingen 555212) method was quantified. The results calculated by comparison with the measured values are shown in Table 5 below.

시험물질(농도:ppm)Test substance (concentration: ppm) TNF-α 생합성(%)TNF-α biosynthesis (%) 실시예 1Example 1 1010 1616 1One 3838 0.10.1 7272 비교예 1Comparative Example 1 1010 7474 1One 8585 0.10.1 9292 대조군Control 100100

상기 표 5의 결과로부터, 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물이 자외선에 의한 종양괴사인자알파(TNF-α)의 생합성을 농도 의존적으로 감소시킴으로써 종양괴사인자알파의 생합성으로 인해 발생할 수 있는 피부 노화를 미연에 방지할 수 있음을 확인하였다.From the results of Table 5, the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention may occur due to the biosynthesis of tumor necrosis factor alpha by reducing the concentration of the biosynthesis of tumor necrosis factor alpha (TNF-α) by ultraviolet radiation It was confirmed that skin aging can be prevented beforehand.

7) 인체 피부를 대상으로 한 피부 주름 개선 효과7) Skin wrinkle improvement effect on human skin

30-50세의 안면주름이 있는 시험대상자 40명에 대하여, 하기 표 6에 기재된 조성을 갖는 실시예 1의 인삼 열매 추출물을 함유한 실시예 2 및 함유하지 않은 비교예 2의 영양크림을 제조한 후 이들의 피부 주름 개선 효과를 비교평가하였다(단위: 중량%).Forty subjects with facial wrinkles aged 30 to 50 years were prepared with the nutrition cream of Example 2 and Comparative Example 2 containing the ginseng fruit extract of Example 1 having the composition shown in Table 6 below. The skin wrinkle improvement effect was compared and evaluated (unit: weight%).

성 분ingredient 실시예 2Example 2 비교예 2Comparative Example 2 인삼 열매 추출물Ginseng Fruit Extract 0.10.1 -- 밀납Beeswax 1010 1010 폴리솔베이트60Polysorbate 60 1.51.5 1.51.5 피이지 60 경화피마자유Sebum 60 Cured Castor Oil 22 22 솔비탄세스퀴올레이트Sorbitan sesquioleate 0.50.5 0.50.5 유동파라핀Liquid paraffin 1010 1010 스쿠알란Squalane 55 55 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 (Estasan: Uniqema(제조사))Caprylic / Capric Triglycerides (Estasan: Uniqema) 55 55 글리세린glycerin 55 55 부틸렌글리콜Butylene glycol 33 33 프로필렌글리콜Propylene glycol 33 33 트리에탄올아민Triethanolamine 0.20.2 0.20.2 방부제, 색소, 향료Preservative, coloring, flavoring 적량Quantity 적량Quantity 정제수Purified water 잔량Remaining amount 잔량Remaining amount

피검자의 안면 좌부에는 실시예 2를, 우부에는 비교예 2를 3개월간 사용하였다. 크림 사용 이전의 안면 양쪽부의 피부 상태를 측정해 놓은 다음 크림 사용 3개월 후 동일 부위를 재측정하여 피부 주름의 변화를 측정하였다. 24℃, 상대습도 40%의 항온항습실에서 눈꼬리 부위의 주름을 레플리카(replica)로 떠서 비시오메타 시스템(Visiometer system; C+K사)으로 피부 주름을 측정하였다. 피부 주름의 변화량은 하기 수학식 1에 따라 계산하였다.Example 2 was used for the left side of the subject and Comparative Example 2 was used for the right side for 3 months. The skin condition was measured on both sides of the face before the use of the cream, and then three months after the use of the cream, the same area was remeasured to measure the change in skin wrinkles. In the constant temperature and humidity room of 24 ° C. and 40% RH, the wrinkles of the tail of the eyes were replicated, and skin wrinkles were measured by a Visiometer system (C + K). The amount of change in skin wrinkles was calculated according to the following equation.

Figure 112007071742417-pat00001
Figure 112007071742417-pat00001

상기 수학식 1에서, "Tdi"는 D90에서의 측정부위 값이며, "Tdo"는 D0에서의 측정부위 값이다.In Equation 1, "Tdi" is a measurement value at D90, and "Tdo" is a measurement value at D0.

상기 수학식 1에 따라 계산한 결과, 비교예 2를 사용한 부위의 피부 주름은 6.5±4%(평균±표준편차)의 감소치를 나타낸 반면, 실시예 2를 사용한 부위의 피부 주름은 39±11%의 감소치를 보여 우수한 피부 주름 개선 효과를 나타내었다.As a result of calculation according to Equation 1, the skin wrinkles at the site using Comparative Example 2 showed a decrease of 6.5 ± 4% (mean ± standard deviation), while the skin wrinkles at the site using Example 2 were 39 ± 11%. It showed a decrease of, showing an excellent skin wrinkle improvement effect.

8) 인체에서 피부 탄력 개선 효과8) Improvement of skin elasticity in human body

상기 표 6의 조성으로 제조한 실시예 2 및 비교예 2의 피부 탄력 개선 효과를 측정하였다. 30세 이상의 여성 40명을 대상으로 2개 조로 나누어, 각 조에 상기 실시예 2 및 비교예 2의 영양크림을 매일 2회씩 12주간 안면에 도포한 후 피부 탄 력 측정기(Cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)를 이용하여 피부 탄력을 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 7에 나타내었다. 표 7의 결과 값은 피부 탄력 측정기의 피부 점탄성(viscoelasticity)의 성질을 의미한다.The skin elasticity improving effect of Example 2 and Comparative Example 2 prepared by the composition of Table 6 was measured. Forty women over 30 years old were divided into two groups, and each group applied the nutrition cream of Example 2 and Comparative Example 2 to the face twice a day for 12 weeks and then had a skin elasticity measuring instrument (Cutometer SEM 575, C + K). Electronic Co., Germany) to measure the skin elasticity, the results are shown in Table 7. The results in Table 7 refer to the nature of skin viscoelasticity of the skin elasticity meter.

시험물질Test substance 피부 탄력효과Skin elasticity effect 실시예2Example 2 0.46±0.120.46 ± 0.12 비교예2Comparative Example 2 0.29±0.090.29 ± 0.09

상기 표 7의 결과에서 보여지는 바와 같이, 실시예 1의 인삼 열매 추출물이 함유된 실시예 2의 영양크림을 사용한 경우 150% 가량 피부 탄력 증진 효과를 나타내었다.As shown in the results of Table 7, when the nutrition cream of Example 2 containing the ginseng fruit extract of Example 1 was used, the skin elasticity enhancing effect was about 150%.

[시험예 3] 피부 미백 효과[Test Example 3] skin whitening effect

1) 쥐의 색소세포를 이용한 멜라닌 생성 억제 효과1) Inhibitory Effects of Melanin Production Using Pigment Cells

실시예 1의 인삼 열매 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과를 알아보기 위하여 쥐의 색소세포를 이용하였다.In order to determine the melanin production inhibitory effect of the ginseng fruit extract of Example 1, the rat pigment cells were used.

먼저, C57BL/6 마우스 유래의 쥐 색소세포(Mel-Ab cell)(Dooley, T.P. et al, Skin pharmacol, 7, pp 188-200)를 DMEM(Dulbeccos modified Eagles media)에 10% 우태반 혈청, 100nM 2-O-테트라데카노일포르볼(tetradecanoyphorbol)-13-아세테이트 및 1nM 콜레라 독소(cholera toxin)를 첨가한 배지에서 37℃, 5% CO2의 조건에서 배양하였다. 배양한 Mel-Ab세포를 0.25% 트립신-EDTA로 떼어내고, 24공 평판배양기에 105 세포/공(cells/well)의 농도로 세포를 배양한 다음 이틀째부터 3일 연속으로 1ppm 및 10ppm의 인삼 열매 추출물을 가하여 배양하였다. 이 때, 홍삼 추출물과 하이드로퀴논은 양성대조군으로 사용하였다. 그 다음 배양액을 제거하고, PBS로 세척한 후, 1N 수산화나트륨으로 세포를 녹여 400nm에서 흡광도를 측정한 다음, 하기 수학식 2에 따라 멜라닌 생성 억제율을 계산하였으며, 그 결과를 하기 표 8에 나타내었다(Dooley의 방법). First, mouse Mel-Ab cells derived from C57BL / 6 mice (Dooley, TP et al, Skin pharmacol, 7, pp 188-200) were placed in DMEM (Dulbeccos modified Eagles media) in 10% fetal placental serum, 100 nM. The culture was carried out at 37 ° C. and 5% CO 2 in a medium to which 2-O-tetracanocanophorbol-13-acetate and 1 nM cholera toxin were added. The cultured Mel-Ab cells were separated with 0.25% trypsin-EDTA, the cells were incubated at a concentration of 10 5 cells / well in a 24-hole plate incubator, and then 1 ppm and 10 ppm of ginseng for 3 consecutive days from the second day. Fruit extracts were added and incubated. At this time, red ginseng extract and hydroquinone were used as a positive control. Then, the culture solution was removed, washed with PBS, the cells were dissolved with 1N sodium hydroxide, the absorbance was measured at 400 nm, and the melanin production inhibition rate was calculated according to Equation 2 below, and the results are shown in Table 8 below. (Dooley's method).

Figure 112007071742417-pat00002
Figure 112007071742417-pat00002

시험물질Test substance 멜라닌 생성 억제율(%)Melanin production inhibition rate (%) 실시예 1(1ppm)Example 1 (1 ppm) 14.014.0 실시예 1(10ppm)Example 1 (10 ppm) 34.434.4 홍삼 추출물(10ppm)Red Ginseng Extract (10ppm) 5.35.3 하이드로퀴논(대조군)Hydroquinone (control) 41.141.1

상기 표 8에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물은 홍삼 추출물 보다 우수한 멜라닌 생성 억제율을 보였고, 하이드로 퀴논과는 유사한 정도의 멜라닌 생성 억제율을 보이는 것을 확인하였다. 이를 통해 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물이 우수한 미백 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다. As shown in Table 8, the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention showed an excellent melanin production inhibition rate than the red ginseng extract, and showed a melanin production inhibition rate similar to hydroquinone. Through this, the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention was confirmed to exhibit an excellent whitening effect.

2) 인체 피부에 대한 미백 효과2) whitening effect on human skin

실시예 1의 인삼 열매 추출물의 인체 피부에 대한 미백 효과를 알아보기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.In order to determine the whitening effect of the ginseng fruit extract of Example 1 on the human skin was carried out the following experiment.

먼저, 건강한 12명의 남자를 대상으로 피검자의 상박 부위에 직경 1.5㎝의 구멍이 뚫린 불투명 테이프를 부착한 뒤, 각 피검자의 최소 홍반량(Minimal Erythema Dose)의 1.5~2배 정도의 자외선(UVB)을 조사하여 피부의 흑화를 유도하였다.First, the opaque tape with a hole of 1.5 cm diameter was attached to the upper arm of 12 healthy men, and then 1.5 ~ 2 times of ultraviolet light (UVB) of the minimum erythema dose of each subject. Was irradiated to induce skin blackening.

상기 자외선 조사 후 시험물질인 실시예 1의 인삼 열매 추출물과 하이드로퀴논을 각각 바르고, 한곳은 아무 것도 바르지 않고 10 주 동안 상태 변화를 관찰하였다. 1주 단위로 피부의 색깔을 색차계 CR2002(일본, 미놀타 사)로 측정하였다. After the UV irradiation, the ginseng fruit extract and hydroquinone of Example 1, which were test substances, were respectively applied, and one place was observed for 10 weeks without applying anything. Skin color was measured on a weekly basis with a colorimeter CR2002 (Minolta, Japan).

그 다음 상기 각 시험물질의 도포 개시시점과 도포 완료시점에서의 피부색의 차이(△L*)를 하기 수학식 3에 따라 계산하였고, 그 결과를 하기 표 9에 나타내었다. 한편, 미백 효과는 시료 도포 부위와 대조군 부위의 △L*의 비교로 판정하는데, △L* 값이 2정도일 경우는 침착된 색소의 미백화가 뚜렷한 경우이고, 1.5정도 이상이면 미백 효과가 있다고 판정할 수 있다. Then, the difference in skin color (ΔL *) between the start time and the completion time of application of each test substance was calculated according to Equation 3 below, and the results are shown in Table 9 below. On the other hand, the whitening effect is determined by comparing ΔL * between the sample application site and the control site. When the value of ΔL * is about 2, the whitening effect of the deposited pigment is clear, and when about 1.5 or more, the whitening effect is determined. Can be.

△L* = 도포 완료시점에서의 L*값 - 도포 개시시점에서의 L*값ΔL * = L * value at the time of completion of coating-L * value at the start of coating

시험물질Test substance 피부색 밝기 정도(△L*)Skin color brightness degree (△ L *) 실시예 1Example 1 1.76±0.211.76 ± 0.21 하이드로 퀴논(양성 대조군) Hydroquinone (positive control) 1.90 ±0.131.90 ± 0.13 용매(Vehicle)(음성 대조군) Vehicle (negative control) 0.50 ±0.160.50 ± 0.16

상기 표 9에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물은 하이드로 퀴논과 유사한 정도의 피부색 밝기 정도를 보임을 확인하였다. 이는 상기 인삼 열매 추출물이 자외선에 의해 생성된 색소 침착을 개선하여 피부색을 밝게 해주기 때문이다.As shown in Table 9, the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention was confirmed to show a similar degree of skin color brightness as hydroquinone. This is because the ginseng fruit extract improves the pigmentation produced by ultraviolet light and brightens the skin color.

[시험예 4] 피부 보습 및 아토피 증상 개선 효과[Test Example 4] Skin moisturizing and atopic symptoms improvement effect

1) 인간 각질형성세포의 분화유도1) Induction of differentiation of human keratinocytes

각질형성세포 및 인간피부세포주(HaCaT)의 분화시 생성되는 CE(Cornified Envelop)의 양을 측정하여 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물의 세포분화 촉진 효과를 알아보았다. By measuring the amount of Cornified Envelop (CE) generated during the differentiation of keratinocytes and human skin cell lines (HaCaT) to determine the cell differentiation promoting effect of the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention.

일차 배양한 인간의 각질형성세포를 배양용 플라스크에 넣어 바닥에 부착시킨 후, 하기 표 10에 기재된 시험물질들을 농도별로 배양액에 첨가하고, 세포가 바닥 면적의 70~80% 정도 자랄 때까지 5일간 배양하였다. 이 세포를 수확(cell harvest)하여 PBS(phosphate buffered saline)로 세척한 다음, 2% SDS(Sodium Dodecyl Sulfate)와 20mM 농도의 DTT(Dithiothreitol)를 함유한 10mM 농도의 트리스-염산 완충액(Tris-HCl, pH 7.4) 1ml를 가하여 소니케이션(sonication), 보일링(boiling), 원심분리한 침전물을 다시 PBS 1ml에 현탁시켜 340nm에서의 흡광도를 측정하였다. 이와 별도로 상기 소니케이션 후의 용액 일부를 취하여 단백질 함량을 측정하여, 세포분화 정도의 평가 시 기준으로 삼았다. 저칼슘(0.03mM) 처리군과 고칼슘(1.2 mM) 처리군을 각각 음성/양성 대조군으로 하고, 저칼슘 농도에 시험물질을 첨가하여 실시한 시험 결과를 하기 표 10에 나타내었다. Human keratinocytes cultured in primary culture were put in a culture flask and attached to the bottom. Then, the test substances described in Table 10 were added to the culture solution by concentration, and the cells were grown for about 70 to 80% of the floor area for 5 days. Incubated. The cells were harvested and washed with PBS (phosphate buffered saline) and then 10 mM Tris-HCl (Tris-HCl) containing 2% Sodium Dodecyl Sulfate (SDS) and 20 mM Dithiothreitol (DTT). , pH 7.4) 1 ml was added, and the precipitates sonicated, boiled, and centrifuged were again suspended in 1 ml of PBS to measure absorbance at 340 nm. Separately, a portion of the solution after the sonication was taken to measure the protein content, which was used as a reference for evaluating the degree of cell differentiation. Low calcium (0.03mM) treated group and high calcium (1.2 mM) treated group as a negative / positive control, respectively, and the test results performed by adding the test substance to the low calcium concentration is shown in Table 10 below.

시험물질Test substance 각질형성세포에서의 분화능 (%)Differentiation capacity in keratinocytes (%) 대조군Control 저칼슘처리군(Ca2 + 0.03 mM)Low calcium group (Ca 2 + 0.03 mM) 100100 고칼슘처리군(Ca2 + 1.2 mM)High calcium group (Ca 2 + 1.2 mM) 210210 홍삼 추출물(100 ppm)Red Ginseng Extract (100 ppm) 104104 실시예 1Example 1 1 ppm1 ppm 115115 10 ppm10 ppm 120120 100 ppm100 ppm 124124

상기 표 10의 결과를 통하여 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물은 각질형성세포에서 분화를 촉진하는 것을 확인할 수 있었다.Through the results of Table 10, the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention was confirmed to promote differentiation in keratinocytes.

2) 인간 피부세포주의 트랜스 글루타미네이즈(transglutaminase)의 발현 효과2) Effect of Transglutaminase Expression on Human Skin Cell Line

인간의 피부세포주를 96공 평판배양기에 각 공당 5×104개를 넣고 24시간 동안 부착시켰다. 부착시킨 피부세포주에 시험물질을 처리한 후, 2일이 지난 다음, 배지를 제거하고, -20℃ 냉장고에 보관하였다. 동결-해동(Freeze-thawing)을 2회 반복하여 물질 처리한 세포를 파괴시킨 후, -20℃ 에 보관한 아세톤:에탄올(1:1, v/v)을 처리하여 4℃에서 30분간 방치하여 세포를 고정시켰다. 그 후, 실온에 방치하여 유기용매가 증발되게 하고, 블록킹(1% 소혈청알부민), 트랜스글루타미네이즈 항체(primary antibody), HRP 안티-마우스 항체(secondary)를 수행하였으며, 발색은 OPD(o-phennyldiamine)를 첨가하여 수행하였다. 발현량은 490nm에서 흡광도를 측정하였고, 보정은 630nm에서 백그라운드(background)를 측정하여 수행하였다. 저칼슘(0.03mM) 처리군과 고칼슘(1.2 mM) 처리군을 각각 음성/양성 대조군으로 하고, 저칼슘 농도에 시험물질을 첨가하여 실시한 결과를 하기 표 11에 나타내었다.Human skin cell lines were put in 5 × 10 4 cells in each 96-well plate incubator and attached for 24 hours. After treatment with the test substance to the attached skin cell line, two days later, the medium was removed, and stored in a -20 ℃ refrigerator. After freeze-thawing was repeated twice, the cells treated with material were destroyed, and then treated with acetone: ethanol (1: 1, v / v) stored at -20 ° C and left at 4 ° C for 30 minutes. The cells were fixed. Thereafter, the organic solvent was allowed to evaporate at room temperature, blocking (1% bovine serum albumin), transglutaminase antibody (primary antibody), HRP anti-mouse antibody (secondary) were performed, and color development was OPD (o). -phennyldiamine) was added. Expression was measured by absorbance at 490nm, calibration was performed by measuring the background (background) at 630nm. Low calcium (0.03mM) treated group and high calcium (1.2 mM) treated group as a negative / positive control, respectively, and the results of the test material added to the low calcium concentration is shown in Table 11 below.

시험물질Test substance 트랜스글루타미네이즈 발현량(%)Transglutaminase Expression (%) 대조군 Control 저칼슘처리군(Ca2 + 0.03 mM)Low calcium group (Ca 2 + 0.03 mM) 100100 고칼슘처리군(Ca2 + 1.2 mM)High calcium group (Ca 2 + 1.2 mM) 140140 홍삼 추출물(100 ppm)Red Ginseng Extract (100 ppm) 131131 실시예 1 Example 1 1 ppm1 ppm 135135 10 ppm10 ppm 175175 100 ppm100 ppm 210210

상기 표 11의 결과에서, 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물은 대조군에 비해 두 배 정도의 증가 양상을 보였고, 대조군보다도 많은 양이 발현됨을 알 수 있었다. 따라서, 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물이 트랜스글루타미네이즈의 발현을 향상시키는 것을 알 수 있었다. In the results of Table 11, the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention showed a two-fold increase compared to the control, it can be seen that the amount is expressed more than the control. Therefore, it was found that the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention improves the expression of transglutaminase.

3) 인간 피부에서 표피지질(총 세라마이드) 생성량 증가 효과3) Increased epidermal lipid (total ceramide) production in human skin

실시예 1의 인삼 열매 추출물이 실제 인간 피부에서의 지질 합성 증가에 미치는 효과를 평가하기 위하여, Carbopol ETD 2020 0.5%, TEA 0.45%, 시험물질 5%, 및 탈이온화된 물로 100을 맞추어 사용하였다. 12명의 성인 남, 녀를 대상으로 팔뚝에 50ml 폴리프로필렌 코르니컬 튜브(polypropylene cornical tube)의 직경만큼의 영역을 표시한 후 매일 2회씩 대조군들과 실시예 1의 인삼 열매 추출물을 20μl씩 도포하면서 피검자를 2군으로 나누어 3일째와 11일째 생성 지질량을 하기와 같은 방법으로 지질을 추출하여 분석하였다. 팔뚝을 수돗물을 이용하여 씻은 다음 스카치 810 매직테입(Scotch 810 Magic tape)으로 1회 테입 스트립핑(tape stripping)한 후 자른 50ml 폴리프로필렌 코르니컬 튜브를 저장소(reservoir)로 사용하여 1ml의 사이클로핵산/에탄올(cyclohexane/ethanol)(4:1)을 첨가한 다음 약 1분간 섞어 준 뒤 이를 새로운 튜브에 옮기고 다시 1ml의 사이클로헥산/에탄올(1:1)을 위와 같은 방법으로 처리한 후 튜브에 모았다. 이 후 이를 50℃에서 질소 가스를 이용하여 건조시킨 다음 500μl의 클로로포름/메탄올(2:1)에 녹인 후 각 시험물질들을 CAMAG사의 자동화 TLC 샘플러-4(Automated TLC sampler-4)를 이용하여 실리카겔 TLC(Thin Layer chromatography) 판에 점적하고, AMD(Automated Multiple Development)를 이용하여 하기 표 12와 같은 조성비의 전개 용매로 전개하였다. In order to evaluate the effect of the ginseng fruit extract of Example 1 on the increase in lipid synthesis in real human skin, 100 was used as Carbopol ETD 2020 0.5%, TEA 0.45%, test substance 5%, and deionized water. Twelve adult males and females were marked with the diameter of a 50 ml polypropylene cornical tube on the forearm, followed by 20 μl of the control and the ginseng fruit extract of Example 1 twice daily. Was divided into two groups, and the amount of lipid produced on day 3 and day 11 was analyzed by extracting lipids as follows. Wash the forearm with tap water, tape stripping once with Scotch 810 Magic tape, and cut 50 ml polypropylene conical tubes as a reservoir using 1 ml of cyclonucleic acid / Ethanol (cyclohexane / ethanol) (4: 1) was added and mixed for about 1 minute, and then transferred to a new tube, and 1 ml of cyclohexane / ethanol (1: 1) was treated in the same manner as above and collected in the tube. Thereafter, the mixture was dried using nitrogen gas at 50 ° C., and then dissolved in 500 μl of chloroform / methanol (2: 1), and each test material was prepared using CAMAG's Automated TLC sampler-4. (Thin Layer chromatography) was applied to the plate, and developed using a developing solvent having a composition ratio as shown in Table 12 using AMD (Automated Multiple Development).

클로로포름chloroform 메탄올Methanol water 아세트산Acetic acid 헥산Hexane 디에틸에테르Diethyl ether 페트롤리움에테르Petroleum ether 용매이동거리 (cm)Solvent movement distance (cm) 1차Primary 4040 1010 1One 3.03.0 2차Secondary 190190 99 1One 6.56.5 3차3rd 22 1212 33 7.57.5 4차4th 100100 TopTop

TLC 판을 전개시킨 후 TLC 스캐너-II(CAMAG 사: densitometer)를 이용하여 570nm 파장에서 각 밴드(band)의 크기를 측정하였다. 비처치군의 세라마이드 생성량을 100%로 환산한 각 처치군의 세라마이드 생성량은 하기 표 13에 나타내었다. After the TLC plate was developed, the size of each band was measured at a wavelength of 570 nm using a TLC scanner-II (CAMAG: densitometer). The ceramide production amount of each treatment group in which the ceramide production amount of the untreated group was converted to 100% is shown in Table 13 below.

시험물질Test substance 3일 처리후 (%)After 3 days treatment (%) 11일 처리후 (%)After 11 days of treatment (%) 대조군Control 무처리군No treatment group 100100 100100 운반제(Vehicle)Vehicle 103103 9898 글리세린 (5%)Glycerin (5%) 102102 9494 실시예 1(5%)Example 1 (5%) 108108 116116

상기 표 13에 나타난 바와 같이, 실시예 1의 인삼 열매 추출물 처치 3일 후에 음성대조군(무처리군/비히클) 대비 약 5 내지 8% 정도의 증가 상태를 보였고 양성대조군(글리세린) 보다는 6% 정도의 증가를 보였다. 그리고 11일 후에는 지질 생성능이 음성대조군에 비해 약 16% 정도, 양성대조군에 비해 22% 정도 우수한 것으로 나타났다. 이는 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물에 의한 세라마이드 증가를 입증하는 것이다. As shown in Table 13, after 3 days of treatment with ginseng fruit extract of Example 1 showed an increase of about 5 to 8% compared to the negative control group (non-treated group / vehicle) and 6% of the positive control group (glycerine) Showed an increase. After 11 days, lipid production was about 16% better than the negative control and 22% better than the positive control. This demonstrates the increase in ceramide by the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention.

4) 인체에서의 피부 보습력 증가 4) Increased skin moisture in the human body

피부 건조증을 나타내는 50-60대의 성인 남녀 50명을 2개조로 나누어, 각 조에 실시예 2와 비교예 2를 매일 2회씩 4주간 안면에 도포하였다. 도포 개시 전과, 도포 후 1주, 2주, 4주 경과한 시점 및 도포를 중지한 2주 경과(총 6주 경과) 후에 항온, 항습 조건(24℃, 상대습도 40%)에서 코니오미터로 피부 수분량을 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 14에 나타내었다. 시험결과는 시험개시 직전에 측정한 코니오미터 값을 기준으로 하여 일정기간 처치한 후의 측정값의 증가분을 백분율로 표시한 것이다. Fifty adult men and women in their fifties and sixties with skin dryness were divided into two groups, and Example 2 and Comparative Example 2 were applied to the face twice daily for four weeks in each group. Before application start, after 1 week, 2 weeks, 4 weeks after application, and after 2 weeks (total 6 weeks) after application was stopped, constant temperature, constant humidity (24 ° C, 40% relative humidity) was used as a comonometer. Skin moisture was measured, and the results are shown in Table 14 below. The test result is a percentage of the increase of the measured value after a certain period of treatment based on the Koniometer value measured immediately before the test was started.

시험물질Test substance 수분 증가율 (%)Moisture Growth Rate (%) 1주 경과1 week past 2주 경과2 weeks past 4주 경과4 weeks past 6주 경과After 6 weeks 실시예 2Example 2 3434 4141 4242 3333 비교예 2Comparative Example 2 3030 3434 3434 1515

코니오미터는 표피의 전기전도도 값을 측정하여 피부에 존재하는 수분량을 측정하는 피부 수분 측정기이다. 상기 표 14에서 보여지는 바와 같이, 실시예 1의 인삼 열매 추출물이 함유된 실시예 2의 물질을 도포한 군에서는 비교예 2를 도포한 대조군에 비해서 피부수분량이 더 증가되었다. 또한, 실시예 2의 영양크림의 도포를 중지한 2주 후(총 6주 경과)에 피부수분을 측정한 수치가 1~2주 경과 후의 수치와 유사하게 나타나, 실시예 2를 도포하지 않아도 일정 기간 동안 본 발명에 의한 인삼 열매 추출물의 도포에 의한 피부 수분이 지속적으로 유지됨을 알 수 있었다. A conniometer is a skin moisture meter that measures the amount of moisture present on the skin by measuring the conductivity of the epidermis. As shown in Table 14, the skin moisture content was increased in the group coated with the material of Example 2 containing the ginseng fruit extract of Example 1 compared to the control group applied to Comparative Example 2. Also, two weeks after the application of the nourishing cream of Example 2 (total of 6 weeks), the measured value of the skin moisture was similar to that after 1 to 2 weeks. During the period it was found that the skin moisture by the application of the ginseng fruit extract according to the present invention is continuously maintained.

5) 아토피성 피부염 개선 효과5) Atopic dermatitis improvement effect

아토피 증상 개선 효과를 다음과 같이 측정하였다. 아토피 증상(가려움, 진무름 또는 심한 건조증)으로 진단받았거나, 육안관찰로 아토피 유사 증상을 보이는 10~50대 사이의 50명을 대상으로 하여 2그룹으로 나누고, 각각 실시예 2와 비교예 2를 제공하여, 아토피 증상을 보이는 부위에 매일 2회씩 12주 동안 도포하게 하였다. 효능 평가는 12주 처치 후 설문 조사를 통해 개선 정도를 본인이 주관적으로 판단하게 하였다. 설문에서는 아토피성 피부염의 증상을 "가려움", "건조함", "각질발생", "비듬", "홍반", "부어오름", "피부 균열" 및 "진물과 습진" 등으로 나누고 상기 증상이 있는 경우 각각의 증상에 대하여 개선 정도를 평가한 후에 이를 평균하여 아토피 증상 개선 효과를 개인별로 평가하였으며, 그 결과를 하기 표 15에 나타내었다.The effect of improving atopic symptoms was measured as follows. 50 patients who were diagnosed with atopic symptoms (itch, erosion or severe dryness) or who showed atopic-like symptoms by visual observation were divided into two groups, and provided in Example 2 and Comparative Example 2, respectively. The atopic dermatitis was applied twice a day for 12 weeks. Efficacy assessments were conducted after 12 weeks of treatment and subjectively judged the improvement. In the questionnaire, the symptoms of atopic dermatitis are divided into "itch", "dry", "keratogenesis", "dandruff", "erythema", "swelling", "skin cracking", and "dust and eczema". In this case, after evaluating the degree of improvement for each symptom, the average of the atopy symptom improvement effect was evaluated for each individual, and the results are shown in Table 15 below.

시험물질Test substance 응답자수 (인)Number of respondents 현저히 개선Markedly improved 개선Improving 변화없음No change 악화worse 실시예 2Example 2 22 44 1414 00 비교예 2Comparative Example 2 66 88 66 00

표 15에서 나타난 바와 같이, 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물이 함유된 제형을 도포한 처치군이 대조군보다 전반적으로 아토피 증상이 더 개선되었음을 알 수 있다. As shown in Table 15, it can be seen that the treatment group to which the formulation containing the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention was further improved than the control group.

[시험예 5] 여드름 및 피부 트러블 완화[Test Example 5] Acne and skin trouble relief

1) 피지 조절 효과: 5-알파-리덕타아제 활성 억제 효과1) sebum control effect: 5-alpha-reductase activity inhibitory effect

성숙한 SD(Sproque-Dawley) 웅성 랫트(생후 7-8주)를 디에틸에테르로 치사시킨 후, 복부 전립선을 떼내어 결합조직을 제거하고 완충액(0.32M 수크로오스, 0.1mm 디티오트레이톨(dithiothreitol) 및 20mM 아세트산 나트륨)을 첨가하여 잘게 자른 다음, 분쇄기로 현탁화하였다. 현탁액은 원심분리하여 상층액을 취해 5-알파-리덕타아제를 부분 정제하고, 이 효소의 활성도 억제 실험을 수행하였다. Mature Sproque-Dawley male rats (7-8 weeks old) were killed with diethyl ether, and then the abdominal prostate was removed to remove connective tissue and buffered (0.32 M sucrose, 0.1 mm dithiothreitol). And 20 mM sodium acetate) was added to the finely chopped and suspended in a grinder. The suspension was centrifuged to take supernatant, partially purified 5-alpha-reductase, and the activity inhibition experiment of this enzyme was performed.

위에서 얻은 상층액의 일부를 취하여 0.2M 일염기산과 0.2M 이염기산이 들어 있는 완충액에 넣은 후, 동위원소인 3H가 붙어있는 기질(테스토스테론)과 함께 반응시켜 생성물인 디하이드로테스토스테론의 생성량을 측정하였다. Taking a portion of the supernatant obtained above was placed in a buffer containing 0.2M monobasic acid and 0.2M dibasic acid, is reacted with isotope substrate (testosterone) marked with 3 H measure the amount of dihydrotestosterone product It was.

반응용액은 1mM 디티오트레이톨, 40mM 나트륨 포스페이트(pH 6.5), 50μM NADPH, [1,2,6,7-3H] 테스토스테론/테스토스테론(2.2×109몰) 및 효소 현탁액(0.8㎎) 단백질을 565㎕ 포함하였다.The reaction solution is 1mM dithiothreitol, 40mM sodium phosphate (pH 6.5), 50μM NADPH, [1,2,6,7- 3 H] testosterone / testosterone (2.2 × 109 mol) and enzyme suspension (0.8㎎) protein 565 μl was included.

실시예 1의 인삼 열매 추출물을 10% 에탄올에 녹여 한 반응당 100㎍/10% 에탄올 10㎕ 상태로 가하고, 대조군으로는 동일한 부피의 용매를, 양성대조군으로는 리보플라빈을 사용하였다. The ginseng fruit extract of Example 1 was dissolved in 10% ethanol and added to 10 μl of 100 μg / 10% ethanol per reaction, and the same volume of solvent was used as a control and riboflavin was used as a positive control.

반응은 효소 현탁액을 부가하는 것과 동시에 시작하여 37℃에서 30분간 진행시킨 후, 1㎖의 에틸아세테이트를 가하여 추출하였으며, 100㎕의 에틸아세테이트상을 실리카 플라스틱 시트 카이젤겔 60 에프 254(Silica plastic sheet kieselgel 60 F254)상에서, 전개용매계는 아세테이트-사이클로헥산(1:1)으로 전개하였다.The reaction was started at the same time as the addition of the enzyme suspension and proceeded at 37 ° C. for 30 minutes, followed by extraction by adding 1 ml of ethyl acetate. 100 μl of ethyl acetate was extracted from silica plastic sheet kieselgel 60 254 60 F254), the developing solvent system was developed with acetate-cyclohexane (1: 1).

플라스틱 시트를 공기 건조한 후, 동위원소의 양을 측정하기 위해 바스 시스템을 사용하였는데, 건조된 플라스틱 시트와 엑스레이 필름을 함께 바스 카세트에 넣어 1주일 후에 필름에 남아있는 테스토스테론과 디하이드로테스토스테론의 동위원소 양을 측정하였으며, 각각의 저해율에 대한 결과를 하기 표 16에 나타내었다.After air drying the plastic sheet, the bath system was used to measure the isotope amount. The isotopic amount of testosterone and dihydrotestosterone remaining in the film after one week by placing the dried plastic sheet and the x-ray film together in the bath cassette. Was measured, and the results for each inhibition rate are shown in Table 16 below.

시험물질Test substance T(dpm)T (dpm) DHT(dpm)DHT (dpm) 전환율(%)% Conversion 저해율(%)% Inhibition 실시예 1Example 1 68786878 23552355 25.525.5 39.939.9 대조군Control 75207520 55365536 42.442.4 -- 양성 대조군Positive control 63006300 25302530 28.728.7 32.432.4 (1) T : 테스토스테론 영역에서 나타난 3H 레디오 액티버티 (2) DHT : 디하이드로테스토스테론 영역에서 나타난 3H 레디오 액티버티 (3) 전환율 : DHT 영역의 레디오 액티버티/전체 레디오 액티버티 (4) 저해율 : 100 x (대조군의 전환율-시료의 전환율)/대조군의 전환율(1) T: 3H radio activity in the testosterone region (2) DHT: 3H radio activity in the dihydrotestosterone region (3) Conversion rate: radio activity / total radio activity in the DHT region (4) Inhibition rate: 100 x (control rate vs. sample rate) / control rate

상기 표 16으로부터, 인삼 열매 추출물은 5-알파 리덕타아제 억제 효과가 있음을 알 수 있었다. From Table 16, the ginseng fruit extract was found to have a 5-alpha reductase inhibitory effect.

2) 지질합성(lipogenesis) 억제 효과2) Lipogenesis Inhibitory Effect

지질 합성에 필요한 탄소 원소의 소비(uptake) 정도를 정량하여 지질합성 저해 정도를 평가하는 방법으로 피지선에서의 지질 합성 정도를 평가하였다. The degree of lipid synthesis in sebaceous glands was evaluated by quantifying the uptake of carbon elements necessary for lipid synthesis and assessing the degree of inhibition of lipid synthesis.

즉, 피지선이 많은 햄스터 귀 조직을 생검(biopsy)하여 C14이 라벨된 배지에서 6시간 동안 방사능 측정기로 대조군과 시험물질들을 비교 정량하여 저해 정도를 평가하였다. 시험물질들은 햄스터 오른쪽 귀 조직을 이용, 배지에 시험물질 용액 0.01%를 가하여 사용하였고, 대조군은 햄스터 왼쪽 귀 조직을 이용, 배지에 생리 식염수 0.01%를 가하여 사용하였으며, 그 결과를 하기 표 17에 나타내었다. In other words, the hamster ear tissue with a lot of sebaceous glands was biopsyed for 6 hours in a C14-labeled medium, and the control group and the test substance were compared and quantified to evaluate the degree of inhibition. Test substances were used by adding 0.01% test substance solution to the medium using hamster right ear tissue, and the control group was used by adding 0.01% physiological saline to the medium using hamster left ear tissue, and the results are shown in Table 17 below. It was.

한편, 표 17에서 저해율은 하기 수학식 4에 따라 계산한 것이고, 그 값은 4 마리의 햄스터에 대한 평균값이다.On the other hand, the inhibition rate in Table 17 is calculated according to the following equation 4, the value is the average value for the four hamsters.

Figure 112007071742417-pat00003
Figure 112007071742417-pat00003

시험물질Test substance 저해율(%)% Inhibition 실시예 1Example 1 4747 양성 대조군(레티노인산)Positive control (retinoic acid) 5252

상기 표 17의 결과로부터, 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물이 지질 생합성 억제 효과가 있음을 알 수 있다. From the results of Table 17, it can be seen that the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention has a lipid biosynthesis inhibitory effect.

3) 면포 감소 효과3) Cotton cloth reduction effect

면포 감소 효과를 확인하기 위하여 본 발명에 사용된 실시예 1의 인삼 열매 추출물을 1,3-부틸렌글리콜에 용해시켜 1% 용액이 되도록 한 후, 토끼 임상실험용 시험물질로 사용하였다. The ginseng fruit extract of Example 1 used in the present invention was dissolved in 1,3-butylene glycol to make a 1% solution, and then used as a rabbit clinical test substance in order to confirm the reduction effect of the cotton.

흰 토끼의 귀에 면포 유발 물질인 50% 올레인산/파라핀오일 0.2㎖를 오전에 도포하여 면봉으로 문질러 주었다. 하루 두 번 오전(50% 올레인산/파라핀오일), 오후(물질)에 도포하며 총 실험 기간인 한달 동안 도포하였다. 면포는 약 10일 전후부터 발생되는데, 실시예 1의 인삼 열매 추출물을 0.2㎖씩 오후에 도포해 준 결과 2주 후부터는 점차적으로 면포의 수 및 크기가 감소하였다.In the morning of the rabbit rabbit, 50% oleic acid / paraffinic oil (0.2%) was applied in the morning and rubbed with a cotton swab. It was applied twice a day in the morning (50% oleic acid / paraffin oil), in the afternoon (material) and for a month during the total experiment period. Noodles were generated from about 10 days, 0.2 g each of the ginseng fruit extract of Example 1 was applied in the afternoon, and after 2 weeks, the number and size of the noodle gradually decreased.

각 조직을 생검하여 각질을 벗겨낸 다음, 면포 크기를 현미경 하에서 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 18에 나타내었다.Each tissue was biopsied and exfoliated, and the scrim size was measured under a microscope, and the results are shown in Table 18 below.

시험물질Test substance 평균 면포 크기 측정 (0.1 mm) N=3Average scrim size measurement (0.1 mm) N = 3 대조군(미처리군)Control group (untreated group) 1.781.78 올레인산 (OA)Oleic acid (OA) 3.53.5 올레인산 (OA) + 실시예 1Oleic acid (OA) + Example 1 2.32.3

상기 표 18의 결과로부터, 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물로 처리한 토끼의 면포가 현저히 감소되었다는 것을 알 수 있었다. 즉, 실시예 1의 인삼 열매 추출물에 의해 피지감소가 나타났고, 결과적으로 피부 과각질화를 감소시켜 면포가 감소되었음을 추정할 수 있다.From the results in Table 18, it can be seen that the cotton cloth of the rabbit treated with the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention was significantly reduced. That is, sebum reduction was shown by the ginseng fruit extract of Example 1, and as a result, it can be estimated that the skin scleroderma was reduced by reducing the skin keratinization.

4) 피지 분비 억제 효과4) sebum secretion inhibitory effect

지성피부 완화 효과를 측정하기 위해서 20-45세의 여성층으로 지성피부를 가진 20명에게 이마 부분에 10명은 실시예 2(인삼 열매 추출물 함유)를, 다른 10명에게는 비교예 2를 아침, 저녁으로 1일 2회 도포하여 사용하게 한 후에 1주, 2주, 3주 및 4주 후에 피부 유분 측정기(Sebumeter SM810)를 이용하여 피부의 피지 분비량을 측정하였다. 실험은 20℃, 상대습도 20%에서 이루어졌으며 측정 결과는 표 19에 나타내었다. 결과는 피검자 10명의 평균값으로 나타내었다. 지성 피부인 경우 측정값이 220 이상이고, 정상피부의 경우 100 내지 220 사이이다.To measure the effects of oily skin, 20 to 45-year-old females with oily skin had 10 cases of Example 2 (containing ginseng fruit extract) on the forehead, and 10 others of Comparative Example 2 in the morning and evening. After applying twice a day to use, after 1 week, 2 weeks, 3 weeks and 4 weeks sebum secretion of the skin was measured using a skin oil meter (Sebumeter SM810). The experiment was carried out at 20 ℃, 20% relative humidity and the measurement results are shown in Table 19. The results are expressed as the average value of 10 subjects. For oily skin the measured value is 220 or more, for normal skin it is between 100 and 220.

피지분비 억제 효과Sebum secretion inhibitory effect 시험물질Test substance 적용전Before application 1주1 week 2주2 weeks 3주3 weeks 4주4 Weeks 비교예 2Comparative Example 2 245245 240240 239239 235235 230230 실시예 2Example 2 245245 236236 231231 218218 209209

상기 표 19의 결과에서, 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물을 함유하는 실시예 2의 영양크림이 과다한 피지 분비를 억제하는 효과를 나타내어 피지 조절 효과가 있음을 확인할 수 있었다.In the results of Table 19, it was confirmed that the nutrition cream of Example 2 containing the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention exhibits the effect of inhibiting excessive sebum secretion, has a sebum control effect.

5) 항염증 효과: 프로스타글란딘 E2(PGE2) 생성 억제 효과5) Anti-inflammatory effect: inhibitory effect of prostaglandin E2 (PGE2) production

본 발명에 의한 인삼 열매 추출물의 프로스타글란딘 E2 생성 억제 효과를 알아보기 위하여 하기와 같은 방법으로 실험하였다(참고문헌: Jeffrey, K. H., Anglea, S. W., Zoe, S., and Rhia C. M. Intracellular Measurement of Prostaglandin E2: Effect of Anti-inflammatory Drugs on Cyclooxygenase Activity and Prostanoid Expression, Analytical Biochemistry, 1999, 271, 18-28).In order to investigate the inhibitory effect of the ginseng fruit extract according to the present invention prostaglandin E2 production was tested in the following manner (Ref .: Jeffrey, KH, Anglea, SW, Zoe, S., and Rhia CM Intracellular Measurement of Prostaglandin E2: Effect of Anti-inflammatory Drugs on Cyclooxygenase Activity and Prostanoid Expression, Analytical Biochemistry, 1999, 271, 18-28).

먼저, 사람의 표피 조직에서 분리한 섬유아세포를 CO2 배양기에서 24시간 동안 배양한 다음, FBS(fetal bovine serum)가 포함되지 않은 배지로 교체하여 2 시간 동안 배양한 후, 실시예 1의 인삼 열매 추출물에 증류수를 혼합하여 각각 1㎍/mL, 10 ㎍/mL 및 100 ㎍/mL의 농도로 준비하여 처리한 다음, 37℃, 5 %(v/v)의 CO2 배양기에서 2 시간 동안 배양하였다. First, the fibroblasts isolated from human epidermal tissue were incubated for 24 hours in a CO 2 incubator, then replaced with medium containing no FBS (fetal bovine serum) and cultured for 2 hours, and then the ginseng fruit of Example 1 Distilled water was mixed with the extract, prepared and treated at concentrations of 1 µg / mL, 10 µg / mL and 100 µg / mL, respectively, and then incubated for 2 hours in a CO 2 incubator at 37 ° C and 5% (v / v). .

그 다음, 프로스타글란딘 E2 자극원으로 칼슘 이오노포어 A23187(Calcium ionophore A23187)과 아라키돈산을 50㎛의 농도로 5 분간 처리한 후, 세포를 용혈시키고 ELISA 판독기 450 nm에서 흡광도를 측정하여 프로스타글란딘 E2를 정량하였으며, 그 결과를 하기 표 20에 나타내었다. 이때, 하기 표 20에 기재된 억제율은 아라키돈산 처리시 실시예 1의 인삼 열매 추출물을 처리하지 않은 피부 섬유아세포와 실시예 1의 인삼 열매 추출물을 처리한 섬유아세포의 프로스타글란딘 E2 생성량의 차이를 기준으로 계산하였으며, 5 회 반복하여 평균값을 구하였다.Subsequently, calcium ionophore A23187 and arachidonic acid were treated for 5 minutes at a concentration of 50 μm as a prostaglandin E2 stimulator, and the cells were hemolyzed and absorbance was measured at 450 nm of ELISA reader to quantify prostaglandin E2. And the results are shown in Table 20 below. At this time, the inhibition rate shown in Table 20 is calculated based on the difference in the production of prostaglandin E2 of the skin fibroblasts not treated with the ginseng fruit extract of Example 1 and the fibroblasts treated with the ginseng fruit extract of Example 1 when arachidonic acid treatment The average value was repeated five times.

시험물질Test substance 농도 (㎍/mL)Concentration (㎍ / mL) 프로스타글란딘 E2 (pg/105 cells)Prostaglandin E2 (pg / 10 5 cells) 억제율 (%)Inhibition Rate (%) 음성대조군Negative Control -- 25.2 ± 4.425.2 ± 4.4 -- 아라키돈산Arachidonic acid -- 385.1 ± 9.1385.1 ± 9.1 -- 아라키돈산 + 실시예 1 Arachidonic Acid + Example 1 1One 289.6 ± 6.5289.6 ± 6.5 24.824.8 1010 246.4 ±8.6246.4 ± 8.6 36.036.0 100100 195.6 ±14.3195.6 ± 14.3 49.249.2

상기 표 20의 결과에서, 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물은 자극원에 의한 프로스타글란딘 E2 생성을 억제할 수 있음을 확인할 수 있었다.In the results of Table 20, it was confirmed that the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention can inhibit the production of prostaglandin E2 by the stimulation source.

6) 항염증 효과: LPS(Lipopolysaccharide)로 유도된 사이클로옥시게나제-2(COX-2)의 생합성 억제 효과6) Anti-inflammatory effect: Inhibition of biosynthesis of cyclooxygenase-2 (COX-2) induced by LPS (Lipopolysaccharide)

인체 섬유아세포를 105 개의 농도로 12공 평판배양기에서 배양한 다음 LPS 처리 후, 실시예 1의 인삼 열매 추출물을 1ppm, 10ppm 및 100ppm을 포함한 배지로 교체하였다. 배양 2일째 세포를 수확해서(harvest) 웨스턴 블랏(Westren blot) 방법을 사용하여 생성된 사이클로옥시게나제-2(cyclooxygenase-2, COX-2)의 양을 정량하였다. 대조군을 100으로 하여 농도계(densitometer)로 측정한 값과의 비교치를 하기 표 21에 나타내었다. 이때 대조군은 실시예 1의 인삼 열매 추출물을 처리하지 않고 배양한 미처리군이다.Human fibroblasts were cultured in a 12-hole plate incubator at a concentration of 10 5 , and after LPS treatment, the ginseng fruit extract of Example 1 was replaced with a medium containing 1 ppm, 10 ppm and 100 ppm. Cells were harvested on the second day of culture (harvest) and the amount of cyclooxygenase-2 (COX-2) produced using the Western blot method was quantified. A comparison with the value measured with a densitometer using the control group as 100 is shown in Table 21 below. At this time, the control group is an untreated group cultured without treating the ginseng fruit extract of Example 1.

시험물질(농도:ppm)Test substance (concentration: ppm) COX-2 생합성(%)COX-2 biosynthesis (%) 실시예 1 Example 1 100100 1515 1010 3535 1One 7171 대조군Control 100100

상기 표 21의 결과에서 알 수 있듯이, 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물은 염증반응 유발인자인 LPS로 유도된 사이클로옥시게나제-2의 생합성을 농도 의존적으로 감소시켜 염증반응을 억제함으로써 피부 트러블을 완화시킬 수 있는 효능을 나타내었다.As can be seen from the results of Table 21, the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention by inhibiting the inflammatory response by reducing the biosynthesis of cyclooxygenase-2 induced by the inflammatory response triggering factor LPS Efficacy in alleviating skin troubles has been shown.

7) 항염증 효과: LPS(Lipopolysaccharide)로 유도된 종양괴사인자알파(TNF-α)의 생합성 억제 효과7) Anti-inflammatory effect: Inhibitory effect of LPS (Lipopolysaccharide) -induced tumor necrosis factor alpha (TNF-α) on biosynthesis

인체 각질형성세포를 105개의 농도로 12공 평판배양기에 배양하였고, LPS를 처리한 후, 실시예 1의 인삼 열매 추출물 1pp, 10ppm 및 100ppm을 포함한 배지로 교체하였다. 6-24시간 배양한 다음 세포를 수확해서(harvest) ELISA(Pharmingen 555212) 방법을 사용하여 생성된 종양괴사인자알파(TNF-α)의 양을 정량하였다. 대조군을 100으로 하여 측정한 값과의 비교치를 표 22에 나타내었다. 이때 대조군은 실시예 1의 인삼 열매 추출물을 처리하지 않고 배양한 미처리군이다.Human keratinocytes were cultured in a 12-hole plate incubator at a concentration of 10 5 , and treated with LPS, and then replaced with a medium containing 1pp, 10ppm and 100ppm of ginseng fruit extract of Example 1. Cells were harvested for 6-24 hours and harvested (harvest) to quantify the amount of tumor necrosis factor alpha (TNF-α) produced using the ELISA (Pharmingen 555212) method. Table 22 shows a comparison with the value measured using the control group as 100. At this time, the control group is an untreated group cultured without treating the ginseng fruit extract of Example 1.

시험물질(농도:ppm)Test substance (concentration: ppm) TNF-α 생합성(%)TNF-α biosynthesis (%) 실시예 1 Example 1 100100 1414 1010 4141 1One 6969 대조군Control 100100

상기 표 22의 결과에서 알 수 있듯이, 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물은 염증유발인자 LPS에 의한 종양괴사인자알파(TNF-α)의 생합성을 농도 의존적으로 감소시켜 이로 인해 발생할 수 있는 염증반응을 억제하여 피부 트러블 개선에 기여할 수 있었다.As can be seen from the results in Table 22, the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention concentration-dependently reduce the biosynthesis of tumor necrosis factor alpha (TNF-α) caused by the inflammation-inducing factor LPS may be caused by this Inhibition of the inflammatory response could contribute to skin problems.

8) 대식세포(Macrophage)에 대하여 LPS로 유도시킨 NO(산화질소) 억제 효과8) LPS-induced NO (nitric oxide) inhibitory effect on macrophage

본 발명에 의한 인삼 열매 추출물의 항염증 효과를 알아보기 위하여 대식세포(Macrophage)에 대하여 LPS로 유도시킨 NO(산화질소) 억제 실험을 진행하였다. In order to examine the anti-inflammatory effect of the ginseng fruit extract according to the present invention was carried out LPS-induced NO (nitric oxide) inhibition experiments on macrophage (Macrophage).

10% 농도의 혈청을 첨가한 배지에서 5% CO2 조건 하에 대식세포(Raw 264.7 cell)를 배양하였다. 96공 평판배양기에서 2×105개의 농도로 자라게 하고, LPS(1 ug/ml)로 자극한 후 실시예 1의 인삼 열매 추출물과 홍삼 추출물을 각각 처리하여 37℃에서 1시간 동안 보관한 후 NO 생성 정도를 측정하여 LPS로 유도시킨 NO 저해하는 효과를 비교하였다. NO 생성량의 측정은 Griess 반응법(Minghetti, L. et al., 1991, Glia 19. 152-160)을 이용하였으며, 그 결과를 도 5에 나타내었다.Macrophages (Raw 264.7 cells) were incubated under 5% CO 2 in medium with 10% serum. After growing at a concentration of 2 × 10 5 in a 96-hole flat plate incubator and stimulating with LPS (1 ug / ml), the ginseng fruit extract and red ginseng extract of Example 1 were treated and stored at 37 ° C. for 1 hour, and then NO. The degree of production was measured to compare the effect of NO inhibition induced by LPS. The measurement of NO production was carried out using the Griess reaction method (Minghetti, L. et al., 1991, Glia 19. 152-160), the results are shown in FIG.

도 5의 결과에서 보여지는 바와 같이, 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물은 염증유발인자(Cytokine)로서의 NO 생성을 효과적으로 억제하였으며, 그 효과가 홍삼 추출물보다 월등히 우수하였다. 따라서, 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물은 염증반응 조절을 통한 피부 트러블에 의한 상처를 치유하고 주름 생성을 억제하는 효과에 기여할 것으로 기대된다.As shown in the results of Figure 5, the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention effectively inhibited the NO production as a cytotoxic factor (Cytokine), the effect was much better than the red ginseng extract. Therefore, the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention is expected to contribute to the effect of healing wounds and inhibiting wrinkles caused by skin problems through the control of the inflammatory response.

9) 여드름 및 피부 트러블 개선 효과9) Acne and skin trouble improvement effect

실험에 참여한 인원은 평소 여드름을 비롯한 피부 트러블이 심한 여성 10명으로, 항온항습실에서 얼굴을 비누로 수세한 후 30분간 적응시키고, 여드름 개수 및 염증이 동반된 개수를 비교하여 피부 트러블 정도를 측정하였다.The participants in the experiment were 10 women with severe skin problems, including acne. After washing the face with soap in a constant temperature and humidity room for 30 minutes, the skin trouble was measured by comparing the number of acne and the number with inflammation. .

상기 피시험자들에게 실시예 2 및 비교예 2의 영양크림을 각각 4주일 동안 사용하게 한 다음 여드름 및 피부 트러블 정도를 비교하였으며, 그 결과를 하기 표 23에 나타내었다.The test subjects were allowed to use the nutrition creams of Example 2 and Comparative Example 2 for 4 weeks, and then the degree of acne and skin troubles was compared, and the results are shown in Table 23 below.

실시예1 (5명)Example 1 (5 persons) 비교예1 (5명)Comparative Example 1 (5 persons) 피부 트러블 개선비율Skin trouble improvement rate 80%80% 20%20%

상기 표 23의 결과에서 보여지는 바와 같이, 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물을 포함한 실시예 2를 4주간 도포한 결과 기존 여드름 개수의 감소 및 염증 동반 트러블의 개선 효과가 나타났다.As shown in the results of Table 23, the application of Example 2 including the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention for 4 weeks showed a reduction in the number of existing acne and improvement of the accompanying inflammation.

[시험예 6] 피부 혈색 개선 효과Test Example 6 Skin Color Improvement Effect

1) 인삼 열매 추출물의 HUVEC(Human umbilical vein endothelial cell)에서의 NO 생성능1) NO Production of Ginseng Fruit Extract in Human Uumbilical Vein Endothelial Cells

사람의 혈관내피세포에는 eNOS(endothelial nitric oxide synthase)가 존재하며, 그 활성이 증가하는 것으로 NO(산화질소)를 생성시켜 혈관을 확장시키고, 혈행을 촉진하는 역할을 하게 된다. 사람의 혈관내피세포를 배양한 후 인삼 열매 추출물(도 6)과 일반홍삼 추출물(도 7)을 배지에 처리하여 생성되는 NO의 양을 비교하였다. 즉, 혈관내피세포는 젤라틴 코팅된 24공 평판배양기에서 2.5×104 cells/well의 밀도로 부착시킨 다음 성장배지에서 12시간 동안 배양하였다. 혈관내피세포는 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물과 홍삼 추출물을 처리한 군, 무처리군을 12시간 동안 전처리하였다. 내피세포는 37℃에서 FBS가 없는 M199 배지에 10μmol/L DAF-FM 다이아세테이트(diacetate; Molecular Probe, OR)로 30분 동안 처리하였다. 혈관내피세포는 FBS가 없는 M199 배지로 3번 씻어준 후, 평행판 플로우 챔버(parallel plate flow chamber)에 넣고 수은 램프(mercury lamp)로부터 분리된 빛으로 자극하였다. 자극(Excitation) 파장은 488nm이고, NO가 결합된 DAF는 515 nm에서 형광을 나타낸다. 사진은 공초점 레이저 현미경(Atto Bioscience, USA)으로 찍었고, 형광의 밝기는 이미지-프로 플러스 v4.5 소프트웨어(Media Cybernetics, San Diego, CA, USA)로 분석하여 무처리군 대비 형광의 강도로서 NO 생성 정도를 비교하였다.Endothelial nitric oxide synthase (eNOS) is present in human vascular endothelial cells, and its activity is increased to produce NO (nitric oxide) to expand blood vessels and promote blood circulation. After culturing human vascular endothelial cells, the amount of NO produced by treating ginseng fruit extract (FIG. 6) and general red ginseng extract (FIG. 7) in the medium was compared. In other words, vascular endothelial cells were attached at a density of 2.5 × 10 4 cells / well in a gelatin-coated 24-hole plate incubator and then incubated for 12 hours in a growth medium. The vascular endothelial cells were pretreated with the ginseng fruit extract and red ginseng extract of Example 1 and the untreated group for 12 hours. Endothelial cells were treated with 10 μmol / L DAF-FM diacetate (Molecular Probe, OR) for 30 minutes in M199 medium without FBS at 37 ° C. Vascular endothelial cells were washed three times with M199 medium without FBS, placed in a parallel plate flow chamber, and stimulated with light separated from a mercury lamp. The excitation wavelength is 488 nm, and the NO-bound DAF fluoresces at 515 nm. Photos were taken with a confocal laser microscope (Atto Bioscience, USA), and the brightness of the fluorescence was analyzed with Image-Pro Plus v4.5 software (Media Cybernetics, San Diego, CA, USA) to analyze NO as the intensity of fluorescence compared to the untreated group. The degree of production was compared.

도 6 및 도 7의 결과에서 볼 수 있듯이, 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물은 무처리군 대비 500~1300%의 NO 생성 정도를 나타내었고, 일반홍삼 추출물은 100~200%의 NO 생성 정도를 나타내었다(동일한 농도비교 50~100ug/ml). 따라서, 본 발명에 의한 실시예 1의 인삼 열매 추출물은 홍삼 추출물에 비하여 월등히 우수한 혈관내피세포에서의 NO 생성능을 나타내었다. 실시예 1의 인삼 열매 추출물의 위와 같은 뛰어난 NO(산화질소) 생성능은 결국 모세혈관을 확장시키고 혈액순환을 촉진시킴으로써 피부에 영양분을 원활하게 공급하고 피부 노화를 억제시키며, 피부의 혈색을 개선시킬 수 있는 효능에 기여하게 된다.As can be seen in the results of Figure 6 and Figure 7, the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention showed a degree of generation of 500 ~ 1300% compared to the untreated group, the general red ginseng extract is 100 ~ 200% NO The degree of formation was shown (same concentration 50 ~ 100ug / ml). Therefore, the ginseng fruit extract of Example 1 according to the present invention showed an excellent ability to produce NO in vascular endothelial cells as compared to the red ginseng extract. The excellent NO (nitrogen oxide) production ability of the ginseng fruit extract of Example 1, as shown above, may eventually expand capillaries and promote blood circulation, thereby smoothly supplying nutrients to skin, inhibiting skin aging, and improving skin coloration. Will contribute to the efficacy.

2) 인체 피부(얼굴)의 혈색 개선 효과 2) Color improvement effect on human skin (face)

본 발명의 인삼 열매 추출물을 함유하는 조성물에 대하여 피부에서의 혈액순환 촉진 효과를 평가하기 위하여, LDPI(Laser Doppler Perfusion Imager)를 이용하여 피부에서의 혈액순환 정도를 측정하였다. LDPI는 피부에서의 혈액순환을 측정하는 기기로 널리 알려져 있고 현재도 사용되고 있는 기기로서, 피부의 모세혈관에서 혈액의 속도 및 양뿐만 아니라 소동맥과 소정맥에서의 흐름까지 측정해 낼 수 있는 매우 민감한 기기이다.In order to evaluate the blood circulation promoting effect on the skin of the composition containing the ginseng fruit extract of the present invention, the degree of blood circulation in the skin was measured using a LDPI (Laser Doppler Perfusion Imager). LDPI is a well-known and still used device for measuring blood circulation in the skin. It is a very sensitive device that can measure not only the speed and amount of blood in the capillaries of the skin, but also the flow in the small arteries and veins. .

항온항습실에서 얼굴을 비누로 수세한 후 30분간 적응시키고, LDPI와 피부온도 측정기구인 IR(Infrad) 카메라를 이용하여 초기값을 측정하였다. 실험에 참여한 인원은 평소 손발이 차가운 여성 20명으로, LDPI로 이마 아래 부분의 초기 혈류량을 측정하였고, IR 카메라를 이용하여 이마, 눈밑 및 뺨의 피부 온도 초기값을 측정하였다. After washing the face with soap in a thermo-hygrostat room for 30 minutes, the initial values were measured using an IRPI (Infrad) camera, an LDPI and skin temperature measuring instrument. The participants were 20 women with cold hands and feet. LDPI was used to measure the initial blood flow in the lower part of the forehead, and the IR temperature was measured for the forehead, under eye and cheek skin.

실시예 2를 1주일 동안 피시험자들에게 사용하게 한 후 혈류량과 피부 온도를 초기 측정값과 비교하였으며, 그 결과를 하기 표 24 및 표 25에 나타내었다.After allowing Example 2 to be used by the subjects for one week, blood flow and skin temperature were compared with the initial measured values, and the results are shown in Tables 24 and 25 below.

사용 전후 LDPI 결과LDPI results before and after use 얼굴Face 사용전Before use 1주 사용후After 1 week 평균값medium 0.9520.952 1.1691.169

사용 전후 IR 결과IR results before and after use 이마forehead 눈밑Under the eyes cheek 사용 전Before use 32.2632.26 32.0232.02 30.4430.44 1주 사용 후After 1 week 33.8733.87 33.6933.69 33.5733.57

상기와 같이, 본 발명에 의한 인삼 열매 추출물을 함유한 실시예 2를 사용한 결과, 피시험자들의 얼굴에서 말초혈액순환 개선 효과로 인하여 혈색이 개선되는 것을 확인할 수 있었으며, 이는 궁극적으로 본 발명에 의한 인삼 열매 추출물을 함유하는 경우 피부의 영양분을 효과적으로 전달하고 피부 노화를 억제하며 지연시키는데 기여할 수 있음을 시사한다.As described above, as a result of using Example 2 containing the ginseng fruit extract according to the present invention, it was confirmed that the color is improved due to the peripheral blood circulation improvement effect on the face of the test subjects, which ultimately according to the present invention Containing fruit extract suggests that it can contribute to the effective delivery of skin nutrients, to inhibit and retard skin aging.

[제형예 1] 유연화장수(스킨로션)Formulation Example 1 Flexible Cosmetic (Skin Lotion)

배합성분Ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 정제수Purified water 잔량Remaining amount 인삼열매 추출물Ginseng Berry Extract 0.10.1 부틸렌글리콜Butylene glycol 2.02.0 프로필렌글리콜Propylene glycol 2.02.0 카르복시비닐폴리머Carboxy Vinyl Polymer 0.10.1 피이지-12 노닐페닐에테르Fiji-12 nonylphenyl ether 0.20.2 폴리솔베이트 80Polysorbate 80 0.40.4 에탄올ethanol 10.010.0 트리에탄올아민Triethanolamine 0.10.1 방부제, 색소, 향료Preservative, coloring, flavoring 적량Quantity

[제형예 2] 영양화장수(밀크로션)Formulation Example 2 Nutritious Longevity (Milk Lotion)

배합성분Ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 정제수Purified water 잔량Remaining amount 인삼열매 추출물 Ginseng Berry Extract 0.10.1 밀납Beeswax 4.04.0 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.51.5 솔비탄세스퀴올레이트Sorbitan sesquioleate 1.51.5 유동파라핀Liquid paraffin 0.50.5 Montana 202 (제조사:Seppic)Montana 202 (Manufacturer: Seppic) 5.05.0 글리세린glycerin 3.03.0 부틸렌글리콜Butylene glycol 3.03.0 프로필렌글리콜Propylene glycol 3.03.0 카르복시비닐폴리머Carboxy Vinyl Polymer 0.10.1 트리에탄올아민Triethanolamine 0.20.2 방부제, 색소, 향료Preservative, coloring, flavoring 적량Quantity

[제형예 3] 마사지크림Formulation Example 3 Massage Cream

배합성분Ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 정제수Purified water 잔량Remaining amount 인삼열매 추출물Ginseng Berry Extract 0.10.1 밀납Beeswax 10.010.0 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.51.5 피이지 60 경화피마자유Sebum 60 Cured Castor Oil 2.02.0 솔비탄세스퀴올레이트Sorbitan sesquioleate 0.80.8 유동파라핀Liquid paraffin 40.040.0 스쿠알란Squalane 5.05.0 Montana 202 (제조사:Seppic)Montana 202 (Manufacturer: Seppic) 4.04.0 글리세린glycerin 5.05.0 부틸렌글리콜Butylene glycol 3.03.0 프로필렌글리콜Propylene glycol 3.03.0 트리에탄올아민Triethanolamine 0.20.2 방부제, 색소, 향료Preservative, coloring, flavoring 적량Quantity

[제형예 4] 팩[Formulation Example 4] Pack

배합성분Ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 정제수Purified water 잔량Remaining amount 인삼열매 추출물Ginseng Berry Extract 0.10.1 폴리비닐알콜Polyvinyl alcohol 13.013.0 소듐카르복시메틸셀룰로오스Sodium Carboxymethyl Cellulose 0.20.2 글리세린glycerin 5.05.0 알란토인Allantoin 0.10.1 에탄올ethanol 6.06.0 핑이지-12 노닐페닐에테르Pingzi-12 nonylphenyl ether 0.30.3 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 0.30.3 방부제, 색소, 향료Preservative, coloring, flavoring 적량Quantity

도 1은 실시예 1의 인삼 열매 추출물과 비교예 1의 인삼 추출물의 진세노사이드 성분을 분석한 그래프이다.1 is a graph analyzing the ginsenoside components of the ginseng fruit extract of Example 1 and the ginseng extract of Comparative Example 1.

도 2는 시험물질의 활성산소 제거 활성을 보여주는 그래프이다.2 is a graph showing the active oxygen removal activity of the test substance.

도 3은 실시예 1의 인삼 열매 추출물의 콜라겐 생성량을 측정한 그래프이다.Figure 3 is a graph measuring the amount of collagen production of ginseng fruit extract of Example 1.

도 4는 실시예 1의 인삼 열매 추출물의 MMP-1 생합성 저해 효과를 측정한 그래프이다.Figure 4 is a graph measuring the inhibitory effect of MMP-1 biosynthesis of ginseng fruit extract of Example 1.

도 5는 실시예 1의 인삼 열매 추출물과 홍삼 추출물의 일산화질소 저해 효과를 비교한 그래프이다.Figure 5 is a graph comparing the nitrogen monoxide inhibitory effect of the ginseng fruit extract and red ginseng extract of Example 1.

도 6은 실시예 1의 인삼 열매 추출물에 의한 NO 생성량을 보여주는 그래프이다.Figure 6 is a graph showing the amount of NO produced by the ginseng fruit extract of Example 1.

도 7은 홍삼 추출물에 의한 NO 생성량을 보여주는 그래프이다.7 is a graph showing the amount of NO produced by red ginseng extract.

Claims (7)

삭제delete 삭제delete 인삼 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 피부 외용제 조성물.Skin external composition for improving skin wrinkles containing ginseng fruit extract as an active ingredient. 인삼 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 탄력 개선용 피부 외용제 조성물.Skin external preparation composition for improving skin elasticity containing ginseng fruit extract as an active ingredient. 제 3항 또는 제4항에 있어서, 상기 인삼 열매 추출물은 종자를 분리하여 제거한 인삼 열매의 과육과 과피를 일광건조 또는 열풍건조한 후 물 또는 에탄올로 추출하여 제조한 것임을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.The composition for external application for skin according to claim 3 or 4, wherein the ginseng fruit extract is prepared by extracting the flesh and skin of the ginseng fruit from which the seeds are separated and dried with water or ethanol after sun drying or hot air drying. 제 3항 또는 제4항에 있어서, 상기 피부 외용제 조성물은 화장료임을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.The external preparation composition for skin according to claim 3 or 4, wherein the external preparation composition for skin is cosmetic. 제 6항에 있어서, 상기 화장료는 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 바디로션, 바디크림, 바디오일 및 바디에센스로 이루어진 군으로부터 선택되는 제형을 가지는 것임을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.The method of claim 6, wherein the cosmetic cream, supple cosmetics, astringent cosmetics, nourishing cosmetics, nutrition cream, massage cream, essence, eye cream, eye essence, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, powder, body lotion, body cream Skin external composition, characterized in that it has a formulation selected from the group consisting of body oil and body essence.
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2859918A1 (en) 2013-10-11 2015-04-15 AMI Cosmetic Co., Ltd. Cosmetic composition containing fermented ginseng berry pleurotus ferulae product.
KR20160061682A (en) 2014-11-24 2016-06-01 주식회사 아미코스메틱 Cosmetic composition containing ginseng berry extracts and polygonum multiflorum extracts
KR101757790B1 (en) 2010-11-30 2017-07-17 (주)아모레퍼시픽 Composition of skin external application containing Panax ginseng var. Hwangsookjong extracts

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6524626B2 (en) * 1999-04-23 2003-02-25 E Excel International, Inc. Ginseng berry topical products
JP2005306806A (en) * 2004-04-23 2005-11-04 Nikko Chemical Co Ltd Promoter of collagen synthesis and cosmetic for antiaging

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6524626B2 (en) * 1999-04-23 2003-02-25 E Excel International, Inc. Ginseng berry topical products
US20030152544A1 (en) * 1999-04-23 2003-08-14 Jau-Fei Chen Ginseng berry topical applications
JP2005306806A (en) * 2004-04-23 2005-11-04 Nikko Chemical Co Ltd Promoter of collagen synthesis and cosmetic for antiaging

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Chen, Yanping ; Liu, Lei ; Zhang, Lei, 吉林大學學報. Journal of Jilin University. Medicine Edition. 醫學版 ,v.31 no.3 ,2005 ,pp.474-476*

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101757790B1 (en) 2010-11-30 2017-07-17 (주)아모레퍼시픽 Composition of skin external application containing Panax ginseng var. Hwangsookjong extracts
EP2859918A1 (en) 2013-10-11 2015-04-15 AMI Cosmetic Co., Ltd. Cosmetic composition containing fermented ginseng berry pleurotus ferulae product.
KR20160061682A (en) 2014-11-24 2016-06-01 주식회사 아미코스메틱 Cosmetic composition containing ginseng berry extracts and polygonum multiflorum extracts

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