KR101558186B1 - Cosmetic composition containing Phyllanthus urinaria extrancts - Google Patents

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Abstract

본 발명은 항노화, 항산화 또는 주름개선 효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 여우구슬 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 피부에서 콜라겐생성을 촉진하며, MMP-1을 억제하고, DNA 손상을 보호하며, 사이클로옥시게나제-2의 생합성을 억제하고, 종양괴사인자-α의 생합성을 억제하여 항노화, 항산화 또는 주름개선 효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition having an anti-aging, antioxidant or wrinkle-reducing effect. More specifically, the present invention relates to a cosmetic composition having an anti-aging, antioxidant or wrinkle- And inhibiting the biosynthesis of cyclooxygenase-2 and inhibiting the biosynthesis of tumor necrosis factor-alpha, thereby having anti-aging, antioxidant or wrinkle-reducing effects.

여우구슬 추출물, 항노화, 항산화, 주름개선, 화장료 조성물 Fox bead extract, anti-aging, antioxidant, wrinkle improvement, cosmetic composition

Description

여우구슬 추출물을 함유하는 화장료 조성물{Cosmetic composition containing Phyllanthus urinaria extrancts}[0001] Cosmetic composition containing Phyllanthus urinaria extrancts containing a fox bead extract [

본 발명은 항노화, 항산화 또는 주름개선 효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 여우구슬 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 피부에서 콜라겐생성을 촉진하며, MMP-1을 억제하고, DNA 손상을 보호하며, 사이클로옥시게나제-2의 생합성을 억제하고, 종양괴사인자-α의 생합성을 억제하여 항노화, 항산화 또는 주름개선 효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition having an anti-aging, antioxidant or wrinkle-reducing effect. More specifically, the present invention relates to a cosmetic composition having an anti-aging, antioxidant or wrinkle- And inhibiting the biosynthesis of cyclooxygenase-2 and inhibiting the biosynthesis of tumor necrosis factor-alpha, thereby having anti-aging, antioxidant or wrinkle-reducing effects.

인간의 피부는 나이가 들어감에 따라 여러 가지 내적, 외적 요인에 의해 변화를 겪는다. 즉, 내적으로는 신진대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되어 생체에 필요한 면역 단백질 및 생체 구성 단백질들의 생합성이 줄어들게 되며, 외적으로는 오존층 파괴로 인하여 태양 광선 중 지표에 도달하는 자외선의 함량이 증가하고 환경 오염이 더욱 심화됨에 따라 자유 라디칼 및 활성 유해 산소 등이 증가함으로써, 피부의 두께가 감소하 고, 주름이 증가하며, 탄력이 감소될 뿐 아니라 피부 혈색도 칙칙해지고, 피부트러블이 자주 발생하며, 기미와 주근깨 및 검버섯 또한 증가하는 등 여러 가지 변화를 일으키게 된다.The human skin undergoes changes due to various internal and external factors as it gets older. In other words, internally, secretion of various hormones that regulate metabolism is reduced, the function of immune cells and the activity of cells are lowered, and the biosynthesis of immune proteins and biocompatible proteins necessary for the living body is reduced, and ozone layer destruction As the amount of ultraviolet rays reaching the surface of the sunlight increases and environmental pollution is further intensified, free radicals and active harmful oxygen are increased, thereby reducing the thickness of the skin, increasing the wrinkles and decreasing the elasticity Skin color is also gray, skin troubles occur frequently, and spots, freckles and black spots also increase.

노화가 진행될수록 피부를 구성하는 물질인 콜라겐, 엘라스틴, 히아루론산 및 당단백질의 함유량 및 배열이 변하거나 감소하는 증상들이 나타나게 되고, 자유 라디칼 및 활성 유해 산소에 의한 산화적 스트레스를 받게 된다. 또한 노화가 진행되거나 자외선에 의해서, 피부를 구성하는 대부분의 세포에서는, 염증을 일으킨다고 알려져 있는 전염증성 사이토카인(proinflammatory cytokine)을 생성하는 효소인 사이클로옥시게나제-2(Cox-2, cyclooxygenase)의 생합성이 증가하고, 이들 염증성 인자에 의해 피부조직을 분해하는 효소인 매트릭스 메탈로프로테아제(MMP, Matrix metalloproteinase)의 생합성이 증가하며, iNOS(inducible nitric oxide synthase)에 의한 NO(nitric oxide) 생성이 증가하는 것으로 알려져 있다. 즉 자연적으로 진행되는 내인성 노화에 따른 세포 활성의 감소 및 미세염증에 의해 기질물질의 생합성이 감소되고, 여러 가지 유해 환경에 의한 스트레스의 증가 및 태양 광선에 의한 활성 산소 종의 증가와 같은 외적 요인에 의해 분해 및 변성이 가속화되어 피부기질이 파괴되고 얇아지면서 피부 노화의 제반 증상들이 나타나게 된다. 따라서, 이러한 노화의 현상들을 방지하고, 개선시킬 수 있는 활성성분에 대하여 많은 연구가 행해지고 있는 것이 현실이다.As the aging progresses, the content and arrangement of collagen, elastin, hyaluronic acid and glycoprotein, which constitute the skin, are changed or decreased, and oxidative stress due to free radicals and active noxious oxygen is experienced. Cox-2 (cyclooxygenase), an enzyme that produces a proinflammatory cytokine, known to cause inflammation in most cells constituting the skin by aging or ultraviolet rays, And the biosynthesis of Matrix metalloproteinase (MMP), an enzyme that degrades skin tissue, is increased by these inflammatory factors, and nitric oxide (NO) production by iNOS (inducible nitric oxide synthase) Respectively. In other words, decrease of cellular activity due to natural endogenous aging and decrease of biosynthesis of substrate material by microinflammation, increase of stress due to various harmful environment, increase of active oxygen species by sunlight, As the degradation and denaturation are accelerated, the skin substrate is destroyed and thinned, and various symptoms of skin aging appear. Therefore, it is a reality that many researches have been conducted on active ingredients that can prevent and improve such aging phenomena.

여우구슬(Phyllanthus urinaria)은 어린초 또는 진주초라고도 불리며, 주로 밭이나 풀밭에서 자란다. 높이가 15∼40cm이고, 붉은빛이 돌며 가지가 퍼지며, 가 지에 좁은 날개가 있고, 잎은 어긋나며 2줄로 달려서 깃꼴겹잎같이 보인다. 밑부분에 달걀을 거꾸로 세운 모양의 삼각형의 잎이 몇 개가 있으며, 잎은 타원형이고 끝이 둥글며 가장자리가 밋밋하다. 잎 뒷면은 흰빛이 나며 잎자루는 짧다. 꽃은 1가화이고 7∼8월에 피며 적갈색이다. 화피는 6개, 수술은 3개, 암술은 1개이다. 열매는 삭과(殼果)로 편구형으로 자루가 없고 적갈색이며 옆으로 달린 주름살이 있다. 여우주머니와 비슷하지만 열매에 자루가 없으며, 한국·일본 및 열대·아열대 지방에 널리 분포한다. 또한 여우구슬은 장염, 이질, 전염성 간염 및 신염으로 인한 수종, 요로 감염, 명목, 수아의 감적, 화안목옹, 구창두창 및 무명 소종에 대한 치료 효과가 있고, 화장료에 첨가되어 미백 효능을 나타낼 수 있음이 알려져 있다.Fox beads ( Phyllanthus urinaria ), also known as juvenile or pearl juice , mainly grows in fields and grasses. It is 15 to 40 cm high, reddish, with branches spreading, narrow wings on the ground, with leaves alternating and running in 2 rows, appear like a twig leaf. There are several triangular leaves shaped like inverted eggs at the bottom, the leaves are elliptical, the ends are round, and the edges are flat. The back of the leaf is white and the petiole is short. The flower is a single flower, blooming in July-August, and reddish brown. 6 hairs, 3 stamens, 1 pistil. Fruit is capillary (果), with a sagittal shape, without a bag, with a reddish brown color and a wrinkled side. It is similar to a fox bag, but has no bag of fruit, and is widely distributed in Korea, Japan, and tropical and subtropical regions. In addition, fox beads have therapeutic effects on enteritis, dysentery, infectious hepatitis, and nephritis, urinary tract infections, nematodes, soreness markers, Is known.

대한민국 공개특허공보 제2004-59004호에는 진주초 추출물, 첨미우 추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 유효성분으로 함유하는 멜라닌 생성 억제 활성을 갖는 식물 추출물을 함유하는 피부 미백용 조성물이 개시되어 있다.Korean Patent Laid-Open Publication No. 2004-59004 discloses a composition for skin whitening comprising a plant extract having an activity of inhibiting melanin formation, which comprises at least one member selected from the group consisting of pearl bean juice extract, .

또한 일본공개특허공보 평8-12566호에는 진주초 추출물(Phyllanthus niruri L.), 마티코(Piper elongatum Vahl. & Piper ungustifolium) 및 서양 쐐기풀(Urtica urens)로 이루어진 군에서 선택된 1종 또는 2종 이상을 배합하여 함유하는 티로시나제 활성 저해제가 개시되어 있다.Japanese Patent Laid-Open Publication No. Hei 8-12566 discloses an extract of Phyllanthus niruri L., Piper elongatum Vahl. & Piper ungustifolium ) and Western nettle ( Urtica urens ) in combination with at least one selected from the group consisting of at least one selected from the group consisting of at least one kind of tyrosinase activity inhibitor.

이에, 본 발명자들은 피부 노화를 억제하는 항노화용 화장품을 연구하던 중 여우구슬 추출물이 피부에서 콜라겐생성을 촉진하며, MMP-1을 억제하고, DNA 손상을 보호하며, 사이클로옥시게나제-2의 생합성을 억제하고, 종양괴사인자-α의 생합성을 억제함으로써 항노화, 항산화 또는 주름개선 효과를 나타내는 것을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.Accordingly, the inventors of the present invention have conducted research on anti-aging cosmetics that inhibit skin aging, and found that fox bead extract promotes collagen production in skin, inhibits MMP-1, protects DNA damage, and biosynthesis of cyclooxygenase- And suppresses the biosynthesis of tumor necrosis factor-alpha, thereby exhibiting an anti-aging, antioxidant or wrinkle-reducing effect, thus completing the present invention.

따라서, 본 발명의 목적은 피부에서 콜라겐생성을 촉진하며, MMP-1을 억제하고, DNA 손상을 보호하며, 사이클로옥시게나제-2의 생합성을 억제하고, 종양괴사인자-α의 생합성을 억제하여 항노화, 항산화 또는 주름개선 효과를 갖는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.Accordingly, an object of the present invention is to provide a method for inhibiting MMP-1, protecting DNA damage, suppressing biosynthesis of cyclooxygenase-2, inhibiting biosynthesis of tumor necrosis factor- Anti-aging, antioxidant or wrinkle-improving effect.

상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에서는 여우구슬 추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화용 화장료 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides an anti-aging cosmetic composition comprising a fox bead extract as an active ingredient.

또한 본 발명에서는 여우구슬 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides an antioxidant cosmetic composition containing a fox bead extract as an active ingredient.

또한 본 발명에서는 여우구슬 추출물을 유효성분으로 함유하는 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.The present invention also provides a cosmetic composition for improving wrinkles containing a fox bead extract as an active ingredient.

본 발명에 의한 화장료 조성물은 여우구슬 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 피부에서 콜라겐생성을 촉진하며, MMP-1을 억제하고, DNA 손상을 보호하며, 사이클로옥시게나제-2의 생합성을 억제하고, 종양괴사인자-α의 생합성을 억제하여 항노화, 항산화 또는 주름개선 효과를 갖는 화장료 조성물을 제공할 수 있었다.The cosmetic composition according to the present invention promotes collagen production in skin by containing fox marbled extract as an active ingredient, inhibits MMP-1, protects DNA damage, suppresses the biosynthesis of cyclooxygenase-2, It was possible to provide a cosmetic composition having anti-aging, antioxidant or wrinkle-reducing effects by inhibiting the biosynthesis of necrotic factor -?.

이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

본 발명은 여우구슬 추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화용, 항산화용 또는 주름 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to an anti-aging, antioxidant or wrinkle-improving cosmetic composition containing a fox bead extract as an active ingredient.

본 발명에서 사용하는 여우구슬 추출물은 여우구슬을 당업계에 잘 알려진 방법으로 물 또는 유기용매로 추출하여 제조할 수 있다. 본 발명에서 사용하는 유기용매는 에탄올, 메탄올, 부탄올, 에테르, 에틸아세테이트 및 클로로포름으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상일 수 있으며, 또는 이들 유기용매와 물과의 혼합용매를 사용할 수도 있다. 바람직하게는 80% 에탄올을 사용할 수 있다.The fox bead extract used in the present invention can be prepared by extracting fox beads with water or an organic solvent by a method well known in the art. The organic solvent used in the present invention may be at least one selected from the group consisting of ethanol, methanol, butanol, ether, ethyl acetate and chloroform, or a mixed solvent of these organic solvents and water may be used. Preferably, 80% ethanol is used.

본 발명에 의한 화장료 조성물은 상기 여우구슬 추출물을 조성물 총 중량에 대하여 0.001∼10 중량% 로 함유할 수 있으며, 바람직하게는 0.01∼5 중량%로 함유할 수 있다. 상기 여우구슬 추출물의 함량이 0.001 중량% 미만이면 상기 추출물에 의한 항노화, 항산화 및 주름 개선 효과를 얻을 수 없고, 10 중량%를 초과하면 함량 증가에 비해 효과의 증가가 크지 않기 때문에 오히려 비효율적이다.The cosmetic composition according to the present invention may contain 0.001 to 10% by weight, preferably 0.01 to 5% by weight, of the fox bean extract, based on the total weight of the composition. If the content of the fox bean extract is less than 0.001% by weight, the effect of anti-aging, antioxidation and wrinkle improvement by the extract can not be obtained, and if it exceeds 10% by weight, the increase of the effect is not so significant.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화될 수 있다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로서, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는, 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 또한 포말(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다.The cosmetic composition according to the present invention may be formulated containing a cosmetically or dermatologically acceptable medium or base. It may be any formulation suitable for topical application, for example, as a solution, a gel, a solid, a paste anhydrous product, an emulsion obtained by dispersing an oil phase in water, a suspension, a microemulsion, a microcapsule, In the form of a non-ionic follicle dispersing agent, or in the form of creams, skins, lotions, powders, ointments, sprays or conical sticks. These compositions may be prepared according to conventional methods in the art. The composition according to the invention may also be used in the form of a foam or in the form of an aerosol composition further containing a compressed propellant.

본 발명에 의한 화장료 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.The cosmetic composition according to the present invention can be used as a cosmetic composition in the form of a cosmetic composition containing a lipid, an organic solvent, a solubilizer, a thickening agent, a gelling agent, a softening agent, an antioxidant, a suspending agent, a stabilizer, a foaming agent, a fragrance, Such as fillers, emulsifiers, emulsifiers, fillers, sequestering agents, chelating agents, preservatives, vitamins, blockers, moisturizers, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, lipid vesicles or any other ingredient commonly used in cosmetics May contain adjuvants commonly used in the field of cosmetics or dermatology. Such adjuvants are introduced in amounts commonly used in the cosmetics or dermatological fields.

본 발명에 의한 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 바 디로션, 바디크림, 바디오일 및 바디에센스 등의 화장료로 제형화될 수 있다.The cosmetic composition according to the present invention is not particularly limited in its formulation. Examples of the cosmetic composition according to the present invention include softening lotion, convergent lotion, nutritional lotion, nutritional cream, massage cream, essence, eye cream, eye essence, cleansing cream, Cleansing water, a pack, a powder, a body lotion, a body cream, a body oil, and a body essence.

이하, 실시예 및 시험예를 들어 본 발명의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 실험예 및 실시예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 발명의 범주 및 범위가 하기 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.Hereinafter, the constitution and effects of the present invention will be described in more detail with reference to examples and test examples. However, these examples and examples are provided for illustrative purposes only in order to facilitate understanding of the present invention, and the scope and scope of the present invention are not limited by the following examples.

[실시예 1] 여우구슬 추출물 제조[Example 1] Preparation of fox bead extract

건조한 여우구슬 0.5kg에 중량비 4배의 70% 에탄올 수용액 2ℓ를 넣고, 3회 환류 추출한 다음, 25℃에서 3일간 침적시켰다. 그 후, 여과포 여과와 원심분리를 통해 잔사와 여액을 분리하였고, 분리된 여액을 감압 농축하여 여우구슬 추출물을 얻었다.To 0.5 kg of dried fox beads, 2 L of a 70% ethanol aqueous solution of 4 times the weight ratio was added, and the mixture was refluxed three times and then immersed at 25 DEG C for 3 days. Thereafter, the filtrate was separated by filtration and centrifugation, and the separated filtrate was concentrated under reduced pressure to obtain a fox bead extract.

[시험예 1] 여우구슬 추출물의 항산화 효과[Test Example 1] Antioxidant activity of fox bead extract

자외선(UV) 조사에 의하여 세포에서 발생하는 활성산소(ROS; Reactive oxygen species)를 제거하는 능력을 비교하는 실험을 통하여 항산화 효과를 조사하였으며, 그 결과를 도 1에 나타내었다. 양성대조군으로서 일반적으로 항산화 효과를 비교하는데 사용하는 트롤록스(trolox)를 사용하였으며, 시험물질을 처리하지 않은 군을 대조군으로 사용하였다.The antioxidant effect was investigated by comparing the ability to remove reactive oxygen species (ROS) generated in cells by ultraviolet (UV) irradiation. The results are shown in FIG. As a positive control group, trolox, which is generally used for comparing antioxidative effects, was used, and a group not treated with the test substance was used as a control group.

도 1의 결과에서, 본 발명에 의한 실시예 1의 여우구슬 추출물은 인간 HaCaT 각질형성세포 단층 배양 시스템(human HaCaT keratinocytes monolayer culture system)에서 대조군에 비하여 UV에 의해 생성된 활성 산소를 유의적으로 소거하는 효과를 나타내었다. 이는 항산화 물질의 활성지표로 사용되는 트롤록스와 유사한 정도의 우수한 활성이었으며, 이를 통하여 본 발명의 실시예 1에 의한 여우구슬 추출물이 피부 노화의 원인이 되는 활성 산소를 유의적으로 소거함으로써 피부의 주름 생성 및 탄력 저하를 예방하는 효과를 가질 수 있음을 확인하였다.1, the fox bead extract of Example 1 according to the present invention significantly inhibited the active oxygen generated by UV in the human HaCaT keratinocytes monolayer culture system (human HaCaT keratinocytes monolayer culture system) . This was an excellent activity similar to that of trolox used as an activity index of antioxidants. Through this, the extract of fox marbles according to Example 1 of the present invention significantly eradicated active oxygen which causes skin aging, Production and elasticity of the water-soluble polymer.

[시험예 2] 단세포 겔 전기영동(Single cell gel electrophoresis; SCGE, Comet assay)에 의한 DNA 산화적 손상에 대한 억제 활성[Test Example 2] Inhibitory activity against DNA oxidative damage by single cell gel electrophoresis (SCGE, Comet assay)

사람의 정상 섬유아세포를 24hr 배양한 후 실시예 1의 여우구슬 추출물과 비타민 E를 각각 농도별로 처리하고, 12hr 후에 양성대조군인 H2O2(최종농도 10-3M)를 처리한 다음 전기영동법으로 염색한 결과를 형광현미경으로 관찰하였다. 이때 이미지 아날라이저(image analyzer)인 KOMET 3.1(Kinetic Imaging, England)를 사용하여 25개의 각 세포에서 DNA 절단의 결과로 나타난 테일(tail)의 길이(um)를 분석하였으며, 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.Human normal fibroblasts were cultured for 24 hrs. Then, the fox bead extract and vitamin E of Example 1 were treated for each concentration, treated with a positive control group of H 2 O 2 (final concentration: 10 -3 M) after 12 hours, and then subjected to electrophoresis The result of the staining was observed with a fluorescence microscope. At this time, the length (um) of the tail as a result of DNA cleavage in each of 25 cells was analyzed using an image analyzer, KOMET 3.1 (Kinetic Imaging, England) Respectively.

여우구슬 추출물, 비타민 E의 DNA 산화적 손상에 대한 억제작용Inhibitory effect of fox bead extract, vitamin E on DNA oxidative damage 시험물질Test substance 테일 길이(㎛)Tail length (탆) 저해율(%)Inhibition rate (%) H2O2 H 2 O 2 110.6110.6 -- H2O2 + 실시예 1(10 ppm)H 2 O 2 + Example 1 (10 ppm) 65.865.8 24.424.4 H2O2 + 실시예 1(50 ppm)H 2 O 2 + Example 1 (50 ppm) 55.755.7 33.233.2 H2O2 + 실시예 1(100 ppm)H 2 O 2 + Example 1 (100 ppm) 42.142.1 44.944.9 H2O2 + 비타민 E 10 ppmH 2 O 2 + vitamin E 10 ppm 60.660.6 38.938.9

상기 표 1의 결과에서, 세포 겔 전기영동에 의한 실시예 1의 여우구슬 추출물은 유의성 있는 산화적 DNA 손상 억제 활성을 나타내었으며, 이로 인해 본 발명에 의한 여우구슬 추출물이 히드록실 라디칼(.OH)에 의한 DNA 싱글 스트랜드 브레이크(single strand break)를 억제하는 DNA 산화적 손상억제제로서 작용함을 확인할 수 있었다. In the results shown in Table 1, the fox bead extract of Example 1 by cell gel electrophoresis showed significant oxidative DNA damage inhibitory activity, and thus the fox bead extract according to the present invention inhibited the hydroxyl radical (.OH) , Which is a DNA oxidative damage inhibitor that suppresses DNA single strand break caused by DNA damage.

[시험예 3] I형 프로콜라겐 분석(Type I Procollagen assay)[Test Example 3] I-type procollagen assay (Type I Procollagen assay)

인체 섬유아세포를 105 개의 농도로 12공 평판배양기에서 배양한 다음 실시예 1의 여우구슬 추출물 1ppm 및 10ppm을 포함한 배지로 교체하였다. 배양 3일째 세포를 수확해서(harvest) ELISA 방법으로 생성된 I형 프로콜라겐(type I procollagen)의 양을 정량하였으며, 그 결과를 도 2에 나타내었다. 상기 결과는 실시예 1의 여우구슬 추출물을 포함하지 않은 대조군을 100으로 하여 측정한 값과의 비교치로 산출하였고, 양성대조군으로 TGF-b를 사용하였다.Human fibroblasts were cultured in a 12-well plate incubator at a concentration of 10 5 and then replaced with a medium containing 1 ppm and 10 ppm of the fox bead extract of Example 1. On the third day of culture, the cells were harvested and the amount of type I procollagen produced by the ELISA method was quantified. The results are shown in FIG. The results are shown in Table 1, which is a comparison with the control value of the control group not containing the fox bead extract of Example 1 as 100, and TGF-b was used as a positive control.

도 2의 결과에서 보여지는 바와 같이, 인간 정상 섬유아세포 단층 배양 시스템(Normal human fibroblast monolayer culture system)에서 실시예 1의 여우구슬 추출물은 대조군에 비하여 I형 프로콜라겐 생성을 뚜렷하게 촉진시키는 효과를 나타내었다. 즉, 실시예 1의 여우구슬 추출물은 인체 피부의 노화에 의해 발생하는 콜라겐 생성량 감소 현상을 억제할 수 있었고, 주름 개선효과를 나타내었다. As shown in the results of FIG. 2, in the normal human fibroblast monolayer culture system, the fox bee extract of Example 1 showed a markedly enhanced effect on the formation of type I procollagen compared with the control group . That is, the extract of fox marbles of Example 1 suppressed the reduction of collagen production caused by aging of human skin, and showed an effect of improving wrinkles.

[시험예 4] MMP-1 발현 억제 분석[Test Example 4] MMP-1 expression inhibition assay

인체 섬유아세포를 105 개의 농도로 12공 평판배양기에서 배양한 다음 자외선 B를 40mJ/㎠로 조사한 후, 실시예 1의 여우구슬 추출물 1ppm 및 10ppm을 포함한 배지로 교체하였다. 배양 2일째 세포를 수확해서(harvest) ELISA 방법으로 생성된 MMP-1(matrix metalloproteinase I)의 양을 정량하였으며, 그 결과를 도 3에 나타내었다. 상기 결과는 시험물질을 포함하지 않는 자외선 대조군을 100으로 하여 측정한 값과의 비교치로 산출하였고, 양성대조군은 TGF-b를 사용하였다.Human fibroblasts were cultured in a 12-well plate incubator at a concentration of 10 5, irradiated with ultraviolet ray B at 40 mJ / cm 2, and then replaced with a medium containing 1 ppm and 10 ppm of fox bead extract of Example 1. On the second day of culture, the cells were harvested and the amount of MMP-1 (matrix metalloproteinase I) produced by the ELISA method was quantified. The results are shown in FIG. The above results were calculated by comparing the values measured with the ultraviolet control group containing no test substance as 100, and TGF-b was used as the positive control group.

도 3의 결과에서 보여지는 바와 같이, 인간 정상 섬유아세포 단층 배양 시스템에서 본 발명에 의한 실시예 1의 여우구슬 추출물은 UVB 40 mJ/㎠에 의해서 유도되는 MMP-1의 발현을 유의적으로 억제하였다. 따라서, 본 발명에 의한 실시예 1의 여우구슬 추출물은 내적 노화 또는 외적 환경요인에 의하여 발생하는 피부조직 분해효소인 MMP-1의 생합성을 저해하여 피부노화를 억제하고 주름개선에 효과가 있음을 확인하였다.As shown in the results of FIG. 3, in the human normal fibroblast monolayer culture system, the fox bead extract of Example 1 according to the present invention significantly inhibited the expression of MMP-1 induced by UVB 40 mJ / cm 2 . Thus, the fox marbling extract of Example 1 according to the present invention inhibits the biosynthesis of MMP-1, a skin tissue degrading enzyme caused by internal aging or external environmental factors, thereby suppressing skin aging and improving wrinkles Respectively.

[시험예 5] 자외선에 의한 사이클로옥시게나제-2(COX-2)의 생합성 억제 효과[Test Example 5] Effect of inhibiting the biosynthesis of cyclooxygenase-2 (COX-2)

인체 섬유아세포를 105 개의 농도로 12공 평판배양기에서 배양한 다음 자외선A를 15J/㎠로 조사한 후, 실시예 1의 여우구슬 추출물을 각각 0.1pp, 1ppm 및 10ppm 포함한 배지로 교체하였다. 배양 2일째 세포를 수확해서(harvest) 웨스턴블랏(Westren blot) 방법을 사용하여 생성된 사이클로옥시게나제-2(cyclooxygenase-2, COX-2)의 양을 정량하였다. 시험물질을 함유하지 않은 자외선 대조군을 100으로 하여 농도계(densitometer)로 측정한 값과의 비교치로 산출하였고, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.Human fibroblasts were cultured in a 12-well plate incubator at a concentration of 10 5, irradiated with UVA at 15 J / cm 2, and then replaced with media containing 0.1 pp, 1 ppm and 10 ppm of fox bead extracts of Example 1, respectively. On the second day of culture, cells were harvested and the amount of cyclooxygenase-2 (COX-2) produced using the Westren blot method was quantitated. The results are shown in Table 2 below. The results are shown in Table 2 below. The results are shown in Table 2 below.

시험물질(농도:ppm)Test substance (concentration: ppm) COX-2 생합성(%)COX-2 biosynthesis (%) 실시예 1Example 1 1010 1515 1One 2828 0.10.1 7373 대조군Control group 100100

상기 표 2의 결과로부터, 실시예 1의 여우구슬 추출물은 자외선에 의한 사이클로옥시게나제-2의 생합성을 농도 의존적으로 감소시켰으며, COX-2의 산물인 프로스타글란딘 E2(PGE2)에 의한 피부조직분해를 방지하는 것을 확인할 수 있었다. From the results shown in the above Table 2, the fox bean extract of Example 1 decreased the biosynthesis of cyclooxygenase-2 by ultraviolet light in a concentration-dependent manner, and the skin tissue degradation by prostaglandin E2 (PGE2) . ≪ / RTI >

[시험예 6] 자외선에 의한 종양괴사인자알파(TNF-α)의 생합성 억제 효과[Test Example 6] Inhibitory effect of ultraviolet light on the biosynthesis of tumor necrosis factor alpha (TNF-α)

인체 각질형성세포를 105개의 농도로 12공 평판배양기에서 배양한 다음 자외선B를 30mJ/㎠로 조사한 후, 실시예 1의 여우구슬 추출물을 각각 0.1pp, 1ppm 및 10ppm 포함한 배지로 교체하였다. 배양 6-24시간 후 세포를 수확해서(harvest) ELISA(Pharmingen 555212) 방법을 사용하여 생성된 종양괴사인자알파(TNF-α)의 양을 정량하였으며, 시험물질을 처리하지 않은 자외선 대조군을 100으로 하여 측정한 값과의 비교치로 산출한 결과를 하기 표 3에 나타내었다.Human keratinocytes were cultured in a 12-well plate incubator at a concentration of 10 5 , irradiated with ultraviolet ray B at 30 mJ / cm 2, and then replaced with media containing 0.1 pp, 1 ppm and 10 ppm of fox bead extracts of Example 1, respectively. Cells were harvested 6-24 hours after culture and the amount of tumor necrosis factor alpha (TNF-a) produced was quantitated using ELISA (Pharmingen 555212) method, The results are shown in Table 3 below.

시험물질(농도:ppm)Test substance (concentration: ppm) TNF-α 생합성(%)TNF-α biosynthesis (%) 실시예 1Example 1 1010 1616 1One 3838 0.10.1 7272 대조군Control group 100100

상기 표 3의 결과로부터, 본 발명에 의한 실시예 1의 여우구슬 추출물이 자외선에 의한 종양괴사인자알파(TNF-α)의 생합성을 농도 의존적으로 감소시킴으로써 종양괴사인자알파의 생합성으로 인해 발생할 수 있는 피부노화를 미연에 방지할 수 있음을 확인하였다. From the results shown in the above Table 3, it can be seen that the fox bead extract of Example 1 according to the present invention can be produced by the biosynthesis of tumor necrosis factor alpha by reducing the biosynthesis of tumor necrosis factor alpha (TNF-a) It was confirmed that skin aging can be prevented in advance.

[실시예 2 및 비교예 1][Example 2 and Comparative Example 1]

하기 표 4에 기재된 조성에 따라 실시예 2 및 비교예 1의 영양크림을 통상적인 방법으로 각각 제조하였다(단위: 중량%)The nutritional creams of Example 2 and Comparative Example 1 were prepared according to the compositions shown in Table 4 below in the usual manner (unit:% by weight)

성 분ingredient 실시예 2Example 2 비교예 1Comparative Example 1 실시예 1의 여우구슬 추출물The fox bead extract of Example 1 0.10.1 -- 밀납Wax 1010 1010 폴리솔베이트60Polysorbate 60 1.51.5 1.51.5 피이지 60 경화피마자유Piggy 60 hardened castor oil 22 22 솔비탄세스퀴올레이트Sorbitan sesquioleate 0.50.5 0.50.5 유동파라핀Liquid paraffin 1010 1010 스쿠알란Squalane 55 55 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드
(Estasan: Uniqema(제조사))
Caprylic / capric triglyceride
(Estasan: Uniqema (manufacturer))
55 55
글리세린glycerin 55 55 부틸렌글리콜Butylene glycol 33 33 프로필렌글리콜Propylene glycol 33 33 트리에탄올아민Triethanolamine 0.20.2 0.20.2 정제수Purified water 잔량Balance 잔량Balance

[시험예 7] 인체피부를 대상으로 한 피부주름 개선 효과[Test Example 7] Effect of improving skin wrinkles on human skin

30-50세의 안면주름이 있는 시험대상자 40명을 대상으로 하여 피검자의 안면 좌부에는 실시예 2를, 우부에는 비교예 1을 3개월간 사용하게 한 후 이들의 피부주름 개선 효과를 비교평가하였다. 크림사용 이전의 안면 양쪽부의 피부 상태를 측정해 놓은 다음 크림사용 3개월 후 동일 부위를 재측정하였다. 24℃, 상대습도 40%의 항온항습실에서 눈꼬리 부위의 주름을 레플리카(replica)로 떠서 비시오메타 시스템(Visiometer system; C+K사)으로 피부주름을 측정하였다. 피부주름의 변화량은 하기 수학식 1에 따라 계산하였다.Forty patients who had facial wrinkles of 30-50 years old were used in Example 2 for the left side of the subject and Comparative Example 1 for 3 months for the right side. The skin condition of both sides of the face before the use of the cream was measured, and then the same site was re-measured after 3 months of use of the cream. The skin wrinkles were measured with a Visiometer system (C + K company) by removing the wrinkles of the eye tail region with a replica in a constant temperature and humidity chamber at 24 ° C and a relative humidity of 40%. The amount of change in the skin wrinkles was calculated according to the following formula (1).

Figure 112008059731591-pat00001
Figure 112008059731591-pat00001

상기 수학식 1에서, "Tdi"는 D90에서의 측정부위값이며, "Tdo"는 D0에서의 측정부위 값이다.In the equation (1), "Tdi" is the measured site value at D90 and "Tdo" is the measured site value at D0.

상기 수학식 1에 따라 계산한 결과, 비교예 1을 사용한 부위의 피부주름은6.5±4%(평균±표준편차)의 감소치를 나타낸 반면, 실시예 2를 사용한 부위의 피부주름은 39±11%의 감소치를 보여 우수한 피부주름 개선효과를 나타내었다.As a result of calculation according to Equation (1), skin wrinkles at the site using Comparative Example 1 showed a decrease of 6.5 +/- 4% (mean 占 standard deviation), while skin wrinkles at the site using Example 2 were 39 占 11% Of the total wrinkles.

[시험예 8] 인체에서 피부 탄력 개선 효과[Test Example 8] Effect of improving skin elasticity in human body

30세 이상의 여성 40명을 대상으로 2개조로 나누어, 각 조에 상기 실시예 2 및 비교예 1의 영양크림을 매일 2회씩 12주간 안면에 도포한 후 피부탄력측정기(Cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)를 이용하여 피부 탄력 개선 효과를 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 5에 나타내었다. 표 5의 결과값은 피부탄력측정기의 피부 점탄성(viscoelasticity)의 성질을 의미한다.The nutritional cream of Example 2 and Comparative Example 1 was applied to the face for 2 weeks each for 12 weeks in each group. The skin elasticity meter (Cutometer SEM 575, C + K Electronic Co., Germany). The results are shown in Table 5 below. The results in Table 5 indicate the viscoelasticity of the skin elasticity measuring device.

시험물질Test substance 피부탄력효과Skin elasticity effect 실시예 2Example 2 0.46±0.120.46 + 0.12 비교예 1Comparative Example 1 0.29±0.090.29 ± 0.09

상기 표 5의 결과에서 보여지는 바와 같이, 실시예 1의 여우구슬 추출물이 함유된 실시예 2의 영양크림을 사용한 경우 150% 가량 피부탄력 증진효과를 나타내었다.As shown in the results of Table 5, when the nutritional cream of Example 2 containing the fox bean extract of Example 1 was used, the skin elasticity was improved by about 150%.

상기와 같이, 본 발명에 의한 여우구슬 추출물을 함유한 실시예 2를 사용함으로써 피부 주름 및 피부 탄력을 개선시켜 피부노화를 억제하고 지연시키는데 기여할 수 있음을 확인할 수 있었다.As described above, it was confirmed that the use of Example 2 containing the fox bead extract according to the present invention improves skin wrinkles and skin elasticity, thereby contributing to suppression and delay of skin aging.

[제형예 1] 유연화장수(스킨로션)[Formulation Example 1] Softening lotion (skin lotion)

배합성분Compounding ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 정제수Purified water 잔량Balance 실시예 1의 여우구슬 추출물The fox bead extract of Example 1 0.10.1 부틸렌글리콜Butylene glycol 2.02.0 프로필렌글리콜Propylene glycol 2.02.0 카르복시비닐폴리머Carboxyvinyl polymer 0.10.1 피이지-12 노닐페닐에테르Phage-12 nonylphenyl ether 0.20.2 폴리솔베이트 80Polysorbate 80 0.40.4 에탄올ethanol 10.010.0 트리에탄올아민Triethanolamine 0.10.1

[제형예 2] 영양화장수(밀크로션)[Formulation Example 2] Nutritional lotion (Milk lotion)

배합성분Compounding ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 정제수Purified water 잔량Balance 실시예 1의 여우구슬 추출물 The fox bead extract of Example 1 0.10.1 밀납Wax 4.04.0 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.51.5 솔비탄세스퀴올레이트Sorbitan sesquioleate 1.51.5 유동파라핀Liquid paraffin 0.50.5 Montana 202 (제조사:Seppic)Montana 202 (Manufacturer: Seppic) 5.05.0 글리세린glycerin 3.03.0 부틸렌글리콜Butylene glycol 3.03.0 프로필렌글리콜Propylene glycol 3.03.0 카르복시비닐폴리머Carboxyvinyl polymer 0.10.1 트리에탄올아민Triethanolamine 0.20.2

[제형예 3] 마사지크림[Formulation Example 3] Massage cream

배합성분Compounding ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 정제수Purified water 잔량Balance 실시예 1의 여우구슬 추출물The fox bead extract of Example 1 0.10.1 밀납Wax 10.010.0 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.51.5 피이지 60 경화피마자유Piggy 60 hardened castor oil 2.02.0 솔비탄세스퀴올레이트Sorbitan sesquioleate 0.80.8 유동파라핀Liquid paraffin 40.040.0 스쿠알란Squalane 5.05.0 Montana 202 (제조사:Seppic)Montana 202 (Manufacturer: Seppic) 4.04.0 글리세린glycerin 5.05.0 부틸렌글리콜Butylene glycol 3.03.0 프로필렌글리콜Propylene glycol 3.03.0 트리에탄올아민Triethanolamine 0.20.2

[제형예 4] 팩[Formulation Example 4] Pack

배합성분Compounding ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 정제수Purified water 잔량Balance 실시예 1의 여우구슬 추출물The fox bead extract of Example 1 0.10.1 폴리비닐알콜Polyvinyl alcohol 13.013.0 소듐카르복시메틸셀룰로오스Sodium carboxymethylcellulose 0.20.2 글리세린glycerin 5.05.0 알란토인Allantoin 0.10.1 에탄올ethanol 6.06.0 피이지-12 노닐페닐에테르Phage-12 nonylphenyl ether 0.30.3 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 0.30.3

도 1은 실시예 1의 여우구슬 추출물의 활성산소 제거 활성을 보여주는 그래프이다.FIG. 1 is a graph showing the active oxygen elimination activity of the fox bead extract of Example 1. FIG.

도 2는 실시예 1의 여우구슬 추출물의 콜라겐 생성량을 측정한 그래프이다.FIG. 2 is a graph showing the amount of collagen production of the fox bead extract of Example 1. FIG.

도 3은 실시예 1의 여우구슬 추출물의 MMP-1 생합성 저해 효과를 측정한 그래프이다.FIG. 3 is a graph showing the effect of the extract of fox marbles of Example 1 on the inhibition of MMP-1 biosynthesis. FIG.

Claims (5)

여우구슬의 70% 에탄올 수용액 추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화용 화장료 조성물.An anti-aging cosmetic composition comprising 70% ethanol aqueous solution of fox beads as an active ingredient. 여우구슬의 70% 에탄올 수용액 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 화장료 조성물.An antioxidant cosmetic composition comprising 70% ethanol aqueous solution of fox beads as an active ingredient. 여우구슬의 70% 에탄올 수용액 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물.A cosmetic composition for improving skin wrinkles containing 70% ethanol aqueous solution of fox beads as an active ingredient. 제 1항 내지 제 3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 조성물 총 중량에 대하여 상기 여우구슬의 70% 에탄올 수용액 추출물을 0.001~10 중량%로 함유함을 특징으로 하는 화장료 조성물.4. The cosmetic composition according to any one of claims 1 to 3, wherein the cosmetic composition comprises 0.001 to 10% by weight of a 70% ethanol aqueous solution extract of the fox beads based on the total weight of the composition. 제 1항 내지 제 3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 바디로션, 바디크림, 바디오일 및 바디에센스로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가지는 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물.The cosmetic composition according to any one of claims 1 to 3, wherein the cosmetic composition is at least one selected from the group consisting of softening agents, convergent lotion, nutritional lotion, nutritional cream, massage cream, essence, eye cream, eye essence, cleansing cream, cleansing foam, Wherein the cosmetic composition has one of the formulations selected from the group consisting of a powder, a powder, a body lotion, a body cream, a body oil, and a body essence.
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