KR101844980B1 - External composition for skin containing extract of Salix blinii H.Lev. - Google Patents

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Abstract

본 발명은 제주산버들 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 제주산버들 추출물을 함유함으로써 피부 노화 방지 효과, 피부 보습력 개선 효과 및 미백 효과를 제공할 수 있는 조성물에 관한 것이다.More particularly, the present invention relates to a composition capable of providing skin aging-preventing effect, skin moisturizing power-improving effect and whitening effect by containing an extract of bean curd refuse.

Description

제주산버들 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물{External composition for skin containing extract of Salix blinii H.Lev. }[0001] The present invention relates to a composition for external application for skin, }

본 발명은 제주산버들(Salix blinii H.Lev.) 추출물을 함유하는 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 제주산버들 추출물을 함유함으로써 피부 노화 방지 효과, 피부 탄력 증진 효과, 피부 주름 감소 효과, 피부 탄력 증진 효과 및 피부 보습력 개선 효과를 제공할 수 있는 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a composition containing Salix blinii H. Lev. Extract of Jeju, and more particularly, to a composition containing an extract of Willow bean root from Jeju to improve skin aging effect, skin elasticity enhancement effect, And a composition capable of providing an effect of improving the elasticity and improving the skin moisturizing ability.

인간의 피부는 나이가 들어감에 따라 여러 가지 내적, 외적 요인에 의해 변화를 겪는다. 즉, 내적으로는 신진대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되어 생체에 필요한 면역 단백질 및 생체 구성 단백질들의 생합성이 줄어들게 되며, 외적으로는 오존층 파괴로 인하여 태양 광선 중 지표에 도달하는 자외선의 함량이 증가하고 환경 오염이 더욱 심화됨에 따라 자유 라디칼 및 활성 유해 산소 등이 증가함으로써, 피부의 두께가 감소하고, 주름이 증가하며, 탄력이 감소될 뿐 아니라 피부 혈색도 칙칙해지고, 피부 트러블이 자주 발생하며, 기미와 주근깨 및 검버섯 또한 증가하는 등 여러 가지 변화를 일으키게 된다.The human skin undergoes changes due to various internal and external factors as it gets older. In other words, internally, secretion of various hormones that regulate metabolism is reduced, the function of immune cells and the activity of cells are lowered, and the biosynthesis of immune proteins and biocompatible proteins necessary for the living body is reduced, and ozone layer destruction As the content of ultraviolet rays reaching the surface of the sunlight increases and environmental pollution is further intensified, free radicals and active noxious oxygen are increased, so that the thickness of the skin decreases, the wrinkles increase, the elasticity decreases Skin color is grayish, skin troubles occur frequently, and spots, freckles and black blots also increase.

노화가 진행될수록 피부를 구성하는 물질인 콜라겐, 엘라스틴, 히알루론산 및 당단백질의 함유량 및 배열이 변하거나 감소하는 증상들이 나타나게 되고, 자유 라디칼 및 활성 유해 산소에 의한 산화적 스트레스를 받게 된다. 또한 노화가 진행되거나 자외선에 의해서, 피부를 구성하는 대부분의 세포에서는, 염증을 일으킨다고 알려져 있는 전염증성 사이토카인(proinflammatory cytokine)을 생성하는 효소인 사이클로옥시제나제-2(Cox-2, cyclooxygenase)의 생합성이 증가하고, 이들 염증성 인자에 의해 피부조직을 분해하는 효소인 매트릭스 메탈로프로테아제(MMP, Mztrix metalloproteinase)의 생합성이 증가하며, iNOS(inducible nitric oxide synthase)에 의한 NO(nitric oxide) 생성이 증가하는 것으로 알려져 있다. 즉 자연적으로 진행되는 내인성 노화에 따른 세포 활성의 감소 및 미세염증에 의해 기질물질의 생합성이 감소되고, 여러 가지 유해 환경에 의한 스트레스의 증가 및 태양 광선에 의한 활성 산호 종의 증가와 같은 외적 요인에 의해 분해 및 변성이 가속화되어 피부 기질이 파괴되고 얇아지면서 피부 노화의 제반 증상들이 나타나게 된다. 따라서, 이러한 노화의 현상들을 방지하고, 개선시킬 수 있는 활성성분에 대하여 많은 연구가 행하지고 있는 것이 현실이다.As the aging progresses, the content and arrangement of collagen, elastin, hyaluronic acid and glycoprotein, which constitute the skin, are changed or decreased, and oxidative stress due to free radicals and active noxious oxygen is experienced. In addition, most of the cells constituting the skin undergo aging or ultraviolet rays, Cox-2 (cyclooxygenase), an enzyme that produces a proinflammatory cytokine known to cause inflammation, And the biosynthesis of matrix metalloproteinase (MMP), which is an enzyme that degrades skin tissue, is increased by these inflammatory factors, and nitric oxide (NO) production by iNOS (inducible nitric oxide synthase) Respectively. In other words, there is a decrease in cell activity due to natural endogenous aging and a decrease in the biosynthesis of substrate materials due to microinflammation, an increase in stress due to various harmful environments, and an increase in active coral species caused by sunlight As the degradation and denaturation are accelerated, the skin substrate is destroyed and thinned, and various symptoms of skin aging appear. Therefore, it is a reality that many researches have been conducted on the active ingredients which can prevent and improve such aging phenomena.

사람의 피부색을 결정하는 데는 여러 가지 요인들이 관여하는데, 그 중에서도 멜라닌 색소를 만드는 멜라노사이트(melanocyte)의 활동성, 혈관의 분포, 피부의 두께 및 카로티노이드와 빌리루빈 등 인체 내외의 색소 함유 유무 등의 요인들이 중요하다.Several factors are involved in determining the skin color of a person, including the activity of the melanocyte that makes the melanin pigment, the distribution of blood vessels, the thickness of the skin, and the presence or absence of pigment in and out of the body, such as carotenoids and bilirubin It is important.

이중 특히 가장 중요한 요인은 인체 내의 멜라노사이트에서 타이로시나제 등의 여러 가지 효소가 작용하여 생성되는 멜라닌이라는 흑색 색소이다. 이 멜라닌 색소의 형성에는 유전적 요인, 호르몬 분비, 스트레스 등과 관련된 생리적 요인 및 자외선 조사 등과 같은 환경적 요인 등이 영향을 미친다.Especially, the most important factor is melanin, a melanin pigment produced by various enzymes such as tyrosinase in melanocytes in the human body. The formation of melanin pigment affects genetic factors, hormonal secretion, physiological factors such as stress, and environmental factors such as ultraviolet irradiation.

신체 피부의 멜라닌 세포에서 생성되는 멜라닌 색소는 검은 색소와 단백질의 복합체 형태를 갖는 페놀계 고분자 물질로서, 태양으로부터 조사되는 자외선을 차단하여 진피 이하의 피부기관을 보호해주는 동시에 피부 생체 내에 생겨난 자유 라디칼 등을 잡아주는 등 피부 내 단백질과 유전자들을 보호해주는 유용한 역할을 담당한다.The melanin pigment produced in the melanocytes of the body skin is a phenolic polymer substance having a complex form of black pigment and protein. It protects skin organs below the dermis by blocking ultraviolet rays irradiated from the sun, and at the same time, free radicals And protects proteins and genes in the skin.

이와 같이 피부 내, 외부의 스트레스적 자극에 의해 생겨난 멜라닌은 스트레스가 사라져도 피부 각질화를 통해서 외부로 배출되기 전까지는 없어지지 않는 안정한 물질이다. 그러나 멜라닌이 필요 이상으로 많이 생기게 되면 기미, 주근깨 및 점 등과 같은 과색소 침착증을 유발하여 미용상으로 좋지 않은 결과를 가져오게 된다.Melanin, which is produced by stress stimuli inside and outside the skin, is a stable substance that does not disappear until the skin is excreted through skin keratinization even if the stress disappears. However, when melanin is produced more than necessary, it induces hypercholesterolemia such as spots, freckles, and dots, resulting in poor cosmetic results.

오늘날 동양권의 여성들은 백옥같이 하얗고 깨끗한 피부를 선호하며 이를 미의 중요한 기준으로 삼고 있기 때문에 과색소 침착에 대한 치료 및 미용상 문제를 해결하고자 하는 요구가 늘어나게 되었다.Today, oriental women prefer white, clean skin like white whites, and this is an important criterion of beauty, so there has been a growing demand for treatment and cosmetic problems for hyperpigmentation.

이와 같은 요구에 부응하여 종전부터 아스코르빈산, 코지산, 알부틴, 하이드로퀴논, 글루타치온 또는 이들의 유도체, 또는 타이로시나제 저해활성을 가진 물질들을 화장료나 의약품에 배합하여 사용하여 왔으나, 이들의 불충분한 미백효과, 피부에 대한 안전성 문제, 화장료에 배합 시 나타나는 제형 및 안정성의 문제 등으로 인해 그 사용이 제한되고 있다.In response to such demands, substances having ascorbic acid, kojic acid, arbutin, hydroquinone, glutathione, derivatives thereof, or tyrosinase inhibiting activity have been conventionally used in cosmetics or pharmaceuticals, The use thereof is limited due to a whitening effect, a safety problem to the skin, a problem of formulation and stability in combination with cosmetics, and the like.

피부 중에서 최외각에 위치한 표피(epidermis)의 가장 중요한 기능은, 외부로부터의 다양한 자극(화학물질, 대기오염물질, 건조한 환경, 자외선 등의 물리 및 화학적 자극인자)에 대한 방어와 피부를 통한 체내 수분의 과도한 발산을 막는 보호기능이며, 이러한 보호기능은 각질형성세포로 구성된 각질층이 정상적으로 형성되어 있을 때만 그 기능을 유지할 수 있다. 표피 중에서도 가장 바깥에 존재하는 각질층(stratim corneum, horney layer)은 각질형성세포로부터 형성되며, 분화가 완결된 각질 세포와 그를 둘러싼 지질층으로 구성되어 있다(J. Invest. Dermatol. 1983; 80: 44~49). 각질세포는 표피 최하층에서 지속적으로 증식(proliferation)하는 기저세포(basal cell)가 단계적으로 형태 및 기능상의 변화를 거치며, 피부 표면까지 상승한 특징적은 세포이며, 일정 기간이 경과하면 오래된 각질세포는 피부에서 탈락되고 새로운 각질세포가 그 기능을 대신하게 되는데, 이러한 반복적인 일련의 변화 과정을 '표피 세포의 분화' 또는 '각화(keratinization)'라고 부른다. 각화과정 중의 각질형성세포는 천연보습인자(natural moisturizing factor; NMF)와 세포간 지방질(세라마이드, 콜레스테롤, 지방산)을 생성하면서 각질층을 형성하여, 각질층이 견고함과 유연성을 가지게 하여 피부장벽(skin barrier)으로서의 기능을 보유하게 한다.The most important function of the epidermis located on the outermost part of the skin is to protect against various external stimuli (physical and chemical stimulants such as chemicals, air pollutants, dry environment, ultraviolet rays) , And this protective function can maintain its function only when the stratum corneum composed of keratinocytes is normally formed. The stratum corneum (horney layer), which is the outermost part of the epidermis, is formed from keratinocytes and consists of keratinocytes with complete differentiation and a surrounding lipid layer (J. Invest. Dermatol. 1983; 80: 49). The keratinocyte is a characteristic cell in which the basal cell that continuously proliferates in the lowest epidermis undergoes a stepwise change in morphology and function and is elevated to the surface of the skin. After a certain period of time, This process is called "epidermal cell differentiation" or "keratinization" because the new keratinocyte replaces its function. During keratinization, keratinocytes form the stratum corneum while producing natural moisturizing factors (NMF) and intercellular lipids (ceramides, cholesterol, fatty acids), making the stratum corneum firm and flexible, As shown in Fig.

그러나, 이러한 각질층은 과도한 세안이나, 목욕 등의 생활 습관적 요인, 건조한 대기, 오염물질 등의 환경적인 요인 및 아토피성 피부나 노인성 피부 같은 내인성 질환 등으로 인해 쉽게 그 기능이 손실될 수 있으며, 실제적으로 현대에 들어서 더욱 늘어난 여러 요인들로 인해 최근에는 건조피부증상 및 이로 인한 제반 장해를 호소하는 사람들이 점점 증가하고 있는 추세이다. 따라서, 적절한 피부수분을 유지하기 위하여 외부로부터 수분을 공급하거나, 체내로부터의 수분 손실을 방지하기 위한 연구가 많이 진행되어 왔으며, 실제로 수분보유능력이 있는 여러 종류의 보습제(moisturizer)가 개발되어 주로 화장품 영역에서 많이 사용되고 있다.However, such a stratum corneum can easily lose its function due to excessive skin cleansing, lifestyle factors such as bathing, environmental factors such as dry air and pollutants, and endogenous diseases such as atopic skin and senile skin, Due to the increasing number of factors in the modern age, there has been an increasing tendency in recent years to appeal to people with dry skin symptoms and disorders. Therefore, in order to maintain proper skin moisture, studies have been conducted to supply moisture from the outside or to prevent water loss from the body, and a variety of moisturizers having moisture retention ability have been developed, It is widely used in the area.

제주산버들(Salix blinii H.Lev.) 은 제주 특산식물이며, 잎은 길이 2-5cm, 폭 3-13mm로서 좁은 피침형 또는 도피침형이며 첨두이고 좁은 예저이며 처음에는 견모로 덮여 있지만 떨어지고 뒷면은 회녹색으로 가장자리에 잔톱니가 있다. 삭과는 길이 3mm정도로서 털이 있고 여름에 익는다. 꽃은 4-5월로 잎과 함께 피고 암수딴그루이며 유이화서로 달린다. 수꽃의 포는 타원상으로 뾰족하고 끝이 흑갈색이며 털이 밀생하고 수술은 2개, 밀선은 1개이다. 자화수는 길이 1-2cm로서 화축에 털이 있으며 포는 타원형 첨두이고 끝이 흑갈색이며 견모가 밀생하고 밀선은 1개로서 자방 길이의 1/2보다 길다. 자방은 대가 없으며 긴 타원형으로서 털이 있고 암술대는 길며 암술머리는 4개이다. 높이가 50cm에 달하며 가지를 많이 치고 가지밑부분에서 뿌리가 내린다. 어린 가지는 처음에 털이 있으나 점처 없어지면서 홍록색이 돈다. 제주산버들의 육모 촉진 및 탈모 개선 효능과 이를 육모제에 대해 이용할 수 있는 점이 알려져 있으나(대한민국 특허출원 제 10-2008-0019236호), 본 발명의 제주산버들의 피부에서의 효능에 대해서는 거의 연구된 바가 없으며, 특히 피부에서의 항노화, 보습, 미백 등의 효과에 대해서는 아직까지 보고된 바 없다.
Jeju Wild Willow ( Salix blinii H.Lev.) is a Jeju specialty plant. Leaves are 2-5cm long and 3-13mm wide. They are narrow lanceolate or esophagus type. They are acute and narrow. They are covered with roots at first, but fall down. There is a saw tooth. Capsules are 3mm long and have hairs and ripen in summer. Flower is bloomed with leaves in April-May, male and female are diatomaceous, and run on Yuehua. Male flower bract is pointed with oval shape and ends are dark brown, hairy is densely, with 2 stamens and 1 stitch line. The magnetized water is 1-2cm long with hairs on the axis, the bract is elliptical peak, the end is dark brown, the hair is dense, and the millimeter is one, which is longer than ½ of the length. It is long oval, hairy, style is long, and there are four stigma. It reaches 50cm in height and shoots a lot of branches. The young branch has hairs at first but it disappears and the red color turns red. (Korean Patent Application No. 10-2008-0019236). However, the efficacy of the present invention on the skin of the bean curd of Jeju is hardly studied There is no bar, and the effects of anti-aging, moisturizing and whitening on skin have not been reported yet.

이에 본 발명자들은 제주산버들 추출물이 항노화, 피부 주름 개선, 미백 및 보습 개선 효과를 제공할 수 있음을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.Thus, the inventors of the present invention found that the bean curd extract of the present invention can provide anti-aging, skin wrinkle improvement, whitening, and moisturizing effect, and thus completed the present invention.

따라서, 본 발명의 목적은 제주산버들 추출물을 함유하여 항노화, 피부 주름 개선, 미백 및 보습 개선용 피부 외용제 조성물을 제공하는 것이다.
Accordingly, an object of the present invention is to provide an external composition for skin for anti-aging, skin wrinkle improvement, whitening, and moisturizing improvement by containing a crude extract of Cheju bean.

상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 제주산버들 추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화용 피부 외용제 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides an anti-aging external preparation for skin comprising an extract of bean curd refuse as an active ingredient.

또한, 본 발명은 제주산버들 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 탄력 증진용 피부 외용제 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a skin external application composition for promoting skin elasticity comprising an extract of burdock bean as an active ingredient.

또한, 본 발명은 제주산버들 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 피부 외용제 조성물을 제공한다.The present invention also provides a composition for external application for skin for improving skin wrinkles containing an extract of burdock bean as an active ingredient.

또한, 본 발명은 제주산버들 추출물을 유효성분으로 함유하는 보습용 피부 외용제 조성물을 제공한다.Also, the present invention provides a composition for external application for skin for moisturizing, which comprises an extract of willow boroe as an active ingredient.

또한, 본 발명은 제주산버들 추출물을 함유하는 미백용 피부 외용제 조성물을 제공한다.
In addition, the present invention provides a whitening dermatological external preparation composition containing a crude bean curd extract.

본 발명의 조성물은 제주산버들 추출물 함유함으로써 항노화, 피부 탄력 증진 효과, 피부 주름 개선 효과, 피부 미백 효과 및 피부 보습 효과를 제공할 수 있다.
The composition of the present invention can provide anti-aging, skin elasticity enhancement effect, skin wrinkle improvement effect, skin whitening effect, and skin moisturizing effect by containing the bean curd extract.

본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 제주산버들(Potentilla stolonifera var. quelpaertensis Nakai) 추출물을 유효성분으로 함유한다.The composition for external application for skin according to the present invention contains an extract of Potentilla stolonifera var. Quelpaertensis Nakai as an active ingredient.

본 발명의 제주산버들 추출물은 당업계에 공지된 방법에 따라 수득될 수 있으며, 구체적인 예를 들면 제주산버들을 일광건조 또는 열풍건조한 후 물 또는 에탄올로 추출하여 제조할 수 있다. 보다 구체적으로는 제주산버들을 자연 건조 또는 강제 건조 등 임의의 방법으로 건조하여 잘게 자른 후, 물, 에탄올, 부탄올, 아세톤 등의 극성 용매; 에테르, 헥산, 벤젠, 클로로포름, 에틸아세테이트 등의 비극성 용매; 상기 비극성 용매와 극성 용매의 혼합 용매; 알카리수 등의 용매, 또는 콩기름, 참기름 등의 식물유 등을 사용하여 냉침, 페르콜레이션(percolation), 온침 등의 임의의 방법에 의해서 침출 처리하여 유효 성분을 함유한 침출물을 얻는다. 침출 처리는 냉침과 페르콜레이션의 경우 3~ 168 시간 정도, 온침의 경우는 사용하는 용매 등의 종류와 온도에 따라 상이하나, 적합하게는 용매의 환류 온도에 가까운 온도로 0.5 ~ 72시간 시간 정도 수행하는 것이 바람직하며, 특히, 함수 알코올에 침출한 틴크나 유동 엑기스 또는 엑기스의 것을 사용하는 것이 바람직하다.The bean curd extract of the present invention can be obtained by a method known in the art, and specific examples thereof can be prepared by extracting with water or ethanol after drying the bean curd with sunlight or hot air drying. More specifically, the burrs of Jeju are dried by any method such as natural drying or forced drying, and then finely pulverized. Thereafter, a polar solvent such as water, ethanol, butanol or acetone; Non-polar solvents such as ether, hexane, benzene, chloroform, and ethyl acetate; A mixed solvent of the non-polar solvent and the polar solvent; And the like, or a vegetable oil such as soybean oil or sesame oil, by leaching with an arbitrary method such as cooling, percolation, warming, etc. to obtain a leached product containing the active ingredient. The leaching process varies depending on the type and temperature of the solvent used, and preferably about 0.5 to 72 hours at a temperature close to the reflux temperature of the solvent, in the case of cold beating and percolation. It is preferable to use a tincture, a fluid extract or an extract which has been leached in the functional alcohol.

본 발명의 조성물은 상기 제주산버들 추출물을 조성물 총 중량에 대하여 0.1~20 중량%의 양으로 함유하는 것이 바람직하다. 이는 상기 유효성분의 함량이 0.1 중량% 미만이면 상기 성분에 의한 효능, 효과가 미약하고, 20 중량%를 초과하면 피부 안전성 또는 제형상의 문제가 있기 때문이다.The composition of the present invention preferably contains the crude bean curd extract in an amount of 0.1 to 20% by weight based on the total weight of the composition. If the content of the active ingredient is less than 0.1% by weight, the effect and effect of the ingredient are insignificant. If the content is more than 20% by weight, there is a problem of skin safety or shape.

본 발명의 조성물은 항노화용 피부 외용제 조성물로서 사용될 수 있으며, 이는 피부 탄력을 증진시키고 주름을 개선시키는 효과가 뛰어나다.The composition of the present invention can be used as a composition for external application for skin for anti-aging, which is excellent in improving skin elasticity and improving wrinkles.

본 발명의 조성물은 보습용 피부 외용제 조성물로서 사용될 수 있으며, 이는 피부 장벽 기능을 강화시키고 피부 각질형성세포의 분화를 유도시킬 수 있다. The composition of the present invention can be used as a composition for external application for moisturizing skin, which can enhance the skin barrier function and induce differentiation of dermal keratinocytes.

본 발명의 조성물은 미백용 조성물로서 사용될 수 있으며, 이는 티로시나제 활성을 저해하고 멜라닌의 생성을 억제함으로써 우수한 미백 효과를 제공할 수 있다.The composition of the present invention can be used as a whitening composition, which can provide an excellent whitening effect by inhibiting tyrosinase activity and inhibiting the production of melanin.

본 발명에 따른 조성물은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화될 수 있다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로서, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한 포말(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.The composition according to the invention may be formulated containing a cosmetically or dermatologically acceptable medium or base. These are all formulations suitable for topical application, for example as a solution, a gel, a solid, a paste anhydrous product, an emulsion obtained by dispersing an oil phase in water, a suspension, a microemulsion, a microcapsule, a microgranule or an ionic form (liposome) In the form of ionic fibrin dispersions, or in the form of creams, skins, lotions, powders, ointments, sprays or conical sticks. It can also be used in the form of a foam or in the form of an aerosol composition further containing a compressed propellant. These compositions may be prepared according to conventional methods in the art.

또한 본 발명에 의한 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.In addition, the composition according to the present invention may further comprise at least one selected from the group consisting of fatty substances, organic solvents, solubilizers, thickening agents, gelling agents, softening agents, antioxidants, suspending agents, stabilizing agents, Such as fillers, emulsifiers, emulsifiers, fillers, sequestering agents, chelating agents, preservatives, vitamins, blockers, moisturizers, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, lipid vesicles or any other ingredient commonly used in cosmetics May contain adjuvants commonly used in the field of cosmetics or dermatology. Such adjuvants are introduced in amounts commonly used in the cosmetics or dermatological fields.

또한, 본 발명의 조성물은 피부 개선 효과를 증가시키기 위하여 피부 흡수 촉진 물질을 함유할 수 있다. In addition, the composition of the present invention may contain a skin absorption promoting substance to increase the skin improving effect.

또한, 본 발명의 조성물은 제주산버들 추출물 외에 본 발명이 목적으로 하는 항노화, 보습 및 미백 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 바람직하게는 상기 피부 보호 효과에 상승효과를 줄 수 있는 다른 성분들을 함유할 수 있다.
In addition, the composition of the present invention may contain, in addition to the bean curd extract, other ingredients capable of synergizing the skin protection effect within the range that does not impair the desired anti-aging, moisturizing and whitening effect of the present invention can do.

이하, 시험예 및 제형예를 들어 본 발명의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 시험예 및 제형예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 발명의 범주 및 범위가 하기 예에 의해 제한되는 것은 아니다.
Hereinafter, the constitution and effects of the present invention will be described in more detail with reference to test examples and formulation examples. However, these test examples and formulation examples are provided for illustrative purposes only for the sake of understanding of the present invention, and the scope and scope of the present invention are not limited by the following examples.

[[ 제조예Manufacturing example 1] 양지꽃 추출물의 제조 1] Preparation of Yangmoo

제주산버들을 잘게 자르고 정제수로 세척한 후, 60 열풍건조법에 의해 건조하여 얻은 건조물100g을 70% 에탄올 1L에 넣고, 48시간동안 상온에서 냉침하여 추출하였다. 다음, 추출액을 0.45㎛ 여과지로 여과한 후 50℃에서 회전 감압증발기로 건조하여 건조 중량 13g을 얻었다.
After removing the burdocks from Jeju and washing with purified water, the dried product was dried by 60 hot air drying method. 100 g of the dried product was put into 1 L of 70% ethanol and extracted by cooling at room temperature for 48 hours. Next, the extract was filtered through a 0.45 μm filter paper, and dried at 50 ° C. with a rotary evaporator to obtain 13 g of dry weight.

[[ 시험예Test Example 1] 엘라스타아제 활성 억제 효능 측정 1] Elastase activity inhibitory activity measurement

본 발명의 제주산버들 추출물의 엘라스타아제 활성 저해능을 EGCG와 비교하여 측정하였다. 사용된 엘라스타아제와 기질은 미국 시그마알드리치 사로부터 상업적으로 구매하였고(Cat.No. E0127), 제주산버들 추출물은 제조예 1에서 얻어진 제주산버들 추출물을 사용하였다.The inhibitory activity of elastase activity of the bean curd extract of the present invention was measured in comparison with EGCG. The elastase and substrate used were commercially purchased (Cat. No. E0127) from Sigma Aldrich, USA, and the chelate weevil extract obtained from Preparation Example 1 was used.

하기의 시험방법으로 엘라스타아제 활성 저해작용을 시험하였다. The elastase activity inhibitory activity was tested by the following test method.

96 웰 플레이트에서 10mg/L Tris-HCL 완충액(pH 8.0)으로 조제한 완충액 1ml 에 상기 제조예 1에서 추출한 제주산버들 추출물 10mg을 용해한 시험물질 50μL 및 20㎍/mL 엘라스타아제·타입 III 용액 50μL를 혼합하였다. EGCG 250μM 은 양성 대조군으로 사용하였으며 음성 대조군인 비처리군은 증류수를 사용하였다. 그 후, 상기 완충액으로 조제한 0.4514㎎/mL N-SUCCINYL-ALA-ALA-ALA-p-NITROANILIDE 100μL를 첨가하고, 25℃에서 15분 반응시켰다. 반응종료 후, 파장 415㎚에 있어서의 흡광도를 측정하였다. 동일한 방법으로 공시험을 행하여 보정하였다.To 1 ml of the buffer prepared with 10 mg / L Tris-HCl buffer (pH 8.0) in a 96-well plate, 50 μL of the test substance in which 10 mg of the bean curd extract obtained in Preparation Example 1 was dissolved and 50 μL of 20 μg / mL elastase type III solution . EGCG 250 μM was used as a positive control, and negative control group, distilled water, was used. Then, 100 μL of 0.4514 mg / mL N-SUCCINYL-ALA-ALA-ALA-p-NITROANILIDE prepared as the buffer solution was added and reacted at 25 ° C. for 15 minutes. After completion of the reaction, the absorbance at a wavelength of 415 nm was measured. A blank test was carried out in the same manner and corrected.

엘라스타아제 활성 저해작용의 계산방법은 하기 수학식 1과 같으며, 결과는 하기 표 1에 나타내었다.The method for calculating the activity of inhibiting the activity of the elastase is shown in the following Equation 1, and the results are shown in Table 1 below.

Figure 112011085099287-pat00001
Figure 112011085099287-pat00001

A: 실험시료 무첨가, 효소 첨가에서의 파장 415 ㎚에 있어서의 흡광도A: Absorbance at 415 nm at the wavelength of the enzyme addition,

B: 실험시료 무첨가, 효소 무첨가에서의 파장 415 ㎚에 있어서의 흡광도B: absorbance at a wavelength of 415 nm in the absence of the sample added with the enzyme and no addition of the enzyme

C: 실험시료 첨가, 효소 첨가에서의 파장 415 ㎚에 있어서의 흡광도C: Absorbance at wavelength 415 nm in addition of experimental sample and enzyme addition

D: 실험시료 첨가, 효소 무첨가에서의 파장 415 ㎚에 있어서의 흡광도D: absorbance at a wavelength of 415 nm in the addition of an experimental sample and no enzyme addition

화합물compound 억제정도(%)% Inhibition 비처리군Untreated group 00 EGCGEGCG 6565 제주산버들 추출물 Jeju raspberry extract 6767

상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 제주산버들 추출물은 엘라스타아제 활성 억제 정도가 우수한 엘라스타아제 활성 억제제로 알려져 있는 EGCG와 유사한 효과를 나타내어, 본 발명의 제주양지꽃 추출물의 엘라스타아제 활성 억제 효과가 뛰어남을 확인할 수 있다.
As shown in Table 1, the bean curd extract of the present invention showed an effect similar to that of EGCG, which is known as an inhibitor of the activity of inhibiting elastase activity. Thus, the effect of suppressing the elastase activity of the extract of the fermented sea mustard extract of the present invention I can confirm that it is excellent.

[[ 시험예Test Example 2]  2] 콜라게나아제Collagenase (( MMPMMP -1) -One) 저해능Low performance

본 발명의 제주산버들 추출물의 콜라게나아제 생성 저해능을 레티노익산과 비교하여 측정하였다.The inhibitory effect on the collagenase production of the bean curd extract of the present invention was measured in comparison with retinoic acid.

2.5%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Media) 배지가 들어있는 96공 평판배양기(96-well microtiter plate)에 인간의 섬유아세포를 5,000 세포/공(well)이 되도록 넣고, 70~80% 정도 자랄 때까지 CO2 5%, 37℃ 배양기(incubator)에서 배양하였다. 제주산버들 추출물을 100 ㎍/ml ㎍/ml 농도로 24시간 동안 처리한 다음, 세포배양액을 채취하였다. Human fibroblasts were plated at 5,000 cells / well in a 96-well microtiter plate containing 2.5% fetal calf serum-containing DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Media) And incubated at 37 ° C in an incubator with CO 2 of 5% until it grew to about 80%. The extracts of Korean wild burdock were treated at a concentration of 100 ㎍ / ml ㎍ / ml for 24 hours, and cell culture medium was collected.

상업적으로 이용가능한 콜라게나아제 측정기구(미국 아머샴파마샤 사, Catalog #: RPN 2610)를 이용하여 채취한 세포배양액의 콜라게나아제 생성 정도를 측정하였다. 먼저 1차 콜라게나아제 항체가 균일하게 도포된 96-공 평판(96-well plate)에 채취한 세포 배양액을 넣고 3시간 동안 항원-항체 반응을 항온조에서 실시하였다. 3시간 후 발색단이 결합된 2차 콜라겐 항체를 96-공 평판(96-well plate)에 넣고 다시 15분간 반응시켰다. 15분 후 발색유발물질(3,3',5,5'-tetramethylbenzidine, sigma)을 넣어 실온에서 15분간 발색을 유발시키고, 다시 1M 황산을 넣어 발색반응을 중지시키면 반응액의 색깔은 노란색을 띠게 되며 반응 진행의 정도에 따라 노란색의 정도가 다르게 나타났다. The degree of collagenase production in the cell culture was measured using a commercially available collagenase assay device (Amersham Pharmacia, USA, Catalog #: RPN 2610). First, the cell culture solution collected on a 96-well plate uniformly coated with primary collagenase antibody was added and the antigen-antibody reaction was performed in a thermostatic chamber for 3 hours. After 3 hours, the second collagen antibody bound to the chromophore was placed in a 96-well plate and reacted for another 15 minutes. After 15 minutes, the color development substance (3,3 ', 5,5'-tetramethylbenzidine, sigma) was added and color development was induced at room temperature for 15 minutes. When 1 M sulfuric acid was added to stop the color development reaction, the color of the reaction solution became yellow And the degree of yellowing was different according to the progress of the reaction.

노란색을 띠는 96-공 평판(96-well plate)의 흡광도를 흡광계를 이용하여 405nm에서 측정하고, 하기 수학식 2에 의해 콜라게나아제의 합성 정도를 계산하였으며, 그 결과는 하기 표 2에 나타내었다. 이때 조성물을 처리하지 않은 군에서 채취한 세포 배양액의 반응 흡광도를 대조군으로 하였다. The absorbance of a yellow 96-well plate was measured at 405 nm using a spectrophotometer and the degree of synthesis of collagenase was calculated by the following equation (2) Respectively. At this time, the reaction absorbance of the cell culture fluid collected from the non-treated group was used as a control.

Figure 112011085099287-pat00002
Figure 112011085099287-pat00002

화합물compound 발현정도(%)Expression level (%) 비처리군Untreated group 100100 레티노익산Retinoic acid 7575 제주산버들 추출물Jeju raspberry extract 7474

상기 표 2에 나타낸 바와 같이, 제주산버들 추출물의 콜라게나아제 발현 정도가 콜라게나아제 발현 저해제로 알려져 있는 레티노익산과 비교하여서도 콜라게나아제 발현 저해 효과가 비슷한 수준임을 알 수 있다.As shown in Table 2 above, collagenase expression inhibitory effects of the Jeju bean curd extract are similar to those of retinoic acid, which is known as collagenase expression inhibitor.

이와 같은 결과를 통하여, 본 발명의 제주산버들 추출물은 기질 메탈로 프로테아제(MMP-1)를 저해시키는 효과를 가짐을 확인할 수 있다.
From these results, it can be confirmed that the bean curd extract of the present invention has an effect of inhibiting the substrate metalloprotease (MMP-1).

[[ 제형예Formulation Example 1 및  1 and 비교제형예Comparative Formulation Example 1] One]

하기 표 3의 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양크림을 제조하였다(단위: 중량%).Nutritive creams were prepared in a conventional manner according to the composition of Table 3 below (unit: wt%).

배합성분(중량%)Ingredients (% by weight) 제형예1Formulation Example 1 비교제형예1Comparative Formulation Example 1 정제수Purified water To 100To 100 To 100To 100 제주산버들 추출물Jeju raspberry extract 33 -- 식물성 경화유Vegetable hydrogenated oil 1.501.50 1.501.50 스테아린산Stearic acid 0.600.60 0.600.60 글리세롤 스테아레이트Glycerol stearate 1.001.00 1.001.00 스테아릴 알코올Stearyl alcohol 2.002.00 2.002.00 폴리글리세릴-10 펜타스테아레이트 & 베헤닐 알코올 & 소디움 스테아로일 락틸에이트Polyglyceryl-10pentastearate and behenyl alcohol and sodium stearoyl lactylate 1.001.00 1.001.00 아라키딜 베헤닐 알코올 &아라키딜글루코사이드Arachidyl behenyl alcohol and arachidyl glucoside 1.001.00 1.001.00 세틸아릴 알코올 & 세테아릴글루코사이드Cetylaryl Alcohol and Cetearyl Glucoside 2.002.00 2.002.00 PEG-100 스테아레이트 & 글리세롤올레이트 & 프로필렌글리콜PEG-100 Stearate & Glycerololate & Propylene Glycol 1.501.50 1.501.50 카프릴릭/카르릭 트리 글리세라이드Caprylic / carboxy triglyceride 11.0011.00 11.0011.00 사이클로메디콘Cyclomedicone 6.006.00 6.006.00 방부제, 향Preservative, incense 적량Suitable amount 적량Suitable amount 트리에탄올 아민Triethanolamine 0.10.1 0.10.1

[ [ 시험예Test Example 3] 피부 탄력 향상 효능 확인 3] Skin elasticity improvement efficacy confirmation

사람에서의 피부 탄력 향상 효과를 확인하기 위하여 상기 제형예 1과 비교제형예 1의 제형으로 다음과 같이 평가하였다. In order to confirm the skin elasticity improvement effect in human, the formulations of Formulation Example 1 and Comparative Formulation Example 1 were evaluated as follows.

30~40대의 건강한 여성 20명을 각각 제형예 1과 비교제형예 1의 2개 군에 대해 10명씩 2조로 나누어 영양크림을 매일 1회씩 12주간 안면 왼쪽에 도포하게 한 후, 피부탄력 측정기(Cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)를 이용하여 피부탄력을 측정하였다. 그 결과는 하기 표 4에 나타내었다. 표 4의 결과값은 Cutometer SEM 575의 ΔR8(R8(왼쪽)-R8(오른쪽)) 값으로 기재하였는데, R8 값은 피부 점탄성(viscoelasticity)의 성질을 나타낸다.Twenty healthy women in the 30s to 40s were divided into two groups of 10 for each of the two groups of Formulation Example 1 and Comparative Example 1, and the nutritional cream was applied once to the left side for 12 weeks on the left side. Then, SEM 575, C + K Electronic Co., Germany). The results are shown in Table 4 below. The results in Table 4 are reported as ΔR8 (R8 (left) -R8 (right)) of Cutometer SEM 575, where R8 values indicate the properties of viscoelasticity.

실험제품Experimental product 피부탄력효과Skin elasticity effect 제형예 1Formulation Example 1 0.330.33 비교제형예 1Comparative Formulation Example 1 0.100.10

상기 표 4에 나타난 바와 같이, 본 발명의 제주산버들 추출물이 함유된 제형예 1은 비교제형예 1을 도포한 군에 비하여 피부 탄력성이 더 증가되었다. As shown in Table 4, Formulation Example 1 containing the bean curd extract of the present invention showed more skin elasticity than Comparative Example 1 coated group.

따라서, 본 발명의 제주산버들 추출물을 함유하는 조성물은 피부 탄력 향상에 매우 효과적임을 확인할 수 있다.
Therefore, it can be confirmed that the composition containing the crude bean curd extract of the present invention is very effective for improving skin elasticity.

[[ 시험예Test Example 4] 피부 주름 개선 효능 확인  4] Confirmation of skin wrinkle improvement efficacy

본 발명의 조성물에 의한 사람에서의 주름 개선 효과를 확인하기 위하여 상기 제형예 1과 비교제형예 1을 이용하였다.Formulation Example 1 and Comparative Formulation Example 1 were used in order to confirm the wrinkle-reducing effect of the composition of the present invention in humans.

상기 제형예 1과 비교제형예 1의 주름 개선 효과를 확인하기 위하여 다음과 같이 평가하였다. 40대의 건강한 여성 20명을 각각 제형예 1과 비교제형예 1의 2개 군에 대해 10명씩 2조로 나누어 영양크림을 매일 1회씩 12주간 안면에 도포하게 한 후, 실리콘을 이용하여 레플리카를 떠서 주름의 상태를 피부측정기(visiometer, SV600, Courage+Khazaka electronic GmbH, Germany)로 측정하여 화상분석하였다. 그 결과는 하기 표 5에 나타내었다. 하기 표 5의 값은, 도포 12주 후의 각각의 변수(parameter)값에서 도포 전 변수값을 뺀 것의 평균을 나타낸 것이다.In order to confirm the effect of improving the wrinkles of Formulation Example 1 and Comparative Formulation Example 1, the following evaluation was made. Twenty healthy women in their 40s were divided into two groups of 10 each for Formulation Example 1 and Comparative Formulation Example 1 to apply the nutritional cream once a day for 12 weeks to the face, Were visually analyzed by viscometer (SV600, Courage + Khazaka electronic GmbH, Germany). The results are shown in Table 5 below. The values in Table 5 below are the average values obtained by subtracting the pre-application parameter values from the respective parameter values after 12 weeks of application.

사용 8주 후
임상 결과
After 8 weeks of use
Clinical outcome
R1R1 R2R2 R3R3 R4R4 R5R5
제형예 1Formulation Example 1 -0.30-0.30 -0.21-0.21 -0.14-0.14 -0.10-0.10 -0.09-0.09 비교제형예 1Comparative Formulation Example 1 0.270.27 0.260.26 0.210.21 0.030.03 0.030.03

R1 : 주름 등고선의 최고치와 최저치의 차이값R1: Difference between the maximum value and the minimum value of the wrinkle contour line

R2 : 주름 등고선을 임의로 5칸씩 나눈 후 그 중 R1값 들의 평균R2: The wrinkle contour is arbitrarily divided into 5 squares, and the average of R1 values

R3 : 5개씩 나눈 R1값 중 최고 값R3: the highest value of R1 divided by 5

R4 : 주름 등고선의 베이스라인(baseline)에서 각 각의 꼭대기와 계곡의 값을 뺀 평균값R4: Average value obtained by subtracting the value of each apex and valley from the baseline of the wrinkle contour line

R5 : 주름 등고선의 베이스라인(baseline)에서 각 각의 주름 윤곽을 뺀 값의 차이 값R5: Difference between the baseline of the wrinkle contour line minus the contour of each wrinkle

상기 표 5에서 나타낸 바와 같이, 제형예 1의 피부외용제 조성물은 피부 주름 개선 효과가 매우 우수함을 알 수 있었다.
As shown in Table 5, it was found that the composition for external application for skin of Formulation Example 1 was excellent in the effect of improving skin wrinkles.

[[ 시험예Test Example 5] 피부  5] Skin 보습력Moisture power 증가 효과 측정 Increase effect measurement

제주산버들 추출물이 피부 보습력 증가에 미치는 효과를 측정하기 위하여, 상기 제형예 1 및 비교제형예 1을 이용하였고, 하기와 같이 평가하였다. In order to measure the effect of the wild burdock extract of Jeju on skin moisturizing ability, Formulation Example 1 and Comparative Formulation Example 1 were used and evaluated as follows.

건조 피부로 분류된 40~50대 성인 남녀 20명을 각각 제형예 1 및 비교제형예 1의 2개 군에 대해 10명씩 2조로 나누어 영양크림을 매일 2회씩 4주간 안면에 도포하게 하였다. 도포 개시 전과, 도포 후 1주, 2주, 4주 경과한 시점, 그리고 도포를 중지한 2주 경과(총 6주 경과) 후에 항온, 항습 조건(24℃, 상대습도 40%)에서 피부수분량측정기(Corneometer CM825, C+K Electronic Co., 독일)로 피부수분량을 측정하였다. 그 결과는 하기 표 6에 나타내었다. 표 6의 결과는 시험개시 직전에 측정한 피부 수분량 측정기 값을 기준으로 하여 일정기간 처치한 후의 측정값의 증가분을 백분율로 표시한 것이다. 20 men and women in the 40s and 50s classified as dry skin were divided into two groups of 10 persons for each of Formulation Example 1 and Comparative Formulation Example 1 to apply the nutritional cream twice daily for 4 weeks to the face. (24 ° C, relative humidity 40%) after 1 week, 2 weeks, and 4 weeks after application, and after 2 weeks (total 6 weeks) (Corneometer CM825, C + K Electronic Co., Germany). The results are shown in Table 6 below. The results in Table 6 are based on the skin moisture meter measured immediately before the start of the test, and the increase in the measured value after treatment for a certain period is expressed as a percentage.

시험군Test group 수분 증가율 (%)Moisture growth rate (%) 1주 경과1 week 2주 경과Two weeks 4주 경과4 weeks 6주 경과6 weeks 제형예 1Formulation Example 1 3030 3535 3939 3434 비교제형예 1Comparative Formulation Example 1 3030 3333 3636 2525

상기 표 6의 결과를 보면, 비교제형예 1을 도포한 경우에는 도포가 이루어진 4주까지는 약 30% 정도의 수분 증가율을 보이지만, 도포를 중지한 후에는 피부수분량이 감소하는 반면, 제주산버들 추출물을 함유한 제형예 1을 도포한 경우에는 도포를 중지한 후에도 대부분 34% 이상의 피부수분 증가율을 보임을 확인할 수 있다. 이를 통해 제주양지꽃 추출물을 함유한 본 발명의 조성물은 피부 보습력 유지 효과가 우수함을 알 수 있다.
The results of Table 6 show that when Comparative Formulation Example 1 is applied, the moisture increase rate is about 30% until 4 weeks of application, but after the application is stopped, the amount of skin moisture decreases, , It was confirmed that the skin moisture increase rate was 34% or more even after the application was stopped. Thus, it can be seen that the composition of the present invention containing the extract of Jeju mulberry extract is excellent in the skin moisturizing ability maintenance effect.

[[ 시험예Test Example 6] 각질형성세포 분화 촉진 효과 측정 6] Measurement of promoting effect of keratinocyte differentiation

제주산버들 추출물의 각질형성세포의 분화 촉진 효과를 알아보기 위해, 하기와 같이 각질형성세포의 분화시 생성되는 CE(Cornified Envelop)양을 흡광도를 이용하여 측정하였다.In order to investigate the differentiation promoting effect of keratinocyte extracts of Jeju bean curd extract, the amount of corned envelope (CE) produced upon differentiation of keratinocytes was measured using absorbance.

먼저, 신생아의 표피로부터 분리해 일차 배양한 사람의 각질형성세포를 배양용 플라스크에 넣어 바닥에 부착시킨 뒤 하기 표 7의 시험물질을 배양액에 5 ppm 농도로 처리한 후 세포가 바닥 면적의 70~80% 정도 자랄 때까지 5일간 배양하였다. 이때, 저칼슘(0.03mM) 처리군과 고칼슘(1.2mM) 처리군을 각각 음성 대조군, 양성 대조군으로 하였다. 그 다음 상기 배양한 세포를 수확하여 PBS(Phophate buffered saline)로 세척한 뒤 2% SDS(sodium dodecyl sulfate)와 20mM 농도의 DTT(Dithiothreitol)를 함유한 10mM 농도의 트리스-염산 완충액(Tris-HCl, pH 7.4) 1ml를 가하여 소니케이션(sonication), 보일링(boiling), 원심분리를 하고, 침전물을 다시 PBS 1ml에 현탁시켜 340nm에서의 흡광도를 측정하였다. 이와 별도로 상기 소니케이션 후의 용액을 일부 취하여 단백질 함량을 측정하고, 세포 분화정도 평가시 기준으로 삼았다. 그 결과를 하기 표 7에 나타내었다.First, keratinocytes of primary cultures isolated from the epidermis of newborn infants were placed in a culture flask and adhered to the bottom. After treating the test substances in Table 7 with the concentration of 5 ppm in the culture medium, The cells were cultured for 5 days until they grew to about 80%. At this time, low calcium (0.03 mM) and high calcium (1.2 mM) treatment groups were negative control and positive control, respectively. Then, the cultured cells were harvested, washed with PBS (Phosphate buffered saline), and then suspended in 10 mM Tris-HCl buffer (Tris-HCl, pH 7.4) containing 2% SDS (sodium dodecyl sulfate) and 20 mM DTT (Dithiothreitol) pH 7.4) was added, sonication, boiling, and centrifugation. The precipitate was suspended again in 1 ml of PBS and the absorbance at 340 nm was measured. Separately, a part of the solution after the sonication was taken to measure the protein content and used as a standard in evaluating the degree of cell differentiation. The results are shown in Table 7 below.

시험물질Test substance 각질형성세포에서의 분화능(%)The ability to differentiate in keratinocytes (%) 저칼슘(0.03mM) 용액
(음성 대조군)
Low calcium (0.03 mM) solution
(Negative control)
100100
고칼슘(1.2mM) 용액
(양성 대조군)
High calcium (1.2 mM) solution
(Positive control group)
210210
제주산버들 추출물Jeju raspberry extract 180180

상기 표 7에 나타낸 바와 같이, 제주산버들 추출물을 처리한 경우 각질 형성 세포의 분화 촉진 효과가 우수한 것을 확인할 수 있었다.
As shown in Table 7 above, it was confirmed that when the bean curd extract was treated, the effect of accelerating differentiation of keratinocytes was excellent.

[[ 시험예Test Example 7] 피부 장벽기능 회복 효과 측정 7] Measurement of skin barrier function recovery effect

제주산버들 추출물이 피부 손상으로 인해 손상된 피부 장벽기능의 회복에 미치는 효과 측정하기 위하여, 하기와 같은 실험을 수행하였다. 성인 남녀 10명의 상박을 테이프 스트립핑(Tape Stripping) 방법을 이용하여 피부 장벽에 손상을 주고 각각 하기 표 8의 조성으로 제조한 제형예 2 및 비교제형예 2의 2개 군을 도포하면서 7일 동안 하루에 한번씩 경피수분손실량(TWEL)의 회복 정도를 Vapometer(Delfin, 핀란드)로 측정 비교하였다. 여기에서 비교제형예 2는 음성대조군으로서 비히클(vehicle)이다. 실험 결과는 하기 표 9에 나타내었다. 표 9의 결과는 장벽 손상 전과 장벽 손상 후의 처리전 차이를 100% 기준으로 하여 비교하였다. The following experiment was conducted to determine the effect of Jeju bean curd extract on recovery of damaged skin barrier function due to skin damage. Ten adult male and female adults were injured on the skin barrier using a tape stripping method, and the two groups of Formulation Example 2 and Comparative Formulation Example 2, which were prepared according to the composition shown in Table 8 below, were applied for 7 days The recovery rate of TWEL was measured and compared with Vapometer (Delfin, Finland) once a day. Here, Comparative Formulation Example 2 is a vehicle as a negative control. The experimental results are shown in Table 9 below. The results in Table 9 were compared before treatment before barrier damage and after treatment before barrier damage on the basis of 100%.

배합성분(중량%)Ingredients (% by weight) 제형예 2Formulation Example 2 비교제형예2Comparative Formulation Example 2 정제수Purified water 6767 6969 프로필렌글리콜Propylene glycol 3030 3030 제주산버들 추출물Jeju raspberry extract 33 --

시험군Test group TWEL (g/㎡h)TWEL (g / m 2 h) 1hr1hr 2hr2 hr 3hr3hr 4hr4hr 5hr5hr 6hr6hr 제형예 2Formulation Example 2 6.26.2 6.46.4 6.56.5 6.56.5 6.66.6 6.86.8 비교제형예 2Comparative Formulation Example 2 8.88.8 9.09.0 9.19.1 9.29.2 9.39.3 9.59.5

상기 표 9에서 알 수 있는 바와 같이, 제주산버들 추출물을 처리할 경우 빠른 속도로 경피 수분 손실을 막아주며, 장벽 손상이 회복됨을 확인할 수 있다.
As can be seen from the above Table 9, it can be confirmed that when the bean curd extract is treated, the transdermal water loss is prevented at a high rate and the barrier damage is restored.

[[ 시험예Test Example 8] 미백 효과 -  8] Whitening effect - 티로시나제Tyrosinase 저해 효과 Inhibitory effect

티로시나제 효소는 버섯류(Mushroom)로부터 추출된 것으로 시그마(SIGMA)사의 것을 사용하였다. 먼저 기질인 티로신을 증류수에 용해시켜 0.3mg/ml의 용액으로 만들고 그 용액을 1.0ml씩 시험관에 넣은 다음, 여기에 포타슘-포스페이트 완충용액(0.1mol 농도, pH 6.8) 1.0ml 및 증류수 0.7ml를 첨가하였다.The tyrosinase enzyme was extracted from Mushroom and was obtained from Sigma (SIGMA). First, the substrate, tyrosine, is dissolved in distilled water to make a 0.3 mg / ml solution. The solution is put into a test tube in an amount of 1.0 ml. Then, 1.0 ml of potassium phosphate buffer solution (0.1 mol concentration, pH 6.8) and 0.7 ml of distilled water .

본 발명의 제주산버들 추출물을 물에 적당농도로 혼합하여 준비한 각 시료액 0.2ml를 반응액에 넣은 다음 37℃ 항온조에서 10분 동안 반응시켰다. 이때 대조군은 각 시료액 대신 용매만을 0.2ml 넣은 것으로 준비하였고, 양성대조군으로는 아스코르브산을 사용하였다. 이 반응액에 2500유닛/ml의 티로시나제 용액 0.1ml씩을 넣고 다시 37℃ 항온조에서 10분 동안 반응시켰다. 이 반응액이 든 시험관을 얼음물속에 넣어서 급냉시켜 반응을 중지시키고 광전분광분석계로 파장 475nm에서의 흡광도를 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 10에 나타내었다. 각각의 티로시나제 저해 효과는 하기 수학식 3로 산출하였다.0.2 ml of each sample liquid prepared by mixing the crude bean curd extract of the present invention at an appropriate concentration in water was added to the reaction solution and reacted in a 37 ° C thermostatic chamber for 10 minutes. At this time, the control group was prepared by adding 0.2 ml of a solvent instead of each sample solution, and ascorbic acid was used as a positive control group. 0.1 ml of tyrosinase solution of 2500 units / ml was added to the reaction solution, followed by reaction at 37 ° C for 10 minutes. The reaction tube was immersed in ice water to quench the reaction, and the absorbance at 475 nm was measured with a photoelectron spectrometer. The results are shown in Table 10 below. Each tyrosinase inhibitory effect was calculated by the following equation (3).

Figure 112011085099287-pat00003
Figure 112011085099287-pat00003

시험물질Test substance 티로시나제 저해율(%)Inhibition rate of tyrosinase (%) 대조군(무첨가)Control group (no addition) 00 아스코르브산Ascorbic acid 5252 제주산버들 추출물 Jeju raspberry extract 7070

상기 표 10의 결과에서, 본 발명에 의한 제주산버들 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 티로시나제 억제율이 공지된 티로시나제 저해제인 아스코르브산보다 현저한 미백 효과가 있음을 알 수 있었다.
From the results of Table 10, it can be seen that the inhibitory effect of tyrosinase of the cosmetic composition containing the bean curd extract of the present invention is more remarkable than that of ascorbic acid, which is a known tyrosinase inhibitor.

[[ 시험예Test Example 9] 미백 효과- B16/F10  9] Whitening effect - B16 / F10 멜라노마Melanoma 세포를 이용한 멜라닌 생성 억제 효과 Inhibitory Effect of Cells on Melanin Production

상기 제조예 1의 제주산버들 추출물 및 코지산을 각각 0.001 중량%로 함유한 시료를 시험물질로 하여 일정 농도로 B16/F10 멜라노마 세포(한국세포주은행)의 배양액에 첨가하여 3일간 배양한 후 배양액을 제거하고 PBS로 세척하고 1N NaOH로 세포를 녹여 405 nm에서 흡광도를 측정하였다. 시험물질을 첨가하지 않은 세포를 대조군으로 하여 대조군에서의 멜라닌 함량과 비교하여 각 시험물질의 멜라닌 생성 저해 정도를 측정하였다. 수학식 4에 따라 멜라닌 생성 억제율을 계산하여 그 결과를 표 11에 나타내었다.A sample containing 0.001% by weight of each of the crude bean curd extract and koji acid of Preparation Example 1 was added to the culture medium of B16 / F10 melanoma cells (Korean Cell Line Bank) at a constant concentration as a test substance, and the mixture was cultured for 3 days The culture was removed, washed with PBS, and the cells were lysed with 1N NaOH and absorbance was measured at 405 nm. Cells to which the test substance was not added were used as a control group, and the melanin formation inhibition degree of each test substance was measured by comparing with the melanin content in the control group. The inhibition rate of melanin production was calculated according to Equation (4) and the results are shown in Table 11.

Figure 112011085099287-pat00004
Figure 112011085099287-pat00004

시험물질Test substance 멜라닌생성 억제율(%)Melanin production inhibition rate (%) 대조군(무첨가)Control group (no addition) 00 코지산Kojic acid 5353 제주산버들 추출물 Jeju raspberry extract 5252

상기 표 11의 결과에서, 본 발명에 의한 제주산버들 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 멜라닌 생성 억제율이 공지된 우수한 멜라닌 생성 저해제인 코지산과 유사한 미백 효과를 가짐을 확인하였다.
From the results of Table 11, it was confirmed that the inhibitory rate of melanogenesis of the cosmetic composition containing the bean curd extract of the present invention has a whitening effect similar to that of koji acid, which is a well-known melanin formation inhibitor.

Claims (7)

제주산버들(Salix blinii H.Lev.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 피부 외용제 화장료 조성물.An external skin cosmetic composition for skin whitening comprising an extract of Salix blinii H. Lev. As an active ingredient. 제 1항에 있어서, 상기 제주산버들 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.1~20 중량%의 양으로 함유됨을 특징으로 하는 피부 외용제 화장료 조성물.[Claim 3] The cosmetic composition for external application for skin according to claim 1, wherein the crude bean curd extract is present in an amount of 0.1 to 20% by weight based on the total weight of the composition. 삭제delete 제주산버들(Salix blinii H.Lev.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 탄력 증진용 피부 외용제 화장료 조성물.A cosmetic composition for external skin application for enhancing skin elasticity comprising an extract of Salix blinii H. Lev. As an active ingredient. 제주산버들(Salix blinii H.Lev.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 개선용 피부 외용제 화장료 조성물.A cosmetic composition for external application for skin for improving skin wrinkles containing an extract of Salix blinii H. Lev. As an active ingredient. 제주산버들(Salix blinii H.Lev.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 보습용 피부 외용제 화장료 조성물.A cosmetic composition for skin external application for skin moisturizing, comprising an extract of Salix blinii H.Lev. 삭제delete
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