KR101928027B1 - 자외선에 의한 피부 손상 예방, 방지 또는 개선용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 초피나무 열매 추출물, 상백피 추출물, 및 유용성 감초 추출물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 추출물을 유효성분으로 함유하는, 추출물의 새로운 용도를 제공한다. 본 발명은 상기 추출물을 유효성분으로 함유하는 자외선에 의한 피부 손상 방지, 예방 또는 개선용 조성물을 제공한다.

Description

자외선에 의한 피부 손상 예방, 방지 또는 개선용 조성물 {Composition for protection against UV-induced skin damages}

본 발명은 자외선에 의한 피부 손상을 예방, 또는 개선할 수 있는 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로 자외선에 의한 피부 노화, 또는 피부 자극에 의해 발생하는 여러가지 피부 증상들을 예방, 또는 개선할 수 있는 조성물에 관한 것이다.

피부가 자외선에 노출되면 여러 경로의 메커니즘을 통하여 손상을 받게 된다. 자외선은 직접적으로 세포 내 핵심 요소인 DNA를 손상시킨다. Thmine dimer 를 형성하거나 DNA breakage를 유발한다. 손상된 DNA가 누적되면 세포가 정상 기능을 할 수 없으며, 심한 경우 암을 유발할 수 있다. 또한 자외선은 피부에서 활성산소(ROS)를 증가시키며, 증가된 활성산소는 세포 표면의 수용체에 결합하여 신호전달체계를 활성화 시킨다. 대표적으로, 전사인자인 NF-κB 와 AP-1이 활성화 된다. NF-κB가 활성화 되면 IL-1, IL-6, TNFa과 같은 싸이토카인의 분비가 증가하고, 이러한 물질들은 섬유아세포의 MMP1 분비를 촉진시키며, 콜라겐 분해효소인 MMP8을 분비하는 호중구의 진피로의 유입을 촉진하여 세포외 기질의 분해를 가속화 할 수 있다. AP-1이 활성화되면 섬유아세포의 콜라겐 합성이 감소하고 섬유아세포 및 각질세포에서 MMP1 발현이 증가한다.

그 밖에도 자외선은 피부세포에서 많은 유전자의 발현에 변화를 주는데, human constitutive photomorphogenic protein-1 (COP1)에 의하여 자외선에 대한 피부의 반응들이 조절됨이 최근에 보고되었다. COP1은 Arabidopsis에서 처음 발견 되었으며, 식물이 자외선에 대한 내성을 갖도록 하고 광형태형성(photomorphogenesis)를 조절한다. 사람의 경우에서는 COP1은 E3 ligase 기능을 가지고 있으며, human de-etiolated-1 (DET1)와 복합으로 p53이나 cJUN 단백질의 분해에 관여한다. 자외선에 의하여 각질형성세포 및 섬유세포에서 COP1과 DET1 발현이 자외선에 의하여 감소하였으며, 결과적으로 p53과 cJUN 단백질을 세포내에 축적시킬 수 있음이 보고되었다. 특히 자외선 노출 후 p53과 cJUN의 변화에 앞서 COP1의 변화가 일어나, COP1이 자외선에 대한 초기 반응 인자일 가능성이 제기되고 있다. 또한, 자외선에 의하여 피부에 생성되는 Formylindole(3,2-b) carbazole(FICZ)가 Arylhadrocarbon receptor에 결합하여 염증, 대사이상, 광노화, 멜라닌생성, 암 유발을 촉진하는 것이 보고되고 있다.

현재까지 가장 효과적으로 알려져 있는 자외선에 대한 피부 보호 방법은 자외선 차단제 사용이다. 자외선 차단제는 자외선을 물리적으로 반사시키거나, 화학적으로 흡수하여 피부 안으로 에너지가 흡수되는 것을 막아준다. 하지만 자외선 차단제를 사용하더라도, 일부 자외선으 피부 안으로 흡수되어 피부 손상을 일으키는 것으로 알려져 있다. 생물학적인 자외선에 대한 피부 보호 방안은 레티놀과 레티노익산을 이용한 방안이다. 이러한 레티놀과 레티노익산 등의 레티노이드의 광노화 억제에 의한 주름개선 또는 탄력개선 효과는 문헌을 통하여 잘 알려져 있다. 하지만 이들 레티노이드는 주름개선 또는 탄력개선이라는 긍정적인 효과와 더불어, 소량만을 피부에 적용하여도 자극이 나타난다는 단점을 가지며, 또한 불안정성으로 인하여 공기 중에 노출되면 쉽게 산화 변질되기 때문에 사용하는데 많은 제약이 있다. 이에 레티노이드를 안정화하기 위한 연구는 계속해서 진행되고 있으나, 아직까지 피부에 대한 자극 즉 안전성의 문제는 해결되지 않고 있는 실정이다. 또한 레티노익산 등은 최기형성(Teratogenicity)의 부작용이 있어 일상적으로 사용하는 화장료 조성물로서는 적합하지 않다.

한편 초피나무 열매 (Zanthoxylum piperitum Fruit)는 항산화 활성, 자외선 차단 효과 등이 알려져 있었으나, 피부 자극이 강하고, 제형 안정성 때문에 실제 화장품에는 극히 적은 양(화장품 내 1% 이하)이 사용되었다. 또한, 이러한 피부 자극성으로 인해 초피나무 열매 추출물 자체를 사용하지 못하고 발효 추출물의 형태로 사용할 수 밖에 없는 문제가 있었다. 이러할 경우 화장품 제조 단가가 증가하고, 활성 차이 등과 같은 문제가 있었다.

1. Yaar M, Gilchrest BA, Photoageing: mechanism, prevention and therapy, Br J Dermatol., 157(5), 874 (2007)

따라서 본 발명이 해결하고자 하는 과제는 위와 같은 문제점을 해결하고, 자외선에 의해 유발되는 다양한 피부 증상들을 개선할 수 있는 조성물을 제공하고자 한다.

또한 본 발명은 우수한 자외선 차단 및 자외선에 의한 피부 손상 방지 효과가 있는 '초피나무열매 추출물'의 함량을 줄여 피부 자극을 줄이면서, 자외선 차단 및 피부 손상 방지 효과를 향상시킨 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명은 피부 자극이 적은 화장료 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명은 자외선에 의한 피부 흑화를 억제할 수 있는 혼합 추출물의 새로운 용도를 제공하고자 한다.

본 발명은 자외선에 의한 피부 홍반을 억제할 수 있는 혼합 추출물의 새로운 용도를 제공하고자 한다.

상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 초피나무 열매 추출물, 상백피 추출물, 및 유용성 감초 추출물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 추출물을 유효성분으로 함유하는, 자외선에 의한 피부 손상 방지, 예방 또는 개선용 조성물을 제공한다.

본 발명의 일 실시예는 (a) 초피나무 열매 추출물; 및 (b) 상백피 추출물, 유용성 감초 추출물 또는 이들의 혼합물을 포함하는 조성물을 제공한다. 또한 상기 조성물의 자외선에 의한 피부 손상 방지, 예방 또는 개선 용도를 제공한다.

본 발명의 다른 실시예는 초피나무 열매 추출물, 상백피 추출물, 및 유용성 감초 추출물이 모두 혼합된 혼합 추출물을 포함하는, 자외선에 의한 피부 손상 방지, 예방 또는 개선용 조성물을 제공한다.

본 명세서에서 '혼합 추출물'은 초피나무 열매, 및/또는 상백피, 및/또는 감초를 한번에 추출하여 추출물을 얻는 경우뿐만 아니라, 초피나무 열매를 단독으로 추출하여 얻은 추출물, 및/또는 상백피를 단독으로 추출하여 얻은 추출물, 및/또는 감초를 단독으로 추출하여 얻은 유용성 추출물을 혼합하는 경우도 모두 포함하는 의미로 사용된다.

초피나무(Zanthoxylum piperitum)는 산초나무(Zanthoxylum schinifolium)와 형태가 유사하나, 형태 및 효능이 서로 상이하다. 특히 초피나무의 열매는 말려서 껍질만 분리하여 향신료로 이용하기도 하였다. 본 발명의 실시예에서 바람직하게 상기 초피나무는 초피나무의 열매를 이용하여 추출물로 제조할 수 있다.

상백피(Mulberry root)는 뽕나무 뿌리를 말린 것으로, 뽕나무의 바깥쪽 뿌리 껍질을 긁어낸 다음 속의 흰 껍질을 벗겨 말린것을 상백피라 한다.

유용성 감초 추출물(Oil Soluble Licorice Extract)은 감초 (Glycyrrhiza glabra L. var. glandulifera Regelet Herder, Glycyrrhiza uralensis Fisher) 또는 그 밖의 근연식물(Leguminosae)의 뿌리를 무수에탄올로 추출하여 얻은 추출물을 다시 에틸아세테이트로 추출한 다음 추출액을 감압농축하여 건조한 유용성 추출물을 가루로 한 성분이다.

본 명세서에서 사용된 용어, "추출물"은 추출 처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다.

본 발명에서 추출하는 데에 사용되는 추출 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물, 증류수, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 아세톤, 에테르, 벤젠, 클로로포름, 에틸아세테이트, 메틸렌클로라이드, n-헥산, 염산, 초산, 포름산, 디에틸에테르, 부틸렌클라이콜, 및 사이클로헥산 으로 이루어진 군 중에서 선택되는 하나 이상의 용매 등을 들 수 있으며, 알코올을 용매로 사용하는 경우에는 바람직하게는 C₁ 내지 C₄의 알코올(메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올)을 사용할 수 있다. 본 발명에서 추출 용매로 보다 바람직하게는 물, 에탄올 또는 이의 혼합물을 사용할 수 있다.

상기 추출 용매의 양은 초피나무 열매 또는 상백피의 중량대비 1 내지 100배가 이용될 수 있고, 바람직하게는 2 내지 80배가 이용될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 3 내지 50배가 이용될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

더욱 구체적으로, 초피나무 열매 또는 상백피를 음건하여 분쇄한 후, 추출용매를 초피나무 열매 또는 상백피 분쇄물의 1 내지 20배 부피량만큼 가하여 추출하고 나서, 선택적으로 (감압)농축, 건조 또는 정제 과정을 거쳐 제조할 수 있다. 보다 구체적으로, 전술한 방법과 같이 추출용매를 가하여 유효성분물질을 추출하되 (a) 냉각 콘덴서가 장치되어 용매가 증발되는 것을 방지한 상태에서 50 내지 100℃의 온도 조건에서 1 내지 20시간 가열하여 추출하거나, (b) 5 내지 37℃의 온도 조건에서 1 내지 15일간 침적시켜 유효성분을 추출할 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 또 다른 실시예에 따르면, 초피나무 열매 또는 상백피 추출물은 초피나무 열매 또는 상백피 추출물의 분획물일 수 있다.

본 발명의 초피나무 열매 또는 상백피 분획물은 상기 초피나무 열매 또는 상백피 추출물(바람직하게는 탄소수 1-4의 저급 알코올 추출물)을 헥산, 클로로포름, 부탄올 및 에틸 아세테이트와 같은 물보다 극성이 낮은 용매로 분획하여 얻을 수 있으며, 바람직하게는 헥산 또는 클로로포름을 이용할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

특히, 본 발명에 따른 효과를 달성한다는 목적에서 본 발명에 따른 초피나무 열매 또는 상백피 추출물은 탄소수 1-4의 저급 알코올 추출물의 헥산 또는 클로로포름 분획물인 것이 바람직하다.

상기 분획물은 건조시키기 전의 액상 상태의 초피나무 열매 또는 상백피 추출물을 이용하거나 건조된 초피나무 열매 또는 상백피 추출물을 물, 에탄올 또는 이들의 혼합용매 등 적당한 용매에 현탁 또는 용해시킨 후, 헥산, 클로로포름, 부탄올 또는 에틸 아세테이트와 같은 물보다 극성이 낮은 용매를 순차적으로 첨가하여 각각의 층을 분리한 다음 각 층을 감압 농축 및/또는 건조시켜 수득할 수 있다.

이때, 상기 감압 농축은 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.

또한, 본 발명에 따른 “건조”는 감압 건조, 진공 건조, 비등 건조, 분무 건조, 상온 건조 또는 동결 건조일 수 있으나, 동결 건조를 하는 것이 더욱 바람직하다. 다만 본 발명은 이러한 건조 방법에 한정되지 않는다.

본 발명은 자외선에 의한 피부 손상을 예방, 방지 또는 개선하기 위한 조성물을 제공하며, 보다 구체적으로 자외선에 의한 피부 손상을 예방, 방지 또는 개선하기 위한 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명은 초피나무 열매 추출물과 함께, 상백피 추출물, 유용성 감초 추출물 또는 이들의 혼합물을 사용하여 자외선에 의한 피부 손상을 예방, 방지 또는 개선할 수 있는 조성물을 제공한다. 바람직하게 본 발명은 초피나무 열매 추출물, 상백피 추출물 및 유용성 감초 추출물을 모두 포함하는 자외선에 의한 피부 손상 예방, 방지 또는 개선용 조성물을 제공한다.

다른 실시예에서 본 발명은 초피나무 열매 추출물, 상백피 추출물 및 유용성 감초 추출물의 혼합 추출물의 자외선에 의한 피부 손상, 예방, 방지 또는 개선용이라는 새로운 용도를 제공하고자 한다.

본 발명의 발명자들은 초피나무 열매 추출물과 상백피 추출물을, 초피나무 열매 추출물과 유용성 감초 추출물을, 또는 초피나무 열매 추출물, 상백피 추출물 및 유용성 감초 추출물을 포함하는 조성물이 피부 자극이 적으면서도, 자외선에 의한 피부 손상을 예방, 방지, 또는 개선할 수 있다는 점을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.

본 명세서에서 사용된 자외선에 의한 피부 손상은 자외선에 의해 유발되는 여러가지 피부 증상들을 의미하는 것으로, 구체적으로 자외선에 의한 피부 노화, 주름, 탄력저하, 기미, 주근깨, 잡티 생성 등과 같은 멜라닌 색소 침착, 흑화 현상, 광선탄력섬유증, 피부암 등과 같은 증상을 의미하는 것으로 이해될 수 있다.

본 발명자의 발명자들은 전술한 기술적 과제를 달성하기 위하여, 각질형성세포 내에서 COP1을 증가, 자외선에 의한 DNA 손상을 억제, aryl hydrocarbon receptor 활성 억제 등의 효과를 확인하고, 자외선으로부터 피부를 보호할 수 있는 혼합 추출물에 대한 연구를 하여 본 발명을 완성하게 되었다.

본 명세서에서 사용된 용어, "방지"의 의미는 상기 조성물을 이용하여 피부 손상을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미할 수 있으며, 피부 손상이 일어나는 것을 차단하는 행위를 모두 포함할 수 있다.

본 명세서에서 사용된 용어, "예방"의 의미는 상기 "방지"를 포함하는 의미로 이해될 수 있으며, 더 이상 피부 손상이 진행되거나 확대되지 않도록 막는 행위를 더 포함할 수 있다.

본 명세서에서 사용된 용어, "개선"은 상기 조성물이 피부를 더 좋은 상태로 유도할 수 있다는 것을 의미하며, 예를 들어, 자외선에 의해 붉어지거나, 탄력을 잃은 피부의 홍반을 줄이거나 탄력을 증가시킬 수 있음을 의미할 수 있다.

상기 조성물은 화장료 조성물, 약학 조성물의 형태로 이용될 수 있으며, 피부 외용제로 제형화되어 사용될 수 있으나, 반드시 이러한 형태로 제한되지는 않는다.

본 발명의 초피나무 열매 추출물; 및 상백피 열매 추출물 및/또는 유용성 감초 추출물의 혼합 추출물은 조성물 전체 중량 대비 0.0001 내지 10 중량% 포함될 수 있으며, 바람직하게는 0.001 내지 5 중량%, 더욱 바람직하게는 0.01 내지 1 중량% 포함될 수 있다.

상기 추출물의 함량이 0.0001 중량% 미만일 경우, 피부 손상 예방 및/또는 개선 효과를 기대하기 어렵고, 10 중량%를 초과하는 경우, 증가하는 함유량만큼 뚜렷한 효과가 기대되지 않는다.

상기 혼합 추출물에 포함되는 초피나무 열매 추출물의 함량은 혼합 추출물 총 중량 대비 0.1 내지 100 중량% 포함될 수 있으며, 바람직하게는 0.5 내지 80 중량%, 더 바람직하게는 1 내지 50중량% 포함될 수 있으며, 가장 바람직하게 5 내지 40 중량% 포함될 수 있다.

상기 혼합 추출물에 포함되는 유용성 감초 추출물의 함량은 혼합 추출물 총 중량 대비 0.1 내지 100 중량% 포함될 수 있으며, 바람직하게는 0.5 내지 80 중량%, 더 바람직하게는 1 내지 50중량% 포함될 수 있으며, 가장 바람직하게 5 내지 40 중량% 포함될 수 있다.

상기 혼합 추출물에 포함되는 상백피 추출물의 함량은 혼합 추출물 총 중량 대비 0.1 내지 100 중량% 포함될 수 있으며, 바람직하게는 0.5 내지 80 중량%, 더 바람직하게는 1 내지 50중량% 포함될 수 있으며, 가장 바람직하게 5 내지 40 중량% 포함될 수 있다.

바람직한 실시예에서 상기 혼합 추출물에 포함되는 초피나무 열매 추출물, 유용성 감초 추출물, 및 상백피 추출물의 혼합비율은 중량비 기준으로 1:0.5~1.5: 0.5~1.5로 혼합될 수 있다.

상기 성분들은 상기 함량 범위일 때, 피부 자극이 적으면서도 자외선에 의해 손상된 피부의 개선 효과를 가져올 수 있다.

본 발명의 혼합 추출물은 통상의 생약 추출물을 함유하는 화장료 조성물 제조 방법에 따라 화장료 조성물로 제조될 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기 추출물 이외에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 보습제, 증점제, 계면활성제, 유상기제, 방부제, 산화방지제, 알코올, 향료, pH 조절제, 천연추출물 등은 물론 상기 추출물에 의한 효과를 배가시키기 위한 화학적 성분을 적당한 양으로 배합할 수 있다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예컨대, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 구체적으로, 유연 화장수, 영양 화장수, 스킨 토너, 영양 크림, 유액, 화장연고, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 젤, 메이크업 베이스, 파운데이션, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 바람직한 제형으로는, 화장료 조성물 내에 추출물들이 고루 분산되고, 본 발명의 효과가 가장 잘 발휘되는 로션, 크림, 에센스 제형이 바람직하다.

본 발명은 또한 상기 혼합 추출물을 개체의 피부에 도포하는 단계를 포함하는, 자외선에 의한 피부 손상 방지, 예방 또는 개선 방법을 제공한다. 상기 개체는 쥐, 가축, 인간 등을 포함하는 포유동물을 제한 없이 포함한다.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명은 초피나무 열매 추출물; 및 상백피 추출물, 유용성 감초 추출물 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 약학 조성물을 제공하고자 한다. 구체적으로, 본 발명은 초피나무 열매 추출물; 및 상백피 추출물, 유용성 감초 추출물 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 의한 피부 손상 방지, 예방 또는 개선용 약학 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명의 화합물을 포함하는 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있으나, 바람직하게는 비경구 제제일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.

본 발명은 또한 초피나무 열매 추출물; 및 상백피 추출물, 유용성 감초 추출물 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 의한 피부 손상 방지, 예방 또는 개선용 피부 외용제의 제형으로 제공할 수 있다.

상기 초피나무 열매 추출물; 및 상백피 추출물, 유용성 감초 추출물 또는 이들의 혼합물을 피부외용제로 사용하는 경우, 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 피부용 외용제에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 또한 상기 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.

상기 초피나무 열매 추출물; 및 상백피 추출물, 유용성 감초 추출물 또는 이들의 혼합물이 피부 외용제 제형으로 제공될 경우, 이에 제한되는 것은 아니나, 연고, 패취, 겔, 크림 또는 분무제와 같은 제형을 가질 수 있다.

본 발명의 약학 조성물은 특히 바람직하게 비경구용 제제로 이용될 수 있으며, 예를 들어, 피부외용제는 바세린, 스테아릴알코올 등의 약제학적으로 허용되는 적당한 기제; 폴리소르베이트, 소르비탄 세스퀴올레이트 등의 약제학적으로 허용되는 적당한 계면활성제; 글리세린 등의 약제학적으로 허용되는 적당한 보습제; 약제학적으로 허용되는 적당한 용제; 및 착향제, 착색제, 안정화제, 점성화제 등을 균질하게 혼합하는 통상의 피부외용제 제조방법에 의해서 제조될 수 있다.

또한, 본 발명의 상기 초피나무 열매 추출물; 및 상백피 추출물, 유용성 감초 추출물 또는 이들의 혼합물을 의약품으로 사용하는 경우, 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다. 예컨대, 공지의 피부 노화 방지 성분, 멜라닌 색소 침착 억제 성분, 주름 개선 성분, 보습 성분 등을 포함할 수 있을 것이다. 상기 성분 추가 시에는 복합 사용에 따른 피부 안전성, 제형화의 용이성, 유효성분들의 안정성을 고려할 수 있다.

본 발명의 약학 조성물은 유효량의 상기 초피나무 열매 추출물; 및 상백피 추출물, 유용성 감초 추출물 또는 이들의 혼합물의 혼합 추출물을 포함할 때 바람직한 자외선에 의한 피부 손상 방지, 예방 또는 개선 효과를 제공할 수 있다. 본 발명에 있어서, '유효량'이라 함은 멜라닌 색소 침착 억제 효과, 피부 주름 방지 효과 등과 같은, 자외선에 의한 피부 손상 방지 효과를 충분히 나타낼 수 있는 화합물의 양을 의미한다.

본 발명의 조성물에 포함되는 상기 혼합 추출물의 유효량은 조성물이 제품화되는 형태, 상기 화합물이 피부에 적용되는 방법 및 피부에 머무르는 시간 등에 따라 달라질 것이다. 예컨대, 상기 조성물이 의약품으로 제품화되는 경우에는 일상적으로 피부에 적용하게 되는 화장품으로 제품화되는 경우에 비해 높은 농도로 상기 혼합 추출물을 포함할 수 있을 것이다. 따라서, 일일 투여량은 건조중량을 기준으로 0.1 내지 100 ㎎/㎏이고, 바람직하게는 30 내지 80 ㎎/㎏이고, 더욱 바람직하게는 50 내지 60 mg/kg이며, 하루 1~6 회 투여될 수 있다.

본 발명의 일 실시예에서 초피나무 열매 추출물; 및 상백피 추출물, 유용성 감초 추출물이 혼합된, 혼합 추출물을 포함하는, 자외선에 의한 피부 흑화 억제, 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 다른 실시예에서 초피나무 열매 추출물, 상백피 추출물, 및 유용성 감초 추출물이 혼합된, 혼합 추출물을 포함하는, 자외선에 의한 피부 홍반 억제, 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 초피나무 열매 추출물; 및 상백피 추출물, 유용성 감초 추출물 또는 이들의 혼합물의 혼합 추출물을 함유하는 조성물은 자외선에 의한 피부 손상 방지, 예방 또는 개선에 우수한 효과를 나타낸다.

본 발명의 혼합 추출물을 함유하는 조성물은 피부 자극이 적으면서도 자외선에 의한 유발되는 피부 손상을 완화할 수 있다.

본 발명은 자외선에 의한 피부 흑화를 억제할 수 있는 혼합 추출물을 새로운 용도를 제공한다.

본 발명은 자외선에 의한 피부 홍반을 억제할 수 있는 혼합 추출물의 새로운 용도를 제공한다.

도 1은 초피나무 열매 추출물의 각질 형성 세포에서 농도 의존적으로 COP1 발현을 증가 시키는 것을 확인한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 유용성 감초 추출물이 CPD가 증가하는 것을 억제하는 것을 확인한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 3은 상백피 추출물이 Arylhydrocarbon receptor 시그날의 활성을 억제하는 것을 확인한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 4는 초피나무 열매 추출물, 상백피 추출물, 및/또는 유용성 감초 추출물의 단일 및 혼합 추출물의 자외선에 의한 피부 홍반 억제 효과를 결과로 나타낸 그래프이다.
도 5는 초피나무 열매 추출물, 상백피 추출물, 및/또는 유용성 감초 추출물의 단일 및 혼합 추출물의 자외선에 의한 피부 흑화 억제 효과를 결과로 나타낸 그래프이다.

이하, 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위하여 하기 실시예 등을 들어 설명한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며 본 발명의 범위가 아래에서 상술하는 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 본 발명의 구체적 이해를 돕기 위해 예시적으로 제공되는 것이다.

[혼합 추출물의 준비]

1. 초피 나무 열매 추출물의 준비

초피나무열매 추출물은 국내산 초피나무열매를 1:5 비율로 에탄올 추출하여 제조한 것을 오비엠랩 (대전, 대한민국)에서 구매하였다.

2. 상백피 추출물의 준비

국내산 상백피 (Morus Alba Bark)를 50% Butylene Glycol을 용매로 1:25의 비율로 추출 여과 하여 제조한 것을 씨엔텍에서 구매하였다.

3. 유용성 감초 추출물

MARUZEN (일본)에서 제조한 원료를 구입하여 준비하였다.

4. 혼합 추출물의 제조

1-3을 혼합하여 혼합 추출물을 준비하였다.

[추출물의 활성 측정]

<실험예 1> COP1 발현 촉진

자외선에 의하여 표피층 각질 형성 세포에서 COP1의 발현이 감소하는 것이 자외선에 의한 피부 손상 유발 과정에서 중요하게 작용하는 것이 잘 알려져 있다. 따라서 초피 나무 열매 추출물이 각질 형성 세포에서 COP1의 발현을 증가 시킬 수 있는지 확인해보았다. 각질형성세포에 초피나무열매 추출물(ZE)을 처리 하고, 24 시간 후에 mRNA를 추출하여 cDNA를 합성하여 COP1 유전자 발현 정도를 COP1 특이적인 Taqman probe (life technology, USA) 를 이용하여 PCR 방법으로 확인하였다. 아무 시료도 처리하지 않은 대조군에 대한 COP1 상대적 발현값을 하기 서술한 수식에 의하여 계산하였다.

도 1의 결과에서 볼 수 있듯이, 초피나무 열매 추출물은 각질 형성 세포에서 농도 의존적으로 COP1 발현을 증가 시키는 것을 확인하였다.

<실험예 2> DNA 손상 방지

자외선은 직접적으로 DNA 손상을 일으키고, CPD와 같은 photoproduct를 축적시킨다. DNA 손상이 축적되면 세포는 정상적인 기능을 하지 못한다. 따라서 유용성 감초 추출물이 자외선이 DNA 손상을 유발하는 것을 방지할 수 있는지 확인하기 위하여 자외선을 조사하고 24시간 후에 CPD 양을 측정하였다.

도 2의 결과에서 볼 수 있듯이, 유용성 감초 추출물은 자외선 조사에 의하여 DNA 손상 물질인 CPD가 증가하는 것을 효과적으로 억제하는 것을 확인하였다.

<실험예 3 > aryl hydrocarbon receptor 활성 억제

자외선에 의해 생성되는 Formylindole(3,2-b) carbazole(FICZ)가 Aryl hadrocarbon receptor에 결합하여 염증, 대사이상, 광노화, 멜라닌생성, 암 유발을 촉진하는 것이 보고되고 있다. 따라서, 상백피 추출물이 Aryl hadrocarbon receptor 시그날을 차단할 수 있는지 Aryl hadrocarbon receptor활성화 후 증가되는 XRE 시그날을 분석하였다. 각질형성세포에 XRE 리포터 벡터를 트렌스펙션 한 후에, 상백피 추출물과 XRE inducer를 처리하였다. 24시간 후에 XRE 리포터 활성을 luciferase assay를 통해 분석하였다.

도 3의 결과에서 볼 수 있듯이, 상백피 추출물은 Arylhydrocarbon receptor 시그날의 활성을 효과적으로 억제하는 것을 확인 하였다.

[추출물의 혼합 및 제형화 ]

하기 표 1과 같은 조성으로 실시예 1 내지 6의 혼합 추출물을 준비하였다.

	초피나무열매추출물	상백피 추출물	유용성감초추출물
비교예1	-	-	-
실시예1	100%	-	-
실시예2	-	100%	-
실시예3	-	-	100%
실시예4	50%	50%
실시예5	50%		50%
실시예6	33%	33%	33%

상기 표 1의 실시예 1-6을 다음의 표 2와 같은 혼합비율로 크림으로 제조하여 제형예 1-6을 제조하여 실험을 수행하였다. 함량은 중량%로 나타냈다.

성분	제형예1	제형예2	제형예3	제형예4	제형예5	제형예6
실시예 1	3.0	-	-	-	-	-
실시예 2	-	3.0	-	-	-	-
실시예 3	-	-	3.0	-	-	-
실시예 4	-	-	-	3.0	-	-
실시예 5	-	-	-	-	3.0	-
실시예 6	-	-	-	-	-	3.0
글리세린	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
프로필렌 글리콜	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0
방부제	적량	적량	적량	적량	적량	적량
향	적량	적량	적량	적량	적량	적량
정제수	to 100	to 100	to 100	to 100	to 100	to 100

<실험예 4> 자외선에 의한 홍반 억제 인체 효능 평가

상기 제형예 1~6에 대해서 건강한 35세에서 50세의 남성을 대상으로 자외선에 대한 피부 보호 효능을 평가하기 위하여 홍반 생성 어떤 영향을 주는지 다음과 같이 평가하였다. 35세에서 50세까지의 남성 5명의 상완에 1cm² 영역별로 제형예 1~6의 크림을 20ul씩 아침 저녁으로 7일간 발라주었다. 1.5MED의 자외선을 쪼여주고 24시간 후에 홍반 생성 정도를 Mexameter를 이용하여Erythema value로 측정하였다.

도 4의 결과에서 볼 수 있듯이, 초피나무 열매 추출물(제형예 1), 상백피 추출물(제형예 2) 및 유용성 감초 추출물(제형예 3)은 자외선에 의해 피부에 홍반이 생기는 것을 억제하였으며, 초피나무 열매 추출물과 상백피 추출물 및 유용성 감초 추출물 1종 이상을 포함하는 혼합물에서(제형예 4~6)는 자외선에 의한 홍반 억제 효과가 더욱 증대되는 것을 확인하였다.

<실험예 5> 자외선에 의한 흑화억제 인체 효능 평가

상기 제형예 1~6에 대해서 대해서 건강한 35세에서 50세의 남성을 대상으로 자외선에 대한 피부 보호 효능을 평가하기 위하여 흑화에 어떤 영향을 주는 지 다음과 같이 평가하였다. 35세에서 50세까지의 남성 5명의 상완에 1cm² 영역별로 제형예 1~6의 크림을 20ul씩 아침 저녁으로 7일간 발라주었다. 1.5MED의 자외선을 쪼여주고 72시간 후에 흑화된 정도를 Mexameter를 이용하여 melanin value로 측정하였다.

도 5의 결과에서 볼 수 있듯이, 초피나무 열매 추출물(제형예 1), 상백피 추출물(제형예 2) 및 유용성 감초 추출물(제형예 3)은 자외선에 의해 피부가 흑화되는 것을 억제하였으며, 초피나무 열매 추출물과 상백피 추출물 및 유용성 감초 추출물 1종 이상을 포함하는 혼합물에서(제형예 4~6) 는 자외선에 의한 흑화 억제 효과가 더욱 증대되는 것을 확인하였다.

<실험예 6> 피부 자극도 테스트

실시예 1-6의 혼합 추출물을 포함하는 제형예 1-6을 바른 후 가려움, 따가움, 화끈거림, 이물감 등 피부 자극을 유발하는지 설문 조사를 통하여 피부 자극도를 평가하였다. 자극이 없는 경우 0점, 자극이 가장 심한 경우 10 점 기준으로 각 항목에 대해 사용자가 점수를 매긴 것을 종합하여 피부 자극도 지수를 산정하였다.

	피부 자극도
비교예1
제형예1	9
제형예2	10
제형예3	9
제형예4	7
제형예5	7
제형예6	4

초피나무열매 추출물, 상백피 추출물, 유용성 감초 추출물 각각 100%조성물을 3%씩 포함하는 화장료 조성물을 사용하였을 때(제형예 1-3), 피부 자극도는 9~10 정도로 나타났으며, 33%씩 혼합한 혼합물을 3% 처방 시 (제형예 6, 각각 1% 처방됨) 피부 자극도가 4 로 현저히 감소하였다.

이러한 결과를 통해, 초피나무 열매 추출물, 상백피 추출물, 유용성 감초 추출물을 함께 사용할 때 추출물 각각을 사용할 때보다 더 우수한 흑화 방지 효과를 나타내면서도, 자극을 완화할 수 있는 효과가 발휘되는 것을 확인하였다.

<실험예 7> 제형 안정화

100% 단일물질을 3% 화장품에 처방 시 열 안정성, 광 안정성이 떨어져 변색, 침전이 발생 유통기한이 짧아지는 문제가 있었으나, 33%씩 혼합한 경우 열 안정성, 광 안정성 등 제형 안정성이 증가하였다. 따라서 우수한 흑화 예방 효과를 가지면서도 제형 안정성을 향상시킨 화장품을 제조할 수 있었다.

Claims (8)

1. 초피나무 열매 추출물, 상백피 추출물, 및 유용성 감초 추출물이 혼합된 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는, 자외선에 의한 흑화 현상, 또는 피부 홍반 방지, 예방 또는 개선용 조성물.
2. 삭제
3. 삭제
4. 제1항에 있어서, 상기 초피나무 열매 추출물은 초피나무 열매와 에탄올의 중량비율을 1:3-7(초피나무 열매:에탄올)로 추출한 후 건조하여 70% 디프로필렌글리콜에 용해한 것을 특징으로 하는, 자외선에 의한 흑화 현상, 또는 피부 홍반 방지, 예방 또는 개선용 조성물.
5. 삭제
6. 삭제
7. 초피나무 열매 추출물, 상백피 추출물, 및 유용성 감초 추출물이 혼합된, 혼합 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는, 자외선에 의한 피부 흑화 억제, 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
8. 초피나무 열매 추출물, 상백피 추출물, 및 유용성 감초 추출물이 혼합된, 혼합 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는, 자외선에 의한 피부 홍반 억제, 예방 또는 개선용 화장료 조성물.

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