KR20180065994A - External composition for skin containing germinated seeds of ginseng extract - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to a composition for skin external preparation, containing an extract of germinated ginseng seeds. More particularly, the present invention relates to the composition for skin external preparation, wherein the composition contains the extract of germinated ginseng seeds and thus has excellent effects in skin protection, anti-aging and anti-wrinkling, skin elasticity improvement, whitening, skin moisturizing, prevention and improvement of dry skin diseases such as atopic diseases and the like, sebum controlling, anti-inflammatory, prevention or alleviation of skin troubles such as acne and the like, skin complexion improvement, keratin removal, hair loss prevention, anti-dandruff, improvement of shine and softness of hair, improvement of shape and elasticity of the face or body, and improvement of lines of the face or body.

Description

발아 인삼씨 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물{External composition for skin containing germinated seeds of ginseng extract}[0001] The present invention relates to an external composition for skin containing ginseng seed extract,

본 발명은 발아 인삼씨 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 발아 인삼씨 추출물을 함유함으로써 피부의 전반적인 개선 효과가 탁월한 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for external application for skin containing ginseng ginseng seed extract, and more particularly to a composition for external application for skin which contains ginseng ginseng seed extract to excellently improve the skin's overall effect.

최근 여러 화학물질 등에 의한 피부의 부작용을 줄이면서도 보습, 미백, 항노화 효과 등에 있어서 상기의 문제를 해결하기 위하여 천연물을 사용한 화장품 등 피부 외용제 조성물이 많이 개발되고 있다. 이에 본 발명자들은 이제까지 널리 알려지지 않은 여러 천연물들에 있어서 피부의 전반적인 개선을 위한 피부 외용제로서의 응용 가능성을 연구하였다.In recent years, a composition for external application for skin such as cosmetics using natural products has been developed in order to solve the above problems in moisturizing, whitening, anti-aging effect and the like while reducing side effects of skin caused by various chemical substances and the like. Accordingly, the present inventors have studied the possibility of application as an external preparation for skin to improve overall skin in various natural products not yet widely known.

여러 천연물들 중 인삼(Panax ginseng C.A. Meyer)은 오가피과 인삼 속에 속하는 식물로, 한국, 중국, 일본 등지에서 2,000여년 전부터 질병을 예방하고 수명을 연장시킬 목적으로 생약으로 사용되어 왔다. 인삼의 지금까지 알려진 효능 및 효과는 중추신경계에 대한 작용, 항발암 작용과 항암활성, 면역기능 조절작용, 항당뇨 작용, 간기능 항진효능, 심혈관 장해개선 및 항동맥경화 작용, 혈압조절 작용, 갱년기 장애 개선 및 골다공증에 미치는 효과, 항스트레스 및 항피로작용, 항산화 활성 및 노화억제 효능 등이 알려져 있다. 인삼의 대표적 생리활성 성분인 진세노사이드(Ginsenoside)는 인삼의 지상 및 지하부에 고르게 분포되어 있으나, 인삼 근(뿌리), 인삼엽, 인삼열매 등 그 부위에 따라 진세노사이드 함량과 조성은 큰 차이가 있다. Ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) is a plant belonging to the genus Ganoderma and has been used as a herbal medicine in Korea, China and Japan for over 2,000 years to prevent disease and prolong its life. The known potency and effects of ginseng are as follows: action on the central nervous system, anti-cancer and anti-cancer activity, immune function regulation, anti-diabetic effect, liver function enhancement, cardiovascular disorder improvement and anti-arteriosclerosis effect, Antioxidant activity, antioxidant activity, and antioxidant activity of the present invention. Ginsenoside, which is a representative physiologically active ingredient of ginseng, is distributed evenly on the ground and underground of ginseng. However, ginsenoside content and composition vary greatly depending on the site such as ginseng roots, ginseng leaves, and ginseng fruit .

최근 천연 화장품에 대한 소비자의 관심이 증대되고 동시에 한방 소재를 활용하는 많은 화장품들이 출시되면서 인삼도 화장품의 중요한 피부효능을 가진 식물소재로 연구되고 있다. 그러나, 대부분 인삼근의 추출물 또는 인삼근의 진세노사이드 성분과 인삼 다당체를 활용한 연구만 수행되고 있는 실정이다. Recently, consumers' interest in natural cosmetics has been increasing, and at the same time, many cosmetics utilizing herbal materials have been released, and ginseng has been studied as a plant material having important skin effect of cosmetics. However, most studies using only ginseng root extract or ginsenoside components of ginseng roots and ginseng polysaccharides are performed.

국내공개특허 제 2009-0130801호Korean Patent Publication No. 2009-0130801

본 발명의 발명자들은 반복적이고 다양한 실험을 통해, 인삼씨 추출물이 피부에 대하여 안전하면서 충분한 보호 및 개선효과를 제공할 수 있음을 확인하고 연구를 거듭하던 중, 발아 인삼씨 추출물이 발아되지 않은 인삼씨 추출물을 사용할 경우보다 우수한 피부 보호 및 개선 효과를 보임을 발견하고 본 발명을 완성하였다. 또한, 아임계 추출법에 의해 추출된 발아 인삼씨 추출물의 피부 보호 및 개선 효과가 보다 탁월함을 발견하고 본 발명을 완성하였다.The inventors of the present invention have repeatedly and variously conducted experiments to confirm that the ginseng seed extract can provide a safe and sufficient protection and improvement effect to the skin. While researching, it has been found that the ginseng seed extract does not germinate The present invention has been accomplished based on the discovery that the extract has better skin protection and improvement effects. In addition, the present inventors have found that ginseng ginseng seed extract extracted by subcritical extraction method is more excellent in skin protection and improvement effect, and completed the present invention.

따라서, 본 발명의 목적은 발아 인삼씨 추출물을 유효성분을 함유함으로써 우수한 피부 보호 및 개선효과를 갖는 피부 외용제 조성물을 제공하는 것이다. 또한, 본 발명의 목적은 아임계 추출법으로 추출한 발아 인삼씨 추출물을 유효성분을 함유함으로써 피부의 보호 및 개선에 유용한 피부 외용제 조성물을 제공하는 것이다.Accordingly, it is an object of the present invention to provide a composition for external application for skin having an excellent skin protecting and improving effect by containing germinated ginseng seed extract as an active ingredient. It is another object of the present invention to provide a composition for external application for skin which is useful for protecting and improving skin by containing an effective ingredient of a germinated ginseng seed extract extracted by a subcritical extraction method.

상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 발아 인삼씨 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물을 제공한다. To achieve the above object, the present invention provides a composition for external application for skin containing germinated ginseng seed extract.

보다 상세하게는 본 발명에서 사용되는 발아 인삼씨 추출물은 인삼의 발아된 씨앗에서 추출되는 것이다. 발아 상태의 인삼씨는 발아 이전 상태와 비교하여 생명 현상에 필요한 효능 성분을 더욱 많이 포함하고 있어 보다 강한 효능을 제공할 수 있다.More specifically, the ginseng seed extract used in the present invention is extracted from germinated seeds of ginseng. Ginseng seeds germinated more than the germination state before the ginseng contains more essential ingredients needed for life phenomenon, can provide more powerful effects.

상기 발아 인삼씨는 인삼씨를 20℃~25℃ 온도의 깨끗한 물에 넣어 배양시킴으로써 발아시킬 수 있다. 이때, 인삼씨는 껍질에 흠집을 내어 발아시키는 것이 바람직하고, 물에 넣어준 후 인삼씨를 하루 1~2회 정도 물을 갈아주며 7~10일간 배양시키는 것이 바람직하다. 낮에는 자연채광이 드는 곳에 두는 것이 좋다. The germination ginseng seed can be germinated by culturing the ginseng seed in a clean water at a temperature of 20 ° C to 25 ° C. At this time, it is preferable that ginseng seeds are germinated by scratching their husks. It is preferable that ginseng seeds are put into water and then cultured for 7 to 10 days after watering once or twice a day. It is good to place in daylight where daylight is available.

본 발명에 사용된 발아 인삼씨 추출물을 제조하는 방법은 특별히 제한되지 않으며, 인삼씨로부터 침출, 전출하여 얻은 침출액, 또는 그 침출액을 다시 일부 또는 전부 농축하여 얻은 농축물, 또는 다시 그 농축물을 건조시켜 제조한 추출 엑기스 및 추출액 중에 함유되고 있는 주효과를 발휘하는 화학물질 그 자체를 포함한다. The method for producing germinated ginseng seeds used in the present invention is not particularly limited, and it is preferable to use a method of producing germinated ginseng seeds by extracting ginseng seeds, extracting the ginseng seeds from the ginseng seeds, or extracting the extracts, And the chemical substance itself exhibiting the main effect contained in the extract.

또한, 상기 발아 인삼씨 추출물은 아임계 추출법(Subcritical Water Extraction)으로 추출한 것이 바람직하다. 기존에 사용된 초임계 추출법에서 초임계 유체의 밀도는 액체와 유사하고, 점도와 확산계수는 기체와 유사하다. 따라서 초임계 유체를 추출용매로 사용하면 식물체의 미세기공으로 쉽게 침투하고, 적절한 분자밀도를 갖게 됨으로써 원하는 물질의 분자를 에워싸서 빠져 나오는 방식으로 원하는 물질의 추출물을 얻을 수 있다. 이때, 초임계 상태로 만들어서 추출용매로 사용할 수 있는 물질로서는 우선 무독성이어야 하고, 초임계 상태가 고온/고압이므로 폭발의 위험성이 없어야 하며, 추출용매로서 용해력이 우수해야 한다. 이러한 조건만 충족시키면 어떠한 물질도 초임계 유체로 만들어서 추출을 할 수 있다. In addition, the ginseng seed extract is preferably extracted with Subcritical Water Extraction. In conventional supercritical extraction methods, the density of supercritical fluids is similar to that of liquids, and viscosity and diffusion coefficients are similar to those of gases. Therefore, when a supercritical fluid is used as an extraction solvent, it can be easily penetrated into a micro-particle of a plant and has an appropriate molecular density, so that a desired substance extract can be obtained by surrounding molecules of a desired substance and coming out. At this time, as a substance which can be used as an extraction solvent by making it into a supercritical state, it should first be non-toxic, and since the supercritical state is high temperature / high pressure, there is no danger of explosion and excellent dissolving power should be used as an extraction solvent. Once these conditions are met, any substance can be made into a supercritical fluid for extraction.

반면, 본 발명에서 사용되는 아임계 기술은 용매가 임계점을 넘지 못한 상태에서 추출용매로 사용하는 것으로, 용매를 무엇으로 선택하는가에 따라서 초임계 추출과 같은 성능을 낼 수 있으며, 본 발명에서는 용매로서 물을 사용한다. 또한, 초임계 이산화탄소는 극성물질은 추출을 하지 못하므로 유기용매를 보조용매로 함께 사용하여야 하지만, 아임계 물은 추출성능이 더 뛰어나고 조업조건의 변화 범위가 커서 비극성물질 및 극성물질 모두 추출이 가능하다. 뿐만 아니라, 아임계 물로 추출을 하는 경우에는 가수분해 반응도 진행할 수 있다.On the other hand, the subcritical technology used in the present invention is used as an extraction solvent in a state in which the solvent does not exceed the critical point. Depending on what solvent is selected, the subcritical technology can achieve the same performance as supercritical extraction. Use water. Since supercritical carbon dioxide can not extract polar substances, organic solvents should be used together as an auxiliary solvent. However, supercritical carbon dioxide can extract both nonpolar and polar substances because of its superior extraction ability and range of operating conditions. Do. In addition, in the case of extraction with subcritical water, a hydrolysis reaction can also proceed.

이 추출법에 의하면 인삼씨 추출물을 고체나 반고체 시료에서 온도와 압력에 따른 물의 유전상수(dielectric constant, e)의 변화를 이용하여 단시간 내에 추출할 수 있다. 따라서, 인삼씨 추출물을 아임계 추출법에 의하여 추출함으로써 통상의 용매추출법에 의한 경우보다 추출 속도가 빠르고 물을 추출용매로서 사용하므로 잔류 유기용매 또는 중금속이 없어 인체 및 환경에 무해하다. 한편, 저온공정으로 진행되므로 추출물의 활성이 유지되며 열변성 물질의 추출도 가능하고, 공정자체가 추출물의 분리회수가 용이하여 조업비용이 절감될 뿐만 아니라 용매의 재순환도 가능하다. 그리고 온도와 압력과 같은 추출조건에 따라 유용물질을 선택적으로 얻을 수 있다는 장점이 있다.According to this extraction method, the extract of ginseng seed can be extracted in a short time using the change of dielectric constant (e) of water according to temperature and pressure in a solid or semi-solid sample. Therefore, extraction of ginseng seeds by subcritical extraction method is faster than extraction by conventional solvent extraction method, and since water is used as an extraction solvent, it is harmless to human body and environment because there is no residual organic solvent or heavy metal. On the other hand, since the process proceeds to the low-temperature process, the activity of the extract is maintained and the thermo-denatured substance can be extracted, and the process itself can easily separate and recover the extract, thereby reducing the operation cost and recycling the solvent. It is also advantageous to obtain a useful substance selectively according to extraction conditions such as temperature and pressure.

본 발명에서 사용되는 아임계 추출법에 의한 인삼씨 추출물은 구체적으로 다음과 같이 제조할 수 있다. 인삼씨를 준비한 후 아임계 추출장치를 이용해서 50~200MPa, 바람직하게는 100MPa의 압력에서 인삼씨를 분해하여 유효 성분을 추출한다. 50MPa 미만의 압력에서는 유효 성분들이 충분히 추출되지 않고, 200MPa 초과 압력에서는 압력 대비 유효 성분 추출 증가량이 미미하기 때문에 상기 범위의 압력에서 추출한다. 추출 후 1.2㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번, 0.45㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번, 0.2㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번 필터링하여 이물질 및 미생물을 제거하여 아임계 인삼씨 추출물을 준비할 수 있다.The ginseng seed extract according to the subcritical extraction method used in the present invention can be specifically prepared as follows. After preparing the ginseng seed, the ginseng seed is decomposed at a pressure of 50 to 200 MPa, preferably 100 MPa by using a subcritical extractor to extract the active ingredient. The effective components are not sufficiently extracted at a pressure of less than 50 MPa and the extraction of the effective component is less than the pressure at a pressure exceeding 200 MPa. After extraction, the filter is filtered once with a filter having a pore size of 1.2 mu m, once with a filter having a pore size of 0.45 mu m, and once with a filter having a pore size of 0.2 mu m to remove impurities and microorganisms.

본 발명의 조성물은 상기 인삼씨 추출물을 조성물 총 중량에 대하여 바람직하게는 1~50중량%의 양으로 함유할 수 있다. 이는 상기 유효성분의 함량이 1 중량% 미만이면 성분이 갖고 있는 피부 효능을 기대하기 어려우며, 50 중량%를 초과하면 더 이상 효능이 크게 증가하지 않아 그 원료 효율성이 떨어지기 때문이다.The composition of the present invention may contain the ginseng seed extract in an amount of preferably 1 to 50% by weight based on the total weight of the composition. If the content of the active ingredient is less than 1% by weight, it is difficult to expect the skin effect of the ingredient. If the content exceeds 50% by weight, the efficacy of the ingredient is not greatly increased.

본 발명의 조성물은 피부를 보호하거나 전반적으로 개선하기 위한 피부 외용제 조성물로서 사용될 수 있다. The composition of the present invention can be used as an external preparation for skin to protect or generally improve the skin.

보다 상세하게는, 본 발명에 따른 조성물은 피부 손상 억제 및 피부 보호용일 수 있다. 활성산소의 생성을 억제하고 활성산소에 의해 유발된 산화적 손상을 억제하는 효능이 있는 발아 인삼씨 추출물을 유효성분으로 함유함으로써, 활성산소 또는 자외선 등에 의한 피부 세포의 손상을 억제 또는 예방할 수 있고, 이를 통해 피부를 보호할 수 있다. 이때 상기 피부는 두피 또는 모발일 수 있다.More particularly, the composition according to the present invention may be for skin damaging and skin protection. It is possible to inhibit or prevent the damage of skin cells caused by active oxygen or ultraviolet rays by containing germinated ginseng seed extract having an effect of inhibiting the production of active oxygen and inhibiting oxidative damage caused by active oxygen, This can protect your skin. The skin may be scalp or hair.

또한, 본 발명에 따른 조성물은 활성산소 또는 자외선에 의한 피부 손상 억제하고 콜라겐 생성을 촉진하거나 매트릭스 메탈프로테이나아제(MMP-1)의 생합성을 저해함으로써, 피부의 노화 또는 주름을 예방 또는 개선시킬 수 있고, 피부의 탄력을 개선시킬 수 있다. In addition, the composition according to the present invention can prevent or ameliorate skin aging or wrinkles by inhibiting skin damage caused by active oxygen or ultraviolet rays, promoting collagen production or inhibiting biosynthesis of matrix metalloproteinase (MMP-1) And the elasticity of the skin can be improved.

본 발명에 따른 조성물은 티로시나제 활성을 저해하고 멜라닌의 생성을 억제시키거나, 피부에 침착된 색소를 미백화시킴으로써 피부 미백용으로 사용될 수 있다.The composition according to the present invention can be used for skin whitening by inhibiting tyrosinase activity and inhibiting the production of melanin or by whitening the pigment deposited on the skin.

본 발명에 따른 조성물은 각질형성세포의 분화를 촉진함으로써 오래된 각질세포의 탈락과 새로운 각질세포의 생성 과정인 표피 세포의 분화 또는 각화(keratinization)과정을 도와, 각질을 효과적으로 제거할 수 있으므로 각질 제거용으로 사용될 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 조성물은 각질층의 생성-탈락속도(turnover rate)를 정상 범위로 유지함으로써 각질층의 보습인자와 지질의 양을 정상적으로 유지할 수 있도록 하고 트랜스 글루타미네이즈 발현을 촉진할 수 있다. 이로써, 각질형성세포의 분화를 촉진하고 피부 수분을 유지함으로써 피부 보습 및 피부 장벽 기능을 강화시켜 아토피나 건선과 같은 피부 건조 질환을 예방 또는 치료할 수 있다. The composition according to the present invention promotes the differentiation of keratinocytes, thereby facilitating the elimination of keratinocytes and the differentiation or keratinization of epidermal cells, which is a process of producing new keratinocytes, thereby effectively removing keratin. Therefore, . In addition, the composition according to the present invention can keep the amount of moisturizing factor and lipid in the stratum corneum normally and maintain the transglutaminase expression by maintaining the turnover rate of the stratum corneum in the normal range. This promotes the differentiation of keratinocytes and maintains skin moisture, thereby enhancing skin moisturizing and skin barrier function, thereby preventing or treating skin dryness diseases such as atopy and psoriasis.

또한, 본 발명에 따른 조성물은 피부에 적용 시 과잉으로 분비되는 피지를 억제하고, 활성 산소 제거와 콜라겐 합성을 촉진하여 모공을 축소시키며, 염증 인자의 발현 감소로 피부 트러블 증상을 억제하는 효과를 통하여 모공 축소, 피지 조절 및 피부 트러블 증상 개선용 피부 외용제 조성물로서 사용될 수 있고, 나아가 피지의 과다 분비에 의한 여드름, 모공확대, 지루성 피부염 등을 예방 또는 개선시킬 수 있다.In addition, the composition according to the present invention suppresses excess sebum secreted when applied to the skin, reduces active oxygen and promotes collagen synthesis to reduce pores, and suppresses skin troubles by reducing the expression of inflammatory factors It can be used as a composition for external application for skin for reducing pores, controlling sebum and improving the symptoms of skin troubles, and further preventing or improving acne, enlargement of pores and seborrheic dermatitis due to excessive secretion of sebum.

한편, 본 발명에 따른 조성물은 사이클로옥시게나제-2(COX-2)의 생합성을 억제함으로써 염증을 예방 또는 개선시킬 수 있고, 이를 통해 여드름을 포함하는 피부 트러블 증상을 완화시킬 수 있다. 또한, 우수한 항산화력으로 인해 피부 자극의 생성을 방어할 수 있다. 여기서 피부는 두피를 포함한다.Meanwhile, the composition according to the present invention can prevent or ameliorate inflammation by inhibiting biosynthesis of cyclooxygenase-2 (COX-2), thereby alleviating skin troubles including acne. In addition, excellent antioxidant power can prevent the generation of skin irritation. Here the skin contains the scalp.

한편, 본 발명에 따른 조성물은 두피 또는 모발을 포함하는 피부의 혈색 개선용일 수 있으며, 탈모 예방용, 항 비듬용 또는 모발의 광택 또는 부드러움 증진용으로 사용될 수 있다.Meanwhile, the composition according to the present invention may be used for improving the color of skin including the scalp or hair, and may be used for preventing hair loss, for anti-dandruff or for improving the gloss or softness of hair.

나아가, 본 발명에 따른 조성물은 지방세포의 분화를 촉진함으로써 얼굴과 바디의 볼륨 및 탄력을 증진시킬 수 있다. 얼굴과 바디 중 볼륨과 탄력의 증진이 요구되는 부위에 본 발명에 따른 피부 외용제 조성물을 도포하면, 볼륨과 탄력이 증진되며, 볼륨과 탄력의 증진이 요구되는 부위는 노화로 인해 함몰된 부위일 수 있다. 예컨대, 노화로 인해 함몰된 볼살 등을 들 수 있으며, 함몰된 볼에 본 발명에 따른 조성물을 도포하면 지방세포 분화를 촉진함으로써 볼륨이 증진될 수 있다. 볼륨과 탄력의 증진이 요구되는 부의의 다른 예로는 가슴과 엉덩이 부위를 들 수 있고, 가슴과 둔부에 본 발명에 따른 조성물을 도포하면 가슴과 둔부가 탄력있고 풍만해 지는 효과가 있다.Furthermore, the composition according to the present invention can promote the differentiation of adipocytes, thereby improving the volume and elasticity of the face and the body. When the composition for external application for skin according to the present invention is applied to areas where the volume and the elasticity of the face and the body are required to be improved, volume and elasticity are enhanced. The area where volume and elasticity are required to be increased is the area that is depressed due to aging have. For example, when the composition according to the present invention is applied to a depressed ball, the volume may be enhanced by promoting differentiation of adipocytes. Another example of a negative that requires the improvement of volume and elasticity is the chest and the buttocks. When the composition according to the present invention is applied to the chest and the buttocks, the chest and buttocks are resilient and bulky.

또한, 본 발명에 따른 조성물은 유효성분으로 함유된 발아 인삼 씨 추출물이 지방세포의 분화를 촉진함으로써 얼굴과 바디의 볼륨 및 탄력을 증진시키고, 콜라겐의 생합성을 촉진하고 콜라겐의 분해를 억제함으로써 노화 등의 원인으로 인해 손상된 얼굴과 바디의 라인을 개선시킬 수 있다.In addition, the composition according to the present invention promotes the differentiation of adipocytes by enhancing the volume and elasticity of the face and body, promoting the biosynthesis of collagen and inhibiting collagen degradation, Can improve the damaged face and line of the body.

본 발명의 조성물은 발아 인삼씨 추출물 또는 아임계 추출법으로 추출한 발아 인삼씨 추출물을 함유함으로써 일반 인삼씨 추출물을 함유하는 조성물보다 우수한 피부 보호 및 개선 효과를 제공한다. The composition of the present invention contains ginseng ginseng seed extract or germination ginseng seed extract extracted by subcritical extraction method, thereby providing skin protection and improvement effect superior to compositions containing common ginseng seed extract.

나아가, 본 발명의 조성물은 피부 보호 효과뿐만 아니라, 항노화, 항주름, 피부 탄력 개선, 미백, 피부 보습, 아토피 등의 피부 건조 질환의 예방 및 개선, 피지 조절, 항염증, 여드름 등의 피부 트러블 증상 예방 또는 개선, 각질 제거, 피부 혈색 개선, 탈모 예방, 항비듬, 모발의 광택 및 부드러움 개선, 얼굴 또는 바디의 볼륨 및 탄력 증진, 얼굴 또는 바디의 라인 개선 효과에 있어서도 우수한 효과를 제공할 수 있다.Furthermore, the composition of the present invention can be used not only for protecting skin but also for preventing and improving skin dryness diseases such as anti-aging, anti wrinkle, skin elasticity improvement, whitening, skin moisturizing and atopy, sebum control, anti- It is possible to provide an excellent effect in preventing or improving symptoms, exfoliation, improvement in skin color, prevention of hair loss, anti dandruff, improvement of gloss and softness of hair, volume and elasticity enhancement of face or body, .

따라서, 본 발명의 조성물은 이를 통해 화장품 또는 의약 분야에서 다양하게 활용 가능하다.Accordingly, the composition of the present invention can be used in various fields in the field of cosmetics or medicine.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물과 비교예의 수분함량 증가율을 나타낸 도이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물과 비교예의 TEWL(경표피 수분 손실) 측정 결과를 나타낸 도이다.
BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIG. 1 is a graph showing the moisture content increase rate of a composition according to an embodiment of the present invention and a comparative example. FIG.
FIG. 2 is a graph showing the TEWL (water hardness loss) measurement results of a composition according to an embodiment of the present invention and a comparative example.

이하, 본 발명을 하기의 실시예를 통하여 설명한다. 실시예는 본 발명을 보다 상세히 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 하기의 실시예의 범위로 제한되는 것은 아니다. Hereinafter, the present invention will be described with reference to the following examples. The examples are intended to further illustrate the present invention and are not intended to limit the scope of the present invention.

또한, 이 기술분야의 통상의 지식을 가진 자이면 누구나 이 발명의 기술 사상의 범주를 이탈하지 않고 첨부한 특허청구범위 내에서 다양한 변형 및 모방이 가능함은 명백한 사실이다.It will be apparent to those skilled in the art that various modifications and variations can be made in the present invention without departing from the scope of the invention.

[실시예 1] 발아 인삼씨 추출물[Example 1] Ginseng ginseng seed extract

발아 상태의 인삼씨를 정제수 70%, 알코올 30% 용매에 넣고 25℃에서 6시간 방치하여 활성 성분들을 추출한다. 추출 후에 3㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번, 1㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번 필터링을 하여 이물질을 제거하고, 마지막으로 제균 필터로 미생물을 제거하여 발아 인삼씨 추출물을 얻는다.Ginseng seeds germinated in 70% pure water and 30% alcohol are left at 25 ℃ for 6 hours to extract the active ingredients. After the extraction, the filter is filtered once with a filter having a diameter of 3 μm and once with a filter having a filter having a diameter of 1 μm to remove foreign matter. Finally, microorganisms are removed with a filter to obtain germination ginseng seed extract.

[실시예 2] 발아 아임계 인삼씨 추출물[Example 2] Gout subcritical ginseng seed extract

발아 상태의 인삼씨를 아임계 추출장치를 이용, 40℃에서 20MPa로 4시간 동안 유효 성분을 추출한다. 추출 후 1.2㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번, 0.45㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번, 0.2㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번 필터링하여 이물질 및 미생물을 제거하여 발아 아임계 인삼씨 추출물을 얻는다.Ginseng seeds germinated are extracted with active ingredient for 4 hours at 40 ° C and 20 MPa using a subcritical extraction device. After extraction, the filter is filtered once with a filter having a 1.2 μm gap, once with a filter having a 0.45 μm gap and once with a filter having a 0.2 μm gap to remove germs and microorganisms to obtain germination ginseng seed extract.

[비교예] 일반 인삼씨 추출물 [Comparative Example] The ginseng seed extract

발아 상태가 아닌 인삼씨를 정제수 70%, 알코올 30% 용매에 넣고 25℃에서 6시간 방치하여 활성 성분들을 추출한다. 추출 후에 3㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번, 1㎛ 공극을 갖는 필터에서 1번 필터링을 하여 이물질을 제거하고, 마지막으로 제균 필터로 미생물을 제거하여 일반 인삼씨 추출물을 얻는다.Ginseng seeds that are not germinated are put into 70% purified water and 30% alcohol and left at 25 ℃ for 6 hours to extract active ingredients. After the extraction, the filter is filtered once with a filter having a diameter of 3 μm and once with a filter having a filter having a diameter of 1 μm to remove foreign matter. Finally, microorganisms are removed with a filter to obtain a general ginseng seed extract.

[시험예 1] 활성산소 생성 억제 실험[Test Example 1] Inhibition of active oxygen production

자외선(UV) 조사에 의하여 세포에서 발생하는 활성산소(ROS; Reactive oxygen species)를 제거하는 능력을 비교하는 실험을 통하여 항산화 효과를 조사하였다. 양성대조군으로서 일반적으로 항산화 효과를 비교하는데 사용하는 트롤록스(trolox)(Aldrich Co.)를 사용하였다. 또한 시험물질을 처리하지 않은 군을 대조군으로 사용하였다. 인간 HaCaT 각질형성세포 단층 배양 시스템(human HaCaT keratinocytes monolayer culture system:PBoukamp, German Cancer Research Center, Heidelberg. German)에 자외선(UVB 30mJ/cm2)을 처리한 후 실시예1에 따라 제조된 발아 인삼씨 추출물과 실시예 2의 발아 아임계 인삼씨 추출물, 비교예의 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물을 하기 표1과 같이 각각 처리하였다. 그런 다음, ROS의 양을 DCFH-DA(2', 7'-dichlorodihydro-fluorescein diacetate, Molecular Probes, Inc)를 형광플레이트리더로 측정하였다. 자외선을 처리한 대조군에 대한 비율로 ROS 생성 억제 비율을 계산하여 그 결과를 표 1에 나타내었다.Antioxidant effect was investigated by comparing the ability to remove reactive oxygen species (ROS) from cells by ultraviolet (UV) irradiation. As a positive control, trolox (Aldrich Co.), which is generally used to compare antioxidative effects, was used. In addition, the test group was not used as a control group. (UVB 30 mJ / cm 2 ) was applied to a human HaCaT keratinocyte monolayer culture system (PBoukamp, German Cancer Research Center, Heidelberg. German), and then the germinated ginseng seed Ginseng seed extract of Example 2 and non-germinated ginseng seed extract of Comparative Example were treated as shown in Table 1, respectively. Then, the amount of ROS was measured with a fluorescent plate reader using DCFH-DA (2 ', 7'-dichlorodihydro-fluorescein diacetate, Molecular Probes, Inc.). The inhibition ratio of ROS formation was calculated as a ratio to the control group treated with ultraviolet light, and the results are shown in Table 1.

시험물질 ROS 생성 억제 비율(%)Test substance ROS generation inhibition rate (%) 시험물질Test substance ROS 생성 억제 비율(%)ROS generation inhibition rate (%) 대조군Control group 00 트롤록스 0.1 mMTrolox 0.1 mM 42.742.7 실시예 1(10ppm)Example 1 (10 ppm) 33.233.2 실시예 1(1ppm)Example 1 (1 ppm) 17.517.5 실시예 2(10ppm)Example 2 (10 ppm) 39.839.8 실시예 2(1ppm)Example 2 (1 ppm) 21.321.3 비교예(10ppm)Comparative Example (10 ppm) 19.919.9 비교예(1ppm)Comparative Example (1 ppm) 11.211.2

상기 실시예 1에 따라 제조된 발아 인삼씨 추출물과 실시예 2의 발아 아임계 인삼씨 추출물은 인간 HaCaT 각질형성세포 단층 배양 시스템(human HaCaT keratinocytes monolayer culture system)에서 대조군에 비하여 UV에 의해 생성된 활성산소를 유의적으로 소거하는 효과를 나타낸다. 이는 항산화 물질의 활성지표로 사용되는 트롤록스와 유사한 정도의 우수한 활성이다. 그러나 비교예의 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물은 본 발명의 발아된 인삼씨 추출물보다 낮은 활성산소 소거효과를 보인다. 즉, 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 발아 인삼씨 추출물과 실시예 2의 발아 아임계 인삼씨 추출물은 일반 피부 손상의 원인이 되는 활성 산소를 보다 효과적으로 소거함으로써 두피와 모발을 포함하는 피부를 보호하고 더 나아가 주름 생성, 탄력 저하 및 색소 침착 등을 예방하는 효과를 가질 수 있음을 확인할 수 있다.The germinated ginseng seed extract prepared according to Example 1 and the germination germination seed extract of Example 2 were compared with the control group in the human HaCaT keratinocytes monolayer culture system in the human HaCaT keratinocytes monolayer culture system, It shows an effect of significantly erasing oxygen. This is an excellent activity similar to that of trolox used as an activity index of antioxidants. However, the non-germinated general ginseng seed extract of Comparative Example shows a less active oxygen scavenging effect than the germinated ginseng seed extract of the present invention. That is, the germinated ginseng seed extract prepared according to Example 1 of the present invention and the germination ginseng seed extract of Example 2 are more effective in eradicating active oxygen which is a cause of general skin damage, so that the skin including scalp and hair It is possible to confirm that it has an effect of preventing wrinkle formation, lowering of elasticity and pigmentation, and the like.

[시험예 2] 단 세포 겔 전기영동(Single cell gel electrophoresis; SCGE, Comet assay)에 의한 DNA 산화적 손상에 대한 억제 활성[Test Example 2] Inhibitory activity against DNA oxidative damage by single cell gel electrophoresis (SCGE, Comet assay)

사람의 정상 섬유아세포(자체 일차 배양)를 24시간 배양한 후 실시예 1에 따라 제조된 발아 인삼씨 추출물과 실시예 2의 발아 아임계 인삼씨 추출물, 비교예의 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물과 양성대조군인 비타민 E를 각각 농도별로 처리하고 12시간 후에 H2O2(최종농도 10-3M)를 처리한 다음 전기영동법으로 염색한 결과를 형광현미경으로 관찰하였다. 이때 이미지 아날라이저(image analyzer)인 KOMET 3.1(Kinetic Imaging, England)를 사용하여 25개의 각 세포에서 DNA 절단의 결과로 나타난 테일(tail)의 길이(um)를 분석하였으며, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.After culturing human normal fibroblasts (their primary cultures) for 24 hours, germinated ginseng seed extract prepared according to Example 1, germination ginseng seed extract of Example 2, non-germinated ginseng seed extract of Comparative Example and positive The control group, vitamin E, was treated at each concentration, treated with H 2 O 2 (final concentration 10-3M) after 12 hours, and stained with electrophoresis, and observed with a fluorescence microscope. At this time, the length (um) of the tail, which is the result of DNA cleavage in each of 25 cells, was analyzed using an image analyzer, KOMET 3.1 (Kinetic Imaging, England) Respectively.

시험물질 테일 길이(㎛) 저해율(%)Test material tail length (탆) Inhibition rate (%) 시험물질Test substance 테일길이(㎛)Tail length (탆) 저해율(%)Inhibition rate (%) 대조군Control group 121.1121.1 0.00.0 비타민 E(10ppm)Vitamin E (10ppm) 68.968.9 43.1043.10 실시예 1(10ppm)Example 1 (10 ppm) 73.373.3 39.4739.47 실시예 1(1ppm)Example 1 (1 ppm) 91.291.2 24.6924.69 실시예 2(10ppm)Example 2 (10 ppm) 71.171.1 41.2941.29 실시예 2(1ppm)Example 2 (1 ppm) 88.488.4 27.0027.00 비교예(10ppm)Comparative Example (10 ppm) 95.295.2 21.3921.39 비교예(1ppm)Comparative Example (1 ppm) 103.1103.1 14.8614.86

상기 표 2의 결과에서, 세포 겔 전기영동에 의한 실시예 1에 따라 제조된 발아 인삼씨 추출물과 실시예 2의 발아 아임계 인삼씨 추출물은 비교예의 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물보다 우수한 산화적 DNA 손상 억제 활성을 나타냈으며, 이는 양성 대조군인 비타민 E와 유사한 효과이다. 따라서, 이로 인해 본 발명에 의한 인삼씨 추출물이 히드록실 라디칼(.OH)에 의한 DNA 싱글 스트랜드 브레이크(single strand break)를 억제하는 DNA 산화적 손상억제제로서 작용함을 확인할 수 있다. 이는 두피 또는 모발을 포함하는 피부의 세포의 유전자를 보호하는 중요한 방어 효과이다.In the results of Table 2, the germinated ginseng seed extract prepared according to Example 1 by cell gel electrophoresis and the germination ginseng seed extract of Example 2 were superior to the non-germinated ginseng seed extract of Comparative Example in oxidative DNA Inhibitory activity, similar to vitamin E, a positive control. Therefore, it can be confirmed that the ginseng seed extract according to the present invention acts as a DNA oxidative damage inhibitor which inhibits DNA single strand break by hydroxyl radical (.OH). This is an important protective effect for protecting the genes of cells of the skin including the scalp or hair.

[시험예 3] 프로콜라겐 생성 촉진 효능 실험[Experimental Example 3] Effect of promoting the production of procollagen

상기 실시예 1에 따라 제조된 발아 인삼씨 추출물과 실시예 2의 발아 아임계 인삼씨 추출물의 프로콜라겐 생성능을 양성대조군인 비타민 C, 비교예의 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물과 비교하여 측정하였다. 프로콜라겐은 콜라겐 생성 유도 물질로 콜라겐 생성과 노화 방지에 필요한 물질이며, 비타민 C는 콜라겐의 합성에 필수성분으로 알려져 있다. The procoagulant activity of the germinated ginseng seed extract prepared in Example 1 and the germination ginseng seed extract of Example 2 was compared with that of the non-germinated ginseng seed extract of vitamin C, which is a positive control, and the ginseng seed extract of Comparative Example. Pro-collagen is a collagen-inducing substance that is necessary for collagen production and anti-aging. Vitamin C is known to be an essential ingredient in the synthesis of collagen.

시험은 2.5%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Media) 배지가 들어 있는 96공 평판배양기(96-well microtiter plate)에 인간의 섬유아세포를 5,000 세포/공(well)이 되도록 넣고, 90% 정도 자랄 때까지 배양하였다. 그 후 무혈청 DMEM 배지에서 24시간 배양한 다음, 무혈청 DMEM 배지에 녹여진 상기 실시예 1 및 2, 비교예 및 비타민 C 각각을 10-4 몰농도로 24시간 동안 처리한 후, 세포배양액을 채취한다. 24시간 후에 배지 중에 유리된 프로콜라겐의 양을 프로콜라겐 타입-1 C-펩타이드 EIA 키트(procollagen type-1 C-peptide EIA kit)(MK101, Takara, Japan)를 사용하여 측정하였다. The test was carried out by placing human fibroblasts at 5,000 cells / well in a 96-well microtiter plate containing 2.5% fetal bovine serum-containing DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Media) And cultured until it grew to about 90%. Thereafter, the cells were cultured in a serum-free DMEM medium for 24 hours, treated with 10 -4 molar concentrations of each of the above Examples 1 and 2, Comparative Example and vitamin C dissolved in a serum-free DMEM medium for 24 hours, Collecting. After 24 hours, the amount of procollagen liberated in the medium was measured using a procollagen type-1 C-peptide EIA kit (MK101, Takara, Japan).

비처리군에서의 프로콜라겐 생성 정도를 100으로 하고, 이에 대비하여 시험물질을 처리한 군에서의 프로콜라겐 생성 정도를 구하였으며, 그 결과는 하기 표 3에 나타내었다. The degree of procollagen production in the untreated group was taken as 100 and the degree of procollagen production in the group treated with the test substance was determined. The results are shown in Table 3 below.

시험물질Test substance 프로콜라겐 생성 정도(%)Procollagen production (%) 비처리군Untreated group 100100 비타민 CVitamin C 120120 실시예 1Example 1 117117 실시예 2Example 2 119119 비교예Comparative Example 104104

프로콜라겐의 생성 정도가 높을수록 콜라겐의 생성 정도가 높아지며, 따라서 피부 주름의 생성을 방지할 수 있다. 상기 표 3에서 보면, 실시예 1에 따라 제조된 발아 인삼씨 추출물과 실시예 2의 발아 아임계 인삼씨 추출물은 시험관내(in vitro)에서 콜라겐의 합성에 필수적인 성분으로 알려져 있는 비타민 C와 프로콜라겐의 생성 촉진 정도가 유사하나, 비교예의 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물은 실시예 1 및 2에 비하여 프로콜라겐 생성 촉진 정도가 낮은 것을 확인할 수 있다. 따라서, 본 발명에 따른 실시예 1 및 2는 프로콜라겐 생성을 효과적으로 촉진시키므로써 피부 내 콜라겐의 생성을 도와 주름개선 효과뿐만 아니라 항노화 효과도 뛰어남을 알 수 있다.The higher the degree of production of procollagen, the higher the degree of production of collagen, and thus the generation of skin wrinkles can be prevented. Table 3 shows that the germinated ginseng seed extract prepared according to Example 1 and the germination ginseng seed extract of Example 2 are in vitro synthesized from vitamin C and procollagen which are known to be essential components for collagen synthesis But the non-germinated ginseng seed extract of Comparative Example had a lower degree of promotion of pro-collagen production than those of Examples 1 and 2. Thus, it can be seen that Examples 1 and 2 according to the present invention effectively promote collagen production, thereby contributing to the production of collagen in the skin, as well as an anti-wrinkle effect as well as an anti-aging effect.

[시험예 4] 미백 효과 시험(쥐의 색소세포를 이용한 멜라닌 생성 억제효과 측정)[Test Example 4] Whitening effect test (measurement of inhibitory effect on melanin formation using mouse pigment cells)

상기 실시예 1에 따라 제조된 발아 인삼씨 추출물과 실시예 2의 발아 아임계 인삼씨 추출물의 멜라닌 생성 억제능을 비교예의 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물 및 양성 대조군인 하이드로퀴논과 비교하여 측정하였다.The ginseng seed extract prepared in Example 1 and the germination ginseng seed extract of Example 2 were measured for their ability to inhibit melanogenesis by comparing the ginseng seed extract of the Comparative Example and the hydroquinone as a positive control.

C57BL/6 마우스 유래의 쥐의 색소세포(Mel-Ab cell)(Dooley, T.P. et al, Skin pharmacol, 7, pp 188-200)를 DMEM에 10% 우태반 혈청, 100nM 12-O-테트라데카노일포르볼(tetradecanoylphorbol)-13-아세테이트, 1nM 콜레라 독소(cholera toxin)를 첨가한 배지에서 37℃, 5% CO2의 조건에서 배양하였다. 배양된 Mel-Ab 세포를 0.25% 트립신-EDTA로 떼어내고, 24-웰 플레이트에 105 세포/웰(cells/well)의 농도로 세포를 배양한 다음, 이틀째부터 3일 연속으로 각 시험물질을 가하여 배양하였다. 시험물질로는 하이드로퀴논과 상기 실시예 1 및 2, 비교예를 각각 10ppm의 농도로 하여 사용하였다. 이때, 상기 하이드로퀴논은 양성대조군으로 사용하였다. 그 다음 배양액을 제거하고, PBS로 세척한 후, 1N 수산화나트륨으로 세포를 녹여 400nm에서 흡광도를 측정한 다음, 하기 수학식 1에 따라 멜라닌 생성 억제율을 계산하여 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다(Dooley의 방법).The cells were cultured in DMEM supplemented with 10% fetal bovine serum, 100 nM 12-O-tetradecanoyl (10 μM) Acetate, and 1 nM cholera toxin at 37 ° C in the presence of 5% CO 2 . The cultured Mel-Ab cells were detached with 0.25% trypsin-EDTA, and the cells were cultured at a concentration of 10 5 cells / well (cells / well) in a 24-well plate. And cultured. As test materials, hydroquinone was used at a concentration of 10 ppm in each of Examples 1 and 2 and Comparative Examples. At this time, the hydroquinone was used as a positive control. Then, the culture solution was removed, washed with PBS, and the cells were dissolved with 1 N sodium hydroxide, and the absorbance at 400 nm was measured. The rate of inhibition of melanin formation was calculated according to the following formula (1) Dooley's method).

Figure pat00001
Figure pat00001

시험물질Test substance 멜라닌 생성 억제율 (%)Melanin production inhibition rate (%) 비처리군Untreated group 100100 하이드로퀴논(양성 대조군)Hydroquinone (positive control) 41.141.1 실시예 1Example 1 36.136.1 실시예 2Example 2 38.738.7 비교예Comparative Example 18.318.3

상기 표 4에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 발아 인삼씨 추출물과 실시예 2의 발아 아임계 인삼씨 추출물은 공지된 미백 물질인 하이드로퀴논과 유사한 정도의 멜라닌 생성 억제율을 보이는 것을 확인할 수 있다. 그리고 비교예의 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물보다 우수한 맬라닌 생성 억제율을 보임을 알 수 있다. 따라서, 본 발명의 조성물은 피부 내 멜라닌 생성을 효과적으로 억제함으로써 미백 효과가 뛰어남을 알 수 있다.As shown in Table 4, the germinated ginseng seed extract prepared according to Example 1 of the present invention and the germination ginseng seed extract of Example 2 exhibited a degree of inhibition of melanin formation similar to that of hydroquinone, which is a known whitening substance, . And the inhibition rate of malalanin production is superior to that of the non-germinated ginseng seed extract of the comparative example. Thus, it can be seen that the composition of the present invention is excellent in whitening effect by effectively inhibiting the production of melanin in the skin.

[시험예 5] 피부 보습 시험(인간 각질 형성 세포의 분화 유도 시험)[Test Example 5] Skin moisturizing test (Differentiation induction test of human keratinocytes)

상기 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 발아 인삼씨 추출물과 실시예 2의 발아 아임계 인삼씨 추출물의 피부장벽기능 및 피부 보습능을 확인하기 위하여 흡광도를 이용한 시험을 실시하였다.The ginseng seed extract prepared according to Example 1 of the present invention and the germination ginseng seed extract of Example 2 were tested for their skin barrier function and skin moisturizing ability using absorbance.

먼저, 일차 배양한 인간의 각질형성세포를 배양용 플라스크에 넣어 바닥에 부착시킨 후, 실시예 1 및 2, 비교예를 하기 표 5와 같이 조성된 배양액에 첨가하여, 세포가 바닥 면적의 70~80% 정도 자랄 때까지 5일간 배양하였다. 이 세포를 수확(cell harvest)하여 PBS(phosphate buffered saline)로 세척한 뒤, 2% SDS(Sodium Dodecyl Sulfate)와 20mM 농도의 DTT(Dithiothreitol)를 함유한 10mM 농도의 트리스-염산 완충액(Tris-HCl, pH 7.4) 1㎖를 가하여 3분간 소니케이션(sonication)을 수행하고 난 후, 10분간 끓였다. 이를 1200rpm으로 30분간 원심 분리를 하여 분리한 침전물을 다시 PBS 1㎖에 현탁시켜 340nm에서의 흡광도를 측정하였다. First, human keratinocytes cultured in primary culture were placed in a culture flask and adhered to the bottom. Then, the cells of Examples 1 and 2 and Comparative Examples were added to the culture solution prepared as shown in Table 5 below, The cells were cultured for 5 days until they grew to about 80%. The cells were harvested and washed with PBS (phosphate buffered saline). The cells were washed with 10 mM Tris-HCl buffer (Tris-HCl buffer, pH 7.4) containing 2% SDS (sodium dodecyl sulfate) and 20 mM DTT (Dithiothreitol) , pH 7.4), sonication was performed for 3 minutes, and the mixture was boiled for 10 minutes. This was centrifuged at 1200 rpm for 30 minutes, and the separated precipitate was suspended in 1 ml of PBS and the absorbance at 340 nm was measured.

이와 별도로 상기 소니케이션 후의 용액 일부를 취하여 단백질 함량을 측정하여, 세포 분화 정도의 평가시 기준으로 삼았다. 저칼슘(0.03mM) 처리군과 고칼슘(1.2mM) 처리군을 각각 음성/양성 대조군으로 하고, 저칼슘 농도에 시험물질을 첨가하여 실시한 시험 결과를 하기 표 5에 나타내었다.Separately, a part of the solution after the sonication was taken to measure the protein content, and was used as a standard for evaluation of the degree of cell differentiation. The test results are shown in Table 5 below, in which low calcium (0.03 mM) and high calcium (1.2 mM) treatment groups were used as negative / positive control groups and low calcium concentration test substances were added.

시험물질Test substance 사용농도Concentration used 각질형성세포에서의 분화능 (%)The ability to differentiate in keratinocytes (%) 대조군Control group Low Ca2 +(0.03 mM)Low Ca < 2 + & gt ; (0.03 mM) 100100 Hign Ca2 +(1.2 mM)Hign Ca < 2 + & gt ; (1.2 mM) 206206 실시예 1Example 1 0.1 ppm0.1 ppm 178178 0.05 ppm0.05 ppm 151151 실시예 2Example 2 0.1 ppm0.1 ppm 183183 0.05 ppm0.05 ppm 166166 비교예Comparative Example 0.1 ppm0.1 ppm 142142 0.05 ppm0.05 ppm 120120

상기 표 5에 나타난 바와 같이, 각질형성세포 분화시 생성되는 CE(Cornified Envelop)의 양을 측정하여 세포분화 촉진효과를 비교한 결과, 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 발아 인삼씨 추출물과 실시예 2의 발아 아임계 인삼씨 추출물은 각질형성세포에서 분화를 촉진할 뿐만 아니라 비교예의 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물보다 우수한 효능을 보임을 알 수 있다. 따라서, 본 발명에 따른 조성물은 피부의 장벽 기능을 강화하고 피부 보습능을 증진시킴을 알 수 있다.As shown in Table 5, when the amount of CE (cornified envelope) produced during keratinocyte differentiation was measured to compare cell differentiation promoting effects, The germinated ginseng seed extract prepared according to Example 1 of the present invention and the germination ginseng seed extract of Example 2 not only promoted differentiation in keratinocytes but also showed superior efficacy to the ginseng seed extracts not germinated in Comparative Example . Accordingly, it can be seen that the composition according to the present invention enhances the skin barrier function and improves the skin moisturizing ability.

[제조예 1 및 2, 비교제조예 1 및 2][Production Examples 1 and 2, Comparative Production Examples 1 and 2]

상기 실시예 1 및 2, 비교예에서 제조된 추출물을 함유하는 조성물을 하기 표 6의 조성에 따라 통상적인 방법으로 혼합하여 제조하였다.The compositions containing the extracts prepared in Examples 1 and 2 and Comparative Examples were prepared by mixing in a conventional manner according to the composition shown in Table 6 below.

배합성분Compounding ingredient 제조예 1Production Example 1 제조예 2Production Example 2 비교제조예 1Comparative Preparation Example 1 비교제조예 2Comparative Production Example 2 정제수Purified water To 100To 100 To 100To 100 To 100To 100 To 100To 100 실시예 1Example 1 0.10.1 -- -- -- 실시예 2Example 2 -- 0.10.1 -- -- 비교예Comparative Example -- -- -- 0.10.1 식물성 경화유Vegetable hydrogenated oil 1.501.50 1.501.50 1.501.50 1.501.50 스테아린산Stearic acid 0.600.60 0.600.60 0.600.60 0.600.60 글리세롤 스테아레이트Glycerol stearate 1.001.00 1.001.00 1.001.00 1.001.00 스테아릴 알코올Stearyl alcohol 2.002.00 2.002.00 2.002.00 2.002.00 폴리글리세릴-10 펜타스테아레이트 & 베헤닐 알코올 & 소디움 스테아로일 락틸에이트Polyglyceryl-10pentastearate and behenyl alcohol and sodium stearoyl lactylate 1.001.00 1.001.00 1.001.00 1.001.00 아라키딜 베헤닐 알코올 &아라키딜글루코사이드Arachidyl behenyl alcohol and arachidyl glucoside 1.001.00 1.001.00 1.001.00 1.001.00 세틸아릴 알코올 & 세테아릴글루코사이드Cetylaryl Alcohol and Cetearyl Glucoside 2.002.00 2.002.00 2.002.00 2.002.00 PEG-100 스테아레이트 & 글리세롤올레이트 & 프로필렌글리콜PEG-100 Stearate & Glycerololate & Propylene Glycol 1.501.50 1.501.50 1.501.50 1.501.50 카프릴릭/카르릭 트리 글리세라이드Caprylic / carboxy triglyceride 11.0011.00 11.0011.00 11.0011.00 11.0011.00 사이클로메디콘Cyclomedicone 6.006.00 6.006.00 6.006.00 6.006.00 방부제, 향Preservative, incense 적량Suitable amount 적량Suitable amount 적량Suitable amount 적량Suitable amount 트리에탄올 아민Triethanolamine 0.10.1 0.10.1 0.10.1 0.10.1

(단위: 중량%)(Unit: wt%)

[시험예 6] 피부 수분 지속력 측정[Test Example 6] Measurement of skin moisture persistence

1회 도포시 피부 수분 변화량 및 지속력을 측정하기 위해 상기의 표 6의 조성에 따라 통상적인 방법으로 제조한 제조예 1~2 및 비교제조예 1~2의 수분 증가량을 수분측정기(corneometer)를 이용하여 평가하였다. To measure the skin moisture change and the sustainability at the time of one application, the moisture increase amount of each of Preparation Examples 1 and 2 and Comparative Preparation Examples 1 and 2 prepared by a conventional method according to the composition of Table 6 was measured using a corneometer Respectively.

먼저, 30세 이상의 여성 25명을 선정하여 양쪽 전박을 흐르는 물에 세정하게 한 뒤, 손목으로부터 5cm 거리의 부위에 지름 1.5cm의 원으로 시험부위를 표시하였다. 피험자들을 23±1℃ 및 45±5% RH가 유지되는 항온-항습실에서 30분간 대기시킨 후 수분측정기(CM825, Courage & Khazaka, Germany)로 시험부위의 수분 함량을 하기의 방법으로 측정하였다. First, 25 women aged 30 years or older were selected and washed with running water in flowing water. The test area was marked with a circle 1.5 cm in diameter at a distance of 5 cm from the wrist. The moisture content of the test area was measured by the following method using a moisture analyzer (CM825, Courage & Khazaka, Germany) after waiting for 30 minutes in a constant temperature and humidity chamber maintained at 23 ± 1 ° C and 45 ± 5% RH.

<수분측정기 측정방법><Measurement method of moisture meter>

피부 표피 내에 존재하는 수분의 양을 센서를 이용하여 수분의 이온정도를 측정, 이를 수치화하여 수분의 양을 계산함으로써 보습력을 측정하였다.The amount of water present in the epidermis of the skin was measured by measuring the degree of ion of water using a sensor, numerically calculating the amount of moisture, and then measuring the moisture content.

1. 측정하고자 하는 피부부위에 수분측정기(corneometer)의 프로브를 올려놓았다.1. A probe of a corneometer is placed on the skin area to be measured.

2. 프로브를 피부에 누르면 센서를 통하여 피부 전기 전도도(capacitance)가 수치화되어 화면에 표시되었다.2. When the probe is pressed against the skin, the skin's electrical conductivity is quantified and displayed on the screen.

3. 측정부위를 달리 하여, 측정을 반복하였다.3. Measurement was repeated with different measurement sites.

4. 1회 측정 후, 킴와이프와 같은 휴지로 센서를 닦은 후, 재측정하였다.4. After one measurement, the sensor was wiped with a tissue such as a kim wipe and then re-measured.

그 후에 양쪽 전박에 각각 제조예 1 및 2와 비교제조예 1 및 2를 시험부위에 동일양 도포하여 흡수시킨 후, 항온-항습실에서 30분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간 경과시 시험부위의 수분 함량을 측정하였다. 수분 함량 증가율은 제조예 1~2 및 비교제조예 1~2를 도포하기 전 상태대비 계산된 수치이며, 표 7 및 도 1에 평균결과를 나타내었다. Thereafter, the same preparations of Preparation Examples 1 and 2 and Comparative Preparations 1 and 2 were applied to both test strips on both test strips, followed by 30 minutes, 1 hour, 2 hours, 4 hours, and 6 hours The moisture content of the test site was measured. The water content increase rate is a calculated value relative to the state before application of Production Examples 1 to 2 and Comparative Production Examples 1 and 2, and the average results are shown in Table 7 and FIG.

도포 전Before application 30 분30 minutes 1 시간1 hours 2 시간2 hours 4 시간4 hours 6 시간6 hours 대조군
(무도포)
Control group
(Mud)
26.2026.20 26.1126.11 26.2126.21 26.1526.15 26.1926.19 26.1726.17
제조예 1Production Example 1 26.2226.22 42.2342.23 40.4440.44 38.7238.72 36.9436.94 34.5734.57 제조예 2Production Example 2 26.1726.17 42.8142.81 41.5141.51 40.1740.17 38.9338.93 36.6636.66 비교제조예 1Comparative Preparation Example 1 26.1926.19 29.2029.20 27.5527.55 26.1226.12 25.625.6 25.125.1 비교제조예 2Comparative Production Example 2 26.2126.21 37.2137.21 36.2236.22 33.1433.14 29.2529.25 27.2227.22

상기 표 7과 도 1에서 알 수 있듯이, 발아 인삼씨 추출물이 함유된 제조예 1~2를 도포한 경우, 일반 인삼씨 추출물을 함유한 비교제조예 2의 처방을 1회 도포시보다 피부에 더 높은 수분량이 오랫동안 지속된다는 것을 볼 수 있다. 특히 발아 아임계 인삼씨 추출물을 사용한 제조예 2의 경우 도 1에 나타난 바와 같이 제조예 1 보다 우수한 피부 수분 지속력을 나타냄을 확인할 수 있다. As can be seen from Table 7 and FIG. 1, when Preparation Examples 1 and 2 containing germinated ginseng seed extract were applied, the prescription of Comparative Preparation Example 2 containing a common ginseng seed extract was applied to the skin It can be seen that the high moisture content lasts for a long time. In particular, in the case of Preparation Example 2 using ginseng extract of ginseng subcritical ginseng, as shown in Fig.

[시험예 7] 피부 보습효과 측정[Test Example 7] Measurement of skin moisturizing effect

장기적인 피부 보습력 개선효과를 측정하기 위하여 TEWL(경표피수분손실, Trans Epidermal Water Loss)를 측정하였다. 이때 상기 시험예 6과 동일한 제조예 1 및 2와 비교제조예 1 및 2를 사용하여 시험을 진행하였다.TEWL (Trans Epidermal Water Loss) was measured to measure long-term skin moisturizing effect. At this time, tests were carried out using the same Production Examples 1 and 2 and Comparative Production Examples 1 and 2 as in Test Example 6. [

먼저, 30세 이상 여성 30명에게 제조예 1 및 2와 비교제조예 1 및 2를 매일 2회 4주간 양쪽 뺨에 도포하도록 하고, 도포 전, 도포 후 2주, 도포 후 4주 경과한 시점에서 항온, 항습 조건 (24℃, 상대습도 40%)에서 하기 방법으로 TEWL(경표피 수분 손실, Trans Epidermal Water Loss)을 측정하였다.First, 30 women aged 30 years or older were allowed to apply Preparation Examples 1 and 2 and Comparative Preparations 1 and 2 twice a day for 4 weeks on both cheeks, 2 weeks after application, 4 weeks after application, TEWL (Trans Epidermal Water Loss) was measured by the following method at constant temperature and humidity (24 ° C, 40% relative humidity).

<TEWL 측정 방법><TEWL measurement method>

피부에서 증발하는 수분의 양을 면적과 시간에 따라 계산하여 증발하는 수분량을 온도와 보습 전자센서로 읽고 수치화하여 피부의 보습력을 측정하였다.The amount of moisture evaporating from the skin was calculated according to the area and time, and the amount of water evaporated was read and quantified with the temperature and humidity electronic sensor to measure the moisture of the skin.

1. 환경조건: 온도, 습도가 일정하게 유지되고, 측정자와 피검자 외에 최소한의 인원만 남도록 했다. 이때, 가급적 공기의 흐름을 차단하였다.1. Environmental conditions: The temperature and humidity were kept constant and only the minimum number of persons other than the measurer and the subject were left. At this time, the air flow was blocked as much as possible.

2. TEWL 프로브를 피검자의 측정부위에 올려놓았다.2. Place the TEWL probe on the subject's measurement site.

3. 측정부위에 프로브를 올려놓을 때 피부에 자국이 남을 정도로 무리한 힘이 가해지지 않도록 가볍게 올려놓고 지면과 90도의 각도를 이루도록 하였다.3. When placing the probe on the measurement site, place it lightly so that excessive force is not applied to the skin to leave marks on the skin, and make an angle of 90 degrees with the ground.

4. 시간이 지날수록 피부의 TEWL 수치가 일정해지는 값을 약 1~3분간 측정하였다.4. The value at which the TEWL value of the skin becomes constant as time passes is measured for about 1 to 3 minutes.

5. 프로브의 손잡이는 가급적 멀리 잡아서 측정자의 체온이 전해지지 않도록 주의하였다.5. Handle the probe as far as possible so that the temperature of the measurer is not transmitted.

6. 면적 당 시간당 증발하는 수분량(g/m2/h)을 계산하였다.6. The amount of water evaporated per hour per area (g / m 2 / h) was calculated.

측정된 TEWL을 통하여 보습력을 비교하고, 그 결과를 도 2에 나타내었다. 도 2에서 볼 수 있듯이, 제조예 1~2의 경우 비교제조예 2에 비해 수분 증발량이 현저히 줄었다는 것을 볼 수 있다. 즉, 2주 후에 일반 인삼씨 추출물을 사용한 비교제조예 2의 경우 피부 수분량이 약 104%로 줄었으나, 본 발명의 제조예 1~2의 경우 모두 125% 이상 유지되고 있었다. 특히 발아 아임계 인삼씨 추출물을 사용한 제조예 2의 경우 4주 경과 후에도 약 120%의 피부 수분을 유지하고 있어 우수한 피부 보습력을 가짐을 알 수 있었다. The moisture resistance was compared with the measured TEWL, and the results are shown in Fig. As can be seen from FIG. 2, in the case of Production Examples 1 and 2, the amount of moisture evaporation was significantly reduced as compared with Comparative Production Example 2. That is, in Comparative Preparation Example 2 using common ginseng seed extract 2 weeks later, the skin moisture content was reduced to about 104%, but in Production Examples 1 and 2 of the present invention, the moisture content was maintained at over 125%. In particular, in the case of Preparation Example 2 using ginseng extract of ginseng subcritical ginseng, about 120% of the skin moisture was retained even after 4 weeks, and thus it was found that it has excellent skin moisturizing power.

[시험예 8] 피부 탄력 향상 효능 확인[Test Example 8] Confirmation of skin elasticity improving effect

사람에서의 피부 탄력 향상 효과를 확인하기 위하여 수분 증가량을 수분측정기(corneometer)를 이용하여 평가하였다.In order to confirm the skin elasticity improvement effect in humans, the moisture increase was evaluated using a corneometer.

30~40대의 건강한 여성 110명을 각각 제조예 1 및 2와 비교제조예 1 및 2의 4개 군에 대해 영양크림을 매일 1회씩 12주간 안면 왼쪽에 도포하게 한 후, 피부탄력 측정기(Cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)를 이용하여 피부탄력을 측정하였다. 그 결과는 하기 표 8에 나타내었다. 표 8의 결과값은 Cutometer SEM 575의 ΔR8(R8(왼쪽)-R8(오른쪽)) 값으로 기재하였는데, R8 값은 피부 점탄성(viscoelasticity)의 성질을 나타낸다.110 healthy women from 30 to 40 were compared with the preparation examples 1 and 2. The nutritional creams were applied to the left side of the face for one week for 12 weeks for each of the four groups of preparation examples 1 and 2, 575, C + K Electronic Co., Germany). The results are shown in Table 8 below. The results in Table 8 are reported as ΔR8 (R8 (left) -R8 (right)) of Cutometer SEM 575, where the R8 value indicates the nature of the viscoelasticity of the skin.

실험제품Experimental product 피부탄력효과Skin elasticity effect 제조예 1Production Example 1 6969 제조예 2Production Example 2 7373 비교제조예 1Comparative Preparation Example 1 5252 비교제조예 2Comparative Production Example 2 5858

상기 표 8에 나타난 바와 같이, 본 발명의 발아 인삼씨 추출물을 함유하는 제조예 1 및 2는 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물을 함유하는 비교제조예 2를 도포한 군에 비하여 피부 탄력성이 더 증가된다. 따라서, 발명의 발아 인삼씨 추출물을 함유하는 조성물은 피부 탄력 향상에 매우 효과적임을 확인할 수 있다.As shown in Table 8, Production Examples 1 and 2 containing the germinated ginseng seed extract of the present invention are further improved in skin elasticity as compared with the group treated with Comparative Production Example 2 containing germinated seed extracts which are not germinated . Therefore, it can be confirmed that the composition containing germinated ginseng seed extract of the present invention is very effective for improving skin elasticity.

[시험예 9] 피부 주름 개선 효능 확인 [Test Example 9] Confirmation of skin wrinkle improving efficacy

본 발명의 조성물의 사람에 대한 주름 개선 효과를 확인하기 위하여 상기 제조예 1 및 2와 비교제조예 1 및 2를 이용하였다.In order to confirm the wrinkle-improving effect of the composition of the present invention on humans, the above Production Examples 1 and 2 and Comparative Production Examples 1 and 2 were used.

상기 제조예 1 및 2와 비교제조예 1 및 2의 주름 개선 효과를 확인하기 위하여 다음과 같이 평가하였다. 40대의 건강한 여성 110명을 각각 제조예 1 및 2와 비교제조예 1 및 2의 4개 군에 대해 영양크림을 매일 1회씩 12주간 안면에 도포하게 한 후, 실리콘을 이용하여 레플리카를 떠서 주름의 상태를 피부측정기(visiometer, SV600, Courage+Khazaka electronic GmbH, Germany)로 측정하여 화상분석하였다. 그 결과는 하기 표 9에 나타내었다. 하기 표 9의 값은, 도포 12주 후의 각각의 변수(parameter)값에서 도포 전 변수값을 뺀 것의 평균을 나타낸 것이다.In order to confirm the wrinkle-improving effect of the above-mentioned Production Examples 1 and 2 and Comparative Production Examples 1 and 2, the following evaluation was made. 110 healthy volunteers of 40 healthy women were treated with the nutrient cream once daily for 12 weeks for each of the four groups of Production Examples 1 and 2 in comparison with those of Production Examples 1 and 2. The replicas were then drained using silicone to remove wrinkles The state was measured with a visiometer (SV600, Courage + Khazaka electronic GmbH, Germany) and the images were analyzed. The results are shown in Table 9 below. The values in Table 9 below are the average values obtained by subtracting the pre-application parameter values from the respective parameter values after 12 weeks of application.

사용 8주 후
임상 결과
After 8 weeks of use
Clinical outcome
R1R1 R2R2 R3R3 R4R4 R5R5
제조예 1Production Example 1 4141 43.243.2 4545 15.915.9 1111 제조예 2Production Example 2 3333 32.832.8 3636 12.412.4 77 비교제조예 1Comparative Preparation Example 1 6969 68.668.6 7676 31.231.2 2222 비교제조예 2Comparative Production Example 2 5858 58.158.1 6363 26.526.5 1818

R1: 주름 등고선의 최고치와 최저치의 차이값R2: 주름 등고선을 임의로 5칸씩 나눈 후 그 중 R1값 들의 평균R1: Difference value between the maximum value and the minimum value of the wrinkle contour line R2: The wrinkle contour line is arbitrarily divided into 5 squares,

R3: 5개씩 나눈 R1값 중 최고 값R3: the highest value of R1 divided by 5

R4: 주름 등고선의 베이스라인(baseline)에서 각 각의 꼭대기와 계곡의 값을 뺀 평균값R4: Average value obtained by subtracting the value of each apex and valley from the baseline of the wrinkle contour line

R5: 주름 등고선의 베이스라인(baseline)에서 각 각의 주름 윤곽을 뺀 값의 차이 값R5: Difference between the baseline of the wrinkle contour line minus the outline of each wrinkle

상기 표 9에서 나타낸 바와 같이, 본 발명의 발아 인삼씨 추출물을 함유하는 제조예 1 및 2는 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물을 함유하는 비교제조예 2에 비하여 피부 주름 개선 효과가 아주 우수함을 알 수 있었다. As shown in Table 9, Production Examples 1 and 2 containing the germinated ginseng seed extract of the present invention were found to have excellent skin wrinkle-reducing effect as compared to Comparative Preparation Example 2 containing ginseng seed extracts not germinated there was.

[시험예 10] 혈색 개선 효과[Test Example 10]

본 발명에 의한 피부 외용제 조성물의 피부 혈액 순환 촉진 효과를 평가하기 위하여, LDPI(Laser Doppler Perfusion Imager)를 이용하여 피부에서의 혈액순환 정도를 측정하였다. LDPI는 피부에서의 혈액순환을 측정하는 기기로 널리 알려져 있고 현재 사용되고 있는 기기로서, 피부의 모세혈관에서 혈액의 속도 및 양 뿐만 아니라 소동맥과 소정맥에서의 흐름까지 측정해 낼 수 있는 매우 민감한 기기이다.In order to evaluate the skin blood circulation promoting effect of the composition for external application for skin according to the present invention, the degree of blood circulation in the skin was measured using LDPI (Laser Doppler Perfusion Imager). LDPI is a widely used and widely used device for measuring blood circulation in skin. It is a highly sensitive device that can measure not only blood velocity and quantity in the capillaries of the skin, but also flow in the small artery and the parenchyma.

항온항습실에서 얼굴을 비누로 수세한 후 30분간 적응시키고, LDPI를 이용하여 초기값을 측정하였다. 먼저 평소 손발이 차가운 여성 30명의 이마 아래 부분의 초기 혈류량을 LDPI로 측정하였다. 그런 다음 상기 제조예 1 및 2와 비교제조예 1 및 2를 1주일 동안 피시험자들에게 사용하도록 한 후에 측정한 혈류량과 상기 초기 측정값을 비교한 결과(피부 혈류량 변화)를 하기 표 10에 나타내었다. The face was soaked in a constant temperature and humidity chamber, and then adapted for 30 minutes. Initial values were measured using LDPI. First, the initial blood flow in the lower part of the forehead of 30 women with cold hands and feet was measured by LDPI. The results of the blood flow measured after the preparation examples 1 and 2 and the comparative preparation examples 1 and 2 were used for the test subjects for 1 week were compared with the initial measured values (skin blood flow change) .

화장료 사용 전후 LDPI 결과-피부 혈류량LDPI results before and after using cosmetics - skin blood flow 시험물질Test substance 1주 사용 후 피부 혈류량 변화율(%)Percent change of skin blood flow after 1 week use (%) 제조예 1Production Example 1 1111 제조예 2Production Example 2 1414 비교제조예 1Comparative Preparation Example 1 1One 비교제조예 2Comparative Production Example 2 55

상기 표 10의 결과에서, 본 발명의 발아 인삼씨 추출물을 함유하는 제조예 1및 2는 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물을 함유하는 비교제조예 2 보다 피부 혈류량을 현저하게 증가시키며, 이러한 혈액 순환 촉진을 통해 혈색이 개선되는 것을 확인할 수 있다. 이는 궁극적으로 본 발명에 의한 발아 인삼씨 추출물을 함유하는 조성물이 피부의 영양분을 효과적으로 전달하고 피부 노화를 억제하며 지연시키는 데 기여할 수 있음을 시사한다.The results of Table 10 show that Production Examples 1 and 2 containing the germinated ginseng seed extract of the present invention significantly increase the skin blood flow rate compared with Comparative Production Example 2 containing the germinated ginseng seed extract which did not germinate, The improvement in color tone can be confirmed. This suggests that a composition containing germinated ginseng seed extract according to the present invention can contribute to effectively transmit nutrients of the skin and inhibit and delay skin aging.

[시험예 11] 피지 분비 억제 효과[Test Example 11] Effect of suppressing sebum secretion

<5α-리덕타아제 활성 억제를 통한 피부 과분비 억제 효과>&Lt; 5a-reductase inhibitory effect &lt; RTI ID = 0.0 &gt;

5α-리덕타아제 활성 억제 효과를 확인하기 위해서 HEK293-5αR2 세포에서 [14C]테스토스테론이 [14C]디하이드로테스토스테론(DHT: dihydrotestosterone)으로 변환되는 비율을 측정하였다. HEK293 세포에 p3 x FLAG-CMV-5αR2를 형질감염시켜서 24 웰 플레이트에 웰당 2.5 x 105 세포로 넣고 배양하였다(Park et al., 2003, JDS. Vol. 31, pp. 191-98). 다음날 효소 기질과 저해제가 첨가된 새로운 배지로 바꿔주었다. 배지의 기질로는 0.05μCi [14C]테스토스테론(Amersham Pharmacia biotech, UK)을 사용하였다.In order to confirm 5α-reductase inhibitory effect, the ratio of [ 14 C] testosterone to [ 14 C] dihydrotestosterone (DHT) in HEK293-5αR2 cells was measured. HEK293 cells were transfected with p3 x FLAG-CMV-5αR2, and cultured in 2.5 × 10 5 cells / well in a 24-well plate (Park et al., 2003, JDS Vol. 31, pp. 191-98). The next day, the medium was changed to a new medium supplemented with an enzyme substrate and an inhibitor. 0.05 [mu] Ci [ 14 C] testosterone (Amersham Pharmacia biotech, UK) was used as the substrate of the medium.

5α-리덕타아제 활성 억제 정도를 확인하기 위해서 본 발명에 따른 발아 인삼씨 추출물인 실시예 1및 2와 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물인 비교예를 넣고 37℃, 5% CO2 배양기에서 2시간 동안 배양하였다. 이 때 인삼씨 추출물을 넣지 않은 것은 음성대조군으로 사용하고, 피나스테라이드(finasteride)를 넣은 것을 양성대조군으로 사용하였다. 이 후 배양 배지를 수거하여 스테로이드를 800 ㎕ 에틸아세테이트로 추출한 다음 상부의 유기용매층을 분리하여 말린 후 남은 잔유물을 다시 50 ㎕ 에틸아세테이트로 녹여서 실리카 플라스틱시트 카이젤겔 60 F254(Silica plastic sheet kieselgel 60 F254) 상에서 에틸아세테이트-헥산(1:1)을 용매로 하여 전개하였다. In order to confirm the degree of inhibition of 5α-reductase activity, Examples 1 and 2 of the germinated ginseng seed extract according to the present invention and a comparative example of ginseng seed extract not germinated were placed in a 37 ° C., 5% CO 2 incubator for 2 hours Lt; / RTI &gt; At this time, no ginseng seed extract was used as a negative control, and finasteride was used as a positive control. Thereafter, the culture medium was collected, and the steroid was extracted with 800 쨉 l of ethyl acetate. The upper organic solvent layer was separated, dried, and the remaining residue was again dissolved in 50 쨉 l ethyl acetate to obtain a silica plastic sheet kiesel gel 60 F254 ) Using ethyl acetate-hexane (1: 1) as the solvent.

플라스틱 시료를 공기 중에서 건조한 후, 동위원소의 양을 측정하기 위하여 바스 시스템을 사용하였는데, 건조된 플라스틱 시트와 엑스레이 필름을 함께 바스 카셋트에 넣어 1주일 후에 필름에 남아있는 테스토스테론과 디하이드로테스토스테론의 동위원소 양을 측정한 다음 하기 수학식 2 및 3에 따라 전환율 및 저해율을 각각 산출하였으며, 그 결과를 하기 표 11에 나타내었다.After drying the plastic sample in air, the bath system was used to measure the amount of isotope. The dried plastic sheet and x-ray film were put together in a bath cassette, and after 1 week, the testosterone remaining in the film and isotopes of dihydrotestosterone The conversion and inhibition rates were calculated according to the following equations (2) and (3), respectively, and the results are shown in Table 11 below.

Figure pat00002
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Figure pat00003
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시험물질Test substance 전환율(%)Conversion Rate (%) 저해율(%)Inhibition rate (%) 음성대조군Negative control group 48.048.0 -- 양성대조군Positive control group 27.627.6 42.542.5 실시예 1Example 1 32.232.2 32.932.9 실시예 1Example 1 29.829.8 37.937.9 비교예Comparative Example 41.141.1 14.414.4

상기 표 11의 결과에서, 테스토스테론을 디하이드로테스토스테론으로 전환시켜 세포질 내에 있는 수용체 단백질과 결합해 핵 내로 들어가 피지선 세포를 활성화하고 분화를 촉진시켜 피지선 내에서 피지를 과분비시키는 역할을 하는 5α-리덕타아제의 활성을 본 발명에 의한 실시예 1 및 2의 발아 인삼씨 추출물이 비교예의 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물보다 효과적으로 억제함으로써 테스토스테론의 디하이드로테스토스테론으로의 전환을 차단하는 것을 확인할 수 있다. 따라서, 본 발명에 의한 조성물이 5α-리덕타아제의 활성을 효과적으로 억제시킴으로써 피지의 과분비를 억제시킬 수 있음을 확인할 수 있다.In the results shown in the above Table 11, 5α-reductase, which converts testosterone into dihydrotestosterone and binds to the receptor protein in cytoplasm to enter the nucleus to activate sebaceous glands and promote differentiation, Activity of the ginseng seed extract of Examples 1 and 2 according to the present invention was inhibited more effectively than that of the non-germinated ginseng seed extract of Comparative Example, thereby blocking the conversion of testosterone to dihydrotestosterone. Therefore, it can be confirmed that the composition according to the present invention effectively inhibits the activity of 5? -Reddactase, thereby suppressing the hypersecretion of sebum.

<피지 분비 억제 효과>&Lt; Effect of suppressing sebum secretion &

본 발명에 따른 피부 외용제 조성물의 피지 분비 억제 효과를 알아보기 위하여 다음과 같이 평가하였다. 피지분비가 많다고 느끼는 피험자 남녀 30명을 선정하여 지정된 부위에 제조예 1 및 2와 비교제조예 1 및 2의 영양크림을 4주간 매일 바르게 하였다. 피지감소의 효과에 대한 판정은 피지량 측정기(Sebumeter SM810, C+K Electronic Co., 독일)를 사용하여 2주 및 4주 경과 후 평균 피지 감소율(%)을 각각 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 12에 나타내었다.In order to examine the effect of the composition for external application for skin according to the present invention on sebum secretion suppression, the following evaluation was made. 30 men and women who felt that sebum secretion was high were selected and the nutritional creams of Preparation Examples 1 and 2 and Comparative Preparation Examples 1 and 2 were made every day for four weeks in designated areas. The results are shown in Table 12. The results are shown in Table 12 below. The results are shown in Table 12 below. The results are shown in Table 12 below. Respectively.

시험물질Test substance 피지 감소율(%)Sebum reduction rate (%) 2주 경과 후After 2 weeks 4주 경과 후After 4 weeks 제조예 1Production Example 1 3333 2424 제조예 2Production Example 2 3939 3131 비교제조예 1Comparative Preparation Example 1 33 1One 비교제조예 2Comparative Production Example 2 1111 77

상기 표 12의 결과에서, 본 발명에 의한 실시예 1 및 2의 발아 인삼씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 제조예 1및 2는 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물을 함유하는 비교제조예 2보다 과잉으로 분비되는 피지를 효과적으로 억제할 수 있음을 알 수 있다.The results of Table 12 show that Production Examples 1 and 2 containing the germinated ginseng seed extract of Examples 1 and 2 according to the present invention as an active ingredient are superior to those of Comparative Preparation Example 2 containing germinated general ginseng seed extract It can be seen that the secreted sebum can be effectively inhibited.

[시험예 12] LPS(Lipopolysaccharide)로 유도된 사이클로옥시게나제-2(COX-2)의 생합성 억제 효과Test Example 12 Effect of LPS (Lipopolysaccharide) Induced Cyclooxygenase-2 (COX-2) on Biosynthesis

인체 섬유아세포(자체 일차 배양)를 105 개의 농도로 12공 평판배양기에 배양한 다음 LPS처리를 한 후, 실시예 1의 발아 인삼씨 추출물과 실시예 2의 발아 아임계 인삼씨 추출물, 비교예의 일반 인삼씨 추출물 1 ppm, 50 ppm을 포함한 배지로 교체하였다. 배양 2일째 세포를 수확해서(harvest) 웨스턴블랏(Westren blot) 방법을 사용하여 생성된 사이클로옥시게나제-2(cyclooxygenase-2, COX-2)의 양을 정량하였다. 대조군을 100으로 하여 농도계(densitometer)로 측정한 값과의 비교치를 하기 표 13에 나타내었다. 이때 대조군은 인삼씨 추출물을 처리하지 않고 배양한 미처리군이다.Human fibroblasts (their primary cultures) were cultured in a 12-well plate incubator at a concentration of 105, and then subjected to LPS treatment. Then, the germinated ginseng seed extract of Example 1, the germination ginseng seed extract of Example 2, Ginseng seed extract at 1 ppm and 50 ppm. On the second day of culture, cells were harvested and the amount of cyclooxygenase-2 (COX-2) produced using the Westren blot method was quantitated. The comparison with the value measured with a densitometer with the control group as 100 is shown in Table 13 below. The control group was an untreated group cultured without treatment of ginseng seed extract.

시험물질(농도:ppm)Test substance (concentration: ppm) COX-2 생합성(%)COX-2 biosynthesis (%) 실시예 1Example 1 5050 3535 1One 4949 실시예 2Example 2 5050 2828 1One 4141 비교예Comparative Example 5050 5252 1One 7777 대조군Control group -- 100100

상기 표 13의 결과에서 알 수 있듯이, 본 발명에 의한 실시예 1의 발아 인삼씨 추출물과 실시예 2의 발아 아임계 인삼씨 추출물은 비교예의 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물보다 염증반응 유발인자인 LPS로 유도된 사이클로옥시게나제-2의 생합성을 농도 의존적으로 감소시켜 염증반응을 억제함으로써, 피부 트러블 증상을 완화시킬 수 있는 효능을 나타내었다.As can be seen from the results of Table 13, the germination ginseng seed extract of Example 1 and the germination germination germination seed extract of Example 2 according to the present invention are superior to the non-germinated ginseng seed extract of Comparative Example in the amount of LPS Induced decrease in the biosynthesis of cyclooxygenase-2 in a concentration-dependent manner, thereby suppressing the inflammatory reaction, thereby exhibiting the effect of alleviating the skin trouble symptoms.

[시험예 13] 지질합성(Lipogenesis) 억제 시험[Test Example 13] Lipogenesis inhibition test

생쥐의 섬유아세포주(fibroblast cell line)인 3T3-L1 세포를 10%의 우태아 혈청(fetal bovine serum, FBS)이 함유된 DMEM(Dulbecos modified eagles medium, GIBCO BRL, Life Technologes 社) 배지가 담긴 6웰 배양 플레이트(culture plate)에 1×05 세포/웰로 부착시켰다. 2일이 지난 후 다시 새로운 DMEM(10% FBS 함유) 배지로 교환하고 2일 동안 배양하였다. 그 다음, 상기 배양한 세포를 다시 1㎍/㎖ 인슐린(insulin), 0.5mM IBMX 및 0.25μM 덱사메타손(dexamethasone)을 함유한 DMEM(10% FBS 함유)로 분화 유도를 하고 실시예 1 및 2, 비교예 및 카페인(양성대조군)을 50μM씩 처리한 다음 처리 2일이 경과한 후 다시 인슐린이 포함된 DMEM으로 교환하여 5일 동안 배양하였다. 5일 후 다시 정상 배지(DMEM, 10% FBS 함유)로 교환하고 상기 세포가 형태적으로 지방세포로 변화할 때까지 관찰하면서 배양하였다.3T3-L1 cells, a fibroblast cell line of mice, were cultured in DMEM supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS) (Dulbecco's modified eagles medium, GIBCO BRL, Life Technologies) Well plates in a culture plate at 1 x 05 cells / well. After 2 days, the cells were replaced with fresh DMEM (containing 10% FBS) medium and cultured for 2 days. Then, the cultured cells were again induced to differentiate into DMEM (containing 10% FBS) containing 1 μg / ml insulin, 0.5 mM IBMX and 0.25 μM dexamethasone, and compared with those of Examples 1 and 2 After two days of treatment, caffeine (positive control) was treated at a concentration of 50 μM, and the cells were exchanged with insulin-containing DMEM for 5 days. After 5 days, the cells were replaced with normal medium (DMEM, containing 10% FBS) and cultured while observing until the cells morphologically changed into adipocytes.

본 발명에 따른 조성물의 지방세포 내 지방 축적 억제 효능을 평가하기 위하여 상기에서 분화가 완료된 3T3-L1 지방세포를 이용하여 수단 III 염색(S4136, sigma-aldrich)을 실시하였다. 지방 세포를 인산염 버퍼 내에서 4% 파라포름알데하이드(pH 7.2)로 상온에서 고정한 후에 PBS(phsphate buffered saline)로 수세해준 후에 수단 III으로 염색한 후에 사진을 찍어서 육안 비교하였다. 음성 대조군은 시험물질이나 비교물질을 첨가하지 않은 배지만을 사용한 것이고, 양성 대조군으로 카페인 50μM을 처리하였다. 지방 축적 억제 정도는 염색된 정도를 +++, ++, +, -로 나누어 등급을 부여하였다. 그 결과를 표 14에 나타내었다.In order to evaluate the effect of the composition according to the present invention on the inhibition of fat accumulation in adipocytes, staining III (S4136, sigma-aldrich) was carried out using 3T3-L1 adipocytes differentiated as above. The adipocytes were fixed with 4% paraformaldehyde (pH 7.2) in phosphate buffer at room temperature, washed with PBS (phsphate buffered saline), stained with SIII and then photographed and compared visually. The negative control group was prepared by adding a test substance or a test substance to which no comparative substance was added, and treated with 50 μM caffeine as a positive control group. The level of inhibition of fat accumulation was graded by dividing the degree of staining by +++, ++, +, -. The results are shown in Table 14.

시료sample 저해율%% Inhibition 음성 대조군Negative control group ++++++ 양성 대조군Positive control group ++ 실시예 1Example 1 ++ 실시예 2Example 2 ++++ 비교예Comparative Example --

상기 표 14에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 실시예 1 및 2에 따른 발아 인삼씨 추출물은 공지된 지질합성 저해 물질인 카페인과 동등하거나 그보다 우수한 지질합성 저해 효과가 있고, 비교예의 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물보다 지질합성 저해 효과가 뛰어남을 알 수 있다. 따라서, 지질합성이 억제됨으로써 피지가 감소되어 여드름 발생을 억제할 수 있다.As shown in Table 14, the ginseng seed extract according to Examples 1 and 2 of the present invention has lipid synthesis inhibitory effect equal to or better than that of caffeine, which is a known lipid synthesis inhibitor, It was found that the lipid synthesis inhibitory effect is superior to that of the extract of the seeds. Therefore, lipid synthesis is inhibited, and sebum is reduced, so that occurrence of acne can be suppressed.

[시험예 14] 여드름 개선과 피지분비 감소 및 자극 유무의 시험[Test Example 14] Test for improvement of acne and reduction of sebum secretion and stimulation

여드름을 보유하고 있는 120명을 10명씩 3개 군으로 나누고 각각의 군에 해당하는 피험자에게 상기 제조예 1~2 및 비교제조예 1~2로부터 제조된 화장료 조성물을 한 달간 사용하게 하였다. 여드름 개선 척도는 1점에서 5점까지로 하고, 1점은 '아니다', 3점은 '보통이다', 5점은 '매우 그렇다'로 표기하도록 하였다. 실험 결과는 하기의 표 15에 10명의 평균점수로 표기하였다.120 persons having acne were divided into three groups of 10 persons each, and the cosmetic composition prepared in Preparation Examples 1 to 2 and Comparative Preparation Examples 1 to 2 was used for one month to subjects belonging to each group. Acne improvement scale is from 1 point to 5 points, 1 point is 'No', 3 points are 'Normal' and 5 points are 'Very agree'. The experimental results are shown in Table 15 below with an average score of 10 persons.

여드름 소멸 시기는 소멸이 판독된 일수를 기준으로 하였으며, 여드름 재발은 유무로 1개월 뒤의 결과를 기준으로 하였다. 피지 분비감소는 1점에서 5점까지로 하고, 1점은 '아니다', 3점은 '보통이다', 5점은 '매우 그렇다'로 표기하도록 하였다. 실험 결과는 하기 표 15에 10명의 평균점수로 표기하였다. 피부자극의 유무는 (자극반응을 보인 명수)/(총 시험자수)로 보았다.The acne extermination period was based on the number of days of disappearance readings, and the results were based on the results after 1 month with or without recurrence of acne. The reduction of sebaceous secretion was from 1 point to 5 points, 1 point was 'No', 3 points were 'Normal' and 5 points were 'Very agree'. The experimental results are shown in Table 15 below with an average score of 10 persons. The presence or absence of skin irritation was evaluated as (number of stimuli) / (total number of test subjects).

염증성 여드름 개선Inflammatory acne improvement 면포성 여드름 소멸시기Acne-bloating period 여드름 재발Recurrence of acne 피지분비 감소Decrease sebaceous glands 자극 유무Presence or absence of stimulation 제조예 1Production Example 1 3.83.8 3.63.6 1.61.6 3.43.4 1.71.7 제조예 2Production Example 2 4.24.2 4.44.4 1.41.4 3.83.8 1.81.8 비교제조예 1Comparative Preparation Example 1 1.41.4 1.21.2 4.24.2 1.51.5 1.21.2 비교제조예 2Comparative Production Example 2 2.22.2 2.42.4 3.83.8 1.91.9 1.51.5

상기 표 15에 나타낸 바와 같이, 제조예 1~2는 비교제조예 1~2에 비해 여드름이 재발되지 않았고, 전반적으로 여드름 개선에 대해 우수한 효과가 있다. 또한, 본 발명에 따른 발아 아임계 인삼씨 추출물을 함유하는 제조예 2는 발아 인삼씨 추출물을 함유하는 제조예 2보다 여드름 개선, 피지 분비 및 자극 완화효과에 있어서 모두 우수한 효과를 갖는다.As shown in Table 15, the production examples 1 and 2 had no recurrence of acne as compared with the comparative preparative examples 1 and 2, and the acne improvement was excellent overall. In addition, Production Example 2 containing germanium ginseng seed extract according to the present invention is superior to Production Example 2 containing germinated ginseng seed extract in terms of acne improvement, sebum secretion and stimulation relaxation effect.

[시험예 15] 비듬균에 대한 항균효과[Test Example 15] Antimicrobial effect on dandruff

비듬원인균인 피티로스포룸 오발레를 대상으로 실시예 1 및 2, 비교예, 아연피리치온, 피록톤올아민 및 천연물로서 항비듬용 제품에 널리 사용되고 있는 티트리오일(Tea tree oil)의 항균효과를 최소성장억제농도(Minimum Inhibitory Concentration, MIC) 측정법을 이용하여 비교 시험하였다. Antibacterial effect of tea tree oil, which is widely used in anti-dandruff products as Examples 1 and 2, Comparative Example, zinc pyrithione, pylontonol amine and natural product, Were compared using the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) assay.

MIC 측정법은 다음과 같다. 각 시료를 액상배지에 일정농도 간격으로 희석한 후 피티로스포룸 오발레를 접종하여 배양한 다음, 시료농도별 균체의 성장 정도를 관찰하여 균 성장을 억제하는 최소농도를 판정하였다. The MIC measurement method is as follows. Each sample was diluted at a predetermined concentration interval in a liquid medium and cultured by inoculation with P. vorulatus ovalet, and then the degree of growth of the microbial cells at each sample concentration was observed to determine the minimum concentration for inhibiting microbial growth.

성분명Ingredients 실시예 1Example 1 실시예 2Example 2 비교예 Comparative Example 아연피리치온Zinc pyrichion 프록톤올아민Protonolamine 티트리오일Tea trio day MIC(ppm)MIC (ppm) 800~1000800-1000 700~850700 to 850 1300~15001300 ~ 1500 5~105 to 10 100~200100 to 200 800~1000800-1000

MIC 측정에 의하면, 실시예 1 및 2의 MIC는 대표적인 항 비듬균 소재인 아연피리치온이나 피록톤올 아민에 비해 낮은 것으로 나타났으나, 천연 티트리 오일의 MIC가 1000ppm인 것에 비하면 천연성분으로서는 상당히 우수한 것으로 나타났다. 또한, 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물인 비교예보다도 효능이 우수한 것으로 나타났다.이상의 실험 결과로부터, 발아 인삼씨 추출물은 인삼씨 추출물보다 염증억제효과가 우수하여 가려움 등 두피 트러블 증상 완화효과가 기대되며 화학합성 항균제인 아연 피리치온이나 피록톤올 아민에 비해 항균력은 낮은 것으로 나타났으나, 항균성 천연물로서 현재 많은 제품에 적용되고 있는 티 트리오일과 유사한 비듬균 성장억제 효과가 나타났다. 발아 인삼씨 추출물이 천연물로서 인체에 안전하기 때문에 그 사용량을 높일 수 있다는 점을 고려한다면, 항비듬 및 항가려움 원료로서 충분한 활용가치가 있다 할 것이다.According to the MIC measurement, the MICs of Examples 1 and 2 were lower than those of representative anti-dandruff materials such as zinc pyrithione or pyrrothonolamine. However, compared to the MIC of natural tea tree oil having a MIC of 1000 ppm, Respectively. In addition, the ginseng seed extract showed better anti-inflammatory effect than the ginseng seed extract, and thus it is expected to alleviate the symptoms of scalp troubles such as itch, Compared to synthetic antimicrobial zinc pyrithione and pylotonol amine, the antimicrobial activity was low, but antimicrobial activity of antimicrobial growth inhibitory effect similar to tea trioyl, which is currently applied to many products, is exhibited. Considering that the ginseng ginseng seed extract is a natural product and can be used safely because it is safe for human body, it will have sufficient utility value as anti-dandruff and anti-itch ingredients.

[제조예 3 및 4, 비교제조예 3][Production Examples 3 and 4, Comparative Production Example 3]

상기 실시예 1 및 2와 비교예의 추출물을 함유하는 조성물을 하기 표 17의 조성으로 통상적인 방법에 따라 혼합하여 제조하였다.Compositions containing the extracts of Examples 1 and 2 and Comparative Examples were prepared by mixing according to the conventional method with the composition shown in Table 17 below.

성분 (중량%)Component (% by weight) 제조예 3Production Example 3 제조예4Production Example 4 비교제조예 3Comparative Production Example 3 실시예 1(발아 인삼씨 추출물)Example 1 (germinated ginseng seed extract) 0.10.1 -- -- 실시예 2(발아 아임계 인삼씨 추출물)Example 2 (germination germination seed extract) -- 0.10.1 -- 비교예(일반 인삼씨 추출물)Comparative Example (Common ginseng seed extract) -- -- 0.10.1 카프릴릭카프릭트리글리세라이드Caprylic Capric Triglyceride 7070 7070 7070 에탄올ethanol 1010 1010 1010 water 잔량Balance 잔량Balance 잔량 Balance

[시험예 16] 탈모 방지 효과 시험[Test Example 16] Test for preventing hair loss

본 발명에 따른 조성물의 탈모 방지 효과를 시험하기 위하여 상기 표 17에서 제조된 조성물을 사용하여 초기 탈모 현상이 있는 피검자 30명을 대상으로 탈모 방지 효과에 관한 실험을 16주 동안 진행하였다. 상기 제조예 4 및 5와 비교제조예 6의 조성물을 1일 1회씩 16주 동안 사용한 후, 16주가 경과한 다음 머리를 감을 때 다시 탈락모를 수집하여 개수를 세었으며, 그 결과를 표 18에 나타내었다.In order to test the effect of preventing the hair loss of the composition according to the present invention, the experiment on the effect of preventing hair loss was carried out for sixteen weeks on the subjects having the initial hair loss phenomenon using the composition prepared in Table 17 above. The compositions of Preparation Examples 4 and 5 and Comparative Preparation Example 6 were used once a day for 16 weeks, and 16 weeks later, when the hair was wrapped again, decolorization was collected and counted. The results are shown in Table 18 .

처리군Treated group 탈락모개수평균(개)/표준편차Number of dropouts (average) / standard deviation 대조군Control group 82.80 / 10.3282.80 / 10.32 제조예3Production Example 3 52.23 / 7.4152.23 / 7.41 제조예 4Production Example 4 44.71 / 6.8544.71 / 6.85 비교제조예 3Comparative Production Example 3 72.36 / 9.2272.36 / 9.22

상기 표 18에 나타난 바와 같이, 발아 인삼씨 추출물을 함유한 조성물인 제조예 3 및 4를 처리한 경우 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물을 함유하는 비교제조예 3에 비해 탈락모의 개수가 유의하게 감소하는 것을 확인할 수 있다.As shown in Table 18, when the preparations 3 and 4 containing the germinated ginseng seed extract were treated, the number of decay moths was significantly reduced as compared with Comparative Preparation Example 3 containing the ginseng seed extract not germinated .

[시험예 17] 모발 광택 증진 효과[Test Example 17] Hair gloss enhancement effect

모발시료 0.1g을 샴푸 0.1g으로 세척한 후 흐르는 물에 깨끗이 씻은 다음, 모발시료를 25℃, 50% 습도 조건에서 6시간 건조시켰다. 그런 다음, 상기 표 17의 제조예 3 및 4와 비교제조예 3의 조성물을 각각 0.1g씩 도포하고, 다음과 같은 방법으로 코니어포토미터를 사용하여 광택을 측정하였다.0.1 g of the hair sample was washed with 0.1 g of shampoo, washed thoroughly with flowing water, and then the hair sample was dried at 25 ° C and 50% humidity for 6 hours. Then, 0.1 g each of the compositions of Production Examples 3 and 4 and Comparative Production Example 3 of Table 17 were applied, and the gloss was measured using a cone photometer in the following manner.

모발시료를 할로겐 램프가 장착되어 있는 코니어포토미터에서 광택을 측정하였다. 상기 코니어포토미터는 빛의 입사각은 30도이며, 0부터 90도까지의 반사된 값을 얻을 수 있다. 광택도는 아래와 같은 식으로 계산하였다.The hair samples were measured for gloss in a cone photometer equipped with a halogen lamp. The cone photometer has a light incident angle of 30 degrees and can obtain a reflected value from 0 to 90 degrees. The gloss was calculated by the following equation.

Figure pat00004
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광택은 난반사가 적고 정반사가 많이 일어날수록 좋은 결과를 보이는 것이며, 측정결과를 하기 표 19에 나타내었다.The gloss is less diffuse and the more the specular reflection occurs, the better the result. The measurement results are shown in Table 19 below.

처리군Treated group dd SfSf GG 대조군Control group 6.496.49 68.4168.41 10.5410.54 제조예 3Production Example 3 6.326.32 110.23110.23 17.4417.44 제조예 4Production Example 4 6.296.29 137.52137.52 21.8621.86 비교제조예 3Comparative Production Example 3 6.436.43 92.392.3 14.3514.35

상기 표 19의 결과로부터, 발아 인삼씨 추출물을 함유한 조성물인 제조예 3 및 4를 처리하였을 경우 비교제조예 3에 비해 모발 광택이 유의하게 개선됨을 확인할 수 있다.From the results shown in Table 19, it can be seen that the hair gloss was significantly improved when the preparations 3 and 4 containing the germinated ginseng seed extract were treated, as compared with Comparative Preparation Example 3. [

[시험예 18] 지방세포 분화 촉진 효과 확인[Test Example 18] Confirmation of promotion effect of adipocyte differentiation

인간의 골수 중간엽줄기세포(human bone marrow mesenchymal stem cells, hBM-MSCs)를 론자사(Lonza, Inc. Walkersbille, MD, USA)에서 구입하여 론자사의 지침서에 따라 배양하였다. 지방세포 분화는 인도메타신(indomethacin) 대신 트로글리타존(troglitazone, TRO)을 사용하여 중간엽줄기세포의 지방세포 분화를 유도한 점을 제외하고는 론자사에서 권장하는 방법을 사용하여 진행하였다. 구체적으로, 중간엽줄기세포의 배양액에 인슐린 1g/ml, 덱사메타손(dexamethasone, DEXA) 1M, 이소부틸메틸잔틴 (isobutylmethylxanthine, IBX) 0.5mM 및 TRO 2M을 넣고 배양하여 중간엽줄기세포를 지방세포로 분화시켰다. 실험군의 경우, 지방세포 분화 유도시에 실시예 1의 발아 인삼씨 추출물, 실시예 2의 발아 아임계 인삼씨 추출물, 비교예의 일반 인삼씨 추출물, 트로글리타존 (troglitazone), 글리벤클라마이드 (Glibenclamide) (Sigma-aldrich, U.S.A로부터 구입)를 각각 10M 처리 후 (10일 동안 이틀 간격으로 처리), 각각 10M을 배지에 첨가하였다. 중간엽줄기세포의 지방세포 분화 유도 10일 후, 세포 배양액을 제거하고 인산염 완충용액(phosphate buffered saline, PBS)으로 세포를 세척한 뒤, 10% 포르말린/PBS 용액 0.2ml/cm2을 사용하여 세포를 10분간 고정시켰다. 고정된 세포를 60% 이소프로판올 용액 0.5ml/cm2로 1회 세척하고, 오일레드오(Oil Red O)를 60% 이소프로판올에 녹인 염색액을 0.2ml/cm2로 10분간 지방세포 내의 지질체를 염색하였다. 염색된 오일레드오를 100% 이소프로판올 용액으로 용출시킨 후, 500nm의 파장에서 흡광도를 측정하였다.Human bone marrow mesenchymal stem cells (hBM-MSCs) were purchased from Lonza, Inc. (Walkersbille, MD, USA) and cultured according to Lonza's guidelines. Adipocyte differentiation was carried out using a method recommended by Ron, except that troglitazone (TRO) was used instead of indomethacin to induce adipocyte differentiation of mesenchymal stem cells. Specifically, mesenchymal stem cells are differentiated into adipocytes by inserting 1 g / ml of insulin, 1 M of dexamethasone, DEXA, 0.5 mM of isobutylmethylxanthine (IBX) and 2 M of TRO into the culture medium of mesenchymal stem cells . In the case of the experimental group, germinated ginseng seed extract of Example 1, germination germination seed extract of Example 2, common ginseng seed extract of comparative example, troglitazone, glibenclamide (Sigib-aldrich , USA) were each treated with 10M (treated at intervals of two days for 10 days), and 10M of each was added to the medium. After 10 days of induction of differentiation of mesenchymal stem cells into adipocytes, the cell culture medium was removed and the cells were washed with phosphate buffered saline (PBS). Cells were washed with 0.2 ml / cm 2 of 10% formalin / PBS solution Was fixed for 10 minutes. The lipid bodies in a washed once fixed cells in 60% isopropanol solution 0.5ml / cm 2, and oil red O (Oil Red O) for 10 minutes for dye dissolved in 60% isopropanol in 0.2ml / cm 2 adipocytes Lt; / RTI &gt; The dyed oil red oi was eluted with a 100% isopropanol solution, and the absorbance was measured at a wavelength of 500 nm.

그 결과를 하기 표 20에 나타내었다. 각 데이터 값은 IDX (-) 음성 대조군으로 보정하였다.The results are shown in Table 20 below. Each data value was calibrated to an IDX negative control.

처리군Treated group Oil Red 상대적 염색 비율Oil Red Relative Dyeing Ratio 대조군Control group 1.001.00 실시예 1Example 1 2.752.75 실시예 2Example 2 3.123.12 비교예Comparative Example 1.541.54

상기 표 20에서 볼 수 있는 바와 같이 발아 인삼씨 추출물은 발아되지 않은 일반 인삼씨 추출물보다 지방세포의 분화 촉진효과가 우수함을 확인할 수 있었다 (P value <0.01).As shown in Table 20, ginseng ginseng seed extract was superior to non-ginseng ginseng seed extract in promotion of differentiation of adipocytes (P value <0.01).

본 발명에 따른 피부 외용제 조성물을 화장료의 형태로 제형화할 경우, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 아이 크림, 영양 크림, 마사지 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 파우더, 에센스 또는 팩 등의 형태로 제형화될 수 있으며, 그 제형이 특별히 한정되는 것은 아니다. 또한, 본 발명에 의한 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다. 또한, 본 발명의 조성물은 피부 개선 효과를 증가시키기 위하여 피부 흡수 촉진 물질을 함유할 수 있다.When the composition for external application for skin according to the present invention is formulated in the form of a cosmetic composition, it may be formulated into cosmetic formulations such as softening lotion, convergent lotion, nutritional lotion, eye cream, nutritional cream, massage cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, powder, essence, And the formulations thereof are not particularly limited. In addition, the composition according to the present invention can also be used as a lubricant, an organic solvent, a solubilizer, a thickening agent, a gelling agent, a softening agent, an antioxidant, a suspending agent, a stabilizer, a foaming agent, a fragrance, The active ingredient may be combined with any other ingredients commonly used in cosmetics, such as ionic emulsifiers, fillers, sequestering agents, chelating agents, preservatives, vitamins, blockers, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, And may contain adjuvants commonly used in the same cosmetic or dermatological fields. Such adjuvants are introduced in amounts commonly used in the cosmetics or dermatological fields. In addition, the composition of the present invention may contain a skin absorption promoting substance to increase the skin improving effect.

또한, 본 발명에 따른 조성물은 약학조성물일 수 있다. 상기 약학 조성물에는 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 약제학적 보조제 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 추가로 함유할 수 있다. 상기 약제학적 조성물은, 로션, 크림, 연고 또는 젤 등으로 제형화될 수 있다. 상기 약제학적 조성물은, 경피 투여되는 것이 바람직하다.In addition, the composition according to the present invention may be a pharmaceutical composition. The pharmaceutical composition may further contain a preservative, a stabilizer, a wetting agent or an emulsifying accelerator, a pharmaceutical adjuvant such as a salt and / or a buffer for controlling osmotic pressure, and other therapeutically useful substances. The pharmaceutical composition may be formulated into lotions, creams, ointments or gels. The pharmaceutical composition is preferably transdermally administered.

상기 약제학적 조성물의 유효성분인 발아 인삼씨 추출물의 투여량은 치료받을 대상의 연령, 성별, 체중과, 치료할 특정 질환 또는 병리 상태, 질환 또는 병리 상태의 심각도, 투여경로 및 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있다. 일반적으로 투여량은 0.0001 mg/kg/일 내지 대략 2000 g/kg/일 범위이다.The dosage of the germinated ginseng seed extract which is an effective ingredient of the pharmaceutical composition varies depending on the age, sex, and weight of the subject to be treated, the specific disease or pathological condition to be treated, the severity of the disease or pathological condition, will be. Dosage determinations based on these factors are within the level of those skilled in the art. Generally, the dosage ranges from 0.0001 mg / kg / day to about 2000 g / kg / day.

하기에 본 발명에 따른 화장료 조성물 및 약학 조성물의 제형예를 설명하나, 하기 예시 이외에도 여러 가지 제형으로 응용 가능하며, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.Formulation examples of the cosmetic composition and the pharmaceutical composition according to the present invention will be described below. However, the present invention can be applied to various formulations other than the following examples.

[제형예 1] 유연 화장수(스킨 로션)[Formulation Example 1] Flexible lotion (skin lotion)

하기 표 21에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 유연 화장수를 제조하였다.A flexible lotion was prepared according to a conventional method according to the composition shown in Table 21 below.

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 발아 인삼씨 추출물Germination ginseng seed extract 1.01.0 글리세린glycerin 3.53.5 올레일알코올Oleyl alcohol 1.51.5 에탄올ethanol 5.55.5 폴리솔베이트 80Polysorbate 80 3.23.2 카르복실비닐폴리머Carboxyl vinyl polymer 1.01.0 부틸렌 글리콜Butylene glycol 2.02.0 프로필렌 글리콜Propylene glycol 2.02.0 방부제, 향료Preservative, fragrance 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량Balance system 100100

[제형예 2] 영양 화장수(밀크 로션) [Formulation Example 2] Nutritional lotion (Milk lotion)

하기 표 22에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양 화장수를 제조하였다.Nutrition lotion was prepared according to a conventional method according to the composition shown in Table 22 below.

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 발아 인삼씨 추출물Germination ginseng seed extract 1.01.0 글리세린glycerin 3.03.0 부틸렌글리콜Butylene glycol 3.03.0 프로필렌글리콜Propylene glycol 3.03.0 카르복시비닐폴리머Carboxyvinyl polymer 0.10.1 밀납Wax 4.04.0 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.51.5 카프릴릭/카프릭 리글리세라이드Caprylic / capriciculiglyceride 5.05.0 스쿠알란Squalane 5.05.0 솔비타세스퀴올레이트Sorbitacecequioleate 1.51.5 세테아릴 알코올Cetearyl alcohol 1.01.0 트리에탄올아민Triethanolamine 0.20.2 방부제, 향료Preservative, fragrance 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량Balance system 100100

[제형예 3] 영양 크림 [Formulation Example 3] Nourishing cream

하기 표 23에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양 크림을 제조하였다. Nutritive creams were prepared according to the compositions shown in Table 23 below in a conventional manner.

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 발아 인삼씨 추출물Germination ginseng seed extract 1.01.0 글리세린glycerin 3.53.5 부틸렌글리콜Butylene glycol 3.03.0 유동파라핀Liquid paraffin 7.07.0 베타글루칸Beta Glucan 7.07.0 카보머Carbomer 0.10.1 카프릴릭/카프릭 리글리세라이드Caprylic / capriciculiglyceride 3.03.0 스쿠알란Squalane 5.05.0 세테아릴 글루코사이드Cetearyl glucoside 1.51.5 소르비탄 스테아레이트Sorbitan stearate 0.40.4 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.21.2 트리에탄올아민Triethanolamine 0.10.1 방부제, 향료Preservative, fragrance 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량Balance system 100100

[제형예 4] 맛사지 크림 [Formulation Example 4] Massage cream

하기 표 24에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 맛사지 크림을 제조하였다. Massage cream was prepared according to a conventional method according to the composition shown in Table 24 below.

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 발아 인삼씨 추출물Germination ginseng seed extract 1.01.0 글리세린glycerin 8.08.0 부틸렌글리콜Butylene glycol 3.03.0 유동파라핀Liquid paraffin 45.045.0 베타글루칸Beta Glucan 7.07.0 카보머Carbomer 0.10.1 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드Caprylic / capric triglyceride 3.03.0 밀납Wax 4.04.0 세테아릴 글루코사이드Cetearyl glucoside 1.51.5 세스퀴 올레인산 소르비탄Sesquioleic acid sorbitan 0.90.9 파라핀paraffin 1.51.5 방부제, 색소, 향료Preservative, coloring, fragrance 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량Balance system 100100

[제형예 5] 팩 [Formulation Example 5] Pack

하기 표 25에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 팩을 제조하였다. The packs were prepared in a conventional manner according to the composition shown in Table 25 below.

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 발아 인삼씨 추출물Germination ginseng seed extract 1.01.0 글리세린glycerin 4.04.0 폴리비닐알콜Polyvinyl alcohol 15.015.0 히알루론산 추출물Hyaluronic acid extract 5.05.0 베타글루칸Beta Glucan 7.07.0 알란토인Allantoin 0.10.1 노닐 페닐에테르Nonyl phenyl ether 0.40.4 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.21.2 에탄올 방부제Ethanol preservative 적량Suitable amount 방부제, 향료Preservative, fragrance 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량Balance system 100100

[제형예 6] 국소 투여용 약제(패취제) [Formulation Example 6] Pharmaceutical preparation for local administration (patch)

하기 표 26에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 패취제를 제조하였다. The patches were prepared in a conventional manner according to the compositions shown in Table 26 below.

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 발아 인삼씨 추출물Germination ginseng seed extract 1.01.0 베타-1,3-글루칸Beta-1,3-glucan 3.03.0 디에틸아민 Diethylamine 0.7 0.7 아황산나트륨Sodium sulphate 0.10.1 폴리옥시에틸렌라우릴에테르(E.O=9)Polyoxyethylene lauryl ether (E.O. = 9) 1.01.0 폴리히드록시에틸렌세틸스테아릴에테르 (Cetomacrogol 1000)Polyhydroxyethylene cetyl stearyl ether (Cetomacrogol 1000) 1.01.0 점성의 파라핀 오일Viscous paraffin oil 2.52.5 카프릴산에스테르/카프르산에스테르 (Cetiol LC)Caprylic acid ester / capric acid ester (Cetiol LC) 2.52.5 폴리에틸렌글리콜400Polyethylene glycol 400 3.03.0 폴리아크릴산(Carbopol 934P)Polyacrylic acid (Carbopol 934P) 1.01.0 정제수Purified water 잔량Balance system 100100

본 발명이 속한 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 상기 내용을 바탕으로 본 발명의 범주 내에서 다양한 응용 및 변형을 행하는 것이 가능할 것이다.Those skilled in the art will appreciate that various modifications, additions and substitutions are possible, without departing from the scope and spirit of the invention as disclosed in the accompanying claims.

Claims (7)

발아된 인삼씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 두피 및 모발의 트러블 증상 개선용 피부 외용제 조성물.A composition for external application for skin for improving the symptoms of scalp and hair trouble containing ginseng extract of ginseng as an active ingredient. 제1항에 있어서, 상기 발아된 인삼씨 추출물은 아임계 추출법으로 추출한 것임을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물.2. The composition for external application for skin according to claim 1, wherein the germinated ginseng seed extract is extracted by subcritical extraction. 제1항에 있어서, 상기 발아된 인삼씨 추출물의 함량은 조성물의 총 중량을 기준으로 1~50중량%인 것을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물.[3] The composition for external application for skin according to claim 1, wherein the ginseng seed extract is 1 to 50% by weight based on the total weight of the composition. 제1항에 있어서, 상기 두피 및 모발의 트러블 증상은 탈모, 비듬, 또는 상기 탈모 및 비듬인 것을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물.The composition for external application for skin according to claim 1, wherein the trouble symptoms of the scalp and hair are hair loss, dandruff, or hair loss and dandruff. 발아된 인삼씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 모발의 광택 및 부드러움 중 적어도 하나 이상의 개선용 피부 외용제 조성물.A composition for external application for skin for improving at least one of gloss and softness of hair containing ginseng extract of ginseng as an active ingredient. 제5항에 있어서, 상기 발아된 인삼씨 추출물은 아임계 추출법으로 추출한 것임을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물.[Claim 7] The composition for external application for skin according to claim 5, wherein the ginseng seed extract germinated is extracted by subcritical extraction. 제5항에 있어서, 상기 발아된 인삼씨 추출물의 함량은 조성물의 총 중량을 기준으로 1~50중량%인 것을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물.[Claim 6] The composition for external application for skin according to claim 5, wherein the ginseng seed extract is 1 to 50% by weight based on the total weight of the composition.
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