KR101110301B1 - Whitening cosmetics composition containing the sorbaria sorbifolia var. stellipila extract - Google Patents

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Abstract

본 발명은 쉬땅나무(Sorbaria sorbifolia var. stellipila) 추출물을 포함하는 피부미백용 화장료 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a cosmetic composition for skin whitening comprising Sorbaria sorbifolia var. Stellipila extract.

본 발명에 의하면 쉬땅나무(Sorbaria sorbifolia var. stellipila) 추출물은 멜라닌 생성억제 활성 및 피부 미백작용을 동시에 가지고 있으므로, 쉬땅나무 추출물은 각종 기능성 화장료로서 유용하다.According to the present invention, since the extract of Sorbaria sorbifolia var. Stellipila has melanin production inhibitory activity and skin whitening effect at the same time, the extract of shit tree is useful as various functional cosmetics.

쉬땅나무(Sorbaria sorbifolia var. stellipila), 멜라닌 생성억제, 피부 미백 Sorbaria sorbifolia var.stellipila, melanin production inhibitory skin whitening

Description

쉬땅나무 추출물을 포함하는 피부미백용 화장료 조성물 {Whitening cosmetics composition containing the sorbaria sorbifolia var. stellipila extract}Whitening cosmetics composition containing the sorbaria sorbifolia var. stellipila extract}

본 발명은 쉬땅나무(Sorbaria sorbifolia var. stellipila) 추출물을 포함하는 피부미백용 화장료 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a cosmetic composition for skin whitening comprising Sorbaria sorbifolia var. Stellipila extract.

인체에 있어서 피부는 외부환경으로부터 생체를 보호하는 보호막의 기능을 하는 기관으로서, 인체 내의 생체성분 즉, 물이나 전해질 등의 손실을 방지하는 동시에 외부로부터 유해물질이 인체 내로 침입하지 못하도록 하는 역할을 한다.In the human body, the skin acts as a protective film to protect the living body from the external environment. It prevents the loss of biological components such as water or electrolytes and prevents harmful substances from entering the body. .

인간의 피부는 노화 과정에서 다양한 물리ㅇ화학적인 변화가 일어나며, 그 원인으로는 크게 내적인 노화(intrinsic aging)와 광노화(photo-aging)로 구분되며 이에 관한 연구가 활발히 이루어져 왔다. 즉, 자외선, 스트레스, 질병상태, 환경인자, 상처, 나이가 들어감에 따른 자유라디칼의 활성화 등으로부터 야기될 수 있으며, 이런 상태가 심화될 경우 생체 내에 존재하는 항산화 방어망을 파괴하고, 세포 및 조직을 손상시켜 성인병 및 노화를 촉진하게 된다. 보다 구체적으로는 피부의 주요 구성물질인 지질, 단백질, 다당류 및 핵산 등이 산화되어 피부세포 및 조직이 파괴되고, 결국 피부노화 현상이 생겨나는 것이다. 특히 단백질의 산화는 피부의 결합조직인 콜라겐, 히아루론산, 엘라스틴, 프로테오글리칸, 피브로넥틴 등이 절단되어 심한 과다 염증반응과 피부의 탄력에 지장을 주게 되고 이것이 더 심해질 경우 DNA의 변이에 의해 돌연변이, 암의 유발, 면역기능 저하의 사태에 이르게 된다. 그러므로 신체의 대사 과정 중 발생하는 자유라디칼이나 자외선 조사, 염증반응에 의해 매개되는 자유라디칼을 소거하여 세포막을 보호하고, 또 이미 손상 받은 세포는 활발한 신진대사에 의해 재생화 시켜서 세포를 증식시켜야 피부는 빠르게 회복되고 건강한 피부를 유지할 수 있다. Human skin has various physicochemical changes during the aging process, and its causes are classified into internal aging and photo-aging. That is, it may be caused by ultraviolet rays, stress, disease state, environmental factors, wounds, activation of free radicals with age, and when this condition is intensified, it destroys the antioxidant defense network existing in the living body and destroys cells and tissues. Damage to promote adult disease and aging. More specifically, lipids, proteins, polysaccharides, and nucleic acids, which are major constituents of the skin, are oxidized to destroy skin cells and tissues, resulting in skin aging. In particular, the oxidation of protein is caused by the breakdown of collagen, hyaluronic acid, elastin, proteoglycan, and fibronectin, which are the skin's connective tissues, resulting in severe excessive inflammatory reactions and disruption of skin elasticity. This leads to a situation of reduced immune function. Therefore, cell membranes are protected by eliminating free radicals generated by the body's metabolic processes, irradiated with ultraviolet radiation or inflammatory reactions.Also, damaged cells must be regenerated by active metabolism to proliferate the skin. You can recover quickly and maintain healthy skin.

2001년 7월 식품의약품안전청에서는 기능성 화장품 기준 및 시험방법 등을 고시한 바 있는데, 미백에 도움을 주는 물질로는 닥나무 추출물, 유용성 감초추출물을 고시성분으로 등재하였다. [화장품 관련 정책 종합설명회, 식품의약안전청, pp243-250, 2003] 이외에도 녹차, 상백피, 빈랑자, 황금, 산삼 등의 천연물은 화장품의 활성성분으로 사용하고 있다. [김영중, 천연물연구의 최근동향, 대한화장품학회지, 29, pp1-15, 2003; 안덕균, 피부미용의 한의학적 이론, 대한화장품학회지, 29, pp79-87, 2003] 이처럼 최근에 화장품 소재로 많은 천연물들이 연구되고 있으며, 특히 한의학에서 사용되는 한약재들을 응용한 한방화장품이 다양하게 연구 및 생산되고 있다. 한방재로 사용되고 있는 생약, 야채, 과일, 꽃 등의 식물 추출물 가운데 안정성이 뛰어난 화장품원료를 찾고자 하는 노력이 계속 이루 어져 왔다. In July 2001, the Korea Food and Drug Administration (KFDA) issued a list of functional cosmetic standards and test methods. The substances that help whitening are listed as the ingredient of the extract of mulberry and oil-soluble licorice extract. In addition to [General Information on Cosmetics Policy, Korea Food and Drug Administration, pp243-250, 2003], natural products such as green tea, baekbaekpi, betel nut, gold and wild ginseng are used as active ingredients of cosmetics. [Kim Young-Joong, Recent Trends in Natural Products Research, Journal of the Korean Society of Cosmetic Products, 29, pp1-15, 2003; Ahn, Deok-Kyun, Korean Theory of Skin Beauty, Journal of the Korean Cosmetic Society, 29, pp79-87, 2003] As such, many natural products have been studied as cosmetics, and various researches and productions of herbal cosmetics using herbal medicines used in oriental medicine It is becoming. Efforts have been made to find cosmetic ingredients with excellent stability among plant extracts such as herbal medicines, vegetables, fruits, and flowers that are used as herbal medicines.

본 발명의 발명자들은 쉬땅나무 추출물이 멜라닌 생성억제 활성이 우수하고, 피부 미백효과가 있음을 확인함으로써, 본 발명을 완성하게 되었다. 즉, 쉬땅나무 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물은 본 발명을 통해 처음으로 보고된다.The inventors of the present invention have completed the present invention by confirming that the bark tree extract has an excellent melanin production inhibitory activity and has a skin whitening effect. That is, the cosmetic composition for skin whitening comprising the bark tree extract is reported for the first time through the present invention.

본 발명의 목적은 여러 천연물 중 쉬땅나무 추출물의 천연물로부터 제조된 추출물을 선택하여, 화장료의 원료로서의 효능을 확인하고, 그 사용 방법을 개발하여, 이 원료를 사용함으로써 소정의 기능성을 갖는 화장료를 제조할 수 있는 방법을 제공하는 것이다.An object of the present invention is to select an extract prepared from the natural product of the bark tree extract of various natural products, to confirm the efficacy as a raw material of the cosmetic, to develop a method of using the same, to prepare a cosmetic having a predetermined functionality by using this raw material To provide a way to do this.

즉, 본 발명의 목적은 피부 화장료에 적용 가능하고 화장료에 함유 시 멜라닌 생성억제 활성 및 피부 미백효과를 나타내는 천연 추출물을 제공하는 것이다.That is, an object of the present invention is to provide a natural extract that is applicable to skin cosmetics and exhibits melanin production inhibitory activity and skin whitening effect when contained in cosmetics.

본 발명의 과제해결을 위하여, 쉬땅나무(Sorbaria sorbifolia var. stellipila) 추출물을 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물을 그 특징으로 한다.In order to solve the problem of the present invention, it is characterized by a cosmetic composition for skin whitening containing Sorbaria sorbifolia var. Stellipila extract.

쉬땅나무 추출물은 멜라닌 생성억제 활성 및 피부 미백효과가 우수하다.Barberry extract has excellent melanin inhibitory activity and skin whitening effect.

본 발명의 화장료 조성물은 쉬땅나무 추출물을 함유하고 있으므로, 피부 미백용 화장료 조성물로 유용한 효과를 가지고 있다.Since the cosmetic composition of the present invention contains the bark tree extract, it has a useful effect as a cosmetic composition for skin whitening.

본 발명의 화장료 조성물은 화장수, 젤, 수용성 리퀴드, 크림, 에센스, 수중유(O/W) 또는 유중수(W/O)형의 에멀전, 연고 등의 다양한 제형으로 제조되어, 피부 미백을 위한 기능성 화장품으로 적용되는 효과를 가지고 있다.The cosmetic composition of the present invention is prepared in various formulations, such as lotion, gel, water-soluble liquid, cream, essence, oil-in-water (O / W) or water-in-oil (W / O) type emulsion, ointment, functional for skin whitening Has the effect of applying to cosmetics.

이와 같은 본 발명을 보다 구체적으로 설명하면 하기와 같다.The present invention will be described in more detail as follows.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 쉬땅나무 추출물을 주요 활성 성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다.The cosmetic composition according to the present invention is characterized in that it contains chitin extract as the main active ingredient.

천연 재료는 피부에 부작용이 적을 뿐 아니라, 최근 천연 재료를 이용한 화장품에 대한 소비자들의 호응이 높아짐에 따라 화장품 원료로서 개발가치가 한층 늘어나고 있다. 이에, 본 발명자들은 여러 천연물들에 있어서 화장품으로의 응용 가능성을 연구한 결과, 쉬땅나무를 선정하고 이로부터 추출물을 제조하여, 피부 미백 효과 실험을 통해 확인하여, 화장품 원료로서의 효능을 기대할 수 있다는 것을 발견하게 되었다.Natural ingredients have less side effects on the skin, and as the consumer's response to cosmetics using natural ingredients has increased recently, the development value of cosmetics as a raw material for cosmetics is increasing. Thus, the present inventors have studied the possibility of applying to cosmetics in various natural products, select the bark tree and manufacture the extract from it, confirm through the skin whitening effect experiment, it can be expected that the efficacy as a cosmetic raw material Found out.

쉬땅나무(Sorbaria sorbifolia var. stellipila)는 장미과에 속하는 낙엽 활엽 소교목으로서 다른 이름으로는 개쉬땅나무, 쉬나무, 밥쉬나무, 진지매 등으로 불리며 한약명으로는 진주매(珍珠梅), 동북진주매(東北珍珠梅) 등으로 불리며 꽃이 삭 모양이 수수이삭 같아서 쉬땅나무라고 불린다. 깊은 산의 산골짜기나 냇가에서 소군락을 이루며 자생하며 이른 봄 가장 빨리 싹을 틔우는 목본류 중의 하나이며 꿀이 많아 밀원식물로도 좋으며 초여름 흰꽃송이가 무리지어 가지 끝에 피는 모습이 아름다워 관상용, 조경용으로 가치가 매우 좋으며 이른 봄 새로 돋아나는 어린 순을 나물로 식용한다. 줄기, 열매이삭, 뿌리, 줄기 껍질을 모두 약으로 쓸 수 있으며 주로 줄기와 경피(莖皮)를 진주매(珍珠梅)라 하여 약용하며 가을이나 겨울에 채취하여 햇볕에 말려서 쓴다. 성분으로는 잎에는 솔비포린(sorbifolin; scutellarein-7-o-xylorhamnoside), 꽃에는 캠프게롤-3-아라보퓨라노사이드(kaempgerol-3-arabofuranoside), 아스트라가린(astragalin), 퀘르세틴-3-글루쿠로나이드(quercetin-3-glucuronide), 이소람네틴-3-글루코사이드(isorhamnetin-3-glucoside), 스쿠텔라레인(scutellarein), 클로로겐산(chlorogenic acid), 아르부틴(arbutin), 스쿠텔라레인-7-o-α-1-람노사이드(scutellarein-7-o-α-l-rhamnoside) 및 플라보노이드(flavonoid) 화합물이 함유되어 있다. 약리작용으로는 활혈(活血), 거어(祛瘀), 소종(消腫), 지통(止痛)의 효능이 있어 골절, 타박상, 염좌상, 풍습성관절염, 골다공증 및 뼈를 튼튼히 하는데 쓰며 울혈을 풀어주는 작용이 있어 동통에 따른 통증 완화 효과 등이 있는 것으로 알려져 있다. 쉬땅나무의 꽃은 풍치, 구충에 약으로 사용되어 왔다.Sorbaria sorbifolia var.stellipila is a deciduous broad-leaved arborescent belonging to the family Rosaceae, and other names are gash bark, walnut tree, rice buckthorn, jinjimae, etc. It is called 東北 珍珠 梅, and it is called Sue Tak because of its flower-like shape. It grows in small mountain valleys and streams, and is one of the earliest flowering trees in the early spring. It is good for wheat plants because it has a lot of honey, and it is beautiful for blooming in the early summer. It is very good and eats new sprouting young sprouts in early spring. Stem, fruit ear, root, stem bark all can be used as medicine, mainly stem and percutaneous (莖 皮) is called medicinal (珍珠 梅) medicinal and collected in the autumn or winter to write in the sun. Ingredients include sorbifolin (scutellarein-7-o-xylorhamnoside) in leaves, kaempgerol-3-arabofuranoside in flowers, astragarin, quercetin-3-glucoin Ronide (quercetin-3-glucuronide), isorhamnetin-3-glucoside, scoutellarein, chlorogenic acid, arbutin, scutellalane-7- o-α-1-rhamnoside and flavonoid compounds are contained. Pharmacological action of the blood, (활), larvae, small sarcoma, jitong (止痛) has the efficacy of fractures, bruises, sprains, spontaneous arthritis, osteoporosis and bones are used to strengthen the congestion It is known to have the effect of relieving pain due to pain. The flowers of the bark tree have been used as medicine for flavor and insect repellent.

본 발명에서 화장료 원료로 사용하는 쉬땅나무 추출물은 쉬땅나무 전초로부터 침출, 전출하여 얻은 침출액, 또는 그 침출액을 다시 일부 또는 전부 농축하여 얻은 농축물, 또는 다시 그 농축물을 건조시켜 제조한 추출 엑기스 및 추출액 중에 함유되고 있는 주효과를 발휘하는 화학물질 그 자체를 포함한다.The bark tree extract used as a cosmetic raw material in the present invention is a leachate obtained by leaching from the bark tree outpost, or a concentrate obtained by partially or totally concentrating the leachate, or an extract extracted by drying the concentrate again. It contains the chemical substance itself which exhibits the main effect contained in the extract.

한편, 본 발명에 따른 쉬땅나무 추출물의 함량은 화장료 조성물 전체에 대하여 동결건조중량 기준 0.001 내지 30.0 중량% 범위가 바람직하다. 상기 추출물의 함량이 0.001 중량% 미만인 경우에는 피부개선 효과가 거의 없으며, 30.0 중량%를 초과하는 경우에는 함유량 증가에 대한 효과 증대 정도가 미미하여 경제적이지 못하기 때문이다.On the other hand, the content of the bark tree extract according to the present invention is preferably in the range of 0.001 to 30.0% by weight based on the lyophilized weight relative to the entire cosmetic composition. If the content of the extract is less than 0.001% by weight, there is almost no skin improvement effect, and when the content of the extract exceeds 30.0% by weight, it is not economical because the degree of increase of the effect on the content is insignificant.

또한, 본 발명에 따른 쉬땅나무 추출물을 화장료 조성성분으로 사용함에 있어서는 동결건조된 분말 형태로는 물론이고, 물 또는 통상의 유기용매에 분산 또는 용해된 액체 형태로도 사용될 수 있다. 액체 형태로 화장료 조성물에 포함되더라도 동결건조중량 기준으로 0.001 내지 30.0 중량% 범위내로 그 사용량을 조절하여 사용할 수 있다.In addition, when using the extract of the barberry tree according to the present invention as a cosmetic composition, it can be used in the form of lyophilized powder, as well as in the form of a liquid dispersed or dissolved in water or a conventional organic solvent. Even if included in the cosmetic composition in a liquid form can be used by adjusting the amount used within the range of 0.001 to 30.0% by weight on the basis of lyophilized weight.

또한 본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기의 추출물 외에 본 발명이 목적으로 하는 주효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 바람직하게는 주효과에 상승효과를 줄 수 있는 다른 성분 예를 들면, 녹차 추출물, 닥나무 추출물, 감초추출물, 상백피 추출물, 빈랑자 추출물, 황금 추출물, 산삼 추출물 등의 천연물을 함유하는 것도 무방하다.In addition, the cosmetic composition according to the present invention, in addition to the above extract, other ingredients that can give a synergistic effect to the main effect, preferably within the range that does not impair the main effect for the purpose of the present invention, for example, green tea extract, mulberry extract It may contain natural products such as licorice extract, lettuce extract, betel nut extract, golden extract, and wild ginseng extract.

또한 본 발명에 따른 쉬땅나무 추출물은 건조된 쉬땅나무의 전초를 적절한 추출용매를 사용하여 추출한 것이다. 본 발명에서 사용되는 추출용매는 정제수 및 통상의 유기용매로부터 선택된 단일 용매 또는 2종 이상의 혼합용매를 사용할 수 있다. 구체적으로는 정제수, 탄소수 1 내지 6의 알콜, 글리세린, 탄소수 2 내지 6의 알킬렌글리콜, 탄소수 1 내지 6의 알칸, 탄소수 1 내지 6의 할로겐화탄화수소, 탄소수 2 내지 6의 알킬 알카노에이트 및 그의 혼합물로부터 선택된 추출용매를 사용할 수 있다. 좀 더 구체적으로 예시하면 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸렌글리콜, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 디클로로에탄, 헥산, 에틸아세테이트 및 그의 혼합물로부터 선택된 추출용매를 사용할 수 있다. 쉬땅나무의 전초를 상기 추출용매로 추출한 후에는 냉침 및 여과하고, 그 여액을 50℃ 이하에서 감압농축하고 감압농축물을 동결건조하여 본 발명에 따른 쉬땅나무 추출물을 분말 형태로 얻을 수 있다. 필요하다면, 상기 동결건조한 쉬땅나무 추출물 분말을 물 또는 통상의 유기용매에 분산 또는 용해시켜 액체 형태로 얻을 수도 있다.In addition, the bark tree extract according to the present invention is to extract the dried starch tree outpost using an appropriate extraction solvent. As the extraction solvent used in the present invention, a single solvent or two or more mixed solvents selected from purified water and a conventional organic solvent may be used. Specifically, purified water, alcohols having 1 to 6 carbon atoms, glycerin, alkylene glycols having 2 to 6 carbon atoms, alkanes having 1 to 6 carbon atoms, halogenated hydrocarbons having 1 to 6 carbon atoms, alkyl alkanoates having 2 to 6 carbon atoms, and mixtures thereof Extraction solvents selected from can be used. More specifically, an extraction solvent selected from purified water, methanol, ethanol, glycerin, ethylene glycol, butylene glycol, propylene glycol, dichloromethane, dichloroethane, hexane, ethyl acetate, and mixtures thereof may be used. After extracting the starch of the bark tree with the extraction solvent, and cold extraction and filtration, the filtrate is concentrated under reduced pressure at 50 ℃ or less and the freeze-dried concentrate under reduced pressure to obtain the bark tree extract according to the present invention in powder form. If necessary, the lyophilized barberry extract powder may be dispersed or dissolved in water or a conventional organic solvent to obtain a liquid form.

본 발명의 화장료 조성물은 수성, 수성-알콜성 또는 오일성 용액, 수중유 또는 유증수 또는 다중 에멀전, 수성 또는 오일성 겔, 액체, 페이스트성 또는 고체 무수 생성물, 소구체를 사용한 수성상에서의 오일분산물의 형태일 수 있으며 보다 바람직하게는 이온성 및/또는 비이온성 형태의 지질 소포체의 형태일 수 있다.The cosmetic composition of the present invention is in the form of an aqueous, aqueous-alcoholic or oily solution, oil-in-water or oily water or multi-emulsion, aqueous or oily gel, liquid, paste or solid anhydrous product, oil dispersion in aqueous phase using globules. And more preferably in the form of lipid endoplasmic reticulum in ionic and / or nonionic form.

본 발명의 화장료 조성물은 다소 유체일 수 있으며, 백색 또는 유색크림, 연고, 밀크로션, 유액(serum), 에센스, 페이스트 또는 무스의 외관을 가질 수 있다. 이는 선택적으로 에어로졸 형태로 피부에 적용될 수도 있고, 고체 형태 예컨대, 스틱의 형태일 수도 있다. 이는 피부용 케어 제품 및/또는 메이크업 제품으로서 사용될 수도 있다.The cosmetic composition of the present invention may be somewhat fluid and may have the appearance of white or colored cream, ointment, milk lotion, serum, essence, paste or mousse. It may optionally be applied to the skin in the form of an aerosol or may be in the form of a solid, such as a stick. It may be used as a skin care product and / or makeup product.

공지된 방식으로 본 발명에 따른 조성물은 또한 화장 분야에서 통상적인 보 조제, 예컨대 친수성 또는 친지성 겔화제, 친수성 또는 친지성 활성제, 보존제, 항산화제, 용매, 방향제, 충전제, 차단제, 안료, 흡취제 및 염료를 함유할 수 있다. 이들 다양한 보조제의 양은 당해 분야에서 통상적으로 사용되는 양이며, 예컨대 화장료 조성물 총중량에 대해 0.01 내지 20 중량% 범위이다. 그 성질에 따라 이러한 보조제는 지방상, 수성상, 지질 소포체 및/또는 나노 입자에 도입될 수 있다. 어떠한 경우라도 보조제 및 그 비율은 본 발명에 따른 화장료 조성물의 바람직한 성질에 악영향을 미치지 않도록 선택될 것이다.In a known manner the compositions according to the invention can also be used as conventional auxiliaries in the cosmetic field, such as hydrophilic or lipophilic gelling agents, hydrophilic or lipophilic active agents, preservatives, antioxidants, solvents, fragrances, fillers, blockers, pigments, odorants. And dyes. The amounts of these various adjuvants are amounts commonly used in the art, such as in the range of 0.01 to 20% by weight relative to the total weight of the cosmetic composition. Depending on its nature, such adjuvants may be incorporated into the fatty phase, aqueous phase, lipid vesicles and / or nanoparticles. In any case, the adjuvant and its proportions will be chosen so as not to adversely affect the desirable properties of the cosmetic composition according to the invention.

이하, 실시예를 통해 본 발명을 좀 더 구체적으로 설명한다. 단, 이들 실시예는 본 발명의 예시적인 기재일 뿐이며 본 발명의 범위가 이들 실시예에 국한되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. However, these Examples are only illustrative description of the present invention and the scope of the present invention is not limited to these Examples.

[실시예] [Example]

제조예 1. 쉬땅나무의 에탄올 수용액 추출물의 제조Preparation Example 1 Preparation of Ethanol Aqueous Extract of Barberry

세절하여 음건한 쉬땅나무를 95%(V/V) 에탄올 수용액으로 5시간씩 3회 환류추출하고 냉침한 후, 와트만(Whatman) #5 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하여, 쉬땅나무 추출물 분말(쉬땅나무 6.0 g을 기준으로 한 수득율 2.0%)을 얻었다.The dried bark tree was chopped and refluxed three times for 5 hours with 95% (V / V) ethanol solution, and then cooled and filtered through Whatman # 5 filter paper. The filtered extract was concentrated under reduced pressure and freeze-dried at 50 ° C. or lower, thereby obtaining a tree extract powder (yield 2.0% based on 6.0 g of trees).

그리고, 상기에서 얻은 쉬땅나무 추출물 분말을 정제수/부틸렌글리콜이 7/3 부피비를 이루고 있는 혼합용액에 3 중량% 농도로 용해시킨 용액을, 하기 실시예에 서 시료용액으로 사용하였다.In addition, a solution obtained by dissolving the above-obtained Syrup extract powder at a concentration of 3% by weight in a mixed solution of 7/3 volume ratio of purified water / butylene glycol was used as a sample solution in the following example.

제조예 2. 쉬땅나무의 프로필렌글리콜 추출물의 제조Preparation Example 2 Preparation of Propylene Glycol Extract of Barberry

상기 제조예 1과 동일한 방법으로 쉬땅나무 추출물 분말(3.0 g을 기준으로 한 수득율 1.0%)을 제조하되, 추출용매로서 95%(V/V) 에탄올 수용액을 대신하여 프로필렌글리콜을 사용하였다.In the same manner as in Preparation Example 1, the bark tree extract powder (1.0% yield based on 3.0 g) was prepared, but propylene glycol was used in place of the 95% (V / V) ethanol aqueous solution as the extraction solvent.

제조예 3. 쉬땅나무의 에틸아세테이트 추출물의 제조Preparation Example 3 Preparation of Ethyl Acetate Extract of Barberry

상기 제조예 1과 동일한 방법으로 쉬땅나무 추출물 분말(4.5 g을 기준으로 한 수득율 1.5%)을 제조하되, 추출용매로서 95%(V/V) 에탄올 수용액을 대신하여 에틸아세테이트를 사용하였다.In the same manner as in Preparation Example 1, the bark tree extract powder (yield 1.5% based on 4.5 g) was prepared, but ethyl acetate was used in place of the 95% (V / V) ethanol aqueous solution as the extraction solvent.

제조예 4. 쉬땅나무의 수 추출물의 제조Preparation Example 4 Preparation of Water Extract of Barberry

상기 제조예 1과 동일한 방법으로 쉬땅나무 추출물 분말(2.1g을 기준으로 한 수득율 0.7%)을 제조하되, 추출용매로서 95%(V/V) 에탄올 수용액을 대신하여 물을 사용하였다.In the same manner as in Preparation Example 1, the bark tree extract powder (a yield of 0.7% based on 2.1 g) was prepared, but water was used instead of the 95% (V / V) ethanol aqueous solution as the extraction solvent.

제조예 5. 쉬땅나무의 디클로로메탄 추출물의 제조Preparation Example 5 Preparation of Dichloromethane Extract of Barberry

상기 제조예 1과 동일한 방법으로 쉬땅나무 추출물 분말(1.7 g을 기준으로 한 수득율 0.57%)을 제조하되, 추출용매로서 95%(V/V) 에탄올 수용액을 대신하여 디클로로메탄을 사용하였다.In the same manner as in Preparation Example 1, the bark tree extract powder (yield 0.57% based on 1.7 g) was prepared, but dichloromethane was used as a solvent instead of 95% (V / V) ethanol solution.

제조예 6. 쉬땅나무의 헥산 추출물의 제조Preparation Example 6 Preparation of Hexane Extract of Barberry

상기 제조예 1과 동일한 방법으로 쉬땅나무 추출물 분말(4.2 g을 기준으로 한 수득율 1.4%)을 제조하되, 추출용매로서 95%(V/V) 에탄올 수용액을 대신하여 헥산을 사용하였다.In the same manner as in Preparation Example 1, the bark tree extract powder (yield 1.4% based on 4.2 g) was prepared, but hexane was used as a solvent instead of 95% (V / V) ethanol aqueous solution.

실시예 1. NBT법을 이용한 항산화 효과Example 1 Antioxidant Effect Using NBT Method

상기 제조예 1에서 수득한 쉬땅나무 추출물의 항산화 효과를 측정하기 위해 실험실 조건에서 레티놀과 BHT와 같은 항산화제를 비교샘플로 하여, NBT법에 의해 항산화 활성을 측정하였다. 항산화 효과를 측정하기 위해서 크산틴과 크산틴옥시다제에 의해 생성되는 활성산소를 NBT법에 의해 측정하고, 피검물질이 활성산소를 제거하는 효과, 즉 활성산소 소거효과를 평가하였다. 크산틴과 크산틴옥시다제에 의해 활성산소를 생성시키고, 이 활성산소가 니트로 블루 테트라졸리움(Nitro Blue Tetrazolium ; NBT)과 반응하여 생성되는 청색을 파장 560 nm에서 측정하는 것으로 활성산소 소거율을 측정하였다.In order to measure the antioxidant effect of the bark tree extract obtained in Preparation Example 1, the antioxidant samples such as retinol and BHT were compared in a laboratory condition, and the antioxidant activity was measured by NBT method. In order to measure the antioxidant effect, the active oxygen produced by xanthine and xanthine oxidase was measured by NBT method, and the effect of removing the active oxygen by the test substance, that is, the active oxygen scavenging effect, was evaluated. Free radicals are generated by xanthine and xanthine oxidase, and the active oxygen scavenging rate is measured by measuring the blue color produced by reaction of the reactive oxygen with Nitro Blue Tetrazolium (NBT) at a wavelength of 560 nm. It was.

NBT법에 의한 항산화 활성 측정방법을 보다 구체적으로 설명하면 하기와 같다. The antioxidant activity measurement method by the NBT method will be described in more detail.

바이엘병에 0.05 M 탄산나트륨 2.4 mL, 3 mM 크산틴 용액 0.1 mL, 3 mM EDTA 용액 0.1 mL, BSA 용액 0.1 mL, 및 0.72 mM NBT 용액 0.1 mL를 가하고, 560 nm에서 의 흡광도(So)를 측정하였다.2.4 mL of 0.05 M sodium carbonate, 0.1 mL of 3 mM xanthine solution, 0.1 mL of 3 mM EDTA solution, 0.1 mL of BSA solution, and 0.1 mL of 0.72 mM NBT solution were added to a Bayer bottle, and the absorbance (S o ) at 560 nm was measured. It was.

여기에 시료용액으로서 상기 제조예 1에서 수득한 쉬땅나무 추출물, 레티놀 및 BHT를 각각 0.1 mL씩 첨가하고 25℃에서 10분간 방치하였다. 그런 다음, 크산틴 옥시다제 용액 0.1 mL를 가하고 빠른 속도로 교반한 후에 25℃에서 20분간의 배양하였다. 6 mM 염화구리(Ⅱ) 용액 0.1 mL를 가하여 반응을 정지시키고, 560 nm에서의 흡광도(St)를 측정하였다.0.1 mL of each of the barberry extract, retinol and BHT obtained in Preparation Example 1 was added thereto as a sample solution, and the mixture was left at 25 ° C. for 10 minutes. Then, 0.1 mL of xanthine oxidase solution was added and stirred at high speed, followed by incubation for 20 minutes at 25 ° C. 0.1 mL of 6 mM copper (II) chloride solution was added to stop the reaction, and the absorbance (S t ) at 560 nm was measured.

공시험용액은 시료용액 대신에 증류수를 사용하였을 뿐이고, 나머지 실험과정은 상기와 동일하게 실시한 후에 560 nm에서의 흡광도(Bt)를 측정하였다.For the blank test solution, only distilled water was used instead of the sample solution. The rest of the experiment was performed in the same manner as described above, and then the absorbance at 560 nm (B t ) was measured.

시료용액의 블랭크(Blank)는 크산틴 옥시다제 용액 대신에 증류수 0.1 mL를 사용하였을 뿐이고, 나머지 실험과정은 상기와 동일하게 실시한 후에 560 nm에서의 흡광도(Bo)를 측정하였다.Merely a 0.1 mL distilled water in place of the blank (Blank) is a xanthine oxidase solution of the sample solution was used, and the remaining course of the experiment was measured and the absorbance (B o) at 560 nm after performing in the same manner as described above.

상기에서 측정한 흡광도 값을 하기 수학식 1에 대입하여 NBT법에 의한 항산화 활성을 산출하였고, 그 결과는 하기 표 1에 나타내었다.Substituting the absorbance value measured in the above Equation 1 to calculate the antioxidant activity by the NBT method, the results are shown in Table 1 below.

Figure 112009080320343-pat00001
Figure 112009080320343-pat00001

상기 수학식 1에서, St는 시료용액을 효소 반응한 후에 측정한 흡광도 값을 나타내고, Bt는 공시험용액을 효소 반응한 후에 측정한 흡광도 값을 나타내고, So는 시료 용액에 효소를 첨가하기 이전에 측정한 흡광도 값을 나타내고, Bo는 공시험용액에 효소를 첨가하기 이전에 측정한 흡광도 값을 나타낸다.In Equation 1, S t represents the absorbance value measured after the enzymatic reaction of the sample solution, B t represents the absorbance value measured after the enzymatic reaction of the blank test solution, and S o is added to the sample solution. The absorbance value measured previously is shown, and B o represents the absorbance value measured before adding the enzyme to the blank test solution.

시료명Sample Name 항산화효과(%)Antioxidative effect(%) 쉬땅나무 추출물 (제조예 1)Barberry Extract (Manufacturing Example 1) 9292 레티놀Retinol 9191 BHTBHT 8989

상기 표 1의 결과에 의하면, 시료용액 모두에서 우수한 항산화 효과를 확인할 수 있었고, 특히 쉬땅나무 추출물은 레티놀 및 BHT보다 동등 내지는 다소 향상된 항산화 효과가 있음이 확인되었다.According to the results of Table 1, it was confirmed that the excellent antioxidant effect in all of the sample solution, in particular, the tree extract was found to have an equivalent or somewhat improved antioxidant effect than retinol and BHT.

실시예 2. DPPH법을 이용한 항산화 효과Example 2 Antioxidant Effect Using DPPH Method

상기 제조예 1에서 수득한 쉬땅나무 추출물의 항산화 효과를 측정하기 위해 실험실 조건에서 녹차추출물과 비타민 E와 같은 항산화제를 비교 샘플로 하여 DPPH법을 이용, 항산화 활성을 측정하였다. DPPH법은 DPPH(2,2-Di(4-tert-octylphenyl)-1-picrylhydrazyl) 자유라디칼 소거활성에 의하여 항산화 활성을 측정하였다. 피검물질에 의해 DPPH가 환원되어 흡광도가 감소하는 정도를 공시험액의 흡광도와 비교하여 파장 560 nm에서 자유라디칼 소거율을 측정하였다. 사용한 시약으로서는 DPPH 자유라디칼 (Aldrich Chem. Co., MW=618.76) 0.1 mM 용액 61.88 mg을 메탄올에 용해하여 100 mL가 되도록 하였다.In order to measure the antioxidant effect of the bark tree extract obtained in Preparation Example 1, the antioxidant activity was measured using a DPPH method using a green tea extract and an antioxidant such as vitamin E as a comparative sample under laboratory conditions. In the DPPH method, antioxidant activity was measured by DPPH (2,2-Di (4-tert-octylphenyl) -1-picrylhydrazyl) free radical scavenging activity. The free radical scavenging rate was measured at a wavelength of 560 nm by comparing the degree of DPPH reduction by the test substance to the decrease in absorbance. As the reagent used, 61.88 mg of a 0.1 mM solution of DPPH free radicals (Aldrich Chem. Co., MW = 618.76) was dissolved in methanol to make 100 mL.

DPPH법에 의한 항산화 활성 측정방법을 보다 구체적으로 설명하면 하기와 같다. The antioxidant activity measurement method by the DPPH method will be described in more detail.

96-웰 플레이트에 0.1 mM DPPH 용액 0.15 mL 및 시료용액으로서 상기 제조예 1에서 수득한 쉬땅나무 추출물, 녹차추출물 및 비타민 E를 각각 0.15 mL를 가하여 빨리 교반하고 25℃에서 10분간의 배양한 후에 560 nm에서의 흡광도(St)를 측정하였다.0.15 mL of 0.1 mM DPPH solution and sample solution, 0.15 mL, respectively, were added to the 96-well plate, and the solution was quickly stirred. Absorbance (S t ) at nm was measured.

공시험용액은 시료용액 대신에 증류수를 사용하였을 뿐이고, 나머지 실험과정은 상기와 동일하게 실시한 후에 560 nm에서의 흡광도(Bt)를 측정하였다.For the blank test solution, only distilled water was used instead of the sample solution. The rest of the experiment was performed in the same manner as described above, and then the absorbance at 560 nm (B t ) was measured.

시료용액의 블랭크(Blank)는 DPPH 용액 대신에 메탄올 0.15 mL를 사용하였을 뿐이고, 나머지 실험과정은 상기와 동일하게 실시한 후에 560 nm에서의 흡광도(Bo)를 측정하였다.Merely blank (Blank) of the sample solution was used in place of methanol, 0.15 mL solution of DPPH, and the remaining course of the experiment was measured and the absorbance (B o) at 560 nm after performing in the same manner as described above.

상기에서 측정한 흡광도 값을 하기 수학식 2에 대입하여 DPPH법에 의한 항산화 활성을 산출하였고, 그 결과는 하기 표 2에 나타내었다.Substituting the absorbance value measured in the above Equation 2 to calculate the antioxidant activity by the DPPH method, the results are shown in Table 2 below.

Figure 112009080320343-pat00002
Figure 112009080320343-pat00002

상기 수학식 2에서, St는 시료용액을 자유라디칼 소거한 후에 측정한 흡광도 값을 나타내고, Bt는 공시험용액을 자유라디칼 소거한 후에 측정한 흡광도 값을 나타내고, So는 시료용액에 자유라디칼을 첨가하기 이전에 측정한 흡광도 값을 나타내고, Bo는 공시험용액에 자유라디칼을 첨가하기 이전에 측정한 흡광도 값을 나타낸다.In Equation 2, S t represents absorbance values measured after free radical scavenging of the sample solution, B t represents absorbance values measured after free radical scavenging of the blank test solution, and S o represents free radicals in the sample solution. The absorbance value measured before the addition of is indicated, and B o represents the absorbance value measured before the addition of free radicals to the blank test solution.

시료명Sample Name 항산화 효과 (%)Antioxidative effect (%) 쉬땅나무 추출물 (제조예 1)Barberry Extract (Manufacturing Example 1) 6767 녹차추출물Green tea extract 3535 비타민 EVitamin E 3333

상기 표 2의 결과에 의하면, 쉬땅나무 추출물은 녹차추출물과 비타민 E 보다 우수한 항산화 효과가 있음이 확인되었다.According to the results of Table 2, it was confirmed that the bark tree extract has an excellent antioxidant effect than the green tea extract and vitamin E.

실시예 3. 자외선조사에 의한 세포독성 완화 효과Example 3. Cytotoxic Alleviation Effect by UV Irradiation

상기 제조예 1에서 수득한 쉬땅나무 추출물의 자외선 조사에 의한 세포독성의 완화효과를 평가하기 위하여 실시하였다. 섬유아세포(fibroblast)를 24-웰 시험 플레이트에 1×105개씩 넣고 24시간 동안 부착시켰다. 각 웰을 PBS로 1회 세척하고 각 웰에 500 uL의 PBS를 넣었다. 이 섬유아세포에 자외선 B(UVB) 램프(Model : F15T8, UV B 15W, Sankyo Dennki사, Japan)를 이용하여 자외선 10 mJ/㎠를 조사한 후 PBS를 덜어내고 세포배양 배지(DMEM에 10% FBS가 첨가된 것) 1 mL를 첨가하였다. 여기에 평가하고자 하는 쉬땅나무 추출물을 처리한 후 24시간동안 배양하였다. 24시간이 지나면 배지를 제거하고, 각 웰 당 세포배양 배지 500 uL 배지와 MTT 용액(2.5 ㎎/mL) 60 uL를 넣은 후 2시간동안 37℃ CO2 배양기에서 배양하였다. 배지를 제거하고 이소프로판올-HCl(0.04 N)을 500 uL씩 넣어주었다. 5분간 진탕하여 세포를 용해시키고 상등액 100 uL씩을 96-웰 시험 플레이트에 옮긴 후, 마이크로플레이트 판독기에서 565 nm 흡광도를 측정하였다. 하기 수학식 3에 의해 세포생존율(%)을 측정하였고, 자외선에 의한 세포독성 완화율은 하기 수학식 4에 의하여 계산하였다. 그 결과는 하기 표 3에 나타내었다.It was carried out to evaluate the mitigating effect of cytotoxicity by ultraviolet irradiation of the barberry extract obtained in Preparation Example 1. Fibroblasts (fibroblasts) were placed in 24-well test plates 1 × 10 5 and attached for 24 hours. Each well was washed once with PBS and 500 uL of PBS was added to each well. The fibroblasts were irradiated with UV 10 mJ / cm 2 using an ultraviolet B (UVB) lamp (Model: F15T8, UV B 15W, Sankyo Dennki, Japan), and then PBS was removed and 10% FBS was added to the cell culture medium (DMEM). 1 mL) was added. After processing the bark tree extract to be evaluated here, it was incubated for 24 hours. After 24 hours, the medium was removed, and 500 uL of cell culture medium and 60 uL of MTT solution (2.5 mg / mL) were added to each well, followed by incubation in a 37 ° C. CO 2 incubator for 2 hours. The medium was removed and 500 uL of isopropanol-HCl (0.04 N) was added. After shaking for 5 minutes to lyse the cells and transfer 100 uL of the supernatant to 96-well test plate, the 565 nm absorbance was measured in a microplate reader. Cell survival rate (%) was measured by Equation 3 below, and cytotoxicity relaxation rate by UV was calculated by Equation 4 below. The results are shown in Table 3 below.

Figure 112009080320343-pat00003
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상기 수학식 3에서, St는 시료를 처리한 웰을 발생 반응한 후에 측정한 웰의 흡광도 값을 나타내고, Bt는 시료를 처리하지 않은 웰을 발색 반응한 후에 측정한 흡광도 값을 나타내고, Bo는 시료를 처리한 웰을 발색 반응한 후에 측정한 흡광도 값을 나타낸다.In Equation 3, S t represents the absorbance value of the well measured after generating and reacting the well treated with the sample, and B t represents the absorbance value measured after the color reaction of the well not treated with the sample, B o shows the absorbance value measured after the color reaction of the well which processed the sample.

Figure 112009080320343-pat00004
Figure 112009080320343-pat00004

상기 수학식 4에서, St는 자외선 조사하고 시료를 처리한 웰의 세포생존율을 나타내고, Bt는 자외선 조사하고 시료를 처리하지 않은 웰의 세포생존율을 나타내고, Bo는 자외선을 조사하지 않고, 시료를 처리하지 않은 웰의 세포생존율을 나타낸다.In Equation 4, S t represents the cell viability of the wells that are irradiated with ultraviolet light and treated the sample, B t represents the cell viability of the wells which are irradiated with ultraviolet light and not treated with the sample, and B o does not irradiate the ultraviolet light, The cell viability of the wells in which the sample was not treated is shown.

시료명Sample Name 세포독성 완화율 (%)Cytotoxic alleviation rate (%) 쉬땅나무 추출물 (제조예 1)Barberry Extract (Manufacturing Example 1) 6363

상기 표 3의 결과에 의하면, 쉬땅나무 추출물은 자외선에 의한 세포 독성을 63% 완화하므로 자외선을 효과적으로 방어함을 알 수 있다.According to the results of Table 3, it can be seen that the bark tree extract effectively prevents ultraviolet rays because it alleviates cytotoxicity by 63%.

실시예 4. 자외선 조사에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제 효과Example 4 Inhibitory Effect of Inflammatory Cytokine Expression by Ultraviolet Irradiation

상기 제조예 1에서 수득한 쉬땅나무 추출물의 항염증 효과를 확인하기 위해 자외선 조사에 의해 발현되는 염증성 사이토카인 발현 억제정도를 평가하였다.In order to confirm the anti-inflammatory effect of the bark tree extract obtained in Preparation Example 1 was evaluated the degree of inhibition of inflammatory cytokine expression expressed by ultraviolet irradiation.

사람의 표피조직에서 분리한 섬유아세포(Fibroblast)를 24-웰 시험 플레이트에 5×104개씩 넣고 24시간동안 부착시켰다. 각 웰을 PBS로 1회 세척하고 각 웰에 500 uL의 PBS를 넣었다. 이 섬유아세포에 자외선 B(UVB) 램프(Model : F15T8, UV B 15W, Sankyo Dennki사, Japan)를 이용하여 자외선 10 mJ/㎠를 조사한 후 PBS를 덜어내고 세포배양 배지(DMEM에 FBS가 첨가되지 않은 배지) 350 uL를 첨가하였다. 여기에 평가하고자 하는 쉬땅나무 추출물을 처리한 후 5시간동안 배양하였다. 배양 상층액을 150 uL 취하여 IL-1α를 정량함으로서 쉬땅나무 추출물의 염증성 사이토카인 발현억제효과를 판단하였다. IL-1α의 양은 효소면역분석법 (Enzyme-linked Immunosorbent Assay;ELISA)을 이용하여 정량화하였으며, IL-1α의 생성율은 하기 수학식 5에 의해 계산하였다. 그 결과는 하기 표 4에 나타내었다.Fibroblasts isolated from human epidermal tissue (Fibroblast) were placed in a 24-well test plate each 5 × 10 4 and attached for 24 hours. Each well was washed once with PBS and 500 uL of PBS was added to each well. The fibroblasts were irradiated with UV 10 mJ / cm 2 using an ultraviolet B (UVB) lamp (Model: F15T8, UV B 15W, Sankyo Dennki, Japan), and then PBS was removed and FBS was not added to the cell culture medium (DMEM). Medium) 350 uL was added. After processing the bark tree extract to be evaluated here, it was incubated for 5 hours. 150 μL of the culture supernatant was taken to quantify IL-1α, and the inhibitory effect of inflammatory cytokine expression was determined. The amount of IL-1α was quantified using Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA), and the production rate of IL-1α was calculated by the following Equation 5. The results are shown in Table 4 below.

Figure 112009080320343-pat00005
Figure 112009080320343-pat00005

상기 수학식 5에서, St는 자외선 조사하고 시료를 처리한 웰의 IL-1α 생성량을 나 타내고, Bt는 자외선 조사하고 시료를 처리하지 않은 웰의 IL-1α 생성량을 나타내고, Bo는 자외선을 조사하지 않고, 시료를 처리하지 않은 웰의 IL-1α 생성량을 나타낸다.In Equation 5, S t represents the amount of IL-1α produced in the wells that have been irradiated with UV light and the sample is treated, B t represents the amount of IL-1α produced in the wells not irradiated with UV light, and B o is The amount of IL-1α produced in the wells not irradiated with ultraviolet light but not treated with the sample is shown.

시료명Sample Name 염증 성사이토카인 발현 억제율 (%)Inhibitory rate of inflammatory cytokine expression (%) 쉬땅나무 추출물 (제조예 1)Barberry Extract (Manufacturing Example 1) 7474

상기 표 4의 결과에 의하면, 쉬땅나무 추출물은 자외선에 의한 염증성 사이토카인인 IL-1α의 생성을 74% 억제하여, 자외선에 의한 염증 발생을 효과적으로 방어함을 알 수 있다.According to the results of Table 4, the bark tree extract is 74% inhibit the production of inflammatory cytokines IL-1α by ultraviolet rays, it can be seen that effectively protects the inflammation caused by ultraviolet rays.

실시예 5. B16F1 멜라노싸이트를 이용한 멜라닌 생성 억제 효과Example 5 Inhibitory Effect of Melanin Production Using B16F1 Melanosite

상기 제조예 1 내지 6에서 수득한 쉬땅나무 추출물의 피부 미백효과를 확인하기 위해 B16F1 멜라노싸이트에 대한 멜라닌 생성 억제 정도를 보고 미백 효과를 판단하였다.In order to confirm the skin whitening effect of the bark tree extract obtained in Preparation Examples 1 to 6, the whitening effect was determined by looking at the degree of inhibition of melanin production for B16F1 melanocytes.

본 실시예에 사용된 B16F1 멜라노싸이트는 마우스에서 유래한 세포균주이며, 멜라닌이라는 흑색색소를 분비하는 세포이다. 이 세포의 인공배양 중에 시료용액을 처리하여 멜라닌 흑색색소가 감소하는 정도를 비교 평가하였다. 본 실시예에 사용된 B16F1 멜라노싸이트는 ATCC (American Type Culture Collection, 기탁번호 : 6323)로부터 분양받아 사용하였다.B16F1 melanocytes used in this example are cell strains derived from mice, and cells that secrete a black pigment called melanin. The degree of reduction of melanin black pigment was evaluated by treating the sample solution during artificial culture of these cells. The B16F1 melanocytes used in this example were used after being sold from ATCC (American Type Culture Collection, Accession No .: 6323).

B16F1 멜라노싸이트의 멜라닌 생합성 억제효과 측정은 다음과 같이 행하였다. B16F1 멜라노싸이트를 6-웰 플레이트에 각 웰당 2×106 농도로 분주하고 세포를 부착시킨 후 독성을 유발하지 않는 농도로 시료를 처리하여 72시간 동안 배양하였다. 72시간 배양 후 세포를 트립신-EDTA로 떼어 낸 후 세포수를 측정한 다음 원심분리하여 세포를 회수하였다.The melanin biosynthesis inhibitory effect of B16F1 melanocytes was measured as follows. B16F1 melanocytes were dispensed in 6-well plates at a concentration of 2 × 10 6 per well, cells were attached, and the samples were incubated for 72 hours by treating the samples at a concentration that does not cause toxicity. After 72 hours of incubation, the cells were detached with trypsin-EDTA, the cell number was measured, and the cells were recovered by centrifugation.

세포내 멜라닌의 정량은 로탄(Lotan : Cancer Res., 40: 3345-3350, 1980)의 방법을 약간 변형하여 실시하였다. 셀 펠릿을 PBS로 1회 세척한 후 균질화 버퍼액(50 mM 소듐 포스페이트, pH 6.8, 1% Triton X-100, 2 mM PMSF) 1 mL를 첨가하여 5분간 와류하여 세포를 파쇄하였다. 원심분리 (3,000 rpm, 10분)하여 얻은 세포 여액에 1N NaOH (10% DMSO)를 첨가하여 추출된 멜라닌을 용해한 후 마이크로 플레이트 판독기로 405 nm에서 멜라닌의 흡광도를 측정한 다음 멜라닌을 정량하여 시료의 멜라닌 생성 저해율(%)을 측정하였다. B16F1 멜라노싸이트의 멜라닌 생성 저해율(%)은 하기 수학식 6에 의하여 계산하였다. IC50 값은 멜라닌 생성을 50% 저해하는 물질의 농도이다. 측정된 IC50 값은 하기 표 5에 나타내었다.Quantification of intracellular melanin was carried out with a slight modification of the method of Rotan: Cancer Res. , 40: 3345-3350, 1980. The cell pellet was washed once with PBS, and then 1 mL of homogenization buffer solution (50 mM sodium phosphate, pH 6.8, 1% Triton X-100, 2 mM PMSF) was added to vortex for 5 minutes to disrupt the cells. Melt the extracted melanin by adding 1N NaOH (10% DMSO) to the cell filtrate obtained by centrifugation (3,000 rpm, 10 minutes), and measure the absorbance of melanin at 405 nm with a microplate reader, and then quantify the melanin. Melanin production inhibition rate (%) was measured. Melanin inhibition rate (%) of B16F1 melanocytes was calculated by the following equation (6). IC 50 value is the concentration of substance that inhibits melanin production by 50%. The measured IC 50 values are shown in Table 5 below.

Figure 112009080320343-pat00006
Figure 112009080320343-pat00006

상기 수학식 6에서, A는 시료를 첨가하지 않은 웰의 멜라닌 양을 나타내고, B는 시료를 첨가한 웰의 멜라닌 양을 나타낸다.In Equation 6, A represents the melanin amount of the well to which the sample is not added, and B represents the melanin amount of the well to which the sample is added.

시료명Sample Name 멜라닌 생성 억제효과(IC50)Melanin production inhibitory effect (IC 50 ) 쉬땅나무 에탄올 수용액 추출물 (제조예 1)Extract of Ethanol aqueous solution of bark tree (Preparation Example 1) 0.06%0.06% 쉬땅나무 프로필렌글리콜 추출물 (제조예 2)Bare tree propylene glycol extract (Preparation Example 2) 0.15%0.15% 쉬땅나무 에틸아세테이트 추출물 (제조예 3)Barberry Ethyl Acetate Extract (Preparation 3) 0.18%0.18% 쉬땅나무 수 추출물 (제조예 4)Barberry Extract (Manufacturing Example 4) 0.13%0.13% 쉬땅나무 디클로로메탄 추출물 (제조예 5)Bare tree dichloromethane extract (Preparation 5) 0.14%0.14% 쉬땅나무 에탄올 헥산 추출물 (제조예 6)Bare tree ethanol hexane extract (Preparation 6) 0.19%0.19% 하이드로퀴논Hydroquinone 0.20%0.20% 알부틴Arbutin 0.15%0.15% 상백피 추출물Lettuce extract 0.19%0.19% 유용성 감초 추출물Usefulness Licorice extract 0.24%0.24%

상기 표 5의 결과에 의하면, 상기 제조예 1 내지 6에서 수득한 쉬땅나무 추출물의 IC50 값은 0.06 내지 0.19% 범위로, 기존의 미백제인 하이드로퀴논, 알부틴, 유용성 감초 추출물, 상백피 추출물 등에 비해 비슷하거나 우수한 효과를 나타내는 것을 알 수 있다.According to the results of Table 5, the IC 50 value of the barberry extract obtained in Preparation Examples 1 to 6 ranges from 0.06 to 0.19%, which is similar to that of the conventional whitening agent hydroquinone, arbutin, oil-soluble licorice extract, and lettuce extract. It can be seen that the excellent effect.

실시예 6. 보습 효과(크림제)Example 6 Moisturizing Effect (Cream Agent)

상기 제조예 1에서 수득한 쉬땅나무 추출물을 함유한 크림 형태의 '본원 화장료1'과, 쉬땅나무 추출물을 포함하지 않는 크림 형태의 '비교 화장료1a, 1b, 1c, 1d'를 각각 제조하여, 사람을 대상으로 피부 보습효과를 비교실험을 행하여 평가하였다. '본원 화장료1'과 '비교 화장료1a, 1b, 1c, 12d'의 조성은 하기 표 6에 나타내었다.The cream form 'mainwon cosmetics 1' containing the extract of the bark tree obtained in Preparation Example 1 and the cream cosmetics 'comparative cosmetics 1a, 1b, 1c, 1d' not containing the bark tree extract were prepared, respectively. The skin moisturizing effect was evaluated by performing a comparative experiment. The composition of the 'main cosmetics 1' and 'comparative cosmetics 1a, 1b, 1c, 12d' is shown in Table 6 below.

하기 표 6의 조성(나)를 가열하여 70℃에서 보존하였다. 여기에, 조성(가)를 가하여 예비유화한 후에 호모믹서로 균일하게 유화한 다음, 서서히 냉각하여 크림제를 제조하였다.The composition (b) shown in Table 6 below was heated and stored at 70 ° C. After adding the composition (A) to preemulsification, the mixture was emulsified uniformly with a homomixer, and then cooled slowly to prepare a cream.

원료(중량%)Raw material (% by weight) 본원 화장료1Cosmetics 1 비교 화장료Comparative cosmetics 1a1a 1b1b 1c1c 1d1d 조성
(가)
Furtherance
(end)
스테아릴 알콜Stearyl alcohol 88 88 88 88 88
스테아린산Stearic acid 22 22 22 22 22 스테아린산 콜레스테롤Stearic acid cholesterol 22 22 22 22 22 스쿠알란Squalane 44 44 44 44 44 2-옥틸도데실알콜2-octyldodecyl alcohol 66 66 66 66 66 폴리옥시에틸렌(25몰부가)
알콜에스테르
Polyoxyethylene (25 mol addition)
Alcohol ester
33 33 33 33 33
글리세릴모노스테아린산
에스테르
Glyceryl Monostearic Acid
ester
22 22 22 22 22
조성
(나)
Furtherance
(I)
쉬땅나무 추출물Bare tree extract 55 -- -- -- --
글리세린glycerin -- -- 55 -- -- Na-히알루론산염Na-hyaluronic acid salt -- -- -- 55 -- 1,3-부틸렌글라이콜1,3-butylene glycol -- -- -- -- 55 정제수Purified water 6868 7373 6868 6868 6868 system 100100 100100 100100 100100 100100

실험자 (20세 내지 35세의 여성) 20명을 대상으로 아래 팔뚝부위에'본원 화장료1'과 '비교 화장료1a, 1b, 1c, 1d'를 각각 바르고, 약 90분 후에, 바르기 전과 바른 후의 보습 능력을 Corneometer(CM 820)로 △Hydration을 평가하였다.Twenty test subjects (women aged 20 to 35 years old) applied the original cosmetics 1 and the comparative cosmetics 1a, 1b, 1c, and 1d on the lower forearm, and after about 90 minutes, moisturized before and after Ability was assessed by ΔHydration with Corneometer (CM 820).

△Hydration= 바른 후의 보습력 - 바르기 전의 보습력△ Hydration = Moisturizing after applying-Moisturizing before applying

구분division 본원 화장료1Cosmetics 1 비교 화장료Comparative cosmetics 1a1a 1b1b 1c1c 1d1d 보습제 종류Moisturizer Types 쉬땅나무추출물Bare tree extract -- 글리세린glycerin Na-히아루론산염Na-hyaluronic acid salt 1,3-부틸렌글라이콜1,3-butylene glycol △Hydration△ Hydration 1717 66 1111 1414 1010

상기 표 7의 결과에 의하면, 쉬땅나무 추출물을 함유한 크림을 도포한 실험자의 아래 팔뚝부위에서 보습효과가 우수함을 알 수 있다.According to the results of Table 7, it can be seen that the moisturizing effect is excellent in the lower forearm of the experimenter applying the cream containing the bark tree extract.

실시예 7. 피부 미백 효과(화장수)Example 7. Skin Whitening Effect (Cosmetic Water)

상기 제조예 1에서 수득한 쉬땅나무 추출물을 함유한 화장수 형태의 '본원 화장료2'와, 쉬땅나무 추출물을 포함하지 않는 화장수 형태의 '비교 화장료2'를 각각 제조하여, 사람을 대상으로 피부 미백효과를 평가하였다. '본원 화장료2'와 '비교 화장료2'의 조성은 하기 표 8에 나타내었다.Prepares the 'main cosmetics 2' in the form of the lotion containing the bark tree extract obtained in Preparation Example 1 and the 'comparative cosmetics 2' in the form of the lotion without the bark tree extract, respectively, for the skin whitening effect Was evaluated. The composition of the 'main cosmetics 2' and 'comparative cosmetics 2' are shown in Table 8 below.

하기 표 8의 조성 (가)를 정확히 평량하고, 온도를 45℃까지 가온하였다. 별도 용기에서 조성 (나)를 정확히 평량하고, 가온하여 녹인 후 천천히 조성 (가)와 혼합하고 Disper Mixer를 사용하여 2000 rpm 속도로 2분 정도 교반하여 화장수를 제조하였다.The composition (A) of Table 8 was exactly weighed out, and the temperature was warmed to 45 ° C. In a separate container, the composition (B) was accurately weighed, dissolved in warming, and slowly mixed with the composition (A) and stirred at 2000 rpm for 2 minutes using a disper mixer to prepare a lotion.

원료(중량%)Raw material (% by weight) 본원 화장료2Cosmetics 2 비교 화장료2Comparative Cosmetics 2 조성
(가)
Furtherance
(end)
쉬땅나무 추출물 (제조예 1)Barberry Extract (Manufacturing Example 1) 1.01.0 --
글리세린glycerin 3.03.0 3.03.0 1,3 부틸렌글리콜1,3 butylene glycol 4.04.0 4.04.0 구연산나트륨Sodium citrate 0.20.2 0.20.2 구연산Citric acid 0.10.1 0.10.1 정제수Purified water 80.2580.25 81.2581.25 조성
(나)
Furtherance
(I)
방부제antiseptic 0.40.4 0.40.4
폴리옥시에칠렌(40)
경화 피마자유
Polyoxyethylene (40)
Cured Castor Oil
1.01.0 1.01.0
향료Spices 0.050.05 0.050.05 에탄올ethanol 10.010.0 10.010.0 system 100100 100100

실험자 (20세 내지 35세의 여성) 15명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 '본원 화장료2'를, 얼굴 왼쪽 부위에는 '비교 화장료2'를 각각 1일 2회씩 연속 2개월간 화장수를 도포하였다. 시험 완료 후 얼굴 좌우 양편의 도포 부위 피부를 화상분석기 및 피부색의 변화를 크로마메타 (Minolta CR300)를 이용하여 색의 밝기 변화(ΔL)를 측정하였다.15 test subjects (women aged 20 to 35 years) were applied to the right side of the face 'main cosmetics 2' and the left side of the face 'comparative cosmetics 2' twice a day for 2 consecutive months. After completion of the test, the applied skin of both sides of the face was measured for change in brightness (ΔL) of color using an image analyzer and skin color change using a chromameter (Minolta CR300).

ΔL= 시험 후 피부 밝기 - 시험 전 피부 밝기ΔL = skin brightness after test-skin brightness before test

복수의 숙련자에 의한 객관적 육안 관찰과 피검자에 의한 주관적 육안관찰을 실시하여 하기 등급 분류에 따라 효과를 측정하였다. 이때 미백 효능 정도를 하기 7등급으로 분류하여 평가하였다.Objective visual observation by a plurality of skilled workers and subjective visual observation by a subject were performed, and the effects were measured according to the following classification. At this time, the degree of whitening efficacy was classified into the following seven ratings.

[미백효능 평가 기준][Whitening efficacy evaluation criteria]

-3: 매우 악화 -2: 악화 -3: very worse -2: worse

-1: 약간 악화 0: 변화 없음-1: slightly worse 0: no change

1: 약간 개선 2: 개선 1: slightly improved 2: improved

3: 매우 개선3: highly improved

그 결과는 하기 표 9에 나타내었다. The results are shown in Table 9 below.

구 분division 피부색의
밝기 변화(ΔL)
Skin-colored
Change in brightness (ΔL)
숙련자의 객관적 평가Objective evaluation of the skilled person 피검자의 주관적 평가Subjective Evaluation of the Subject
본원 화장료3Cosmetics 3 비교 화장료3Comparative Cosmetics3 본원 화장료3Cosmetics 3 비교 화장료3Comparative Cosmetics3 평균값medium 3.03.0 2.52.5 1.51.5 2.62.6 1.81.8

상기 표 9의 결과에 의하면, 쉬땅나무 추출물을 함유한 화장수를 도포한 실험자의 안면 피부에서 미백효과가 우수함을 알 수 있다.According to the results of Table 9, it can be seen that the whitening effect is excellent in the facial skin of the experimenter applying the lotion containing the bark tree extract.

실시예 8. 피부 미백 효과(로션)Example 8. Skin Whitening Effect (Lotion)

상기 제조예 1에서 수득한 쉬땅나무 추출물을 함유한 로션 형태의 '본원 화장료3'과, 쉬땅나무 추출물을 포함하지 않는 로션 형태의 '비교 화장료3'을 각각 제조하여, 사람을 대상으로 피부 미백효과를 평가하였다. '본원 화장료3'과 '비교 화장료3'의 조성은 하기 표 10에 나타내었다. The lotion form 'mainwon cosmetics 3' containing the thyme extract obtained in Preparation Example 1 and the lotion form 'comparative cosmetics 3' containing no thyme extract were prepared, respectively, and the skin whitening effect on humans. Was evaluated. The composition of the 'main cosmetics 3' and 'comparative cosmetics 3' is shown in Table 10 below.

하기 표 10의 조성 (가)를 정확히 평량하고, 온도를 80℃까지 가온하였다. 별도 용기에 조성 (나)를 정확히 평량하고, 가온하여 녹인 후 천천히 조성 (나)와 혼합하고 교반기를 사용하여 3600 rpm 속도로 일정시간 동안 교반한 후 25℃까지 냉각하여 숙성시켜 로션을 제조하였다.The composition (A) of the following Table 10 was exactly weighed, and the temperature was heated up to 80 degreeC. The composition (B) was precisely weighed in a separate container, heated and dissolved, and then slowly mixed with the composition (B), stirred at a rate of 3600 rpm for a predetermined time using a stirrer, and cooled to 25 ° C. to prepare a lotion.

구분division 원료(중량%)Raw material (% by weight) 본원 화장료3Cosmetics 3 비교 화장료3Comparative Cosmetics3 조성
(가)
Furtherance
(end)
세테아릴알코올Cetearyl Alcohol 1.71.7 1.71.7
폴리글리세릴 2-올레이트Polyglyceryl 2-oleate 1.51.5 1.51.5 세라마이드Ceramide 0.70.7 0.70.7 세테아레스-4Setares-4 1.21.2 1.21.2 선플라워오일Sunflower oil 10.010.0 10.010.0 조성
(나)
Furtherance
(I)
쉬땅나무추출물Bare tree extract 3.03.0 --
글리세린glycerin 5.05.0 5.05.0 카보머Carbomer 0.20.2 0.20.2 방부제antiseptic 0.40.4 0.40.4 정제수Purified water 76.376.3 79.379.3 system 100100 100100

실험자 (20세 내지 35세의 여성) 15명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 '본원 화장료3'을, 얼굴 왼쪽 부위에는 '비교 화장료3'을 각각 1일 2회씩 연속 2개월간 로션을 도포하였다. 시험 완료 후 얼굴 좌우 양편의 도포 부위 피부를 화상분석기 및 피부색의 변화를 크로마메타 (Minolta CR300)를 이용하여 색의 밝기 변화(ΔL)를 측정하였다.15 test subjects (women aged 20 to 35 years) were applied with lotion for two months in a row on the right side of the face and 'comparative cosmetic 3' on the left side of the face twice a day. After completion of the test, the applied skin of both sides of the face was measured for change in brightness (ΔL) of color using an image analyzer and skin color change using a chromameter (Minolta CR300).

ΔL= 시험 후 피부 밝기 - 시험 전 피부 밝기ΔL = skin brightness after test-skin brightness before test

복수의 숙련자에 의한 객관적 육안 관찰과 피검자에 의한 주관적 육안관찰을 실시하여 하기 등급 분류에 따라 효과를 측정하였다. 이때 미백 효능 정도를 하기 7등급으로 분류하여 평가하였다.Objective visual observation by a plurality of skilled workers and subjective visual observation by a subject were performed, and the effects were measured according to the following classification. At this time, the degree of whitening efficacy was classified into the following seven ratings.

[미백효능 평가 기준][Whitening efficacy evaluation criteria]

-3: 매우 악화 -2: 악화 -3: very worse -2: worse

-1: 약간 악화 0: 변화 없음-1: slightly worse 0: no change

1: 약간 개선 2: 개선 1: slightly improved 2: improved

3: 매우 개선3: highly improved

그 결과는 하기 표 11에 나타내었다. The results are shown in Table 11 below.

구 분division 피부색의
밝기 변화(ΔL)
Skin-colored
Change in brightness (ΔL)
숙련자의 객관적 평가Objective evaluation of the skilled person 피검자의 주관적 평가Subjective Evaluation of the Subject
본원 화장료3Cosmetics 3 비교 화장료3Comparative Cosmetics3 본원 화장료3Cosmetics 3 비교 화장료3Comparative Cosmetics3 평균값medium 3.33.3 2.52.5 1.91.9 2.72.7 1.71.7

상기 표 11의 결과에 의하면, 쉬땅나무 추출물을 함유한 로션을 도포한 실험자의 안면 피부에서 미백효과가 우수함을 알 수 있다.According to the results of Table 11, it can be seen that the whitening effect is excellent in the facial skin of the experimenter applying the lotion containing the bark tree extract.

실시예 9. 피부 미백 효과(크림)Example 9. Skin Whitening Effect (Cream)

상기 제조예 1에서 수득한 쉬땅나무 추출물을 함유한 크림 형태의 '본원 화장료4'와, 쉬땅나무 추출물을 포함하지 않는 화장수 형태의 '비교 화장료4'를 각각 제조하여, 사람을 대상으로 피부 미백효과를 평가하였다. '본원 화장료4'와 '비교 화장료4'의 조성은 하기 표 12에 나타내었다.'Wonwon cosmetics 4' in the form of a cream containing the extract of the bark tree tree obtained in Preparation Example 1 and 'comparative cosmetics 4' in the form of a lotion containing no bark tree extract, respectively, skin whitening effect on human Was evaluated. The composition of the 'main cosmetics 4' and 'comparative cosmetics 4' is shown in Table 12 below.

원료(중량%)Raw material (% by weight) 본원 화장료4Cosmetics 4 비교 화장료4Comparative Cosmetics 4 조성
(가)
Furtherance
(end)
스테아릴 알콜Stearyl alcohol 8.08.0 8.08.0
스테아린산Stearic acid 2.02.0 2.02.0 스테아린산 콜레스테롤Stearic acid cholesterol 2.02.0 2.02.0 스쿠알란Squalane 4.04.0 4.04.0 2-옥틸도데실알콜2-octyldodecyl alcohol 6.06.0 6.06.0 폴리옥시에틸렌(25몰부가)알콜에스테르Polyoxyethylene (25 mol addition) alcohol ester 3.03.0 3.03.0 글리세릴모노스테아린산 에스테르Glyceryl Monostearic Acid Ester 2.02.0 2.02.0 유동파라핀Liquid paraffin 5.05.0 5.05.0 조성
(나)
Furtherance
(I)
쉬땅나무 추출물Bare tree extract 3.03.0 --
프로필렌글리콜Propylene glycol 5.05.0 5.05.0 글리세린glycerin 4.04.0 4.04.0 정제수Purified water 56.056.0 59.059.0 system 100100 100100

실험자 (20세 내지 35세의 여성) 15명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 '본원 화장료4'를, 얼굴 왼쪽 부위에는 '비교 화장료4'를 각각 1일 2회씩 연속 2개월간 도포하였다. 시험 완료 후 얼굴 좌우 양편의 도포 부위 피부를 화상분석기 및 피부색의 변화를 크로마메타 (Minolta CR300)를 이용하여 색의 밝기 변화(ΔL)를 측정하였다.15 test subjects (women aged 20 to 35 years) were applied to the right side of the face 'main cosmetics 4' and the left side of the face 'comparative cosmetics 4' twice a day for 2 consecutive months. After completion of the test, the applied skin of both sides of the face was measured for change in brightness (ΔL) of color using an image analyzer and skin color change using a chromameter (Minolta CR300).

ΔL= 시험 후 피부 밝기 - 시험 전 피부 밝기ΔL = skin brightness after test-skin brightness before test

복수의 숙련자에 의한 객관적 육안 관찰과 피검자에 의한 주관적 육안관찰을 실시하여 하기 등급 분류에 따라 효과를 측정하였다. 이때 미백 효능 정도를 하기 7등급으로 분류하여 평가하였다.Objective visual observation by a plurality of skilled workers and subjective visual observation by a subject were performed, and the effects were measured according to the following classification. At this time, the degree of whitening efficacy was classified into the following seven ratings.

[미백효능 평가 기준][Whitening efficacy evaluation criteria]

-3: 매우 악화 -2: 악화 -3: very worse -2: worse

-1: 약간 악화 0: 변화 없음-1: slightly worse 0: no change

1: 약간 개선 2: 개선 1: slightly improved 2: improved

3: 매우 개선3: highly improved

그 결과는 하기 표 13에 나타내었다. The results are shown in Table 13 below.

구 분division 피부색의
밝기 변화(ΔL)
Skin-colored
Change in brightness (ΔL)
숙련자의 객관적 평가Objective evaluation of the skilled person 피검자의 주관적 평가Subjective Evaluation of the Subject
본원 화장료4Cosmetics 4 비교 화장료4Comparative Cosmetics 4 본원 화장료4Cosmetics 4 비교 화장료4Comparative Cosmetics 4 평균값medium 3.23.2 2.62.6 1.81.8 2.72.7 1.61.6

상기 표 13의 결과에 의하면, 쉬땅나무 추출물을 함유한 크림을 도포한 실험자의 안면 피부에서 미백효과가 우수함을 알 수 있다.According to the results of Table 13, it can be seen that the whitening effect is excellent in the facial skin of the experimenter applying the cream containing the bark tree extract.

Claims (5)

쉬땅나무(Sorbaria sorbifolia var. stellipila) 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.Sorbaria sorbifolia var. Stellipila extract cosmetic composition for skin whitening, characterized in that it contains. 청구항 1에 있어서,The method according to claim 1, 상기 쉬땅나무 추출물은 조성물 전체에 대하여 동결건조중량 기준으로 0.001 내지 30.0 중량% 함유하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.The simple tree extract is a cosmetic composition, characterized in that it contains 0.001 to 30.0% by weight based on the total lyophilized weight. 청구항 1 또는 2항에 있어서,The method according to claim 1 or 2, 상기 쉬땅나무 추출물은 정제수, 탄소수 1 내지 6의 알콜, 글리세린, 탄소수 2 내지 6의 알킬렌글리콜, 탄소수 1 내지 6의 알칸, 탄소수 1 내지 6의 할로겐화탄화수소, 탄소수 2 내지 6의 알킬 알카노에이트 및 그의 혼합물로부터 선택된 추출용매를 사용하여 추출한 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.The tree extract may be purified water, alcohol having 1 to 6 carbon atoms, glycerin, alkylene glycol having 2 to 6 carbon atoms, alkanes having 1 to 6 carbon atoms, halogenated hydrocarbons having 1 to 6 carbon atoms, alkyl alkanoates having 2 to 6 carbon atoms, and Cosmetic composition characterized in that the extraction using the extraction solvent selected from the mixture. 청구항 3항에 있어서,The method according to claim 3, 상기 쉬땅나무 추출물은 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 헥산, 디클로로메탄, 디클로로에탄, 에틸아세테이트 및 이의 혼합물로부터 선택된 추출용매를 사용하여 추출한 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.The chitan extract is a cosmetic composition, characterized in that extracted using a solvent extracted from purified water, methanol, ethanol, glycerin, ethylene glycol, propylene glycol, butylene glycol, hexane, dichloromethane, dichloroethane, ethyl acetate and mixtures thereof . 청구항 1 또는 2항에 있어서,The method according to claim 1 or 2, 화장수, 젤, 수용성 리퀴드, 크림, 에센스, 수중유(O/W) 또는 유중수(W/O)형의 에멀전, 및 연고로 이루어진 제형으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.Cosmetic composition, characterized in that it is selected from a formulation consisting of a lotion, gel, water-soluble liquid, cream, essence, emulsion in water (O / W) or water-in-oil (W / O) type, and ointment.
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