KR101918929B1 - 알릴 메르캅탄 생성능이 우수한 균주 및 이를 이용한 발효 식품의 제조방법 - Google Patents
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Abstract
본 명세서에는 알릴 메르캅탄 생성능이 우수한 신규한 유산균, 이를 이용한 식품 조성물 및 발효 식품의 제조방법이 개시된다. 상기 유산균은 기탁번호가 KCCM12031P인 락토바실러스 펜토서스 SMB-718(Lactobacillus pentosus SMB-718) 균주로서, 발효 소재로 이용 가능하고 향미 증진제 및 항산화 물질로 알려져 있는 알릴 메르캅탄의 함량을 증가시켜 준다.
Description
본 명세서에는 알릴 메르캅탄 생성능이 우수한 신규한 유산균, 이를 이용한 식품 조성물 및 발효 식품의 제조방법이 개시된다.
백합과의 파 속에 속하는 식물로서 우리나라와 인도, 중국, 미국 및 남부 유럽 등의 다양한 지역에서 재배되고 있으며 다양한 식품의 가공 및 조리에 이용되고 있는 마늘과 양파는 건강 유지에 도움이 되고 생리 활성이 우수한 기능성 식품 원료라는 것이 잘 알려져 있다.
마늘의 우수한 성능은 마늘의 다양한 성분에서 기인하는데, 그 중 주요 대사산물인 알릴 메르캅탄(Allyl mercaptan)은 콜레스테롤 합성을 감소시켜 심장질환의 위험을 낮추어 주고, 항산화 활성이 우수하며, 향미 증진제(flavor enhancer)로 사용되어 음식의 향미를 높여 주는 효과가 있다.
한편, 일반적으로 유산균은 직접 혹은 간접적으로 식품에 첨가되어 이들의 대사산물인 유산에 의하여 식품의 저장성을 향상시키며, 식품의 향미와 조직을 개선한다고 알려져 있다. 또한, 발효 식품을 통하여 섭취된 유산균은 장내로 유입된 후 병원성 미생물의 저해 및 면역활성의 증진 등 숙주 동물에 많은 도움을 주는 것으로 알려져 있다.
그러나, 이러한 유산균을 이용한 발효를 통하여 양파와 마늘에 함유된 유효성분인 알릴 메르캅탄(Allyl mercaptan)의 함량을 증가시키는 방법에 관해서는 알려진 바가 없다.
일 측면에서, 본 명세서는 발효 소재로 이용 가능하고 향미 증진제 및 항산화 물질로 알려져 있는 알릴 메르캅탄의 함량을 증가시켜 주는 신규한 락토바실러스 펜토서스 SMB-718(Lactobacillus pentosus SMB-718) 균주를 제공하는 것을 목적으로 한다.
다른 측면에서, 본 명세서는 상기 균주를 이용한 발효 식품을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또 다른 측면에서, 본 명세서는 상기 균주를 이용하여 발효 식품을 제조하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
일 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 기탁번호가 KCCM12031P인 락토바실러스 펜토서스 SMB-718(Lactobacillus pentosus SMB-718) 균주를 제공한다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 균주는 서열번호 1의 염기서열을 포함하는 16S rDNA를 갖는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 균주는 알릴 메르캅탄(allyl mercaptan)을 함유하는 알리움 속(Allium sp.) 식물의 알릴 메르캅탄 함량을 증가시키는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 알리움 속 식물은 양파, 마늘, 부추 및 쪽파로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상인 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 균주는 항균력을 갖는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 기탁번호 KCCM12031P의 균주는 에세리키아 속(Escherichia sp.), 스타필로코커스 속(Staphylococcus sp.), 바실러스 속(Bacillus sp.), 슈도모나스 속(Pseudomonas sp.) 및 리스테리아 속(Listeria sp.) 중 1 이상의 균주에 대해 항균 활성을 갖는 것일 수 있다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 상기 균주를 배양시켜 얻은 배양물 또는 이의 추출물을 제공한다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 상기 균주를 발효 균주로 이용한 발효물 또는 이의 추출물을 제공한다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 상기 균주; 이의 파쇄물; 이의 배양물; 이의 발효물; 및 상기 균주, 파쇄물, 배양물 또는 발효물의 추출물 중 1 이상을 포함하는 식품 조성물을 제공한다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 상기 균주를 발효 균주로 사용하여 발효 식품을 제조하는 단계를 포함하는 발효 식품의 제조방법을 제공한다.
일 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 발효 소재로 이용 가능하고 향미 증진제 및 항산화 물질로 알려져 있는 알릴 메르캅탄의 함량을 증가시켜 주는 신규한 락토바실러스 펜토서스 SMB-718(Lactobacillus pentosus SMB-718) 균주를 제공하는 효과가 있다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 상기 균주를 이용한 발효 식품을 제공하는 효과가 있다.
또 다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 상기 균주를 이용하여 발효 식품을 제조하는 방법을 제공하는 효과가 있다.
도 1은 본 명세서에 따른 기탁번호가 KCCM12031P인 락토바실러스 펜토서스 SMB-718(Lactobacillus pentosus SMB-718) 균주의 16s rDNA 시퀀스를 나타낸 것이다.
도 2는 본 명세서에 따른 기탁번호가 KCCM12031P인 락토바실러스 펜토서스 SMB-718(Lactobacillus pentosus SMB-718) 균주의 계통도를 나타낸 것이다.
도 3은 본 명세서의 일 실시예에서 SMB 718 균주와 JCM 1158 균주의 API Kit(50CHL) 활성 비교 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 본 명세서의 일 실시예에서 락토바실러스 펜토서스 SMB-718 균주와 락토바실러스 펜토서스 JCM 1558 균주 (KCTC 3120)를 이용한 발효 공정 후 GC-MS 분석 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 본 명세서에 따른 기탁번호가 KCCM12031P인 락토바실러스 펜토서스 SMB-718(Lactobacillus pentosus SMB-718) 균주의 계통도를 나타낸 것이다.
도 3은 본 명세서의 일 실시예에서 SMB 718 균주와 JCM 1158 균주의 API Kit(50CHL) 활성 비교 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 본 명세서의 일 실시예에서 락토바실러스 펜토서스 SMB-718 균주와 락토바실러스 펜토서스 JCM 1558 균주 (KCTC 3120)를 이용한 발효 공정 후 GC-MS 분석 결과를 나타낸 것이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 명세서는 마늘, 양파 등을 포함하는 알리움 속(Allium sp.) 식물을 발효시켜 상기 식물에 함유된 알릴 메르캅탄(allyl mercaptan)의 함량을 높이고 식품의 향미 및 건강 기능성을 증진시킬 수 있는 신규한 유산균에 관한 것이다.
일 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 기탁번호가 KCCM12031P인 락토바실러스 펜토서스 SMB-718(Lactobacillus pentosus SMB-718) 균주를 제공한다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 균주는 식물 유래의 유산균일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 균주는 전통 장류 식품에서 분리한 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 균주는 서열번호 1의 염기서열을 포함하는 16S rDNA를 갖는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 균주는 발효 균주, 즉 종균으로 사용될 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 균주는 발효 시 알릴 메르캅탄(allyl mercaptan)의 함량을 증가시키는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 균주는 발효 시 알릴 메르캅탄(allyl mercaptan)을 함유하는 알리움 속(Allium sp.) 식물의 알릴 메르캅탄 함량을 증가시키는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 알리움 속 식물은 양파, 마늘, 부추 및 쪽파로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 균주는 발효 식품의 이취를 감소시키고 향미를 증진시키는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 균주는 항균력을 갖는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 기탁번호 KCCM12031P의 균주는 에세리키아 속(Escherichia sp.), 스타필로코커스 속(Staphylococcus sp.), 바실러스 속(Bacillus sp.), 슈도모나스 속(Pseudomonas sp.) 및 리스테리아 속(Listeria sp.) 중 1 이상의 균주에 대해 항균 활성을 갖는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 기탁번호 KCCM12031P의 균주는 대장균(Escherichia coli), 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 바실러스 세레우스(Bacillus cereus), 슈도모나스 에루지노사(Pseudomonas aeruginosa) 및 리스테리아 모노사이토게네스(Listeria monocytogenes) 중 1 이상의 균주에 대해 항균 활성을 갖는 것일 수 있다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 균주를 배양시켜 얻은 배양물 또는 이의 추출물을 제공한다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 배양물 또는 이의 추출물은 알릴 메르캅탄을 포함하는 것일 수 있다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 균주를 발효 균주로 이용한 발효물 또는 이의 추출물을 제공한다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 발효물 또는 이의 추출물은 알릴 메르캅탄을 포함하는 것일 수 있다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 상기 균주; 이의 파쇄물; 이의 배양물; 이의 발효물; 및 상기 균주, 파쇄물, 배양물 또는 발효물의 추출물 중 1 이상을 포함하는 식품 조성물을 제공한다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 식품 조성물은 알릴 메르캅탄을 포함하는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 식품 조성물은 용액, 분말, 현탁액, 분산액, 에멀젼, 유성 분산액, 페이스트, 과립제 또는 정제 형태로 제조할 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 상기 균주를 발효 균주로 사용하여 발효 식품을 제조하는 단계를 포함하는 발효 식품의 제조방법을 제공한다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 발효 식품은 알릴 메르캅탄을 포함하는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 방법은 알리움 속 식물, 소금 및 정제수를 포함하는 배지에 기탁번호가 KCCM12031P인 락토바실러스 펜토서스 SMB-718(Lactobacillus pentosus SMB-718) 균주를 접종하여 발효하는 단계를 포함하는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 방법은 알리움 속 식물, 소금 및 정제수를 전체 배지 중량을 기준으로 각각 10 내지 70 중량%, 1 내지 10 중량% 및 15 내지 88 중량%로 혼합한 다음, 전체 배지 중량을 기준으로 1 내지 5 중량%로 상기 균주를 접종하는 것일 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실시예
1. 균주의 분리
1차로 유산균을 분리하기 위하여, 보리, 콩, 무우, 버섯 등을 넣어 만든 전통 장류 중 하나인 시금장을 입수하여 액상과 함께 곱게 간 다음, 연속 희석법을 이용하여 멸균 생리식염수에 102~106배로 희석한 후, 희석액 0.1 ml을 유산균 분리용 한천배지인 MRS broth(Difco, USA)에 도말한 후 30 ℃에서 48시간 동안 혐기 배양하였다. 또한, 2차로 유산균을 분리하기 위하여, 1차에서 분리된 미생물을, pH 5.2 이하일 때 노란색으로 변화하는 BCP agar(Eiken, Japan) 배지에 접종한 뒤, 혐기 조건에서 30 ℃에서 48시간 동안 배양하여 노란색의 환이 생기는 미생물을 분리하였다.
이후, 상기 분리된 미생물 중에서 염이 첨가된 식품에서 생육할 수 있는 유산균을 선별하기 위해 2% NaCl을 첨가한 MRS 배지에서 30 ℃에서 48 시간 동안 배양한 후 집락을 형성한 내염성 유산균만 선별하였고, 또한, 내산성 균주를 선별하기 위해 pH 5.0으로 조절한 MRS broth에 접종한 후 30 ℃에서 24시간 동안 배양하여 생육한 유산균만을 선별하여, 최종 5종의 유산균을 선별하였다(표 1 참고).
| 분리시료 | 분리 | 내염성 (2% NaCl) |
내산성 (pH 5.0) |
| 시금장 | 101 | 89 | 5 |
실시예 2. 알릴 메르캅탄 생성능이 우수한 유산균 선별
실시예 1에서 선별한 5종의 균주 중 알릴 메르캅탄 생성능이 있는 균주를 선별하기 위하여, 1 내지 5 중량%의 찐양파 페이스트, 1 내지 5 중량%의 정제염, 1 내지 5 중량%의 마늘, 50 내지 70 중량%의 무 페이스트, 10 내지 46 중량%의 정제수를 포함한 배지에, 유산균주를 각각 1 내지 5 중량%로 접종한 후, 25 ℃에서 24시간 동안 배양하여 GC-MS 분석으로 가장 높은 알릴 메르캅탄 생성능을 보이는 특이적인 균주(락토바실러스 펜토서스 SMB 718) 1종을 선별하였다(표 2 참고).
| 균주 | Allyl mercaptan peak area |
| RTCL3 | 1.15×108 |
| RTCL9 | 7.67×107 |
| RTCL31 | 7.67×108 |
| RTCL72 | 5.76×107 |
| RTCL79 (SMB718) |
5.90×109 |
실시예 3. 선별된 균주의 동정
상기 실시예 2에서 선별된 균주를 대표적인 universal primer인 27F(5'-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3', 서열번호 2)와 1429R(5'-TACGGYTACCTTGTTACGACTT-3', 서열번호 3) primer를 사용하여 PCR을 수행하여 16S rDNA(서열번호 1)를 증폭시킨 뒤, Wizard DNA 정제 키트를 이용하여 정제하고, 솔젠트㈜(대전)에 염기서열의 분석을 의뢰하였다. NCBI Blast와 EzTaxon server 2.1(Jongsik Chun)에서 염기서열의 상동성 비교를 통해 동정한 결과, 상기 선별된 균주는 락토바실러스 펜토서스 JCM 1558 (KCTC 3120) (Lactobacillus pentosus JCM 1558(T))와 100% 유사한 것으로 나타났다.
이후, EzTaxon server 2.1(Jongsik Chun)에서 선별 균주와 유사한 균주들의 16s rRNA 정보를 메가 프로그램(MEGA program)을 이용하여 염기서열들을 정렬하고 시각적 관찰과 수작업으로 보정한 후 Neighbor joining 방법을 사용하여 계통도를 작성하였다(도 2 참고).
한편, API Kit(50CHL)를 이용한 당 이용성 테스트를 통해 SMB-718 균주와 JCM1558 (KCTC 3120) 균주 간의 활성 차이를 비교하여 도 3에 나타내었다.
상기 결과들에 의해, 본 명세서에 따른 유산균은 락토바실러스 펜토서스 JCM1558 (KCTC 3120) 균주와 근접한 균주로 동정이 되나, 이와는 상이한 균주임을 확인하였다. 이에, SMB-718 균주를 락토바실러스 펜토서스 SMB-718로 명명하고, 상기 균주를 2017년 05월 26일자로 기탁기관인 한국미생물보존센터에 기탁번호 KCCM12031P로 기탁하였다.
실시예
4.
동정된
유산균의 알릴 메르캅탄
생성능
확인
상기 실시예 3에서 동정된 락토바실러스 펜토서스 SMB-718 균주와 락토바실러스 펜토서스 JCM 1558 (KCTC 3120) 균주의 알릴 메르캅탄 생성능을 GC-MS를 이용하여 하기와 같이 비교하였다(도 4 참고).
구체적으로, 1 내지 5 중량%의 찐양파 페이스트, 1 내지 5 중량%의 정제염, 1 내지 5 중량%의 마늘, 50 내지 70 중량%의 무 페이스트, 10 내지 46 중량%의 정제수를 포함한 배지에, 유산균주인 락토바실러스 펜토서스 SMB 718, 락토바실러스 펜토서스 JCM1558 (KCTC 3120)를 각각 1 내지 5 중량%로 접종한 후, 25 ℃에서 24시간 동안 발효를 진행하여 알릴 메르캅탄의 생성량을 비교하였다.
| Area | 간접정량값(ppb) | |
| Lactobacillus pentosus SMB 718 | 4.92×109 | 343.62 |
| Lactobacillus pentosus JCM 1558 (KCTC 3120) | 1.23×109 | 82.24 |
그 결과, 본 명세서에 따른 락토바실러스 펜토서스 SMB 718 균주는 SPME 법으로 분석 시 알릴 메르캅탄의 피크 넓이(peak area)가 4×109 이상이고, 간접 정량 시 알릴 메르캅탄의 함량이 300 ppb이상인 것을 확인하였다.
발효 전 배지 내의 알릴 메르캅탄의 Area 값인 2×107보다 락토바실러스 펜토서스 SMB 718 균주를 이용한 발효물에서 알릴 메르캅탄이 다량 검출된 반면, 기준주인 락토바실러스 펜토서스 JCM 1558 (KCTC 3120) 균주를 이용한 발효물에서는 적게 검출되었다.
또한, 간접 정량 비교를 위하여 Internal standard(ethyl benzoate)를 100 ppb의 농도로 첨가하여 Area 값 비교를 통하여 계산한 결과, 락토바실러스 펜토서스 SMB 718 균주에서는 343 ppb의 알릴 메르캅탄이 검출되었고, 기준주에서는 82 ppb의 알릴 메르캅탄이 검출되어 SMB 718 균주가 기준주보다 4배 이상 많은 양의 알릴 메르캅탄을 만드는 것을 확인하였다.
실시예 5. 동정된 유산균의 항균 활성 확인
락토바실러스 펜토서스 SMB 718 균주와 락토바실러스 펜토서스 JCM 1558 (KCTC 3120) 균주의 항균력을 조사하기 위해 한국생명공학연구원 생물자원센터에서 식품에서 질병을 일으키는 미생물인 대장균(Escherichia coli KCTC 2441), 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus KCTC 3881), 바실러스 세레우스(Bacillus cereus KCTC 3624), 슈도모나스 에루지노사(Pseudomonas aeruginosa KCTC 1750), 리스테리아 모노사이토게네스(Listeria monocytogenes KCTC 3569)를 포함한 총 5종을 분양 받아 이에 대한 항균력을 비교하였다.
항균력 측정은 MRS(Difco, USA) agar 배지에 락토바실러스 펜토서스 SMB 718 균주, 락토바실러스 펜토서스 JCM 1558 (KCTC 3120) 균주를 중앙에 점 모양으로 각각 접종한 후 37 ℃에서 24시간 동안 선 배양하였다. 향균력 조사를 위한 5종의 균들은 각각 Tryptic soy(Difco, USA) broth 배지에 접종하여 30 ℃에서 24시간 동안 배양하였다. 이후, agar를 0.5% 첨가시킨 Tryptic soy agar 배지 10 ml에 5%씩 접종한 다음, 선 배양해 놓은 SMB 718, JCM 1558 (KCTC 3120)의 MRS agar 배지 위에 분주하여 굳힌 후, 30 ℃에서 24시간 동안 배양하여 생성된 저지환 크기를 측정하여 락토바실러스 펜토서스 SMB 718 균주와 락토바실러스 펜토서스 JCM 1558 (KCTC 3120) 균주의 항균력을 비교하였다. 표 4는 락토바실러스 펜토서스 SMB 718 균주와 락토바실러스 펜토서스 JCM 1558 (KCTC 3120) 균주에 대한 항균력 시험 결과를 나타낸 것이다(단위: 밀리미터(mm))
| Escheria coli KCTC2441 | Staphylococcusaureus KCTC3881 | PseudomonasaeruginosaKCTC1750 | ListeriamonocytogenesKCTC3569 | Bacilluscereus KCTC3624 | |
| Lactobacillus pentosus SMB 718 | 19 | 17 | 15 | 14 | 17 |
| Lactobacillus pentosus JCM1558(KCTC 3120) | 17 | 14 | 11 | 12 | 14 |
그 결과, 락토바실러스 펜토서스 SMB 718 균주는 식중독 또는 설사를 유발하는 식품 유래의 병원성 미생물에 대해 우수한 항균 활성을 갖는 것을 알 수 있었다.
이에 따라, 본 명세서에 따른 균주는 유해균 생장 억제력을 가져 유해한 세균의 오염 없이 신선한 발효물을 제공할 수 있는 유산균으로 활용할 수 있음을 확인하였다.
실험예 1. 알릴 메르캅탄 생성 측정 방법
1. 고체상 미세 추출법(Solid phase microextraction )( SPME )
(a) SPME 섬유는 75㎛ 카르복센(carboxen)/폴리디메틸실록산(polydimethylsiloxane)을 사용하였다.
(b) 발효 전후의 샘플은 4 mL를 20 mL 헤드스페이스 바이알에 넣고 테플론 캡으로 밀봉하였다.
(c) 30 ℃에서 20분간 방치하여 평형상태에 도달시킨 후, SPME 섬유를 노출시켜 10분 동안 시료의 휘발성 성분을 섬유에 흡착시켰다.
(d) 섬유를 GC의 주입부(injection port)(250℃)에 5분간 탈착 후 추출은 중복(duplicate)으로 실시하였다(표 5 참고).
2. 간접 정량
(a) Internal standard를 이용하여 간접 정량을 실시하였다.
(b) 알릴 메르캅탄 분석을 위하여 사용된 Internal standard는 Ethyl benzoate였다.
(c) Ethyl benzoate를 100 ppb 함량으로 샘플을 넣은 바이알에 첨가하여 교반하여 준비하였다.
3. 기체 크로마토그래피-질량 분석(Gas chromatography-mass spectrometry)(GC-MS)에 의한 성분 분석
(a) 알릴 메르캅탄 성분은 Thermo Fisher Scientific ISQ series single quadrupole, 질량 선택적 검출기(mass selective detector)(MSD)(Thermo Fisher Scientific Co., USA)를 사용하여 동정하였다.
(b) 컬럼(Column)은 DB-wax(30m length X 0.25mm i.d X 0.25㎛ film thickness : J & W Scientifie, Folson, CA, USA)를 사용하였다.
(c) 오븐 온도는 40 ℃에서 5분간 유지한 후 180 ℃까지 5 ℃/min의 속도로 승온시켜 5분간 유지하였다.
(d) 주입기(injector) 온도는 250 ℃, 검출기(detector) 온도는 230 ℃로 유지하고 운반 기체(carrier gas)로는 헬륨을 사용하였으며 유속은 0.8 mL/min으로 하였다.
(e) 이온화 전압(ionization voltage)은 70 eV, 분석할 분자량의 범위(m/z)는 35-350으로 하여 중복(duplicate)으로 분석을 실시하였다(표 5 참고).
| SPME 조건 | |
| Fiber | CAR/PDMS (75μm) |
| Adsorption | 30℃, 250rpm, 10min |
| Incubation | 30℃, 250rpm, 20min |
| Desorption | 250℃, 5min |
| Sample | 4ml sample (20ml amber vial) |
| GC-MS(Quadrupole) 조건 | |
| Column | DB-WAX(30m length x 0.25mm I.D x 0.25㎛ film thickness) |
| Carrier gas | He (flow rate 0.8ml/min) |
| Oven temp. | 40℃ (initial hold 5min), 180℃ (hold for 5min) at 5℃/min |
| Injector temp. | 250℃ |
| Detector temp. | 230℃ |
| Split ratio | Splitless |
| Mass spectra ionization energy | 70eV |
| Mass scan range | 35-350 a.m.u |
이상, 본 발명내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의해 정의된다고 할 것이다.
<110> SEMPIO FOODS COMPANY
<120> MICROORGANISM INCREASING ALLYL MERCAPTAN CONTENTS AND METHOD FOR
MANUFACTURING FERMENTED FOOD USING THE SAME
<130> 17P350/IND
<160> 3
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 1416
<212> DNA
<213> Unknown
<220>
<223> Lactobacillus pentosus SMB 718
<400> 1
tgcagtcgaa cgaactctgg tattgattgg tgcttgcatc atgatttaca tttgagtgag 60
tggcgaactg gtgagtaaca cgtgggaaac ctgcccagaa gcgggggata acacctggaa 120
acagatgcta ataccgcata acaacttgga ccgcatggtc cgagnttgaa agatggcttc 180
ggctatcact tttggatggt cccgcggcgt attagctaga tggtgrggta acggctcacc 240
atggcaatga tacgtagccg acctgagagg gtaatcggcc acattgggac tgagacacgg 300
cccaaactcc tacgggaggc agcagtaggg aatcttccac aatggacgaa agtctgatgg 360
agcaacgccg cgtgagtgaa gaagggtttc ggctcgtaaa actctgttgt taaagaagaa 420
catatctgag agtaactgtt caggtattga cggtatttaa ccagaaagcc acggctaact 480
acgtgccagc agccgcggta atacgtaggt ggcaagcgtt gtccggattt attgggcgta 540
aagcgagcgc aggcggtttt ttaagtctga tgtgaaagcc ttcggctcaa ccgaagaagt 600
gcatcggaaa ctgggaaact tgagtgcaga agaggacagt ggaactccat gtgtagcggt 660
gaaatgcgta gatatatgga agaacaccag tggcgaaggc ggctgtctgg tctgtaactg 720
acgctgaggc tcgaaagtat gggtagcaaa caggattaga taccctggta gtccataccg 780
taaacgatga atgctaagtg ttggagggtt tccgcccttc agtgctgcag ctaacgcatt 840
aagcattccg cctggggagt acggccgcaa ggctgaaact caaaggaatt gacgggggcc 900
cgcacaagcg gtggagcatg tggtttaatt cgaagctacg cgaagaacct taccaggtct 960
tgacatacta tgcaaatcta agagattaga cgttcccttc ggggacatgg atacaggtgg 1020
tgcatggttg tcgtcagctc gtgtcgtgag atgttgggtt aagtcccgca acgagcgcaa 1080
cccttattat cagttgccag cattaagttg ggcactctgg tgagactgcc ggtgacaaac 1140
cggaggaagg tggggatgac gtcaaatcat catgcccctt atgacctggg ctacacacgt 1200
gctacaatgg atggtacaac gagttgcgaa ctcgcgagag taagctaatc tcttaaagcc 1260
attctcagtt cggattgtag gctgcaactc gcctacatga agtcggaatc gctagtaatc 1320
gcggatcagc atgccgcggt gaatacgttc ccgggccttg tacacaccgc ccgtcacacc 1380
atgagagttt gtaacaccca aagtcggtgg ggtaac 1416
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 27F primer
<400> 2
agagtttgat cmtggctcag 20
<210> 3
<211> 22
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 1429R primer
<400> 3
tacggytacc ttgttacgac tt 22
Claims (10)
- 기탁번호가 KCCM12031P인 락토바실러스 펜토서스 SMB-718(Lactobacillus pentosus SMB-718) 균주.
- 제 1항에 있어서,
상기 균주는 서열번호 1의 염기서열을 포함하는 16S rDNA를 갖는, 균주.
- 제 1항에 있어서,
상기 균주는 알릴 메르캅탄(allyl mercaptan)을 함유하는 알리움 속(Allium sp.) 식물의 알릴 메르캅탄 함량을 증가시키는, 균주.
- 제 3항에 있어서,
상기 알리움 속 식물은 양파, 마늘, 부추 및 쪽파로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상인, 균주.
- 제 1항에 있어서,
상기 균주는 대장균(Escherichia coli), 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 바실러스 세레우스(Bacillus cereus), 슈도모나스 에루지노사(Pseudomonas aeruginosa) 및 리스테리아 모노사이토게네스(Listeria monocytogenes) 중 1 이상의 균주에 대해 항균력을 갖는, 균주.
- 삭제
- 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 따른 균주를 배양시켜 얻은 배양액.
- 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 따른 균주를 발효 균주로 이용한 발효물.
- 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 따른 균주, 이의 파쇄물, 이의 배양액 및 이의 발효물 중 1 이상을 포함하는 식품 조성물.
- 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 따른 균주를 발효 균주로 사용하여 발효 식품을 제조하는 단계를 포함하는 발효 식품의 제조방법.
Priority Applications (1)
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| KR1020170094143A KR101918929B1 (ko) | 2017-07-25 | 2017-07-25 | 알릴 메르캅탄 생성능이 우수한 균주 및 이를 이용한 발효 식품의 제조방법 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020170094143A KR101918929B1 (ko) | 2017-07-25 | 2017-07-25 | 알릴 메르캅탄 생성능이 우수한 균주 및 이를 이용한 발효 식품의 제조방법 |
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020170094143A KR101918929B1 (ko) | 2017-07-25 | 2017-07-25 | 알릴 메르캅탄 생성능이 우수한 균주 및 이를 이용한 발효 식품의 제조방법 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR101918929B1 (ko) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20210004210A (ko) * | 2019-07-03 | 2021-01-13 | 인천대학교 산학협력단 | 카로티노이드를 생산하는 락토바실러스 펜토서스 균주 및 이를 포함하는 항산화용 조성물 |
| KR102376622B1 (ko) * | 2022-01-14 | 2022-03-18 | 재단법인 발효미생물산업진흥원 | 항염증 및 항산화 활성을 갖는 락토바실러스 펜토수스 srcm209254 균주 및 이의 용도 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101091833B1 (ko) | 2009-08-27 | 2011-12-12 | 주식회사 바이오랜드 | 유산균을 이용한 ｓａｃ 고함량 마늘 발효물의 제조방법 |
| US20160376263A1 (en) | 2016-07-26 | 2016-12-29 | Senomyx, Inc. | Bitter taste modifiers including substituted 1-benzyl-3-(1-(isoxazol-4-ylmethyl)-1h-pyrazol-4-yl)imidazolidine-2,4-diones and compositions thereof |
| US20170087199A1 (en) | 2016-02-10 | 2017-03-30 | Senomyx, Inc. | Compositions for delivering a cooling sensation |
| WO2017058594A1 (en) | 2015-10-01 | 2017-04-06 | Senomyx, Inc. | Compounds useful as modulators of trpm8 |
-
2017
- 2017-07-25 KR KR1020170094143A patent/KR101918929B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| KR20210004210A (ko) * | 2019-07-03 | 2021-01-13 | 인천대학교 산학협력단 | 카로티노이드를 생산하는 락토바실러스 펜토서스 균주 및 이를 포함하는 항산화용 조성물 |
| KR102203500B1 (ko) | 2019-07-03 | 2021-01-14 | 인천대학교 산학협력단 | 카로티노이드를 생산하는 락토바실러스 펜토서스 균주 및 이를 포함하는 항산화용 조성물 |
| KR102376622B1 (ko) * | 2022-01-14 | 2022-03-18 | 재단법인 발효미생물산업진흥원 | 항염증 및 항산화 활성을 갖는 락토바실러스 펜토수스 srcm209254 균주 및 이의 용도 |
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